KR20200118827A - 젬시타빈 모노포스페이트의 소분자 약물 컨쥬게이트 - Google Patents

젬시타빈 모노포스페이트의 소분자 약물 컨쥬게이트 Download PDF

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KR20200118827A
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스티븐 알버트 에버레트
크레이그 알랜 코번
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마베릭스 온콜로지, 잉크.
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Abstract

식 (I)를 갖는 화합물:
Figure pct00176

또는 그의 약학적으로 허용가능한 염, 에스테르, 아미드, 용매화물, 또는 입체이성질체가 개시되고, 여기서
L, Y1, Y2, Y3, Y4, Y5, Z1, Z2, Z3, Z4, Z5, Z6는 각각 본명세서에서 정의된 바와 같음; 그의 조성물; 그의 용도; 및 그의 사용 방법이 개시됨.

Description

젬시타빈 모노포스페이트의 소분자 약물 컨쥬게이트
우선권 주장
이 출원은 2018년 2월 2일에 출원된 미국 가특허출원 번호 제 62/625,820호의 이익을 주장하고, 이는 전체가 참고로서 여기에 포함된다.
발명의 분야
본발명은 암 및 예를 들어, 싸이토크롬 P450 1B1 (CYP1B1) 및 그의 대립형질 변이체를 발현하는 세포를 특징으로 하는 다른 증식성 병태의 치료 또는 예방에서의 사용을 위한 신규한 소분자 약물 컨쥬게이트 (SMDCs)에 관한 것이다. 본발명은 의학 치료법, 예를 들어 암 또는 다른 증식성 병태의 치료 또는 예방에서의 사용을 위한 하나 이상의 그러한 화합물을 포함하는 약제학적 조성물, 그리고 인간 또는 비-인간 동물 환자에서의 암 또는 다른 병태를 치료하는 방법을 또한 제공한다. 본발명의 다른 양상은 본명세서에서추가 개시된다.
본발명의 배경
CYP1B1는 디옥신-유도가능 CYP1 유전자 패밀리의 멤버이고 또한 Sutter et al. (J Biol. Chem., May 6; 269(18):13092-9, 1994)에 의해 기술된 바와 같은 CYP1A1 및 CYP1A2를 포함한다. CYP1B1는 스테로이드, 제노바이오틱스, 약물 및/또는 SMDCs를 포함하는 다양한 기질을 대사 및 활성화가능한 헴티올레이트 모노-옥시제나제 효소이다. CYP1B1 단백질은 상이한 조직 타입의 1차 및 전이성 인간 암의 넓은 범위에서 높은 빈도로 발현되고 정상 조직에서는 발현되지 않거나 무시할만한 수준이다 (예를 들어 McFadyen MC, Melvin WT and Murray GI, "Cytochrome P450 Enzymes: Novel Options for Cancer Therapeutics", Mol Cancer Ther., 3(3): 363-71, 2004; McFadyen MC and Murray GI, "Cytochrome P450 1B1: a Novel Anticancer Therapeutic Target", Future Oncol., 1(2): 259-63, 2005.
특히, CYP1B1는 상응하는 정상 조직에서는 발현없이 방광, 뇌, 유방, 결장, 두경부, 신장, 폐, 간, 난소, 전립선 및 피부 암 내에서 발현하는 것으로 나타났다. 예를 들어, Barnett, et al.in Clin. Cancer Res., 13(12): 3559-67, 2007는 교아종, 역형성별아교세포종, 뇌교종 및 악성 뇌교종을 포함하는 신경교 종양에서 과-발현되지만 비침범된 뇌 조직에서는 발현되지 않는다고 보고했고; Carnell, et al., in Int. J. Radiat. Oncol. Biol. Phys., 58(2): 500-9, 2004는 전립선 선암에서 과-발현되지만, 상응하는 정상 전립선 조직에서는 발현되지 않는다고 보고했고; Carnell, et al., 2004 (ibid.)는 또한 CYP1B1가 (n = 22, 100 %) 방광 암종에서 발현됨을 입증했고; Downie, et al., in Clin. Cancer Res., 11(20): 7369-75, 2005 및 McFadyen, et al., in Br. J. 암, 85(2): 242-6, 2001는, 1차 및 전이성 난소 암에서 CYP1B1의 증가발현, 및 정상 난소 조직에서는 비발현을 보고했고; 및 Gibson, et al., in Mol. Cancer Ther., 2(6): 527-34, 2003, and Kumarakulasingham, et al., in Clin. Cancer Res., 11(10): 3758-65, 2005는, CYP1B1가 결장 선암에서 과-발현되지만, 상응하는 정상 조직에서는 발현되지 않는다고 보고했다.
몇몇 연구는 상응하는 정상 조직과 비교하여 유방 암에서 CYP1B1가 과-발현됨을 입증했다(참조, 예를 들어: Murray GI, Taylor MC, McFadyen MC, McKay JA, Greenlee WF, Burke MD and Melvin WT, "Tumor-Specific Expression of Cytochrome P450 CYP1B1", Cancer Res., 57(14): 3026-31, 1997; Haas S, Pierl C, Harth V, Pesch B, Rabstein S, Bruning T, Ko Y, Hamann U, Justenhoven C, Brauch H and Fischer HP, "Expression of Xenobiotic and Steroid Hormone Metabolizing Enzymes in Human Breast Carcinomas". Int. J. Cancer, 119(8): 1785-91, 2006; McKay JA, Murray GI, Ah-See AK, Greenlee WF, Marcus CB, Burke MD and Melvin WT, "Differential Expression of CYP1A1 and CYP1B1 in Human Breast Cancer", Biochem. Soc. Trans., 24(2): 327S, 1996).
Everett, et al., in J. Clin. Oncology, 25: 18S, 2007는, CYP1B1가 악성 흑색종 및 파종성 질환에서 과-발현되고 정상 피부에서는 발현되지 않는다고 보고했다. Chang, et al., in Toxicol. Sci., 71(1): 11-9, 2003는 CYP1B1 단백질이 정상 간에서 존재하지 않는다고 보고했지만 Everett, et al., 2007 (ibid.)는 간에의 흑색종 단계 IV 전이에서 CYP1B1가 과-발현되지만 인접한 정상 간 조직에서는 발현되지 않는다고 확인했다.
Greer, et al., in Proc. Am. Assoc. Cancer Res., 45: 3701, 2004는, 두경부 편평상피 세포 암종의 악성 진행 동안 과-발현되지만 정상 상피에서는 발현되지 않는다고 보고했다.
McFadyen, et al., in Br. J. Cancer, 91(5): 966-71, 2004는, 신장 암종에서 CYP1B1를 검출했지만 상응하는 정상 조직에서는 검출되지 않았다.
Murray, et al., 2004 (ibid.)는 정상 폐 조직과 비교하여 폐 암 세포 내에서 CYP1B1 과-발현을 입증하기 위해 면역조직화학을 사용했다. Su, et al., in Anti-Cancer Res., 2, 509-15, 2009는 질병 초기 단계와 비교하여 진행 단계 IV 비-소 세포 폐 암에서 CYP1B1 과-발현을 입증하기 위해 면역조직화학을 사용했다.
CYP1B1 발현은 넓은 범위의 상이한 암 및 다른 증식성 병태의 특징이고, 그러한 넓은 범위의 암 및 다른 병태를 정의하기 위해 CYP1B1 발현이 사용될 수 있음이 상기한 수많은 문헌으로부터 명백하다고 했다. 정상 (비-암) 세포는 상당한 수준의 CYP1B1를 발현시키지 않기 때문에, CYP1B1를 발현시키는 세포에서 세포독성을 나타내지만 정상 세포에서는 실질적으로 비-세포독성인 화합물은 CYP1B1 발현을 특징으로 하는 암에서 표적 항암제로서 유용할 것이라고 합리적으로 또한 예상될 수 있다. "표적"은 그러한 화합물이 전신적으로 송달될 수 있고 CYP1B1를 발현시키는 암 세포의 존재 하에서만 활성화되고, 신체의 나머지에 대해서는 실질적으로 비독성임을 의미한다.
또한, 많은 싸이토크롬 P450 효소는 다양한 항암 약물을 대사하고 해독한다고 공지되어 있다. McFadyen, et al. (Biochem Pharmacol. 2001, Jul 15; 62(2): 207-12)는 비-CYP1B1 발현 세포와 비교하여 CYP1B1를 발현시키는 세포에서 도세탁셀의 감도에서 상당한 감소를 입증했다. 이러한 발견은 세포 내 CYP1B1 존재가 일부 세포독성 약물에 대한 그의 감도를 저하시킬 수 있음을 나타낸다. 따라서 CYP1B1-활성화 SMDCs는 약물 내성이 CYP1B1에 의해 매개되는 암의 치료에 유용할 수 있다.
또한, CYP1B1 유전자는 암 내에서 매우 다형태이고 CYP1B1 유전자 내에 함유된 몇몇 단일 누클레오타이드 다형은 암호화된 단백질의 발현 및/또는 활성을 변경시킨다고 확인되었다. 이들 중, CYP1B1*3 (4326C>G; L432V) 대립형질은 Sissung, et al. in Mol Cancer Ther., 7(1): 19-26, 2008 및 거기에 언급된 참고문헌에 의해 기술된 바와 같은 몇몇 기질에 대해 CYP1B1의 발현 및 효소 동력학이 둘다 증가함을 특징으로 하였다. 이러한 발견은 CYP1B1뿐만 아니라, 효소의 대립형질 변이체도 또한 SMDC 활성화 및 암 표적화에 기여할 수 있음을 나타낸다.
원하지 않는 독성이나 효율 손실 없이 약물의 다른 부정적인 속성을 낮추기 위한 수단으로서 SMDCs가 연구되었다. SMDC는 불활성으로 만들기 위해 화학적으로 변경되었지만, 투여 이후 대사되거나 체내에서 약물의 활성 형태로 전환되는 약물이다. 정상 조직과 비교하여 1차 종양 및 전이성 질환 내 CYP1B1의 과-발현은 McFadyen et al., Mol Cancer Ther., 3(3), 363-71, 2004에 의해 검토된 표적 암 치료법에 대한 CYP1B1-활성화 SMDCs의 개발에 대한 엄청난 기회를 제공한다. 사실, 표적 암 치료법에 대한 CYP1B1-활성화 SMDC의 발견 및 개발은 Patterson LH 및 Murray GI in Curr Pharm Des., 8(15): 1335-47, 2002에 의해 검토된 바와 같이, 임상에서 사용되는, 정상 조직에서 싸이토크롬 P450s 발현에 의해 활성화되는 기존의 비-표적 싸이토크롬 P450-활성화 SMDC 가령 SMDC 알킬화제시클로포스파미드, 이포스파미드, 다카바진, 프로카바진보다 상당한 약물학적 장점을 제공할 가능성이 있다.
SMDC 설계에서 소위 '트리거-링커-이펙터' 화학의 활용은 이펙터 (대표적으로 활성약물)를 방출시키기 위해 링커의 단편화를 개시하기 위해 트리거의 활성화를 필요로 하고, 이펙터의 생물학적 활성은 SMDC 형태로 마스킹된다. 종양- 발현 싸이토크롬 P450s 가령 CYP1B1를 표적화하는 선택적 SMDCs의 설계는 (1) 선택적 트리거 모이어티의 확인, (2) 트리거 활성화(통상 방향족 하이드록시화에 의해) 이후 효과적으로 분절되는 생-안정성 링커의 사용, 및 (3) 트리거링공정의 효율을 간섭하지 않는 적절한 이펙터 또는 약물을 필요로 한다.
WO 99/40944는 약물 모이어티를 방출시키기 위해 CYP1B1에 의해 하이드록시화를 통해 활성화된다고 기술된 SMDC는 담체 프레임워크에 결합된 약물 모이어티를 포함한다고 기술한다.
WO 2010/125350는 또한 약물 모이어티를 방출시키기 위해 CYP1B1에 의해 하이드록시화를 통해 활성화된 SMDC를 기술한다.
따라서, 이를 필요로 하는 환자에게 유용한 신규한 SMDC에 대한 강한 필요성이 남아 있다.
발명의 요약
본발명은 신규한 구조적 및 기능적 특징을 갖는 기술된 SMDCs을 제공하고, 여기서 이들 신규한 특징은 이들 SMDCs를 필요로 하는 환자의 총족되지 않은 필요성을 충족시키기 위해 개발되었다.
제 1 양상에 따르면, 본발명은 식 (I)의 화합물:
Figure pct00001
또는 그의 약학적으로 허용가능한 염, 에스테르, 용매화물, 또는 입체이성질체에 관한 것이고,
여기서:
-L-는 다음으로서 정의되고: -(C1-C5)알킬렌-O-C(O)-, -(C3-C5)알케닐렌-O-,
Figure pct00002
A는 -(C1-C5)알킬렌-O-C(O)-;
E는 -O-, -O-C(O)N(H)-, -O-C(S)N(H)- 또는 -S- 또는 -S-C(O)N(H)-;
D는 -(C1-C5)알킬렌- 또는 -(C3-C5)알케닐렌-;
Y1는 C=C, 탄소 또는 질소, 여기서 Y1는 질소이면, Z1는 부재;
각각의 Y4 및 Y5는 독립적으로 탄소 또는 질소, 여기서 Y3는 질소이면, Z3는 부재하고 Y4는 질소이면, Z5는 부재하고;
Y2는 C 또는 N 여기서 Y2는 질소이면, Z2는 부재;
Y5는 산소, 탄소, 질소 또는 황 원자, 여기서 Z6는 부재일 때 Y5는 산소, 또는 황 원자;
각각의 Z1, 및 Z2는 존재하는 경우, 수소, 알킬, 알케닐, 알키닐, 아릴, 헤테로아릴, 아르알킬, 알킬옥시, 알케닐옥시, 알키닐옥시, 아릴옥시, 아르알킬옥시, 알킬티옥시, 알케닐티옥시, 알키닐티옥시, 아릴티옥시, 아르알킬티옥시, 아미노, 하이드록시, 티오, 할로, 카르복시, 포밀, 니트로 및 시아노로부터 독립적으로 선택되고, 여기서 각각의 알킬, 알케닐, 알키닐, 알콕시, 및 아릴 모이어티는 독립적으로 1-3 할로로 임의로 치환되고;
Z3, Z4, 및 Z5는 각각 수소, 알킬, 중수소화 알킬, C1-6알콕시, 중수소화 C1-6알콕시, 알케닐, 알키닐, 아릴, 아르알킬, 알킬옥시, 알케닐옥시, 알키닐옥시, 아릴옥시, 아르알킬옥시, 알킬티옥시, 알케닐티옥시, 알키닐티옥시, 아릴티옥시, 아르알킬티옥시, 아미노, 알킬아미노, 아르알킬아미노, 아릴아미노, 하이드록시, 티오, 할로, 카르복시, 포밀, 니트로 및 시아노로부터 독립적으로 선택되고, 여기서 각각의 알킬, 알케닐, 알키닐, 알콕시, 및 아릴 모이어티는 독립적으로 1-3 할로로 임의로 치환되고;
단 Z1, Z2 또는 Z4 중 적어도 하나는 H;
Z6는 수소, 알킬, 알케닐, 알키닐, 아릴 및 아르알킬로부터 선택되고, 여기서 각각의 알킬, 알케닐, 알키닐, 알콕시, 및 아릴 모이어티는 독립적으로 1-3 할로로 임의로 치환되고;
각각의 Z8는 독립적으로 수소, 비치환된 C1-C6 알킬, 치환된 C1-C6 알킬, 비치환된 C1-C6 알콕시, 비치환된 중수소화 C1-C6 알콕시, 치환된 C1-C6 알콕시, 및 치환된 중수소화 C1-C6 알콕시이고 여기서 치환된 알킬, 알콕시 및 중수소화 알콕시는 아미노, 모노- 또는 디-치환된 아미노, 시클릭 C1-C5 알킬아미노, 이미다졸릴, C1-C6 알킬피페라지닐, 모르폴리노, 티올, 티오에테르, 테트라졸, 카르복시산, 에스테르, 아미도, 모노- 또는 디-치환된 아미도, N-연결된 아미드, N-연결된 설폰아미드, 설폭시, 설포네이트, 설포닐, 설폭시, 설피네이트, 설피닐, 포스포노옥시, 포스페이트 또는 설폰아미드로부터 선택된 하나 이상의 기로 치환되고, 여기서 각각의 알킬, 알케닐, 알키닐, 알콕시, 및 아릴은 1-3 할로로 임의로 치환된다.
본발명의 또다른 양상은 약제로서의 사용을 위한 본명세서에서 기술된 바와 같은 본발명의 화합물, 또는 그의 약학적으로 허용가능한 염, 에스테르, 아미드 또는 용매화물에 관한 것이다.
본발명의 또다른 양상은 증식성 병태의 치료 또는 예방 방법에서의 사용을 위한 본명세서에서 기술된 바와 같은 본발명의 화합물, 또는 그의 약학적으로 허용가능한 염, 에스테르, 아미드 또는 용매화물에 관한 것이다.
본발명의 또다른 양상은 치료적으로 또는 예방적으로 유용한 양의 본명세서에서 기술된 바와 같은 본발명의 화합물을 이를 필요로 하는 환자에게 투여하는 것을 포함하는 치료 또는 예방 방법에 관한 것이다.
본발명의 또다른 양상은 치료적으로 또는 예방적으로 유용한 양의 본명세서에서 기술된 바와 같은 본발명의 화합물을 이를 필요로 하는 환자에게 투여하는 것을 포함하는 치료 또는 예방 방법에 관한 것이고, 여기서 증식성 병태는 방광, 뇌, 유방, 결장, 두경부, 신장, 폐, 간, 난소, 췌장, 전립선 또는 피부 암으로부터 선택된 암이다.
본발명의 또다른 양상은 증식성 병태의 치료 또는 예방 방법에 관한 것이고, 상기 방법은 이를 필요로 하는 대상에게 치료적으로 또는 예방적으로 유용한 양의 본명세서에서 기술된 바와 같은 본발명의 화합물, 또는 그의 약학적으로 허용가능한 염, 에스테르, 아미드 또는 용매화물을 투여하는 단계를 포함한다.
본발명의 또다른 양상은 증식성 병태의 치료 또는 예방 방법에서의 사용을 위한 약제의 제조를 위한 본명세서에서 기술된 바와 같은 본발명의 화합물, 또는 그의 약학적으로 허용가능한 염, 에스테르, 아미드 또는 용매화물의 용도에 관한 것이다.
본발명의 또다른 양상은 다음을 포함하는 CYP1B1 효소를 발현시키는 종양 세포의 존재에 대한 환자 진단 방법에 관한 것이다: (a) 여기서 기술된 구체예 중 어느 하나에서 개시된 특정의 SMDC을 환자에게 투여하는 단계, (b) 이후 생성된 상응하는 하이드록실화 대사체의 양을 결정하는 단계; 및, (c) 그 양을 환자 내 종양 세포의 존재 또는 부재와 상호비교하는 단계.
본발명의 또다른 양상은 (1) 환자 내 종양 존재를 확인하고; 및 (2) 치료적으로 또는 예방적으로 유용한 양의 본명세서에서 기술된 바와 같은 본발명의 화합물, 또는 그의 약학적으로 허용가능한 염, 에스테르, 아미드 또는 용매화물의 치료적으로 또는 예방적으로 유용한 양을 투여함에 의해 치료를 필요로 한다고 확인된 환자를 치료하는 방법에 관한 것이다.
본발명의 또다른 양상은 식 (I)의 특정의 화합물을 제조하기 위해 사용될 수 있는 중간체 화합물에 관한 것이고, 여기서 중간체는 식 (I), 또는 그의 약학적으로 허용가능한 염, 에스테르, 아미드, 용매화물, 또는 입체이성질체에서 정의된 바와 같다.
본발명의 추가 양상 및 구체예는 아래의 논의를 따른다.
도 1a는 (5,7-디(메톡시)벤조푸란-2-일)메틸 (1-((2R,4R,5R)-
3,3-디플루오로-4-하이드록시-5-(하이드록시메틸)테트라하이드로푸란-2-일)-2-옥소-1,2-디하이드로피리미딘-4-일)카바메이트 (I)의 CYP1B1-유도된 3-하이드록시화, 이후 1,4 제거에 의한 세포독성 이펙터 분자의 즉석 방출을 위한 메카니즘을 나타낸다.
도 1b는 (5,7-디(메톡시)벤조푸란-2-일)메틸(1-((2R,4R,5R)-3,3-디플루오로-4-하이드록시-5-(하이드록실-메틸)테트라하이드로푸란-2-일)-2-옥소-1,2-디하이드로피리미딘-4-일)카바메이트 (I)의 CYP1B1-유도된 4-하이드록시화, 이후 1,6 제거에 의한 세포독성 이펙터 분자의 즉석 방출을 위한 메카니즘을 나타낸다.
도 1c는 (5,7-디(메톡시)벤조푸란-2-일)메틸 (1-((2R,4R,5R)-3,3-디플루오로-4-하이드록시-5-(하이드록실-메틸)테트라하이드로푸란-2-일)-2-옥소-1,2-디하이드로피리미딘-4-일)카바메이트 (I)의 CYP1B1-유도된 6-하이드록시화, 이후 1,8 제거에 의한 세포독성 이펙터 분자의 즉석 방출을 위한 메카니즘을 나타낸다.
도 1d는 (5,6,7-트리(메톡시)벤조푸란-2-일)메틸 (1-((2R,4R,5R)-3,3-디플루오로-4-하이드록시-5-(하이드록실-메틸)테트라하이드로푸란-2-일)-2-옥소-1,2-디하이드로- 피리미딘-4-일)카바메이트 (II)의 CYP1B1-유도된 C-6 탈알킬화, 이후 1,6 제거에 의한 세포독성 이펙터 분자의 즉석 방출을 위한 메카니즘을 나타낸다.
도 2a는 CD-1 마우스에의 젬시타빈의 iv 투여 후 젬시타빈 및 dFdU의 평균 혈장 농도를 나타낸다.
도 2b는 CD-1 마우스에의 Int 1-4의 iv 투여 후 Int 1-4, 젬시타빈 및 dFdU의 평균 혈장 농도를 나타낸다.
도 3a는 수컷 CD-1 마우스에의 화합물 1 (11.6 mg/Kg 및 23.2 mg/Kg)의 iv 투여 후 화합물 1, Int 1-4, 젬시타빈, dFdU, 및 젬시타빈 모노포스페이트의 혈장 농도를 나타낸다.
도 3b는 수컷 CD-1 마우스에의 Int 1-4 (10.0 mg/Kg, 제형 1 및 2)의 iv 투여 후 화합물 1, Int 1-4, 젬시타빈, dFdU, 및 젬시타빈 모노포스페이트의 혈장 농도를 나타낸다.
도 4는 CD-1 마우스에의 iv 투여 후 Int 3-3의 iv 투여 후 Int 3-3, 젬시타빈, 및 dFdU의 농도를 나타낸다.
도 5는 CD-1 마우스에의 Int 1-4의 iv 투여 후 정상 조직 및 혈장 내 Int 1-4, 젬시타빈, 및 dFdU의 C0 또는 Cmax를 나타낸다.
도 6는 CD-1 마우스에의 젬시타빈의 iv 투여 후 정상 조직 및 혈장 내 젬시타빈, 및 dFdU의 C0 또는 Cmax를 나타낸다.
도 7는 수컷 사이노몰구스 원숭이 내 Int 1-4의 iv 투여 후 Int 1-4, 젬시타빈 및 dFdU의 평균 혈장 농도를 나타낸다.
도 8a는 수컷 사이노몰구스 원숭이 내 Int 1-4의 iv 투여 후 Int 1-4, 젬시타빈 및 dFdU의 평균 혈장 농도를 나타낸다.
도 8b는 수컷 사이노몰구스 원숭이 내 젬시타빈 (2.65 및 5 mg/Kg)의 iv 투여 후 젬시타빈 및 dFdU의 평균 혈장 농도를 나타낸다.
도 9a는 수컷 사이노몰구스 원숭이 내 화합물 1 (5 mg/Kg)의 iv 투여 후 화합물 1, Int 1-4, 젬시타빈 및 dFdU의 평균 혈장 농도를 나타낸다.
도 9b는 수컷 사이노몰구스 원숭이 내 젬시타빈의 iv 투여 후 젬시타빈 및 dFdU의 평균 혈장 농도를 나타낸다.
도 10a는 수컷 Sprague-dawley 래트에의 젬시타빈의 iv 투여 후 젬시타빈 및 dFdU의 평균 혈장 농도를 나타낸다.
도 10b는 수컷 Sprague-dawley 래트에의 Int 1-4의 iv 투여 후 Int 1-4, 젬시타빈 및 dFdU의 평균 혈장 농도를 나타낸다.
도 11는 수컷 비글 개에의 Int 1-4의 iv 투여 후 Int 1-4, 젬시타빈 및 dFdu의 평균 혈장 농도를 나타낸다.
도 12a는 수컷 비글 개에의 Int 1-4의 iv 투여 후 Int 1-4, 젬시타빈 및 dFdu의 평균 혈장 농도를 나타낸다.
도 12b는 수컷 비글 개에의 젬시타빈의 iv 투여 후 젬시타빈 및 dFdu의 평균 혈장 농도를 나타낸다.
발명의 상세한 설명
이펙터 분자가 약물학적 기능을 갖는 젬시타빈 유사체인 SMDCs가 개시된다.
이들 이펙터 분자는 반응시켜 식 (I)의 화합물을 형성하도록 화학적으로 개질된다. 식 (I)의 화합물의 하이드록시화, 가령 CYP1B1-유도된 하이드록시화는, 에폭사이드 형성을 통해 하이드록시화 또는 하이드록시화의 결과로서 일어나는 식 (I)의 화합물의 붕괴에 의해 젬시타빈 분자의 방출을 허용한다. 대안적으로, 식 (II)의 화합물의 탈알킬화, 가령 CYP1B1-유도된 탈알킬화는, 식 (II) 화합물의 붕괴에 의해 젬시타빈 분자의 방출을 허용한다.
개략적으로, 식 (I)의 화합물의 구조는 3 부분을 포함한다고 고려될 수 있다: 트리거 영역, 링커 및 모노인산화 젬시타빈 분자. 트리거는 대표적으로 CYP1B1-유도된 하이드록시화를 위한 기질로서 작용하고 식 (I)의 왼쪽편에 도시된 바이시클릭 모이어티 및 그의 치환체를 포함, 즉 Y1, Y2, Y3, Y4, Y5, Z1, Z2, Z3, Z4, Z5, Z6 및 이들 모이어티가 부착된 잔여 탄소 원자를 함유하는 화합물의 일부를 포함한다고 일반적으로 이해될 수 있다.
화합물의 트리거 영역은 L를 포함하는 링커 영역을 통해 부착되고, 링커 영역은 이와 같이 표지된 이펙터 분자에 부착된다. 다음 논의에서, 많은 용어가 언급되고, 이들은, 문맥상 반대를 나타내지 않는 한, 아래에 제공된 의미를 가진다고 이해되어야 한다.
화학적 구조가 도시 또는 기술된 때, 명백히 다르게 언급되지 않는 한, 모든 탄소는 4의 원자가에 맞도록 수소 치환을 갖는다고 추정된다. 예를 들어, 화학적 모이어티 -C(C)3에 대해, 9개의 수소가 암시되어 그 구조는 -C(CH3)3이다. 어떤 경우 구조 내 특정 원자는 치환기로서의 수소 또는 수소들 (명시적으로 정의된 수소), 예를 들어, -CH2CH2-를 갖는 것으로서 본문 식에서 기술되어 있다. 상기한 설명적 기술은 아니면 복잡한 구조에 간략성과 단순성을 부여하기 위해 화학 분야에서 흔하다는 것을 본업계에서의 숙련가는 이해한다.
부착점이 나타내어져 있지 않는 한, 식 (I)의 변수의 정의에서 나열된 화학적 모이어티 및 모든 그의 구체예는 왼쪽부터 오른쪽으로 읽어야 하고, 여기서 오른편은 정의된 부모 구조에 직접 부착되어 있다. 그러나, 부착점이 화학적 모이어티의 왼쪽편에 나타내어져 있으면 (예를 들어, -알킬옥시-(C1-C25)알킬), 이 화학적 모이어티의 왼편은 정의된 부모 구조에 직접 부착되어 있다.
화합물의 구축을 목적으로 여기서 개시된 화합물의 일반적 기술을 고려할 때, 그러한 구축은 안정한 구조물의 생성을 유발한다고 추정된다. 즉, 본업계에서 통상의 지식을 가진 자는 이론적으로 안정한 화합물 (즉 입체적으로 실용적인 및/또는 합성적으로 가능한)로서 고려되지 않는 일부 구조물을 인식한다
여기서 기술된 화합물, 그리고 그의 약학적으로 허용가능한 염 또는 그의 다른 유도체는 임의로 동위원소적으로-표지된 형태로 존재할 수 있고, 동위원소적으로-표지된 형태에서 화합물의 하나 이상의 원자가 동일 원자수이만 자연에서 발견되는 원자 질량과는 상이한 원자 질량을 가지는 원자에 의해 대체되어 있다. 여기서 기술된 화합물 내에 포함될 수 있는 동위원소의 예시는 수소, 탄소, 질소, 산소, 인, 황, 불소 및 클로라이드의 동위원소, 가령 각각 2H (중수소), 3H (삼중수소), 13C, 14C, 15N, 180, 170, 31P, 32P, 35S, 18F 및 36Cl를 포함한다. 여기서 기술된 동위원소적으로-표지된 화합물, 그리고 그의 약학적으로 허용가능한 염, 에스테르, SMDCs, 용매화물, 수화물 또는 다른 유도체는 비-동위원소적으로 표지된 시약에 대해, 쉽게 이용가능한 동위원소적으로 표지된 시약을 대체하여 아래 반응식 및/또는 실시예에서 개시된 절차를 수행하여 일반적으로 제조될 수 있다. 특정 수소 위치가 "D" 또는 "중수소"로 대체될 때, 그 위치에서의 중수소의 존재비가 중수소의 자연적 존재비, 0.015%보다 실질적으로 더 크고, 그 위치에서 대표적으로 적어도 50% 중수소 함입을 가진다고 이해되어야 한다. 한 구체예에서, 여기서 화합물 개시된 하나 이상의 sp3 탄소에 부착된 하나 이상의 수소가 중수소로 대체된다. 또다른 구체예에서, 여기서 화합물 개시된 하나 이상의 sp2 탄소에 부착된 하나 이상의 수소가 중수소로 대체된다.
임의적" 또는 "임의로"는 이후에 기술된 사건 또는 상황이 일어나거나 일어나지 않을 수 있고, 그 기술은 그러한 사건 또는 상황이 일어난 경우와 일어나지 않은 경우를 포함함을 의미한다. 본업계에서 통상의 지식을 가진 자는 하나 이상의 임의적 치환체를 함유한다고 기술된 임의의 분자에 대해, 단지 입체적으로 실용적인 및/또는 합성적으로 가능한 화합물만이 포함됨을 의미한다는 것을 이해한다. "임의로 치환된"은 치환된 또는 비치환됨을 의미하고 다르게 특정되지 않는 한 용어 내 모든 연이은 변형자를 언급한다. 그래서, 예를 들어, 용어 "임의로 치환된 아릴알킬"에서 분자의 "알킬" 부분 및 "아릴" 부분은 치환 또는 비치환될 수 있다.
다르게 특정되지 않는 한, 용어 "임의로 치환된"은 바로 앞의 화학적 모이어티에 적용된다. 예를 들어, 가변 기 (가령 R)가, 임의로 치환된 알킬, 또는 시클로알킬 아릴로서 정의되면, 단지 알킬 기만이 임의로 치환된다.
화합물의 "약학적으로 허용가능한 염"은 약학적으로 허용가능하고 부모 화합물의 소정의 약물학적 활성을 보유하는 염을 의미한다. 약학적으로 허용가능한 염은 비-독성으로 이해된다. 적절한 약학적으로 허용가능한 염에 대한 부가적 정보는 Remington's Pharmaceutical Sciences, 17.sup.th ed., Mack Publishing Company, Easton, Pa., 1985, 참고로서 여기에 포함됨, 또는 S. M. Berge, et al., "Pharmaceutical Salts," J. Pharm. Sci., 1977; 66:1-19에서 찾을 수 있고 이들은 둘 다 참고로서 여기에 포함된다.
약학적으로 허용가능한 산 부가 염의 비-제한적 예시는 무기 산 가령 염산, 하이드로브롬산, 황산, 질산, 인산, 등; 그리고 유기 산 가령 아세트산, 트리플루오로아세트산, 프로피온산, 헥산산, 시클로펜탄프로피온산, 글리콜산, 피루브산, 젖산, 옥살산, 말산, 말론산, 숙신산, 푸마르산, 타르타르산, 시트르산, 벤조산, 신남산, 3-(4-하이드록시벤조일)벤조산, 만델산, 메탄설폰산, 에탄설폰산, 1,2-에탄디설폰산, 2-하이드록시에탄설폰산, 벤젠설폰산, 4-클로로벤젠설폰산, 2-나프탈렌설폰산, 4-톨루엔설폰산, 캠퍼설폰산, 글루코헵톤산, 4,4'-메틸렌비스-(3-하이드록시-2-엔-1-카르복시산), 3-페닐프로피온산, 트리메틸아세트산, 3차 부틸아세트산, 라우릴 황산, 글루콘산, 글루탐산, 하이드록시나프토산, 살리실산, 스테아르산, 무콘산, p-톨루엔설폰산, 및 살리실 산 등과 형성되는 것들을 포함한다.
약학적으로 허용가능한 염기 부가 염의 비-제한적 예시는 부모 화합물 내에 존재하는 산성 프로톤이 소듐, 포타슘, 리튬, 암모늄, 칼슘, 마그네슘, 철, 아연, 구리, 망간, 알루미늄 염 등의 이온 형태로 대체된 때 형성되는 것들을 포함한다. 바람직한 염은 암모늄, 포타슘, 소듐, 칼슘, 및 마그네슘 염이다. 상기 염은 가능하면 치환될 수 있다. 치환된 염의 비-제한적 예시는 알킬화 암모늄 염, 가령 트리에틸암모늄 염을 포함한다. 약학적으로 허용가능한 유기 비-독성 염기로부터 유래된 염은, 비제한적으로, 1차, 2차, 및 3차 아민, 자연발생 치환된 아민을 포함하는 치환된 아민, 시클릭 아민 및 염기성 이온교환 수지의 염을 포함한다. 유기 염기의 예시는 이소프로필아민, 트리메틸아민, 디에틸아민, 트리에틸아민, 트리프로필아민, 에탄올아민, 2-디메틸아미노에탄올, 2-디에틸아미노에탄올, 디시클로헥실아민, 라이신, 아르기닌, 히스티딘, 카페인, 프로카인, 히드라바민, 콜린, 베타인, 에틸렌디아민, 글루코스아민, 메틸글루카민, 테오브롬, 퓨린, 피페라진, 피페리딘, N-에틸 피페리딘, 트로메타민, N-메틸글루카민, 폴리아민 수지, 등을 포함한다. 예시적 유기 염기는 이소프로필아민, 디에틸아민, 에탄올아민, 트리메틸아민, 디시클로헥실아민, 콜린, 및 카페인이다.
여기서 개시된 모든 화합물은 그의 약학적으로 허용가능한 염으로 존재할 수 있다고 기재되어 있는지와 무관하게 그의 유리 염기 형태 또는 그의 약학적으로 허용가능한 염을 포함한다.
용어 "SMDC"는 소분자 약물 컨쥬게이트를 지칭한다. SMDCs는 특정의 용도를 위해 또다른 화학적 모이어티에 공유적으로 부착된 약물이다.
여기서 사용된 질환, 장애 또는 증후군을 "치료하는" 또는 "치료"는, (i) 인간에서 질환, 장애 또는 증후군의 발생을 예방, 즉 질환, 장애 또는 증후군의 임상적 증상이, 그 질환, 장애 또는 증후군에 노출 또는 걸리기 쉽지만 아직 그 질환, 장애 또는 증후군을 경험하거나 증상이 나타나지 않은 동물에서 발병하지 않도록 유도; (ii) 질환, 장애 또는 증후군을 저해, 즉, 그의 진행을 중지; 및 (iii) 질환, 장애 또는 증후군을 완화, 즉, 질환, 장애 또는 증후군의 억제 유발을 포함한다. 본업계에서 공지되어 있는 바와 같이, 전신 대 국소 송달, 나이, 체중, 일반적 건강, 성별, 투여시간, 약물 상호작용 및 병태 경중도에 대한 조절이 필요할 수 있고, 본업계에서 통상의 지식을 가진 자에 의한 일상적 실험으로 결정될 수 있다.
여기서 개시된 모든 화합물은 단일 입체이성질체 (단일 거울상 이성질체 및 단일 부분입체이성질체를 포함하는), 라세메이트, 거울상 이성질체 및 부분입체이성질체 및 다형체의 혼합물로서 존재할 수 있다. 이 개시물에서 화합물의 입체이성질체는 기하 이성질체 및 광학 이성질체, 가령 회전장애 이성질체를 포함한다. 여기서 개시된 화합물은 또한 기하 이성질체로서 존재할 수 있다. 모든 그러한 단일 입체이성질체, 라세메이트 및 그의 혼합물, 및 기하 이성질체는 여기서 개시된 화합물의 범위 내로 의도된다.
또한, 이 개시물의 화합물은 비용매화 그리고 약학적으로 허용가능한 용매 가령 물, 에탄올, 등와의 용매화 형태로서 존재할 수 있다. 일반적으로, 용매화 형태는 이 개시물의 화합물의 목적으로 비용매화 형태와 동등하다고 고려된다.
알킬은 직쇄, 시클릭 또는 분지쇄 (대표적으로 문맥상 반대가 아니라면 직쇄)일 수 있는 포화 하이드로카빌 라디칼을 의미한다. 여기서 알킬 기가 하나 이상의 불포화 부위를 가지는 경우, 이들은 탄소-탄소 이중 결합 또는 탄소-탄소 삼중 결합으로 구성될 수 있다. 여기서 알킬 기가 탄소-탄소 이중 결합을 포함하는 경우, 이는 알케닐 기를 제공한고; 탄소-탄소 삼중 결합의 존재는 알키닐 기를 제공한다. 하나의 예시에서, 알킬, 알케닐 및 알키닐 기는 1 내지 25 탄소 원자를 포함한다. 하나의 예시에서, 알킬, 알케닐 및 알키닐 기는 1 내지 10 탄소 원자를 포함한다. 하나의 예시에서, 알킬, 알케닐 및 알키닐 기는 1 내지 6 탄소 원자를 포함한다. 하나의 예시에서, 알킬, 알케닐 및 알키닐 기는 1 내지 4 탄소 원자를 포함한다. 하나의 예시에서, 알킬, 알케닐 및 알키닐 기는 1 내지 3 탄소 원자를 포함한다. 하나의 예시에서, 알킬, 알케닐 및 알키닐 기는 1 내지 2 탄소 원자를 포함한다. 또다른 예시에서, 알킬 기는 1 탄소 원자를 포함한다. 알케닐 및 알키닐 기에서의 하한은 2 탄소 원자이시클로알킬 기의 하한은 3 탄소 원자라고 이해된다.
알킬, 알케닐 또는 알키닐 기는, 즉 알킬 기의 하나 이상의 수소 원자를 공식적으로 대체하면서 예를 들어 1회, 2회, 또는 3회, 예를 들어 1회 치환될 수 있다. 그러한 치환체의 예시는 할로 (예를 들어 플루오로, 클로로, 브로모 및 아이오도), 아릴, 하이드록시, 니트로, 아미노, 알콕시, 알킬티오, 카르복시, 시아노, 티오, 포밀, 에스테르, 아실, 티오아실, 아미도, 설폰아미도, 카바메이트 등이다.
-(C3-C5)알케닐렌-은, 길이가 3 내지 5 탄소인 2가 알켄 기를 의미하고, 이는 가령 -(C3-C5)알케닐렌-O- 또는 -(C3-C5)알케닐렌-O-C(O)N(H)- 내 또다른 원자에 부착될 수 있다. -(C3-C5)알케닐렌-은 1 내지 4 C1-C6 알킬 기로 임의로 치환될 수 있다.
카르복시는 기능적 기 CO2H을 의미하고, 이는 탈프로톤화 형태 (CO2 -)일 수 있다.
할로 또는 할로겐은 각각 플루오로, 브로모, 클로로 또는 아이오도이다.
아실 및 티오아실은 각각 식 -C(O)-알킬 또는 -C(S)-알킬의 기능적 기를 의미하고, 여기서 알킬은 여기서 전에 정의된 바와 같다.
에스테르는 모이어티 -OC(=O)-를 포함하는 기능적 기를 의미한다.
아미도는 모이어티 -N(H)C(=O)-를 포함하는 기능적 기를 의미하고, 여기서 도시된 각각의 수소 원자는 알킬 또는 아릴로 대체될 수 있다.
카바메이트는 모이어티 -N(H)C(=O)O-를 포함하는 기능적 기를 의미하고, 여기서 도시된 각각의 수소 원자는 알킬 또는 아릴로 대체될 수 있다.
설폰아미도는 모이어티 -SO2N(H)2-를 포함하는 기능적 기를 의미하고, 여기서 도시된 각각의 수소 원자는 알킬 또는 아릴로 대체될 수 있다.
알킬옥시 (알콕시와 동의어) 및 알킬티오 모이어티는 각각 식 -O-알킬 및 -S-알킬을 갖고, 여기서 알킬은 여기서 전에 정의된 바와 같다.
Et3NH+는 다음 구조를 지칭한다
Figure pct00003
.
알케닐옥시, 알키닐옥시, 알케닐티오 및 알키닐티오는 식 -O-알케닐, -O-알키닐, -S-알케닐 및 S-알키닐을 갖고, 여기서 알케닐 및 알키닐은 여기서 전에 정의된 바와 같다.
중수소화 알킬은 여기서 정의된 바와 같은 알킬 기를 여기서 의미하고, 여기서 알킬 기의 하나 이상의 수소 원자는 중수소로 대체된다. 하나 이상의 중수소화 알킬 기가 여기서 개시된 분자 내에 존재할 때, 각각의 중수소화 C1-C6 알킬 기는 동일 또는 상이할 수 있다.
중수소화 C1-C6알킬은 여기서 -C1-C6알킬 기를 의미하고 여기서 C1-C6알킬 기의 하나 이상의 수소 원자는 중수소로 대체된다. 하나 이상의 중수소화 C1-C6알킬 기가 여기서 개시된 분자 내에 존재할 때, 각각의 중수소화 C1-C6 알킬 기는 동일 또는 상이할 수 있다.
중수소화 알콕시는 여기서-O-알킬 기를 의미하고, 여기서 알킬 기의 하나 이상의 수소 원자는 중수소로 대체된다. 하나 이상의 중수소화 알킬 기가 여기서 개시된 분자 내에 존재할 때, 각각의 중수소화 C1-C6 알킬 기는 동일 또는 상이할 수 있다.
중수소화 C1-C6알콕시는 여기서 O-C1-C6알킬 기를 의미하고 여기서 C1-C6알킬 기의 하나 이상의 수소 원자는 중수소로 대체된다. 하나 이상의 중수소화 알킬 기가 여기서 개시된 분자 내에 존재할 때, 각각의 중수소화 C1-C6 알킬 기는 동일 또는 상이할 수 있다.
중수소화 메톡시는 여기서 -OCD1-3을 의미한다. -OCD1-3는 -OCH2D, -OCHD2, 또는 -OCD3를 포함하는 것을 의미한다고 이해된다. 하나 이상의 중수소화 메톡시 기가 여기서 개시된 분자 내에 존재할 때, 각각의 중수소화 메톡시 기는 동일 또는 상이할 수 있다.
아미노 기는 여기서 식 -N(R)2 기를 의미하고 여기서 각각의 R는 독립적으로 수소, 알킬 또는 아릴이다. 예를 들어, R는 불포화, 비치환된 C1-6 알킬 가령 메틸 또는 에틸일 수 있다. 또다른 예시에서, 질소 원자 N에 부착된 두 R 기는 연결되어 링을 형성한다. 여기서 두 Rs가 질소 원자 N에 부착된 하나의 예시는 대표적으로 밀단 탄소 원자로부터 두 수소 원자가 제거되고 이에 의해 아민의 질소 원자와 함께 링을 형성하는, 알칸으로부터 공식적으로 유래된 -R-R- 형태 알킬렌 디라디칼이다. 공지된 바와 같이 시클릭 아민 상 디라디칼은 반드시 알킬렌일 필요는 없고: 모르폴린 (여기서 -R-R-는 -(CH2)2O(CH2)2-)은 시클릭 아미노 치환체가 제조될 수 있는 예시이다.
여기서 아미노는 또한 그러한 아미노 기를 포함하는 화합물의 결과인 아민의 그의 영역 4차화 또는 프로톤화 유도체를 포함한다고 이해된다. 후자의 예시는 염 가령 하이드로클로라이드 염으로 이해될 수 있다.
아릴은 여기서 방향족 화합물로부터 수소 원자의 공식적 제거로 형성된 라디칼을 의미한다.
아릴렌 디라디칼은, 공식적으로, 두 수소 원자의 제거에 의해 방향족 모이어티로부터 유래되고, 특히 문맥상 반대를 나타내지 않는 한, 모노시클릭, 예를 들어, 페닐렌일 수 있다. 본업계에서 숙련가에게 공지된 바와 같이, 헤테로헤테로방향족 모이어티는 하나 이상의 탄소 원자 및 거기에 부착된 임의의 수소 원자 대신 하나 이상의 헤테로원자, 대표적으로 O, N 또는 S를 포함하는 방향족 모이어티의 하위세트이다. 예시적 헤테로방향족 모이어티는 피리딘, 푸란, 피롤, 티오펜 및 피리미딘을 포함한다. 헤테로방향족 링의 추가 예시는 피리딜; 피리다진 (여기서 2 질소 원자는 방향족 6-원 링 내 인접); 피라진 (여기서 2 질소는 6-원 방향족 링 내 1,4-배치); 피리미딘 (여기서 2 질소 원자는 6-원 방향족 링 내 1,3-배치); 및 1,3,5-트리아진 (여기서 3 질소 원자는 6-원 방향족 링 내 1,3,5-배치)를 포함한다.
아릴 또는 아릴렌 라디칼은 전자-구인성 기로 한번 이상 치환될 수 있다.
젬시타빈의 인산 유도체는 다음 구조를 갖는 화합물을 포함한다:
Figure pct00004
또는
Figure pct00005
젬시타빈의 인산 유도체 염 형태의 비-제한적 예시는 소듐 염, 포타슘 염, 칼슘 염, 트리에틸아민 염, 및 암모늄 염을 포함한다.
전자-구인성 기의 비-제한적 예시는 시아노 (-CN), 할로알킬, 아미드, 니트로, 케토 (-COR), 알케닐, 알키닐, 4차 아미노 (-N+R3), 에스테르, 아미도 (-C(O)NR2), N-연결된 아미도 (-NR-C(=O)-R), N-연결된 설폰아미도 (-NR-S(=O)2R), 설폭시 (-S(=O)2OH), 설포네이트 (S(=O)2OR), 설포닐 (S(=O)2R) 및 설폰아미드 (-S(=O)2-NR2)를 포함하고, 여기서 각각의 R는 C1-C6 알킬 기, C3-C20 헤테로시클릭 기, 또는 C3-C20 아릴 기로부터 독립적으로 선택되고, 여기서 C1-C6 알킬 기는 에테르, 아미노, 모노- 또는 디-치환된 아미노, 시클릭 C1-C5 알킬아미노, 이미다졸릴, C1-C6 알킬피페라지닐, 모르폴리노, 티올, 티오에테르, 테트라졸, 카르복시산, 에스테르, 아미드, 모노- 또는 디-치환된 아미드, N-연결된 아미드 (-NR-C(=O)-R), N-연결된 설폰아미드 (-NR-S(=O)2-R), 설폭시 (-S(=O)2OH), 설포네이트 (S(=O)2OR), 설포닐 (S(=O)2R), 설폭시 (S(=O)OH), 설피네이트 (S(=O)OR), 설피닐 (S(=O)R), 포스포노옥시(-OP(=O)(OH)2), 포스페이트 (OP(=O)(OR)2), 및 설폰아미드 (-S(=O)2-NR2)로부터 선택된 하나 이상의 기로 치환될 수 있고, 여기서 각각의 R는 C1-C6 알킬 기, C3-C20 헤테로시클릭 기, 또는 C3-C20 아릴 기로부터 독립적으로 선택된다. 또다른 예시에서, 각각의 R은 C1-C6 알킬 기 (알킬의 정의에 기초, 여기서 상기 C1-C6 알킬 기는 비치환된 C1-C6 알콕시 및 치환된 C1-C6 알콕시 기를 포함한다)이다. 또다른 예시에서, 각각의 R은 C1-C6 알킬, 비치환된 C1-C6 알콕시 또는 치환된 C1-C6 알콕시이고, 여기서 치환된 알킬 또는 치환된 알콕시는 에테르, -OH 아미노, 모노- 또는 디-치환된 아미노, 시클릭 C1-C5 알킬아미노, 이미다졸릴, C1-C6 알킬피페라지닐, 모르폴리노, 티올, 티오에테르, 테트라졸, 카르복시산, 에스테르, 아미드, 모노- 또는 디-치환된 아미드, N-연결된 아미드 (-NR-C(=O)-R), N-연결된 설폰아미드 (-NR-S(=O)2-R), 설폭시 (-S(=O)2OH), 설포네이트 (S(=O)2OR), 설포닐 (S(=O)2R), 설폭시 (S(=O)OH), 설피네이트 (S(=O)OR), 설피닐 (S(=O)R), 포스포노옥시(-OP(=O)(OH)2), 포스페이트 (OP(=O)(OR)2), 및 설폰아미드 (-S(=O)2-NR2)로부터 선택된 하나 이상의 기로 치환되고, 여기서 각각의 R는 C1-C6 알킬 기, C3-C20 헤테로시클릭 기, 또는 C3-C20 아릴 기로부터 독립적으로 선택된다.
식 (I)의 화합물의 이들 3 영역: 트리거, 링커 및 이펙터 영역-의 구성과 변형이 이제 기술된다.
식 (I)의 화합물의 트리거 영역은 일반적으로 5 원 링에 융합된 6 원 링을 포함하는 컨쥬게이트된 바이시클릭 모이어티를 포함한다.
이론에 구속됨 없이, 예를 들어 CYP1B1에 의해 실행되는 하이드록시화용 기질로서의 식 (I)의 화합물의 활성은, 그 위치에서 도 1a-1d에 나타낸 바와 같이 하이드록시화가 발생하는 제거 공정, 1,4-, 1,6- 또는 1,8-제거에 의해 화합물의 즉석 붕괴를 유도하는 하이드록시화에 민감한 트리거 모이어티의 구조에 의해 일부 달성된다고 생각된다. 또한, -OCH3는 정상적으로 하이드록시화 및 연이은 O-탈알킬화를 통해 대사된다. 그러나, 중수소화 메톡시는 동력학적 동위원소 효과를 통해 CYP 기초 하이드록시화 및 O-탈알킬화에 향상된 안정성을 부여할 수 있다. 인접 방향족 C-H 결합은 따라서 CYP 기초 하이드록시화에 대한 부위가 되고, 이는 1,4-, 1,6- 또는 1,8-제거를 통해 화합물의 즉석 붕괴를 유도한다.
식 (I)의 화합물의 구조로부터, 탄소 원자의 컨쥬게이션으로 인해, 화합물 즉석 분해에 대한 3 메카니즘 중 어느 하나가 트리거 영역 상 치환체의 특성과 독립적으로 발생할 수 있음이 주목된다. 따라서 식 (I)의 화합물의 이 영역의 넓고 다양한 특성이 아래에 논의된 바와 같이 허용될 수 있다.
식 (I)의 화합물의 한 구체예에서, Y2는 C이고 Y3는 C(H)이다. 식 (I)의 화합물의 또다른 구체예에서, 각각의 Y3 및 Y4는 C(H)이다. 식 (I)의 화합물의 또다른 구체예에서, Y2는 C이고, Y3 및 Y4는 C(H)이다. 식 (I)의 화합물의 또다른 구체예에서, Y2는 C이고, Y1, Y3 및 Y4는 C(H)이다.
식 (I)의 화합물의 또다른 구체예에서, Y1는 N, Y2는 C, Y3는 C(H), Y4는 C(H)이고, Y5는 S이다. 식 (I)의 화합물의 또다른 구체예에서, Y1는 N, Y2는 N, Y3는 C(H), Y4는 C(H)이고, Y5는 C(H)이다. 식 (I)의 화합물의 또다른 구체예에서, Y1는 C(H), Y2는 C, Y3는 C(H), Y4는 C(H)이고, Y5는 N(CH3)이다. 식 (I)의 화합물의 또다른 구체예에서, Y1는 C(H), Y2는 N, Y3는 C(H), Y4는 C(H)이고, Y5는 N이다. 식 (I)의 화합물의 또다른 구체예에서, Y1는 N, Y2는 N, Y3는 C(H), Y4는 C(H)이고, Y5는 N이다. 식 (I)의 화합물의 또다른 구체예에서, Y1는 C, Y2는 C, Y3는 C(H), Y4는 C(H)이고, Y5는 S이다. 식 (I)의 화합물의 또다른 구체예에서, Y1는 N, Y2는 C, Y3는 C(H), Y4는 C(H)이고, Y5는 O이다. 식 (I)의 화합물의 또다른 구체예에서, Y1는 C(H), Y2는 C, Y3는 C(H), Y4는 C(H)이고, Y5는 O이다.
치환체 Z1, Z2 및 Z4는 일반적으로 여기서 기술된 바와 같을 수 있다. 그러나, 이들 모이어티 중 적어도 하나는 화합물의 하이드록시화를 위한 부위를 허용하도록 수소 원자이다. 식 (I)의 화합물의 일부 구체예에서, Z2 또는 Z4는 수소이다. 다른 구체예에서 Z2 및 Z4는 수소이다. Z2 또는 Z4는 수소 원자 또는 Z2 및 Z4 둘 다 수소 원자 또는 Z2 또는 Z4 중 어느 것도 수소 원자가 아닌 이들 구체예에서, Z1는 수소일 수 있다. 식 (I)의 화합물의 특정의 구체예에서, 각각의 Z1, Z2 및 Z4는 수소 원자이다.
식 (I)의 또다른 구체예에서, Z3는 수소 알킬, 중수소화 알킬, C1-6알콕시, 중수소화 C1-6알콕시, 할로, 알케닐, 알키닐, 아릴, 아르알킬, 알킬옥시, 알케닐옥시, 알키닐옥시, 아릴옥시, 아르알킬옥시, 알킬티옥시, 알케닐티옥시, 알키닐티옥시, 아릴티옥시, 아르알킬티옥시, 아미노, 하이드록시, 티오, 카르복시, 포밀, 니트로 및 시아노로부터 선택되고, 여기서 각각의 알킬, 알케닐, 알키닐, 알콕시 및 아릴 모이어티는 독립적으로 1-3 할로로 임의로 치환된다. 식 (I)의 또다른 구체예에서, Z3는 할로이다. 식 (I)의 또다른 구체예에서, Z3는 메틸이다. 식 (I)의 또다른 구체예에서, Z3는 메톡시이다. 식 (I)의 또다른 구체예에서, Z3는 브로모이다.
식 (I)의 또다른 구체예에서, Z5는 수소 알킬, 중수소화 알킬, C1-6알콕시, 중수소화 C1-6알콕시, 할로, 알케닐, 알키닐, 아릴, 아르알킬, 알킬옥시, 알케닐옥시, 알키닐옥시, 아릴옥시, 아르알킬옥시, 알킬티옥시, 알케닐티옥시, 알키닐티옥시, 아릴티옥시, 아르알킬티옥시, 아미노, 하이드록시, 티오, 카르복시, 포밀, 니트로 및 시아노로부터 선택된다. 식 (I)의 또다른 구체예에서, Z5는 할로이다. 식 (I)의 또다른 구체예에서, Z5는 메틸이다. 식 (I)의 또다른 구체예에서, Z5는 메톡시이다. 식 (I)의 또다른 구체예에서, Z5는 브로모이다.
식 (I)의 또다른 구체예에서, Z3 및 Z5는 각각 수소 알킬, 중수소화 알킬, C1-C6 알콕시, 중수소화 C1-C6 알콕시, 할로, 알케닐, 알키닐, 아릴, 아르알킬, 알킬옥시, 알케닐옥시, 알키닐옥시, 아릴옥시, 아르알킬옥시, 알킬티옥시, 알케닐티옥시, 알키닐티옥시, 아릴티옥시, 아르알킬티옥시, 아미노, 하이드록시, 티오, 할로, 카르복시, 포밀, 니트로 및 시아노로부터 선택되고, 여기서 각각의 알킬, 알케닐, 알키닐, 알콕시 및 아릴 모이어티는 독립적으로 1-3 할로로 임의로 치환된다. 식 (I)의 또다른 구체예에서, Z3 및 Z5는 각각 알킬, 중수소화 알킬, C1-C6 알콕시, 중수소화 C1-C6알콕시, 알케닐, 알키닐, 아릴, 아르알킬, 알킬옥시, 알케닐옥시, 알키닐옥시, 아릴옥시, 아르알킬옥시, 알킬티옥시, 알케닐티옥시, 알키닐티옥시, 아릴티옥시, 아르알킬티옥시, 아미노, 하이드록시, 티오, 할로, 카르복시, 포밀, 니트로 및 시아노로부터 선택되고, 여기서 각각의 알킬, 알케닐, 알키닐, 알콕시 및 아릴 모이어티는 독립적으로 1-3 할로로 임의로 치환된다. 식 (I)의 또다른 구체예에서, Z3 및 Z5는 각각 중수소화 C1-C6알콕시이다. 식 (I)의 또다른 구체예에서, Z3 및 Z5는 각각 C1-C6알콕시이다. 식 (I)의 또다른 구체예에서, Z3 및 Z5는 각각 C1-C6알킬이다. 식 (I)의 또다른 구체예에서, Z3 및 Z5는 각각 C1-C3알콕시이다. 식 (I)의 또다른 구체예에서, Z3 및 Z5는 각각 C1-C3알킬이다. 식 (I)의 또다른 구체예에서, Z3 및 Z5는 각각 수소이다. 식 (I)의 또다른 구체예에서, Z3 및 Z5는 각각 할로이다. 식 (I)의 또다른 구체예에서, Z3 및 Z5는 각각 브로모이다. 식 (I)의 또다른 구체예에서, Z3 및 Z5는 각각 중수소화 메톡시이다. 식 (I)의 또다른 구체예에서, Z3 및 Z5는 각각 메톡시이다. 식 (I)의 또다른 구체예에서, Z3 및 Z5는 각각 메틸이다. 식 (I)의 또다른 구체예에서, Z3 및 Z5는 각각 -OCD1-3이다. 식 (I)의 또다른 구체예에서, Z3 및 Z5는 각각 -OCD3이다.
식 (I)의 또다른 구체예에서, Z3 및 Z5는 각각 독립적으로 할로, 메틸, 메톡시, 또는 중수소화 메톡시로부터 선택된다.
본발명의 한 양상은 식 (I)의 화합물:
Figure pct00006
또는 그의 약학적으로 허용가능한 염, 에스테르, 용매화물, 또는 입체이성질체에 관한 것이고, 여기서:
-L-는 다음으로서 정의되고: -(C1-C5)알킬렌-O-C(O)-, -(C3-C5)알케닐렌-O-,
Figure pct00007
A는 -(C1-C5)알킬렌-O-C(O)-;
E는 -O-, -O-C(O)N(H)-, -O-C(S)N(H)-, -S- 또는 -S-C(O)N(H)-;
D는 -(C1-C5)알킬렌- 또는 -(C3-C5)알케닐렌-;
Y1는 C=C, 탄소 또는 질소, 여기서 Y1는 질소이면, Z1는 부재;
각각의 Y4 및 Y5는 독립적으로 탄소 또는 질소, 여기서 Y3는 질소이면, Z3는 부재하고 Y4는 질소이면, Z5는 부재하고;
Y2는 C 또는 N 여기서 Y2는 질소이면, Z2는 부재;
Y5는 산소, 탄소, 질소 또는 황 원자, 여기서 Y5는 산소, 또는 황 원자일 때 Z6는 부재;
Z3, Z4, 및 Z5는 각각 독립적으로 수소, 알킬, 중수소화 알킬, C1-6알콕시, 중수소화 C1-6알콕시, 알케닐, 알키닐, 아릴, 아르알킬, 알킬옥시, 알케닐옥시, 알키닐옥시, 아릴옥시, 아르알킬옥시, 알킬티옥시, 알케닐티옥시, 알키닐티옥시, 아릴티옥시, 아르알킬티옥시, 아미노, 하이드록시, 티오, 할로, 카르복시, 포밀, 니트로 및 시아노로부터 선택되고, 여기서 각각의 알킬, 알케닐, 알키닐, 알콕시, 및 아릴 모이어티는 독립적으로 1-3 할로로 임의로 치환되고;
단 Z1, Z2 또는 Z4 중 적어도 하나는 H;
Z6는 수소, 알킬, 알케닐, 알키닐, 아릴 및 아르알킬로부터 선택되고, 여기서 각각의 알킬, 알케닐, 알키닐, 알콕시, 및 아릴 모이어티는 독립적으로 1-3 할로로 임의로 치환되고;
각각의 Z8는 독립적으로 수소, 비치환된 C1-C6 알킬, 치환된 C1-C6 알킬, 비치환된 C1-C6 알콕시, 비치환된 중수소화 C1-C6 알콕시, 치환된 C1-C6 알콕시, 및 치환된 중수소화 C1-C6 알콕시이고 여기서 치환된 알킬, 알콕시 및 중수소화 알콕시는 아미노, 모노- 또는 디-치환된 아미노, 시클릭 C1-C5 알킬아미노, 이미다졸릴, C1-C6 알킬피페라지닐, 모르폴리노, 티올, 티오에테르, 테트라졸, 카르복시산, 에스테르, 아미도, 모노- 또는 디-치환된 아미도, N-연결된 아미드, N-연결된 설폰아미드, 설폭시, 설포네이트, 설포닐, 설폭시, 설피네이트, 설피닐, 포스포노옥시, 포스페이트 또는 설폰아미드로부터 선택된 하나 이상의 기로 치환되고, 여기서 각각의 알킬, 알케닐, 알키닐, 알콕시, 및 아릴은 1-3 할로로 임의로 치환되고; 및
식 (I), 또는 그의 약학적으로 허용가능한 염, 에스테르, 아미드, 용매화물, 또는 입체이성질체의 또다른 구체예에서, Y3 및 Y4는 각각 탄소이다.
식 (I), 또는 그의 약학적으로 허용가능한 염, 에스테르, 아미드, 용매화물, 또는 입체이성질체의 또다른 구체예에서, Z3, Z4 및 Z5는 각각 할로, 비치환된 C1-C3 알킬, 치환된 C1-C3 알킬, 비치환된 C1-C3 알콕시, 치환된 C1-C3 알콕시, 비치환된 중수소화 C1-C3 알콕시, 또는 치환된 C1-C3 알콕시로부터 선택되고, 여기서 각각의 알킬 및 알콕시 모이어티는 1-3 할로로 독립적으로 치환될 수 있다.
식 (I), 또는 그의 약학적으로 허용가능한 염, 에스테르, 아미드, 용매화물, 또는 입체이성질체의 또다른 구체예에서, Z3, Z4 및 Z5는 각각 브로모, 클로로, 플루오로, 1-3 할로로 임의로 치환된 메틸, 중수소화 메틸, 1-3 할로로 임의로 치환된 메톡시, 또는 중수소화 메톡시로부터 선택된다.
식 (I)의 또다른 구체예는 식 (Ia)를 갖는 화합물:
Figure pct00008
.
또는 그의 약학적으로 허용가능한 염, 에스테르, 용매화물, 또는 입체이성질체에 관한 것이고,
여기서 L, Y1, Y2, Y5, Z3, Z4, Z5, Z6는 식 (I)의 구체예 중 어느 하나에서 정의된 바와 같다.
식 (I) 및 (Ia)의 다른 구체예는 식 (Ib-i), (Ib-ii), (Ib-iii), (Ib-iv), (Ib-v), (Ib-vi), (Ib-vii), (Ib-viii), (Ib-ix), (Ib-x), (Ib-xi), (Ib-xii), (Ib-xiii), (Ib-xiv), (Ib-xv), (Ib-xvi), (Ib-xvii) 또는 (Ib-xviii)중 하나 이상을 갖는 화합물:
Figure pct00009
Figure pct00010
Figure pct00011
또는 상기 식 중 어느 하나의 약학적으로 허용가능한 염, 에스테르, 용매화물, 또는 입체이성질체에 관한 것이고, 여기서:
Z3 및 Z5는 각각 독립적으로 할로, 1-3 할로로 임의로 치환된 메틸, 1-3 할로로 임의로 치환된 메톡시 또는 중수소화 메톡시;
Z4는, 존재할 때, 할로, 1-3 할로로 임의로 치환된 메틸, 1-3 할로로 임의로 치환된 메톡시 또는 중수소화 메톡시;
-L-이펙터는: -(C1-C3)알킬렌-O-C(O)-이펙터,
Figure pct00012
D는 -(C1-C3)알킬렌-;
E는 -O-, -O-C(O)N(H)-, -O-C(S)N(H)-, -S- 또는 -S-C(O)N(H)-;
A는 -C(H)2-O-C(O)-.; 및
이펙터는 (i) 젬시타빈의 인산 유도체 또는 (ii) 젬시타빈의 인산 유도체의 염 형태의 일부이다.
식 (I), (Ia), (Ib-i), (Ib-ii), (Ib-iii), (Ib-iv), (Ib-v), (Ib-vi), (Ib-vii), (Ib-viii), (Ib-ix), (Ib-x), (Ib-xi), (Ib-xii), (Ib-xiii), (Ib-xiv), (Ib-xv), (Ib-xvi), (Ib-xvii), 또는 (Ib-xviii)를 갖는 화합물, 또는 그의 약학적으로 허용가능한 염, 에스테르, 아미드, 용매화물, 또는 입체이성질체의 다른 구체예에서, 링커 영역 (L)는 -C(H)2-O-C(O)-이다.
L는 아래에 더욱 상세히 기술되는 링킹 영역을 나타낸다. L (링킹 영역)의 각각의 다음 구체예는, 화학적으로 가능한 경우 트리거 영역 및 이펙터의 임의의 조합을 포함하는, 각각의 트리거 영역 및 이펙터에 대한 별도의 구체예일 수 있다. 링커 영역의 다양한 구체예가 이제 기술된다.
각각의 하위구체예를 포함하는, 식 (I), (Ia), (Ib-i), (Ib-ii), (Ib-iii), (Ib-iv), (Ib-v), (Ib-vi), (Ib-vii), (Ib-viii), (Ib-ix), (Ib-x), (Ib-xi), (Ib-xii), (Ib-xiii), (Ib-xiv), (Ib-xv), (Ib-xvi), (Ib-xvii), ot (Ib-xviii)의 다른 구체예에서, 링커 영역 (L)는 -(C1-C5)알킬렌-O-C(O)-이다.
각각의 하위구체예를 포함하는, 식 (I), (Ia), (Ib-i), (Ib-ii), (Ib-iii), (Ib-iv), (Ib-v), (Ib-vi), (Ib-vii), (Ib-viii), (Ib-ix), (Ib-x), (Ib-xi), (Ib-xii), (Ib-xiii), (Ib-xiv), (Ib-xv), (Ib-xvi), (Ib-xvii), 또는 (Ib-xviii)의 다른 구체예에서, 링커 영역 (L)는 -(C3-C5)알케닐렌-O-C(O)-이다.
각각의 하위구체예를 포함하는, 식 (I), (Ia), (Ib-i), (Ib-ii), (Ib-iii), (Ib-iv), (Ib-v), (Ib-vi), (Ib-vii), (Ib-viii), (Ib-ix), (Ib-x), (Ib-xi), (Ib-xii), (Ib-xiii), (Ib-xiv), (Ib-xv), (Ib-xvi), (Ib-xvii), 또는 (Ib-xviii)의 다른 구체예에서, 링커 영역 (L) 은
Figure pct00013
이고
여기서:
A는 -(C1-C5)알킬렌-O-C(O);
X는 -O-;
D는 -(C1-C5)알킬렌- 또는 -(C3-C5)알케닐렌-;
및 각각의 Z8는 본명세서에서 구체예 중 어느 하나에서 정의된 바와 같다.
각각의 하위구체예를 포함하는, 식 (I), (Ia), (Ib-i), (Ib-ii), (Ib-iii), (Ib-iv), (Ib-v), (Ib-vi), (Ib-vii), (Ib-viii), (Ib-ix), (Ib-x), (Ib-xi), (Ib-xii), (Ib-xiii), (Ib-xiv), (Ib-xv), (Ib-xvi), (Ib-xvii), 또는 (Ib-xviii)의 다른 구체예에서, 링커 영역 (L)은
Figure pct00014
이고
여기서:
A는 -(C1-C2)알킬렌-O-C(O)-;
X는 -O-;
D는 -(C1-C2)알킬렌- 또는 -(C3-C4)알케닐렌-;
및 각각의 Z8는 본명세서에서 구체예 중 어느 하나에서 정의된 바와 같다.
각각의 하위구체예를 포함하는, 식 (I), (Ia), (Ib-i), (Ib-ii), (Ib-iii), (Ib-iv), (Ib-v), (Ib-vi), (Ib-vii), (Ib-viii), (Ib-ix), (Ib-x), (Ib-xi), (Ib-xii), (Ib-xiii), (Ib-xiv), (Ib-xv), (Ib-xvi), (Ib-xvii), 또는 (Ib-xviii)의 다른 구체예에서, 링커 영역 (L)은
Figure pct00015
여기서:
A는 -(C1-C2)알킬렌-O-C(O)-;
각각의 하위구체예를 포함하는, 식 (I), (Ia), (Ib-i), (Ib-ii), (Ib-iii), (Ib-iv), (Ib-v), (Ib-vi), (Ib-vii), (Ib-viii), (Ib-ix), (Ib-x), (Ib-xi), (Ib-xii), (Ib-xiii), (Ib-xiv), (Ib-xv), (Ib-xvi), (Ib-xvii), 또는 (Ib-xviii)의 다른 구체예에서, 링커 영역 (L)은
Figure pct00016
여기서
A는 -(C1-C2)알킬렌-O-C(O)-; 및
D는 -CH2- 또는 -CH2-C(H)=C(H-이다.
식 (Ic-i), (Ic-ii), (Ic-iii), (Ic-iv), (Ic-v), (Ic-vi), (Ic-vii), (Ic-viii), (Ic-ix), (Ic-x), (Ic-xi), (Ic-xii), (Ic-xiii), (Ic-xiv), (Ic-xv), (Ic-xvi), (Ic-xvii), (Ic-xviii), (Ic-xix), 또는 (Ic-xx), 또는 그의 약학적으로 허용가능한 염, 에스테르, 아미드, 용매화물, 또는 입체이성질체 중 어느 하나의 다른 구체예에서:
Rb는 헤테로시클로알킬, 또는 알콕시아릴로 임의로 치환된 -(C1-C5)알킬;
Rz는 헤테로시클로알킬 또는 아릴로 임의로 치환된 -(C1-C5)알킬; 및
M는 -O- Na+, -O- Et3NH+, -O- K+ 또는
-O- NH4 +이다.
식 (Ic-i), (Ic-ii), (Ic-iii), (Ic-iv), (Ic-v), (Ic-vi), (Ic-vii), (Ic-viii), (Ic-ix), (Ic-x), (Ic-xi), (Ic-xii), (Ic-xiii), (Ic-xiv), (Ic-xv), (Ic-xvi), (Ic-xvii), (Ic-xviii), (Ic-xix), 또는 (Ic-xx), 또는 그의 약학적으로 허용가능한 염, 에스테르, 아미드, 용매화물, 또는 입체이성질체 중 어느 하나의 다른 구체예에서:
Rb는 헤테로시클로알킬, 또는 알콕시아릴로 임의로 치환된 -(C1-C5)알킬;
Rz는 헤테로시클로알킬 또는 아릴로 임의로 치환된 -(C1-C5)알킬; 및
M은 Et3NH+이다.
식 (Ic-i), (Ic-ii), (Ic-iii), (Ic-iv), (Ic-v), (Ic-vi), (Ic-vii), (Ic-viii), (Ic-ix), (Ic-x), (Ic-xi), (Ic-xii), (Ic-xiii), (Ic-xiv), (Ic-xv), (Ic-xvi), (Ic-xvii), (Ic-xviii), (Ic-xix), 또는 (Ic-xx), 또는 그의 약학적으로 허용가능한 염, 에스테르, 아미드, 용매화물, 또는 입체이성질체 중 어느 하나의 다른 구체예에서:
Rb는 헤테로시클로알킬, 또는 알콕시아릴로 임의로 치환된 -(C1-C5)알킬;
Rz는 헤테로시클로알킬 또는 아릴로 임의로 치환된 -(C1-C5)알킬; 및
M는 -O-(C1-C5)알킬-헤테로시클로알킬이다.
각각의 하위구체예를 포함하는, 식 (I), (Ia), (Ib-i), (Ib-ii), (Ib-iii), (Ib-iv), (Ib-v), (Ib-vi), (Ib-vii), (Ib-viii), (Ib-ix), (Ib-x), (Ib-xi), (Ib-xii), (Ib-xiii), (Ib-xiv), (Ib-xv), (Ib-xvi), (Ib-xvii), (Ib-xviii), 또는 그의 약학적으로 허용가능한 염, 에스테르, 아미드, 용매화물, 또는 입체이성질체의 다른 구체예에서, Z3, Z5 및 Z4는, 존재할 때, 각각 메톡시 또는 중수소화 메톡시이다.
각각의 하위구체예를 포함하는, 식 (I), (Ia), (Ib-i), (Ib-ii), (Ib-iii), (Ib-iv), (Ib-v), (Ib-vi), (Ib-vii), (Ib-viii), (Ib-ix), (Ib-x), (Ib-xi), (Ib-xii), (Ib-xiii), (Ib-xiv), (Ib-xv), (Ib-xvi), (Ib-xvii), 또는 (Ib-xviii), 또는 그의 약학적으로 허용가능한 염, 에스테르, 아미드, 용매화물, 또는 입체이성질체의 다른 구체예에서, Z3, Z5 및 Z4는, 존재할 때, 각각 1-3 할로로 임의로 치환된 메톡시, 또는 중수소화 메톡시, 및 이펙터는 본명세서에서 기술된 구체예 중 어느 하나에서 정의된 바와 같다.
각각의 하위구체예를 포함하는, 식 (I), (Ia), (Ib-i), (Ib-ii), (Ib-iii), (Ib-iv), (Ib-v), (Ib-vi), (Ib-vii), (Ib-viii), (Ib-ix), (Ib-x), (Ib-xi), (Ib-xii), (Ib-xiii), (Ib-xiv), (Ib-xv), (Ib-xvi), (Ib-xvii), (Ib-xviii), 또는 그의 약학적으로 허용가능한 염, 에스테르, 아미드, 용매화물, 또는 입체이성질체의 다른 구체예에서, Z3 및 Z5는 각각 독립적으로 브로모 또는 플루오로, 및 Z4는, 존재할 때, 1-3 할로로 임의로 치환된 메톡시, 또는 중수소화 메톡시이다.
각각의 하위구체예를 포함하는, 식 (I), (Ia), (Ib-i), (Ib-ii), (Ib-iii), (Ib-iv), (Ib-v), (Ib-vi), (Ib-vii), (Ib-viii), (Ib-ix), (Ib-x), (Ib-xi), (Ib-xii), (Ib-xiii), (Ib-xiv), (Ib-xv), (Ib-xvi), (Ib-xvii), (Ib-xviii), 또는 그의 약학적으로 허용가능한 염, 에스테르, 아미드, 용매화물, 또는 입체이성질체의 다른 구체예에서, Z3 및 Z5는 각각 독립적으로 브로모 또는 플루오로; Z4는, 존재할 때, 1-3 할로로 임의로 치환된 메톡시, 또는 중수소화 메톡시; 및 이펙터는 본명세서에서 기술된 구체예 중 어느 하나에서 정의된 바와 같다.
다음 식 (Id-i), (Id-ii), (Icd-iii), (Id-iv), (Id-v), (Id-vi), (Id-vii), (Id-viii), (Id-ix), (Id-x), (Id-xi), (Id-xii), (Id-xiii), (Id-xiv), (Id-xv), (Id-xvi), (Id-xvii), (Id-xviii), (Id-xix), 또는 (Id-xx) 중 임의의 하나 이상과 관련된 식 (I)를 갖는 화합물의 다른 구체예:
Figure pct00017
Figure pct00018
또는 상기 식 중 어느 하나의 약학적으로 허용가능한 염, 에스테르, 용매화물, 또는 입체이성질체, 여기서:
Z3, Z4, 및 Z5는 각각 독립적으로 1-3 할로로 임의로 치환된 메틸, 할로, 1-3 할로로 임의로 치환된 메톡시 또는 중수소화 메톡시; 및
M2는 -O- Na+, -O- Et3NH+, -O- K+, -O- NH4 +이다.
일부 구체예에서, 식 (Id-ii-1)를 갖는 화합물
Figure pct00019
또는 그의 약학적으로 허용가능한 염, 에스테르, 아미드, 용매화물, 또는 입체이성질체가 여기서 제공되고
여기서:
Z3, Z4, 및 Z5는 각각 독립적으로 수소, 1-3 할로로 임의로 치환된 메틸, 할로, 1-3 할로로 임의로 치환된 메톡시 또는 중수소화 메톡시; 및
각각의 M2는 OH 및 O- (M1)로 이루어진 그룹으로부터 독립적으로 선택되고, 여기서 (M1)은 각각의 경우에서 독립적으로 금속 양이온, 암모늄, 알킬 암모늄 양이온, 또는 아미노 산 양이온이다.
(Id-ii-1)의 일부 구체예에서, M2의 하나는 OH; 및 M2의 다른 하나는 O- (M1)이다.
일부 다른 구체예에서, M2의 각각 경우는 O- (M1) 독립적으로 선택된다.
(Id-ii-1)의 일부 구체예에서, (M1)는 Na+, Ca2+, K+, Mg2+, Zn2+, NH4+, (HNEt3)+, 메글루민-H+, 트로메타민-H+, 디에탄올아민-H+, 라이신-H+, 및 아르기닌-H+로 이루어진 그룹으로부터 선택된다. 특정의 구체예에서, (M1)은 Na+이다.
(Id-ii-1)의 일부 구체예에서, 각각의 Z5 및 Z3는 독립적으로 메톡시이다.
(Id-ii-1)의 일부 구체예에서, Z4는 수소이다.
(Id-ii-1)의 일부 구체예에서, 화합물은:
Figure pct00020
또는 그의 약학적으로 허용가능한 염, 에스테르, 아미드, 용매화물, 또는 입체이성질체다.
식 (I)의 화합물의 또다른 구체예는 여기서 실시예에서 기술된 화합물 중 하나 이상, 또는 화합물 1-5 중 임의의 하나 이상의 약학적으로 허용가능한 염, 에스테르, 아미드, 용매화물, 또는 입체이성질체다.
식 (I)의 화합물의 젬시타빈 부분은 대표적으로 CYP1B1가 발현된 세포 내 소정의 표적 효과를 제공하는 모이어티이다. 식 (I)의 모든 구체예에서, 식 (I)의 링커 부분은 식 (I)의 이펙터 성분의 아미노 보유 염기 부분에 직접 부착된다. 방출된 때, 이펙터 분자는 이펙터 분자가 방출된 세포에 대해 확실한 약물학적 효과를 가진다.
이펙터 분자는 그의 방출을 유발하는 역할을 하는 세포에 대해 세포억제 또는 세포독성 효과를 가진다 (예를 들어 CYP1B1-를 발현시키는 세포). 공지된 바와 같이, 세포독성 분자는 세포에 독성인 분자이고 세포억제제는 세포의 성장 및/또는 복제를 억제하는 것이다.
본 발명에 따른 사용을 위해, 본원에 기재된 화합물 또는 이의 생리학적으로 허용되는 염, 용매화물, 에스테르 또는 아미드는 이를 위한 하나 이상의 약제학적으로 허용되는 담체 및 선택적으로 다른 치료 및/또는 예방 성분과 함께 화합물 또는 이의 생리학적으로 허용되는 염, 에스테르, 아미드 또는 기타 생리학적 기능성 유도체를 포함하는 약제학적 제형으로 제공될 수 있다. 임의의 담체 (들)는 제형의 다른 성분과 양립할 수 있고 그 수용자에게 해롭지 않다는 의미에서 허용된다.
본 발명에 따른 화합물의 생리학적으로 허용되는 염의 예로는 아세트산, 락트산, 타르타르산, 말레산, 시트르산, 피루브산, 옥살산, 푸마르산, 옥살로아세트산, 이세티온산, 락토비온산 및 숙신산과 같은 유기 카르복실산으로 형성된 산 부가 염; 메탄 설폰산, 에탄 설폰산, 벤젠 설폰산 및 p- 톨루엔 설폰산과 같은 유기 설폰산 및 염산, 황산, 인산 및 설팜 산과 같은 무기산을 포함한다.
생리학적으로 허용되는 에스테르 또는 아미드, 특히 에스테르의 결정은 당업자의 기술 범위 내에 있다.
기재된 용도/방법 중 어느 하나에 사용될 수 있는 본원에 기재된 화합물의 상응하는 용매화물을 제조, 정제 및/또는 취급하는 것이 편리하거나 바람직할 수 있다. 용어 용매화물은 화합물 또는 화합물의 염과 같은 용질의 복합체 및 용매를 지칭하기 위해 본원에서 사용된다. 용매가 물인 경우, 용매화물은 기질 분자 당 존재하는 물 분자의 수에 따라 수화물, 예를 들어 일수화물, 이수화물, 삼수화물 등으로 지칭될 수 있다.
본 발명의 화합물은 다양한 입체 이성질체 형태로 존재할 수 있고, 상기 정의된 본발명의 화합물은 거울상 이성질체 및 라세미 혼합물을 포함하여 모든 입체 이성질체 형태 및 그의 혼합물을 포함한다는 것을 이해할 것이다. 본발명은 화학식 I의 화합물의 개별 거울상 이성질체뿐만 아니라 이러한 거울상 이성질체의 전체 또는 부분 라세미 혼합물을 포함하는 임의의 이러한 입체 이성질체 형태 또는 입체 이성질체 혼합물의 사용을 그 범위 내에 포함한다.
또한, 본원에 기술된 것과 같은 항암 SMDC는 종양 표적화 펩티드, 예를 들어 파지 디스플레이 펩타이드 라이브러리 개발을 통해 확인된 작은 펩티드와 같은 종양 표적화 모이어티의 부착에 의해 특정 종양을 향해 표적화될 수 있음을 당업자는 이해할 것이다. 이러한 펩티드 또는 다른 모이어티는 특정 암, 특히 고형 종양에 대한 이들을 포함하는 접합체의 표적화를 도울 수 있다. 따라서, 이러한 접합체, 즉 종양-표적화 모이어티에 접합된 본발명의 화합물의 제공은 이러한 접합체의 사용을 포함하거나 포함하는 본원에 기재된 조성물, 용도 및 방법과 같이 본발명의 추가 측면을 형성한다.
본 발명의 화합물은 당업계에서 쉽게 이용가능한 시약 및 기술 및/또는 후술하는 예시적인 방법을 사용하여 제조될 수 있다. 본발명의 화합물은 CYP1B1 효소를 발현하는 세포에서 세포 독성을 나타내지만 CYP1B1을 발현하지 않는 정상 세포에서는 실질적으로 무독성인 것으로 밝혀졌다. 본발명의 화합물은 또한 CYP1A1 효소를 발현하는 세포에서 세포 독성을 나타낼 수 있다. 따라서 실제로, 본발명의 화합물은 (전형적으로 CYP1B1에 의해) 세포 독성제로 전환되는 비 독성 전구 약물이다.
적합하게는, 본발명의 화합물은 하기 정의된 바와 같은 세포 독성 IC50 값 또는 10 μM 미만, 유리하게는 5 μM 미만, 예를 들어 1.0 μM 또는 0.5 μM 미만을 갖는다.
일부 구체예에서, 본발명의 화합물의 세포 독성은 화합물을 CYP1B1을 발현하도록 조작된 세포와 상이한 연속 희석으로 인큐베이션함으로써 측정될 수 있다. 적합하게는, 상기 세포는 재조합 CYP1B1 및 사이토크롬 P-450 환원 효소 (CPR)를 함유할 수 있는 차이니즈 햄스터 난소 (CHO) 세포일 수 있다. 인간 P-450 리덕타제와 함께 발현될 때 높은 수준의 기능성 효소는 디 하이드로폴레이트 리덕타제 (DHFR) 유전자 증폭을 사용하여 달성할 수 있다. 일반적으로, 조작된 세포는 화합물과 함께 인큐베이션될 수 있으며, 적절한 시간 (예: 96 시간) 후, 적절한 분석 시약과 함께 추가로 (예를 들어, 1.5 시간 동안) 인큐베이션되어 배양액 내 살아있는 세포의 수를 표시할 수 있다. 적합한 분석 시약은 세포에 의해 조직 배양 배지에 용해되는 포르마잔 제품으로 생체 환원되는 MTS (아래 참조)이다. 포르마잔 제품의 흡광도는 510nm에서 직접 측정할 수 있으며, 490nm 또는 510nm에서 흡광도 양으로 측정한 정량적 포르마잔 제품은 배양중인 살아있는 세포의 수에 정비례한다. 본발명에 따른 화합물의 IC50 값을 결정하는 상세한 방법은 하기 실시예 3에 기재되어 있다.
비교를 위해, 본발명의 화합물의 IC50 값은 또한 CYP1B1, 예를 들어 야생형 CHO 세포를 함유하지 않는 세포 (예를 들어, 차이니즈 햄스터 난소 세포)에서 측정될 수 있다. 본발명의 화합물은 적합하게는 적어도 200의 CYP1B1 발현 세포에 대한 배 선택성을 가질 수 있으며, 여기서 "배 선택성"은 비 -CYP1 발현 세포에서 주어진 화합물의 IC50 값 및 CYP1B1 발현 세포에서 동일한 화합물의 IC50 값의 몫으로 정의된다.
일부 구체예에서, 본발명의 화합물의 세포 독성은 또한 실시예 5에 기재된 바와 같이 두경부 편평 세포 암종 환자로부터 유래된 원발성 두경부 종양 세포와 상이한 연속 희석으로 화합물을 인큐베이션함으로써 측정될 수 있다.
일부 구체예에서, 본발명의 화합물의 생체 내 효능은 CYP1B1을 구성적으로 누드 마우스의 옆구리에 피하로 발현하는 원발성 두경부 편평 세포 암종 종양 세포를 이식하여 원발성 인간 종양 이종 이식 모델을 생성하고 종양 성장에 대한 SMDC 처리의 효과를 측정함으로써 측정될 수 있다.
일부 구체예에서, 본발명의 화합물의 생체 내 약동학적 파라미터 (AUC, 농도, tmax, t½)는 마우스, 래트, 개 및 원숭이를 포함하는 설치류 및 비 설치류 종의 혈장 및 조직에서 측정될 수 있다.
이와 같이, 본발명은 또한 치료에 의한 인간 또는 동물 신체의 치료 특히, CYP1B1을 발현하는 세포를 특징으로 하는 본발명의 특정 구체예에서 증식성 병태를 포함하는, 인간 및 비-인간 동물에서, 예를 들어 증식성 장애 또는 질병과 같은 증식성 병태의 치료 또는 예방에 사용하기 위한, 전술한 약제학적으로 허용되는 에스테르, 아미드, 염, 용매화물 및 SMDC를 포함하는 본발명의 화합물 중 하나 이상의 용도를 포함한다. 보다 구체적으로, 본발명은 CYP1B1 발현에 의해 본발명의 특정 구체예에서 특징화되는 암 치료를 위한 본발명의 화합물 중 하나 이상의 용도를 포함한다.
본원에서 "증식성 병태"는 시험관내 또는 생체 내에서 종양 또는 과형성 성장과 같이 원하지 않는 과다 또는 비정상 세포의 원치 않는 또는 제어되지 않은 세포 증식을 특징으로 하는 질환 또는 장애를 의미한다. 증식성 병태의 예는 악성 신생물 및 종양, 암, 백혈병, 건선, 뼈 질환, 섬유증식성 장애 (예: 결합 조직) 및 죽상 경화증을 포함하는 전 악성 및 악성 세포 증식이다.
상기 증식성 병태는 본발명의 특정 구체예에서 CYP1B1을 발현하는 세포에 의해 특징 화될 수 있다.
상기 증식성 병태는 방광암, 뇌암, 유방암, 결장암, 두경부암, 신장 암, 폐암, 간암, 난소 암, 전립선 암 및 피부암으로부터 선택될 수 있다. 일부 구체예에서, 상기 증식성 상태는 고형 종양을 포함할 수 있다.
또다른 구체예는 화학식 I 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염, 에스테르, 아미드 또는 용매화물의 모든 구체예를 포함하여, 화학식 I에 따른 화합물의 치료적 또는 예방적 유용한 양을 대상체에게 투여하는 것을 포함하는, 증식성 상태의 치료 또는 예방 방법에 관한 것이고, 여기서 증식성 병태는 방광암, 뇌암, 유방암, 결장암, 두경부암, 신장암, 폐암, 간암, 난소 암, 전립선 암 및 피부암이다.
본원에서 "치료"는 인간이든지 또는 비-인간 동물 (예를 들어, 수의학 적용에서)이든지, 증식성 병태에 대한 일부 원하는 치료 효과가 달성되는, 치료에 의한 치료를 의미한다; 예를 들어, 진행 속도의 감소, 진행 속도의 중단, 장애의 개선 또는 상태의 치유를 포함하는 장애의 진행의 억제. 예방 조치로서의 치료도 포함된다. 본원에서 예방 또는 예방에 대한 언급은 상태의 완전한 예방을 나타내거나 요구하지 않는다. 그 발현은 대신 본발명에 따른 예방 또는 예방을 통해 감소되거나 지연될 수 있다. 본원에서 "치료적 유효량"은 합당한 이익/위험 비에 상응하는 이러한 치료 효과를 생성하는데 효과적인 본발명의 하나 이상의 화합물 또는 이러한 하나 이상의 화합물을 포함하는 약제학적 제형의 양을 의미한다.
따라서, 본발명의 화합물은 항암제로 사용될 수 있다. 본원에서 용어 "항암제"는 암을 치료하는 화합물 (즉, 암 치료에 유용한 화합물)을 의미한다. 본발명의 화합물의 항암 효과는 세포 증식 조절, 혈관 신생 억제, 전이 억제, 침습 억제 또는 아폽토시스 촉진을 포함하는 하나 이상의 메커니즘을 통해 발생할 수 있다.
본 발명의 화합물의 적절한 투여량은 환자마다 다를 수 있음을 이해할 것이다. 최적의 투여량을 결정하는 것은 일반적으로 본발명의 치료의 임의의 위험 또는 유해한 부작용에 대한 치료적 이점 수준의 균형을 포함할 것이다. 선택된 용량 수준은 특정 화합물의 활성, 투여 경로, 투여 시간, 화합물의 배설 속도, 치료 기간, 사용된 다른 약물, 화합물 또는 물질, 환자의 연령, 성별, 체중, 상태, 일반적인 건강 상태 및 이전 병력의 조합을 포함한 다양한 요인에 따라 달라진다. 화합물 (들)의 양 및 투여 경로는 궁극적으로 의사의 재량에 달려 있지만, 일반적으로 투여량은 원하는 효과를 달성하기 위해 작용 부위에서 국소 농도를 달성하는 것이다.
생체 내 투여는 치료 과정 전반에 걸쳐 연속적으로 또는 간헐적으로 1 회 용량으로 수행될 수 있다. 가장 효과적인 투여 수단 및 투여량을 결정하는 방법은 당업자에게 잘 알려져 있으며, 치료에 사용되는 제제, 치료 목적, 치료할 표적 세포 및 치료할 대상에 따라 달라질 것이다. 치료 의사에 의해 선택된 용량 수준 및 패턴으로 단일 또는 다중 투여가 수행될 수 있다.
약제학적 제형은 경구, 국소 (피부, 협측 및 설하 포함), 직장 또는 비경구 (피하, 피내, 근육 내 및 정맥 내 포함), 비강 및 폐 투여, 예를 들어 흡입에 적합한 것들을 포함한다. 적절한 경우, 제형은 개별 투약 단위로 편리하게 제공될 수 있고 약학 분야에 잘 알려진 임의의 방법에 의해 제조될 수 있다. 방법은 전형적으로 활성 화합물을 액체 담체 또는 미분된 고체 담체 또는 둘 모두와 결합시키는 단계를 포함하고, 필요하다면 생성물을 원하는 제형으로 성형하는 단계를 포함한다.
담체가 고체인 경구 투여에 적합한 약제학적 제형은 가장 바람직하게는 각각 소정량의 활성 화합물을 함유하는 볼루스, 캡슐 또는 정제와 같은 단위 투여량 제형으로 제공된다. 정제는 선택적으로 하나 이상의 보조 성분과 함께 압축 또는 성형에 의해 제조될 수 있다. 압축 정제는 결합제, 윤활제, 불활성 희석제, 윤활제, 표면 활성제 또는 분산제와 임의로 혼합된 분말 또는 과립과 같은 자유 유동 형태의 활성 화합물을 적합한 기계에서 압축하여 제조할 수 있다. 성형된 정제는 비활성 액체 희석제로 활성 화합물을 성형하여 만들 수 있다. 정제는 선택적으로 코팅될 수 있고, 코팅되지 않은 경우 선택적으로 스코어링될 수 있다. 캡슐은 활성 화합물을 단독으로 또는 하나 이상의 보조 성분과 혼합하여 캡슐 쉘에 충전한 다음 일반적인 방식으로 밀봉하여 제조할 수 있다. 카세제는 임의의 보조 성분 (들)과 함께 활성 화합물이 쌀 종이 봉투에 밀봉되어있는 캡슐과 유사하다. 활성 화합물은 또한 분산성 과립으로 제형화될 수 있으며, 이는 예를 들어 투여 전에 물에 현탁되거나 음식에 뿌려질 수 있다. 과립은 예를 들어 봉지에 포장될 수 있다. 담체가 액체인 경구 투여에 적합한 제형은 수성 또는 비 수성 액체의 용액 또는 현탁액, 또는 수 중유 액체 에멀젼으로 제공될 수 있다.
경구 투여용 제형은 제어 방출 투여 형태, 예를 들어 활성 화합물이 적절한 방출 제어 매트릭스로 제형화되거나 적절한 방출 제어 필름으로 코팅된 정제를 포함한다. 이러한 제형은 예방적 사용에 특히 편리할 수 있다.
담체가 고체인 직장 투여에 적합한 약제학적 제형은 가장 바람직하게는 단위 투여량 좌약으로 제공된다. 적합한 담체는 코코아 버터 및 당업계에서 일반적으로 사용되는 다른 물질을 포함한다. 좌약은 활성 화합물을 연화되거나 용융된 담체 (들)와 혼합한 후 금형에서 냉각 및 성형함으로써 편리하게 형성될 수 있다.
비경구 투여에 적합한 약제학적 제형은 수성 또는 친수성 비히클에서 활성 화합물의 멸균 용액 또는 현탁액을 포함한다.
주사 가능한 제제는 일시 주입 또는 연속 주입에 적합할 수 있다. 이러한 제제는 단위 투여량 또는 다중 용량 용기에 편리하게 제공되며, 사용을 위해 필요할 때까지 제제 도입 후 밀봉된다. 대안적으로, 활성 화합물은 사용 전에 멸균된 발열원이 없는 물과 같은 적합한 비히클로 구성된 분말 형태일 수 있다.
활성 화합물은 또한 장기간으로 작용하는 데포 제제로 제형화될 수 있으며, 이는 근육 내 주사 또는 이식, 예를 들어 피하 또는 근육 내로 투여될 수 있다. 데포 제제는 예를 들어 적합한 중합체 또는 소수성 물질, 또는 이온 교환 수지를 포함할 수 있다. 이러한 지속성 제형은 예방적 사용에 특히 편리하다.
구강을 통한 폐 투여에 적합한 제형은 활성 화합물을 함유하고 바람직하게는 0.5 내지 7 마이크론 범위의 직경을 갖는 입자가 수용자의 기관지 트리에 전달되도록 제시된다.
한 가지 가능성으로서, 이러한 제형은 활성 화합물, 적합한 액체 또는 기체 추진제 및 선택적으로 계면 활성제 및/또는 고체 희석제와 같은 기타 성분를 포함하는, 흡입 장치에 사용하기 위한 예를 들어 젤라틴의 관통 가능한 캡슐, 에 편리하게 제공될 수 있는 미세하게 분쇄된 분말의 형태로, 또는 대안적으로 자가-추진 제형으로 제공될 수 있다. 적합한 액체 추진제는 프로판 및 클로로플루오로카본을 포함하고, 적절한 기체 추진제는 이산화탄소를 포함한다. 활성 화합물이 용액 또는 현탁액의 액적 형태로 분배되는 자가-추진 제형이 또한 사용될 수 있다.
이러한 자가-추진 제형은 당업계에 공지된 것과 유사하며 확립된 절차에 의해 제조될 수 있다. 적절하게는, 자가-추진 제형은 원하는 스프레이 특성을 갖는 수동-작동 또는 자동 작동 밸브가 제공된 용기에 제공된다. 유리하게는 밸브는 각각의 작동시 고정된 부피, 예를 들어 25 내지 100 마이크로 리터를 전달하는 계량 형이다.
추가 가능성으로서, 활성 화합물은 가속 기류 또는 초음파 교반을 사용하여 흡입용 미세 액적 미스트를 생성할 수 있는 분무기 또는 분무기에서 사용하기 위한 용액 또는 현탁액의 형태일 수 있다.
비강 투여에 적합한 제제는 일반적으로 위에서 설명한 것과 유사한, 폐 투여를 위한 제제를 포함한다. 분배될 때, 이러한 제형은 바람직하게는 비강에 머무를 수 있도록 10 내지 200 마이크론 범위의 입자 직경을 가져야 한다; 이는 적절한 입자 크기의 분말을 사용하거나 적절한 밸브를 선택하여 적절하게 달성할 수 있다. 다른 적합한 제형은 코 가까이에 보관된 용기로부터 비강을 통한 신속한 흡입에 의한 투여를 위한 20 내지 500 마이크론 범위의 입자 직경을 갖는 거친 분말, 및 0.2 내지 5 % w/v의 수성 또는 유성 용액 또는 현탁액의 활성 화합물을 포함하는 점비액을 포함한다.
상기 언급된 담체 성분에 더하여 상기 기재된 약제학적 제형은 희석제, 완충제, 향미제, 결합제, 표면 활성제, 증점제, 윤활제, 보존제 (항산화제 포함) 등, 및 의도된 수용자의 혈액과 제형을 등장성으로 만드는 목적으로 포함된 물질과 같은 적절한 하나 이상의 추가 담체 성분을 포함할 수 있음을 이해해야 한다.
약제학적으로 허용되는 담체는 당업자에게 잘 알려져 있으며 0.1M 및 바람직하게는 0.05M 인산염 완충액 또는 0.8 % 식염수를 포함하지만 이에 제한되지는 않는다. 추가로, 약제학적으로 허용되는 담체는 수성 또는 비 수성 용액, 현탁액 및 에멀젼일 수 있다. 비 수성 용매의 예는 프로필렌 글리콜, 폴리에틸렌 글리콜, 올리브 오일과 같은 식물성 기름 및 에틸 올레이트와 같은 주사 가능한 유기 에스테르이다. 수성 담체에는 물, 알코올성/수성 용액, 에멀젼 또는 현탁액 (식염수 및 완충 매체 포함)이 포함된다. 비경구 비히클에는 염화나트륨 용액, 링거 덱스트로스, 덱 스트로스 및 염화나트륨, 젖산 링거 또는 고정 오일이 포함된다. 예를 들어, 항균제, 항산화제, 킬레이트제, 불활성 가스 등과 같은 방부제 및 기타 첨가제가 또한 존재할 수 있다.
국소 제형에 적합한 제형은 예를 들어 겔, 크림 또는 연고로서 제공될 수 있다.
치료될 부위, 예를 들어, 상처나 궤양에 직접 분무 또는 뿌릴 수 있는 액체 또는 분말 제형이 제공될 수도 있다. 대안적으로, 붕대, 거즈, 메쉬 등과 같은 담체를 제형과 함께 분무하거나 뿌린 다음 치료할 부위에 적용할 수 있다.
수의학적 용도를 위한 치료학적 제형은 편리하게 분말 또는 액체 농축 형태일 수 있다. 표준 수의학적 제형 관행에 따라, 락토오스 또는 수 크로스와 같은 통상적인 수용성 부형제를 물리적 특성을 개선하기 위해 분말에 혼입시킬 수 있다. 따라서 본발명의 특히 적합한 분말은 50 내지 100 % w/w, 바람직하게는 60 내지 80 % w/w의 활성 성분 (들) 및 0 내지 50 % w/w, 바람직하게는 20 내지 40 % w/w의 통상적인 수의학 부형제 성분을 포함한다. 이러한 분말은 예를 들어 중간 프리믹스를 통해 동물 사료에 첨가하거나 동물 식수에 희석할 수 있다.
본 발명의 액체 농축물은 적합하게는 화합물 또는 이의 유도체 또는 염을 함유하고 수의학적으로 허용되는 수혼화성 용매, 예를 들어 폴리에틸렌 글리콜, 프로필렌 글리콜, 글리세롤, 글리세롤 포르말 또는 최대 30 % v/v 에탄올과 혼합된 그러한 용매를 선택적으로 포함할 수 있다. 액체 농축액은 동물의 식수에 투여될 수 있다.
일반적으로, 본발명의 하나 이상의 화합물의 적절한 용량은 하루에 대상체의 체중 1 kg 당 약 1 ㎍ 내지 약 5000 ㎍ 범위, 예를 들어 1, 5, 10, 25, 50, 하루 100, 250, 1000, 2500 또는 5000 μg/kg일 수 있다. 화합물 (들)이 염, 용매화물, SMDC 등인 경우, 투여량은 모 화합물을 기준으로 계산될 수 있으므로 사용되는 실제 중량은 비례적으로 증가될 수 있다.
일부 구체예에서, 본발명의 하나 이상의 화합물은 상기 기재된 종류의 증식성 상태의 치료를 위한 병용 요법에서, 즉 다른 치료제와 함께 사용될 수 있다. 이러한 다른 치료제의 예는 토포이소머라제 억제제, 알킬화제, 항대사산물, DNA 결합제 및 미세관 억제제 (튜불린 표적 제제), 예를 들어 시스플라틴, 사이클로포스파미드, 에토포사이드, 이리노테칸, 플루다라빈, 5FU, 탁산 또는 미토마이신 C를 포함하지만 이에 제한되지는 않는다. 다른 치료제는 당업자에게 명백할 것이다. 다른 치료법과 병용된 활성 화합물의 경우, 두 가지 이상의 치료법이 개별적으로 다양한 투여 일정과 다른 경로를 통해 제공될 수 있다.
상기 열거된 제제와 본발명의 화합물의 조합은 그의 일반적인 지식 및 숙련된 의사에게 알려진 투여 요법을 사용하여 투여량을 선택하는 의사의 재량일 것이다.
본 발명의 화합물이 1 개, 2 개, 3 개, 4 개 이상, 바람직하게는 1 개 또는 2 개, 바람직하게는 1 개의 다른 치료제와 병용 요법으로 투여되는 경우, 화합물은 동시에 또는 순차적으로 투여될 수 있다. 순차적으로 투여하는 경우, 가까운 간격으로 (예: 5-10 분에 걸쳐) 또는 더 긴 간격 (예: 1, 2, 3, 4 시간 이상 또는 필요한 경우 더 긴 간격으로)으로 투여할 수 있고, 정확한 투약 요법은 치료제 (들)의 특성에 상응한다.
본 발명의 화합물은 또한 방사선 요법, 광역학 요법, 유전자 요법, 수술 및 조절식과 같은 비화학요법 치료와 함께 투여될 수 있다.
본 발명의 또 다른 측면은 다음을 포함하는 CYP1B1 효소를 발현하는 종양 세포의 존재에 대한 환자의 진단 방법에 관한 것이다: (a) 본발명의 하나 이상의 화합물을 환자에게 투여하는 단계; (b) 후속적으로 생성되는 상응하는 히드록실화 대사 산물의 양을 결정하는 단계; 및 (c) 이 양을 환자의 종양 세포의 존재 또는 부재와 상호비교하는 단계.
본 발명의 또 다른 측면은 (1) 환자에서 종양의 존재를 확인하는 단계; 및 (2) 치료를 필요로 하는 것으로 확인된 환자를 치료적으로 또는 예방적으로 유용한 양의 제 1 항 내지 제 15 항 중 어느 한 항에 따른 화합물 또는 그의 제약 상 허용되는 염, 에스테르, 아미드 또는 용매화물을 투여함으로써 치료하는 단계;의 방법에 관한 것이다. 한 구체예에서, 종양은 종양 바이오 마커를 사용하여 확인할 수 있다. 종양 바이오 마커는 종양이 원발성인지 전이성인지 결정하는 것과 같은 특정 진단을 확립하는 데에도 유용할 수 있다. 이를 구별하기 위해, 원발성 종양 부위에 위치한 세포에서 발견되는 염색체 변화를 이차 부위에서 발견되는 것과 비교하여 스크리닝할 수 있다. 변화가 일치하면 이차 종양이 전이성으로 식별될 수 있다. 변화가 다르면 이차 종양은 별개의 원발성 종양으로 식별될 수 있다.
다른 구체예에서, 종양은 생검에 의해 확인될 수 있다. 사용될 수 있는 생검의 비 제한적인 예는 미세 바늘 흡인 생검, 코어 바늘 생검, 진공 보조 생검, 영상 유도 생검, 외과 생검, 절개 생검, 내시경 생검, 골수 생검을 포함한다.
다른 구체예에서, 종양의 식별은 자기 공명 영상 (MRI)에 의해 이루어질 수 있으며, 자기장을 사용하여 신체의 상세한 이미지를 생성하는 검사이다.
다른 구체예에서, 종양의 확인은 뼈 스캔에 의해 이루어질 수 있다. 다른 구체예에서, 종양의 확인은 CAT 스캔이라고도 불리는 컴퓨터 단층 촬영 (CT) 스캔일 수 있다.
또 다른 구체예에서, 종양의 식별은 동일한 기계를 사용하여 동시에 수행된 양전자 방출 단층 촬영 (PET) 스캔 및 컴퓨터 단층 촬영 (CT) 스캔으로부터의 이미지를 결합한 통합 PET-CT 스캔에 의해 이루어질 수 있다.
다른 구체예에서, 종양의 식별은 초음파에 의해 이루어질 수 있는데, 이는 고주파 음파를 사용하여 신체 내부의 종양을 찾는 영상 검사이다.
보다 구체적인 구체예에서, 환자를 치료하는 데 도움이 될 수 있는 동반 진단은 개인 맞춤형 의학의 한 형태로 1910 Innovation Park Drive, Tuscon, AZ 85755에 위치한 Roche Group의 구성원인 Ventana Medical Systems, Inc.에서 얻을 수 있다.
하기 실시예 및 도식은 본원에 개시된 화합물에 대한 일반적인 합성 절차를 묘사한다. 본원에 개시된 화합물의 합성은 이러한 실시예 및 반응식에 의해 제한되지 않는다. 당업자는 본명세서에 개시된 화합물을 합성하기 위해 다른 절차를 사용할 수 있고, 실시예 및 도식에 기재된 절차가 그러한 절차 중 하나일 뿐임을 알 것이다. 하기 설명에서, 당업자는 특정 반응 조건, 첨가된 시약, 용매 및 반응 온도가 본개시 내용의 범위 내에 속하는 특정 화합물의 합성을 위해 변형될 수 있음을 인식할 것이다.
화합물의 제조
일반
1H, 13C 및 31P 핵 자기 공명 (NMR) 스펙트럼을 Bruker Avance DPX 400MHz 분광계에서 표시된 용매에 기록했다. 화학적 이동은 ppm으로 표시된다. 신호 분할 패턴은 단일 선 (s), 넓은 단일 선 (bs), 이중선 (d), 삼중 선 (t), 사 중선 (q), 다중 선 (m) 또는 이들의 조합으로 설명된다. 저분해능 전자 분무 (ES) 질량 스펙트럼을 메탄올/물 (95: 5) 또는 물 아세토 니트릴 (1: 1) + 0.1 % 포름산을 이동상으로 사용하여 양이온 모드로 실행된 Bruker MicroTof 질량 분석기에서 기록했다. Bruker Microtof 질량 분석기에서 고분해능 전기 분무 측정을 수행했다. LC-MS 분석은 Agilent HPLC 1100 (Phenomenex Gemini Column 5μ C18 110Å 50x3.0 mm, (0 ~ 20 % MeOH/H2O)로 용리된) 및 Bruker Microtof 질량 분석기와 직렬로 연결된 다이오드 어레이 검출기로 수행되었다. 실리카겔 (230-400 메쉬) 또는 RediSep®.4, 12, 40 또는 80g 실리카 예비충전 컬럼으로 수행했다. 모든 출발 물질은 시판되며 추가 정제없이 사용되었다. 모든 반응은 달리 명시되지 않는 한 건조 및 불활성 조건에서 수행되었다.
라세미 혼합물 또는 입체 이성질체의 비-라세미 혼합물로부터 단일 입체 이성질체의 제조 및/또는 분리 및 분리 방법은 당업계에 잘 알려져 있다. 예를 들어, 광학 활성 (R)- 및 (S)-이성질체는 키랄 신톤 또는 키랄 시약을 사용하여 제조하거나 통상적인 기술을 사용하여 분해할 수 있다. 거울상 이성질체 (R- 및 S- 이성질체)는 예를 들어 다음에 의해 통상의 지식을 가진 자가 본업계에서 공지된 방법에 의해 분해할 수 있다: 결정화에 의해 분리될 수 있는 부분 입체 이성질체 염 또는 복합체의 형성; 분리될 수 있는 부분 입체 이성질체 유도체의 형성을 통해, 이는 예를 들어 결정화, 하나의 거울상 이성질체와 거울상 이성질체-특이적 시약의 선택적 반응, 예를 들어 효소 산화 또는 환원, 이어서 변형 및 비 변형 거울상 이성질체의 분리; 또는 예를 들어 결합된 키랄 리간드를 갖는 실리카와 같은 키랄 지지체상에서 또는 키랄 용매의 존재 하에서 키랄 환경에서 기체-액체 또는 액체 크로마토 그래피. 원하는 거울상 이성질체가 상기 기재된 분리 절차 중 하나에 의해 다른 화학 물질로 전환되는 경우, 원하는 거울상 이성질체 형태를 유리하기 위해 추가 단계가 필요할 수 있음을 이해할 것이다. 대안적으로, 특정 거울상 이성질체는 광학 활성 시약, 기질, 촉매 또는 용매를 사용하는 비대칭 합성에 의해 또는 비대칭 변환에 의해 거울상 이성질체에서 다른 이성질체로 전환함으로써 합성될 수 있다. 특정 거울상 이성질체가 풍부한 거울상 이성질체 혼합물의 경우, 주요 성분 거울상 이성질체는 재결정화에 의해 추가로 농축될 수 있다 (수율상 수반되는 손실과 함께).
아래 실시예는 본명세서에 개시된 화합물에 대한 일반적인 합성 절차를 묘사한다. 본원에 개시된 화합물의 합성은 이러한 실시예 및 반응식에 의해 제한되지 않는다. 당업자는 본명세서에 개시된 화합물을 합성하기 위해 다른 절차를 사용할 수 있고, 실시예 및 도식에 기재된 절차가 그러한 절차 중 하나일 뿐임을 알 것이다. 하기 설명에서, 당업자는 특정 반응 조건, 첨가된 시약, 용매 및 반응 온도가 본개시 내용의 범위 내에 속하는 특정 화합물의 합성을 위해 변형될 수 있음을 인식할 것이다. 달리 명시되지 않는 한, 제조 방법에 대한 설명을 포함하지 않는 하기 실시예의 중간 화합물은 당업자에게 상업적으로 이용가능하거나 또는 상업적으로 이용가능한 전구체 분자 및 당업계에 공지된 합성 방법을 사용하여 숙련된 기술자에 의해 합성될 수 있다.
달리 명시되지 않는 한, 제조 방법에 대한 설명을 포함하지 않는 하기 실시예의 중간 화합물은 당업자에게 상업적으로 이용가능하거나 그렇지 않으면 다음을 사용하여 당업자에 의해 합성될 수 있다.
트리거 전구체에 대한 일반적 제조 실시예
본발명의 화합물에 대한 트리거 전구체 분자는 다음 합성 반응식 및 본발명의 화합물에 도달하기 위한 숙련된 의약 화학에 공지된 출발물질, 시약 및/또는 반응 조건에 대한 임의의 필요한 변형을 행함에 의해 제조될 수 있다. 이들 반응식에 대한 합성 전구체 분자는 상업적으로 이용가능하거나 또는 그의 제조는 본업계에서 공지되어 있다.
제조 실시예 1
벤조푸란 트리거 전구체
벤조푸란 트리거 전구체 (i), 여기서 Z3, Z4 및 Z5는 본명세서에서 정의된 바와 같음,는 다음 반응식을 사용하여 제조될 수 있다:
Figure pct00021
벤조푸란-2-카르복실레이트의 합성은 널리 공지되어 있고 중간체 가령 (i-b)의 합성에 대해 많은 방법이 존재한다. 이와 같이, 적절히 치환된 살리실알데히드 출발 재료 (i-a)는 할로아세테이트 가령 에틸-2-브로모아세테이트와 반응시킬 수 있고, 이후 포밀펜옥시아세트산 유도체 중간체의 환화가 발생한다 [참조: H. Dumont 및 S. Kostanecki, "Zur kenntnis der cumaron-gruppe," Chemische Berichte, vol. 42, no. 1, pp. 911-915, 1909]. 환화는 염기성 촉매 가령 소듐 에탄올레이트, 1,8-디아조바이시클로-[5.4.0]-7-운데칸, 또는 포타슘 카보네이트의 존재 하 알콜성 용액 내에서 수행될 수 있다. 얻어진 에스테르는 이후 1차 알콜로의 카르복실레이트 에스테르의 환원을 위한 공지 방법 가령 금속 하이드라이드 환원제 (LiAlH4, LiBEt3H 또는 NaBH4)을 사용하여 소정의 트리거 전구체로 추가 기능화 또는 전환될 수 있다.
제조 실시예 2
벤조[b]티오펜 트리거 전구체
벤조[b]티오펜 트리거 전구체 (iii) 여기서 Z3, Z4 및 Z5는 본명세서에서 정의된 바와 같음,는 다음 반응식 중 하나를 사용하여 제조될 수 있다.
반응식 (ii)
Figure pct00022
대안적으로, 식 (ii)의 벤조티오펜-2-일 알콜은 식 (ii-e)의 치환된 살리실알데히드 유도체로부터 편리하게 제조될 수 있다 (상기 반응식 참조). 디메틸티오카바밀 클로라이드를 사용한 알킬화 및 연이은 Newman-Kwart 재배열은 식 (ii-g)의 중간체를 제공한다. 알칼리 마무리는 식 (ii-h)의 유리 티오페놀을 수득할 수 있고 이는 표준 절차를 사용하여 알킬화/환화 반응을 거칠 수 있다. 에스테르 중간체 (ii-i)는 이후 1차 알콜로의 카르복실레이트 에스테르의 환원을 위해 흔히 사용되는 방법 가령 테트라하이드로푸란 내 LAH을 사용하여 알콜 (ii)로 환원될 수 있다.
제조 실시예 3
1H-벤조[d]이미다졸 트리거 전구체
1H-벤조[d]이미다졸 트리거 전구체, 여기서 Z3, Z4 및 Z5는 본명세서에서 정의된 바와 같음,는 Borchardt et. al. "Preparation of tetrahydropyranones as hepatitis C virus RNA-dependent RNA polymerase inhibitors", WO 2004/074270에서 기술된 것과 유사한 다음 반응식을 사용하여 제조될 수 있다.
반응식 (iii)
Figure pct00023
적절하게 치환된 2-할로-니트로벤젠 (iii)는 메틸아민와 반응시켜 아미노 니트로 중간체를 형성할 수 있고 이는 이후 니트로 아렌의 아닐린로의 전환을 위한 공지 방법 가령 아연 및 산 공급원 가령 HCl을 사용하여 환원되어 화합물 (iii-b)을 얻을 수 있다. 화합물 (iii-b)은 이후 시약 가령 하이드록시 아세트산과 함께 가열에 의해 표적 알콜 (vi)로 전환될 수 있다.
제조 실시예 4
1H-인돌 트리거 전구체
1H-인돌 트리거 전구체, 여기서 Z3, Z4 및 Z5는 본명세서에서 정의된 바와 같음,는 Condie et. al. in Tetrahedron, (2005), 61(21), 4989-5004에서 기술된 것과 유사한 다음 반응식을 사용하여 제조될 수 있다.
반응식 (iv)
Figure pct00024
적절히 치환된 벤즈알데히드 출발 재료 (iv-a)는 2-아지도아세테이트 시약과 반응시키고 이후 불활성 용매 가령 오르토-디클로로벤젠 내에서 고온에서 가열하고 인돌 에스테르 중간체 (iv-b)을 제공할 수 있다. 인돌 (iv-b)는 이후 알킬 할라이드, 가령 메틸 아이오다이드, 및 적절한 염기, 가령 NaH로 알킬화되어, 끝에서 두 번째의 트리거 (iv-c)을 제공하고 이는 이후 카르복실산 에스테르의 1차 알콜로의 환원을 위해 흔히 사용되는 방법 가령 테트라하이드로푸란 내 리튬 알루미늄 하이드라이드를 사용하여 1차 알콜 표적 (vii)으로 환원될 수 있다.
제조 실시예 5
벤조티아졸 트리거 전구체
벤조티아졸 트리거 전구체, 여기서 Z3, Z4 및 Z5는 본명세서에서 정의된 바와 같음,는 다음 반응식을 사용하여 제조될 수 있다.
Figure pct00025
적절히 치환된 아닐린은 요오드화되고 이후 그러한 변환 실행에 공지 표준 방법 가령 N-아이오도숙시네이트를 사용하여 중간체 (v-b)로 아실화될 수 있고, 이후 아세틸 클로라이드와 반응시킨다. 아세트아미드 (v-b)는 시약 가령 Laweson 시약을 사용하여 상응하는 티오아세트아미드로 전환될 수 있고 이후 염기 또는 구리(I)아이오다이드를 사용하여 환화되어 티아졸 (v-c)을 제공할 수 있다.
2-메틸 기는 이후 산화제 가령 포타슘 퍼망가네이트를 사용하여 상응하는 카르복시산 (v-d)로 산화될 수 있다. 상기한 조건을 사용하여 1차 알콜 (ix)로의 연이은 전환이 실행될 수 있다.
제조 실시예 6
벤족사졸 트리거 전구체
벤족사졸 트리거 전구체, 여기서 Z3, Z4 및 Z5는 본명세서에서 정의된 바와 같음,는 다음 반응식을 사용하여 제조될 수 있다.
Figure pct00026
적절히 치환된 아닐린은 요오드화되고 이후 그러한 변환 실행에 공지 표준 방법 가령 N-아이오도숙시네이트를 사용하여 중간체 (vI-b)로 아실화될 수 있고, 이후 아세틸 클로라이드와 반응시킨다. 아세트아미드 (vI-c)는 환화되어 옥사졸 (vI-d)을 제공할 수 있다. 상기한 조건을 사용하여 1차 알콜 (vi)로의 연이은 전환이 실행될 수 있다.
본발명의 화합물에 대한 합성 실시예
본발명의 화합물은 아래 합성 반응식 I 및 II 및 본발명의 화합물에 도달하기 위한 숙련된 의약 화학자에게 공지된 출발물질, 시약 및/또는 반응 조건에 대한 임의의 필요한 변형을 행함에 의해 제조될 수 있다. 이들 반응식에 대한 합성 전구체 분자는 상업적으로 이용가능하거나 또는 그의 제조는 본업계에서 공지되어 있다.
합성 반응식 I
Figure pct00027
SMDCs의 포스페이트 유사체는 누클레오사이드의 포스페이트 및 포스포네이트 유사체의 합성을 위한 널리 공지되고 확립된 문헌 방법 (참조: Pradere et. al. Chem. Rev. 2014, 114, 9154-9218)을 사용하여 여기서 기술된 상위 중간체로부터 출발하여 제조될 수 있다.
중간체 화합물의 합성
화합물 A: (5,7-디브로모벤조푸란-2-일)메탄올
Figure pct00028
단계 A: Int A-1의 합성
Figure pct00029
DMF (1800 mL) 내 3,5-디브로모-2-하이드록시벤즈알데히드 (400 g, 1.44 mol) 및 에틸 2-브로모아세테이트 (360 g, 2.16 mol)의 용액에 무수 포타슘 카보네이트 (590 g, 4.29 mol)를 한번에 실온에서 부가했다. 혼합물을 100oC에서 가열하고 이 온도에서 밤새 자기적으로 교반했다. 혼합물을 실온까지 냉각시키고 고체를 여과에 의해 제거했다. 필터 케이크를 EtOAc로 세척하고 (500 mL × 3) 및 여액을 회전-증발기로 감압 하에서 농축하여 EtOAc를 제거했다. 잔사를 얼음 물 (w/w = 1/1, 4 L) 내에 붓고 이에 의해 황색 고체를 형성시켰다. 고체를 여과에 의해 수집하고 MeOH (200 mL)로 3회 세척했다. 고체를 감압 하에서 건조시켜 240 g의 화합물 Int A-1을 얻었고 이를 직접 다음 단계에서 사용했다. Rf = 0.5 (석유 에테르: EtOAc =20: 1)
단계 B: 화합물 A의 합성
Figure pct00030
MeOH (1000 mL) 및 THF (1000 mL) 내 Int A-1 (120 g, 0.35 mol)의 냉각 용액에 반응 온도를 5~10 oC 사이에서 유지하기 위해 NaBH4 (52.8 g, 1.39 mol)를, 조금씩 (5 g 각각) 부가했다. 얻어진 혼합물을 얼음 배쓰를 제거하고 16h의 기간에 걸쳐 반응이 실온까지 되도록 방치하기 전에 3 시간 동안 교반했다. 혼합물을 얼음/물 (w/w = 1/1, 3 L) 내에 붓고 농축하여 대부분의 유기 용매를 제거했다. 혼합물을 EtOAc로 추출하고 (800 mL × 3) 및 조합시킨 유기 세척물을 포화 식염수 (400 mL)로 3회 추출했다. 유기 상을 분리하고 무수 소듐 설페이트 상에서 건조시켰다. 이 공정을 반복하고 두 반응 생성물을 조합시키고 농축하여 120 g의 미정제 화합물 A를 얻었고 이를 직접 다음 단계에 사용했다. Rf = 0.4 (석유 에테르: EtOAc =5: 1) 1H NMR: 400 MHz CDCl3 7.62 (d, J=1.8 Hz, 1H), 7.58 (d, J=1.5 Hz, 1H), 6.69 (s, 1H), 4.81 (d, J=3.3 Hz, 2H), 2.12 (br.s, 1H).
화합물 B: (5,7-디메톡시벤조푸란-2-일)메탄올
Figure pct00031
화합물 B의 합성
Figure pct00032
화합물 A (60 g, 0.20 mol), NaOMe (600 mL, 30% w/w, Alfa로부터 구입) 및 DMF (6 g, 0.08 mol)의 혼합물에 CuBr (8 g, 0.056 mol)를 실온에서 질소 하에서 부가했다. 이후 혼합물을 80 oC에서 4 h 동안 교반했다. 반응 혼합물을 0oC까지 냉각시키고 이후 H2O (500 mL)를 혼합물에 0 oC에서 부가했다. 혼합물을 Celite의 패드를 통해 여과하고 여액을 DCM로 3회 추출했다 (500mL). 조합시킨 DCM 추출물을 무수 소듐 설페이트 상에서 건조시키고 여과했다. 여액을 농축하여 갈색 고체를 얻었다. 이 공정을 반복하고 두 반응 생성물을 조합시키고 농축하여 오일을 얻었고 이를 칼럼 크로마토그래피에 의해 정제하여 (Pet 에테르: EtOAc = 5:1 내지 0:1)에 의해 정제하여 60 g의 화합물 B을 황색 고체로서 얻었다. Rf (Pet 에테르: EtOAc = 5: 1) = 0.4 1H NMR (400 MHz) CDCl3 6.62 (d, J=6.3 Hz, 1H), 6.46 (s, 1H), 4.77 (d, J=6.0 Hz, 2H), 3.99 (s, 3H), 3.86 (s, 3H).
화합물 C: (5,7-비스(메톡시-d 3 )벤조푸란-2-일)메탄올
Figure pct00033
단계 A: Int C-1의 합성
Figure pct00034
AcOH (1.5 L) 내 5-메톡시살리실알데히드 (200 g, 1.31 mol) 및 무수 NaOAc (172 g, 2.10 mol)의 혼합물에 Br2 (270 g, 1.71 mol)를 한방울씩 1 시간에 걸쳐 0~5 oC (얼음-물 배쓰) 사이에서 질소 하에서 적하 퍼넬로 부가했다. 혼합물을 데우고 실온까지 및 2 시간 동안 교반했다. 혼합물을 얼음-물 (w/w =1/1, 2 L) 내에 붓고 15 min 동안 교반했다. 이후 혼합물을 여과했다. 여액을 물 (400 mL × 3)로 세척하고 이후 진공 (오일 펌프)에 의해 45 oC에서 2 일 동안 건조시켜 Int C-1 (200 g)를 황색 고체로서 얻었다. LCMS: 230.9 [M+H]+. 1 H NMR: (DMSO-d6, 400 MHz): 10.09 (s, 1H), 7.54 (d, J = 2.8 Hz, 1H), 7.32 (d, J = 2.8 Hz, 1H), 3.78 (s, 3H).
단계 B: Int C-2의 합성
Figure pct00035
1000 mL의 건조 DMF 내 Int C-1 (200 g, 0.87 mol) 및 무수 K2CO3 (360 g, 2.61 mol)의 혼합물에 217 g (1.30 mol)의 에틸 2-브로모아세테이트를 한번에 실온에서 질소 하에서 부가하고 100oC까지 가열하고 6 시간 동안 교반하기 전에 실온에서 10 min 동안 교반했다. 혼합물을 실온까지 냉각시키고 농축했다. 잔사를 물 (1 L) 내에 붓고 20 min 동안 교반했다. 혼합물을 여과하고 여액을 물로 세척하고 (500 mL × 3) 및 진공 (오일 펌프)에 의해 건조시켜 Int C-2 (105.4 g)를 갈색 고체로서 얻었다. LCMS: 299.0 [M+H]+. 1 H NMR (DMSO-d6, 400 MHz): 7.76 (s, 1H), 7.40 (s, 1H), 7.30 (s, 1H), 4.38 (q, J = 7 Hz, 2H), 3.82 (s, 3H), 2.09 (s, 1H), 1.35 (t, J = 7 Hz, 3H).
단계 C: Int C-3의 합성
Figure pct00036
DCM (700 mL) 내 Int C-2 (120 g, 0.40 mol)의 용액에 DCM (500 mL) 내 BBr3 (350 g, 1.4 mol)의 용액을 한방울씩 -70oC에서 30 min의 기간에 걸쳐 질소 하에서 부가했고 그 동안 온도를 -60 oC 아래로 유지했다. 반응 혼합물을 0oC까지 데우고 0oC에서 3 h 동안 교반했다. 반응을 얼음 물 (w/w =1/1, 1 L) 내에 천천히 붓고 이후 DCM로 추출했다 (800 mL × 2). 조합시킨 유기 상을 포화 식염수 (800 mL × 2)로 세척하고, 무수 Na2SO4 상에서 건조시켰고, 여과하고 진공에 의해 농축했다. 잔사를 실리카 겔 크로마토그래피 (칼럼 높이: 150 mm, 직경: 50 mm, 100-200 메쉬 실리카 겔, 석유 에테르/EtOAc=20/1, 10/1, 5/1)에 의해 정제하여 Int C-3 (42 g)를 백색 고체로서 얻었다. LCMS: 283.0 [M-H]+. 1 H NMR (DMSO-d6, 400 MHz): 9.86 (s, 1H), 7.72 (s, 1H), 7.20 (s, 1H), 7.09 (s, 1H), 4.38 (q, J = 7 Hz, 2H), 1.34 (t, J = 7 Hz, 3H).
단계 D: Int C-4의 합성
Figure pct00037
건조 아세톤 (2 L) 내 Int C-3 (95 g, 0.33 mol)의 용액에 K2CO3 (115 g, 0.83 mol) 및 CD3I (97 g, 0.67 mol)를 한번에 부가하고 환류까지 12 시간 동안 가열했다. 혼합물을 냉각시키고 여과하고 고체를 아세톤 (300 mL×3)로 세척했다. 조합시킨 유기 층을 증발시켜 Int C-4 (81 g)를 황색 고체로서 얻었다. LCMS: 302.0 [M+H]+. 1 H NMR (DMSO-d6, 400 MHz): 7.77 (s, 1H), 7.41 (s, 1H), 7.31 (s, 1H), 4.38 (q, J = 7.2 Hz, 2H), 1.35 (t, J = 7.2 Hz, 3H).
단계 E: Int C-5의 합성
Figure pct00038
DMSO (800 mL) 내 Int C-4 (70 g, 0.071 mol), 비스(피나콜라토)디보론 (89 g, 0.35 mol), KOAc (68.6 g, 0.70 mol) 및 Pd(dppf)Cl2 (16.8 g, 0.023 mol)의 혼합물을 15 min 동안 질소로 탈기시키고 이후 80 oC까지 밤새 질소 하에서 가열했다. 반응 혼합물을 물 (1.5 L) 내에 붓고 EtOAc로 추출하고 (600 mL ×3). 유기 추출물을 포화 식염수 (800 mL ×2)로 세척하고, 무수 MgSO4 상에서 건조시키고 여과했다. 여액을 농축하여 잔사를 얻었고 이를 실리카 겔 칼럼 크로마토그래피 (칼럼 높이: 80 mm, 직경: 28 mm, 100-200 메쉬 실리카 겔, 석유 에테르/EtOAc = 20/1, 10/1, 5/1)에 의해 정제하여 Int C-5 (53 g)를 옅은 고체로서 얻었다. 1 H NMR (DMSO-d6, 400 MHz): 7.62 (s, 1H), 7.38 (d, J = 2.4 Hz, 1H), 7.26 (d, J = 2.4 Hz, 1H), 4.31 (q, J = 7.2 Hz, 2H), 1.28-1.32 (m, 15H).
단계 F: Int C-6의 합성
Figure pct00039
600 mL의 THF/MeOH (v/v = 1/2) 내 Int C-5 (58 g, 0.17 mol)의 용액에 30% H2O2 (200 mL)를 0oC에서 한번에 부가했다. 혼합물을 동일 온도에서 2 시간 동안 교반했다. 포화 수성 Na2S2O3 (500 mL)를 부가하고 혼합물을 다시 1 시간 동안 교반했다. H2O2가 파괴되었는지를 보기 위해 포타슘 아이오다이드-전분 시험 종이에 의해 반응을 확인했다. 혼합물을 EtOAc로 추출하고 (500 mL ×3) 및 조합시킨 추출물을 식염수로 세척하고 (500 mL), 무수 MgSO4 상에서 건조시키고 이후 여과했다. 여과물을 농축하여 Int C-6 (25.4 g)를 백색 고체로서 얻었다. LCMS: 240.1 [M+H]+. 1 H NMR: (DMSO, 400 MHz): 10.40 (s, 1H), 7.57 (s, 1H), 6.64 (d, J = 2.4 Hz, 1H), 6.48(d, J = 2.4 Hz, 1H), 4.31 (q, J = 7.2 Hz, 2H), 1.30 (t, J = 7.2 Hz, 3H).
단계 G: Int C-7의 합성
Figure pct00040
아세톤 (800 mL) 내 화합물 Int C-6 (27 g, 0.113 mol)의 용액에 무수 K2CO3 (38.8 g, 0.282 mol) 및 CD3I (32.8 g, 0.226 mol)를 부가했다. 반응 혼합물을 12 h 동안 환류까지 가열했고 이후 냉각시키고 여과했다. 고체를 아세톤 (400 mL ×3)로 세척하고 조합시킨 유기 추출물을 진공에 의해 증발시켜 22 g의 화합물 Int C-7를 백색 고체로서 얻었다. LCMS: 257.1 [M+H]+. 1 H NMR: (DMSO-d6, 400 MHz): 7.60 (s, 1H), 6.76 (d, J = 2.4 Hz, 1H), 6.67 (d, J = 2.4 Hz, 1H), 4.31 (q, J = 7.2 Hz, 2H), 1.30 (t, J = 7.2 Hz, 3H).
단계 H: 화합물 C의 합성
Figure pct00041
무수 THF (400 mL) 내 Int C-7 (16 g, 0.062 mol)의 용액에 LiAlH4 (4.8 g, 0.125 mol)를 0oC에서 10 min에 걸쳐 질소 하에서 부가했다. 반응 혼합물을 0oC에서 2 시간 동안 교반했다. 반응을 물 (100 ml)로 켄칭하고 얻어진 현탁액을 여과했다. 여액을 농축하여 화합물 C (8.5 g)을 백색 고체로서 얻었다. LCMS: 197.2 [M-OH]+, 215.2 [M+H]+, 237.1 [M+23]+. 1 H NMR: (DMSO, 400 MHz): 6.65 (s, 2H), 6.49 (s, 1H), 5.46 (t, J = 6 Hz, 1H), 4.51 (d, J = 6 Hz, 2H).
화합물 D: 5-메톡시-7-메틸벤조푸란-2-일)메탄올
Figure pct00042
단계 A: Int D-1의 합성
Figure pct00043
디옥산 (80 mL)/H2O (10 mL) 내 2.0 g (7.0 mmol)의 메틸 7-브로모-5-메톡시벤조푸란-2-카르복실레이트 (에틸 에스테르 Int C-2에 대해 기술된 것과 유사한 방식으로 제조), CH3B(OH)2 (0.42 g, 7.0 mmol) 및 Na2CO3 (2.2 g, 20.7 mmol)의 용액에 Pd(PPh3)4 (0.8 g, 0.7 mmol)를 부가했다. 혼합물을 밤새 환류시키고 이후 실온까지 냉각시켰다. 반응 혼합물을 H2O 내에 붓고, EtOAc로 추출하고 유기 추출물을 식염수로 세척하고 MgSO4 상에서 건조시켰다. 용액을 농축하여 잔사를 얻었고 이를 실리카 겔 칼럼에 의해 정제하여 320 mg의 화합물 Int D-1을 얻었다.
단계 B: 화합물 D의 합성
Figure pct00044
THF (15 mL) 내 LiAlH4 (0.22 g, 5.79 mmol)의 현탁액에 THF (15 mL) 내 Int D-1 (0.32 g, 1.45 mmol)의 용액을 0oC에서 한방울씩 부가했다. 혼합물을 30 min 동안 0 oC에서 교반하고 이후 H2O 내에 붓고, EtOAc로 추출하고, 유기 상을 식염수로 세척하고, MgSO4 상에서 건조시켰고, 농축하여 잔사를 얻었고, 이를 실리카 겔 칼럼에 의해 정제하여 260 mg의 화합물 D을 얻었다. LCMS: (EI): 175.1 [M-OH]+, 193.1[MH]+. 1 H NMR (400 MHz, DMSO-d6): 6.92 (1H, s), 6.70 (1H, s), 6.69 (1H, s), 5.45 (1H, t, J = 11.6Hz), 5.54 (2H, dd, J = 0.8Hz, 6Hz), 3.76 (3H, s), 2.41 (3H, s).
화합물 E: (7-시클로프로필-5-메톡시벤조푸란-2-일)메탄올
Figure pct00045
단계 A: 화합물 E의 합성
Figure pct00046
디옥산 (80 mL)/H2O (10 mL) 내 2.0 g (7.0 mmol)의 메틸 7-브로모-5-메톡시벤조푸란-2-카르복실레이트 (에틸 에스테르 Int C-2에 대해 기술된 것과 유사한 방식으로 제조), 시클로프로필보론산 (0.6 g, 8.0 mmol) 및 Na2CO3 (2.2 g, 20.7 mmol)의 용액에 Pd(PPh3)4 (0.8 g, 0.7 mmol)를 부가했다. 혼합물을 밤새 환류시키고 이후 냉각시켰다. 반응 혼합물을 H2O 내에 붓고 EtOAc로 추출했다 (3 x 20 mL). 조합시킨 유기 추출물을 식염수로 세척하고, MgSO4 상에서 건조시키고 농축하여 잔사를 얻었고 이를 실리카 겔 칼럼에 의해 정제하여 200 mg의 소정의 에스테르를 얻었다. THF (5 mL) 내 LiAlH4 (0.12 g, 3.25 mmol)의 현탁액에 한방울씩 THF (5 mL) 내 에스테르 (0.20 g, 0.813 mmol)의 용액을 0oC에서 부가하고 30 min 동안 0 oC에서 교반했다. 반응 혼합물을 H2O 내에 붓고, EtOAc로 추출하고 유기 추출물을 식염수로 세척하고, MgSO4 상에서 건조시켰고, 농축하여 잔사를 얻었고 이를 실리카 겔 칼럼에 의해 정제하여 화합물 E (0.15 g)을 얻었다. LCMS: 다음에 대한 MS (EI): C13H14O3, 201.0 [M-OH]+,219.1 [MH]+. 1 H NMR (400 MHz, DMSO-d6): . 6.84 (s, 1H), 6.62 (s, 1H), 6.37 (s, 1H), 5.40 (m, 1H), 4.54 (d, J = 6Hz, 2H), 3.70 (s, 3H), 2.20-2.17 (m, 1H), 0.99-0.95 (m, 2H), 0.84-0.82 (m, 2H).
화합물 F: (7-이소프로필-5-메톡시벤조푸란-2-일)메탄올
Figure pct00047
화합물 F의 합성
Figure pct00048
디옥산 (80 mL)/H2O (10 mL) 내 2.0 g (7.0 mmol)의 메틸 7-브로모-5-메톡시벤조푸란-2-카르복실레이트 (에틸 에스테르 Int C-2에 대해 기술된 것과 유사한 방식으로 제조), 시클로프로필보론산 (0.6 g, 8.0 mmol) 및 Na2CO3 (2.2 g, 20.7 mmol)의 용액에 Pd(PPh3)4 (0.8 g, 0.7 mmol)를 부가했다. 혼합물을 밤새 환류시키고 이후 냉각시켰다. 반응 혼합물을 H2O 내에 붓고 EtOAc로 추출했다 (3 x 20 mL). 조합시킨 유기 추출물을 식염수로 세척하고, MgSO4 상에서 건조시키고 농축하여 잔사를 얻었고 이를 실리카 겔 칼럼에 의해 정제하여 500 mg의 소정의 에스테르를 얻었다. 에탄올 (20 mL) 내 올레핀성 에스테르 (0.5 g, 2.29 mmol) 및 Pd/C (0.1 g)의 혼합물을 50 psi의 수소 압력 하에서 2 h 동안 실온에서 수소화시켰다. 혼합물을 여과하고 증발시켜 400 mg의 소정의 화합물을 제공했다. THF (15 mL) 내 LiAlH4 (0.305 g, 8.04 mmol)의 현탁액에 한방울씩 THF (15 mL) 내 중간체 에스테르 (0.50 g, 2.01 mmol)의 용액을 0oC에서 부가하고 30 min 동안 0oC에서 교반했다. 반응 혼합물을 물 내에 붓고 EtOAc로 추출했다. 유기 추출물을 식염수로 세척하고, MgSO4 상에서 건조시키고 농축하여 잔사를 얻었고 이를 실리카 겔 칼럼에 의해 정제하여 350 mg의 화합물 F을 얻었다. LCMS: 다음에 대한 MS (EI): C13H16O3, 203.1 [M-OH]+, 221 [MH] +. 1 H NMR (400 MHz, DMSO-d6): 6.86 (1H, d, J = 2.4Hz), 6.69 (1H, d, J = 2.4Hz), 4.64 (2H, s), 3.78 (3H,s), 3.39-3.30 (1H, m), 1.34 (6H, d, J = 6.8Hz).
화합물 G: (5-메톡시-7-페닐벤조푸란-2-일)메탄올
Figure pct00049
화합물 G의 합성
Figure pct00050
디옥산 (20 mL)/H2O (5 mL) 내 메틸 7-브로모-5-메톡시벤조푸란-2-카르복실레이트 (1.5 mmol), 페닐보론산 (0.18 g, 1.5 mmol) 및 Na2CO3 (0.48 g, 4.5 mmol)의 용액에 Pd(PPh3)4 (0.17 g, 0.15 mmol)를 부가했다. 혼합물을 1h 동안 N2 하에서 환류시켰다. 반응 혼합물을 H2O 내에 붓고, EtOAc로 추출하고 유기 추출물을 식염수로 세척하고, MgSO4 상에서 건조시키고 농축하여 200 mg의 미정제 커플링 생성물을 얻었고 이를 15 mL의 THF 내에 재용해시키고 한방울씩 THF (15 mL) 내 LiAlH4 (0.23 g, 5.96 mmol)의 현탁액에 0oC에서 부가했다. 반응을 30 min 동안 0oC에서 교반하고 이후 물 내에 붓고 EtOAc로 추출했다 (3 x 10 mL). 유기 추출물을 식염수로 세척하고 MgSO4 상에서 건조시키고 이후 농축하여 잔사를 얻었고 이를 실리카 겔 칼럼에 의해 정제하여 300 mg의 화합물 G를 얻었다. LCMS: 다음에 대한 MS (EI): C16H14O3, 237.1 [M-OH]+, 255.1 [MH] +, 277.1 [M+Na]+. 1 H NMR (400 MHz, DMSO-d6): . 7.88-7.85 (m, 2H), 7.54-7.50 (m, 2H), 7.13 (d, J = 2.8Hz, 1H), 7.04 (d, J = 2.4Hz, 1H), 6.76 (s, 1H), 5.47 (t, J = 12Hz, 1H), 4.57 (d, J = 6.0 Hz, 2H), 3.83 (s, 3H).
화합물 H: (7-(디메틸아미노)-5-메톡시벤조푸란-2-일)메탄올
Figure pct00051
화합물 H의 합성
Figure pct00052
디옥산 (80 mL) 내 메틸 7-브로모-5-메톡시벤조푸란-2-카르복실레이트 (3.0 g, 10 mmol), 디메틸아민 (0.57 g, 13 mmol) 및 Cs2CO3 (12.3 g, 37 mmol)의 용액에 Pd2(dba)3 (0.75 g, 0.82 mmol) 및 450 mg (1.50 mmol)의 (2-bi페닐)디-tert-부틸포스핀 (JohnPhos)를 부가했다. 혼합물을 밤새 N2 하에서 환류시키고 이후 냉각시켰다. 반응 혼합물을 H2O 내에 붓고 이후 EtOAc로 추출했다 (3 x 20 mL). 유기 추출물을 식염수로 세척하고, MgSO4 상에서 건조시켰고, 진공에서 농축하여 700 mg의 소정의 아미노 에스테르를 얻었다. THF (30 mL) 내 LiAlH4 (0.32 g, 8.43 mmol)의 현탁액에 THF (30 mL) 내 상기한 아미노 에스테르 (0.70 g, 2.81 mmol)의 용액을 0oC에서 한방울씩 부가하고 30 min 동안 교반했다. 반응 혼합물을 H2O 내에 붓고 EtOAc로 추출했다. 유기 추출물을 식염수로 세척하고, MgSO4 상에서 건조시켰고, 진공에서 농축하여 잔사를 얻었고 이를 실리카 겔 칼럼에 의해 정제하여 화합물 H (0.39 g)을 얻었다. LCMS: 다음에 대한 MS (EI): C12H15NO3, 222.1 [MH]+. 1 H NMR (400 MHz, DMSO-d6): . 6.57 (d, J = 0.4Hz, 1H), 6.54 (d, J = 2.4Hz, 1H), 6.24 (s, 1H), 4.63 (s, 2H), 3.76 (s, 3H), 6.76 (s, 1H), 2.97 (s, 6H).
화합물 I: (5-메톡시-7-(메틸(페닐)아미노)벤조푸란-2-일)메탄올
Figure pct00053
화합물 I의 합성
Figure pct00054
디옥산 (80 mL) 내 메틸 7-브로모-5-메톡시벤조푸란-2-카르복실레이트 (3.0 g, 10 mmol), N-메틸아닐린 (1.36 g, 12 mmol) 및 Cs2CO3 (12.3 g, 37 mmol)의 용액에 Pd2(dba)3 (0.75 g, 0.82 mmol) 및 X-Phos (0.43, 1.44 mmol)를 부가했다. 혼합물을 밤새 N2 하에서 환류시켰다. 반응 혼합물을 냉각시키고 이후 물 내에 붓고 EtOAc로 추출했다. 유기 추출물을 식염수로 세척하고, MgSO4 상에서 건조시키고 농축시켜 잔사를 얻었고 이를 실리카 겔 칼럼에 의해 정제하여 1.1 g의 소정의 C-N 커플링 생성물을 얻었고 이를 직접 다음 단계에서 사용했다. THF (20 mL) 내 LiAlH4 (0.20 g, 5.77 mmol)의 현탁액에 THF (20 mL) 내 상기 기술된 에스테르 (0.60 g, 1.92 mmol)의 용액을 한방울씩 0oC에서 부가했다. 반응 혼합물을 30 min 동안 0oC에서 교반하고 이후 H2O 내에 붓고 EtOAc로 추출했다. 유기 추출물을 식염수로 세척하고 MgSO4 상에서 건조시키고 농축했다. 잔사를 실리카 겔 칼럼에 의해 정제하여 화합물 I (0.35 g)을 백색 고체로서 얻었다. LCMS: 다음에 대한 MS (EI): C17H17NO3, 284.2 [M+H]+. 1 H NMR (400 MHz, CD3OD): . 7.20-7.17 (m, 2H), 6.89-6.85 (m, 1H), 6.84-6.79 (m, 3H), 6.67-6.64 (m, 1H), 6.64-6.63 (m, 1H), 4.58 (s, 2H), 3.80 (s, 3H), 3.30 (s, 3H).
화합물 J: (5-메톡시-7-(4-메틸피페라진-1-일)벤조푸란-2-일)메탄올
Figure pct00055
아민으로서 N-메틸피페라진을 사용했다. 화합물 I의 합성에 대해 기술된 바와 유사한 2-단계 절차 LCMS: 다음에 대한 (EI): C15H20N2O3, 277.2 [MH]+. 1 H NMR (400 MHz, MeOD): 6.67 (1H, s), 6.63 (1H, s), 6.37 (1H, s), 4.65 (2H, s), 3.80 (3H, s), 3.36-3.30 (4H, m), 2.70-2.68 (3H, m).
화합물 K: (5-메톡시-7-모르폴리노벤조푸란-2-일)메탄올
Figure pct00056
아민으로서 모르폴린을 사용하여 화합물 I의 합성에 대해 기술된 바와 유사한 2-단계 절차. LCMS: 다음에 대한 (EI): C14H17N4O, 264.1 [MH]+. 1 H NMR (400 MHz, MeOD): 6.65 (s, 1H), 6.60 (s, 1H), 6.34 (s, 1H), 4.62 (s, 2H), 3.88-3.86 (m, 4H), 3.77 (s, 3H), 3.30-3.26 (m, 4H).
화합물 L: 4-(2-(하이드록시메틸)-5-메톡시벤조푸란-7-일)티오모르폴린 1,1-디옥사이드
Figure pct00057
아민으로서 티오모르폴린 1,1-디옥사이드를 사용하여 화합물 I의 합성에 대해 기술된 바와 유사한 2-단계 절차. LCMS: 다음에 대한 (EI): C14H17NO5S, 312.0 [MH]+. 1 H NMR (400 MHz, DMSO): 6.70 (s, 1H), 6.66 (s, 1H), 6.41 (s, 1H), 5.49-5.44 (m, 1H), 4.54-4.52 (m, 2H), 3.82-0.80 (m, 4H), 3.75 (s, 3H), 3.27-3.24 (m, 4H).
화합물 M: (7-(1,1-디플루오로에틸)-5-메톡시벤조푸란-2-일)메탄올
Figure pct00058
단계 A: Int M-1의 제조
Figure pct00059
(100 mL) 내 메틸 7-브로모-5-메톡시벤조푸란-2-카르복실레이트 (2.85 g, 10 mmol)의 용액에 (1-에톡시)-트리부틸스타난 (6.31 g, 17.5 mmol) 및 PdCl2(PPh)3 (0.7 g, 1.0 mmol)를 부가했다. 혼합물을 밤새 50oC에서 N2 하에서 교반했다. 반응 혼합물을 H2O 내에 붓고, EtOAc로 추출하고 유기 추출물을 식염수로 세척하고, MgSO4 상에서 건조시켰고, 진공에서 농축하여 2.0 g의 잔사를 얻었고 이를 직접 다음 단계에서 추가 정제 없이 사용했다.
단계 B: Int M-2의 제조
Figure pct00060
디옥산 (100 mL) 내 Int M-1 (2.0 g, 7.25 mmol)의 용액에 2M HCl (9 mL, 18 mmol)를 부가했다. 혼합물을 30 min 동안 실온에서 교반하고 이후 EtOAc로 희석했다. 유기 상을 2회 포화 NaHCO3 이후 물 이후 식염수로 세척했다. 유기물을 MgSO4 상에서 건조시키고 진공에서 농축하여 1.2 g의 Int M-2를 얻었고 이를 직접 다음 단계에서 정제 없이 사용했다.
단계 C: Int M-3의 제조
Figure pct00061
DAST (6 mL) 내 Int M-2 (0.9 g, 0.88 mmol)의 용액을 밤새 60oC에서 교반했다. 반응 혼합물을 냉각시키고 1 mL의 물로 매우 천천히 처리했다. 얻어진 혼합물을 EtOAc (3 x 20 mL)로 추출하고 유기 추출물을 식염수로 세척하고 MgSO4 상에서 건조시켰다. 용매증발로 450 mg의 Int M-3를 회색 고체로서 제공했다.
단계 D: 화합물 M의 제조
Figure pct00062
THF (20 mL) 내 LiAlH4 (0.18 g, 4.93 mmol)의 현탁액에 THF (20 mL) 내 Int M-3 (0.45 g, 1.67 mmol)의 용액을 한방울씩 0oC에서 부가했다. 반응 혼합물을 30 min 동안 0oC에서 교반하고 이후 H2O 내에 붓고 EtOAc로 추출했다. 유기 추출물을 식염수로 세척하고 MgSO4 상에서 건조시키고 농축했다. 잔사를 실리카 겔 칼럼에 의해 정제하여 화합물 M (0.27 g)을 백색 고체로서 얻었다. LCMS: 다음에 대한 MS (EI): C12H12F2O3, 223.0 [M-OH]+. 1 H NMR (400 MHz, MeOD): 7.16 (s, 1H), 6.97 (s, 1H), 6.70 (s, 1H), 4.66 (s, 2H), 3.82 (s, 3H), 2.10 (t, J = 18.8Hz, 3H).
화합물 N: (5,7-디메틸벤조푸란-2-일)메탄올
Figure pct00063
단계 A: Int N-1의 제조
Figure pct00064
CH3CN (2000 mL) 내 2,4-디메틸페놀 (80 g, 0.66 mol)의 용액에 Et3N (248 g, 2.46 mol) 및 MgCl2 (93 g, 0.99 mol)를 한번에 실온에서 부가했다. 혼합물을 실온에서 1 h 동안 교반하고 이후 (CH2O)n를 부가했다. 얻어진 혼합물을 환류까지 가열하고 밤새 교반했다. 혼합물을 실온까지 냉각시키고 이후 교반한 5% HCl (500 mL) 용액 내에 부었다. 혼합물을 EtOAc로 추출했다 (3 × 400 mL). 조합시킨 유기 추출물을 식염수로 세척하고 (300 mL) 및 분리했다. 유기 층을 무수 Na2SO4 상에서 건조시켰고, 여과하고 감압 하에서 농축했다. 잔사를 칼럼 크로마토그래피(칼럼 높이: 50 cm, 직경: 20 cm, 100-200 메쉬 실리카 겔, 석유 에테르/EtOAc = 10/1)에 의해 정제하여 Int N-1 (58 g)을 황색 고체로서 얻었다. 1 H NMR: (CDCl3, 400 MHz): 10.87 (s, 1H), 9.82 (s, 1H), 6.81 (s, 1H), 2.29 (s, 6H).
단계 B: Int N-2의 제조
Figure pct00065
DMF (1.2 L) 내 Int N-1 (58 g, 0.386 mol) 및 K2CO3 (160 g, 1.16 mol)의 혼합물에 메틸 2-브로모아세테이트 (88.2 g, 0.58mol)를 한번에 실온에서 N2 하에서 부가했다. 혼합물을 실온에서 10 min 동안 교반하고 이후 100 oC까지 가열하고 밤새 교반했다. 현탁액을 실온까지 냉각시키고 여과했다. 필터 케이크를 EtOAc로 세척하고 (500 mL × 3) 및 여액을 농축하여 대부분의 EtOAc를 제거했다. 얻어진 DMF 용액을 얼음-물 (w/w = 1/1) (1 L) 내에 붓고 20 min 동안 실온에서 교반했다. 갈색 고체를 여과에 의해 수집했다. 필터 케이크를 물로 세척하고 (200 mL) 및 이후 고 진공으로 건조시켜 (P2O5, 오일 펌프를 갖는 Vacuum Dryer로 압력 <10 Pa을 만듬) 미정제 Int N-2를 얻었고 이를 PE/EA (v/v = 5/1, 600 mL)로 세척했다. 잔여 용매를 회전-증발기로 제거하여 순수 Int N-2 (40 g)를 갈색 고체로서 얻었다. 1 H NMR: (CDCl3, 400 MHz): 7.38 (s, 1H), 7.36 (s, 1H), 7.30 (s, 1H), 3.93 (s, 3H), 2.34 (s, 3H), 2.28 (s, 3H). LCMS: MS 계산치: 204.1; MS 실험치: 205.1
단계 C: 화합물 N의 제조
Figure pct00066
무수 THF (100 mL) 내 LAH (4.5 g, 118 mmol)의 교반 현탁액에 한방울씩 Int N-2 (12 g, 60 mmol)를 4 oC에서 (얼음-물 배쓰) N2 하에서 부가했다. 내부 온도를 10oC아래로 제어하도록 주의하면서 물 (50 mL)의 한방울씩 부가에 의해 혼합물을 급냉하기 전에 혼합물을 0oC에서 1h 동안 교반했다. 현탁액을 여과하고 필터 케이크를 THF (100 mL)로 세척했다. 여액을 농축하고 잔사를 석유 에테르/EtOAc = 8/1로 세척하고 화합물 N (8 g)를 백색 고체로서 얻었다. 1 H NMR: (CDCl3, 400 MHz): 7.30 (s, 1H), 7.25 (s, 1H), 6.56 (s, 1H), 4.74 (d, J = 6.0 Hz, 2H), 2.37 (t, J = 13.0 Hz, 6H), 1.92 (t, J = 6.2 Hz,1H). 13 C NMR: (CDCl3, 100 MHz): δ 155.3, 153.7, 133.1, 130.9, 125.6, 120.8, 111.3, 103.4, 57.8, 20.1, 19.5. LCMS: 순도: 98.4%; MS 계산치: 176.1; MS 실험치: 159.1 [M-OH]. 융점: 96.4℃ - 97.1℃.
화합물 O: (4-((5,7-디메톡시벤조푸란-2-일)메톡시)페닐)메탄올
Figure pct00067
단계 A: Int O-1의 합성
Figure pct00068
무수 THF (300 mL) 내 화합물 B (30.0 g, 0.144 mol), 에틸 4-하이드록시벤조에이트 (28.7 g, 0.173 mol) 및 PPh3 (18.8 g, 0.187 mol)의 현탁액에 DEAD (32.2 g, 0.187 mol)를 한방울씩 4 oC에서 (얼음-물 배치) 30 min에 걸쳐 부가했다. 부가 완료후, 반응 혼합물을 실온에서 15 h 동안 교반하도록 했다. 혼합물을 물 내에 붓고 DCM로 추출했다 (200 mL × 3). 조합시킨 유기 추출물을 Na2SO4 상에서 건조시켰다. 여과액을 감압하에 농축시켰다. 잔사를 칼럼 크로마토그래피 (칼럼 높이: 20 cm, 직경: 5 cm, 100-200 메쉬 실리카 겔, 석유 에테르/EtOAc = 5/1)에 의해 정제하여 미정제 Int O-1 (20 g, 85% 1H NMR 순도)를 회색 고체로서 얻었다. 1 H NMR (400 MHz, CDCl3): 8.01 (d, J=9.26 Hz, 2 H), 7.01 (d, J = 8.82 Hz, 2 H), 6.74 (s, 1H), 6.60 (d, J = 2.21 Hz, 1 H), 6.47 (d, J = 2.21 Hz, 1 H), 5.20 (s, 2 H), 4.36 (q, J = 7.06 Hz, 2 H), 3.92 - 4.06 (m, 3 H), 3.77 - 3.89 (m, 3 H), 1.39 (t, J = 7.28Hz, 3 H).
단계 B: 화합물 O의 합성
Figure pct00069
무수 THF (200 mL) 내 LAH (2.87 g, 0.075 mol)의 현탁액에 Int O-1 (18 g, 0.050 mol)를 조금씩 4oC에서 (얼음-물 배쓰) 30 min에 걸쳐 질소 하에서 부가했다. 부가 완료 후 반응 혼합물을 실온에서 12 h 동안 교반하도록 했다. 물 (3 ml)를 0oC에서 한방울씩 부가했고, 이후 15% NaOH 수성 (3 ml) 및 H2O (15 ml)를 부가했다. 30 min 교반후, MgSO4 (40 g)를 부가하고 혼합물을 또다른 30 min 교반했다. 이후 혼합물을 여과하고 여액을 감압 하에서 농축했다. 잔사를 칼럼 크로마토그래피 (칼럼 높이: 20 cm, 직경: 5 cm, 100-200 메쉬 실리카 겔, 석유 에테르/EtOAc = 5:1)에 의해 정제하여 화합물 O (11 g)를 회색 고체로서 얻었다. LCMS: 315.1 [M+H] 1 H NMR (400 MHz, DMSO): 7.24 (d, J = 8.03 Hz, 2 H), 7.00 (d, J = 8.03 Hz, 2 H), 6.93 (s, 1 H), 6.93 (s, 1 H), 6.70 (s, 1 H), 6.54 (s, 1 H), 5.19 (s, 2 H), 5.05 (t, J = 5.52 Hz, 1 H), 4.41 (d, J = 5.52 Hz, 2 H), 3.89 (s, 3 H), 3.76 (s, 3 H). 13 C NMR (100 MHz, DMSO-d6): δ 157.14, 156.98, 145.56, 139.40, 135.67, 1129.40, 128.38, 114.91, 107.67, 97.78, 96.33, 63.00, 62.56, 56.214, 56.00, 40.61, 40.41, 40.26, 39.99, 39.78, 39.57, 39.37. MP: 128.5oC - 129.5oC.
화합물 P: (4-((5,7-비스(메톡시-d3)벤조푸란-2-일)메톡시)페닐)메탄올
Figure pct00070
출발물질로서 화합물 C을 사용하여 화합물 O의 합성에 대해 기술된 바와 유사한 2-단계 절차. LCMS: MS 계산치:320.2, MS 실험치: 321.1 [M+H]+. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): 7.25 (d, J=8.8 Hz, 2 H), 7.02 (d, J = 8.8 Hz, 2 H), 6.94 (s, 1H), 6.70 (d, J = 2.4 Hz, 1 H), 6.54 (d, J = 2.4 Hz, 1 H), 5.20 (s, 2 H), 5.07 (t, J = 6 Hz, 1 H), 4.42 (d, J = 5.6 Hz, 2 H). MP: 130.6℃- 131.2℃.
화합물 Q: (4-((5-메톡시-7-메틸벤조푸란-2-일)메톡시)페닐)메탄올
Figure pct00071
출발물질로서 화합물 D을 사용하여 화합물 O의 합성에 대해 기술된 바와 유사한 2-단계 절차. LCMS: MS 계산치: 298.12; MS 실험치: 321.0 [M+Na]. 1 H NMR (400 MHz, CDCl3): 7.29 (d, J =8.4 Hz, 2 H), 6.99 (d, J =8.4 Hz, 2 H), 6.82 (d, J =2.0 Hz, 1 H), 6.71-6.68 (m, 2 H), 5.13 (s, 2 H), 4.61 (s, 2 H), 3.80 (s, 3 H), 2.47 (s, 3 H)，1.63 (br, 1 H). 13 C NMR (100 MHz, CDCl3): 157.9, 155.9, 153.2, 149.5, 133.9, 128.6, 127.8, 122.3, 115.0, 114.4, 106.6, 100.8, 64.9, 63.3, 55.8, 15.2. 융점: 101.6℃ - 102.3℃.
화합물 R: (4-((5,7-디메틸벤조푸란-2-일)메톡시)페닐)메탄올
Figure pct00072
출발물질로서 화합물 N을 사용하여 화합물 N의 합성에 대해 기술된 바와 유사한 2-단계 절차. LCMS: MS 계산치: 282.13; MS 실험치: 305.0 [M+Na]. 1 H NMR (400 MHz, CDCl3): 7.31 (d, J =9.2 Hz, 4 H), 7.02 (d, J =8.4 Hz, 2 H), 6.70 (s, 1 H), 4.64 (d, J =3.6 Hz, 2 H), 2.37 (d, J =12.0 Hz, 6 H), 1.75 (s, 1 H). 13 C NMR (100 MHz, CDCl3): 157.9, 154.2, 151.9, 133.8, 131.4, 128.6, 125.8, 121.2, 115.1, 111.8, 105.9, 64.9, 63.2, 20.5, 19.9. 융점: 133.8℃ - 135.6℃
화합물 S: (E)-3-(5,7-디메틸벤조푸란-2-일)프로프-2-엔-1-올
Figure pct00073
단계 A: Int S-1의 제조
Figure pct00074
아세토니트릴 (300 mL) 내 화합물 N (30 g, 0.170 mol)의 용액에 IBX (104.3 g, 0.340 mol)를 부가하고 혼합물을 환류까지 가열하고 밤새 교반했다. 혼합물을 실온까지 냉각시키고 여과했다. 필터 케이크를 EtOAc (100 mL)로 세척하고 용매를 농축하여 Int S-1 (27 g)을 무색 오일로서 얻었다. 1 H NMR: (CDCl3, 400 MHz): 9.81(s, 1H), 7.48 (d, J = 4.0 Hz, 2H), 7.38 (s, 1H), 2.39 (d, J = 18.0 Hz, 6H).
단계 B: Int S-2의 제조
Figure pct00075
THF (50 mL) 내 NaH (3.3 g, 0.139 mol)의 혼합물에 트리에틸 포스포노아세테이트 (31.2 g, 0.139 mol)를 0oC에서 부가했다 (얼음-물 배쓰). 부가 후 혼합물을 0oC에서 1h 동안 교반했다. THF (150 mL) 내 Int S-1 (22 g, 0.126 mol)의 용액을 이후 한방울씩 0oC에서 부가하고 혼합물을 밤새 주변 온도까지 데워지도록 했다. 용매를 얼음 물 내에 붓고 EtOAc로 추출했다 (200 mL). 유기 추출물을 무수 Na2SO4 상에서 건조시키고 농축하여 16.5 g의 Int S-2을 백색 고체로서 얻었다. 1 H NMR (400 MHz, CDCl3): 7.49 (d, J = 16.0 Hz, 1 H), 7.29 (s, 1 H), 7.23 (s, 1 H), 6.80 (s, 1 H), 6.49 (d, J = 16.0 Hz, 1 H), 4.28 (m, 2 H), 2.32 (d, J = 18.0 Hz, 6 H), 1.32 (t, J = 7.2 Hz, 3 H).
단계 C: 화합물 S의 제조
Figure pct00076
무수 THF (200 mL) 내 Int S-2 (21 g, 0.086 mol)의 교반 용액에 4oC에서 (얼음-물 배쓰) DIBAL-H (206 mL, 0.206 mol)를 반응 온도를 -78℃ 및 -65oC사이에서 질소 하에서 유지하기 위해 한방울씩 부가했다. 이후 혼합물을 실온까지 데우고 2h 동안 교반했다. 반응을 물 (20 mL)로 켄칭하고 무수 MgSO4 (200 g)를 부가하고 이후 1h 동안 교반했다. 혼합물을 여과하고 필터 케이크를 EtOAc (200 mL x 2)로 세척했다. 용매를 농축하여 10.4 g의 화합물 S을 얻었다. 1 H NMR (400 MHz, DMSO-d6): 7.31 (s, 2 H), 6.69 (s, 1 H), 6.57 (d, J =16.0 Hz, 1 H), 6.44 (d, J =16.0 Hz, 1 H), 4.98 (t, J =5.6 Hz, 1 H), 4.17 (t, J =4.4 Hz, 2 H), 2.28(d, J =14.8 Hz, 6 H). 13 C NMR (100 MHz, CDCl3): 153.8, 153.6, 133.7, 131.3, 129.7, 126.7, 121.0, 119.3, 111.4, 104.4, 63.1, 20.5, 19.9. LCMS: MS 계산치: 202.1; MS 실험치: 185 [M-OH]. 융점: 104.6oC - 106.3oC
화합물 T: (E)-3-(5-메톡시-7-메틸벤조푸란-2-일)프로프-2-엔-1-올
Figure pct00077
출발물질로서 화합물 D을 사용하여 화합물 S의 합성에 대해 기술된 바와 유사한 2-단계 절차. 1 H NMR: (DMSO-d6, 400 MHz): 6.85 (s, 1H), 6.67 (d, J=10.4Hz, 2H), 6.56-6.43 (m, 2H), 4.96 (t, J=5.2Hz, 1H), 4.14 (s, 2H), 3.73 (s, 3H), 2.38 (s, 3H). 13 C NMR: (DMSO-d6, 100 MHz): 156.0, 155.3, 148.4, 133.4, 129.1, 121.5, 117.5, 114.1, 104.8, 101.3, 61.8, 55.8, 15.2. LCMS: MS 계산치: 218.09; MS 실험치: 201.1 [M- OH + 1].
화합물 U: (E)-3-(5,7-비스(메톡시-d3)벤조푸란-2-일)프로프-2-엔-1-올
Figure pct00078
출발물질로서 화합물 C을 사용하여 화합물 S의 합성에 대해 기술된 바와 유사한 2-단계 절차. 1 H NMR: (DMSO-d6, 400 MHz): 6.74 (s, 1H), 6.65 (s, 1H), 6.64-6.55 (m, 1H), 6.55-6.48 (m, 2H), 5.00 (s, 1H), 4.15 (d, J=4Hz, 2H). 13 C NMR: (DMSO-d6, 100 MHz): 156.9, 155.3, 145.2, 138.7, 133.6, 130.4, 117.3, 104.8, 97.6, 95.1, 61.2. LCMS: MS 계산치: 240.13; MS 실험치: 223.1 [M- OH], 241.1 [M + 1], 263.0 [M + Na]. 융점: 86.5oC - 87.0oC
화합물 V: (5,6,7-트리메톡시벤조푸란-2-일)메탄올
Figure pct00079
단계 A: Int V-1의 합성
Figure pct00080
1000 mL의 DCM 내 150.0 g (0.77 mol)의 2,3,4-트리메톡시벤즈알데히드를 함유하는 용액에 300.0 g (1.74 mol)의 m-CPBA를 5 부분으로 (30 g 각각) 0℃ - 10oC에서 (얼음-물 배쓰) 부가했다. 부가 후 반응 혼합물을 실온까지 데우고 밤새 교반했다. 반응 혼합물을 여과하고 고체를 제거하고 여액을 수성 NaHCO3 (400 mL × 3), 물 (300 mL) 및 식염수 (300 mL)로 세척했다. 유기 층을 분리하고 무수 Na2SO4 상에서 건조시키고 혼합물을 여과했다. 여액을 농축하여 짙은 황색 착색된 오일을 제공했고 이를 EtOH (600 mL) 내에 용해시키고 10% 수성 KOH 용액 (500 mL)로 한번에 처리했다. 혼합물을 50oC에서 4 h 동안 교반했다. 혼합물을 이후 냉각시키고 pH=1로 1 M HCl로 산성화시키고 DCM로 추출했다 (500 mL × 3). 조합시킨 유기 추출물을 물 (500 mL) 및 식염수 (500 mL)로 세척하고, 무수 Na2SO4 상에서 건조시키고 이후 여과했다. 여액을 농축하고 실리카 겔 크로마토그래피 (칼럼 높이: 50 cm, 직경: 20 cm, 100-200 메쉬 실리카 겔, 석유 에테르/EtOAc = 30/1, 20/1, 15/1, 10/1)에 의해 정제하여 Int V-1 (79.0 g)을 황색 오일로서 얻었다. 1 H NMR: (CDCl3, 400 MHz): 6.63 (d, J = 8 Hz, 1H), 6.55 (d, J = 8 Hz, 1H), 5.38 (brs, 1H), 3.96 (s, 3H), 3.90 (s, 3H), 3.81 (s, 3H).
단계 B: Int V-2의 합성
Figure pct00081
Int V-1 (74 g, 400 mmol), HMTA (67.6 g, 480 mmol) 및 TFA (500 mL)의 혼합물을 N2 하에서 20 h 동안 환류시켰다. 용액을 실온까지 냉각시키고 진공 하에서 농축했다. 톨루엔 (200 mL)를 잔사에 부가하고 용액을 추가 농축하여 흔적량의 TFA를 제거했다. 잔여 오일을 THF (300 mL) 및 2 M HCl (300 mL)로 처리하고 이후 환류까지 2 h 동안 가열했다. 용액을 실온까지 냉각시키고 DCM로 추출했다 (300 mL × 3). 조합시킨 유기 층을 물 (300 mL) 및 식염수 (300 mL)로 세척하고, 무수 Na2SO4 상에서 건조시키고 이후 여과했다. 여액을 농축하고 실리카 겔 크로마토그래피 (칼럼 높이: 50 cm, 직경: 20 cm, 100-200 메쉬 실리카 겔, 석유 에테르/EtOAc = 30/1, 20/1, 15/1, 10/1)에 의해 정제하여 Int V-2 (36.0 g)을 황색 고체로서 얻었다. 1 H NMR: (CDCl3, 400 MHz): 10.96 (s, 1H), 9.75 (s, 1H), 6.75 (s, 1H), 4.03 (s, 3H), 3.92 (s, 3H), 3.84 (s, 3H).
단계 C: Int V-3의 합성
Figure pct00082
무수 DMF (200 mL) 내 Int V-2 (36 g, 0.17 mol)의 용액에 K2CO3 (46.9 g, 0.34 mol) 및 메틸 브로모아세테이트 (28.4 g, 0.19 mol)를 실온에서 부가했다. 얻어진 용액을 110oC까지 가열하고 6 시간 동안 교반했다. 현탁액을 냉각시키고 Celite의 패드를 통해 여과했다. 필터 케이크를 EtOAc (500 mL)로 세척하고 여액을 농축했다. 잔여 오일을 실리카 겔 크로마토그래피 (칼럼 높이: 30 cm, 직경: 10 cm, 100-200 메쉬 실리카 겔, 석유 에테르/EtOAc = 15/1, 10/1, 5/1)에 의해 정제하여 Int V-3 (14 g)을 백색 고체로서 얻었다. 1 H NMR: (CDCl3, 400 MHz): 7.41 (s, 1H), 6.76 (s, 1H), 4.20 (s, 3H), 3.93 (s, 3H), 3.90 (s, 3H), 3.87 (s, 3H).
단계 D: 화합물 V의 합성
Figure pct00083
무수 MeOH (100 mL) 내 화합물 Int V-3 (14 g, 52.63 mmol)의 용액에 NaBH4 (10 g, 263.16 mmol)를 0 - 10oC (얼음-물 배쓰)에서 10 부분으로 부가하고 (각각의 부분에 대해 1 g) 얻어진 혼합물을 30oC에서 3 시간 동안 교반했다. 현탁액을 여과하고 여액을 농축하여 10.6 g의 화합물 V을 백색 고체로서 얻었다. MP: 68.2℃ - 68.7℃. LCMS: MS 계산치: 238.08, [M+H] + = 239.1. 1 H NMR: (CDCl3, 400 MHz): 6.74 (s, 1H), 6.60 (s, 1H), 4.77 (d, J = 6.3 Hz, 2H), 4.21 (s, 3H), 3.91(d, J = 5.3 Hz, 6H), 1.95(t, J = 6.4 Hz, 1H).
화합물 W: (4,5,7-트리메톡시벤조푸란-2-일)메탄올
Figure pct00084
출발물질로서 2,4,5-트리메톡시벤즈알데히드로서 사용하여 화합물 V의 합성에 대해 기술된 바와 유사한 3-단계 절차. LCMS: MS 계산치: 238.08, [M+H] + = 239.1. 1 H NMR: (CDCl3, 400 MHz): 6.77 (s, 1H), 6.55 (s, 1H), 4.76 (d, J = 5.6 Hz, 2H), 4.01 (s, 3H), 3.94 (s, 3H), 3.92(s, 3H), 2.13(t, J = 6 Hz, 1H). 13 C NMR: (CDCl3, 100 MHz): 157.2, 146.8, 140.6, 139.7, 135.5, 123.2, 101.8, 96.7, 60.9, 57.9, 57.7, 56.8.
화합물 X: (5,7-디메톡시-3-메틸벤조푸란-2-일)메탄올
Figure pct00085
단계 A: Int X-1의 합성
Figure pct00086
2-하이드록시-5-메톡시아세토페논 (200 g, 1200 mmol) 및 무수 NaOAc (104 g, 1264 mmol)를 2000 mL의 AcOH에 한번에 실온에서 부가했다. 300 mL의 AcOH 내 브롬 (199 g, 1.264 mol)를 이후 내부 반응 온도를 15 - 25oC 사이에서 (물 배쓰)를 유지하면서 실온에서 한방울씩 적하 퍼넬로 2 h에 걸쳐 부가했다. 부가 완료후, 혼합물을 실온에서 16 h 동안 교반하고 이후 얼음 물 내에 붓고 (w/w = 1/1, 8 L) 및 1 h 동안 교반했다. 이후 혼합물을 여과하고 필터 케이크를 물로 세척하고 (3 × 1 L) 이후 공기 중에서 2 일 동안 건조시켜 Int X-1 (210 g)를 황색 고체로서 얻었다. 1 H NMR (400 MHz, CDCl3): 12.45 (s, 1H), 7.39 (d, J = 2.8 Hz, 1H), 7.20 (d, J = 2.4 Hz, 1H), 3.80 (s, 3H), 2.64 (s, 3H).
단계 B: Int X-2의 합성
Figure pct00087
DMF (1 L) 내 Int X-1 (100 g, 0.408 mol) 및 2-브로모아세토니트릴 (73 g, 0.612 mol)의 혼합물에 K2CO3 (169 g, 1.224 mol)를 한번에 실온에서 부가했다. 혼합물을 이후 80 oC까지 N2 하에서 가열하고 밤새 교반했다. 현탁액을 실온까지 냉각시키고 2000 mL의 얼음/물/식염수 (v/v/v = 1/1/2) 내에 붓고 혼합물을 EtOAc로 추출했다 (3 × 1000 mL). 조합시킨 유기 추출물을 물 (3 × 1000 mL) 이후 식염수 (3 × 1000 mL)로 세척하고 무수 Na2SO4 상에서 건조시켰다. 혼합물을 여과하고 여액을 농축했다. 잔사를 실리카 겔 칼럼 (칼럼 높이: 60 cm, 직경: 20 cm, 100-200 메쉬 실리카 겔, 석유 에테르/EtOAc = 5/1 내지 3/1)에 의해 정제하여 Int X-2 (38 g)를 황색 고체로서 얻었다. 1 H NMR (400 MHz, CDCl3): 7.22 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 6.85 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 3.79 (s, 3H), 2.35 (s, 3H).
단계 C: Int X-3의 합성
Figure pct00088
MeOH/MeCN (600 mL, v/v=1/1) 내 Int X-2 (50 g, 188 mmol)의 용액에 K2CO3 (182 g, 1316 mmol)를 한번에 실온에서 부가했다. 혼합물을 실온에서 밤새 교반했다. 혼합물을 여과하고 여액을 물 내에 붓고 (800 mL) 및 EtOAc로 추출했다 (3 × 400 mL). 조합시킨 유기 추출물을 식염수로 세척하고 (3 × 500 mL) 및 무수 Na2SO4 상에서 건조시켰다. 혼합물을 여과하고 여액을 농축했다. 잔사를 1M HCl (500 mL) 및 MeOH (100 mL) 내에 재용해시켰다. 반응을 냉각시키고 여과하기 전에 혼합물을 80 oC까지 2 h 동안 가열했다. 고체를 물로 세척하고 (800 mL x 3) 및 이후 건조시켜 Int X-3 (34.3 g)를 백색 고체로서 얻었다. 1 H NMR (400 MHz, CDCl3): 7.26 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 6.95 (d, J = 2.4 Hz, 1H), 3.98 (s, 3H), 3.86 (s, 3H), 2.55 (s, 3H).
단계 D: Int X-4의 합성
Figure pct00089
무수 DCM (500 mL) 내 Int X-3 (35 g, 117 mmol)의 혼합물에 DIBAL-H (257 mL, 톨루엔 내 1 M, 257 mmol)의 용액을 한방울씩 1 h에 걸쳐 -70 oC에서 N2 하에서 (건조 얼음-아세톤 배쓰) 부가했다. 시스템 온도를 부가동안 -65 oC까지 상승시키고 혼합물을 2 h 동안 -70 oC에서 교반했다. 혼합물을 0 oC까지 데우고 물 (100 ml)로 켄칭하고 혼합물을 여과했다. 유기 상을 분리하고 수성 상을 DCM로 추출했다 (2 ×100 mL). 조합시킨 유기 상을 포화 식염수 (2 ×100 mL)로 세척하고, 무수 Na2SO4 상에서 건조시키고 이후 여과했다. 여액을 진공에서 농축하고 잔사를 실리카 겔 크로마토그래피 (칼럼 높이: 30 cm, 직경: 15 cm, 100-200 메쉬 실리카 겔, Pet 에테르/EtOAc = 10/1 내지 3/1)에 의해 정제하여 Int X-4 (9.8 g)를 황색 고체로서 얻었다. 1 H NMR (400 MHz, CDCl3): 7.08 (d, J = 2.4 Hz, 1H), 6.88 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 4.76 (s, 2H), 3.85 (s, 3H), 2.23 (s, 3H).
단계 E: 화합물 X의 합성
Figure pct00090
Int X-4 (19.5 g, 71.9 mmol), NaOMe (212 mL, MeOH 내 25% w/v) 및 무수 DMF (2.2 g, 29.6 mmol)의 혼합물에 CuBr (3.0 g, 21.2 mmol)를 실온에서 질소 하에서 부가했다. 반응 혼합물을 80oC-90oC까지 3 h 동안 가열했다. 반응 혼합물을 H2O (500 mL)를 부가전에 0oC까지 냉각시켰다. 혼합물을 DCM로 추출하고 (2 ×300 mL) 및 조합시킨 유기 추출물을 무수 Na2SO4 상에서 건조시키고 여과했다. 여액을 회전-증발기로 진공에서 농축하고 잔사를 실리카 겔 크로마토그래피 (칼럼 높이: 30 cm, 직경: 10 cm, 100-200 메쉬 실리카 겔, 석유 에테르/EtOAc = 10/1 내지 3/1)에 의해 정제하여 화합물 X (8.4 g)를 황색 고체로서 얻었다. 1 H NMR (400 MHz, CDCl3): 6.52 (s, 1H), 6.47 (s, 1H), 4.75 (s, 2H), 3.98 (s, 2H), 3.87 (s, 3H), 2.24 (s, 3H), 1.91 (s, 1H). 13 C NMR: (CDCl3, 100 MHz): 156.5, 152.1, 145.3, 138.5, 113.4, 97.1, 93.1, 55.9, 55.8, 55.7, 8.0. LCMS: MS 계산치: 222.24; MS 실험치: 205.1 [M-OH]+. 융점: 71.9℃ - 73.8℃.
화합물 Y: 1-(5,7-디메톡시벤조푸란-2-일)에탄-1-올
Figure pct00091
단계 A: Int Y-1의 합성
Figure pct00092
화합물 B (10.0 g, 48.03 mmol) 및 IBX (26.9 g, 96.06 mmol)의 용액을 150 mL의 아세토니트릴 내에 용해시키고 80oC에서 질소 블랭킷 하에서 4h 동안 교반했다. 현탁액을 냉각시키고 여과하고 케이크를 100 mL의 EtOAc로 세척했다. 여액을 농축하여 9.8 g의 Int Y-1을 황색 고체로서 얻었다.
단계 B: 화합물 Y의 합성
Figure pct00093
0oC에서 50 mL의 THF 내 3.0 g (14.5 mmol)을 함유하는 용액을 MeMgBr (7.3 mL, 21.9 mmol, 에테르 내 3M)에 한방울에 0oC에서 부가했다. 반응 혼합물을 포화 NH4Cl 용액 (20 mL)과 함께 켄칭 전에 10 분 동안 교반했다. 얻어진 유기 층을 EtOAc로 추출하고 (100 mL x 2) 및 조합시킨 유기 추출물을 Na2SO4 상에서 건조시켰고, 여과하고 농축하여 3.2 g의 화합물 Y을 갈색 오일로서 얻었다. 1H NMR (400 MHz, CDCl3) 6.50 (s, 1H), 6.47 (s, 1H), 6.35 (s, 1H), 4.93 (dd, J=6.0, 12.8 Hz, 1H), 3.89 (s, 3H), 3.75 (s, 3H), 1.55 (d, J=6.0, 12.8 Hz, 3H).
화합물 Z: (5,7-디메톡시벤조[b]티오펜-2-일)메탄올
Figure pct00094
단계 A: Int Z-1의 합성
Figure pct00095
THF (100 mL) 내 3,5-디브로모-2-하이드록시벤즈알데히드 (12 g, 42.8 mmol)을 함유하는 0oC 용액에 NaH (1.9 g, 47.6 mmol)를 5 부분으로 부가했다. 반응을 1 h 동안 0oC로부터 20 oC까지 교반하고 이후 재냉각시키고 THF (20 mL) 내 디메틸티오카바모일 클로라이드 (6.52 g, 52.7 mmol)의 용액으로 처리했다. 반응 완료시, 포화 수성 NH4Cl (100 mL)의 용액을 부가하고 얻어진 혼합물을 EtOAc로 추출했다 (100 mL × 2). 유기 추출물을 무수 Na2SO4 상에서 건조시켰고, 여과하고 농축했다. 잔사를 칼럼 크로마토그래피에 의해 정제하여 (석유 에테르: EtOAc = 50:1 ~ 20:1) 9.0 g의 Int Z-1를 황색 고체로서 얻었다. 1 H NMR: (400 MHz, CDCl3) 9.87 (s, 1H), 7.91 (t, J = 8.0 Hz, 2H), 3.40 (s, 6H).
단계 B: Int Z-2의 합성
Figure pct00096
100 mL 둥근 바닥 플라스크 내 화합물 Int Z-1 (5.0 g, 13.6 mmol)를 150oC에서 3 hr 동안 교반하고 이후 냉각시키고 칼럼 크로마토그래피 (석유 에테르: EtOAc = 5:1)에 의해 정제하여 3 g의 Int Z-2를 황색 고체로서 얻었다. 1 H NMR (400 MHz, CDCl3) 10.18 (s, 1H), 8.00 (t, J = 10.0 Hz, 2H), 3.14 (s, 3H), 2.97 (s, 3H).
단계 C: Int Z-3의 합성
Figure pct00097
MeOH (50 mL) 내 3 g (8.17 mmol)의 Int Z-2를 함유하는 용액을 H2O (50 mL) 내 NaOH (1.8 g, 45 mmol)에 부가했다. 반응을 주변 온도에서 2h 동안 교반했다. 반응을 10% 시트르산 (50 mL) 부가에 의해 중화시키고 EtOAc로 추출했다 (50 mL x 2). 유기 추출물을 무수 Na2SO4 상에서 건조시켰고, 여과하고 농축하여 Int Z-3 (2 g, 미정제)을 황색 오일로서 제공했고 이를 다음 단계에서 추가 정제 없이 사용했다.
단계 D: Int Z-4의 합성
Figure pct00098
DMF (80 mL) 내 2 g (6.76 mmol)의 Int Z-3를 함유하는 용액을 에틸 브로모아세테이트 (1.13 g, 6.76 mmol) 및 K2CO3 (2.8 g, 20.3 mmol)에 부가했다. 얻어진 혼합물을 100oC까지 가열하고 12 h 동안 교반했다. 반응을 이후 냉각시키고 100 mL의 물로 처리하고 이후 2 x 100 mL의 EtOAc로 추출했다. 유기 추출물을 건조시키고 농축하여 잔사를 얻었고 이를 칼럼 크로마토그래피에 의해 정제하여 (석유 에테르: EtOAc = 100:1) Int Z-4 (2.0 g)을 백색 고체로서 제공했다. 1 H NMR (400 MHz CDCl3) 7.98 (s, 1H), 7.90 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 7.66 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 4.36-4.34 (m, 2H), 1.37-1.33 (m, 3H).
단계 E: Int Z-5의 합성
Figure pct00099
0oC에서 250 mL 둥근 바닥 플라스크 내 THF (80 mL) 내 LiAlH4 (0.42 g, 11 mmol)을 함유하는 슬러리에 THF (20 mL) 내 Int Z-4 (2 g, 5.5 mmol)의 용액을 한방울씩 0 oC에서 부가했다. 반응 혼합물을 0oC에서 1 h 동안 교반하고 이후 천천히 H2O (0.45 mL) 이후 NaOH (15%, 0.45 mL) 및 H2O (1.3 mL)로 급냉했다. 고체 MgSO4를 부가하고 혼합물을 여과했다. 여액을 농축하여 Int Z-5 (1.4 g)를 백색 고체로서 얻었다.
단계 F: Int Z-6의 합성
Figure pct00100
NaOMe/MeOH (40 mL) 내 Int Z-5 (1.4 g, 4.35 mmol)를 함유하는 용액을 DMF (0.13 g, 1.74 mmol) 및 CuBr (0.19 g, 1.31 mmol)에 부가했다. 얻어진 혼합물을 12 h 동안 100oC에서 교반하고 이후 냉각시키고 50 mL의 물로 처리했다. 혼합물을 50 mL의 DCM로 추출하고 이후 무수 Na2SO4 상에서 건조시켰다. 혼합물을 여과하고 농축하여 잔사를 남기고 이를 칼럼 크로마토그래피에 의해 정제하여 (석유 에테르/EtOAc = 20:1) 1.1 g의 화합물 Z을 백색 고체로서 제공했다. 1 H NMR (400 MHz, CDCl3) 7.11 (s, 1H), 6.73 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 6.36 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 4.83 (t, J = 4.8 Hz, 1H), 3.87 (s, 3H), 3.79 (s, 3H).
실시예
실시예 1:
((2R,3R,5R)-5-(4-((((5,7-디메톡시벤조푸란-2-일)메톡시)카르보닐)-아미노)-2-옥소피리미딘-1(2H)-일)-4,4-디플루오로-3-하이드록시테트라하이드로푸란-2-일)메틸 수소 포스페이트 트리에틸 암모늄 염 (화합물 1)의 제조
Figure pct00101
단계 A: Int 1-1의 합성
Figure pct00102
무수 THF (500 mL) (얼음-물 배쓰) 내 화합물 B (60 g, 0.29 mol) 및 TEA (31 g, 0.30 mol)의 교반 용액에 무수 THF (300 mL) 내 4-니트로페닐 클로로포르메이트 (60 g, 0.30 mol)를 한방울씩 0oC에서 부가했다. 반응 혼합물을 이후 용매 증발전에 20 oC에서 12 h 동안 교반했다. 미정제 잔사를 MTBE (150 mL × 3)로 세척하고 이후 여과했다. 여액을 버리고 필터 케이크를 EtOAc (2000 mL) 및 물 (1000 mL) 내에 용해시켰다. 유기 상을 분리하고 물 (1000 mL × 2) 이후 식염수 (500 mL)로 세척하고 이후 무수 Na2SO4 상에서 건조시켰다. 여액을 농축하여 85 g의 Int 1-1를 얻었다. Rf (PE: EtOAc = 3: 1) = 0.5. 1 H NMR (400 MHz) CDCl3 8.30 (d, J =9.2 Hz, 2 H), 7.40 (d, J =9.2 Hz, 2 H), 6.84 (s, 1H), 6.62 (s, 1 H), 6.51 (s, 1 H), 5.38 (s, 2 H), 4.00 (s, 3 H), 3.84 (s, 3 H).
단계 B: Int 1-2의 합성
Figure pct00103
피리딘 (2000 mL) (얼음-물 배쓰) 내 젬시타빈하이드로클로라이드 (140 g, 460 mmol)의 용액에 TIPDSCl (176 g, 560 mmol)를 한방울씩 0℃에서 N2 하에서 부가했다. 반응 혼합물을 20℃에서 12 h 동안 교반했다. 피리딘을 진공 하에서 제거하고 잔사를 EtOAc (1500 mL)로 용해시키고 물 (800 mL × 3)로 세척했다. 유기 층을 분리하고 무수 Na2SO4 상에서 건조시키고 여과했다. 여액을 농축하여 250 g의 화합물 1-2을 백색 고체로서 얻었고, 이를 직접 다음 단계에 사용했다. 1 H NMR (400 MHz) DMSO-d6 7.49 (d, J =7.6 Hz, 1 H), 7.41-7.44 (m, 2 H), 6.11 (s, 1H), 5.78-5.80 (m, 1 H), 4.37 (s, 1 H), 4.12-4.20 (d, J =10.4 Hz, 1 H), 4.00-3.89 (m, 2 H), 1.05-0.73 (m, 28 H).
단계 C: Int i-3의 합성
Figure pct00104
THF (800 mL) 내 화합물 Int 1-1 (85 g, 0.224 mol)의 교반 현탁액에 화합물 1-2 (116 g, 0.23 mol)를 한번에 질소 하에서 부가했다. 얻어진 용액을 환류까지 100oC에서 12 h 동안 가열했다. 혼합물을 냉각시키고 용매를 증발시켜 잔사를 얻었고 이를 EtOAc (500 mL) 내에 용해시키고 물로 세척했다 (200 mL × 3). 유기 상을 분리하고 무수 Na2SO4 상에서 건조시키고 여과했다. 여액을 감압 하에서 농축하여 미정제 생성물을 얻었고 이를 플래시 크로마토그래피에 의해 정제하여 90 g의 화합물 Int 1-3을 발포물로서 얻었다. Rf (석유 에테르: EtOAc = 1: 1) = 0.4.
단계 D: Int 1-4의 합성
Figure pct00105
화합물 Int 1-3 (90 g, 0.12 mol)를 MeOH (1000 mL) 내에 용해시키고 NH4F (22.5 g, 2.46 mol)로 한번에 처리했다. 얻어진 용액을 용매 증발 전에 20oC에서 12 h 동안 교반하여 잔사를 얻었다. 잔사를 EtOAc (1000 mL) 내에 용해시키고 물로 세척하고 (500 mL × 3) 이후 무수 Na2SO4 상에서 건조시키고 농축하여 잔사를 얻었다. 잔사를 HPLC 등급 MeOH (1000 mL)로 덮고 이후 여과했다. 필터 케이크를 HPLC 등급 MeOH (200 mL × 2)로 세척했다. 필터 케이크를 이후 HPLC 등급 MeOH (1500 mL)로 덮고 80oC에서 가열하고 용액을 생성했다. 용액을 실온까지 12 h에 걸쳐 냉각시켜 침전을 실행했다. 침전물을 여과하고 HPLC 등급 MeOH (150 mL × 3)로 세척하고 고체를 45oC에서 6 일 동안 건조시켜 35 g의 Int 1-4을 백색 고체로서 얻었다. Rf (DCM/MeOH = 15/1) = 0.3. HPLC: t = 2.40 min; 순도: 99.71%. 1 H NMR (400 MHz) DMSO-d6 11.03 (s, 1 H), 8.24 (d, J =7.6 Hz, 1 H), 7.10 (d, J =7.2 Hz, 1H), 6.95 (s, 1 H), 6.72 (s, 1 H), 6.56 (s, 1 H), 6.31 (d, J =2.0 Hz, 1 H), 6.18-6.14 (m, 1 H), 5.30 (s, 3 H), 4.21-3.90 (m, 1 H), 3.82 (s, 4 H), 3.77 (m, 4 H), 3.69-3.64 (m, 1 H). MS 계산치: 497.1, [M-44] + = 454.2.
단계 E: 화합물 1의 합성
Figure pct00106
Int 1-4 (2.0 g, 4.0 mmol)을 함유하는 건조 100 mL 둥근 바닥 플라스크에 트리메틸 포스페이트 (10 ml)를 부가했다. 슬러리를 균질 용액이 형성될 때까지 질소 하에서 실온에서 교반했다. 얻어진 반응 혼합물을 이후 얼음-물-염 배쓰 내에서 -10oC까지 냉각시키고 10 분 동안 교반했다. 인 옥시클로라이드 (2.8 g, 18 mmol)를 한방울씩 10 분의 기간에 걸쳐 부가했다. 부가완료 후 반응 혼합물을 -10oC에서 부가적 3 시간 동안 교반했다. 반응 혼합물을 이후 탈이온수 (200 mL)로 한방울씩0oC에서 처리했다. 부가동안, 황색 고체를 형성시켰고 이를 이후 여과하고 물로 세척했다 (10 mL×3). 황색 고체를 아세토니트릴/물 (20 mL, 1/1) 내에 용해시키고 EtOAc로 pH = 8로 조정했다. 혼합물을 분취용 HPLC에 의해 정제하여 1.0 g의 화합물 1을 백색 고체로서 얻었다. HPLC 순도: 99.83 %. 1 H NMR (400 MHz) DMSO-d6 11.03 (br. s., 1H), 8.32 (d, J=7.5 Hz, 1H), 7.11 (d, J=7.5 Hz, 1H), 6.96 (s, 1H), 6.72 (s, 1H), 6.56 (d, J=1.5 Hz, 1H), 6.16 (t, J=6.9 Hz, 1H), 5.30 (s, 2H), 4.31 - 4.22 (m, 1H), 4.08 (s., 1H), 3.99 (d, J=6.3 Hz, 2H), 3.90 (s, 3H), 3.77 (s, 3H), 2.97 (d, J=6.5 Hz, 6H), 1.16 (t, J=7.2 Hz, 9H). 31 P NMR: (160 MHz) DMSO-d6 0.27.
실시예 2
디소듐 ((2R,3R,5R)-5-(4-((((5,7-디메톡시벤조푸란-2-일)메톡시)- 카르보닐)아미노)-2-옥소피리미딘-1(2H)-일)-4,4-디플루오로-3-하이드록시테트라-하이드로푸란-2-일)-메틸 포스페이트 (화합물 2)의 제조
Figure pct00107
단계 A: 화합물 2의 제조
Figure pct00108
화합물 1 (0.100 g, 0.1 mmoles, 1.0 당량)를 탈이온수 (10 mL) 내에 용해시키고 이전에 탈이온수 (10 mL)로 팽창시킨 Bio-Rex 70 소듐 형태 이온-교환 수지 (5.0 g)에 부가했다. 혼합물을 탈이온수 (20 mL)로 희석하고 실온에서 1 시간 동안 교반했다. HPLC 및 LC_MS는 출발물질로부터 완전히 상이한 체류 시간을 나타냈다. 재료를 하소된 프릿을 통해 여과했다. 얻어진 투명한 용액을 건조까지 동결건조시켜 화합물 2을 백색 분말로서 얻었다. 1 H NMR (300 MHz, D2O): 8.16 (d, J = 7.5 Hz, 1H), 7.02 (d, J = 7.8 Hz, 1H), 6.72 (s, 1H), 6.56 (d, J = 1.8 Hz, 1H), 6.35 (d, J = 2.1 Hz, 1H), 6.06 (t, J = 6.8 Hz, 1H), 5.17 - 5.08 (m, 2H), 4.40 - 4.28 (m, 1H), 4.06 - 4.00 (m, 2H), 3.95 - 3.86 (m, 1H), 3.78 (s, 3H), 3.65 (s, 3H). 31 P NMR (120 MHz, D2O): 4.90
실시예 3
트리에틸암모늄 ((2R,3R,5R)-5-(4-((((5,7-비스(메톡시-d3)벤조푸란-2-일)-메톡시)카르보닐)아미노)-2-옥소피리미딘-1(2H)-일)-4,4-디플루오로-3-하이드록시-테트라하이드로푸란-2-일)메틸 수소 포스페이트 (화합물 3)의 제조
Figure pct00109
단계 A: Int 3-1의 합성
Figure pct00110
THF (100 mL) 내 화합물 C (17 g, 79 mmol)의 교반 용액에 EtOAc (8.2 g, 83 mmol)를 한방울씩 0 ℃에서 (얼음-물 배쓰) 5 min에 걸쳐 이후 THF (50 mL) 내 4-니트로페닐 클로로포르메이트 (17.1 g, 85 mmol)의 용액을 조금씩 부가했다. 얻어진 용액을 실온에서 2 h 동안 교반했다. 용매를 이후 증발시키고 미정제 잔사를 MTBE (100 mL × 3)와 함께 교반하고 이후 여과했다. 필터 케이크를 EtOAc (150 mL) 내에 용해시키고 물로 세척했다 (50 mL × 2). 유기 층을 분리하고, 무수 Na2SO4 상에서 건조시키고 여과했다. 여액을 농축하여 Int 3-9 (19 g)을 백색 고체로서 얻었다. LCMS: 380.2 [M+H]+. 1 H NMR: (CDCl3, 400 MHz): 8.27 (d, J = 8.8 Hz, 2H), 7.38 (d, J = 8.8 Hz, 2H), 6.83 (s, 1H), 6.60 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 6.49 (s, J = 2.0 Hz,1H), 5.37 (s, 2H).
단계 B: Int 3-2의 합성
Figure pct00111
THF (50 mL) 내 Int 1-2 (14 g, 28 mmol)의 교반 용액에 Int 3-9 (11 g, 28 mmol)를 부가하고 얻어진 용액을 환류까지 밤새 가열했다. 혼합물을 실온까지 냉각시키고 용매를 제거하여 잔사를 얻었다. 잔사를 플래시 크로마토그래피 (칼럼 높이: 30 cm, 직경: 10 cm, 100-200 메쉬 실리카 겔, 석유 에테르/EtOAc=10/1, 5/1, 4/1)에 의해 정제하여 Int 3-10 (13 g)을 백색 고체로서 얻었다. LCMS: 702.4 [M-C3H8]+. 1 H NMR (400 MHz, CDCl3): 8.02 (d, J =8.0, 1 H), 7.32 (d, J =8.4, 1 H) 6.81 (s, 1 H), 6.63 (d, J =2.0 Hz, 1 H), 6.47 (d, J =2.0 Hz, 1 H), 6.17-6.14 (t, J =12.4 Hz, 1H), 5.33-5.25 (m, 2 H), 4.43-4.37 (m, 2 H), 4.25-4.21 (m, 1 H), 4.10-3.91 (m, 2 H), 1.11-1.03 (m, 28 H).
단계 C: Int 3-3의 합성
Figure pct00112
화합물 Int 3-2 (13 g, 17.4 mmol)를 MeOH (50 mL) 내에 용해시켰다. 이 용액에 NH4F (2.9 g, 78.4 mmol)를 한번에 부가하고 얻어진 용액을 실온에서 밤새 교반했다. 용매를 증발시켜 잔사를 얻었고 이를 EtOAc (100 mL) 내에 용해시키고 이후 물로 세척했다 (50 mL × 3). 유기 추출물을 조합시키고 무수 Na2SO4 상에서 건조시키고 이후 농축하여 잔사를 얻었다. 잔사를 HPLC 등급 MeOH (200 mL)와 함께 교반하고 이후 여과했다. 필터 케이크를 2회 500 mL의 HPLC 등급 MeOH로 세척했다 (HPLC는 필터 케이크의 순도가 ~99%임을 나타냈다). 필터 케이크를 HPLC 등급 MeOH (200 mL) 내에 용해시키고 80 oC까지 가열했다. 열을 제거하고 얻어진 용액을 실온에서 밤새 방치했다. 얻어진 고체를 여과하고 HPLC 등급 MeOH (50 mL × 3)로 세척했다. 고체 생성물을 45 oC에서 진공 하에서 6 일 가열하고, Int 3-3 (5.7 g)을 백색 고체로서 얻었다. LCMS: 460 [M-CO2]+. 1 H NMR: (DMSO-d6, 400 MHz): = 10.01 (s, 1H), 8.24 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 7.10 (d, J = 7.6 Hz, 1H), 6.94 (s, 1H), 6.71 (s, 1H), 6.55 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 6.32-6.30 (m, 1H), 6.18-6.14 (m, 1H), 5.29 (s, 3H), 4.22-4.16 (m, 1H), 3.89-3.87 (m, 1H), 3.78-3.65 (m, 2H). 13 C NMR: (DMSO-d6, 100 MHz): : 163.7, 157.0, 154.4, 153.1, 152.5, 145.5, 144.9, 139.4, 129.2, 125.9, 123.4, 120.8, 108.5, 98.0, 95.3, 81.4, 69.0, 68.8, 68.6, 59.7, 59.2. MP: 137.8 oC - 142.4 oC.
단계 D: 화합물 3의 합성
Figure pct00113
건조 100 mL 둥근 바닥 플라스크를 Int 3-3 (0.223 g, 0.4 mmol, 1.0 당량) 및 트리메틸 포스페이트 (0.918 ml)로 충전했다. 이 혼합물을 초음파처리하여 균질 용액을 얻었고 이를 이후 얼음-물 배쓰 내에서 냉각시키고 10 분 동안 교반했다. 인 옥시클로라이드 (49 ul, 0.5 mmoles, 1.2 당량)를 한방울씩 3 min의 기간에 걸쳐 부가했다. 교반 반응 혼합물을 실온까지 데우고 2 시간 동안 교반했다. 부가적인 옥시클로라이드 (13 ul)를 부가하고 한 시간 동안 교반했다. 반응을 2 M TEAHC 완충액 (트리에틸암모늄 수소 카보네이트)로 pH = 8까지 켄칭하고 냉장고 내에 주말에 걸쳐 저장했다. 혼합물을 이후 디클로로메탄 (50ml)로 추출했다. 수성 층을 9 min에 걸쳐 분취용 역상-HPLC에 의해 정제했다 (Gemini-NX, 10u C18 110A AXD 100 x 21.20 mm; 0 - 50% CH3CN/50mM TEAHC 물, 50% CH3CN/50mM TEAHC에서 물 10 min 동안 유지하여, 약 6 mL의 미정제 생성물을 얻었고, 주입 양은 0.4 mL였고, 생성물을 ~5.5 min에서 용리했다). 수집된 분획을 동결건조시켜 140 mg의 화합물 3을 백색 고체로서 얻었다. 1 H NMR (D2O, 300MHz): 8.2 ppm (d, 1H, J=7.5 Hz), 7.05 (d, 1H, J=7.5 Hz), 6.79 (s, 1H), 6.65 (d, 1H, 2.4 Hz), 6.455 (d, 1H, J=2.4 Hz), 6.131 (m, 1H), 5.195 (s, 2H), 4.5-4.3 (m, 1H), 4.15-4.0 (m, 2H), 4.0-3.9 (m, 1H), 3.0 (q, 12H, J=7.2 Hz, Et3NH+), 1.141 (t, 18H, J=7.2 Hz, Et3NH+). 31 P NMR (D2O, 121 MHz): 4.975. LC-MS: 606.0 [M+Na]+, 581.6 [M-1]-.
다음 화합물 4-6는 실시예 3에서 기술된 것과 유사한 절차를 사용하여 제조될 수 있다:
화합물 4: 트리에틸암모늄 ((2R,3R,5R)-5-(4-((((5,7-디브로모벤조푸란-2-일)메톡시)카르보닐)-아미노)-2-옥소피리미딘-1(2H)-일)-4,4-디플루오로-3-하이드록시테트라-하이드로푸란-2-일)메틸 수소 포스페이트
Figure pct00114
1 H NMR (300 MHz, D2O): 7.94 (d, J = 7.2 Hz, 1H), 7.09 (s, 1H), 6.98 (s, 1H), 6.94 (d, J = 7.2 Hz, 1H), 6.54 (s, 1H), 6.01 (t, J = 7.2 Hz, 1H), 5.11 - 5.00 (m, 2H), 4.30 - 4.19 (m, 1H), 4.09 - 4.02 (m, 3H), 3.00 (q, J = 7.2 Hz, 6H), 1.08 (t, J = 7.2 Hz, 9H). 31 P NMR (121 MHz, D2O): δ 1.92. LC-MS: 1350.4 [2M+1]+, 675.7, 677.6, 678.7 [M+1]+
화합물 5: 트리에틸암모늄 ((2R,3R,5R)-4,4-디플루오로-3-하이드록시-5-(4-((((5-메톡시-7-메틸벤조푸란-2-일)메톡시)카르보닐)아미노)-2-옥소피리미딘-1(2H)-일)테트라하이드로푸란-2-일)메틸 수소 포스페이트
Figure pct00115
1 H NMR (300 MHz, D2O): 7.94 (d, J = 7.5 Hz, 1H), 6.77 (d, J = 7.5 Hz, 1H), 6.60 (d, J = 2.1 Hz, 1H), 6.56 (s, 1H), 6.40 (s, 1H), 5.96 (t, J = 7.0 Hz, 1H), 5.02 - 4.91 (m, 2H), 4.33 - 4.21 (m, 1H), 4.01 - 3.97 (m, 2H), 3.92 - 3.86 (m, 1H), 3.54 (s, 3H), 2.87 (q, J = 7.3 Hz, 12H), 2.12 (s, 3H), 1.02 (t, J = 7.3 Hz, 18H). 31 P NMR (121 MHz, D2O): 4.88.
화합물 6: 트리에틸암모늄 ((2R,3R,5R)-5-(4-((((5,7-디메틸벤조푸란-2-일)메톡시)카르보닐)아미노)-2-옥소피리미딘-1(2H)-일)-4,4-디플루오로-3-하이드록시테트라-하이드로푸란-2-일)메틸 수소 포스페이트
Figure pct00116
1 H NMR (300 MHz, D2O): 8.04 (d, J = 7.5 Hz, 1H), 6.99 - 6.89 (m, 3H), 6.56 (s, 1H), 6.00 (t, J = 6.9 Hz, 1H), 5.11 - 5.00 (m, 2H), 4.35 - 4.24 (m, 1H), 4.04 - 3.88 (m, 3H), 2.95 (q, J = 7.2 Hz, 12H), 1.98 (s, 3H), 1.96 (s, 3H), 1.07 (t, J = 7.2 Hz, 18H). 31 P NMR (121 MHz, D2O): 4.90. LC-MS: 543.6 [M-H]+.
실시예 4
디(트리에틸암모늄) ((2R,3R,5R)-5-(4-((((4-((5,7-디메톡시벤조푸란-2-일)메톡시)벤질)옥시)카르보닐)아미노)-2-옥소피리미딘-1(2H)-일)-4,4-디플루오로-3-하이드록시테트라하이드로푸란-2-일)메틸 포스페이트 (화합물 7)의 제조
Figure pct00117
단계 A: 화합물 7의 제조
Figure pct00118
Int N를 실시예 1에서 기술된 3 단계 절차를 사용하여 Int N-3로 전환시켰다. 건조 100 mL 둥근 바닥 플라스크를 Int N-3 (0.220 g, 0.4 mmol) 및 트리메틸 포스페이트 (0.906 ml)로 충전했다. 이 혼합물을 초음파처리하여 균질 용액을 얻었고 이후 이를 얼음-물 배쓰 내에서 냉각시키고 10 분 동안 교반했다. 인 옥시클로라이드 (40 uL, 0.4 mmol)를 한방울씩 3 분에 걸쳐 부가했다. 부가 완료후 반응 혼합물을 실온까지 데우고 2 h 동안 교반했다. 부가적인 옥시클로라이드 (13 ul)를 부가하고 반응 혼합물을 한 시간 동안 교반했다. 반응을 pH = 8까지 2 M TEAHC 완충액으로 켄칭하고 밤새 실온에서 교반했다. 혼합물을 이후 디클로로메탄으로 추출했다. 수성 층 (초기에 에멀젼, 이는 밤새 방치에 의해 투명해짐)를 분취용 역상-HPLC 상에서 정제하였다 (Gemini-NX, 10u C18 110A AXD 100 x 21.20 mm; 16 분에 걸쳐 0 - 45% CH3CN/50mM TEAHC 물, 2 분 동안 45% CH3CN/50mM TEAHC 물에서 유지, 생성물을 12 분에서 용리했다). 적절한 분획을 수집하고, 조합시키고 동결건조시켜 화합물 7를 백색 분말로서 얻었다 (87 mg). 1 H NMR (300 MHz, D2O): 7.83 (d, J = 7.8 Hz, 1H), 7.08 (d, J = 7.5 Hz, 1H), 6.69 - 6.63 (m, 3H), 6.10 (s, 1H), 5.97 (t, J = 7.3 Hz, 1H), 5.85 (s, 1H), 5.50 (s, 1H), 4.82 (s, 2H), 4.75 (s, 2H), 4.31 - 4.20 (m, 1H), 4.04 - 3.89 (m, 3H), 3.51 (s, 3H), 3.28 (s, 3H), 2.85 (q, J = 7.3 Hz, 12H), 1.04 (t, J = 7.3 Hz, 18H). 31 P NMR (121 MHz, D2O): 4.95. LCMS: 639.9 [M - 44 + H]+
다음 화합물은 실시예 4에서 기술된 것과 유사한 절차를 사용하여 제조될 수 있다:
화합물 8: 디(트리에틸암모늄) ((2R,3R,5R)-5-(4-((((4-((5-메톡시-7-메틸벤조푸란-2-일)메톡시)벤질)옥시)카르보닐)아미노)-2-옥소피리미딘-1(2H)-일)-4,4-디플루오로-3-하이드록시테트라하이드로푸란-2-일)메틸 포스페이트
Figure pct00119
수율: 55%. 1 H NMR (300 MHz, D2O): 7.86 (d, J = 7.8 Hz, 1H), 6.92 (d, J = 7.8 Hz, 2H), 6.79 (d, J = 7.8 Hz, 1H), 6.48 (d, J = 7.8 Hz, 2H), 6.20 - 6.11 (m, 3H), 5.99 (t, J = 7.3 Hz, 1H), 4.71 (s, 2H), 4.48 (s, 2H), 4.29 - 4.18 (m, 1H), 4.02 - 3.88 (m, 3H), 3.31 (s, 3H), 2.80 (q, J = 7.3 Hz, 12H), 1.00 (t, J = 7.3 Hz, 18H). 31 P NMR (121 MHz, D2O): 4.91. LC-MS: 624.0 [M-CO2+H]+; 690.0[M + Na]+
실시예 5
1차 인간 두경부 편평상피 세포 암종 세포주 내 화합물 1과 그의 비-인산화 SMDC Int 1-4 및 젬시타빈의 비교 세포독성 IC 50
UT-SCC-5, UT-SCC-8, UT-SCC-9, UT-SCC-10, UT-SCC-14, UT-SCC-16A, UT-SCC-16B, 및 UT-SCC-24A를 포함하는 8 1차 초기-계대 인간 두경부 편평상피 세포 암종 세포주에 걸쳐 포스페이트 프로드럭 화합물 1-9, 부모 비-인산화 SMDC 부모 화합물, 및 이펙터 (젬시타빈)에 대한 세포독성 IC50 값을 결정하기 위해 종양 세포 증식 어세이를 사용했다.
방법
96-웰 흑색 투명한-바닥 조직 배양 플레이트 상에서 4000 세포/100 ml/웰에서 UTSCC 세포를 접종했다. 세포를 회수 및 재-부착하기 위해 37℃ 및 5% CO2에서 밤새 배양했다. 다음 날 세포를 시험 화합물 (0 - 100 M)로 72 시간 동안 처리했다. 처리후, alamarBlue 시약의 형광 정량에 의해 세포 증식를 측정했다. alamarBlue 어세이는 대사 활성검출에 기초하여 형광분석/비색 성장 지시자를 포함한다. 특히, 레사주린, alamarBlue 시약의 활성 성분은 청색이고 실질적으로 비-형광이다. 세포 내로 들어가면 레사주린은 적색이고 매우 형광성인 화합물인 레소루핀으로 환원된다. 계속적 세포 성장은 환원 환경을 유지하고, 따라서 전체적 형광과 세포 주변 배지의 색상을 증가시킨다. alamarBlue 시약의 형광 강도는 세포 수에 직접 비례한다. alamarBlue 어세이를 수행하기 위해, 10 ml의 alamarBlue 시약을 각각의 웰에 부가하고 플레이트를 37℃에서 부가적 2 시간 동안 배양했다. BioTek SynergyTM 2 마이크로플레이트 리더을 사용하여 530 nm 여기 및 590 nm 방출에서 형광 강도를 측정했다.
세포 증식 어세이를 각각의 농도에서 삼중으로 수행했다. 컴퓨터 소프트웨어, Graphpad Prism을 사용하여 형광 강도 데이터를 분석했다. 화합물 부재 하에, 각각의 데이터 세트 내 형광 강도 (Ft)는 100 %로서 정의되었다. 세포 부재 하에, 각각의 데이터 내 형광 강도 (Fb)는 0 %로서 정의되었다. 각각의 화합물의 존재 하 퍼센트 세포를 다음 등식에 따라서 계산했다: % 세포 = (F-Fb)/(Ft-Fb), 여기서 F= 화합물의 존재 하 형광 강도, Fb= 세포의 부재 하 형광 강도, 및 Ft = 화합물의 부재 하 형광 강도. % 세포 대 일련의 화합물 농도의 값을 이후 등식 Y = B + (T - B)/1+10((Log EC50-X) × Hill 기울기)의 S자 용량-반응 비선형 회귀 분석을 사용하여 플로팅하고, 여기서 Y = 퍼센트 세포, B = 최소 퍼센트 세포, T = 최대 퍼센트 세포, X = 화합물의 로그 및 Hill 기울기 = 기울기 인자 또는 Hill 계수. IC50 값을 절반-최대 퍼센트 활성을 유발하는 농도에 의해 결정했다.
화합물 1, 비-인산화 부모 SMDC (Int 1-4) 및 젬시타빈에 대한 세포독성 IC50 값을 표 1에 나타낸다. 화합물 1/Int 1-4 ~ 1에 대한 세포독성 IC50 값의 평균 비는 Int 1-4의 프로드럭로서 작용하는 화합물 1과 일치한다. 화합물 1/젬시타빈 ~ 1.6에 대한 세포독성 IC50 값의 평균 비는 화합물 1이 1차 두경부 편평상피 세포 암종 세포주 내에서 필적하는 세포독성을 나타냄을 나타낸다.
표 1. 일련의 1차 두경부 편평상피 세포 암종 세포주 내 중간체 1-4 (부모 SMDC) 및 젬시타빈 (이펙터)와 비교한 화합물 1 (포스페이트 프로드럭)의 세포독성.
*공급원: Turku University Hospital 및 University of Turku, Turku, Finland
실시예 6
약물동력학적 연구
Figure pct00120
화합물 1 (Int 1-4)에 상응하는 비-인산화 SMDC는 낮은 내지 중간 용해도를 나타냈지만 50 mg/mL로 제제화되었다. Int 1-4를 안정성 및 혈장/정상 조직 PK 연구에 부쳤다.
화합물 1는 물 내 가용성 (> 300 mg/mL)에 가용성으로 나타났고 iv/sq 투여용으로 편리하게 제제화되었다.
a) 마우스 혈장 내 화합물 1 ( Int 1-4 ) 대 젬시타빈의 비-인산화 SMDC의 비교 약물동력학 (PK) 연구
배경: 젬시타빈은 불활성 dFdU로 탈아미노화한다고 공지되어 있다. 이론에 속박되기를 원하지 않으면서, Int 1-4는 전신적으로 안정하고 종양 내 활성화되어 '유리' 젬시타빈을 방출하도록 설계된다.
목적: 마우스 내 10 mg/kg에서 Int 1-4 및 5 mg/kg CD-1에서 젬시타빈의 단일 정맥내 주입 투여 이후 혈장 내 Int 1-4 대 '유리' 젬시타빈의 혈장 약물동력학 및 안정성 비교
PK 측정: Int 1-4 및 젬시타빈에 대한 PK 파라미터 C0, CL, Vdss, Cmax, tmax, t½, AUC(0-t), AUC(0-inf), MRT(0-t), MRT(0-inf) 비교
Figure pct00121
CD-1 마우스 내 젬시타빈 약물동력학
Figure pct00122
주: -- = 샘플 없음
상기 표 및 도 2a는 젬시타빈이 긴 순환 반감기 및 AUC 및 긴 노출 시간를 가지는 불활성 dFdU로 전환됨를 나타낸다. dFdU의 AUC0-last (ng.h/mL) 혈장 수준의 비에 기초하여 젬시타빈보다 ~ 500% 더 높다. 데이터는 간행된 문헌과 일치한다.
CD-1 마우스 내 Int 1-4 약물동력학
Figure pct00123
주: -- = 샘플 없음
AUC0-last (ng.h/mL) 비에 기초하여 젬시타빈의 혈장 수준은 투여된 Int 1-4의 ~ 1.3%를 구성한다 (상기 표 데이터 및 도 2b 참조). C0 및 Cmax (ng/mL) 비에 기초하여 젬시타빈의 혈장 수준은 투여된 Int 1-4의 0.01%를 구성한다. 정상 조직 PK 연구에 의해 입증된 바와 같이 Int 1-4는 신속히 혈장에서 제거되고 조직 내로 흡수된다.
b) 수컷 CD-1 마우스 내 화합물 1의 비-인산화 SMDC ( Int 1-4 ) 대 화합물 1 의 비교 약물동력학 (PK) 연구
목적: 수컷 CD-1 마우스 내 11.6 mg/kg 및 23.2 mg/kg에서의 화합물 1과 10.0 mg/kg에서의 Int 1-4 (제형 F1 & F2)의 단일 정맥 내 주입 투여 이후 혈장 내 화합물 1과 그의 비-인산화 SMDC 유사체 (Int 1-4)의 혈장 약물동력학 및 안정성비교
PK 측정: 화합물 1 및 Int 1-4에 대한 PK 파라미터 C0, CL, Vdss, Cmax, tmax, t½, AUC(0-t), AUC(0-inf), MRT(0-t), MRT(0-inf) 비교.
Figure pct00124
마우스 혈장 (IV1) 내 화합물 1 대 Int 1-4 의 비교
Figure pct00125
마우스 혈장 (IV2) 내 화합물 1 대 Int 1-4 의 비교
Figure pct00126
마우스 혈장 내 화합물 1 대 Int 1-4 의 비교 (IV3)
Figure pct00127
ND = not detected
Figure pct00128
c) Int 3-3 ( Int 1-4 의 중수소화 유사체), 화합물 3 의 비-인산화 SMDC ( 화합물 1 의 중수소화 유사체)의 약물동력학.
목적: CD-1 마우스 내 8.83 mg/kg에서 Int 3-3의 단일 정맥내 주입 이후 Int 3-3의 혈장 약물동력학 결정
PK 측정: Int 3-3에 대한 PK 파라미터 C0, CL, Vdss, Cmax, tmax, t½, AUC(0-t), AUC(0-inf), MRT(0-t), MRT(0-inf) 비교.
Figure pct00129
CD-1 마우스 내 Int 3-3 약물동력학
Figure pct00130
d) CD-1 마우스 내 Int 1-4 정상 조직 및 혈장 PK
목적: 수컷 CD-1 마우스 내 20 mg/kg에서 Int 1-4의 단일 정맥 내 주입 투여 이후 배설 장기 내 Int 1-4의 정상 조직 약물동력학, 분포, 및 안정성 비교.
PK 측정: Int 1-4에 대한 PK 파라미터 C0, CL, Vdss, Cmax, tmax, t½, AUC(0-t), AUC(0-inf), MRT(0-t), MRT(0-inf) 비교
Figure pct00131
도 5에 나타낸 바와 같이, Int 1-4는 혈장 및 주요 배설 장기 가령 간 및 신장에서 안정하다. 젬시타빈은 dFdU로 탈아미노화하는 것으로 보인다. 90 % 젬시타빈은 SMDC 형태로 예방되는 시티딘 데아미나제에 의해 해독된다.
e) CD-1 마우스 내 젬시타빈 정상 조직 및 혈장 PK
목적: 수컷 CD-1 마우스 내 10.5 mg/kg에서 젬시타빈의 단일 정맥내 주입 투여 이후 선택 배설 장기 및 혈장 내 젬시타빈의 상 조직 약물동력학, 분포, 및 안정성 결정.
PK 측정: 젬시타빈에 대한 PK 파라미터 C0, CL, Vdss, Cmax, tmax, t½, AUC(0-t), AUC(0-inf), MRT(0-t), MRT(0-inf) 결정
Figure pct00132
도 6에 나타낸 바와 같이, 젬시타빈은 혈장 및 정상 조직 내에서 dFdU로 탈아미노화된다. 임상에서 주사된 투여량 중 90%는 부모 젬시타빈 (1 %) 또는 dFdU (99%)로서 뇨 중에서 회수된다.
f) 수컷 사이노몰구스 원숭이 내 Int 1-4 혈장 PK
목적: 수컷 사이노몰구스 원숭이 내 5 mg/kg 및 10 mg/kg에서 Int 1-4의 단일 정맥내 주입 투여이후 혈장 내 Int 1-4의 혈장 약물동력학 및 안정성비교
PK 측정: Int 1-4에 대한 PK 파라미터 C0, CL, Vdss, Cmax, tmax, t½, AUC(0-t), AUC(0-inf), MRT(0-t), MRT(0-inf) 비교
Figure pct00133
수컷 사이노몰구스 원숭이 내 Int 1-4 파라미터
Figure pct00134
g) 수컷 사이노몰구스 원숭이 내 Int 1-4 및 젬시타빈 PK 비교
목적: 수컷 사이노몰구스 원숭이 내 5 mg/kg 및 10 mg/kg 에서 Int 1-4 및 2.65 mg/kg 및 5.29 mg/kg 에서 동일몰 젬시타빈의 단일 정맥내 주입 투여 이후 혈장 내 Int 1-4 대 젬시타빈의 혈장 약물동력학 및 안정성 비교
PK 측정: Int 1-4에 대한 젬시타빈과 PK 파라미터 C0, CL, Vdss, Cmax, tmax, t½, AUC(0-t), AUC(0-inf), MRT(0-t), MRT(0-inf) 비교
Figure pct00135
수컷 사이노몰구스 원숭이 내 Int 1-4 PK 파라미터
Figure pct00136
수컷 사이노몰구스 원숭이 내 젬시타빈 PK
Figure pct00137
젬시타빈/Int 1-4 Cmax 값의 비에 기초하여 혈장 내 0.09% 유리 젬시타빈은 낮은 전신 노출을 나타낸다. 젬시타빈은 원숭이 내에서 0.02 h의 반감기를 가지고 dFdU로 활성화되고 반면 Int 1-4는 ~50-배 더 긴 반감기 및 더 큰 안정성을 가진다. 젬시타빈의 분포 부피 VDss = 0.221 L/kg는 Int 1-4에 필적한다. 원숭이 내 동일몰 2.65 mg/kg 및 5 mg/kg 투여에서 VDss = 0.287 L/kg는 Int 1-4 및 약물의 혈장 대 전신 물 분포가 유사함를 의미한다. 원숭이 혈장 PK 연구에서 Int 1-4 PK 파라미터는 유리 약물 젬시타빈에 유리하게 비교하지만 Int 1-4는 향상된 대사 안정성을 나타낸다.
h) 수컷 사이노몰구스 원숭이 내 화합물 1 및 젬시타빈 혈장 PK
목적: 수컷 사이노몰구스 원숭이 내 5 mg/kg 및 10 mg/kg에서 화합물 1과 2.28 mg/kg에서 동일몰 젬시타빈의 단일 정맥 내 주입 투여 이후 혈장 내 화합물 1과 Int 1-4의 혈장 약물동력학 및 안정성 비교.
PK 측정: 화합물 1 및 Int 1-4에 대한 젬시타빈과 PK 파라미터 C0, CL, Vdss, Cmax, tmax, t½, AUC(0-t), AUC(0-inf), MRT(0-t), MRT(0-inf) 비교.
Figure pct00138
원숭이 혈장 내 화합물 1 대 Int 1-4의 비교
Figure pct00139
화합물 1은 0.01 h 혈장 반감기를 가지고 아마도 포스파타제 효소에 의해 Int 1-4로 전환된다. 화합물 1은 따라서 Int 1-4의 가용성 프로드럭이고 젬시타빈의 HCl 염과 유사하게 PBS 내에서 임상에서 iv 투여에 유용하다. 젬시타빈/Int 1-4 Cmax 값의 비에 기초하여, 0.09% 유리 젬시타빈이 낮은 전신 노출로 혈장 내에 있다. 젬시타빈은 원숭이 내에서 0.02 h의 짧은 반감기를 가지고 dFdU에 불활성이다. VDss = 0.0357 L/kg의 화합물 1 에 대한 분포의 고 부피는 Int 1-4보다 10-배 낮다. 이론에 속박되기를 원하지 않으면서, 이러한 관찰은 Int 1-4 가 체액 내로 더욱 분포하면서, 혈장 내 남은 충전된 친수성 프로드럭과 일치한다.
화합물 1 및 대사체 Int 1-4 에 대한 PK 파라미터는 프로드럭/약물 전환과 일치한다.
i) 래트 혈장 내 Int 1-4 대 젬시타빈의 비교 약물동력학
목적: Sprague-Dawley 래트 내 10 mg/kg에서 Int 1-4 및 4.71 mg/kg에서 젬시타빈의 단일 정맥내 주입 투여 이후 혈장 내 Int 1-4 대 '유리' 젬시타빈의 혈장 약물동력학 및 안정성 비교.
PK 측정: Int 1-4 및 젬시타빈에 대한 PK 파라미터 C0, CL, Vdss, Cmax, tmax, t½, AUC(0-t), AUC(0-inf), MRT(0-t), MRT(0-inf) 비교
Figure pct00140
젬시타빈은 래트 내에서, 마우스에서보다는 3x 훨씬 긴 혈장 반감기 (t½)를 가진다 (도 10a):
▶ 래트 혈장 t½ ~ 3.3 h
▶ 마우스 혈장 t½ ~ 0.9 h
Sprague-Dawley 래트 내 젬시타빈 약물동력학
Figure pct00141
-- = 샘플 없음; ND = 결정안됨
Int 1-4 Sprague-Dawley 래트 내 약물동력학
Figure pct00142
Int 1-4 은 혈장 내 '유리' 젬시타빈에 대한 더 높은 Cmax 및 AUC 값에 기초하여 래트 내에서 불 안정하다.
▶ 래트 혈장 젬시타빈 t½ ~ 9.43 h
j) In t 1-4 혈장 약물동력학
목적: 수컷 비글 개 내 10 mg/kg 및 20 mg/kg에서 Int 1-4의 단일 정맥내 주입 투여 이후 혈장 내 Int 1-4의 혈장 약물동력학 및 안정성 비교.
PK 측정: 10 및 20 mg/kg에서 Int 1-4에 대한 PK 파라미터 C0, CL, Vdss, Cmax, tmax, t½, AUC(0-t), AUC(0-inf), MRT(0-t), MRT(0-inf) 비교.
Figure pct00143
수컷 비글 개 내 Int 1-4 PK 파라미터
Figure pct00144
k) Int 1-4 대 젬시타빈의 개 혈장 PK 비교
목적: 수컷 비글 개 내 5 mg/kg 및 10 mg/kg에서 Int 1-4 대 5 mg/kg에서 젬시타빈의 단일 정맥내 주입 투여 이후 혈장 내 Int-4의 혈장 약물동력학 및 안정성 비교
PK 측정: 5 및 10 mg/kg에서 Int 1-4 대 5 mg/kg에서 젬시타빈에 대한 PK 파라미터 C0, CL, Vdss, Cmax, tmax, t½, AUC(0-t), AUC(0-inf), MRT(0-t), MRT(0-inf) 비교
Figure pct00145
수컷 비글 개 내 Int 1-4 PK 파라미터
Figure pct00146
수컷 비글 개 내 젬시타빈 약물동력학
Figure pct00147
실시예 7
a) 인간, 래트, 및 마우스 혈장 내 Int 1-4 및 화합물 1의 대사 안정성
인간 혈장 안정성 실험에서 시험 화합물의 반감기 값
방법: 96-웰 마이크로타이터 플레이트 내에서 어세이를 수행했다. 화합물을 37℃에서 0, 5, 15, 30, 및 45 분 동안 중복 (n=2)으로 배양했다. 반응 혼합물 (20 μL) 은 인간 혈장 내에 3 μM 시험 화합물의 최종 농도를 함유했다. 유카트로핀은 어세이 성능을 검증하기 위한 양성 대조구로서 포함되었다. 반감기 t ½ 값을 결정하기 위해 잔여 화합물 % 대 시간의 반-로그 선형 회귀를 사용했다. 혈장 반복 측정에 기초하여 Int 1-4는 인간 내에서 안정한 것으로 발견되었다
Figure pct00148
* 음의 값은 화합물이 안정함을 나타낸다
CD-1 마우스 혈장 안정성 실험에서 시험 화합물의 반감기 값
방법: 어세이를 96-웰 마이크로타이터 플레이트 내에서 수행한다. 화합물을 37℃에서 0, 5, 15, 30, 및 45 분 동안 이중 (n=2)으로 배양했다. 반응 혼합물 (20 μL)은 신선한 CD-1 마우스 혈장 내에 3 μM 최종 시험 농도 화합물을 함유했다. 유카트로핀은 어세이 성능을 검증하기 위해 양성 대조구로서 포함되었다. 반감기 t ½ 값을 결정하기 위해 남은 화합물% 대 시간의 반-로그 플롯의 선형 회귀를 사용했다. Int 1-4는 t ½ ~ 13 h으로 CD-1 마우스 혈장 내에서 안정했다.
Figure pct00149
래트 혈장 안정성 실험에서 시험 화합물의 반감기 값
방법: 어세이를 96-웰 마이크로타이터 플레이트 내에서 수행했다. 화합물을 37℃에서 0, 5, 15, 30, 및 45 분 동안 이중 (n=2)으로 배양했다. 반응 혼합물 (20 μL)은 신선한 Sprague Dawley 래트 혈장 내에 3 μM 최종 시험 농도 화합물을 함유했다. 유카트로핀은 어세이 성능을 검증하기 위해 양성 대조구이다. 반감기 t ½ 값을 결정하기 위해 남은 화합물% 대 시간의 반-로그 플롯의 선형 회귀를 사용했다. Int 1-4는 t ½ ~ 1.2 h로 Sprague Dawley 래트 혈장 내에서 덜 안정한 것으로 밝혀졌다.
Figure pct00150
마우스 혈장 안정성 실험에서 시험 화합물의 반감기 값
방법: 어세이를 96-웰 마이크로타이터 플레이트 내에서 수행했다. 화합물을 37℃에서 0, 5, 15, 30, 및 45 분 동안 이중 (n=2)으로 배양했다. 반응 혼합물 (20 μL)은 신선한 Sprague Dawley 래트 혈장 내에 3 μM 최종 시험 농도 화합물을 함유했다. 유카트로핀은 어세이 성능을 검증하기 위해 양성 대조구이다. 반감기 t ½ 값을 결정하기 위해 남은 화합물% 대 시간의 반-로그 플롯의 선형 회귀를 사용했다. 화합물 1 Int 1-4의 포스페이트 에스테르 TEA 염은 마우스 혈장 내에서 안정한 것으로 밝혀졌다.
Figure pct00151
* 음의 값은 화합물이 안정함을 나타낸다
실시예 8
인간 간 S9 안정성 실험에서 Int 1-4 의 반감기 및 고유 클리어런스 값
방법: 싸이토크롬 P450 (CYP450) 매개 상 I 산화, UDP- 글루쿠로노실트랜스퍼라제 (UGT) 매개 상 II 글루쿠론화, 및 대사를 통해 다른 경로 가령 알데히드 옥시다제 (AO)에 의한 시험 화합물의 대사 안정성의 인비트로 평가를 위해 간 S9 조직 분획을 사용했다. Int 1-4에 대한 고유 클리어런스 값은 인간 간 S9 내에서 2.22 uL/min/mg 단백질이었고, ~ 4 uL/min/mg 단백질보다 작은 것은 낮은 클리어런스 율로 간주되었다.
Figure pct00152
마우스 간 S9 안정성 실험에서 Int 1-4 의 반감기 및 고유 클리어런스 값
방법: 싸이토크롬 P450 (CYP450) 매개 상 I 산화, UDP- 글루쿠로노실트랜스퍼라제 (UGT) 매개 상 II 글루쿠론화, 및 대사를 통해 다른 경로 가령 알데히드 옥시다제 (AO)에 의한 시험 화합물의 대사 안정성의 인비트로 평가를 위해 간 S9 조직 분획을 사용했다. Int 1-4에 대한 고유 클리어런스 값은 마우스 간 S9 내에서 1.27 uL/min/mg 단백질이었고, ~ 4 uL/min/mg 단백질보다 작은 것은 낮은 클리어런스 율로 간주되었다. 마우스 간 S9 내 Int 1-4에 대한 CLint는 인비보 마우스 간 PK 연구와 일치한다.
Figure pct00153
원숭이 간 S9 안정성 실험에서 Int 1-4 의 반감기 및 고유 클리어런스 값
방법: 싸이토크롬 P450 (CYP450) 매개 상 I 산화, UDP- 글루쿠로노실트랜스퍼라제 (UGT) 매개 상 II 글루쿠론화, 및 대사를 통해 다른 경로 가령 알데히드 옥시다제 (AO)에 의한 시험 화합물의 대사 안정성의 인비트로 평가를 위해 간 S9 조직 분획을 사용했다. Int 1-4에 대한 고유 클리어런스 값은 마우스 간 S9 내에서 1.55 uL/min/mg 단백질이었고, ~ 4 uL/min/mg 단백질보다 작은 것은 낮은 클리어런스 율로 간주되었다. 원숭이 간 S9 내 Int 1-4에 대한 낮은 CLint는 인비보 원숭이 혈장 PK 데이터와 일치한다.
Figure pct00154
개 간 S9 안정성 실험에서의 반감기 및 고유 클리어런스 값
방법: 싸이토크롬 P450 (CYP450) 매개 상 I 산화, UDP- 글루쿠로노실트랜스퍼라제 (UGT) 매개 상 II 글루쿠론화, 및 대사를 통해 다른 경로 가령 알데히드 옥시다제 (AO)에 의한 시험 화합물의 대사 안정성의 인비트로 평가를 위해 간 S9 조직 분획을 사용했다. Int 1-4에 대한 고유 클리어런스 값은 마우스 간 S9 내에서 2.2 uL/min/mg 단백질이었고, ~ 4 uL/min/mg 단백질보다 작은 것은 낮은 클리어런스 율로 간주되었다. 개 간 S9 내 Int 1-4에 대한 CLint는 인간 간 S9에 대한 것과 유사하다.
Figure pct00155
래트 간 S9 안정성 실험에서 Int 1-4 의 반감기 및 고유 클리어런스 값
싸이토크롬 P450 (CYP450) 매개 상 I 산화, UDP- 글루쿠로노실트랜스퍼라제 (UGT) 매개 상 II 글루쿠론화, 및 대사를 통해 다른 경로 가령 알데히드 옥시다제 (AO)에 의한 시험 화합물의 대사 안정성의 인비트로 평가를 위해 간 S9 조직 분획을 사용했다. Int 1-4에 대한 고유 클리어런스 값은 래트 간 S9 내에서 14.3 uL/min/mg 단백질이었고, 보통으로 높은 클리어런스로 간주되었다.
Figure pct00156
인간 S9 안정성 데이터로부터 화합물을 낮은 또는 고 클리어런스로 카테고리화하기 위해 사용될 수 있는 분류 밴드:
Figure pct00157
Int 1-4는 인간, 마우스, 개, 및 원숭이에서 낮은 S9 고유 클리어런스 값 Clint < 2.5 mL/min/mg 단백질를 나타내지만 래트 Clint ~ 14 mL/min/mg 단백질에서 보통으로 높은 값을 나타낸다.종에 걸쳐 S9 고유 클리어런스 값은 Int 1-4에 대한 인비보 혈장/정상 조직 PK 안정성 연구와 일치한다.
실시예 9
인간, 개, 원숭이, 래트, 및 마우스 간 마이크로좀 내 Int 1-4 대사 안정성
Figure pct00158
분류 밴드는 대표적으로 화합물을 간 마이크로좀 내 저, 중 또는 고 클리어런스로 카테고리화하기 위해 사용했다:
Figure pct00159
Int 1-4는 인간 간 마이크로좀 내 안정적으로 보인다 CLint = 0.75 mL/min/mg 단백질. Int 1-4는 래트 간 마이크로좀 내 높은 클리어런스율을 가진다 CLint = 297 mL/min/mg 단백질
실시예 10
인간, 래트, 마우스, 개, 원숭이 간 간세포 내 Int 1-4 대사 안정성
Figure pct00160
Figure pct00161
* 음의 값은 화합물이 안정함을 나타낸다
화합물을 간 간세포 내 낮은 또는 고 클리어런스로 카테고리화하기 위해 분류 밴드를 대표적으로 사용했다:
Figure pct00162
Int 1-4는 종 간세포에 걸쳐 상대적으로 낮은 고유 클리어런스 값 Clint ~ 3 내지 8 mL/min/mg를 나타내고 래트는 가장 높은 클리어런스율이고 인간은 가장 낮다. 래트 간세포 내 젬시타빈 대사 안정성은 래트 혈장 PK 연구에서 긴 반감기 및 고 노출과 일치한다.
상기 개시물은 명료성 및 이해를 위해, 설명 및 예시로서 상세히 기술되었다. 본발명은 다양한 특이적 및 바람직한 구체예 및 기술을 참조하여 기술된다. 그러나, 본발명의 사상 및 범위 이내이면서 많은 변형 및 변조가 행해질 수 있음이 이해되어야 한다. 변형 및 변조가 첨부된 범위 이내에서 수행될 수 있음이 본업계에서의 숙련가에게 명백하다. 따라서, 상기 설명은 예시적이지 제한적으로 의도되지 않음이 이해되어야 한다. 따라서 본발명의 범위는 상기 설명을 참조하지 않고 결정되어야 하고 대신 다음 첨부된 청구범위를 그러한 청구범위와 동등물의 전체 범위와 함께 참조하여 결정되어야 한다.

Claims (25)

  1. 식 (I)의 화합물:
    Figure pct00163

    또는 그의 약학적으로 허용가능한 염, 에스테르, 용매화물, 또는 입체이성질체,
    여기서:
    -L-는 다음으로서 정의되고: -(C1-C5)알킬렌-O-C(O)-, -(C3-C5)알케닐렌-O-,
    Figure pct00164

    A는 -(C1-C5)알킬렌-O-C(O)-;
    E는 -O-, -O-C(O)N(H)-, -O-C(S)N(H)- 또는 -S- 또는 -S-C(O)N(H)-;
    D는 -(C1-C5)알킬렌- 또는 -(C3-C5)알케닐렌-;
    Y1는 C=C, 탄소 또는 질소, 여기서 Y1는 질소이면, Z1는 부재;
    각각의 Y4 및 Y5는 독립적으로 탄소 또는 질소, 여기서 Y3는 질소이면, Z3는 부재하고 Y4는 질소이면, Z5는 부재하고;
    Y2는 C 또는 N;
    Y5는 산소, 탄소, 질소 또는 황 원자, 여기서 Y5는 산소, 또는 황 원자일 때 Z6는 부재;
    각각의 Z1, 및 Z2는 존재하는 경우, 수소, 알킬, 알케닐, 알키닐, 아릴, 헤테로아릴, 아르알킬, 알킬옥시, 알케닐옥시, 알키닐옥시, 아릴옥시, 아르알킬옥시, 알킬티옥시, 알케닐티옥시, 알키닐티옥시, 아릴티옥시, 아르알킬티옥시, 아미노, 하이드록시, 티오, 할로, 카르복시, 포밀, 니트로 및 시아노로부터 독립적으로 선택되고, 여기서 각각의 알킬, 알케닐, 알키닐, 알콕시, 및 아릴 모이어티는 독립적으로 1-3 할로로 임의로 치환되고;
    Z3, Z4, 및 Z5는 각각 독립적으로 수소, 알킬, 중수소화 알킬, C1-6알콕시, 중수소화 C1-6알콕시, 알케닐, 알키닐, 아릴, 아르알킬, 알킬옥시, 알케닐옥시, 알키닐옥시, 아릴옥시, 아르알킬옥시, 알킬티옥시, 알케닐티옥시, 알키닐티옥시, 아릴티옥시, 아르알킬티옥시, 아미노, 하이드록시, 티오, 할로, 카르복시, 포밀, 니트로 및 시아노로부터 선택되고, 여기서 각각의 알킬, 알케닐, 알키닐, 알콕시, 및 아릴 모이어티는 독립적으로 1-3 할로로 임의로 치환되고;
    단 Z1, Z2 또는 Z4 중 적어도 하나는 H;
    Z6는 수소, 알킬, 알케닐, 알키닐, 아릴 및 아르알킬로부터 선택되고, 여기서 각각의 알킬, 알케닐, 알키닐, 알콕시, 및 아릴 모이어티는 독립적으로 1-3 할로로 임의로 치환되고;
    각각의 Z8는 독립적으로 수소, 비치환된 C1-C6 알킬, 치환된 C1-C6 알킬, 비치환된 C1-C6 알콕시, 비치환된 중수소화 C1-C6 알콕시, 치환된 C1-C6 알콕시, 및 치환된 중수소화 C1-C6 알콕시이고 여기서 치환된 알킬, 알콕시 및 중수소화 알콕시는 아미노, 모노- 또는 디-치환된 아미노, 시클릭 C1-C5 알킬아미노, 이미다졸릴, C1-C6 알킬피페라지닐, 모르폴리노, 티올, 티오에테르, 테트라졸, 카르복시산, 에스테르, 아미도, 모노- 또는 디-치환된 아미도, N-연결된 아미드, N-연결된 설폰아미드, 설폭시, 설포네이트, 설포닐, 설폭시, 설피네이트, 설피닐, 포스포노옥시, 포스페이트 또는 설폰아미드로부터 선택된 하나 이상의 기로 치환되고, 여기서 각각의 알킬, 알케닐, 알키닐, 알콕시, 및 아릴은 1-3 할로로 임의로 치환됨.
  2. 제 1항에 있어서, Y3 및 Y4는 각각 탄소인 화합물 또는 그의 약학적으로 허용가능한 염, 에스테르, 아미드, 용매화물, 또는 입체이성질체.
  3. 상기 항 중 어느 한 항에 있어서, Z3, Z4 및 Z5는 각각 할로, 비치환된 C1-C3 알킬, 치환된 C1-C3 알킬, 비치환된 C1-C3 알콕시, 치환된 C1-C3 알콕시, 비치환된 중수소화 C1-C3 알콕시, 또는 치환된 C1-C3 알콕시로부터 선택되고, 여기서 각각의 알킬 및 알콕시 모이어티는 1-3 할로로 독립적으로 치환될 수 있는 화합물 또는 그의 약학적으로 허용가능한 염, 에스테르, 아미드, 용매화물, 또는 입체이성질체.
  4. 상기 항 중 어느 한 항에 있어서, Z3, Z4 및 Z5는 각각 브로모, 클로로, 플루오로, 메틸, 1-3 할로로 임의로 치환된 중수소화 메틸, 1-3 할로로 임의로 치환된 메톡시, 또는 중수소화 메톡시로부터 선택되는 화합물 또는 그의 약학적으로 허용가능한 염, 에스테르, 아미드, 용매화물, 또는 입체이성질체.
  5. 상기 항 중 어느 한 항에 있어서 식 (Ia):
    Figure pct00165
    .
    를 갖는 화합물 또는 그의 약학적으로 허용가능한 염, 에스테르, 아미드, 용매화물, 또는 입체이성질체,
    여기서 L, Y1, Y2, Y5, Z3, Z4, Z5, 및 Z6는 각각 제 1-4항 중 어느 한 항에서 정의된 바와 같고, 이펙터는 (i) 젬시타빈의 인산 유도체, 또는 (ii) 젬시타빈의 인산 유도체의 염 형태의 일부임.
  6. 상기 항 중 어느 한 항에 있어서 식 (Ib-i), (Ib-ii), (Ib-iii), (Ib-iv), (Ib-v), (Ib-vi), (Ib-vii), (Ib-viii), (Ib-ix), (Ib-x), (Ib-xi), (Ib-xii), (Ib-xiii), (Ib-xiv), (Ib-xv), (Ib-xvi), (Ib-xvii), 또는 (Ib-xviii):
    Figure pct00166

    Figure pct00167

    Figure pct00168

    를 갖는 화합물 또는 상기 식 중 어느 하나의 약학적으로 허용가능한 염, 에스테르, 아미드, 용매화물, 또는 입체이성질체, 여기서:
    Z3 및 Z5는 각각 독립적으로 할로, 1-3 할로로 임의로 치환된 메틸, 1-3 할로로 임의로 치환된 메톡시 또는 중수소화 메톡시;
    Z4는, 존재할 때, 할로, 1-3 할로로 임의로 치환된 메틸, 1-3 할로로 임의로 치환된 메톡시 또는 중수소화 메톡시이고;
    -L-이펙터는: -(C1-C3)알킬렌-O-C(O)-이펙터,
    Figure pct00169

    D는 -(C1-C3)알킬렌-;
    E는 -O-, -O-C(O)N(H)-, -O-C(S)N(H)-, -S- 또는 -S-C(O)N(H)-;
    A는 -(C1-C3)알킬렌-O-C(O)-; 및
    이펙터는 (i) 젬시타빈의 인산 유도체, 또는 (ii) 젬시타빈의 인산 유도체의 염 형태의 일부임.
  7. 상기 항 중 어느 한 항에 있어서, 링커 영역 (L) 은
    -C(H)2-O-C(O)-인 화합물 또는 그의 약학적으로 허용가능한 염, 에스테르, 아미드, 용매화물, 또는 입체이성질체.
  8. 제1 항에 있어서 식 (Id-i), (Id-ii), (Icd-iii), (Id-iv), (Id-v), (Id-vi), (Id-vii), (Id-viii), (Id-ix), (Id-x), (Id-xi), (Id-xii), (Id-xiii), (Id-xiv), (Id-xv), (Id-xvi), (Id-xvii), (Id-xviii), (Id-xix), 또는 (Id-xx):
    Figure pct00170

    Figure pct00171

    를 갖는 화합물 또는 상기 식 중 어느 하나의 약학적으로 허용가능한 염, 에스테르, 아미드, 용매화물, 또는 입체이성질체, 여기서:
    Z3, Z4, 및 Z5는 각각 독립적으로 1-3 할로로 임의로 치환된 메틸, 할로, 1-3 할로로 임의로 치환된 메톡시 또는 중수소화 메톡시; 및
    M2는 -O- Na+, -O- Et3NH+, -O- K+, -O- NH4 +임.
  9. 상기 항 중 어느 한 항에 있어서, Z3, Z5 및 Z4는, 존재할 때, 각각 1-3 할로로 임의로 치환된 메톡시 또는 중수소화 메톡시인 화합물 또는 그의 약학적으로 허용가능한 염, 에스테르, 아미드, 용매화물, 또는 입체이성질체.
  10. 상기 항 중 어느 한 항에 있어서, Z3 및 Z5는 각각 독립적으로 브로모 또는 플루오로, 및 Z4는, 존재할 때, 1-3 할로로 임의로 치환된 메톡시, 또는 중수소화 메톡시인 화합물 또는 그의 약학적으로 허용가능한 염, 에스테르, 아미드, 용매화물, 또는 입체이성질체.
  11. 상기 항 중 어느 한 항에 있어서, 화합물은 그의 소듐 포스페이트 또는 트리에틸암모늄 포스페이트 염 형태인 화합물 또는 그의 약학적으로 허용가능한 염, 에스테르, 아미드, 용매화물, 또는 입체이성질체.
  12. 제 1항에 있어서 다음 구조 중 하나를 갖는 화합물:
    Figure pct00172

    Figure pct00173

    또는 화합물 1-9 중 임의의 하나의 약학적으로 허용가능한 염, 에스테르, 아미드, 용매화물, 또는 입체이성질체.
  13. 제 1항에 있어서, 식 (Id-ii-1)
    Figure pct00174

    를 갖는 화합물 또는 그의 약학적으로 허용가능한 염, 에스테르, 아미드, 용매화물, 또는 입체이성질체
    여기서:
    Z3, Z4, 및 Z5는 각각 독립적으로 수소, 1-3 할로로 임의로 치환된 메틸, 할로, 1-3 할로로 임의로 치환된 메톡시 또는 중수소화 메톡시; 및
    각각의 M2는 OH 및 O- (M1)로 이루어진 그룹으로부터 독립적으로 선택되고, 여기서 (M1)은 각각의 경우에서 독립적으로 금속 양이온, 암모늄, 알킬 암모늄 양이온, 또는 아미노 산 양이온임.
  14. 제 13항에 있어서, (M1)는 Na+, Ca2+, K+, Mg2+, Zn2+, NH4+, (HNEt3)+, 메글루민-H+, 트로메타민-H+, 디에탄올아민-H+, 라이신-H+, 및 아르기닌-H+로 이루어진 그룹으로부터 선택되는 화합물.
  15. 제 13-14항 중 어느 한 항에 있어서, 각각의 Z5 및 Z3는 독립적으로 메톡시인 화합물.
  16. 제 13-15항 중 어느 한 항에 있어서, Z4는 수소인 화합물.
  17. 화합물 제 13-16 항 중 어느 한 항에 있어서, 화합물은:
    Figure pct00175

    또는 그의 약학적으로 허용가능한 염, 에스테르, 아미드, 용매화물, 또는 입체이성질체인 화합물 또는 그의 약학적으로 허용가능한 염, 에스테르, 아미드, 용매화물, 또는 입체이성질체.
  18. 약학적으로 허용가능한 담체와 함께 상기 항 중 어느 한 항의 화합물, 또는 그의 약학적으로 허용가능한 담체와 함께 상기 항 중 어느 한 항의 화합물의 약학적으로 허용가능한 염, 에스테르, 아미드 또는 용매화물을 포함하는 조성물.
  19. 의약에서의 사용을 위한 제 1 내지 17항 중 어느 한 항에서 정의된 바와 같은 화합물, 또는 약학적으로 허용가능한 염, 에스테르, 아미드 또는 용매화물.
  20. 증식성 병태의 치료 또는 예방 방법에서의 사용을 위한, 제 1 내지 17항 중 어느 한 항에서 정의된 바와 같은 화합물, 또는 약학적으로 허용가능한 염, 에스테르, 아미드 또는 용매화물.
  21. 제 20항의 치료 또는 예방방법에서의 사용을 위한 화합물, 또는 약학적으로 허용가능한 염, 에스테르, 아미드 또는 용매화물, 여기서 증식성 병태는 방광, 뇌, 유방, 결장, 두경부, 신장, 폐, 간, 난소, 췌장, 전립선 또는 피부 암으로부터 선택되는 암임.
  22. 증식성 병태의 치료 또는 예방방법에서의 사용을 위한 약제의 제조를 위한, 제 1 내지 21항 중 어느 한 항에서 정의된 바와 같은 화합물, 또는 약학적으로 허용가능한 염, 에스테르, 아미드 또는 용매화물의 용도.
  23. 다음을 포함하는 CYP1B1 효소를 발현시키는 종양 세포의 존재에 대한 환자 진단 방법: (a) 제 1-21항 중 어느 한 항에 따르는 특정의 화합물을 환자에게 투여하는 단계, (b) 이후 생성된 상응하는 하이드록실화 대사체의 양을 결정하는 단계; 및, (c) 그 양을 환자 내 종양 세포의 존재 또는 부재와 상호비교하는 단계.
  24. (1) 환자 내 종양 존재를 확인하고; 및 (2) 1-21제 항 중 어느 한 항에 따르는 화합물, 또는 그의약학적으로 허용가능한 염, 에스테르, 아미드 또는 용매화물의 치료적으로 또는 예방적으로 유용한 양을 투여함에 의해 치료를 필요로 한다고 확인된 환자를 치료하는 방법.
  25. 증식성 병태를 치료하는 방법, 상기 방법은, 이를 필요로 하는 대상에게 치료적으로 유용한 양의 제1-21 항 중 어느 한 항의 화합물, 또는 그의 약학적으로 허용가능한 염, 에스테르, 아미드 또는 용매화물을 투여하는 단계를 포함함.
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