KR20210067850A - 고초균, 당류 및 미네랄의 혼합물을 유효성분으로 함유하는 송아지의 설사 예방용 사료 첨가제 및 이의 용도 - Google Patents

고초균, 당류 및 미네랄의 혼합물을 유효성분으로 함유하는 송아지의 설사 예방용 사료 첨가제 및 이의 용도 Download PDF

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조성호
박해석
문정숙
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재단법인 발효미생물산업진흥원
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Abstract

본 발명은 고초균, 당류 및 미네랄의 혼합물을 유효성분으로 함유하는 송아지의 설사 예방용 사료 첨가제 및 이의 용도에 관한 것으로, 본 발명은 송아지의 설사 예방 효과가 우수한, 고초균, 당류 및 미네랄의 혼합물을 사료 첨가제로 제공함으로써, 항생제 오남용을 방지할 수 있으며 설사로 인한 송아지의 성장지연 및 폐사를 최소화할 수 있으므로, 축산업 관련 분야에 매우 유용하게 활용될 수 있다.

Description

고초균, 당류 및 미네랄의 혼합물을 유효성분으로 함유하는 송아지의 설사 예방용 사료 첨가제 및 이의 용도{Feed additive for preventing diarrhea of calf comprising mixture of Bacillus subtilis, saccharide and mineral as effective component and uses thereof}
본 발명은 고초균, 당류 및 미네랄의 혼합물을 유효성분으로 함유하는 송아지의 설사 예방용 사료 첨가제 및 이의 용도에 관한 것이다.
최근 사료 가격의 상승, 수입육의 판매 증가로 한우를 사육하는 농민들의 고충이 커지고 있다. 이러한 농장들 중 번식우 농장에서 추가적인 피해를 야기하는 것이 신생 송아지 폐사라고 할 수 있다. 송아지 폐사는 다양한 원인에 의하여 발병하는데 가장 중요한 원인으로 설사병이며, 이로 인한 송아지의 폐사 및 성장부진은 농가의 중요한 피해원인 중 하나로 생각된다.
설사병이란 음식물(소화물)의 소화관 통과시간이 짧아지거나 수분흡수가 감소하여 분변 속 수분의 양이 증가하고 분변의 양과 횟수가 증가하는 것이다. 설사병은 음식물에 대한 체내 거부반응, 즉 일종의 체내 방어 기전이지만 지속되면 탈수증, 대사장애, 영양장애 및 체온저하가 나타나 폐사까지 이르게 된다.
설사병은 병원성 미생물의 감염여부에 따라 감염성 설사와 비감염성 설사로 구분할 수 있다. 감염성 설사의 예방과 치료도 중요하지만 비감염성 설사가 발생할 경우 감염성 설사로 전환될 수 있기 때문에 비감염성 설사의 예방 역시 중요한 요소이다. 비감염성 설사는 사양관리에 문제점이 있는 경우 발생한다. 어미소의 유질불량 또는 대용유를 급여할 경우 급격한 교체, 품질, 급여량, 급여온도 등에 따라서 설사가 발생한다. 급격한 사육환경의 변화는 소화관 내 소화효소의 분비와 정상적인 미생물의 활동을 혼란시켜 설사를 일으킨다. 미생물을 통한 비감염성 설사 예방은 송아지의 장내 유익 미생물의 증가로 인한 병원성 세균의 침투를 방지하고 폐사율을 감소시키는 데 큰 영향을 끼칠 것으로 생각된다.
신생 송아지 체수분은 체중의 75%를 차지하며, 설사가 심한 경우 송아지는 체중의 13~18% 체수분이 손실된다. 수분 손실과 더불어 전해질 손실이 일어나는데 주로 나트륨(Na+)과 칼륨(K+)의 손실이 크다. 따라서 송아지의 폐사율을 감소시키기 위해서는 설사 송아지에 적절한 전해질과 수분 공급이 매우 중요하다.
신생 송아지의 장내 미생물의 중요성은 설사 발생시 항균제를 투여하면 1차적 원인균을 죽일 수 있지만 설사 때문에 장관 내에 상재하고 있는 항균제에 죽지 않는 해로운 균이 증식하여 증상을 악화시키고 설사를 장기화 시킨다. 따라서 장내 유익 미생물을 정착시켜 장의 기능을 정상화 시키는게 가장 시급하다.
따라서 본 발명에서는 전해질(미네랄)의 충분한 공급과 장내 미생물의 정상적인 정착을 위한, 복합 미생물과 전해질을 융합시켜 탈수 및 산성증을 예방하고, 수분공급을 통해 설사로 인한 피해를 예방하고자 한다.
한편, 한국등록특허 제1130989호에는 '천연 생약재를 포함하는 송아지의 설사병 예방활성을 가지는 사료첨가제의 제조방법'에 대해 개시하고 있으며, 한국등록특허 제0951273호에는 '가축설사 억제제로써 죽엽추출물을 함유하는 미생물활성액 사료첨가제 제조방법'에 대해 개시하고 있다. 하지만, 본 발명의 '고초균, 당류 및 미네랄의 혼합물을 유효성분으로 함유하는 송아지의 설사 예방용 사료 첨가제 및 이의 용도'에 대해서는 아직까지 개시된 바가 없다.
본 발명은 상기와 같은 요구에 의해 도출된 것으로서, 본 발명자들은 전통식품으로부터 효소활성 및 유해세균에 대한 항균활성이 우수한, 바실러스 서틸리스(Bacillus subtilis) SCJMB22 및 SCJMB35 균주를 분리 동정하였으며, 설사 개선을 위해 전해질을 포함하는 복합당에 상기 2종의 균주를 첨가하여 혼합한 혼합물을 제조하여 송아지에게 급이하였을 때, 송아지 분변에서 설사를 유발하는 대장균, 로타바이러스, 코로나바이러스, 크립토스포리디움 및 지알디아 병원체가 검출되지 않는 것을 확인함으로써, 본 발명을 완성하였다.
상기 과제를 해결하기 위하여, 본 발명은 고초균, 당류 및 미네랄의 혼합물을 유효성분으로 함유하는 송아지의 설사 예방 또는 개선용 사료 첨가제를 제공한다.
또한, 본 발명은 당류와 미네랄의 혼합물에 고초균을 첨가하는 단계;를 포함하는 송아지의 설사 예방 활성을 가지는 사료 첨가제의 제조 방법을 제공한다.
본 발명은 송아지의 설사 예방 효과가 우수한, 고초균, 당류 및 미네랄의 혼합물을 사료 첨가제로 제공함으로써, 항생제 오남용을 방지할 수 있으며 설사로 인한 송아지의 성장지연 및 폐사를 최소화할 수 있으므로, 축산업 관련 분야에 매우 유용하게 활용될 수 있다.
도 1은 포도당 및 효모 추출물의 함량별로 제조한 배지(M1~M16)에서 본 발명의 바실러스 서틸리스 SCJMB22(A) 및 바실러스 서틸리스 SCJMB35(B) 균주를 각각 배양하였을 때 생균수를 측정한 결과이다.
도 2는 기타 영양원의 함량별로 제조한 배지(E1~E10)에서 본 발명의 바실러스 서틸리스 SCJMB22 균주를 배양하였을 때 생균수를 측정한 결과이다. CO: TSB 배지.
본 발명의 목적을 달성하기 위하여, 본 발명은 고초균, 당류 및 미네랄의 혼합물을 유효성분으로 함유하는 송아지의 설사 예방 또는 개선용 사료 첨가제를 제공한다.
본 발명의 송아지의 설사 예방 또는 개선용 사료 첨가제에서, 상기 고초균은 효소활성 및 유해세균에 대한 항균활성을 가지는 것일 수 있으며, 바람직하게는 프로테아제 및 아밀라아제 활성과 대장균(Escherichia coli) 및 살모넬라 두블린(salmonella dublin)에 대해 항균활성을 가지는 것일 수 있으나, 이에 제한되지 않는다.
또한, 상기 당류는 단당류, 이당류, 다당류 또는 이들의 혼합물일 수 있고, 바람직하게는 단당류, 이당류 및 다당류의 혼합물일 수 있으며, 더욱 바람직하게는 포도당, 자당, 베타글루칸 및 레반의 혼합물일 수 있으나, 이에 제한되지 않는다.
본 발명의 사료 첨가제는 프로테아제 및 아밀라아제 활성과 대장균 및 살모넬라 두블린에 대해 항균활성을 가지는 고초균과 당류의 혼합물과, 칼륨 및 나트륨과 같은 미네랄 성분을 유효성분으로 함유하므로, 설사증상 개선 효과가 있다.
본 발명의 사료 첨가제에는 아미노산, 무기염류, 비타민, 항생물질, 항균물질, 항산화, 항곰팡이 효소, 다른 생균 형태의 미생물 제제 등과 같은 보조제 성분; 곡물, 예를 들면 분쇄 또는 파쇄된 밀, 귀리, 보리, 옥수수 및 쌀; 식물성 단백질 사료, 예를 들면 평지, 콩 및 해바라기를 주성분으로 하는 것; 동물성 단백질 사료, 예를 들면 혈분, 육분, 골분 및 생선분; 당분 및 유제품, 예를 들면 각종 분유 및 유장 분말로 이루어지는 건조성분; 지질, 예를 들면 가열에 의해 임의로 액화시킨 동물성 지방 및 식물성 지방 등과 같은 주성분; 영양보충제, 소화 및 흡수향상제, 성장촉진제, 질병 예방제와 같은 첨가제가 추가로 포함될 수 있다.
본 발명의 사료 첨가제는 액체 상태의 제제 형태일 수 있으며, 사료 첨가용 부형제를 포함할 수 있다. 사료 첨가용 부형제로는 예를 들어, 탄산칼슘, 말분, 제올라이트, 옥분 또는 미강 등을 들 수 있으나, 이에 제한되지 않는다.
본 발명의 사료 첨가제는 하나 이상의 효소 제제를 추가로 포함할 수 있다. 예를 들어 리파제와 같은 지방 분해 효소, 피틴산(phytic acid)을 분해하여 인산염과 이노시톨인산염을 만드는 파이타제(phytase), 녹말과 글리코겐 등에 포함되어 있는 알파-1,4-글리코시드 결합(α-1,4-glycoside bond)을 가수분해하는 효소인 아밀라제, 유기인산에스테르를 가수분해하는 효소인 포스파타제(phosphatase), 말토오스를 두 분자의 글루코스로 가수분해하는 말타제 및 사카로스를 가수분해하여 글루코스-프룩토스 혼합물을 만드는 전환효소 등을 포함할 수 있다.
본 발명의 사료 첨가제는 송아지에게 단독으로 투여되거나 식용 담체 중에서 다른 사료 첨가제와 조합되어 투여될 수 있다. 통상적으로, 당업계에 잘 알려진 바와 같이 단독 일일 섭취량 또는 분할 일일 섭취량을 사용할 수 있다.
본 발명은 또한, 본 발명은 당류와 미네랄의 혼합물에 고초균을 첨가하는 단계;를 포함하는 송아지의 설사 예방 활성을 가지는 사료 첨가제의 제조 방법을 제공한다.
바람직하게는,
1) 자당, 포도당 및 물을 혼합하고 가열하는 단계;
2) 상기 단계 1) 이후에, 염화칼륨 및 탄산수소나트륨을 첨가하는 단계;
3) 상기 단계 2) 이후에, 베타글루칸, 레반 및 글루타치온을 첨가하여 혼합하는 단계; 및
4) 상기 단계 3)에서 획득한 혼합물에 고초균을 첨가하는 단계;를 포함하는 방법일 수 있으며,
더 바람직하게는
1) 자당, 포도당 및 물을 1~6:1~6:1~6의 중량비로 혼합하고 가열하는 단계;
2) 상기 단계 1) 이후에, 0.05~1 중량%의 염화칼륨 및 0.05~1 중량%의 탄산수소나트륨을 첨가하는 단계;
3) 상기 단계 2) 이후에, 0.01~0.1 중량%의 베타글루칸, 0.05~1 중량%의 레반 및 0.01~0.1 중량%의 글루타치온을 첨가하여 혼합하는 단계; 및
4) 상기 단계 3)에서 획득한 혼합물에 106~8 CFU/mL의 고초균을 첨가하는 단계;를 포함하는 방법일 수 있으며,
가장 바람직하게는
1) 자당, 포도당 및 물을 2:1:1의 중량비로 혼합하고 가열하는 단계;
2) 상기 단계 1) 이후에, 0.2 중량%의 염화칼륨 및 0.2 중량%의 탄산수소나트륨을 첨가하는 단계;
3) 상기 단계 2) 이후에, 0.05 중량%의 베타글루칸, 0.1 중량%의 레반 및 0.05 중량%의 글루타치온을 첨가하여 혼합하는 단계; 및
4) 상기 단계 3)에서 획득한 혼합물에 107 CFU/mL의 고초균을 첨가하는 단계;를 포함하는 방법일 수 있으나, 이에 제한되지 않는다.
이하, 본 발명의 실시예에 의해 상세히 설명한다. 단, 하기 실시예는 본 발명을 예시하는 것일 뿐, 본 발명의 내용이 하기 실시예에 한정되는 것은 아니다.
실시예 1. 균주 분리 및 선발
(1) 균주의 분리
항균력이 우수한 식품 유래 바실러스균을 선발하기 위해 국내 전통식 장류와 누룩 김치 등의 시료를 사용하여 각 시료 10g을 멸균 생리식염수 90ml에 단계 희석하였다. 바실러스균 분리를 위한 배지로는 1.5% 한천이 첨가된 TSB(Tryptic Soya Broth) 고체배지에 동일한 시료를 도말하고 형태 관찰을 통하여 바실러스를 분리하였다. 후보균주는 수차례 획선 배양하고, 형태 관찰을 통하여 순수분리하여 바실러스균을 분리하였다. 분리 균주에 대하여 바실러스는 SCJMB숫자로 각각 명명하였다. 순수분리된 균주는 액체배양과 원심분리를 통하여 세포를 수집하고, 바실러스는 25%(v/v) 글리세롤을 통하여 보존하고 하기 실시예에 사용하였다.
(2) 효소활성 평가
효소활성을 검증하기 위해 한천 확산법(agar well diffusion method)을 사용하였으며, 각 효소와 특이적으로 반응하는 기질의 성분이 포함된 선발배지를 제조하였다. 아밀라아제 활성(Amylase activity)을 평가하기 위해 2% 아가 및 1% 가용성 전분(starch soluble)이 함유된 최소배지, 프로테아제 활성(Protease activity)을 평가하기 위해 1.5% 아가 및 2% 스킴 밀크가 함유된 최소배지를 121℃에서 15분 멸균하고, 페트리 디쉬에 각각 25ml 정량 분주하여 고체배지를 제조하였다. 바실러스는 TSB 액체배지에서 37℃, 24시간 140rpm으로 진탕 배양하였다. 배양액은 원심분리한 후 상등액을 취하여 0.2μm의 시린지 필터(syringe filter)로 여과한 후 실험에 사용하였다. 각각의 효소활성 측정 배지에 1cm 간격으로 10㎕의 균주 상등액을 분주하고, 37℃, 24시간 조건의 배양기에서 배양하였다. 24시간 경과 후 2% 스킴 밀크가 함유된 최소배지에 나타난 클리어존(clear zone)과 1% 전분이 함유된 최소배지에 루골 용액(Lugol solution)을 분주하여 나타난 클리어존을 확인하여 효소활성이 있는 바실러스 84주를 1차 선발하였다(데이터 미제시).
효소활성이 우수한 2차 균주선발을 위해 제조된 각각의 효소활성 최소배지를 천공하여 직경 6mm의 웰을 제조하여 실험에 사용하였다. 상기와 같은 방법으로 1차 선발균주의 배양 상등액 100㎕를 천공된 웰에 분주하고 37℃, 24시간 조건의 배양기에서 배양하였다. 24시간 경과 후 1% 전분이 함유된 최소배지에 루골 용액을 분주하여 나타난 클리어존의 직경을 측정하여 아밀라아제 활성을 평가하였다. 또한, 24시간 경과 후 2% 스킴 밀크가 함유된 최소배지에 나타난 클리어존의 직경을 측정하여 프로테아제 활성을 평가하고 결과에 따라 바실러스 40주를 2차 선발하였다(표 1).
바실러스 효소활성 결과
SCJMB 효소활성(clear zone, 직경 mm) SCJMB 효소활성(clear zone, 직경 mm)
protease activity amylase activity protease activity amylase activity
2 22 21 40 25 21
3 23 20 43 25 20
6 23 20 45 22 16
8 22 21 47 24 20
9 23 21 52 24 21
10 22 19 55 21 19
11 21 20 56 25 15
13 24 26 57 23 14
17 21 18 59 19 12
20 21 21 60 25 14
22 25 25 62 27 14
25 11 14 64 19 18
27 24 22 66 20 13
28 20 18 67 18 16
29 22 20 69 19 19
31 20 24 74 22 13
35 28 23 76 21 17
36 26 22 78 19 15
37 22 21 80 18 18
38 24 21 82 19 21
(3) 항균활성 평가
상기 효소활성이 우수한 2차 선발균주(바실러스 40주)에 대하여 항균활성 평가를 진행하였다. 항균활성 측정을 위해 소의 장내 설사를 유발하는 유해미생물인 대장균(E. coli) K99 균주와 살모넬라 두블린(salmonella dublin) ATCC14580 균주를 대상으로 한천 확산법(Agar Diffusion Assay)을 통하여 3차 선발을 진행하였다. 유해미생물 2종에 대한 증식용 배지로 TSB(Tryptic Soy Broth)를 사용하였다. TSB 액체배지를 제조하고, 접종을 통해 37℃, 24시간 140rpm으로 진탕 배양하였다. 흡광도계를 사용하여 OD(optical density)를 측정하고, OD 0.4~0.5(약 107 cfu/g)가 되도록 희석하였다. 희석된 유해미생물 2종을 고체배지에 도말하고 페이퍼 디스크를 올려 2차 선발균주 바실러스 40주의 배양상등액을 50㎕씩 두 차례에 걸쳐 흡습시키고 37℃, 24시간 조건의 배양기에서 배양하였다. 24시간 경과 후 클리어존의 직경을 측정하여 항균활성을 가지는 바실러스 5균주를 3차 선발하였다(표 2).
항균활성이 우수한 4차 균주선발을 위해, NA(Nutrient Agar) 배지를 bottom 배지로 제조하고, 0.7% 한천이 첨가된 TSA 소프트 고체배지에 OD값 0.4~0.5로 배양된 유해미생물 2종을 각 25ml씩 분주하였다. 천공하고 선발된 균주의 배양 상등액 100㎕를 천공된 홀에 주입하고 37℃, 12시간 동안 배양하였다. 배양이 끝난 12시간 후 클리어존의 직경을 측정한 후 결과값을 분석하여 효소활성과 항균활성이 우수한 바실러스 2주(SCJMB22, SCJMB35)를 최종 선발하였다. 최종 선발한 바실러스 2종(SCJMB22, SCJMB35)에 대하여 마크로젠(주)에 위탁하여 동정을 실시하였고, 바실러스 2종은 바실러스 서틸리스(Bacillus subtilis)로 판명되었으며, 최종적으로 바실러스 서틸리스 SCJMB22, 바실러스 서틸리스 SCJMB35로 명명하였다.
바실러스(SCJMB) 항균활성 결과
SCJMB 항균활성(clear zone, 직경 mm)
S. dublin E. coli
13 11 11
22 13 12
27 10 11
35 12 11
36 11 11
실시예 2. 선발 균주의 배양배지 조성 확립
산업적용이 가능한 원료를 이용한 균주의 고농도 배양을 위한 배지로 시약용이 아닌 원료급으로 포도당(함수포도당_CJ 제일제당)과 효모 추출물(Angel yeast co.)을 선정하여 사용하였다. 선발균주의 고농도 배양을 위해 표 3에 개시한 바와 같이 포도당과 효모 추출물의 함유량을 달리하여 균의 생장패턴을 분석하였다. 100mL의 TSB 액체배지에 SCJMB22 및 SCJMB35 균주 배양액 1%를 접종하여 전 배양액으로 사용하였다. 96-웰 마이크로 플레이트에 2종의 균주 전 배양액 100㎕를 분주하고, 마이크로 플레이트 리더를 사용하여 600nm에서 배양 전(0시간)에 해당하는 OD(optical density)를 측정하였다. 샘플링이 끝난 2종의 균주 전 배양액은 진탕 배양기를 사용하여 37℃, 140rpm의 조건으로 배양하였다. SCJMB22 및 SCJMB35 균주에 대하여 TSB 배지에 배양한 것을 대조구로 하여 조건별 배양하고 단계희석을 통해 균수를 측정하였다. 그 결과, 탄소원인 포도당(glucose)의 함량이 1% 이하일 때 효모 추출물(yeast extract)의 함량이 높아짐에 따라 생균수가 증가하였고 2% 이상일 때는 오히려 효모 추출물의 함량이 낮을수록 생균수가 증가하는 경향을 보였다. 두 균주 모두 3% 포도당, 0.5% 효모 추출물 조건인 M13 배지에서 1.1×109 CFU/mL로 가장 높은 생균수를 보였고, 대조구인 TSB 배지에서 배양한 것보다 높은 것을 알 수 있었다(도 1).
또한, 표 4와 같이 기타 영양원에 대한 배지조성을 수립하고 조건별 생균수를 측정하였다. 그 결과, 기타 영양원으로 황산 마그네슘 7수화물(Magnesium sulfate heptahydrate), 제1인산칼륨(Potassium phosphate monobasic) 및 제2인산칼륨(Potassium phosphate dibasic)이 각각 0.1% 포함된 E10의 배지조성 조건에서 가장 높은 생균수가 측정되었다(도 2).
포도당 및 효모 추출물 함량에 따른 배지조성(%)
성분 함량 M1 M2 M3 M4 M5 M6 M7 M8 M9 M10 M11 M12 M13 M14 M15 M16 C0
Glucose 0.5% + + + + - - - - - - - - - - - - TSB
1% - - - - + + + + - - - - - - - -
2% - - - - - - - - + + + + - - - -
3% - - - - - - - - - - - - + + + +
Yeast
extract 		0.5% + - - - + - - - + - - - + - - -
1% - + - - - + - - - + - - - + - -
2% - - + - - - + - - - + - - - + -
3% - - - + - - - + - - - + - - - +
기타 영양원 함량에 따른 배지조성(%)
성분 E1 E2 E3 E4 E5 E6 E7 E8 E9 E10 M13 C0
Glucose 3 3 3 3 3 3 3 3 3 3 3 TSB
Yeast extract 0.5 0.5 0.5 0.5 0.5 0.5 0.5 0.5 0.5 0.5 0.5
Sodium chloride 0.5 0.5
Magnesium sulfate heptahydrate 0.1 0.1 0.1 0.1
Ammonium sulfate 0.2
Potassium phosphate monobasic 0.2 0.1 0.1 0.1
Potassium phosphate dibasic 0.2 0.1 0.1 0.2 0.1
Ammonium phosphate dibasic 0.2
실시예 3. 고초균, 당류 및 미네랄의 혼합물의 송아지의 설사 개선 효과
자당, 포도당 및 정제수를 2:1:1의 비율로 혼합하고 100℃에서 갈변되지 않는 수준으로 가열한 후 당류가 응고되지 않도록 천천히 온도를 낮추었다. 이후에, 미네랄 기능을 위해 0.2 중량%의 염화칼륨 및 0.2 중량%의 탄산수소나트륨을 첨가하였으며, 상기 단당, 이당 및 미네랄이 혼합된 혼합물에 다당류인 베타글루칸, 레반 및 글루타치온을 각각 0.05 중량%, 0.1 중량% 및 0.05 중량% 첨가하여 혼합한 후, 복합당을 제조하였다. 이후에, 상기 실시예 1에서 최종 선발한 바실러스 서틸리스(Bacillus subtilis) SCJMB22 및 SCJMB35 균주를 상기 실시예 2에서 확인한 최종 배지조성에 배양한 후,바실러스 서틸리스 SCJMB22 및 SCJMB35 균주 배양액(각각 107 CFU/mL)을 상기 복합당 혼합물에 첨가하여 최종적으로 고초균, 당류 및 미네랄의 혼합물을 제조하였다. 본 발명의 고초균, 당류 및 미네랄의 혼합물의 설사 개선 효과를 확인하기 위해, 5일마다 1회씩 송아지에게 총 2회 경구투여(20mL)한 후, 5종 진단키트로 분변 검사를 실시하였다. 그 결과, 표 5에 개시한 바와 같이 송아지 분변에서 설사를 유발하는 대장균, 로타바이러스, 코로나바이러스, 크립토스포리디움 및 지알디아(Giardia) 병원체가 검출되지 않는 것을 확인할 수 있었다.
분변 검사 결과
고초균, 당류 및 미네랄의 혼합물
투여 전 투여 후
대장균 검출 미검출
로타바이러스 검출 미검출
코로나바이러스 검출 미검출
크립토스포리디움 검출 미검출
지알디아 검출 미검출
또한, 본 발명의 고초균, 당류 및 미네랄의 혼합물을 5일마다 1회씩 송아지에게 총 2회 경구투여(20mL)한 후, 송아지 출생일 기준으로 60일 동안 송아지에게 항생제 4종(아목사실린, 아지스로마이신, 마보플록사신, 부타D)과 지사제(카보풀비트) 사용 횟수를 측정하였다. 항생제 사용 횟수는 본 발명의 고초균, 당류 및 미네랄의 혼합물을 급이하지 않은 대조군에서는 생후 1개월 41회, 2개월 23회로 2개월간 총 64회를 사용한 반면, 본 발명의 고초균, 당류 및 미네랄의 혼합물을 급이한 실험군에서는 생후 1개월 28회, 2개월 16회로 2개월간 총 44회를 사용하여, 실험군의 항생제 사용빈도가 대조군에 비해 현저하게 감소된 것을 확인하였다. 지사제 사용 횟수는 본 발명의 고초균, 당류 및 미네랄의 혼합물을 급이하지 않은 대조군에서는 생후 1개월 98회, 2개월 28회로 2개월간 총 126회를 사용한 반면, 본 발명의 고초균, 당류 및 미네랄의 혼합물을 급이한 실험군에서는 생후 1개월 50회, 2개월 6회로 2개월간 총 56회를 사용하여, 실험군의 지사제 사용 빈도가 대조군에 비해 현저하게 감소된 것을 확인하였다(표 6).
항생제 및 지사제 사용 횟수 측정
대조군 실험군
항생제 1개월 41회 28회
2개월 23회 16회
총 64회 44회
지사제 1개월 98회 50회
2개월 28회 6회
총 126회 56회

Claims (6)

  1. 고초균, 당류 및 미네랄의 혼합물을 유효성분으로 함유하는 송아지의 설사 예방 또는 개선용 사료 첨가제.
  2. 제1항에 있어서, 상기 고초균은 효소활성 및 유해세균에 대한 항균활성을 가지는 것을 특징으로 하는 송아지의 설사 예방 또는 개선용 사료 첨가제.
  3. 제2항에 있어서, 상기 효소는 프로테아제 및 아밀라아제이고, 상기 유해세균은 대장균(Escherichia coli) 및 살모넬라 두블린(Salmonella dublin)인 것을 특징으로 하는 송아지의 설사 예방 또는 개선용 사료 첨가제.
  4. 제1항에 있어서, 상기 당류는 단당류, 이당류, 다당류 또는 이들의 혼합물인 것을 특징으로 하는 송아지의 설사 예방 또는 개선용 사료 첨가제.
  5. 당류와 미네랄의 혼합물에 고초균을 첨가하는 단계;를 포함하는 송아지의 설사 예방 활성을 가지는 사료 첨가제의 제조 방법.
  6. 제5항에 있어서,
    1) 자당, 포도당 및 물을 혼합하고 가열하는 단계;
    2) 상기 단계 1) 이후에, 염화칼륨 및 탄산수소나트륨을 첨가하는 단계;
    3) 상기 단계 2) 이후에, 베타글루칸, 레반 및 글루타치온을 첨가하여 혼합하는 단계; 및
    4) 상기 단계 3)에서 획득한 혼합물에 고초균을 첨가하는 단계;를 포함하는 송아지의 설사 예방 활성을 가지는 사료 첨가제의 제조 방법.
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