KR20220115803A - 안정한 항-pd-1 항체 약제학적 제제 - Google Patents

안정한 항-pd-1 항체 약제학적 제제 Download PDF

Info

Publication number
KR20220115803A
KR20220115803A KR1020227023258A KR20227023258A KR20220115803A KR 20220115803 A KR20220115803 A KR 20220115803A KR 1020227023258 A KR1020227023258 A KR 1020227023258A KR 20227023258 A KR20227023258 A KR 20227023258A KR 20220115803 A KR20220115803 A KR 20220115803A
Authority
KR
South Korea
Prior art keywords
pharmaceutical formulation
buffer
antibody
formulation
pembrolizumab
Prior art date
Application number
KR1020227023258A
Other languages
English (en)
Inventor
정영석
홍자혜
주경희
하영욱
오인영
김인애
Original Assignee
삼성바이오에피스 주식회사
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by 삼성바이오에피스 주식회사 filed Critical 삼성바이오에피스 주식회사
Publication of KR20220115803A publication Critical patent/KR20220115803A/ko

Links

Images

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/70—Carbohydrates; Sugars; Derivatives thereof
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K39/395—Antibodies; Immunoglobulins; Immune serum, e.g. antilymphocytic serum
    • A61K39/39591—Stabilisation, fragmentation
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/06—Organic compounds, e.g. natural or synthetic hydrocarbons, polyolefins, mineral oil, petrolatum or ozokerite
    • A61K47/16—Organic compounds, e.g. natural or synthetic hydrocarbons, polyolefins, mineral oil, petrolatum or ozokerite containing nitrogen, e.g. nitro-, nitroso-, azo-compounds, nitriles, cyanates
    • A61K47/18—Amines; Amides; Ureas; Quaternary ammonium compounds; Amino acids; Oligopeptides having up to five amino acids
    • A61K47/183—Amino acids, e.g. glycine, EDTA or aspartame
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/06—Organic compounds, e.g. natural or synthetic hydrocarbons, polyolefins, mineral oil, petrolatum or ozokerite
    • A61K47/20—Organic compounds, e.g. natural or synthetic hydrocarbons, polyolefins, mineral oil, petrolatum or ozokerite containing sulfur, e.g. dimethyl sulfoxide [DMSO], docusate, sodium lauryl sulfate or aminosulfonic acids
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/06—Organic compounds, e.g. natural or synthetic hydrocarbons, polyolefins, mineral oil, petrolatum or ozokerite
    • A61K47/22—Heterocyclic compounds, e.g. ascorbic acid, tocopherol or pyrrolidones
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/06—Organic compounds, e.g. natural or synthetic hydrocarbons, polyolefins, mineral oil, petrolatum or ozokerite
    • A61K47/26—Carbohydrates, e.g. sugar alcohols, amino sugars, nucleic acids, mono-, di- or oligo-saccharides; Derivatives thereof, e.g. polysorbates, sorbitan fatty acid esters or glycyrrhizin
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
    • A61K9/0012—Galenical forms characterised by the site of application
    • A61K9/0019—Injectable compositions; Intramuscular, intravenous, arterial, subcutaneous administration; Compositions to be administered through the skin in an invasive manner
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K16/00—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
    • C07K16/18—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans
    • C07K16/28—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants
    • C07K16/2803—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants against the immunoglobulin superfamily
    • C07K16/2818—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants against the immunoglobulin superfamily against CD28 or CD152
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K2039/505—Medicinal preparations containing antigens or antibodies comprising antibodies
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/20—Immunoglobulins specific features characterized by taxonomic origin
    • C07K2317/24—Immunoglobulins specific features characterized by taxonomic origin containing regions, domains or residues from different species, e.g. chimeric, humanized or veneered
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/50—Immunoglobulins specific features characterized by immunoglobulin fragments
    • C07K2317/56—Immunoglobulins specific features characterized by immunoglobulin fragments variable (Fv) region, i.e. VH and/or VL
    • C07K2317/565—Complementarity determining region [CDR]
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/90—Immunoglobulins specific features characterized by (pharmaco)kinetic aspects or by stability of the immunoglobulin
    • C07K2317/94—Stability, e.g. half-life, pH, temperature or enzyme-resistance

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Oil, Petroleum & Natural Gas (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Biophysics (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Mycology (AREA)
  • Dermatology (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Medicinal Preparation (AREA)
  • Medicines Containing Antibodies Or Antigens For Use As Internal Diagnostic Agents (AREA)
  • Peptides Or Proteins (AREA)

Abstract

본 발명은 항-PD-1 항체 또는 이의 항원 결합 단편; 및 안정화제를 포함하고, 버퍼를 포함하지 않는 안정한 항-PD-1 항체 약제학적 제제 및 이를 제조하는 방법에 관한 것이다.

Description

안정한 항-PD-1 항체 약제학적 제제
본 발명은 안정한 항-PD-1 항체 약제학적 제제 및 그 제조방법에 관한 것이다.
약제 안정성을 증진시키기 위한 안정한 항-PD-1 항체 약제학적 제제의 개발 필요성이 부각되고 있다. 항-PD-1 항체 약제학적 제제는 약제 안정성을 위해 버퍼, 안정화제, 및 계면활성제를 포함하고 있다.
그러나, 일부 버퍼는 스트레스 조건에서 자가-분해되기 쉬워서, 항체 의약품의 안정성에 영향을 미칠 수 있다. 또한, 인산의 경우, 동결 환경에서 pH를 유지하지 못하여 항체의 안정성에 영향을 미칠 수 있다.
그러므로, 항-PD-1 항체 약제학적 제제의 안정성에 영향을 미칠 수 있는 버퍼를 포함하지 않고도 항체 단백질을 안정화시킬 수 있는 제제의 개발이 여전히 요구된다.
일 양상은 (a) 항-PD-1 항체 또는 이의 항원 결합 단편; 및 (b) 안정화제를 포함하고, 버퍼를 포함하지 않고, 약 pH 4.5 내지 약 pH 6.5를 갖는 안정한 항-PD-1 항체 약제학적 제제를 제공하는 것이다.
다른 양상은 상기한 약제학적 제제를 개체에 투여하는 단계를 포함하는 개체에서 암을 치료하는 방법을 제공하는 것이다.
다른 양상은 상기 약제학적 제제의 제조 방법을 제공하는 것이다.
본 명세서에서 사용되는 모든 기술용어는, 달리 정의되지 않는 이상, 본 발명의 관련 분야에서 통상의 당업자가 일반적으로 이해하는 바와 같은 의미로 사용된다. 또한, 본 명세서에는 바람직한 방법이나 시료가 기재되나, 이와 유사하거나 동등한 것들도 본 발명의 범주에 포함된다. 또한, 본 명세서에 기재된 수치는 명시하지 않아도 "약"의 의미를 포함하는 것으로 간주한다. 본 명세서에 참고문헌으로 기재되는 모든 간행물의 내용은 전체로서 본 명세서에 원용에 의하여 통합된다.
일 양상은, (a) 항-PD-1 항체 또는 이의 항원 결합 단편; 및 (b) 안정화제를 포함하고, 버퍼를 포함하지 않고, 약 pH 4.5 내지 약 pH 6.5를 갖는 안정한 항-PD-1 항체 약제학적 제제를 제공한다.
통상적으로 알려진 항체를 함유하는 약제학적 제제와 달리, 상기 약제학적 제제는 버퍼를 포함하지 않지만, 항-PD-1 항체의 보존에 바람직한 환경으로서 pH 4.5 내지 pH 6.5, 더욱 바람직한 환경으로서 약 pH 5.0 내지 약 pH 5.5를 유지할 수 있다. 상기 약제학적 제제의 pH는 예를 들면, pH 4.5 내지 6.3, pH 4.8 내지 6.3, pH 5 내지 6.3, pH 5.2 내지 6.3, pH 4.5 내지 6.0, pH 4.8 내지 6.0, pH 5.0 내지 6.0, pH 5.2 내지 6.0, pH 4.5 내지 5.8, pH 4.8 내지 5.8, pH 5.0 내지 5.8, pH 5.2 내지 5.8, pH 4.5 내지 5.6, pH 4.8 내지 5.6, pH 5.0 내지 5.6, pH 5.2 내지 5.6, pH 4.9 내지 5.5, pH 4.9, pH 5.0, pH 5.1, pH 5.2, pH 5.3, pH 5.4, 또는 pH 5.5일 수 있다. 일 구체예에서, 상기 약제학적 제제의 pH는 약 pH 4.5 내지 약 pH 5.5일 수 있다. 다른 구체예에서, 상기 약제학적 제제의 pH는 약 pH 5.0 내지 약 pH 5.5일 수 있다.
상기 약제학적 제제의 pH는 당업계에 알려진 통상적인 방법에 따라 조절할 수 있다. 예를 들어, 상기 약제학적 제제의 pH는 산(예: HCl) 또는 염기(예: NaOH)의 첨가에 의해 조절할 수 있으나, 이에 제한되지 않는다.
용어 "항체(antibody)"는 PD-1에 특이적으로 결합하는 활성을 갖는 임의의 형태의 항체를 나타낸다. 상기 항체는 단일클론 항체, 폴리클론 항체, 인간화 항체, 인간 항체 및 키메라 항체를 포함한다. 상기 항체는 펨브롤리주맙일 수 있다.
용어 "항원 결합 단편"은 항-PD-1 항체에서 PD-1 항원에 결합할 수 있는 단편으로서, 예를 들면, Fab 단편, F(ab')2 단편, Fc 단편, 또는 scFv 단편을 포함하나 이에 제한되지 않는다."펨브롤리주맙(pembrolizumab) 항체"는 암 면역요법에 사용되는 인간화된 항체로서, 여러 상품명 중 하나로 키트루다(KEYDTRUDA®)라는 명칭으로 판매된다. 펨브롤리주맙은 흑색종(melanoma), 비소세포 폐암(non-small cell lung cancer, NSCLC)을 포함한 폐암, 두경부 편평 세포암(head and neck squamous cell cancer, HNSCC)을 포함한 두경부암, 전형적 호지킨 림프종(classical Hodgkin Lymphoma, cHL)을 포함한 호지킨 림프종, 요로상피암, 신세포암, 위암, 마이크로새텔라이트 불안정성-하이 암(microsatellite instability-high cancer, MSI-H), 미스매치 수복 결핍(mismatch repair deficient, dMMR) 고형암, 자궁경부암, 간암, 메르켈 세포암(Merkel cell carcinoma, MCC) 등의 치료에 사용될 수 있다. 상기 펨브롤리주맙은 또한 상업적으로 판매되고 있는 키트루다 중에 존재하는 활성 펨브롤리주맙의 바이오시밀러(biosimilar) 또는 바이오베터(biobetter)를 포함할 수 있다. 펨브롤리주맙은 서열번호 1 내지 3으로 이루어진 군으로부터 선택된 하나 이상의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 영역, 및 서열번호 4 내지 6으로 이루어진 군으로부터 선택된 하나 이상의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 영역을 포함하는 것일 수 있다. 펨브롤리주맙은 서열번호 1(NYYMY)의 아미노산 서열을 갖는 중쇄 CDR1, 서열번호 2(GINPSNGGTNFNEKFK)의 아미노산 서열을 갖는 중쇄 CDR2, 및 서열번호 3(RDYRFDMGFDY)의 아미노산 서열을 갖는 중쇄 CDR3, 및 서열번호 4(RASKGVSTSGYSYLH)의 아미노산 서열을 갖는 경쇄 CDR1, 서열번호 5(LASYLES)의 아미노산 서열을 갖는 경쇄 CDR2, 및 서열번호 6(QHSRDLPLT)의 아미노산 서열을 갖는 경쇄 CDR3을 포함하는 것일 수 있다. 펨브롤리주맙은 서열번호 7(VQLVQSGVEVKKPGASVKVSCKASGYTFTNYYMYWVRQAPGQGLEWMGGINPSNGGTNFNEKFKNRVTLTTDSSTTTAYMELKSLQFDDTAVYYCARRDYRFDMGFDYWGQGTTVTVSSASTKGPSVFPLAPCSRSTSESTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTKTYTCNVDHKPSNTKVDKRVESKYGPPCPPCPAPEFLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSQEDPEVQFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQFNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKGLPSSIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSQEEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSRLTVDKSRWQEGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSLGK)의 아미노산 서열을 갖는 경쇄 가변 영역 및 서열번호 8(IVLTQSPATLSLSPGERATLSCRASKGVSTSGYSYLHWYQQKPGQAPRLLIYLASYLESGVPARFSGSGSGTDFTLTISSLEPEDFAVYYCQHSRDLPLTFGGGTKVEIKRTVAAPSVFIFPPSDEQLKSGTASVVCLLNNFYPREAKVQWKVDNALQSGNSQESVTEQDSKDSTYSLSSTLTLSKADYEKHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEC)의 아미노산 서열을 갖는 중쇄 가변 영역을 포함하는 것일 수 있다.
용어 "바이오시밀러(biosimilar)"는 동등생물의약품이라고도 불린다. 바이오의약품은 화학 제품을 합성한 것이 아니라, 세포를 통해 생산하는 것이기 때문에, 오리지널(original) 의약품과 동일한 제품을 제네릭(generic)처럼 복제할 수 없다. 따라서, 바이오의약품에 대한 복제약은 오리지널 의약품과 동일하지는 않지만 비슷하다는 의미에서 바이오시밀러라고 한다.
용어 "바이오베터(biobetter)"는 오리지널 바이오의약품을 기반으로 효능이나 안전성, 편의성 등을 개량한 약이다. 기존 바이오의약품보다 더 낫다(better)는 의미로 바이오베터라고 불린다. 바이오베터는 유전자재조합기술, 세포배양기술 등 생명공학 기술을 이용해 제조할 수 있다.
펨브롤리주맙은 림프구의 프로그램된 세포 사망 단백질 1(programmed cell death protein 1, PD-1) 수용체를 표적으로 한다. 펨브롤리주맙은 암 세포의 보호 기전을 차단하여 면역 시스템이 암세포를 파괴하도록 하는 IgG4 이소타입 항체이다. 펨브롤 리주맙은 2014년 미국에서 의약 용도로 허가되었다. 또한, 펨브롤리주맙은 2017년 특정 유전적 이상(anomalies), 예를 들면 미스매치 수복 결핍(mismatch repair deficiency) 또는 마이크로샐테라이트 불안정성을 갖는 절단 불가능하거 나(unresectable) 또는 전이성 고형 종양에 대하여 허가되었다. 또한, 펨브롤리주 맙은 단독 또는 다른 화학 치료제와 조합되어 사용될 수 있다. 펨브롤리주맙은 정맥 또는 피하 주사에 의하여 투여될 수 있다.
펨브롤리주맙은 당업계에서 알려진 일반적 방법에 의하여 생산될 수 있다. 예를 들면, US 9,834,605 및 WO 2008/156712A1은 당업계의 통상의 기술자가 펨브롤리주맙을 제조하는데 사용할 수 있는 방법을 기술하고 있다. 예를 들면, 펨브롤리주맙은 숙주세포 중의 면역글로불린 경쇄 및 중쇄 유전자의 재조합 발현에 의하여 제조될 수 있다.
상기 항-PD-1 항체, 예를 들면, 펨브롤리주맙 또는 이의 항원 결합 단편은 수성 용액 중에서 pH에 대한 완충 기능을 갖는다. 상기 항-PD-1 항체, 예를 들면, 펨브롤리주맙 또는 이의 항원 결합 단편의 농도는 pH 4.5 내지 pH 6.5에 해당하는 완충 기능을 제공하기에 적합한 양일 수 있다. 아울러, 상기 항-PD-1 항체, 예를 들면, 펨브롤리주맙 또는 이의 항원 결합 단편의 농도는 암의 치료에 유효한 양일 수 있다. 또한, 상기 항-PD-1 항체, 예를 들면, 펨브롤리주맙 또는 이의 항원 결합 단편의 농도는 상기 약제학적 제제의 안정성, 점도 등을 고려하여 선택될 수 있다. 상기 항-PD-1 항체, 예를 들면, 펨브롤리주맙 또는 이의 항원 결합 단편의 농도는 예를 들면, 5 내지 300 mg/mL, 5 내지 250 mg/mL, 5 내지 200 mg/mL, 10 내지 200 mg/mL, 10 내지 165 mg/mL, 15 내지 160 mg/mL, 5 내지 45 mg/mL, 10 내지 40 mg/mL, 15 내지 35 mg/mL, 20 내지 30 mg/mL, 130 내지 250 mg/mL, 135 내지 200 mg/mL, 135 내지 170 mg/mL, 140 내지 160 mg/mL, 145 내지 155 mg/mL, 약 25 mg/mL, 약 150 mg/mL, 약 200 mg/mL, 또는 약 250 mg/mL일 수 있다. 상기 항-PD-1 항체, 예를 들면, 펨브롤리주맙 또는 이의 항원 결합 단편은 상기 농도에서 약제학적 제제의 안정성, 투여에 적합한 약제학적 제제의 점도 및 pH 유지에 기여할 수 있다.
용어 "안정화제(stabilizer)"는 물질을 방치하거나 보존할 때 상태 변화나 화학 변화를 방지하기 위하여 첨가하는 물질을 의미한다. 상기 안정화제는 폴리올, 아미노산, 및 금속염으로 이루어진 군으로부터 선택된 하나 이상일 수 있다.
본 명세서에 있어서, 용어 "폴리올(polyol)"은 복수 개의 히드록실기(multiple hydroxyl groups)를 갖는 부형제를 나타낸다. 상기 폴리올은 당, 당 알코올, 및 당산(sugar acid)을 포함할 수 있다. 상기 당은 가용성 탄수화물을 나타낸다. 상기 당은 단당류, 이당류, 올리고당, 또는 다당류일 수 있다. 상기 당 알코올은 당으로부터 유도된 유기 화합물로서, 각 탄소 원자는 하나의 히드록실기를 갖는다. 상기 당산은 사슬의 한쪽 또는 양쪽에 카르복실기를 갖는 당을 나타낸다. 상기 폴리올은 글루코스, 프룩토스, 만노스, 갈락토스, 수크로스, 락토스, 말토스, 트레할로스, 만니톨, 소르비톨, 및 폴리에틸렌글리콜으로 이루어진 것으로부터 선택된 하나 이상일 수 있다. 상기 폴리올은 소르비톨, 수크로스, 트레할로스, 만노스, 말토스, 만니톨, 또는 이들의 혼합물일 수 있다. 상기 폴리올은 폴리올의 무수물을 포함한다. 예를 들면, 트레할로스는 트레할로스 뿐만 아니라 트레할로스 디히드레이트를 포함할 수 있다. 상기 폴리올의 농도는 상기 약제학적 제제 중 항-PD-1 항체, 예를 들면, 펨브롤리주맙 또는 이의 항원 결합 단편의 안정성 및 액체 약제학적 제제의 점도를 유지하는데 바람직한 범위 내에서 자유롭게 조절될 수 있고, 각 구체적인 폴리올, 당 알코올 또는 당산에 따라 개별적으로 달라질 수 있다.
상기 당의 농도는 1.0 내지 15.0%(w/v), 3.0 내지 15.0%(w/v), 5.0 내지 15.0%(w/v), 7.0 내지 15.0%(w/v), 1.0 내지 10.0%(w/v), 3.0 내지 10.0%(w/v), 4.0 내지 10.0%(w/v), 5.0 내지 10.0%(w/v), 7.0 내지 10.0%(w/v), 1.0 내지 7.0%(w/v), 2.0 내지 7.0%(w/v), 3.0 내지 7.0%(w/v), 4.0 내지 7.0%(w/v), 1.0 내지 5.0%(w/v), 2.0 내지 5.0%(w/v), 3.0 내지 5.0%(w/v), 4.0 내지 5.0%(w/v), 4.5 내지 5.0%(w/v) (e.g., 약 4.7%(w/v)), 6.5 내지 8.5%(w/v) (e.g., 약 6.8%(w/v), 약 7.0%(w/v), 약 7.2%(w/v)) 또는 7.8 내지 8.2%(w/v) (e.g., 약 7.8%(w/v), 약 7.9%(w/v), 약 8.0%(w/v), 약 8.1%(w/v), 또는 약 8.2%(w/v))일 수 있다. 상기 당은 예를 들면, 수크로스, 글루코스, 갈락토스, 말토스, 프락토스, 트레할로스, 또는 이의 혼합물일 수 있다. 일 구체예에서, 상기 당은 1.0 내지 15.0%(w/v), 4.0 내지 10.0%(w/v), 6.0 내지 8.0%(w/v), 또는 약 7.0%(w/v)의 수크로스일 수 있다. 다른 구체예에서, 상기 당은 1.0 내지 15.0%(w/v), 4.0 내지 10.0%(w/v), 7.0 내지 8.0%(w/v), 또는 약 7.6%(w/v)의 트레할로스일 수 있다.
상기 당 알코올의 농도는 1.0 내지 20.0%(w/v), 예를 들면, 1.0 내지 15.0%(w/v), 1.0 내지 10.0%(w/v), 2.5 내지 10.0%(w/v), 3.0 내지 10.0%(w/v), 3.5 내지 10.0%(w/v), 4.0 내지 10.0%(w/v), 1.0 내지 8.0%(w/v), 2.5 내지 8.0%(w/v), 3.0 내지 8.0%(w/v), 3.5 내지 8.0%(w/v), 4.0 내지 8.0%(w/v), 1.0 내지 6.0%(w/v), 2.5 내지 6.0%(w/v), 3.0 내지 6.0%(w/v), 3.5 내지 6.0%(w/v), 4.0 내지 6.0%(w/v), 4.0 내지 5.5%(w/v), 또는 4.0 내지 5.0%(w/v)일 수 있다. 상기 당 알코올은 예를 들면, 소르비톨, 만니톨, 이의 수화물, 또는 이의 혼합물일 수 있다. 일 구체예에서, 상기 당 알코올은 약 4.0%(w/v)의 소르비톨일 수 있다.
상기 아미노산은 글리신, 알라닌, 발린, 루신, 이소루신, 프롤린, 페닐알라닌, 티 로신, 트립토판, 세린, 트레오닌, 시스테인, 메티오닌, 아스파라진, 글루타민, 라 이신, 아르기닌, 히스티딘, 아스파르트산, 글루탐산, 이의 약제학적으로 허용가능한 염, 또는 이들의 혼합물일 수 있다. 상기 아미노산은 예를 들면, 글리신, 프롤린, 페닐알라닌, 티로신, 트립토판, 라이신, 아르기닌, 이의 약제학적으로 허용가능한 염, 또는 이들의 혼합물일 수 있다. 일 구체예에서, 상기 아미노산은 아르기닌, 이의 약제학적으로 허용가능한 염, 또는 이들의 혼합물일 수 있다. 다른 일 구체예에서, 상기 아미노산은 프롤린, 이의 약제학적으로 허용가능한 염, 또는 이들의 혼합물일 수 있다. 또다른 일 구체예에서, 상기 아미노산은 라이신, 이의 약제학적으로 허용가능한 염, 또는 이들의 혼합물일 수 있다. 또다른 일 구체예에서, 상기 아미노산은 아르기닌, 라이신, 이의 약제학적으로 허용가능한 염, 또는 이들의 혼합물일 수 있다.
상기 안정화제로서 아미노산의 농도는 0.1 내지 300.0 mM, 0.5 내지 300.0 mM, 1.0 내지 300.0 mM, 5.0 내지 300.0 mM, 10.0 내지 300.0 mM, 25.0 내지 300.0 mM, 30.0 내지 300.0 mM, 50.0 내지 300.0 mM, 80.0 내지 300.0 mM, 100.0 내지 300.0 mM, 120.0 내지 300.0 mM, 0.1 내지 250.0 mM, 0.5 내지 250.0 mM, 1.0 내지 250.0 mM, 5.0 내지 250.0 mM, 10.0 내지 250.0 mM, 25.0 내지 250.0 mM, 30.0 내지 250.0 mM, 50.0 내지 250.0 mM, 80.0 내지 250.0 mM, 100.0 내지 250.0 mM, 120.0 내지 250.0 mM, 0.1 내지 200.0 mM, 0.5 내지 200.0 mM, 1.0 내지 200.0 mM, 5.0 내지 200.0 mM, 10.0 내지 200.0 mM, 25.0 내지 200.0 mM, 30.0 내지 200.0 mM, 50.0 내지 200.0 mM, 80.0 내지 200.0 mM, 100.0 내지 200.0 mM, 120.0 내지 200.0 mM, 0.1 내지 160.0 mM, 0.5 내지 160.0 mM, 1.0 내지 160.0 mM, 5.0 내지 160.0 mM, 10.0 내지 160.0 mM, 25.0 내지 160.0 mM, 30.0 내지 160.0 mM, 50.0 내지 160.0 mM, 80.0 내지 160.0 mM, 100.0 내지 160.0 mM, 120.0 내지 160.0 mM, 130.0 내지 150.0 mM, 0.1 내지 100.0 mM, 0.5 내지 100.0 mM, 1.0 내지 100.0 mM, 5.0 내지 100.0 mM, 10.0 내지 100.0 mM, 25.0 내지 100.0 mM, 30.0 내지 100.0 mM, 50.0 내지 100.0 mM, 80.0 내지 100.0 mM, 0.1 내지 50.0 mM, 0.5 내지 50.0 mM, 1.0 내지 50.0 mM, 5.0 내지 50.0 mM, 10.0 내지 50.0 mM, 25.0 내지 50.0 mM, 또는 30.0 내지 50.0 mM, 0.1 내지 40.0 mM, 0.5 내지 40.0 mM, 1.0 내지 40.0 mM, 5.0 내지 40.0 mM, 10.0 내지 40.0 mM, 25.0 내지 40.0 mM, 또는 30.0 내지 40.0 mM, 0.1 내지 30.0 mM, 0.5 내지 30.0 mM, 1.0 내지 30.0 mM, 5.0 내지 30.0 mM, 10.0 내지 30.0 mM, 25.0 내지 30.0 mM, 0.1 내지 20.0 mM, 0.5 내지 20.0 mM, 1.0 내지 20.0 mM, 5.0 내지 20.0 mM, 10.0 내지 20.0 mM, 0.1 내지 10.0 mM, 0.5 내지 10.0 mM, 1.0 내지 10.0 mM, 또는 5.0 내지 10.0 mM일 수 있다. 일 구체예에서, 상기 아미노산은 1.0 내지 10.0 mM, 1.0 내지 5.0 mM, 2.0 내지 10.0 mM, 2.0 내지 5.0 mM, 2.0 내지 4.0 mM, 또는 약 3.3 mM의 아르기닌, 이의 약제학적으로 허용가능한 염, 또는 이의 혼합물일 수 있다. 다른 일 구체예에서, 상기 아미노산은 24 내지 29 mM의 글리신, 이의 약제학적으로 허용가능한 염, 또는 이의 혼합물일 수 있다. 상기 아미노산의 농도는 상기 약제학적 제제의 목적하는 pH에 영향을 미치지 않고, 항-PD-1 항체, 예를 들면, 펨브롤리주맙 또는 이의 항원 결합 단편의 안정성에 영향을 미치지 않는 범위 내에서 자유롭게 조절될 수 있고, 각 구체적인 아미노산에 따라 개별적으로 달라질 수 있다.
상기 금속염은 NaCl, KCl, NaF, KBr, NaBr, Na2SO4, NaSCN, CaCl2, MgCl2, 또는 K2SO4 일 수 있다. 상기 금속염은 예를 들면, NaCl 또는 Na2SO4일 수 있다. 상기 금속염의 농도는 1.0 내지 300.0 mM, 5.0 내지 150.0 mM, 10.0 내지 150.0 mM, 30.0 내지 150.0 mM, 50.0 내지 150.0 mM, 80.0 내지 150.0 mM, 100.0 내지 150.0 mM, 120.0 내지 150.0 mM, 5.0 내지 125.0 mM, 10.0 내지 125.0 mM, 30.0 내지 125.0 mM, 50.0 내지 125.0 mM, 80.0 내지 125.0 mM, 100.0 내지 125.0 mM, 120.0 내지 125.0 mM, 5.0 내지 100.0 mM, 10.0 내지 100.0 mM, 30.0 내지 100.0 mM, 50.0 내지 100.0 mM, 80.0 내지 100.0 mM, 5 내지 80.0 mM, 10.0 내지 80.0 mM, 30.0 내지 80.0 mM, 또는 50.0 내지 80.0 mM일 수 있다. 일 구체예에서, 상기 금속염은 5.0 내지 150.0 mM, 20.0 내지 140.0 mM, 또는 약 100.0 mM의 소듐 클로리드일 수 있다. 금속염의 농도는 본 발명의 약제학적 제제 중 항-PD-1 항체, 예를 들면, 펨브롤리주맙 또는 이의 항원 결합 단편의 안정성 유지하고, 이를 침전시키지 않는 범위 내에서 자유롭게 조절될 수 있고, 각 구체적인 금속염에 따라 개별적으로 달라질 수 있다. 상기 안정화제는 폴리올 및 아미노산의 혼합물일 수 있다. 폴리올 및 아미노산의 혼합물을 사용할 경우, 상기 아미노산은 안정화제 및 점도감소제 중 하나 이상의 역할을 할 수 있다.
본 명세서에 제공된 약제학적 제제가 '성분 A를 포함하지 않는'은 상기 약제학적 제제가 성분 A를 포함하지 않거나 실질적으로 포함하지 않는 것을 의미할 수 있다. '성분 A를 실질적으로 포함하지 않는'은 성분 A를 전혀 포함하지 않거나 또는 성분 A가 존재하더라도, 성분 A가 약제학적 제제의 특성에 실질적으로 어떠한 영향을 미 치지 않는 미량으로 존재하는 경우, 또는 검출 불가능한 양으로 존재하는 경우를 포함하는 것으로 해석될 수 있다.
상기 약제학적 제제는 항-PD-1 항체, 예를 들면, 펨브롤리주맙 또는 이의 항원 결합 단편 외의 별도의 버퍼를 포함하지 않는다. 본 명세서에 있어서, 용어 "버퍼(buffer)"는 약제학적 제제가 pH 변화에 저항하도록 첨가된 조성물을 나타낸 다. 상기 버퍼는 허용가능한 범위 내에서 제제의 pH를 유지할 수 있다. 상기 버퍼는 일반적으로 그의 산-염기 짝(conjugate) 성분의 작용에 의하여 상기 제제가 pH 변화에 저항하도록 한다. 본 명세서에서, 버퍼의 농도가 언급되는 경우, 언급된 농도는 상기 버퍼의 유리 산 또는 유리 염기 형태의 몰 농도를 나타낸다. 본 명세서에서, 구절 "버퍼를 포함하지 않는다"는 약제학적 제제가 pH 변화에 저항하도록 하는 정도의 버퍼를 포함하지 않는 것을 나타낸다. 이는 상기 약제학적 제제 내에서의 의도된 버퍼로서의 기능을 발휘할 수 없는 양을 포함하는 것으로 해석될 수 있다. 상기 버퍼는 히스티딘, 인산 (인산 나트륨 또는 인산 칼륨), 말레인산, 타르타르산, 숙신산(숙시네이트), 시트르산(시트레이트), 아세트산(아세테이트), 탄산, 이의 약제학적으로 허용가능한 염, 또는 이의 혼합물일 수 있다. 일 구체예에서, 상기 버퍼는 히스티딘, 이의 약제학적으로 허용가능한 염, 또는 이의 혼합물일 수 있다. 다른 구체예에서, 상기 버퍼는 인산, 이의 약제학적으로 허용가능한 염, 또는 이의 혼합물일 수 있다.
상기 약제학적 제제는 계면활성제를 포함하지 않는 것, 또는 계면활성제를 더 포함하는 것일 수 있다. 상기 계면활성제는 비이온성 계면활성제일 수 있다. 상기 비이온성 계면활성제는 폴리소르베이트, 폴록사머, 다른 지방산의 소르비탄 에스테르 또는 이들의 혼합물일 수 있다. 상기 폴리소르베이트는 폴리소르베이트 20, 폴리소르베이트 40, 폴리소르베이트 60, 폴리소르베이트 80 또는 이의 혼합물일 수 있다. 폴록사머는 폴록사머 188일 수 있다. 상기 약제학적 제제에서, 계면활성제를 포함하는 경우, 계면활성제의 농도는 상기 약제학적 제제 또는 재구성화된 제제의 전체 부피를 기준으로, 0.001 내지 1%(w/v), 0.001 내지 0.5%(w/v), 0.001 내지 0.1%(w/v), 0.001 내지 0.05%(w/v), 0.001 내지 0.02%(w/v), 0.005 내지 1%(w/v), 0.005 내지 0.5%(w/v), 0.005 내지 0.1%(w/v), 0.005 내지 0.05%(w/v), 0.005 내지 0.02%(w/v), 0.008 내지 1%(w/v), 0.008 내지 0.5%(w/v), 0.008 내지 0.1%(w/v), 0.008 내지 0.05%(w/v), 또는 0.008 내지 0.02%(w/v)일 수 있다. 일 구체예에서, 상기 약제학적 제제는 0.02 내지 0.04%(w/v)의 폴리소르베이트 20, 또는 폴리소르베이트 80을 포함한다.
상기 약제학적 제제는 항산화제를 더 포함하는 것일 수 있다. 용어 "항산화제(antioxidant)"는 산화를 방지하는 물질을 의미한다. 상기 항산화제는 아미노산, 비타민, 코엔자임, 글루타티온, 메틸설포닐설페이트, 또는 이들의 혼합물일 수 있다. 상기 항산화제로서 아미노산은 메티오닌, L-시스테인, L-카르니틴, 또는 이들의 혼합물일 수 있다. 상기 항산화제로서 비타민은 비타민A, 비타민C, 비타민E, 또는 이들의 혼합물일 수 있다. 상기 코엔자임은 코엔자임 Q10일 수 있다. 일 구체예에서, 상기 항산화제는 메티오닌일 수 있다.
상기 항산화제의 농도는 상기 약제학적 제제 중 항-PD-1 항체, 예를 들면, 펨브롤리주맙 또는 이의 항원 결합 단편의 안정성을 유지하는데 바람직한 범위 내에서 자유롭게 조절될 수 있고, 각 구체적인 항산화제의 종류에 따라 개별적으로 달라질 수 있다. 상기 약제학적 제제에서, 항산화제를 포함하는 경우, 항산화제의 농도는 1 내지 70 mM, 1 내지 50 mM, 1 내지 30 mM, 5 내지 50 mM, 5 내지 30 mM, 1 내지 20 mM, 1 내지 15 mM, 1 내지 10 mM, 1 내지 5 mM, 3 내지 20 mM, 3 내지 15 mM, 3 내지 10 mM, 3 내지 7 mM, 20 내지 60 mM, 30 내지 50 mM, 약 5 mM, 약 20 mM, 약 30 mM, 약 40 mM, 또는 약 50 mM일 수 있다. 일 구체예에서, 상기 약제학적 제제는 약 5 mM의 메티오닌을 포함한다. 다른 일 구체예에서, 상기 약제학적 제제는 약 30 mM의 메티오닌을 포함한다. 또다른 일 구체예에서, 상기 약제학적 제제는 약 50 mM의 메티오닌을 포함한다.
상기 약제학적 제제는 액체일 수 있다. 상기 약제학적 제제는 피하 주사 또는 정맥 주사용일 수 있다. 상기 약제학적 제제는 주사에 적합하도록 적절한 수성 담체를 더 포함할 수 있다. 상기 수성 담체는 인간에게 투여 시 안전하고 무독성인 제약상 허용된 것으로서, 예를 들면 물, 염수 용액, 링거 용액, 덱스트로스, 또는 이의 혼합물일 수 있다.
상기 약제학적 제제는 피하 또는 정맥 주사 시 적절한 범위의 삼투압을 가질 수 있 다. 삼투압은 예를 들면, 200 내지 400 mOsm/kg, 200 내지 350 mOsm/kg, 250 내지 300 mOsm/kg, 250 내지 290 mOsm/kg, 270 내지 328 mOsm/kg, 250 내지 269 mOsm/kg, 또는 328 내지 350 mOsm/kg일 수 있다. 삼투압은 투여 시 발생할 수 있는 통증을 최소화하기 위해 적절히 조절될 수 있다.
상기 약제학적 제제는 피하 또는 정맥 주사 시 적절한 범위의 점도를 가질 수 있다. 상기 점도는 25℃±3℃의 상온에서 측정한 경우 예를 들면, 0.5 내지 100 cp, 0.5 내지 90 cp, 0.5 내지 80 cp, 0.5 내지 70 cp, 0.5 내지 60 cp, 0.5 내지 50 cp, 0.5 내지 40 cp, 0.5 내지 30 cp, 0.5 내지 20 cp, 0.5 내지 15 cp, 또는 0.5 내지 10 cp일 수 있다. 상기 점도는 투여 시 발생할 수 있는 통증을 최소화하기 위해 적절히 조절될 수 있다.
일 구체예에서, 상기 약제학적 제제에서 상기 항-PD-1 항체, 예를 들면, 펨브롤리주맙 또는 이의 항원 결합 단편의 농도는 5 내지 300 mg/mL, 5 내지 250 mg/mL, 5 내지 200 mg/mL, 15 내지 30mg/mL, 또는 150 내지 250mg/mL이고, 상기 안정화제는 수크로스, 글루코스, 갈락토스, 말토스, 프락토스, 트레할로스, 소르비톨, 만니톨, 아르기닌, 라이신, 프롤린, 글리신, 페닐알라닌, 티로신, 트립토판, 이의 수화물, 이의 약제학적으로 허용가능한 염, 이들의 혼합물, 또는 금속염이고, 상기 약제학적 제제의 pH는 pH 4.5 내지 pH 6.5, pH 5.0 내지 pH 5.5인 것일 수 있다.
상기 구체예에서, 상기 안정화제는 수크로스, 글루코스, 갈락토스, 말토스, 프락토스, 트레할로스, 이의 수화물, 또는 이의 혼합물이고, 상기 안정화제의 농도는 1.0 내지 15.0%(w/v), 3.0 내지 15.0%(w/v), 5.0 내지 15.0%(w/v), 7.0 내지 15.0%(w/v), 1.0 내지 10.0%(w/v), 3.0 내지 10.0%(w/v), 5.0 내지 10.0%(w/v), 7.0 내지 10.0%(w/v), 1.0 내지 7.0%(w/v), 2.0 내지 7.0%(w/v), 3.0 내지 7.0%(w/v), 4.0 내지 7.0%(w/v), 1.0 내지 5.0%(w/v), .02 내지 5.0%(w/v), 3.0 내지 5.0%(w/v), 4.0 내지 5.0%(w/v), 4.5 내지 5.0%(w/v) (e.g., 약 4.7%(w/v)), 또는 7.8 내지 8.2%(w/v) (e.g., 약 7.8%(w/v), 약 7.9%(w/v), 약 8%(w/v), 약 8.1%(w/v), 또는 약 8.2%(w/v))일 수 있다. 상기 안정화제는 소르비톨, 만니톨, 이의 수화물, 또는 이의 혼합물이고, 상기 안정화제의 농도는 1.0 내지 20.0%(w/v), 예를 들면, 1.0 내지 15.0%(w/v), 1.0 내지 10.0%(w/v), 2.5 내지 10.0%(w/v), 3.0 내지 10.0%(w/v), 3.5 내지 10.0%(w/v), 4.0 내지 10.0%(w/v), 1.0 내지 8.0%(w/v), 2.5 내지 8.0%(w/v), 3.0 내지 8.0%(w/v), 3.5 내지 8.0%(w/v), 4.0 내지 8.0%(w/v), 1.0 내지 6.0%(w/v), 2.5 내지 6.0%(w/v), 3.0 내지 6.0%(w/v), 3.5 내지 6.0%(w/v), 4.0 내지 6.0%(w/v), 4.0 내지 5.5%(w/v), 또는 4.0 내지 5.0%(w/v)일 수 있다. 상기 안정화제는 아르기닌, 라이신, 프롤린, 글리신, 페닐알라닌, 티로신, 트립토판, 이의 수화물, 이의 약제학적으로 허용가능한 염, 또는 이들의 혼합물이고, 상기 안정화제의 농도는 0.1 내지 300.0 mM, 0.5 내지 300.0 mM, 1.0 내지 300.0 mM, 5.0 내지 300.0 mM, 10.0 내지 300.0 mM, 25.0 내지 300.0 mM, 30.0 내지 300.0 mM, 50.0 내지 300.0 mM, 80.0 내지 300.0 mM, 100.0 내지 300.0 mM, 120.0 내지 300.0 mM, 0.1 내지 250.0 mM, 0.5 내지 250.0 mM, 1.0 내지 250.0 mM, 5.0 내지 250.0 mM, 10.0 내지 250.0 mM, 25.0 내지 250.0 mM, 30.0 내지 250.0 mM, 50.0 내지 250.0 mM, 80.0 내지 250.0 mM, 100.0 내지 250.0 mM, 120.0 내지 250.0 mM, 0.1 내지 200.0 mM, 0.5 내지 200.0 mM, 1.0 내지 200.0 mM, 5.0 내지 200.0 mM, 10.0 내지 200.0 mM, 25.0 내지 200.0 mM, 30.0 내지 200.0 mM, 50.0 내지 200.0 mM, 80.0 내지 200.0 mM, 100.0 내지 200.0 mM, 120.0 내지 200.0 mM, 0.1 내지 160.0 mM, 0.5 내지 160.0 mM, 1.0 내지 160.0 mM, 5.0 내지 160.0 mM, 10.0 내지 160.0 mM, 25.0 내지 160.0 mM, 30.0 내지 160.0 mM, 50.0 내지 160.0 mM, 80.0 내지 160.0 mM, 100.0 내지 160.0 mM, 120.0 내지 160.0 mM, 130.0 내지 150.0 mM, 0.1 내지 100.0 mM, 0.5 내지 100.0 mM, 1.0 내지 100.0 mM, 5.0 내지 100.0 mM, 10.0 내지 100.0 mM, 25.0 내지 100.0 mM, 30.0 내지 100.0 mM, 50.0 내지 100.0 mM, 80.0 내지 100.0 mM, 0.1 내지 50.0 mM, 0.5 내지 50.0 mM, 1.0 내지 50.0 mM, 5.0 내지 50.0 mM, 10.0 내지 50.0 mM, 25.0 내지 50.0 mM, 또는 30.0 내지 50.0 mM, 0.1 내지 40.0 mM, 0.5 내지 40.0 mM, 1.0 내지 40.0 mM, 5.0 내지 40.0 mM, 10.0 내지 40.0 mM, 25.0 내지 40.0 mM, 또는 30.0 내지 40.0 mM, 0.1 내지 30.0 mM, 0.5 내지 30.0 mM, 1.0 내지 30.0 mM, 5.0 내지 30.0 mM, 10.0 내지 30.0 mM, 25.0 내지 30.0 mM, 0.1 내지 20.0 mM, 0.5 내지 20.0 mM, 1.0 내지 20.0 mM, 5.0 내지 20.0 mM, 10.0 내지 20.0 mM, 0.1 내지 10.0 mM, 0.5 내지 10.0 mM, 1.0 내지 10.0 mM, 또는 5.0 내지 10.0 mM일 수 있다. 상기 안정화제는 약 1.0 내지 약 15.0%(w/v)의 수크로스, 트레할로스, 이의 수화물, 또는 이들의 혼합물; 및 약 0.1 내지 약 300.0 mM의 아르기닌, 라이신, 프롤린, 글리신, 페닐알라닌, 티로신, 트립토판, 이의 약제학적으로 허용가능한 염, 또는 이의 혼합물;의 혼합물일 수 있다. 상기 안정화제는 약 1.0 내지 약 20.0 %(w/v)의 소르비톨, 만니톨, 이의 수화물, 또는 이의 혼합물; 및 약 0.1 내지 약 300.0 mM의 아르기닌, 라이신, 프롤린, 글리신, 페닐알라닌, 티로신, 트립토판, 이의 약제학적으로 허용가능한 염, 또는 이의 혼합물;의 혼합물일 수 있다.
상기 구체예에서, 상기 약제학적 제제는 계면활성제를 더 포함하는 것일 수 있다. 상기 계면활성제는 폴리소르베이트, 또는 폴록사머일 수 있다. 상기 폴리소르베이트는 폴리소르베이트 20 또는 폴리소르베이트 80일 수 있다. 계면활성제의 농도는 0.001 내지 1%(w/v), 0.001 내지 0.5%(w/v), 0.001 내지 0.1%(w/v), 0.001 내지 0.05%(w/v), 0.001 내지 0.02%(w/v), 0.005 내지 1%(w/v), 0.005 내지 0.5%(w/v), 0.005 내지 0.1%(w/v), 0.005 내지 0.05%(w/v), 0.005 내지 0.02%(w/v), 0.008 내지 1%(w/v), 0.008 내지 0.5%(w/v), 0.008 내지 0.1%(w/v), 0.008 내지 0.05%(w/v), 0.008 내지 0.02%(w/v), 또는 0.02 내지 0.04%(w/v)일 수 있다.
상기 구체예에서, 상기 약제학적 제제는 항산화제를 더 포함하는 것일 수 있다. 상기 항산화제는 메티오닌일 수 있다. 메티오닌의 농도는 1 내지 70 mM, 1 내지 50 mM, 1 내지 30 mM, 5 내지 50 mM, 5 내지 30 mM, 1 내지 20 mM, 1 내지 15 mM, 1 내지 10 mM, 1 내지 5 mM, 3 내지 20 mM, 3 내지 15 mM, 3 내지 10 mM, 3 내지 7 mM, 20 내지 60 mM, 30 내지 50 mM, 약 5 mM, 약 20 mM, 약 30 mM, 약 40 mM, 또는 약 50 mM일 수 있다.
본 발명의 약제학적 제제에서 상기 항-PD-1 항체, 예를 들면, 펨브롤리주맙 또는 이의 항원 결합 단편은 안정화될 수 있다. 용어 "안정화(stabilization)"는 상기 항-PD-1 항체, 예를 들면, 펨브롤리주맙 또는 이의 항원 결합 단편이 투 여 전후, 추가 제조 공정, 보관 또는 저장 시에 이의 물리적 안정성, 화학적 안정 성 및/또는 생물학적 활성을 실질적으로 보유하는 것을 의미한다. 물리적 안정성, 화학적 안정성 및/또는 생물학적 활성은 통상적으로 알려진 방법으로 평가할 수 있다.
본 명세서에 있어서, 항-PD-1 항체 또는 이의 항원 결합 단편의 안정성은 하기 사항 중 하나 이상을 충족하는 것일 수 있다.
안정성(stability)은 선택된 온도에서 선택된 기간 측정될 수 있다. 예를 들면, 일 구체예에서, 안정한 제제는 2 내지 8℃에서 12개월 또는 그 이상 동안 유의한 변화가 관찰되지 않는 제제이다. 다른 구체예에서, 안정한 제제는 2 내지 8℃에서 18개월 또는 그 이상 동안 유의한 변화가 관찰되지 않는 제제이다. 다른 구체예에서, 안정한 제제는 23 내지 27℃에서 3개월 또는 그 이상 동안 유의한 변화가 관찰되지 않는 제제이다. 다른 구체예에서, 안정한 제제는 23 내지 27℃에서 6개월 또는 그 이상 동안 유의한 변화가 관찰되지 않는 제제이다. 다른 구체예에서, 안정한 제제는 23 내지 27℃에서 12개월 또는 그 이상 동안 유의한 변화가 관찰되지 않는 제제이다. 다른 구체예에서, 안정한 제제는 23 내지 27℃에서 18개월 또는 그 이상 동안 유의한 변화가 관찰되지 않는 제제이다. 항체 제제에 대한 안정성 기준은 다음과 같다. SE-HPLC로 측정하였을 때, 항체 단량체의 10% 이하, 예를 들면, 5% 이하, 또는 2.5% 이하가 분해되는 것이다. 항체 역가(potency)는 대조군 또는 표준 항체의 60 내지 140%, 또는 80 내지 120% 이내이다. 예를 들면, SE-HPLC로 저분량 종(LMW)을 측정하였을 때, 항체의 10% 이하, 5% 이하, 또는 2.5% 이하의 변화를 갖는 것일 수 있다. 예를 들면, SE-HPLC로 고분량 종(HMW)을 측정하였을 때, 항체의 10% 이하, 5% 이하, 또는 2.5% 이하의 변화를 갖는 것일 수 있다. 또한, 제제의 농도, 및 pH는 ±10% 이하, ±5% 이하, 또는 ±2.5% 이하의 변화를 갖는 것일 수 있다.
상기 약제학적 제제는 안정성 항온기 내에 넣고 온도 40±2℃ 및 상대 습도 75±5%의 조건에서 4주간 두었을 때, 10% 이하, 5% 이하, 또는 2.5% 이하의 범위 내에서 HMW 또는 pH가 변하는 것이다.
상기 약제학적 제제는 0.3 내지 1mL를 타입 I 유리 재질의 2cc 바이얼(Schott 사)에 넣고, 상기 바이얼을 교반기 (Heidolph 사)에 장착하고 상온에서 400 rpm으로 72시간 교반하였을 때, 10% 이하, 5% 이하, 또는 2.5% 이하의 범위 내에서 HMW 또는 pH가 변하는 것이다.
상기 펨브롤리주맙 또는 이의 항원 결합 단편은 생물학적 활성을 여전히 보유하는 것으로 보이는 소정의 시간에 화학적으로 안정한 경우 상기 약제학적 제제 내에서 화학적 안정성을 보유한다. 화학적 안정성은 화학적으로 변형된 형태의 펨브롤리주맙을 검출하고 정량함에 의해 평가될 수 있다. 화학적 변형은 크기 변형 또는 전하 변화를 포함한다. 상기 전하 변화는 예를 들면 탈아미드화의 결과로서 발생하는 전하 변화일 수 있다. 상기 크기 변형은 크기 배제 크로마토그래피(SE-HPLC), 소듐 도데실술페이트-폴리아크릴아미드겔 전기영동(SDS-PAGE), 모세관 전기영동-소듐 도데실술페이트(capillary electrophoresis-sodium dodecyl sulfate, CE-SDS) 분석, 및 기질-보조 레이저 해흡/이온화/비행시간 질량분석(Matrix-assisted laser desorption/ionization/Time-of-flight Mass spectrometry, MALDI/TOF MS)을 사용하여 평가될 수 있다. 또한, 전하 변화는 이온 교환 크로마토그래피(ion exchange chromatograph, IEC), 및 이미지 모세관 등전 포커싱(Imaged capillary isoelectric focusing, icIEF)에 의해 평가될 수 있다. 활성은 PD-1 리간드 결합 분석을 통하여 결정할 수 있다. PD-1 리간드 결합 분석은 효소-연결 면역흡착 분석(Enzyme-linked immuonsorbent assay, ELISA)에 의하여 수행될 수 있다. ELISA 분석은 펨브롤리주맙이 PD-1 리간드에 결합하는 비율(%)을 측정하는 것이다. 펨브롤리주맙 시료와 ELISA 기판상의 PD-1 리간드와 반응시킨 후 결합 정도는 450 nm 흡광도를 측정하여 상대적 결합 비율(%)(relative binding rate)을 얻을 수 있다.
상기 항-PD-1 항체, 예를 들면, 펨브롤리주맙 또는 이의 항원 결합 단편은 약제학적 제제 내에서 생물학적 활성을 보유한다. 상기 생물학적 활성은 예를 들면 약제학적 제제 내에 상기 항-PD-1 항체 또는 이의 항원 결합 단편의 생물학적 활성이 약제학적 제제의 제조 시점에 나타내는 생물학적 활성의 약 30%, 약 20%, 약 10% 이내 (또는 분석 오차 이내)에 있는 경우 생물학적 활성을 보유한다. 상기 생물학적 활성은 예를 들면 항원 결합 분석에서 결정될 수 있다.
안정화 여부는 온도 스트레스, 예를 들면, 40℃에서 1주 내지 4주, 동결-해동 스트레스, 예를 들면, -70℃ 동결 및 상온에서 해동하는 주기의 5회 반복, 또는 교반 스트레스, 예를 들면, 교반기에서 72시간 동안 400 rpm 회전력을 가하여, 크기 배제-고속 액체 크로마토그래피(Size-Exclusion HPLC, SE-HPLC)를 이용하여, %HMW, % 단량체 및/또는 %LMW를 측정함으로써 평가할 수 있다. 일 구체예에서, 본 발명의 약제학적 제제는 Keytruda®과 비교하여 동등하거나 더 적은 Δ%HMW, Δ%LMW, 또는 Δ%단량체 값을 가질 수 있다. 안정화 여부는 또한 온도 스트레스, 동결-해동 스트레스, 또는 교반 스트레스를 가하여, 이미지 모세관 등전 포커싱(icIEF)을 이용하여, %산성(Acidic) 변화를 측정함으로써 평가할 수 있다. 일 구체예에서, 본 발명의 약제학적 제제는 Keytruda®과 비교하여 동등하거나 더 적은 Δ%산성 값을 가질 수 있다.
본 명세서에서 제공되는 안정한 약제학적 제제는 항체 함량이 25 mg/ml인 경우(pH 5.5 또는 pH 5.0), 제제 0.3 내지 1mL를 타입I 유리 재질의 2cc 바이얼(Schott 사)에 넣고, 40℃에서 4주간 보관하고, 통상적인 SEC로 측정된 %HMW의 변화량 즉, 4주 후의 %HMW- 0주의 %HMW 값이, 10.0% 이하, 5.0% 이하, 또는 2.5%일 수 있다.
본 명세서에서 제공되는 안정한 약제학적 제제는 항체 함량이 25 mg/ml인 경우(pH 5.5 또는 pH 5.0), 제제를 폴리프로필렌 재질의 마이크로튜브에 넣고, 40℃에서 4주간 보관하고, icIEF를 이용하여 측정된 %산성의 변화량 즉, 4주 후의 %산성-0주의 %산성 값이, 20.0% 이하, 15.0% 이하, 또는 10.0% 이하일 수 있다.
일 구체예에서, 상기 약제학적 제제는 (i) 항-PD-1 항체 또는 이의 항원 결합 단편; (ii) 안정화제, 및 (iii) 히스티딘을 제외한 버퍼를 포함하고, 약 4.5 내지 약 6.5의 pH를 갖는다. 상기 히스티딘을 제외한 버퍼는 숙시네이트, 시트레이트, 아세테이트, 포스페이트, 또는 이들의 조합일 수 있다.
다른 양상은 상술한 약제학적 제제로 암을 치료하는 방법을 제공한다. 상기 약제학적 제제에 관해서는 상술한 바와 같다. 상기 암을 치료하는 방법은 약제학적 제제를 암을 치료하기에 효과적인 양으로 개체에 투여하는 단계를 포함할 수 있다. 상기 개체는 사람일 수 있다.
상기 방법에 있어서, "암(cancer)"이라는 용어는 상향조절된 세포 성장을 전형적으로 특징으로 하는 포유동물에서의 병리학적 병태를 지칭하거나 기술한다. 상기 암은 암종, 림프종, 백혈병, 모세포종 및 육종이 포함되지만, 이에 한정되지는 않는다. 상기 암은 예를 들면, 편평 세포 암종, 골수종, 소세포 폐암, 비-소세포 폐암, 신경교종, 호지킨 림프종, 비-호지킨 림프종, 위장 암 또는 위장관암, 신암, 난소 암, 간암, 림프모구성 백혈병, 림프구성 백혈병, 결장직장암, 자궁내막암, 신장암, 전립선암, 갑상선암, 흑색종, 연골육종, 신경모세포종, 췌장암, 다형성 교모세포 종, 자궁경부암, 뇌암, 위암, 방광암, 간세포암, 유방암, 결장 암종, 메르켈 세포 암, 고빈도 현미부수체 불안정성 암, 식도암, 요로상피암, 원발성 종격동 거대 B세 포 림프종 및 두경부암을 포함할 수 있다.
다른 일 양상은 용매에 안정화제를 첨가하여 혼합 용액을 제조하는 단계; 및 상기 혼합 용액에 항-PD-1 항체 또는 이의 항원 결합 단편을 첨가하는 단계; 또는 용매에 항-PD-1 항체 또는 이의 항원 결합 단편을 첨가하여 항-PD-1 항체 또는 이의 항원 결합 단편 용액을 제조하는 단계; 및 상기 용액에 안정화제를 첨가하는 단계;를 포함하는 안정한 약제학적 제제를 제조하는 방법으로서, 상기 제조 단계는 버퍼를 첨가하지 않고 수행되는 것인 방법을 제공한다.
상기 방법에 있어서, 상기 용매는 수성 용매, 예를 들면, 물, 또는 염수(saline)일 수 있다. 상기 방법은 상기 항-PD-1 항체 또는 이의 항원 결합 단편이 첨가된 혼합 용액에 계면활성제를 첨가하는 단계를 더 포함할 수 있다. 상기 방법은 상기 항-PD-1 항체 또는 이의 항원 결합 단편이 첨가된 혼합 용액에 항산화제를 첨가하는 단계를 더 포함할 수 있다. 상기 방법은 상기 제제의 pH를 약 pH 4.5 내지 약 pH 5.5, 약 pH 5.5, 또는 약 pH 5.0으로 조절하는 단계를 더 포함할 수 있다.
상기 약제학적 제제에서 언급된 용어 또는 요소 중 청구된 약제학적 제제의 제조 방법에 대한 설명에서 언급된 것과 같은 것은, 앞에서 청구된 약제학적 제제에 대한 설명에서 언급된 바와 같은 것으로 이해된다.
일 양상에 따른 안정한 항-PD-1 항체 약제학적 제제에 의하면, 버퍼를 포함하지 않고서도 항-PD-1 항체는 안정하게 유지될 수 있다.
일 양상에 따른 개체에서 암을 치료하는 방법에 의하면, 개체에서 암을 효율적으로 치료할 수 있다.
일 양상에 따른 안정한 항-PD-1 항체 약제학적 제제를 제조하는 방법에 의하면, 안정한 항-PD-1 항체 약제학적 제제를 효율적으로 제조할 수 있다.
도 1은 버퍼를 달리한 제제에 대하여 4주간 온도 스트레스를 가한 후 제제의 Δ%HMW를 나타낸 도면이다.
도 2는 버퍼 프리 또는 히스티딘 버퍼 및 계면활성제 함량이 다른 제제에 대한 Tagg 값을 나타낸 도면이다.
도 3은 버퍼 프리 및 20 mM 히스티딘 함유 제제에 대하여 측정된 변성제 농도 변화에 따른 비율(348/332)을 나타낸 도면이다.
도 4는 버퍼 및 PS80 함량을 달리한 제제에 대하여 4주간 온도 스트레스를 가한 후 제제의 Δ%HMW를 나타낸 도면이다.
이하, 본 발명을 하기 실시예에 의하여 더욱 상세하게 설명한다. 단, 하기 실시예는 본 발명을 예시하기 위한 것일 뿐, 이에 의해 본 발명의 범위가 한정되는 것은 아니다.
재료 및 방법
1. 크기 배제 크로마토그래피(size exclusion chromatography, SEC)
시료의 순도를 크기 배제 크로마토그래피에 의하여 검사하였다. 크기 배제 크로마토그래피에서, 항체 단량체, 고분자량 종(high molecular weight species, HMW), 및 저분자량 종(low molecular weight species, LMW)의 백분율이 결정된다. 크기 배제 크로마토그래피에서, LMW는 HMW에 비하여 늦게 용출된다. HMW의 존재는 단백질 응집(aggregate)을 나타내고, LMW의 존재는 단백질 단편을 나타낸다.
2. 동적 광 산란(Dynamic light scattering, DLS) 측정법
시료 중 응집체(aggregate)를 동적 광 산란 측정법에 의하여 검사하였다. 구체적으로, 각 시료에 각 버퍼를 사용하여 희석하고, 96-웰 플레이트의 웰에 로딩하였다. 상기 플레이트를 DynoPro® Plate ReaderTM II(Wyatt Technology 사) 기기에 적재하였다. 시료는 25 내지 70℃범위에서 0.15℃/min의 속도로 온도를 올리면서 약제학적 제제 중의 응집체에 대하여 동적 광산란(DLS)을 통하여 그 크기를 측정하였다. 안정성의 평가는 응집체의 크기가 변하는 시점의 온도를 측정하는 것으로서, Tagg 값이 클수록 더 안정하다는 것을 나타낸다.
3. HUNKY(ΔG, AggPath) 측정법
시료 중 응집체(aggregate)를 HUNKY 측정법에 의하여 검사하였다. HUNKY 장치(HUNKY, Unchained Labs.)는 화학적 변성을 통하여 단백질 안정성을 확인할 수 있는 장치로서, 상기 장치는 변성제와 시료를 이용하여 C1/2, ΔG, AggPath, 및 ΔGtrend 값을 확인할 수 있게 한다. C1/2은 안정성의 순위를 매긴다. ΔG는 안정성을 정량한다. AggPath는 응집을 예측한다. ΔGtrend는 응집에 대하여 상세하게 나타낸다.
4. 이미지 모세관 등전 포커싱(Imaging Capillary Isoelectric Focusing, icIEF)
시료의 %산성(Acidic) 값을 icIEF를 이용하여 측정하였다. 구체적으로, 각 시료를 폴리프로필렌 재질의 1.5mL 마이크로튜브(microtube)에 넣고, 상기 튜브를 안정성 항온기에서 40℃의 온도 스트레스 조건에 4주간 노출시켰다. 시료를 iCE3 시스템(Protein Simple, USA)에 주입하고, iCE CFR software를 이용하여 단백질의 전하 변이값을 측정하였다. %산성은 단백질의 전하 변이 값을 나타낸다. 이들을 측정하는 것은 단백질의 전하 변이체(charge variant)를 확인하는 것이다. 스트레스를 받아 단백질이 변화가 있게 되면 응집이 생기거나 전하가 바뀌게 된다. 따라서, 단백질의 전하 변이는 그 안정성을 확인하는 하나의 인자가 될 수 있다.
5. 약제학적 제제의 제조
표 1에 기재된 각 약제학적 제제를 하기와 같이 제조하였고, 이하의 실시예에서 사용하였다.
먼저, 표 1에 기재된 각 약제학적 제제의 조성에서 펨브롤리주맙 및 계면활성제를 제외한 버퍼 및 안정화제를 멸균 증류수에 첨가하여 완충 용액을 제조하였다. 펨브롤리주맙을 투석 카세트(Slide-A-Lyzer cassette, Thermo Fisher Scientific)에 넣은 다음, 표 1에 기재된 각 조성의 용액이 포함된 비커에 넣어 투석이 이루어지게 하여, 기존 펨브롤리주맙의 용액을 상기 완충 용액으로 교환하였다. 마지막으로, 상기 펨브롤리주맙 용액에 상기 제조된 완충 용액 중에 계면활성제 PS80을 1x 농도가 되도록 첨가하였다. 그 후, 각 용액을 이용하여 펨브롤리주맙을 최종 25 mg/mL으로 농도를 맞추었다.
명칭 그룹 제제 조성
1A 1(버퍼 프리) 버퍼 프리, 7% 수크로스, pH 5.5
1B 버퍼 프리, 7% 수크로스, 0.02% PS80, pH 5.5
1C 버퍼 프리, 7% 수크로스, 0.10% PS80, pH 5.5
1D 버퍼 프리, 7% 수크로스, 0.20% PS80, pH 5.5
2A 2(히스티딘 버퍼) 20 mM 히스티딘, 7% 수크로스, pH 5.5
2B 20 mM 히스티딘, 7% 수크로스, 0.02% PS80, pH 5.5
2C 20 mM 히스티딘, 7% 수크로스, 0.10% PS80, pH 5.5
2D 20 mM 히스티딘, 7% 수크로스, 0.20% PS80, pH 5.5
2E 40 mM 히스티딘, 7% 수크로스, pH 5.5
2F 40 mM 히스티딘, 7% 수크로스, 0.02% PS80, pH 5.5
2G 40 mM 히스티딘, 7% 수크로스, 0.10% PS80, pH 5.5
2H 40 mM 히스티딘, 7% 수크로스, 0.20% PS80, pH 5.5
2I 10 mM 히스티딘, 7% 수크로스, 0.02% PS80, pH 5.5
(키트루다 제제)
3A 3(아세트산 버퍼) 10 mM 아세트산, 7% 수크로스, 0.20% PS80, pH 5.5
4A 4(숙신산 버퍼) 10 mM 숙신산, 7% 수크로스, 0.20% PS80, pH 5.5
5A 5(시트르산 버퍼) 10 mM 시트르산, 7% 수크로스, 0.20% PS80, pH 5.5
실시예 1: 버퍼가 펨브롤리주맙 함유 약제학적 제제의 안정성에 미치는 영향
본 실시예에서는 버퍼가 펨브롤리주맙 함유 약제학적 제제의 안정성에 미치는 영향을 확인하였다. 구체적으로, 1A, 2I, 3A, 4A, 및 5A 제제에 대하여 온도 스트레스를 가한 후, 시료의 순도를 측정하였다.
상기 온도 스트레스는, 상기 제제 각각 0.3 mL를 타입I 유리 재질의 2cc 바이 얼에 넣고, 상기 바이얼을 안정성 항온기에서 40℃의 온도 스트레스 조건에 4주간 노출시켰다. 구체적으로, 상기 바이얼을 상기 안정성 항온기 내에 넣고 온도 40±2℃및 상대 습도 75±5%의 조건에서 4주간 두었다. 4주간 보관된 제제에 대하여 상기한 바에 따라 SEC 분석을 수행하였다.
그 결과는 표 2 및 도 1에 표시되어 있다. 표 2는 버퍼를 달리한 제제 및 4주간 온도 스트레스를 받은 제제의 순도를 HMW 함량으로 나타낸 표이다. 도 1은 버퍼를 달 리한 제제에 대하여 4주간 온도 스트레스를 가한 후 제제의 Δ%HMW를 나타낸 도면이다.
명칭 0주 4주
%HMW %HMW Δ%HMW
1B 0.20 0.59 0.39
2I 0.21 0.63 0.42
3A 0.22 0.73 0.51
4A 0.24 0.98 0.74
5A 0.25 1.13 0.88
표 2 및 도 1에 나타낸 바와 같이, 4주에서 버퍼 포함 제제의 평균 Δ%HMW 값과 버퍼를 포함하지 않은 제제의 Δ%HMW 값은 각각 0.64%와 0.39%로서, 버퍼를 포함하지 않은 제제가 버퍼를 포함한 제제에 비하여 더 안정하였다.
실시예 2: 버퍼 및 계면활성제 함량이 펨브롤리주맙 함유 약제학적 제제의 안정성에 미치는 영향
본 실시예에서는 버퍼 및 계면활성제 함량이 펨브롤리주맙 함유 약제학적 제제의 안정성에 미치는 영향을 확인하였다. 구체적으로, 1A, 1B, 1C, 1D, 2A, 2B, 2C, 2D, 2E, 2F, 2G, 및 2H 제제에 대하여 DLS 측정법에 의하여 Tagg 값을 측정하였다.
그 결과는 표 3 및 도 2에 표시되어 있다. 표 3은 버퍼 프리 또는 히스티딘 버퍼 및 계면활성제 PS80 함량이 다른 제제의 조성 및 그에 대한 Tagg 측정값을 나타낸 표이다. 도 2는 버퍼 프리 또는 히스티딘 버퍼 및 계면활성제 함량이 다른 제제에 대 한 Tagg 값을 나타낸 도면이다.
명칭 Tagg (℃)
1A 61.01
1B 61.71
1C 56.06
1D 50.80
2A 62.26
2B 61.97
2C 57.41
2D 53.28
2E 60.99
2F 62.51
2G 59.36
2H 59.35
표 3 및 도 2에 나타낸 바와 같이, 계면활성제 PS80을 포함하지 않거나 0.02% 포함 제제의 Tagg 값은 계면활성제 PS80을 0.10% 또는 0.20% 포함하는 제제의 Tagg 값에 비하여 높았다. 이는 0.10% 미만의 낮은 함량의 PS80을 포함하는 제제 즉, 1A, 1B, 2A, 2B, 2E, 및 2F는 0.10% 이상의 높은 함량의 PS80을 포함하는 제제 즉, 1C, 1D, 2C, 2D, 2G, 및 2H에 비하여 더 높은 온도에서 응집이 발생하는 것을 나타낸다. 즉, 0.10% 미만의 낮은 함량의 PS80을 포함하는 제제는 0.10% 이상의 높은 함량의 PS80을 포함하는 제제에 비하여 더 안정하다는 것을 나타낸다.
한편, 2A, 2B vs 2E, 2F 즉, PS80 농도가 0.10% 미만일 때 히스티딘의 함량은 Tagg 변화에 큰 영향을 미치지 않았다.
또한, 20 mM 히스티딘 버퍼를 포함한 제제 중 PS80를 포함한 제제 즉, 2B, 2C, 및 2D의 Tagg 값에 비하여, PS80을 포함하지 않은 제제 즉, 2A의 Tagg 값이 가장 높았다. 반면, 40 mM 히스티딘 버퍼를 포함한 제제 중 0.02% PS80를 포함한 제제 즉, 2F의 Tagg 값이, 2E, 2G, 및 2H의 Tagg 값 보다 높았다.
실시예 3: 버퍼가 펨브롤리주맙 함유 약제학적 제제의 안정성에 미치는 영향
본 실시예에서는 버퍼 프리 및 20 mM 히스티딘 버퍼가 펨브롤리주맙 함유 약제학적 제제의 안정성에 미치는 영향을 확인하였다. 구체적으로, 1B, 및 2B 제제에 대하여 HUNKY 측정법에 의하여 ΔG 값을 측정하였다.
HUNKY 측정법은 온도 상승에 따른 단백질 응집을 측정하는 DLS 측정법과 달리, 구아니딘-HCl (Guanidine-HCl, Gdn-HCl)을 통한 화학적 스트레스에 대한 안정성을 측 정하는 것이다. HUNKY 측정법은 구체적으로, 0 내지 5.5 M의 Gdn-HCl의 농도 구배 에서 348 nm와 332 nm에서 흡광도 강도 비율 즉, 비(348/332)를 측정한다. 단백질이 변성함에 따라 상기 비율이 증가한다.
그 결과는 표 4 및 도 3에 표시되어 있다. 표 4는 버퍼 프리 및 20 mM 히스티딘 함유 제제의 조성 및 그에 대하여 측정된 ΔG 값을 나타낸 표이다. 도 3은 버퍼 프리 및 20 mM 히스티딘 함유 제제에 대하여 측정된 변성제 농도 변화에 따른 비 율(348/332)을 나타낸 도면이다.
명칭 ΔG1(kcal/mol)
1B 4.26
2B 4.50
표 4 및 도 3에 나타낸 바와 같이, 1B와 2B의 ΔG 값은 동등 수준이었다. 이는 히스티딘 버퍼의 존재가 펨브롤리주맙 함유 약제학적 제제의 안정성에 대한 영향이 크지 않다는 것을 나타낸다.
실시예 4: 버퍼 및 계면활성제 함량이 펨브롤리주맙 함유 약제학적 제제의 안정성에 미치는 영향
본 실시예에서는 버퍼 및 계면활성제 함량이 펨브롤리주맙 함유 약제학적 제제의 안정성에 미치는 영향을 확인하였다. 구체적으로, 1A, 1B, 1C, 1D, 2A, 2B, 2C, 2D, 2E, 2F, 2G, 및 2H 제제에 대하여 온도 스트레스를 가한 후, SEC를 통하여 시료의 순도를 측정하였다.
상기 온도 스트레스는, 상기 제제 각각 0.3 mL를 타입I 유리 재질의 2cc 바이 얼에 넣고, 상기 바이얼을 안정성 항온기에서 40℃의 온도 스트레스 조건에 4주간 노출시켰다. 구체적으로, 상기 바이얼을 상기 안정성 항온기 내에 넣고 온도 40±2℃ 및 상대 습도 75±5%의 조건에서 4주간 두었다. 4주간 보관된 제제에 대하여 상기한 바에 따라 SEC 분석을 수행하였다.
그 결과는 표 5 및 도 4에 표시되어 있다. 표 5는 버퍼 및 PS80 함량을 달리한 제제의 조성 및 4주간 온도 스트레스를 받은 제제의 순도를 HMW 함량으로 나타낸 표이다. 도 4는 버퍼 및 PS80 함량을 달리한 제제에 대하여 4주간 온도 스트레스를 가한 후 제제의 Δ%HMW를 나타낸 도면이다.
명칭 0주 4주
%HMW %HMW Δ%HMW
1A 0.19 0.50 0.31
1B 0.20 0.59 0.39
1C 0.28 0.75 0.47
1D 0.41 0.90 0.49
2A 0.18 0.48 0.30
2B 0.18 0.62 0.44
2C 0.25 0.87 0.62
2D 0.39 1.05 0.66
2E 0.18 0.60 0.42
2F 0.19 0.84 0.65
2G 0.27 1.20 0.93
2H 0.41 1.59 1.18
표 5 및 도 4에 나타낸 바와 같이, 4주에서 20 mM 히스티딘 버퍼 포함 제제의 평균 Δ%HMW 값과 버퍼를 포함하지 않은 제제의 Δ%HMW 값은 각각 0.51%와 0.42%로서, 버퍼를 포함하지 않은 제제가 20 mM 히스티딘 버퍼를 포함한 제제에 비하여 더 안 정하였다. 반면, 40 mM 히스티딘 버퍼 포함 제제의 평균 Δ%HMW 값은 0.80%로서 가장 낮은 안정성을 보였다.
또한, 20 mM 히스티딘 버퍼를 포함한 제제 중 PS80를 포함한 제제 즉, 2B, 2C, 및 2D의 Δ%HMW 값에 비하여, PS80을 포함하지 않은 제제 즉, 2A의 Δ%HMW 값이 가장 낮았다. 또한, 40 mM 히스티딘 버퍼를 포함한 제제 중 PS80를 포함한 제제 즉, 3B, 3C, 및 3D의 Δ%HMW 값에 비하여, PS80을 포함하지 않은 제제 즉, 3A의 Δ%HMW 값이 가장 낮았다. 이는 버퍼 및 PS80을 포함하는 제제에 비하여, 버퍼 및 PS80 프리를 포함하는 제제가 더 안정하다는 것을 나타낸다.
또한, 스트레스 조건에서 4주간 보관된 제제에 대하여 pH를 측정하였다. 표 6은 40℃ 온도 스트레스 조건에서 4주간 방치된 시료에 대하여 pH를 측정한 결과를 나타낸 표이다.
명칭 pH
40℃/0주 40℃/4주
1A 5.50 5.57
1B 5.47 5.60
1C 5.46 5.53
1D 5.49 5.55
2A 5.59 5.55
2B 5.57 5.53
2C 5.58 5.54
2D 5.64 5.52
2E 5.56 5.52
2F 5.54 5.51
2G 5.55 5.50
2H 5.53 5.51
표 6에 나타낸 바와 같이, 20 mM 히스티딘 버퍼, 40 mM 히스티딘 버퍼 군 및 버퍼 프리 제형의 초기 값 대비 40℃/4주 스트레스 조건하에서 pH 변화량은 유의미한 차 이를 보이지 않았다. 버퍼가 포함되지 않은 제형에서 버퍼가 포함된 제형과 마찬가 지로 pH 완충 작용이 진행되고 있음을 확인하였다.
실시예 5: 버퍼 및 pH의 변화가 펨브롤리주맙 함유 약제학적 제제의 안정성에 미치는 영향
본 실시예에서는 버퍼의 유무 및 pH의 변화가 펨브롤리주맙 함유 약제학적 제제의 안정성에 미치는 영향을 확인하였다.
먼저, 표 7에 기재된 각 약제학적 제제를 상기와 동일한 방법으로 제조하였다.
명칭 펨브롤리주맙 버퍼 안정화제 계면활성제 pH
2I 25 mg/ml 10 mM 히스티딘 7% 수크로스 0.02% PS80 5.5
6A 25 mg/ml - 7% 수크로스 0.02% PS80 5.5
6B 25 mg/ml 10 mM 히스티딘 7% 수크로스 0.02% PS80 5.0
6C 25 mg/ml - 7% 수크로스 0.02% PS80 5.0
표 7의 각각의 제제에 대하여 실시예 1과 동일한 방법으로 온도 스트레스를 가한 후 SEC 분석을 수행하여 시료의 순도를 측정하였다.
그 결과는 표 8에 표시되어 있다. 표 8은 버퍼의 유무 및 pH를 달리한 제제의 순도를 HMW 함량으로 나타낸 표이다.
명칭 조성 0주
%HMW
2I 10 mM 히스티딘, 7% 수크로스, 0.02% PS80, pH 5.5 0.34
6A 버퍼 프리, 7% 수크로스, 0.02% PS80, pH 5.5 0.18
6B 10 mM 히스티딘, 7% 수크로스, 0.02% PS80, pH 5.0 0.16
6C 버퍼 프리, 7% 수크로스, 0.02% PS80, pH 5.0 0.14
표 8에 나타낸 바와 같이, 버퍼 프리 제제는 버퍼 포함 제제에 비하여 %HMW 값이 낮았다. 또한, pH 5.0의 제제가 pH 5.5의 제제에 비하여 %HMW 값이 낮았다. 특히, 버퍼를 포함하지 않는 pH 5.0의 제제는 %HMW 값이 가장 낮았다. 따라서, 버퍼 프리 제제는 버퍼 포함 제제에 비하여 더 안정하고, pH 5.0의 제제는 pH 5.5의 제제에 비하여 더 안정하며, 버퍼를 포함하지 않는 pH 5.0의 제제의 안정성이 가장 우수함을 확인하였다.
또한, 표 7의 각각의 제제에 대하여 온도 스트레스를 가한 후 상기한 바에 따라 icIEF를 이용하여 %산성 값을 측정하였다.
그 결과는 표 9에 표시되어 있다. 표 9는 버퍼의 유무 및 pH를 달리한 제제의 %산성 값을 나타낸 표이다.
명칭 온도 스트레스(40℃): icIEF
0주
%산성
2I 23.90
6A 20.51
6B 20.38
6C 20.41
표 9에 나타낸 바와 같이, 버퍼 프리 제제는 버퍼 포함 제제에 비하여 %산성 값이 낮았다. 또한, pH 5.0의 제제가 pH 5.5의 제제에 비하여 %산성 값이 낮았다. 특히, 버퍼를 포함하지 않는 pH 5.0의 제제는 %산성 값이 가장 낮았다. 따라서, 버퍼 프리 제제는 버퍼 포함 제제에 비하여 더 안정하고, pH 5.0의 제제는 pH 5.5의 제제에 비하여 더 안정하며, 버퍼를 포함하지 않는 pH 5.0의 제제의 안정성이 가장 우수함을 확인하였다.
실시예 6: 안정화제의 확장
본 실시예에서는 안정화제의 종류 변경 및 항산화제의 첨가가 펨브롤리주맙 함유 약제학적 제제의 안정성에 미치는 영향을 확인하였다.
먼저, 표 10에 기재된 각 약제학적 제제를 상기와 동일한 방법으로 제조하였다.
명칭 펨브롤리주맙 버퍼 안정화제 계면활성제 항산화제 pH
7A 25 mg/ml - 7% 수크로스 3.3 mM Arg 0.02% PS80 5.0 mM Met 5.0
7B 25 mg/ml - 4% 소르비톨 3.3 mM Arg 0.02% PS80 5.0 mM Met 5.0
7C 25 mg/ml - 7.6% 트레할로스 3.3 mM Arg 0.02% PS80 5.0 mM Met 5.0
6A 25 mg/ml 10 mM 히스티딘 7% 수크로스 - 0.02% PS80 - 5.5
표 10의 각각의 제제에 대하여 실시예 1과 동일한 방법으로 온도 스트레스를 가한 후 SEC 분석을 수행하여 시료의 순도를 측정하였다.
그 결과는 표 11에 표시되어 있다. 표 11은 안정화제의 종류를 달리하고 항산화제를 첨가한 제제의 순도를 HMW 함량으로 나타낸 표이다.
명칭 0주 1주 2주
%HMW %HMW Δ%HMW %HMW Δ%HMW
7A 0.32 ND ND 0.64 0.32
7B 0.17 0.43 0.26 0.55 0.38
7C 0.19 0.40 0.21 0.54 0.35
6A 0.36 ND ND 0.76 0.40
* ND: 측정하지 않음(not determined).
표 11에 나타낸 바와 같이, 버퍼를 포함하지 않고 항산화제를 첨가하고 pH 5.0을 갖는 제제 즉, 7A, 7B, 및 7C는 버퍼를 포함하고 항산화제를 포함하지 않고 pH 5.5를 갖는 제제 즉, 6A에 비하여 Δ%HMW 값이 낮았다. 즉, 버퍼를 포함하지 않고 항산화제를 첨가하고 pH 5.0을 갖는 제제는 버퍼를 포함하고 항산화제를 포함하지 않고 pH 5.5를 갖는 제제에 비하여 더 안정하였다. 또한, 버퍼를 포함하지 않고 항산화제를 첨가하고 pH 5.0을 갖는 제제는 안정화의 종류를 수크로스, 소르비톨, 트레할로스, 아르기닌, 또는 이의 조합과 같이 다양하게 변경하여도 우수한 안정성을 나타내었다.
또한, 표 10의 각각의 제제에 대하여 온도 스트레스를 가한 후 상기한 바에 따라 icIEF를 이용하여 %산성 값을 측정하였다.
그 결과는 표 12에 표시되어 있다. 표 12는 안정화제의 종류를 달리하고 항산화제를 첨가한 제제의 %산성 값을 나타낸 표이다.
명칭 온도 스트레스(40℃): icIEF
0주 1주 2주 4주
%산성 %산성 Δ%산성 %산성 Δ%산성 %산성 Δ%산성
7A 22.48 ND ND 24.58 2.10 29.42 6.95
7B 20.57 21.95 1.38 24.08 3.51 ND ND
7C 20.97 21.95 0.98 24.05 3.08 ND ND
6A 22.34 ND ND 24.92 2.58 30.78 8.44
* ND: 측정하지 않음(not determined).
표 12에 나타낸 바와 같이, 버퍼를 포함하지 않고 항산화제를 첨가하고 pH 5.0을 갖는 제제 즉, 7A, 7B, 및 7C는 버퍼를 포함하고 항산화제를 포함하지 않고 pH 5.5을 갖는 제제 즉, 6A에 비하여 %산성 변화가 유사 또는 낮았다. 특히, 7A는 Δ%산성 값이 가장 낮았으므로, 가장 우수한 안정성을 나타내었다.
실시예 7: 버퍼 종류가 펨브롤리주맙 함유 약제학적 제제의 안정성에 미치는 영향
본 실시예에서는 버퍼 종류가 펨브롤리주맙 함유 약제학적 제제의 안정성에 미치는 영향을 확인하였다.
먼저, 표 13에 기재된 각 약제학적 제제를 상기와 동일한 방법으로 제조하였다.
명칭 펨브롤리주맙 버퍼 안정화제 계면활성제 pH
8A 25 mg/ml 10 mM 아세테이트 128 mM Arg-HCl 0.02% PS80 5.5
8B 25 mg/ml 10 mM 아세테이트 0.7% NaCl 0.02% PS80 5.5
8C 25 mg/ml 10 mM 히스티딘 128 mM Arg-HCl 0.02% PS80 5.5
8D 25 mg/ml 10 mM 히스티딘 0.7% NaCl 0.02% PS80 5.5
8E 25 mg/ml 10 mM 시트레이트 128 mM Arg-HCl 0.02% PS80 5.5
8F 25 mg/ml 10 mM 시트레이트 0.7% NaCl 0.02% PS80 5.5
8G 25 mg/ml 10 mM 숙시네이트 128 mM Arg-HCl 0.02% PS80 5.5
8H 25 mg/ml 10 mM 숙시네이트 0.7% NaCl 0.02% PS80 5.5
표 13의 각각의 제제에 대하여 실시예 1과 동일한 방법으로 온도 스트레스를 가한 후 SEC 분석을 수행하여 시료의 순도를 측정하였다.
그 결과는 표 14에 표시되어 있다. 표 14는 버퍼의 종류를 달리한 제제의 순도를 HMW 함량으로 나타낸 표이다.
명칭 0주 1주 2주 4주
%HMW %HMW Δ%HMW %HMW Δ%HMW %HMW Δ%HMW
8A 0.25 0.85 0.60 1.23 0.98 1.90 1.65
8B 0.27 0.90 0.63 1.27 1.00 1.93 1.66
8C 0.25 0.90 0.65 1.32 1.07 2.02 1.77
8D 0.26 0.83 0.57 1.21 0.95 1.86 1.60
8E 0.24 0.75 0.51 1.07 0.83 1.71 1.47
8F 0.28 0.82 0.54 1.11 0.83 1.65 1.37
8G 0.26 0.73 0.47 1.05 0.79 1.76 1.50
8H 0.28 0.77 0.49 1.10 0.82 1.71 1.43
표 14에 나타낸 바와 같이, 히스티딘을 포함하는 제제 즉, 8C 및 8D는 다른 버퍼를 포함하는 제제에 비하여 Δ%HMW 값이 높았다. 따라서, 버퍼로서 히스티딘을 포함하는 제제는 다른 종류의 버퍼를 포함하는 제제에 비하여 안정성이 낮음을 확인하였다.
실시예 8: 고농도 펨브롤리주맙 함유 약제학적 제제의 안정성
본 실시예에서는 고농도의 펨브롤리주맙을 함유하는 약제학적 제제의 안정성을 확인하였다.
먼저, 표 15에 기재된 각 약제학적 제제를 상기와 동일한 방법으로 제조하였다.
명칭 펨브롤리주맙 버퍼 안정화제 계면활성제 항산화제 pH
9A 150 mg/ml - 7% 수크로스 10 mM Arg 50 mM Lys 0.02% PS80 30 mM Met 5.5
9B 150 mg/ml - 1% 수크로스 50 mM Arg 50 mM Lys 0.02% PS80 30 mM Met 5.5
9C 150 mg/ml - 7% 수크로스 50 mM Arg - 0.02% PS80 30 mM Met 5.5
9D 150 mg/ml - 7% 수크로스 20 mM Arg - 0.02% PS80 30 mM Met 5.0
9E 150 mg/ml - - 20 mM Arg - 0.02% PS80 - 5.0
9F 150 mg/ml - 5% 수크로스 60 mM Arg - 0.02% PS80 30 mM Met 5.0
9G 150 mg/ml - 7% 수크로스 30 mM Pro - 0.02% PS80 30 mM Met 5.0
9H 150 mg/ml - 7% 수크로스 20 mM Lys - 0.02% PS80 30 mM Met 5.0
9I 150 mg/ml - 7% 수크로스 20 mM Arg - 0.02% PS80 30 mM Met 5.0
9J 150 mg/ml - 7% 수크로스 20 mM Lys - 0.02% PS80 30 mM Met 5.0
9K 150 mg/ml 10 mM 히스티딘 7% 수크로스 - - 0.02% PS80 - 5.5
표 15의 제제 중 9A 내지 9D 및 9K에 대하여 실시예 1과 동일한 방법으로 온도 스트레스를 가한 후 SEC 분석을 수행하여 시료의 순도를 측정하였다. 그 결과는 표 16에 표시되어 있다.
명칭 0주 1주 2주
%HMW %HMW Δ%HMW %HMW Δ%HMW
9A 0.50 1.35 0.85 1.70 1.20
9B 0.44 1.58 1.14 2.03 1.59
9C 0.49 1.35 0.86 1.70 1.21
9D 0.43 1.63 1.20 2.13 1.70
9K 0.64 ND ND 2.35 1.71
* ND: 측정하지 않음(not determined).
표 16에 나타낸 바와 같이, 150 mg/ml의 고농도 펨브롤리주맙을 포함하되 버퍼를 포함하지 않는 제제 9A 내지 9D는 버퍼를 포함하는 제제 9K보다 우수한 안정성을 나타내었다.
또한, 표 15의 각각의 제제에 대하여 온도 스트레스를 가한 후 상기한 바에 따라 icIEF를 이용하여 %산성 값을 측정하였다. 그 결과는 표 17에 표시되어 있다.
명칭 온도 스트레스(40℃): icIEF
0주 1주 2주 4주
%산성 %산성 Δ%산성 %산성 Δ%산성 %산성 Δ%산성
9A 20.74 21.93 1.19 23.84 3.10 ND ND
9B 20.72 21.87 1.15 23.68 2.96 ND ND
9C 20.42 21.76 1.34 23.61 3.19 ND ND
9D 20.96 22.05 1.09 24.29 3.33 ND ND
9E 22.86 23.34 0.48 24.89 2.03 28.86 6.00
9F 22.44 23.26 0.82 25.00 2.56 28.41 5.97
9G 22.80 23.86 1.06 25.64 2.84 29.99 7.19
9H 22.92 23.34 0.42 25.16 2.24 28.00 5.08
9I 20.02 21.52 1.50 24.19 4.17 28.86 8.84
9J 20.21 20.55 0.34 23.83 3.62 28.86 8.65
9K 24.6 ND ND 28.9 4.3 36.69 12.09
* ND: 측정하지 않음(not determined).
표 17에 나타낸 바와 같이, 150 mg/ml의 고농도 펨브롤리주맙을 포함하되 버퍼를 포함하지 않는 제제 9A 내지 9J는 버퍼를 포함하는 제제 9K보다 우수한 안정성을 나타내었다.
또한, 표 18에 기재된 각 약제학적 제제를 상기와 동일한 방법으로 제조하였다.
명칭 펨브롤리주맙 버퍼 안정화제 계면활성제 항산화제 pH
10A 200 mg/ml - 5% 수크로스 80 mM Arg - 0.02% PS80 30 mM Met 5.0
10B 200 mg/ml - 7% 수크로스 40 mM Lys - 0.02% PS80 30 mM Met 5.0
10C 200 mg/ml - 7% 수크로스 26.4 mM Arg - 0.02% PS80 40 mM Met 5.0
10D 200 mg/ml - 7% 수크로스 13.2mM Arg 13.2 mM Lys 0.02% PS80 40 mM Met 5.0
10E 200 mg/ml - 4% 소르비톨 13.2mM Arg 13.2 mM Lys 0.02% PS80 40 mM Met 5.0
10F 250 mg/ml - 7% 수크로스 33.3 mM Arg -　 0.02% PS80 50 mM Met 5.0
10G 250 mg/ml - 7% 수크로스 33.3 mM Lys - 0.02% PS80 50 mM Met 5.0
10H 250 mg/ml - 7% 수크로스 16.7 mM Arg 16.7 mM Lys 0.02% PS80 50 mM Met 5.0
10I 250 mg/ml - 4% 소르비톨 16.7 mM Arg 16.7 mM Lys 0.02% PS80 50 mM Met 5.0
표 18의 각각의 제제에 대하여 온도 스트레스를 가한 후 상기한 바에 따라 icIEF를 이용하여 %산성 값을 측정하였다. 그 결과는 표 19에 표시되어 있다.
명칭 0주 4주
%산성 %산성 Δ%산성
10A 22.19 28.73 6.54
10B 22.66 28.86 6.20
10C 19.72 28.86 9.14
10D 19.41 28.86 9.45
10E 20.01 28.86 8.85
10F 19.76 28.86 9.10
10G 19.56 28.86 9.30
10H 19.76 28.86 9.10
10I 19.92 28.86 8.94
표 19에 나타낸 바와 같이, 200 mg/ml 또는 250 mg/ml의 고농도 펨브롤리주맙을 포함하되 버퍼를 포함하지 않는 제제 10A 내지 10I는 버퍼를 포함하는 제제 9K보다 우수한 안정성을 나타내었다.
SEQUENCE LISTING <110> SAMSUNG BIOEPIS CO., LTD. <120> Stable anti-PD1 antibody liquid pharmaceutical formulations <130> PX063088 <150> KR 10-2019-0167147 <151> 2019-12-13 <160> 8 <170> PatentIn version 3.2 <210> 1 <211> 5 <212> PRT <213> Artificial <220> <223> heavy chain variable CDR1 <400> 1 Asn Tyr Tyr Met Tyr 1 5 <210> 2 <211> 17 <212> PRT <213> Artificial <220> <223> heavy chain variable CDR2 <400> 2 Gly Ile Asn Pro Ser Asn Gly Gly Thr Asn Phe Asn Glu Lys Phe Lys 1 5 10 15 Asn <210> 3 <211> 11 <212> PRT <213> Artificial <220> <223> heavy chain variable CDR3 <400> 3 Arg Asp Tyr Arg Phe Asp Met Gly Phe Asp Tyr 1 5 10 <210> 4 <211> 15 <212> PRT <213> Artificial <220> <223> light chain variable CDR1 <400> 4 Arg Ala Ser Lys Gly Val Ser Thr Ser Gly Tyr Ser Tyr Leu His 1 5 10 15 <210> 5 <211> 7 <212> PRT <213> Artificial <220> <223> light chain variable CDR2 <400> 5 Leu Ala Ser Tyr Leu Glu Ser 1 5 <210> 6 <211> 9 <212> PRT <213> Artificial <220> <223> light chain variable CDR3 <400> 6 Gln His Ser Arg Asp Leu Pro Leu Thr 1 5 <210> 7 <211> 446 <212> PRT <213> Artificial <220> <223> heavy chain variable region <400> 7 Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Val Glu Val Lys Lys Pro Gly Ala Ser 1 5 10 15 Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Asn Tyr Tyr 20 25 30 Met Tyr Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Met Gly 35 40 45 Gly Ile Asn Pro Ser Asn Gly Gly Thr Asn Phe Asn Glu Lys Phe Lys 50 55 60 Asn Arg Val Thr Leu Thr Thr Asp Ser Ser Thr Thr Thr Ala Tyr Met 65 70 75 80 Glu Leu Lys Ser Leu Gln Phe Asp Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Ala 85 90 95 Arg Arg Asp Tyr Arg Phe Asp Met Gly Phe Asp Tyr Trp Gly Gln Gly 100 105 110 Thr Thr Val Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe 115 120 125 Pro Leu Ala Pro Cys Ser Arg Ser Thr Ser Glu Ser Thr Ala Ala Leu 130 135 140 Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp 145 150 155 160 Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu 165 170 175 Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser 180 185 190 Ser Ser Leu Gly Thr Lys Thr Tyr Thr Cys Asn Val Asp His Lys Pro 195 200 205 Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys Arg Val Glu Ser Lys Tyr Gly Pro Pro 210 215 220 Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Phe Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe 225 230 235 240 Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro 245 250 255 Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser Gln Glu Asp Pro Glu Val 260 265 270 Gln Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr 275 280 285 Lys Pro Arg Glu Glu Gln Phe Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val 290 295 300 Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys 305 310 315 320 Lys Val Ser Asn Lys Gly Leu Pro Ser Ser Ile Glu Lys Thr Ile Ser 325 330 335 Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro 340 345 350 Ser Gln Glu Glu Met Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val 355 360 365 Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly 370 375 380 Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp 385 390 395 400 Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Arg Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp 405 410 415 Gln Glu Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His 420 425 430 Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Leu Gly Lys 435 440 445 <210> 8 <211> 218 <212> PRT <213> Artificial <220> <223> light chain variable region <400> 8 Glu Ile Val Leu Thr Gln Ser Pro Ala Thr Leu Ser Leu Ser Pro Gly 1 5 10 15 Glu Arg Ala Thr Leu Ser Cys Arg Ala Ser Lys Gly Val Ser Thr Ser 20 25 30 Gly Tyr Ser Tyr Leu His Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Ala Pro 35 40 45 Arg Leu Leu Ile Tyr Leu Ala Ser Tyr Leu Glu Ser Gly Val Pro Ala 50 55 60 Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser 65 70 75 80 Ser Leu Glu Pro Glu Asp Phe Ala Val Tyr Tyr Cys Gln His Ser Arg 85 90 95 Asp Leu Pro Leu Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys Arg 100 105 110 Thr Val Ala Ala Pro Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro Ser Asp Glu Gln 115 120 125 Leu Lys Ser Gly Thr Ala Ser Val Val Cys Leu Leu Asn Asn Phe Tyr 130 135 140 Pro Arg Glu Ala Lys Val Gln Trp Lys Val Asp Asn Ala Leu Gln Ser 145 150 155 160 Gly Asn Ser Gln Glu Ser Val Thr Glu Gln Asp Ser Lys Asp Ser Thr 165 170 175 Tyr Ser Leu Ser Ser Thr Leu Thr Leu Ser Lys Ala Asp Tyr Glu Lys 180 185 190 His Lys Val Tyr Ala Cys Glu Val Thr His Gln Gly Leu Ser Ser Pro 195 200 205 Val Thr Lys Ser Phe Asn Arg Gly Glu Cys 210 215

Claims (19)

  1. (a) 항-PD-1 항체 또는 이의 항원 결합 단편; 및
    (b) 안정화제를 포함하고,
    버퍼를 포함하지 않고, 약 pH 4.5 내지 약 pH 6.5를 갖는 안정한 항-PD-1 항체 약제학적 제제.
  2. 청구항 1에 있어서, 상기 제제는 약 pH 5.0 내지 약 pH 5.5를 갖는 것인 약제학적 제제.
  3. 청구항 1에 있어서, 상기 항-PD-1 항체는 서열번호 1의 아미노산 서열을 갖는 중쇄 CDR1, 서열번호 2의 아미노산 서열을 갖는 중쇄 CDR2, 및 서열번호 3의 아미노산 서열을 갖는 중쇄 CDR3; 및 서열번호 4의 아미노산 서열을 갖는 경쇄 CDR1, 서열번호 5의 아미노산 서열을 갖는 경쇄 CDR2, 및 서열번호 6의 아미노산 서열을 갖는 경쇄 CDR3을 포함하는 것인 약제학적 제제.
  4. 청구항 1에 있어서, 상기 항-PD-1 항체는 펨브롤리주맙인 것인 약제학적 제제.
  5. 청구항 1에 있어서, 상기 항-PD-1 항체 또는 이의 항원 결합 단편의 농도는 약 5 내지 약 200 mg/ml인 것인 약제학적 제제.
  6. 청구항 1에 있어서, 상기 안정화제는 폴리올, 아미노산 또는 이의 약제학적으로 허용가능한 염, 또는 이들의 혼합물인 것인 약제학적 제제.
  7. 청구항 6에 있어서, 상기 폴리올은 소르비톨, 수크로스, 트레할로스, 만노스, 말토스, 만니톨, 또는 이들의 혼합물인 것인 약제학적 제제.
  8. 청구항 6에 있어서, 상기 아미노산은 글리신, 프롤린, 페닐알라닌, 티로신, 트립토판, 라이신, 아르기닌, 이의 약제학적으로 허용가능한 염, 또는 이의 혼합물 인 것인 약제학적 제제.
  9. 청구항 1에 있어서, 상기 안정화제는 약 1.0 내지 약 15.0%(w/v)의 당, 약 1.0 내지 약 20.0%(w/v)의 당 알코올, 약 0.1 내지 약 300.0 mM의 아미노산, 또는 약 1.0 내지 약 300.0 mM의 금속염인 것인 약제학적 제제.
  10. 청구항 1에 있어서, 상기 안정화제는 약 1.0 내지 약 15.0%(w/v)의 당 및 약 0.1 내지 약 300.0 mM의 아미노산인 것인 약제학적 제제.
  11. 청구항 1에 있어서, 상기 버퍼는 히스티딘, 인산, 구연산, 말레인산, 타르타르산, 숙신산, 시트르산, 아세트산, 탄산, 이의 약제학적으로 허용가능한 염, 또는 이들의 혼합물인 것인 약제학적 제제.
  12. 청구항 1에 있어서, 계면활성제를 포함하지 않는 것, 또는 계면활성제를 더 포함하는 것인 약제학적 제제.
  13. 청구항 12에 있어서, 상기 계면활성제는 폴리소르베이트, 폴록사머, 다른 지방산의 소르비탄 에스테르 또는 이들의 혼합물인 것인 약제학적 제제.
  14. 청구항 1에 있어서, 항산화제를 더 포함하는 것인 약제학적 제제.
  15. 청구항 14에 있어서, 상기 항산화제는 메티오닌인 것인 약제학적 제제.
  16. 청구항 1에 있어서, 상기 약제학적 제제는 피하 주사 또는 정맥 주사용인 것 인 약제학적 제제.
  17. 청구항 1에 있어서,
    상기 항-PD-1 항체 또는 이의 항원 결합 단편의 농도는 약 5 내지 약 200 mg/mL이고,
    상기 안정화제는 약 1.0 내지 약 15.0%(w/v)의 수크로스, 트레할로스, 이의 수화물, 또는 이의 혼합물; 약 1.0 내지 약 20.0 %(w/v)의 소르비톨, 만니톨, 이의 수화물, 또는 이의 혼합물; 약 0.1 내지 약 300.0 mM의 아르기닌, 라이신, 프롤린, 글리신, 페닐알라닌, 티로신, 트립토판, 이의 약제학적으로 허용가능한 염, 또는 이의 혼합물; 또는 이들의 2종 이상의 혼합물인 것인 약제학적 제제.
  18. 암을 치료하기에 효과적인 양의 청구항 1에 따른 약제학적 제제를 개체에 투 여하는 단계를 포함하는 개체에서 암을 치료하는 방법.
  19. 용매에 안정화제를 첨가하여 혼합 용액을 제조하는 단계; 및
    상기 혼합 용액에 펨브롤리주맙 또는 이의 항원 결합 단편을 첨가하는 단계; 또는
    용매에 펨브롤리주맙 또는 이의 항원 결합 단편을 첨가하여 펨브롤리주맙 또는 이의 항원 결합 단편 용액을 제조하는 단계; 및
    상기 용액에 안정화제를 첨가하는 단계;를 포함하는 안정한 약제학적 제제를 제조하는 방법으로서, 상기 제조 단계는 버퍼를 첨가하지 않고 수행되는 것인 방법.
KR1020227023258A 2019-12-13 2020-12-14 안정한 항-pd-1 항체 약제학적 제제 KR20220115803A (ko)

Applications Claiming Priority (3)

Application Number Priority Date Filing Date Title
KR20190167147 2019-12-13
KR1020190167147 2019-12-13
PCT/KR2020/018247 WO2021118321A1 (ko) 2019-12-13 2020-12-14 안정한 항-pd-1 항체 약제학적 제제

Publications (1)

Publication Number Publication Date
KR20220115803A true KR20220115803A (ko) 2022-08-18

Family

ID=76330229

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
KR1020227023258A KR20220115803A (ko) 2019-12-13 2020-12-14 안정한 항-pd-1 항체 약제학적 제제

Country Status (7)

Country Link
US (1) US20230054413A1 (ko)
EP (1) EP4074338A4 (ko)
JP (1) JP2023506629A (ko)
KR (1) KR20220115803A (ko)
AU (1) AU2020402369A1 (ko)
TW (1) TW202138006A (ko)
WO (1) WO2021118321A1 (ko)

Families Citing this family (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
KR20210097882A (ko) * 2020-01-30 2021-08-10 삼성바이오에피스 주식회사 안정한 항-pd-1 항체 약제학적 제제
KR20240024941A (ko) 2021-06-23 2024-02-26 포르미콘 아게 항-pd1 항체의 제제
WO2024006981A1 (en) * 2022-07-01 2024-01-04 Amgen Inc. Anti-pd-1 antibody formulations
WO2024133625A1 (en) * 2022-12-21 2024-06-27 Formycon Ag Formulations of anti-pd1 antibodies

Family Cites Families (7)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
NZ600758A (en) 2007-06-18 2013-09-27 Merck Sharp & Dohme Antibodies to human programmed death receptor pd-1
AU2016249395B2 (en) * 2015-04-17 2022-04-07 Bristol-Myers Squibb Company Compositions comprising a combination of an anti-PD-1 antibody and another antibody
PT3322731T (pt) * 2015-07-14 2021-02-25 Bristol Myers Squibb Co Método de tratamento de cancro utilizando inibidor de ponto de verificação (checkpoint) imunitário; anticorpo que se liga ao recetor de morte programada-1 (pd-1) ou ligando de morte programada 1 (pd-l1)
MX2018006875A (es) * 2015-12-07 2018-11-09 Merck Patent Gmbh Formulacion farmaceutica acuosa que comprende el anticuerpo anti receptor de muerte programada l1 (pd-l1) avelumab.
CN117442719A (zh) * 2017-02-21 2024-01-26 瑞泽恩制药公司 用于治疗肺癌的抗pd-1抗体
JOP20190260A1 (ar) * 2017-05-02 2019-10-31 Merck Sharp & Dohme صيغ ثابتة لأجسام مضادة لمستقبل الموت المبرمج 1 (pd-1) وطرق استخدامها
CN109971724B (zh) * 2017-12-28 2023-10-31 上海细胞治疗研究院 靶向ErbB受体家族且自表达PD-1抗体的CAR-T细胞及其用途

Also Published As

Publication number Publication date
US20230054413A1 (en) 2023-02-23
WO2021118321A1 (ko) 2021-06-17
EP4074338A1 (en) 2022-10-19
EP4074338A4 (en) 2024-03-06
TW202138006A (zh) 2021-10-16
JP2023506629A (ja) 2023-02-17
AU2020402369A1 (en) 2022-07-14

Similar Documents

Publication Publication Date Title
KR20220115803A (ko) 안정한 항-pd-1 항체 약제학적 제제
JP6925337B2 (ja) 抗ｐｄ−ｌ１抗体アベルマブを含む水性医薬製剤
EP3024484B1 (en) Stabilized antibody compositions
US7790679B2 (en) Pharmaceutical formulations
US20080166346A1 (en) Lyophilised Preparation Comprising Antibodies Against The EFG Receptor
JP7503056B6 (ja) 抗ｌａｇ３抗体および抗ｐｄ－１抗体の共－製剤
WO2011080209A2 (en) Novel antibody formulation
CN101668540A (zh) 稳定的抗体制剂
KR20220036998A (ko) 항 cd47/pd-l1 이중특이성 항체를 포함하는 제제, 이의 제조 방법 및 용도
CN118356487A (zh) Csf-1r抗体制剂
CN111683681B (zh) 包含抗ox40抗体的制剂、其制备方法及其用途
EP4098277A1 (en) Stable anti-pd-1 antibody pharmaceutical preparation
WO2021023267A1 (zh) 包含抗pd-1/her2双特异性抗体的制剂及其制备方法和用途
WO2024140651A1 (zh) 包含抗tigit抗体的药物制剂
CN114007648B (zh) 包含抗lag-3抗体的制剂、其制备方法及其用途
WO2024008032A1 (en) Formulations for anti-pd-l1/anti-4-1bb bispecific antibodies
WO2024006981A1 (en) Anti-pd-1 antibody formulations
CN117835965A (zh) 派姆单抗的药物组合物及其用途