KR20210126652A

KR20210126652A - Tno155 및 pd-1 억제제를 포함하는 약제학적 조합물

Info

Publication number: KR20210126652A
Application number: KR1020217028653A
Authority: KR
Inventors: 잉-난 판 천; 화이시앙 하오; 천 리우; 모바리드 모세니; 윌리엄 디. 해스팅스; 실비아 골도니
Original assignee: 노파르티스 아게
Priority date: 2019-02-12
Filing date: 2020-02-10
Publication date: 2021-10-20
Also published as: CA3129031A1; AU2020222295A1; CN113395967A; BR112021015487A2; IL284837A; AU2020222295B2; EP3923940A1; CL2021002100A1; MX2021009562A; JP2022519385A; US20220160706A1; WO2020165733A1; TW202045172A

Abstract

본 발명은 TNO155와 PD-1 억제제를 포함하는 약제학적 조합물; 이를 포함하는 약제학적 조성물; 및 PD-1 억제와 조합된 SHP2 억제제가 유익한 병태의 치료 또는 예방, 예를 들어 암의 치료에 있어서 이러한 조합물 및 조성물을 사용하는 방법에 관한 것이다.

Description

TNO155 및 PD-1 억제제를 포함하는 약제학적 조합물

서열 목록

본 출원에는 ASCII 형식으로 전자 제출되었고 그 전체가 본원에 참조로 포함되는 서열 목록이 포함된다. 2020년 1월 17일에 생성된 상기 ASCII 사본의 파일명은 PAT058373-WO-PCT_SL.txt이고 크기는 40,129 바이트이다.

기술분야

본 발명은 TNO155와 PD-1 억제제를 포함하는 약제학적 조합물; 이를 포함하는 약제학적 조성물; 및 PD-1 억제와 조합된 SHP2 억제가 유익한 병태의 치료 또는 예방, 예를 들어 암의 치료에 있어서 이러한 조합물 및 조성물을 사용하는 방법에 관한 것이다.

TNO155는 활성화된 수용체 티로신 키나제(RTK)로부터 미토겐-활성화 단백질 키나제(MAPK) 경로를 포함한 하류 경로로의 신호를 변환하는 Src 상동성-2 도메인 함유 단백질 티로신 포스파타제-2(SHP2, PTPN11 유전자에 의해 암호화됨)의 경구 생체이용 가능한 알로스테릭 억제제이다. SHP2는 또는 면역 체크포인트 및 사이토카인 수용체 신호전달과 관련이 있었다. TNO155는 광범위한 RTK-의존성 인간 암세포주 및 생체내 종양 이종이식편에서 효능이 입증되었다.

예정사-1(PD-1) 단백질은 T세포 조절인자의 확장된 CD28/CTLA-4 패밀리의 억제성 구성원이다. PD-1에 대한 2개의 리간드인 PD-L1(B7-H1) 및 PD-L2(B7-DC)가 확인되었고, 이들은 PD-1에 결합시 T세포 활성화를 하향조절하는 것으로 밝혀졌다. PD-L1은 다양한 인간 암에 풍부하다.

PD-1은 TCR 신호를 음성적으로 조절하는 면역억제 단백질로 알려져 있다. PD-1과 PD-L1 사이의 상호작용은 예를 들어 종양 침윤 림프구의 감소, T세포 수용체 매개 증식의 감소, 및/또는 암세포에 의한 면역 회피를 유발할 수 있는 면역 체크포인트로서 작용할 수 있다. 면역 억제는 PD-1과 PD-L1 또는 PD-L2의 국소 상호작용을 억제함으로써 역전될 수 있으며, 그 효과는 PD-1과 PD-L2의 상호작용도 차단되면 상가적이다.

면역 반응을 조절하는 데 있어서 면역 체크포인트 경로의 중요성을 감안할 때, 면역 체계를 활성화하는 신규 병용 요법의 개발이 필요하다.

본 발명은

(a) 하기 구조를 갖는 (3S,4S)-8-(6-아미노-5-((2-아미노-3-클로로피리딘-4-일)티오)피라진-2-일)-3-메틸-2-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸-4-아민(TNO155) 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염:

; 및

(b) PD-1 억제제를 포함하는 약제학적 조합물을 제공한다.

추가 구현예에서, PD-1 억제제는 PDR001(스파탈리주맙; Novartis), 니볼루맙(Bristol-Myers Squibb), 펨브롤리주맙(Merck & Co), 피딜리주맙(CureTech), MEDI0680(Medimmune), REGN2810(Regeneron), TSR-042(Tesaro), PF-06801591(Pfizer), BGB-A317(Beigene), BGB-108(Beigene), INCSHR1210(Incyte), 또는 AMP-224(Amplimmune)로부터 선택된다.

추가 구현예에서, PD-1 억제제는 PDR001(스파탈리주맙)이다.

추가 구현예에서, PD-1 억제제는 약 300~400 mg의 용량으로 투여된다.

추가 구현예에서, PD-1 억제제는 3주마다 1회 또는 4주마다 1회 투여된다.

다른 구현예에서, PD-1 억제제는 약 300 mg의 용량으로 3주마다 1회 투여된다.

다른 구현예에서, PD-1 억제제는 약 400 mg의 용량으로 4주마다 1회 투여된다.

추가 구현예에서,

; 및

(b) PDR001(스파탈리주맙)을 포함하는 약제학적 조합물이 제공된다.

TNO155 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염과 PD-1 억제제의 조합물은 본원에서 "본 발명의 조합물"로도 지칭될 것이다.

본 발명의 조합물의 다른 구현예에서, TNO155 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염 및 PD-1 억제제는 개별 제형으로 존재한다.

다른 구현예에서, 본 발명의 조합물은 동시 투여 또는 (임의의 순서의) 순차적 투여를 위한 것이다.

다른 구현예에서, 암의 치료 또는 예방을 필요로 하는 대상체에서 암을 치료 또는 예방하는 방법으로서, 본 발명의 조합물의 치료 유효량을 대상체에게 투여하는 단계를 포함하는 방법이 제공된다.

상기 방법의 추가 구현예에서, 암은 식도 또는 두경부 편평세포 암종; 대장암, 난소암, 췌장암, 또는 비소세포 폐암; 및 신세포 암종으로부터 선택된다.

상기 방법의 추가 구현예에서, 암은 대장암이다.

상기 방법의 추가 구현예에서, 암은 비소세포 폐암이다.

상기 방법의 추가 구현예에서, 암은 두경부 편평세포 암종이다.

추가 구현예에서, 본 발명의 조합물은 식도 또는 두경부 편평세포 암종; 대장암, 난소암, 췌장암, 또는 비소세포 폐암; 및 신세포 암종으로부터 선택되는 암의 치료를 위한 의약의 제조에 있어서의 용도를 제공한다.

다른 구현예에서, 본 발명의 조합물을 포함하는 약제학적 조성물이 제공된다.

추가 구현예에서, 약제학적 조성물은 본원에 기재된 바와 같은 약제학적으로 허용되는 하나 이상의 부형제를 추가로 포함한다.

도 1: 동계 면역능력이 있는 마우스 이종이식 모델에서 단일 제제로서의 TNO155 및 마우스 항-PD1 항체와 조합된 TNO155의 항종양 활성
도 2: TNO155 및 TNO155와 마우스 항-PD1 항체의 조합을 이용한 처치 7일 후 MC38 이종이식 종양의 유세포 분석에 의한 면역표현형
도 3: M-CSF 자극 CD14+ 단핵구 증식은 TNO155에 의해 차단되었다.

정의

상기 및 하기에서 사용되는 일반 용어는 달리 명시하지 않는 한, 바람직하게는 본 발명의 맥락 내에서 다음의 의미를 가지며, 여기서 사용된 보다 일반적인 용어는 서로 독립적으로 보다 구체적인 정의로 대체되거나 유지되어 본 발명의 보다 상세한 구현예를 정의할 수 있다.

본원에서 사용되는 용어 "대상체" 또는 "환자"는 암 또는 암과 직간접적으로 관련된 임의의 장애를 앓거나 이로 고통받을 수 있는 동물을 포함하는 것으로 의도된다. 대상체의 예는 포유동물, 예를 들어 인간, 유인원, 원숭이, 개, 소, 말, 돼지, 양, 염소, 고양이, 마우스, 토끼, 래트, 및 유전자이식 비인간 동물을 포함한다. 구현예에서, 대상체는 인간, 예를 들어 암을 앓고 있거나, 암을 앓을 위험이 있거나, 잠재적으로 암을 앓을 수 있는 인간이다.

본원에서 사용되는 용어 "치료"는 대상체에서 적어도 하나의 증상을 완화, 감소, 또는 경감시키거나 질환의 진행을 지연시키는 치료를 포함한다. 예를 들어, 치료는 암과 같은 장애의 하나 또는 몇몇의 증상의 감소, 또는 장애의 부분적 또는 완전한 근절일 수 있다. 본 발명의 의미 내에서, 용어 "치료"는 또한 발병(즉, 질환의 임상적 징후 이전의 기간)을 저지, 지연시키고/시키거나 질환의 발생 또는 악화 위험을 감소시키는 것을 의미한다.

달리 언급되지 않는 한, 본원에서 "포함"이라는 용어는 확장 가능한(open-ended) 비제한적인 의미로 사용된다.

본 발명을 설명하는 문맥에서(특히, 하기 청구범위의 문맥에서) 단수형 및 유사한 용어는 본원에서 달리 명시되지 않거나 문맥상 명백히 모순되지 않는 한, 단수와 복수를 모두 포함하는 것으로 해석되어야 한다. 화합물, 염 등에 복수형이 사용되는 경우, 이는 또한 단일 화합물, 염을 의미하는 것으로 간주된다.

"병용 요법" 또는 "조합하여"라는 용어는 본 명세서에 기재된 병태 또는 장애(예를 들어, 암)를 치료하기 위해 2가지 이상의 치료제를 투여하는 것을 지칭한다. 이러한 투여는 이들 치료제를 실질적으로 동시적인 방식으로, 예컨대 고정된 비율의 활성 성분을 갖는 단일 캡슐로 공동 투여하는 것을 포함한다. 대안적으로, 이러한 투여는 각각의 활성 성분에 대해 다중 또는 개별 용기(예를 들어, 캡슐, 분말, 및 액체)로 공동 투여하는 것을 포함한다. 분말 및/또는 액체는 투여 전에 원하는 용량으로 재구성되거나 희석될 수 있다. 또한, 이러한 투여는 거의 동시에 또는 서로 다른 시간에 각 유형의 치료제를 순차적으로 사용하는 것도 포함한다. 어느 경우든, 치료 요법은 본원에 기재된 병태 또는 장애의 치료에 있어서 약물 병용의 이로운 효과를 제공할 것이다.

병용 요법은 "시너지 효과"를 제공할 수 있고 "시너지적"임을 입증할 수 있다. 즉, 활성 성분들이 함께 사용될 때 달성되는 효과가 화합물을 개별적으로 사용함으로써 발생하는 효과의 합보다 크다. 시너지 효과는 활성 성분이 (1) 공동 제형화되어 조합된 단위 투여 제형으로 동시에 투여되거나 전달될 때; (2) 개별 제형으로서 교대로 또는 병행하여 전달될 때; 또는 (3) 일부 다른 계획에 의해 전달될 때, 얻어질 수 있다. 교대 요법으로 전달되는 경우, 시너지 효과는 화합물이 순차적으로, 예를 들어 개별 주사기로 서로 달리 주사하여 투여되거나 전달될 때 얻을 수 있다. 일반적으로, 교대 요법 동안에는, 각각의 활성 성분의 유효 투여량이 순차적으로, 즉 연속하여 투여되는 반면, 병용 요법에서는 2가지 이상의 활성 성분의 유효 투여량이 함께 투여된다. 본원에서 사용되는 시너지 효과는 예를 들어 SHP2 억제제로서의 화합물 TNO155 및 PD-1 억제제와 같은 2가지 치료제가 단독으로 투여되는 각 약물의 효과의 단순 합보다 더 큰 효과를 생성하는, 예를 들어 증식성 질환, 특히 암, 또는 이의 증상의 증후적 진행을 늦추는 작용을 의미한다. 시너지 효과는 예를 들어 Sigmoid-Emax 방정식(Holford, N. H. G. and Scheiner, L. B., Clin. Pharmacokinet. 6: 429-453 (1981)), Loewe 가산성 방정식(Loewe, S. and Muischnek, H., Arch. Exp. Pathol Pharmacol. 114: 313-326 (1926)), 및 중위수 효과 방정식(Chou, T. C. and Talalay, P., Adv. Enzyme Regul. 22: 27-55 (1984))과 같은 적합한 방법을 사용하여 계산될 수 있다. 상기 언급된 각각의 방정식은 약물 병용의 효과를 평가하는 데 도움이 되는 해당 그래프를 생성하기 위해 실험 데이터에 적용될 수 있다. 상기 언급된 방정식과 관련된 해당 그래프는 각각 농도-효과 곡선, 이소볼로그램 곡선, 및 병용지수 곡선이다.

본원에서 사용되는 용어 "약제학적 조합물"은 단일 투여 단위 형태의 고정 조합물을 지칭하거나, 또는 2가지 이상의 치료제가 독립적으로 동시에 또는 시간 간격 내에서 개별적으로 투여될 수 있고, 특히 이러한 시간 간격을 통해 조합 파트너가 협동 효과, 예를 들어 시너지 효과를 나타낼 수 있는 병용 투여를 위한 비고정 조합물 또는 부품 키트를 지칭한다.

용어

PD-1 억제제는 PDR001을 포함한다. PDR001은 2015년 7월 30일에 공개된 US 2015/0210769(발명의 명칭: "Antibody Molecules to PD-1 and Uses Thereof")에 기재된 항-PD-1 항체 분자인 스파탈리주맙으로도 알려져 있으며, 이 문헌은 전체가 참조로 포함된다.

추가의 항-PD-1 항체 분자는 다음을 포함한다:

MDX-1106, MDX-1106-04, ONO-4538, BMS-936558, 또는 OPDIVO®로도 알려진 니볼루맙(Bristol-Myers Squibb). 니볼루맙(클론 5C4) 및 다른 항-PD-1 항체는 US 8,008,449 및 WO 2006/121168에 개시되어 있으며, 이들 문헌은 전체가 참조로 포함됨;

람브롤리주맙, MK-3475, MK03475, SCH-900475, 또는 KEYTRUDA®로도 알려진 펨브롤리주맙(Merck & Co). 펨브롤리주맙 및 다른 항-PD-1 항체는 문헌[Hamid, O. et al. (2013) New England Journal of Medicine 369 (2): 134-44, US 8,354,509, 및 WO 2009/114335]에 개시되어 있으며, 이들 문헌은 전체가 참조로 포함됨;

CT-011로도 알려진 피딜리주맙(CureTech). 피딜리주맙 및 다른 항-PD-1 항체는 문헌[Rosenblatt, J. et al. (2011) J Immunotherapy 34(5): 409-18, US 7,695,715, US 7,332,582, 및 US 8,686,119]에 개시되어 있으며, 이들 문헌은 전체가 참조로 포함됨;

AMP-514로도 알려진 MEDI0680(Medimmune). MEDI0680 및 다른 항-PD-1 항체는 US 9,205,148 및 WO 2012/145493에 개시되어 있으며, 이들 문헌은 전체가 참조로 포함됨;

예를 들어 전체가 참조로 포함되는 WO 2010/027827 및 WO 2011/066342에 개시된 AMP-224(B7-DCIg(Amplimmune));

REGN2810(Regeneron); PF-06801591(Pfizer); BGB-A317 또는 BGB-108(Beigene); INCSHR01210 또는 SHR-1210으로도 알려진 INCSHR1210(Incyte); ANB011로도 알려진 TSR-042(Tesaro); 및 예를 들어 전체가 참조로 포함되는 WO 2015/112800, WO 2016/092419, WO 2015/085847, WO 2014/179664, WO 2014/194302, WO 2014/209804, WO 2015/200119, US 8,735,553, US 7,488,802, US 8,927,697, US 8,993,731, 및 US 9,102,727에 기재된 것들을 포함하여 추가로 알려진 항-PD-1 항체.

본 발명의 TNO155와 PD-1 억제제의 조합물은 또한 화합물의 비표지 형태뿐만 아니라 동위원소 표지된 형태를 나타내고자 한 것이다. 동위원소 표지 화합물은 선택된 원자량 또는 질량수를 갖는 원자로 대체된 하나 이상의 원자를 가진다. TNO155 및 PD-1 억제제에 도입될 수 있는 동위원소의 예는 가능한 경우 수소, 탄소, 질소, 산소, 및 염소의 동위원소, 예를 들어 ²H, ³H, ¹¹C, ¹³C, ¹⁴C, ¹⁵N, ³⁵S, ³⁶Cl을 포함한다. 본 발명은 예를 들어 내부에 ³H 및 ¹⁴C와 같은 방사성 동위원소가 존재하거나 ²H 및 ¹³C와 같은 비방사선 동위원소가 존재하는, 동위원소 표지된 TNO155 및 PD-1 억제제를 포함한다. 동위원소 표지된 TNO155 및 PD-1 억제제는 대사 연구(¹⁴C 사용), 반응 동역학 연구(예를 들어, ²H 또는 ³H 사용), 약물 또는 기질 조직 분포 분석을 포함하여 양전자 방출 단층촬영(PET) 또는 단일-광자 방출 컴퓨터 단층촬영(SPECT)과 같은 검출 또는 이미징 기법, 또는 환자의 방사선 치료에 유용하다. 일반적으로 본 발명의 동위원소 표지 화합물은 당업자에게 알려진 통상적인 기술에 의해, 또는 적절한 동위원소 표지 시약을 사용하여 첨부 실시예에 기재된 것과 유사한 공정에 의해 제조될 수 있다.

또한, 더 무거운 동위원소, 특히 중수소(즉, ²H 또는 D)에 의한 치환은 더 큰 대사 안정성으로 인한 특정 치료적 이점, 예를 들어 생체내 반감기의 증가 또는 투약 요건의 감소 또는 치료지수의 개선을 제공할 수 있다. 이러한 맥락에서 중수소는 TNO155 또는 PD-1 억제제의 치환기로 간주되는 것으로 이해된다. 이러한 더 무거운 동위원소, 구체적으로 중수소의 농도는 동위원소 농축 계수에 의해 정의될 수 있다. 본원에서 사용되는 용어 "동위원소 농축 계수"는 특정 동위원소의 동위원소 존재비와 자연 존재비의 비를 의미한다. TNO155 또는 PD-1 억제제에서의 치환기가 중수소인 것으로 표시되는 경우, 이러한 화합물은 각각의 지정된 중수소 원자에 대해 적어도 3500(각각의 지정된 중수소 원자에서 52.5%의 중수소 혼입), 적어도 4000(60%의 중수소 혼입), 적어도 4500(67.5%의 중수소 혼입), 적어도 5000(75%의 중수소 혼입), 적어도 5500(82.5%의 중수소 혼입), 적어도 6000(90%의 중수소 혼입), 적어도 6333.3(95%의 중수소 혼입), 적어도 6466.7(97%의 중수소 혼입), 적어도 6600(99%의 중수소 혼입), 또는 적어도 6633.3(99.5%의 중수소 혼입)의 동위원소 농축 계수를 갖는다.

바람직한 구현예의 설명

TNO155는 SHP2 활성의 경구 생체이용 가능한 소분자 억제제이다. SHP2는 PD-1 및 다른 면역수용체, 예를 들어 CTLA4, SCF1R, 및 LILRB4뿐만 아니라 활성화된 RTK의 하류 신호전달을 변환한다. 전임상 모델에서, RTK에 대한 종양 의존성은 SHP2에 대한 의존성을 예측한다. 또한, 전임상 데이터에 기초하면, SHP2 억제는 면역 체크포인트 억제제의 항종양 활성을 향상시킬 수 있다.

일 구현예에서, 본 발명의 약제학적 조합물과 관련하여, (3S,4S)-8-(6-아미노-5-((2-아미노-3-클로로피리딘-4-일)티오)피라진-2-일)-3-메틸-2-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸-4-아민 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염, 및 PD-1 억제제 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염을 포함하는 약제학적 조합물이 제공된다.

추가 구현예에서, (3S,4S)-8-(6-아미노-5-((2-아미노-3-클로로피리딘-4-일)티오)피라진-2-일)-3-메틸-2-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸-4-아민 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염, 및 PD-1 억제제 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염은 임의의 순서로, 개별적으로, 동시에 또는 순차적으로 투여된다.

추가 구현예에서, (3S,4S)-8-(6-아미노-5-((2-아미노-3-클로로피리딘-4-일)티오)피라진-2-일)-3-메틸-2-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸-4-아민은 경구 투여 형태이다.

다른 구현예에서, (3S,4S)-8-(6-아미노-5-((2-아미노-3-클로로피리딘-4-일)티오)피라진-2-일)-3-메틸-2-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸-4-아민 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염과 PD-1 억제제의 약제학적 조합물 및 약제학적으로 허용되는 적어도 하나의 담체를 포함하는 약제학적 조성물이 제공된다.

다른 구현예에서, PD-1 억제제는 항-PD-1 항체 분자이다.

추가 구현예에서, PD-1 억제제는 2015년 7월 30일에 공개된 US 2015/0210769(발명의 명칭: "Antibody Molecules to PD-1 and Uses Thereof")에 기재된 바와 같은 항-PD-1 항체 분자이며, 이 문헌은 전체가 참조로 포함된다. 일부 구현예에서, 항-PD-1 항체 분자는 BAP049-클론 E 또는 BAP049-클론 B이다.

추가 구현예에서, 항-PD-1 항체 분자는 스파탈리주맙(PDR001)이다.

일 구현예에서, 항-PD-1 항체 분자는 표 1에 나타낸 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 및 경쇄 가변 영역으로부터(예를 들어, 표 1에 개시된 BAP049-클론-E 또는 BAP049-클론-B의 중쇄 및 경쇄 가변 영역 서열로부터)의, 또는 표 1에 나타낸 뉴클레오티드 서열에 의해 암호화된 적어도 1개, 2개, 3개, 4개, 5개, 또는 6개의 상보성 결정 영역(CDR)(또는 집합으로서 모든 CDR)을 포함한다. 일부 구현예에서, CDR은 (예를 들어, 표 1에 제시된 바와 같은) Kabat 정의를 따른다. 일부 구현예에서, CDR은 (예를 들어, 표 1에 제시된 바와 같은) Chothia 정의를 따른다. 일부 구현예에서, CDR은 (예를 들어, 표 1에 제시된 바와 같은) Kabat 및 Chothia 모두의 조합된 CDR 정의를 따른다. 일 구현예에서, VH CDR1의 Kabat 및 Chothia CDR의 조합은 아미노산 서열 GYTFTTYWMH(서열번호 541)를 포함한다. 일 구현예에서, CDR 중 하나 이상(또는 집합으로서 모든 CDR)은 표 1에 나타낸 아미노산 서열, 또는 표 1에 나타낸 뉴클레오티드 서열에 의해 암호화된 아미노산 서열에 비해 1개, 2개, 3개, 4개, 5개, 또는 6개 이상의 변경, 예를 들어 아미노산 치환(예를 들어, 보존적 아미노산 치환) 또는 결실을 갖는다.

일 구현예에서, 항-PD-1 항체 분자는 서열번호 501의 VHCDR1 아미노산 서열, 서열번호 502의 VHCDR2 아미노산 서열, 및 서열번호 503의 VHCDR3 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 영역(VH); 및 서열번호 510의 VLCDR1 아미노산 서열, 서열번호 511의 VLCDR2 아미노산 서열, 및 서열번호 512의 VLCDR3 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 영역(VL)을 포함하며, 각각의 서열은 표 1에 개시되어 있다.

일 구현예에서, 항체 분자는 서열번호 524의 뉴클레오티드 서열에 의해 암호화된 VHCDR1, 서열변호 525의 뉴클레오티드 서열에 의해 암호화된 VHCDR2, 및 서열번호 526의 뉴클레오티드 서열에 의해 암호화된 VHCDR3을 포함하는 VH; 및 서열번호 529의 뉴클레오티드 서열에 의해 암호화된 VLCDR1, 서열번호 530의 뉴클레오티드 서열에 의해 암호화된 VLCDR2, 및 서열번호 531의 뉴클레오티드 서열에 의해 암호화된 VLCDR3을 포함하는 VL을 포함하며, 각각의 서열은 표 1에 개시되어 있다.

일 구현예에서, 항-PD-1 항체 분자는 서열번호 506의 아미노산 서열, 또는 서열번호 506과 적어도 85%, 90%, 95%, 또는 99% 이상 동일한 아미노산 서열을 포함하는 VH를 포함한다. 일 구현예에서, 항-PD-1 항체 분자는 서열번호 520의 아미노산 서열, 또는 서열번호 520과 적어도 85%, 90%, 95%, 또는 99% 이상 동일한 아미노산 서열을 포함하는 VL을 포함한다. 일 구현예에서, 항-PD-1 항체 분자는 서열번호 516의 아미노산 서열, 또는 서열번호 516과 적어도 85%, 90%, 95%, 또는 99% 이상 동일한 아미노산 서열을 포함하는 VL을 포함한다. 일 구현예에서, 항-PD-1 항체 분자는 서열번호 506의 아미노산 서열을 포함하는 VH 및 서열번호 520의 아미노산 서열을 포함하는 VL을 포함한다. 일 구현예에서, 항-PD-1 항체 분자는 서열번호 506의 아미노산 서열을 포함하는 VH 및 서열번호 516의 아미노산 서열을 포함하는 VL을 포함한다.

일 구현예에서, 항체 분자는 서열번호 507의 뉴클레오티드 서열, 또는 서열번호 507과 적어도 85%, 90%, 95%, 또는 99% 이상 동일한 뉴클레오티드 서열에 의해 암호화된 VH를 포함한다. 일 구현예에서, 항체 분자는 서열번호 521 또는 517의 뉴클레오티드 서열, 또는 서열번호 521 또는 517과 적어도 85%, 90%, 95%, 또는 99% 이상 동일한 뉴클레오티드 서열에 의해 암호화된 VL을 포함한다. 일 구현예에서, 항체 분자는 서열번호 507의 뉴클레오티드 서열에 의해 암호화된 VH 및 서열번호 521 또는 517의 뉴클레오티드 서열에 의해 암호화된 VL을 포함한다.

일 구현예에서, 항-PD-1 항체 분자는 서열번호 508의 아미노산 서열, 또는 서열번호 508과 적어도 85%, 90%, 95%, 또는 99% 이상 동일한 아미노산 서열을 포함하는 중쇄를 포함한다. 일 구현예에서, 항-PD-1 항체 분자는 서열번호 522의 아미노산 서열, 또는 서열번호 522와 적어도 85%, 90%, 95%, 또는 99% 이상 동일한 아미노산 서열을 포함하는 경쇄를 포함한다. 일 구현예에서, 항-PD-1 항체 분자는 서열번호 518의 아미노산 서열, 또는 서열번호 518과 적어도 85%, 90%, 95%, 또는 99% 이상 동일한 아미노산 서열을 포함하는 경쇄를 포함한다. 일 구현예에서, 항-PD-1 항체 분자는 서열번호 508의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 및 서열번호 522의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄를 포함한다. 일 구현예에서, 항-PD-1 항체 분자는 서열번호 508의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 및 서열번호 518의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄를 포함한다.

일 구현예에서, 항체 분자는 서열번호 509의 뉴클레오티드 서열, 또는 서열번호 509와 적어도 85%, 90%, 95%, 또는 99% 이상 동일한 뉴클레오티드 서열에 의해 암호화된 중쇄를 포함한다. 일 구현예에서, 항체 분자는 서열번호 523 또는 519의 뉴클레오티드 서열, 또는 서열번호 523 또는 519와 적어도 85%, 90%, 95%, 또는 99% 이상 동일한 뉴클레오티드 서열에 의해 암호화된 경쇄를 포함한다. 일 구현예에서, 항체 분자는 서열번호 509의 뉴클레오티드 서열에 의해 암호화된 중쇄 및 서열번호 523 또는 519의 뉴클레오티드 서열에 의해 암호화된 경쇄를 포함한다.

본원에 기술된 항체 분자는 US 2015/0210769에 기재된 벡터, 숙주 세포, 및 방법에 의해 제조될 수 있으며, 이 문헌은 전체가 참조로 포함된다.

다른 구현예에서, 암 치료를 필요로 하는 대상체에게 (3S,4S)-8-(6-아미노-5-((2-아미노-3-클로로피리딘-4-일)티오)피라진-2-일)-3-메틸-2-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸-4-아민 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염을 포함하는 약제학적 조성물을 제2 치료제와 조합하여 투여하는 단계를 포함하는 암 치료 방법이 제공된다.

추가 구현예에서, 암은 식도 편평세포 암종, 두경부 편평세포 암종, 대장암, 난소암, 췌장암, 비소세포 폐암, 및 신세포 암종으로부터 선택된다.

추가 구현예에서, 암은 식도 편평세포 암종 및 인두 편평세포 암종으로부터 선택된다.

추가 구현예에서, 암은 대장암이다.

추가 구현예에서, 암은 비소세포 폐암이다.

추가 구현예에서, 암은 두경부 편평세포 암종이다.

추가 구현예에서, (3S,4S)-8-(6-아미노-5-((2-아미노-3-클로로피리딘-4-일)티오)피라진-2-일)-3-메틸-2-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸-4-아민 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염, 및 제2 치료제는 동시에, 개별적으로, 또는 일정 기간에 걸쳐 투여된다.

추가 구현예에서, 암 치료를 필요로 하는 대상체에게 투여되는 (3S,4S)-8-(6-아미노-5-((2-아미노-3-클로로피리딘-4-일)티오)피라진-2-일)-3-메틸-2-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸-4-아민 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염의 양은 암을 치료하는 데 효과적이다.

추가 구현예에서, 암 치료를 필요로 하는 대상체에게 투여되는 (3S,4S)-8-(6-아미노-5-((2-아미노-3-클로로피리딘-4-일)티오)피라진-2-일)-3-메틸-2-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸-4-아민 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염, 및 제2 치료제의 양은 암을 치료하는 데 효과적이다.

추가 구현예에서, 제2 치료제는 면역조절제이다.

추가 구현예에서, 제2 치료제는 면역 체크포인트 억제제이다.

추가 구현예에서, 제2 치료제는 PD-1 억제제이다.

추가 구현예에서, PD-1 억제제는 PDR001, 니볼루맙, 펨브롤리주맙, 피딜리주맙, MEDI0680, REGN2810, TSR-042, PF-06801591, BGB-A317, BGB-108, INCSHR1210, 또는 AMP-224로부터 선택된다.

추가 구현예에서, PD-1 억제제는 PDR001이다.

추가 구현예에서, (3S,4S)-8-(6-아미노-5-((2-아미노-3-클로로피리딘-4-일)티오)피라진-2-일)-3-메틸-2-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸-4-아민 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염은 약 1.5 mg/일, 또는 3 mg/일, 또는 6 mg/일, 또는 10 mg/일, 또는 20 mg/일, 또는 30 mg/일, 또는 40 mg/일, 또는 50 mg/일, 또는 60 mg/일, 또는 70 mg/일, 또는 80 mg/일, 또는 90 mg/일, 또는 100 mg/일의 용량으로 경구 투여된다.

추가 구현예에서, (3S,4S)-8-(6-아미노-5-((2-아미노-3-클로로피리딘-4-일)티오)피라진-2-일)-3-메틸-2-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸-4-아민 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염의 1일 용량은 2주 투약에 이은 1주 휴약의 21일 주기를 기반으로 한다.

추가 구현예에서, 용량은 1일 20 mg QD의 (3S,4S)-8-(6-아미노-5-((2-아미노-3-클로로피리딘-4-일)티오)피라진-2-일)-3-메틸-2-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸-4-아민 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염이며, 2주 투약에 이은 1주 휴약의 21일 주기를 기반으로 한다.

추가 구현예에서, PDR001은 약 300 mg의 용량으로 3주마다 1회 투여된다.

추가 구현예에서, PDR001은 약 400 mg의 용량으로 4주마다 1회 투여된다.

다른 구현예에서, 암 치료를 필요로 하는 환자에게 (3S,4S)-8-(6-아미노-5-((2-아미노-3-클로로피리딘-4-일)티오)피라진-2-일)-3-메틸-2-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸-4-아민 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염을 약 1.5 mg/일, 또는 3 mg/일, 또는 6 mg/일, 또는 10 mg/일, 또는 20 mg/일, 또는 30 mg/일, 또는 40 mg/일, 또는 50 mg/일, 또는 60 mg/일, 또는 70 mg/일, 또는 80 mg/일, 또는 90 mg/일, 또는 100 mg/일의 용량으로 경구 투여하는 단계를 포함하는 암 치료 방법이 제공된다.

추가 구현예에서, 암은 대장암이다.

추가 구현예에서, 암은 비소세포 폐암이다.

추가 구현예에서, 암은 두경부 편평세포 암종이다.

추가 구현예에서, 상기 방법은 제2 치료제를 추가로 포함한다.

추가 구현예에서, 제2 치료제는 면역조절제이다.

추가 구현예에서, 제2 치료제는 PD-1 억제제이다.

추가 구현예에서, PD-1 억제제는 PDR001이다.

추가 구현예에서, 제2 치료제는 정맥내 투여된다.

다른 구현예에서, 식도 또는 두경부 편평세포 암종; 대장암, 난소암, 췌장암, 또는 비소세포 폐암; 및 신세포 암종의 치료에 사용하기 위한, (3S,4S)-8-(6-아미노-5-((2-아미노-3-클로로피리딘-4-일)티오)피라진-2-일)-3-메틸-2-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸-4-아민 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염과 PDR001의 약제학적 조합물이 제공된다.

추가 구현예에서, 암은 대장암이다.

추가 구현예에서, 암은 비소세포 폐암이다.

추가 구현예에서, 암은 두경부 편평세포 암종이다.

다른 구현예에서, 식도 또는 두경부 편평세포 암종; 대장암, 난소암, 췌장암, 또는 비소세포 폐암; 및 신세포 암종으로부터 선택되는 암의 치료를 위한 의약의 제조에 있어서, (3S,4S)-8-(6-아미노-5-((2-아미노-3-클로로피리딘-4-일)티오)피라진-2-일)-3-메틸-2-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸-4-아민 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염과 PDR001의 약제학적 조합물의 용도가 제공된다.

다른 구현예에서, 식도 또는 두경부 편평세포 암종; 대장암, 난소암, 췌장암, 또는 비소세포 폐암; 및 신세포 암종으로부터 선택되는 암의 치료 방법으로서, 이러한 암의 치료를 필요로 하는 환자에게 (3S,4S)-8-(6-아미노-5-((2-아미노-3-클로로피리딘-4-일)티오)피라진-2-일)-3-메틸-2-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸-4-아민 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염과 PDR001의 약제학적 조합물, 또는 (3S,4S)-8-(6-아미노-5-((2-아미노-3-클로로피리딘-4-일)티오)피라진-2-일)-3-메틸-2-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸-4-아민 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염과 PDR001의 약제학적 조합물 및 약제학적으로 허용되는 적어도 하나의 담체를 포함하는 약제학적 조성물을 투여하는 단계를 포함하는 방법이 제공된다.

약리학 및 유용성

비소세포 폐암 - 2012년에, 전 세계적으로 약 180만명이 폐암 진단을 받았고, 이 질환으로 약 160만명이 사망했다. 비소세포 폐암은 폐암의 약 85%를 차지하며, 선암종과 편평세포 암종이 가장 흔한 아류형이다. EGFR, ALK, 또는 ROS와 같은 약물치료 가능 암유발 종양유전자의 유전적 변형을 갖지 않는 진행기 비소세포 폐암(NSCLC)에 대한 표준 치료법은 동시 또는 순차적으로 투여되는 화학요법 및 면역요법을 포함한다. 이러한 치료법은 임상적 이점을 제공하지만, 대부분의 환자는 1년 이내에 질환 진행을 경험하며, 진행성 NSCLC 환자의 예후는 여전히 좋지 않다. 면역 체크포인트 억제제를 이용한 NSCLC에 대한 면역요법은 가능성이 입증되었으며, 일부 NSCLC 환자는 수년간 지속적인 질병 통제를 경험하였다. 그러나, 이러한 장기적인 비진행자는 흔하지 않으며, 체크포인트 억제제를 이용한 면역요법에 반응하여 지속적인 관해를 달성하는 환자의 비율을 증가시킬 수 있는 병용 치료 전략이 시급하다. KRAS 종양유전자의 활성화 돌연변이는 폐 선암종의 약 30%에서 발생하며, 일부 연구에서 좋지 않은 결과와 관련이 있었다. 돌연변이 KRAS를 직접 표적화하는 승인된 약물은 없으므로, 진행기 KRAS-돌연변이 NSCLC에 대한 표준 치료법도 전술한 바와 같은 화학요법 및 면역요법이다.

두경부 편평세포암 - 편평세포암은 두경부에서 발생하는 가장 흔한 암으로, 구인두암과 후두암을 합친 경우 전 세계적으로 약 686,000명이 발생하는 것으로 추정된다. 알코올과 흡연은 두경부 편평세포암(HNSCC)의 가장 흔한 위험 요소이며, 인유두종 바이러스(HPV) 감염도 원인 역할을 할 가능성이 있다. HNSCC의 90% 이상이 EGFR 또는 그 리간드의 과발현을 나타낸다. 전이성 질환 환자의 경우, 표준 전신 치료법은 세툭시맙과 조합되거나 조합되지 않은 백금 기반 화학요법을 포함한다. 역사적으로, 전신 화학요법의 중위 생존기간은 약 6개월이며, 환자의 약 20%만이 1년 동안 생존한다. 보다 최근에는, 백금 기반 화학요법을 진행한 환자에서 항-예정사-1(PD-1) 항체인 니볼루맙이 표준 2차 단일 제제 요법(도세탁셀, 메토트렉세이트, 또는 세툭시맙)에 비해 생존 이점이 있는 것으로 나타났다. 그러나, 니볼루맙으로 치료받은 환자의 1년 생존율은 36%에 불과했다. 따라서, 이러한 공격적이고 쇠약하게 하는 암에 대한 개선된 치료법이 절실히 필요하다.

대장암 - 대장암(CRC)은 여성에서 두 번째로 흔한 암이고 남성에서 세 번째로 흔한 암으로, 2012년에 전 세계적으로 약 140만건의 새로운 암 사례를 차지했다. 염색체 불안정성과 미세부수체 불안정성은 모두 CRC의 발병기전에 역할을 한다. 염색체 불안정성은 산발성 대장암의 약 85%에서 발견되며, Wnt 경로 유전자, APC 및 CTNNB1의 돌연변이를 특징으로 한다. 코돈 12 또는 13에서 가장 흔히 발생하는 KRAS 돌연변이는 이들 사례의 약 45%를 차지하며, 항-EGFR 요법을 효력 없게 한다. 결함이 있는 DNA 불일치 복구로 인해 발생하는 미세부수체 불안정성(MSI)은, 불일치 복구 유전자의 생식세포 돌연변이로 인해 린치 증후군에서 발생하는 CRC뿐만 아니라 산발적 CRC의 약 15%에 관련된다. MSI가 높은 CRC는 MSI가 높지 않은 CRC보다 더 나은 예후를 보이는 경향이 있으며, 또한 일부 전신 요법에 대해서는 다르게 반응했다. 전이성 CRC에 대한 전신 요법은 5-플루오로우라실/류코보린, 카페시다빈, 옥살리플라틴, 및 이리노테칸과 같은 화학요법제; 베바시주맙 및 라무시루맙과 같은 항-혈관신생제; KRAS/NRAS 야생형 암에 대한 세툭시맙 및 파니투무맙을 비롯한 항-EGFR 제제; 및 니볼루맙 및 펨브롤리주맙을 비롯한 면역요법제를 포함하여, 단독으로 또는 조합으로 사용되는 다양한 제제를 포함한다. 그러나, 여러 활성 요법에도 불구하고, 전이성 CRC는 여전히 완치될 수 없다. 불일치 복구가 결핍된 (MSI가 높은) CRC는 면역 체크포인트 억제제 요법에 대해 높은 반응률을 나타내지만, 불일치 복구가 충분한 CRC는 그렇지 않다. KRAS-돌연변이 CRC는 일반적으로 불일치 복구가 충분하고 항-EGFR 요법의 후보가 아니므로, 이러한 아류형의 CRC는 특히 요법 개선이 필요하다.

TNO155는 야생형 SHP2의 동급 최초 알로스테릭 억제제이다. SHP2는 2개의 N-말단 SH2 도메인, 전형적인 PTP 도메인, 및 C-말단 꼬리로 이루어진 편재적으로 발현되는 비수용체 단백질 티로신 포스파타제(PTP)이다. 포스파타제 활성은 PTP 도메인에 결합하는 2개의 SHP2 도메인에 의해 자동 억제된다(닫힌 형태). 수용체 티로신 키나제(RTK)가 활성화되면, SHP2가 원형질막에 보충되고, 원형질막에서 SHP2는 활성화된 RTK 및 다수의 어댑터 단백질과 회합하여 RAS/MAPK 경로를 활성화함으로써 신호를 전달한다. TNO155는 SHP2의 비활성 또는 "닫힌" 형태에 결합함으로써, 활성 형태로 열리는 것을 방지한다. 이는 활성화된 RTK로부터 하류 RAS/MAPK 경로로의 신호전달의 변환을 방지한다.

TNO155는 광범위한 RTK-의존성 인간 암세포주 및 생체내 이종이식편에서 효능이 입증되었다. TNO155의 전임상 시험관내 및 생체내 평가는 RTK-의존성 인간 암 모델, 예를 들어 식도암, HNSCC, 및 NSCLC에서 SHP2 포스파타제의 선택적이고 강력한 억제를 보여준다. SHP2 억제는 MAPK 신호전달 경로 내의 바이오마커, 예컨대 인산화 ERK1/2(pERK) 수준의 감소 및 이중 특이성 포스파타제 6(DUSP6) mRNA 전사체의 하향조절을 평가하여 측정될 수 있다. KYSE-520(식도 편평세포 암종) 및 DETROIT-562(인두 편평세포 암종) 암세포주에서, 시험관내 pERK IC50은 각각 8 nM(3.4 ng/mL) 및 35 nM(14.8 ng/mL)이었고, 항증식 IC50은 100 nM(42.2 ng/mL) 및 470 nM(198.3 ng/mL)이었다. TNO155의 항증식 효과는 RTK 신호전달에 의존성인 암세포주에서 가장 효과적인 것으로 밝혀졌다. 생체내에서, 경구 투여된 TNO155(20 mg/kg)에 의한 SHP2 억제는 EGFR-의존성 DETROIT-562 암세포주에서 DUSP6 mRNA 전사체의 약 95% 감소를 달성했으며, 1일 2회 일정으로 투여시 47% 퇴행을 달성했다. 종양 DUSP6 바이오마커의 조절과 결합된 용량 분류 연구는 투여 간격의 80% 이상 동안 50% PD 억제가 이루어질 때 최대 효능이 달성됨을 보여준다.

RTK의 하류 RAS-MAPK 경로 활성화에서의 역할 외에도, SHP2는 면역 체크포인트 및 사이토카인 수용체 신호전달과 관련이 있다. T세포에서, SHP2는 세포예정사-1(PD-1)에 의해 보충되어 공동자극 수용체 CD28을 탈인산화하고 비활성화하여 T세포 활성화를 억제하는 것으로 나타났다. 골수세포에서 SHP2 제거는 IFN-γ 및 종양세포 유래 사이토카인에 대한 반응으로 대식세포에 의한 T세포 화학유인물질 CXCL9의 생성을 강화함으로써 흑색종 성장을 억제하여, IFN-γ-생성 T세포의 종양 침윤을 촉진했다. 따라서, SHP2의 억제는 암세포 성장의 직접적인 억제, 종양 표적화 T세포의 활성화, 및 T세포 종양 침윤의 촉진을 비롯한 여러 메커니즘을 통해 항종양 효능을 달성할 수 있다. 따라서, SHP2는 T세포 활성화의 PD-1 억제 및 2형 종양 관련 대식세포(TAM)와 같은 다른 면역억제 세포에서의 면역 신호전달과 관련이 있다.

면역 체계는 공동자극 및 공동억제 리간드 및 수용체의 네트워크에 의해 엄격하게 제어된다. 이들 분자는 T세포 활성화를 위한 두 번째 신호를 제공하고, 양성 및 음성 신호의 균형잡힌 네트워크를 제공하여, 자가 면역성을 제한하면서 감염에 대한 면역 반응을 최대화한다. 공동자극 신호의 예는 APC의 B7.1(CD80) 및 B7.2(CD86)와 CD4⁺ T-림프구의 CD28 및 CTLA-4 수용체 사이의 결합을 포함한다. CD28에 대한 B7.1 또는 B7.2의 결합은 T세포 활성화를 자극하는 반면, CTLA-4에 대한 B7.1 또는 B7.2의 결합은 이러한 활성화를 억제한다. CD28은 T세포 표면에서 항시적으로 발현되며, CTLA4 발현은 T세포 활성화 후에 빠르게 상향조절된다. CD28 수용체의 다른 리간드는 "B7 슈퍼패밀리"로도 알려진 관련 B7 분자의 그룹을 포함한다. B7.1(CD80), B7.2(CD86), 유도성 공동자극 리간드(ICOS-L), 예정사-1 리간드(PD-L1; B7-H1), 예정사-2 리간드(PD-L2; B7-DC), B7-H3, B7-H4, 및 B7-H6을 포함하여, B7 슈퍼패밀리의 여러 구성원이 알려져 있다.

PDR001(스파탈리주맙)은 인간 PD-1에 특이적으로 그리고 높은 친화력으로 결합한다. Biacore 분석에서, 인간 PD-1에 대한 스파탈리주맙의 해리 상수(KD)는 0.827 nM이다. 생체외 인간 혈액을 이용한 림프구 자극 분석에서, 스파탈리주맙은 포도구균장독소 B(SEB)를 이용한 슈퍼 항원 자극에 대한 반응으로 IL-2 생성을 약 2배 향상시킨다. 스파탈리주맙은 설치류 PD-1과 교차 반응하지 않아 뮤린 종양 모델에서 평가될 수 없다. 항-PD1 요법의 전임상 활성을 평가하기 위해, 인간 PD1 항원에 대한 스파탈리주맙의 결합 친화도와 유사한 마우스 PD1 항원에 대한 결합 친화도를 나타내는 마우스 항체 대체물이 개발되었다(클론 1D2). 더 자세한 내용은 PRD001 임상시험자 자료집을 참조. 동계 마우스 종양 모델 MC38에서 마우스 항-PD1 항체를 이용한 TNO155에 의한 병용 효능 및 면역 조절은 종양 내 활성화된 CD8+ T세포의 증가와 함께 면역억제 골수세포(gMDSC, TAMII)와 림프구(Treg 세포)의 유의한 억제 및 강력한 항종양 효과를 보여주었다. 요약하면, 이러한 데이터는 항-PD1 요법과 조합된 TNO155가 RAS-MAPK 경로 활성화를 억제함으로써 종양 고유 효능 외에도 향상된 항종양 면역성 때문에 전반적인 병용 이점을 제공할 것임을 시사한다.

SHP2는 PD-1 및 CTLA4뿐만 아니라 활성화된 RTK의 하류 신호전달을 변환한다. 면역 반응을 조절하는 데 있어서 면역 체크포인트 경로의 중요성을 감안할 때, 면역 체계를 활성화하는 신규 병용 요법의 개발이 필요하다. TNO155는 면역 체크포인트 억제제의 항종양 활성을 향상시키는 야생형 SHP2의 강력한 억제제이다. 전임상 마우스 동계 종양 모델 연구에서, TNO155와 조합되었을 때 항-PD-1 항체의 항종양 활성이 향상된 것으로 나타났다. 또한, TNO155는 전임상 NSCLC 및 HNSCC 모델에서 단일 제제 활성이 입증되었고, 항-PD-1 제제는 NSCLC 및 HNSCC 환자의 하위집합에서 임상 효능이 입증되었다. 본 발명의 TNO155와 PDR001의 조합물은 동계 MC38 CRC 종양을 보유한 면역능력이 있는 마우스 모델의 치료에서 단일 제제 단독에 비해 개선된 효능을 나타낸다.

본원에 개시된 조합물은 다음 중 하나 이상의 결과를 가져올 수 있다: 항원 제시의 증가, 이펙터 세포 기능(예를 들어, T세포 증식, IFN-γ 분비, 또는 세포용해 기능 중 하나 이상)의 증가, 조절 T세포 기능의 억제, 여러 세포 유형(예를 들어, 조절 T세포, 이펙터 T세포, 및 NK세포)의 활성에 대한 효과, 종양 침윤 림프구의 증가, T세포 수용체 매개 증식의 증가, 암세포에 의한 면역 회피의 감소, 및 발암 활성(예를 들어, 종양유전자의 과발현)의 감소. 일 구현예에서, 조합물에서의 PD-1 억제제의 사용은 PD-1의 하나 이상의 활성을 억제, 감소, 또는 중화시켜, 면역 체크포인트를 차단 또는 감소시킨다. 따라서, 이러한 조합물은 대상체에서 면역 반응의 강화가 요구되는 장애를 치료하거나 예방하는 데 사용될 수 있다.

따라서, 다른 양태에서, 대상체의 면역 반응을 조절하는 방법이 제공된다. 상기 방법은 본원에 개시된 조합물(예를 들어, 본원에 기재된 PD-1 억제제의 치료 유효량을 포함하는 조합물)을 SHP2 억제제와 조합하여, 대상체의 면역 반응이 조절되도록 대상체에게 투여하는 단계를 포함한다. 일 구현예에서, 항체 분자는 대상체의 면역 반응을 강화, 자극, 회복, 또는 증가시킨다. 대상체는 포유동물, 예를 들어 영장류, 바람직하게는 고등 영장류, 예를 들어 인간(예를 들어, 본원에 기재된 장애를 가지고 있거나, 가질 위험이 있는 환자)일 수 있다. 일 구현예에서, 대상체는 면역 반응의 강화를 필요로 한다. 일 구현예에서, 대상체는 본원에 기재된 장애, 예를 들어 본원에 기재된 바와 같은 암 또는 감염성 장애를 가지고 있거나, 가질 위험이 있다. 특정 구현예에서, 대상체는 면역이 손상되어 있거나, 손상될 위험이 있다. 예를 들어, 대상체는 화학요법 치료 및/또는 방사선 요법을 받고 있거나 받은 적이 있다. 대안적으로, 또는 조합하여, 대상체는 감염의 결과로서 면역이 손상되어 있거나, 손상될 위험이 있다.

일 양태에서, 대상체의 암 또는 종양을 치료(예를 들어, 진행의 감소, 억제, 또는 지연 중 하나 이상)하는 방법이 제공된다. 상기 방법은 본원에 개시된 조합물(예를 들어, 본원에 기재된 PD-1 억제제의 치료 유효량을 포함하는 조합물)을 대상체에게 투여하는 단계를 포함한다.

특정 구현예에서, 조합물로 치료되는 암은 고형 종양, 혈액암(예를 들어, 백혈병, 림프종, 골수종, 예를 들어 다발성 골수종) 및 전이성 병변을 포함하나 이에 한정되지 않는다. 일 구현예에서, 암은 고형 종양이다. 고형 종양의 예는 악성종양, 예를 들어 육종 및 암종, 예를 들어 다양한 기관계의 선암종, 예컨대 폐, 유방, 난소, 림프, 위장관(예를 들어 결장), 항문, 생식기, 및 비뇨생식기(예를 들어, 신장, 요로상피, 방광세포, 전립선), 인두, CNS(예를 들어, 뇌, 신경 또는 신경교 세포), 두경부, 피부(예를 들어, 흑색종), 및 췌장에 영향을 미치는 것들, 및 결장암, 직장암, 신장암(예를 들어, 신세포 암종(투명세포 또는 비투명세포 신세포 암종)), 간암, 폐암(예를 들어, 비소세포 폐암(편평 또는 비편평 비소세포 폐암)), 소장암, 및 식도암과 같은 악성종양을 포함하는 선암종을 포함한다. 암은 초기, 중기, 말기 또는 전이성 암일 수 있다.

일부 구현예에서, 암은 진행성 암이다. 일부 구현예에서, 암은 전이성 암이다. 일부 구현예에서, 암은 재발된 암이다. 일부 구현예에서, 암은 난치성 암이다. 일부 구현예에서, 암은 재발성 암이다. 일부 구현예에서, 암은 절제 불가능한 암이다.

일부 구현예에서, 암은 미세부수체 불안정성이 높은(MSI-H) 암이다. 일부 구현예에서, 암은 불일치 복구 결핍(dMMR) 암이다.

일부 구현예에서, 암(예를 들어, 암세포, 암 미세환경, 또는 둘 다)은 PD-L1 발현 수준이 높다. 대안적으로, 또는 조합하여, 암(예를 들어, 암세포, 암 미세환경, 또는 둘 다)은 증가된 IFNγ 및/또는 CD8 발현을 가질 수 있다.

일부 구현예에서, 대상체는 높은 PD-L1 수준 또는 발현 중 하나 이상을 갖는 암, 종양 침윤 림프구(TIL)+인(예를 들어, 증가된 수의 TIL을 갖는) 암, 또는 둘 다에 해당하는 암을 갖거나, 갖는 것으로 식별된다. 특정 구현예에서, 대상체는 PD-L1 수준 또는 발현이 높은, TIL+인 암을 갖거나, 갖는 것으로 식별된다. 일부 구현예에서, 본원에 기재된 방법은 높은 PD-L1 수준 또는 발현 중 하나 이상을 갖는 암, TIL+인 암, 또는 둘 다에 해당하는 암을 갖는 것에 기초하여 대상체를 식별하는 단계를 추가로 포함한다. 특정 구현예에서, 본원에 기재된 방법은 PD-L1 수준 또는 발현이 높은, TIL+인 암을 갖는 것에 기초하여 대상체를 식별하는 단계를 추가로 포함한다. 일부 구현예에서, TIL+인 암은 CD8 및 IFNγ에 대해 양성이다. 일부 구현예에서, 대상체는 PD-L1, CD8, 또는 IFNγ 중 1개, 2개, 또는 그 이상에 대해 양성인 세포의 비율이 높거나, 높은 것으로 식별된다. 특정 구현예에서, 대상체는 PD-L1, CD8, 및 IFNγ 모두에 대해 양성인 세포의 비율이 높거나, 높은 것으로 식별된다.

일부 구현예에서, 본원에 기재된 방법은 PD-L1, CD8, 및/또는 IFNγ 중 1개, 2개, 또는 그 이상에 대해 양성인 세포의 비율이 높은 것에 기초하여 대상체를 식별하는 단계를 추가로 포함한다. 특정 구현예에서, 본원에 기재된 방법은 PD-L1, CD8, 및 IFNγ 모두에 대해 양성인 세포의 비율이 높은 것에 기초하여 대상체를 식별하는 단계를 추가로 포함한다. 일부 구현예에서, 대상체는 PD-L1, CD8, 및/또는 IFNγ 중 1개, 2개, 또는 그 이상, 및 식도암, 난소암, 유방암, 췌장암, 대장암, 피부암, 위암, ER+ 암, 두경부 편평세포 암종, 또는 신세포 암종 중 하나 이상을 갖거나, 갖는 것으로 식별된다. 특정 구현예에서, 본원에 기재된 방법은 PD-L1, CD8, 및/또는 IFNγ 중 1개, 2개, 또는 그 이상, 및 유방암, 췌장암, 대장암, 피부암, 위암, 또는 ER+ 암 중 하나 이상을 갖는 것에 기초하여 대상체를 식별하는 단계를 추가로 포함한다.

본원에 개시된 방법 및 조성물은 상기 언급된 암과 관련된 전이성 병변을 치료하는 데 유용하다.

추가 양태에서, 본 발명은 대상체의 감염성 질환을 치료하는 방법으로서, 본원에 기재된 바와 같은 조합물, 예를 들어 본원에 기재된 PD-1 억제제의 치료 유효량을 포함하는 조합물을 대상체에게 투여하는 단계를 포함하는 방법을 제공한다. 일 구현예에서, 감염성 질환은 간염(예를 들어, C형 간염 감염) 또는 패혈증으로부터 선택된다.

또한, 본 발명은 대상체에서 항원에 대한 면역 반응을 강화하는 방법으로서, (i) 항원; 및 (ii) 본원에 기재된 바와 같은 조합물, 예를 들어 본원에 기재된 PD-1 억제제의 치료 유효량을 포함하는 조합물을, 대상체에서 항원에 대한 면역 반응이 강화되도록 대상체에게 투여하는 단계를 포함하는 방법을 제공한다. 항원은 예를 들어 종양 항원, 바이러스 항원, 박테리아 항원, 또는 병원체의 항원일 수 있다.

본원에 기재된 조합물은 대상체에게 전신적으로(예를 들어, 경구, 비경구, 피하, 정맥내, 직장내, 근육내, 복강내, 비강내, 경피, 또는 흡입 또는 강내 장치에 의해), 국소적으로, 또는 코, 인후, 및 기관지와 같은 점막에 적용하여 투여될 수 있다.

본원에 개시된 치료제의 투여량 및 치료 요법은 결정될 수 있다. 일부 구현예에서, PD-1 억제제는 약 100 mg 내지 600 mg, 예를 들어 약 200 mg 내지 500 mg, 예를 들어 약 250 mg 내지 450 mg, 약 300 mg 내지 400 mg, 약 250 mg 내지 350 mg, 약 350 mg 내지 450 mg, 또는 약 100 mg, 약 200 mg, 약 300 mg, 또는 약 400 mg의 용량(예를 들어, 균일 용량)으로 주사에 의해(예를 들어, 피하 또는 정맥내) 투여된다. 투여 일정(예를 들어, 균일 투여 일정)은 주 1회 내지 2주, 3주, 4주, 5주, 또는 6주마다 1회로 다양할 수 있다. 일 구현예에서, PD-1 억제제는 약 300 mg 내지 400 mg의 용량으로 3주마다 1회 또는 4주마다 1회 투여된다. 일 구현예에서, PD-1 억제제는 약 300 mg의 용량으로 3주마다 1회 투여된다. 일 구현예에서, PD-1 억제제는 약 400 mg의 용량으로 4주마다 1회 투여된다. 일 구현예에서, PD-1 억제제는 약 300 mg의 용량으로 4주마다 1회 투여된다. 일 구현예에서, PD-1 억제제는 약 400 mg의 용량으로 3주마다 1회 투여된다.

표피 성장 인자 수용체(EGFR)는 활성화 EGFR 돌연변이가 있는 NSCLC에서 확립된 중요한 치료용 표적이다. 1세대(예: 에를로티닙, 제피티닙) 및 2세대(예: 아파티닙, 다코미티닙) EGFR 억제제를 이용한 많은 시험이 EGFR-돌연변이 진행성/절제불가 NSCLC 집단에서 수행되었으며, 이 집단에서 화학요법에 비해 EGFR 티로신 키나제 억제제(TKI)의 우수한 효능을 일관되게 보여주었다. 1세대 EGFR TKI에 대한 내성은 MET 및 ERBB2 증폭을 포함한 대체 RTK 경로의 활성화에 의해 발생할 뿐만 아니라, TKI의 결합을 손상시키는 EGFR "게이트키퍼" T790M 돌연변이의 발달을 통해 발생하는 것으로 나타났다. EGFR 활성화 및 게이트키퍼 돌연변이를 억제하는 3세대 비가역 EGFR 억제제(예: 오시머티닙, 로실레티닙)를 이용한 임상 시험은 EGFR T790M-돌연변이 NSCLC에서 효능을 보여주었으며, 이는 EGFR 신호전달에 대한 지속적인 의존성을 강조한다. 3세대 억제제에 내성을 갖게 된 암의 새로운 데이터는 이러한 암이 활성화된 RTK 신호전달을 계속 선택한다는 것을 시사하며, RTK 증폭(MET, ERBB2, FGFR1)뿐만 아니라 EGFR의 내성 돌연변이(C797S)도 설명되었다. 1세대/2세대 및 3세대 EGFR TKI에 내성이 생긴 암이 있는 환자에 대해 이용할 수 있는 치료 옵션은 제한적이다. SHP2는 EGFR 신호전달을 변환하며 전임상 모델에서 RTK 의존성과 SHP2 의존성 사이에 강한 상관관계가 입증되었으므로, 내성이 EGFR 또는 다른 RTK의 신호전달에 의해 유발되는지 여부에 관계없이 TNO155는 이러한 암에서 임상적 이점을 제공할 것으로 예상된다.

두경부암의 90% 이상이 EGFR의 과발현 또는 증폭을 특징으로 하며, 다른 RTK, 특히 FGFR, 및 이들의 리간드의 증폭/과발현도 일반적이다. 진행성 HNSCC에서 세툭시맙을 이용한 EGFR의 억제도 질병 통제가 지속되지는 않지만 임상적 이점이 입증되었다. HNSCC에서 EGFR 억제의 적당한 효능은, TNO155 치료를 통한 SHP2 억제에 의해 저해될 것으로 예상되는, 다른 RTK를 통한 보충적 신호전달과 관련될 수 있다. 또한, 전임상 시험에서 두경부 암세포가 SHP2 억제에 대한 민감도가 가장 높은 계통으로 확인되었다.

역형성 림프종 키나제(ALK)-재배열 NSCLC 또는 줄기세포 인자 수용체(KIT)-돌연변이 위장 기질 종양(GIST)과 같은 전이성 또는 절제 불가능한 RTK-유발 암 환자는 이러한 RTK를 직접 표적화하는 분자로부터 이익을 얻지만, 이러한 제제에 대한 내성은 항상 발생한다. 내성 메커니즘은 흔히 표적 RTK의 약물 내성 돌연변이 및/또는 우회 RTK 경로의 활성화를 포함하며, 대부분의 경우 추가 치료 옵션이 제한된다. TNO155를 이용한 SHP2의 표적화는 이러한 RTK-의존성 암에서 합리적인 접근법이다.

본원에 기재된 데이터는 20 mg/kg BID의 MTD 용량에서 TNO155를 이용한 SHP2의 억제가 TNO155 및 항-PD1 요법에 대해 관찰된 상당한 병용 이점을 갖는 단일 제제로서 항종양 효능을 달성함을 보여준다. 이 조합은 또한 T-reg, TAMII, 및 gMDSC와 같은 억제성 면역 집단의 하위집합을 감소시켰다. 이들 데이터를 종합하면, 동계 마우스 모델에서 TNO155와 항-PD1 요법의 조합이 잠재적으로 면역억제 골수세포와 T-reg 세포의 감소 및 활성화된 세포독성 T세포의 증가의 결과로서 항종양 활성을 발휘함이 입증된다.

약제학적 조성물

다른 양태에서, 본 발명은 약제학적으로 허용되는 하나 이상의 담체(첨가제) 및/또는 희석제와 함께 제형화된, 치료 유효량의 TNO155 및 PD-1 억제제를 포함하는 약제학적으로 허용되는 조성물을 제공한다. 이하 상세히 기재된 바와 같이, 본 발명의 약제학적 조성물은 경구 투여에 적합한 형태, 예를 들어 드렌치(수성 또는 비수성 용액 또는 현탁액), 정제, 예를 들어 협측, 설하, 및 전신 흡수를 대상으로 하는 것, 볼루스, 분말, 과립, 혀에 적용하기 위한 페이스트를 포함한, 고체 또는 액체 형태로 투여하기 위해 특별히 제형화될 수 있다.

본원에서 사용되는 어구 "치료 유효량"은 임의의 의학적 치료에 적용 가능한 합리적인 이익/위험비로 동물의 적어도 세포 하위집단에서 일부 목적하는 치료 효과를 생성하는 데 효과적인, 본 발명의 화합물을 포함하는 화합물, 물질, 또는 조성물의 양을 의미한다.

"약제학적으로 허용되는"이란 어구는 타당한 의학적 판단의 범위 내에서, 합리적인 이익/위험비에 상응하여, 과도한 독성, 자극, 알러지 반응, 또는 다른 문제 또는 합병증 없이 인간 및 동물의 조직과 접촉하여 사용하기에 적합한 화합물, 물질, 조성물, 및/또는 제형을 지칭하기 위해 본원에서 사용된다.

본원에서 사용되는 어구 "약제학적으로 허용되는 담체"는 대상 화합물을 신체의 한 기관 또는 일부에서 신체의 다른 기관 또는 일부로 운반 또는 수송하는 것에 관련된 약제학적으로 허용되는 물질, 조성물, 또는 비히클, 예컨대 액체 또는 고체 충전제, 희석제, 부형제, 제조 보조제(예를 들어, 활택제, 활석 마그네슘, 스테아르산 칼슘 또는 아연, 또는 스테아르산), 또는 용매 캡슐화 재료를 의미한다. 각각의 담체는 제형의 다른 성분과 혼용될 수 있고 환자에게 해롭지 않다는 의미에서 "허용될 수" 있어야 한다. 약제학적으로 허용되는 담체로서 작용할 수 있는 물질의 일부 예는 다음을 포함한다: (1) 당, 예컨대 락토스, 글루코스, 및 수크로스; (2) 전분, 예컨대 옥수수 전분 및 감자 전분; (3) 셀룰로스 및 이의 유도체, 예컨대 카복시메틸 셀룰로스나트륨, 에틸 셀룰로스, 및 아세트산셀룰로스; (4) 분말 트래거캔스; (5) 맥아; (6) 젤라틴; (7) 활석; (8) 부형제, 예컨대 코코아 버터 및 좌약 왁스; (9) 오일, 예컨대 땅콩유, 면실유, 홍화유, 참깨유, 올리브유, 옥수수유, 및 대두유; (10) 글리콜, 예컨대 프로필렌 글리콜; (11) 폴리올, 예컨대 글리세린, 소르비톨, 만니톨, 및 폴리에틸렌 글리콜; (12) 에스테르, 예컨대 에틸 올리에이트 및 에틸 라우레이트; (13) 한천; (14) 완충제, 예컨대 수산화마그네슘 및 수산화알루미늄; (15) 알긴산; (16) 발열원 제거수; (17) 등장성 식염수; (18) 링거액; (19) 에틸 알코올; (20) pH 완충 용액; (21) 폴리에스테르, 폴리카보네이트, 및/또는 폴리무수물; 및 (22) 약제학적 제형에 사용되는 기타 무독성 상용성 물질.

상기 제시한 바와 같이, 본 화합물의 특정 구현예는 아미노 또는 알킬아미노와 같은 염기성 작용기를 함유할 수 있고, 따라서 약제학적으로 허용되는 산과 약제학적으로 허용되는 염을 형성할 수 있다. 이와 관련하여 용어 "약제학적으로 허용되는 염"은 본 발명 화합물의 비교적 무독성인 무기 및 유기 산 부가염을 지칭한다. 이러한 염은 투여 비히클 또는 제형 제조 공정에서 인시튜로 제조되거나, 또는 유리 염기 형태의 본 발명의 정제된 화합물을 적합한 유기 또는 무기산과 별도로 반응시키고 이렇게 형성된 염을 후속 정제 중에 단리시켜 제조될 수 있다. 대표적인 염은 브롬화수소산염, 염산염, 황산염, 중황산염, 인산염, 질산염, 아세트산염, 발레르산염, 올레산염, 팔미트산염, 스테아르산염, 라우르산염, 벤조산염, 락트산염, 인산염, 토실산염, 시트르산염, 말레산염, 푸마르산염, 숙신산염, 타타르산염, 나프틸산염, 메실산염, 글루코헵톤산염, 락토비온산염, 및 라우릴설폰산염 등을 포함한다(예를 들어, 문헌[Berge et al. (1977) "Pharmaceutical Salts", J. Pharm. Sci. 66:1-19] 참조).

대상 화합물의 약제학적으로 허용되는 염은 예를 들어 무독성 유기 또는 무기산에서 유래된, 화합물의 통상적인 무독성 염 또는 4차 암모늄염을 포함한다. 예를 들어, 이러한 통상적인 무독성 염은 염산, 브롬화수소산, 황산, 설팜산, 인산, 질산 등과 같은 무기산에서 유래된 염; 및 아세트산, 프로피온산, 숙신산, 글리콜산, 스테아르산, 락트산, 말산, 타타르산, 시트르산, 아스코르브산, 팔미트산, 말레산, 하이드록시말레산, 페닐아세트산, 글루탐산, 벤조산, 살리실산, 설파닐산, 2-아세톡시벤조산, 푸마르산, 톨루엔설폰산, 메탄설폰산, 에탄 디설폰산, 옥살산, 이소티온산 등과 같은 유기산으로부터 제조된 염을 포함한다. TNO155의 약제학적으로 허용되는 염은 예를 들어 숙신산염이다.

다른 경우에, 본 발명의 화합물은 하나 이상의 산성 작용기를 함유할 수 있고, 따라서 약제학적으로 허용되는 염기와 약제학적으로 허용되는 염을 형성할 수 있다. 이러한 예에서 용어 "약제학적으로 허용되는 염"은 본 발명 화합물의 비교적 무독성인 무기 및 유기 염기 부가염을 지칭한다. 이러한 염은 마찬가지로, 투여 비히클 또는 제형 제조 공정에서 인시튜로 제조되거나, 또는 유리 산 형태의 정제된 화합물을 약제학적으로 허용되는 금속 양이온의 수산화물, 탄산염, 또는 중탄산염과 같은 적합한 염기, 암모니아, 또는 약제학적으로 허용되는 유기 1차, 2차, 또는 3차 아민과 별도로 반응시켜 제조될 수 있다. 대표적인 알칼리 또는 알칼리토류 염은 리튬, 나트륨, 칼륨, 칼슘, 마그네슘, 및 알루미늄 염 등을 포함한다. 염기 부가염의 형성에 유용한 대표적인 유기 아민은 에틸아민, 디에틸아민, 에틸렌디아민, 에탄올아민, 디에탄올아민, 피페라진 등을 포함한다(예를 들어, 상기 Berge 등의 문헌 참조).

습윤제, 유화제, 및 활택제, 예컨대 라우릴황산나트륨 및 스테아르산마그네슘뿐만 아니라 착색제, 이형제, 코팅제, 감미제, 착향제 및 방향제, 보존제 및 항산화제가 또한 조성물에 존재할 수 있다.

약제학적으로 허용되는 항산화제의 예는 다음을 포함한다: (1) 아스코르브산, 시스테인 염산염, 중황산나트륨, 메타중아황산나트륨, 아황산나트륨 등과 같은 수용성 항산화제; (2) 아스코르빌 팔미테이트, 부틸화 하이드록시아니솔(BHA), 부틸화 하이드록시톨루엔(BHT), 레시틴, 프로필 갈레이트, 알파-토코페롤 등과 같은 지용성 항산화제; 및 (3) 시트르산, 에틸렌디아민 테트라아세트산(EDTA), 소르비톨, 타타르산, 인산 등과 같은 금속 킬레이트제.

본 발명의 제형은 경구, 비강, 국소(협측 및 설하를 포함함), 직장, 질, 및/또는 비경구 투여에 적합한 것을 포함한다. 제형은 단위 투약 형태로 편리하게 제공될 수 있고, 약학 분야에 잘 알려진 임의의 방법에 의해 제조될 수 있다. 단일 투약 형태를 생성하기 위해 담체 물질과 조합될 수 있는 활성 성분의 양은 치료되는 숙주, 특정 투여 방식에 따라 달라질 것이다. 단일 투약 형태를 생성하기 위해 담체 물질과 조합될 수 있는 활성 성분의 양은 일반적으로 치료 효과를 생성하는 조성물의 양일 것이다. 일반적으로, 100% 중에서, 이 양은 활성 성분 약 0.1% 내지 약 99%, 바람직하게는 약 5% 내지 약 70%, 가장 바람직하게는 약 10% 내지 약 30%의 범위일 것이다.

특정 구현예에서, 본 발명의 제형은 시클로덱스트린, 셀룰로스, 리포솜, 마이셀 형성제, 예를 들어 담즙산, 및 폴리머 담체, 예를 들어 폴리에스테르 및 폴리무수물로 이루어진 군으로부터 선택되는 부형제; 및 본 발명의 화합물을 포함한다. 특정 구현예에서, 상기 제형은 본 발명의 화합물을 경구 생체이용 가능하게 한다.

이러한 제형 또는 조성물의 제조 방법은 본 발명의 화합물을 담체 및 선택적으로 하나 이상의 보조 성분과 결합시키는 단계를 포함한다. 일반적으로, 제형은 본 발명의 화합물을 액체 담체, 또는 미분 고체 담체, 또는 둘 다와 균일하고 밀접하게 결합시킨 다음, 필요한 경우 생성물을 성형하여 제조된다.

경구 투여에 적합한 본 발명의 제형은 캡슐, 카세제, 환제, 정제, 로젠지(향을 가미한 베이스, 보통 수크로스 및 아카시아 또는 트래거캔스를 사용), 분말, 과립의 형태, 또는 수성 또는 비수성 액체 중의 용액, 현탁액, 또는 고체 분산물, 또는 수중유 또는 유중수 액체 에멀션, 또는 엘릭서 또는 시럽, 또는 파스틸(불활성 베이스, 예컨대 젤라틴 및 글리세린, 또는 수크로스 및 아카시아를 사용), 및/또는 구강 세정액 등일 수 있고, 각각은 활성 성분으로서 소정량의 본 발명의 화합물을 함유한다. 본 발명의 화합물은 또한 볼루스, 연질약, 또는 페이스트로서 투여될 수 있다.

경구 투여를 위한 본 발명의 고체 투약 형태(캡슐, 정제, 환제, 당의정, 분말, 과립, 트로키 등)에서, 활성 성분은 시트르산나트륨 또는 인산이칼슘과 같은 약제학적으로 허용되는 하나 이상의 담체, 및/또는 다음 중 임의의 것과 혼합된다: (1) 전분, 락토스, 수크로스, 글루코스, 만니톨, 및/또는 규산과 같은 충전제 또는 증량제; (2) 예를 들어 카복시메틸셀룰로스, 알긴산염, 젤라틴, 폴리비닐 피롤리돈, 수크로스, 및/또는 아카시아와 같은 결합제; (3) 글리세롤과 같은 보습제; (4) 한천, 탄산칼슘, 감자 또는 타피오카 전분, 알긴산, 특정 규산염, 및 탄산나트륨과 같은 붕해제; (5) 파라핀과 같은 용액 지연제; (6) 4차 암모늄 화합물과 같은 흡수 촉진제 및 폴록사머 및 라우릴황산나트륨과 같은 계면활성제; (7) 예를 들어, 세틸 알코올, 글리세롤 모노스테아레이트, 및 비이온성 계면활성제와 같은 습윤제; (8) 카올린 및 벤토나이트 점토와 같은 흡수제; (9) 활석, 스테아르산칼슘, 스테아르산마그네슘, 고체 폴리에틸렌 글리콜, 라우릴황산나트륨, 스테아르산아연, 스테아르산나트륨, 스테아르산, 및 이들의 혼합물과 같은 활택제; (10) 착색제; 및 (11) 크로스포비돈 또는 에틸 셀룰로스와 같은 방출 조절제. 캡슐, 정제, 및 환제의 경우, 약제학적 조성물은 또한 완충제를 포함할 수 있다. 유사한 유형의 고체 조성물은 또한 락토스 또는 유당뿐만 아니라 고분자량의 폴리에틸렌 글리콜 등과 같은 부형제를 이용하여 연질 및 경질-쉘 젤라틴 캡슐 내의 충전제로서 사용될 수 있다.

정제는 선택적으로 하나 이상의 보조 성분과 함께 압축 또는 성형에 의해 제조될 수 있다. 압축 정제는 결합제(예를 들어, 젤라틴 또는 하이드록시프로필메틸 셀룰로스), 활택제, 불활성 희석제, 보존제, 붕해제(예를 들어, 나트륨 전분 글리콜레이트 또는 가교된 카복시메틸 셀룰로스나트륨), 계면활성제 또는 분산제를 사용하여 제조될 수 있다. 성형 정제는 불활성 액체 희석제로 적신 분말 화합물의 혼합물을 적합한 기계에서 성형함으로써 제조될 수 있다.

당의정, 캡슐, 환제, 및 과립과 같은 본 발명의 약제학적 조성물의 정제, 및 기타 고체 투약 형태는 선택적으로 분할선이 새겨질 수 있거나, 장용 코팅 및 약제학적 제형 분야에서 잘 알려진 다른 코팅과 같은 코팅 및 쉘로 제조될 수 있다. 이들은 또한 목적하는 방출 프로파일, 다른 폴리머 매트릭스, 리포솜, 및/또는 미소구체를 제공하기 위해, 예를 들어 다양한 비율의 하이드록시프로필메틸 셀룰로스를 사용하여 활성 성분의 느린 방출 또는 제어된 방출을 제공하도록 제형화될 수 있다. 이들은 빠른 방출을 위해 제형화, 예를 들어 동결건조될 수 있다. 이들은 예를 들어 박테리아 함유 필터를 통한 여과에 의해 멸균되거나, 또는 사용 직전에 멸균수 또는 일부 다른 멸균 주사용 매질에 용해될 수 있는 멸균 고체 조성물 형태의 멸균제를 혼입함으로써 멸균될 수 있다. 이들 조성물은 또한 선택적으로 불투명화제를 함유할 수 있고, 활성 성분(들)만을 또는 이를 우선적으로 위장관의 특정 부분에서, 필요에 따라 지연된 방식으로 방출하는 조성물일 수 있다. 사용될 수 있는 포매 조성물의 예는 폴리머 물질 및 왁스를 포함한다. 활성 성분은 또한 적절한 경우 상기 부형제 중 하나 이상과 함께 마이크로-캡슐화된 형태일 수 있다.

본 발명의 화합물의 경구 투여를 위한 액체 투약 형태는 약제학적으로 허용되는 에멀션, 마이크로에멀션, 용액, 현탁액, 시럽, 및 엘릭서를 포함한다. 활성 성분 이외에, 액체 투약 형태는 예를 들어 물 또는 기타 용매, 가용화제 및 유화제, 예컨대 에틸 알코올, 이소프로필 알코올, 에틸 카보네이트, 에틸 아세테이트, 벤질 알코올, 벤질 벤조에이트, 프로필렌 글리콜, 1,3-부틸렌 글리콜, 오일(특히, 면실유, 낙화생유, 옥수수유, 배아유, 올리브유, 피마자유 및 참깨유), 글리세롤, 테트라하이드로푸릴 알코올, 폴리에틸렌 글리콜, 및 소르비탄의 지방산 에스테르, 및 이들의 혼합물과 같이 당업계에서 통상적으로 사용되는 불활성 희석제를 함유할 수 있다.

불활성 희석제 이외에, 경구 조성물은 또한 습윤제, 유화제 및 현탁제, 감미제, 착향제, 착색제, 방향제 및 보존제와 같은 보조제를 포함할 수 있다.

현탁액은, 활성 화합물 이외에, 예를 들어 에톡실화 이소스테아릴 알코올, 폴리옥시에틸렌 소르비톨 및 소르비탄 에스테르, 미정질 셀룰로스, 메타수산화알루미늄, 벤토나이트, 한천 및 트래거캔스, 및 이들의 혼합물과 같은 현탁제를 함유할 수 있다.

본 발명의 약제학적 조성물에 사용될 수 있는 적합한 수성 및 비수성 담체의 예는 물, 에탄올, 폴리올(예컨대 글리세롤, 프로필렌 글리콜, 폴리에틸렌 글리콜 등), 및 이들의 적합한 혼합물, 식물성 오일, 예컨대 올리브 오일, 및 주사용 유기 에스테르, 예컨대 에틸 올리에이트를 포함한다. 적절한 유동성은 예를 들어 레시틴과 같은 코팅 물질의 사용에 의해, 분산액의 경우에는 요구되는 입자 크기의 유지에 의해, 그리고 계면활성제의 사용에 의해 유지될 수 있다.

이들 조성물은 또한 보존제, 습윤제, 유화제, 및 분산제와 같은 보조제를 함유할 수 있다. 대상 화합물에 대한 미생물 작용의 예방은 다양한 항균제 및 항진균제, 예를 들어 파라벤, 클로로부탄올, 페놀 소르브산 등을 포함함으로써 보장될 수 있다. 또한 당, 염화나트륨 등과 같은 등장화제를 조성물에 포함시키는 것이 바람직할 수 있다.

본 발명의 화합물이 인간 및 동물에게 의약품으로서 투여될 때, 이들은 그 자체로 제공되거나 또는 약제학적으로 허용되는 담체와 조합하여, 예를 들어 0.1 내지 99%(더 바람직하게는, 10 내지 30%)의 활성 성분을 함유하는 약제학적 조성물로서 제공될 수 있다.

적합한 수화된 형태로 사용될 수 있는 본 발명의 화합물, 및/또는 본 발명의 약제학적 조성물은 당업자에게 알려진 통상적인 방법에 의해 약제학적으로 허용되는 투약 형태로 제형화된다.

본 발명의 약제학적 조성물 중의 활성 성분의 실제 투여량 수준은 환자에게 독성 없이 특정 환자, 조성물, 및 투여 방식에 대해 원하는 치료 반응을 달성하는 데 효과적인 활성 성분의 양을 얻도록 달라질 수 있다.

선택된 투여량 수준은 사용된 본 발명의 특정 화합물, 또는 이의 에스테르, 염 또는 아미드의 활성, 투여 경로, 투여 시간, 사용되는 특정 화합물의 배출 또는 대사 속도, 흡수 속도 및 정도, 치료 기간, 사용되는 특정 조성물과 조합하여 사용되는 다른 약물, 화합물 및/또는 물질, 치료받는 환자의 연령, 성별, 체중, 상태, 일반적인 건강 및 이전 병력, 및 의학 분야에 잘 알려진 유사 인자를 포함하는 다양한 인자에 따라 달라질 것이다.

당해 분야에서 통상의 기술을 가진 의사 또는 수의사는 필요한 약제학적 조성물의 유효량을 쉽게 결정하고 처방할 수 있다. 예를 들어, 의사 또는 수의사는 목적하는 치료 효과를 달성하기 위해 필요한 것보다 낮은 수준으로 약제학적 조성물에 사용된 본 발명 화합물의 투여량에서 시작하여 목적하는 효과가 달성될 때까지 투여량을 점진적으로 증가시킬 수 있다.

일반적으로, 본 발명의 조합물의 적합한 1일 용량은 치료 효과를 생성하는 데 효과적인 최저 용량인 각 화합물의 양일 것이다. 이러한 유효 용량은 일반적으로 상기 기술된 요인에 따라 달라질 것이다.

다른 양태에서, 본 발명은 약제학적으로 허용되는 하나 이상의 담체(첨가제) 및/또는 희석제와 함께 제형화된, 상기 기재된 바와 같은 대상 화합물 중 하나 이상의 치료 유효량을 포함하는 약제학적으로 허용되는 조성물을 제공한다.

실시예

TNO155 및 PDR001

(3S,4S)-8-(6-아미노-5-((2-아미노-3-클로로피리딘-4-일)티오)피라진-2-일)-3-메틸-2-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸-4-아민(TNO155)은 WO2015/107495의 실시예 69에 따라 합성된다. PDR001(스파탈리주맙)은 2015년 7월 30일에 공개된 US 2015/0210769(발명의 명칭: "Antibody Molecules to PD-1 and Uses Thereof")에 기재된 벡터, 숙주 세포, 및 방법에 의해 상술되고 제조될 수 있다. US 2015/0210769 및 WO2015/107495는 모두 그 전체가 참조로 포함된다.

본원에 기재된 TNO155 및 PDR001의 유용성은 하기 실시예의 시험에 의해 입증될 수 있다.

실시예 1

암컷 C57BL/6 마우스에서 각 마우스(n=10/그룹)의 오른쪽 옆구리 피하 공간에 50% Matrigel^® 중의 100만개 세포를 주사하여 MC-38 종양을 확립하였다. 이식 6일 후, 도 1에 표시된 용량 수준 및 일정으로 시험 제제를 투여하였다. 치료 그룹의 종양 부피 대 이식 후 일수가 그래프로 표시되어 있다. 통계적 유의성은 이식 후 20일째에 Turkey 검정에 따라 Kruskal-Wallis 일원배치 분산분석 및 전체-대응표본 다중 비교를 이용해 계산되었다(p ≤ 0.05; p ≤ 0.01).

면역이 손상된 NOD scid 감마(NSG) 또는 면역이 손상되지 않은(C57BL/6) 마우스에 이식된 동계 대장암 마우스 모델 MC38에서 마우스 항-PD1 항체인 클론 1D2를 이용해 단일 제제 및 조합 항종양 활성에 대해 TNO155를 평가하였다. MC38 세포에는 TNO155에 의한 SHP2의 억제를 방지하는 PTPN11 G503V 돌연변이가 있으므로, 이를 통해 종양에 대한 TNO155 면역조절 효과를 직접 조사할 수 있다. 어떤 면역세포도 없는 상태에서 MC38 세포주에서 시험관내 평가된 TNO155는 세포 증식 또는 생존력에 영향을 미치지 않는 것으로 나타났다. 유사하게, 면역이 손상된 NSG 마우스에 이식된 MC38 이종이식편에서, 1일 2회(BID) 20 mg/kg의 TNO155 투여시 항종양 활성의 결여가 관찰되었다. G503V 돌연변이의 존재로 인해, TNO155는 종양세포의 하류 MAPK-신호전달 마커, 예컨대 포스포-ERK 및 포스포-RSK에 영향을 미치지 않았다.

그러나, MC38 세포주를 면역능력이 있는 C57BL/6 마우스에 이식하고 마우스를 매일 20 mg/kg BID의 TNO155로 처치했을 때, 유의한 항종양 활성이 관찰되었다(33% 치료/대조군(T/C), 첫 번째 투여 후 14일째). 주 1회(QW) 10 mg/kg의 마우스 항-PD1 항체로 처치한 경우도 유의한 항종양 성장 억제를 달성했다(68.9% T/C, 첫 번째 투여 후 14일째). 단일 제제 TNO155 및 항-PD1 항체 치료 그룹과 비교할 때 TNO155(20 mg/kg BID)와 항-PD1 항체(10 mg/kg, QW)의 조합이 효능에서 유의한 개선을 나타냈음(2.1% T/C, 첫 번째 투여 후 14일째)을 보여주는 도 1 참조.

실시예 2

MC38 모델에서 효능의 메커니즘을 추가로 조사하기 위해, 치료 7일째 모든 치료 그룹의 이종이식편에 대해 면역표현형 분석을 수행하였다. 암컷 C57BL/6 마우스에서 각 마우스(n=6/그룹)의 오른쪽 옆구리 피하 공간에 50% Matrigel® 중의 100만개 세포를 주사하여 MC-38 종양을 확립하였다. 이식 7일 후, 시험 제제를 TNO155 = 20 mg/kg BID; 및 마우스 항-PD1(1D2 클론) = 10 mg/kg QW로 투여하였다. 종양을 채취하고, 효소 분해에 의해 단일 세포들로 분리하였다. 림프구 및 골수 표현형 모두와 관련된 마커에 대해 세포를 염색하고 유세포 분석으로 분석하였다. 표현형 마커는 세포독성 CD8+ T세포 및 억제 조절인자 T세포(Treg)의 림프구 집단 이외에 2개의 억제 골수 집단인 과립구 MDSC 및 종양 관련 제2형 대식세포에 대해 표시되어 있다(도 2 참조). 집단에 대한 총 CD45+ 세포의 백분율±SEM이 표시되어 있다. 일원배치 분산분석 대응표본 비교(p<0.05).

도 2 참조. 유세포 분석 결과, TNO155와 항-PD1의 조합이 종양에서 과립구 골수 유래 억제 세포(gMDSC: Ly6G+, Ly6C+, C11b+, F4/80+), 종양 관련 제2형 대식세포(TAMII: Ly6G-, Ly6C+, CD11b+, F4/80+, MHCII-)의 T세포 억제 집단의 강력한 감소, 및 세포독성 CD8+ T세포(CD8+: CD45+, CD3+, CD8+)의 증가를 나타내는 것으로 나타났다. 면역억제성 면역세포의 감소에 따라, TNO155와 항-PD1 병용 그룹에서도 억제 T세포 집단(Treg: CD45+, CD4+, CD25+, FoxP3+)의 유의한 감소가 관찰되었다.

이들 데이터는 동계 마우스 모델에서 TNO155와 항-PD1 요법의 조합이 면역억제 골수세포와 T세포의 감소 및 활성화된 T세포의 증가의 결과로서 항종양 활성을 발휘함을 보여준다.

실시예 3

M-CSF 자극 CD14+ 단핵구 증식에 대한 TNO155의 효과 조사. CPT 튜브에서 1800 rpm으로 20분 동안 회전시켜 두 공여체(공여체 1670 및 E423)의 전혈로부터 말초 혈액 단핵 세포(PBMC)를 분리하였다. 이어서, 인간 Pan 단핵구 분리 키트(Miltenyi Biotec # 130-096-537)를 사용하여 PBMC로부터 CD14 양성 단핵구를 분리하였다. 100 μL RPMI 배지에 현탁된 5000개의 단핵구를 50 ng/mL의 재조합 M-CSF가 포함된 96웰 플레이트에 접종하였다. 24시간 후, TNO155를 표시된 최종 농도로 첨가하였다. 동일하게 접종된 세포가 포함된 별도의 플레이트를 사용하여 제조업체의 지침에 따라 CellTiter-Glo^®(CTG) 세포 생존력 분석을 수행하였고, TNO155와 함께 6일 동안 인큐베이션한 후 모든 플레이트에 대해서도 수행하였다. M-CSF 자극 단핵구 증식에 대한 TNO155 효과를 평가하기 위해 6일차 측정을 DMSO 처치 그룹으로 100%로서 정규화하고, 0일차 세포 접종 측정을 밝은 점선으로 표시하였다.

이 데이터는 TNO155가 종양에서 M-CSF 리간드에 노출된 후 종양 미세환경의 단핵구가 면역억제 대식세포로 변환되는 것을 차단할 수 있으며, 종양에서 소진된 T세포를 소생시키는 PD1 표적화 제제와 상승 작용을 한다는 것을 보여준다.

제시된 데이터는 종양의 면역 조절에서의 SHP2 역할에 대한 생체내 증거를 제공한다. MC38 내 PTPN11-G503V 돌연변이의 존재는 특히 종양 미세환경 내에서 TNO155의 효과를 조사하기 위한 훌륭한 도구이다. G503V 돌연변이와 같은 활성화 돌연변이가 SHP2 단백질을 개방 형태로 유지하여 TNO155의 알로스테릭 결합을 위한 결합 포켓의 존재를 방지하는 JMML 및 누난 증후군 환자에서 인간 SHP2의 유사한 돌연변이가 존재하는 것으로 밝혀졌다. 면역이 손상된 마우스에서 생체내 이러한 돌연변이의 존재는 효능 및 하류 MAPK 경로 억제의 결여를 초래하며, 이는 MC38 모델에서 이러한 SHP2 돌연변이가 TNO155의 종양 고유 효능을 방지한다는 추가 증거를 제공한다. 본 발명자들은 20 mg/kg BID의 MTD 용량에서 TNO155를 이용한 SHP2의 억제가 TNO155 및 항-PD1 요법에 대해 관찰된 상당한 병용 이점을 갖는 단일 제제로서 항종양 효능을 달성함을 보여준다. 이 조합은 또한 T-reg, TAMII, 및 gMDSC와 같은 억제성 면역 집단의 하위집합을 감소시켰다. 이들 데이터를 종합하면, 동계 마우스 모델에서 TNO155와 항-PD1 요법의 조합이 잠재적으로 면역억제 골수세포와 T-reg 세포의 감소 및 활성화된 세포독성 T세포의 증가의 결과로서 항종양 활성을 발휘함이 입증된다.

실시예 4

스파탈리주맙과 조합된 TNO155의 초기 요법은 인간을 대상으로 한 최초 TNO155 연구인 CTNO155X2101의 데이터를 기반으로 한다. 처음에, TNO155는 21일 주기(20 mg QD로 시작) 기반의 2주 투약/1주 휴약 방식으로 매일(QD) 투여된다. 스파탈리주맙은 21 주기로 3주마다 300 mg이 투여된다. 임상 시험 프로토콜 CTNO155B12101에서, 진행성 EGFR WT, ALK WT, KRAS G12C, 및 KRAS WT NSCLC 환자를 진행성 HNSCC 환자와 함께 연구한다(이전 면역 종양 요법에 +/- 경험이 없음).

다음 그룹 중 하나에 해당하는 진행성 고형 종양(평가 가능한 질환 포함)이 있는 환자가 치료를 받는다: i) 백금 함유 병용 화학요법의 진행 후이거나 이러한 화학요법에 불내약성인 진행성 EGFR WT, ALK WT NSCLC; ii) 백금 함유 병용 요법의 진행 후이거나 이러한 요법에 불내약성인 진행성 HNSCC 또는 식도 SCC; iii) 임상진료 지침에 따른 표준 치료(SOC) 요법의 진행 후이거나 이러한 요법에 불내성인 진행성 CRC. 용량 확장은 다음 그룹 중 하나에 해당하는, 적어도 하나의 측정 가능한 병변이 있는 진행성 고형 종양 환자를 치료한다: i) 백금 함유 병용 화학요법의 진행 후이거나 이러한 요법에 불내약성이고 항-PD-1 또는 항-PD-L1 요법의 진행 후인, 종양 PD-L1이 1% 이상인 진행성 EGFR WT, ALK WT, KRAS G12C NSCLC; ii) 백금 함유 병용 화학요법의 진행 후이거나 이러한 요법에 불내약성이고 항-PD-1 또는 항-PD-L1 요법의 진행 후인, 종양 PD-L1이 1% 이상인 진행성 EGFR WT, ALK WT, KRAS WT NSCLC; iii) 백금 함유 병용 화학요법의 진행 후이거나 이러한 요법에 불내약성인 진행성 HNSCC.

이전에 보조 환경에서 방사선요법으로 치료를 받았고, 전이 환경에서 도세탁셀, 시스플라틴, 및 플루오로우라실을 투여받은 HNSCC 환자는 부분 반응(1개월 동안 지속되는 화학요법에 대한 최상의 반응)을 경험했다. TNO155 20 mg QD 2주 투약/1주 휴약 + 스파탈리주맙 300 mg Q3W로 치료받은 동일한 HNSCC 환자의 예비 데이터는 두 번째 종양 평가에서 미확인 부분 반응을 보였다(기준선으로부터 -30.6% 감소).

본 명세서에 기재된 실시예 및 구현예는 단지 예시의 목적을 위한 것이고, 이에 비추어 다양한 변형 또는 변경이 당업자에게 제안될 것이며, 이러한 변형 또는 변경은 본 출원의 사상과 범위 및 첨부된 청구범위의 범위 내에 포함되는 것으로 이해된다.

SEQUENCE LISTING <110> NOVARTIS AG <120> PHARMACEUTICAL COMBINATION COMPRISING TNO155 AND A PD-1 INHIBITOR <130> PAT058373-WO-PCT <140> <141> <150> 62/804,707 <151> 2019-02-12 <160> 541 <170> PatentIn version 3.5 <210> 1 <400> 1 000 <210> 2 <400> 2 000 <210> 3 <400> 3 000 <210> 4 <400> 4 000 <210> 5 <400> 5 000 <210> 6 <400> 6 000 <210> 7 <400> 7 000 <210> 8 <400> 8 000 <210> 9 <400> 9 000 <210> 10 <400> 10 000 <210> 11 <400> 11 000 <210> 12 <400> 12 000 <210> 13 <400> 13 000 <210> 14 <400> 14 000 <210> 15 <400> 15 000 <210> 16 <400> 16 000 <210> 17 <400> 17 000 <210> 18 <400> 18 000 <210> 19 <400> 19 000 <210> 20 <400> 20 000 <210> 21 <400> 21 000 <210> 22 <400> 22 000 <210> 23 <400> 23 000 <210> 24 <400> 24 000 <210> 25 <400> 25 000 <210> 26 <400> 26 000 <210> 27 <400> 27 000 <210> 28 <400> 28 000 <210> 29 <400> 29 000 <210> 30 <400> 30 000 <210> 31 <400> 31 000 <210> 32 <400> 32 000 <210> 33 <400> 33 000 <210> 34 <400> 34 000 <210> 35 <400> 35 000 <210> 36 <400> 36 000 <210> 37 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gatgggtaat atctaccccg gcaccggcgg ctctaacttc 180 gacgagaagt ttaagaatag agtgactatc accgccgata agtctactag caccgcctat 240 atggaactgt ctagcctgag atcagaggac accgccgtct actactgcac taggtggact 300 accggcacag gcgcctactg gggtcaaggc actaccgtga ccgtgtctag c 351 <210> 508 <211> 443 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <221> source <223> /note="Description of Artificial Sequence: Synthetic polypeptide" <400> 508 Glu Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Glu 1 5 10 15 Ser Leu Arg Ile Ser Cys Lys Gly Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Thr Tyr 20 25 30 Trp Met His Trp Val Arg Gln Ala Thr Gly Gln Gly Leu Glu Trp Met 35 40 45 Gly Asn Ile Tyr Pro Gly Thr Gly Gly Ser Asn Phe Asp Glu Lys Phe 50 55 60 Lys Asn Arg Val Thr Ile Thr Ala Asp Lys Ser Thr Ser Thr Ala Tyr 65 70 75 80 Met Glu Leu Ser Ser Leu Arg Ser Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys 85 90 95 Thr Arg Trp Thr Thr Gly Thr Gly Ala Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Thr 100 105 110 Val Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu 115 120 125 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Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Gln 340 345 350 Glu Glu Met Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly 355 360 365 Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro 370 375 380 Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser 385 390 395 400 Phe Phe Leu Tyr Ser Arg Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Glu 405 410 415 Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His 420 425 430 Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Leu Gly 435 440 <210> 509 <211> 1329 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <221> source <223> /note="Description of Artificial Sequence: Synthetic polynucleotide" <400> 509 gaggtgcagc tggtgcagtc aggcgccgaa gtgaagaagc ccggcgagtc actgagaatt 60 agctgtaaag gttcaggcta caccttcact acctactgga tgcactgggt ccgccaggct 120 accggtcaag gcctcgagtg gatgggtaat atctaccccg gcaccggcgg ctctaacttc 180 gacgagaagt ttaagaatag agtgactatc accgccgata agtctactag caccgcctat 240 atggaactgt ctagcctgag atcagaggac accgccgtct actactgcac taggtggact 300 accggcacag gcgcctactg gggtcaaggc actaccgtga ccgtgtctag cgctagcact 360 aagggcccgt ccgtgttccc cctggcacct tgtagccgga gcactagcga atccaccgct 420 gccctcggct gcctggtcaa ggattacttc ccggagcccg tgaccgtgtc ctggaacagc 480 ggagccctga cctccggagt gcacaccttc cccgctgtgc tgcagagctc cgggctgtac 540 tcgctgtcgt cggtggtcac ggtgccttca tctagcctgg gtaccaagac ctacacttgc 600 aacgtggacc acaagccttc caacactaag gtggacaagc gcgtcgaatc gaagtacggc 660 ccaccgtgcc cgccttgtcc cgcgccggag ttcctcggcg gtccctcggt ctttctgttc 720 ccaccgaagc ccaaggacac tttgatgatt tcccgcaccc ctgaagtgac atgcgtggtc 780 gtggacgtgt cacaggaaga tccggaggtg cagttcaatt ggtacgtgga tggcgtcgag 840 gtgcacaacg ccaaaaccaa gccgagggag gagcagttca actccactta ccgcgtcgtg 900 tccgtgctga cggtgctgca tcaggactgg ctgaacggga aggagtacaa gtgcaaagtg 960 tccaacaagg gacttcctag ctcaatcgaa aagaccatct cgaaagccaa gggacagccc 1020 cgggaacccc aagtgtatac cctgccaccg agccaggaag aaatgactaa gaaccaagtc 1080 tcattgactt gccttgtgaa gggcttctac ccatcggata tcgccgtgga atgggagtcc 1140 aacggccagc cggaaaacaa ctacaagacc acccctccgg tgctggactc agacggatcc 1200 ttcttcctct actcgcggct gaccgtggat aagagcagat ggcaggaggg aaatgtgttc 1260 agctgttctg tgatgcatga agccctgcac aaccactaca ctcagaagtc cctgtccctc 1320 tccctggga 1329 <210> 510 <211> 17 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <221> source <223> /note="Description of Artificial Sequence: Synthetic peptide" <400> 510 Lys Ser Ser Gln Ser Leu Leu Asp Ser Gly Asn Gln Lys Asn Phe Leu 1 5 10 15 Thr <210> 511 <211> 7 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <221> source <223> /note="Description of Artificial Sequence: Synthetic peptide" <400> 511 Trp Ala Ser Thr Arg Glu Ser 1 5 <210> 512 <211> 9 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <221> source <223> /note="Description of Artificial Sequence: Synthetic peptide" <400> 512 Gln Asn Asp Tyr Ser Tyr Pro Tyr Thr 1 5 <210> 513 <211> 13 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <221> source <223> /note="Description of Artificial Sequence: Synthetic peptide" <400> 513 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Gly Lys 35 40 45 Ala Pro Lys Leu Leu Ile Tyr Trp Ala Ser Thr Arg Glu Ser Gly Val 50 55 60 Pro Ser Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Phe Thr 65 70 75 80 Ile Ser Ser Leu Gln Pro Glu Asp Ile Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Asn 85 90 95 Asp Tyr Ser Tyr Pro Tyr Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Val Glu Ile 100 105 110 Lys Arg Thr Val Ala Ala Pro Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro Ser Asp 115 120 125 Glu Gln Leu Lys Ser Gly Thr Ala Ser Val Val Cys Leu Leu Asn Asn 130 135 140 Phe Tyr Pro Arg Glu Ala Lys Val Gln Trp Lys Val Asp Asn Ala Leu 145 150 155 160 Gln Ser Gly Asn Ser Gln Glu Ser Val Thr Glu Gln Asp Ser Lys Asp 165 170 175 Ser Thr Tyr Ser Leu Ser Ser Thr Leu Thr Leu Ser Lys Ala Asp Tyr 180 185 190 Glu Lys His Lys Val Tyr Ala Cys Glu Val Thr His Gln Gly Leu Ser 195 200 205 Ser Pro Val Thr Lys Ser Phe Asn Arg Gly Glu Cys 210 215 220 <210> 519 <211> 660 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <221> source <223> /note="Description of Artificial Sequence: Synthetic polynucleotide" <400> 519 gagatcgtcc tgactcagtc acccgctacc ctgagcctga gccctggcga gcgggctaca 60 ctgagctgta aatctagtca gtcactgctg gatagcggta atcagaagaa cttcctgacc 120 tggtatcagc agaagcccgg taaagcccct aagctgctga tctactgggc ctctactaga 180 gaatcaggcg tgccctctag gtttagcggt agcggtagtg gcaccgactt caccttcact 240 atctctagcc tgcagcccga ggatatcgct acctactact gtcagaacga ctatagctac 300 ccctacacct tcggtcaagg cactaaggtc gagattaagc gtacggtggc cgctcccagc 360 gtgttcatct tcccccccag cgacgagcag ctgaagagcg gcaccgccag cgtggtgtgc 420 ctgctgaaca acttctaccc ccgggaggcc aaggtgcagt ggaaggtgga caacgccctg 480 cagagcggca acagccagga gagcgtcacc gagcaggaca gcaaggactc cacctacagc 540 ctgagcagca ccctgaccct gagcaaggcc gactacgaga agcataaggt gtacgcctgc 600 gaggtgaccc accagggcct gtccagcccc gtgaccaaga gcttcaacag gggcgagtgc 660 <210> 520 <211> 113 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <221> source <223> /note="Description of Artificial Sequence: Synthetic polypeptide" <400> 520 Glu Ile Val Leu Thr Gln Ser Pro Ala Thr Leu Ser Leu Ser Pro Gly 1 5 10 15 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Ser Leu Ser Ser Thr Leu Thr Leu Ser Lys Ala Asp Tyr 180 185 190 Glu Lys His Lys Val Tyr Ala Cys Glu Val Thr His Gln Gly Leu Ser 195 200 205 Ser Pro Val Thr Lys Ser Phe Asn Arg Gly Glu Cys 210 215 220 <210> 523 <211> 660 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <221> source <223> /note="Description of Artificial Sequence: Synthetic polynucleotide" <400> 523 gagatcgtcc tgactcagtc acccgctacc ctgagcctga gccctggcga gcgggctaca 60 ctgagctgta aatctagtca gtcactgctg gatagcggta atcagaagaa cttcctgacc 120 tggtatcagc agaagcccgg tcaagcccct agactgctga tctactgggc ctctactaga 180 gaatcaggcg tgccctctag gtttagcggt agcggtagtg gcaccgactt caccttcact 240 atctctagcc tggaagccga ggacgccgct acctactact gtcagaacga ctatagctac 300 ccctacacct tcggtcaagg cactaaggtc gagattaagc gtacggtggc cgctcccagc 360 gtgttcatct tcccccccag cgacgagcag ctgaagagcg gcaccgccag cgtggtgtgc 420 ctgctgaaca acttctaccc ccgggaggcc aaggtgcagt ggaaggtgga caacgccctg 480 cagagcggca acagccagga gagcgtcacc gagcaggaca gcaaggactc cacctacagc 540 ctgagcagca ccctgaccct gagcaaggcc gactacgaga agcataaggt gtacgcctgc 600 gaggtgaccc accagggcct gtccagcccc gtgaccaaga gcttcaacag gggcgagtgc 660 <210> 524 <211> 15 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <221> source <223> /note="Description of Artificial Sequence: Synthetic oligonucleotide" <400> 524 acctactgga tgcac 15 <210> 525 <211> 51 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <221> source <223> /note="Description of Artificial Sequence: Synthetic oligonucleotide" <400> 525 aatatctacc ccggcaccgg cggctctaac ttcgacgaga agtttaagaa t 51 <210> 526 <211> 24 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <221> source <223> /note="Description of Artificial Sequence: Synthetic oligonucleotide" <400> 526 tggactaccg gcacaggcgc ctac 24 <210> 527 <211> 21 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <221> source <223> /note="Description of Artificial Sequence: Synthetic oligonucleotide" <400> 527 ggctacacct tcactaccta c 21 <210> 528 <211> 18 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <221> source <223> 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Claims

암 치료를 필요로 하는 대상체에게 (3S,4S)-8-(6-아미노-5-((2-아미노-3-클로로피리딘-4-일)티오)피라진-2-일)-3-메틸-2-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸-4-아민 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염을 제2 치료제와 조합하여 투여하는 단계를 포함하는 암 치료 방법.
제1항에 있어서, 암은 식도 편평세포 암종, 두경부 편평세포 암종, 대장암, 난소암, 췌장암, 비소세포 폐암, 및 신세포 암종으로부터 선택되는, 방법.
제1항 또는 제2항에 있어서, (3S,4S)-8-(6-아미노-5-((2-아미노-3-클로로피리딘-4-일)티오)피라진-2-일)-3-메틸-2-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸-4-아민 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염, 및 제2 치료제는 동시에, 개별적으로, 또는 일정 기간에 걸쳐 투여되는, 방법.
제1항 내지 제3항 중 어느 한 항에 있어서, 암 치료를 필요로 하는 대상체에게 투여되는 (3S,4S)-8-(6-아미노-5-((2-아미노-3-클로로피리딘-4-일)티오)피라진-2-일)-3-메틸-2-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸-4-아민 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염의 양은 암을 치료하는 데 효과적인, 방법.
제1항 내지 제4항 중 어느 한 항에 있어서, 암 치료를 필요로 하는 대상체에게 투여되는 (3S,4S)-8-(6-아미노-5-((2-아미노-3-클로로피리딘-4-일)티오)피라진-2-일)-3-메틸-2-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸-4-아민 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염, 및 제2 치료제의 양은 암을 치료하는 데 효과적인, 방법.
제1항 내지 제5항 중 어느 한 항에 있어서, 제2 치료제는 면역조절제인, 방법.
제6항에 있어서, 제2 치료제는 면역 체크포인트 억제제인, 방법.
제7항에 있어서, 제2 치료제는 PD-1 억제제인, 방법.
제8항에 있어서, PD-1 억제제는 PDR001, 니볼루맙, 펨브롤리주맙, 피딜리주맙, MEDI0680, REGN2810, TSR-042, PF-06801591, BGB-A317, BGB-108, INCSHR1210, 또는 AMP-224로부터 선택되는 방법.
제9항에 있어서, PD-1 억제제는 PDR001인, 방법.
제1항 내지 제10항 중 어느 한 항에 있어서, (3S,4S)-8-(6-아미노-5-((2-아미노-3-클로로피리딘-4-일)티오)피라진-2-일)-3-메틸-2-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸-4-아민 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염은 약 1.5 mg/일, 또는 3 mg/일, 또는 6 mg/일, 또는 10 mg/일, 또는 20 mg/일, 또는 30 mg/일, 또는 40 mg/일, 또는 50 mg/일, 또는 60 mg/일, 또는 70 mg/일, 또는 80 mg/일, 또는 90 mg/일, 또는 100 mg/일의 용량으로 경구 투여되는, 방법.
제11항에 있어서, 1일 용량은 2주 투약에 이은 1주 휴약의 21일 주기를 기반으로 하는, 방법.
제11항에 있어서, PDR001은 약 300 mg의 용량으로 3주마다 1회 투여되는, 방법.
제11항에 있어서, PDR001은 약 400 mg의 용량으로 4주마다 1회 투여되는, 방법.
암 치료를 필요로 하는 환자에게 (3S,4S)-8-(6-아미노-5-((2-아미노-3-클로로피리딘-4-일)티오)피라진-2-일)-3-메틸-2-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸-4-아민 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염을 약 1.5 mg/일, 또는 3 mg/일, 또는 6 mg/일, 또는 10 mg/일, 또는 20 mg/일, 또는 30 mg/일, 또는 40 mg/일, 또는 50 mg/일, 또는 60 mg/일, 또는 70 mg/일, 또는 80 mg/일, 또는 90 mg/일, 또는 100 mg/일의 용량으로 경구 투여하는 단계를 포함하는 암 치료 방법.
제15항에 있어서, 1일 용량은 2주 투약에 이은 1주 휴약의 21일 주기를 기반으로 하는, 방법.
제15항에 있어서, 암은 식도 편평세포 암종, 두경부 편평세포 암종, 대장암, 난소암, 췌장암, 비소세포 폐암, 및 신세포 암종으로부터 선택되는, 방법.
제15항에 있어서, 제2 치료제를 추가로 포함하는 방법.
제18항에 있어서, (3S,4S)-8-(6-아미노-5-((2-아미노-3-클로로피리딘-4-일)티오)피라진-2-일)-3-메틸-2-옥사-8-아자스피로[4.5]데칸-4-아민 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염, 및 제2 치료제는 동시에, 개별적으로, 또는 일정 기간에 걸쳐 투여되는, 방법.
제15항 내지 제18항 중 어느 한 항에 있어서, 제2 치료제는 면역조절제인, 방법.
제20항에 있어서, 제2 치료제는 면역 체크포인트 억제제인, 방법.
제21항에 있어서, 제2 치료제는 PD-1 억제제인, 방법.
제22항에 있어서, PD-1 억제제는 PDR001, 니볼루맙, 펨브롤리주맙, 피딜리주맙, MEDI0680, REGN2810, TSR-042, PF-06801591, BGB-A317, BGB-108, INCSHR1210, 또는 AMP-224로부터 선택되는 방법.
제23항에 있어서, PD-1 억제제는 PDR001인, 방법.
제24항에 있어서, PDR001은 약 300 mg의 용량으로 3주마다 1회 투여되는, 방법.
제24항에 있어서, PDR001은 약 400 mg의 용량으로 4주마다 1회 투여되는, 방법.
제21항 내지 제26항 중 어느 한 항에 있어서, 제2 치료제는 정맥내 투여되는, 방법.