KR20190129968A - 기생충성 질환의 치료를 위한 화합물 및 방법 - Google Patents

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Abstract

다양한 기생충성 질환의 치료에 유용한 화합물이 본원에 제공된다. 이들 화합물, 뿐만 아니라 그의 제약상 허용되는 염은 제약 조성물, 수의학적 조성물로 제제화될 수 있고, 말라리아 및 크립토스포리디움증을 비롯한 기생충에 의해 확산된 질환을 치료 및/또는 예방하는 방법에 사용될 수 있다.

Description

기생충성 질환의 치료를 위한 화합물 및 방법
관련 출원에 대한 상호 참조
본 출원은 2017년 3월 20일에 출원된 미국 가출원 일련 번호 62/473,771에 대한 우선권을 주장하며, 그 내용은 그의 전문이 본원에 참조로 포함된다.
말라리아는 원충 기생충에 의해 유발되는 매개체-매개 감염성 질환이고, 아메리카, 아시아 및 아프리카의 일부를 비롯한 열대 및 아열대 지방에서 만연한다. 인간을 감염시킬 수 있는 5종의 플라스모디움(Plasmodium) 기생충 종 (피. 팔시파룸(P. falciparum), 피. 비박스(P. vivax), 피. 오발레(P. ovale), 피. 말라리아에(P. malariae), 및 피. 크노우레시(P. knowlesi)) 중, 질환의 가장 심각한 형태는 피. 팔시파룸(P. falciparum) 및 피. 비박스(P. vivax)에 의해 유발된다. 추가적으로, 여러 플라스모디움(Plasmodium) 기생충 종은 인간 이외의 포유동물을 감염시킨다. 예를 들어, 피. 베르게이(P. berghei), 피. 샤바우디(P. chabaudi), 피. 빈케이(P. vinckei) 및 피. 요엘리이(P. yoelii)가 특정 설치류에서 말라리아를 유발시킬 수 있다.
대략 5억 1천 5백만명의 사람들이 매년 말라리아에 시달리고, 이들 사람들 중 1 내지 3백만명이 이 질환으로 사망한다. 대부분의 현행 항말라리아 약물은 기생충이 적혈구 내부에 살아있는 복제되는 무성 혈액 단계를 표적화한다. 간- 및 전파-단계 기생충이 말라리아 증상을 유발하지는 않지만, 예방 및 전파-차단 약물은 질환의 유행을 사전에 예방하고, 취약한 집단을 보호하는데 필수적이다. 현행 의료수단의 승인된 항말라리아 약물 예컨대 클로로퀸, 아토바쿠온, 피리메타민 및 술파독신은 인간 말라리아 기생충 내의 몇몇 표적에 단지 국한되어 있고, 현행 약물에 대해 광범위한 내성의 성장은 신규 생물학적 표적을 갖는 신규 항말라리아제의 개발을 촉발시킨다.
크립토스포리디움증은 또 다른 기생충성 질환이고, 정단복합체충문의 원충 기생충의 속인 크립토스포리디움(Cryptosporidium)에 의해 유발된다. 크립토스포리디움증은 가장 흔히 세포내 정단복합체충문 기생충인 씨. 파르붐(C. parvum) 및 씨. 호미니스(C. hominis)에 의해 유발된다. 이는 또한 씨. 카니스(C. canis), 씨. 펠리스(C. felis), 씨. 멜레아그리디스(C. meleagridis) 및 씨. 무리스(C. muris)에 의해 유발될 수 있다. 크립토스포리디움증은 원위 소장에 영향을 미치고, 면역적격 개체 및 면역손상 개체 둘 다에서 기도에 영향을 미칠 수 있다. 크립토스포리디움증은 가장 흔한 수인성 질환 중 하나이고, 전세계에서 발견된다. 이는 또한 소, 양, 돼지, 말, 염소, 및 도마뱀붙이를 비롯한 다른 동물로 전염될 수 있다. 니타족사니드는 크립토스포리디움증을 위한 현행 표준 관리이지만, 이 약물은 오직 소아에서 부분적 효능을 나타내고, AIDS를 앓는 환자에서는 위약보다 더 효과적이지는 않다.
화합물, 제약 조성물, 및 상기 또는 본원의 다른 곳에 기재된 화합물을 포함/사용하여 말라리아 및 크립토스포리디움(Cryptosporidium)을 비롯한 기생충성 질환을 치료하거나 또는 예방하는 방법이 본원에 기재된다.
일부 실시양태에서, 이들 제약 조성물은 인간 이외의 대상체에 사용하기 위한 수의학적 조성물로서 제제화된다.
화합물은 화학식 (I)의 구조 또는 그의 제약상 허용되는 염을 가질 수 있다.
Figure pct00001
여기서 "파선" 결합은 단일 또는 이중 결합일 수 있고;
R1은 임의로 치환된 아릴 또는 헤테로아릴이고;
R2는 임의로 치환된 알콕시, 시클로알콕시 또는 헤테로시클릴이고;
R3은 수소, 또는 -CH2-X이고;
R4 및 R5는 독립적으로 수소, -X, 또는 -CH2-X이고, R4 및 R5는 함께 5- 또는 6-원 융합된 고리를 형성할 수 있고, R4 및 R5 중 적어도 1개는 수소가 아니고;
R6 및 R7은 독립적으로 수소 또는 R이고;
z1-z8은 독립적으로 각 경우에 CH 또는 N으로부터 선택되고; 여기서
-X는 독립적으로 각 경우에 -OH, -OR, -S(O)R, -S(O)2R, -N(R)-S(O)2R, -S(O)2-N(R)(R), -S(O)2-NHR, -N(R)-C(O)-R 또는 -N(R)(R)로부터 선택되고;
R은 독립적으로 각 경우에 임의로 치환된 C1-C12 알킬이다. -X는 독립적으로 각 경우에 -OH, -NH2 또는 -N(R)(R)로부터 선택될 수 있다. 일부 실시양태에서, R4 및/또는 R5 내의 -X 기 (R4 및/또는 R5가 -CH2-X인 경우의 -X 기를 포함)는 -OH, NH2, 또는 -N(R)(R)로부터 선택될 수 있다. 또한, R은 독립적으로 각 경우에 C1-4 선형 또는 분지형 탄화수소로부터 선택될 수 있다.
일부 실시양태에서, R6 및 R7은 각각 수소이다. 일부 실시양태에서, R4 및 R5는 -X 또는 -CH2-X (예를 들어, R4는 -OH이고, R5는 -OH이거나, R4는 -NH2이고, R5는 -NH2이거나, R4는 -OCH3이고, R5는 -OCH3임 등)로부터 선택된 동일한 관능기일 수 있다. 다른 실시양태에서, R5는 수소이고, R4는 -X, 또는 -(CH2)-X이다. 다른 실시양태에서, R4는 수소이고 R5는 -X, 또는 -(CH2)-X이다. 일부 실시양태에서, R4 및 R5는 독립적으로 -OH 및 -OR로부터 선택되고, R4 및 R5는 함께 6-원 융합된 고리를 형성한다. 일부 실시양태에서, R6은 C1-4 선형 또는 분지형 탄화수소이다. 다른 실시양태에서, R6은 수소이다. R1은 임의로 치환된 C6 아릴 또는 헤테로아릴 (예를 들어, 페닐, 플루오로페닐, 디플루오로페닐, 피리딜 등)일 수 있다. 일부 실시양태에서, R2는 C1-4 선형 또는 분지형 알콕시 (예를 들어, 메톡시, 에톡시, 프로폭시, 이소프로폭시 등)이다. 일부 실시양태에서, R2는 1개 이상의 F로 치환된 C1-4 선형 또는 분지형 알콕시 (예를 들어, -OCF3, -OCHF2, 또는 -OCH2F)이다. 다른 실시양태에서, R2는 C3-6 헤테로시클릴 (예를 들어, 아지리디닐, 옥시라닐, 티이라닐, 옥세타닐, 아제티디닐, 티에타닐, 디아제티디닐, 디옥세타닐, 디티에타닐, 피롤리디닐, 테트라히드로푸라닐, 이미다졸릴, 피라졸릴, 옥사졸릴 등)이다. 바람직한 실시양태에서, R2는 옥세타닐 또는 아제티디닐이다. 다른 실시양태에서, R2는 C3-6 시클로알콕시 (예를 들어, 시클로프로폭시)이다. 일부 실시양태에서, R3은 -CH2-X이고, -X는 N(R)(R)이다.
각각의 z1-z8은 CH일 수 있다. 일부 실시양태에서, z1-z4 중 1개는 N이고, 나머지는 CH이다. 일부 실시양태에서, z5-z8 중 1개는 N이고, 나머지는 CH이다. 일부 실시양태에서, z1 및 z4는 각각 N이고, z3 및 z2는 각각 CH이다. 일부 실시양태에서, z5 및 z7은 각각 N이고, z6 및 z8은 각각 CH이다.
화학식 (I)의 구조 중 임의의 입체중심은 어떠한 배위도 존재할 수 있거나, 또는 각각의 입체중심 (예를 들어, 입체이성질체, 부분입체이성질체 등)의 라세미 혼합물로 존재할 수 있다. 일부 실시양태에서, 화합물은 화학식 (II)의 구조를 갖는다.
Figure pct00002
일부 실시양태에서, 화합물은 화학식 (IIb)의 구조를 갖는다.
Figure pct00003
다른 실시양태에서, 화합물은 화학식 (IIa)의 구조를 갖는다.
Figure pct00004
화합물은 또한 화학식 (III)의 구조를 가질 수 있다.
Figure pct00005
여기서 "파선" 결합은 단일 또는 이중 결합일 수 있고;
R1은 임의로 치환된 아릴 또는 헤테로아릴이고;
R2는 임의로 치환된 알콕시, 시클로알콕시 또는 헤테로시클릴이고;
R3은 수소 또는 -CH2-X이고;
R6 및 R7은 독립적으로 수소 또는 R이고;
z1-z8은 독립적으로 각 경우에 CH 또는 N으로부터 선택되고; 여기서
-X는 독립적으로 각 경우에 -OH, -OR, -S(O)R, -S(O)2R, -N(R)-S(O)2R, -S(O)2-N(R)(R), -S(O)2-NHR, -N(R)-C(O)-R 또는 -N(R)(R)로부터 선택되고;
R은 독립적으로 각 경우에 C1-C12 알킬이고;
단 R6이 수소인 경우, R3은 -CH2-N(R)(R)이고, 상기 "파선" 결합은 이중 결합이다. 일부 실시양태에서, "파선 결합"은 이중 결합이다. 다른 실시양태에서, "파선" 결합은 단일 결합이다. -X는 독립적으로 각 경우에 -OH, -NH2 또는 -N(R)(R)로부터 선택될 수 있다. 또한, R은 독립적으로 각 경우에 C1-4 선형 또는 분지형 탄화수소로부터 선택될 수 있다.
각각의 z1-z8은 CH일 수 있다. 일부 실시양태에서, z1-z4 중 1개는 N이고, 나머지는 CH이다. 일부 실시양태에서, z5-z8 중 1개는 N이고, 나머지는 CH이다. 일부 실시양태에서, z1 및 z4는 각각 N이고, z3 및 z2는 각각 CH이다. 일부 실시양태에서, z5 및 z7은 각각 N이고, z6 및 z8은 각각 CH이다.
일부 실시양태에서, R6 및 R7은 각각 수소이다. 일부 실시양태에서, R6은 저급 알킬 (예를 들어, 메틸, 에틸 등)이다. 일부 실시양태에서, R6은 C1-4 선형 또는 분지형 탄화수소이다. 다른 실시양태에서, R6은 수소이다. R1은 임의로 치환된 C6 아릴 또는 헤테로아릴 (예를 들어, 페닐, 플루오로페닐, 디플루오로페닐, 피리딜 등)일 수 있다. 일부 실시양태에서, R2는 C1-4 선형 또는 분지형 알콕시 (예를 들어, 메톡시, 에톡시, 프로폭시, 이소프로폭시 등)이다. 일부 실시양태에서, R2는 1개 이상의 F로 치환된 C1-4 선형 또는 분지형 알콕시 (예를 들어, -OCF3, -OCHF2, 또는 -OCH2F)이다. 다른 실시양태에서, R2는 C3-6 헤테로시클릴 (예를 들어, 아지리디닐, 옥시라닐, 티이라닐, 옥세타닐, 아제티디닐, 티에타닐, 디아제티디닐, 디옥세타닐, 디티에타닐, 피롤리디닐, 테트라히드로푸라닐, 이미다졸릴, 피라졸릴, 옥사졸릴 등)이다. 바람직한 실시양태에서, R2는 옥세타닐 또는 아제티디닐이다. 다른 실시양태에서, R2는 C3-6 시클로알콕시 (예를 들어, 시클로프로폭시)이다.
일부 실시양태에서, 화합물은 화학식 (IV)의 구조를 가질 수 있다.
Figure pct00006
일부 실시양태에서, 화합물은 화합물 E1-E38 중 임의의 것 또는 그의 제약상 허용되는 염이다.
상기 기재된 화합물 중 임의의 것은 제약 조성물로 사용될 수 있다. 일부 실시양태에서, 제약 조성물은 제약상 허용되는 부형제 및 화학식 (I)의 구조를 갖는 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염을 포함할 수 있다.
Figure pct00007
여기서 "파선" 결합은 단일 또는 이중 결합일 수 있고;
R1은 임의로 치환된 아릴 또는 헤테로아릴이고;
R2는 임의로 치환된 알콕시, 시클로알콕시 또는 헤테로시클릴이고;
R3은 수소, 또는 -CH2-X이고;
R4 및 R5는 독립적으로 수소, -X, 또는 -CH2-X이고, R4 및 R5는 함께 5- 또는 6-원 융합된 고리를 형성할 수 있고, R4 및 R5 중 적어도 1개는 수소가 아니고;
R6 및 R7은 독립적으로 수소 또는 R이고;
z1-z8은 독립적으로 각 경우에 CH 또는 N으로부터 선택되고; 여기서
-X는 독립적으로 각 경우에 -OH, -OR, -S(O)R, -S(O)2R, -N(R)-S(O)2R, -S(O)2-N(R)(R), -S(O)2-NHR, -N(R)-C(O)-R 또는 -N(R)(R)로부터 선택되고;
R은 독립적으로 각 경우에 임의로 치환된 C1-C12 알킬이다. -X는 독립적으로 각 경우에 -OH, -NH2 또는 -N(R)(R)로부터 선택될 수 있다. 일부 실시양태에서, R4 및/또는 R5 내의 -X 기 (R4 및/또는 R5이 -CH2-X인 경우의 -X 기를 포함)는 -OH, NH2, 또는 -N(R)(R)로부터 선택될 수 있다. 또한, R은 독립적으로 각 경우에 C1-4 선형 또는 분지형 탄화수소로부터 선택될 수 있다.
일부 실시양태에서, 제약 조성물은 제약상 허용되는 부형제 및 화학식 (III)의 구조를 갖는 화합물을 포함할 수 있다.
Figure pct00008
여기서 "파선" 결합은 단일 또는 이중 결합일 수 있고;
R1은 임의로 치환된 아릴 또는 헤테로아릴이고;
R2는 임의로 치환된 알콕시, 시클로알콕시 또는 헤테로시클릴이고;
R3은 수소 또는 -CH2-X이고;
R6 및 R7은 독립적으로 수소 또는 R이고;
z1-z8은 독립적으로 각 경우에 CH 또는 N으로부터 선택되고; 여기서
-X는 독립적으로 각 경우에 -OH, -OR, -S(O)R, -S(O)2R, -N(R)-S(O)2R, -S(O)2-N(R)(R), -S(O)2-NHR, -N(R)-C(O)-R 또는 -N(R)(R)로부터 선택되고;
R은 독립적으로 각 경우에 C1-C12 알킬이고;
단 R6이 수소인 경우, R3은 -CH2-N(R)(R)이고, 상기 "파선" 결합은 이중 결합이다. 일부 실시양태에서, "파선 결합"은 이중 결합이다. 다른 실시양태에서, "파선" 결합은 단일 결합이다. -X는 독립적으로 각 경우에 -OH, -NH2 또는 -N(R)(R)로부터 선택될 수 있다. 또한, R은 독립적으로 각 경우에 C1-4 선형 또는 분지형 탄화수소로부터 선택될 수 있다. 일부 실시양태에서, 화합물은 제약 조성물에 유효량으로 존재한다. 예를 들어, 화합물은 말라리아의 치료 또는 예방을 위한 유효량으로 존재할 수 있다. 일부 실시양태에서, 화합물은 속 크립토스포리디움 (Cryptosporidium)으로부터의 기생충에 의해 유발된 질환 (예를 들어, 크립토스포리디움증)을 치료 또는 예방하기 위한 유효량으로 존재할 수 있다. 일부 실시양태에서, 제약 조성물은 말라리아 및 크립토스포리디움증의 치료를 위해 제제화될 수 있다.
대상체에서 질환의 치료 또는 예방의 관련 방법이 또한 기재된다. 일부 실시양태에서, 대상체에서의 기생충성 질환의 치료 또는 예방 방법은 대상체에게 유효량의 본원에 기재된 임의의 화합물을 투여하는 단계를 포함한다. 일부 실시양태에서, 유효량의 화합물은 제약 조성물 (예를 들어, 수의학적 조성물 등)은 제제화된다.
기생충성 질환은 말라리아일 수 있다. 일부 실시양태에서, 말라리아는 약물 내성 말라리아 (예를 들어, 클로로퀸, 퀴닌, 피리메타민, 술파독신, 메플로퀸, 아르테메터, 루메판트린, 아르테수네이트, 아모디아퀸, 디히드로아르테미시닌, 피페라퀸, 프로구아닐, 독시시클린, 클린다마이신, 아르테미시닌, 아토바쿠온 또는 그의 임의의 조합물 등에 내성인 말라리아)이다. 일부 실시양태에서, 말라리아는 혈액 단계 말라리아이다. 일부 실시양태에서, 말라리아는 전파 단계 말라리아이다. 일부 실시양태에서, 말라리아는 간 단계 말라리아이다. 일부 실시양태에서, 대상체는 말라리아-유발 기생충에 의해 감염되고, 상기 치료는 그의 간으로부터 상기 감염의 확산을 방지한다. 일부 실시양태에서, 말라리아는 피. 팔시파룸(P. falciparum), 피. 비박스(P. vivax), 피. 오발레(P. ovale), 피. 말라리아에(P. malariae), 피. 크노우레시(P. knowlesi), 피. 베르게이(P. berghei), 피. 샤바우디(P. chabaudi), 피. 빈케이(P. vinckei) 또는 피. 요엘리이(P. yoelii)로부터 선택된 모기 종에서 이동된다. 바람직한 실시양태에서, 모기 종은 (특히 대상체가 인간인 경우에) 피. 팔시파룸(P. falciparum)이다.
기생충성 질환은 크립토스포리디움증일 수 있다. 일부 실시양태에서, 크립토스포리디움증은 씨. 파르붐(C. parvum)에 의해 이동된다.
일부 실시양태에서, 대상체는 인간이다. 다른 실시양태에서, 대상체는 인간이 아니다 (예를 들어, 제약 조성물은 수의학적 조성물로서 제제화됨). 일부 실시양태에서, 대상체는 마우스, 래트, 토끼, 비-인간 영장류, 도마뱀, 도마뱀붙이, 소, 송아지, 양, 새끼양, 말, 망아지, 돼지 또는 새끼돼지다.
이들 및 다른 본 발명의 측면은 하기 상세한 설명으로부터 관련 기술분야의 통상의 기술자에게 명백할 것이고, 이는 간단하게 예시로서, 다양한 방식이 본 발명을 수행하기 위해 고려된다. 실현될 것인 바와 같이, 본 발명은 본 발명을 벗어나지 않으면서 추가의 상이하고 명백한 측면 모두를 가능하게 한다. 따라서, 명세서는 사실상 예시적이며 제한적이지 않다.
정의
본원에 사용된 용어는 특정한 실시양태를 기술하려는 목적을 위한 것이고 제한하려는 것이 아닌 것으로 이해된다. 본원에 기재된 것과 유사하거나 동등한 임의의 방법 및 물질이 본 개시내용의 실시 또는 시험에 사용될 수 있지만, 바람직한 방법 및 물질이 이제 기재된다.
본원에 사용된 용어 "아실"은 본원에 정의된 바와 같은 카르보닐 기를 통해 모 분자 기에 부착된 수소 또는 본원에 정의된 바와 같은 알킬 기를 나타내고, 포르밀 (즉, 카르복시알데히드 기), 아세틸, 트리플루오로아세틸, 프로피오닐 및 부타노일에 의해 예시된다. 예시적인 비치환된 아실 기는 1 내지 6, 1 내지 11, 또는 1 내지 21개의 탄소를 포함한다. 일부 실시양태에서, 알킬 기는 본원에 기재된 바와 같이 1, 2, 3 또는 4개의 치환기로 추가로 치환된다.
본원에 사용된 용어 "알킬"은, 단독으로 또는 다른 기와 조합하여, 1 내지 20개의 탄소 원자 (예를 들어, 1 내지 16개의 탄소 원자, 1 내지 12개의 탄소 원자, 1 내지 10개의 탄소 원자 또는 1 내지 6개의 탄소 원자 등)의 분지형 또는 직쇄 1가 포화 지방족 탄화수소 라디칼을 지칭한다.
본원에 사용된 용어 "알킬렌"은 2개의 수소 원자의 제거에 의해 직쇄 또는 분지쇄 포화 탄화수소로부터 유도된 포화 2가 탄화수소 기를 나타내고, 메틸렌, 에틸렌 및 이소프로필렌으로 예시된다. 일부 실시양태에서, 알킬렌은 알킬 기에 대해 본원에 정의된 바와 같이 1, 2, 3 또는 4개의 치환기로 추가로 치환될 수 있다.
본원에 사용된 용어 "알케닐"은, 단독으로 또는 다른 기와 조합하여, 올레핀계 결합을 갖는 직쇄 또는 분지형 탄화수소 잔기를 지칭한다.
본원에 사용된 용어 "아미노"는 -N(RN1)2를 나타내며, 여기서 각각의 RN1은 독립적으로 H, OH, NO2, N(RN2)2, SO2ORN2, SO2RN2, SORN2, N-보호기, 알킬, 알케닐, 알키닐, 알콕시, 아릴, 알크아릴, 시클로알킬, 알크시클로알킬, 카르복시알킬 (예를 들어, O-보호기로 임의로 치환된 것, 예컨대 임의로 치환된 아릴알콕시카르보닐 기 또는 본원에 기재된 임의의 것), 술포알킬, 아실 (예를 들어, 아세틸, 트리플루오로아세틸, 또는 본원에 기재된 다른 것), 알콕시카르보닐알킬 (예를 들어, O-보호기로 임의로 치환된 것, 예컨대 임의로 치환된 아릴알콕시카르보닐 기 또는 본원에 기재된 임의의 것), 헤테로시클릴 (예를 들어, 헤테로아릴), 또는 헤테로시클릴알킬 (예를 들어, 헤테로아릴알킬)이고, 이들의 언급된 RN1 기 중 각각은 각각의 기에 대해 본원에 정의된 바와 같이 임의로 치환될 수 있거나; 또는 2개의 RN1이 조합되어 헤테로시클릴 또는 N-보호 기를 형성하고, 여기서 각각의 RN2는 독립적으로 H, 알킬 또는 아릴이다. 아미노 기는 비치환된 아미노 (즉, -NH2) 또는 치환된 아미노 (즉 -N(RN1)2)일 수 있다. 바람직한 실시양태에서, 아미노는 -NH2 또는 -NHRN1이고, 여기서 RN1은 독립적으로 OH, NO2, NH2, NRN2 2, SO2ORN2, SO2RN2, SORN2, 알킬, 카르복시알킬, 술포알킬, 아실 (예를 들어, 아세틸, 트리플루오로아세틸, 또는 본원에 기재된 다른 것), 알콕시카르보닐알킬 (예를 들어, t-부톡시카르보닐알킬) 또는 아릴이고, 각각의 RN2는 H, C1-20 알킬 (예를 들어, C1-6 알킬) 또는 C6-10 아릴일 수 있다.
용어 "아릴"은 적어도 1개의 방향족 고리를 갖는 6 내지 12개의 탄소 원자의 방향족 모노- 또는 폴리시클릭 라디칼을 지칭한다. 이러한 기의 예는 페닐, 나프틸, 1,2,3,4-테트라히드로나프탈릴, 1,2-디히드로나프탈릴, 인다닐 및 1H-인데닐을 포함하나, 이에 제한되지는 않는다.
본원에 사용된 바와 같은 "아릴알킬" 기는 본원에 정의된 바와 같이, 알킬렌 기를 통해 모 분자 기에 부착된 본원에 정의된 바와 같은 아릴 기를 나타낸다. 예시적인 비치환된 아릴알킬 기는 7 내지 30개의 탄소 (예를 들어, 7 내지 16개 또는 7 내지 20개의 탄소, 예컨대 C6-10 아릴 C1-6 알킬, C6-10 아릴 C1-10 알킬, 또는 C6-10 아릴 C1-20 알킬)이다. 일부 실시양태에서, 알킬렌 및 아릴은 각각의 기에 대해 본원에 정의된 바와 같은 1, 2, 3 또는 4개의 치환기로 추가로 치환될 수 있다.
알킬, 카르보시클릭 및 아릴 기는 치환 또는 비치환될 수 있다. 치환되는 경우, 일반적으로 예를 들어 1 내지 4개의 치환기가 존재할 것이다. 이들 치환기는 임의로 이들이 연결될 수 있는 알킬, 카르보시클릭 또는 아릴 기와 고리를 형성할 수 있다. 치환기는 예를 들어 하기를 포함할 수 있다: 탄소-함유 기 예컨대 알킬, 아릴, 아릴알킬 (예를 들어, 치환된 및 비치환된 페닐, 치환된 및 비치환된 벤질); 할로겐 원자 및 할로겐-함유 기 예컨대 할로알킬 (예를 들어, 트리플루오로메틸); 산소 함유 기 예컨대 알콜 (예를 들어, 히드록실, 히드록시알킬, 아릴(히드록실)알킬), 에테르 (예를 들어, 알콕시, 시클로알콕시, 아릴옥시, 알콕시알킬, 아릴옥시알킬, 보다 바람직하게는, 예를 들어, 메톡시, 에톡시, 프로폭시, 이소프로폭시, 시클로프로폭시, 등), 알데히드 (예를 들어, 카르복스알데히드), 케톤 (예를 들어, 알킬카르보닐, 알킬카르보닐알킬, 아릴카르보닐, 아릴알킬카르보닐, 아릴카르보닐알킬), 산 (예를 들어, 카르복시, 카르복시알킬), 산 유도체 예컨대 에스테르 (예를 들어, 알콕시카르보닐, 알콕시카르보닐알킬, 알킬카르보닐옥시, 알킬카르보닐옥시알킬), 아미드 (예를 들어, 아미노카르보닐, 모노- 또는 디-알킬아미노카르보닐, 아미노카르보닐알킬, 모노- 또는 디-알킬아미노카르보닐알킬, 아릴아미노카르보닐), 카르바메이트 (예를 들어, 알콕시카르보닐아미노, 아릴옥시카르보닐아미노, 아미노카르보닐옥시, 모노- 또는 디-알킬아미노카르보닐옥시, 아릴아미노카르보닐옥시) 및 우레아 (예를 들어, 모노- 또는 디-알킬아미노카르보닐아미노 또는 아릴아미노카르보닐아미노); 질소-함유 기 예컨대 아민 (예를 들어, 아미노, 모노- 또는 디-알킬아미노, 아미노알킬, 모노- 또는 디-알킬아미노알킬), 아지드, 니트릴 (예를 들어, 시아노, 시아노알킬), 니트로; 황-함유 기 예컨대 티올, 티오에테르, 술폭시드 및 술폰 (예를 들어, 알킬티오, 알킬술피닐, 알킬술포닐, 알킬티오알킬, 알킬술피닐알킬, 알킬술포닐알킬, 아릴티오, 아릴술피닐, 아릴술포닐, 아릴티오알킬, 아릴술피닐알킬, 아릴술포닐알킬); 1개 이상의 헤테로원자를 함유하는 헤테로시클릴 헤테로알킬 기, 및 헤테로시클릭 기, (예를 들어, 티에닐, 푸라닐, 피롤릴, 이미다졸릴, 피라졸릴, 티아졸릴, 이소티아졸릴, 옥사졸릴, 옥사디아졸릴, 티아디아졸릴, 아지리디닐, 아제티디닐, 피롤리디닐, 피롤리닐, 이미다졸리디닐, 이미다졸리닐, 피라졸리디닐, 테트라히드로푸라닐, 피라닐, 피로닐, 피리딜, 피라지닐, 피리다지닐, 피페리딜, 헥사히드로아제피닐, 피페라지닐, 모르폴리닐, 티아나프틸, 벤조푸라닐, 이소벤조푸라닐, 인돌릴, 옥시인돌릴, 이소인돌릴, 인다졸릴, 인돌리닐, 7-아자인돌릴, 벤조피라닐, 쿠마리닐, 이소쿠마리닐, 퀴놀리닐, 이소퀴놀리닐, 나프티리디닐, 신놀리닐, 퀴나졸리닐, 피리도피리딜, 벤족사지닐, 퀴녹살리닐, 크로메닐, 크로마닐, 이소크로마닐, 프탈라지닐 및 카르볼리닐).
용어 "아지도"은 또한 -N=N=N로서 나타내어질 수 있는 -N3 기를 나타낸다.
본원에 사용된 용어 "카르보시클릭" 및 "카르보시클릴"은 고리가 탄소 원자에 의해 형성된, 임의로 치환된 비-방향족 C3-12 모노시클릭, 비시클릭 또는 트리시클릭 구조를 지칭한다. 카르보시클릭 구조는 시클로알킬, 시클로알케닐 및 시클로알키닐 기를 포함한다.
용어 "시클로알킬"은 3 내지 10개, 바람직하게는 3 내지 6개의 탄소 원자의 1가 모노- 또는 폴리카르보시클릭 라디칼을 지칭한다. 이 용어는 추가로 라디칼 예컨대 시클로프로필, 시클로부틸, 시클로펜틸, 시클로헥실, 시클로헵틸, 노르보르닐, 아다만틸 및 인다닐로 예시된다. 바람직한 실시양태에서, "시클로알킬" 모이어티는 임의로 1, 2, 3 또는 4개의 치환기로 치환될 수 있다. 각각 치환기는 달리 구체적으로 나타내지 않는 한, 독립적으로 알킬, 알콕시, 할로겐, 아미노, 히드록실 또는 산소일 수 있다. 시클로알킬 모이어티의 예는 임의로 치환된 시클로프로필, 임의로 치환된 시클로부틸, 임의로 치환된 시클로펜틸, 임의로 치환된 시클로펜테닐, 임의로 치환된 시클로헥실 및 임의로 치환된 시클로헵틸 또는 본원에서 구체적으로 예시된 것을 포함하나 이에 제한되지는 않는다.
본원에 사용된 용어 "시아노"는 -CN 기를 나타낸다.
본원에 사용된 용어 "할로" 또는 "할로겐"은 플루오린 (플루오로), 염소 (클로로), 브로민 (브로모) 또는 아이오딘 (아이오도) 라디칼을 의미한다.
본원에 사용된 용어 "헤테로알킬"은 구성성분 탄소 원자의 1개 이상이 질소, 산소 또는 황에 의해 대체된, 본원에 정의된 바와 같은 알킬 기를 지칭한다. 일부 실시양태에서, 헤테로알킬 기는 알킬 기에 대해 본원에 기재된 바와 같이 1, 2, 3 또는 4개의 치환기로 추가로 치환될 수 있다. 헤테로알킬 기의 예는 알킬-O-를 지칭하는, 본원에 사용된 "알콕시"; 및 알킬-CO-를 지칭하는, 본원에 사용된 "알코일"이다. 알콕시 치환기 또는 알콕시-함유 치환기는 예를 들어 1개 이상의 알킬 기에 의해 치환될 수 있다.
용어 "헤테로아릴"은 N, O 및 S로부터 선택된 1, 2 또는 3개의 고리 헤테로원자를 함유하는 적어도 1개의 방향족 고리를 가지며, 나머지 고리 원자가 C인, 5 내지 12개의 원자의 방향족 모노- 또는 폴리시클릭 라디칼을 지칭한다. 헤테로아릴 기의 1 또는 2개의 고리 탄소 원자는 카르보닐 기로 대체될 수 있다. 헤테로아릴 기의 예는 피리딜, 벤조옥사졸릴, 벤조이미다졸릴 및 벤조티아졸릴이다.
용어 "헤테로사이클" 또는 "헤테로시클릴"은 모노- 또는 폴리시클릭 알킬 고리를 나타내고, 여기서 1, 2 또는 3개의 탄소 고리 원자는 헤테로원자 예컨대 N, O 또는 S에 의해 대체된다. 헤테로시클릴 기의 예는 옥세타닐, 모르폴리닐, 티오모르폴리닐, 피페라지닐, 피페리디닐, 피롤리디닐, 테트라히드로피라닐, 테트라히드로푸라닐, 및 1,3-디옥사닐을 포함하나 이에 제한되지 않는다. 헤테로시클릴 기는 비치환 또는 치환될 수 있고, 부착은 적절한 경우에 그의 탄소 프레임을 통해 또는 그의 헤테로원자(들)을 통해 존재할 수 있다.
용어 "헤테로시클릴 헤테로알킬"은 헤테로알킬 기 (예를 들어, 에테르 또는 알콕시 기)를 통해 모 분자 기에 부착된 본원에 정의된 바와 같은 헤테로시클릭 기를 지칭한다. 헤테로시클릴 헤테로알킬 기의 예는 -OCH2CH2(모르폴리노) 기이다.
상기 기재된 헤테로시클릴 및 헤테로아릴 기는 1, 2, 3개 또는 그 이상의 치환기로 독립적으로 치환될 수 있다. 치환기는 예를 들어 하기를 포함할 수 있다: 탄소-함유 기 예컨대 알킬, 아릴, 아릴알킬 (예를 들어, 치환된 및 비치환된 페닐, 치환된 및 비치환된 벤질); 할로겐 원자 및 할로겐-함유 기 예컨대 할로알킬 (예를 들어, 트리플루오로메틸); 산소 함유 기 예컨대 알콜 (예를 들어, 히드록실, 히드록시알킬, 아릴(히드록실)알킬), 에테르 (예를 들어, 알콕시, 아릴옥시, 알콕시알킬, 아릴옥시알킬), 알데히드 (예를 들어, 카르복스알데히드), 케톤 (예를 들어, 알킬카르보닐, 알킬카르보닐알킬, 아릴카르보닐, 아릴알킬카르보닐, 아릴카르보닐알킬), 산 (예를 들어, 카르복시, 카르복시알킬), 산 유도체 예컨대 에스테르 (예를 들어, 알콕시카르보닐, 알콕시카르보닐알킬, 알킬카르보닐옥시, 알킬카르보닐옥시알킬), 아미드 (예를 들어, 아미노카르보닐, 모노- 또는 디-알킬아미노카르보닐, 아미노카르보닐알킬, 모노- 또는 디-알킬아미노카르보닐알킬, 아릴아미노카르보닐), 카르바메이트 (예를 들어, 알콕시카르보닐아미노, 아릴옥시카르보닐아미노, 아미노카르보닐옥시, 모노- 또는 디-알킬아미노카르보닐옥시, 아릴아미노카르보닐옥시) 및 우레아 (예를 들어, 모노- 또는 디- 알킬아미노카르보닐아미노 또는 아릴아미노카르보닐아미노); 질소-함유 기 예컨대 아민 (예를 들어, 아미노, 모노- 또는 디-알킬아미노, 아미노알킬, 모노- 또는 디-알킬아미노알킬), 아지드, 니트릴 (예를 들어, 시아노, 시아노알킬), 니트로; 황-함유 기 예컨대 티올, 티오에테르, 술폭시드 및 술폰 (예를 들어, 알킬티오, 알킬술피닐, 알킬술포닐, 알킬티오알킬, 알킬술피닐알킬, 알킬술포닐알킬, 아릴티오, 아릴술피닐, 아릴술포닐, 아릴티오알킬, 아릴술피닐알킬, 아릴술포닐알킬); 및 1개 이상의 헤테로원자를 함유하는 헤테로시클릭 기, (예를 들어, 티에닐, 푸라닐, 피롤릴, 이미다졸릴, 피라졸릴, 티아졸릴, 이소티아졸릴, 옥사졸릴, 옥사디아졸릴, 티아디아졸릴, 아지리디닐, 아제티디닐, 피롤리디닐, 피롤리닐, 이미다졸리디닐, 이미다졸리닐, 피라졸리디닐, 테트라히드로푸라닐, 피라닐, 피로닐, 피리딜, 피라지닐, 피리다지닐, 피페리딜, 헥사히드로아제피닐, 피페라지닐, 모르폴리닐, 티아나프틸, 벤조푸라닐, 이소벤조푸라닐, 인돌릴, 옥시인돌릴, 이소인돌릴, 인다졸릴, 인돌리닐, 7-아자인돌릴, 벤조피라닐, 쿠마리닐, 이소쿠마리닐, 퀴놀리닐, 이소퀴놀리닐, 나프티리디닐, 신놀리닐, 퀴나졸리닐, 피리도피리딜, 벤족사지닐, 퀴녹살리닐, 크로메닐, 크로마닐, 이소크로마닐, 프탈라지닐, 벤조티아졸릴 및 카르볼리닐).
본원에 사용된 용어 "히드록실"은 -OH 기를 나타낸다. 일부 실시양태에서, 히드록실 기는 본원에 정의된 바와 같은 O-보호 기로 치환될 수 있다.
본원에 사용된 용어 "N-보호기"는 합성 절차 동안 목적하지 않은 반응에 대해 아미노기를 보호하기 위한 기를 나타낸다. 흔히 사용된 N-보호기는 문헌 [Greene, "Protective Groups in Organic Synthesis," 3rd Edition (John Wiley & Sons, New York, 1999)]에 개시되어 있고, 이는 본원에 참조로 포함된다. 본원에 사용된 용어 "O-보호기"는 산소 함유 (예를 들어, 페놀, 히드록실 또는 카르보닐) 기가 화학적 합성 동안 바람직하지 않은 반응에 대해 보호하도록 의도된 기를 나타낸다. 흔히 사용되는 O-보호기는 문헌 ["Protective Groups in Organic Synthesis," 3rd Edition (John Wiley & Sons, New York, 1999)]에 개시되어 있고, 이는 본원에 참조로 포함된다. 본원에 사용된 용어 "퍼플루오로알킬"은 알킬 기에 결합된 각각의 수소 라디칼이 플루오라이드 라디칼에 의해 대체된 본원에 정의된 바와 같은 알킬 기를 나타낸다. 예를 들어, 퍼플루오로알킬 기는 트리플루오로메틸 및 펜타플루오로에틸에 의해 예시된다.
본원에 사용된 용어 "술포닐"은 -S(O)2- 기를 나타낸다.
"치환된" 탄화수소는 치환기로서 1개 이상의 탄화수소 라디칼, 치환된 탄화수소 라디칼을 가질 수 있거나, 또는 1개 이상의 헤테로원자를 포함할 수 있다. 치환된 탄화수소 라디칼의 예는, 비제한적으로, 헤테로사이클, 예컨대 헤테로아릴을 포함한다. 달리 명시되지 않는 한, 1개 이상의 헤테로원자로 치환된 탄화수소는 1-20개의 헤테로원자를 포함할 것이다. 다른 실시양태에서, 1개 이상의 헤테로원자로 치환된 탄화수소는 1-12개 또는 1-8개 또는 1-6개 또는 1-4개 또는 1-3개 또는 1-2개의 헤테로원자를 포함할 것이다. 헤테로원자의 예는 산소, 질소, 황, 인, 할로겐 (F, Cl, Br, I 등), 붕소, 규소 등을 포함하나 이에 제한되지 않는다. 일부 실시양태에서, 헤테로원자는 산소, 질소, 황, 인 및 할로겐 (F, Cl, Br, I 등)으로 이루어진 군으로부터 선택될 것이다. 일부 실시양태에서, 헤테로원자 또는 기는 탄소를 치환할 수 있다. 일부 실시양태에서, 헤테로원자 또는 기는 수소를 치환할 수 있다. 일부 실시양태에서, 치환된 탄화수소는 분자의 백본 또는 쇄에서 1개 이상의 헤테로원자를 포함할 수 있다 (예를 들어, "옥사"에서와 같이, 2개의 탄소 원자 사이에 개재됨). 일부 실시양태에서, 치환된 탄화수소는 분자의 백본 또는 쇄로부터의 1개 이상의 헤테로원자 펜던트를 포함할 수 있다 (예를 들어, "옥소"에서와 같이, 백본 또는 쇄 등에서 수소를 대체함으로써 쇄 또는 백본에서의 탄소 원자와 공유적으로 결합됨).
용어 "치환기"는 예를 들어 알킬, 할로알킬, 시클로알킬, 헤테로시클릴, 헤테로시클로알케닐, 시클로알케닐, 아릴 또는 헤테로아릴 기 상에서, 그 기의 임의의 원자에서 그 중에 1개 이상의 수소 원자를 대체하는 "치환된" 기를 지칭한다. 한 측면에서, 기 상의 치환기(들)는 독립적으로 그 치환기에 대해 기재된 허용가능한 원자 또는 원자단의 어느 1개 단독이거나 2개 이상의 임의의 조합이다. 또 다른 측면에서, 치환기 그 자체는 상기 치환기의 어느 1개로 치환될 수 있다. 또한, 본원에 사용된 어구 "임의로 치환된"은 비치환 (예를 들어, H로 치환)되거나, 또는 치환되는 것을 의미한다. 주어진 원자에서의 치환은 원자가에 의해 제한되는 것이 이해된다. 통상의 치환기는 할로, C1-12 직쇄 또는 분지쇄 알킬, C2-12 알케닐, C2-12 알키닐, C3-12 시클로알킬, C6-12 아릴, C3-12 헤테로아릴, C3-12 헤테로시클릴, C1-12 알킬술포닐, 니트로, 시아노, -COOR, -C(O)NRR', -OR, -SR, -NRR' 및 옥소, 예컨대 모이어티 예컨대 트리플루오로메톡시, 염소, 브로민, 플루오린, 메틸, 메톡시, 피리딜, 푸릴, 트리아질, 피페라지닐, 피라조일, 이미다조일 등으로의 일 또는 이- 또는 삼-치환을 포함하며, 각각은 임의로 1개 이상의 헤테로원자 예컨대 할로, N, O, S, 및 P을 함유한다. R 및 R'는 독립적으로 수소, C1-12 알킬, C1-12 할로알킬, C2-12 알케닐, C2-12 알키닐, C3-12 시클로알킬, C4-24 시클로알킬알킬, C6-12 아릴, C7-24 아르알킬, C3-12 헤테로시클릴, C3-24 헤테로시클릴알킬, C3-12 헤테로아릴 또는 C4-24 헤테로아릴알킬이다. 달리 나타내지 않는 한, 본원에 기재된 모든 기는 임의로 1개 이상의 통상의 치환기를 원자가에 의해 허용되는 정도로 포함한다. 또한, 본원에 사용된, 어구 "임의로 치환된"은 비치환 (예를 들어, H로 치환)되거나 또는 치환되는 것을 의미한다. 본원에 사용된 용어 "치환된"은 수소 원자가 제거되고 치환기 (예를 들어, 통상의 치환기)로 대체되는 것을 의미한다. 주어진 원자에서의 치환이 원자가에 의해 제한되는 것은 화학 기술분야의 통상의 기술자에 의해 이해된다. 수식자 "임의로 치환된" 또는 "치환된" 없이 치환기 (라디칼) 접두어 명칭 예컨대 알킬을 사용하는 것은 특정한 치환기가 치환되지 않음을 의미하는 것으로 이해된다. 그러나, 수식자 "임의로 치환된" 또는 "치환된" 없이 "할로알킬"을 사용하는 것은 여전히 적어도 1개의 수소 원자가 할로에 의해 대체되는 알킬 기를 의미하는 것으로 이해된다.
본원의 화합물의 기재는 관련 기술분야의 통상의 기술자에게 공지된 화학 결합의 원리에 의해 제한되는 것으로 이해될 것이다. 따라서, 기가 다수의 치환기 중 1개 이상에 의해 치환될 수 있는 경우, 이러한 치환은 원자가 등과 관련된 화학 결합의 원리에 따르도록, 및 본질적으로 불안정하지 않은 화합물을 제공하도록 선택된다.
본원에 제공된 화합물은 1개 이상의 비대칭 탄소 원자를 가질 수 있고, 광학적으로 순수한 거울상이성질체, 거울상이성질체의 혼합물 예컨대 라세미체, 광학적으로 순수한 부분입체이성질체, 부분입체이성질체의 혼합물, 부분입체이성질체 라세미체 또는 부분입체이성질체 라세미체의 혼합물의 형태로 존재할 수 있다. 광학 활성 형태는 예를 들어 라세미체의 분해에 의해, 비대칭 합성 또는 비대칭 크로마토그래피(키랄 흡착제 또는 용리액을 사용하는 크로마토그래피)에 의해 수득될 수 있다. 특정의 개시된 화합물은 다양한 입체이성질체 형태로 존재할 수 있다. 입체이성질체는 단지 그의 공간 배열만이 상이한 화합물이다. 거울상이성질체는 가장 통상적으로 키랄 중심으로서 작용하는 비대칭적으로 치환된 탄소 원자를 함유하기 때문에 그의 거울 상이 겹쳐지지 않는 입체이성질체의 쌍이다. "거울상이성질체"는 서로 거울상이며 겹쳐지지 않는 한 쌍의 분자 중 1개를 의미한다. 부분입체이성질체는 가장 통상적으로 그들이 2개 이상의 비대칭적으로 치환된 탄소 원자를 함유하고, 1개 이상의 키랄 탄소 원자의 주위의 치환기의 배위를 나타내기 때문에, 거울상과 관련되지 않는 입체이성질체이다. 화합물의 거울상이성질체는 예를 들어 1종 이상의 널리 공지된 기술 및 방법, 예컨대 키랄 크로마토그래피 및 그에 기반한 분리 방법을 사용하여 라세미체로부터 거울상이성질체를 분리함으로써 제조될 수 있다. 라세미 혼합물로부터 본원에 기재된 화합물의 거울상이성질체를 분리하기 위한 적절한 기술 및/또는 방법은 관련 기술분야의 통상의 기술자에 의해 용이하게 결정될 수 있다. "라세미체" 또는 "라세미 혼합물"은 2종의 거울상이성질체를 함유하는 화합물을 의미하며, 여기서 이러한 혼합물은 광학 활성을 나타내지 않고, 즉 편광의 평면을 회전시키지 않는다. "기하 이성질체"는 치환기 원자의 배향 (예를 들어, 탄소-탄소 이중 결합, 시클로알킬 고리, 또는 가교된 비시클릭계 등에 대한)이 상이한 이성질체를 의미한다. 탄소-탄소 이중 결합의 각각의 측 상의 (H 이외의) 원자는 E (치환기가 탄소-탄소 이중 결합의 반대 측에 있음) 또는 Z (치환기가 동일 측에 배향되어 있음) 배위일 수 있다. "R", "S", "S*", "R*", "E", "Z", "시스", 및 "트랜스"는 코어 분자에 대한 배위를 나타낸다. 특정한 개시된 화합물은 회전장애이성질체 형태로 존재할 수 있다. 회전장애이성질체는 회전에 대한 입체 변형 장벽이 충분히 높아서 이형태체의 단리를 가능하게 하는, 단일 결합에 대한 장애 회전으로부터 생성된 입체이성질체이다. 본원에 개시된 화합물은 또한 이성질체-특이적 합성에 의해 개별 이성질체로서 제조되거나 또는 이성질체 혼합물로부터 분해될 수 있다. 통상적인 분해 기술은 광학 활성 산을 사용하여 이성질체 쌍의 각각의 이성질체의 유리 염기의 염을 형성시키는 것 (뒤이어 분별 결정화 및 유리 염기의 재생), 광학 활성 아민을 사용하여 이성질체 쌍의 각각의 이성질체의 산 형태의 염을 형성시키는 것 (뒤이어 분별 결정화 및 유리 산의 재생), 광학적으로 순수한 산, 아민 또는 알콜을 사용하여 이성질체 쌍의 이성질체 각각의 에스테르 또는 아미드를 형성시키는 것 (뒤이어 크로마토그래피 분리 및 키랄 보조제의 제거), 또는 다양한 널리 공지된 크로마토그래피 방법을 사용하여 출발 물질 또는 최종 생성물의 이성질체 혼합물을 분해하는 것을 포함한다. 개시된 화합물의 입체화학이 명명되거나 구조에 의해 도시되는 경우, 명명되거나 도시된 입체이성질체는 다른 입체이성질체에 대해 적어도 60 중량%, 70 중량%, 80 중량%, 90 중량%, 99 중량% 또는 99.9 중량%이다. 단일 거울상이성질체가 명명되거나 구조에 의해 도시되는 경우, 도시되거나 명명된 거울상이성질체는 적어도 60 중량%, 70 중량%, 80 중량%, 90 중량%, 99 중량%, 또는 99.9 중량% 광학적으로 순수하다. 단일 부분입체이성질체가 명명되거나 구조에 의해 도시되는 경우, 도시되거나 명명된 부분입체이성질체는 적어도 60 중량%, 70 중량%, 80 중량%, 90 중량%, 99 중량% 또는 99.9 중량% 순수하다. 퍼센트 광학 순도는 거울상이성질체의 중량/거울상이성질체의 중량 플러스 그의 광학 이성질체의 중량의 비이다. 중량 기준 부분입체이성질체 순도는 1종의 부분입체이성질체의 중량/모든 부분입체이성질체의 중량의 비이다. 개시된 화합물의 입체화학이 명명되거나 구조에 의해 도시되는 경우, 명명되거나 도시된 입체이성질체는 다른 입체이성질체에 대해 몰 분율 기준으로 적어도 60%, 70%, 80%, 90%, 99%, 또는 99.9% 순수하다. 단일 거울상이성질체가 명명되거나 구조에 의해 도시되는 경우, 도시되거나 명명된 거울상이성질체는 몰 분율 기준으로 적어도 60%, 70%, 80%, 90%, 99%, 또는 99.9% 순수하다. 단일 부분입체이성질체가 명명되거나 구조에 의해 도시되는 경우, 도시되거나 명명된 부분입체이성질체는 몰 분율 기준으로 적어도 60%, 70%, 80%, 90%, 99%, 또는 99.9% 순수하다. 몰 분율 기준 퍼센트 순도는 거울상이성질체의 몰/거울상이성질체의 몰 플러스 그의 광학 이성질체의 몰의 비이다. 유사하게, 몰 분율 기준 퍼센트 순도는 부분입체이성질체의 몰/부분입체이성질체의 몰 플러스 그의 이성질체의 몰의 비이다. 개시된 화합물이 입체화학을 나타내지 않고 명명되거나 구조에 의해 도시되고, 화합물이 적어도 1개의 키랄 중심을 갖는 경우에, 명칭 또는 구조는 상응하는 광학 이성질체가 없는 화합물의 거울상이성질체, 화합물의 라세미 혼합물 또는 1종의 거울상이성질체가 그의 상응하는 광학 이성질체에 비해 풍부한 혼합물을 포함하는 것으로 이해되어야 한다. 개시된 화합물이 입체화학을 나타내지 않고 명명되거나 구조에 의해 도시되고, 2개 이상의 키랄 중심을 갖는 경우, 명칭 또는 구조는 다른 부분입체이성질체가 없는 부분입체이성질체, 다른 부분입체이성질체 쌍이 없는 다수의 부분입체이성질체, 부분입체이성질체의 혼합물, 부분입체이성질체 쌍의 혼합물, 1종의 부분입체이성질체가 다른 부분입체이성질체(들)에 비해 풍부한 부분입체이성질체의 혼합물, 또는 1종 이상의 부분입체이성질체가 다른 부분입체이성질체(들)에 비해 풍부한 부분입체이성질체의 혼합물을 포함하는 것으로 이해되어야 한다. 본 개시내용은 모든 이들 형태를 포함한다.
본원에 사용된 용어 작용제의 용어 "유효량" 또는 "치료 유효량"은 유익하거나 목적하는 결과, 예를 들어 임상 결과를 가져오기에 충분한 양이고, 이에 따라, "유효량"은 적용되는 문맥에 따라 달라진다. 예를 들어, 항말라리아제 작용제인 작용제를 투여하는 것과 관련하여, 작용제의 유효량은, 예를 들어 1종 이상의 증상 또는 상태의 완화 또는 호전 또는 방지 또는 예방; 질환, 장애 또는 상태의 정도 감소; 질환, 장애 또는 상태의 안정화된 (즉, 악화되지 않는) 상태; 질환, 장애 또는 상태의 확산을 방지하는 것 (예를 들어, 간 밖으로의 플라스모디움(Plasmodium) 감염의 확산을 방지하고/거나, 전신 질환을 방지하고/거나, 말라리아의 증후성 단계를 방지하고/거나, 플라스모디움(Plasmodium) 감염의 확립을 방지하고/거나, 모기 등으로 다시 전파되는 것을 방지함으로써 질환의 추가적 확산을 방지하는 것); 질환, 장애 또는 상태의 진전의 지연 또는 저속화; 질환, 장애 또는 상태의 호전 또는 완화; 및 작용제의 투여 없이 얻어진 반응에 비해, 검출가능하거나 또는 검출가능하지 않은 완화 (부분 또는 전체)를 달성하기에 충분한 양이다.
본원에 사용된 용어 "제약 조성물"은 제약상 허용되는 부형제와 제제화된 본원에 기재된 화합물을 함유하는 조성물을 나타낸다. 일부 실시양태에서, 제약 조성물은 포유동물에서 질환의 치료를 위한 치료 요법의 일부로서 정부 규제 기관의 승인 하에 제조 또는 판매된다. 제약 조성물은, 예를 들어 단위 투여 형태의 경구 투여용으로 (예를 들어, 정제, 캡슐, 캐플릿, 겔캡, 또는 시럽); 국소 투여용으로 (예를 들어, 크림, 겔, 로션 또는 연고); 정맥내 투여용으로 (예를 들어, 미립자 색전이 없는 멸균 용액으로서 및 정맥내 사용에 적합한 용매계 중의 것으로); 또는 본원에 기재된 임의의 다른 제약상 허용되는 제제 (하기 참조)로 제제화될 수 있다.
이의 조성물의 제조를 위한 유용한 제약 담체는 고체, 액체 또는 기체일 수 있다. 따라서, 조성물은 정제, 환제, 캡슐, 좌제, 분말 또는 장용 코팅 또는 다른 보호된 제제 (예를 들어, 이온-교환 수지 상에 결합하거나 또는 지질-단백질 소포에서 패키징됨), 지속 방출 제제, 용액, 현탁액, 엘릭시르 및 에어로졸의 형태를 취할 수 있다. 담체는 석유, 동물성, 식물성 또는 합성 오일의 것을 비롯한 다양한 오일, 예를 들어 땅콩 오일, 대두 오일, 미네랄 오일, 참깨 오일로부터 선택될 수 있다. 물, 염수, 수성 덱스트로스 및 글리콜은 주사액을 위해 특히 (혈액과의 등장성인 경우) 바람직한 액체 담체이다. 예를 들어, 정맥내 투여를 위한 제제는 물에 고체 활성 성분을 용해시켜 수용액을 생성하고, 용액 멸균을 제공함으로써 제조된 활성 성분의 멸균 수용액을 포함한다. 적합한 제약 부형제는 전분, 셀룰로스, 활석, 글루코스, 락토스, 수크로스, 젤라틴, 맥아, 쌀, 소맥분, 백악, 실리카 겔, 스테아르산마그네슘, 스테아르산나트륨, 글리세롤 모노스테아레이트, 염화나트륨, 건조 탈지유, 글리세롤, 프로필렌 글리콜, 물, 에탄올을 포함한다. 조성물은 종래의 제약 첨가제 예컨대 보존제, 안정화제, 습윤제 또는 유화제, 삼투압을 조정하는 염 및 완충제에 적용될 수 있다. 적합한 제약 담체 및 그의 제제는 문헌 [Remington's Pharmaceutical Sciences by E. W. Martin]에 기재되어 있다. 이러한 조성물은, 임의의 사건에서, 수용자에게 투여하기 위한 적절한 투여 형태를 제조하기 위해 적합한 담체와 함께 유효량의 활성 화합물을 포함할 것이다.
본원에 사용된 용어 "제약상 허용되는 염"은, 타당한 의학적 판단의 범주 내에서, 과도한 독성, 자극, 알레르기 반응 등이 없이 인간 및 동물의 조직과 접촉하여 사용하기에 적합하며 합리적 이익/위험 비에 상응하는 본원에 기재된 화합물 중 임의의 것의 염을 지칭한다. 제약상 허용되는 염은 관련 기술분야에 널리 공지되어 있다. 예를 들어, 제약상 허용되는 염은 문헌 [Berge et al., J. Pharmaceutical Sciences 66:1-19, 1977] 및 [Pharmaceutical Salts: Properties, Selection, and Use, (Eds. P.H. Stahl and C.G. Wermuth), Wiley-VCH, 2008]에 기재된다. 염은 무기 및 유기 산 및 염기를 포함한 제약상 허용되는 비독성 산 및 염기로부터 제조될 수 있다. 대표적인 산 부가염은 아세테이트, 아디페이트, 알기네이트, 아스코르베이트, 아스파르테이트, 벤젠술포네이트, 벤조에이트, 비술페이트, 보레이트, 부티레이트, 캄포레이트, 캄포르술포네이트, 시트레이트, 시클로펜탄프로피오네이트, 디클로로아세테이트, 디글루코네이트, 도데실술페이트, 에탄술포네이트, 포르메이트, 푸마레이트, 글루코헵토네이트, 글루타메이트, 글리세로포스페이트, 헤미술페이트, 헵토네이트, 헥사노에이트, 히푸레이트, 히드로브로마이드, 히드로클로라이드, 히드로아이오다이드, 2-히드록시-에탄술포네이트, 이세티오네이트, 락토비오네이트, 락테이트, 라우레이트, 라우릴 술페이트, 말레이트, 말레에이트, 말로네이트, 만델레이트, 메탄술포네이트, 뮤케이트, 2-나프탈렌술포네이트, 니코티네이트, 니트레이트, 올레에이트, 옥살레이트, 팔미테이트, 파모에이트, 판토테네이트, 펙티네이트, 퍼술페이트, 3-페닐프로피오네이트, 포스페이트, 피크레이트, 피발레이트, 프로피오네이트, 스테아레이트, 숙시네이트, 술페이트, 타르트레이트, 티오시아네이트, 톨루엔술포네이트, 운데카노에이트, 및 발레레이트 염을 포함한다. 대표적인 염기성 염은 알칼리 또는 알칼리 토금속 염을 포함하며, 이는 나트륨, 리튬, 칼륨, 칼슘 및 마그네슘, 뿐만 아니라, 암모늄, 테트라메틸암모늄, 테트라에틸암모늄, 메틸아민, 디메틸아민, 트리메틸아민, 트리에틸아민 및 에틸아민을 포함하나 이에 제한되지는 않는 비독성 암모늄, 4급 암모늄 및 아민 양이온을 포함한다.
본원에 사용된 용어 "대상체"는 본 개시내용에 따른 조성물이, 예를 들어 실험, 진단, 예방 및/또는 치료 목적을 위해 투여될 수 있는 임의의 유기체를 지칭한다. 전형적인 대상체는 임의의 동물 (예를 들어, 포유동물 예컨대 마우스, 래트, 토끼, 비-인간 영장류 및 인간, 도마뱀, 도마뱀붙이 등)을 포함한다. 대상체는 가축 (예를 들어, 소, 송아지, 양, 새끼양, 말, 망아지, 돼지, 새끼돼지 등) 또는 뮤리다에과(Meuridae) (예를 들어, 래트, 마우스 등) 중의 동물일 수 있다. 대상체는 치료를 추구 또는 필요로 할 수 있거나, 치료를 요구할 수 있거나, 치료를 수용할 수 있거나, 향후에 치료를 수용할 수 있거나, 또는 특정한 질환 또는 상태에 대해 훈련된 전문가에 의한 관리 하에 있는 인간 또는 동물일 수 있다.
본원에서 사용되고, 관련 기술분야에서 널리 이해되는 바와 같이, 상태를 "치료하다" 또는 상태의 "치료" (예를 들어, 본원에 기재된 상태 예컨대 말라리아)는 유익하거나 목적하는 결과, 예컨대 임상 결과를 수득하기 위한 접근법이다. 유익하거나 또는 목적하는 결과는 1종 이상의 증상 또는 상태의 완화 또는 호전; 질환, 장애, 또는 상태의 정도 감소; 질환, 장애, 또는 상태의 안정화된 (즉, 악화되지 않는) 상태; 질환, 장애, 또는 상태의 확산을 지연시키거나 또는 저속화하는 것 (예를 들어 간 밖으로의 플라스모디움(Plasmodium) 감염의 확산을 방지하거나 또는 모기로 다시 전파되는 것을 방지하고/거나, 말라리아의 증후성 단계를 방지하고/거나 플라스모디움(Plasmodium) 감염의 확립을 방지하는 것); 질환, 장애, 또는 상태의 진전의 지연 또는 저속화; 질환, 장애, 또는 상태의 호전 또는 완화; 및 검출가능하거나 또는 검출가능하지 않은 완화 (부분 또는 전체)를 포함할 수 있으나, 이에 제한되지 않는다. 특정 질환, 장애, 또는 상태를 "완화시키는 것"은 이러한 질환, 장애, 또는 상태의 정도 및/또는 바람직하지 못한 임상 징후가, 치료 부재 하에서의 정도 또는 시간 경과와 비교해서 감소되고/되거나 진행의 시간 경과가 느려지거나 또는 길어진다는 것을 의미한다.
용어 "단위 투여 형태"는 각각의 단위가 임의의 적합한 제약 부형제 또는 부형제와 연관되어, 목적하는 치료 효과를 생성하도록 계산된 미리 결정된 양의 활성 물질을 함유하는, 인간 대상체 및 다른 포유동물에 대한 단일 투여로서 적합한 물리적 이산 단위를 지칭한다. 예시적인, 비-제한적인 단위 투여 형태는 정제 (예를 들어, 저작성 정제), 캐플릿, 캡슐 (예를 들어, 경질 캡슐 또는 연질 캡슐), 로젠지, 필름, 스트립, 겔캡 및 시럽을 포함한다 (또한 하기 참조).
개시내용의 다른 특색 및 이점은 하기 상세한 설명 및 청구범위에 기재된다.
화합물
본 개시내용은 말라리아의 치료에 유용한 신규 화합물 및 제약 조성물을 제공한다. 개시내용은 또한 이들 화합물과 조성물을 사용하는 방법을 제공한다.
일부 실시양태에서, 화합물은 표 1에 열거된 임의의 화합물일 수 있다.
표 1
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Figure pct00013
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Figure pct00015
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Figure pct00017
*각각의 입체이성질체는 예시적인 합성에 기재된 바와 같이 단리하고, 하기 기재된 바와 같이 임의의 생물학적 실험에 사용하였다. 그러나, 각각의 부분입체이성질체 (즉, 이성질체 1 또는 이성질체 2)가 기재된 바와 같이 단리되고 혼합물로서는 존재하지 않으나 - C3 또는 C4 위치에서의 입체화학은 결정될 수 없었다.
화학 명칭과 화학식 간에 임의의 불일치가 발생한 경우, 지시된 화학 명칭을 갖는 화합물 및 지시된 화학 구조를 갖는 화합물 둘 다는 본 발명에 포함되는 것으로 고려될 것임이 이해될 것이다.
적용가능한 경우, 본 발명의 화합물은 화합물 그 자체, 뿐만 아니라 그의 염 및 그의 전구약물을 포함한다. 염은, 예를 들어, 음이온과 본원에 기재된 화합물 상의 양으로 하전된 기 (예를 들어, 아미노) 사이에서 형성될 수 있다. 적합한 음이온은 클로라이드, 브로마이드, 아이오다이드, 술페이트, 니트레이트, 포스페이트, 시트레이트, 메탄술포네이트, 트리플루오로아세테이트 및 아세테이트를 포함한다. 마찬가지로, 염은 또한 양이온과 본원에 기재된 화합물 상의 음으로 하전된 기 (예를 들어, 카르복실레이트) 사이에서 형성될 수 있다. 적합한 양이온은 나트륨 이온, 칼륨 이온, 마그네슘 이온, 칼슘 이온, 및 암모늄 양이온 예컨대 테트라메틸암모늄 이온을 포함한다. 전구약물의 예는 대상체에게 투여 시 활성 화합물을 제공할 수 있는 카르복실산 기의 C1-6 알킬 에스테르를 포함한다.
본 개시내용의 화합물의 제약상 허용되는 염은 제약상 허용되는 무기 및 유기 산 및 염기로부터 유도된 염을 포함한다. 본원에 사용된 용어 "제약상 허용되는 염"은 본원에 개시된 화합물에 제약상 허용되는 산 또는 염기의 첨가에 의해 형성된 염을 지칭한다. 본원에 사용된 어구 "제약상 허용되는"은 독성학적 관점에서 제약 용도로 사용하도록 허용되고 활성 성분과 유해하게 상호작용하지 않는 물질을 지칭한다.
적합한 산 염의 예는 아세테이트, 아디페이트, 알기네이트, 아스파르테이트, 벤조에이트, 벤젠술포네이트, 비술페이트, 부티레이트, 시트레이트, 캄포레이트, 캄포르술포네이트, 디글루코네이트, 도데실술페이트, 에탄술포네이트, 포르메이트, 푸마레이트, 글루코헵타노에이트, 글리콜레이트, 헤미술페이트, 헵타노에이트, 헥사노에이트, 히드로클로라이드, 히드로브로마이드, 히드로아이오다이드, 2-히드록시에탄술포네이트, 락테이트, 말레에이트, 말로네이트, 메탄술포네이트, 2-나프탈렌술포네이트, 니코티네이트, 니트레이트, 팔모에이트, 펙티네이트, 퍼술페이트, 3-페닐프로피오네이트, 포스페이트, 피크레이트, 피발레이트, 프로피오네이트, 살리실레이트, 숙시네이트, 술페이트, 타르트레이트, 티오시아네이트, 토실레이트 및 운데카노에이트를 포함한다. 다른 산, 예컨대 옥살산은 그 자체로는 제약상 허용되지 않지만, 본 발명의 화합물 및 그의 제약상 허용되는 산 부가염을 수득하는데 있어서 중간체로서 유용한 염의 제조에 사용될 수 있다. 적절한 염기로부터 유래된 염은 알칼리 금속 (예를 들어, 나트륨), 알칼리 토금속 (예를 들어, 마그네슘), 암모늄 및 N-(알킬)4 + 염을 포함한다. 본 발명은 또한 본원에 개시된 화합물의 임의의 염기성 질소-함유 기의 4급화를 고려한다. 수용성 또는 유용성 또는 분산성 생성물은 이러한 4급화에 의해 수득될 수 있다. 본원에서의 임의의 화학식의 화합물의 염 형태는 카르복실 기의 아미노산 염 (예를 들어, L-아르기닌, -리신, -히스티딘 염)일 수 있다.
적합한 염의 목록은 문헌 [Remington's Pharmaceutical Sciences, 17th ed., Mack Publishing Company, Easton, Pa., 1985, p. 1418; Journal of Pharmaceutical Science, 66, 2 (1977); 및 "Pharmaceutical Salts: Properties, Selection, and Use A Handbook; Wermuth, C. G. and Stahl, P. H. (eds.) Verlag Helvetica Chimica Acta, Zurich, 2002 [ISBN 3-906390-26-8]에서 확인되고, 각각은 그의 전문이 본원에 참조로 포함된다.
화합물의 중성 형태는 상기 염을 염기 또는 산과 접촉시키고, 모 화합물을 통상의 방식으로 단리시킴으로써 재생될 수 있다. 화합물의 모 형태는, 극성 용매 중 가용성과 같은 특정의 물리적 특성에 있어서 다양한 염 형태와 상이하나, 그 외에는 염은 본 발명의 목적상 화합물의 모 형태와 동등하다.
염 형태에 더하여, 본 발명은 전구약물 형태의 화합물을 제공한다. 본원에 기재된 화합물의 전구약물은 생리적 조건 하에 화학적 변화를 거쳐 본 발명의 화합물을 제공하는 그러한 화합물이다. 추가로, 전구약물은 생체외 환경에서 화학적 또는 생화학적 방법을 통해 본 발명의 화합물로 전환될 수 있다. 예를 들어, 전구약물은 적합한 효소 또는 화학적 시약과 함께 경피 패치 저장조에 놓이는 경우, 본 발명의 화합물로 천천히 전환될 수 있다. 전구약물은 일부 상황에서, 모 약물보다 투여하기가 더 용이할 수 있기 때문에 종종 유용하다. 이들은 예를 들어, 모 약물보다 경구 투여에 의해 보다 생체이용성일 수 있다. 전구약물은 또한 모 약물에 비해 약리학적 조성물에서 개선된 용해도를 가질 수 있다. 광범위한 전구약물 유도체, 예컨대 전구약물의 가수분해적 절단 또는 산화적 활성화에 의존하는 유도체들이 관련 기술분야에 공지되어 있다. 비제한적으로, 전구약물의 예는 에스테르 ("전구약물")로서 투여되지만, 그 후 대사적으로 카르복실산, 즉, 활성 실체로 가수분해되는 본 발명의 화합물일 것이다. 추가의 예는 본 발명의 화합물의 펩티딜 유도체를 포함한다.
본 발명은 또한 화합물의 다양한 수화물 및 용매화물 형태를 포함한다.
본 발명의 화합물은 또한 이러한 화합물을 구성하는 원자 중 1개 이상에서 비천연 비율의 원자 동위원소를 함유할 수 있다. 예를 들어, 화합물은 방사성 동위원소, 예컨대 예를 들어 삼중수소 (3H), 아이오딘-125 (125I) 또는 탄소-14 (14C)로 방사성표지될 수 있다. 본 발명의 화합물의 모든 동위원소 변형은, 그것이 방사성이든지 아니든지 간에, 본 발명의 범주 내에 포괄되는 것으로 의도된다.
방법
본원에 기재된 화합물은 본원에 제공된 방법에서 유용하고, 어떠한 특정한 이론에 얽매이는 것은 아니지만, 말라리아 (예를 들어, 피. 팔시파룸(P. falciparum), 피. 비박스(P. vivax), 피. 오발레(P. ovale), 피. 말라리아에(P. malariae) 및/또는 피. 크노우레시(P. knowlesi) )및/또는 크립토스포리디움증 (예를 들어 씨. 파르붐(C. parvum), 씨. 호미니스(C. hominis), 씨. 카니스(C. canis), 씨. 펠리스(C. felis), 씨. 멜레아그리디스(C. meleagridis) 및 씨. 무리스(C. muris))를 유발하는 기생충성 원충을 사멸시키거나 또는 성장을 억제하는 그의 능력을 통해 그의 바람직한 효과를 발휘하는 것으로 여겨진다. 일부 실시양태에서, 치료는 원인 예방, 예컨대 간 밖으로의 플라스모디움(Plasmodium) 및/또는 크립토스포리디움(Cryptosporidium) 감염의 확산을 방지하는 것, 전신 질환을 방지하는 것, 말라리아의 증후성 단계를 방지하는 것, 감염의 확립을 방지하는 것 및/또는 (예를 들어 모기로의) 추가의 전파를 방지하는 것을 포함한다. 일부 실시양태에서, 말라리아의 치료는 (예를 들어, 피. 비박스(P. vivax) 또는 피. 말라리아에(P. malariae)의) 치유를 달성하도록 의도된 치료, 예를 들어, 근치적 치유를 위한 치료 (즉, 간으로부터 수면소체를 소거하는 것)를 지칭한다. 다양한 예에서, 방법은 간으로부터 말라리아-유발 기생충의 감염의 확산을 방지하는 것을 포함한다. 일부 실시양태에서, 크립토스포리디움증의 치료는 원인 예방, 예컨대 대상체의 감염된 부분 (예를 들어 간, 장, 기도 등) 밖으로의 크립토스포리디움의 확산을 방지하는 것을 포함한다.
화합물은 약물 내성 말라리아 예컨대 클로로퀸, 퀴닌, 피리메타민, 술파독신, 메플로퀸, 아르테메터, 루메판트린, 아르테수네이트, 아모디아퀸, 디히드로아르테미시닌, 피페라퀸, 프로구아닐, 독시시클린, 클린다마이신, 아르테미시닌, 아토바쿠온 및 그의 임의의 조합물에 내성인 말라리아의 치료에 유용할 수 있다.
제약 조성물
1. 제제
본원에 기재된 방법에 사용하기 위해, 화합물은 제약 또는 수의학적 조성물로서 제제화될 수 있다. 선택된 제제는 치료될 대상체, 투여 방식 및 목적하는 치료의 유형 (예를 들어, 방지, 예방, 또는 요법)에 따라 달라질 수 있다. 제제 기술의 개요는 문헌 [Remington: The Science and Practice of Pharmacy, 21st Edition, Lippincott Williams & Wilkins, (2005); 및 Encyclopedia of Pharmaceutical Technology, eds. J. Swarbrick and J. C. Boylan, 1988-1999, Marcel Dekker, New York]에서 발견되고, 그 각각은 본원에 참조로 포함된다. 예시적인 투여 경로 및 제제는 하기에 기재되어 있다.
개시된 방법의 실시에서, 화합물 (또는 그의 제약상 허용되는 염) 또는 조성물은 임의의 일반적이고 허용가능한 경로 및 관련 기술분야에 공지된 방법에 의해 투여될 수 있다. 따라서, 화합물 또는 조성물은, 예를 들어, 경장 또는 위장 경로 (예를 들어, 경구로 또는 직장으로)에 의해, 국소로 (예를 들어, 피부 또는 접근가능한 점막으로 (예를 들어, 구강내 (예를 들어, 설하 또는 협측), 비강내, 직장내 또는 비뇨생식기 표면)), 비경구로 (예를 들어, 근육내, 정맥내, 피하, 관절내, 소포내, 척수강내, 경막외, 안구, 또는 귀 적용 또는 주사에 의해), 경피로, 또는 흡입 (예를 들어, 에어로졸에 의해)에 의해 투여될 수 있다.
관련 기술분야의 통상의 기술자에 의해 적절하다고 결정된 바와 같이, 조성물은 고체, 액체 또는 기체이 형태로 존재할 수 있다. 따라서, 일반적 예로서, 제약 조성물은 정제, 캡슐, 시럽, 환제, 장용 코팅 또는 다른 보호된 제제, 지속 방출 제제, 엘릭시르, 분말, 과립, 현탁액, 에멀젼, 용액, 겔 (예를 들어, 히드로겔), 페이스트, 연고, 크림, 플라스터, 경피 패치, 드렌치, 좌제, 관장제, 주사제, 임플란트, 스프레이 또는 에어로졸의 형태로 존재할 수 있다.
조성물은 일반적으로 유효량의 본원에 기재된 화합물 및 관련 분야에 널리 공지된 1종 이상의 제약상 허용되는 담체 또는 부형제를 포함한다. 따라서, 조성물은 1종 이상의 희석제, 완충제, 보존제, 염, 탄수화물, 아미노산, 담체 단백질, 지방산, 지질 등을 포함할 수 있다. 본원에 기재된 화합물은 조성물의 총 중량 중 합산된 양, 예를 들어, 1-95 중량%으로 존재할 수 있다.
주사를 위한 제제는 액체 용액 또는 현탁액으로서, 또는 주사 전에 액체 중의 용액 또는 현탁액용으로 적합한 고체 형태로서, 또는 에멀젼으로서 통상의 형태로 제조될 수 있다. 이들 제제를 위한 적합한 부형제는 예를 들어 물, 염수, 덱스트로스, 및 글리세롤을 포함한다. 이러한 조성물은 또한 비독성 보조 물질, 예컨대 습윤제 또는 유화제 및 pH 완충제, 예컨대 아세트산나트륨, 소르비탄 모노라우레이트 등을 함유할 수 있다.
경구 사용을 위한 제제에는 1종 이상의 비-독성의 제약상 허용되는 부형제와의 혼합물로 화합물을 함유하는 정제가 포함된다. 부형제는, 예를 들어 불활성 희석제 또는 충전제 (예를 들어, 수크로스, 소르비톨, 당, 만니톨, 미세결정질 셀룰로스, 감자 전분을 포함한 전분, 탄산칼슘, 염화나트륨, 락토스, 인산칼슘, 황산칼슘, 또는 인산나트륨); 과립화제 및 붕해제 (예를 들어, 미세결정질 셀룰로스를 포함한 셀룰로스 유도체, 감자 전분을 포함한 전분, 크로스카르멜로스 소듐, 알기네이트, 또는 알긴산); 결합제 (예를 들어, 수크로스, 글루코스, 소르비톨, 아카시아, 알긴산, 알긴산나트륨, 젤라틴, 전분, 예비젤라틴화 전분, 미세결정질 셀룰로스, 규산알루미늄마그네슘, 카르복시메틸셀룰로스 소듐, 메틸셀룰로스, 히드록시프로필 메틸셀룰로스, 에틸셀룰로스, 폴리비닐피롤리돈, 또는 폴리에틸렌 글리콜); 및 윤활제, 활택제, 및 부착방지제 (예를 들어, 스테아르산마그네슘, 스테아르산아연, 스테아르산, 실리카, 수소화 식물성 오일, 또는 활석)일 수 있다. 다른 제약상 허용되는 부형제는 착색제, 향미제, 가소제, 함습제, 및 완충제일 수 있다.
경구 사용을 위한 제제는 저작성 정제로서, 또는 활성 성분이 불활성 고체 희석제 (예컨대 감자 전분, 락토스, 미세결정질 셀룰로스, 칼슘 카르보네이트, 칼슘 포스페이트 또는 카올린)와 혼합되어 있는 경질 젤라틴 캡슐로서, 또는 활성 성분이 물 또는 오일 매질, 예를 들어 땅콩 오일, 액체 파라핀 또는 올리브 오일과 혼합되어 있는 연질 젤라틴 캡슐로서 제공될 수도 있다. 분말, 과립, 펠릿은 정제 및 캡슐에서 상기 언급된 성분을 사용하여 예를 들어 혼합기, 유동층 장치 또는 분무 건조 장비를 사용하는 통상적인 방식으로 제조될 수 있다.
용해 또는 확산 제어 방출은 화합물의 정제, 캡슐, 펠릿, 또는 과립 제제의 적절한 코팅에 의해, 또는 적절한 매트릭스에 화합물을 도입하는 것에 의해 달성될 수 있다. 제어 방출 코팅은 상기 언급된 코팅 물질들, 및/또는 예컨대 셸락, 밀랍, 글리코왁스, 피마자 왁스, 카르나우바 왁스, 스테아릴 알콜, 글리세릴 모노스테아레이트, 글리세릴 디스테아레이트, 글리세롤 팔미토스테아레이트, 에틸셀룰로스, 아크릴 수지, dl-폴리락트산, 셀룰로스 아세테이트 부티레이트, 염화 폴리비닐, 폴리비닐 아세테이트, 비닐 피롤리돈, 폴리에틸렌, 폴리메타크릴레이트, 메틸메타크릴레이트, 2-히드록시메타크릴레이트, 메타크릴레이트 히드로겔, 1,3 부틸렌 글리콜, 에틸렌 글리콜 메타크릴레이트, 및/또는 폴리에틸렌 글리콜 중 1종 이상을 포함할 수 있다. 제어 방출 매트릭스 제형에서, 매트릭스 물질은 또한, 예를 들어, 수화된 메틸셀룰로스, 카르나우바 왁스 및 스테아릴 알콜, 카르보폴 934, 실리콘, 글리세릴 트리스테아레이트, 메틸 아크릴레이트-메틸 메타크릴레이트, 폴리비닐 클로라이드, 폴리에틸렌, 및/또는 할로겐화 플루오로카본을 포함할 수 있다.
화합물 및 조성물이 경구로 투여하기 위해 포함될 수 있는 액체 형태는 수용액, 적합한 향미 시럽, 수성 또는 오일 현탁액, 및 식용 오일, 예컨대 목화씨 오일, 참깨 오일, 코코넛 오일 또는 땅콩 오일을 함유한 향미 에멀젼 뿐만 아니라 엘릭시르 및 유사한 제약 비히클을 포함한다.
제약 조성물은 또한 인간 이외의 대상체에 사용하기 위해 의도된 수의학적 조성물로서 제제화될 수 있다. 본 발명에 따른 수의학적 조성물은 예를 들어 요청된 투여 방식, 예를 들어, 비강, 경구, 피내, 피부 또는 비경구에 맞도록 임의의 적절한 형태로 존재할 수 있다. 바람직한 실시양태에서, 조성물은 경구 투여를 위해 의도된 형태로 존재하고, 예를 들어, 가축이 섭식하는 경우 먹이 배급에 혼합되거나, 또는 식사 후 직접 구강에 넣는다. 본 발명의 수의학적 조성물은 비강, 경구 또는 주사액 현탁액 또는 용액 형태, 또는 고체 또는 반고체 형태, 분말, 펠릿, 캡슐, 과립, 당-코팅 환제, 겔룰, 스프레이, 카쉐, 환제, 정제, 페이스트, 임플란트 또는 겔로 존재한다. 특정한 실시양태에서, 조성물은 경구 고체 형태 형태, 바람직하게는 정제로 존재한다. 일부 실시양태에서, 수의학적 조성물은 동물 (예를 들어, 소, 새끼양, 염소, 말 등)의 특정한 종에 대한 유효량의 화합물을 가질 수 있다.
바람직한 실시양태에서, 본 발명의 조성물은 경구 투여를 위해 펠릿 또는 정제로 제제화된다. 이 유형의 제제에 따르면, 이들은 부형제로서 락토스 1수화물, 미세결정질 셀룰로스, 크로스포비돈/포비돈, 아로마, 압축 당 및 스테아르산마그네슘을 포함한다. 조성물이 펠릿 또는 정제 형태로 존재하는 경우, 이들은 예를 들어 1 mg, 2 mg 또는 4 mg 토라세미드 펠릿 또는 정제이다. 이러한 펠릿 또는 정제는 이들이 1일당 1 또는 2회 섭취 시 본 발명에 따른 약량학에 맞추어 재단할 수 있도록 나눌 수 있다. 추가의 바람직한 실시양태에서, 본 발명의 조성물은 비경구 투여를 위해 주사액 또는 현탁액으로 제제화된다. 주사가능한 조성물은 치료 유효량의 토라세미드와 pH 조절제, 완충제, 현탁화제, 가용화제, 안정화제, 등장화제 및/또는 보존제를 혼합함으로써, 및 통상적인 방법에 따른 정맥내, 피하, 근육내 주사제 또는 관류제의 혼합물의 변환에 의해 제조된다. 아마도, 주사가능한 조성물은 통상적인 방법에 따라 동결건조될 수 있다. 현탁화제의 예는 메틸셀룰로스, 폴리소르베이트 80, 히드록시에틸셀룰로스, 크산탄 검, 소듐 카르복시메틸셀룰로스 및 폴리에톡실화 소르비탄 모노라우레이트를 포함한다. 가용화제의 예는 폴리옥시 에틸렌- 고체화된 피마자 오일, 폴리소르베이트 80, 니코틴아미드, 폴리에톡실화 소르비탄 모노라우레이트, 마크로골 및 피마자 오일 지방산의 에틸 에스테르를 포함한다. 더욱이, 보존제가 메틸 p-히드록시벤조에이트, 에틸 p- 히드록시벤조에이트, 소르브산, 페놀, 크레졸 및 클로로크레졸을 포함하며, 안정화제는 아황산나트륨, 소듐 메탈술파이트 및 에테르를 포함한다. 등장화제의 예는 만니톨이다. 주사가능한 현탁액 또는 용액을 제조하는 경우, 이들이 혈액 등장성임을 확실히 하는 것이 바람직하다.
2. 키트
화합물 및 조성물은 임의로 1종 이상의 다른 제약 작용제와 함께 키트에 패키징될 수 있다 (하기 참조). 키트의 비제한적 예는 예를 들어 2종의 정제, 정제 및 분말제, 바이알 내의 좌제 및 액제, 또는 2종의 국부용 크림제를 함유하는 키트를 포함한다. 키트는 대상체에게 단위 용량을 투여하는데 도움을 주는 임의적인 성분, 예컨대 분말 형태를 재구성하기 위한 바이알, 주사용 시린지, 주문제작된 IV 전달 시스템 또는 흡입기를 포함할 수 있다. 추가적으로, 단위 용량 키트는 조성물의 제조 및 투여를 위한 지침서를 함유할 수 있다. 키트는 1명의 대상체를 위해 단일 사용 단위 용량으로서 제조되고, 특정한 대상체를 위해 여러회 사용으로서 제조될 수 있거나 (일정한 용량으로, 또는 개별 화합물은 요법이 진행됨에 따라 효력이 달라질 수 있음), 또는 키트는 다수의 대상체에게 투여하는데 적합한 다중 용량을 함유할 수 있다 ("벌크 패키징"). 키트 구성요소는 카툰, 블리스터 팩, 병, 튜브 등에 조립될 수 있다.
3. 투여량
화합물의 용량은 수많은 인자, 예컨대 투여 방식, 대상체의 연령 및 체중, 및 치료될 대상체의 상태에 따라 달라지고, 궁극적으로는 담당 의사 또는 수의사에 의해 결정될 것이다. 담당 의사 또는 수의사에 의해 결정된 화합물의 이러한 양은 본원 및 청구범위에 "치료 유효량"으로 지칭한다. 예를 들어, 본원에 개시된 화합물의 용량은 전형적으로 1일당 약 1 내지 약 1000 mg의 범위로 존재한다. 바람직하게는, 치료 유효량은 1일당 약 1 mg 내지 약 500 mg의 양으로 존재한다.
본원에 기재된 각각의 약물의 투여는 독립적으로 1일 내지 1년 동안 1일당 1 내지 4회일 수 있고, 심지어 대상체의 삶 동안일 수 있다. 만성인 장기 투여가 지시될 수 있다.
4. 조합 요법
화합물 및 제약 조성물은 조합 요법으로 제제화되고, 사용될 수 있고, 즉, 화합물 및 제약 조성물이 1종 이상의 다른 목적하는 치료제 또는 의료 절차와 동시에, 이전에 또는 이후에 제제화되거나 또는 투여될 수 있다. 조합 요법에 사용하기 위한 요법 (치료제 또는 절차)의 특정한 조합은 목적하는 치료제 및/또는 절차의 적합성 및 달성하고자 하는 목적하는 치료 효과를 고려해야 할 것이다. 사용된 요법은 동일한 장애에 대해 목적하는 효과를 달성할 수 있거나 또는 다른 효과 (예를 들어, 임의의 부작용의 제어)를 달성할 수 있다는 것이 또한 인지될 것이다.
본원에 기재된 화합물과 조합하기 위한 다른 약물의 예는 말라리아의 치료를 위한 제약 (예를 들어, 클로로퀸, 퀴닌, 피리메타민, 술파독신, 메플로퀸, 아르테메터, 루메판트린, 아르테수네이트, 아모디아퀸, 디히드로아르테미시닌, 피페라퀸, 프로구아닐, 독시시클린, 클린다마이신, 아르테미시닌, 아토바쿠온, 말라리아의 치료에 대해 승인된 임의의 다른 치료제, 및 그의 임의의 조합물) 및/또는 크립토스포리디움증의 치료를 위한 제약 (예를 들어, 니타족사니드)을 포함한다. 본원에 기재된 화합물과 조합하기 위한 약물의 다른 예는 상이하지만 아직 연관되거나 또는 관련된 증상 또는 적응증의 치료를 위한 제약을 포함한다. 조합 방법은 함께 또는 개별적으로 제제화된 2종 (또는 그 이상)의 작용제의 사용을 포함할 수 있고, 이는 관련 기술분야의 통상의 기술자에 의해 적절하게 결정된다. 한 예에서, 2종 이상 약물이 작용제의 동시 또는 거의 동시 투여를 위해 함께 제제화된다.
실시예
하기 실시예는 말라리아의 치료에서 대표적인 수의 화합물의 합성 및 이들 화합물의 용도를 설명한다. 따라서, 실시예는 개시내용을 설명하지만 이를 제한하지 않는 것으로 의도된다. 구체적으로 예시되지 않은 추가의 화합물은 본원에 기재된 방법과 조합하여 통상적인 방법을 사용함으로써 합성할 수 있다.
화합물의 합성
물질 및 방법
모든 반응을 N2 또는 아르곤 분위기 하에 수행하였다. 모든 시약 및 용매를 상업적 공급자로부터 입수하고, 제공받은 대로 사용하거나, 또는 각주 참고문헌에 따라 합성하였다. NMR 스펙트럼을 브루커 300 (300 MHz 1H, 75 MHz 13C) 및 브루커 400 (400 MHz 1H, 100 MHz 13C) 분광계에 기록하였다. 양성자 화학적 이동을 NMR 용매를 참조로 ppm (6)로 기록하였다. 데이터는 하기와 같이 보고된다: 화학적 이동, 다중도 (br = 넓은, s = 단일선, d = 이중선, t = 삼중선, q = 사중선, p = 오중선, m = 다중선; 커플링 상수 (Hz); 통합). 달리 나타내지 않는 한 NMR 데이터는 25℃에서 수집하였다. 플래쉬 크로마토그래피는 40-60 펀 (pirn) 실리카 겔 (60 Å 메쉬)을 텔레다인 이스코 콤비플래쉬 Rf에서 사용하여 수행하였다. 순도 분석을 위해, 순도를 모든 실시예에 대해 210 nm에서의 UV 흡광도에 의해 결정하고, 동일성은 SQ 질량 분광계에서 양성 전기분무 이온화에 의해 결정하였다. 하기 방법을 사용하였다: 탠덤 액체 크로마토그래피법/질량 분광측정법 (LCMS)을 워터스 2795 분리 모듈 및 3100 질량 검출기에서 수행하였다. 이동상 A는 물 중 0.01% 포름산으로 이루어진 반면, 이동상 B는 아세토니트릴 중 0.01% 포름산으로 이루어졌다. 구배는 1.75 mL/분에서 2.5, 5 또는 7.5분에 걸쳐 5% 내지 95% 이동상 B를 실행시켰다. 애질런트 포로쉘 120 EC-C18, 2.7 mM, 3.0x30 mm 칼럼을 40℃에서 유지된 칼럼 온도에 의해 사용하였다. 샘플 용액 2.1 mL를 주입하였다. 분석 TLC를 EM 시약 0.25 mm 실리카 겔 60-F 플레이트에서 수행하였다. 시각화를 UV 광 및 수성 과망가니즈산칼륨 (KMnO4) 염색에 이어서 가열에 의해 달성하였다. 정확한 질량 측정을 애질런트 6230 타임-오브-플라이트 질량 분광계에서 (M+H)+로서 수득하였다. 또한, 화합물 순도 및 동일성을 UPLC-MS에 의해 결정하였다. 순도를 210 nm에서의 UV 흡광도에 의해 결정하였다. 동일성을 양성 및 음성 전기분무 이온화에 의해 SQ 질량 분광계로 결정하였다. 이동상 A는 또한 물 중 0.1% 수산화암모늄 또는 0.05% 트리플루오로아세트산으로 이루어지는 반면, 이동상 B는 또한 아세토니트릴 중 0.1% 수산화암모늄 또는 0.06% 트리플루오로아세트산으로 이루어졌다. 구배는 0.9 mL/분에서 2.65분에 걸쳐 5% 내지 95% 이동상 B를 실행시켰다. 액퀴티 BEH C18, 1.7 um, 2.1x50 mm 칼럼을 65℃에서 유지된 칼럼 온도에 의해 사용하였다. 화합물을 1 mg/mL의 공칭 농도로 DMSO 중에 용해시키고, 이 용액의 1.0 μL를 주입하였다. 키랄 분리를 SFC-MS에 의해 수행하였다. 베르게르 G600 초임계 유체 크로마토그래프를 양성 APCI 모드에서 작동하는 워터스 ZQ 단일 사중극자 질량 분광계와 커플링하였다. 20% 이소프로판올로 개질된 액화 CO2를 사용하여, 등용매 분리를 40℃에서 유지된 4.6x100 mm 키랄팩 AD-H 칼럼 상에서 4.0 ml/분으로 5.0분 동안 수행하였다. 화합물을 1 mg/mL의 공칭 농도로 메탄올 중에 용해시키고, 이 용액의 10 μL를 주입하였다. 하기의 합성 실시예는 특히 제한되지 않으며, 본 발명의 화합물을 합성하기 위한 다른 방법론은 관련 기술분야의 통상의 기술자에게 널리 공지되어 있다.
약어
하기 합성 실시예에 걸쳐, 다양한 약어가 사용되며, 관련 기술분야의 통상의 기술자에게 널리 공지되어 있다. 표 2는 실시예에 걸쳐 사용된 약어의 다양한 예 및 상응하는 참조를 설명한다.
표 2
Figure pct00018
실시예 1: (3S,4R,8R,9S,10S)-N-(4-시클로프로폭시페닐)-10-((디메틸아미노)메틸)-3,4- 디히드록시-9-(4-(페닐에티닐)페닐)-1,6-디아자비시클로[6.2.0]데칸-6-카르복스아미드 ("E1")
Figure pct00019
중간체 1: ((8R,9R,10S,Z)-9-(4-브로모페닐)-6-((2-니트로페닐)술포닐)-1,6-디아자비시클로[6.2.0]데스-3-엔-10-일)메탄올.
DCM (27.00 mL) 중 (8R,9R,10S,Z)-10-((비스(4-메톡시페닐)(페닐)메톡시)메틸)-9-(4-브로모페닐)-6-((2-니트로페닐)술포닐)-1,6-디아자비시클로[6.2.0]데스-3-엔 (2.00 g, 2.66 mmol) (Journal of Organic Chemistry　(2012),　77(17),　7187-7211; WO　2015070204)의 용액에 TFA (3.03 g, 26.60 mmol, 1.97 mL)를 첨가하였다. 혼합물을 15℃에서 20시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 NaHCO3 용액 (100 mL)의 첨가에 의해 켄칭한 다음, DCM 180 mL (3 X 60 mL)로 추출하였다. 합한 유기 층을 [NaSO4] 상에서 건조시키고, 여과하고, 감압 하에 농축시켜 잔류물을 수득하였다. 잔류물을 칼럼 크로마토그래피 (SiO2, 석유 에테르: DCM=1:1 내지 DCM:MeOH=10:1)에 의해 정제하여 중간체 1 (1.47g, 조 물질)을 흑색 고체로서 수득하였다. 반응 생성물의 존재를 NMR 및 LCMS에 의해 확인하였다.
중간체 2: 2-(((8R,9S,10S,Z)-9-(4-브로모페닐)-6-((2-니트로페닐)술포닐)-1,6-디아자비시클로[6.2.0]데스-3-엔-10-일)메틸)이소인돌린-1,3-디온.
탈기하고 N2로 퍼징한 THF (5 mL) 중 트리페닐포스핀 (1.52 g, 5.78 mmol)의 혼합물에 디이소프로필 아조디카르복실레이트 (1.17 g, 5.78 mmol, 1.12 mL)를 첨가하였다. 0℃에서 N2 분위기 하에 교반된 이 혼합물에 탈기하고 N2로 퍼징한 THF (5 mL) 중 중간체 1 (1.47 g, 2.89 mmol, 1.00 당량) 및 이소인돌린-1,3-디온 (637.81 mg, 4.34 mmol, 1.50 당량)의 혼합물을 첨가하였다. 혼합물을 N2 분위기 하에 16℃에서 18시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 H2O (20 mL)의 첨가에 의해 켄칭한 다음, DCM (3 X 20 mL)으로 추출하였다. 합한 유기 층을 [Na2SO4] 상에서 건조시키고, 여과하고, 감압 하에 농축시켜 잔류물을 수득하였다. 잔류물을 칼럼 크로마토그래피 (SiO2, 석유 에테르: 에틸아세테이트 =5:1에서 2:1)에 의해 정제하여 중간체 2 (1.26 g, 1.98 mmol, 68.39% 수율)를 갈색 고체로서 수득하였으며, 이는 NMR 및 LCMS에 의해 확인된 바와 같다.
중간체 3: 2-(((8R,9S,10S)-9-(4-브로모페닐)-3,4-디히드록시-6-((2-니트로페닐)술포닐)-1,6-디아자비시클로[6.2.0]데칸-10-일)메틸)이소인돌린-1,3-디온
아세톤/물 (15.00 mL) 중 중간체 2 (1.26 g, 1.98 mmol)의 용액에 N-메틸모르폴린 N-옥시드 (463.09 mg, 3.95 mmol, 417.20 μL)에 이어서 OsO4 (5.02 mg, 19.76 μmol, 1.03 μL)를 첨가하였다. 혼합물을 15℃에서 1.5시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 [Na2SO4] 상에서 건조시키고, 여과하고, 감압 하에 농축시켰다. 잔류물을 칼럼 크로마토그래피 (SiO2, 석유 에테르/에틸 아세테이트 =3/1에서 0:1)에 의해 정제하여 중간체 3 (1.11 g, 1.65 mmol, 83.48% 수율)을 백색 고체로서 수득하였으며, 이는 LCMS 및 NMR에 의해 확인된 바와 같다.
중간체 4a 및 4b: 2-(((3aR,6aR,7S,8R,10aS)-7-(4-브로모페닐)-2,2-디메틸-5-((2-니트로페닐)술포닐)옥타히드로-3aH-아제토[1,2-a][1,3]디옥솔로[4,5-f][1,4]디아조신-8-일)메틸)이소인돌린-1,3-디온 (중간체 4a) 및 2-(((3aS,6aS,7S,8R,10aS)-7-(4-브로모페닐)-2,2-디메틸-5-((2-니트로페닐)술포닐)옥타히드로-3aH-아제토[1,2-a][1,3]디옥솔로[4,5-f][1,4]디아조신-8-일)메틸)이소인돌린-1,3-디온 (중간체 4b).
DCM (10.00 mL) 중 중간체 3 (880.00 mg, 1.31 mmol) 및 2,2-디메톡시프로판 (272.97 mg, 2.62 mmol, 321.14 μL)의 용액에 TsOH (225.66 mg, 1.31 mmol)를 첨가하였다. 혼합물을 15℃에서 교반하였다. 20시간 후, 반응 혼합물을 감압 하에 농축시켜 잔류물을 수득하였다. 잔류물을 정제용-TLC (SiO2, 석유 에테르/에틸 아세테이트 = 1:1)에 의해 정제하여 각각의 시스-디올, 중간체 4a (덜 극성, 53.00 mg, 74.48 μmol, 5.68% 수율)를 백색 고체로서, 그리고 중간체 4b (더 극성, 260.00 mg, 365.38 μmol, 27.88% 수율)를 백색 고체로서 수득하였으며, 이는 NMR 및 LCMS에 의해 확인된 바와 같다.
중간체 5: ((3aR,6aR,7S,8S,10aS)-7-(4-브로모페닐)-2,2-디메틸-5-((2-니트로페닐)술포닐)옥타히드로-3aH-아제토[1,2-a][1,3]디옥솔로[4,5-f][1,4]디아조신-8-일)메탄아민.
에탄올 (5.00 mL) 중 중간체 4b (360.00 mg, 505.92 μmol)의 용액에 히드라진 수화물 (37.99 mg, 758.88 μmol, 36.88 μL)을 첨가하였다. 70℃에서 1.5시간 동안 교반한 후, 반응 혼합물을 셀라이트를 통해 여과하고, 감압 하에 농축시켜 중간체 5 (239.00 mg, 411.02 μmol, 81.24% 수율)를 황색 고체로서 수득하였으며, 이는 NMR 및 LCMS에 의해 확인된 바와 같다.
중간체 6: 1-((3aR,6aR,7S,8S,10aS)-7-(4-브로모페닐)-2,2-디메틸-5-((2-니트로페닐)술포닐)옥타히드로-3aH-아제토[1,2-a][1,3]디옥솔로[4,5-f][1,4]디아조신-8-일)-N,N-디메틸메탄아민.
DCM (500 μL) 중 중간체 5 (239.00 mg, 411.02 μmol) 및 포름알데히드 (200.47 mg, 2.47 mmol, 183.92 μL)의 용액에 MgSO4 (494.74 mg, 4.11 mmol) 및 아세트산 (49.36 mg, 822.04 μmol, 47.01 μL)을 첨가하였다. 20분 후, 소듐 트리아세톡시보로히드라이드 (60.32 mg, 1.23 mmol)를 첨가하고, 혼합물을 15℃에서 23시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 셀라이트에 의해 여과하고, 감압 하에 농축하여 잔류물을 수득하였다. 잔류물을 정제용-TLC (SiO2, DCM: MeOH = 10:1)에 의해 정제하여 중간체 6 (210.00 mg, 344.53 μmol, 83.82% 수율)을 황색 오일로서 수득하였으며, 이는 LCMS에 의해 확인된 바와 같다.
중간체 7: 1-((3aR,6aR,7R,8S,10aS)-7-(4-브로모페닐)-2,2-디메틸옥타히드로-3aH-아제토[1,2-a][1,3]디옥솔로[4,5-f][1,4]디아조신-8-일)-N,N-디메틸메탄아민.
CH3CN (2.00 mL) 중 중간체 6 (210.00 mg, 344.53 μmol)의 용액에 벤젠티올 (17.08 mg, 155.04 μmol, 15.82 μL)을 첨가한 다음, Cs2CO3 (224.51 mg, 689.06 μmol)을 첨가하였다. 혼합물을 N2 분위기 하에 40℃에서 1.5시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 H2O (5 mL)의 첨가에 의해 켄칭하고, DCM 15 mL (3 X 5 mL)로 추출하였다. 합한 유기 층을 [Na2SO4] 상에서 건조시키고, 여과하고, 감압 하에 농축시켜 잔류물을 수득하였다. 잔류물을 정제용-TLC (SiO2, DCM: MeOH = 10:1)에 의해 정제하여 중간체 7 (72.00 mg, 169.66 μmol, 49.24% 수율)을 황색 오일로서 수득하였으며, 이는 NMR 및 LCMS에 의해 확인된 바와 같다.
중간체 8: (3aR,6aR,7S,8S,10aS)-7-(4-브로모페닐)-N-(4-시클로프로폭시페닐)-8-((디메틸아미노)메틸)-2,2-디메틸헥사히드로-3aH-아제토[1,2-a][1,3]디옥솔로[4,5-f][1,4]디아조신-5(4H)-카르복스아미드.
DCM (2.00 mL) 중 중간체 7 (48.00 mg, 113.11 μmol)의 용액에 N2 분위기 하에 TEA (5.72 mg, 56.55 μmol, 7.84 μL) 및 1-(시클로프로폭시)-4-이소시아네이토-벤젠 (23.78 mg, 135.73 μmol)을 첨가하였다. 15℃에서 22시간 동안 교반한 후, 반응 혼합물을 H2O (5 mL)의 첨가에 의해 켄칭한 다음, DCM 15 mL(3 x 5 mL)로 추출하였다. 합한 유기 층을 감압 하에 농축시켜 잔류물을 수득하였다. 잔류물을 정제용-TLC (SiO2, DCM: MeOH = 10:1)에 의해 정제하여 중간체 8 (29.40 mg, 49.04 μmol, 43.35% 수율)을 연한색 오일로서 수득하였으며, 이는 LCMS에 의해 확인된 바와 같다.
중간체 9: (3aR,6aR,7S,8S,10aS)-N-(4-시클로프로폭시페닐)-8-((디메틸아미노)메틸)-2,2-디메틸-7-(4-(페닐에티닐)페닐)헥사히드로-3aH-아제토[1,2-a][1,3]디옥솔로[4,5-f][1,4]디아조신-5(4H)-카르복스아미드.
N2 분위기 하에 CH3CN (1.00 mL) 중 중간체 8 (29.00 mg, 48.37 μmol)의 용액에 TEA (97.89 mg, 967.38 μmol, 134.09 μL) 및 에티닐벤젠 (24.70 mg, 241.84 μmol, 26.56 μL) 및 XPhos Pd G3 (6.14 mg, 7.26 μmol)의 혼합물을 첨가하였다. 70℃에서 1시간 동안 교반한 후, 반응 혼합물을 H2O (4 mL)의 첨가에 의해 켄칭한 다음, DCM 15 mL (3 x 5 mL)로 추출하였다. 합한 유기 층을 Na2SO4 상에서 건조시키고, 여과하고, 감압 하에 농축시켜 중간체 9 (30.00 mg)를 연한색 오일로서 수득하였으며, 이는 LCMS에 의해 확인된 바와 같다.
E1의 합성: (3S,4R,8R,9S,10S)-N-(4-시클로프로폭시페닐)-10-((디메틸아미노)메틸)-3,4-디히드록시-9-(4-(페닐에티닐)페닐)-1,6-디아자비시클로[6.2.0]데칸-6-카르복스아미드.
CH3CN (500.00 μL) 중 중간체 9 (20.00 mg, 32.22 μmol)의 용액에 1 M HCl (500.00 μL)을 첨가하였다. 15℃에서 18시간 동안 교반한 후, 반응 혼합물을 감압 하에 농축시켜 잔류물을 수득하였다. 잔류물을 정제용 HPLC (칼럼: 워터스 엑스브리지 정제용 OBD C18 150*30 5u; A: 물 (0.225% 포름산) B: 아세토니트릴)에 의해 정제하여 화합물 E1 (8.20 mg, 14.12 μmol, 43.83% 수율)을 황색 고체로서 수득하였다.
1H NMR (400 MHz, 클로로포름-d) δ ppm 0.73 (d, J=4.52 Hz, 4 H) 1.26 (s, 1 H) 2.32 (s, 6 H) 2.60 - 2.70 (m, 2 H) 2.86 - 2.92 (m, 1 H) 2.96 - 3.05 (m, 2 H) 3.22 (br d, J=15.56 Hz, 1 H) 3.52 - 3.65 (m, 3 H) 3.65 - 3.75 (m, 2 H) 3.86 (br s, 2 H) 3.97 - 4.05 (m, 1 H) 4.13 (br s, 1 H) 4.31 (br d, J=9.54 Hz, 1 H) 6.95 (d, J=9.03 Hz, 2 H) 7.24 (d, J=9.03 Hz, 2 H) 7.32 - 7.46 (m, 6 H) 7.49 - 7.57 (m, 4 H) 8.37 (br s, 1 H) 8.56 (br s, 1 H).
실시예 2: (3S,4R,8R,9S,10S)-10-((디메틸아미노)메틸)-3,4-디메톡시-N-(4-메톡시페닐)-9-(4-(페닐에티닐)페닐)-1,6-디아자비시클로[6.2.0]데칸-6-카르복스아미드 ("E2")
Figure pct00020
중간체 10: 2-(((3S,4R,8R,9S,10S)-9-(4-브로모페닐)-3,4-디히드록시-6-((2-니트로페닐)술포닐)-1,6-디아자비시클로[6.2.0]데칸-10-일)메틸)이소인돌린-1,3-디온.
CH3CN (2.00 mL) 및 1 M HCl (2.00 mL) 중 중간체 4a (170.00 mg, 238.90 μmol)의 용액을 20℃에서 18시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 감압 하에 농축시켜 잔류물을 수득하였다. 잔류물을 정제용-TLC (SiO2, DCM: MeOH = 10:1)에 의해 정제하여 중간체 10 (140.00 mg, 208.49 μmol, 87.27% 수율)을 백색 고체로서 수득하였으며, 이는 NMR에 의해 확인된 바와 같다.
중간체 11: 2-(((3S,4R,8R,9S,10S)-9-(4-브로모페닐)-3,4-디메톡시-6-((2-니트로페닐)술포닐)-1,6-디아자비시클로[6.2.0]데칸-10-일)메틸)이소인돌린-1,3-디온.
DCM (4.00 mL) 중 중간체 10 (125.00 mg, 186.15 μmol)의 용액에 N2 분위기 하에 0℃에서 트리메틸옥소늄 테트라플루오로보레이트 (137.67 mg, 930.75 μmol) 및 N1,N1,N8,N8-테트라메틸나프탈렌-1,8-디아민 (239.36 mg, 1.12 mmol)을 첨가하였다. 실온 (15℃)에서 18시간 동안 교반한 후, 반응 혼합물을 감압 하에 농축시켜 잔류물을 수득하였다. 잔류물을 정제용-TLC (SiO2, 에틸 아세테이트)에 의해 정제하여 중간체 11 (100.00 mg, 142.94 μmol, 76.79% 수율)을 백색 고체로서 수득하였으며, 이는 NMR에 의해 확인된 바와 같다.
중간체 12: ((3S,4R,8R,9S,10S)-9-(4-브로모페닐)-3,4-디메톡시-6-((2-니트로페닐)술포닐)-1,6-디아자비시클로[6.2.0]데칸-10-일)메탄아민.
에탄올 (3.00 mL) 중 중간체 11 (100.00 mg, 142.94 μmol)의 용액에 N2H4.H2O (10.73 mg, 214.42 μmol, 10.42 μL)을 첨가하였다. 70℃에서 1시간 동안 교반한 후, 반응 혼합물을 셀라이트를 통해 여과하고, 감압 하에 농축시켜 조 중간체 12 (87.00 mg)를 황색 고체로서 수득하였으며, 이는 NMR에 의해 확인된 바와 같다.
중간체 13: 1-((3S,4R,8R,9S,10S)-9-(4-브로모페닐)-3,4-디메톡시-6-((2-니트로페닐)술포닐)-1,6-디아자비시클로[6.2.0]데칸-10-일)-N,N-디메틸메탄아민.
DCM (2.00 mL) 중 중간체 12 (87.00 mg, 152.77 μmol)의 용액에 HCHO (27.53 mg, 916.64 μmol, 25.25 μL), MgSO4 (183.89 mg, 1.53 mmol), NaBH(OAc)3 (97.14 mg, 458.32 μmol) 및 AcOH (18.35 mg, 305.55 μmol, 17.47 μL)를 첨가하였다. 15℃에서 3시간 동안 교반한 후, 반응 혼합물을 셀라이트를 통해 여과하고, 감압 하에 농축시켜 잔류물을 수득하였다. 잔류물을 정제용-TLC (SiO2, DCM: MeOH = 10:1)에 의해 정제하여 중간체 13 (46.00 mg, 76.98 μmol, 50.39% 수율)을 백색 오일로서 수득하였다.
중간체 14: ((3S,4R,8R,9S,10S)-9-(4-브로모페닐)-3,4-디메톡시-1,6-디아자비시클로[6.2.0]데칸-10-일)메탄아민.
CH3CN (2.00 mL) 중 중간체 13 (46.00 mg, 76.98 μmol)의 용액에 벤젠티올 (12.72 mg, 115.48 μmol, 11.78 μL) 및 Cs2CO3 (50.17 mg, 153.97 μmol)을 첨가하였다. 40℃에서 1.5시간 동안 교반한 후, N2 분위기 하에, 반응 혼합물을 H2O (2 mL)의 첨가에 의해 켄칭하고, DCM 15 mL (3 x 5 mL)로 추출하였다. 합한 유기 층을 [Na2SO4] 상에서 건조시키고, 여과하고, 감압 하에 농축시켜 잔류물을 수득하였다. 잔류물을 정제용-TLC (SiO2, DCM: MeOH = 10:1)에 의해 정제하여 중간체 14 (17.00 mg, 41.23 μmol, 53.55% 수율)를 백색 오일로서 수득하였으며, 이는 LCMS에 의해 확인된 바와 같다.
중간체 15: (3S,4R,8R,9S,10S)-10-(아미노메틸)-9-(4-브로모페닐)-3,4-디메톡시-N-(4-메톡시페닐)-1,6-디아자비시클로[6.2.0]데칸-6-카르복스아미드.
DCM (2.00 mL) 중 중간체 14 (17.00 mg, 41.23 μmol)의 용액에 TEA (2.09 mg, 20.61 μmol, 2.86 μL) 및 1-이소시아네이토-4-메톡시-벤젠 (6.15 mg, 41.23 μmol, 5.30 μL)을 첨가하였다. N2 분위기 하에, 혼합물을 15℃에서 2.5시간 동안 교반한 후, 반응 혼합물을 H2O (5 mL)의 첨가에 의해 켄칭한 다음, DCM 15 mL (3 x 5 mL)로 추출하였다. 합한 유기 층을 감압 하에 농축시켜 잔류물을 수득하였다. 잔류물을 정제용-TLC (DCM:MeOH=10:1)에 의해 정제하여 중간체 15 (33.00 mg, 조 물질)를 투명한 오일로서 수득하였으며, 이는 LCMS에 의해 확인된 바와 같다.
E2의 합성: (3S,4R,8R,9S,10S)-10-((디메틸아미노)메틸)-3,4-디메톡시-N-(4-메톡시페닐)-9-(4-(페닐에티닐)페닐)-1,6-디아자비시클로[6.2.0]데칸-6-카르복스아미드
아세토니트릴 (2.00 mL) 중 중간체 15 (33.00 mg, 58.77 μmol)의 용액에 N2 분위기 하에 TEA (118.94 mg, 1.18 mmol, 162.93 μL) 및 XPhos Pd G3 (7.46 mg, 8.82 μmol)을 첨가하였다. 70℃에서 1시간 동안 교반한 후, 반응 혼합물을 H2O (2 mL)의 첨가에 의해 켄칭한 다음, DCM 15 mL (3 x 5 mL)로 추출하였다. 합한 유기 층을 [Na2SO4] 상에서 건조시키고, 여과하고, 감압 하에 농축시켜 잔류물을 수득하였다. 잔류물을 정제용-TLC (SiO2, DCM: MeOH = 10:1)에 이어서 정제용 HPLC (칼럼: 워터스 엑스브리지 정제용 OBD C18 150*30 5u; A: 물 (0.225% 포름산) B: 아세토니트릴)에 의해 정제하여 4.4 mg, 7.55 μmol, 12.85% 수율을 백색 고체로서 수득하였다. 구조를 LCMS 및 NMR에 의해 확인하였다.
1H NMR (400 MHz, 클로로포름-d) δ ppm 2.06 (s, 6 H) 2.39 (br s, 2 H) 2.58 (br s, 2 H) 3.03 - 3.14 (m, 1 H) 3.30 (br s, 1 H) 3.48 (s, 4 H) 3.51 - 3.58 (m, 2 H) 3.61 - 3.67 (m, 4 H) 3.78 (s, 3 H) 3.89 - 4.12 (m, 3 H) 6.83 (d, J=8.91 Hz, 2 H) 7.18 (d, J=8.78 Hz, 2 H) 7.36 (br d, J=5.40 Hz, 3 H) 7.43 - 7.47 (m, 2 H) 7.48 - 7.51 (m, 2 H) 7.52 - 7.56 (m, 2 H) 7.99 (br s, 1 H).
실시예 3: (4S,8R,9R,10S)-4-(디메틸아미노)-10-(히드록시메틸)-N-(4-메톡시페닐)-9-(4-(페닐에티닐)페닐)-1,6-디아자비시클로[6.2.0]데칸-6-카르복스아미드 ("E3")
Figure pct00021
중간체 16: tert-부틸 N-[(1S)-3-[(2R,3R,4S)-3-(4-브로모페닐)-2-[[(2-니트로페닐)술포닐아미노]메틸]-4-(트리틸옥시메틸)아제티딘-1-일]-1-[[tert-부틸(디페닐)실릴]옥시메틸]프로필]카르바메이트.
DCM (40.00 mL) 중 N-(((2R,3R,4S)-3-(4-브로모페닐)-4-((트리틸옥시)메틸)아제티딘-2-일)메틸)-2-니트로벤젠술폰아미드 (WO2015070204) (1.20 g, 1.72 mmol) 및 (S)-tert-부틸 (1-((tert-부틸디페닐실릴)옥시)-4-옥소부탄-2-일)카르바메이트 (US 20150266867) (911.52 mg, 2.06 mmol)의 용액에 MgSO4 (2.07 g, 17.20 mmol) 및 NaBH(OAc)3 (729.07 mg, 3.44 mmol)을 첨가하였다. 15℃에서 2시간 동안 교반한 후, 반응 혼합물을 포화 NaHCO3 수성 (15 mL)의 첨가에 의해 켄칭하고, DCM (2 x 5 mL)으로 추출하였다. 합한 유기 층을 Na2SO4 상에서 건조시키고, 여과하고, 감압 하에 농축시켜 잔류물을 수득하였다. 잔류물을 칼럼 크로마토그래피 (SiO2, 석유 에테르/에틸 아세테이트 =20:1에서 3:1)에 의해 정제하여 중간체 16 (2.00 g)을 백색 고체로서 수득하였다:
1H NMR (400MHz, 클로로포름-d) δ = 7.81 - 7.69 (m, 3H), 7.66 - 7.58 (m, 6H), 7.45 - 7.34 (m, 8H), 7.15 - 7.04 (m, 18H), 4.87 - 4.76 (m, 2H), 3.68 - 3.59 (m, 3H), 3.50 - 3.42 (m, 3H), 3.14 (br. s., 1H), 3.03 - 2.97 (m, 1H), 2.95 - 2.82 (m, 2H), 2.46 (br. s., 2H), 1.40 (s, 9H), 1.05 (s, 9H).
중간체 17: tert-부틸 ((S)-4-((2R,3R,4S)-3-(4-브로모페닐)-2-((2-니트로페닐술폰아미도)메틸)-4-((트리틸옥시)메틸)아제티딘-1-일)-1-히드록시부탄-2-일)카르바메이트
THF (6 mL) 중 중간체 16 (500.00 mg, 444.74 μmol)의 용액에 15℃에서 TBAF (174.42 mg, 667.11 μmol)을 첨가하였다. 15℃에서 1시간 동안 교반한 후, 반응 혼합물을 감압 하에 농축시켜 잔류물을 수득하였다. 잔류물을 칼럼 크로마토그래피 (SiO2, DCM: MeOH =100:1에서 20:1)에 의해 정제하여 중간체 17 (300.00 mg, 338.65 μmol, 76.15% 수율)을 백색 고체로서 수득하였다:
1H NMR (400MHz, 클로로포름-d) δ = 7.83 (dd, J=7.8, 17.3 Hz, 2H), 7.76 - 7.63 (m, 2H), 7.22 - 7.12 (m, 15H), 7.01 (d, J=8.0 Hz, 2H), 5.05 (br. s., 1H), 4.45 (br. s., 1H), 3.78 - 3.70 (m, 1H), 3.59 (br. s., 3H), 3.43 (d, J=9.5 Hz, 1H), 3.33 - 3.16 (m, 2H), 3.05 (d, J=6.0 Hz, 2H), 2.96 - 2.87 (m, 1H), 2.83 - 2.72 (m, 1H), 2.58 - 2.48 (m, 1H), 1.74 (dd, J=4.8, 14.8 Hz, 1H), 1.43 (s, 9H).
중간체 18: N-[[(2R,3R,4S)-1-[(3S)-3-아미노-4-히드록시-부틸]-3-(4-브로모페닐)-4-(트리틸옥시메틸)아제티딘-2-일]메틸]-2-니트로-벤젠술폰아미드.
DCM (16.00 mL) 중 중간체 17 (800.00 mg, 903.08 μmol)의 용액에 TMSOTf (602.15 mg, 2.71 mmol, 489.55 μL) 및 2,6-루티딘 (387.06 mg, 3.61 mmol, 420.72 μL, 4 당량)을 첨가하였다. 15℃에서 16시간 동안 교반한 후, 반응 혼합물을 감압 하에 농축시켜 잔류물을 수득하였다. 잔류물을 칼럼 크로마토그래피 (SiO2, DCM: MeOH = 1:0에서 20:1까지)에 의해 정제하여 중간체 18 (700 mg, 조 물질)을 백색 고체 (TEA을 함유)로서 수득하였다:
1H NMR (400MHz, 클로로포름-d) δ = 7.85 (td, J=2.3, 4.7 Hz, 1H), 7.76 - 7.72 (m, 1H), 7.70 - 7.63 (m, 2H), 7.25 - 7.16 (m, 15H), 6.98 (d, J=8.4 Hz, 2H), 3.72 - 3.60 (m, 3H), 3.52 - 3.42 (m, 3H), 3.27 (dd, J=6.6, 14.1 Hz, 1H), 3.14 - 3.00 (m, 3H), 2.83 - 2.68 (m, 2H), 1.85 - 1.62 (m, 2H)
중간체 19: N-[[(2R,3R,4S)-3-(4-브로모페닐)-1-[(3S)-3-(디메틸아미노)-4-히드록시-부틸]-4-(트리틸옥시메틸)아제티딘-2-일]메틸]-2-니트로-벤젠술폰아미드.
DCM (15.00 mL) 중 중간체 18 (700.00 mg, 890.88 μmol)의 용액에 HCHO (86.77 mg, 1.07 mmol, 79.61 μL, 37% 순도), MgSO4 (1.07 g, 8.91 mmol)를 첨가한 다음, NaBH(OAc)3 (377.63 mg, 1.78 mmol)을 조금씩 첨가하였다. 15℃에서 1시간 동안 교반한 후, 반응 혼합물을 포화 NaHCO3 수성 (100 mL)의 첨가에 의해 켄칭하고, DCM (2 x 30 mL)으로 추출하였다. 합한 유기 층을 Na2SO4 상에서 건조시키고, 여과하고, 감압 하에 농축시켜 잔류물을 수득하였다. 잔류물을 칼럼 크로마토그래피 (SiO2, DCM: MeOH =1:0에서 15:1)에 의해 정제하여 중간체 19 (500 mg, 614.40 μmol, 68.97% 수율)를 백색 고체로서 수득하였다:
1H NMR (400MHz, 클로로포름-d) δ = 7.87 (dd, J=1.5, 7.5 Hz, 1H), 7.78 - 7.73 (m, 1H), 7.72 - 7.61 (m, 2H), 7.23 - 7.12 (m, 18H), 7.05 (d, J=8.0 Hz, 2H), 3.64 - 3.54 (m, 3H), 3.22 - 3.06 (m, 4H), 3.03 - 2.98 (m, 1H), 2.87 - 2.70 (m, 2H), 2.56 (td, J=6.0, 12.0 Hz, 1H), 2.45 (br. s., 1H), 2.22 (s, 6H), 1.57 (d, J=14.1 Hz, 1H), 1.41 (d, J=6.0 Hz, 1H)
중간체 20: (4S,8R,9R,10S)-9-(4-브로모페닐)-N,N-디메틸-6-(2-니트로페닐)술포닐-10-(트리틸옥시메틸)-1,6-디아자비시클로[6.2.0]데칸-4-아민.
0℃에서 THF (19 ml) 중 트리페닐포스핀 (1 g, 3.76 mmol)의 용액에 디이소프로필 아조디카르복실레이트 (0.72 mL, 3.76 mmol)를 천천히 첨가하였다. 이어서, 이 혼합물을 0℃에서 THF (75 mL) 중 중간체 19 (500 mg, 614.40 μmol)의 용액에 첨가하였다. 15℃에서 4시간 동안 교반한 후, 반응 혼합물을 감압 하에 농축시켜 잔류물을 수득하였다. 잔류물을 칼럼 크로마토그래피 (SiO2, DCM: MeOH = 20:1)에 의해 정제하여 중간체 20 (200.00 mg, 251.33 μmol, 40.91% 수율)을 백색 고체로서 수득하였다:
1H NMR (400MHz, 클로로포름-d) δ = 8.14 (d, J=7.5 Hz, 1H), 7.65 - 7.55 (m, 3H), 7.25 - 7.19 (m, 19H), 3.62 - 3.50 (m, 4H), 3.42 (br. s., 1H), 3.17 - 2.98 (m, 4H), 2.85 (dd, J=7.1, 9.3 Hz, 1H), 2.69 - 2.60 (m, 1H), 2.44 - 2.31 (m, 2H), 2.04 (br. s., 6H), 1.89 (br. s., 1H)
중간체 21: (4S,8R,9R,10S)-9-(4-브로모페닐)-N,N-디메틸-10-(트리틸옥시메틸)-1,6-디아자비시클로[6.2.0]데칸-4-아민.
아세토니트릴 (3.00 mL) 중 중간체 20 (150.00 mg, 188.49 μmol)의 용액에 Cs2CO3 (368.49 mg, 1.13 mmol) 및 벤젠티올 (83.07 mg, 753.96 μmol, 76.92 μL)을 첨가하였다. 40℃에서 16시간 동안 교반한 후, 반응 혼합물을 물 (15 mL)의 첨가에 의해 켄칭하고, 에틸 아세테이트 (2 x 5 mL)로 추출하였다. 합한 유기 층을 염수 (2 x 5 mL)로 세척하고, Na2SO4 상에서 건조시키고, 여과하고, 감압 하에 농축시켜 잔류물을 수득하였다. 잔류물을 정제용-TLC (SiO2, DCM: MeOH = 10:1)에 의해 정제하여 중간체 21 (90.00 mg, 147.39 μmol, 78.20% 수율)을 백색 고체로서 수득하였으며, 이를 직접 사용하였다.
중간체 22: (4S,8R,9R,10S)-9-(4-브로모페닐)-4-(디메틸아미노)-N-(4-메톡시페닐)-10-(트리틸옥시메틸)-1,6-디아자비시클로[6.2.0]데칸-6-카르복스아미드.
DCM (3.00 mL) 중 중간체 21 (90.00 mg, 147.39 μmol)의 용액에 1-이소시아네이토-4-메톡시-벤젠 (26.38 mg, 176.87 μmol)을 첨가하였다. 15℃에서 1시간 동안 교반한 후, 반응 혼합물을 물 (15 mL)의 첨가에 의해 켄칭하고, DCM (2 x 5 mL)으로 추출하였다. 합한 유기 층을 염수 (2 x 10 mL)로 세척하고, Na2SO4 상에서 건조시키고, 여과하고, 감압 하에 농축시켜 잔류물을 수득하였다. 잔류물을 정제용-TLC (SiO2, DCM: MeOH = 20:1)에 의해 정제하여 중간체 22 (90.00 mg, 118.46 μmol, 80.37% 수율)를 백색 고체로서 수득하였다:
1H NMR (400MHz, 클로로포름-d) δ = 7.28 - 7.18 (m, 21H), 6.82 (d, J=8.8 Hz, 2H), 4.15 - 4.06 (m, 1H), 3.77 (s, 3H), 3.64 - 3.47 (m, 4H), 3.18 - 2.98 (m, 3H), 2.92 - 2.82 (m, 2H), 2.70 (d, J=13.2 Hz, 1H), 2.43 - 2.33 (m, 7H), 2.10 (br. s., 1H), 1.95 (br. s., 1H)
중간체 23: (4S,8R,9R,10S)-4-(디메틸아미노)-N-(4-메톡시페닐)-9-[4-(2-페닐에티닐)페닐]-10-(트리틸옥시메틸)-1,6-디아자비시클로[6.2.0]데칸-6-카르복스아미드.
아세토니트릴 (1 mL) 중 중간체 22 (64.00 mg, 84.24 μmol) 및 에티닐벤젠 (25.81 mg, 252.71 μmol)의 용액에 XPhos Pd G3 (7.13 mg, 8.42 μmol) 및 Cs2CO3 (54.89 mg, 168.47 μmol)을 첨가하였다. 70℃에서 2시간 동안 교반한 후, 반응 혼합물을 농축시켜 잔류물을 수득하였다. 잔류물을 갈색 고체로서의 정제용-TLC (에틸 아세테이트: 메탄올 = 10 :1)에 의해 정제하여 중간체 23 (47.00 mg, 60.18 μmol, 71.44% 수율)을 수득하였다.
1H NMR (400MHz, MeOD-d4) δ 7.54 (d, J = 4.8 Hz, 2H), 7.38-7.35(m, 7H), 7.33-7.21 (m, 18H), 6.83 (d, J = 8.8 Hz, 2H), 4.13 (s, 1H), 3.77 (s, 3H), 3.61-3.52 (m, 4H),3.19-3.17 (m, 2H), 2.94-2.90 (m, 2H), 2.73-2.44 (m, 1H), 2.17-1.97 (m, 1H).
E3의 합성: (4S,8R,9R,10S)-4-(디메틸아미노)-10-(히드록시메틸)-N-(4-메톡시페닐)-9-[4-(2-페닐에티닐)페닐]-1,6-디아자비시클로[6.2.0]데칸-6-카르복스아미드.
DCM (1 mL) 중 중간체 23 (40.00 mg, 51.22 μmol)의 용액에 TFA (58.40 mg, 512.17 μmol, 37.92 μL)를 첨가하였다. 25℃에서 12시간 동안 교반한 후, 반응 혼합물을 포화 NaHCO3에 의해 켄칭하고, DCM (3 x 5 mL)으로 추출하여 유기 층을 수득하였다. 층을 무수 Na2SO4 상에서 건조시키고, 농축시켜 잔류물을 수득하였다. 잔류물을 정제용 HPLC (칼럼: 워터스 엑스브리지 정제용 OBD C18 150*30 5u; A: 물 (0.225% 포름산) B: 아세토니트릴)에 의해 정제하여 화합물 E3 (21.70 mg, 40.28 μmol, 78.6% 수율)을 백색 고체로서 수득하였다.
HRMS (ESI): 계산치 C33H38N4O3 [M + H]+ 539.29, 실측치 539.30.
1H NMR: (400MHz, MeOD-d4) δ 7.60(d, J = 4.8 Hz, 2H), 7.49-7.46 (m, 4H), 7.38-7.36 (m, 2H), 7.23-7.24 (d, J = 8.8 Hz, 2H), 6.87 (d, J = 8.8 Hz, 2H), 3.76 (s, 3H), 3.55-3.52 (m, 2H), 3.48-3.3.42 (m, 6H), 3.34-3.31 (m, 1H), 3.19 (s, 1H), 2.89 (s, 6H), 2.62 (s, 1H), 2.04 (m, 2H).
실시예 4: (3Z,8R,9S,10S)-10-[(디메틸아미노)메틸]-N-(4-메톡시페닐)-9-[4-(2-페닐에티닐)페닐]-1,6-디아자비시클로[6.2.0]데스-3-엔-6-카르복스아미드 ("E4")
Figure pct00022
중간체 24: (3Z,8R,9R,10S)-9-(4-브로모페닐)-10-(트리틸옥시메틸)-1,6-디아자비시클로[6.2.0]데스-3-엔.
아세토니트릴 (6 mL) 중 (8R,9R,10S,Z)-10-((비스(4-메톡시페닐)(페닐)메톡시)메틸)-9-(4-브로모페닐)-6-((2-니트로페닐)술포닐)-1,6-디아자비시클로[6.2.0]데스-3-엔 및 벤젠티올 (132.09 mg, 1.20 mmol, 122.31 μL)의 용액에 25℃에서 Cs2CO3 (260.41 mg, 799.25 μmol)을 첨가하였다. 50℃에서 12시간 동안 교반한 후, 반응 혼합물을 H2O (5 mL)로 켄칭하고, DCM (10 mL)으로 추출하여 유기 상을 수득하였다. 유기 상을 농축시키고, 정제용-TLC (석유 에테르: 에틸 아세테이트 =1:1)에 의해 정제하여 중간체 24 (450 mg, 795.70 μmol, 99.56% 수율)를 백색 고체로서 수득하였다.
1H NMR (400MHz, CDCl3-d1) δ7.26-7.16 (m, 19H), 5.90-5.84 (m, 1H), 5.67-5.60 (m, 1H), 3.61-3.53 (m, 4H), 3.61-3.52 (m, 4H), 3.11-3.09 (m, 2H), 2.86-2.84 (m, 2H), 2.48 (d, J = 5.2 Hz, 1H).
중간체 25: (3Z,8R,9R,10S)-9-(4-브로모페닐)-N-(4-메톡시페닐)-10-(트리틸옥시메틸)-1,6-디아자비시클로[6.2.0]데스-3-엔-6-카르복스아미드.
DCM (2 mL) 중 중간체 24 (400 mg, 707.29 μmol) 및 Et3N (196.08 μL, 1.41 mmol)의 용액에 1-이소시아네이토-4-메톡시-벤젠 (116.04 mg, 778.02 μmol)을 0℃에서 적가하였다. 25℃에서 5시간 동안 교반한 후, 반응 혼합물을 농축시켜 잔류물을 수득하였다. 잔류물을 정제용-TLC (석유 에테르: 에틸 아세테이트 =1:1)에 의해 정제하여 중간체 25 (400 mg, 559.68 μmol, 79.13% 수율)를 백색 고체로서 수득하였다.
1H NMR (400MHz, CDCl3-d1) δ7.31-7.19 (m, 19H), 6.85-6.81 (m, 2H), 6.04 (s, 1H), 5.81-5.80 (m, 1H), 5.73-5.68 (m, 1H), 4.15 (d, J = 16 Hz, 1H), 5.72 (d, J = 16 Hz, 1H), 4.15-4.00 (m, 1H), 3.99-3.70 (m, 1H), 3.66-3.56 (m, 5H), 3.21-3.19 (m, 2H), 3.19-3.00 (m, 1H), 2.81-2.77 (m, 1H).
중간체 26: (3Z,8R,9R,10S)-9-(4-브로모페닐)-10-(히드록시메틸)-N-(4-메톡시페닐)-1,6-디아자비시클로[6.2.0]데스-3-엔-6-카르복스아미드.
DCM (1 mL) 중 중간체 25 (360.00 mg, 503.71 μmol)의 용액에 TFA (3 mL, 5037 μmol)을 0℃에서 적가하였다. 25℃에서 1시간 동안 교반한 후, 반응 혼합물을 포화 NaHCO3 (3 mL)으로 켄칭하고, DCM (5 mL)으로 추출하여 유기 상을 수득하였다. 유기 층을 무수 Na2SO4 상에서 건조시키고, 농축시키고, 정제용-TLC (석유 에테르: 에틸 아세테이트 =1:2)에 의해 정제하여 중간체 26 (210 mg, 444.57 μmol, 88.26% 수율)을 백색 고체로서 수득하였다.
1H NMR (400MHz, CDCl3-d1) δ7.48 (d, J = 8.4 Hz, 2H), 7.38 (d, J = 8.4 Hz, 2H), 7.21 (d, J = 9.6 Hz, 2H), 6.83 (d, J = 8.8 Hz, 2H), 6.06 (s, 2H), 5.85 (s, 1H), 5.74-5.71 (m, 1H), 4.26 (m, 1H), 4.03-3.95 (m, 1H), 3.77-3.59 (m, 6H), 3.28 (m, 1H), 2.90 (s, 1H).
중간체 27: (3Z,8R,9S,10S)-9-(4-브로모페닐)-10-[(1,3-디옥소이소인돌린-2-일)메틸]-N-(4-메톡시페닐)-1,6-디아자비시클로[6.2.0]데스-3-엔-6-카르복스아미드.
THF (2 mL) 중 중간체 26 (210.00 mg, 444.57 μmol), 이소인돌린-1,3-디온 (71.95 mg, 489.03 μmol) 및 PPh3 (233.21 mg, 889.13 μmol)의 용액에 DIAD (179.79 mg, 889.13 μmol)를 25℃에서 적가하였다. 25℃에서 5시간 동안 교반한 후, 반응 혼합물을 농축시켜 잔류물을 수득하였다. 잔류물을 정제용-TLC (석유 에테르: 에틸 아세테이트 =1:1)에 의해 정제하여 중간체 27 (200 mg, 332.51 μmol, 74.79% 수율)을 담갈색 고체로서 수득하였다.
1H NMR (400MHz, CDCl3-d1) δ7.80-7.67 (m, 17H), 7.54-7.67 (m, 22H), 7.25-7.20 (m, 2H), 6.80 (s, 2H), 6.06 (s, 2H), 5.85 (s, 1H), 5.74 (s, 1H), 4.22 (s, 1H) 4.02 (m, 1H), 3.77-3.75 (m, 4H), 3.70-3.66 (m, 3H), 3.50 (s, 3H), 3.12 (m, 1H), 2.88 (s, 1H).
중간체 28: (3Z,8R,9S,10S)-10-(아미노메틸)-9-(4-브로모페닐)-N-(4-메톡시페닐)-1,6-디아자비시클로[6.2.0]데스-3-엔-6-카르복스아미드.
MeOH (1mL) 중 중간체 27 (60.00 mg, 99.75 μmol)의 용액에 2-아미노에탄올 (60.33 μL, 997.52 μmol)을 적가하였다. 25℃에서 3시간 동안 교반한 후, 반응 혼합물을 농축시켜 잔류물을 수득하였다. 잔류물을 정제용-TLC (디클로로메탄: 메탄올 =12:1)에 의해 정제하여 중간체 28 (33.00 mg, 70.01 μmol, 70.18% 수율)을 백색 고체로서 수득하였다.
1H NMR (400MHz, CDCl3-d1) δ7.50 (d, J = 13.6 Hz, 2H), 7.46 (m, 2H), 7.21 (d, J = 5.5 Hz, 2H), 6.82 (d, J = 9.6 Hz, 1H), 6.08 (s, 1H), 5.83 (s, 1H), 5.73(s, 1H), 4.22 (m, 2H), 4.02-4.00 (m, 1H), 3.77(s, 3H), 3.71-3.63 (m, 2H), 3.55-3.50 (m, 1H), 3.36-3.17 (m, 1H), 2.81-2.76 (m, 3H).
중간체 29: (3Z,8R,9S,10S)-9-(4-브로모페닐)-10-[(디메틸아미노)메틸]-N-(4-메톡시페닐)-1,6-디아자비시클로[6.2.0]데스-3-엔-6-카르복스아미드.
DCM (2 mL) 중 중간체 28 (23.00 mg, 48.79 μmol)의 교반 용액에 25℃에서 NaBH(OAc)3 (51.70 mg, 243.96 μmol)을 첨가하였다. 25℃에서 2시간 동안 교반한 후, 반응 혼합물을 농축시켜 잔류물을 수득하였다. 잔류물을 정제용-TLC (디클로로메탄: 메탄올=12:1)에 의해 정제하여 중간체 29 (20 mg, 40.04 μmol, 82% 수율)를 백색 고체로서 수득하였다.
1H NMR (400MHz, CDCl3-d1) δ7.53 (d, J = 8.4 Hz, 2H), 7.31-7.26 (m, 2H), 7.19 (d, J = 8.8 Hz, 3H), 6.82 (d, J = 8.8 Hz, 3H), 6.14 (s, 1H), 5.83-5.86 (m, 2H), 4.12-4.02 (m, 3H), 3.90-3.59 (m, 9H), 3.19 (m, 1H), 3.01-2.80 (m, 2H), 2.38 (s, 6H).
E4의 합성: (3Z,8R,9S,10S)-10-[(디메틸아미노)메틸]-N-(4-메톡시페닐)-9-[4-(2-페닐에티닐)페닐]-1,6-디아자비시클로[6.2.0]데스-3-엔-6-카르복스아미드.
아세토니트릴 (1 mL) 중 중간체 29 (20.00 mg, 40.04 μmol) 및 에티닐벤젠 (12.27 mg, 120.13 μmol, 13.19 μL)의 용액에 XPhos Pd G3 (3.39 mg, 4.00 μmol) 및 Cs2CO3 (26.09 mg, 80.09 μmol)을 첨가하였다. 70℃에서 2시간 동안 교반한 후, 반응 혼합물을 농축시켜 잔류물을 수득하였다. 잔류물을 정제용 HPLC (0.04% HCl/아세토니트릴/H2O 시스템)에 의해 정제하여 (3Z,8R,9S,10S)-10-[(디메틸아미노)메틸]-N-(4-메톡시페닐)-9-[4-(2-페닐에티닐)페닐]-1,6-디아자비시클로[6.2.0]데스-3-엔-6-카르복스아미드 (2.00 mg, 3.84 μmol, 9.59% 수율)를 백색 고체로서 수득하였다.
HRMS (ESI) 계산치 C32H33N4O [M + H]+ 489.27, 실측치 520.10
1H NMR (400MHz, MeOD-d4) δ7.74 (d, J = 5.5 Hz, 2H), 7.67 (d, J = 8.8 Hz, 2H), 7.53 (d, J = 3.6 Hz, 2H), 7.20 (d, J = 8.8 Hz, 2H), 7.18 (d, J = 8.8 Hz, 2H), 6.13 (d, J = 5.6 Hz, 1H), 5.78 (d, J = 12.4 Hz, 1H), 4.33 (s, 2H), 4.30-4.21 (m, 9H), 3.90-3.75 (m, 5H), 3.50-3.31 (m, 3H), 2.77 (s, 6H).
실시예 5: (3S,4R,8R,9S,10S)-10-((디메틸아미노)메틸)-3,4-디히드록시-N-(4-메톡시페닐)-9-(4-(페닐에티닐)페닐)-1,6-디아자비시클로[6.2.0]데칸-6-카르복스아미드 ("E5")
Figure pct00023
중간체 30a 및 30b: (3S,4R,8R,9S,10S)-9-(4-브로모페닐)-10-((1,3-디옥소이소인돌린-2-일)메틸)-3,4-디히드록시-N-(4-메톡시페닐)-1,6-디아자비시클로[6.2.0]데칸-6-카르복스아미드 (30a) 및 (3R,4S,8R,9S,10S)-9-(4-브로모페닐)-10-((1,3-디옥소이소인돌린-2-일)메틸)-3,4-디히드록시-N-(4-메톡시페닐)-1,6-디아자비시클로[6.2.0]데칸-6-카르복스아미드 (30b).
아세톤/H2O=10:1 (1 mL) 중 중간체 27 (60 mg, 99.75 μmol)의 교반 용액에 실온에서 NMO (17.53 mg, 149.62 μmol) 및 OsO4 (2.54 mg, 9.98 μmol)를 첨가하였다. 25℃에서 2시간 동안 교반한 후, 반응 혼합물을 농축시켜 잔류물을 수득하였다. 잔류물을 정제용-TLC (석유 에테르: 에틸 아세테이트 =1:5)에 의해 정제하여 중간체 30a (덜 극성) (25 mg, 39.34 μmol, 39.44% 수율)를 담갈색 고체로서, 그리고 중간체 30b (더 극성) (25 mg, 39.34 μmol, 39.44% 수율)를 담갈색 고체로서 수득하였다.
중간체 30a 1H NMR (400MHz, CDCl3-d1) δ7.82 (d, J = 2.8 Hz, 2H), 7.81 (d, J = 2.0 Hz, 2H), 7.71-7.02 (m, 4H), 7.26 (m, 2H), 6.80 (d, J = 1.2 Hz, 2H), 4.24-4.07 (m, 2H), 3.93-3.81 (m, 2H), 3.74(s, 3H), 3.62-3.54 (m, 3H), 3.28-2.88 (m, 1H), 2.65-2.49 (m, 2H).
중간체 30b 1H NMR (400MHz, CDCl3-d1) δ7.83 (d, J = 2.8 Hz, 2H), 7.81 (d, J = 2.0 Hz, 2H), 7.73-7.47 (m, 4H), 7.24 (m, 2H), 6.80 (d, J = 8.8 Hz, 2H), 6.58 (s, 1H), 3.96-3.90 (m, 2H), 3.70-3.68 (m, 4H), 3.56-3.50 (m, 3H), 3.00 (s, 1H), 2.87-2.76 (m, 2H).
중간체 31a: (3S,4R,8R,9S,10S)-10-(아미노메틸)-9-(4-브로모페닐)-3,4-디히드록시-N-(4-메톡시페닐)-1,6-디아자비시클로[6.2.0]데칸-6-카르복스아미드.
MeOH (2 mL) 중 중간체 30a (120 mg, 188.83 μmol)의 교반 용액에 2-아미노에탄올 (115.34 mg, 1.89 mmol)을 첨가하였다. 25℃에서 2시간 동안 교반한 후, 반응 혼합물을 농축시켜 잔류물을 수득하였다. 잔류물을 정제용-TLC (디클로로메탄: 메탄올=8:1)에 의해 정제하여 중간체 31a (70 mg, 138.50 μmol, 73.35% 수율)를 백색 고체로서 수득하였다.
1H NMR (400MHz, CDCl3-d1) δ7.47-7.43 (m, 3H), 7.42-7.40 (m, 1H), 7.35-7.20 (m, 3H), 7.18-6.79 (m, 2H), 4.31-4.27 (m, 1H), 3.89 (s, 1H), 3.89-3.79 (m, 5H), 3.76-3.23 (m, 2H), 2.91-2.86 (m, 2H), 2.72-2.61 (m, 2H).
중간체 32a: (3S,4R,8R,9S,10S)-9-(4-브로모페닐)-10-((디메틸아미노)메틸)-3,4-디히드록시-N-(4-메톡시페닐)-1,6-디아자비시클로[6.2.0]데칸-6-카르복스아미드.
DCM (2 mL) 중 31a (70.00 mg, 138.50 μmol)의 교반 용액에 HCHO (112.41 mg, 1.39 mmol, 103.13 μL, 37% 용액) 및 MgSO4 (166.72 mg, 1.39 mmol)를 첨가하였다. 25℃에서 0.5시간 동안 교반한 후, 추가의 NaBH(OAc)3 (146.77 mg, 692.52 μmol)을 첨가하였다. 추가로 1.5시간 후, 반응 혼합물을 농축시켜 잔류물을 수득하였다. 잔류물을 정제용-TLC (디클로로메탄: 메탄올=5:1)에 의해 정제하여 중간체 32a (60 mg, 112.47 μmol, 81% 수율)를 담갈색 고체로서 수득하였다.
1H NMR (400MHz, CDCl3-d1) δ7.48-7.43 (m, 4H), 7.42-7.40 (m, 1H), 7.27-7.20 (m, 2H), 6.81-6.78 (m, 2H), 4.26-4.03 (m, 3H), 3.64-3.54 (m, 5H), 3.27-3.24 (m, 1H).
E5의 합성: (3S,4R,8R,9S,10S)-10-((디메틸아미노)메틸)-3,4-디히드록시-N-(4-메톡시페닐)-9-(4-(페닐에티닐)페닐)-1,6-디아자비시클로[6.2.0]데칸-6-카르복스아미드.
아세토니트릴 (1 mL) 중 중간체 32a (20.00 mg, 40.04 μmol) 및 에티닐벤젠 (12.27 mg, 120.13 μmol, 13.19 μL)의 용액에 XPhos Pd G3 (3.39 mg, 4.00 μmol, 0.10 당량) 및 Cs2CO3 (26.09 mg, 80.09 μmol)을 첨가하였다. 70℃에서 2시간 동안 교반한 후, 반응 혼합물을 농축시켜 잔류물을 수득하였다. 잔류물을 정제용 HPLC (칼럼: 워터스 엑스브리지 정제용 OBD C18 150*30 5u; A: 물 (0.225% 포름산) B: 아세토니트릴)에 의해 정제하여 (3S,4R,8R,9S,10S)-10-((디메틸아미노)메틸)-3,4-디히드록시-N-(4-메톡시페닐)-9-(4-(페닐에티닐)페닐)-1,6-디아자비시클로[6.2.0]데칸-6-카르복스아미드 (2.00 mg, 3.84 μmol, 9.59% 수율)를 백색 고체로서 수득하였다.
HRMS (ESI) 계산치 C33H38N4O4 [M + H]+ 554.29, 실측치 554.20
1H NMR (400MHz, MeOD-d4) δ7.59 (s, 4H), 7.51 (d, J = 3.6 Hz, 2H), 7.38 (s, 3H), 7.16 (d, J = 8.8 Hz, 2H), 6.85 (d, J = 8.8 Hz, 2H), 4.20-4.11 (s, 3H), 3.85-3.82 (m, 4H), 3.75 (s, 3H), 3.57-3.44 (m, 3H), 3.12-2.97 (m, 4H), 2.97-2.56 (m, 6H).
실시예 6: (3R,4S,8R,9S,10S)-10-((디메틸아미노)메틸)-3,4-디히드록시-N-(4-메톡시페닐)-9-(4-(페닐에티닐)페닐)-1,6-디아자비시클로[6.2.0]데칸-6-카르복스아미드 ("E6")
Figure pct00024
중간체 31b: (3R,4S,8R,9S,10S)-10-(아미노메틸)-9-(4-브로모페닐)-3,4-디히드록시-N-(4-메톡시페닐)-1,6-디아자비시클로[6.2.0]데칸-6-카르복스아미드.
MeOH (2 mL) 중 중간체 30b (30 mg, 47.21 μmol)의 교반 용액에 25℃에서 2-아미노에탄올 (28.84 mg, 472.10 μmol)을 첨가하였다. 25℃에서 2시간 동안 교반한 후, 반응 혼합물을 농축시켜 잔류물을 수득하였다. 잔류물을 정제용-TLC (디클로로메탄: 메탄올=8:1)에 의해 정제하여 중간체 31b (20 mg, 39.57 μmol, 83.82% 수율)를 백색 고체로서 수득하였다.
1H NMR (400MHz, CDCl3-d1) δ7.51-7.48 (m, 3H), 7.46-7.43 (m, 4H), 6.83 (d, J = 8.8 Hz, 2H), 7.77-3.73 (m, 3H), 3.65-3.51 (m, 2H), 3.23-3.15 (m, 1H), 2.80-2.73 (m, 3H).
중간체 32b: (3R,4S,8R,9S,10S)-9-(4-브로모페닐)-10-((디메틸아미노)메틸)-3,4-디히드록시-N-(4-메톡시페닐)-1,6-디아자비시클로[6.2.0]데칸-6-카르복스아미드.
DCM (2 mL) 중 중간체 31a (10 mg, 19.79 μmol)의 교반 용액에 25℃에서 HCHO (16.06 mg, 197.90 μmol, 14.73 μL, 37% 용액) 및 MgSO4 (23.82 mg, 197.90 μmol)를 첨가하였다. 25℃에서 0.5시간 동안 교반한 후, 추가의 NaBH(OAc)3 (20.97 mg, 98.95 μmol)을 첨가하였다. 25℃에서 1.5시간 동안 추가적으로 교반한 후, 반응 혼합물을 농축시켜 잔류물을 수득하였다. 잔류물을 정제용-TLC (디클로로메탄: 메탄올=5:1)에 의해 정제하여 중간체 32b (10 mg, 18.75 μmol, 47.36% 수율)를 담갈색 고체로서 수득하였다.
1H NMR (400MHz, CDCl3-d1) δ7.54-7.46 (m, 4H), 7.30-7.25 (m, 7H), 6.83-6.80 (d, J = 8.8 Hz, 2H), 3.89-3.78 (m, 2H), 3.67-3.63 (m, 6H), 3.56-3.48 (m, 3H), 2.74-2.64 (m, 3H), 2.28 (s, 6H).
E6의 합성: (3R,4S,8R,9S,10S)-10-((디메틸아미노)메틸)-3,4-디히드록시-N-(4-메톡시페닐)-9-(4-(페닐에티닐)페닐)-1,6-디아자비시클로[6.2.0]데칸-6-카르복스아미드.
아세토니트릴 (1 mL) 중 중간체 32b (10 mg, 18.75 μmol) 및 에티닐벤젠 (5.74 mg, 56.24 μmol, 6.18 μL)의 용액에 XPhos Pd G3 (1.59 mg, 1.87 μmol) 및 Cs2CO3 (12.22 mg, 37.49 μmol)을 첨가하였다. 70℃에서 2시간 동안 교반한 후, 반응 혼합물을 농축시켜 잔류물을 수득하였다. 잔류물을 정제용 HPLC (0.04% HCl/ACN/H2O 시스템)에 의해 정제하여 (3R,4S,8R,9S,10S)-10-((디메틸아미노)메틸)-3,4-디히드록시-N-(4-메톡시페닐)-9-(4-(페닐에티닐)페닐)-1,6-디아자비시클로[6.2.0]데칸-6-카르복스아미드 (2 mg, 3.61 μmol, 19.23% 수율)를 백색 고체로서 수득하였다.
HRMS (ESI) 계산치 C33H38N4O4 [M + H]+ 554.29, 실측치 554.2.
1H NMR (400MHz, MeOD-d4) δ7.62 (s, 4H), 7.53-7.51 (m, 2H), 7.40 (d, J = 4.8 Hz, 3H), 7.24 (d, J = 4.8 Hz, 2H), 6.87 (d, J = 8.8 Hz, 2H), 4.18 (s, 3H), 4.08 (s, 1H), 3.94-3.93 (m, 3H), 3.76 (s, 4H), 3.56-3.52 (m, 2H), 3.42-3.40 (m, 2H), 3.23-3.21 (m, 2H), 2.99-2.95 (m, 1H), 3.70 (s, 6H).
실시예 7-9
하기 실시예 화합물 (E7-E9)을 중간체 ("Int.") 32a 또는 32b에 의해 출발하여 표 3 중 열거된 알킨 및 명시된 알데히드 (나타낸 경우)에 의해 실시예 6에 따라 제조하였다.
표 3
Figure pct00025
Figure pct00026
실시예 10: (3S,4R,8R,9S,10S)-3,4-디히드록시-10-[[이소프로필(메틸)아미노]메틸]-N-(4-메톡시페닐)-9-[4-(2-페닐에티닐)페닐]-1,6-디아자비시클로[6.2.0]데칸-6-카르복스아미드 ("E10")
Figure pct00027
중간체 33a: (3S,4R,8R,9S,10S)-9-(4-브로모페닐)-3,4-디히드록시-10-[(이소프로필아미노)메틸]-N-(4-메톡시페닐)-1,6-디아자비시클로[6.2.0]데칸-6-카르복스아미드.
DCM (1.00 mL) 중 중간체 31a (100.00 mg, 197.86 μmol), 아세톤 (68.95 mg, 1.19 mmol, 87.28 μL), AcOH (11.88 mg, 197.86 μmol, 11.31 μL) 및 MgSO4 (238.16 mg, 1.98 mmol)의 용액에 NaBH(OAc)3 (125.80 mg, 593.58 μmol)을 첨가하였다. 20℃에서 12시간 동안 교반한 후, 반응 혼합물을 셀라이트를 통해 여과하고, 감압 하에 농축시켜 조 중간체 33a (116.00 mg)를 연황갈색 고체로서 수득하였다.
중간체 34a: (3S,4R,8R,9S,10S)-9-(4-브로모페닐)-3,4-디히드록시-10-[[이소프로필(메틸)아미노]메틸]-N-(4-메톡시페닐)-1,6-디아자비시클로[6.2.0]데칸-6-카르복스아미드.
DCM (1.00 mL) 중 중간체 33a (116.00 mg, 211.88 μmol), 포름알데히드 (103.08 mg, 1.27 mmol, 94.57 μL), MgSO4 (255.04 mg, 2.12 mmol) 및 AcOH (12.72 mg, 211.88 μmol, 12.11 μL)의 용액에 NaBH(OAc)3 (134.72 mg, 635.64 μmol)을 첨가하였다. 20℃에서 2시간 동안 교반한 후, 반응 혼합물을 셀라이트를 통해 여과하고, 감압 하에 농축시켜 조 중간체 34b (138.00 mg, 조 물질)를 암황색 고체로서 수득하였다.
E10의 합성: (3S,4R,8R,9S,10S)-3,4-디히드록시-10-[[이소프로필(메틸)아미노]메틸]-N-(4-메톡시페닐)-9-[4-(2-페닐에티닐)페닐]-1,6-디아자비시클로[6.2.0]데칸-6-카르복스아미드.
CH3CN (1.00 mL) 중 중간체 34a (30.00 mg, 53.43 μmol) 및 에티닐벤젠 (10.91 mg, 106.86 μmol, 11.73 μL)의 용액에 Et3N (16.22 mg, 160.29 μmol, 22.22 μL) 및 XPhos Pd G3 (4.52 mg, 5.34 μmol)을 첨가하였다. 70℃에서 2시간 동안 교반한 후, 반응 혼합물을 셀라이트를 통해 여과하고, 감압 하에 농축시켜 잔류물을 수득하였으며, 이를 정제용 HPLC (칼럼: 워터스 엑스브리지 정제용 OBD C18 150*30 5u; A: 물 (0.225% 포름산) B: 아세토니트릴)에 의해 정제하여 (3S,4R,8R,9S,10S)-3,4-디히드록시-10-[[이소프로필(메틸)아미노]메틸]-N-(4-메톡시페닐)-9-[4-(2-페닐에티닐)페닐]-1,6-디아자비시클로[6.2.0]데칸-6-카르복스아미드 (11.20 mg, 17.81 μmol, 33.34% 수율, 포름산 염)를 담황색 고체로서 수득하였다.
1H NMR (400MHz, 클로로포름-d) δ = 8.65 - 8.37 (m, 1H), 7.57 - 7.52 (m, 2H), 7.49 (d, J=8.0 Hz, 2H), 7.42 - 7.34 (m, 5H), 7.25 (d, J=9.0 Hz, 2H), 6.81 (d, J=9.0 Hz, 2H), 4.36 - 4.21 (m, 1H), 4.13 (br. s., 1H), 3.96 (d, J=14.1 Hz, 1H), 3.84 - 3.73 (m, 5H), 3.62 - 3.46 (m, 2H), 3.21 (d, J=15.6 Hz, 1H), 2.83 (d, J=14.1 Hz, 4H), 2.75 - 2.54 (m, 2H), 2.11 (br. s., 3H), 0.99 (d, J=5.5 Hz, 3H), 0.71 (d, J=5.0 Hz, 3H)
실시예 11: (3R,4S,8R,9S,10S)-3,4-디히드록시-10-[[이소프로필(메틸)아미노]메틸]-N-(4-메톡시페닐)-9-[4-(2-페닐에티닐)페닐]-1,6-디아자비시클로[6.2.0]데칸-6-카르복스아미드 ("E11")
실시예 E11을 중간체 31b에 의해 시작하여 실시예 10에 기재된 합성을 사용하여 제조하였다.
1H NMR (400MHz, 클로로포름-d) δ = 8.73 - 8.47 (m, 1H), 7.56 - 7.51 (m, 4H), 7.41 - 7.34 (m, 5H), 7.28 (d, J=8.9 Hz, 2H), 6.81 (d, J=8.9 Hz, 2H), 3.88 (d, J=5.4 Hz, 1H), 3.80 - 3.74 (m, 5H), 3.72 - 3.48 (m, 5H), 3.24 (dd, J=6.8, 14.1 Hz, 1H), 2.88 (t, J=11.9 Hz, 1H), 2.82 - 2.75 (m, 1H), 2.72 (d, J=14.2 Hz, 2H), 2.65 - 2.56 (m, 1H), 2.09 (s, 3H), 0.95 (d, J=6.5 Hz, 3H), 0.71 (d, J=6.4 Hz, 3H).
실시예 12: (3S,4R,8R,9S,10S)-9-[4-[2-(2,3-디플루오로페닐)에티닐]페닐]-10-[(디메틸아미노)메틸]-3,4-디히드록시-N-(4-메톡시페닐)-1,6-디아자비시클로[6.2.0]데칸-6-카르복스아미드 ("E12")
Figure pct00028
중간체 35a: (3S,4R,8R,9S,10S)-10-[(디메틸아미노)메틸]-9-(4-에티닐페닐)-3,4-디히드록시-N-(4-메톡시페닐)-1,6-디아자비시클로[6.2.0]데칸-6-카르복스아미드.
CH3CN (1.00 mL) 중 중간체 32a (54.00 mg, 101.23 μmol) 및 에티닐트리메틸실란 (29.83 mg, 303.69 μmol, 42.01 μL)의 용액에 Cs2CO3 (131.93 mg, 404.92 μmol) 및 XPhos Pd G3 (8.57 mg, 10.12 μmol)을 첨가하였다. N2 분위기 하에 70℃에서 2시간 동안 교반한 후, 반응 혼합물을 셀라이트를 통해 여과하고, 감압 하에 농축시켜 조 생성물 2 (78.00 mg, 조 물질)를 암황색 고체로서 수득하였다.
E12의 합성: (3S,4R,8R,9S,10S)-9-[4-[2-(2,3-디플루오로페닐)에티닐]페닐]-10-[(디메틸아미노)메틸]-3,4-디히드록시-N-(4-메톡시페닐)-1,6-디아자비시클로[6.2.0]데칸-6-카르복스아미드.
CH3CN (500 μL) 중 (3R,4S,8R,9S,10S)-10-[(디메틸아미노)메틸]-9-(4-에티닐페닐)-3,4-디히드록시-N-(4-메톡시페닐)-1,6-디아자비시클로[6.2.0]데칸-6-카르복스아미드 (중간체 35a) (21.60 mg, 45.13 μmol) 및 1-브로모-2,3-디플루오로벤젠 (8.71 mg, 45.13 μmol, 5.06 μL)의 용액에 Cs2CO3 (29.41 mg, 90.26 μmol) 및 XPhos Pd G3 (3.82 mg, 4.51 μmol)을 첨가하였다. N2 분위기 하에 40℃에서 1시간 동안 교반한 후, 잔류물을 정제용-TLC (SiO2, DCM: MeOH = 8:1)에 의해 정제하여 촉매를 제거한 다음, 정제용 HPLC(칼럼: 워터스 엑스브리지 정제용 OBD C18 150*30 5u; A: 물 (0.225% 포름산) B: 아세토니트릴)에 의해 정제하여 (3S,4R,8R,9S,10S)-9-[4-[2-(2,3-디플루오로페닐)에티닐]페닐]-10-[(디메틸아미노)메틸]-3,4-디히드록시-N-(4-메톡시페닐)-1,6-디아자비시클로[6.2.0]데칸-6-카르복스아미드 (2.00 mg, 3.14 μmol, 6.96% 수율, 포름산 염))를 백색 고체로서 수득하였다.
1H NMR (400MHz, 클로로포름-d) δ = 8.48 - 8.27 (m, 1H), 7.58 (d, J=7.9 Hz, 2H), 7.40 (d, J=7.9 Hz, 2H), 7.29 (d, J=8.4 Hz, 3H), 7.22 - 7.13 (m, 1H), 7.11 - 7.03 (m, 1H), 6.83 (d, J=8.8 Hz, 2H), 6.73 (br. s., 1H), 3.89 (br. s., 2H), 3.77 (s, 4H), 3.75 - 3.62 (m, 3H), 3.61 - 3.48 (m, 2H), 3.28 (dd, J=6.6, 14.1 Hz, 1H), 2.89 (d, J=12.8 Hz, 3H), 2.80 (d, J=14.6 Hz, 2H), 2.68 (d, J=7.5 Hz, 1H), 2.27 (s, 6H)
실시예 13: (3R,4S,8R,9S,10S)-9-(4-((2,3-디플루오로페닐)에티닐)페닐)-10-((디메틸아미노)메틸)-3,4-디히드록시-N-(4-메톡시페닐)-1,6-디아자비시클로[6.2.0]데칸-6-카르복스아미드 ("E13")
Figure pct00029
중간체 36b: (3R,4S,8R,9S,10S)-10-((디메틸아미노)메틸)-9-(4-에티닐페닐)-3,4-디히드록시-N-(4-메톡시페닐)-1,6-디아자비시클로[6.2.0]데칸-6-카르복스아미드.
CH3CN (1.00 mL) 중 (3R,4S,8R,9S,10S)-9-(4-브로모페닐)-10-[(디메틸아미노)메틸]-3,4-디히드록시-N-(4-메톡시페닐)-1,6-디아자비시클로[6.2.0]데칸-6-카르복스아미드 (중간체 32b) (40.00 mg, 74.98 μmol) 및 에티닐(트리메틸)실란 (22.09 mg, 224.95 μmol, 31.12 μL)의 용액에 Cs2CO3 (97.72 mg, 299.93 μmol) 및 XPhos Pd G3 (6.35 mg, 7.50 μmol)을 첨가하였다. N2 분위기 하에 70℃에서 1시간 동안 교반한 후, 반응 혼합물을 셀라이트를 통해 여과하고, 감압 하에 농축시켜 잔류물을 수득하였으며, 이를 정제용-TLC (DCM: MeOH = 10:1, Rf =0.2)에 의해 정제하여 중간체 36b (30.00 mg, 62.69 μmol, 83.60% 수율)를 담황색 고체로서 수득하였다.
중간체 37b: (3aS,6aR,7S,8S,10aR)-8-((디메틸아미노)메틸)-7-(4-에티닐페닐)-N-(4-메톡시페닐)-2,2-디메틸헥사히드로-3aH-아제토[1,2-a][1,3]디옥솔로[4,5-f][1,4]디아조신-5(4H)-카르복스아미드.
2,2-디메톡시프로판 (500 μL) 및 DCM (500 μL) 중 중간체 36b (30.00 mg, 62.69 μmol)의 용액에 TsOH (1.08 mg, 6.27 μmol)를 첨가하였다. 20℃에서 1시간 동안 교반한 후, 반응물을 농축시키고, 정제용-TLC (DCM: MeOH = 10 :1)에 의해 정제하여 중간체 37b (20.00 mg, 38.56 μmol, 61.51% 수율)를 황색 오일로서 수득하였다.
중간체 38b: (3aS,6aR,7S,8S,10aR)-7-(4-((2,3-디플루오로페닐)에티닐)페닐)-8-((디메틸아미노)메틸)-N-(4-메톡시페닐)-2,2-디메틸헥사히드로-3aH-아제토[1,2-a][1,3]디옥솔로[4,5-f][1,4]디아조신-5(4H)-카르복스아미드.
CH3CN (500 μL) 중 중간체 37b (20.00 mg, 38.56 μmol) 및 1-브로모-2,3-디플루오로-벤젠 (22.33 mg, 115.68 μmol, 12.98 μL)의 용액에 Cs2CO3 (50.25 mg, 154.24 μmol) 및 XPhos Pd G3 (3.26 mg, 3.86 μmol)을 첨가하였다. N2 분위기 하에 70℃에서 1시간 동안 교반한 후, 반응 혼합물을 정제용-TLC (DCM: MeOH = 10:1)에 의해 정제하여 중간체 38b (15.00 mg, 23.78 μmol, 61.68% 수율)를 황색 오일로서 수득하였다.
E13의 합성: (3R,4S,8R,9S,10S)-9-(4-((2,3-디플루오로페닐)에티닐)페닐)-10-((디메틸아미노)메틸)-3,4-디히드록시-N-(4-메톡시페닐)-1,6-디아자비시클로[6.2.0]데칸-6-카르복스아미드.
CH3CN (500.00 μL) 중 중간체 38b (15.00 mg, 23.78 μmol, 1.00 당량)의 혼합물에 1 M HCl (500.00 μL)을 첨가하였다. 15℃에서 12시간 동안 교반한 후, 반응 혼합물을 감압 하에 농축시켜 잔류물을 수득하였으며, 이를 정제용 HPLC (칼럼: 워터스 엑스브리지 정제용 OBD C18 150*30 5u; A: 물 (0.225% 포름산) B: 아세토니트릴)에 의해 정제하여 (3S,4R,8R,9S,10S)-9-(4-((2,3-디플루오로페닐)에티닐)페닐)-10-((디메틸아미노)메틸)-3,4-디히드록시-N-(4-메톡시페닐)-1,6-디아자비시클로[6.2.0]데칸-6-카르복스아미드 (11.00 mg, 17.28 μmol, 72.65% 수율, 포름산 염))를 백색 고체로서 수득하였다.
1H NMR (400MHz, 메탄올-d4) δ = 8.69 - 8.45 (m, 1H), 7.61 (s, 4H), 7.40 - 7.29 (m, 2H), 7.25 - 7.13 (m, 3H), 6.85 (d, J=9.0 Hz, 2H), 4.22 (dd, J=6.0, 15.6 Hz, 1H), 4.12 (d, J=6.0 Hz, 1H), 3.87 - 3.80 (m, 2H), 3.80 - 3.72 (m, 5H), 3.53 - 3.46 (m, 1H), 3.36 (br. s., 1H), 3.00 - 2.88 (m, 3H), 2.84 - 2.73 (m, 2H), 2.41 (s, 6H)
실시예 14: (4aR,7aR,8S,9S,11aS)-9-((디메틸아미노)메틸)-N-(4-메톡시페닐)-8-(4-(페닐에티닐)페닐)옥타히드로-2H-아제토[1,2-a][1,4]디옥시노[2,3-f][1,4]디아조신-6(3H)-카르복스아미드 ("E14")
Figure pct00030
중간체 39a: (4aR,7aR,8S,9S,11aS)-8-(4-브로모페닐)-9-((디메틸아미노)메틸)-N-(4-메톡시페닐)옥타히드로-2H-아제토[1,2-a][1,4]디옥시노[2,3-f][1,4]디아조신-6(3H)-카르복스아미드.
DCE (1.00 mL) 중 중간체 32a (30.00 mg, 56.24 μmol), NaOH (15.00 mg, 112.48 μmol, 180.30 μL, 30% m/v) 및 TBAB (3.63 mg, 11.25 μmol)의 혼합물을 55℃에서 12시간 동안 교반하였다. LC-MS는 반응물 1의 ~40%이 남아있음을 나타냈다. 목적 중간체 MS를 갖는 1개의 신규 피크가 검출되었다. 반응 혼합물을 DCM 10 mL로 희석하고, H2O 15 mL * 5로 세척하였다. 이어서, 염수 3 mL * 2로 세척하고, Na2SO4 상에서 건조시키고, 여과하고, 감압 하에 농축시켜 잔류물을 수득하였으며, 이를 정제용-TLC (SiO2, DCM: MeOH = 10: 1)에 의해 정제하여 중간체 39 (10.00 mg, 17.87 μmol, 31.78% 수율)를 무색 오일로서 수득하였다.
E14의 합성: (4aR,7aR,8S,9S,11aS)-9-((디메틸아미노)메틸)-N-(4-메톡시페닐)-8-(4-(페닐에티닐)페닐)옥타히드로-2H-아제토[1,2-a][1,4]디옥시노[2,3-f][1,4]디아조신-6(3H)-카르복스아미드.
CH3CN (500 μL) 중 중간체 39a (20.00 mg, 35.75 μmol) 및 에티닐벤젠 (10.95 mg, 107.25 μmol, 11.77 μL)의 용액에 Cs2CO3 (46.59 mg, 143.00 μmol) 및 XPhos Pd G3 (3.03 mg, 3.58 μmol)을 첨가하였다. N2 분위기 하에 70℃에서 1시간 동안 N2 분위기 하에 교반한 후, 반응 혼합물을 농축시키고, 정제용-TLC (SiO2, DCM: MeOH = 10:1)에 의해 정제하여 촉매를 제거한 다음, 정제용 HPLC (칼럼: 워터스 엑스브리지 정제용 OBD C18 150*30 5u; A: 물 (0.225% 포름산) B: 아세토니트릴)에 의해 정제하여 (4aR,7aR,8S,9S,11aS)-9-((디메틸아미노)메틸)-N-(4-메톡시페닐)-8-(4-(페닐에티닐)페닐)옥타히드로-2H-아제토[1,2-a][1,4]디옥시노[2,3-f][1,4]디아조신-6(3H)-카르복스아미드 (포름산 염), 6.00 mg, 10.33 μmol, 28.90% 수율)를 백색 고체로서 수득하였다.
1H NMR (400MHz, 클로로포름-d) δ = 8.26 (br s, 1H), 7.55 (dd, J=2.0, 7.0 Hz, 2H), 7.51 - 7.42 (m, 4H), 7.40 - 7.33 (m, 3H), 7.20 (d, J=9.0 Hz, 2H), 6.83 (d, J=9.0 Hz, 2H), 4.21 (br d, J=15.6 Hz, 1H), 4.10 (br d, J=14.1 Hz, 1H), 4.06 - 3.94 (m, 3H), 3.86 - 3.76 (m, 5H), 3.66 (br s, 1H), 3.59 - 3.52 (m, 2H), 3.48 - 3.29 (m, 3H), 2.89 (br d, J=13.1 Hz, 1H), 2.60 - 2.33 (m, 3H), 2.03 (s, 6H), 1.83 (br s, 1H).
실시예 15: (3S,8R, 9S,10S)-10-[(디메틸아미노)메틸]-3-히드록시-N-(4-메톡시페닐)-9-[4-(2-페닐에티닐)페닐]-1,6-디아자비시클로[6.2.0]데칸-6-카르복스아미드 ("E15")
Figure pct00031
중간체 40: N-[[(2R,3R,4S)-3-(4-브로모페닐)-1-[(2S)-4-[tert-부틸(디페닐)실릴]옥시-2-히드록시-부틸]-4-(트리틸옥시메틸)아제티딘-2-일]메틸]-2-니트로-벤젠술폰아미드.
CH3CN (4.00 mL) 중 N-[[(2R,3R,4S)-3-(4-브로모페닐)-4-(트리틸옥시메틸)아제티딘-2-일]메틸]-2-니트로-벤젠술폰아미드 (400.00 mg, 572.56 μmol) 및 LiClO4 (121.83 mg, 1.15 mmol, 50.34 μL)의 용액에 tert-부틸-[2-[(2R)-옥시란-2-일]에톡시]-디페닐-실란 (Organic Letters (2016), 18(3), 468-471) (373.88 mg, 1.15 mmol)을 첨가하였다. 80℃에서 16시간 동안 교반한 후, 반응 혼합물을 감압 하에 농축시켜 용매를 제거하였다. 잔류물을 H2O (20 mL)로 희석하고, DCM (3 x 20 mL)으로 추출하였다. 합한 유기 층을 염수 (3 x 10 mL)로 세척하고, Na2SO4 상에서 건조시키고, 여과하고, 감압 하에 농축시켜 잔류물을 수득하였으며, 이를 정제용-TLC (SiO2, 석유 에테르/에틸 아세테이트 =2/1)에 의해 정제하여 중간체 40 (250.00 mg, 243.87 μmol, 42.59% 수율)을 담황색 고체로서 수득하였다.
중간체 41: [(1S)-1-[[(2R,3R,4S)-2-[[아세틸-(2-니트로페닐)술포닐-아미노]메틸]-3-(4-브로모페닐)-4-(트리틸옥시메틸)아제티딘-1-일]메틸]-3-[tert-부틸(디페닐)실릴]옥시-프로필] 아세테이트.
DCM (3.00 mL) 중 N-[[(2R,3R,4S)-3-(4-브로모페닐)-1-[(2S)-4-[tert-부틸(디페닐)실릴]옥시-2-히드록시-부틸]-4-(트리틸옥시메틸)아제티딘-2-일]메틸]-2-니트로-벤젠술폰아미드 (중간체 40) (250.00 mg, 243.87 μmol), Et3N (24.68 mg, 243.87 μmol, 33.81 μL) 및 DMAP (2.98 mg, 24.39 μmol)의 용액에 Ac2O (62.24 mg, 609.68 μmol, 57.10 μL)를 첨가하였다. 15℃에서 16시간 동안 교반한 후, 반응 혼합물을 H2O (20 mL)의 첨가에 의해 켄칭한 다음, DCM (3 x 15 mL)으로 추출하였다. 합한 유기 층을 염수 (10 mL)로 세척하고, Na2SO4 상에서 건조시키고, 여과하고, 감압 하에 농축시켜 잔류물을 수득하였으며, 이를 정제용-TLC (SiO2, 석유 에테르/에틸 아세테이트 =3/1, 플레이트 2)에 의해 정제하여 중간체 41 (270.00 mg, 243.42 μmol, 99.81% 수율)을 백색 고체로서 수득하였다.
중간체 42: [(1S)-1-[[(2R,3R,4S)-3-(4-브로모페닐)-2-[[(2-니트로페닐)술포닐아미노]메틸]-4-(트리틸옥시메틸)아제티딘-1-일]메틸]-3-[tert-부틸(디페닐)실릴]옥시-프로필] 아세테이트.
THF (2 mL) 및 H2O (2 mL) 중 [(1S)-1-[[(2R,3R,4S)-2-[[아세틸-(2-니트로페닐)술포닐-아미노]메틸]-3-(4-브로모페닐)-4-(트리틸옥시메틸)아제티딘-1-일]메틸]-3-[tert-부틸(디페닐)실릴]옥시-프로필] 아세테이트 (중간체 41) (270.00 mg, 243.42 μmol)의 용액에 LiOH.H2O (20.43 mg, 486.84 μmol)를 첨가하였다. 15℃에서 1시간 동안 교반한 후, 반응 혼합물을 H2O (30 mL)로 희석하고, DCM (20 mL* 4)으로 추출하였다. 합한 유기 층을 염수 (20 mL* 3)로 세척하고, Na2SO4 상에서 건조시키고, 여과하고, 감압 하에 농축시켜 잔류물을 수득하였으며, 이를 정제용-TLC (SiO2, 석유 에테르/에틸 아세테이트 =3/1, 플레이트 1)에 의해 정제하여 중간체 42 (200.00 mg, 187.41 μmol, 76.99% 수율)를 백색 고체로서 수득하였다.
중간체 43: [(1S)-1-[[(2R,3R,4S)-3-(4-브로모페닐)-2-[[(2-니트로페닐)술포닐아미노]메틸]-4-(트리틸옥시메틸)아제티딘-1-일]메틸]-3-히드록시-프로필] 아세테이트.
THF (3 mL) 중 [(1S)-1-[[(2R,3R,4S)-3-(4-브로모페닐)-2-[[(2-니트로페닐)술포닐아미노]메틸]-4-(트리틸옥시메틸)아제티딘-1-일]메틸]-3-[tert-부틸(디페닐)실릴]옥시-프로필] 아세테이트 (중간체 42) (200.00 mg, 187.41 μmol)의 용액에 TBAF (98.00 mg, 374.82 μmol)를 첨가하였다. 15℃에서 2시간 동안 교반한 후, 반응 혼합물을 감압 하에 농축시켜 용매를 제거하였다. 잔류물을 DCM (30 mL)으로 희석하고, H2O (15 mL* 5)에 이어서 염수 (10 mL* 3)로 세척하고, Na2SO4 상에서 건조시키고, 여과하고, 감압 하에 농축시켜 잔류물을 수득하였으며, 이를 정제용-TLC (SiO2, 석유 에테르/에틸 아세테이트 =1/1, 플레이트 1)에 의해 정제하여 중간체 43 (150.00 mg, 180.99 μmol, 96.57% 수율)을 백색 고체로서 수득하였다.
중간체 44: [(3S,8R,9R,10S)-9-(4-브로모페닐)-6-(2-니트로페닐)술포닐-10-(트리틸옥시메틸)-1,6-디아자비시클로[6.2.0]데칸-3-일] 아세테이트.
THF (2 mL) 중 PPh3 (94.94 mg, 361.98 μmol, 2.00 당량) 및 DIAD (73.20 mg, 361.98 μmol, 70.38 μL, 2.00 당량)의 혼합물을 0℃에서 N2 분위기 하에 교반하여 우윳빛 혼합물을 수득하였다. 이 혼합물에 THF (1 mL) 중 [(1S)-1-[[(2R,3R,4S)-3-(4-브로모페닐)-2-[[(2-니트로페닐)술포닐아미노]메틸]-4-(트리틸옥시메틸)아제티딘-1-일]메틸]-3-히드록시-프로필] 아세테이트 (중간체 43) (150.00 mg, 180.99 μmol)의 용액을 첨가하였다. 15℃에서 16시간 동안 교반한 후, 반응 혼합물을 감압 하에 농축시켜 용매를 제거하였다. 잔류물을 DCM (30 mL)으로 희석하고, H2O (10 mL* 2)로 세척하고, Na2SO4 상에서 건조시키고, 여과하고, 감압 하에 농축시켜 잔류물을 수득하였으며, 이를 정제용-TLC (SiO2, 석유 에테르/에틸 아세테이트 =1/1, 플레이트 1)에 의해 정제하여 중간체 44 (150.00 mg, 조 물질)를 백색 고체로서 수득하였다.
중간체 45: [(3S,8R,9R,10S)-9-(4-브로모페닐)-10-(트리틸옥시메틸)-1,6-디아자비시클로[6.2.0]데칸-3-일] 아세테이트.
CH3CN (3 mL) 중 [(3S,8R,9R,10S)-9-(4-브로모페닐)-6-(2-니트로페닐)술포닐-10-(트리틸옥시메틸)-1,6-디아자비시클로[6.2.0]데칸-3-일] 아세테이트 (중간체 44) (150 mg, 185.01 μmol)의 용액에 Cs2CO3 (120.56 mg, 370.02 μmol) 및 벤젠티올 (30.58 mg, 277.52 μmol, 28.31 μL)을 첨가하였다. 40℃에서 2시간 동안 교반한 후, 반응 혼합물을 감압 하에 농축시켜 용매를 제거하였다. 잔류물을 H2O (30 mL)로 희석하고, DCM (20 mL * 5)으로 추출하였다. 합한 유기 층을 염수 (20 mL * 3)로 세척하고, Na2SO4 상에서 건조시키고, 여과하고, 감압 하에 농축시켜 잔류물을 수득하였으며, 이를 정제용-TLC (SiO2, 석유 에테르/에틸 아세테이트 =1/1, 플레이트 1)에 의해 정제하여 중간체 45 (180.00 mg, 조 물질)를 황색 고체로서 수득하였다.
중간체 46: [(3S,8R,9R,10S)-9-(4-브로모페닐)-6-[(4-메톡시페닐)카르바모일]-10-(트리틸옥시메틸)-1,6-디아자비시클로[6.2.0]데칸-3-일] 아세테이트.
DCM (3 mL) 중 [(3S,8R,9R,10S)-9-(4-브로모페닐)-10-(트리틸옥시메틸)-1,6-디아자비시클로[6.2.0]데칸-3-일] 아세테이트 (중간체 45) (180 mg, 287.73 μmol)의 용액에 1-이소시아네이토-4-메톡시벤젠 (42.91 mg, 287.73 μmol, 36.99 μL)을 첨가하였다. 15℃에서 1시간 동안 교반한 후, 반응 혼합물을 H2O (15 mL)의 첨가에 의해 켄칭한 다음, DCM (20 mL * 4)으로 추출하였다. 합한 유기 층을 NaHCO3 용액 (15 mL), 염수 (15 mL*2)로 세척하고, Na2SO4 상에서 건조시키고, 여과하고, 감압 하에 농축시켜 잔류물을 수득하였으며, 이를 정제용-TLC (SiO2, 석유 에테르/에틸 아세테이트 =1/1, 플레이트 1)에 의해 정제하여 중간체 46 (200 mg, 258.15 μmol, 89.72% 수율)을 백색 고체로서 수득하였다.
중간체 47: [(3S, 8R,9R,10S)-9-(4-브로모페닐)-10-(히드록시메틸)-6-[(4-메톡시페닐)카르바모일]-1,6-디아자비시클로[6.2.0]데칸-3-일] 아세테이트.
DCM (3 mL) 중 [(3S, 8R,9R,10S)-9-(4-브로모페닐)-6-[(4-메톡시페닐)카르바모일]-10-(트리틸옥시메틸)-1,6-디아자비시클로[6.2.0]데칸-3-일] 아세테이트 (중간체 46) (200 mg, 258.15 μmol, 1.00 당량)의 용액에 TFA (294.34 mg, 2.58 mmol, 191.13 μL)를 첨가하였다. 15℃에서 2시간 동안 교반한 후, 반응 혼합물을 NaHCO3 용액 (20 mL)의 첨가에 의해 켄칭하고, DCM (20 mL * 5)으로 추출하였다. 합한 유기 층을 염수 (10 mL* 3)로 세척하고, Na2SO4 상에서 건조시키고, 여과하고, 감압 하에 농축시켜 잔류물을 수득하였으며, 이를 정제용-TLC (SiO2, 석유 에테르/에틸 아세테이트 =1/1, 플레이트 1)에 의해 정제하여 중간체 47 (130.00 mg, 244.16 μmol, 94.58% 수율)을 백색 고체로서 수득하였다.
중간체 48: [(3S, 8R,9S,10S)-9-(4-브로모페닐)-10-[(1,3-디옥소이소인돌린-2-일)메틸]-6-[(4-메톡시페닐)카르바모일]-1,6-디아자비시클로[6.2.0]데칸-3-일] 아세테이트.
THF (1 mL) 중 PPh3 (128.08 mg, 488.32 μmol, 2.00 당량) 및 DIAD (98.74 mg, 488.32 μmol, 94.94 μL, 2.00 당량)의 혼합물을 0℃에서 N2 분위기 하에 교반하여 우윳빛 혼합물을 수득하였다. 이 우윳빛 혼합물에 0℃에서 THF (1 mL) 중 (3S,8R,9R,10S)-9-(4-브로모페닐)-10-(히드록시메틸)-6-[(4-메톡시페닐)카르바모일]-1,6-디아자비시클로[6.2.0]데칸-3-일] 아세테이트 (중간체 47) (130 mg, 244.16 μmol) 및 이소인돌린-1,3-디온 (53.88 mg, 366.24 μmol)의 용액을 첨가하였다. 15℃에서 12시간 동안 교반한 후, 반응 혼합물을 감압 하에 농축시켜 용매를 제거한 다음, 정제용-TLC (SiO2, 석유 에테르/에틸 아세테이트 =1/1, 플레이트 1)에 의해 정제하여 중간체 48 (200 mg, 조 물질)을 황색 오일로서 수득하였다.
중간체 49: (3S, 8R,9S,10S)-10-(아미노메틸)-9-(4-브로모페닐)-3-히드록시-N-(4-메톡시페닐)-1,6-디아자비시클로[6.2.0]데칸-6-카르복스아미드.
EtOH (2 mL) 중 [(3S, 8R,9S,10S)-9-(4-브로모페닐)-10-[(1,3-디옥소이소인돌린-2-일)메틸]-6-[(4-메톡시페닐)카르바모일]-1,6-디아자비시클로[6.2.0]데칸-3-일] 아세테이트 (중간체 48) (200 mg, 302.32 μmol)의 용액에 N2H4.H2O (29.39 μL, 604.64 μmol)을 첨가하였다. 70℃에서 2시간 동안 교반한 후, 반응 혼합물을 감압 하에 농축시켜 용매를 제거하였다. 잔류물을 H2O (10 mL)로 희석하고, DCM (10 mL* 5)으로 추출하였다. 합한 유기 층을 염수 (10 mL*2)로 세척하고, Na2SO4 상에서 건조시키고, 여과하고, 감압 하에 농축시켜 잔류물을 수득하였으며, 이를 정제용-TLC (SiO2, DCM: MeOH = 10:1, 플레이트 1)에 의해 정제하여 중간체 49 (60 mg, 122.60 μmol, 40.55% 수율)를 백색 고체로서 수득하였다.
중간체 50: (3S,8R,9S,10S)-9-(4-브로모페닐)-10-[(디메틸아미노)메틸]-3-히드록시-N-(4-메톡시페닐)-1,6-디아자비시클로[6.2.0]데칸-6-카르복스아미드.
DCM (3 mL) 중 (3S, 8R,9S,10S)-10-(아미노메틸)-9-(4-브로모페닐)-3-히드록시-N-(4-메톡시페닐)-1,6-디아자비시클로[6.2.0]데칸-6-카르복스아미드 (중간체 49) (60 mg, 122.60 μmol), 포름알데히드 (54.77 μL, 735.60 μmol), MgSO4 (147.57 mg, 1.23 mmol) 및 AcOH (0.70 μL, 12.26 μmol)의 용액에 NaBH(OAc)3 (77.95 mg, 367.80 μmol)을 첨가하였다. 15℃에서 2시간 동안 교반한 후, 반응 혼합물을 셀라이트를 통해 여과하고, NaHCO3 용액 (10 mL * 3)으로 세척하였다. 합한 유기 층을 Na2SO4 상에서 건조시키고, 여과하고, 감압 하에 농축시켜 중간체 50 (50 mg, 96.63 μmol, 78.81% 수율)을 백색 고체로서 수득하였다.
E15의 합성: (3S,8R,9S,10S)-10-[(디메틸아미노)메틸]-3-히드록시-N-(4-메톡시페닐)-9-[4-(2-페닐에티닐)페닐]-1,6-디아자비시클로[6.2.0]데칸-6-카르복스아미드.
CH3CN (1 mL) 중 (3S, 8R,9S,10S)-9-(4-브로모페닐)-10-[(디메틸아미노)메틸]-3-히드록시-N-(4-메톡시페닐)-1,6-디아자비시클로[6.2.0]데칸-6-카르복스아미드 (중간체 50) (50 mg, 96.63 μmol) 및 에티닐벤젠 (29.61 mg, 289.89 μmol, 31.84 μL)의 용액에 Cs2CO3 (125.94 mg, 386.52 μmol) 및 XPhos Pd G3 촉매 (8.18 mg, 9.66 μmol)를 첨가하였다. N2 분위기 하에 70℃에서 1시간 동안 교반한 후, 반응 혼합물을 정제용-TLC (SiO2, DCM: MeOH = 10:1, 플레이트 1)에 의해 정제하여 촉매를 제거하여 조 생성물을 수득하였으며, 이를 추가의 정제용 HPLC (정제용 HPLC (칼럼: 루나 C18 150*25 5u; 이동상: A: 물 (0.225% 포름산) B: 아세토니트릴)에 의해 정제하여 생성물인 페닐에티닐)페닐]-1,6-디아자비시클로[6.2.0]데칸-6-카르복스아미드 (10 mg, 17.10 μmol, 17.7% 수율, 포름산 염))를 백색 고체로서 수득하였다.
1H NMR (400MHz, 클로로포름-d) δ = 8.44 (br s, 1H), 7.54 (br d, J=7.0 Hz, 4H), 7.44 - 7.34 (m, 5H), 7.29 - 7.24 (m, 2H), 6.83 (br d, J=8.8 Hz, 2H), 6.29 (s, 1H), 5.71 (br s, 1H), 3.87 (br s, 2H), 3.77 (s, 3H), 3.75 - 3.62 (m, 4H), 3.52 - 3.38 (m, 1H), 3.18 (br dd, J=6.1, 13.6 Hz, 1H), 2.93 - 2.79 (m, 1H), 2.77 - 2.66 (m, 2H), 2.66 - 2.58 (m, 1H), 2.19 (s, 6H), 2.08 - 1.97 (m, 1H), 1.96 - 1.85 (m, 1H)
실시예 16-17: (8R,9S,10S)-10-[(디메틸아미노)메틸]-3-히드록시-N-(4-메톡시페닐)-9-[4-(2-페닐에티닐)페닐]-1,6-디아자비시클로[6.2.0]데칸-6-카르복스아미드의 이성질체
Figure pct00032
중간체 51: (8R,9S,10S)-10-트리틸옥시메틸-3-히드록시-N-(4-메톡시페닐)-9-[4-브로모페닐]-1,6-디아자비시클로[6.2.0]데칸-6-카르복스아미드.
THF (1.00 mL) 중 (3Z,8R,9R,10S)-9-(4-브로모페닐)-N-(4-메톡시페닐)-10-(트리틸옥시메틸)-1,6-디아자비시클로[6.2.0]데스-3-엔-6-카르복스아미드 (중간체 25, 980.00 mg, 1.37 mmol, 1.00 당량)의 용액에 0℃에서 BH3-Me2S (10 M, 686 μL, 5.00 당량)을 첨가하고, 반응 혼합물을 25℃에서 3시간 동안 교반하였다. H2O (1.24 g, 68.56 mmol, 1.24 mL, 50.00 당량)를 천천히 첨가하고, 반응 혼합물을 25℃에서 30분 동안 교반하였다. 이어서, 내지 반응 용액을 NaOH/H2O (18.27 g, 68.50 mmol, 15% 순도, 50.00 당량) 및 H2O2 (6.66 g, 68.56 mmol, 5.65 mL, 35% 순도, 50.00 당량)를 첨가하였다. 생성된 반응 혼합물을 25℃에서 3시간 동안 교반하였다. 반응물을 H2O (10 mL)로 켄칭하고, DCM (50 mL)으로 추출하였다. 합한 유기 층을 무수 Na2SO4 상에서 건조시키고, 농축시켜 조 생성물을 백색 고체 (혼합물)로서 수득하였고, 이를 추가 정제 없이 후속 단계에 사용하였다.
중간체 52: [(8R,9R,10S)-9-(4-브로모페닐)-6-[(4-메톡시페닐)카르바모일]-10-(트리틸옥시메틸)-1,6-디아자비시클로[6.2.0]데칸-4-일] 아세테이트.
0℃에서 DCM (2 mL) 중 중간체 51 (1.2 g, 1.64 mmol), Et3N (497.85 mg, 4.92 mmol) 및 DMAP (20.04 mg, 164 μmol)의 용액에 Ac2O (334.86 mg, 3.28 mmol)를 첨가하였다. 25℃에서 3시간 동안 교반한 후, 반응물을 H2O (10 mL)로 켄칭하고, DCM (20 mL)으로 추출하여 유기 층을 수득하였다. 유기 층을 무수 Na2SO4 상에서 건조시키고, 농축시켜 잔류물을 수득하였다. 잔류물을 정제용-TLC (석유 에테르: 에틸 아세테이트 = 1:1)에 의해 정제하여 [(8R,9R,10S)-9-(4-브로모페닐)-6-[(4-메톡시페닐)카르바모일]-10-(트리틸옥시메틸)-1,6-디아자비시클로[6.2.0]데칸-4-일] 아세테이트의 2종의 이성질체를 수득하였다. 각각의 이성질체를 정제용-TLC에 의해 분리하여 이성질체 1 (126 mg, 9.92% 수율, Rf = 0.5)을 백색 고체로서, 그리고 이성질체 2 (197 mg, 15.50% 수율, Rf = 0.4)를 백색 고체로서, 그리고 혼합된 분획 [(8R,9R,10S)-9-(4-브로모페닐)-6-[(4-메톡시 페닐)카르바모일]-10-(트리틸옥시메틸)-1,6-디아자비시클로[6.2.0]데칸-4-일] 아세테이트 (624 mg, 49.11% 수율, Rf = 0.3)를 백색 고체로서 수득하였다. 각각의 입체이성질체를 개별적으로 분리하고, 각각의 화합물에 대한 4 위치의 입체화학은 결정할 수 없었다.
이성질체 1:
1H NMR (400MHz, CDCl3-d1) δ8.25 (s, 1H), 7.47 (d, J = 8.8 Hz, 2H), 7.19-7.11 (m, 23H), 6.77 (d, J = 8.8 Hz, 2H), 4.62 (s, 1H), 3.92-3.88 (m, 1H), 3.74-3.70 (m, 1H), 3.56-3.55 (m, 4H), 3.45-3.41 (m, 1H), 3.30-3.29 (m, 1H), 3.08-3.07 (m, 3H), 2.89-2.87 (m, 1H), 2.73-2.70 (m, 1H), 2.55-2.52 (m, 1H), 2.43 (s, 1H), 2.06 (s, 3H), 1.92-1.88 (m, 2H), 1.12-1.1.10 (m, 3H), 0.9-0.87 (m, 3H).
이성질체 2:
1H NMR (400MHz, CDCl3-d1) δ7.34-7.22 (m, 23H), 7.09 (d, J = 8 Hz, 2H), 6.83 (d, J = 8.8 Hz, 2H), 5.07-5.04 (m, 1H), 3.92-3.88 (m, 1H), 3.77 (m, 5H), 3.65-3.58 (m, 3H), 3.25-3.27 (m, 2H), 3.03-3.00 (m, 1H), 3.02-2.99 (m, 1H), 2.61-2.57 (m, 1H), 2.45-2.44 (m, 1H), 2.16 (s, 3H), 2.08-2.05 (m, 1H), 1.74-1.71 (m, 2H), 1.00-0.95 (m, 1H).
혼합된 분획 1H NMR (400MHz, CDCl3-d1) δ7.52-7.17 (m, 21H), 6.84-6.82 (m, 3H), 4.81 (s, 1H), 4.29-4.16 (m, 1H), 3.99-3.77 (m, 1H), 3.67-3.66 (m, 1H), 3.65-3.63 (m, 6H), 3.63-3.56 (m, 5H), 3.40-3.39 (m, 3H), 3.16-3.12 (m, 2H), 2.96-2.94 (m, 1H), 2.63-.59 (m, 1H), 2.28-2.25 (m, 1H), 1.97 (s, 3H), 1.89-1.86 (m, 1H), 1.28-1.25 (m, 2H), 0.88-0.84 (m, 1).
중간체 53: (8R,9R,10S)-9-(4-브로모페닐)-10-(히드록시메틸)-6-((4-메톡시페닐)카르바모일)-1,6-디아자비시클로[6.2.0]데칸-3-일 아세테이트.
DCM (2 mL) 중 [(8R,9R,10S)-9-(4-브로모페닐)-6-[(4-메톡시 페닐)카르바모일]-10-(트리틸옥시메틸)-1,6-디아자비시클로[6.2.0]데칸-4-일] 아세테이트 (624 mg, 805.43 μmol)의 용액에 TFA (918.35 mg, 8.05 mmol, 596.33 μL)를 첨가하였다. 25℃에서 3시간 동안 교반한 후, 반응 혼합물을 NaHCO3 (10 mL)에 의해 켄칭하고, DCM (20 mL)으로 추출하여 유기 층을 수득하였다. 유기 층을 무수 Na2SO4 상에서 건조시키고, 농축시켜 잔류물을 수득하였으며, 정제용-TLC (석유 에테르: 에틸 아세테이트 = 1:1)에 의해 정제하여 중간체 53 (265 mg, 61.80% 수율)을 백색 고체로서 수득하였다.
1H NMR (400MHz, CDCl3-d1) δ7.46 (d, J = 8 Hz, 2H), 7.38 (d, J = 8 Hz, 2H), 7.26 (d, J = 8 Hz, 2H), 6.83 (d, J = 8 Hz, 2H), 6.47 (s, 1H), 4.80 (s, 1H), 3.81-3.77 (m, 4H), 3.64-3.57 (m, 5H), 3.52-3.47 (m, 3H), 3.25-3.22 (m, 1H), 3.21 (s, 1H), 2.97-2.84 (m, 1H), 22.33-2.23 (m, 2H), 2.24 (s, 2H), 2.15-1.96 (m, 2H).
중간체 54: [(8R,9S,10S)-9-(4-브로모페닐)-10-[(1,3-디옥소이소인돌린-2-일)메틸]-6-[(4-메톡시페닐)카르바모일]-1,6-디아자비시클로[6.2.0]데칸-3-일] 아세테이트.
THF (2 mL) 중 중간체 53 (275 mg, 516.5 μmol), 이소인돌린-1,3-디온 (83.59 mg, 568.15 μmol) 및 PPh3 (203.21 mg, 774.75 μmol)의 용액에 DIAD (156.66 mg, 774.75 μmol)를 25℃에서 적가하였다. 25℃에서 5시간 동안 교반한 후, 반응 혼합물을 농축시켜 잔류물을 수득하였다. 잔류물을 정제용-TLC (석유 에테르: 에틸 아세테이트 = 1:1)에 의해 정제하여 중간체 54 (460 mg, 조 물질)를 담황색 고체로서 수득하였다.
1H NMR (4400MHz, CDCl3-d1) δ7.79 (s, 2H), 7.70-7.65 (m, 20H), 7.55-7.53 (m, 20H), 7.48-7.45 (m, 30H), 6.86 (m, 3H), 6.62 (s, 1H), 4.76 (s, 2H), 3.86-3.83 (m, 6H), 3.79-7.77 (m, 3H), 3.65-3.64 (m, 3H), 3.54-3.49 (m, 1H), 3.09-3.04 (m, 1H), 2.85-2.81 (m, 1H), 2.56-2.53 (m, 1H), 3.37-3.14 (m, 1H), 2.21-2.14 (m, 1H).
중간체 55: [(8R,9S,10S)-10-(아미노메틸)-9-(4-브로모페닐)-6-[(4-메톡시페닐)카르바모일]-1,6-디아자비시클로[6.2.0]데칸-3-일] 아세테이트.
EtOH (1 mL) 중 중간체 54 (460 mg, 695.35 μmol)의 용액에 히드라진 수화물 (53.28 mg, 1.04 mmol, 51.73 μL)을 적가하였다. 80℃에서 2시간 동안 교반한 후, 반응 혼합물을 여과하고, 농축시켜 중간체 55 (500 mg, 조 물질)를 정제 없이 갈색 액체로서 수득하였으며, 후속 단계에 직접 사용할 것이다.
HRMS (ESI): 계산치 C24H28BrN4O3 [M + H]+ 531.15, 실측치 531.1
중간체 56: (8R,9S,10S)-10-(아미노메틸)-9-(4-브로모페닐)-3-히드록시-N-(4-메톡시페닐)-1,6-디아자비시클로[6.2.0]데칸-6-카르복스아미드.
EtOH: H2O = 2:1 (1 mL) 중 중간체 55 (300 mg, 564.50 μmol)의 용액에 LiOH.H2O (47.37 mg, 1.13 mmol)를 첨가하였다. 40℃에서 2시간 동안 교반한 후, 반응 혼합물을 H2O (3 mL)로 희석하고, DCM (10 mL)으로 추출하여 유기 층을 수득하였다. 유기 층을 농축시키고, 정제용-TLC (디클로로메탄: 메탄올=10:1)에 의해 정제하여 중간체 56 (90 mg, 32.58% 수율)을 백색 고체로서 수득하였다.
1H NMR (4400MHz, CDCl3-d1) δ7.52-7.47 (m, 2H), 7.34-7.32 (m, 18H), 7.27-7.22 (m, 3H), 6.84 (d, J = 9.2 Hz, 2H), 6.17 (s, 1H), 3.87-3.84 (m, 1H), 3.78-3.74 (m, 3H), 3.70-3.66 (m, 3H), 3.57-3.55 (m, 2H), 3.13-3.10 (m, 1H), 2.77-2.71 (m, 1H), 2.04-1.88 (m, 5H).
중간체 57: (8R,9S,10S)-9-(4-브로모페닐)-10-[(디메틸아미노)메틸]-3-히드록시-N-(4-메톡시페닐)-1,6-디아자비시클로[6.2.0]데칸-6-카르복스아미드.
DCM (2 mL) 중 중간체 56 (90 mg, 183.9 μmol)의 교반 용액에 HCHO (149.26 mg, 1.84 mmol, 136.93 μL, 37% 용액) 및 MgSO4 (442.72 mg, 3.68 mmol)를 첨가하였다. 25℃에서 0.5시간 동안 교반한 후, NaBH(OAc)3 (194.88 mg, 919.49 μmol)을 첨가하였다. 25℃에서 1.5시간 동안 교반한 후, 반응 혼합물을 농축시켜 잔류물을 수득하였다. 잔류물을 정제용-TLC (디클로로메탄: 메탄올= 10: 1)에 의해 정제하여 중간체 57 (58 mg, 60.95% 수율)을 담갈색 고체로서 수득하였다.
1H NMR (400MHz, CDCl3-d1) δ7.51-7.44 (m, 2H), 7.30-7.23 (m, 5H), 6.85 (d, J = 8.8 Hz, 2H), 6.15 (s, 1H), 3.89-3.87 (m, 2H), 3.83-3.78 (m, 3H), 3.73-3.67 (m, 4H), 3.20-3.15 (m, 1H), 2.72-2.69 (m, 2H), 2.60-2.51 (m, 2H), 2.14 (s, 5H), 2.05-2.026 (m, 4H), 2.00-1.91 (m, 1H).
E16 및 E17의 합성: (8R,9S,10S)-10-[(디메틸아미노)메틸]-3-히드록시-N-(4-메톡시페닐)-9-[4-(2-페닐에티닐)페닐]-1,6-디아자비시클로[6.2.0]데칸-6-카르복스아미드 이성질체 1 (E16) 및 이성질체 2 (E17).
아세토니트릴 (1 mL) 중 중간체 57 (50 mg, 96.63 μmol) 및 에티닐벤젠 (29.61 mg, 289.89 μmol)의 용액에 XPhos Pd G3 (8.18 mg, 9.66 μmol) 및 Cs2CO3 (62.97 mg, 193.26 μmol)을 첨가하였다. 70℃에서 2시간 동안 교반한 후, 반응 혼합물을 농축시켜 잔류물을 수득하였다. 잔류물을 (8R,9S,10S)-10-[(디메틸아미노)메틸]-3-히드록시-N-(4-메톡시페닐)-9-[4-(2-페닐에티닐)페닐]-1,6-디아자비시클로[6.2.0]데칸-6-카르복스아미드의 정제용 HPLC (칼럼: 워터스 엑스브리지 정제용 OBD C18 150*30 5u; A: 물 (0.225% 포름산) B: 아세토니트릴)에 의해 정제하여 각각의 입체이성질체를 수득하였다. 각각의 이성질체를 분리하여 이성질체 1 (5.1 mg, 9.80% 수율) 및 이성질체 2 (17.1 mg, 32.85% 수율)를 백색 고체로서 수득하였다.
E16: 이성질체 1: HRMS (ESI): 계산치 C32H35N4O2 [M + H]+ 539.29, 실측치 529.
1H NMR (400MHz, MeOD-d4) δ7.60-7.50 (m, 6H), 7.39-7.37 (m, 3H), 7.36-7.18 (m, 2H), 6.85 (d, J = 8.8 Hz, 2H), 3.83-3.80 (m, 2H), 3.76 (s, 3H),3.69-3.68 (m, 2H), 3.55-3.52 (m, 3H), 3.15-3.09 (m, 2H), 3.01-3.00 (m, 2H), 3.41-3.34 (m, 2H), 2.26 (m, 6H), 1.75-1.72 (m, 1H).
E17: 이성질체 2: HRMS (ESI): 계산치 C32H35N4O2 [M + H]+ 539.29, 실측치 529.40
1H NMR (400MHz, MeOD-d4) δ7.61-7.54 (m, 6H), 7.50 (d, J = 1.6 Hz, 3H), 7.38-7.36 (m, 2H), 6.85 (d, J = 8.8 Hz, 2H), 3.84-3.80 (m, 3H), 3.75 (s, 3H), 3.67-3.61 (m, 2H), 3.55-3.51 (m, 1H), 3.08-3.05 (m, 2H), 2.83-2.80 (m, 1H), 2.74-2.68 (m, 3H), 2.26 (s, 6H), 2.03-1.94 (m, 2H).
실시예 18-19: (8R,9R,10S)-4-(디메틸아미노)-10-(히드록시메틸)-N-(4-메톡시페닐)-9-[4-(2-페닐에티닐)페닐]-1,6-디아자비시클로[6.2.0]데칸-6-카르복스아미드 이성질체 1 ("E18") 및 이성질체 2 ("E19")
Figure pct00033
중간체 58: (8R,9R,10S)-9-(4-브로모페닐)-N-(4-메톡시페닐)-3-옥소-10-((트리틸옥시)메틸)-1,6-디아자비시클로[6.2.0]데칸-6-카르복스아미드.
DCM (5 mL) 중 중간체 51 (500.00 mg, 682.41 μmol, 1 당량)의 용액에 데스-마르틴 (347.32 mg, 818.89 μmol)을 첨가하였다. 25℃에서 3시간 동안 교반한 후, 반응 혼합물을 포화 Na2SO3 (5 mL)에 의해 켄칭하고, DCM (10 mL)으로 추출하여 유기 층을 수득하였다. 유기 층을 농축시키고, 정제용-TLC (석유 에테르: 에틸 아세테이트 = 1:1)에 의해 정제하여 중간체 58 (280 mg, 56.15% 수율)을 갈색 고체로서 수득하였다.
1H NMR (400MHz, CDCl3-d1) δ7.37-7.19 (m, 30H), 6.86-6.82 (m, 2H), 6.20 (s, 1H), 4.27-4.20 (m, 3H), 4.07-3.81 (m, 1H), 3.79-3.77 (m, 3H), 3.70-3.66 (m, 3H), 3.54-3.31 (m, 1H), 3.06-3.04 (m, 1H), 2.98-2.94 (m, 2H), 2.76-2.73 (m, 1H), 2.72-2.45 (m, 1H).
중간체 59: (8R,9R,10S)-9-(4-브로모페닐)-3-(디메틸아미노)-N-(4-메톡시페닐)-10-((트리틸옥시)메틸)-1,6-디아자비시클로[6.2.0]데칸-6-카르복스아미드.
MeOH (2 mL) 중 중간체 58 (250 mg, 342.14 μmol)의 교반 용액에 N-메틸메탄아민 (2 M, 1.71 mL) 및 CH3COOH (205.46 mg, 3.42 mmol)를 첨가하였다. 25℃에서 0.5시간 동안 교반한 후, NaBH3CN (21.50 mg, 342.14 μmol)을 첨가하였다. 25℃에서 1.5시간 동안 교반한 후, 반응 혼합물을 농축시켜 잔류물을 수득하였다. 잔류물을 정제용-TLC (디클로로메탄: 메탄올 = 15: 1)에 의해 정제하여 중간체 59 (120 mg, 46.16% 수율)를 담갈색 고체로서 수득하였다.
HRMS (ESI) 계산치 C32H33N4O [M + H]+ 759.28, 실측치 759.2.
중간체 60: (8R,9R,10S)-9-(4-브로모페닐)-3-(디메틸아미노)-10-(히드록시메틸)-N-(4-메톡시페닐)-1,6-디아자비시클로[6.2.0]데칸-6-카르복스아미드.
DCM (1 mL) 중 중간체 59 (115 mg, 151.36 μmol)의 교반 용액에 TFA (172.58 mg, 1.51 mmol). 25℃에서 12시간 동안 교반한 후, 반응 혼합물을 포화 NaHCO3 (5 mL)으로 켄칭하고, DCM (5 mL)으로 추출하여 유기 층을 수득하였다. 유기 용액을 수집하고, 농축시킨 다음, 정제용-TLC (디클로로메탄: 메탄올 = 10: 1)에 의해 정제하여 중간체 60 (45.00 mg, 57.45% 수율)을 담갈색 고체로서 수득하였다.
1H NMR (400MHz, CDCl3-d1) δ7.47-7.43 (m, 2H), 7.38-7.31 (m, 4H), 6.83 (d, J = 8.8 Hz, 2H), 3.99 (s, 1H), 3.77 (s, 5H), 3.63-3.61 (m, 5H), 3.59-3.57 (m, 5H), 3.48-3.46 (m, 2H), 3.32-3.13 (m, 3H), 2.76 (s, 6H), 2.48-2.34 (m, 4H), 2.04-2.00 (m, 1H).
E18 및 E19의 합성: (8R,9R,10S)-4-(디메틸아미노)-10-(히드록시메틸)-N-(4-메톡시페닐)-9-[4-(2-페닐에티닐)페닐]-1,6-디아자비시클로[6.2.0]데칸-6-카르복스아미드 이성질체 1 (E18) 및 이성질체 2 (E19)
아세토니트릴 (1 mL) 중 중간체 59 (30 mg, 57.98 μmol) 및 에티닐벤젠 (17.76 mg, 173.94 μmol)의 용액에 XPhos Pd G3 (4.91 mg, 5.80 μmol) 및 Cs2CO3 (37.78 mg, 115.96 μmol)을 첨가하였다. 70℃에서 2시간 동안 교반한 후, 반응 혼합물을 농축시켜 잔류물을 수득하였다. 잔류물을 정제용 HPLC (칼럼: 워터스 엑스브리지 정제용 OBD C18 150*30 5u; A: 물 (0.225% 포름산) B: 아세토니트릴)에 의해 정제하여 이성질체 1 (E18) (2.60 mg, 8.32% 수율) 및 이성질체 2 (E19) (11.40 mg, 36.50% 수율)로서 분리된 (8R,9R,10S)-4-(디메틸아미노)-10-(히드록시메틸)-N-(4-메톡시페닐)-9-[4-(2-페닐에티닐)페닐]-1,6-디아자비시클로[6.2.0]데칸-6-카르복스아미드의 각각의 입체이성질체를 백색 고체로서 수득하였다.
E18: 이성질체 1, HRMS (ESI) 계산치: C33H38N4O3 [M + H]+ 539.29, 실측치 539.4
1H NMR (400MHz, MeOD-d4) δ8.34 (s, 1H), 7.56-7.51 (m, 2H), 7.50-7.48 (m, 4H), 7.37 (d, J = 5.2 Hz, 2H), 7.26 (d, J = 9.6 Hz, 2H), 6.85 (d, J = 8.8 Hz, 1H), 4.09-4.05 (m, 1H), 3.75-3.72 (m, 3H), 3.66-3.65 (m, 1H), 3.52-3.46 (m, 4H), 3.26-3.20 (m, 2H), 2.64 (s, 6H), 2.55-2.52 (m, 1H), 1.97 (s, 2H).
E19: 이성질체 2, HRMS (ESI) 계산치: C33H38N4O3 [M + H]+ 539.29, 실측치 539.4
1H NMR (400MHz, MeOD-d4) δ8.55 (s, 1H), 7.61 (d, J = 8 Hz, 2H), 7.51-7.49 (m, 4H), 7.38-7.36 (m, 3H), 7.23 (d, J = 8.8 Hz, 2H), 6.86 (d, J = 8.8 Hz, 2H), 4.21-4.11 (m, 1H), 3.76-3.73 (m, 5H), 3.76-3.73 (m, 2H), 3.62-3.40 (m, 3H), 3.31-3.13 (m, 3H), 2.81-2.77 (s, 6H), 2.64 (s, 1H), 2.46 (s, 1H), 2.06-2.03 (m, 1H).
실시예 20-21: (8R,9S,10S)-9-(4-브로모페닐)-4-(디메틸아미노)-10-[(디메틸아미노)메틸]-N-(4-메톡시페닐)-1,6-디아자비시클로[6.2.0]데칸-6-카르복스아미드 이성질체 1 ("E20") 및 이성질체 2 실시예 21 ("E21")
Figure pct00034
중간체 61: (8R,9S,10S)-3-(디메틸아미노)-10-((1,3-디옥소이소인돌린-2-일)메틸)-N-(4-메톡시페닐)-9-(4-(페닐에티닐)페닐)-1,6-디아자비시클로[6.2.0]데칸-6-카르복스아미드.
THF (2 mL) 중 실시예 18 및 19 (165 mg, 318.87 μmol, 1 당량), 이소인돌린-1,3-디온 (51.61 mg, 350.75 μmol) 및 PPh3 (125.45 mg, 478.30 μmol)의 혼합물의 용액에 DIAD (96.72 mg, 478.30 μmol)를 적가하였다. 25℃에서 12시간 동안 교반한 후, 잔류물을 정제용-TLC (석유 에테르: 에틸 아세테이트 = 0:1)에 의해 정제하여 중간체 61 (184 mg, 89.25% 수율)을 담황색 고체로서 수득하였다.
1H NMR (400MHz, CDCl3-d1) δ7.83-7.81 (m, 1H), 7.73-7.72 (m, 2H), 7.55-7.26 (m, 5H), 6.82-6.79 (m, 2H), 3.94-3.74 (m, 2H), 3.72 (s, 3H), 3.67-3.56 (m, 5H), 3.54-3.55 (m, 2H), 3.35-3.06 (m, 1H), 2.77 (s, 6H), 1.26 (s, 1H).
중간체 62: (8R,9S,10S)-10-(아미노메틸)-3-(디메틸아미노)-N-(4-메톡시페닐)-9-(4-(페닐에티닐)페닐)-1,6-디아자비시클로[6.2.0]데칸-6-카르복스아미드
EtOH (1 mL) 중 중간체 61 (174 mg, 260.56 μmol)의 용액에 히드라진 수화물 (19.96 mg, 390.84 μmol)을 적가하였다. 80℃에서 2시간 동안 교반한 후, 반응 혼합물을 여과하고, 농축시켜 잔류물을 수득하였다. 잔류물을 정제용-TLC (디클로로메탄: 메탄올=6:1)에 의해 정제하여 중간체 62 (50.00 mg, 35.69% 수율)를 갈색 액체로서 수득하였다.
HRMS (ESI) 계산치 C33H39N5O2 [M + H]+ 538.31, 실측치 538.2
E20 및 E21의 합성: (4S,8R,9S,10S)-9-(4-브로모페닐)-4-(디메틸아미노)-10-[(디메틸아미노)메틸]-N-(4-메톡시페닐)-1,6-디아자비시클로[6.2.0]데칸-6-카르복스아미드 (E20) 및 (4R,8R,9S,10S)-9-(4-브로모페닐)-4-(디메틸아미노)-10-[(디메틸아미노)메틸]-N-(4-메톡시페닐)-1,6-디아자비시클로[6.2.0]데칸-6-카르복스아미드 (E21).
DCM (2.00 mL) 중 중간체 61 (50 mg, 96.81 μmol)의 교반 용액에 HCHO (78.57 mg, 968.10 μmol, 72.08 μL) 및 MgSO4 (116.53 mg, 968.10 μmol)을 첨가하였다. 25℃에서 0.5시간 동안 교반한 후, CH3COOH (5.81 mg, 96.81 μmol) 및 NaBH(OAc)3 (102.59 mg, 484.05 μmol)을 첨가하였다. 25℃에서 1.5시간 동안 교반한 후, 반응 혼합물을 H2O (5 mL)로 켄칭하고, DCM (20 mL * 3)으로 추출하여 유기 층을 수득하였다. 유기 층을 무수 Na2SO4 상에서 건조시키고, 농축시켜 잔류물을 수득하였다. 잔류물을 정제용 HPLC에 의해 정제하여 (8R,9S,10S)-9-(4-브로모페닐)-4-(디메틸아미노)-10-[(디메틸아미노)메틸]-N-(4-메톡시페닐)-1,6-디아자비시클로[6.2.0]데칸-6-카르복스아미드를 이성질체 1 (E20) (2.90 mg, 5.33 μmol, 5.51% 수율)로서 담갈색 고체로서 (HRMS (ESI) 계산치: C35H43N5O2 [M + H]+ 566.34, 실측치 566.4; 1H NMR (400MHz, MeOD-d4) δ7.61-7.51 (m, 5H), 7.44-7.38 (m, 4H), 7.37-7.23 (m, 2H), 6.87-6.85 (m, 2H), 4.05-3.77 (m, 1H), 3.77 (s, 3H), 3.66-3.51 (m, 2H), 3.19-3.16 (m, 1H), 2.50-2.47 (m, 1H), 2.35-2.19 (m, 1H), 1.86-1.80 (m, 1H))), 그리고 이성질체 2 (E21) (15.20 mg, 27.91 μmol, 28.83% 수율)를 담갈색 고체로서 수득하고 분리하였다 (1H NMR (400MHz, MeOD-d4) δ7.56-7.54 (m, 6H), 7.52-7.51 (m, 3H), 7.23-7.22 (m, 2H), 6.83-6.84 (m, 2H), 4.14-4.12 (m, 1H), 3.87-3.81 (m, 1H), 3.76 (s, 3H), 3.67-3.48 (m, 2H), 3.24-3.22 (m, 2H), 2.77 (s, 6H), 2.71-2.60 (m, 4H), 2.32-2.31 (m, 2H), 2.31-2.30 (m, 1H)).
실시예 22: (3S,4R,8R,9R,10S)-3,4-디히드록시-10-(히드록시메틸)-N-(4-메톡시페닐)-9-(4-(피리딘-3-일에티닐)페닐)-1,6-디아자비시클로[6.2.0]데칸-6-카르복스아미드 ("E22")
Figure pct00035
중간체 63a 및 63b: (3S,4R,8R,9R,10S)-9-(4-브로모페닐)-3,4-디히드록시-N-(4-메톡시페닐)-10-(트리틸옥시메틸)-1,6-디아자비시클로[6.2.0]데칸-6-카르복스아미드 (63a) 및 (3R,4S,8R,9R,10S)-9-(4-브로모페닐)-3,4-디히드록시-N-(4-메톡시페닐)-10-(트리틸옥시메틸)-1,6-디아자비시클로[6.2.0]데칸-6-카르복스아미드 (63b)
아세톤/H2O = 10:1 (1 mL) 중 중간체 25 (220 mg, 307.83 μmol) 및 NMO (43.27 mg, 369.4 μmol)의 용액에 25℃에서 OsO4 (7.83 mg, 30.78 μmol)를 첨가하였다. 25℃에서 12시간 동안 교반한 후, 반응 혼합물을 농축시켜 잔류물을 수득하였다. 잔류물을 정제용-TLC (석유 에테르: 에틸 아세테이트 = 1: 5)에 의해 정제하여 중간체 63a (120 mg, 52.07% 수율)를 백색 고체로서 (1H NMR (400MHz, CDCl3-d1) δ7.31-7.05 (m, 23H), 6.85-6.81 (m, 2H), 6.82 (d, J = 8 Hz, 2H), 4.23-4.19 (m, 1H), 3.99 (s, 1H), 3.76-3.73 (m, 6H), 3.50-3.43 (m, 2H), 3.19-3.13 (m, 2H), 2.98-2.96 (m, 1H), 2.86-2.84 (m, 1H), 2.78-2.59 (m, 1H)), 그리고 중간체 63b (134 mg, 58.14% 수율)를 백색 고체로서 수득하였다 (1H NMR (400MHz, CDCl3-d1) δ7.39-7.24 (m, 23H), 7.09-7.05 (m, 2H), 6.84 (d, J = 8.8 Hz, 2H), 3.85-3.78 (m, 5H), 3.69-3.61 (m, 4H), 3.45-3.40 (m, 3H), 3.14-3.13 (m, 1H), 3.05-3.04 (m, 1H), 2.78-2.75 (m, 1H)).
중간체 64a: (3S,4R,8R,9R,10S)-9-(4-브로모페닐)-3,4-디히드록시-10-(히드록시메틸)-N-(4-메톡시페닐)-1,6-디아자비시클로[6.2.0]데칸-6-카르복스아미드.
DCM (2 mL) 중 중간체 63a (60 mg, 80.14 μmol)의 용액에 TFA (91.37 mg, 801.39 μmol)를 첨가하였다. 25℃에서 3시간 동안 교반한 후, 반응물을 NaHCO3 (10 mL)으로 켄칭하고, DCM (20 mL)으로 추출하여 유기 층을 수득하였다. 유기 층을 무수 Na2SO4 상에서 건조시키고, 농축시켜 잔류물을 수득하였다. 잔류물을 정제용-TLC (석유 에테르: 에틸 아세테이트)에 의해 정제하여 중간체 64a (35 mg, 86.24% 수율)를 백색 고체로서 수득하였다.
1H NMR (400MHz, CDCl3-d1) δ7.43 (d, J = 7.6 Hz, 2H), 7.30 (d, J = 8.4 Hz, 2H), 7.20 (d, J = 8.8 Hz, 2H), 6.82 (d, J = 8.8 Hz, 2H), 4.32-4.28 (m, 1H), 4.13-4.06 (m, 2H), 3.85 (m, 1H), 3.76 (s, 3H), 3.61 (s, 1H), 3.48 (s, 3H), 3.22 (m, 1H), 2.98-2.88 (m, 2H), 2.77-2.70 (m, 2H), 2.0 (s, 1H).
E22의 합성: (3S,4R,8R,9R,10S)-3,4-디히드록시-10-(히드록시메틸)-N-(4-메톡시페닐)-9-(4-(피리딘-3-일에티닐)페닐)-1,6-디아자비시클로[6.2.0]데칸-6-카르복스아미드.
아세토니트릴 (1 mL) 중 중간체 64a (20 mg, 39.5 μmol) 및 3-에티닐피리딘 (8.15 mg, 78.99 μmol)의 용액에 XPhos Pd G3 (3.34 mg, 3.95 μmol) 및 Cs2CO3 (25.74 mg, 78.99 μmol)을 첨가하였다. 70℃에서 1시간 동안 교반한 후, 반응 혼합물을 농축시켜 잔류물을 수득하였다. 잔류물을 정제용 HPLC (칼럼: 워터스 엑스브리지 정제용 OBD C18 150*30 5u; A: 물 (0.225% 포름산) B: 아세토니트릴)에 의해 정제하여 (3S,4R,8R,9R,10S)-3,4-디히드록시-10-(히드록시메틸)-N-(4-메톡시페닐)-9-(4-(피리딘-3-일에티닐)페닐)-1,6-디아자비시클로[6.2.0]데칸-6-카르복스아미드 (6.8 mg, 29.69% 수율)를 백색 고체로서 수득하였다 (HRMS (ESI) 계산치 C30H32N4O5 [M+H]+ 529.24, 실측치 529.30; 1H NMR (400MHz, MeOD-d4) δ8.69 (s, 1H), 8.51 (d, J = 4 Hz, 1H), 7.98 (d, J = 8 Hz, 1H), 7.60-7.52 (m, 4H), 7.48-7.45 (m, 1H), 7.16 (d, J = 8.8 Hz, 2H), 6.84 (d, J = 8.8 Hz, 2H), 4.16-4.11 (m, 2H), 3.84-3.82 (m, 2H), 3.75 (s, 3H), 3.64-3.58 (m, 4H), 3.39-3.60 (m, 2H), 2.88-2.79 (m, 3H)).
실시예 23: (3R,4S,8R,9R,10S)-3,4-디히드록시-10-(히드록시메틸)-N-(4-메톡시페닐)-9-(4-(피리딘-3-일에티닐)페닐)-1,6-디아자비시클로[6.2.0]데칸-6-카르복스아미드 ("E23")
Figure pct00036
중간체 64b: (3R,4S,8R,9R,10S)-9-(4-브로모페닐)-3,4-디히드록시-10-(히드록시메틸)-N-(4-메톡시페닐)-1,6-디아자비시클로[6.2.0]데칸-6-카르복스아미드.
DCM (2 mL) 중 중간체 63b (130 mg, 173.63 μmol)의 용액에 TFA (197.98 mg, 1.74 mmol)를 첨가하였다. 25℃에서 3시간 동안 교반한 후, 반응물을 NaHCO3 (10 mL)으로 켄칭하고, DCM (20 mL)으로 추출하여 유기 층을 수득하였다. 유기 층을 무수 Na2SO4 상에서 건조시키고, 농축시켜 잔류물을 수득하였다. 잔류물을 정제용-TLC (석유 에테르: 에틸 아세테이트)에 의해 정제하여 중간체 64b (75 mg 85.30% 수율)를 백색 고체로서 수득하였다 (1H NMR (400MHz, CDCl3-d1) δ7.48 (d, J = 7.6 Hz, 2H), 7.09-7.28 (m, 7H), 6.84 (d, J = 8.8 Hz, 2H), 3.78 (d, J = 10.8 Hz, 1H), 3.72-3.66 (m, 4H), 3.59-3.57 (m, 5H), 3.53-3.51 (m, 4H), 3.27-3.25 (m, 1H), 2.88-2.74 (m, 2H)).
E23의 합성: (3R,4S,8R,9R,10S)-3,4-디히드록시-10-(히드록시메틸)-N-(4-메톡시페닐)-9-(4-(피리딘-3-일에티닐)페닐)-1,6-디아자비시클로[6.2.0]데칸-6-카르복스아미드.
아세토니트릴 (1 mL) 중 중간체 64b (20 mg, 39.50 μmol) 및 3-에티닐피리딘 (8.15 mg, 78.99 μmol)의 용액에 XPhos Pd G3 (3.34 mg, 3.95 μmol) 및 Cs2CO3 (25.74 mg, 78.99 μmol)을 첨가하였다. 70℃에서 2시간 동안 교반한 후, 반응 혼합물을 농축시켜 잔류물을 수득하였다. 잔류물을 정제용 HPLC (칼럼: 워터스 엑스브리지 정제용 OBD C18 150*30 5u; A: 물 (0.225% 포름산) B: 아세토니트릴)에 의해 정제하여 (3R,4S,8R,9R,10S)-3,4-디히드록시-10-(히드록시메틸)-N-(4-메톡시페닐)-9-(4-(피리딘-3-일에티닐)페닐)-1,6-디아자비시클로[6.2.0]데칸-6-카르복스아미드 (7.4 mg, 29.69% 수율)를 백색 고체로서 수득하였다.
HRMS (ESI) 계산치 C30H32N4O5 [M + H]+ 529.24, 실측치 529.30.
1H NMR (400MHz, MeOD-d4) δ8.69 (s, 1H), 8.52 (d, J = 5.2 Hz, 1H), 7.98 (d, J = 8 Hz, 1H), 7.61-7.56 (m, 4H), 7.48-7.46 (m, 1H), 7.23 (d, J = 8.8 Hz, 2H), 6.86 (d, J = 9.2 Hz, 2H), 3.84-3.80 (m, 3H), 3.76 (s, 3H), 3.65-3.50 (m, 7H), 3.31-3.28 (m, 1H), 3.08-3.26 (m, 1H), 2.74-2.71 (m, 1H).
중간체 A5의 합성: [(1S)-1-[[tert-부틸(디페닐)실릴]옥시메틸]-3-옥소-프로필] 아세테이트.
Figure pct00037
중간체 A2: tert-부틸-[[(2S)-옥시란-2-일]메톡시]-디페닐-실란
0℃에서 DCM (80 mL) 중 (R)-옥시란-2-일메탄올 (3.00 g, 40.50 mmol, 2.68 mL) 및 이미다졸 (5.51 g, 80.99 mmol)의 용액에 TBDPSCl (13.36 g, 48.60 mmol, 12.48 mL)을 첨가하였다. 25℃에서 12시간 동안 교반한 후, 반응 혼합물을 H2O (20 mL)로 켄칭하고, DCM (60 mL *2)으로 추출하여 유기 층을 수득하였다. 층을 무수 Na2SO4 상에서 건조시키고, 농축시켜 잔류물을 수득하였다. 잔류물을 실리카 겔 (석유 에테르: 에틸 아세테이트 = 10:1) 상에서 칼럼 크로마토그래피에 의해 정제하여 중간체 A2 (12.66 g, 100.00% 수율)를 무색 액체로서 수득하였다.
1H NMR (400MHz, CDCl3-d1) δ7.69-7.68 (m, 4H), 7.46-7.40 (m, 5H), 8.87-3.85(m, 1H), 3.73-3.70 (m, 1H), 3.14-3.13 (m, 1H), 2.76-2.74 (m, 1H), 1.05 (s, 9H).
중간체 A3: (2S)-1-[tert-부틸(디페닐)실릴]옥시펜트-4-엔-2-올.
CuI (1.83 g, 9.60 mmol, 1.5 당량)를 3구 플라스크에 질소 하에 넣고, 무수 THF (20 mL)를 첨가하였다. 생성된 혼합물을 -78℃로 냉각시킨 다음, 비닐 브로민화마그네슘 (1 M, 22.40 mL, 3.5 당량)을 적가하면서, 내부 온도를 -78℃ 미만으로 유지하였다. 불균질 혼합물을 -20℃로 가온하고, 이 온도에서 30분 동안 교반하였다. 용액을 다시 -78℃로 냉각시킨 후, 중간체 A2 (2.00 g, 6.40 mmol, 1 당량)를 적가하였다. 혼합물을 교반하고, 20℃로 12시간 동안 서서히 가온시켰다. 반응 혼합물을 H2O (20 mL)로 켄칭하고, DCM (60 mL *2)으로 추출하여 유기 층을 수득하였다. 층을 무수 Na2SO4 상에서 건조시키고, 농축시켜 잔류물을 수득하였다. 잔류물을 실리카 겔 (석유 에테르: 에틸 아세테이트 = 7:1) 상에서 칼럼 크로마토그래피에 의해 정제하여 중간체 A3 (2.18 g, 100.00% 수율)을 무색 액체로서 수득하였다.
1H NMR (400MHz, CDCl3-d1) δ7.67-7.65 (m, 4H), 7.44-7.37 (m, 7H), 5.82-5.76 (m, 1H), 5.10-4.90 (m, 2H), 3.81-3.78 (m, 1H), 3.68-3.65 (m, 1H), 3.57-3.54 (m, 1H), 2.46-2.44 (m, 1H), 2.25-2.22 (m, 1H), 1.05 (m, 9H).
중간체 A4: [(1S)-1-[[tert-부틸(디페닐)실릴]옥시메틸]부트-3-에닐] 아세테이트.
0℃에서 DCM (2 mL) 중 중간체 A3 (2.18 g, 6.40 mmol, 1 당량), Et3N (1.94 g, 19.21 mmol, 3 당량) 및 DMAP (78.21 mg, 640.18 μmol, 0.1 당량)의 용액에 아세트산 무수물 (980.06 mg, 9.60 mmol, 1.5 당량)을 첨가하였다. 생성된 반응 혼합물을 25℃에서 3시간 동안 교반하였다. TLC (석유 에테르: 에틸 아세테이트 = 10:1)는 반응이 완료됨을 나타내고, 반응 혼합물을 H2O (10 mL)로 켄칭하고, DCM (20 mL * 3)으로 추출하여 유기 층을 수득하였다. 층을 무수 Na2SO4 상에서 건조시키고, 농축시켜 잔류물을 수득하였다. 잔류물을 실리카 겔 (석유 에테르: 에틸 아세테이트 =10:1) 상에서 칼럼 크로마토그래피에 의해 정제하여 중간체 A4 (2.30 g, 93.94% 수율)를 무색 액체로서 수득하였다.
1H NMR (400MHz, CDCl3-d1) δ7.67-7.65 (m, 4H), 7.40-7.26 (m, 6H), 5.77-5.69 (m, 1H), 5.11-5.01 (m, 3H), 3.73-3.66 (m, 2H), 2.48-2.32 (m, 1H), 2.02 (m, 3H), 1.09 (m, 9H).
중간체 A5: [(1S)-1-[[tert-부틸(디페닐)실릴]옥시메틸]-3-옥소-프로필] 아세테이트.
DCM/MeOH = 1:1 (30 mL) 중 중간체 A4 (1.70 g, 4.44 mmol, 1 당량)의 -78℃ 용액을 용액이 청색으로 변할 때까지 O2 중 O3의 스트림으로 처리하였다. 이어서, N2을 색상이 사라질 때까지 용액에 버블링시켰다. 생성된 용액을 Me2S (2.76 g, 44.44 mmol, 10 당량)로 처리하고, 20℃로 가온하고, 2시간 동안 교반하였다. TLC (석유 에테르: 에틸 아세테이트 = 5:1)는 반응이 완료됨을 나타내고, 반응 혼합물을 DCM (50 mL)으로 희석하고, H2O (10 mL)로 세척하여 유기 층을 수득하였다. 유기 층을 무수 Na2SO4 상에서 건조시키고, 농축시켜 중간체 A5 (1.70 g, 조 물질)를 무색 액체로서 추가 정제 없이 수득하였다.
실시예 24: (4S,8R,9S,10S)-10-[(디메틸아미노)메틸]-4-히드록시-N-(4-메톡시페닐)-9-[4-(2-페닐에티닐)페닐]-1,6-디아자비시클로[6.2.0]데칸-6-카르복스아미드 ("E24")
Figure pct00038
중간체 69: [(1S)-3-[(2R,3R,4S)-3-(4-브로모페닐)-2-[[(2-니트로페닐)술포닐아미노]메틸]-4-(트리틸옥시메틸)아제티딘-1-일]-1-[[tert-부틸(디페닐)실릴]옥시메틸]프로필] 아세테이트.
DCM (12 mL) 중 N-(((2R,3R,4S)-3-(4-브로모페닐)-4-((트리틸옥시)메틸)아제티딘-2-일)메틸)-2-니트로벤젠술폰아미드 (WO2015070204) (1.20 g, 1.72 mmol, 1 당량)의 교반 용액에 25℃에서 중간체 A5 (1.46 g, 3.78 mmol, 2.2 당량), CH3COOH (103.29 mg, 1.72 mmol, 1 당량)를 첨가하였다. 생성된 반응 혼합물을 25℃에서 0.5시간 동안 교반하였다. 혼합물에 NaBH(OAc)3 (1.09 g, 5.16 mmol, 3 당량)을 첨가하였다. 생성된 반응 혼합물을 25℃에서 1.5시간 동안 교반하였다. LCMS는 반응이 완료됨을 나타내고, 반응 혼합물을 H2O (5 mL)에 의해 켄칭하고, DCM (10 mL*3)으로 추출하여 유기 층을 수득하였다. 층을 무수 Na2SO4 상에서 건조시키고, 농축시켜 잔류물을 수득하였다. 잔류물을 실리카 겔 (석유 에테르: 에틸 아세테이트 = 1: 1) 상에서 칼럼 크로마토그래피에 의해 정제하여 중간체 69 (1.67 g, 조 물질)를 담갈색 고체로서 수득하였다.
1H NMR (400MHz, CDCl3-d1) δ5.15-5.11 (m, `H), 4.96-4.95 (m, 1H), 4.10-4.07 (m, 1H), 3.62-3.44(m, 4H), 3.17-3.12 (m, 1H), 2.88-2.81 (m, 3H), 2.51-2.44 (m, 2H), 2.06-2.08 (m, 3H).
중간체 70: [(1S)-3-[(2R,3R,4S)-3-(4-브로모페닐)-2-[[(2-니트로페닐)술포닐아미노]메틸]-4-(트리틸옥시메틸)아제티딘-1-일]-1-(히드록시메틸)프로필] 아세테이트.
THF (16 mL) 중 중간체 69 (1.67 g, 1.56 mmol, 1 당량)의 교반 용액에 TBAF (1.22 g, 4.68 mmol, 3 당량)를 첨가하였다. 생성된 반응 혼합물을 25℃에서 12시간 동안 교반하였다. LCMS는 반응이 완료됨을 나타내고, 반응 혼합물을 농축시켜 잔류물을 수득하였다. 잔류물을 실리카 겔 (석유 에테르: 에틸 아세테이트 = 1: 1) 상에서 칼럼 크로마토그래피에 의해 정제하여 중간체 70 (920.00 mg, 71.16% 수율)을 백색 고체로서 수득하였다.
1H NMR (400MHz, CDCl3-d1) δ 7.85-7.66 (m, 10), 7.26-6.97 (m, 20H), 5.02 (m, 1H), 4.85-4.82 (m, 1H), 4.05-3.76 (m, 1H), 3.70-3.52 (m, 3H), 3.12-2.86 (m, 3H), 2.03 (s, 5H), 1.52-1.46 (m, 2H).
중간체 71: [(4S,8R,9R,10S)-9-(4-브로모페닐)-6-(2-니트로페닐)술포닐-10-(트리틸옥시메틸)-1,6-디아자비시클로[6.2.0]데칸-4-일] 아세테이트.
THF (20 mL) 중 중간체 70 (660.00 mg, 796.36 μmol, 1 당량)의 교반 용액에 PPh3 (835.51 mg, 3.19 mmol, 4 당량) 및 DIAD (644.13 mg, 3.19 mmol, 619.35 μL, 4 당량)의 혼합물을 첨가하였다. 생성된 반응 혼합물의 혼합물을 25℃에서 12시간 동안 교반하였다. LCMS는 반응이 완료됨을 나타내고, 반응 혼합물을 농축시켜 잔류물을 수득하였다. 잔류물을 정제용-TLC (석유 에테르: 에틸 아세테이트 = 1: 1)에 의해 정제하여 중간체 71 (445.00 mg, 조 물질)을 백색 고체로서 수득하였다.
1H NMR (400MHz, CDCl3-d1) δ7.92-7.90 (m, 1H), 7.69-7.61 (m, 3H), 7.26-7.16 (m, 20H), 4.42-4.40 (m, 2H), 4.14-4.10 (m, 1H), 3.57 (s, 3H), 3.56-3.45 (m, 1H), 3.10-3.03 (m, 3H), 2.85-2.84 (m, 1H), 2.37-2.31 (m, 1H), 2.13-1.98 (m, 1H), 1.87-1.54 (m, 1H),01.28-1.26 (m, 3H).
중간체 72: [(4S,8R,9R,10S)-9-(4-브로모페닐)-6-(2-니트로페닐)술포닐-10-(트리틸옥시메틸)-1,6-디아자비시클로[6.2.0]데칸-4-일] 아세테이트.
THF (20.00 mL) 중 중간체 71 (660.00 mg, 796.36 μmol, 1 당량)의 교반 용액에 PPh3 (835.51 mg, 3.19 mmol, 4 당량) 및 DIAD (644.13 mg, 3.19 mmol, 619.35 μL, 4 당량)의 혼합물을 첨가하였다. 생성된 반응 혼합물의 혼합물을 25℃에서 12시간 동안 교반하였다. LCMS는 반응이 완료되었음을 나타내고, 반응 혼합물을 농축시켜 잔류물을 수득하였다. 잔류물을 정제용-TLC (석유 에테르: 에틸 아세테이트 = 1: 1)에 의해 정제하여 중간체 72 (445.00 mg, 조 물질)를 백색 고체로서 수득하였다.
1H NMR (400MHz, CDCl3-d1) δ7.26-7.22 (m, 25H), 4.01-4.00 (m, 1H), 3.83-3.81 (m, 1H), 3.62-3.47 (m, 1H), 3.51-3.47 (m, 1H), 3.49-3.48 (m, 1H), 3.21-3.11 (m, 1H), 2.92-2.88 (m, 1H),2.49-2.47 (m, 2H), 2.05 (s, 3H), 1.85-1.084 (m, 1H), 1.60 (s, 3H).
중간체 73: [(4S,8R,9R,10S)-9-(4-브로모페닐)-6-[(4-메톡시페닐)카르바모일]-10-(트리틸옥시메틸)-1,6-디아자비시클로[6.2.0]데칸-4-일] 아세테이트.
DCM (2 mL) 중 중간체 72 (154.00 mg, 246.17 μmol, 1 당량) 및 Et3N (49.82 mg, 492.34 μmol, 68.25 μL, 2 당량)의 교반 용액에 1-이소시아네이토-4-메톡시벤젠 (40.39 mg, 270.78 μmol, 34.82 μL, 1.1 당량)을 첨가하였다. 생성된 반응 혼합물을 25℃에서 12시간 동안 교반하였다. LCMS는 반응이 완료되었음을 나타내고, 반응 혼합물을 H2O (2 mL)에 의해 켄칭하고, DCM (10 mL*3)으로 추출하여 유기 층을 수득하였다. 층을 무수 Na2SO4 상에서 건조시키고, 농축시켜 잔류물을 수득하였다. 잔류물을 정제용-TLC (석유 에테르: 에틸 아세테이트 = 1: 1)에 의해 정제하여 중간체 73 (169 mg, 88.61% 수율)을 백색 고체로서 수득하였다.
1H NMR (400MHz, CDCl3-d1) δ7.33-7.23 (m, 20H), 6.83-6.82 (m, 2H), 4.59-4.57 (m, 1H), 4.30-4.27 (m, 1H), 3.78-3.75 (m, 4), 3.63-3.3.62 (m, 1H), 3.54-3.53 (m, 1H), 3.15-3.13 (m, 2H), 2.92-2.90 (m, 2H), 2.08-2.00 (m, 3H), 1.89-1.85 (s, 2H), 1.57 (m, 1H).
중간체 74: [(4S,8R,9R,10S)-9-(4-브로모페닐)-10-(히드록시메틸)-6-[(4-메톡시페닐)카르바모일]-1,6-디아자비시클로[6.2.0]데칸-4-일] 아세테이트.
DCM (2 mL) 중 중간체 73 (169.00 mg, 218.14 μmol, 1 당량)의 교반 용액에 TFA (248.72 mg, 2.18 mmol, 10 당량)를 첨가하였다. 생성된 반응 혼합물을 25℃에서 12시간 동안 교반하였다. LCMS는 반응이 완료되었음을 나타내고, 반응 혼합물을 NaHCO3에 의해 켄칭하고, DCM (10 mL*3)으로 추출하여 유기 층을 수득하였다. 층을 무수 Na2SO4 상에서 건조시키고, 농축시켜 잔류물을 수득하였다. 잔류물을 정제용-TLC (석유 에테르: 에틸 아세테이트 = 1: 2)에 의해 정제하여 중간체 74 (81.00 mg, 152.13 μmol, 69.74% 수율)를 백색 고체로서 수득하였다.
HRMS (ESI): 계산치 C25H30BrN3O5 [M + H]+ 532.14, 실측치 534.1
중간체 75: [(4S,8R,9S,10S)-9-(4-브로모페닐)-10-[(1,3-디옥소이소인돌린-2-일)메틸]-6-[(4-메톡시페닐)카르바모일]-1,6-디아자비시클로[6.2.0]데칸-4-일] 아세테이트.
THF (2 mL) 중 중간체 74 (81.00 mg, 104.55 μmol, 1 당량), 이소인돌린-1,3-디온 (16.92 mg, 115.01 μmol, 1.1 당량) 및 PPh3 (41.13 mg, 156.82 μmol, 1.5 당량)의 용액에 N2 하에 25℃에서 DIAD (31.71 mg, 156.82 μmol, 30.49 μL, 1.5 당량)를 적가하였다. 생성된 반응 혼합물을 25℃에서 12시간 동안 교반하였다. LCMS는 반응이 완료되었음을 나타내고, 반응 혼합물을 농축시켜 잔류물을 수득하였다. 잔류물을 정제용-TLC (석유 에테르: 에틸 아세테이트 = 1:1)에 의해 정제하여 중간체 75 (58.00 mg, 83.86% 수율)를 황색 고체로서 수득하였다.
1H NMR (400MHz, CDCl3-d1) δ7.83-7.81 (m, 2H), 7.73-7.71 (m, 2H), 7.51-7.49 (m, 4H), 7.25-7.23 (m, 2H), 6.89-6.84 (m, 2H), 6.56 (s, 1H), 4.59-4.55 (m, 1H), 4.28-4.27 (m, 1H), 3.82-3.78 (m, 4H), 3.58-3.55 (m, 3.50H), 3.50-3.25 (m, 2H), 2.99-2.98 (m, 1H), 2.37-2.12 (m, 1H), 2.08 (s, 5H).
중간체 76: (4S,8R,9S,10S)-10-(아미노메틸)-9-(4-브로모페닐)-6-((4-메톡시페닐)카르바모일)-1,6-디아자비시클로[6.2.0]데칸-4-일 아세테이트.
EtOH (1 mL) 중 중간체 75 (58.00 mg, 87.67 μmol, 1 당량)의 용액에 N2 하에 25℃에서 히드라진 수화물 (6.72 mg, 131.51 μmol, 6.52 μL, 98% 순도, 1.5 당량)을 적가하였다. 생성된 반응 혼합물을 70℃에서 1시간 동안 교반하였다. LCMS는 반응이 완료되었음을 나타내고, 반응 혼합물을 농축시켜 추가 정제 없이 잔류물 중간체 76을 수득하였다.
HRMS (ESI): 계산치 C25H31BrN4O4 [M + H]+ 531.15, 실측치 531.1
중간체 77: (4S,8R,9S,10S)-10-(아미노메틸)-9-(4-브로모페닐)-4-히드록시-N-(4-메톡시페닐)-1,6-디아자비시클로[6.2.0]데칸-6-카르복스아미드.
EtOH:H2O=1:1 (1 mL) 중 중간체 76 (46.00 mg, 86.56 μmol, 1 당량)의 용액에 25℃에서 LiOH.H2O (7.26 mg, 173.12 μmol, 2 당량)을 첨가하였다. 생성된 반응 혼합물을 25℃에서 2시간 동안 교반하였다. LCMS는 반응이 완료되었음을 나타내고, 반응 혼합물을 H2O (2 mL)에 의해 켄칭하고, DCM (10 mL*3)으로 추출하여 유기 층을 수득하였다. 층을 무수 Na2SO4 상에서 건조시키고, 농축시켜 중간체 77 (80.00 mg, 조 물질)을 백색 고체로서 수득하였다.
HRMS (ESI): ET6538-397-P1P 계산치 C23H29BrN4O3 [M + H]+ 489.14, 실측치 491.1.
중간체 78: (4S,8R,9S,10S)-9-(4-브로모페닐)-10-((디메틸아미노)메틸)-4-히드록시-N-(4-메톡시페닐)-1,6-디아자비시클로[6.2.0]데칸-6-카르복스아미드.
THF (2 mL) 중 중간체 77 (757.00 mg, 1.01 mmol, 1 당량), 이소인돌린-1,3-디온 (164.07 mg, 1.12 mmol, 1.1 당량) 및 PPh3 (398.85 mg, 1.52 mmol, 1.5 당량)의 용액에 N2 하에 25℃에서 DIAD (307.49 mg, 1.52 mmol, 1.5 당량)를 적가하였다. 생성된 반응 혼합물을 25℃에서 12시간 동안 교반하였다. LCMS는 반응이 완료되었음을 나타내고, 반응 혼합물을 농축시켜 잔류물을 수득하였다. 잔류물을 정제용-TLC (석유 에테르: 에틸 아세테이트 = 1:1)에 의해 정제하여 중간체 78 (1.13 g, 조 물질)을 황색 고체로서 수득하였다.
1H NMR (400MHz, CDCl3-d1) δ7.45-7.44 (m, 3H), 7.39-7.37 (m, 2H), 6.83-6.81 (m, 2H), 4.08-3.97 (m, 2H), 3.77-3.76 (m, 2H), 3.45-3.44 (m, 1H), 3.29-3.10 (m, 3H), 2.02 (s, 6H), 0.87 (s, 2H).
E24의 합성: (4S,8R,9S,10S)-10-[(디메틸아미노)메틸]-4-히드록시-N-(4-메톡시페닐)-9-[4-(2-페닐에티닐)페닐]-1,6-디아자비시클로[6.2.0]데칸-6-카르복스아미드 (E24).
아세토니트릴 (1 mL) 중 중간체 78 (40.00 mg, 77.30 μmol, 1 당량) 및 에티닐벤젠 (23.68 mg, 231.90 μmol, 25.47 μL, 3.00 당량)의 용액에 XPhos Pd G3 (6.54 mg, 7.73 μmol, 0.1 당량) 및 Cs2CO3 (50.37 mg, 154.60 μmol, 2 당량)을 첨가하였다. 생성된 반응 혼합물을 70℃에서 2시간 동안 교반하였다. LCMS는 반응이 완료되었음을 나타내고, 반응 혼합물을 농축시켜 잔류물을 수득하였다. 잔류물을 정제용 HPLC (칼럼: 워터스 엑스브리지 정제용 OBD C18 150*30 5u; A: 물 (0.225% 포름산) B: 아세토니트릴)에 의해 정제하여 (4S,8R,9S,10S)-10-[(디메틸아미노)메틸]-4-히드록시-N-(4-메톡시페닐)-9-[4-(2-페닐에티닐)페닐]-1,6-디아자비시클로[6.2.0]데칸-6-카르복스아미드 (6.10 mg, 14.65% 수율)를 백색 고체로서 수득하였다.
HRMS (ESI): 계산치 C33H38N4O3 [M + H]+ 539.29, 실측치 539.4 1H NMR (400MHz, MeOD-d4) δ7.55-7.50 (m, 2H), 7.49-7.37 (m, 4H), 6.86-6.84 (m, 2H), 4.18-4.05 (m, 1H), 4.02-4.00 (m, 1H), 3.75 (s, 3H), 3.64-3.31 (m, 1H), 2.90-2.85 (m,3H), 2.43 (s, 6H), 2.35-2.34 (m, 1H), 2.34-2.06 (m, 1H).
실시예 25: (8R,9S,10S)-3,10-비스[(디메틸아미노)메틸]-N-(4-메톡시페닐)-9-[4-(2-페닐에티닐)페닐]-1,6-디아자비시클로[6.2.0]데칸-6-카르복스아미드 ("E25")
Figure pct00039
Figure pct00040
Figure pct00041
중간체 79: tert-부틸 N-[[(2R,3R,4S)-1-알릴-3-(4-브로모페닐)-4-(트리틸옥시메틸)아제티딘-2-일]메틸]-N- (2-니트로페닐)술포닐-카르바메이트.
DCM (60 mL) 중 N-(((2R,3R,4S)-3-(4-브로모페닐)-4-((트리틸옥시)메틸)아제티딘-2-일)메틸)-2-니트로벤젠술폰아미드 (WO2015070204) (8.50 g, 11.51 mmol, 1 당량), DMAP (140.58 mg, 1.15 mmol, 0.1 당량) 및 Et3N (3.49 g, 34.52 mmol, 4.79 mL, 3 당량)의 용액에 BOC2O (2.76 g, 12.66 mmol, 1.1 당량)를 첨가하고, 반응 혼합물을 25℃에서 4시간 동안 교반하였다. TLC (석유 에테르: DCM = 3:1)는 반응이 완료되었음을 나타내고, 반응물을 H2O (100 mL)로 켄칭하고, DCM (300 mL)으로 추출하여 유기 층을 수득하였다. 유기 층을 무수 Na2SO4 상에서 건조시키고, 농축시켜 잔류물을 수득하였다. 잔류물을 실리카 겔 상에서 크로마토그래피 (석유 에테르: 에틸 아세테이트 = 3:1)에 의해 정제하여 중간체 79 (8.19 g, 84.83% 수율)를 갈색 고체로서 수득하였다.
1H NMR (400MHz, CDCl3-d1) δ8.20 (d, J = 4.4 Hz, 1H), 7.70 (s, 3H), 7.35-7.32 (m, 5H), 7.19-7.13 (m, 10H), 7.11 (m, 7H), 5.73-5.63 (m, 1H), 5.09-5.05 (m, 1H), 4.90-4.87 (m, 1H), 3.95-3.91 (m, 1H), 3.65-3.64 (m, 3H), 3.54-3.49 (m, 1H), 3.09-3.04 (m, 1H), 2.85-2.81 (m, 1H), 2.56-2.53 (m, 1H), 3.06-3.05 (m, 1H), 2.94-2.89 (m, 1H).
중간체 80: tert-부틸 N-[[(2R,3R,4S)-3-(4-브로모페닐)-4-(트리틸옥시메틸)아제티딘-2-일]메틸]-N-(2- 니트로페닐)술포닐-카르바메이트.
EtOH (10 mL) 중 중간체 79 (7.70 g, 9.18 mmol, 1 당량)의 용액에 1,3-디메틸헥사히드로피리디민-2,4,6-트리온 (2.15 g, 13.77 mmol, 1.5 당량) 및 Pd(PPh3)4 (1.06 g, 917.98 μmol, 0.1 당량)를 첨가하고, 반응 혼합물을 40℃에서 2시간 동안 교반하였다. LCMS는 반응이 완료됨을 나타내고, 반응물을 10% NaOH (20 mL)로 켄칭하고, DCM (500 mL)으로 추출하여 유기 층을 수득하였다. 유기 층을 무수 Na2SO4 상에서 건조시키고, 농축시켜 잔류물을 수득하였다. 잔류물을 실리카 겔 (석유 에테르: 에틸 아세테이트 = 3:1) 상에서 칼럼 크로마토그래피에 의해 정제하여 중간체 80 (6.44 g, 8.06 mmol, 87.83% 수율)을 담갈색 고체로서 수득하였다.
1H NMR (400 MHz, CDCl3-d1) δ8.24-8.22 (m, 1H), 7.72-7.65 (m, 3H), 7.33 (s, 4H), 7.22-7.19 (m, 16H), 7.42-7.34 (m, 2H), 3.95-3.89 (m, 1H), 3.06-3.04 (m, 1H), 3.02-2.95 (m, 1H), 2.05 (s, 1H), 1.03 (s, 9H).
중간체 81: tert-부틸 N-[[(2R,3R,4S)-3-(4-브로모페닐)-1-[2-(히드록시메틸)알릴]-4-(트리틸옥시메틸) 아제티딘-2-일]메틸]-N-(2-니트로페닐)술포닐-카르바메이트.
DMF (60 mL) 중 중간체 80 (6.44 g, 8.06 mmol, 1 당량) 및 K2CO3 (3.34 g, 24.18 mmol, 3 당량)의 용액에 25℃에서 2-(브로모메틸)프로프-2-엔-1-올 (1.83 g, 12.09 mmol, 1.5 당량)을 첨가하고, 반응 혼합물을 25℃에서 12시간 동안 교반하였다. LCMS는 반응이 완료됨을 나타내고, 반응물을 H2O (50 mL)로 켄칭하고, DCM (100 mL)으로 추출하여 유기 층을 수득하였다. 유기 층을 무수 Na2SO4 상에서 건조시키고, 농축시켜 잔류물을 수득하였다. 잔류물을 실리카 겔 상에서 크로마토그래피 (석유 에테르: 에틸 아세테이트 = 2:1)에 의해 정제하여 중간체 81 (5.52 g, 78.83% 수율)을 백색 고체로서 수득하였다.
1H NMR (400MHz, CDCl3-d1) δ8.20 (d, J = 4.8 Hz, 2H), 8.02 (s, 1H), 7.72-7.67 (m, 3H), 7.42-7.40 (m, 2H), 7.30-7.26 (m, 2H), 7.18-7.16 (m, 10H), 7.08-7.07 (m, 7H), 4.80 (s, 1H), 4.65 (s, 1H), 4.06-3.98 (m, 3H), 3.84 (m, 1H), 3.65-3.62 (m, 2H), 3.55-3.51 (m, 2H), 3.03-3.00 (m, 2H), 1.30 (s, 9H).
중간체 82: N-[[(2R,3R,4S)-3-(4-브로모페닐)-1-[2-(히드록시메틸)알릴]-4-(트리틸옥시메틸)아제티딘-2-일]메틸]-2-니트로-벤젠술폰아미드.
MeOH (50 mL) 중 중간체 81 (5.00 g, 5.75 mmol, 1 당량)의 용액에 K2CO3 (3.97 g, 28.75 mmol, 5 당량)을 첨가하고, 반응 혼합물을 80℃에서 3시간 동안 교반하였다. LCMS는 반응이 완료됨을 나타내고, 반응물을 H2O (100 mL)로 켄칭하고, DCM (300 mL)으로 추출하여 유기 층을 수득하였다. 유기 층을 무수 Na2SO4 상에서 건조시키고, 농축시켜 잔류물을 수득하였다. 잔류물을 실리카 겔 상에서 크로마토그래피 (석유 에테르: 에틸 아세테이트 = 1:1)에 의해 정제하여 중간체 82 (2.50 g, 3.25 mmol, 56.56% 수율)를 백색 고체로서 수득하였다.
1H NMR (400MHz, CDCl3-d1) δ 7.82-7.78 (m, 2H), 7.71-7.69 (m, 1H), 7.18-7.13 (m, 18H), 5.10 (s, 1H), 5.01-4.97 (m, 2H), 4.12-4.07 (m, 2H), 3.70-3.58 (m, 3H), 3.34-3.23 (m, 1H), 3.07-3.06 (m, 1H), 2.93-2.89 (m, 2H).
중간체 83: N-알릴-N-[[(2R,3R,4S)-3-(4-브로모페닐)-1-[2-(히드록시메틸)알릴]-4-(트리틸옥시메틸)아제티딘-2-일]메틸]-2-니트로-벤젠술폰아미드.
DMF (1.00 mL) 중 중간체 82 (2.50 g, 3.25 mmol, 1 당량)의 용액에 25℃에서 3-브로모프로프-1-엔 (590.18 mg, 4.88 mmol, 1.5 당량) 및 K2CO3 (1.35 g, 9.76 mmol, 3 당량)을 첨가하고, 반응 혼합물을 25℃에서 12시간 동안 교반하였다. LCMS는 반응이 완료됨을 나타내고, 반응물을 H2O (100 mL)로 켄칭하고, DCM (500 mL)으로 추출하여 유기 층을 수득하였다. 유기 층을 무수 Na2SO4 상에서 건조시키고, 농축시켜 잔류물을 수득하였다. 잔류물을 실리카 겔 상에서 크로마토그래피 (석유 에테르: 에틸 아세테이트 = 1:1)에 의해 정제하여 중간체 83 (2.62 g, 99.68% 수율)을 백색 고체로서 수득하였다.
1H NMR (400MHz, CDCl3-d1) δ8.02 (s, 1H), 7.66-7.53 (m, 1H), 7.37-7.35 (m, 3H), 7.15-7.11 (m, 19H), 5.43-5.36 (m, 1H), 5.00-4.98 (m, 1H), 4.88 (s, 1H), 4.80-4.76 (m, 2H), 4.04-(s, 2H), 3.82-3.79 (m, 2H), 3.52-3.32 (m, 3H), 3.16 (m, 1H), 3.06-3.02 (m, 2H), 2.96-2.88 (m, 2H).
중간체 84: [(3E,8R,9R,10S)-9-(4-브로모페닐)-6-(2-니트로페닐)술포닐-10-(트리틸옥시메틸)-1,6-디아자비시클로[6.2.0]데스-3-엔-3-일]메탄올.
DCM (20 mL) 중 중간체 83 (2.20 g, 2.72 mmol, 1 당량)의 용액에 [1,3-비스(2,4,6-트리메틸페닐)이미다졸리딘-2-일리덴]-디클로로-[(2-이소프로폭시페닐) 메틸렌]루테늄 (호베이다-그럽스 제2 세대 촉매) (426.12 mg, 680.04 μmol, 0.25 당량)을 첨가하고, 반응 혼합물을 40℃에서 12시간 동안 교반하였다. LCMS는 반응이 완료됨을 나타내고, 반응물을 농축시켜 잔류물을 수득하였다. 잔류물을 실리카 상에서 칼럼 크로마토그래피 (석유 에테르: 에틸 아세테이트 = 1:1)에 의해 정제하여 중간체 84 (2.12 g, 100.00% 수율)를 백색 고체로서 수득하였다.
1H NMR (400MHz, CDCl3-d1) δ7.89-7.87 (m, 1H), 7.70-7.61 (m, 3H), 7.26-7.22 (m, 17H), 7.11-7.08 (m, 2H), 5.68-5.64 (m, 1H), 4.15-4.05 (m, 1H), 3.99-3.64 (m, 2H), 3.53-3.52 (m, 1H), 3.31-3.22 (m, 2H), 3.12-3.09 (m, 2H), 2.85-2.84 (m, 1H), 2.17 (s, 1H).
중간체 85: [(8R,9R,10S)-9-(4-브로모페닐)-6-(2-니트로페닐)술포닐-10-(트리틸옥시메틸)-1,6-디아자비시클로[6.2.0]데칸-3-일]메탄올.
THF (15 mL) 중 중간체 84 (750.00 mg, 960.65 μmol, 1 당량) 및 Et3N (1.94 g, 19.21 mmol, 2.66 mL, 20 당량)의 용액에 2-니트로벤젠술포노히드라지드 (2.09 g, 9.61 mmol, 10 당량)를 첨가하고, 반응 혼합물을 40℃에서 12시간 동안 교반하였다. LCMS는 반응이 완료됨을 나타내고, 반응물을 H2O (3 mL)로 켄칭하고, DCM (10 mL*2)으로 추출하여 유기 층을 수득하였다. 유기 층을 무수 Na2SO4 상에서 건조시키고, 농축시켜 잔류물을 수득하였다. 잔류물을 실리카 겔 (석유 에테르: 에틸 아세테이트 = 1:1) 상에서 칼럼 크로마토그래피에 의해 정제하여 중간체 85 (1.50 g, 100.00% 수율)를 황색 고체로서 수득하였다.
1H NMR (400MHz, CDCl3-d1) δ7.76-7.74 (d, J = 5.6 Hz, 2H), 7.65-7.55 (m, 4H), 7.26-7.22 (m, 19H), 7.10-7.08 (d, J = 8.4 Hz, 2H), 3.75-3.61 (m, 6H), 3.26-3.22 (m, 1H), 3.16-3.12 (m, 1H), 3.00-2.99 (m, 2H), 2.89-2.87 (m, 2H), 2.72-2.69 (m, 1H), 2.17 (s, 1H), 1.97-1.90 (m, 3H), 1.40-1.26 (m, 2H).
중간체 86: [(8R,9R,10S)-9-(4-브로모페닐)-6-(2-니트로페닐)술포닐-10-(트리틸옥시메틸)-1,6-디아자비시클로[6.2.0]데칸-3-일]메틸 아세테이트.
0℃에서 DCM (15 mL) 중 중간체 85 (1.49 g, 1.90 mmol, 1 당량), Et3N (576.78 mg, 5.70 mmol, 3 당량) 및 DMAP (23.21 mg, 190.00 μmol, 0.1 당량)의 용액에 아세트산 무수물 (387.94 mg, 3.80 mmol, 355.91 μL, 2 당량)을 첨가하였다. 생성된 반응 혼합물을 25℃에서 3시간 동안 교반하였다. LCMS는 반응이 완료되었음을 나타내고, 반응 혼합물을 H2O (10 mL)로 켄칭하고, DCM (30 mL*2)으로 추출하여 유기 층을 수득하였다. 층을 무수 Na2SO4 상에서 건조시키고, 농축시켜 잔류물을 수득하였다. 잔류물을 실리카 겔 (석유 에테르: 에틸 아세테이트 = 1:1) 상에서 칼럼 크로마토그래피에 의해 정제하여 중간체 86 (1.51 g, 96.32% 수율)을 백색 고체로서 수득하였다.
1H NMR (400MHz, CDCl3-d1) δ7.80-7.76 (m, 1H), 7.61-7.56 (m, 3H), 7.27-7.22 (m, 15H), 7.13-7.11 (d, J = 8.4 Hz, 2H), 4.01-3.99 (m, 2H), 3.69-3.63 (m, 4H), 3.22-3.12 (m, 3H), 2.94-2.88 (m, 2H), 2.62-2.61 (m, 1H), 2.20-2.05 (m, 1H), 1.92 (s, 1H), 1.82 (s, 3H), 1.32-1.27 (m, 1H).
중간체 87: [(8R,9R,10S)-9-(4-브로모페닐)-10-(트리틸옥시메틸)-1,6-디아자비시클로[6.2.0]데칸-3-일]메틸 아세테이트.
아세토니트릴 (15 mL) 중 중간체 86 (1.51 g, 1.83 mmol, 1. 당량) 및 벤젠티올 (302.57 mg, 2.75 mmol, 280.16 μL, 1.5 당량)의 용액에 Cs2CO3 (1.19 g, 3.66 mmol, 2 당량)을 25℃에서 적가하였다. 생성된 반응 혼합물을 25℃에서 12시간 동안 교반하였다. LCMS는 반응이 완료되었음을 나타내고, 반응 혼합물을 H2O (10 mL)로 켄칭하고, DCM (20 mL*3)으로 추출하여 유기 층을 수득하였다. 유기부를 무수 Na2SO4 상에서 건조시키고, 농축시켜 잔류물을 수득하였다. 잔류물을 실리카 겔 (디클로로메탄: 메탄올 = 10:1) 상에서 칼럼 크로마토그래피에 의해 정제하여 중간체 87 (1.09 g, 조 물질)을 백색 고체로서 수득하였다.
HRMS (ESI): 계산치 C37H39BrN2O3 [M + H]+ 639.21, 실측치 639.1.
중간체 88: [(8R,9R,10S)-9-(4-브로모페닐)-6-[(4-메톡시페닐)카르바모일]-10-(트리틸옥시메틸)-1,6-디아자비시클로[6.2.0]데칸-3-일]메틸 아세테이트.
DCM (10 mL) 중 중간체 87 및 Et3N (344.05 mg, 3.40 mmol, 2 당량)의 용액에 1-이소시아네이토-4-메톡시-벤젠 (278.91 mg, 1.87 mmol, 1.1 당량)을 0℃에서 적가하였다. 생성된 반응 혼합물을 25℃에서 3시간 동안 교반하였다. LCMS는 반응이 완료되었음을 나타내고, 반응 혼합물을 H2O (20 mL)로 켄칭하고, DCM (50 mL *3)로 추출하여 유기 층을 수득하였다. 층을 무수 Na2SO4 상에서 건조시키고, 농축시켜 잔류물을 수득하였다. 잔류물을 실리카 겔 (석유 에테르: 에틸 아세테이트 = 1:1) 상에서 칼럼 크로마토그래피에 의해 정제하여 중간체 87 (1.10 g, 81.76% 수율)을 백색 고체로서 수득하였다.
1H NMR (400MHz, CDCl3-d1) δ7.30-7.23 (m, 20H), 6.84-6.82 (m, 2H), 6.09 (s, 1H), 4.07-4.03 (m, 1H), 3.79-3.78 (m, 3H), 3.72 (m, 1H), 3.62-3.55 (m, 3H), 3.19-3.17 (m, 1H), 3.00-2.94 (m, 2H), 2.55-2.54 (m, 1H), 2.52-2.50 (m, 1H), 2.00 (s, 1H), 1.87 (s, 3H), 1.86-1.77 (m, 1H).
중간체 89: (8R,9R,10S)-9-(4-브로모페닐)-3-(히드록시메틸)-N-(4-메톡시페닐)-10-(트리틸옥시메틸)-1,6-디아자비시클로[6.2.0]데칸-6-카르복스아미드.
MeOH (7 mL) 중 중간체 88 (750.00 mg, 950.85 μmol, 1 당량)의 용액에 K2CO3 (394.25 mg, 2.85 mmol, 3 당량)을 첨가하였다. 생성된 반응 혼합물을 25℃에서 12시간 동안 교반하였다. LCMS는 반응이 완료되었음을 나타내고, 반응 혼합물을 여과하여 여과물을 수득하고, 농축시켜 잔류물을 수득하였다. 잔류물을 정제용-TLC (석유 에테르: 에틸 아세테이트 = 1:1)에 의해 정제하여 중간체 88 (757.00 mg, 조 물질)을 백색 고체로서 수득하였다.
1H NMR (400MHz, CDCl3-d1) δ7.29-7.23 (m, 24H), 7.09-7.07 (m, 1H), 6.84-6.81 (m, 2H), 3.77 (s, 3H), 3.66-3.63 (m, 2H), 3.62 (m, 4H), 3.15-3.07 (m, 1H), 2.82-2.79 (m, 1H), 2.66-2.64 (m, 1H), 1.77 (s, 1H), 1.28-1.25 (s, 2H).
중간체 90: (8R,9R,10S)-9-(4-브로모페닐)-3-[(1,3-디옥소이소인돌린-2-일)메틸]-N-(4-메톡시페닐)-10-(트리틸옥시메틸)-1,6-디아자비시클로[6.2.0]데칸-6-카르복스아미드.
THF (2 mL) 중 중간체 89 (757.00 mg, 1.01 mmol, 1 당량), 이소인돌린-1,3-디온 (164.07 mg, 1.12 mmol, 1.1 당량) 및 PPh3 (398.85 mg, 1.52 mmol, 1.5 당량)의 용액에 N2 하에 25℃에서 DIAD (307.49 mg, 1.52 mmol, 1.5 당량)를 적가하였다. 생성된 반응 혼합물을 25℃에서 12시간 동안 교반하였다. LCMS는 반응이 완료되었음을 나타내고, 반응 혼합물을 농축시켜 잔류물을 수득하였다. 잔류물을 정제용-TLC (석유 에테르: 에틸 아세테이트 = 1:1)에 의해 정제하여 중간체 90 (1.13 g, 조 물질)을 황색 고체로서 수득하였다.
1H NMR (400MHz, CDCl3-d1) δ7.70-7.68 (m, 3H), 7.68-7.65 (m, 8H), 7.49-7.47 (m, 3H), 7.22-7.17 (m, 3H), 6.74-6.72 (m, 2H), 5.99 (s, 1H), 3.84-3.77 (m, 2H), 3.75 (s, 3H), 3.64-3.60 (m, 4H), 3.54-3.50 (m, 3H), 3.16 (s, 1H), 3.05 (s, 1H), 2.94 (s, 1H), 2.64-2.62 (m, 1H), 1.88 (s, 1H).
중간체 91: (8R,9R,10S)-3-(아미노메틸)-9-(4-브로모페닐)-N-(4-메톡시페닐)-10-(트리틸옥시메틸)-1,6-디아자비시클로[6.2.0]데칸-6-카르복스아미드.
EtOH (2 mL) 중 중간체 90 (1.13 g, 1.29 mmol, 1 당량)의 용액에 NH2NH2.H2O (98.86 mg, 1.94 mmol, 98% 순도, 1.5 당량)을 적가하였다. 생성된 반응 혼합물을 70℃에서 1시간 동안 교반하였다. LCMS는 반응이 완료되었음을 나타내고, 반응 혼합물을 H2O (2 mL)에 의해 켄칭하고, DCM (10 mL*3)으로 추출하여 유기 층을 수득하였다. 층을 무수 Na2SO4 상에서 건조시키고, 농축시켜 잔류물을 수득하였다. 잔류물을 정제용-TLC (디클로로메탄: 메탄올 = 12:1)에 의해 정제하여 중간체 91 (586.00 mg, 60.91% 수율)을 백색 고체로서 수득하였다.
1H NMR (400MHz, CDCl3-d1) δ7.21-7.14 (m, 20H), 7.12-7.09 (m, 3H), 6.81-6.78 (m, 2H), 3.76-3.70 (m, 5H), 3.59-3.51 (m, 5H), 3.17-3.14 (m, 1H), 3.00-2.99 (m, 1H), 2.77-2.72 (m, 1H), 2.68-2.46 (m, 3H), 1.91 (m, 2H), 1.69 (s, 1H), 1.63 (s, 1H).
중간체 92: (8R,9R,10S)-9-(4-브로모페닐)-3-[(디메틸아미노)메틸]-N-(4-메톡시페닐)-10-(트리틸옥시메틸)-1,6-디아자비시클로[6.2.0]데칸-6-카르복스아미드.
DCM (6 mL) 중 중간체 91 (586.00 mg, 785.80 μmol, 1 당량)의 교반 용액에 HCHO (637.77 mg, 7.86 mmol, 585.11 μL, 10 당량) 및 MgSO4 (945.86 mg, 7.86 mmol, 10 당량)를 첨가하였다. 생성된 반응 혼합물을 25℃에서 0.5시간 동안 교반하였다. 혼합물에 CH3COOH (47.19 mg, 785.80 μmol, 1 당량) 및 NaBH(OAc)3 (832.71 mg, 3.93 mmol, 5 당량)을 첨가하였다. 생성된 반응 혼합물을 25℃에서 1.5시간 동안 교반하였다. LCMS는 반응이 완료되었음을 나타내고, 반응 혼합물을 H2O (5 mL)에 의해 켄칭하고, DCM (20 mL * 3)으로 추출하여 유기 층을 수득하였다. 유기 층을 무수 Na2SO4 상에서 건조시키고, 농축시켜 잔류물을 수득하였다. 잔류물을 정제용-TLC (디클로로메탄: 메탄올 = 12:1)에 의해 정제하여 중간체 92 (370.00 mg, 60.85% 수율)를 담갈색 고체로서 수득하였다.
1H NMR (400MHz, CDCl3-d1) δ7.34-7.29 (m, 2H), 7.76-7.22 (m, 10H), 7.14-7.12 (m, 2H), 6.83 (s, 1H), 6.83-6.79 (m, 2H), 3.76-3.67 (m, 4H), 3.63-3.60 (m, 4H), 3.15-3.14 (m, 1H), 2.97-2.96 (m, 1H), 2.73-2.64 (m, 3H), 2.73-2.65 (m, 1H), 2.02-1.88 (m, 3H).
중간체 93: (8R,9R,10S)-9-(4-브로모페닐)-3-[(디메틸아미노)메틸]-10-(히드록시메틸)-N-(4-메톡시페닐)-1,6-디아자비시클로[6.2.0]데칸-6-카르복스아미드.
DCM (1 mL) 중 중간체 92 (370.00 mg, 478.16 μmol, 1 당량)의 교반 용액에 TFA (545.20 mg, 4.78 mmol, 10 당량)를 첨가하였다. 생성된 반응 혼합물을 25℃에서 12시간 동안 교반하였다. LCMS는 반응이 완료되었음을 나타내고, 반응 혼합물을 NaHCO3 (5 mL)에 의해 켄칭하고, DCM (10 mL*3)으로 추출하여 유기 층을 수득하였다. 층을 무수 Na2SO4 상에서 건조시키고, 농축시켜 잔류물을 수득하였다. 잔류물을 정제용-TLC (디클로로메탄: 메탄올 = 8: 1)에 의해 정제하여 (172.00 mg, 67.68% 수율)을 담갈색 고체로서 수득하였다.
1H NMR (400MHz, CDCl3-d1) δ7.44 (d, J = 8.0 Hz, 2H), 7.35 (d, J = 8.0 Hz, 2H), 7.28-7.25 (m, 3H), 6.84 (d, J = 8.8 Hz, 2H), 3.78-3.73 (m, 4H), 3.70-3.61 (m, 1H), 3.60-3.56 (m, 4H), 3.51-3.39 (m, 1H), 3.23-3.14 (m, 1H), 2.89-2.63 (m, 1H), 2.29 (m, 6H), 2.17-2.12 (m, 1H), 1.89 (s, 2H), 1.64-1.61 (m, 1H).
중간체 94: (8R,9S,10S)-9-(4-브로모페닐)-3-[(디메틸아미노)메틸]-10-[(1,3-디옥소이소인돌린-2-일)메틸]-N-(4-메톡시페닐)-1,6-디아자비시클로[6.2.0]데칸-6-카르복스아미드.
THF (2 mL) 중 중간체 93 (172.00 mg, 323.62 μmol, 1 당량), 이소인돌린-1,3-디온 (52.38 mg, 355.98 μmol, 1.1 당량) 및 PPh3 (127.32 mg, 485.43 μmol, 1.5 당량)의 용액에 N2 하에 25℃에서 DIAD (98.16 mg, 485.43 μmol, 1.5 당량)를 적가하였다. 생성된 반응 혼합물을 25℃에서 12시간 동안 교반하였다. LCMS는 반응이 완료되었음을 나타내고, 반응 혼합물을 농축시켜 잔류물을 수득하였다. 잔류물을 정제용-TLC (디클로로메탄: 메탄올 = 10:1)에 의해 정제하여 중간체 94 (152.00 mg, 71.10% 수율)를 황색 고체로서 수득하였다.
1H NMR (400MHz, CDCl3-d1) δ7.81 (d, J = 4.8 Hz, 2H), 7.70 (d, J = 4.8 Hz, 2H), 7.51 (d, J = 8.4 Hz, 2H), 7.44 (d, J = 8.4 Hz, 2H), 7.26-7.23 (m, 3H), 6.82 (d, J = 8.8 Hz, 2H), 3.92-3.89 (m, 1H), 3.76 (s, 3H), 3.70-3.68 (m, 2H), 3.66-3.64 (m, 2H), 3.57-3.53 (m, 4H), 2.79 (m, 1H), 2.67-2.61 (m, 1H), 2.39-2.38 (m, 1H), 2.36 (m, 3H), 2.16-1.99 (m, 1H), 1.26 (s, 1H).
중간체 95: (8R,9S,10S)-10-(아미노메틸)-9-(4-브로모페닐)-3-[(디메틸아미노)메틸]-N-(4-메톡시페닐)-1,6-디아자비시클로[6.2.0]데칸-6-카르복스아미드.
EtOH (2 mL) 중 중간체 94 (152.00 mg, 230.09 μmol, 1 당량)의 용액에 NH2NH2.H2O (17.63 mg, 345.14 μmol, 17.12 μL, 98% 순도, 1.5 당량)를 적가하였다. 생성된 반응 혼합물을 70℃에서 1시간 동안 교반하였다. LCMS는 반응이 완료되었음을 나타내고, 반응 혼합물을 H2O (2 mL)에 의해 켄칭하고, DCM (10 mL*3)으로 추출하여 유기 층을 수득하였다. 층을 무수 Na2SO4 상에서 건조시키고, 농축시켜 잔류물을 수득하였다. 잔류물을 정제용-TLC (디클로로메탄: 메탄올 = 5:1)에 의해 정제하여 중간체 95 (80.00 mg, 65.54% 수율)를 백색 고체로서 수득하였다.
HRMS (ESI): 계산치 C26H36BrN5O2 [M + H]+ 530.21, 실측치 530.1
중간체 96: (8R,9S,10S)-9-(4-브로모페닐)-3,10-비스[(디메틸아미노)메틸]-N-(4-메톡시페닐)-1,6-디아자비시클로[6.2.0]데칸-6-카르복스아미드.
DCM (2 mL) 중 중간체 95 (120.00 mg, 226.20 μmol, 1 당량)의 교반 용액에 HCHO (183.43 mg, 2.26 mmol, 168.28 μL, 10 당량) 및 MgSO4 (272.28 mg, 2.26 mmol, 10 당량)를 첨가하였다. 생성된 반응 혼합물을 25℃에서 0.5시간 동안 교반하였다. 혼합물에 CH3COOH (13.58 mg, 226.20 μmol, 1 당량) 및 NaBH(OAc)3 (239.71 mg, 1.13 mmol, 5 당량)을 첨가하였다. 생성된 반응 혼합물을 25℃에서 1.5시간 동안 교반하였다. LCMS는 반응이 완료되었음을 나타내고, 반응 혼합물을 H2O (5 mL)에 의해 켄칭하고, DCM (20 mL * 3)으로 추출하여 유기 층을 수득하였다. 유기 층을 무수 Na2SO4 상에서 건조시키고, 농축시켜 잔류물을 수득하였다. 잔류물을 정제용-TLC (디클로로메탄: 메탄올 = 2:1)에 의해 정제하여 (100.00 mg, 79.15% 수율)을 백색 고체로서 수득하였다.
1H NMR (400MHz, CDCl3-d1) δ7.46 (d, J = 8.4 Hz, 2H), 7.32 (d, J = 8.4 Hz, 2H), 7.25 (d, J = 12.8 Hz, 2H), 6.83 (d, J = 8.4 Hz, 2H), 6.12 (s, 1H), 3.77 (s, 3H), 3.61-3.59 (m, 2H), 3.57-3.55 (m, 2H), 3.41-3.39 (m, 2H), 2.78-2.75 (m, 1H), 2.42-2.38 (m, 1H), 2.28-2.26 (m, 2H), 2.16 (s, 6H), 2.00 (m, 1H), 1.76 (m, 1H).
E25의 합성: (8R,9S,10S)-3,10-비스[(디메틸아미노)메틸]-N-(4-메톡시페닐)-9-[4-(2-페닐에티닐)페닐]-1,6-디아자비시클로[6.2.0]데칸-6-카르복스아미드 (E25).
아세토니트릴 (1 mL) 중 중간체 96 (50.00 mg, 89.52 μmol, 1 당량) 및 에티닐벤젠 (27.43 mg, 268.55 μmol, 29.49 μL, 3 당량)의 용액에 XPhos Pd G3 (7.58 mg, 8.95 μmol, 0.1 당량) 및 Cs2CO3 (58.33 mg, 179.04 μmol, 2 당량)을 첨가하였다. 생성된 반응 혼합물을 70℃에서 2시간 동안 교반하였다. LCMS는 반응이 완료되었음을 나타내고, 반응 혼합물을 H2O (5 mL)에 의해 켄칭하고, DCM (10 mL*3)으로 추출하여 유기 층을 수득하였다. 층을 무수 Na2SO4 상에서 건조시키고, 농축시켜 잔류물을 수득하였다. 잔류물을 정제용 HPLC (칼럼: 워터스 엑스브리지 정제용 OBD C18 150*30 5u; A: 물 (0.225% 포름산) B: 아세토니트릴)에 의해 정제하여 실시예 25 (10.00 mg, 17.25 μmol, 19.27% 수율)를 백색 고체로서 수득하였다.
HRMS (ESI): 계산치 C36H45N5O2 [M + H]+ 580.36, 실측치 580.5
1H NMR (400MHz, MeOD-d4) δ7.56-7.51 (m, 6H), 7.38-7.37 (m, 2H), 7.37 (d, J = 13.2 Hz, 2H), 6.85 (d, J = 8.8 Hz, 2H), 4.02-3.98 (m, 2H), 3.853-3.82 (m, 2H), 3.75 (s, 3H), 3.54-3.51 (m, 1H), 2.99-2.91 (m,3H), 2.87 (m, 1H), 2.71 (s, 6H), 2.44 (s, 6H), 2.02 (m, 2H), 1.84-1.81 (m, 1H).
실시예 26: (8R,9S,10S)-10-[(디메틸아미노)메틸]-3-(히드록시메틸)-N-(4-메톡시페닐)-9-[4-(2-페닐에티닐)페닐]-1,6-디아자비시클로[6.2.0]데칸-6-카르복스아미드 ("E26")
Figure pct00042
중간체 97: [(8R,9R,10S)-9-(4-브로모페닐)-10-(히드록시메틸)-6-[(4-메톡시페닐)카르바모일]-1,6-디아자비시클로[6.2.0]데칸-3-일]메틸 아세테이트.
DCM (3.6 mL) 중 중간체 88 (180.00 mg, 228.20 μmol, 1 당량)의 교반 용액에 TFA (2.28 mmol, 168.96 μL, 10 당량)를 첨가하였다. 생성된 반응 혼합물을 25℃에서 12시간 동안 교반하였다. LCMS는 반응이 완료되었음을 나타내고, 반응 혼합물을 포화 NaHCO3 (10 mL)으로 켄칭하고, DCM (50 mL *3)으로 추출하여 유기 층을 수득하고, 층을 농축시켜 잔류물을 수득하였다. 잔류물을 정제용-TLC (디클로로메탄: 메탄올 = 12:1)에 의해 정제하여 중간체 97 (300.00 mg, 조 물질)을 백색 고체로서 수득하였다.
1H NMR (400MHz, CDCl3-d1) δ7.47-7.45 (m, 1H), 7.38-7.32 (m, 2H), 7.26-7.22 (m, 3H), 6.84-6.82 (d, J = 8.8 Hz, 2H), 6.08 (s, 1H), 4.24-4.20 (m, 1H), 4.11-4.07 (m, 1H), 3.80-3.77 (m, 4H), 3.65 (s, 4H), 3.55-3.54 (m, 2H), 3.48-3.43 (m,1H), 2.97 (s, 1H), 2.83 (s, 1H), 2.08-2.03 (m, 4H), 1.96-1.94 (m, 1H), 1.86-1.84 (m, 1H).
중간체 98: [(8R,9S,10S)-9-(4-브로모페닐)-10-[(1,3-디옥소이소인돌린-2-일)메틸]-6-[(4-메톡시페닐)카르바모일]-1,6-디아자비시클로[6.2.0]데칸-3-일]메틸 아세테이트.
THF (2 mL) 중 중간체 97 (300.00 mg, 549.00 μmol, 1 당량), 이소인돌린-1,3-디온 (88.85 mg, 603.90 μmol, 1.1 당량) 및 PPh3 (216.00 mg, 823.50 μmol, 1.5 당량)의 용액에 DIAD (166.52 mg, 823.50 μmol, 1.5 당량)를 25℃에서 적가하였다. 생성된 반응 혼합물을 25℃에서 12시간 동안 교반하였다. LCMS는 반응이 완료되었음을 나타내고, 반응 혼합물을 농축시켜 잔류물을 수득하였다. 잔류물을 정제용-TLC (석유 에테르: 에틸 아세테이트 = 1:1)에 의해 정제하여 중간체 98 (458.00 mg, 조 물질)을 황색 고체로서 수득하였다.
1H NMR (400MHz, CDCl3-d1) δ7.80-7.70 (m, 2H), 7.68-7.65 (m, 12H), 7.49-7.46((m, 19H), 7.46-7.44 (m, 3H), 6.85-6.80 (m, 3H), 6.06 (s, 1H), 4.12-4.06 (m, 2H), 3.84-3.77 (m, 1H), 3.67-3.65 (m, 4H), 3.59-3.55 (m, 5H), 2.87-2.83 (m, 2H), 2.46-2.42 (m, 1H), 1.98 (s, 3H), 1.30-1.26 (m, 3H).
중간체 99: [(8R,9S,10S)-10-(아미노메틸)-9-(4-브로모페닐)-6-[(4-메톡시페닐)카르바모일]-1,6-디아자비시클로[6.2.0]데칸-3-일]메틸 아세테이트.
EtOH (2 mL) 중 중간체 98 (458.00 mg, 677.95 μmol, 1 당량)의 용액에 NH2NH2.H2O (51.95 mg, 1.02 mmol, 98% 순도, 1.5 당량)을 적가하였다. 생성된 반응 혼합물을 70℃에서 1시간 동안 교반하였다. LCMS는 반응이 완료되었음을 나타내고, 반응 혼합물을 H2O (2 mL)에 의해 켄칭하고, DCM (10 mL*3)으로 추출하여 유기 층을 수득하였다. 층을 무수 Na2SO4 상에서 건조시키고, 농축시켜 잔류물을 수득하였다. 잔류물을 정제용-TLC (디클로로메탄: 메탄올 = 12:1)에 의해 정제하여 중간체 99 (180.00 mg, 48.67% 수율)를 백색 고체로서 수득하였다.
1H NMR (400MHz, CDCl3-d1) δ7.47-7.45 (m, 3H), 7.38-7.34 (m, 2H), 7.24-7.22 (m, 2H), 6.84-6.81 (m, 2H), 6.07 (s, 1H), 4.20-4.18 (m, 1H), 4.10-4.09 (m, 1H), 3.77-3.62 (m, 5H), 3.60-3.57 (m, 3H), 3.45-3.33 (m, 2H), 3.35-3.32 (m, 2H), 2.95-2.92 (m, 1H), 2.77-2.76 (m, 2H), 2.55-2.54 (m, 1H), 2.03 (s, 3H), 1.94-1.74 (m, 2H), 1.27-1.24 (m, 2H).
중간체 100: [(8R,9S,10S)-9-(4-브로모페닐)-10-[(디메틸아미노)메틸]-6-[(4-메톡시페닐)카르바모일]-1,6-디아자비시클로[6.2.0]데칸-3-일]메틸 아세테이트.
DCM (2 mL) 중 중간체 99 (180.00 mg, 329.99 μmol, 1 당량)의 교반 용액에 HCHO (267.83 mg, 3.30 mmol, 245.71 μL, 10 당량) 및 MgSO4 (397.21 mg, 3.30 mmol, 10 당량)를 첨가하였다. 생성된 반응 혼합물을 25℃에서 0.5시간 동안 교반하였다. 혼합물에 CH3COOH (19.82 mg, 329.99 μmol, 1 당량) 및 NaBH(OAc)3 (349.69 mg, 1.65 mmol, 5 당량)을 첨가하였다. 생성된 반응 혼합물을 25℃에서 1.5시간 동안 교반하였다. LCMS는 반응이 완료되었음을 나타내고, 반응 혼합물을 H2O (5 mL)로 켄칭하고, DCM (20 mL * 3)으로 추출하여 유기 층을 수득하였다. 유기 층을 무수 Na2SO4 상에서 건조시키고, 농축시켜 잔류물을 수득하였다. 잔류물을 정제용-TLC (디클로로메탄: 메탄올 = 12:1)에 의해 정제하여 중간체 100 (134.00 mg, 70.80% 수율)을 백색 고체로서 수득하였다.
1H NMR (400MHz, CDCl3-d1) δ7.49-7.47 (m, 2H), 7.35-7.26 (m, 2H), 7.24-7.22 (m, 2H), 6.84-6.81 (m, 2H), 6.08 (s, 1H), 4.23-4.19 (m, 1H), 3.77 (s, 4H), 3.73-3.58 (m, 4H), 3.60-3.58 (m, 1H), 2.98-2.93(m, 1H), 2.95-2.93 (m, 1H), 2.76 (m, 2H), 2.56-2.51 (m, 2H), 2.05 (s, 6H), 1.92-1.88 (m, 2H).
중간체 101: [(8R,9S,10S)-10-[(디메틸아미노)메틸]-6-[(4-메톡시페닐)카르바모일]-9-[4-(2-페닐에티닐)페닐]-1,6-디아자비시클로[6.2.0]데칸-3-일]메틸 아세테이트.
아세토니트릴 (1 mL) 중 중간체 100 (60.00 mg, 104.62 μmol, 1 당량) 및 에티닐벤젠 (32.05 mg, 313.85 μmol, 34.47 μL, 3 당량)의 용액에 XPhos Pd G3 (8.86 mg, 10.46 μmol, 0.1 당량) 및 Cs2CO3 (68.17 mg, 209.23 μmol, 2 당량)을 첨가하였다. 생성된 반응 혼합물을 70℃에서 2시간 동안 교반하였다. LCMS는 반응이 완료되었음을 나타내고, 반응 혼합물을 농축시켜 잔류물을 수득하였다. 잔류물을 갈색 고체로서의 정제용-TLC (디클로로메탄: 메탄올=7:1)에 의해 정제하여 중간체 101 (42.00 mg, 67.50% 수율)을 수득하였다.
HRMS (ESI): 계산치 C36H42N4O4 [M + H]+ 595.32, 실측치 565.2
E26의 합성: (8R,9S,10S)-10-[(디메틸아미노)메틸]-3-(히드록시메틸)-N-(4-메톡시페닐)-9-[4-(2-페닐에티닐)페닐]-1,6-디아자비시클로[6.2.0]데칸-6-카르복스아미드 (E26).
MeOH (2 mL) 중 중간체 101 (42.00 mg, 70.62 μmol, 1 당량)의 용액에 K2CO3 (29.28 mg, 211.86 μmol, 3 당량)을 첨가하였다. 생성된 반응 혼합물을 25℃에서 12시간 동안 교반하였다. LCMS는 반응이 완료되었음을 나타내고, 반응 혼합물을 H2O (5 mL)에 의해 켄칭하고, DCM (10 mL*3)으로 추출하여 유기 층을 수득하였다. 층을 무수 Na2SO4 상에서 건조시키고, 농축시켜 잔류물을 수득하였다. 잔류물을 정제용 HPLC (칼럼: 워터스 엑스브리지 정제용 OBD C18 150*30 5u; A: 물 (0.225% 포름산) B: 아세토니트릴)에 의해 정제하여 화합물 E26 (10.80 mg, 27.67% 수율)을 백색 고체로서 수득하였다.
HRMS (ESI): 계산치 C34H40N4O3 [M + H]+ 553.31, 실측치 553.4
1H NMR (400MHz, MeOD-d4) δ7.57-7.51 (m, 6H), 7.39-7.38 (m, 3H), 6.85-6.83 (m, 2H), 3.91-3.82 (m, 1H), 3.76-3.71 (m, 1H), 3.71-3.69 (m, 4H), 3.76 (m, 2H), 3.03-2.94 (m, 3H), 2.59-2.47 (m, 4H), 1.95-1.92 (m, 1H), 1.91-1.82 (m, 2H).
실시예 27: (8R,9R,10S)-3-[(디메틸아미노)메틸]-10-(히드록시메틸)-N-(4-메톡시페닐)-9-[4-(2-페닐에티닐)페닐]-1,6-디아자비시클로[6.2.0]데칸-6-카르복스아미드 ("E27")
Figure pct00043
중간체 102: (8R,9R,10S)-3-[(디메틸아미노)메틸]-N-(4-메톡시페닐)-9-[4-(2-페닐에티닐)페닐]-10-(트리틸옥시메틸)-1,6-디아자비시클로[6.2.0]데칸-6-카르복스아미드.
아세토니트릴 (1 mL) 중 중간체 92 (30.00 mg, 38.77 μmol, 1 당량) 및 에티닐벤젠 (11.88 mg, 116.31 μmol, 12.77 μL, 3 당량)의 용액에 XPhos Pd G3 (3.28 mg, 3.88 μmol, 0.1 당량) 및 Cs2CO3 (25.26 mg, 77.54 μmol, 2 당량)을 첨가하였다. 생성된 반응 혼합물을 70℃에서 2시간 동안 교반하였다. LCMS는 반응이 완료되었음을 나타내고, 반응 혼합물을 농축시켜 잔류물을 수득하였다. 잔류물을 정제용-TLC (디클로로메탄: 메탄올 = 7:1)에 의해 정제하여 중간체 102 (50.00 mg, 조 물질)를 갈색 고체로서 수득하였다.
HRMS (ESI): 계산치 C53H54N4O3 [M + H]+ 795.42, 실측치 795.4
E27의 합성: (8R,9R,10S)-3-[(디메틸아미노)메틸]-10-(히드록시메틸)-N-(4-메톡시페닐)-9-[4-(2-페닐에티닐)페닐]-1,6-디아자비시클로[6.2.0]데칸-6-카르복스아미드 (E27).
DCM (1 mL) 중 중간체 102 (50.00 mg, 62.89 μmol, 1 당량)의 교반 용액에 TFA (71.71 mg, 628.91 μmol, 46.56 μL, 10.00 당량)를 첨가하였다. 생성된 반응 혼합물을 25℃에서 12시간 동안 교반하였다. LCMS는 반응이 완료되었음을 나타내고, 반응 혼합물을 NaHCO3 (5 mL)에 의해 켄칭하고, DCM (10 mL*3)으로 추출하여 유기 층을 수득하였다. 층을 무수 Na2SO4 상에서 건조시키고, 농축시켜 잔류물을 수득하였다. 잔류물을 정제용 HPLC (칼럼: 워터스 엑스브리지 정제용 OBD C18 150*30 5u; A: 물 (0.225% 포름산) B: 아세토니트릴)에 의해 정제하여 화합물 E27 (4.70 mg, 13.52% 수율)을 백색 고체로서 수득하였다.
HRMS (ESI): 계산치 C33H37N4O2 [M + H]+ 553.29, 실측치 553.4
1H NMR (400MHz, MeOD-d4) δ7.544-7.51 (m, 6H), 7.39-7.37 (m, 3H), 7.34-7.22 (m, 2H), 6.86-6.81 (m, 2H), 4.02-3.99 (m, 1H), 3.76-3.72 (m, 4H),3.70-3.66 (m, 1H), 3.41-3.40 (m, 1H), 3.38-3.35 (m, 1H), 3.12 (m, 1H), 2.85-2.75 (m, 1H), 2.16-2.09 (m, 2H), 1.81-1.77 (m, 1H).
실시예 28: (3R,8R,9R,10S)-3-(디메틸아미노)-10-(히드록시메틸)-N-(4-메톡시페닐)-9-[4-(2-페닐에티닐)페닐]-1,6-디아자비시클로[6.2.0]데칸-6-카르복스아미드 ("E28")
Figure pct00044
중간체 103: N-[[(2R,3R,4S)-1-알릴-3-(4-브로모페닐)-4-(트리틸옥시메틸)아제티딘-2-일]메틸]-2,2,2-트리플루오로-아세트아미드.
DCM (250.00 mL) 중 [(2R,3R,4S)-1-알릴-3-(4-브로모페닐)-4-(트리틸옥시메틸)아제티딘-2-일]메탄아민 (J.O.C. (2012), 77(17), 7187-7211) (25.00 g, 31.62 mmol, 1.00 당량)의 용액에 TEA (25.59 g, 252.92 mmol, 35.06 mL, 8.00 당량)를 첨가한 다음, 이를 0℃로 냉각시켰다. TFAA (26.56 g, 126.46 mmol, 17.59 mL, 4.00 당량)를 반응 혼합물에 적가하였다. 20℃에서 16시간 동안 교반한 후, 반응 혼합물을 NaHCO3 용액 (100 mL)에 의해 켄칭하고, DCM (50 mL x 3)으로 추출하고, 합한 유기 층을 농축시켜 잔류물을 수득하였다. 잔류물을 칼럼 크로마토그래피 (SiO2, 석유 에테르/에틸 아세테이트 =20/1에서 1:1)에 의해 정제하여 중간체 103 (11.00 g, 16.94 mmol, 53.56% 수율)을 황색 고체로서 수득하였다.
1H NMR (400 MHz, 클로로포름-d) δ ppm 2.87 - 3.08 (m, 2 H) 3.09 - 3.24 (m, 2 H) 3.30 - 3.51 (m, 3 H) 3.57 - 3.69 (m, 2 H) 5.10 (br d, J=10.14 Hz, 1 H) 5.18 - 5.33 (m, 1 H) 5.80 (dddd, J=17.28, 10.01, 7.44, 5.40 Hz, 1 H) 6.11 (br s, 1 H) 7.17 - 7.23 (m, 16 H) 7.33 (d, J=8.38 Hz, 2 H)
중간체 104: N-[[(2R,3R,4S)-3-(4-브로모페닐)-4-(트리틸옥시메틸)아제티딘-2-일]메틸]-2,2,2-트리플루오로-아세트아미드.
EtOH (169.00 mL) 중 중간체 103 (11.00 g, 16.94 mmol, 1.00 당량)의 용액에 N2 분위기 하에 1,3-디메틸바르비투르산 (3.97 g, 25.41 mmol, 1.50 당량) 및 Pd(PPh3)4 (1.96 g, 1.69 mmol, 0.10 당량)를 첨가하였다. 혼합물을 40℃에서 16시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 NaHCO3 용액 (200 mL)에 의해 켄칭하고, DCM (50 mL x 3)으로 추출하고, 합한 유기 층을 농축시켜 잔류물을 수득하였다. 잔류물을 칼럼 크로마토그래피 (SiO2, 석유 에테르/에틸 아세테이트 =10/1에서 5:1)에 의해 정제하여 중간체 104 (7.80 g, 12.80 mmol, 75.55% 수율)를 황색 고체로서 수득하였다.
1H NMR (400 MHz, 클로로포름-d) δ ppm 2.26 (br s, 1 H) 2.20 - 2.31 (m, 1 H) 2.99 - 3.07 (m, 1 H) 3.10 - 3.23 (m, 2 H) 3.30 - 3.39 (m, 1 H) 3.76 (br t, J=7.28 Hz, 1 H) 4.27 - 4.49 (m, 2 H) 6.10 (br s, 1 H) 7.17 - 7.24 (m, 16 H) 7.32 - 7.38 (m, 2 H)
중간체 105: tert-부틸 N-[(1R)-1-[[(2R,3R,4S)-3-(4-브로모페닐)-2-[[(2,2,2-트리플루오로아세틸)아미노]메틸]-4-(트리틸옥시메틸)아제티딘-1-일]메틸]-3-[tert-부틸(디페닐)실릴]옥시-프로필]카르바메이트.
DCM (50.00 mL) 중 중간체 104 (4.00 g, 6.56 mmol, 1.00 당량), tert-부틸 N-[(1R)-3-[tert-부틸(디페닐)실릴]옥시-1-포르밀-프로필]카르바메이트 (문헌 [Bioorganic & Medicinal Chemistry (2006), 14(1), 214-236]에 기재된 바와 같이 합성하고, 그 전문이 본원에 참조로 포함됨) (2.90 g, 6.56 mmol, 1.00 당량)의 용액에 MgSO4 (158.00 mg, 1.31 mmol, 20.00 당량) 및 NaBH(OAc)3 (139.10 mg, 656.30 μmol, 10.00 당량)을 첨가하였다. 20℃에서 16시간 동안 교반한 후, 추가의 tert-부틸 N-[(1R)-3-[tert-부틸(디페닐)실릴]옥시-1-포르밀-프로필]카르바메이트 (1 g)를 첨가하였다. 추가로 0.5시간 후, 반응 혼합물을 NaHCO3 용액 (200 mL)에 의해 켄칭하고, DCM (50 mL x 3)으로 추출하고, 합한 유기 층을 농축시켜 잔류물을 수득하였다. 잔류물을 칼럼 크로마토그래피 (SiO2, 석유 에테르/에틸 아세테이트 =20/1에서 10:1)에 의해 정제하여 중간체 105 (4.20 g, 4.06 mmol, 61.85% 수율)를 황색 검으로서 수득하였다.
1H NMR (400 MHz, 클로로포름-d) δ ppm 1.01 - 1.05 (m, 9 H) 1.41 - 1.47 (m, 10 H) 1.63 - 1.78 (m, 1 H) 1.82 - 1.92 (m, 1 H) 2.65 - 2.76 (m, 1 H) 2.82 - 3.01 (m, 2 H) 3.13 (br dd, J=9.60, 6.09 Hz, 1 H) 3.29 - 3.79 (m, 7 H) 4.67 (br d, J=9.29 Hz, 1 H) 7.11 - 7.25 (m, 17 H) 7.31 - 7.50 (m, 8 H) 7.63 (td, J=7.37, 1.44 Hz, 4 H) 8.40 - 8.73 (m, 1 H)
중간체 106: tert-부틸 N-[(1R)-1-[[(2R,3R,4S)-3-(4-브로모페닐)-2-[[(2,2,2-트리플루오로아세틸)아미노]메틸]-4-(트리틸옥시메틸)아제티딘-1-일]메틸]-3-히드록시-프로필]카르바메이트.
THF (50.00 mL) 중 중간체 105 (4.20 g, 4.06 mmol, 1.00 당량)의 용액에 TBAF (1.59 g, 6.09 mmol, 1.50 당량)를 첨가하였다. 20℃에서 16시간 동안 교반한 후, 반응 혼합물을 농축시켜 잔류물을 수득하였다. 잔류물을 칼럼 크로마토그래피 (SiO2, 석유 에테르/에틸 아세테이트 =10/1에서 2:1)에 의해 정제하여 중간체 106 (2.30 g, 2.89 mmol, 71.23% 수율)을 황색 고체로서 수득하였다.
1H NMR (400 MHz, 클로로포름-d) δ ppm 1.41 (s, 3 H) 1.45 - 1.53 (m, 9 H) 1.58 - 1.77 (m, 2 H) 2.49 (br dd, J=12.74, 4.33 Hz, 2 H) 2.82 (t, J=12.17 Hz, 1 H) 2.88 - 2.98 (m, 2 H) 3.08 - 3.29 (m, 3 H) 3.47 (td, J=7.87, 3.20 Hz, 1 H) 3.60 - 3.72 (m, 1 H) 4.51 (br d, J=9.41 Hz, 1 H) 7.12 (d, J=8.41 Hz, 1 H) 7.09 - 7.14 (m, 1 H) 7.16 - 7.26 (m, 17 H) 7.34 (d, J=8.41 Hz, 1 H) 8.13 (br s, 1 H)
중간체 107: tert-부틸 N-[(1R)-1-[[(2R,3R,4S)-3-(4-브로모페닐)-2-[[(2,2,2-트리플루오로아세틸)아미노]메틸]-4-(트리틸옥시메틸)아제티딘-1-일]메틸]-3-옥소-프로필]카르바메이트.
DCM (30.00 mL) 중 중간체 106 (2.30 g, 2.89 mmol, 1.00 당량)의 용액에 N2 하에 0℃에서 DMP (2.45 g, 5.78 mmol, 1.79 mL, 2.00 당량)를 첨가하였다. 혼합물을 0℃에서 1시간 동안 교반하였다. LCMS는 반응물 106이 완전히 소비되었음을 나타내고, 대부분은 목적 생성물이며, 반응 혼합물을 H2O (20 mL) 중 NaHCO3 (2.5 g) 및 Na2SO3 (2.5 g)의 용액으로 켄칭하고, DCM (20 mL x 3)으로 추출하고, 합한 유기 층을 농축시켜 잔류물을 수득하였다. 잔류물을 칼럼 크로마토그래피 (SiO2, 석유 에테르/에틸 아세테이트 =2/1에서 0:1)에 의해 정제하여 중간체 107 (1.80 g, 2.27 mmol, 78.37% 수율)을 황색 고체로서 수득하였다.
1H NMR (400 MHz, 클로로포름-d) δ ppm 1.47 (s, 9 H) 1.51 - 1.69 (m, 3 H) 2.46 - 2.54 (m, 2 H) 2.78 - 2.88 (m, 1 H) 2.89 - 3.00 (m, 2 H) 3.08 - 3.20 (m, 2 H) 3.49 - 3.69 (m, 4 H) 3.91 - 4.07 (m, 1 H) 4.50 - 4.76 (m, 1 H) 7.08 - 7.13 (m, 3 H) 7.17 - 7.26 (m, 22 H) 8.25 (br s, 1 H) 9.63 (s, 1 H)
중간체 108: tert-부틸 N-[(3R,5Z,8R,9R,10S)-9-(4-브로모페닐)-10-(트리틸옥시메틸)-1,6-디아자비시클로[6.2.0]데스-5-엔-3-일]카르바메이트.
MeOH (20.00 mL) 및 H2O (77.13 mg, 4.28 mmol, 77.13 μL, 2.00 당량) 중 중간체 107 (1.70 g, 2.14 mmol, 1.00 당량)의 용액에 K2CO3 (591.32 mg, 4.28 mmol, 2.00 당량)을 첨가하였다. 20℃에서 16시간 동안 교반한 후, 추가의 K2CO3(200 mg)을 첨가하였다. 추가의 2시간 후, 반응 혼합물을 물 (30 mL) 중에 용해시키고, DCM (20 mL x 3)으로 추출하고, 유기 층을 Na2SO4 상에서 건조시킨 다음, 농축시켜 잔류물을 수득하였다. 잔류물을 칼럼 크로마토그래피 (SiO2, 석유 에테르/에틸 아세테이트 =5/1에서 0:1)에 의해 정제하여 중간체 108 (750.00 mg, 771.30 μmol, 45.05% 수율, 70% 순도)을 황색 고체로서 수득하였다.
중간체 109: tert-부틸 N-[(3R,8R,9R,10S)-9-(4-브로모페닐)-10-(트리틸옥시메틸)-1,6-디아자비시클로[6.2.0]데칸-3-일]카르바메이트.
DCM (18.00 mL) 중 중간체 108 (750.00 mg, 1.10 mmol, 1.00 당량)의 용액에 AcOH (66.17 mg, 1.10 mmol, 63.02 μL, 1.00 당량) 및 NaBH(OAc)3 (2.34 g, 11.02 mmol, 10.00 당량)을 첨가하였다. 혼합물을 20℃에서 0.5시간 동안 교반하였다. LCMS는 반응물 108이 완전히 소비되었음을 나타내고, 대부분은 목적 생성물이고, 반응 혼합물을 NaHCO3 용액 (20 mL)에 의해 켄칭하고, DCM (10 mL x 3)으로 추출하고, 합한 유기 층을 농축시켜 중간체 109를 황색 고체 (750 mg, 조 물질)로서 수득하였으며, 이를 직접 후속 단계에 사용하였다.
중간체 110: tert-부틸 N-[(3R,8R,9R,10S)-9-(4-브로모페닐)-6-[(4-메톡시페닐)카르바모일]-10-(트리틸옥시메틸)-1,6-디아자비시클로[6.2.0]데칸-3-일]카르바메이트.
DCM (10.00 mL) 중 중간체 109 (750.00 mg, 769.02 μmol, 1.00 당량)의 용액에 TEA (38.91 mg, 384.51 μmol, 53.30 μL, 0.50 당량) 및 1-이소시아네이토-4-메톡시-벤젠 (137.64 mg, 922.82 μmol, 118.66 μL, 1.20 당량)을 첨가하였다. 혼합물을 20℃에서 0.5시간 동안 교반하였다. LCMS는 반응물 109가 완전히 소비되었음을 나타내고, 대부분은 목적 생성물이었다. 반응 혼합물을 농축시켜 잔류물을 수득하였다. 잔류물을 칼럼 크로마토그래피 (SiO2, 석유 에테르/에틸 아세테이트)에 의해 정제하고, 정제용 HPLC (칼럼: 워터스 엑스브리지 정제용 OBD C18 150*30 5u; A: 물 (0.225% 포름산) B: 아세토니트릴)에 의해 추가로 정제하였다. 중간체 110 (150.00 mg, 180.33 μmol, 23.45% 수율)을 백색 고체로서 수득하였다.
1H NMR (400 MHz, 클로로포름-d) δ ppm 1.45 (br d, J=6.15 Hz, 9 H) 2.18 (br s, 2 H) 3.20 - 3.68 (m, 3 H) 3.72 - 4.51 (m, 11 H) 5.14 - 5.42 (m, 1 H) 6.78 (br s, 1 H) 6.88 (br t, J=7.97 Hz, 2 H) 7.22 - 7.38 (m, 20 H) 7.47 - 7.53 (m, 1 H).
중간체 111: (3R,8R,9R,10S)-3-아미노-9-(4-브로모페닐)-10-(히드록시메틸)-N-(4-메톡시페닐)-1,6-디아자비시클로[6.2.0]데칸-6-카르복스아미드.
DCM (3.00 mL) 중 중간체 110 (120.00 mg, 144.26 μmol, 1.00 당량)의 용액에 0℃에서 TFA (1.54 g, 13.51 mmol, 1.00 mL, 93.63 당량)를 첨가하였다. 혼합물을 20℃에서 1시간 동안 교반하였다. LCMS는 반응물 110이 완전히 소비되었음을 나타내고, 대부분은 목적 생성물이고, 반응 혼합물을 NaHCO3 용액 (20 mL)에 의해 켄칭한 다음, NH3.H2O (1 mL)로 세척하고, DCM (10 mL x 3)으로 추출하고, 합한 유기 층을 농축시켜 잔류물을 수득하였다. 잔류물을 정제용-TLC (SiO2, DCM: MeOH = 10:1)에 의해 정제하여 중간체 111 (60.00 mg, 122.60 μmol, 84.98% 수율)을 백색 고체로서 수득하였다.
중간체 112: (3R,8R,9R,10S)-9-(4-브로모페닐)-3-(디메틸아미노)-10-(히드록시메틸)-N-(4-메톡시페닐)-1,6-디아자비시클로[6.2.0]데칸-6-카르복스아미드.
DCM (3.00 mL) 중 중간체 111 (60.00 mg, 122.60 μmol, 1.00 당량), HCHO (99.50 mg, 1.23 mmol, 91.28 μL, 10.00 당량)의 용액에 20℃에서 MgSO4 (147.57 mg, 1.23 mmol, 10.00 당량) 및 NaBH(OAc)3 (259.84 mg, 1.23 mmol, 10.00 당량)을 첨가하였다. 혼합물을 20℃에서 1시간 동안 교반하였다. LCMS는 반응물 111이 완전히 소비되었음을 나타내고, 대부분은 목적 생성물이고, 반응 혼합물은 NaHCO3 용액 (10 mL)에 의해 켄칭하고, DCM (5 mL x 3)으로 추출하고, 합한 유기 층을 농축시켜 잔류물을 수득하였다. 잔류물을 정제용-TLC (SiO2, DCM: MeOH = 10:1)에 의해 정제하여 중간체 112 (38.00 mg, 73.44 μmol, 59.90% 수율)를 황색 고체로서 수득하였다.
1H NMR (400 MHz, 클로로포름-d) δ ppm 1.84 - 1.99 (m, 1 H) 2.49 (br s, 6 H) 2.55 (br d, J=9.26 Hz, 2 H) 2.88 (br d, J=11.69 Hz, 1 H) 3.02 - 3.16 (m, 3 H) 3.41 (br dd, J=11.58, 4.52 Hz, 1 H) 3.51 - 3.61 (m, 3 H) 3.62 - 3.86 (m, 6 H) 3.98 - 4.17 (m, 1 H) 4.73 (s, 1 H) 6.78 - 6.91 (m, 2 H) 7.23 (d, J=8.82 Hz, 2 H) 7.34 - 7.53 (m, 4 H).
E28의 합성: (3R,8R,9R,10S)-3-(디메틸아미노)-10-(히드록시메틸)-N-(4-메톡시페닐)-9-[4-(2-페닐에티닐)페닐]-1,6-디아자비시클로[6.2.0]데칸-6-카르복스아미드 (E28).
CH3CN (350.00 μL) 중 중간체 112 (25.00 mg, 48.31 μmol, 1.00 당량), 에티닐벤젠 (14.80 mg, 144.93 μmol, 15.91 μL, 3.00 당량)의 용액에 N2 분위기 하에 Cs2CO3 (47.22 mg, 144.93 μmol, 3.00 당량) 및 XPhos Pd G3 (4.09 mg, 4.83 μmol, 0.10 당량)을 첨가하였다. 혼합물을 70℃에서 3시간 동안 교반하였다. LCMS는 반응물 1이 완전히 소비되었음을 나타내고, 대부분은 목적 생성물이고, 반응 혼합물을 물 (2 mL) 중에 용해시키고, DCM (2 mL x 3)으로 추출하고, 유기 층을 Na2SO4 상에서 건조시킨 다음, 농축시켜 잔류물을 수득하였다. 잔류물을 정제용-TLC (SiO2, DCM: MeOH = 10:1)에 의해 정제한 다음, 추가로 정제용 HPLC (칼럼: 워터스 엑스브리지 정제용 OBD C18 150*30 5u; A: 물 (0.225% 포름산) B: 아세토니트릴)에 의해 정제하여 화합물 E28 (포름산 염으로서 13.00 mg, 24.13 μmol, 49.95% 수율)을 백색 고체로서 수득하였다.
1H NMR (400 MHz, 클로로포름-d) δ ppm 1.88 (br d, J=7.65 Hz, 1 H) 2.38 (s, 7 H) 2.49 (br dd, J=13.30, 9.29 Hz, 3 H) 2.71 (br s, 1 H) 2.79 - 2.96 (m, 1 H) 3.09 (br d, J=15.94 Hz, 1 H) 3.25 (br dd, J=13.30, 5.02 Hz, 1 H) 3.41 - 3.73 (m, 6 H) 3.78 (s, 3 H) 3.90 - 4.03 (m, 1 H) 6.84 (d, J=8.91 Hz, 2 H) 7.21 (d, J=8.91 Hz, 2 H) 7.32 - 7.40 (m, 3 H) 7.46 - 7.57 (m, 6 H).
실시예 29: (3S,8R,9R,10S)-3-(디메틸아미노)-10-(히드록시메틸)-N-(4-메톡시페닐)-9-(4-(페닐에티닐)페닐)-1,6-디아자비시클로[6.2.0]데칸-6-카르복스아미드 ("E29")
합성을 중간체 105 대신에 거울상이성질체 tert-부틸 N-[(1S)-3-[tert-부틸(디페닐)실릴]옥시-1-포르밀-프로필]카르바메이트 (Bioorganic & Medicinal Chemistry (2006))를 사용하여 중간체 105 (중간체 105)의 합성 후 실시예 28에 기재된 것과 유사하게 수행하였다.
1H NMR (400MHz, 클로로포름-d) δ = 7.64 - 7.46 (m, 6H), 7.44 - 7.34 (m, 3H), 7.33 - 7.29 (m, 1H), 7.29 - 7.25 (m, 2H), 6.85 (d, J=8.9 Hz, 2H), 6.29 (br s, 1H), 3.86 (br d, J=10.8 Hz, 1H), 3.80 (s, 3H), 3.78 - 3.72 (m, 2H), 3.72 - 3.65 (m, 1H), 3.65 - 3.54 (m, 4H), 3.21 - 3.11 (m, 1H), 2.99 - 2.87 (m, 1H), 2.72 - 2.60 (m, 2H), 2.37 (s, 6H), 2.15 (br s, 1H), 2.01 (br d, J=7.9 Hz, 1H).
실시예 30: (4R,8R,9R,10S)-4-(디메틸아미노)-10-(히드록시메틸)-N-(4-메톡시페닐)-9-(4-(페닐에티닐)페닐)-1,6-디아자비시클로[6.2.0]데칸-6-카르복스아미드 ("E30")
합성을 출발 물질로서 거울상이성질체 (R)-tert-부틸 (1-((tert-부틸디페닐실릴)옥시)-4-옥소부탄-2-일)카르바메이트 (US 20150266867)를 사용하여 실시예 3에 나타낸 바와 같이 수행하였다.
1H NMR (400MHz, 클로로포름-d) δ = 7.59 - 7.54 (m, 2H), 7.52 - 7.45 (m, 4H), 7.41 - 7.30 (m, 5H), 6.89 - 6.80 (m, 2H), 3.80 (s, 3H), 3.77 - 3.58 (m, 5H), 3.57 (br d, J=8.2 Hz, 1H), 3.51 - 3.43 (m, 2H), 3.29 (br d, J=13.6 Hz, 1H), 3.02 (br s, 1H), 2.67 - 2.44 (m, 2H), 2.34 (s, 6H), 1.81 (br s, 1H), 1.66 (br s, 1H).
실시예 31: (8R,9R,10S)-4-((디메틸아미노)메틸)-10-(히드록시메틸)-N-(4-메톡시페닐)-9-(4-(페닐에티닐)페닐)-1,6-디아자비시클로[6.2.0]데칸-6-카르복스아미드 ("E31")
Figure pct00045
중간체 113: N-[[(2R,3R,4S)-1-알릴-3-(4-브로모페닐)-4-(트리틸옥시메틸)아제티딘-2-일]메틸]-N-[2-(히드록시메틸)알릴]-2-니트로-벤젠술폰아미드.
DMF (62.5 mL) 중 N-[[(2R,3R,4S)-1-알릴-3-(4-브로모페닐)-4-(트리틸옥시메틸)아제티딘-2-일]메틸]-2-니트로-벤젠술폰아미드 (WO2015070204) (5.00 g, 6.77 mmol, 1.00 당량)의 용액에 K2CO3 (2.11 g, 15.23 mmol, 2.25 당량)을 첨가하고, 0℃로 냉각하고, DMF (7.5 mL) 중 2-(브로모메틸)프로프-2-엔-1-올 (2.04 g, 13.54 mmol, 2.00당량)을 첨가하였다. 혼합물을 20℃에서 16시간 동안 교반하였다. LC-MS는 반응물 113이 완전히 소비되었음을 나타내고, 목적 MS가 검출되었다. 반응 혼합물을 물 (300 mL)의 첨가에 의해 켄칭하고, 에틸 아세테이트 (100mL * 2)로 추출하였다. 합한 유기 층을 염수 (100 mL * 2)로 세척하고, Na2SO4 상에서 건조시키고, 여과하고, 감압 하에 농축시켜 잔류물을 수득하였다. 잔류물을 칼럼 크로마토그래피 (SiO2, 석유 에테르/에틸 아세테이트 =20:1에서 2:1)에 의해 정제하여 중간체 113 (5.00 g, 6.18 mmol, 91.32% 수율)을 백색 고체로서 수득하였다:
1H NMR (400MHz, 클로로포름-d) δ = 8.00 (s, 1H), 7.68 - 7.62 (m, 1H), 7.60 - 7.46 (m, 3H), 7.30 - 7.23 (m, 3H), 7.19 - 7.12 (m, 10H), 7.07 (dd, J=2.9, 6.8 Hz, 6H), 5.57 (tdd, J=6.6, 10.4, 17.0 Hz, 1H), 5.10 - 5.00 (m, 2H), 4.89 (d, J=10.1 Hz, 1H), 4.69 (s, 1H), 3.91 (d, J=8.8 Hz, 3H), 3.70 - 3.61 (m, 1H), 3.54 - 3.38 (m, 3H), 3.26 - 3.14 (m, 3H), 2.98 (dd, J=4.4, 9.3 Hz, 1H), 2.85 - 2.73 (m, 2H)
중간체 114: [(3E,8R,9R,10S)-9-(4-브로모페닐)-6-(2-니트로페닐)술포닐-10-(트리틸옥시메틸)-1,6-디아자비시클로[6.2.0]데스-3-엔-4-일]메탄올.
DCM (500.00 mL) 중 중간체 113 (5.00 g, 6.18 mmol, 1.00 당량)의 용액에 호베이다-그럽스 촉매 제2 세대 (774.77 mg, 1.24 mmol, 0.20 당량)를 첨가하였다. 혼합물을 55℃에서 2시간 동안 교반하였다. TLC (석유 에테르: 에틸아세테이트 =1:1)는 중간체 113이 완전히 소비되었음을 나타내고, 목적 MS가 검출되었다. 반응 혼합물을 감압 하에 농축시켜 잔류물을 수득하였다. 잔류물을 칼럼 크로마토그래피 (SiO2, 석유 에테르/에틸 아세테이트 =20:1에서 1:1)에 의해 정제하여 중간체 114 (4.00 g, 5.12 mmol, 82.90% 수율)를 갈색 고체로서 수득하였다:
1H NMR (400MHz, 클로로포름-d) δ = 7.88 - 7.83 (m, 1H), 7.64 - 7.51 (m, 3H), 7.18 (d, J=6.0 Hz, 2H), 7.13 (s, 14H), 7.06 (d, J=8.5 Hz, 2H), 5.81 (t, J=6.3 Hz, 1H), 4.07 - 4.02 (m, 3H), 3.96 - 3.88 (m, 1H), 3.59 - 3.32 (m, 6H), 3.19 (d, J=14.1 Hz, 1H), 3.09 - 2.93 (m, 3H), 2.83 - 2.79 (m, 1H).
중간체 115: [(8R,9R,10S)-9-(4-브로모페닐)-6-(2-니트로페닐)술포닐-10-(트리틸옥시메틸)-1,6-디아자비시클로[6.2.0]데칸-4-일]메탄올.
THF (51.00 mL) 중 중간체 114 (4.00 g, 5.12 mmol, 1.00 당량)의 용액에 2-니트로벤젠술포노히드라지드 (5.56 g, 25.60 mmol, 4.00당량) 및 TEA (5.18 g, 51.23 mmol, 7.10 mL, 10.00 당량)를 첨가하였다. 40℃에서 16시간 동안 교반한 후, 반응 혼합물을 물 (100 mL)의 첨가에 의해 켄칭하고, 에틸 아세테이트 (50 mL * 2)로 추출하였다. 합한 유기 층을 Na2SO4 상에서 건조시키고, 여과하고, 감압 하에 농축시켜 잔류물을 수득하였다. 잔류물을 칼럼 크로마토그래피 (SiO2, 석유 에테르/에틸 아세테이트 =10/1에서 1:1)에 의해 정제하여 중간체 115 (3.60 g, 조 물질)를 백색 고체로서 수득하였다.
중간체 116: [(8R,9R,10S)-9-(4-브로모페닐)-6-(2-니트로페닐)술포닐-10-(트리틸옥시메틸)-1,6-디아자비시클로[6.2.0]데칸-4-일]메틸 아세테이트.
DCM (80.00 mL) 중 중간체 115 (3.60 g, 4.60 mmol, 1.00 당량)의 용액에 0℃에서 DMAP (56.19 mg, 460.00 μmol, 0.1 당량) 및 TEA (465.40 mg, 4.60 mmol, 637.53 μL, 1.00 당량)에 이어서 Ac2O (939.07 mg, 9.20 mmol, 861.53 μL, 2.00 당량)을 첨가하였다. 20℃에서 2시간 동안 교반한 후, 반응 혼합물을 포화 NaHCO3 수성 (150 mL)의 첨가에 의해 켄칭하고, DCM (50mL * 2)으로 추출하였다. 합한 유기 층을 Na2SO4 상에서 건조시키고, 여과하고, 감압 하에 농축시켜 잔류물을 수득하였다. 잔류물을 칼럼 크로마토그래피 (SiO2, 석유 에테르/에틸 아세테이트 =30/1에서 1:1)에 의해 정제하여 중간체 116 (3.00 g, 3.64 mmol, 79.07% 수율)을 백색 고체로서 수득하였다.
중간체 117: [(8R,9R,10S)-9-(4-브로모페닐)-10-(트리틸옥시메틸)-1,6-디아자비시클로[6.2.0]데칸-4-일]메틸 아세테이트.
아세토니트릴 (80.00 mL) 중 중간체 116 6 (3.00 g, 3.64 mmol, 1.00 당량)의 용액에 0℃에서 Cs2CO3 (1.42 g, 4.37 mmol, 1.20 당량) 및 벤젠티올 ("PhSH") (601.14 mg, 5.46 mmol, 1.50 당량)을 첨가하였다. 20℃에서 16시간 동안 교반한 후, 반응 혼합물을 물 (100 mL)의 첨가에 의해 켄칭하고, 에틸 아세테이트 (30 mL * 2)로 추출하였다. 합한 유기 층을 염수 (50 mL * 2)로 세척하고, Na2SO4 상에서 건조시키고, 여과하고, 감압 하에 농축시켜 잔류물을 수득하였다. 잔류물을 칼럼 크로마토그래피 (SiO2, 석유 에테르/에틸 아세테이트 =10:1에서 1:1)에 의해 정제하여 중간체 117 (2.00 g, 3.13 mmol, 85.90% 수율)을 백색 고체로서 수득하였다.
중간체 118: [(8R,9R,10S)-9-(4-브로모페닐)-6-[(4-메톡시페닐)카르바모일]-10-(트리틸옥시메틸)-1,6-디아자비시클로[6.2.0]데칸-4-일]메틸 아세테이트.
DCM (50.00 mL) 중 중간체 117 (2.00 g, 3.13 mmol, 1.00 당량)의 용액에 0℃에서 1-이소시아네이토-4-메톡시-벤젠 (560.21 mg, 3.76 mmol, 1.20 당량)을 첨가하였다. 혼합물을 15℃에서 2시간 동안 교반하였다. LC-MS는 중간체 117이 완전히 소비되었음을 나타내고, 목적 MS가 검출되었다. 반응 혼합물을 물 (100 mL)의 첨가에 의해 켄칭하고, DCM (30mL * 2)으로 추출하였다. 합한 유기 층을 Na2SO4 상에서 건조시키고, 여과하고, 감압 하에 농축시켜 잔류물을 수득하였다. 잔류물을 칼럼 크로마토그래피 (SiO2, DCM: MeOH = 100:1에서 20:1까지)에 의해 정제하여 중간체 118 (2.20 g, 2.79 mmol, 89.11% 수율)을 백색 고체로서 수득하였다.
1H NMR (400MHz, 클로로포름-d) δ = 7.28 - 7.16 (m, 23H), 6.83 (d, J=9.0 Hz, 2H), 4.01 - 3.95 (m, 1H), 3.92 - 3.85 (m, 1H), 3.80 - 3.73 (m, 5H), 3.63 - 3.54 (m, 2H), 3.42 (t, J=8.0 Hz, 1H), 3.20 - 2.90 (m, 5H), 2.74 (dd, J=11.0, 14.1 Hz, 1H), 2.50 - 2.40 (m, 1H), 2.06 (s, 3H), 1.66 (dd, J=6.8, 13.8 Hz, 1H), 1.53 - 1.45 (m, 1H).
중간체 119: (8R,9R,10S)-9-(4-브로모페닐)-4-(히드록시메틸)-N-(4-메톡시페닐)-10-(트리틸옥시메틸)-1,6-디아자비시클로[6.2.0]데칸-6-카르복스아미드.
DCM (1.00 mL) 및 MeOH (1 mL) 중 중간체 118 (200.00 mg, 253.56 μmol, 1.00 당량)의 용액에 K2CO3 (175.22 mg, 1.27 mmol, 5.00 당량)을 첨가하였다. 혼합물을 15℃에서 4시간 동안 교반하였다. LC-MS는 중간체 118이 완전히 소비되었음을 나타내고, 목적 MS를 갖는 1개의 주요 피크가 검출되었다. 반응 혼합물을 물 (10 mL)의 첨가에 의해 켄칭하고, DCM (5 mL * 2)으로 추출하였다. 합한 유기 층을 Na2SO4 상에서 건조시키고, 여과하고, 감압 하에 농축시켜 잔류물을 수득하였다. 잔류물을 칼럼 크로마토그래피 (SiO2, 석유 에테르/에틸 아세테이트 =10:1에서 1:1)에 의해 정제하여 중간체 119 (150.00 mg, 200.88 μmol, 79.22% 수율)를 백색 고체로서 수득하였다.
1H NMR (400MHz, 클로로포름-d) δ = 7.37 (d, J=8.5 Hz, 2H), 7.27 (s, 4H), 7.22 (s, 15H), 6.80 (d, J=8.5 Hz, 2H), 3.90 (d, J=16.1 Hz, 2H), 3.77 (s, 3H), 3.70 - 3.57 (m, 3H), 3.43 - 3.32 (m, 2H), 3.19 - 3.07 (m, 2H), 3.05 - 2.94 (m, 2H), 2.75 (d, J=11.5 Hz, 1H), 2.47 (t, J=12.0 Hz, 1H), 1.89 (br. s., 1H), 1.52 - 1.38 (m, 2H).
중간체 120: (8R,9R,10S)-9-(4-브로모페닐)-4-[(1,3-디옥소이소인돌린-2-일)메틸]-N-(4-메톡시페닐)-10-(트리틸옥시메틸)-1,6-디아자비시클로[6.2.0]데칸-6-카르복스아미드.
3 mL THF 중 PPh3 (0.15 g)의 용액에 0℃에서 DIAD (0.11 mL)를 첨가하였다. 5분 후, 이 혼합물을 0℃에서 THF (1 mL) 중 중간체 119 (20.00 mg, 26.78 μmol, 1.00 당량) 및 이소인돌린-1,3-디온 (5.91 mg, 40.17 μmol, 1.50 당량)의 용액에 첨가하였다. 혼합물을 15℃에서 16시간 동안 교반하였다. LC-MS는 중간체 9가 완전히 소비되었음을 나타내고, 목적 MS가 검출되었다. 반응 혼합물을 감압 하에 농축시켜 잔류물을 수득하였다. 잔류물을 정제용-TLC (SiO2, 석유 에테르/에틸 아세테이트 =1:1)에 의해 정제하여 중간체 120 (10.00 mg, 11.42 μmol, 42.63% 수율)을 백색 고체로서 수득하였다.
1H NMR (400MHz, 클로로포름-d) δ = 7.87 (dd, J=3.0, 5.5 Hz, 1H), 7.75 (dd, J=3.3, 5.3 Hz, 2H), 7.32 - 7.28 (m, 7H), 7.27 - 7.20 (m, 15H), 6.80 (d, J=9.0 Hz, 2H), 6.17 (s, 1H), 3.83 - 3.75 (m, 3H), 3.74 - 3.56 (m, 5H), 3.52 (d, J=7.5 Hz, 1H), 3.24 - 3.12 (m, 3H), 3.03 - 2.96 (m, 1H), 2.83 - 2.74 (m, 1H), 2.45 - 2.30 (m, 2H), 1.83 (d, J=7.5 Hz, 1H).
중간체 121: (8R,9R,10S)-4-(아미노메틸)-9-(4-브로모페닐)-N-(4-메톡시페닐)-10-(트리틸옥시메틸)-1,6-디아자비시클로[6.2.0]데칸-6-카르복스아미드.
EtOH (10.00 mL) 중 중간체 120 (500.00 mg, 570.87 μmol, 1.00 당량)의 용액에 N2H4.H2O (28.58 mg, 570.87 μmol, 27.75 μL, 1.00 당량)을 첨가하였다. 혼합물을 70℃에서 1시간 동안 교반하였다. LC-MS는 중간체 120이 소비되었음을 나타내고, 목적 MS가 검출되었다. 반응 혼합물을 첨가 물 (30 mL)에 의해 켄칭하고, DCM (10 mL * 2)으로 추출하였다. 합한 유기 층을 염수 (10 mL * 2)로 세척하고, Na2SO4 상에서 건조시키고, 여과하고, 감압 하에 농축시켜 잔류물을 수득하였다. 잔류물을 칼럼 크로마토그래피 (SiO2, DCM: MeOH = 100:1에서 10:1까지)에 의해 정제하여 Ph3PO를 함유하는 중간체 121 (150.00 mg, 조 물질)을 황색 고체로서 수득하였다.
1H NMR (400MHz, 클로로포름-d) δ = 7.64 - 7.56 (m, 4H), 7.51 - 7.45 (m, 3H), 7.39 (dt, J=2.8, 7.4 Hz, 5H), 7.14 (s, 13H), 6.71 (d, J=9.0 Hz, 2H), 3.79 - 3.62 (m, 4H), 3.56 - 3.46 (m, 2H), 3.31 (br. s., 1H), 3.11 - 2.85 (m, 5H), 2.74 (d, J=12.5 Hz, 1H), 2.44 - 2.18 (m, 2H), 1.62 - 1.39 (m, 3H).
중간체 122: (8R,9R,10S)-9-(4-브로모페닐)-4-((디메틸아미노)메틸)-N-(4-메톡시페닐)-10-((트리틸옥시)메틸)-1,6-디아자비시클로[6.2.0]데칸-6-카르복스아미드.
DCM (5.00 mL) 중 중간체 121 (150.00 mg, 201.14 μmol, 1.00 당량)의 용액에 MgSO4 (290.53 mg, 2.41 mmol, 12.00 당량) 및 HCHO (98.21 mg, 1.21 mmol, 90.10 μL, 37% 순도, 6.02 당량)에 이어서 NaBH(OAc)3 (639.44 mg, 3.02 mmol, 15.00 당량)을 첨가하였다. 혼합물을 15℃에서 16시간 동안 교반하였다. LC-MS는 중간체 121이 소비되었음을 나타내고, 1개의 목적 MS가 검출되었다. 반응 혼합물을 포화 NaHCO3 수성 (20 mL)의 첨가에 의해 켄칭하고, DCM (5 mL * 2)으로 추출하였다. 합한 유기 층을 Na2SO4 상에서 건조시키고, 여과하고, 감압 하에 농축시켜 잔류물을 수득하였다. 잔류물을 정제용-TLC (SiO2, DCM: MeOH = 20:1)에 의해 정제하여 중간체 122 (60.00 mg, 77.54 μmol, 38.55% 수율)를 황색 고체로서 수득하였다.
1H NMR (400MHz, 클로로포름-d) δ = 7.24 - 7.08 (m, 24H), 6.72 (d, J=9.0 Hz, 2H), 3.88 (d, J=14.1 Hz, 1H), 3.67 (s, 3H), 3.57 - 3.48 (m, 3H), 3.33 - 3.25 (m, 1H), 3.10 - 2.86 (m, 5H), 2.64 (dd, J=10.8, 14.3 Hz, 1H), 2.44 - 2.36 (m, 1H), 2.21 (s, 6H), 1.90 (d, J=12.0 Hz, 1H), 1.51 (br. s., 2H), 1.36 (d, J=4.5 Hz, 2H).
중간체 123: (8R,9R,10S)-4-[(디메틸아미노)메틸]-N-(4-메톡시페닐)-9-[4-(2-페닐에티닐)페닐]-10-(트리틸옥시메틸)-1,6-디아자비시클로[6.2.0]데칸-6-카르복스아미드.
아세토니트릴 (1.00 mL) 중 중간체 122 (60.00 mg, 77.54 μmol, 1.00 당량)의 용액에 에티닐벤젠 (23.76 mg, 232.62 μmol, 25.55 μL, 3.00 당량), Cs2CO3 (101.06 mg, 310.16 μmol, 4.00 당량) 및 Xphos Pd G3 (6.56 mg, 7.75 μmol, 0.1 당량)을 첨가하였다. 혼합물을 70℃에서 2시간 동안 교반하였다. LC-MS는 반응물이 완전히 소비되었음을 나타내고, 목적 MS가 검출되었다. 반응 혼합물을 물 (10 mL)의 첨가에 의해 켄칭하고, DCM (5 mL * 2)으로 추출하였다. 합한 유기 층을 염수 (5 mL * 2)로 세척하고, Na2SO4 상에서 건조시키고, 여과하고, 감압 하에 농축시켜 잔류물을 수득하였다. 잔류물을 정제용-TLC (SiO2, DCM: MeOH = 20:1)에 의해 정제하여 중간체 123 (50.00 mg, 62.89 μmol, 81.11% 수율)을 황색 고체로서 수득하였다.
E31의 합성: (8R,9R,10S)-4-((디메틸아미노)메틸)-10-(히드록시메틸)-N-(4-메톡시페닐)-9-(4-(페닐에티닐)페닐)-1,6-디아자비시클로[6.2.0]데칸-6-카르복스아미드 (E31).
DCM (1.00 mL) 중 중간체 123 (50.00 mg, 62.89 μmol, 1.00 당량)의 용액에 TFA (71.71 mg, 628.90 μmol, 46.56 μL, 10.00 당량)을 첨가하였다. 혼합물을 25℃에서 1시간 동안 교반하였다. LC-MS는 중간체 123이 완전히 소비되었음을 나타내고, 목적 MS가 검출되었다. 반응 혼합물을 포화 NaHCO3 수성 (10 mL)의 첨가에 의해 켄칭하고, DCM (5 mL * 2)으로 추출하였다. 합한 유기 층을 Na2SO4 상에서 건조시키고, 여과하고, 감압 하에 농축시켜 잔류물을 수득하였다. 잔류물을 정제용-TLC (SiO2, DCM: MeOH = 10:1)에 의해 정제하여 화합물 E31 (4.50 mg, 8.14 μmol, 12.95% 수율)을 백색 고체로서 수득하였다.
1H NMR (400MHz, 클로로포름-d) δ = 7.54 (dd, J=2.0, 7.5 Hz, 2H), 7.48 (s, 4H), 7.37 - 7.29 (m, 5H), 6.82 (d, J=9.0 Hz, 2H), 4.05 (d, J=14.1 Hz, 1H), 3.78 (s, 3H), 3.73 - 3.62 (m, 4H), 3.60 - 3.52 (m, 2H), 3.46 (t, J=8.5 Hz, 1H), 3.15 (dd, J=5.3, 16.3 Hz, 2H), 2.86 (dd, J=10.5, 14.6 Hz, 1H), 2.58 (br. s., 1H), 2.32 (s, 6H), 2.25 (t, J=12.3 Hz, 2H), 2.03 (d, J=12.5 Hz, 1H), 1.59 (br. s., 2H), 1.53 (br. s., 1H)
실시예 32: (8R,9S,10S)-10-[(디메틸아미노)메틸]-4-(히드록시메틸)-N-(4-메톡시페닐)-9-[4-(2-페닐에티닐)페닐]-1,6-디아자비시클로[6.2.0]데칸-6-카르복스아미드 ("E32")
Figure pct00046
중간체 124: (8R,9R,10S)-9-(4-브로모페닐)-4-[(디메틸아미노)메틸]-10-(히드록시메틸)-N-(4-메톡시페닐)-1,6-디아자비시클로[6.2.0]데칸-6-카르복스아미드.
DCM (10.00 mL) 중 중간체 122 (400.00 mg, 516.93 μmol, 1.00 당량)의 용액에 TFA (589.40 mg, 5.17 mmol, 382.73 μL, 10.00 당량)를 첨가하였다. 혼합물을 25℃에서 1시간 동안 교반하였다. LC-MS는 중간체 122가 완전히 소비되었음을 나타내고, 목적 MS가 검출되었다. 반응 혼합물을 포화 NaHCO3 수성 (10 mL)의 첨가에 의해 켄칭하고, DCM (5 mL * 2)으로 추출하였다. 합한 유기 층을 Na2SO4 상에서 건조시키고, 여과하고, 감압 하에 농축시켜 잔류물을 수득하였다. 잔류물을 칼럼 크로마토그래피 (SiO2, DCM: MeOH = 100:1에서 10:1까지)에 의해 정제하여 중간체 124 (130.00 mg, 조 물질)를 황색 고체로서 수득하였다.
1H NMR (400MHz, 클로로포름-d) δ = 7.47 (d, J=8.8 Hz, 1H), 7.39 - 7.32 (m, 3H), 7.32 - 7.26 (m, 9H), 7.23 (d, J=9.3 Hz, 3H), 6.91 (d, J=8.4 Hz, 1H), 3.93 (d, J=14.1 Hz, 1H), 3.69 (s, 3H), 3.60 - 3.52 (m, 4H), 3.04 (d, J=14.1 Hz, 2H), 2.75 - 2.63 (m, 2H), 2.23 (s, 6H), 2.15 (d, J=11.9 Hz, 1H), 1.65 - 1.46 (m, 4H).
중간체 125: (8R,9S,10S)-9-(4-브로모페닐)-4-[(디메틸아미노)메틸]-10-[(1,3-디옥소이소인돌린-2-일)메틸]-N-(4-메톡시페닐)-1,6-디아자비시클로[6.2.0]데칸-6-카르복스아미드.
3 mL THF 중 PPh3 (0.15 g)의 용액에 0℃에서 DIAD (0.11 mL)를 첨가하였다. 이 혼합물 (1.16 mL)을 0℃에서 THF (1.00 mL) 중 중간체 124 (30.00 mg, 56.45 μmol, 1.00 당량) 및 이소인돌린-1,3-디온 (12.46 mg, 84.67 μmol, 1.50 당량)의 용액에 첨가하였다. 혼합물을 25℃에서 16시간 동안 교반하였다. LC-MS는 중간체 124가 완전히 소비되었음을 나타내고, 목적 MS가 검출되었다. 반응 혼합물을 감압 하에 농축시켜 잔류물을 수득하였다. 잔류물을 정제용-TLC (SiO2, DCM: MeOH = 20:1)에 의해 정제하여 Ph3PO를 함유하는 중간체 125 (30.00 mg, 조 물질)를 백색 고체로서 수득하였다.
중간체 126: (8R,9S,10S)-10-(아미노메틸)-9-(4-브로모페닐)-4-[(디메틸아미노)메틸]-N-(4-메톡시페닐)-1,6-디아자비시클로[6.2.0]데칸-6-카르복스아미드.
EtOH (2.00 mL) 중 중간체 125 (100.00 mg, 151.38 μmol, 1.00 당량)의 용액에 N2H4.H2O (7.58 mg, 151.38 μmol, 7.36 μL, 1.00 당량)을 첨가하였다. 혼합물을 70℃에서 1시간 동안 교반하였다. LC-MS는 중간체 125가 완전히 소비되었음을 나타내고, 목적 MS가 검출되었다. 반응 혼합물을 물 (10 mL)의 첨가에 의해 켄칭하고, DCM (5 mL * 2)으로 추출하였다. 합한 유기 층을 염수 (5 mL * 2)로 세척하고, Na2SO4 상에서 건조시키고, 여과하고, 감압 하에 농축시켜 잔류물을 수득하였다. 잔류물을 정제용-TLC (SiO2, DCM: MeOH = 8:1)에 의해 정제하여 중간체 126 (90.00 mg, 조 물질)을 황색 고체로서 수득하였다.
중간체 127: (8R,9S,10S)-9-(4-브로모페닐)-4,10-비스[(디메틸아미노)메틸]-N-(4-메톡시페닐)-1,6-디아자비시클로[6.2.0]데칸-6-카르복스아미드.
DCM (2.00 mL) 중 중간체 126 (45.00 mg, 84.83 μmol, 1.00 당량)의 용액에 HCHO (41.31 mg, 508.98 μmol, 37.90 μL, 37% 용액, 6.00 당량), MgSO4 (122.53 mg, 1.02 mmol, 12.00 당량)를, 30분 동안 교반한 후, NaBH(OAc)3 (269.68 mg, 1.27 mmol, 15.00당량)을 첨가하였다. 혼합물을 15℃에서 16시간 동안 교반하였다. LC-MS는 중간체 126이 완전히 소비되었음을 나타내고, 목적 MS가 검출되었다. 반응 혼합물을 포화 NaHCO3 수성 (10 mL)의 첨가에 의해 켄칭하고, DCM (3 mL * 2)으로 추출하였다. 합한 유기 층을 염수 (3 mL * 2)로 세척하고, Na2SO4 상에서 건조시키고, 여과하고, 감압 하에 농축시켜 잔류물을 수득하였다. 잔류물을 정제용-TLC (SiO2, DCM: MeOH = 10:1)에 의해 정제하여 중간체 127 (20.00 mg, 35.81 μmol, 42.21% 수율)을 황색 고체로서 수득하였다.
1H NMR (400MHz, 클로로포름-d) δ = 7.46 - 7.40 (m, 2H), 7.37 - 7.33 (m, 2H), 7.30 (d, J=9.0 Hz, 2H), 6.81 (d, J=9.0 Hz, 2H), 3.97 (d, J=14.1 Hz, 1H), 3.77 (s, 3H), 3.67 (d, J=15.6 Hz, 1H), 3.60 - 3.54 (m, 1H), 3.45 - 3.32 (m, 2H), 3.15 - 3.03 (m, 2H), 2.74 (dd, J=10.8, 14.3 Hz, 1H), 2.47 - 2.34 (m, 4H), 2.30 (s, 6H), 2.25 - 2.17 (m, 1H), 2.02 (s, 6H), 1.62 - 1.48 (m, 3H).
E32의 합성: (8R,9S,10S)-4,10-비스[(디메틸아미노)메틸]-N-(4-메톡시페닐)-9-[4-(2-페닐에티닐)페닐]-1,6-디아자비시클로[6.2.0]데칸-6-카르복스아미드 (E32).
아세토니트릴 (1.00 mL) 중 중간체 127 (15.00 mg, 26.86 μmol, 1.00 당량)의 용액에 에티닐벤젠 (10.97 mg, 107.42 μmol, 3.00당량), Xphos Pd G3 (2.27 mg, 2.69 μmol, 0.10 당량) 및 Cs2CO3 (35.00 mg, 107.42 μmol, 4.00 당량)을 첨가하였다. 혼합물을 70℃에서 1시간 동안 교반하였다. LC-MS는 중간체 127이 완전히 소비되었음을 나타내고, 목적 MS가 검출되었다. 반응 혼합물을 물 (10 mL)의 첨가에 의해 켄칭하고, 에틸 아세테이트 (3 mL * 2)로 추출하였다. 합한 유기 층을 염수 (3 mL * 2)로 세척하고, Na2SO4 상에서 건조시키고, 여과하고, 감압 하에 농축시켜 잔류물을 수득하였다. 잔류물을 정제용-TLC (SiO2, DCM: MeOH = 8:1)에 의해 정제하여 화합물 E32 (4.30 mg, 7.42 μmol, 27.61% 수율)를 황색 고체로서 수득하였다.
1H NMR (400MHz, 클로로포름-d) δ = 7.50 - 7.44 (m, 2H), 7.44 - 7.36 (m, 4H), 7.31 - 7.21 (m, 5H), 6.74 (d, J=8.5 Hz, 2H), 3.93 (d, J=14.6 Hz, 1H), 3.70 (s, 3H), 3.63 - 3.52 (m, 2H), 3.42 - 3.28 (m, 2H), 3.09 - 2.99 (m, 2H), 2.72 (dd, J=10.5, 14.1 Hz, 1H), 2.36 (d, J=10.0 Hz, 3H), 2.23 (s, 6H), 2.16 (t, J=12.5 Hz, 2H), 1.96 (br. s., 6H), 1.54 (br. s., 1H), 1.45 (br. s., 2H).
실시예 33: (8R,9S,10S)-10-[(디메틸아미노)메틸]-4-(히드록시메틸)-N-(4-메톡시페닐)-9-[4-(2-페닐에티닐)페닐]-1,6-디아자비시클로[6.2.0]데칸-6-카르복스아미드 ("E33")
Figure pct00047
중간체 128: [(8R,9R,10S)-9-(4-브로모페닐)-10-(히드록시메틸)-6-[(4-메톡시페닐)카르바모일]-1,6-디아자비시클로[6.2.0]데칸-4-일]메틸 아세테이트.
DCM (10.00 mL) 중 중간체 118 (600.00 mg, 760.68 μmol, 1.00 당량)의 용액에 TFA (867.33 mg, 7.61 mmol, 563.20 μL, 10.00 당량)를 첨가하였다. 혼합물을 20℃에서 2시간 동안 교반하였다. LC-MS는 중간체 118이 소비되었음을 나타내고, 목적 MS가 검출되었다. 반응 혼합물을 포화 NaHCO3 수성 (30 mL)의 첨가에 의해 켄칭하고, DCM (10 mL * 2)으로 추출하였다. 합한 유기 층을 Na2SO4 상에서 건조시키고, 여과하고, 감압 하에 농축시켜 잔류물을 수득하였다. 잔류물을 칼럼 크로마토그래피 (SiO2, DCM /MeOH=1:0에서 20:1)에 의해 정제하여 중간체 128 (300.00 mg, 549.00 μmol, 72.17% 수율)을 백색 고체로서 수득하였다.
중간체 129: [(8R,9S,10S)-9-(4-브로모페닐)-10-[(1,3-디옥소이소인돌린-2-일)메틸]-6-[(4-메톡시페닐)카르바모일]-1,6-디아자비시클로[6.2.0]데칸-4-일]메틸 아세테이트.
0℃에서 THF (19 ml) 중 트리페닐포스핀 (1 g, 3.76 mmol)의 용액에 DIAD (0.73 mL, 3.76 mmol)를 천천히 첨가하였다. 이 제조된 혼합물 (11 mL)을 THF (15.00 mL) 중 중간체 128 (300.00 mg, 549.00 μmol, 1.00 당량) 및 이소인돌린-1,3-디온 (121.16 mg, 823.50 μmol, 1.50 당량)의 혼합물에 0℃에서 첨가한 다음, 혼합물을 25℃에서 16시간 동안 N2 분위기 하에 교반하였다. LC-MS는 중간체 128이 완전히 소비되었음을 나타내고, 목적 MS가 검출되었다. 반응 혼합물을 감압 하에 농축시켜 잔류물을 수득하였다. 잔류물을 칼럼 크로마토그래피 (SiO2, DCM: MeOH = 1:0에서 10:1까지)에 의해 정제하여 Ph3PO를 함유하는 중간체 129 (400.00 mg, 조 물질)를 황색 고체로서 수득하였다.
중간체 130: [(8R,9S,10S)-10-(아미노메틸)-9-(4-브로모페닐)-6-[(4-메톡시페닐)카르바모일]-1,6-디아자비시클로[6.2.0]데칸-4-일]메틸 아세테이트.
EtOH (10.00 mL) 중 중간체 129 (400.00 mg, 592.09 μmol, 1.00 당량)의 용액에 N2H4.H2O (29.64 mg, 592.09 μmol, 28.78 μL, 1.00 당량)을 첨가하였다. 혼합물을 70℃에서 2시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 첨가 물 (30 mL)에 의해 켄칭하고, DCM (30 mL * 2)으로 추출하였다. 합한 유기 층을 염수 (30 mL * 2)로 세척하고, Na2SO4 상에서 건조시키고, 여과하고, 감압 하에 농축시켜 잔류물을 수득하였다. 잔류물을 칼럼 크로마토그래피 (SiO2, DCM: MeOH =1:0에서 20:1)에 의해 정제하여 중간체 130 (280.00 mg, 513.32 μmol, 86.70% 수율)을 백색 고체로서 수득하였다.
중간체 131: [(8R,9S,10S)-9-(4-브로모페닐)-10-[(디메틸아미노)메틸]-6-[(4-메톡시페닐)카르바모일]-1,6-디아자비시클로[6.2.0]데칸-4-일]메틸 아세테이트.
DCM (5.00 mL) 중 중간체 130 (140.00 mg, 256.66 μmol, 1.00 당량)의 용액에 MgSO4 (370.73 mg, 3.08 mmol, 12.00 당량) 및 HCHO (124.99 mg, 1.54 mmol, 114.67 μL, 37% 용액, 6.00 당량)을 첨가한 다음, NaBH(OAc)3 (815.95 mg, 3.85 mmol, 15.00 당량)을 조금씩 첨가하였다. 혼합물을 15℃에서 16시간 동안 교반하였다. LC-MS는 중간체 130이 소비되었음을 나타내고, 1개의 목적 MS가 검출되었다. 반응 혼합물을 포화 NaHCO3 수성 (20 mL)의 첨가에 의해 켄칭하고, DCM (5 mL * 2)으로 추출하였다. 합한 유기 층을 Na2SO4 상에서 건조시키고, 여과하고, 감압 하에 농축시켜 잔류물을 수득하였다. 잔류물을 정제용-TLC (SiO2, DCM: MeOH = 20:1)에 의해 정제하여 중간체 131 (73.00 mg, 127.28 μmol, 49.59% 수율)을 백색 고체로서 수득하였다.
중간체 132: [(8R,9S,10S)-10-[(디메틸아미노)메틸]-6-[(4-메톡시페닐)카르바모일]-9-[4-(2-페닐에티닐)페닐]-1,6-디아자비시클로[6.2.0]데칸-4-일]메틸 아세테이트.
아세토니트릴 (4.00 mL) 중 중간체 131 (73.00 mg, 127.28 μmol, 1.00 당량)의 용액에 에티닐벤젠 (39 mg, 381.85 μmol, 3.00당량), Xphos Pd G3 (10.77 mg, 12.73 μmol, 0.10 당량) 및 Cs2CO3 (165.89 mg, 509.14 μmol, 4.00 당량)을 첨가하였다. 혼합물을 70℃에서 1시간 동안 교반하였다. LC-MS는 중간체 131이 완전히 소비되었음을 나타내고, 목적 MS가 검출되었다. 반응 혼합물을 물 (10 mL)의 첨가에 의해 켄칭하고, 에틸 아세테이트 (3 mL * 2)로 추출하였다. 합한 유기 층을 염수 (3 mL * 2)로 세척하고, Na2SO4 상에서 건조시키고, 여과하고, 감압 하에 농축시켜 잔류물을 수득하였다. 잔류물을 정제용-TLC (SiO2, DCM: MeOH = 10:1)에 의해 정제하여 중간체 132 (30.00 mg, 50.44 μmol, 39.63% 수율)를 갈색 고체로서 수득하였다.
E33의 합성: (8R,9S,10S)-10-[(디메틸아미노)메틸]-4-(히드록시메틸)-N-(4-메톡시페닐)-9-[4-(2-페닐에티닐)페닐]-1,6-디아자비시클로[6.2.0]데칸-6-카르복스아미드 (E33).
MeOH (500.00 μL) /DCM (0.5 mL) 중 중간체 132 (30.00 mg, 50.44 μmol, 1.00 당량)의 용액에 K2CO3 (34.86 mg, 252.20 μmol, 5.00 당량)을 첨가하였다. 혼합물을 15℃에서 1시간 동안 교반하였다. LC-MS는 중간체 132가 완전히 소비되었음을 나타내고, 목적 MS를 갖는 1개의 주요 피크가 검출되었다. 반응 혼합물을 물 (10 mL)의 첨가에 의해 켄칭하고, DCM (5 mL * 2)으로 추출하였다. 합한 유기 층을 Na2SO4 상에서 건조시키고, 여과하고, 감압 하에 농축시켜 잔류물을 수득하였다. 잔류물을 정제용 HPLC (칼럼: 루나 C18 150*25 5u 이동상: [물(0.225% 포름산)-아세토니트릴];B%: 25%-45%, 12분)에 의해 정제하여 화합물 E33 (11.00 mg, 18.37 μmol, 36.42% 수율, 포름산 염))을 백색 고체로서 수득하였다:
1H NMR (400MHz, 메탄올-d4) δ = 7.58 - 7.49 (m, 6H), 7.38 (d, J=3.5 Hz, 3H), 7.29 (d, J=8.8 Hz, 2H), 6.81 (d, J=9.3 Hz, 2H), 3.92 (d, J=15.4 Hz, 1H), 3.82 - 3.71 (m, 5H), 3.59 (d, J=6.2 Hz, 2H), 3.45 (t, J=9.0 Hz, 1H), 3.20 - 3.05 (m, 2H), 3.01 - 2.91 (m, 2H), 2.88 - 2.81 (m, 1H), 2.48 (t, J=12.1 Hz, 1H), 2.40 - 2.29 (m, 6H), 1.83 (br. s., 1H), 1.67 - 1.48 (m, 2H).
실시예 34: (8R,9S,10S)-10-((디메틸아미노)메틸)-N-(4-메톡시페닐)-2-메틸-9-(4-(페닐에티닐)페닐)-1,6-디아자비시클로[6.2.0]데칸-6-카르복스아미드 ("E34")
Figure pct00048
중간체 133: (2R,3R,4S)-1-알릴-3-(4-브로모페닐)-4-(히드록시메틸)아제티딘-2-카르보니트릴.
DCM (291.00 mL) 중 (2R,3R,4S)-1-알릴-3-(4-브로모페닐)-4-((트리틸옥시)메틸)아제티딘-2-카르보니트릴 (J.O.C (2012), 77(17), 7187-7211) (16.00 g, 29.12 mmol, 1.00 당량)의 용액에 25℃에서 TFA (33.20 g, 291.20 mmol, 21.56 mL, 10.00 당량)를 첨가하였다. 혼합물을 25℃에서 16시간 동안 교반하였다. TLC는 반응물이 와전히 소비되었음을 나타내고, 목적 생성물이 관찰되고, NaHCO3 용액 (500 mL)으로 켄칭하고, DCM (200 mL x 3)으로 추출하고, Na2SO4 상에서 건조시키고, 농축시켜 잔류물 (8.95 g, 조 물질)을 황색 고체로서 수득하였으며, 이를 직접 후속 단계에 사용하였다.
중간체 134: (2R,3R,4S)-3-(4-브로모페닐)-4-(히드록시메틸)아제티딘-2-카르보니트릴.
EtOH 중 중간체 133 (8.95 g, 29.14 mmol, 1.00 당량), 1,3-디메틸 바르비투르산 (6.82 g, 43.71 mmol, 1.50 당량), Pd(PPh3)4 (3.37 g, 2.91 mmol, 0.10 당량)의 혼합물 (290.00 mL)을 탈기하고, N2로 3시간 동안 퍼징한 다음, 혼합물을 N2 분위기 하에 40℃에서 16시간 동안 교반하였다. LCMS는 반응물 133이 완전히 소비되었음을 나타내고, 목적 MS가 관찰되고, 농축시켜 잔류물을 수득하였다. 잔류물을 정제용 HPLC (칼럼: 워터스 엑스브리지 정제용 OBD C18 150*30 5u; A: 물 (10mM NH4HCO3); B: 아세토니트릴)에 의해 정제하여 중간체 134 (4.70 g, 17.60 mmol, 60.38% 수율)를 오렌지색 고체로서 수득하였다.
중간체 135: (2R,3R,4S)-3-(4-브로모페닐)-4-(히드록시메틸)-1-(1-메틸알릴)아제티딘-2-카르보니트릴
THF (3.50 mL) 중 중간체 134 (1.60 g, 5.99 mmol, 1.00 당량)의 용액에 P(OEt)3 (39.81 mg, 239.59 μmol, 41.04 μL, 0.04 당량), (E)-부트-2-엔-1-일 아세테이트 (724.70 mg, 6.35 mmol, 1.06 당량), 알릴(클로로)팔라듐 (21.92 mg, 59.90 μmol, 0.01 당량) 및 DBU (911.89 mg, 5.99 mmol, 902.86 μL, 1.00 당량)를 첨가하고, 혼합물을 탈기하고, N2로 3시간 동안 탈기한 다음, 혼합물을 N2 분위기 하에 40℃에서 16시간 동안 교반하였다. 반응물을 물 (15 mL)로 켄칭하고, DCM (20 mL x 3)으로 추출하고, Na2SO4 상에서 건조시키고, 농축시켜 잔류물을 수득하였다. 잔류물을 칼럼 크로마토그래피 (SiO2, 석유 에테르/에틸 아세테이트 =10/1에서 0:1)에 의해 정제하여 중간체 135 (150.00 mg, 466.98 μmol, 7.80% 수율)를 백색 고체로서 수득하였다.
1H NMR (400 MHz, 메탄올-d4) δ =1.20 (dd, J=11.04, 6.53 Hz, 3 H) 3.11 (quin, J=7.03 Hz, 1 H) 3.43 - 3.55 (m, 2 H) 3.59 - 3.67 (m, 1 H) 3.80 - 3.92 (m, 1 H) 4.04 - 4.15 (m, 1 H) 4.35 (d, J=8.53 Hz, 1 H) 4.41 (d, J=8.53 Hz, 1 H) 5.05 - 5.41 (m, 2 H) 5.64 - 5.91 (m, 1 H) 7.47 - 7.52 (m, 2 H) 7.52 - 7.56 (m, 2 H).
중간체 136: (2R,3R,4S)-3-(4-브로모페닐)-4-[[tert-부틸(디메틸)실릴]옥시메틸]-1-(1-메틸알릴)아제티딘-2-카르보니트릴.
DMF (6.00 mL) 중 중간체 135 (1.23 g, 3.83 mmol, 1.00 당량)의 용액에 이미다졸 (1.56 g, 22.98 mmol, 6.00 당량) 및 TBSCl (2.31 g, 15.32 mmol, 1.88 mL, 4.00 당량)을 첨가하였다. 혼합물을 25℃에서 16시간 동안 교반하였다. LCMS는 반응물이 완전히 소비되었음을 나타내고, 목적 MS가 관찰되고, 물 (30 mL)로 세척하고, 에틸 아세테이트 (30 mL x 3)로 추출하고, Na2SO4 상에서 건조시키고, 농축시켜 잔류물을 수득하였다. 잔류물을 칼럼 크로마토그래피 (SiO2, 석유 에테르/에틸 아세테이트 =100/1에서 10:1)에 의해 정제하여 중간체 136 (1.60 g, 3.67 mmol, 95.93% 수율)을 백색 고체로서 수득하였다.
1H NMR (400 MHz, 메탄올-d4) δ ppm -0.36 - -0.13 (m, 7 H) 0.69 - 0.77 (m, 9 H) 1.19 (dd, J=18.57, 6.53 Hz, 3 H) 3.04 - 3.17 (m, 1 H) 3.39 - 3.47 (m, 1 H) 3.53 - 3.59 (m, 1 H) 3.61 - 3.72 (m, 1 H) 3.82 - 3.92 (m, 1 H) 4.33 - 4.44 (m, 1 H) 5.07 - 5.35 (m, 2 H) 5.61 - 5.85 (m, 1 H) 7.46 - 7.50 (m, 2 H) 7.52 - 7.56 (m, 2 H).
중간체 137: [(2R,3R,4S)-3-(4-브로모페닐)-4-[[tert-부틸(디메틸)실릴]옥시메틸]-1-(1-메틸알릴)아제티딘-2-일]메탄아민.
THF (200.00 mL) 중 중간체 136 (1.85 g, 4.25 mmol, 1.00 당량)의 용액에 N2 분위기 하에 0℃에서 LiBHEt3 (1 M, 5.06 mL, 10.00 당량)을 첨가하였다. 혼합물을 25℃에서 2시간 동안 교반하였다. LCMS는 반응물 136이 완전히 소비되었음을 나타내고, 목적 MS가 관찰되고, H2O (100 mL)으로 켄칭하고, 에틸 아세테이트 (300 ml x 3)로 추출하고, 농축시켜 잔류물을 수득하였다. 잔류물을 칼럼 크로마토그래피 (SiO2, DCM/MeOH=1/0에서 10:1)에 의해 정제하여 중간체 137 (1.40 g, 3.19 mmol, 74.95% 수율)을 오일로서 수득하였다.
중간체 138: N-[[(2R,3R,4S)-3-(4-브로모페닐)-4-[[tert-부틸(디메틸)실릴]옥시메틸]-1-(1-메틸알릴)아제티딘-2-일]메틸]-2-니트로-벤젠술폰아미드.
THF (55.00 mL) 중 중간체 138 (1.36 g, 3.09 mmol, 1.00 당량)의 용액에 0℃에서 TEA (9.91 g, 97.95 mmol, 13.58 mL, 31.70 당량) 및 2-니트로벤젠술포닐 클로라이드 (2.05 g, 9.27 mmol, 3.00 당량)를 첨가하였다. 혼합물을 25℃에서 2시간 동안 교반하였다. LCMS는 반응물 1이 완전히 소비되었음을 나타내고, 목적 MS가 관찰되고, 농축시켜 잔류물을 수득하였다. 잔류물을 칼럼 크로마토그래피 (SiO2, 석유 에테르/에틸 아세테이트 =20/1에서 5:1)에 의해 정제하여 중간체 138 (1.93 g, 조 물질)을 황색 오일로서 수득하였다.
중간체 139: N-알릴-N-[[(2R,3R,4S)-3-(4-브로모페닐)-4-[[tert-부틸(디메틸)실릴]옥시메틸]-1-(1-메틸알릴)아제티딘-2-일]메틸]-2-니트로-벤젠술폰아미드.
DMF (15.00 mL) 중 중간체 138 (1.95 g, 3.12 mmol, 1.00 당량)의 용액에 K2CO3 (647.17 mg, 4.68 mmol, 1.50 당량)을 첨가한 다음, 3-브로모프로프-1-엔 (1.13 g, 9.36 mmol, 808.84 μL, 3.00 당량)을 첨가하였다. 혼합물을 25℃에서 16시간 동안 교반하였다. LCMS는 반응물 138이 완전히 소비되었음을 나타내고, 목적 MS가 관찰되고, 염수 (20 mL x 3)로 세척하고, 에틸 아세테이트 (20 mL x 3)로 추출하고, Na2SO4 상에서 건조시키고, 농축시켜 잔류물을 수득하였다. 잔류물을 칼럼 크로마토그래피 (SiO2, 석유 에테르/에틸 아세테이트 =20/1에서 5:1)에 의해 정제하여 중간체 139 (1.90 g, 2.86 mmol, 91.61% 수율)를 황색 검으로서 수득하였다.
1H NMR (400 MHz, 클로로포름-d) δ =ppm -0.34 - -0.27 (m, 3 H) -0.23 - -0.18 (m, 3 H) 0.70 - 0.75 (m, 9 H) 1.14 (dd, J=16.76, 6.62 Hz, 3 H) 3.11 - 3.42 (m, 5 H) 3.15 - 3.79 (m, 6 H) 4.69 - 4.82 (m, 1 H) 4.93 - 5.04 (m, 1 H) 5.05 - 5.22 (m, 2 H) 5.28 - 5.50 (m, 1 H) 5.67 - 5.81 (m, 1 H) 7.32 (d, J=8.38 Hz, 2 H) 7.43 (dd, J=8.38, 1.32 Hz, 2 H) 7.52 - 7.62 (m, 3 H) 7.62 - 7.70 (m, 1 H).
중간체 140: [(3Z,8R,9R,10S)-9-(4-브로모페닐)-2-메틸-6-(2-니트로페닐)술포닐-1,6-디아자비시클로[6.2.0]데스-3-엔-10-일]메톡시-tert-부틸-디메틸-실란.
DCE (368.00 mL) 중 중간체 139 (1.84 g, 2.77 mmol, 1.00 당량)의 용액에 호베이다-그럽스 촉매 제1 세대 (569.51 mg, 692.50 μmol, 0.25 당량)을 첨가하였다. 혼합물을 90℃에서 16시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 여과하고, 감압 하에 농축시켜 잔류물을 수득하였다. 잔류물을 정제용-TLC (SiO2, 석유 에테르/에틸 아세테이트 = 5:1)에 의해 정제하여 중간체 140 (1.25 g, 1.96 mmol, 70.88% 수율)을 담흑색 고체로서 수득하였다.
중간체 141: [(8R,9R,10S)-9-(4-브로모페닐)-2-메틸-6-(2-니트로페닐)술포닐-1,6-디아자비시클로[6.2.0]데칸-10-일]메톡시-tert-부틸-디메틸-실란.
THF (40.00 mL) 중 중간체 140 (1.00 g, 1.57 mmol, 1.00 당량)의 용액에 TEA (1.43 g, 14.13 mmol, 1.96 mL, 9.00 당량) 및 2-니트로벤젠술포노히드라지드 (1.02 g, 4.71 mmol, 3.00 당량)를 첨가하였다. 혼합물을 40℃에서 오일 조에서 16시간 동안 교반하였다. LCMS는 반응물 140이 완전히 소비되었음을 나타내고, 대부분은 목적 생성물이었다. 반응 혼합물을 NaHCO3(20 mL)의 포화 용액으로 켄칭하고, 에틸 아세테이트 (30 mL x3)로 3회 추출하였다. 합한 유기 추출물을 MgSO4 상에서 건조시키고, 여과하고, 감압 하에 농축시켜 조 생성물을 수득하였다. 잔류물을 칼럼 크로마토그래피 (SiO2, 석유 에테르/에틸 아세테이트 =20/1에서 5:1)에 의해 정제하여 중간체 141 (830.00 mg, 1.04 mmol, 66.22% 수율, 80% 순도)을 황색 고체로서 수득하였다.
1H NMR (400 MHz, 클로로포름-d) δ=ppm -0.29 - -0.08 (m, 6 H) 0.75 (d, J=14.05 Hz, 9 H) 1.03 - 1.17 (m, 2 H) 1.36 - 1.48 (m, 1 H) 1.71 - 2.17 (m, 3 H) 2.62 (br. s., 1 H) 2.75 - 2.94 (m, 1 H) 3.00 - 3.29 (m, 2 H) 3.37 - 3.48 (m, 1 H) 3.49 - 3.67 (m, 3 H) 3.69 - 3.87 (m, 2 H) 7.28 - 7.46 (m, 4 H) 7.53 - 7.66 (m, 3 H) 7.78 (d, J=6.02 Hz, 1 H)
중간체 142: [(8R,9R,10S)-9-(4-브로모페닐)-2-메틸-1,6-디아자비시클로[6.2.0]데칸-10-일]메톡시-tert-부틸-디메틸-실란.
CH3CN (8.00 mL) 중 중간체 141 (830.00 mg, 1.30 mmol, 1.00 당량)의 용액에 Cs2CO3 (508.28 mg, 1.56 mmol, 1.20 당량) 및 벤젠티올 (214.77 mg, 1.95 mmol, 198.86 μL, 1.50 당량)을 첨가하였다. 20℃에서 16시간 동안 교반한 후, 반응물을 물 (15 mL)로 희석하고, 에틸 아세테이트 (15 mL x 3)로 추출하고, Na2SO4 상에서 건조시키고, 농축시켜 잔류물을 수득하였다. 잔류물을 정제용-TLC (SiO2, 석유 에테르/에틸 아세테이트 = 5:1)에 의해 정제하여 중간체 142 (580.00 mg, 1.02 mmol, 78.70% 수율, 80% 순도)를 황색 고체로서 수득하였다.
중간체 143: (8R,9R,10S)-9-(4-브로모페닐)-10-[[tert-부틸(디메틸)실릴]옥시메틸]-N-(4-메톡시페닐)-2-메틸-1,6-디아자비시클로[6.2.0]데칸-6-카르복스아미드.
DCM (10.00 mL) 중 중간체 142 (550.00 mg, 1.21 mmol, 1.00 당량)의 용액에 0℃에서 TEA (61.36 mg, 606.35 μmol, 84.05 μL, 0.50 당량) 및 1-이소시아네이토-4-메톡시-벤젠 (180.88 mg, 1.21 mmol, 155.93 μL, 1.00 당량)을 첨가하였다. 20℃에서 3시간 동안 교반한 후, 반응물을 물 (10 mL)로 희석하고, DCM (20 mL x 3)으로 추출하고, Na2SO4 상에서 건조시키고, 농축시켜 잔류물을 수득하였다. 잔류물을 칼럼 크로마토그래피 (SiO2, 석유 에테르/에틸 아세테이트 =10/1에서 5:1)에 의해 정제하여 중간체 143 (700.00 mg, 1.16 mmol, 95.99% 수율)을 황색 고체로서 수득하였다.
중간체 144: (8R,9R,10S)-9-(4-브로모페닐)-10-(히드록시메틸)-N-(4-메톡시페닐)-2-메틸-1,6-디아자비시클로[6.2.0]데칸-6-카르복스아미드.
THF (10.00 mL) 중 중간체 143 (690.00 mg, 1.14 mmol, 1.00 당량)의 용액에 TBAF (596.13 mg, 2.28 mmol, 2.00 당량)를 첨가하였다. 혼합물을 50℃에서 16시간 동안 교반하였다. TLC는 반응물 1이 완전히 소비되었음을 나타내고, 목적 생성물이 관찰되고, 물 (10 mL x3)로 세척하고, 에틸 아세테이트 (20 mL x 3)로 추출하고, Na2SO4 상에서 건조시키고, 농축시켜 잔류물을 수득하였다. 잔류물을 칼럼 크로마토그래피 (SiO2, DCM/MeOH=1/0에서 20:1)에 의해 정제하여 중간체 144 (440.00 mg, 900.86 μmol, 79.02% 수율)를 황색 고체로서 수득하였다.
1H NMR (400 MHz, 클로로포름-d) δ= ppm 1.09 (d, J=6.53 Hz, 3 H) 1.40 (d, J=16.56 Hz, 1 H) 1.77 - 1.99 (m, 2 H) 2.72 - 2.90 (m, 2 H) 3.51 (d, J=6.02 Hz, 1 H) 3.57 - 3.69 (m, 4 H) 3.71 - 3.80 (m, 4 H) 3.81 - 3.94 (m, 2 H) 6.02 - 6.08 (m, 1 H) 6.79 - 6.87 (m, 2 H) 7.24 (d, J=9.03 Hz, 2 H) 7.36 - 7.43 (m, 2 H) 7.43 - 7.49 (m, 2 H)
중간체 145: (8R,9S,10S)-9-(4-브로모페닐)-10-[(1,3-디옥소-3a,7a-디히드로이소인돌-2-일)메틸]-N-(4-메톡시페닐)-2-메틸-1,6-디아자비시클로[6.2.0]데칸-6-카르복스아미드.
THF (18.00 mL) 중 중간체 144 (420.00 mg, 859.92 μmol, 1.00 당량)의 용액에 0℃에서 이소인돌린-1,3-디온 (189.78 mg, 1.29 mmol, 1.50 당량), PPh3 (451.09 mg, 1.72 mmol, 2.00 당량) 및 DIAD (347.77 mg, 1.72 mmol, 334.39 μL, 2.00 당량)를 첨가하였다. 혼합물을 25℃에서 16시간 동안 교반하였다. LCMS는 반응물 145가 완전히 소비되었음을 나타내고, 대부분은 목적 생성물이고, 물 (10 mL)로 세척하고, 에틸 아세테이트 (10 mL x 3)로 추출하고, Na2SO4 상에서 건조시키고, 농축시켜 잔류물을 수득하였다. 잔류물을 칼럼 크로마토그래피 (SiO2, 석유 에테르/에틸 아세테이트 =5/1에서 1:1)에 의해 정제하여 중간체 145 (800.00 mg, 645.63 μmol, 75.08% 수율, 50% 순도)를 갈색 검으로서 수득하였다.
중간체 146: (8R,9S,10S)-10-(아미노메틸)-9-(4-브로모페닐)-N-(4-메톡시페닐)-2-메틸-1,6-디아자비시클로[6.2.0]데칸-6-카르복스아미드.
EtOH (14.00 mL) 중 중간체 145 (750.00 mg, 605.28 μmol, 1.00 당량)의 용액에 NH2NH2.H2O (30.30 mg, 605.28 μmol, 29.42 μL, 1.00 당량)을 첨가하였다. 혼합물을 80℃에서 2시간 동안 교반하였다. LCMS는 중간체 145가 완전히 소비되었음을 나타내고, 대부분은 목적 생성물 (중간체 146)이고, 물 (40 mL)로 세척하고, 에틸 아세테이트 (30 mL x 3)로 추출하고, Na2SO4 상에서 건조시키고, 농축시켜 잔류물을 수득하였다. 잔류물을 칼럼 크로마토그래피 (SiO2, DCM/MEOH=0/1에서 10:1)에 의해 정제하여 (10S,10aR)-9-아미노-10-(4-브로모페닐)-N-(4-메톡시페닐)-6-메틸옥타히드로피롤로[1,2-a][1,4]디아조신-2(1H)-카르복스아미드 ("R146") (190 mg)를 황색 혼합물 고체로서 (1H NMR (400 MHz, 클로로포름-d) δ=ppm 0.97 (d, J=6.02 Hz, 1 H) 1.14 (d, J=8.03 Hz, 2 H) 1.25 - 1.48 (m, 2 H) 1.87 - 2.09 (m, 2 H) 2.72 - 2.84 (m, 1 H) 3.01 (d, J=10.04 Hz, 1 H) 3.15 - 3.23 (m, 1 H) 3.28 (d, J=6.02 Hz, 1 H) 3.45 (br. s., 1 H) 3.62 - 4.11 (m, 7 H) 6.82 (d, J=10.04 Hz, 2 H) 7.18 - 7.25 (m, 2 H) 7.29 (d, J=8.03 Hz, 2 H) 7.49 (d, J=8.03 Hz, 2 H)), 그리고 중간체 146 (40 mg)을 황색 고체로서 수득하였다 (1H NMR (400 MHz, 클로로포름-d) =ppm 0.99 - 1.16 (m, 3 H) 1.44 (d, J=11.04 Hz, 1 H) 1.87 (br. s., 3 H) 2.66 (br. s., 1 H) 2.80 - 2.91 (m, 1 H) 2.92 - 3.00 (m, 1 H) 3.01 - 3.15 (m, 1 H) 3.38 (br. s., 1 H) 3.59 (d, J=12.55 Hz, 2 H) 3.67 - 3.84 (m, 6 H) 6.14 (s, 1 H) 6.81 (d, J=8.53 Hz, 2 H) 7.20 (d, J=8.53 Hz, 2 H) 7.34 (d, J=8.03 Hz, 2 H) 7.46 (d, J=8.03 Hz, 2)). H).
중간체 147: (8R,9S,10S)-9-(4-브로모페닐)-10-((디메틸아미노)메틸)-N-(4-메톡시페닐)-2-메틸-1,6-디아자비시클로[6.2.0]데칸-6-카르복스아미드
DCM (3.00 mL) 중 화합물 146 (15.00 mg, 21.54 umol, 1.00 당량)의 용액에 HCHO (17.48 mg, 215.42 umol, 16.04 uL, 37% 순도, 10.00 당량) 및 MgSO4 (51.86 mg, 430.83 umol, 20.00 당량)에 이어서 NaBH(OAc)3 (45.66 mg, 215.42 umol, 10.00 당량)을 첨가하였다. 혼합물을 20℃에서 2시간 동안 교반한 후, 생성된 혼합물을 여과하고, 여과물을 농축시켰다. 잔류물을 정제용-TLC (SiO2, 디클로로메탄:메탄올 = 20:1)에 의해 정제하여 화합물 147 (5.00 mg, 7.76 umol, 36.02% 수율, 80% 순도)을 담황색 고체로서 수득하였다.
E34의 합성: (8R,9S,10S)-10-((디메틸아미노)메틸)-N-(4-메톡시페닐)-2-메틸-9-(4-(페닐에티닐)페닐)-1,6-디아자비시클로[6.2.0]데칸-6-카르복스아미드 (E34).
CH3CN (500.00 μL) 중 중간체 147 (5.00 mg, 9.70 μmol, 1.00 당량)의 용액에 에티닐벤젠 (2.97 mg, 29.10 μmol, 3.19 μL, 3.00 당량), Cs2CO3 (12.64 mg, 38.80 μmol, 4.00 당량)을 첨가하고, N2로 3회 탈기한 다음, XPhos Pd G3 (821.04 ug, 0.97 μmol, 0.10 당량 포함)을 첨가하였다. 70℃에서 3시간 동안 교반한 후, 반응물을 물 (3 mL)로 희석하고, 에틸 아세테이트 (5 mL x 3)로 추출하고, Na2SO4 상에서 건조시키고, 농축시켜 잔류물을 수득하였다. 잔류물을 정제용-TLC (SiO2, 석유 에테르/에틸 아세테이트 = 1:1)에 의해 정제하여 화합물 E34 (5.00 mg, 9.32 μmol, 96.04% 수율)를 담황색 고체로서 수득하였다.
1H NMR (400 MHz, 클로로포름-d) δ=ppm 1.16 (d, J=6.17 Hz, 3 H) 1.70 - 1.94 (m, 4 H) 2.01 (br. s., 6 H) 2.42 - 2.66 (m, 3 H) 2.83 - 2.94 (m, 1 H) 3.47 (br. s., 2 H) 3.53 - 3.62 (m, 1 H) 3.65 - 3.82 (m, 6 H) 6.04 (s, 1 H) 6.83 (d, J=8.82 Hz, 2 H) 7.24 (d, J=8.82 Hz, 2 H) 7.33 - 7.39 (m, 3 H) 7.39 - 7.44 (m, 2 H) 7.50 (d, J=7.94 Hz, 2 H) 7.53 - 7.57 (m, 2 H).
실시예 35: (8R,9R,10S)-10-(히드록시메틸)-N-(4-메톡시페닐)-2-메틸-9-[4-(2-페닐에티닐)페닐]-1,6-디아자비시클로[6.2.0]데칸-6-카르복스아미드 ("E35")
Figure pct00049
CH3CN (1.00 mL) 중 중간체 144 (20.00 mg, 40.95 μmol, 1.00 당량)의 용액에 에티닐벤젠 (12.55 mg, 122.85 μmol, 13.49 μL, 3.00 당량), Cs2CO3 (53.37 mg, 163.80 μmol, 4.00 당량), N2로 3회 탈기한 다음, XPhos Pd G3 (3.47 mg, 4.10 μmol, 0.10 당량 포함)을 첨가하였다. 혼합물을 70℃에서 16시간 동안 교반하였다. LCMS는 반응물 144이 완전히 소비되었음을 나타내고, 대부분은 목적 생성물이고, 물 (10 mL)로 세척하고, 에틸 아세테이트 (10 mL x 3)로 추출하고, Na2SO4 상에서 건조시키고, 농축시켜 잔류물을 수득하였다. 잔류물을 정제용 HPLC (칼럼: 워터스 엑스브리지 정제용 OBD C18 150*30 5u; A: 물 (10mM NH4HCO3); B: 아세토니트릴)에 의해 정제하여 화합물 E35 (8.30 mg, 16.29 μmol, 39.77% 수율)를 백색 고체로서 수득하였다.
1H NMR (400 MHz, 클로로포름-d) δ = 1.10 (d, J=6.02 Hz, 3 H) 1.40 (d, J=13.55 Hz, 1 H) 1.76 - 2.01 (m, 3 H) 2.72 - 3.03 (m, 1 H) 2.76 (br. s., 1 H) 3.43 - 3.81 (m, 9 H) 3.82 - 3.96 (m, 2 H) 6.03 - 6.11 (m, 1 H) 6.80 - 6.88 (m, 2 H) 7.24 (d, J=9.03 Hz, 2 H) 7.32 - 7.40 (m, 3 H) 7.48 - 7.56 (m, 6 H).
실시예 36: (3S,4R,8R,9S)-3,4-디히드록시-N-(4-메톡시페닐)-9-[4-(2-페닐에티닐)페닐]-1,6-디아자비시클로[6.2.0]데칸-6-카르복스아미드 ("E36")
Figure pct00050
중간체 150: (R)-2-(알릴아미노)-1-(4-브로모페닐)에탄-1-올
(R)-2-브로모페닐)옥시란 (8.0g, 40.2 mmol)이 들은 플라스크에 알릴아민 (12.03 ml, 161 mmol)을 첨가하였다. 혼합물을 55℃에서 20시간 동안 교반하였다. 그 후, LCMS에 의한 분석은 반응이 완료되었음을 나타내고, 혼합물을 실온으로 냉각시키고, 유기 용매를 감압 하에 증발시켰다. 잔류물로 헥산을 첨가 시, 백색 고체를 형성하고, 여과하고, 고진공 하에 2시간 동안 건조시켜 목적 생성물 (R)-2-(알릴아미노)-1-(4-브로모페닐)에탄-1-올 (9.66 g, 37.7 mmol, 94% 수율)을 백색 고체로서 수득하였다. 반응물을 후속 단계에 추가 정제 없이 사용하였다.
1H NMR (300 MHz, CDCl3) δ 7.53 - 7.36 (m, 2H), 7.29 - 7.13 (m, 2H), 5.96 - 5.72 (m, 1H), 5.28 - 5.02 (m, 2H), 4.67 (dd, J = 9.0, 3.6 Hz, 1H), 3.41 - 3.18 (m, 2H), 2.87 (dd, J = 12.2, 3.6 Hz, 1H), 2.66 (dd, J = 12.2, 8.9 Hz, 1H).
중간체 151: (R)-2-(알릴(2-(4-브로모페닐)-2-히드록시에틸)아미노)아세토니트릴
실온에서 무수 아세토니트릴 (60 ml) 중 (R)-2-(알릴아미노)-1-(4-브로모페닐)에탄-1-올 (9.66 g, 37.7 mmol)의 용액에 K2CO3 (7.82 g, 56.6 mmol) 및 2-브로모아세토니트릴 (7.88 ml, 113 mmol)을 첨가하였다. 불균질 혼합물을 질소 분위기 하에 85℃에서 18시간 동안 교반하였다. 그 후, LCMS에 의한 분석은 반응이 완료되었음을 나타내고, 혼합물을 실온으로 냉각시켰다. 유기 용매를 감압 하에 증발시키고, 물 (50 ml)로 희석시키고, 에틸 아세테이트로 추출하였다. 합한 유기 성분을 Na2SO4 상에서 건조시키고, 여과하고, 감압 하에 농축시켰다. 잔류물을 칼럼 크로마토그래피 (SiO2, 에틸 아세테이트/헥산=20-30%)에 의해 정제하여 (R)-2-(알릴(2-(4-브로모페닐)-2-히드록시에틸)아미노)아세토니트릴 (9 g, 30.5 mmol, 81% 수율)을 연황색 고체로서 수득하였다.
1H NMR (300 MHz, CDCl3) δ 7.54-7.40 (m, 2H), 7.31-7.16 (m, 2H), 5.91-5.66 (m, 1H), 5.43-5.22 (m, 2H), 4.78-4.65 (m, 1H), 3.79-3.54 (m, 2H), 3.45-3.30 (m, 1H), 3.27-3.11 (m, 2H), 2.86 - 2.74 (m, 1H), 2.68 - 2.54 (m, 1H).
중간체 152: (R)-2-(알릴(2-(4-브로모페닐)-2-클로로에틸)아미노)아세토니트릴
0℃에서 무수 DMF (100 ml) 중 피리딘 (12.1 ml, 151 mmol)의 용액에 티오닐 클로라이드 (4.38 ml, 60.3 mmol)를 적가하였다. 혼합물을 0℃에서 15분 동안 교반하였다. 이 용액에 DCM (10 ml) 중 (R)-2-(알릴(2-(4-브로모페닐)-2-히드록시에틸)아미노)아세토니트릴 (8.9 g, 30.2 mmol)을 5분에 걸쳐 첨가하였다. 이 혼합물을 0℃에서 30분 동안 교반하고, 이 때 TLC 분석은 반응이 완료되었음을 나타냈다. 반응 혼합물에 포화 수성 NaHCO3을 첨가하고, 생성된 용액을 10분 동안 격렬히 교반한 후, 분리 깔때기로 옮겼다. 층을 분리하고, 수성 상을 DCM으로 추출하고, 합한 유기 추출물을 염수로 세척하고, MgSO4로 건조시키고, 여과하고, 감압 하에 농축시켜 조 생성물을 수득하였다. 잔류물을 칼럼 크로마토그래피 (SiO2, 에틸 아세테이트/헥산 = 0-20%)에 의해 정제하여 목적 중간체 (5.00 g, 9.87 mmol, 92% 수율)를 갈색 고체로서 수득하였다.
1H NMR (300 MHz, CDCl3) δ ppm 7.57 - 7.42 (m, 2H), 7.32 - 7.23 (m, 2H), 5.84 - 5.58 (m, 1H), 5.37 - 5.14 (m, 2H), 4.91 - 4.71 (m, 1H), 3.65 - 3.38 (m, 2H), 3.26 - 2.94 (m, 4H).
중간체 153: (2R,3S)-1-알릴-3-(4-브로모페닐)아제티딘-2-카르보니트릴
100 ml 둥근 바닥 플라스크에 (R)-2-(알릴(2-(4-브로모페닐)-2-클로로에틸)아미노)아세토니트릴 (0.55 g, 1.754 mmol) 및 무수 THF (10 ml)를 채워 연황색 용액을 수득하였다. 플라스크를 드라이 아이스/아세톤 조에 완전히 잠수시키고, -50℃로 냉각시켰다. LiHMDS (1M, THF 용액)를 이 냉각 용액에 적가하였다. 첨가가 완료된 후, 반응물을 -50℃에서 1시간 동안 교반하였다. LCMS 및 TLC 분석 (헥산 중 20% EtOAc, KMnO4 염색)은 출발 물질의 완전한 소멸을 나타내었다. 반응 혼합물을 포화 수성 NH4Cl로 처리하고, 생성된 용액을 10분 동안 격렬히 교반한 다음, 분리 깔때기로 옮겼다. 층을 분리하고, 수성 상을 EtOAc로 추출하고, 합한 유기 추출물을 염수로 세척하고, MgSO4로 건조시키고, 여과하고, 감압 하에 농축시켜 조 생성물을 수득하였다. 잔류물을 칼럼 크로마토그래피 (SiO2, 에틸 아세테이트/헥산 = 0-20%)에 의해 정제하여 분획의 2개의 주요 세트를 수득하였다. 분획의 제1 세트 (0.16g, 0.577 mmol, 33% 수율)는 부산물인 (2S,3S)-1-알릴-3-(4-브로모페닐)아제티딘-2-카르보니트릴을 수득하였다. 정치 시 응고된 분획의 제2 세트 (0.17g, 0.613 mmol, 35% 수율)는 목적 생성물인 (2R,3S)-1-알릴-3-(4-브로모페닐)아제티딘-2-카르보니트릴을 수득하였다.
1H NMR (300 MHz, CDCl3) δ 7.59 - 7.45 (m, 2H), 7.36 - 7.28 (m, 2H), 5.91 - 5.69 (m, 1H), 5.36 - 5.14 (m, 2H), 4.39 - 4.26 (m, 1H), 3.87 - 3.75 (m, 1H), 3.60 - 3.40 (m, 2H), 3.31 - 3.18 (m, 2H).
중간체 154: ((2R,3S)-1-알릴-3-(4-브로모페닐)아제티딘-2-일)메탄아민
교반하면서 0℃로 냉각시킨 DCM (23 ml) 중 (2R,3S)-1-알릴-3-(4-브로모페닐)아제티딘-2-카르보니트릴 (0.62 g, 2.25 mmol)의 용액에 DIBAL-H (2.41 ml, 13.51 mmol)를 천천히 시린지를 통해 첨가하였다. 15분 후, 반응물을 실온으로 45분에 걸쳐 가온되도록 하였다. 그 후, LCMS에 의한 분석은 반응이 완료되었음을 나타내고, 반응을 0℃로 냉각시키고, 메탄올 (1.366 ml, 33.8 mmol)을 천천히 첨가하였다. 이 혼합물에 로쉘 용액 (100 mL)을 천천히 첨가하였다 (관리가 필요함, 발열이었음). 수성 상을 DCM으로 추출하고, 합한 유기 상을 MgSO4 상에서 건조시키고, 감압 하에 농축시켜 (2R,3S)-1-알릴-3-(4-브로모페닐)아제티딘-2-카르보니트릴을 황색 오일로서 수득하였으며, 이를 후속 단계에 정제 없이 사용하였다.
중간체 155: N-(((2R,3S)-1-알릴-3-(4-브로모페닐)아제티딘-2-일)메틸)-2-니트로벤젠술폰아미드
0℃로 냉각시킨 DCM (26 ml) 및 중 중간체 154 (1.454 g, 5.171 mmol)의 용액에 2,6-루티딘 (1.797 ml, 15.51 mmol)에 이어서 2-니트로벤젠-1-술포닐 클로라이드 (1.261 g, 5.69 mmol)를 한 번에 첨가하였다. 이어서, 용액을 실온으로 가온되도록 하고, 16시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물에 물을 첨가하고, 수성 층을 DCM으로 추출하였다. 합한 유기 추출물을 MgSO4 상에서 건조시키고, 여과하고, 감압 하에 농축시켜 조 생성물을 수득하였다. 잔류물을 칼럼 크로마토그래피 (SiO2, 에틸 아세테이트/헥산 = 0-20%)에 의해 정제하여 중간체 155 (2.4 g, 100% 수율)를 수득하였다.
중간체 156: N-알릴-N-[[(2R,3S)-1-알릴-3-(4-브로모페닐)아제티딘-2-일]메틸]-2-니트로-벤젠술폰아미드.
DMF (10.00 mL) 중 중간체 155 (5.00 g, 10.72 mmol, 1.00 당량)의 용액에 K2CO3 (2.22 g, 16.08 mmol, 1.50 당량) 및 3-브로모프로프-1-엔 (1.95 g, 16.08 mmol, 1.39 mL, 1.50 당량)을 첨가하였다. 혼합물을 25℃에서 16시간 동안 교반하였다. LCMS는 반응물 156이 완전히 소비되었음을 나타내고, 대부분으 목적 생성물이고, 반응 혼합물을 물 (100 mL) 중에 용해시키고, DCM (20 mL x 3)으로 추출하고, 유기 층을 Na2SO4 상에서 건조시킨 다음, 농축시켜 잔류물을 수득하였다. 잔류물을 칼럼 크로마토그래피 (SiO2, 석유 에테르/에틸 아세테이트 =10/1에서 5:1)에 의해 정제하여 중간체 156 (5.00 g, 9.87 mmol, 92.10% 수율)을 갈색 고체로서 수득하였다.
1H NMR (400 MHz, 클로로포름-d) δ ppm 2.53 (s, 1 H) 2.90 (dd, J=13.80, 6.65 Hz, 1 H) 2.94 - 3.11 (m, 2 H) 3.18 - 3.26 (m, 1 H) 3.33 (dd, J=7.34, 2.20 Hz, 1 H) 3.41 (dd, J=13.80, 5.14 Hz, 1 H) 3.47 - 3.63 (m, 2 H) 3.65 - 3.75 (m, 1 H) 3.88 (dd, J=16.00, 5.96 Hz, 1 H) 4.95 (dd, J=17.07, 1.13 Hz, 1 H) 5.03 - 5.14 (m, 2 H) 5.21 (dd, J=17.19, 1.51 Hz, 1 H) 5.48 (ddt, J=16.89, 10.43, 6.23, 6.23 Hz, 1 H) 5.64 - 5.87 (m, 1 H) 7.35 - 7.40 (m, 2 H) 7.42 - 7.49 (m, 2 H) 7.55 - 7.62 (m, 2 H) 7.64 - 7.72 (m, 2 H)
중간체 157: (3Z,8R,9S)-9-(4-브로모페닐)-6-(2-니트로페닐)술포닐-1,6-디아자비시클로[6.2.0]데스-3-엔.
톨루엔 (500.00 mL) 중 중간체 156 (5.00 g, 9.87 mmol, 1.00 당량)의 용액에 N2 분위기 하에 호베이다-그럽스 촉매 제1 세대 (812 mg)를 첨가하였다. 혼합물을 60℃에서 오일 조에서 16시간 동안 교반하였다. 추가의 호베이다-그럽스 촉매 제1 세대 (1218 mg)를 첨가하고, 16시간 초과로 교반하였다. 반응 혼합물을 농축시켜 잔류물을 수득하였다. 잔류물을 칼럼 크로마토그래피 (SiO2, 석유 에테르/에틸 아세테이트 =5/1에서 0:1)에 의해 정제하여 중간체 157 (1.20 g, 1.25 mmol, 12.71% 수율, 50% 순도)을 흑색 고체로서 회수된 SM (2.2 g)과 함께 수득하였다.
1H NMR (400 MHz, 클로로포름-d) δ ppm 2.62 (br s, 1 H) 3.15 - 3.31 (m, 2 H) 3.38 (br s, 1 H) 3.52 (br d, J=16.98 Hz, 1 H) 3.60 - 3.79 (m, 3 H) 3.82 - 3.95 (m, 1 H) 4.03 (br dd, J=14.33, 6.62 Hz, 1 H) 5.58 - 5.67 (m, 1 H) 5.68 - 5.81 (m, 1 H) 7.30 (br d, J=7.94 Hz, 2 H) 7.45 (br d, J=8.16 Hz, 2 H) 7.56 (br d, J=7.28 Hz, 1 H) 7.61 - 7.67 (m, 2 H) 7.83 (br d, J=7.50 Hz, 1 H).
중간체 158: (3Z,8R,9S)-9-(4-브로모페닐)-1,6-디아자비시클로[6.2.0]데스-3-엔.
CH3CN (17.00 mL) 중 중간체 157 (1.70 g, 1.78 mmol, 1.00 당량)의 용액에 벤젠티올 (293.67 mg, 2.67 mmol, 271.92 μL, 1.50 당량) 및 Cs2CO3 (694.74 mg, 2.13 mmol, 1.20 당량)을 첨가하였다. 40℃에서 16시간 동안 교반한 후, 반응 혼합물을 물 (100 mL) 중에 용해시키고, DCM (30 mL x 3)으로 추출하고, 유기 층을 Na2SO4 상에서 건조시킨 다음, 농축시켜 잔류물을 수득하였다. 잔류물을 칼럼 크로마토그래피 (SiO2, 석유 에테르/에틸 아세테이트 =1/1 내지 디클로로메탄: 메탄올=10:1)에 의해 정제하여 중간체 158 (650.00 mg, 1.55 mmol, 87.18% 수율, 70% 순도)을 흑색 오일로서 수득하였다.
1H NMR (400 MHz, 클로로포름-d) δ ppm 2.42 - 2.50 (m, 1 H) 2.52 - 2.61 (m, 1 H) 2.77 - 3.10 (m, 3 H) 3.22 (br dd, J=16.22, 4.38 Hz, 1 H) 3.36 - 3.50 (m, 3 H) 3.53 - 3.69 (m, 3 H) 3.77 (br t, J=8.99 Hz, 1 H) 5.67 - 5.86 (m, 2 H) 7.21 - 7.28 (m, 2 H) 7.44 (d, J=8.33 Hz, 2 H).
중간체 159: (3Z,8R,9S)-9-(4-브로모페닐)-N-(4-메톡시페닐)-1,6-디아자비시클로[6.2.0]데스-3-엔-6-카르복스아미드.
DCM (10.00 mL) 중 중간체 158 (650.00 mg, 1.55 mmol, 1.00 당량)의 용액에 TEA (78.52 mg, 775.92 μmol, 107.56 μL, 0.50 당량)를 첨가한 다음, 1-이소시아네이토-4-메톡시-벤젠 (277.75 mg, 1.86 mmol, 239.44 μL, 1.20 당량)을 N2 분위기 하에 20℃에서 첨가하였다. 혼합물을 20℃에서 1시간 동안 교반하였다. LCMS는 반응물 158이 완전히 소비되었음을 나타내고, 대부분은 목적 생성물이고, 반응 혼합물을 물 (10 mL) 중에 용해시키고, DCM (5 mL x 3)으로 추출하고, 유기 층을 Na2SO4 상에서 건조시킨 다음, 농축시켜 잔류물을 수득하였다. 잔류물을 칼럼 크로마토그래피 (SiO2, 석유 에테르/에틸 아세테이트 =5/1에서 1:1)에 의해 정제하여 중간체 159 (560.00 mg, 1.27 mmol, 81.84% 수율)을 백색 고체로서 수득하였다.
1H NMR (400 MHz, 클로로포름-d) δ ppm 2.37 - 2.56 (m, 1 H) 3.24 - 3.33 (m, 1 H) 3.34 - 3.41 (m, 1 H) 3.42 - 3.53 (m, 1 H) 3.54 - 3.64 (m, 2 H) 3.68 - 3.74 (m, 2 H) 3.77 (s, 3 H) 3.86 (br dd, J=15.88, 7.28 Hz, 1 H) 4.17 (br d, J=15.44 Hz, 1 H) 5.64 (br d, J=11.69 Hz, 1 H) 5.74 - 5.91 (m, 1 H) 6.06 (s, 1 H) 6.82 (d, J=8.82 Hz, 2 H) 7.22 (d, J=9.04 Hz, 2 H) 7.34 (d, J=8.16 Hz, 2 H) 7.48 (d, J=8.38 Hz, 2 H).
중간체 160a 및 160b: (3S,4R,8R,9S)-9-(4-브로모페닐)-3,4-디히드록시-N-(4-메톡시페닐)-1,6-디아자비시클로[6.2.0]데칸-6-카르복스아미드 (160a); (3R,4S,8R,9S)-9-(4-브로모페닐)-3,4-디히드록시-N-(4-메톡시페닐)-1,6-디아자비시클로[6.2.0]데칸-6-카르복스아미드 (160b).
아세톤 (5.00 mL) 및 H2O (500.00 μL) 중 중간체 159 (500.00 mg, 1.13 mmol, 1.00 당량)의 용액에 -78℃에서 NMO (198.63 mg, 1.69 mmol, 178.95 μL, 1.50 당량) 및 OsO4 (2.87 mg, 11.30 μmol, 0.59 μL, 0.01 당량)를 첨가하였다. 이어서, 생성된 반응 혼합물을 20℃에서 0.5시간 동안 교반되도록 하였다. TLC는 반응물이 완전히 소비되었음을 나타내고, 2종의 목적 생성물이 관찰되고, 반응 혼합물을 농축시켜 잔류물을 수득하였다. 잔류물을 정제용-TLC (SiO2, 석유 에테르/에틸 아세테이트)에 의해 정제하였다. 중간체 160a (100.00 mg, 209.93 μmol, 61.92% 수율)를 백색 고체로서 (1H NMR (400 MHz, 클로로포름-d) δ ppm 2.17 - 2.37 (m, 1 H) 2.63 (br d, J=13.16 Hz, 1 H) 2.90 (br dd, J=13.37, 8.55 Hz, 1 H) 3.23 (br d, J=15.79 Hz, 1 H) 3.39 - 3.45 (m, 1 H) 3.46 - 3.52 (m, 2 H) 3.58 (br d, J=5.26 Hz, 2 H) 3.73 - 3.83 (m, 5 H) 3.95 (br s, 1 H) 4.11 (br dd, J=15.57, 5.04 Hz, 1 H) 4.25 (br s, 1 H) 6.81 (d, J=8.77 Hz, 2 H) 7.16 (d, J=8.77 Hz, 2 H) 7.32 (d, J=8.33 Hz, 2 H) 7.44 (d, J=8.33 Hz, 2 H) 7.92 (br s, 1 H)), 그리고 중간체 160b (275.00 mg, 577.29 μmol, 72.98% 수율)를 백색 고체로서 수득하였다 (1H NMR (400 MHz, 클로로포름-d) δ ppm 2.27 (br s, 1 H) 2.79 (br d, J=14.03 Hz, 1 H) 2.93 - 3.05 (m, 1 H) 3.27 - 3.52 (m, 1 H) 3.45 - 3.52 (m, 3 H) 3.54 - 3.70 (m, 5 H) 3.73 - 3.82 (m, 4 H) 6.79 (d, J=9.21 Hz, 2 H) 7.21 (d, J=8.77 Hz, 2 H) 7.25 - 7.30 (m, 1 H) 7.27 (d, J=6.82 Hz, 1 H) 7.28 - 7.31 (m, 1 H) 7.47 (d, J=8.33 Hz, 2 H)).
E36의 합성: (3S,4R,8R,9S)-3,4-디히드록시-N-(4-메톡시페닐)-9-[4-(2-페닐에티닐)페닐]-1,6-디아자비시클로[6.2.0]데칸-6-카르복스아미드 (E36).
CH3CN (150.00 μL) 중 중간체 160a (10.00 mg, 20.99 μmol, 1.00 당량), 에티닐벤젠 (6.43 mg, 62.97 μmol, 6.91 μL, 3.00 당량)의 용액에 N2 분위기 하에 Cs2CO3 (27.36 mg, 83.96 μmol, 4.00 당량) 및 Xphos Pd G3 (1.78 mg, 2.10 μmol, 0.10 당량)을 첨가하였다. 혼합물을 70℃에서 1시간 동안 교반하였다. LCMS는 반응물 1이 완전히 소비되었음을 나타내고, 대부분은 목적 생성물이었다. 반응 혼합물을 여과하고, 필터 케이크를 DCM (10 mL)으로 세척하고, 여과물을 농축시켜 잔류물을 수득하였다. 잔류물을 정제용-TLC (SiO2, 석유 에테르/에틸 아세테이트 = 1:1)에 의해 정제한 다음, 추가로 정제용 HPLC (칼럼: 워터스 엑스브리지 정제용 OBD C18 150*30 5u; A: 물 (0.225% 포름산) B: 아세토니트릴)에 의해 정제하여 화합물 E36 (4.00 mg, 8.04 μmol, 38.30% 수율)을 백색 고체로서 수득하였다.
1H NMR (400 MHz, 클로로포름-d) δ ppm 2.31 - 2.44 (m, 1 H) 2.73 (br d, J=13.45 Hz, 1 H) 2.92 - 2.99 (m, 1 H) 3.33 (br d, J=15.66 Hz, 1 H) 3.57 (br t, J=7.39 Hz, 2 H) 3.70 (br d, J=4.63 Hz, 1 H) 3.75 - 3.85 (m, 4 H) 3.87 - 3.94 (m, 1 H) 4.00 (br s, 1 H) 4.16 (br d, J=16.32 Hz, 1 H) 6.83 (br d, J=8.82 Hz, 2 H) 7.21 (br d, J=8.82 Hz, 2 H) 7.35 (br s, 3 H) 7.44 (br d, J=7.94 Hz, 2 H) 7.49 - 7.59 (m, 4 H) 7.82 (br s, 1 H).
실시예 37: (3R,4S,8R,9S)-3,4-디히드록시-N-(4-메톡시페닐)-9-[4-(2-페닐에티닐)페닐]-1,6-디아자비시클로[6.2.0]데칸-6-카르복스아미드 ("E37").
Figure pct00051
CH3CN (150.00 μL) 중 중간체 160b (10.00 mg, 20.99 μmol, 1.00 당량), 에티닐벤젠 (6.43 mg, 62.98 μmol, 6.92 μL, 3.00 당량)의 교반 용액에 N2 분위기 하에 Cs2CO3 (27.36 mg, 83.97 μmol, 4.00 당량) 및 Xphos Pd G3 (1.78 mg, 2.10 μmol, 0.10 당량)을 첨가하였다. 혼합물을 70℃에서 1시간 동안 교반하였다. LCMS는 반응물 160b가 완전히 소비되었음을 나타내고, 대부분은 목적 생성물이었다. 반응 혼합물을 여과하고, 필터 케이크를 DCM (5 mL)으로 세척하고, 여과물을 농축시켜 잔류물을 수득하였다. 잔류물을 정제용-TLC (SiO2, 석유 에테르/에틸 아세테이트 = 1:1)에 의해 정제한 다음, 추가로 정제용 HPLC (칼럼: 워터스 엑스브리지 정제용 OBD C18 150*30 5u; A: 물 (0.225% 포름산) B: 아세토니트릴)에 의해 정제하여 화합물 E37 (5.00 mg, 10.05 μmol, 47.87% 수율)을 백색 고체로서 수득하였다.
1H NMR (400 MHz, 클로로포름-d) δ ppm 2.32 (br s, 1 H) 2.60 (br s, 2 H) 2.87 (br d, J=14.11 Hz, 1 H) 3.06 (dd, J=14.00, 6.95 Hz, 1 H) 3.29 - 3.48 (m, 2 H) 3.57 - 3.65 (m, 2 H) 3.71 (br d, J=5.51 Hz, 4 H) 3.77 (s, 3 H) 3.80 - 3.84 (m, 1 H) 6.66 (br s, 1 H) 6.82 (d, J=8.82 Hz, 2 H) 7.20 - 7.26 (m, 2 H) 7.27 (s, 1 H) 7.33 - 7.43 (m, 5 H) 7.49 - 7.57 (m, 4 H).
실시예 38: (3R,4S,8R,9S,10S)-N-(4-시클로프로폭시페닐)-10-((디메틸아미노)메틸)-3,4-디히드록시-9-(4-(페닐에티닐)페닐)-1,6-디아자비시클로[6.2.0]데칸-6-카르복스아미드 (E38)
화합물 E38의 합성을 중간체 4a 대신에 중간체 4b가 사용된 화합물 E1의 합성과 달리 동일한 합성 경로에서 수행하였다. 이어서, 상기 기재된 바와 같은 동일한 반응 단계가 뒤따랐다.
생물학적 활성의 측정
실시예 39: 시험관내 피. 팔시파룸(P. falciparum) 혈액-단계 배양 및 검정.
피. 팔시파룸(P. falciparum)의 균주 (Dd2, 3D7, D6, K1, NF54, V1/3, HB3, 7G8, FCB 및 TM90C2B)를 말라리아 리서치 앤드 레퍼런스 리에이전트 리소스 센터(Malaria Research and Reference Reagent Resource Center) (MR4)로부터 입수하였다. 완전 배양 배지 (10.4 g/L RPMI 1640, 5.94 g/L HEPES, 5 g/L 알부맥스 II, 50 mg/L 하이포크산틴, 2.1 g/L 중탄산나트륨, 10% 인간 혈청 및 43 mg/L 겐타마이신) 중에서 37℃에서, 피. 팔시파룸(P. falciparum) 분리주를 O-양성 인간 혈액과 함께 93% N2, 4% CO2, 3% O2의 분위기에서 유지시켰다. 기생충을 기생충혈증이 3-8%에 도달할 때까지 배지에서 배양하였다. 김사-염색된 혈액 도말표본으로부터 적어도 500개의 적혈구를 체크함으로써 기생충혈증을 결정하였다. 화합물 스크리닝을 위해, 2.0% 기생충혈증 및 2.0% 적혈구용적률에서의 기생충 희석물을 배지로 생성하였다. 배지 25 μl를 384-웰 흑색, 투명 바닥 플레이트에 분배하고, DMSO 중 각각의 화합물 100 nl를 검정 플레이트에 대조군 화합물 (메플로퀸)과 함께 옮겼다. 다음으로, 배지 중 기생충 현탁액 25 μl를 검정 플레이트에 분배하여 1%의 최종 기생충혈증 및 1%의 최종 적혈구용적률을 수득하였다. 검정 플레이트를 37℃에서 72시간 동안 인큐베이션하였다. 용해 완충제 (20 mM 트리스-HCl, 5 mM EDTA, 0.16% (w/v) 사포닌, 1.6% (v/v) 트리톤 X-100) 중 10× SYBR 그린 I (인비트로젠; 10,000× 농도로 공급됨)로 이루어진 10 μl의 검출 시약을 검정 플레이트에 분배하였다. 최적 염색을 위해, 검정 플레이트를 암실에서 실온에서 24시간 동안 두었다. 검정 플레이트를 엔비전(Envision) (퍼킨엘머(PerkinElmer))에서 485 nm 여기 및 530 nm 방출 설정으로 505개의 이색성 거울을 사용하여 판독하였다.
상기 기재된 프로토콜에 따라, 화합물 E1-E38에 대한 50% 유효 농도 (EC50)를 피. 팔시파룸(P. falciparum) Dd2에 대해 측정하였고, 결과를 하기 표 4에 50 nM 미만의 EC50에 대해서는 +++, 50 nM 내지 250 nM의 EC50에 대해서는 ++ 및 >250 nM의 EC50에 대해서는 +로 나타내었다.
표 4
Figure pct00052
실시예 40: 시험관내 피. 베르게이(P. berghei) 간-단계 검정.
HepG2 세포 (ATCC)를 표준 조직 배양 인큐베이터 (37℃, 5% CO2)에서 DMEM, 10% (v/v) FBS (시그마) 및 1% (v/v) 항생제-항진균제 중에서 유지시켰다. 피. 베르게이(P. berghei) (ANKA GFP-luc) 감염된 에이. 스테펜시(A. stephensi) 모기를 뉴욕 대학교 랑곤 메디칼 센터 곤충실험실로부터 입수하였다. 검정을 위해, 웰당 ~17,500개의 HepG2 세포를 384-웰 마이크로타이터 플레이트에 이중으로 첨가하였다. 37℃에서 18-24시간 후, 배지를 교환하고, 화합물을 첨가하였다. 1시간 후, 새로 절제된 모기로부터 수득된 기생충을 플레이트에 첨가하고 (웰당 4,000개의 기생충), 플레이트를 10분 동안 1,000 r.p.m.으로 회전시킨 다음, 37℃에서 인큐베이션하였다. 최종 검정 부피는 30 μl였다. 37℃에서 48시간 인큐베이션 후, 브라이트-글로(Bright-Glo) (프로메가(Promega))를 기생충 플레이트에 첨가하여 상대 발광을 측정하였다. 각각의 플레이트의 상대 신호 강도를 엔비전 (퍼킨엘머) 시스템으로 평가하였다.
실시예 41: 시험관내 피. 팔시파룸(P. falciparum) 간-단계 검정.
마이크로패턴화된 공동-배양 (MPCC)은 콜로니로 조직화되고 지지적 기질 세포에 의해 둘러싸인 1차 인간 간세포의 시험관내 공동-배양 시스템이다. 이러한 포맷으로의 간세포는 주요 간-특이적 기능 및 유전자 발현에 의해 평가되는 바와 같이, 증식 없이 최대 4-6주 동안 기능적 표현형을 유지한다. 간략하게, 96-웰 플레이트를 래트-꼬리 유형 I 콜라겐 (50 μg/mL)으로 균질하게 코팅하고, 콜라겐을 선택적 간세포 부착을 매개하는 500-μm-섬 마이크로도메인으로 패턴화하기 위해 소프트-리소그래피 기술에 적용하였다. MPCC를 생성하기 위해, 냉동보존된 1차 인간 간세포 (바이오리클레메이션IVT(BioreclamationIVT))를 4℃에서 100g에서 6분 동안 원심분리에 의해 펠릿화하고, 트리판 블루 배제 (전형적으로 70-90%)를 사용하여 생존율에 대해 평가하고, 1% 페니실린-스트렙토마이신을 함유하는 무혈청 DMEM 중에서 마이크로패턴화된 콜라겐 플레이트 상에 시딩하였다 (각 웰은 500 μM의 콜로니로 조직화된 ~10,000개의 간세포를 함유함). 세포를 2-3시간 후에 1% 페니실린-스트렙토마이신을 함유하는 무혈청 DMEM으로 세척하고, 인간 간세포 배양 배지48로 교체하였다. 간세포 시딩 24시간 후에 3T3-J2 마우스 배아 섬유모세포를 시딩하였다 (웰당 7,000개 세포).
간세포를 시딩하고 1일 후에 MPCC를 75,000개의 포자소체 (NF54) (존스 홉킨스 대학교)로 감염시켰다. 37℃ 및 5% CO2에서 3시간 동안 인큐베이션한 후, 웰을 PBS로 1회 세척하고, 각각의 화합물을 첨가하였다. 배양물을 매일 투여하였다. 감염 후 제3.5일에 샘플을 고정시켰다. 면역형광 염색을 위해, MPCC를 4℃에서 10분 동안 -20℃ 메탄올로 고정시키고, PBS로 2회 세척하고, PBS 중 2% BSA로 차단하고, 마우스 항-피. 팔시파룸(P. falciparum) Hsp70 항체 (클론 4C9, 2 μg/mL)와 함께 1시간 동안 실온에서 인큐베이션하였다. 샘플을 PBS로 세척한 다음, 알렉사 488-접합된 2차 염소 항-마우스와 함께 1시간 동안 실온에서 인큐베이션하였다. 샘플을 PBS로 세척하고, DNA 염료 훽스트 33258 (인비트로젠; 1:1,000)로 대조염색하고, 플루오로마운트 G (서던 바이오테크(Southern Biotech))를 사용하여 유리 슬라이드 상에 탑재하였다. 니콘 이클립스(Nikon Eclipse) Ti 형광 현미경 상에서 이미지를 캡처하였다. 발생 간 단계 기생충의 직경을 측정하고, 상응하는 면적을 계산하는 데 사용하였다.
실시예 42: 피. 팔시파룸(P. falciparum) 세포질 PheRS 생화학적 검정.
세포질 피. 팔시파룸(P. falciparum) PheRS의 α-(PF3D7_0109800) 및 β-(PF3D7_1104000) 서브유닛 둘 다의 단백질 서열을 PlasmoDB (http://plasmodb.org/ plasmo/)로부터 입수하였다. 이. 콜라이(E. coli)에서의 발현을 위해 최적화된 전장 α- 및 β-서브유닛 유전자 서열을 Nco1 및 Kpn1 부위를 사용하여 pETM11 (카나마이신 내성) 및 pETM20 (암피실린 내성) 발현 벡터 내로 클로닝하고, 이. 콜라이 B834 세포 내로 공동-형질전환시켰다. 0.5 mM 이소프로필 β-d-1-티오갈락토피라노시드 (IPTG)를 첨가하여 단백질 발현을 유도하고, 37℃에서 OD600이 0.6-0.8에 도달할 때까지 세포를 성장시켰다. 이들을 유도 후 20시간 동안 18℃에서 성장되도록 하였다. 세포를 5,000g에서 20분 동안 원심분리에 의해 분리하고, 박테리아 펠릿을 50 mM 트리스-HCl (pH 7.5), 200 mM NaCl, 4 mM β-메르캅토에탄올, 15% (v/v) 글리세롤, 0.1 mg/mL 리소자임 및 1 mM 페닐메틸술포닐 플루오라이드 (PMSF)로 이루어진 완충제 중에 현탁시켰다. 세포를 초음파처리에 의해 용해시키고, 20,000g에서 1시간 동안 원심분리에 의해 정화하였다. 상청액을 예비패킹된 NiNTA 칼럼 (지이 헬스케어(GE Healthcare))에 적용하고, 결합된 단백질을 용리 완충제 (50 mM 트리스-HCl (pH 7.5), 80 mM NaCl, 4 mM β-메르캅토에탄올, 15% (v/v) 글리세롤, 1M 이미다졸)와의 구배-혼합에 의해 용리시켰다. 순수한 분획을 풀링하고, 추가 정제를 위해 헤파린 칼럼 상에 로딩하였다. 다시, 결합된 단백질을 헤파린 용리 완충제 50 mM 트리스-HCl (pH 7.5), 1M NaCl, 4 mM β-메르캅토에탄올, 15% (v/v) 글리세롤의 구배를 사용하여 용리시켰다. 순수한 분획을 다시 풀링하고, 50 mM 트리스-HCl (pH 7.5), 200 mM NaCl, 4 mM β-메르캅토에탄올, 1 mM DTT 및 0.5 mM EDTA를 함유하는 완충제 내로 밤새 투석하였다. TEV 프로테아제 (프로테아제:단백질의 1:50 비)를 단백질 샘플에 첨가하고, 20℃에서 24시간 동안 인큐베이션하여 폴리히스티딘 태그를 제거하였다. 단백질을 50 mM 트리스-HCl (pH 7.5), 200 mM NaCl, 4 mM β-메르캅토에탄올, 1 mM MgCl2 중에서 지이 하이로드(GE HiLoad) 60/600 슈퍼덱스 칼럼 상 겔-여과 크로마토그래피를 통해 추가로 정제하였다. 용리된 단백질 (피. 팔시파룸(P. falciparum) cPheRS의 이종이량체)을 수집하고, SDS-PAGE를 통해 순도를 평가하고, -80℃에서 저장하였다.
피. 팔시파룸(P. falciparum)으로부터의 핵 코딩된 tRNAPhe는 문헌 [Nature 538, 344-349 (20 October 2016) doi:10.1038/nature19804]에 기재된 바와 같은 시험관내 전사 방법을 사용하여 합성하였다. 피. 팔시파룸(P. falciparum) 세포질 PheRS에 대한 아미노아실화 및 효소 억제 검정을 문헌 [Biochem. J. 465, 459-469 (2015)]에 기재된 바와 같이 수행하였다. 효소적 검정을 3℃에서 30 mM HEPES (pH 7.5), 150 mM NaCl, 30 mM KCl, 50 mM MgCl2, 1 mM DTT, 100 μM ATP, 100 μM L-페닐알라닌, 15 μM 피. 팔시파룸(P. falciparum) tRNAPhe, 2 U/mL 이. 콜라이 무기 피로포스파타제 (NEB) 및 500 nM 재조합 피. 팔시파룸(P. falciparum) PheRS를 함유하는 완충제 중에서 수행하였다. 40 mM EDTA를 첨가하고 후속적으로 얼음으로 옮겨 상이한 시점에 반응을 정지시켰다. 재조합 말토스 결합 단백질을 음성 대조군으로서 사용하였다. cPheRS 억제 검정은 검정 완충제 중에서 강한 결합제에 대해 0.01 nM, 0.1 nM, 1 nM, 10 nM, 100 nM, 1 μM, 5 μM 및 10 μM, 및 보다 약한 결합제에 대해 1 nM, 10 nM, 100 nM, 1 μM, 10 μM, 100 μM, 및 500 μM의 억제제 농도를 사용하여 수행하였다. 효소 및 억제 실험을 삼중으로 2회 수행하였다.
실시예 43: 포유동물 세포 세포독성 검정.
포유동물 세포 (HepG2, A549 및 HEK293)를 ATCC로부터 입수하고, 10% FBS 및 1% (v/v) 항생제-항진균제를 함유하는 DMEM 중에서 상용적으로 배양하였다. 세포독성 검정을 위해, 1 × 106개 세포를 화합물 처리 1일 전에 384-웰 플레이트에 시딩하였다. 세포를 상승 용량의 화합물로 72시간 동안 처리하고, 생존율을 셀-타이터 글로 (프로메가)를 사용하여 측정하였다. 모든 세포주를 범용 미코플라스마 검출 키트 (ATCC)를 사용하여 미코플라스마 오염에 대해 시험하였다.
실시예 44: 시험관내 ADME/PK 및 안전성 검정.
시험관내 특징화 검정 (단백질 결합, 마이크로솜 안정성, 간세포 안정성, 시토크롬 P450 (CYP) 억제, 및 수용해도)을 산업-표준 기술에 따라 수행하였다. 이온 채널 억제 연구는 표준 기술을 사용하여 Q-패치 시스템을 사용하여 수행하였다.
실시예 45: 생체내 피. 베르게이(P. berghei) 혈액-단계 검정.
CD-1 마우스 (실험 군당 n = 4; 암컷; 6-7주령; 20-24g, 찰스 리버(Charles River))에게 처리 24시간 전에 대략 1 × 105개의 피. 베르게이(P. berghei) (ANKA GFP-luc) 혈액-단계 기생충을 정맥내로 접종하고, 화합물을 경구로 투여하였다 (0시간). 생체내 영상화 시스템 (IVIS 스펙트럼CT, 퍼킨엘머)에 의해 기생충혈증을 모니터링하여 생물발광 신호를 획득하였다 (150 mg kg-1의 루시페린을 영상화 대략 10분 전에 복강내로 주사함). 또한, 혈액 도말 샘플을 각각의 마우스로부터 주기적으로 수득하고, 김사로 염색하고, 혈액 기생충혈증의 시각적 검출을 위해 현미경 하에 관찰하였다. 25%를 초과하는 기생충혈증을 갖는 동물은 인도적으로 안락사시켰다.
실시예 46: 생체내 피. 베르게이(P. berghei) 원인 예방 검정.
CD-1 마우스 (실험 군당 n = 4; 암컷; 6-7주령; 20-24g, 찰스 리버)에게 에이. 스테펜시(A. stephensi) 모기로부터 새로 절제된 대략 1 × 105개의 피. 베르게이(P. berghei) (ANKA GFP-luc) 포자소체를 정맥내로 접종하였다. 감염 직후, 마우스를 단일 경구 용량의 화합물로 처리하고; 감염을 피. 베르게이(P. berghei) 적혈구-단계 검정에 대해 기재된 바와 같이 모니터링하였다. 시간-경과 실험의 경우, 화합물 처리 (10 mg kg-1의 단일 경구 용량)의 시간은 감염 5일 전에서 감염 2일 후까지 다양하였다.
실시예 47: 생체내 피. 베르게이(P. berghei) 전파-단계 검정.
CD-1 (실험 군당 n = 3; 암컷; 6-7주령; 21-24g, 찰스 리버) 마우스를 피. 베르게이(P. berghei) (ANKA GFP-luc)로 96시간 동안 감염시킨 후, 비히클 또는 화합물로 처리하였다 (제0일). 제2일에, 암컷 에이. 스테펜시(A. stephensi) 모기가 20분 동안 마우스를 먹이로 하도록 하였다. 1주 후 (제9일), 모기의 중장을 절제하고, 낭포체를 현미경으로 계수하였다 (12.5× 배율).
실시예 48: 생체내 피. 팔시파룸(P. falciparum) 혈액-단계 검정.
생체내 적합화된 피. 팔시파룸(P. falciparum) (3D7HLH/BRD)을 문헌 [PLoS One 3, e2252 (2008)]에 기재된 바와 같이 선택하였다. 간략하게, NSG 마우스 (실험 군당 n = 2; 암컷; 4-5주령; 19-21g; 더 잭슨 래보러토리(The Jackson Laboratory))에게 1 ml의 인간 적혈구 (O-양성, 50% 적혈구용적률, 5% 알부맥스를 함유하는 50% RPMI 1640)를 매일 복강내로 주사하여 인간화된 순환 적혈구를 갖는 마우스 (huRBC NSG)를 생성하였다. 대략 2 × 107개의 혈액-단계 피. 팔시파룸(P. falciparum) 3D7HLH/BRD (FASEB J. 25, 3583-3593 (2011))를 huRBC NSG 마우스에게 정맥내로 감염시키고, 감염 5주 후에 >1% 기생충혈증을 달성하였다. 3회의 생체내 계대 후에, 기생충을 동결시키고 실험적으로 사용하였다. 1 × 107개의 혈액-단계의 피. 팔시파룸(P. falciparum) 3D7HLH/BRD로 감염시키고 대략 48시간 후에, 평균 기생충혈증은 대략 0.4%였다. huRBC NSG 마우스를 단일 용량의 화합물로 경구로 처리하고, 기생충혈증을 30일 동안 IVIS에 의해 모니터링하여 생물발광 신호를 획득하였다 (150 mg kg-1의 루시페린을 영상화 대략 10분 전에 복강내로 주사함).
실시예 49: 생체내 피. 팔시파룸(P. falciparum) 전파-단계 검정.
huRBC NSG 마우스 (실험 군당 n=2; 암컷; 4-5주령; 18-20 g; 잭슨 래보러토리)를 혈액-단계 피. 팔시파룸(P. falciparum) 3D7HLH/BRD로 2주 동안 감염시켜 성숙 생식모세포가 발생하도록 하였다. 후속적으로, 마우스를 단일 경구 용량의 화합물로 처리하였다. 혈액 샘플을 11일 동안 수집하였다. 기생충 단계의 분자 검출을 위해, 대조군 및 처리된 마우스로부터 40 μl의 혈액을 수득하였다. 간략하게, 알앤이지 플러스(RNeasy Plus) 키트를 사용하여 게놈 DNA 엘리미네이터 칼럼 (퀴아젠)으로 혈액 샘플로부터 전체 RNA를 단리하였다. 슈퍼스크립트(SuperScript) III 제1-가닥 합성 시스템 (라이프 테크놀로지스(Life Technologies))을 사용하여 추출된 RNA로부터 제1 가닥 cDNA 합성을 수행하였다. 기생충 단계를 문헌 [Sci. Transl. Med. 6, 244re5 (2014)]에 기재된 바와 같은 단계-특이적 qRT-PCR 검정을 사용하여 정량화하였다. PF3D7_0501300 (고리 단계 기생충), PF3D7_1477700 (미성숙 생식모세포) 및 PF3D7_1031000 (성숙 생식모세포)의 전사체 수준을 측정하기 위한 프라이머를 설계하였다. PF3D7_1120200 (피. 팔시파룸(P. falciparum) UCE) 전사체에 대한 프라이머를 구성적으로 발현된 기생충 마커로서 사용하였다. 최종 농도 250 nM에서 각각의 유전자에 대한 프라이머를 함유하는 cDNA를 사용하여 총 반응 부피 20 μl로 검정을 수행하였다. SYBR 그린 마스터 믹스 (어플라이드 바이오시스템즈(Applied Biosystems))를 사용하여, 하기 반응 조건으로 Viia7 qRT-PCR 기계 (라이프 테크놀로지스) 상에서 증폭을 수행하였다: 1 사이클 × 95℃에서 10분 및 40 사이클 × 95℃에서 1초 및 60℃에서 20초. 각각의 cDNA 샘플을 삼중으로 실행하고, 평균 Ct 값을 분석에 사용하였다. 각각의 마커에 대한 컷-오프 (음성 대조군) 초과의 수득된 Ct 값을 특이적 전사체의 존재에 대해 음성인 것으로 간주하였다. 기생충 접종 전 각각의 마우스로부터의 혈액 샘플을 또한 동일한 프라이머 세트를 사용하여 '배경 잡음'에 대해 시험하였다. 어떠한 샘플로부터도 증폭이 검출되지 않았다.
실시예 50: 생체내 피. 팔시파룸(P. falciparum) 간-단계 검정.
C57BL/6 (인간 재-상주, >70%)에 대한 FRG 녹아웃 마우스 (huHep FRG 녹아웃; 실험 군당 n = 2; 암컷; 5.5-6월령; 19-21g; 예쿠리스(Yecuris))에게 대략 1 × 105개의 피. 팔시파룸(P. falciparum) (NF54HT-GFP-luc) 포자소체를 정맥내로 접종하고, 화합물을 접종 1일 후 단일 10 mg kg-1 경구 용량으로서 투여하였다. 감염을 IVIS에 의해 매일 모니터링하였다. 인간 적혈구 (0.4 ml, O-양성, 50% 적혈구용적률, 5% 알부맥스를 함유하는 50% RPMI 1640)의 매일 생착을 접종 5일 후에 개시하였다. qPCR 분석을 위해, 접종 7일 후에 혈액 샘플 (40 μl)을 수집하였다. 혈액-단계 기생충의 분자 검출을 위해, 대조군 및 처리된 마우스로부터 40 μl의 혈액을 수득하였다. 간략하게, 알앤이지 플러스 키트를 사용하여 게놈 DNA 엘리미네이터 칼럼 (퀴아젠)으로 혈액 샘플로부터 전체 RNA를 단리하였다. 슈퍼스크립트 III 제1-가닥 합성 시스템 (라이프 테크놀로지스)을 사용하여 추출된 RNA로부터 제1가닥 cDNA 합성을 수행하였다. 혈액-단계 기생충의 존재를 문헌 [PLOS Comput. Biol. 9, e1003392 (2013)]에 기재된 바와 같은 고도의 단계-특이적 qRT-PCR 검정을 사용하여 정량화하였다. PF3D7_1120200 (피. 팔시파룸(P. falciparum) UCE)의 전사체 수준을 측정하기 위한 프라이머를 설계하였다. 최종 농도 250 nM에서 각각의 유전자에 대한 프라이머를 함유하는 cDNA를 사용하여 총 반응 부피 20 μl로 검정을 수행하였다. SYBR 그린 마스터 믹스 (어플라이드 바이오시스템즈)를 사용하여 Viia7 qRT-PCR 기계 (라이프 테크놀로지스) 상에서 증폭을 수행하였고, 반응 조건은 하기와 같았다: 1 사이클×95℃에서 10분 및 40 사이클×95℃에서 1초 및 60℃에서 20초. 각각의 cDNA 샘플을 삼중으로 실행하고, 평균 Ct 값을 분석에 사용하였다. 각각의 마커에 대한 컷-오프 (음성 대조군) 초과의 수득된 Ct 값을 특이적 전사체의 존재에 대해 음성인 것으로 간주하였다. 각각의 마우스로부터의 혈액 샘플을 또한 기생충 접종 전에 동일한 프라이머 세트를 사용하여 배경 잡음에 대해 시험하였다. 어떠한 샘플로부터도 증폭이 검출되지 않았다.
실시예 51: 생체내 씨. 파르붐(C. parvum) 검정.
만성 무증상 씨. 파르붐(C. parvum) 감염의 NOD SCID 감마 마우스 모델을 사용하여 생체내 화합물 효능을 시험하였다. NOD SCID 감마 마우스를 이유 5-7일 후에 경구 위관영양에 의해 ~1x105개의 씨. 파르붐(C. parvum) 낭포체로 감염시켰다. 감염된 동물은 감염 1주 후에 분변 중에 낭포체를 배출하기 시작하였으며, 이를 정량적 PCR (qPCR)에 의해 측정하였다. 양성 대조군 화합물 파로모마이신을 사용한 경험에 기초하여, 4일간의 약물 화합물 후에 기생충 배출의 80% 퍼센트 감소를 검출하는데 80% 검정력을 달성하기 위해 실험 군당 4마리의 마우스가 필요하였다. 실험 약물 요법 군 이외에, 추가의 음성 (DMSO/메틸셀룰로스 담체를 사용한 위관영양) 및 양성 (파로모마이신 2000 mg/kg 1일 1회) 대조군을 각각의 실험에 포함시켰다. 마우스를 이유 5-7일 후 (제-6일)에 감염시키고, 감염을 1주 후 (제0일)에 확인하고, 실험 화합물을 제1-4일에 경구 위관영양에 의해 투여하였다. 투여 빈도는 나타난 바와 같았다. 제5일에 qPCR에 의해 분변 낭포체 배출을 측정함으로써 처리 효능을 평가하였다.
실시예 52: 씨. 파르붐(C. parvum) 시험관내 EC50 검정.
인간 회맹부 선암종 (HCT-8) 세포를 ATCC로부터 입수하고, HEPES, 피루브산나트륨 (1 mM), 및 L-글루타민 (ATCC)을 함유하고 10% 말 혈청 (ATCC) 및 120 U/ml 페니실린 및 120 μg/ml 스트렙토마이신으로 보충된 RPMI 1640 배지가 담긴 T-75 조직 배양 플라스크에서 유지시켰다. 세포를 384-웰, 조직 배양-처리된, 흑색-벽의 투명바닥 마이크로웰 플레이트 (비디 팔콘(BD Falcon)) 내로 8,850개 세포/웰의 밀도로 플레이팅하고, 전면성장으로 성장되도록 하였다. 이어서, 이에 접종 배지 (말 혈청이 없는 RPMI 1640) 중에 현탁된 5.5 x 103개의 프라이밍된 씨. 파르붐(C. parvum) 낭포체 (분취그라스 팜스(Bunchgrass Farms), 아이다호주 디어리)를 접종하였다. 낭포체를 이전에 기재된 프로토콜 (J. Eukaryot. Microbiol. 46:56S-57S)에 따라 탈낭을 위해 프라이밍하였다. 간략하게, 낭포체를 10분 동안 10mM HCl로 37℃에서 처리하고, 원심분리하고, Ca2+ 및 Mg2+를 갖는 포스페이트-완충 염수 (PBS) 중의 타우로콜산나트륨 (시그마-알드리치)의 2 mM 용액으로 처리하였다. 현탁액을 10분 동안 16℃에서 인큐베이션한 다음, 접종 배지 중에 희석하고, 각 웰에 첨가하였다. 감염된 세포를 20% 말 혈청을 함유하는 동등한 부피의 성장 배지 (총 혈청 농도 10%)에서 37℃에서 3시간 동안 인큐베이션하였다. 화합물을 희석하고, EC50 곡선의 생성을 위해 0.12, 0.37, 1.1, 3.3, 및 10 μM (각각의 농도, n =14)의 고정 용량에서 검정하였다. 최종 EC50 곡선의 경우, 3개의 웰을 감염되지 않은 채로 두되, 각각의 상응하는 농도의 화합물로 처리하여 배경 염색을 평가하였다. 모든 곡선은 그래프패드 프리즘에서 로그[억제제] 대 반응 _ 가변 기울기 방정식 (방정식 3)을 사용하여 생성하였고, 하단 제한은 0으로 설정하였다.
상기 기재된 프로토콜에 따라, 화학식 (I)의 구조를 갖는 여러 화합물에 대한 50% 유효 농도 (EC50)를 씨. 파르붐(C. parvum)에 대해 측정하고, 결과를 하기 표 5에 나타내었다.
표 5
Figure pct00053
다른 실시양태
본원에 인용된 각각의 및 모든 특허, 특허 출원 및 공개의 개시내용은 그 전문이 본원에 참조로 포함된다. 미국 공개 번호 2016/0289235의 개시내용이 또한 참조로 포함된다. 특정한 실시양태에서, 본 발명의 화합물은 미국 공개 번호 2016/0289235의 표 1에 기재된 화합물이 아니다.
본 개시내용은 구체적 실시양태를 제공하지만, 추가의 변형이 가능하며, 본 출원이 하기, 일반적으로, 본 발명에 기재된 원리의 임의의 변동, 사용 또는 적용을 포함하는 것으로 의도되고, 본 개시내용으로부터의 이러한 벗어남을 포함하는 것은 본 개시내용이 관련된 기술분야 내에서 공지된 또는 통상의 실시 내에 속하며, 상기 제시한 본질적인 특색에 적용될 수 있는 것으로 이해될 것이다.

Claims (82)

  1. 화학식 (I)의 구조를 갖는 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염.
    Figure pct00054

    여기서 "파선" 결합은 단일 또는 이중 결합일 수 있고;
    R1은 임의로 치환된 아릴 또는 헤테로아릴이고;
    R2는 임의로 치환된 알콕시, 시클로알콕시 또는 헤테로시클릴이고;
    R3은 수소, 또는 -CH2-X이고;
    R4 및 R5는 독립적으로 수소, -X, 또는 -CH2-X이고, R4 및 R5는 함께 5- 또는 6-원 융합된 고리를 형성할 수 있고, R4 및 R5 중 적어도 1개는 수소가 아니고;
    R6 및 R7은 독립적으로 수소 또는 R이고;
    z1-z8은 독립적으로 각 경우에 CH 또는 N으로부터 선택되고; 여기서
    -X는 독립적으로 각 경우에 -OH, -OR, -S(O)R, -S(O)2R, -N(R)-S(O)2R, -S(O)2-N(R)(R), -S(O)2-NHR, -N(R)-C(O)-R 또는 -N(R)(R)로부터 선택되고;
    R은 독립적으로 각 경우에 임의로 치환된 C1-C12 알킬이다.
  2. 제1항에 있어서, 화학식 (II)의 구조를 갖는 화합물.
    Figure pct00055
  3. 제1항 또는 제2항에 있어서, R7은 수소인 화합물.
  4. 제1항에 있어서, 화학식 (IIb)의 구조를 갖는 화합물.
    Figure pct00056
  5. 제1항에 있어서, 화학식 (IIa)의 구조를 갖는 화합물.
    Figure pct00057
  6. 제1항 내지 제5항 중 어느 한 항에 있어서, R4 및 R5는 -X 또는 -CH2-X로부터 선택된 동일한 관능기인 화합물.
  7. 제1항 내지 제5항 중 어느 한 항에 있어서, R5는 수소이고, R4는 -X, 또는 -(CH2)-X인 화합물.
  8. 제1항 내지 제5항 중 어느 한 항에 있어서, R4는 수소이고, R5는 -X, 또는 -(CH2)-X인 화합물.
  9. 제6항 내지 제8항 중 어느 한 항에 있어서, R4 또는 R5의 기 -X 또는 -(CH2)-X 내의 -X는 -OH, -NH2, 또는 -N(R)(R)인 화합물.
  10. 제1항 내지 제5항 중 어느 한 항에 있어서, R4 및 R5는 독립적으로 -OH 및 -OR로부터 선택되고, R4 및 R5는 함께 6-원 융합된 고리를 형성하는 것인 화합물.
  11. 제1항 내지 제10항 중 어느 한 항에 있어서, R6은 C1-4 선형 또는 분지형 탄화수소인 화합물.
  12. 제1항 내지 제10항 중 어느 한 항에 있어서, R6은 수소인 화합물.
  13. 제1항 내지 제11항 중 어느 한 항에 있어서, R은 독립적으로 각 경우에 C1-4 선형 또는 분지형 탄화수소인 화합물.
  14. 제1항 내지 제13항 중 어느 한 항에 있어서, R1은 임의로 치환된 C6 아릴 또는 헤테로아릴인 화합물.
  15. 제1항 내지 제14항 중 어느 한 항에 있어서, R1은 페닐, 플루오로페닐, 디플루오로페닐, 또는 피리딜인 화합물.
  16. 제1항 내지 제15항 중 어느 한 항에 있어서, R2는 C1-4 선형 또는 분지형 알콕시인 화합물.
  17. 제1항 내지 제16항 중 어느 한 항에 있어서, R2는 메톡시, 에톡시, 프로폭시, 또는 이소프로폭시인 화합물.
  18. 제1항 내지 제15항 중 어느 한 항에 있어서, R2는 1개 이상의 F로 치환된 C1-4 선형 또는 분지형 알콕시인 화합물.
  19. 제1항 내지 제15항 중 어느 한 항에 있어서, R2는 -OCF3, -OCHF2, 또는 -OCH2F인 화합물.
  20. 제1항 내지 제15항 중 어느 한 항에 있어서, R2는 C3-6 헤테로시클릴 (예를 들어, 아지리디닐, 옥시라닐, 티이라닐, 옥세타닐, 아제티디닐, 티에타닐, 디아제티디닐, 디옥세타닐, 디티에타닐, 피롤리디닐, 테트라히드로푸라닐, 이미다졸릴, 피라졸릴, 옥사졸릴 등)인 화합물.
  21. 제1항 내지 제15항 중 어느 한 항에 있어서, R2는 옥세타닐 또는 아제티디닐인 화합물.
  22. 제1항 내지 제15항 중 어느 한 항에 있어서, R2는 C3-6 시클로알콕시인 화합물.
  23. 제22항에 있어서, R2는 시클로프로폭시인 화합물.
  24. 제1항 및 제6항 내지 제23항 중 어느 한 항에 있어서, z1-z4 중 1개는 N이고, 나머지는 CH인 화합물.
  25. 제1항 및 제6항 내지 제24항 중 어느 한 항에 있어서, z5-z8 중 1개는 N이고, 나머지는 CH인 화합물.
  26. 제1항, 제6항 내지 제23항 및 제25항 중 어느 한 항에 있어서, z1 및 z4는 각각 N이고, z3 및 z2는 각각 CH인 화합물.
  27. 제1항, 제6항 내지 제23항 및 제26항 중 어느 한 항에 있어서, z5 및 z7은 각각 N이고, z6 및 z8은 각각 CH인 화합물.
  28. 화학식 (III)의 구조를 갖는 화합물.
    Figure pct00058

    여기서 "파선" 결합은 단일 또는 이중 결합일 수 있고;
    R1은 임의로 치환된 아릴 또는 헤테로아릴이고;
    R2는 임의로 치환된 알콕시, 시클로알콕시 또는 헤테로시클릴이고;
    R3은 수소 또는 -CH2-X이고;
    R6 및 R7은 독립적으로 수소 또는 R이고;
    z1-z8은 독립적으로 각 경우에 CH 또는 N으로부터 선택되고; 여기서
    -X는 독립적으로 각 경우에 -OH, -OR, -S(O)R, -S(O)2R, -N(R)-S(O)2R, -S(O)2-N(R)(R), -S(O)2-NHR, -N(R)-C(O)-R 또는 -N(R)(R)로부터 선택되고;
    R은 독립적으로 각 경우에 C1-C12 알킬이고;
    단 R6이 수소인 경우, R3은 -CH2-N(R)(R)이고, 상기 "파선" 결합은 이중 결합이다.
  29. 제28항에 있어서, 화학식 (IV)의 구조를 갖는 화합물.
    Figure pct00059
  30. 제28항 또는 제29항에 있어서, 상기 "파선" 결합이 이중 결합인 화합물.
  31. 제28항 또는 제29항에 있어서, R6은 C1-4 선형 또는 분지형 탄화수소인 화합물.
  32. 제28항 내지 제31항 중 어느 한 항에 있어서, R1은 임의로 치환된 C6 아릴 또는 헤테로아릴인 화합물.
  33. 제28항 내지 제32항 중 어느 한 항에 있어서, R1은 페닐, 플루오로페닐, 디플루오로페닐, 또는 피리딜인 화합물.
  34. 제28항 내지 제33항 중 어느 한 항에 있어서, R2는 C1-4 선형 또는 분지형 알콕시인 화합물.
  35. 제28항 내지 제23항 중 어느 한 항에 있어서, R2는 메톡시, 에톡시, 프로폭시, 또는 이소프로폭시인 화합물.
  36. 제35항에 있어서, R2는 C3-6 시클로알콕시인 화합물.
  37. 제35항에 있어서, R2는 시클로프로폭시인 화합물.
  38. 제1항 내지 제15항 중 어느 한 항에 있어서, R2는 1개 이상의 F로 치환된 C1-4 선형 또는 분지형 알콕시인 화합물.
  39. 제1항 내지 제15항 중 어느 한 항에 있어서, R2는 -OCF3, -OCHF2, 또는 -OCH2F인 화합물.
  40. 제1항 내지 제15항 중 어느 한 항에 있어서, R2는 C3-6 헤테로시클릴 (예를 들어, 아지리디닐, 옥시라닐, 티이라닐, 옥세타닐, 아제티디닐, 티에타닐, 디아제티디닐, 디옥세타닐, 디티에타닐, 피롤리디닐, 테트라히드로푸라닐, 이미다졸릴, 피라졸릴, 옥사졸릴 등)인 화합물.
  41. 제1항 내지 제15항 중 어느 한 항에 있어서, R2는 옥세타닐인 화합물.
  42. 제28항 및 제30항 내지 제37항 중 어느 한 항에 있어서, z1-z4 중 1개는 N이고, 나머지는 CH인 화합물.
  43. 제28항 및 제30항 내지 제42항 중 어느 한 항에 있어서, z5-z8 중 1개는 N이고, 나머지는 CH인 화합물.
  44. 제28항, 제30항 내지 제37항 및 제43항 중 어느 한 항에 있어서, z1 및 z4는 각각 N이고, z3 및 z2는 각각 CH인 화합물.
  45. 제28항, 제30항 내지 제37항 및 제44항 중 어느 한 항에 있어서, z5 및 z7은 각각 N이고, z6 및 z8은 각각 CH인 화합물.
  46. 제1항 또는 제28항에 있어서, 화합물 E1-E38로 이루어진 군으로부터 선택된 화합물.
  47. 제약상 허용되는 부형제 및 제1항 내지 제46항 중 어느 한 항의 화합물을 포함하는 제약 조성물.
  48. 제47항에 있어서, 상기 화합물이 유효량으로 존재하는 것인 제약 조성물.
  49. 제47항에 있어서, 수의학적 조성물로서 제제화된 제약 조성물.
  50. 제47항 내지 제49항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 화합물이 말라리아를 치료하는 유효량으로 존재하는 것인 제약 조성물.
  51. 제47항 내지 제49항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 화합물이 속 크립토스포리디움(Cryptosporidium)으로부터의 기생충에 의해 유발된 질환을 치료하는 치료 유효량으로 존재하는 것인 제약 조성물.
  52. 제51항에 있어서, 상기 질환이 크립토스포리디움증인 제약 조성물.
  53. 대상체에게 유효량의 제1항 내지 제46항 중 어느 한 항의 화합물을 투여하는 단계를 포함하는, 대상체에서 기생충성 질환을 치료 또는 예방하는 방법.
  54. 제53항에 있어서, 상기 기생충성 질환이 말라리아인 방법.
  55. 제53항에 있어서, 상기 말라리아가 약물 내성 말라리아인 방법.
  56. 제55항에 있어서, 약물 내성 말라리아가 클로로퀸, 퀴닌, 피리메타민, 술파독신, 메플로퀸, 아르테메터, 루메판트린, 아르테수네이트, 아모디아퀸, 디히드로아르테미시닌, 피페라퀸, 프로구아닐, 독시시클린, 클린다마이신, 아르테미시닌, 아토바쿠온 또는 그의 임의의 조합물에 내성인 것인 방법.
  57. 제53항에 있어서, 상기 말라리아가 간 단계 말라리아인 방법.
  58. 제57항에 있어서, 상기 대상체의 간이 말라리아-유발 기생충에 의해 감염되고, 상기 치료가 그의 간으로부터 상기 감염의 확산을 방지하는 것인 방법.
  59. 제53항에 있어서, 상기 말라리아가 혈액 단계 말라리아인 방법.
  60. 제53항에 있어서, 상기 말라리아가 전파 단계 말라리아인 방법.
  61. 제53항에 있어서, 상기 말라리아가 피. 팔시파룸(P. falciparum), 피. 비박스(P. vivax), 피. 오발레(P. ovale), 피. 말라리아에(P. malariae), 피. 크노우레시(P. knowlesi), 피. 베르게이(P. berghei), 피. 샤바우디(P. chabaudi), 피. 빈케이(P. vinckei) 또는 피. 요엘리이(P. yoelii)로부터 선택된 모기 종에서 이동되는 것인 방법.
  62. 제61항에 있어서, 상기 모기 종이 피. 팔시파룸(P. falciparum)인 방법.
  63. 제53항에 있어서, 상기 기생충성 질환이 크립토스포리디움증인 방법.
  64. 제63항에 있어서, 상기 크립토스포리디움증이 씨. 파르붐(C. parvum)에 의해 이동되는 것인 방법.
  65. 제53항에 있어서, 상기 대상체가 인간인 방법.
  66. 제53항에 있어서, 상기 대상체가 인간이 아닌 것인 방법.
  67. 제66항에 있어서, 상기 대상체가 마우스, 래트, 토끼, 비-인간 영장류, 도마뱀, 도마뱀붙이, 소, 송아지, 양, 새끼양, 말, 망아지, 돼지 또는 새끼돼지인 방법.
  68. 대상체에게 제47항 내지 제52항 중 어느 한 항의 제약 조성물을 투여하는 단계를 포함하는, 대상체에서 기생충성 질환을 치료 또는 예방하는 방법.
  69. 제68항에 있어서, 상기 기생충성 질환이 말라리아인 방법.
  70. 제68항에 있어서, 상기 말라리아가 약물 내성 말라리아인 방법.
  71. 제70항에 있어서, 약물 내성 말라리아가 클로로퀸, 퀴닌, 피리메타민, 술파독신, 메플로퀸, 아르테메터, 루메판트린, 아르테수네이트, 아모디아퀸, 디히드로아르테미시닌, 피페라퀸, 프로구아닐, 독시시클린, 클린다마이신, 아르테미시닌, 아토바쿠온 또는 그의 임의의 조합물에 내성인 것인 방법.
  72. 제68항에 있어서, 상기 말라리아가 간 단계 말라리아인 방법.
  73. 제72항에 있어서, 상기 대상체의 간이 말라리아-유발 기생충에 의해 감염되고, 상기 치료가 그의 간으로부터 상기 감염의 확산을 방지하는 것인 방법.
  74. 제68항에 있어서, 상기 말라리아가 혈액 단계 말라리아인 방법.
  75. 제68항에 있어서, 상기 말라리아가 전파 단계 말라리아인 방법.
  76. 제68항에 있어서, 상기 말라리아가 피. 팔시파룸(P. falciparum), 피. 비박스(P. vivax), 피. 오발레(P. ovale), 피. 말라리아에(P. malariae), 피. 크노우레시(P. knowlesi), 피. 베르게이(P. berghei), 피. 샤바우디(P. chabaudi), 피. 빈케이(P. vinckei) 또는 피. 요엘리이(P. yoelii)로부터 선택된 모기 종에서 이동되는 것인 방법.
  77. 제68항에 있어서, 상기 모기 종이 피. 팔시파룸(P. falciparum)인 방법.
  78. 제68항에 있어서, 상기 기생충성 질환이 크립토스포리디움증인 방법.
  79. 제78항에 있어서, 상기 크립토스포리디움증이 씨. 파르붐(C. parvum)에 의해 이동되는 것인 방법.
  80. 제68항에 있어서, 상기 대상체가 인간인 방법.
  81. 제68항에 있어서, 상기 대상체가 인간이 아닌 것인 방법.
  82. 제81항에 있어서, 상기 대상체가 마우스, 래트, 토끼, 비-인간 영장류, 도마뱀, 도마뱀붙이, 소, 송아지, 양, 새끼양, 말, 망아지, 돼지 또는 새끼돼지인 방법.
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Families Citing this family (7)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN110650738B (zh) 2017-03-20 2023-05-09 博德研究所 用于治疗寄生虫病的化合物和方法
CN110168093B (zh) * 2017-09-12 2023-08-15 中科蓝华(广州)生物医药技术有限公司 一种转染细胞内寄生虫的试剂盒及其应用
WO2020041384A1 (en) * 2018-08-20 2020-02-27 The Broad Institute, Inc. 3-phenyl-2-cyano-azetidine derivatives, inhibitors of rna-guided nuclease activity
WO2020061167A1 (en) * 2018-09-18 2020-03-26 Washington University Treatment of infections of toxoplasma gondii and closely related parasites
JP2022516798A (ja) * 2019-01-09 2022-03-02 エーザイ・アール・アンド・ディー・マネジメント株式会社 ジアザビシクロ［６．２．０］デカン関連化合物の合成のための方法
US20230009323A1 (en) * 2019-10-25 2023-01-12 The Broad Institute, Inc. Compounds and methods for the treatment of cryptosporidiosis
WO2022067060A1 (en) * 2020-09-24 2022-03-31 The Broad Institute, Inc. Apicomplexan parasite inhibition

Family Cites Families (18)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US3176017A (en) 1963-02-26 1965-03-30 American Home Prod Aroylalkyl derivatives of diazabicyclo-nonanes and-decanes
US3542780A (en) 1967-07-25 1970-11-24 American Home Prod 2-amidino-1,2,3,4-tetrahydropyrazine(1,2-a)indoles
US3531485A (en) 1967-08-14 1970-09-29 American Home Prod Aryl-substituted diazabicycloalkanes
IL140402A0 (en) 1998-07-14 2002-02-10 Bayer Ag Antiparasitic artemisinin derivatives (endoperoxides)
UA77515C2 (en) 2002-04-04 2006-12-15 Diazabicyclo alkane derivatives possessing neuroldnin-nk1 receptor antagonistic activity
US7511159B2 (en) 2003-12-25 2009-03-31 Ono Pharmaceutical Co., Ltd. Azetidine ring compounds and drugs comprising the same
TWI600654B (zh) * 2012-11-19 2017-10-01 艾姆公司 用於治療寄生蟲疾病之化合物及組合物
WO2014096423A1 (en) 2012-12-20 2014-06-26 Ucb Pharma S.A. Therapeutically active pyrazolo-pyrimidine derivatives
UY35772A (es) 2013-10-14 2015-05-29 Bayer Cropscience Ag Nuevos compuestos plaguicidas
US9716274B2 (en) 2013-10-24 2017-07-25 Toyota Jidosha Kabushiki Kaisha Cathode active material for sodium batteries, and sodium battery
US10059711B2 (en) 2013-11-11 2018-08-28 The Broad Institute, Inc. Compounds and methods for the treatment of malaria
US20160326157A1 (en) 2014-01-06 2016-11-10 President And Fellows Of Harvard College Monobactams and methods of their synthesis and use
PE20161371A1 (es) 2014-03-24 2016-12-21 Novartis Ag Compuestos organicos de monobactam para el tratamiento de infecciones bacterianas
EP3848353A1 (en) 2014-10-24 2021-07-14 Takeda Pharmaceutical Company Limited Medicaments for the treatment of ophthalmic diseases
US11040976B2 (en) * 2015-04-24 2021-06-22 President And Fellows Of Harvard College Substrate selective inhibitors of insulin-degrading enzyme (IDE) and uses thereof
CN110650738B (zh) 2017-03-20 2023-05-09 博德研究所 用于治疗寄生虫病的化合物和方法
WO2020061167A1 (en) 2018-09-18 2020-03-26 Washington University Treatment of infections of toxoplasma gondii and closely related parasites
US20220193034A1 (en) 2019-04-23 2022-06-23 Washington University Compounds and methods for the treatment of parasitic diseases

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US11174260B2 (en) 2021-11-16
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CA3057087A1 (en) 2018-09-27
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