KR20230001450A - CRISPR/Cas 복합체를 이용한 개화지연 양배추 식물체의 제조방법 - Google Patents
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Abstract
본 발명은 양배추의 개화조절 유전자를 표적으로 CRISPR/Cas 복합체를 이용한 개화지연 양배추 식물체의 제조방법에 관한 것이다.
Description
본 발명은 CRISPR/Cas 복합체를 이용한 개화지연 양배추 교정체의 제조방법에 관한 것이다.
양배추는 배추과(Cruciterae)에 속하는 Brassica 속(Gunus) 작물 중 oleracea 종(species)으로 학명은 Brassica oleracea L. var capitata L.이다. 같은 oleracea 종에는 불-결구성의 케일(var. acephala), 꽃봉오리를 이용하는 꽃양배추(var. botrytis), 브로콜리(var. italica), 엽액에서 작은 액아가 결구되는 방울다다기 양배추(var. gemmifera) 등 다양한 변종이 있다. 영명은 cabbage, white cabbage 등으로 불리어지며, 중국명은 捲心菜, 圓白菜, 甘藍이다.
양배추는 서늘한 기후를 좋아하는 호냉성 채소로서 배추(chinese cabbage, 학명 Brassica rapa)보다 고온과 저온에 잘 견디므로 여름재배가 가능하며 겨울동안에 밖에서 저장할 수도 있다. 또한 영양가가 높은 채소로서 보건상 중요하며 위궤양에 좋은 효과를 내는 성분이 함유되어 있다. 배추와 같이 저온감응 채소이지만 모가 어릴 때는 저온에 감응되지 않고 모의 줄기직경이 5∼6mm 이상 되어야 저온에 감응되는 녹식물춘화형이다. 봄 파종 품종은 추파성이 아니기 때문에 저온감응성이 민감하여 조기추개에 대비 저온기의 관리에 주의해야 한다.
CRISPR/Cas9 시스템은 매우 높은 표적 특이성을 가지고 있고 메틸화된 DNA도 표적으로 인지할 수 있기 때문에 매우 다양한 유전자에 적용할 수 있으며 멘델의 유전법칙에 따라 자손에게 전달되어 형질의 세대고정이 가능하다는 장점이 있다. 또한, Cas9 단백질과 sgRNA (single guide RNA)만을 필요로 하기 때문에 위의 두 방법에 비해 적은 비용으로 목표 형질의 도입이 가능하다는 장점이 있어 최근 동물 및 식물 등에서 널리 적용되고 있는 신육종 기술이다.
한편, 한국공개특허 제2016-0052350호에는 '식물체의 개화시기를 조절하는 무 유래의 FLC 유전자 및 이의 용도'가 개시되어 있고, 한국등록특허 제2113500호에는 'SOC1 유전자를 교정하여 만추성 형질을 가지는 유전체 교정 배추 식물체의 제조방법 및 그에 따른 식물체'가 개시되어 있으나, 본 발명의 'CRISPR/Cas 복합체를 이용한 개화지연 양배추 교정체의 제조방법'에 대해서는 기재된 바가 없다.
본 발명은 상기와 같은 요구에 의해 도출된 것으로서, 본 발명자들은 양배추 식물체의 개화를 지연시키기 위해 양배추의 개화조절 유전자를 표적으로 하는 CRISPR/Cas9 벡터를 구축하여 유전체 교정 양배추를 개발하고자 한다.
상기 과제를 해결하기 위해, 본 발명은 양배추의 개화조절 유전자의 표적 염기서열에 특이적인 가이드 RNA(guide RNA)를 암호화하는 DNA 및 엔도뉴클레아제(endonuclease) 단백질을 암호화하는 핵산 서열을 포함하는 재조합 벡터를 유효성분으로 함유하는, 양배추의 개화를 지연시키기 위한 유전체 교정용 조성물을 제공한다.
또한, 본 발명은 (a) 양배추의 개화조절 유전자의 표적 염기서열에 특이적인 가이드 RNA를 암호화하는 DNA 및 엔도뉴클레아제 단백질을 암호화하는 핵산 서열을 포함하는 재조합 벡터를 양배추 식물세포에 도입하여 유전체를 교정하는 단계; 및 (b) 상기 유전체가 교정된 양배추 식물세포로부터 양배추 식물체를 재분화하는 단계;를 포함하는, 개화가 지연된 유전체 교정 양배추 식물체의 제조방법을 제공한다.
또한, 본 발명은 상기 방법에 의해 제조된 개화가 지연된 유전체 교정 양배추 식물체 및 이의 유전체가 교정된 종자를 제공한다.
본 발명에서 제시한 개화조절 유전자 편집을 통한 돌연변이 유도는 개화가 지연된 식물체를 개발하는데 유용하게 이용할 수 있다. 또한, 본 발명에 따른 방법은 자연적 변이와 구별할 수 없는 변이를 유도하므로, 안전성과 환경 유해성 여부를 평가하기 위해 막대한 비용과 시간이 소모되는 GMO(Genetically Modified Organism) 작물과 달리 비용과 시간을 절약할 수 있을 것으로 기대된다.
도 1은 양배추 유래 FLC 유전자의 클로닝 과정 모식도이다.
도 2는 CRISPR/Cas9 시스템을 이용한 양배추 식물체의 유전자 교정 과정을 나타낸다.
도 3는 CRISPR RGEN Tools을 사용하여 결정된 FLC (Flowering Locus C) 타겟 sgRNA 부위를 나타낸다.
도 4는 GI (GIGANTEA) 유전자 타겟 부위를 대상으로 Targeted deep sequencing을 이용하여 야생형(wild type), Cas9 protein transformant, RGEN transformants 양배추 원형질체의 돌연변이 비율을 분석한 결과이다.
도 2는 CRISPR/Cas9 시스템을 이용한 양배추 식물체의 유전자 교정 과정을 나타낸다.
도 3는 CRISPR RGEN Tools을 사용하여 결정된 FLC (Flowering Locus C) 타겟 sgRNA 부위를 나타낸다.
도 4는 GI (GIGANTEA) 유전자 타겟 부위를 대상으로 Targeted deep sequencing을 이용하여 야생형(wild type), Cas9 protein transformant, RGEN transformants 양배추 원형질체의 돌연변이 비율을 분석한 결과이다.
본 발명의 목적을 달성하기 위하여, 본 발명은 양배추의 개화조절 유전자의 표적 염기서열에 특이적인 가이드 RNA(guide RNA)를 암호화하는 DNA 및 엔도뉴클레아제(endonuclease) 단백질을 암호화하는 핵산 서열을 포함하는 재조합 벡터를 유효성분으로 함유하는, 양배추의 개화를 지연시키기 위한 유전체 교정용 조성물을 제공한다.
본 발명의 조성물에 있어서, 상기 개화조절 유전자는 FLC (Flowering Locus C) 또는 GI (GIGANTEA) 일 수 있으나, 이에 제한되지 않는다.
본 명세서에서 용어 "유전체/유전자 교정(genome/gene editing)"은, 인간 세포를 비롯한 동·식물 세포의 유전체 염기서열에 표적지향형 변이를 도입할 수 있는 기술로서, DNA 절단에 의한 하나 이상의 핵산 분자의 결실(deletion), 삽입(insertion), 치환(substitutions) 등에 의하여 특정 유전자를 녹-아웃(knock-out) 또는 녹-인(knock-in)하거나, 단백질을 생성하지 않는 비-코딩(non-coding) DNA 서열에도 변이를 도입할 수 있는 기술을 말한다. 본 발명의 목적상 상기 유전체 교정은 특히 엔도뉴클레아제(endonuclease) 예컨대, Cas9 (CRISPR associated protein 9) 단백질 및 가이드 RNA를 이용하여 식물체에 변이를 도입하는 것일 수 있다. 또한, '유전자 교정'은 '유전자 편집'과 혼용되어 사용될 수 있다.
또한, 용어 "표적 유전자"는 본 발명을 통해 교정하고자 하는 식물체의 유전체 내에 있는 일부 DNA를 의미하며, 그 유전자의 종류에 제한되지 않으며, 코딩 영역 및 비-코딩 영역을 모두 포함할 수 있다. 당업자는 그 목적에 따라, 제조하고자 하는 유전체 교정 식물체에 대하여 원하는 변이에 따라 상기 표적 유전자를 선별할 수 있다.
또한, 용어 "가이드 RNA(guide RNA)"는 짧은 단일 가닥의 RNA로, 표적 유전자를 암호화하는 염기서열 중 표적 DNA에 특이적인 RNA를 의미하며, 표적 DNA 염기서열과 전부 또는 일부가 상보적으로 결합하여 해당 표적 DNA 염기서열로 엔도뉴클레아제 단백질을 이끄는 역할을 하는 리보핵산을 의미한다. 상기 가이드 RNA는 두 개의 RNA, 즉, crRNA (CRISPR RNA) 및 tracrRNA (trans-activating crRNA)를 구성 요소로 포함하는 이중 RNA (dual RNA); 또는 표적 유전자 내 염기서열과 전부 또는 일부 상보적인 서열을 포함하는 제1 부위 및 엔도뉴클레아제(특히, RNA-가이드 뉴클레아제)와 상호작용하는 서열을 포함하는 제2 부위를 포함하는 단일 사슬 가이드 RNA(single guide RNA, sgRNA) 형태를 말하나, 엔도뉴클레아제가 표적 염기서열에서 활성을 가질 수 있는 형태라면 제한없이 본 발명의 범위에 포함될 수 있으며, 함께 사용된 엔도뉴클레아제의 종류 또는 엔도뉴클레아제의 유래 미생물 등을 고려하여 당업계의 공지된 기술에 따라 제조하여 사용할 수 있다.
또한, 상기 가이드 RNA는 플라스미드 주형으로부터 전사된 것, 생체 외(in vitro)에서 전사된(transcribed) 것(예컨대, 올리고뉴클레오티드 이중가닥) 또는 합성한 가이드 RNA 등일 수 있으나, 이에 제한되지 않는다.
또한, 본 발명에 따른 유전체 교정용 조성물에 있어서, 상기 엔도뉴클레아제 단백질은 Cas9, Cpf1 (also known as Cas12a), TALEN (Transcription activator-like effector nuclease), ZFN (Zinc Finger Nuclease) 또는 이의 기능적 유사체로 이루어진 군으로부터 선택되는 하나 이상일 수 있고, 바람직하게는 RNA-가이드 뉴클레아제인 Cas9 또는 Cpf1 등일 수 있으며, 더욱 바람직하게는 Cas9 단백질일 수 있으나, 이에 제한되지 않는다.
또한, 상기 Cas9 단백질은 스트렙토코커스 피요제네스(Streptococcus pyogenes) 유래의 Cas9 단백질, 캠필로박터 제주니(Campylobacter jejuni) 유래의 Cas9 단백질, 스트렙토코커스 써모필러스(S. thermophilus) 또는 스트렙토코커스 아우레우스(S. aureus) 유래의 Cas9 단백질, 네이쎄리아 메닝기티디스(Neisseria meningitidis) 유래의 Cas9 단백질, 파스투렐라 물토시다(Pasteurella multocida) 유래의 Cas9 단백질, 프란시셀라 노비시다(Francisella novicida) 유래의 Cas9 단백질 등으로 이루어진 군에서 선택된 하나 이상일 수 있으나, 이에 제한되지 않는다. Cas9 단백질 또는 이의 유전자 정보는 NCBI(National Center for Biotechnology Information)의 GenBank와 같은 공지의 데이터베이스에서 얻을 수 있다. 상기 Cas9 유전자 정보는 공지된 서열을 그대로 사용할 수도 있고, 형질도입되는 대상(유기체)의 코돈에 최적화된 서열을 사용할 수 있으나, 이에 제한되지 않는다.
Cas9 단백질은 RNA-guided DNA 엔도뉴클레아제 효소로, 이중 가닥 DNA 절단(double stranded DNA break)을 유도한다. Cas9 단백질이 정확하게 표적 염기서열에 결합하여 DNA 가닥을 잘라내기 위해서는 PAM (Protospacer Adjacent Motif)이라 알려진 3개의 염기로 이루어진 짧은 염기서열이 표적 염기서열 옆에 존재해야 하며, Cas9 단백질은 PAM 서열(NGG)로부터 3번째와 4번째 염기쌍 사이를 추정하여 절단한다.
본 발명에 따른 유전체 교정용 조성물에 있어서, 사용된 CRISPR/Cas9 시스템은 교정하고자 하는 특정 유전자의 특정위치에 이중나선 절단을 도입하여 DNA 수선 과정에서 유도되는 불완전 수선에 의한 삽입-결실(insertion-deletion, InDel) 돌연변이를 유도시키는 NHEJ(non-homologous end joining) 기작에 의한 유전자 교정 방법이다.
본 발명은 또한,
(a) 양배추의 개화조절 유전자의 표적 염기서열에 특이적인 가이드 RNA(guide RNA)를 암호화하는 DNA 및 엔도뉴클레아제(endonuclease) 단백질을 암호화하는 핵산 서열을 포함하는 재조합 벡터를 양배추 식물세포에 도입하여 유전체를 교정하는 단계; 및
(b) 상기 유전체가 교정된 양배추 식물세포로부터 양배추 식물체를 재분화하는 단계;를 포함하는, 개화가 지연된 유전체 교정 양배추 식물체의 제조방법을 제공한다.
본 발명의 제조방법에 있어서, 상기 개화조절 유전자는 FLC (Flowering Locus C) 또는 GI (GIGANTEA) 일 수 있으나, 이에 제한되지 않는다.
또한, 상기 표적 염기서열에 특이적인 가이드 RNA를 암호화하는 DNA 및 엔도뉴클레아제 단백질을 암호화하는 핵산 서열을 포함하는 재조합 벡터를 식물세포에 도입하는 것은 형질전환 방법을 의미한다. 식물 종의 형질전환은 이제는 쌍자엽 식물뿐만 아니라 단자엽 식물 양자를 포함한 식물 종에 대해 일반적이다. 원칙적으로, 임의의 형질전환 방법은 본 발명에 따른 재조합 벡터를 적당한 선조 세포로 도입시키는데 이용될 수 있다.
본 발명에 따른 제조방법에 있어서, 상기 가이드 RNA는 멀티 카피 유전자에 특이적으로 결합 가능한 것일 수 있으나, 이에 제한되지 않는다.
본 발명에 따른 제조방법에 있어서, 상기 가이드 RNA와 엔도뉴클레아제 단백질의 복합체를 식물세포에 형질도입하는 방법은 원형질체에 대한 칼슘/폴리에틸렌 글리콜 방법(Krens et al., 1982, Nature 296:72-74; Negrutiu et al., 1987, Plant Mol. Biol. 8:363-373), 원형질체의 전기천공법(Shillito et al., 1985, Bio/Technol. 3:1099-1102), 식물 요소로의 현미주사법(Crossway et al., 1986, Mol. Gen. Genet. 202:179-185), 각종 식물 요소의(DNA 또는 RNA-코팅된) 입자 충격법(Klein et al., 1987, Nature 327:70), 아그로박테리움 튜메파시엔스(Agrobacterium tumefaciens) 매개된 유전자 전이에서(비완전성) 박테리아에 의한 감염 등으로부터 적당하게 선택될 수 있다.
본 발명의 일 구현 예에 따른 제조방법에 있어서, 상기 재조합 벡터가 식물 세포에 형질전환되면, DNA 결합 및 절단 활성이 있는 엔도뉴클레아제 단백질과 상기 엔도뉴클레아제 단백질에 결합되며 표적 서열로 엔도뉴클레아제 단백질을 이끄는 sgRNA가 함께 발현되게 된다.
본 명세서에서 용어 "재조합"은 세포가 이종의 핵산을 복제하거나, 상기 핵산을 발현하거나 또는 펩티드, 이종의 펩티드 또는 이종의 핵산에 의해 코딩된 단백질을 발현하는 세포를 지칭하는 것이다. 재조합 세포는 상기 세포의 천연 형태에서는 발견되지 않는 유전자 또는 유전자 절편을, 센스 또는 안티센스 형태 중 하나로 발현할 수 있다. 또한 재조합 세포는 천연 상태의 세포에서 발견되는 유전자를 발현할 수 있으며, 그러나 상기 유전자는 변형된 것으로서 인위적인 수단에 의해 세포 내 재도입된 것이다.
또한, 용어 "벡터"는 세포 내로 전달하는 DNA 단편(들), 핵산 분자를 지칭할 때 사용된다. 벡터는 DNA를 복제시키고, 숙주세포에서 독립적으로 재생산될 수 있다. 용어 "전달체"는 흔히 "벡터"와 호환하여 사용된다. 용어 "발현 벡터"는 목적한 코딩 서열과, 특정 숙주 생물에서 작동가능하게 연결된 코딩 서열을 발현하는데 필수적인 적정 핵산 서열을 포함하는 재조합 DNA 분자를 의미한다. 진핵세포에서 이용 가능한 프로모터, 인핸서, 종결신호 및 폴리아데닐레이션 신호는 공지되어 있다.
본 발명에 따른 제조방법에 있어서, 상기 표적 염기서열에 특이적인 가이드 RNA 및 엔도뉴클레아제 단백질이 도입되는 "식물세포"는 어떤 식물세포도 된다. 식물세포는 배양 세포, 배양 조직, 배양 기관 또는 전체 식물이다. "식물 조직"은 분화된 또는 미분화된 식물의 조직, 예를 들면 이에 한정되진 않으나, 뿌리, 줄기, 잎, 꽃가루, 소포자, 난세포, 종자 및 배양에 이용되는 다양한 형태의 세포들, 즉 단일 세포, 원형질체(protoplast), 싹 및 캘러스 조직을 포함한다. 식물 조직은 인 플란타(in planta)이거나 기관 배양, 조직 배양 또는 세포 배양 상태일 수 있다.
본 발명의 제조방법에 있어서, 유전체가 교정된 식물세포로부터 유전체가 교정된 식물을 재분화하는 방법은 당업계에 공지된 임의의 방법을 이용할 수 있다. 유전체가 교정된 식물세포는 전식물로 재분화되어야 한다. 캘러스 또는 원형질체 배양으로부터 성숙한 식물의 재분화를 위한 기술은 수많은 여러 가지 종에 대해서 당업계에 주지되어 있다(Handbook of Plant Cell Culture, 1-5권, 1983-1989 Momillan, N.Y.).
본 발명은 또한, 상기 방법에 의해 제조된 개화가 지연된 유전체 교정 양배추 식물체 및 이의 유전체가 교정된 종자를 제공한다.
이하, 본 발명을 실시예에 의해 상세히 설명한다. 단, 하기 실시예는 본 발명을 예시하는 것일 뿐, 본 발명의 내용이 하기 실시예에 한정되는 것은 아니다.
1. 양배추
FLC
유전자의 클로닝
양배추 FLC 유전자를 클로닝하기 위해서 기내에서 종자를 발아시켜 얻은 양배추 품종 '스피드' ('Speed': Jeil Seed, Korea)의 배양묘를 10일간 생육시킨 후 어린잎을 취하여 DNA를 추출하였다. 상기 추출한 DNA를 가지고 NCBI에 공개된 양배추 FLC1, FLC3 및 FLC2/4 유전자 각각의 특이적 프라이머 세트를 디자인하여 PCR을 수행한 후, 증폭산물을 정제하고 서열분석을 진행하였다(도 1). 프라이머를 제작하기 위해 FLC1(CAJ77613), FLC2/4(AAQ76275), FLC3(CAJ77614) 유전자 서열의 보존된(conserved) 영역을 참조하여 프라이머를 제작하였다(표 1). PCR 증폭산물을 TA 클로닝 벡터에 라이게이션(ligation)시킨 후 대장균에 다시 삽입하여 LB 배지에 배양한 후 카나마이신(Kanamycin) 항생제 고체 배지에 옮겨 밤새 배양한 후 콜로니 PCR을 수행한 후 1.2% 아가로스 겔에 전기영동하여 표적 유전자의 밴드 크기를 확인한 후 카나마이신 항생제 액체 배지에 옮겨 24시간 증식시켰다. 그리고 Plasmid DNA를 추출하여 정제 한 후 '스피드' 품종 고유의 유전자 염기서열 확보를 진행하였다.
| Target gene | Sequence (5'→3') | Amplicon size (bp) | |
| FLC1 | F | AGATCAAATTAGGGCGCAAAGC (서열번호 15) | 5400 |
| R | ATTCGCCGATTAAAGGTAAC (서열번호 16) | ||
| FLC3 | F | CACTTGAACCGAACCTCTGG (서열번호 17) | 5107 |
| R | ATTTCAGCCCCGTCTAAAGG (서열번호 18) | ||
| FLC2/4 | F | ACCGAACCGAACCTCAGGATC (서열번호 19) | 5634 |
| R | GTAGTTTTTACACACGGGGTC (서열번호 20) |
2. 유전자 교정을 위한 가이드 RNA 설계 및 형질전환
양배추 '스피드'의 FLC 및 양배추 GI 유전자 정보를 기반으로 하여 CRISPR RGEN Tools (http://rgenome.net/)을 사용하여 멀티 카피 FLC, GI 유전자를 동시에 표적할 수 있도록 엑손 부위를 표적으로, high out-of-frame score로 여러 개의 다른 FLC, GI sgRNA의 타겟 부위를 결정했다.
고안된 sgRNA 염기서열을 포함하는 pBAtC::FLC-sgRNA를 제작한 후, 아그로박테리움을 이용하여 양배추 잎 외식편에 형질전환하였다(도 2). 간단하게, 상기 pBAtC::FLC-sgRNA를 아그로박테리움 튜머파시엔스(Agrobacterium tumefaciens) GV3101 균주로 형질전환시킨 후, 28℃에서 18시간동안 배양하고, 상기 형질전환된 아그로박테리움 균주를 LB 배지로 옮겨 OD600 값이 0.8~1 정도될 때까지 배양하였다. 그 후 상기 아그로박테리움을 양배추 품종 '스피드'의 잎 외식편과 공동배양하여 양배추를 형질전환시켰다. 그 후, 상기 잎 외식편을 선별배지로 옮겨 배양시킨 후 신초유도배지에서 신초 성장을 유도한 후 형질전환 식물체로 키웠다.
3. 형질전환 식물체의 유전자 교정 확인
형질전환 식물체에서 게노믹 DNA를 추출한 후, PCR을 통해 sgRNA 표적 위치를 증폭시키고 시퀀싱 분석을 통해 표적 유전자의 편집 여부를 분석하였다.
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using CRISPR/Cas complex
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Claims (7)
- 양배추의 개화조절 유전자의 표적 염기서열에 특이적인 가이드 RNA(guide RNA)를 암호화하는 DNA 및 엔도뉴클레아제(endonuclease) 단백질을 암호화하는 핵산 서열을 포함하는 재조합 벡터를 유효성분으로 함유하는, 양배추의 개화를 지연시키기 위한 유전체 교정용 조성물.
- 제1항에 있어서, 상기 개화조절 유전자는 FLC (Flowering Locus C) 또는 GI (GIGANTEA)인 것을 특징으로 하는 양배추의 개화를 지연시키기 위한 유전체 교정용 조성물.
- (a) 양배추의 개화조절 유전자의 표적 염기서열에 특이적인 가이드 RNA(guide RNA)를 암호화하는 DNA 및 엔도뉴클레아제(endonuclease) 단백질을 암호화하는 핵산 서열을 포함하는 재조합 벡터를 양배추 식물세포에 도입하여 유전체를 교정하는 단계; 및
(b) 상기 유전체가 교정된 양배추 식물세포로부터 양배추 식물체를 재분화하는 단계;를 포함하는, 개화가 지연된 유전체 교정 양배추 식물체의 제조방법. - 제3항에 있어서, 상기 개화조절 유전자는 FLC (Flowering Locus C) 또는 GI (GIGANTEA)인 것을 특징으로 하는 제조방법.
- 제3항에 있어서, 상기 가이드 RNA는 멀티 카피 유전자에 특이적으로 결합 가능한 것을 특징으로 하는 제조방법.
- 제3항 내지 제5항 중 어느 한 항의 방법에 의해 제조된 개화가 지연된 유전체 교정 양배추 식물체.
- 제6항에 따른 양배추 식물체의 유전체가 교정된 종자.
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| KR1020210084294A KR20230001450A (ko) | 2021-06-28 | 2021-06-28 | CRISPR/Cas 복합체를 이용한 개화지연 양배추 식물체의 제조방법 |
Applications Claiming Priority (1)
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| KR1020210084294A KR20230001450A (ko) | 2021-06-28 | 2021-06-28 | CRISPR/Cas 복합체를 이용한 개화지연 양배추 식물체의 제조방법 |
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| KR20230001450A true KR20230001450A (ko) | 2023-01-04 |
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ID=84925102
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| KR (1) | KR20230001450A (ko) |
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN117586369A (zh) * | 2024-01-12 | 2024-02-23 | 中国热带农业科学院三亚研究院 | 一种用于延迟开花或延长生育期的ScFT2蛋白及其编码基因和应用 |
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2021
- 2021-06-28 KR KR1020210084294A patent/KR20230001450A/ko unknown
Cited By (2)
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|---|---|---|---|---|
| CN117586369A (zh) * | 2024-01-12 | 2024-02-23 | 中国热带农业科学院三亚研究院 | 一种用于延迟开花或延长生育期的ScFT2蛋白及其编码基因和应用 |
| CN117586369B (zh) * | 2024-01-12 | 2024-03-26 | 中国热带农业科学院三亚研究院 | 一种用于延迟开花或延长生育期的ScFT2蛋白及其编码基因和应用 |
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