KR20230115996A

KR20230115996A - 히포파에 람노이데스 케이크 가수분해물의 미용 용도

Info

Publication number: KR20230115996A
Application number: KR1020237019928A
Authority: KR
Inventors: 루이 다누; 플로랑스 앙리; 장솔렌 솔렌 민; 필리쁘 모저
Original assignee: 바스프 뷰티 케어 솔루션즈 프랑스 에스에이에스
Priority date: 2020-12-15
Filing date: 2021-12-13
Publication date: 2023-08-03
Also published as: US20240050359A1; FR3117372A1; WO2022129750A1; CN116710062A; FR3117372B1; EP4262741A1; JP2024503201A

Abstract

본 발명은 피부 부속기의 성장을 증가시키고/시키거나 그의 손실을 감소시키고/시키거나; 그의 생체역학적 특성 및/또는 그의 표면 및/또는 질감 특성을 증가시키고/시키거나; 손상된 피부 부속기를 복구하기 위한 히포파에 람노이데스(Hippophae rhamnoides) 케이크 가수분해물의 미용 용도에 관한 것이다. 본 발명은 또한 케이크 가수분해물 또는 이를 함유하는 미용 조성물의 국소 적용을 포함하는 미용 관리 방법에 관한 것이다. 본 발명은 또한 탈모 및/또는 대머리의 치료에 있어서의 피부과 또는 약학 용도를 위한 H. 람노이데스 케이크 가수분해물 또는 이를 포함하는 피부과 또는 약학 조성물에 관한 것이다.

Description

히포파에 람노이데스 케이크 가수분해물의 미용 용도

본 발명은 히포파에 람노이데스(Hippophae rhamnoides) 케이크 가수분해물의 신규 미용 용도에 관한 것이다.

모발, 속눈썹 및 눈썹과 같은 피부 부속기의 관리에는 전체적인 처리, 즉 모발 섬유 또는 케라틴 섬유뿐만 아니라 모낭을 포함한 해당 피부 영역의 직접적인 처리가 포함된다. 모발의 경우, 이러한 모낭은 두피 전체에 분포하며 모발 성장을 담당한다. 이 모낭은 모구에서 모낭의 하부에 있는 증식성 상피 기원의 세포를 포함한다.

또한, 모발 섬유의 직접적인 관리에는 구성 단백질의 처리가 포함된다. 예를 들어, 케라틴은 도시 생활 방식, 화학 위생 제품의 사용 빈도, 스타일링 습관 및 또한 환경 조건, 즉 태양, 오염, 염분, 바람, 기후 조건의 변화, 일반적인 생활 방식 및 또한 노화로 유발되는 손상에 특히 민감하다. 이 단백질은 변성되고 피부 부속기, 특히 모발이 저항성이 낮아지고, 유연성이 낮아지고 잘 부서질 뿐만 아니라, 더 푸석하고 갈라진 끝이 더 많아지게 만든다. 이러한 부속기는 생체역학적 및 표면 특성을 잃는다.

한 가지 해결책은 외인성 단백질을 공급하여 모발 단백질에 대한 손상을 보완하는 것이다.

가수분해(화학적, 열적 또는 효소적)는 단백질을 저분자량으로 분해하고 물에서의 그의 용해도를 높이고 이 경우 모발 섬유로의 침투를 높여 단백질이 미용 제제에서 유용하게 만들기 위해 필요한 과정이다. 저분자량 분자만이 섬유, 특히 손상된 모발 섬유에 침투할 수 있다. 이러한 가수분해 단백질은 모발 섬유의 수분 유지, 탄력을 개선하고 부드러움, 광택, 탄력 및 풍성함을 더 많이 제공하는 데 도움을 준다. 이들은 내부로부터 모발 섬유를 강화하는 데 도움이 된다.

고성능 가수분해 단백질은 이온 전하 및 극성 부위(반 데르 발스 힘에 의한 상호 작용)로 인해 모발 섬유에 지속성(substantive property)(모발 케라틴과의 약한 결합)을 가지고 있다. 그들은 또한 모발 섬유 표면에 보호막을 형성할 수 있다.

가수분해 단백질을 기반으로 한 제품이 미용 시장에 존재한다. 이 단백질은 식물 또는 동물 기원이다. 가장 일반적인 것은 밀, 실크, 케라틴, 콜라겐, 엘라스틴, 우유 및 아몬드의 가수분해 단백질이다. 그러나 이 분야에서 효율적인 대체 성분에 대한 지속적인 요구가 있다.

본 발명자들은 H. 람노이데스 케이크의 가수분해물이 케라틴 섬유에 침투하여 역학적 특성 및 질감 및 표면 특성을 증가시키는 능력을 갖는다는 것을 예상치 못하게 발견하였다. 이 가수분해물은 피부 부속기의 성장을 증가시키고, 손실을 막고, 저항력을 높이고, 파손, 특히 모발의 파손을 줄여 더 윤기 있고 광채 있고 볼륨 있게 만드는 것으로 나타났다. 또한, H. 람노이데스 케이크 가수분해물은 다음 설명에서 보여지는 바와 같이 피부 부속기 복구 특성을 갖는다.

본 발명에 따른 가수분해물의 한 가지 이점은 그가 일반적으로 업그레이드되지 않는 산업 추출 잔류물로부터 유래된 제품이고, 따라서 제품의 개발이 친환경적 접근법에 속한다는 점이다. 또 다른 이점은 케라틴 섬유, 특히 모발뿐만 아니라 두피와 모낭에도 영향을 미치기 때문에 완전한 관리를 제공하는 성분이라는 것이다. 또한, 본 발명에 따른 가수분해물은 산업적 규모로 용이하게 생산될 수 있다. 마지막으로, 케라틴 섬유에 침투하여 본원에 기술된 미용 효과를 제공할 수 있는 바로 그 저분자량 펩티드를 회수하기 위해 효소적 가수분해를 통해 케이크의 단백질을 분별할 수 있다.

본 발명에 따른 가수분해물은 히포파에 람노이데스 식물의 케이크로부터 유래한다. 산자나무(sea buckthorn)라고도 불리는 이 식물은 이의 용도가 역사적으로 알려져 있다. 따라서, 고대 그리스에서는 잎을 동물 사료로 사용했으며, 특히 말의 털 광택을 증가시키기 위해 사용하였다. 그리스인들은 또한 장과를 통증과 복통을 줄이고 괴혈병을 치료하기 위해 치료적으로 사용하였다. 잎 추출물은 또한 천식, 위궤양, 피부 문제(흉터, 화상) 및 폐 문제를 치료하는 데 사용되었다. 중국에서는, H. 람노이데스의 열매가 기침을 완화하고 가래를 해소하고 위를 튼튼하게 하고 소화의 어려움을 완화하며 혈액을 활성화하고 울혈을 없애는 데 사용된다. 중앙아시아에서는, 현지인들이 고혈압, 소화기 및 피부 장애를 치료하기 위해 산자나무를 사용하였다. 장과에서 추출한 오일은 항염증 특성 및 위궤양 치료를 위해 사용된다. 건조 열매의 달인물은 피부 문제에 사용된다.

또한, H. 람노이데스 추출물이 이미 미용 시장에 존재한다. 따라서, H. 람노이데스 종자의 초임계 CO₂ 추출로부터의 부산물의 수성 추출물은 피부 및 점막에 대한 노화 방지 특성을 바탕으로 출원인이 RNAge™라는 이름으로 판매하고 있으며 특허 출원 WO 2019/069007에 기술되었다. 그러나 본 발명에 따른 추출물은 후자와 상이한데, 그 이유는 그가 종자의 초임계 CO₂ 추출로부터의 부산물의 가수분해물이기 때문이다. 본 발명에 기술된 미용 효과 또한 상이하다.

특허 출원 CN105063139 및 CN108065411은 H. 람노이데스 종자의 초임계 CO₂ 추출 잔류물로부터의 펩티드 가수분해물을 개시하고 있다. 이들은 효소적 가수분해에 의해 얻어진 가수분해물이다. 그러나 이들 2개의 특허 출원 중 어느 것에도 본 발명의 주제를 구성하는 미용 또는 피부과 적용이 개시되어 있지 않다.

특허 출원 CN108354862는 특히 비듬 방지 및 진정 효과를 위한 H. 람노이데스의 오일을 포함하는 조성물을 기술하고 있다. 그러나 첫째로 이것은 오일이고 가수분해물이 아니며 둘째로 본 발명에 기술된 미용 효과는 상기 특허 출원의 비듬 방지 효과와 상이하다.

특허 출원 FR3031455는 H. 람노이데스로부터 추출될 수 있고 특히 복구제로서, 그 중에서도 모발을 위한 복구제로서 미용 조성물에 혼입되도록 의도된 여러 분자를 기술한다. 그러나 본 발명에 기술된 정확한 효과에 대한 어떠한 개시 또는 제안도 언급되어 있지 않다. 또한, 식물 H. 람노이데스의 추출물이 추출물 유형에 대한 추가 설명 없이 개시되어 있다.

특허 출원 FR2943255는 모발 광택 손실을 개선하기 위해 α-5-환원효소의 활성을 자극하기 위한 초임계 CO₂ 추출로 얻은 H. 람노이데스 오일 추출물의 용도에 대해 기술한다. 그러나 이는 초임계 CO₂추출물로 가수분해물은 고사하고 그의 부산물도 아니다. 더욱이, 본 특허 출원에 기술된 미용 효과가 개시되어 있지 않고 제안되지도 않는다.

특허 출원 WO 2009/125071은 초임계 CO₂ 추출 부산물로부터 얻은 몇 가지 식물 추출물을 기술하고 있으며, 이들 부산물은 이후 수성 알코올 추출 또는 특히 물과 부틸렌 글리콜의 혼합물로의 추출을 거친다. H. 람노이데스 열매의 추출물이 개시되어 있다. 그러나 본 발명의 추출물은 H. 람노이데스 부산물의 가수분해물이기 때문에 다르다. 상기 특허 출원은 또한 본 발명에 기술된 미용 효과를 전혀 기술하지 않으며, 특히 피부 부속기에 대한 어떠한 효과도 기술하지 않고 있다.

따라서, 출원인이 아는 한, 선행 기술에는 본 발명에 따른 가수분해물의 미용 또는 약학 용도가 개시되어 있지 않다. 상기 용도는 어떤 문서에서도 단독으로 또는 조합하여 제안되지 않고 있다.

발명의 개시

따라서 제1 주제는 피부 부속기, 유리하게는 모발의 성장을 증가시키고/시키거나 그의 손실을 감소시키고/시키거나; 피부 부속기, 유리하게는 모발의 생체역학적 특성 및/또는 표면 및/또는 질감 특성을 유지 및/또는 증가시키고/시키거나; 손상된 피부 부속기, 유리하게는 모발을 복구하기 위한 H. 람노이데스 케이크의 가수분해물의 비치료적 미용 용도에 관한 것이다.

두 번째 주제는 미용 조성물에서 가수분해물의 비치료적 미용 용도에 관한 것이다.

세 번째 주제는 본 발명에 따른 가수분해물 또는 이를 포함하는 미용 조성물의 국소 적용을 포함하는 비치료적 미용 관리 방법에 관한 것이다.

네 번째 주제는 미용 처리 방법에 관한 것이고 최종 주제는 피부과 또는 약학 용도를 위한 본 발명에 따른 가수분해물에 관한 것이다.

따라서 제1 주제는 피부 부속기, 유리하게는 모발의 성장을 증가시키고/시키거나 그의 손실을 감소시키고/시키거나; 피부 부속기, 유리하게는 모발의 생체역학적 특성 및/또는 표면 및/또는 질감 특성을 유지 및/또는 증가시키고/시키거나; 손상된 피부 부속기, 유리하게는 모발을 복구하기 위한 H. 람노이데스의 가수분해물의 비치료적 미용 용도에 관한 것이다.

"미용 용도"라는 용어는 치료적, 약학적, 피부과적 용도가 아닌 용도, 즉 치료적 조치가 필요하지 않고 건강한 피부 및/또는 피부 부속기 및/또는 점막을 위해 의도되는 용도를 의미한다. 용어 "건강한"은 해당 분야의 전문가, 피부과 전문의사에 의해 비병리학적으로 평가되는, 즉 어떠한 감염, 염증, 흉터, 피부 질환 또는 피부 병태, 예컨대 칸디다증, 농가진, 건선, 습진, 여드름 또는 피부염, 특히 지루성 피부염, 비듬, 또는 상처 또는 부상 및/또는 기타 피부병 및/또는 탈모 및/또는 대머리를 나타내지 않는, 피부 또는 피부 부속기 또는 점막을 지칭한다. 따라서, 본 발명의 목적을 위해, "손상된" 피부 부속기는 해당 분야의 전문가에 의해 비병리학적으로 검증된 부속기이다. 특히, 손상된 피부 부속기는 유연성 및/또는 탄력성 및/또는 변형성을 현저하게 상실하여 결과적으로 탈수된 부속기이다. "손상된" 피부 부속기는 구조 및/또는 시각적 및/또는 생체역학적 특성을 잃는다. 따라서 푸석하고 거칠어지며 저항력이 낮아지고 부서지기 쉽고 갈라지거나 말리므로 끝이 갈라진다. 더욱이, 이들은 거칠고 따라서 부드러움이 떨어지고, 스타일링 및 쉐이핑하기가 어렵다. 이러한 모발 표면 품질의 손실은 눈에 띄고 보기 좋지 않다. 또한 머리카락은 빛을 덜 반사하므로 눈에 띄게 윤기가 떨어지고 덜 빛난다. 머리카락도 가늘고 얇아진다.

용어 "피부 부속기"는 모발, 속눈썹, 눈썹, 체모, 특히 턱수염 및/또는 손톱을 의미한다. 본 발명에 따르면, 턱수염은 콧수염을 포함한다. 우선적으로, 관련된 피부 부속기는 모발이다. 본 발명에 따른 가수분해물은 국소적으로 허용되는 성분이다. "국소적으로 허용되는"이라는 용어는 피부, 특히 두피, 또는 점막 또는 피부 부속기에 무독성, 무자극성이며, 알레르기 또는 염증 반응을 유발하지 않고, 화학적으로 불안정하지 않은 국소 적용에 적합한 성분을 의미한다.

가수분해물은 경구 또는 국소적으로 사용될 수 있다. 유리하게는 국소적으로 사용된다. 용어 "국소적으로"는 성분을 피부 및/또는 점막 및/또는 피부 부속기, 특히 피부 부속기의 표면에 직접적인 국소 적용 및/또는 분무를 의미한다. 매우 유리한 방식에 따르면, 국소 경로는 두피 및/또는 점막을 포함하는 피부에 대한 적용을 배제한다.

가수분해물은 두피, 다리, 허벅지, 팔, 몸통, 목선, 목, 얼굴의 전체 또는 일부, 이마, 턱, 입술, 입술 윤곽, 눈 윤곽, 얼굴의 "T" 영역으로부터 선택된 신체 및/또는 얼굴의 피부의 전체 또는 일부, 및 유리하게는 두피, 및/또는 피부 부속기의 전체 또는 일부, 유리하게는 손톱, 모발, 체모, 특히 턱수염, 속눈썹 및/또는 눈썹, 더욱더 유리하게는 모발, 더 우선적으로 모발에 국소적으로 적용될 수 있다.

따라서 "피부"라는 용어는 두피를 의미하기도 한다.

따라서 본 발명의 주제는 피부 부속기, 유리하게는 모발의 성장을 증가시키고/시키거나 그의 손실을 감소시키고/시키거나; 피부 부속기, 유리하게는 모발의 생체역학적 특성 및/또는 표면 및/또는 질감 특성을 유지 및/또는 증가시키고/시키거나; 손상된 피부 부속기, 유리하게는 모발을 복구하기 위한 H. 람노이데스 케이크의 가수분해물의 비치료적 미용 용도에 관한 것이다.

본 발명의 목적을 위해, 피부 부속기의 "생체역학적 특성을 유지 및/또는 증가시키는 것"이라는 용어는 그의 저항성 및/또는 탄성 및/또는 변형성 및/또는 강도, 및/또는 가소성, 즉. 그의 취성, 특히 연신에 대한 그의 반응 및/또는 그의 유연성을 유지 및/또는 증가시키는 것을 의미한다. 이러한 특성은 인장력에 대한 그의 저항성을 측정하여 생체 외에서 평가될 수 있다. 이러한 생체역학적 매개변수, 특히 모발의 매개변수는 연신에 대한 반응으로 평가될 수 있으며 예를 들어 인장 시험(Dia-Stron)에 의해 측정될 수 있다. 측정된 매개변수는 탄성 계수(Pa), 파단 신장율(%), 파단 강도(gmf), 항복 후 소성 영역의 기울기(gmf/% 신장율)일 수 있으며 피부 부속기의 직경에 대해 정규화된다. 이 마지막 매개변수(기울기)로 파손 직전 연구 재료의 가소성을 측정할 수 있다. 이 기술로 연구되는 재료의 특징적인 신장율의 함수로서 응력(또는 힘)의 곡선을 얻을 수 있다. 산화, 환원 또는 자외선 조사에 의해 손상된 모발 섬유(피부 부속기)에서 이황화 가교가 피질 도메인에서 유리 기로 절단된 후 파단 신장율의 증가 및 항복 후 기울기의 감소가 관찰될 수 있는 것으로 알려져 있다.

본 발명의 한 실시 형태에서, 피부 부속기의 "생체역학적 특성을 유지 및/또는 증가시키는 것"은 시간-유도 또는 광-유도 노화 동안 현저하게 나타날 뿐만 아니라, 환경 조건에 대한 반응으로서 산화성 화학적 또는 물리적 작용제와 접촉하여 매일 나타나는 당화 산물(최종 당화 산물(Advanced Glycation End Product) 또는 AGE)을 감소시키는 것을 의미한다. 이러한 당화 산물은 부속기의 생체역학적 특성을 감소시킨다. 따라서, 한 실시양태에서, 본 발명에 따른 가수분해물은 촉매로서 철 및 산화제로서 과산화수소의 존재하에, 그리고 본 발명에 따른 가수분해물의 존재하에 마커 단백질로서 알부민의 산화 후에 측정된 당화 산물의 백분율이 추출물이 없는 것을 제외하고는 동일한 조건에서 검출된 당화 산물의 백분율에 비해 적어도 20% 감소, 유리하게는 적어도 25% 감소, 더 유리하게는 적어도 50% 감소될 때 "피부 부속기의 생체역학적 특성을 유지 및/또는 증가"시키는 데 효과적인 양이다. 유리하게는, 피부 부속기는 모발이다. 더 유리하게는, 이는 실시예 1a)에 따라 제조된 바와 같은 가수분해물의 존재하에 실시예 3a)에 기술된 조건하에서 검출된 당화 산물의 감소이다(표 3).

본 발명의 대안적인 실시 형태에서, 피부 부속기의 "생체역학적 특성을 유지 및/또는 증가시키는 것"은 과산화수소 및 산화 촉매로서 철의 존재하에 알부민의 산화의 결과로서 본 발명에 따른 가수분해물의 존재하에 측정된 트립토판의 분해를 본 발명에 따른 가수분해물의 부재 하에 측정된 트립토판 분해 백분율에 비해 적어도 30%, 유리하게는 적어도 40%, 더 유리하게는 적어도 95% 감소시키는 것을 의미한다. 유리하게는, 피부 부속기는 모발이다. 더 유리하게는, 이는 실시예 3b)에 기술된 조건하에 실시예 1a)에 따라 제조된 바와 같은 가수분해물이다(표 4).

본 발명의 또 다른 대안적인 실시 형태에서, "피부 부속기의 생체역학적 특성을 유지 및/또는 증가시키는 것"은 알부민 산화 후에 철 및 과산화수소의 존재하에서 검출되는 디티로신의 형성을 본 발명에 따른 가수분해물의 존재하에 적어도 35%, 우선적으로 적어도 55% 감소시키는 것을 의미한다. 유리한 실시 형태에서, 피부 부속기는 모발이다. 더 유리하게는, 가수분해물은 실시예 3c)에 기술된 조건하에 실시예 1a)에 따라 제조된 바와 같은 가수분해물이다(표 5).

본 발명의 또 다른 대안적인 실시 형태에서, "피부 부속기의 생체역학적 특성을 유지 및/또는 증가시키는 것"은 과산화수소의 존재하에 알부민을 산화시킨 후 철의 존재하에서 검출되는 펜토시딘의 형성을 본 발명에 따른 가수분해물의 존재하에서 적어도 35%, 우선적으로 적어도 60% 감소시키는 것을 의미한다. 유리한 실시 형태에서, 피부 부속기는 모발이다. 더 유리하게는, 가수분해물은 실시예 3d)에 기술된 조건하에 실시예 1a)에 따라 제조된 바와 같은 가수분해물이다(표 6).

본 발명의 또 다른 실시 형태에서, "피부 부속기의 생체역학적 특성을 유지 및/또는 증가시키는 것"은 구리 및 지단백질의 존재하에 쉬프 염기, 당화 중간체의 형성을 본 발명에 따른 가수분해물의 존재하에서 가수분해물 없는 동일한 조건하에서 측정된 상기 쉬프 염기의 양에 비해 적어도 11%, 유리하게는 적어도 18%, 매우 유리하게는 적어도 93% 감소시키는 것을 의미한다. 유리한 실시 형태에서, 피부 부속기는 모발이다. 더 유리하게는, 가수분해물은 실시예 3d)에 기술된 조건하에 실시예 1a)에 따라 제조된 바와 같은 가수분해물이다(표 7).

따라서, 본 발명에 따른 가수분해물은 효과적이며 피부 부속기, 우선적으로 모발 부속기의 저항성, 탄력성, 유연성, 강도 및/또는 가소성을 증가시키는 데 사용될 수 있고, 따라서 이들의 파손을 감소시킬 수 있다.

피부 부속기, 유리하게는 모발의 "표면 및/또는 질감 특성을 유지 및/또는 증가시키는 것"이라는 용어는 또한 상기 피부 부속기를 더 매끄럽게 하고/하거나 더 부드럽게 하고/하거나 덜 거칠게 하여 시각적으로 더 윤기 있게 하고/하거나 더 빛나게 하여 엉킴을 쉽게 풀 수 있게 하고/하거나 스타일링하기 쉽게 하고/하거나 쉐이핑하기 쉽게 하는 것을 의미한다. 이러한 속성은 이미징 기술, 예를 들어 비디오 현미경 또는 전자 현미경에 의해, 또는 시각적 또는 촉각적 감각을 정의하도록 훈련된 외부 지원자가 수행하는 모발 다발에 대한 관능 검사에 의해, 또는 전문가(미용사)의 평가 테스트 또는 소비자 설문지에 의한 자체 평가에 의해 평가될 수 있다. 포뮬라에서 제품의 효과는 모발의 인지할 수 있는 시각적 또는 촉각적 품질 기준에 따라 평가된다.

또한, "피부 부속기의 성장을 유지 및/또는 증가시키는 것"이라는 용어는 모낭 유두의 섬유아세포에서 DNA 양을 유지 및/또는 증가시키는 것을 의미한다. 한 실시 형태에서, 이는 감작되지 않은 섬유아세포에서 가수분해물의 부재 하에 측정된 DNA의 양과 비교하여 본 발명에 따른 가수분해물의 존재하에 모발 유두의 섬유모세포에서 적어도 20%, 유리하게는 적어도 30%, 더 유리하게는 적어도 40%의 DNA 양의 증가를 의미한다. 더욱더 유리하게는, 본 발명에 따른 가수분해물은 실시예 4에 제시된 바와 같은 측정 조건 하에 실시예 1a)에 기술된 것이다(표 8).

본 발명의 대안적인 실시 형태에서, "피부 부속기의 성장을 유지 및/또는 증가시키는 것"이라는 용어는 모낭 유두의 섬유아세포에서 ATP 양을 증가시키는 것을 의미한다. 한 실시 형태에서, 이는 본 발명에 따른 가수분해물의 존재하에 모발 유두의 섬유아세포에서 측정된 ATP 양이 가수분해물 없이 측정된 ATP 양과 비교하여 적어도 10%, 바람직하게는 적어도 15%, 더욱더 바람직하게는 적어도 40% 증가한 것을 의미한다. 더욱더 유리하게는, 본 발명에 따른 가수분해물은 실시예 4에 제시된 바와 같은 측정 조건 하에 실시예 1a)에 기술된 것이다(표 9).

본 발명의 또 다른 대안적인 실시 형태에서, "피부 부속기의 성장을 유지 및/또는 증가시키는 것"은 상기 부속기의 모낭의 유두에서 섬유모세포의 합성을 유지 및/또는 증가시키는 것을 의미한다. 본 발명의 한 실시 형태에서, 이는 본 발명에 따른 가수분해물의 존재하에 유두 내 섬유아세포 수가 가수분해물 없이 측정된 섬유아세포 수와 비교하여 적어도 10%, 우선적으로 적어도 20%, 더 우선적으로 적어도 25% 증가한 것을 의미한다. 유리하게는, 이는 모낭의 유두에서 측정된 섬유아세포 수의 증가이다. 더 유리하게는, 이러한 증가는 실시예 4에 기술된 조건하에 실시예 1a)에 따라 제조된 가수분해물의 존재하에 측정된다(표 10).

피부 부속기, 특히 모발의 성장을 증가시키는 가수분해물의 효과는 생체 외에서도 평가될 수 있다. 따라서, 본 발명의 또 다른 대안적인 실시 형태에서, "피부 부속기의 성장을 증가시키는 것"이라는 용어는 케라틴 섬유가 본 발명에 따른 가수분해물의 존재하에, 유리하게는 상기 섬유를 감작시키고 그의 신장을 늦추는 작용제의 존재하에, 상기 작용제로, 그러나 가수분해물 없이, 감작된 대조군 케라틴 섬유의 신장과 비교하여 적어도 5%, 유리하게는 적어도 10% 신장한 것을 의미한다. 유리하게는, 이는 모발에 관한 것이다. 매우 유리하게는, 감작제는 캡사이신이다. 더 유리하게는, H. 람노이데스 케이크의 가수분해물은 실시예 5에 제시된 조건 하에 실시예 1a)에 기술된 바와 같이 제조된 것이다.

또한, "피부 부속기의 손실을 감소시키는 것"이란 용어는 전용 작용제로 감작시켰을 때 모낭 유두의 섬유아세포에서 DNA 양을 증가시키는 것을 의미한다. 따라서 유리하게는, 캡사이신으로 본 발명에 따른 가수분해물의 존재하에 감작된 섬유모세포에서 측정된 DNA 양이 캡사이신으로 가수분해물 없이 감작된 동일한 섬유아세포에서 측정된 DNA 양과 비교하여 적어도 25%, 유리하게는 적어도 50%, 매우 유리하게는 적어도 60% 증가한다. 본 발명의 특히 유리한 실시 형태에서, 이는 모낭의 유두에서 측정되는 DNA 양의 증가를 수반한다. 더욱이, 이러한 증가는 실시예 4에 기술된 조건하에 실시예 1a)에 따라 제조된 가수분해물의 존재하에 측정된다(표 8).

본 발명의 대안적 방식에서, "피부 부속기의 손실을 감소시키는 것"은 캡사이신 및 본 발명에 따른 가수분해물의 존재하에 캡사이신으로 감작된 유두 섬유모세포 수를 캡사이신으로 가수분해물 없이 감작된 섬유아세포 수와 비교하여 적어도 20%, 우선적으로 적어도 30%, 더 우선적으로 적어도 50% 증가시키는 것을 의미한다. 본 발명의 특히 유리한 실시 형태에서, 이는 모낭의 유두에서 측정된 섬유모세포 수의 증가이다. 유리하게는, 이러한 증가는 실시예 4에 기술된 조건하에 실시예 1a)에 따라 제조된 가수분해물의 존재하에 측정된다(표 10).

본 발명의 또 다른 대안적인 실시 형태에서, "피부 부속기의 손실을 감소시키는 것"은 우선적으로 그가 캡사이신으로 감작될 때 모낭의 유두의 섬유아세포에서 ATP 양을 증가시키는 것을 의미한다. 유리한 실시 형태에서, 이는, 유리하게는 본 발명에 따른 가수분해물의 존재하에 캡사이신으로 감작된, 모발 유두의 섬유모세포에서 측정된 ATP 양이 가수분해물 없이 캡사이신으로 감작된 동일한 섬유아세포에서 측정된 ATP 양과 비교하여 캡사이신으로 감작되고 본 발명에 따른 가수분해물의 존재하에 섬유모세포에서 측정되어 적어도 100%, 우선적으로 적어도 130% 증가한 것을 의미한다. 본 발명의 특히 유리한 실시 형태에서, 이는 모낭의 유두에서 측정된 ATP 양의 증가를 수반한다. 더 유리하게는, 이러한 증가는 실시예 4에 기술된 조건하에 실시예 1a)에 따라 제조된 가수분해물의 존재하에 측정된다(표 9).

피부 부속기, 특히 모발의 성장을 증가시키는 특성 및 또한 생체역학적 및/또는 표면 및/또는 질감 특성을 증가시키는 특성으로 인해 본 발명에 따른 가수분해물은 피부 부속기, 특히 모발의 볼륨, 색상, 광택 및 광채를 개선하기 위한 활성 성분이 된다.

피부 부속기관, 특히 모발의 생체역학적 특성에 대한 본 발명에 따른 가수분해물의 유효성은 또한 그의 파손을 평가할 수 있게 하는, 인장 강도 시험(Diastron), 피로 시험, 또는 모발에 대한 반복 스타일링 시험을 포함하는 다양한 시험에 의해 입증될 수 있다. 끝이 갈라진 모발 섬유를 정량화하는 것도 가능하다. 또한 이러한 생체역학적 특성은 건조 또는 젖은 모발에 필요한 스타일링 힘을 측정하여 평가될 수 있다.

또한, 피부 부속기에서 가수분해물의 분포를 직접 측정하여 그의 침투 정도를 평가할 수 있다. 유리하게는, 모발에서의 가수분해물의 분포는 다양한 이미징 및 현미경 기술에 의해 연구된다. 더 유리하게는, 푸리에 변환 적외선 분광법(FTIR)을 사용할 수 있다. 따라서, 본 발명의 유리한 실시 형태에서, 산화제로 손상된 모발에 본 발명에 따른 가수분해물을 적용한 후 모발을 가로로 절단한 후, FTIR에 의해 가수분해물을 적용하지 않고 동일한 산화제로 손상된 동일한 모발, 또는 손상되지 않은 모발과 비교하여 연구한다. 그런 다음 가수분해물의 진동 프로파일을 절단물의 진동 프로파일과 비교하여 모발에서 제품의 분포를 평가한다. 더 유리하게는, 산화제는 과산화수소이다.

또한, "손상된 피부 부속기를 복구한다는 것"이라는 용어는 영양 결핍, 예를 들어, PM2.5 및 PM10으로 알려진 미세 입자로부터 선택된 오염 물질, 금속, 예를 들어 구리 또는 철, 중금속, 기후 및/또는 환경 조건, 예컨대 바람, 비, 급격한 온도 및 습도 변화, 추위, 열, UV, 해염, 수영장의 염소, 및 과산화수소를 비롯한 기타 물리적 또는 화학적 작용제, 특히 샴푸, 화장품 메이크업 제품, 헤어 컬러링, 탈색 및 파마 제품, 바니시, 용매 및 가정용 제품에 존재하는 것, 기계적 공격, 예컨대 브러싱, 헤어드라이어 및 고데기의 열, 뿐만 아니라 내인성 및/또는 시간-유도 노화에 의해 손상된 피부 부속기에 대한 본 발명에 따른 가수분해물의 복구 효과를 의미한다. 후자는 피부 부속기, 특히 속눈썹, 눈썹 및 악화된 모발의 수분 손실을 비롯한 구조적 및/또는 기능적 품질 손실의 원인이 된다.

본 발명의 목적을 위해, 용어 "피부 부속기를 복구하는 것"은 피부 부속기, 우선적으로는 모발의 구조 및/또는 시각적 특성 및/또는 생체역학적 특성을 적어도 부분적으로 개선하는 것을 의미한다. 이러한 복구는 피부 부속기가 환경적, 화학적, 생물학적 및/또는 역학적 스트레스에 노출될 때 우선적으로 평가된다.

환경적 스트레스에는 특히 연기, 오염, 온도, 특히 뜨거운 온도, 차가운 온도 및 이의 급격한 변화, 수분 함량, 특히 습도 또는 건조, 태양 복사, 특히 가시 스펙트럼, UV 및/또는 감마선, 비, 바람, 먼지 및 해염이 포함된다.

화학적 스트레스에는 가혹한 가정용 제품, 수영장의 염소, 가혹한 미용 제품, 예컨대 컬러링 및 탈색 제품, 매니큐어 및/또는 제거제, 용매, 및 메이크업이 포함된다.

모발에 대한 화학적 스트레스에는 특히 공격적인 샴푸 및 헤어케어 및/또는 트리트먼트 제품, 특히 스트레이트닝 및/또는 파마와 같은 스타일링 또는 쉐이핑을 위한 것 및/또는 염색 및/또는 탈색을 위한 것이 포함된다.

역학적 스트레스에는 특히 브러싱 및/또는 천 (귀, 옷) 및/또는 먼지 및/또는 모래와 같은 입자에 문지르기와 같은 마찰, 헤어드라이어 및 고데기에 의한 가열, 및/또는 스타일링, 특히 당김, 연신 및/또는 비틀림에 대한 노출이 포함된다.

본 발명에 따른 가수분해물은 또한 노화의 부정적인 영향을 감소시킴으로써 피부 부속기, 유리하게는 모발, 및/또는 피부, 유리하게는 두피, 및/또는 점막을 위한 노화 방지 성분으로서 효과적이다.

따라서, 본 발명의 한 실시 형태에서, 복구 효과는 해당 분야의 기존 기술에 따라 평가될 수 있다. 복구 효과를 측정하기 위한 종래의 방법으로 평가되는 제품이 손상된 피부 부속기, 우선적으로 손상된 모발의 시각적, 구조적 및/또는 기능적 상태를 손상되지 않은 피부 부속기, 우선적으로 손상되지 않은 모발의 상태와 비슷하게 복구하는 능력을 측정할 수 있다. 이들은 손상된 피부 부속기, 우선적으로 손상된 모발에 적용되고, 복구 효과는 손상되지 않은 피부 부속기, 우선적으로 손상되지 않은 모발과 비교하여 측정된다. 유리하게는, 복구 효과는 부속기의 단백질의 변성을 유도하는 산화제로 시험관 내에서 손상된 피부 부속기에 대해 복구 효과이다. 유리하게는, 이는 모발에 대한 가수분해물의 복구 효과이고 산화제는 더 우선적으로 과산화수소이다. 더 유리하게는, 이 단백질 변성은 실시예 6에 기술된 조건하에서 시차 엔탈피 분석기(DSC Q100, TA Instruments)를 사용하여 시차 주사 열량측정법(Wortmann and Deutz, Appl. Polym. Sci., 48, 137-150 (1993))으로 단백질 변성 온도(℃)를 측정함으로써 평가된다. 따라서, 본 발명에 따른 가수분해물은 손상된 부속기의 복구 지수가 "건강한" 부속기, 즉 과산화수소수로 유도된 산화 스트레스를 받지 않은 부속기에 비해 적어도 20%, 우선적으로 적어도 30%일 때 피부 부속기, 우선적으로 모발을 복구하는 데 효과적인 양이다. 유리하게는, 이는 실시예 6에 기술된 조건하에 실시예 1a)에 따라 제조된 바와 같은 가수분해물의 존재하에서의 복구 지수의 측정을 수반한다.

피부 부속기, 유리하게는 모발에 대한 이러한 복구 효과를 생체 내에서 평가하기 위해, 비디오 현미경, 공초점 현미경, FTIR 또는 라만 현미경, X선, 및 전자 현미경으로부터 선택된 여러 방법을 사용할 수 있으며, 그 목적은 특히 표면 손상의 징후로서 떨어진 인설을 시각화하고 정량화하여 피부 부속기의 케라틴 섬유의 보호막인 큐티클의 상태 및/또는 품질을 관찰하는 것이다. 원자력 현미경법 또는 백색광 간섭측정 프로필로메트리와 같은 피부 부속기, 특히 모발의 형태를 평가하기 위한 물리적 표면 정량화 방법, 화학(XPS), 전하(유동 전위) 또는 에너지(역 가스 크로마토그래피)를 평가하기 위한 방법이 시행될 수 있다.

피부 부속기관, 특히 모발의 내부 특성에 대한 본 발명에 따른 가수분해물의 복구 효과를 평가하기 위해 열량측정법(DSC)이 사용될 수 있다.

본 발명에 따른 가수분해물은 H. 람노이데스 종자의 초임계 CO₂ 추출로부터의 부산물, 즉 오일의 부산물 또는 상기 종자를 압착한 후 얻은 부산물의 효소적 또는 화학적 가수분해에 의해 얻어진 가수분해물이다. 본 발명의 목적을 위해, 종자는 과피로도 알려진 과육 부분이 없는 H. 람노이데스의 장과(또는 열매)에 해당한다. 이산화탄소를 이용한 초임계 추출은 추출할 화합물의 유분을 분리할 수 있는 당업자에게 친숙한 기술이므로 다양한 용도에 사용될 수 있다. 본 발명의 목적을 위해, 이 추출의 잔류물은 "부산물"이라고 불리며 상기 기술을 통해 추출되지 않은 모든 화합물을 포함한다. 따라서 "부산물"이라는 용어는 케이크라고도 하는, 오일 추출 후 얻은 잔류물을 의미한다. "케이크"라는 용어는 다음 설명에서 사용된다. 유리하게는, 이는 따라서 H. 람노이데스 종자의 탈지 분획이다. 우선적으로, 이는 H. 람노이데스 종자의 초임계 추출로부터의 부산물의 효소적 또는 화학적 가수분해물, 더 우선적으로 이의 효소적 가수분해물이다. 더 우선적으로, 부산물에는 오일이 전혀 포함되어 있지 않다.

효소적 가수분해는 당업자에게 공지된 임의의 프로테아제의 존재하에, 및 유리하게는 펩신, 트립신 또는 키모트립신과 같은 췌장 기원의 효소로부터 선택된 동물 기원의 효소, 우선적으로 트립신, 또는 파파인, 브로멜라인, 피신 또는 악티니딘으로부터 선택된 식물 기원의 효소, 우선적으로 파파인, 또는 Alcalase®라는 이름으로 판매되는 바실루스 리체니포르미스(Bacillus licheniformis) 균주로부터의 효소 또는 균주 B. 섭틸리스(B. subtilis)로부터의 효소로부터 선택된 박테리아 기원의 효소, 우선적으로 Alcalase®의 존재하에 수행될 수 있다. 본 발명의 특히 유리한 실시 형태에서, 사용되는 효소는 Alcalase®이다.

가수분해는 효소의 최적 pH에 따라 pH 3 내지 9에서, 및 유리하게는 pH 4 내지 8.5, 매우 유리하게는 pH 8.5에서 수행될 수 있다. 가수분해는 40℃ 내지 65℃, 유리하게는 50 내지 60℃, 매우 유리하게는 55℃의 온도에서 수행될 수 있다. 이는 1시간 내지 3시간에 걸쳐, 우선적으로 2시간에 걸쳐 수행된다.

그 후 사용된 효소는 가열함으로써, 유리하게는 80℃ 내지 100℃의 온도에서, 매우 유리하게는 90℃의 온도에서, 5분 내지 30분 동안, 우선적으로 10분 동안 가열함으로써 불활성화된다. 효소의 불활성화는 pH 5 내지 8, 바람직하게는 pH 6.5에서 일어난다.

그 후 수득한 가수분해물은 원심분리하고 연속적인 여과에 의해 0.22 ㎛의 공극률로 정제한다.

유리하게는, 효소적 가수분해 단계 전에, 단백질은 케이크로부터 먼저 추출된다. 이 경우, pH 7.5 내지 10에서, 유리하게는 pH 8 내지 9에서, 매우 유리하게는 pH 9.0에서, 30분 내지 2시간 동안, 우선적으로 1시간 동안 추출된다.

단백질 추출 및 가수분해에 사용되는 케이크의 중량은 용매 및 케이크의 총 중량에 대해 5% 내지 20%, 유리하게는 5% 내지 15%, 더 유리하게는 10 중량%이다.

단백질 추출에 사용되는 용매는 물, 특허 출원 FR3061416에 기술된 바와 같은 용매로서 코코넛 워터, 또는 용매의 총 중량에 대해 적어도 50 중량%의 특허 출원 FR3069450에 기술된 바와 같은 C₆-C₁₆ 디알킬 카보네이트(C₇-C₁₀, 유리하게는 C₈ 디알킬 카보네이트, 예를 들어 디옥틸 카보네이트 또는 디에틸헥실 카보네이트를 포함함)를 포함하는 용매로부터 선택된다. 유리하게는, 사용되는 용매는 유일한 용매로서 물이다.

상기 단백질 추출은 실온, 즉 20℃의 온도를 비롯하여 4℃ 내지 300℃, 유리하게는 4℃ 내지 100℃, 더 유리하게는 15℃ 내지 80℃, 매우 유리하게는 15℃ 내지 30℃의 온도에서 수행될 수 있다. 본 발명의 특히 유리한 실시 형태에서, 단백질 추출은 실온에서 수행된다.

대안적인 실시 형태에서, 추출은 아임계 조건하에서 수행된다.

"아임계 조건하에서의 추출"이라는 용어는 100℃ 초과의 온도 조건 및 22.1 MPa(221 bar) 미만의 압력 조건 하에 물의 존재하에서의 추출을 의미하며, 따라서 물이 액체 상태로 유지되지만 실온에서 점성 및 표면 장력이 물보다 낮아 유전 상수가 증가한다. 따라서, 추출 압력은 10 MPa(100 bar) 내지 25 MPa(250 bar), 우선적으로 15 내지 22.1 MPa(150 내지 221 bar)이다.

따라서, 아임계 조건하에서 추출은 100℃ 내지 300℃, 유리하게는 120℃ 내지 250℃, 더 유리하게는 140℃ 내지 200℃ 범위의 온도에서 물에서 수행된다. 추출은 주어진 단일 온도 또는 연속적으로 증가하는 온도에서 수행될 수 있다. 본 발명의 하나의 유리한 실시 형태에서, 추출은 160℃의 단일 온도에서 수행될 것이다. 대안적인 실시 형태에서, 100℃ 내지 200℃의 3개의 증가하는 온도 구배, 예컨대 120℃, 140℃ 그 후 160℃, 또는 110℃, 130℃ 그 후 150℃, 또는 그 외 120℃, 145℃ 그 후 170℃에 따라 수행될 것이다.

본 발명의 특히 유리한 실시 형태에서, 가수분해물은 다음과 같이 효소 절단에 의해 수득된다: 단백질은 케이크 및 용매로서 물의 총 중량에 대해 10 중량%의 양의 케이크로부터, pH 12, 실온에서 1시간에 걸쳐 추출된다. 이렇게 추출된 단백질은 Alcalase®와 단백질의 총 부피에 대해 5 부피% 농도의 Alcalase®의 존재하에 55℃의 온도 및 pH 8.5에서 2시간 동안 가수분해된다. 효소는 90℃ 및 pH 6.5의 온도에서 20분 동안 가열하여 불활성화된다. 그 후 혼합물은 실시예 1a)에 기술된 조건하에서 냉각되고, 원심분리되고, 여과된다(0.22 ㎛).

대안적으로, 케이크의 단백질은 케이크 및 용매로서 물의 총 중량에 대해 10 중량%의 양의 케이크를 사용하여 pH 8.5, 실온, 즉 20℃의 온도에서 1시간에 걸쳐 추출된다. 이렇게 추출된 단백질은 Alcalase®와 단백질의 총 부피에 대해 5 부피% 농도의 Alcalase®의 존재하에 55℃의 온도 및 pH 8.5에서 2시간 동안 가수분해된다. 효소는 90℃의 온도 및 pH 6.5에서 20분 동안 가열하여 불활성화된다. 그 후 혼합물을 실시예 1b)에 기술된 조건하에서 냉각되고, 원심분리되고, 여과된다(0.22 ㎛).

또한, 대안적으로, 케이크의 단백질은 케이크 및 용매로서 물의 총 중량에 대해 10 중량%의 양의 케이크를 사용하여 pH 12, 실온, 즉 20℃의 온도에서 1시간에 걸쳐 추출된다. 이렇게 추출된 단백질은 파파인과 단백질의 총 부피에 대해 5 부피% 농도의 파파인의 존재하에 55℃의 온도 및 pH 8.5에서 2시간에 걸쳐 가수분해된다. 파파인은 90℃의 온도 및 pH 6.5에서 20분 동안 가열하여 불활성화된다. 그 후 혼합물을 실시예 1c)에 기술된 조건하에서 냉각되고, 원심분리되고, 여과된다(0.22 ㎛).

본 발명에 따른 가수분해물은 결과적으로 5%를 포함하여 1 중량% 내지 20 중량%, 유리하게는 2 중량% 내지 10 중량%의 건조 물질 함량, 1L의 가수분해물당 15 g 내지 35 g, 유리하게는 1L의 가수분해물당 18.8 g의 총 단백질 함량 및 또한 15% 내지 40%, 유리하게는 18.25%의 5 킬로 달톤(kDalton)(Da) 내지 30 kDa의 분자량을 갖는 펩티드의 백분율, 40% 내지 85%, 유리하게는 72.6%의 5 kDa 미만의 분자량을 갖는 펩티드의 백분율을 포함한다(실시예 2). 유리하게는, 가수분해물은 적어도 3 중량%, 구체적으로 적어도 3.5 중량%, 더 구체적으로 3.44 중량%, 매우 유리하게는 3.84 중량%의 건조 물질 함량을 포함한다. 더욱더 유리한 방식에서, 가수분해물은 5 중량%의 건조 물질 함량을 포함한다.

매우 유리하게는, 가수분해물은 18.25%의 5 kDa 내지 30 kDa의 분자량을 갖는 펩티드의 백분율, 및 72.6%의 5 kDa 미만의 분자량을 갖는 펩티드의 백분율을 포함한다

또한, 매우 유리하게는, 본 발명에 따른 가수분해물은 갈산, 또는 헥사히드록시디펜산으로 가수분해될 수 있는 어떠한 폴리머, 또는 헥사히드록시디펜산으로 가수분해될 수 있는 어떠한 폴리머, 또는 엘라그산, 갈로타닌 또는 엘라기타닌으로 가수분해될 수 있는 어떠한 폴리머도 함유하지 않는다. 더 유리하게는, 가수분해물은 특히 특허 출원 FR031455에 기술된 바와 같은, 언급된 화합물의 어떠한 유도체 또는 이의 어떠한 염도 함유하지 않는다.

또 다른 유리한 실시 형태에서, 본 발명에 따른 가수분해물은 WO 2009/125071에 기술된 바와 같은 L-퀘브라키톨도 다른 메틸 이노시톨 및/또는 이노시톨도 함유하지 않는다. 특히, 본 발명에 따른 가수분해물은 미리세틴, 케르세틴, 캄파에롤 또는 이소르함네틴을 함유하지 않는다.

따라서, 가수분해물, 특히 실시예 1a) 내지 1c)에서 제조된 바와 같은 가수분해물은 액체 형태이다. 선택적으로, 가수분해물은 예를 들어 동결 건조에 의해 또는 말토덱스트린의 존재하에 분무에 의해 건조될 수 있다. 그런 다음 가수분해물은 분말 형태가 된다.

이 경우, 특히 실시예 1a) 내지 1c)에 기술된 조건하에서 수득된 본 발명에 따른 가수분해물은 수득된 분말의 총 중량에 대해 20% 내지 90%, 우선적으로 40% 내지 80%, 더 우선적으로 70% 내지 80%의 중량 농도의 말토덱스트린의 존재하에 분무화된다.

본 발명에 따른 가수분해물은 단독으로 사용되거나 미용 조성물에 포함될 수 있다.

미용 또는 피부과 성분의 형태로 단독으로 사용되는 경우 우선적으로 글리세롤을 함유한 수용액에 용해되며, 유리하게는 가수분해물을 포함하는 수용액의 총 중량에 대해 60 중량% 내지 90 중량%, 더 유리하게는 70 중량% 내지 85 중량%의 농도로, 매우 유리하게는 80 중량%의 농도로 존재한다.

본 발명의 하나의 대안적인 실시 형태에서, 가수분해물은 용매, 특히 극성 용매, 예컨대 알코올, 폴리올, 글리콜, 예컨대 펜틸렌 글리콜 및/또는 부틸렌 글리콜 및/또는 프로필렌 글리콜 및/또는 헥실렌 글리콜 및/또는 카프릴릴 글리콜, 또는 이들의 혼합물, 우선적으로 물-글리콜 혼합물, 더 우선적으로 헥실렌 글리콜, 프로필렌 글리콜, 카프릴릴 글리콜 및 이들의 임의의 혼합물로부터 선택된 글리콜을 함유하는 것에 용해되고/되거나 희석된다. 유리하게는, 수득된 가수분해물은 헥실렌 글리콜을 함유하는 수용액, 특히 미용 성분의 총 중량에 대해 0.1 중량% 내지 10 중량%의 헥실렌 글리콜, 우선적으로 0.5 중량% 내지 5 중량%의 헥실렌 글리콜을 함유하는 수용액에 희석되고/되거나 가용성이다. 유리하게는, 수득된 가수분해물은 카프릴릴 글리콜, 특히 가수분해물을 포함하는 수용액의 총 중량에 대해 0.01 중량% 내지 5 중량%의 카프릴릴 글리콜, 우선적으로 0.1 중량% 내지 1 중량%의 카프릴릴 글리콜을 함유하는 수용액에 희석되고/되거나 가용성이다. 대안적으로, 본 발명에 따른 가수분해물이 용해되는 용액은 프로필렌 글리콜 및 카프릴릴 글리콜을 포함한다.

특히, 본 발명에 따른 가수분해물이 용해되는 수용액은 잔탄 검, 구체적으로 수용액의 총 중량에 대해 0.01 중량% 내지 5 중량%, 더 구체적으로 0.1 중량% 내지 5 중량%의 잔탄 검, 더 구체적으로 가수분해물을 포함하는 수용액의 총 중량에 대해 0.1 중량% 내지 1 중량%의 잔탄 검을 포함한다.

유리하게는, 본 발명에 따른 가수분해물이 용해되는 용액은 헥실렌 글리콜, 카프릴릴 글리콜 및 잔탄 검을 포함한다.

본 발명의 대안적인 실시 형태에서, 추출물은 Geogard™라는 이름으로 판매되는 벤조산나트륨과 글루코노락톤의 혼합물을 포함하는 용액에 용해된다.

가수분해물은 적어도 하나의 미용상 허용되는 부형제를 포함하는 미용 조성물에 혼입될 수 있다. 본 발명의 목적을 위해, 용어 "미용상 허용되는" 부형제는 국소적으로 허용되는 화합물 및/또는 용매, 즉 피부, 특히 두피와 접촉 시 과도한 염증 및 알레르기 반응을 유발하지 않는 것, 독성이 없는 것, 불안정하지 않은 것, 또는 이와 동등한 것을 의미한다.

본 발명의 목적상, 용어 "미용 조성물"은 비치료적 조성물, 즉 피부과 전문의가 "정상"이라고 지칭하는 피부, 특히 두피, 및/또는 피부 부속기를 예방하고/하거나 관리하기 위해 의도된 조성물을 의미한다. 용어 "정상" 피부 또는 두피 또는 피부 부속기는 이전에 정의된 바와 같은 건강한 피부 또는 두피 또는 피부 부속기를 의미하는 것으로 본원에서 의도된다.

본 발명의 우선적인 실시 형태에서, 본 발명에 따른 가수분해물은 미용 조성물에, 조성물의 총 중량에 대해 1 x 10^-4 중량% 내지 10 중량%, 우선적으로 1 x 10^-4중량% 내지 5 중량%, 더 유리하게는 1 x 10^-3 중량% 내지 3 중량%, 더 우선적으로 0.001 중량% 내지 0.1 중량%의 함량으로 존재한다.

따라서 조성물은 피부 부속기, 유리하게는 모발의 성장을 증가시키고/시키거나 그의 손실을 감소시키고/시키거나; 피부 부속기, 유리하게는 모발의 생체역학적 특성 및/또는 표면 및/또는 질감 특성을 유지 및/또는 증가시키고/시키거나; 손상된 피부 부속기, 유리하게는 모발을 복구하기 위해 사용될 수 있다.

본 발명에 따른 미용 조성물은 피부 또는 두피 및/또는 피부 부속기, 우선적으로 두피 및/또는 피부 부속기에 국소 적용하기 위해 통상적으로 사용되는 제시 형태, 예컨대 액체 또는 고체, 또는 심지어 가압 액체 형태일 수 있다. 이들은 수성 또는 유성 용액, 크림 또는 수성 겔 또는 유성 겔(특히 병 또는 튜브에 담김), 샤워 젤, 샴푸, 컨디셔너, 밀크, 오일, 에멀젼, 하이드로겔, 마이크로에멀젼 또는 나노에멀젼, 특히 수중유 또는 유중수 또는 다중 또는 실리콘 기반 에멀젼, 세럼, 로션(특히 유리 또는 플라스틱 병 또는 계량 병에 담김) 또는 에어로졸 또는 스프레이, 바이알, 액체 비누, 페이스트, 피부과용 바, 연고, 폼, 마스크, 래커, 패치, 바니시, 무수 제품(이는 바람직하게는 액체, 페이스트 또는 고체임)의 형태, 또는 예를 들어 지팡이 형태(특히 스틱 형태), 또는 분말 형태로 제형화될 수 있다. 특히 속눈썹 또는 눈썹용 메이크업 제품, 예컨대 마스카라 또는 펜슬 또는 메이크업 제거 제품일 수 있다. 특히, 미용 조성물은 세럼, 로션, 크림, 샴푸, 헤어 컨디셔너, 오일, 밀크, 연고, 페이스트, 폼, 에멀젼, 하이드로겔, 샤워 젤, 마스크, 래커, 스프레이, 왁스, 마스카라, 메이크업 펜슬 또는 바니시로 이루어진 군으로부터 선택되고, 유리하게는 샴푸, 컨디셔너 또는 로션의 형태이다.

우선적으로, 가수분해물은 케라틴 섬유, 특히 모발 섬유, 및 피부, 특히 두피를 침해하지 않는 "중성 및 순한" 조성물의 제형화에 적합하다. 가수분해물은 또한 계면활성제와 함께 양이온성 제형에 사용하기에 적합하다.

본 발명에 따른 조성물은 경우에 따라 관심의 다른 화합물과 함께 임의의 적합한 용매 및/또는 임의의 적합한 비히클 및/또는 임의의 적합한 부형제를 함유할 수 있다. 이들은 특히 계면활성제, 보존제, 완충제, 팽윤제, 킬레이트제, 살생물제, 변성제, 유백제, pH 조절제, 환원제, 안정제, 유화제, 증점제, 겔화제, 필름 형성 중합체, 용매, 충전제, 살균제, 냄새 흡수제, 매트화제, 컨디셔닝제, 질감제, 광택제, 안료, 착색제, 방향제, 화학적 또는 광물성 선스크린, 미량 원소 및 에센셜 오일로부터 선택되는 미용상 허용되는 부형제를 함유할 수 있다. 이들 조합도 본 발명에 포함된다. CTFA Cosmetic Ingredient Handbook, Second Edition(1992)은 특히 두피에 국소적으로 사용하기에 적합한 미용 산업에서 일반적으로 사용되는 다양한 미용 성분을 기술한다.

미용 조성물은 본 발명에 따른 가수분해물과 동일한 특성을 갖고 상기 가수분해물과 상승적일 수도 있고 그렇지 않을 수도 있는 효과를 유도하는 다른 미용제를 함유할 수 있거나, 보완적인 효과를 갖는 미용제를 함유할 수 있다. 탈모 방지 활성제로서, 출원인이 Trichogen™ LS 8960이라는 이름으로 판매하는 술포펩티드, 아미노산, 아미노사카라이드, 비타민 B군, 아연 및 파낙스 진생(Panax ginseng) 및 아르티움 마주스(Artium majus) 추출물의 조합, 또는 출원인에 의해 Litchiderm™이라는 이름으로 판매되는 리치 치넨시스(Litchi chinensis) 과피 추출물과 같은 보호제, 또는 출원인에 의해 Phytosoothe™ LS9766이라는 이름으로 판매되는 유채 피토스테롤과 같은 진정 및 가려움방지 활성제가 언급될 것이다.

기타 활성제, 예컨대 특히 모발 관리를 위한 항산화 활성제로서 DN-Age™라는 이름으로 판매되는 카시아 알라타(Cassia alata) 잎 추출물, 디글리케이팅제(deglycating agent)로서 CollRepair™라는 이름으로 판매되는 살비아 밀티오리자(Salvia miltiorhizza) 추출물과 니아신아미드의 조합물, 또는 피부 따라서 두피의 탄력성을 촉진하는 활성제, 예컨대 Dermican™이라는 이름으로 판매되는 합성 테트라펩티드, Linefactor™라는 이름으로 판매되는 히비스커스 아벨모스쿠스(Hibiscus abelmoschus)의 추출물, Proteasyl™이라는 이름으로 판매되는 정제된 완두콩 추출물, Elestan™이라는 이름으로 판매되는 마닐카라 물티네르비스(Manilkara multinervis)의 추출물, Collalift™ 18이라는 이름으로 판매되는 카야 세네갈렌시스(Khaya senegalensis)의 추출물, 출원인에 의해 Argassential™이라는 이름으로 판매되는 아르간 펄프의 추출물, Sqisandryl™이라는 이름으로 판매되는 스키잔드라 키넨시스(Schizandra chinensis)의 추출물, Eperuline™이라는 이름으로 판매되는 에페루아 팔카타(Eperua falcata)의 추출물, 또는 출원인에 의해 MAT-XS™ Bright라는 이름으로 판매되는 오르토시폰 스타미누스(Orthosiphon staminus)의 추출물이 조성물에 존재할 수 있다. 이러한 활성제의 조합은 특히 모낭을 강화하고 탈모를 감소시킬 수 있다. 본 발명의 가수분해물은 또한 모발 보호 특성, 특히 오염에 대한 모발 보호 특성을 위해 출원인에 의해 Rambuvital™이라는 이름으로 판매되는 식물 네펠리움 라파세움(Nephelium lappaceum)의 종자 추출물과 조합될 수 있다.

본 발명의 제3 주제는 피부 부속기, 유리하게는 모발의 성장을 증가시키고/시키거나 그의 손실을 감소시키고/시키거나; 피부 부속기, 유리하게는 모발의 생체역학적 특성 및/또는 표면 및/또는 질감 특성을 유지 및/또는 증가시키고/시키거나; 손상된 피부 부속기, 유리하게는 모발을 복구하기 위한, 본 발명에 따른 가수분해물 또는 이를 포함하는 미용 조성물의 국소 적용을 포함하는 비치료적 미용 관리 방법에 관한 것이다.

본 발명의 유리한 실시 형태에서, 미용 관리 방법은 두피, 다리, 허벅지, 팔, 몸통, 목선, 목, 얼굴의 전체 또는 일부, 이마, 턱, 입술, 입술 윤곽, 눈 윤곽, 얼굴의 "T" 영역으로부터 선택된 신체 및/또는 얼굴의 피부의 전체 또는 일부, 및 유리하게는 두피, 및/또는 피부 부속기의 전체 또는 일부, 유리하게는 손톱, 모발, 체모, 특히 턱수염, 속눈썹 및/또는 눈썹, 더욱더 유리하게는 모발, 더 우선적으로 모발에 본 발명에 따른 가수분해물 또는 이를 포함하는 미용 조성물의 국소 적용으로 이루어진다.

결과적으로 미용 관리 방법으로 피부 부속기, 유리하게는 모발의 색상 및/또는 광택 및/또는 광채 및/또는 볼륨을 개선할 수 있다.

또 다른 주제는 피부 부속기, 유리하게는 모발의 성장을 증가시키고/시키거나 그의 손실을 감소시키고/시키거나; 피부 부속기, 유리하게는 모발의 생체역학적 특성 및/또는 표면 및/또는 질감 특성을 유지 및/또는 증가시키고/시키거나; 손상된 피부 부속기, 유리하게는 모발을 복구하기 위한 미용 처리 방법으로서, 다음의 단계를 포함하는 방법에 관한 것이다:

- 치료적 조치를 필요로 하는 병리, 특히 피부 병리를 앓지 않고, H. 람노이데스의 가수분해물 또는 이를 포함하는 미용 조성물을 적용하는 것이 요망되고/되거나 이를 필요로 하는 사람의 전용 집단을 식별하는 단계;

- 처리를 필요로 하는 건강한 두피, 및/또는 건강한 피부 부속기를 포함하는 신체의 건강한 영역 및/또는 건강한 피부를 식별하는 단계;

- 본 발명에 따른 가수분해물 또는 이를 포함하는 조성물을 국소 적용하는 단계로, 이 경우 조성물의 총 중량에 대해 1 x 10^-4 중량% 내지 10 중량%, 우선적으로 1 x 10^-4 중량% 내지 5 중량%, 더 유리하게는 1 x 10^-3 중량% 내지 3 중량%, 더욱더 바람직하게는 0.001 중량% 내지 0.1 중량%의 함량으로 국소 적용하는 단계.

최종 목적은 탈모 및/또는 대머리의 치료에 있어 단독으로 또는 적어도 하나의 피부과적으로 또는 약학적으로 허용되는 부형제를 포함하는 피부과 또는 약학 조성물에 사용하기 위한 H. 람노이데스 케이크의 가수분해물에 관한 것이다. 본 발명의 유리한 실시 형태에서, 가수분해물은 본 발명에 기술된 바와 같고 피부과 또는 약학 조성물에 조성물의 총 중량에 대해 1 x 10^-4 중량% 내지 10 중량%, 우선적으로 1 x 10^-4 중량% 내지 5%, 더 유리하게는 1 x 10^-3 중량% 내지 3 중량%, 더 우선적으로 0.001 중량% 내지 0.1 중량%의 함량으로 존재한다.

실시예는 본 발명의 필수적인 부분을 구성하고, 실시예를 포함하여 전체적으로 취해진 설명으로부터 종래 기술에 비해 신규한 것으로 보이는 임의의 특징은 본 발명의 필수적인 부분을 구성한다. 따라서 각 실시예는 일반적인 범위를 갖는다.

달리 표시되지 않는 한, 온도는 섭씨 온도로 표시하며 압력은 대기압이다.

실시예

실시예 1: 케이크 가수분해물의 다양한 제조 방법

실시예 1a): 케이크 단백질을 케이크 및 용매로서 물의 총 중량에 대해 10 중량%의 양의 케이크를 사용하여 pH 12, 실온, 즉 20℃의 온도에서 1시간에 걸쳐 추출하였다. 이렇게 추출된 단백질을 알칼라아제와 단백질의 총 부피에 대해 부피 농도가 5%인 액체 형태의 알칼라아제로 55℃의 온도 및 pH 8.5에서 2시간 동안 가수분해시켰다. 90℃의 온도 및 pH 6.5에서 20분 동안 가열하여 효소를 불활성화시켰다. 그런 다음 혼합물을 냉각시키고 원심분리하고 여과하였다(0.22 μm).

실시예 1b): 케이크 단백질을 케이크 및 용매로서 물의 총 중량에 대해 10 중량%의 양의 케이크를 사용하여 pH 8.5, 실온, 즉 20℃의 온도에서 1시간에 걸쳐 추출하였다. 이렇게 추출된 단백질을 알칼라아제와 단백질의 총 부피에 대해 부피 농도가 5%인 액체 형태의 알칼라아제로 55℃의 온도 및 pH 8.5에서 2시간 동안 가수분해시켰다. 90℃의 온도 및 pH 6.5에서 20분 동안 가열하여 효소를 불활성화시켰다. 그런 다음 혼합물을 냉각시키고 원심분리하고 여과하였다(0.22 μm).

실시예 1c): 케이크 단백질을 케이크 및 용매로서 물의 총 중량에 대해 10 중량%의 양의 케이크를 사용하여 pH 12, 실온, 즉 20℃의 온도에서 1시간에 걸쳐 추출하였다. 이렇게 추출된 단백질을 파파인과 단백질의 총 부피에 대해 부피 농도가 5%인 액체 형태의 파파인으로 55℃의 온도 및 pH 8.5에서 2시간 동안 가수분해시켰다. 90℃의 온도 및 pH 6.5에서 20분 동안 가열하여 효소를 불활성화시켰다. 그런 다음 혼합물을 냉각시키고 원심분리하고 여과하였다(0.22 μm).

실시예 2. 본 발명에 따른 가수분해물의 총 단백질 함량 및 펩티드 분자량 프로파일 분석

실시예 2a) 총 단백질 분석:

재료 및 방법: 원료 및 추출물의 단백질 함량은 총질소(Kjeldahl 방법)를 결정하고 얻어진 값에 6.25배(N x 6.25)를 곱하여 산정하였다.

결과: 결과는 표 1(H. 람노이데스 가수분해의 단백질 함량)에 정리한다.

[표 1]

결론: 실시예 1a)에 따른 가수분해물의 총 단백질 함량은 18 내지 32 g/L 단백질이다(표 1). 총 단백질 함량은 건조물의 37% 내지 65%이다.

실시예 2b) 펩티드 분자량 프로파일 분석:

재료 및 방법: 실시예 1a)에 따라 제조된 바와 같은 가수분해물의 펩티드 분자량 분포를 컬럼(Superose® 12 10/300 GL, GE Healthcare Life Sciences)에서의 겔 침투에 의해 분석하였다. 알려진 분자량의 단백질 분자로 컬럼을 보정한 후 분자량을 결정하였다.

결과: 결과는 표 2에 정리한다.

[표 2]

결론: 실시예 1a)에 따라 제조된 바와 같은 가수분해물은 MW가 5 kDa 미만인 펩티드를 70% 이상 포함한다.

실시예 3. 피부 부속기의 생체역학적 특성에 대한 본 발명에 따른 가수분해물의 시험관 내 효과

재료 및 방법: 1.5% 알부민, 2 mM 철, 5 mM EDTA, 및 25 mM H₂O₂ 과산화수소를 포함하는 시약을 H. 람노이데스 가수분해물의 존재 또는 부재 하에 두었다. 알부민은 H₂O₂의 존재하에 산화된다. 산화 반응은 철로 촉매된다. 산화 반응의 촉매 작용 모니터링은 철의 부재하에 수행하였다. 혼합물을 37℃에서 1일 동안 인큐베이션하였다. 트립토판, 디티로신, 펜토시딘, 및 당화 산물의 양을 형광에 의해 측정하였다(여기/방출 파장: 트립토판의 경우 280 nm/340 nm; 디티로신의 경우 315 nm/410 nm; 펜토시딘의 경우 335 nm/385 nm; 일반 당화 산물의 경우 370 nm/440 nm).

결과: 결과를 표 3 내지 6에 정리한다.

실시예 3a) 당화 산물(AGE)의 감소

[표 3]

결론: 철의 존재는 과산화수소의 존재하에서 알부민 산화 과정을 촉매하고 형광성 당화 산물의 형성을 수반한다. 0.01% 및 0.1%(w/v)의 H. 람노이데스 가수분해물은 이러한 당화 산물의 형성을 적어도 28% 이상 감소시켰다.

실시예 3b) 트립토판 분해 감소

[표 4]

결론: 본 발명에 따른 가수분해물의 첨가로 알부민 산화 후 트립토판의 분해를 30% 이상 감소시켰고, 이는 단백질의 산화를 감소시키고 따라서 피부 부속기, 특히 모발의 역학적 특성을 유지 및/또는 증가시키는 능력을 보여주었다.

실시예 3c) 디티로신 형성의 감소

[표 5]

결론: 본 발명에 따른 가수분해물의 첨가는 알부민의 산화 후 디티로신의 형성을 35% 이상 감소시켰고, 이는 단백질의 산화를 감소시키고 따라서 피부 부속기, 특히 모발의 역학적 특성을 유지 및/또는 증가시키는 능력을 보여주었다.

실시예 3d) 펜토시딘 형성 감소

[표 6]

실시예 3e) 당화 중간체의 감소: 쉬프 염기

재료 및 방법: 실시예 1a)에 따라 제조된 바와 같은 가수분해물(최종 0.01% 또는 0.1%(w/v))을 구리(200 μM) 및 지단백질(100 μg/mL)을 포함하는 완충 용액(인산 완충 생리식염수(PBS))에 첨가하거나, 첨가하지 않았다(대조군). 혼합물을 37℃의 온도에서 48시간 동안 인큐베이션하였다. 쉬프 염기의 양(평균%)은 분광법(여기 파장 370 nm/발광 파장 440 nm)으로 측정하였다.

결과:

[표 7]

결론: 본 발명에 따른 가수분해물은 쉬프 염기의 출현을 11% 이상 감소시켰다.

실시예 4. 피부 부속기의 성장 증가

재료 및 방법: 인간 모낭 유두의 섬유아세포 및 0.05% v/v 성장 인자 칵테일을 함유하고 테스트할 H. 람노이데스 가수분해물이 존재하거나 부재하는 기본 배양 배지로 구성된 현탁액을 200 xg에서 5분 동안 원심분리하여 응집체를 형성하였다. 대조 조건은 기본 배양 배지에 0.05% v/v 성장 인자 칵테일을 첨가하고(에탄올 EtOH 대조군) 세포 감작제로서 캡사이신(10 μm)을 첨가하여(캡사이신 대조군) 만들었다. 응집체를 제어된 분위기(5% CO₂ 및 95% 상대 습도) 하에 37℃의 온도에서 인큐베이션하였다.

응집체를 완충 생리 식염수(PBS)에 헹구고 세포를 프로테아제(콜라게나아제 A, 트립신)와 EDTA의 혼합물에서 인큐베이션하여 분리하였다.

유세포 분석을 위해 현탁 세포의 일부를 PBS에 취하였다. 세포 수와 자가형광은 측정되는 두 가지 매개변수이다. 자가형광은 쉽게 측정되고 세포 노화의 마커로 사용되는 직접적인 매개변수이다(Rattan et al. 1982). 세포 수는 모낭의 성장 잠재력의 간접적 매개변수이다. 세포의 또 다른 일부는 세포 DNA 함량 및 ATP 생성률 분석에 사용하였다. 이 두 매개변수는 공급업체의 지침(CyQuant NF Cell proliferation Assay Kit C35006, Invitrogen 및 Bioluminescence Assay Kit CLS II Roche 11699695001, Sigma-Aldrich)에 따라 측정하였다.

결과: 결과를 표 8(응집체로 성장한 유두 섬유아세포의 DNA 양에 대한 H. 람노이데스 가수분해물의 효과), 표 9(응집체로 성장한 유두 섬유아세포에 의한 ATP 생성에 대한 H. 람노이데스 가수분해물의 효과) 및 표 10(유세포 분석으로 측정한, 응집체로 성장한 유두 섬유아세포의 수, 입도 및 자가형광에 대한 H. 람노이데스 가수분해물의 효과)에 정리하였다.

[표 8]

결론: 10 μM 농도의 캡사이신으로 감작된 유두 섬유아세포 응집체의 처리는 세포 내 DNA 양을 감소시켰다. 0.03%(w/v)의 H. 람노이데스 가수분해물의 동시 첨가는 캡사이신의 부정적인 영향을 감소시켰고, 이는 가수분해물의 피부 부속기, 특히 모발의 손실을 줄이는 능력을 입증하였다. 0.1%(w/v)의 H. 람노이데스 가수분해물로 응집체의 처리는 DNA의 총량을 증가시켰고(대조군에 비해 +41%), 이는 피부 부속기의 성장을 증가시키는 데에 대한 본 발명에 따른 가수분해물의 효과를 입증하였다.

[표 9]

결론: 10 μM 농도의 캡사이신으로 감작된 유두 섬유아세포 응집체의 처리는 대조군(에탄올)에 비해 세포에서 ATP 생성을 76% 감소시켰다. 캡사이신에 0.03%(w/v)의 H. 람노이데스 가수분해물의 조합된 첨가는 1) 캡사이신의 부정적인 영향을 상쇄시킬 수 있었고, 이는 피부 부속기, 유리하게는 모발의 손실을 감소시키는 본 발명에 따른 가수분해물의 능력을 입증하였고, 2) 감작되지 않은 대조군에 비해 ATP 생성을 16% 이상 자극할 수 있었고, 이는 피부 부속기, 우선적으로 모발의 성장을 증가시키는 데에 대한 상기 가수분해물의 효과를 나타내었다.

[표 10]

결론: 캡사이신(10 μM)으로 감작된 유두 섬유아세포 응집체의 처리는 탈모를 수반하는 대조군(EtOH)에 비해 유두 섬유아세포 수를 감소시켰고, 세포의 전체 입도를 증가시켰으며, 형광을 증가시켰다. 캡사이신에 0.03%(w/v)의 H. 람노이데스 가수분해물의 조합된 첨가는 세 가지 측정 매개변수에 대한 캡사이신의 부정적인 영향을 감소시켰고 대조군에 비해 세포 수를 54% 증가시켰고, 이는 가수분해물의 탈모 감소 능력을 보여주었다. 또한, 가수분해물 존재하에서 측정된 세포 수도 캡사이신에 감작되지 않은 대조군보다 더 많았으며, 이는 섬유아세포 수를 증가시키는 데 대한 효과와 이데 따른 모발 성장에 대한 효과를 나타냈다. 이러한 결과는 H. 람노이데스 가수분해물의 초기 또는 유도된 탈모에 대한 보호 잠재력 및 모발 성장 촉진제의 잠재력을 보였다.

실시예 5. 성장에 대한 생체 외 효과

재료 및 방법: 인간 모낭을 0.5 μg/ml 인슐린을 함유하는 완전 성장 배지에서 생체 외 배양하고, 30 μM의 캡사이신으로 처리하였다. 후자의 분자는 모낭 성장을 지연시키는 작용제로 사용한다. 캡사이신 처리가 없는 대조 조건을 만들었다. 캡사이신에 감작된 모낭을 0.03%(w/v) H. 람노이데스 가수분해물로 처리하거나 처리하지 않았다. 고립된 상태에서 배양된 적어도 10개의 모낭에 대해 각 배양 조건을 평가하였다(n = 10). 모낭을 5% CO₂의 존재하에 37℃에서 인큐베이션하였다. 배양 배지를 약 2주 동안 주 3회 갱신하였다. 서로 다른 날에 촬영한 사진으로부터 배양된 모낭의 모간 신장이 수득되었다. 모발 길이는 이미지 분석(Image J)으로 평가하고 평균 ± 표준 오차로 μm로 표시하였다.

결과: 결과를 표 11에 정리하였다 (모발 신장 값(㎛))

[표 11]

결론: 0.5 μg/ml 인슐린을 함유하는 배지에서 생체 외 배양된 모낭은 모간 신장(대조군)에 의해 입증된 바와 같이 계속 성장하였다. 캡사이신(30 μM) 처리는 대조군에 비해 배양 제6일에 신장에 있어 눈에 띄는 손실을 야기하였다. 0.03%(w/v) H. 람노이데스 가수분해물로 캡사이신으로 감작된 모낭의 처리는 캡사이신 처리된 모낭과 비교하여 이르면 배양 6일째에 모발 신장을 유의하게 개선하였다.

실시예 6. 모발 섬유에 대한 복구 효과

재료 및 방법: 연구를 위해 짙은 갈색의 코카시안 모발 다발을 계량하고(1 g; 12 cm) 준비하였다. 모발 다발을 세척한 후 과산화수소 용액(5.6% H₂O₂ + 13.9% (NH₄)₂S₂O₈, pH = 9.4)을 사용하여 30분 동안 3회 탈색하였다. 건강한(탈색되지 않은) 모발 다발은 대조군으로서 그대로 두었다. 세척하고 공기 흐름 하 55℃에서 45분 동안 건조시킨 후, 모발 다발을 증류수(대조군) 또는 1% H. 람노이데스 가수분해물을 함유하는 수용액에 24시간 동안 침지시켰다. 두 용액 모두 사전에 pH 5.5에서 완충시켰다. 모발 다발을 헹군 다음 공기 흐름 하에 약 60℃에서 1시간 동안 건조하였다. 2 K/분의 가열 속도를 이용한 시차 열량측정법(Wortmann et al. 1993) 및 시차 엔탈피 분석기(DSC Q100, TA Instruments)에 의해 인간 단백질의 변성 온도를 측정하였다.

결과:

[표 12]

결론: 과산화수소로 탈색된 모발은 탈색되지 않은 건강한 모발보다 더 불안정하였다. 모발 섬유 단백질의 변성 온도 차이는 손상된 모발과 건강한 모발 사이에 -8℃였다. H. 람노이데스 가수분해물로 처리된 과산화된 모발과 대조 모발 사이의 변성 온도 차이는 -4.9℃에 불과했다. 손상된 모발의 처리는 열 변성에 대한 모발 단백질의 안정성을 +3.5℃ 향상시켰다. H. 람노이데스 가수분해물은 과산화수소로 손상된 모발 섬유에 복구 효과를 나타냈다.

실시예 7: 본 발명에 따른 가수분해물을 포함하는 조성물의 예

실시예 7a): 샴푸

[표 13]

샴푸는 4개의 상을 혼합하고 조성물을 pH 5.2 및 점도 2200 mPa.s(Brookfield 기기(RVT, 23℃, 스핀들 5, 50 rpm)로 측정함)로 조정함으로써 당업자에게 잘 알려진 당 업계의 통상적인 방법에 의해 제조한다.

실시예 7b: 두피용 알코올 수용액

[표 14]

수성 알코올 용액은 3개의 상을 혼합하고 조성물을 pH 6.2로 조정함으로써 당업자에게 잘 알려진 당 업계의 통상적인 방법에 의해 제조한다.

실시예 7c: 두피용 마스크

[표 15]

마스크는 4개의 상을 혼합하고 조성물을 pH 4.1 및 점도 26,000 mPa.s(Brookfield 기기(RVT; 23℃, 스핀들 5, 50 rpm))로 조정하여 당업자에게 잘 알려진 통상적인 방법에 의해 제조한다.

실시예 7d: 헤어 세럼

[표 16]

Claims

피부 부속기, 유리하게는 모발의 성장을 증가시키고/시키거나 그의 손실을 감소시키고/시키거나; 피부 부속기, 유리하게는 모발의 생체역학적 특성 및/또는 표면 및/또는 질감 특성을 유지 및/또는 증가시키고/시키거나; 손상된 피부 부속기, 유리하게는 모발을 복구하기 위한 히포파에 람노이데스(Hippophae rhamnoides) 케이크의 가수분해물의 비치료적 미용 용도.
제1항에 있어서, 가수분해물이 히포파에 람노이데스 종자를 초임계 CO₂로 추출하여 얻은 부산물 또는 상기 종자를 압착하여 얻은 부산물의 가수분해물인 것을 특징으로 하는 용도.
제1항 또는 제2항에 있어서, 가수분해물이 효소적 가수분해물인 것을 특징으로 하는 용도.
제1항 내지 제3항 중 어느 한 항에 있어서, 가수분해물이 알칼리 pH, 유리하게는 pH 8.5에서 효소적 분해에 의해 수득되는 것을 특징으로 하는 용도.
제1항 내지 제4항 중 어느 한 항에 있어서, 가수분해물이 하기를 함유하는 것을 특징으로 하는 용도:
- 2 중량% 내지 10 중량%의 건조 물질 함량,
- 1L의 가수분해물당 15 g 내지 35 g, 유리하게는 1L의 가수분해물당 18.8 g의 총 단백질 함량,
- 15% 내지 40%, 유리하게는 18.25%의, 5 kDa 내지 30 kDa의 분자량을 갖는 펩티드의 백분율,
- 40% 내지 85%, 유리하게는 72.6%의, 5 kDa 미만의 분자량을 갖는 펩티드의 백분율.
제1항 내지 제5항 중 어느 한 항에 있어서, 국소 경로를 통해 사용되는 것을 특징으로 하는 용도.
제1항 내지 제6항 중 어느 한 항에 있어서, 케이크 가수분해물이 피부 부속기, 유리하게는 모발, 및/또는 피부, 유리하게는 두피, 및/또는 점막의 노화의 부정적인 영향을 감소시키는 것을 특징으로 하는 용도.
제1항 내지 제7항 중 어느 한 항에 있어서, 케이크 가수분해물이 피부 부속기, 유리하게는 모발의 색상 및/또는 광택 및/또는 광채 및/또는 볼륨을 개선하는 것을 특징으로 하는 용도.
제1항 내지 제8항 중 어느 한 항에 있어서, 케이크 가수분해물이 미용 조성물에, 조성물의 총 중량에 대해 1 x 10^-4 중량% 내지 10 중량%, 우선적으로 1 x 10^-4 중량% 내지 5 중량%, 더 유리하게는 1 x 10^-3 중량% 내지 3 중량%, 더 우선적으로 0.001 중량% 내지 0.1 중량%의 함량으로 포함되는 것을 특징으로 하는 용도.
제9항에 있어서, 미용 조성물이 적어도 하나의 미용상 허용되는 부형제를 포함하는 것 및 이 조성물이 세럼, 로션, 크림, 샴푸, 헤어 컨디셔너, 오일, 밀크, 연고, 페이스트, 폼, 에멀젼, 하이드로겔, 샤워 젤, 마스크, 래커, 스프레이, 왁스, 마스카라, 메이크업 펜슬 또는 바니시로부터 선택되고, 유리하게는 샴푸, 컨디셔너 또는 로션의 형태인 것을 특징으로 하는 용도.
피부 부속기, 유리하게는 모발의 성장을 증가시키고/시키거나 그의 손실을 감소시키고/시키거나; 피부 부속기, 유리하게는 모발의 생체역학적 특성 및/또는 표면 및/또는 질감 특성을 유지 및/또는 증가시키고/시키거나; 손상된 피부 부속기, 유리하게는 모발을 복구하기 위한 히포파에 람노이데스 케이크의 가수분해물 또는 이를 포함하는 미용 조성물의 국소 적용을 포함하는 비치료적 미용 관리 방법.
제11항에 있어서, 가수분해물 또는 이를 포함하는 미용 조성물이 두피, 다리, 허벅지, 팔, 몸통, 목선, 목, 얼굴의 전체 또는 일부, 이마, 턱, 입술, 입술 윤곽, 눈 윤곽, 얼굴의 "T" 영역으로부터 선택된 신체 및/또는 얼굴의 피부의 전체 또는 일부, 및 유리하게는 두피, 및/또는 피부 부속기의 전체 또는 일부, 더 우선적으로 모발에 국소 적용되는 것을 특징으로 하는 미용 관리 방법.
탈모 및/또는 대머리의 치료에 있어서의 피부과 또는 약학 용도를 위한 히포파에 람노이데스 케이크의 가수분해물 또는 이를 포함하는 피부과 또는 약학 조성물.
제13항에 있어서, 제2항 내지 제5항 중 어느 한 항에 정의된 바와 같은 것을 특징으로 하는 가수분해물.