KR20190002036A - 블루베리 추출물을 포함하는 장내 유익균의 증식을 위한 프리바이오틱스 및 이의 용도 - Google Patents
블루베리 추출물을 포함하는 장내 유익균의 증식을 위한 프리바이오틱스 및 이의 용도 Download PDFInfo
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Abstract
본 발명은 블루베리 추출물을 포함하는 장내 유익균의 증식 프리바이오틱스 및 이의 용도에 관한 것이다. 본 발명에 따른 본 발명의 블루베리 추출물에 대상으로 한 장내 유익균 락토바실러스 아시도필루스 ATCC 4356의 증식에 미치는 영향실험 (실험예 1), 장내 유해균의 증식에 미치는 영향실험 (실험예 2), 장내 유익균 증식인자를 알아보기 위한 총 폴리페놀 함량(실험예 3), DPPH 라디칼 소거능 측정실험 (실험예 4), ABTS 라디칼 소거능 측정실험 (실험예 5), 및 당구성분석 실험(실험예 6)등을 수행한 결과, 본 발명의 블루베리 추출물이 장내 유익균을 강력하게 증식하고, 장내 유해균에 대하여 강력한 생육저해효과가 있으며, DPPH 자유 라디칼 및 ABTS 자유 라디칼 소거 활성이 강력하여 우수한 전자공여능을 나타냄을 확인하였으며, 총 폴리페놀 함량, 당 함량 면에서 장내 유익균인 프로바이오틱스의 증식을 촉진하는 것으로 확인함으로서, 블루베리 추출물을 포함하는 프리바이오틱스에 의하여 장내 유익균을 모두 조절 할 수 있는 장점뿐만 아니라 이의 우수한 전자공여능 제공특성으로 강력한 항산화 작용도 가능한 장점도 있어, 약학조성물, 건강기능식품 및 건강보조식품으로 유용하게 이용할 수 있다.
Description
본 발명은 블루베리 추출물을 포함하는 장내 유익균의 증식을 위한 프리바이오틱스 및 이의 용도를 제공하는 것이다.
[문헌 1] 정혜미 등, 대추 추출물이 장내 미생물의 생육에 미치는 영향 및 항산화 활성2011, J Korean Soc Food Sci Nutr 40(4), 500～508
[문헌 2]Manning TS. Gibson GR. 2004. Prebiotics. Best Practice & Research Clinical Gastroenterology. 18(2):287-298
[문헌 3] Cardona et al., 2013, Journal of Nutritional biochemistry, 24, 1415-1422
[문헌4] Jeong et al.,국내 시판 블루베리와 라즈베리의 영양성분 분석 및 항산화 활성, Journal of the Korean Society of Food Science and Nutrition, 37(11), 1375-1381, 2008
[문헌 5] Martineau LC et al.Anti-diabetic properties of the Canadian lowbush blueberry Vaccinium angustifolium Ait. , Phytomedicine.13(9-10):612-623, 2006
[문헌 6] Parry J et al., Chemical compositions, antioxidant capacities, and antiproliferative activities of selected fruit seed flours., J Agric Food Chem., 31;54(11):3773-8.2006)
[문헌 7] Sellappan et al. Phenolic compounds and antioxidant capacity of Georgia-grown blueberries and blackberries., J Agric Food Chem. 50(8):2432-8. 2002).
[문헌 8] Orrhge, K. et al., 2000, Bifidobacteria and lactobacilli in human health, Drugs Exptl. Clin. Res., 26, 95-111
[문헌 9] Fuller, K., 1989, Probiotics in man and animals, J. Appl. Bacteriol., 66, 365-378
[문헌 10] 한국특허공개 10-2015-0075447호
[문헌 11] Xie et al. Effects of Ligustrum robustum on gut microbes and obesity in rats, World J Gastroenterol. 2015, 21(46):13042-13054
인간의 대장 및 분변 중에 존재하는 세균은 약400여종에 달하며, 이 중90%이상이 혐기성을 띄는 균주이다. 이들은 일정한 균형을 유지하여 장내에서 균총을 형성하고 있으며, 인체의 건강상태 및 스트레스, 노화 생리적 변화 뿐 아니라 외부에서 유입된 음식물, 약물 등으로 인한 영향을 받는다. 신체적 건강과 수명연장을 위해서는 장내 균총으로 유익균을 보다 많이 보유하고, 유해균이 적은 상태를 유지해야 한다. 2001년 세계보건기구(FAO)와 국제식량기구(FAO)의 합동전문가위원회는 프로바이오틱스(probiotics)를 ‘살아있는 미생물로 적당한 양을 섭취하면 건강에 유익한 세균’으로 정의했으며(정혜미 등, 2011, J Korean Soc Food Sci Nutr 40(4), 500～508) 이는 장내미생물을 개선하는데 도움을 줄 수 있는 생균제제를 의미한다. 한편 프리바이오틱스(prebiotics)란 장내 유용미생물이 사용할 수 있고, 장내 유익균주의 성장과 기능에 도움을 줄 수 있는 물질을 의미한다. 현재까지 알려진 프리바이오틱스는 비전분 다당류 및 올리고당이었으며, 인간의 효소에 의해서는 잘 분해되지 않으나 미생물이 이용할 수 있는 물질들이었다(Manning TS. Gibson GR. 2004. Prebiotics. Best Practice & Research Clinical Gastroenterology. 18(2):287-298). 최근 장내 미생물에 유익한 영향을 줄 수 있는 폴리페놀의 효과가 알려지면서 이러한 프리바이오틱스의 개념이 넓어지고 있다(Cardona et al., 2013, Journal of Nutritional biochemistry, 24, 1415-1422).
본 발명에 사용된 블루베리는 주로 동남아시아에 분포하고 있으며 원산지는 북아메리카인 진달래과(Ericaceae) 산앵두나무속(Vaccinium)에 속하는 관목성 식물로 약 400여 종이 있다(Jeong et al., 국내 시판 블루베리와 라즈베리의 영양성분 분석 및 항산화 활성, Journal of the Korean Society of Food Science and Nutrition, 37(11), 1375-1381, 2008). 2002년 미국의 대표적 일간지인 뉴욕 타임지는 세계 10대 장수식품에 블루베리를 선정한 바 있다. 블루베리는 항당뇨(Martineau LC et al., Anti-diabetic properties of the Canadian lowbush blueberry Vaccinium angustifolium Ait. , Phytomedicine.13(9-10):612-623, 2006) 및 항암(Parry J et al., Chemical compositions, antioxidant capacities, and antiproliferative activities of selected fruit seed flours., J Agric Food Chem., 31;54(11):3773-8.2006)에 효과가 있는 것으로 보고되었고, 특히 플라보노이드(flavonoids) 및 페놀류(phenolic compunds)등의 항산화 물질이 풍부하여 질병예방 및 노화 방지에 효능이 있는 것으로 보고 되고 있다.(Sellappan et al., Phenolic compounds and antioxidant capacity of Georgia-grown blueberries and blackberries., J Agric Food Chem. 50(8):2432-8. 2002).
한편, 젖산균(lactic acid bacteria)은 프로바이오틱(probiotic)으로 널리 이용되고 있는 대표적인 세균으로 자연계에 널리 존재하고, 사람이나 동물의 장(腸)과 발효식품 등에서도 쉽게 발견되는 미국식품의약국(Food and Drug Administration)에서 안전하다고 인정한 미생물이다(Orrhge, K. et al., 2000, Bifidobacteria and lactobacilli in human health, Drugs Exptl. Clin. Res., 26, 95-111). 젖산균은 장내 상피세포에 부착하여 기생하게 되어 장내 균총의 성질을 개선시켜 장내 균총의 안정화, 유해세균의 정착 억제에 따른 부패산물 생성 감소 및 질병 예방, 면역 활성화 작용, 항암작용, 콜레스테롤 저하 등 숙주동물에 많은 도움을 준다. 젖산균이 여러 부패성 미생물 및 병원성 미생물에 대하여 생육억제 작용을 갖는 것은 몇 가지 대사적인 특성 때문인데 젖산균은 대사산물로서 항균활성 인자인 organic acid, hydrogen peroxide, reuterin, diacetyl, acetaldehyde, bacteriocin 등을 생산하기 때문이다 (Fuller, K., 1989, Probiotics in man and animals, J. Appl. Bacteriol., 66, 365-378; 한국특허공개 10-2015-0075447호)
프로바이오틱스는 현재 건강기능식품으로서 주로 사용되고 있지만, 치료 목적으로도 일부 사용되고 있으며, 구체적으로는 면역글로뷸린 A 항체 생성을 증가시키고 로타바이러스 쉐딩(shedding)을 감소시켜 설사 유병 기간을 단축시키므로 항생제 연관 설사의 예방 및 치료제, 또는 궤양성 대장염이나 크론병과 같은 염증성 장질환 치료제, 복부 팽만감이나 변비 치료제, 과민성 대장염 치료제, 방사선 유발성 장염 치료제, 헬리코박터 감염 치료 보조제 등으로의 적용이 활발히 시도되고 있으며, 특히 만성 염증성 장질환 치료제로서 효과적인 것으로 보고되고 있다. (한국공개특허 10-2008-0075971호)
그러나, 상기 문헌의 어디에도 블루베리 추출물을 포함하는 장내 유익균의 증식 프리바이오틱스 및 이의 용도에 대한 어떠한 내용도 교시되거나 개시된 바는 없다.
본 발명자들은 천연물로부터 장 건강을 위한 프리바이오틱스를 개발하고자 목적으로 본 발명의 블루베리 추출물에 대상으로 한 장내 유익균 락토바실러스 아시도필루스 ATCC 4356의 증식에 미치는 영향실험 (실험예 1), 장내 유해균의 증식에 미치는 영향실험 (실험예 2), 장내 유익균 증식인자를 알아보기 위한 총 폴리페놀 함량(실험예 3), DPPH 라디칼 소거능 측정실험 (실험예 4), ABTS 라디칼 소거능 측정실험 (실험예 5), 및 당분석 실험(실험예 7)등을 수행한 결과, 본 발명의 블루베리 추출물이 장내 유익균을 강력하게 증식하고, 장내 유해균에 대하여 강력한 생육저해효과가 있으며, DPPH 자유 라디칼 및 ABTS 자유 라디칼 소거 활성이 강력하여 우수한 전자공여능을 나타냄을 확인하였으며, 총 폴리페놀 함량 및 당 함량 면에서 장내 유익균인 프로바이오틱스의 증식을 촉진하는 것으로 확인함으로서, 본 발명을 완성하게 되었다.
상기 목적을 달성하기 위하여, 본 발명은 블루베리 추출물을 포함하는 장내 유익균의 증식 촉진을 위한 프리바이오틱스를 제공한다.
본원에서 정의되는 “장내 유익균”이란 “프로바이오틱스”와 동일시하며, 소화 흡수에 도움을 주고 장내 유해균 성장을 저해하여 장내 환경이 바람직한 상태를 유지하게 하는 균주를 의미한다. 대표적인 균주로 바람직하게는, 프로바이오틱스(prebiotics)으로 널리 이용되고 있는 임의의 유산균으로서, 당업계에서 용이하게 입수가능한 예를 들어, 미국 세포주 보존센타 (ATCC: American Type Culture Collection), 한국생명공학연구원 생물자원센터(KCTC: Korean Collection for Type Cultures), 한국종균협회 부설 한국미생물보존센터(KCCM: Korean Culture Center of Microorganisms), 농촌진흥청 농업유전자원센터(KACC: Korean Agricultural Culture Collection) 등에서 입수가능한 균주로서, 구체적으로는, 락토바실러스속(Lactobacillus), 비피도박테리움 속 균주(Bifidobacterium), 바실러스속 (Bacillus), 스트렙토코카스속(Streptococcus), 엔테로코카스속(Enterococcus) 의 미생물; 바람직하게는 비피도박테리움 속, 락토바실러스 속 또는 스트렙토코커스 속 균주이고, 보다 바람직하게는 비피도박테리움 속 또는 스트렙토코커스 속 균주; 보다 바람직하게는 비피도박테리움 롱검(Bifidobacterium longum), 비피도박테리움 비피덤(Bifidobacterium bifidum), 비피도박테리움 브레베(Bifidobacterium breve), 비피도박테리움 애니말리스 아종 락티스(Bifidobacterium animalis ssp. lactis), 비피도박테리움 애돌레센티스 (Bifidobacterium adolescentis), 비피도박테리움 슈도카테눌라텀(Bifidobacterium pseudocatenulatum), 비피도박테리움 카테눌라텀(Bifidobacterium catenulatum) 또는 비피도박테리움 인판티스(Bifidobacterium infantis), 비피도박테리움 테르모필룸(B. thermophilum) 균종과 같은 비피도박테리아; 등의 비피도박테리움 속 균주; 락토바실러스 플란타룸(Lactobacillus plantarum), 락토바실러스 펜토서스(Lactobacillus pentosus), 락토바실러스 카세이(Lactobacillus casei), 락토바실러스 카세이 아종 파라카세이(Lactobacillus casei ssp. paracasei), 락토바실러스 람노서스(Lactobacillus rhamnosus), 락토바실러스 아시도필러스(Lactobacillus acidophilus), 락토바실러스 델브루키(Lactobacillus delbrueckii), 락토바실러스 델브루키 아종 불가리쿠스(Lactobacillus delbrueckii ssp. bulgaricus), 락토바실러스 델브루키 아종 델브루키(Lactobacillus delbrueckii ssp. delbrueckii), 락토바실러스 페르멘텀(Lactobacillus fermentum), 락토바실러스 가세리(Lactobacillus gasseri), 락토바실러스 루테리(Lactobacillus reuteri), 락토바실루스 브레비스(Lb. brevis), 락토바실루스 셀로비오수스(Lb. cellobiosus), 락토바실루스 크리스파투스(Lb. crispatus), 락토바실루스 지지(Lb. GG), 락토바실루스 존소니이(Lb. johnsonii), 락토바실루스 락티스(Lb. lactis), 락토바실루스 류테리(Lb. reuteri), 락토바실루스 살리바리우스(Lb. salivarius) 균종 등의 락토바실러스 속 균주; 바실루스 세레우스 토이오이 (Bacillus cereus toyoi) 또는 바실루스 세레우스(Bacillus cereus) 균종 등의 바실루스 속 균주; 류코노스톡 (Leuconostoc citreum), 류코노스톡 메센테로이데스 (Leuconostoc mesenteroides) 등의 류코노스톡 속 균주((Leuconostoc species);); 페디오코쿠스 아시디락티시 (Pediococcus acidilactici), 페디오코쿠스 펜토사세우스(Pediococcus pentosaceus) 등의 페디오코쿠스속 균주(Pediococcus species); 프로피오니박테리움 애시디차시엔스 (Propionibacterium acidifaciens), 프로피오니박테리움 애시디프로피오니시 (Propionibacterium acidipropionici) 등의 프로피오니박테리움 속 균주 (Propionibacterium species); 스트렙토코커스 서머필러스 (Streptococcus thermophilus), 에스. 크레모리스(S. cremoris), 에스. 인판타리우스(S. infantarius), 에스. 인테르메디우스(S. intermedius), 에스. 락티스(S. lactis), 에스. 살리바리우스 아종 테르모필루스(S. salivarius subsp. thermophilus ) 균종과 같은 스트렙토코쿠스 속 균주 (Streptococcus species); 엔테로코쿠스 파에칼리스 (Enterococcus faecalis) 및 엔테로코쿠스 파에시움 (E. faecium) 등의 엔테로코쿠스 속 균주(Enterococcus species); 사카로미세스 세레비시아 (Saccharomyces cerevisiae), 사카로미세스 불라디 (Saccharomyces boulardii) 등의 사카로미세스 속 균주(Saccharomyces species), 바람직하게는, 락토바실러스 속 균주 또는 비피도박테리움 속 균주, 가장 바람직하게는, 락토바실러스 아시도필루스(Lactobacillus acidophilus), 가장 바람직하게는 상기 락토바실러스 속 균주는 락토바실러스 아시도필루스 ATCC 4356, 락토바실러스 애시도필러스 (Lactobacillus acidophilus, KCTC No.3164), 바실러스 세레우스 (Bacillus cereus , KCTC No.13123), 비피도박테리움 롱굼 (Bifidobacterium longum sub sp .longum , KCTC No.3128) 또는 스트렙토코커스 종 (Streptococcus sp, KCTC No.5644)를 포함한다.
본원에서 정의되는 추출물은 물, 주정, 메탄올, 에탄올, 부탄올 등의 C1 내지 C4의 저급 알코올 또는 이들의 혼합용매로, 바람직하게는 물 또는 물 및 에탄올 혼합용매, 보다 바람직하게는 물 또는 10 내지 99%(v/w) 물 및 에탄올 혼합용매, 보다 더 바람직하게는, 물 또는 20 내지 80%(v/w) 물 및 에탄올 혼합용매에 가용한 추출물을 포함한다.
이하, 본 발명의 추출물을 수득하는 방법을 상세히 설명한다.
본 발명의 추출물은 블루베리를 각각 세척, 건조 및 세절하고, 상기 실험재료 부피의 약 1배 내지 200배 부피 (v/v), 바람직하게는 10배 내지 100배 부피 (v/v)의 정제수를 포함한 물, 주정, 탄소수 1 내지 4의 저급 알콜, 아세톤, 클로로포름, 메틸렌클로리드, 헥산 또는 이들의 혼합용매, 바람직하게는 물 또는 물 및 알콜 혼합용매, 보다 바람직하게는 물 또는 10 내지 99%(v/w) 물 및 에탄올 혼합용매, 보다 더 바람직하게는, 물 또는 20 내지 80%(v/w) 물 및 에탄올 혼합용매를 가하여 냉침추출, 열수추출, 초음파 추출, 환류냉각 추출 등의 추출방법, 바람직하게는, 1시간 내지 24시간, 바람직하게는 2시간 내지 12시간 동안, 50℃ 내지 300℃, 바람직하게는 60℃ 내지 290℃에서 수행하는 환류냉각추출법 을 수행하여 추출물을 수득하는 제 1단계; 상기에서 얻은 추출물을 여과포로 여과하고 농축 및 1일 내지 24일, 바람직하게는 2일 내지 10일 동안 동결건조하여 본 발명의 추출물을 수득할 수 있다.
따라서 본 발명은 상기 제조방법 및 상기 제조방법으로 제조한 블루베리 추출물을 유효성분으로 함유하는 장내 유익균의 증식 촉진을 위한 약학조성물, 건강 기능식품 및 건강보조식품을 제공한다.
본 발명에 따른 본 발명의 블루베리 추출물에 대상으로 한 장내 유익균 락토바실러스 아시도필루스 ATCC 4356의 증식에 미치는 영향실험 (실험예 1), 장내 유해균의 증식에 미치는 영향실험 (실험예 2), 장내 유익균 증식인자를 알아보기 위한 총 폴리페놀 함량(실험예 3), DPPH 라디칼 소거능 측정실험 (실험예 4), ABTS 라디칼 소거능 측정실험 (실험예 5), 및 당분석 실험(실험예 6)등을 수행한 결과, 본 발명의 블루베리 추출물이 장내 유익균을 강력하게 증식하고, 장내 유해균에 대하여 강력한 생육저해효과가 있으며, DPPH 자유 라디칼 및 ABTS 자유 라디칼 소거 활성이 강력하여 우수한 전자공여능을 나타냄을 확인하였으며, 총 폴리페놀 함량및 당 함량 면에서 장내 유익균인 프로바이오틱스의 증식을 촉진하는 것으로 확인함으로서, 블루베리 추출물을 포함하는 프리바이오틱스에 의하여 장내 유익균을 모두 조절 할 수 있는 장점뿐만 아니라 이의 우수한 전자공여능 제공특성으로 강력한 항산화 작용도 가능한 장점도 있어, 약학조성물, 건강기능식품 및 건강보조식품으로 유용하다.
상기 목적을 해결하기 위해 본 발명은 블루베리 추출물을 유효성분을 함유하는 장내 유익균의 증식 촉진 또는 장내 유해균 증식으로 기인한 질환의 예방 및 치료용 약학 조성물을 제공한다.
분원에서 정의되는 “장내 유해균 증식으로 기인한 질환”은 이에 제한되지는 않으나, 예를 들어, 항생제 연관 설사, 궤양성 대장염, 크론병과 같은 염증성 장질환, 복부 팽만감, 변비, 급성 또는 만성 과민성 대장염, 방사선 유발성 장염, 헬리코박터 감염증 등을 포함한다.
또한, 본 발명은 블루베리 추출물을 유효성분을 함유하는 장내 유익균의 증식 촉진 또는 장내 유해균 증식으로 기인한 질환의 예방 및 개선용 건강기능식품을 제공한다.
본 발명의 조성물은, 조성물 총 중량에 대하여 상기 생약 추출물을 0.01 내지 99% 중량으로 포함한다.
그러나 상기와 같은 조성은 반드시 이에 한정되는 것은 아니고, 환자의 상태 및 질환의 종류 및 진행 정도에 따라 변할 수 있다.
본 발명의 추출물을 포함하는 조성물은 약학적 조성물의 제조에 통상적으로 사용하는 적절한 담체, 부형제 및 희석제를 더 포함할 수 있다.
본 발명에 따른 추출물을 포함하는 조성물은, 각각 통상의 방법에 따라 산제, 과립제, 정제, 캡슐제, 현탁액, 에멀젼, 시럽, 에어로졸 등의 경구형 제형, 외용제, 좌제 및 멸균 주사용액의 형태로 제형화하여 사용될 수 있으며, 이에 포함될 수 있는 담체, 부형제 및 희석제로는 락토즈, 덱스트로즈, 수크로스, 솔비톨, 만니톨, 자일리톨, 에리스리톨, 말티톨, 전분, 아카시아 고무, 알지네이트, 젤라틴, 칼슘 포스페이트, 칼슘 실리케이트, 셀룰로즈, 메틸 셀룰로즈, 미정질 셀룰로스, 폴리비닐 피롤리돈, 물, 메틸히드록시벤조에이트, 프로필히드록시벤조에이트, 마그네슘 스테아레이트 및 광물유를 들 수 있다. 제제화할 경우에는 보통 사용하는 충진제, 증량제, 결합제, 습윤제, 붕해제, 계면활성제 등의 희석제 또는 부형제를 사용하여 조제된다. 경구투여를 위한 고형제제에는 정제, 환제, 산제, 과립제, 캡슐제 등이 포함되며, 이러한 고형제제는 상기 추출물에 적어도 하나 이상의 부형제 적어도 면, 전분, 칼슘카보네이트 (calcium carbonate), 수크로스 (sucrose) 또는 락토오스 (lactose), 젤라틴 등을 섞어 조제된다. 또한 단순한 부형제 이외에 마그네슘 스티레이트 탈크 같은 윤활제들도 사용된다. 경구를 위한 액상제제로는 현탁제, 내용액제, 유제, 시럽제 등이 해당되는데 흔히 사용되는 단순희석제인 물, 리퀴드 파라핀 이외에 여러 가지 부형제, 예를 들면 습윤제, 감미제, 방향제, 보존제 등이 포함될 수 있다. 비경구 투여를 위한 제제에는 멸균된 수용액, 비수성용제, 현탁제, 유제, 동결건조제제, 좌제가 포함된다. 비수성용제, 현탁제로는 프로필렌글리콜 (propylene glycol), 폴리에틸렌 글리콜, 올리브 오일과 같은 식물성 기름, 에틸올레이트와 같은 주사 가능한 에스테르 등이 사용될 수 있다. 좌제의 기제로는 위텝솔 (witepsol), 마크로골, 트윈 (tween) 61, 카카오지, 라우린지, 글리세로제라틴 등이 사용될 수 있다.
본 발명의 추출물의 바람직한 투여량은 환자의 상태 및 체중, 질병의 정도, 약물형태, 투여경로 및 기간에 따라 다르지만, 당업자에 의해 적절하게 선택될 수 있다. 그러나 바람직한 효과를 위해서, 추출물은 1일 0.01 mg/kg 내지 10 g/kg으로, 바람직하게는 1 mg/kg 내지 1 g/kg으로 투여하는 것이 좋다. 투여는 하루에 한번 투여할 수도 있고, 수회 나누어 투여할 수 있다. 그러므로 상기 투여량은 어떠한 면으로든 본 발명의 범위를 한정하는 것은 아니다.
본 발명의 조성물은 쥐, 생쥐, 가축, 인간 등의 포유동물에 다양한 경로로 투여될 수 있다. 투여의 모든 방식은 예상될 수 있는데, 예를 들면, 경구 및 직장, 또는 정맥 등의 방법을 통하여 투여할 수 있다.
또한, 본 발명은 블루베리 추출물을 유효성분을 함유하는 장내 유익균의 증식 촉진 또는 장내 유해균 증식으로 기인한 질환의 예방 및 개선을 위한 건강기능식품을 제공한다.
본원에서 정의되는 "건강기능식품"은 건강기능식품에 관한 법률 제6727호에 따른 인체에 유용한 기능성을 가진 원료나 성분을 사용하여 제조 및 가공한 식품을 의미하며, "기능성"이라 함은 인체의 구조 및 기능에 대하여 영양소를 조절하거나 생리학적 작용 등과 같은 보건 용도에 유용한 효과를 얻을 목적으로 섭취하는 것을 의미한다.
본 발명의 장내 유익균의 증식 촉진 또는 장내 유해균 증식으로 기인한 질환의 예방 및 개선을 위한 건강기능식품은, 조성물 총 중량에 대하여 상기 추출물을 0.01 내지 95%, 바람직하게는 1 내지 80% 중량백분율로 포함한다.
더욱이, 본 발명의 조성물은 장내 유익균의 증식 촉진 또는 장내 유해균 증식으로 기인한 질환의 치료 또는 고환 기능증진을 목적으로 건강식품일 수 있다.
또한, 장내 유익균의 증식 촉진 또는 장내 유해균 증식으로 기인한 질환의 예방 및 개선을 위한 목적으로 산제, 과립제, 정제, 캡슐제, 환제, 현탁액, 에멀젼, 시럽 등의 약학 투여형태 또는 티백제, 침출차, 건강 음료 등의 형태인 건강기능식품으로 제조 및 가공이 가능하다.
또한, 본 발명은 블루베리 추출물을 유효성분을 함유하는 장내 유익균의 증식 촉진 또는 장내 유해균 증식으로 기인한 질환의 예방 및 개선을 위한 건강보조식품을 제공한다.
본원에서 정의되는 건강보조식품중 주성분은 전체 조성물 중량대비 활성성분의 함량이 약 30% 내지 99% 범위, 바람직하게는, 50% 내지 99% 범위, 보다 바람직하게는 70% 내지 99% 범위임을 의미한다.
본 발명의 건강 기능성 음료 조성물은 지시된 비율로 필수 성분으로서 상기 추출물을 함유하는 외에는 다른 성분에는 특별한 제한이 없으며 통상의 음료와 같이 여러 가지 향미제 또는 천연 탄수화물 등을 추가 성분으로서 함유할 수 있다. 상술한 천연 탄수화물의 예는 모노사카라이드, 예를 들어, 포도당, 과당 등; 디사카라이드, 예를 들어 말토스, 슈크로스 등; 및 폴리사카라이드, 예를 들어 덱스트린, 시클로덱스트린 등과 같은 통상적인 당, 및 자일리톨, 소르비톨, 에리트리톨 등의 당알콜이다. 상술한 것 이외의 향미제로서 천연 향미제 (타우마틴, 스테비아 추출물 (예를 들어 레바우디오시드 A, 글리시르히진 등)) 및 합성 향미제 (사카린, 아스파르탐 등)를 유리하게 사용할 수 있다. 상기 천연 탄수화물의 비율은 본 발명의 조성물 100 ㎖ 당 일반적으로 약 1~20 g, 바람직하게는 약 5~12 g이다.
본 발명에 따른 추출물을 식품첨가물로 사용할 경우, 상기 추출물을 그대로 첨가하거나 다른 식품 또는 식품 성분과 함께 사용될 수 있고, 통상적인 방법에 따라 적절하게 사용될 수 있다. 상기물질을 첨가할 수 있는 식품의 예로는 육류, 소세지, 빵, 쵸코렛, 캔디류, 스넥류, 과자류, 피자, 라면, 기타 면류, 껌류, 아이스크림류를 포함한 낙농제품, 각종 스프, 음료수, 차, 드링크제, 알콜음료 및 비타민 복합제 등이 있으며, 통상적인 의미에서의 건강식품을 모두 포함한다.
상기 외에 본 발명의 조성물은 여러 가지 영양제, 비타민, 광물 (전해질), 합성 풍미제 및 천연 풍미제 등의 풍미제, 착색제 및 중진제 (치즈, 초콜릿 등), 펙트산 및 그의 염, 알긴산 및 그의 염, 유기산, 보호성 콜로이드 증점제, pH 조절제, 안정화제, 방부제, 글리세린, 알콜, 탄산 음료에 사용되는 탄산화제 등을 함유할 수 있다. 그밖에 본 발명의 조성물들은 천연 과일 쥬스 및 과일 쥬스 음료 및 야채 음료의 제조를 위한 과육을 함유할 수 있다. 이러한 성분은 독립적으로 또는 조합하여 사용할 수 있다. 이러한 첨가제의 비율은 그렇게 중요하진 않지만 본 발명의 조성물 100 중량부 당 0 내지 약 20 중량부의 범위에서 선택되는 것이 일반적이다.
또한, 본 발명의 추출물은 장내 유익균의 증식 촉진 또는 장내 유해균 증식으로 기인한 질환 예방 효과를 목적으로 식품 또는 음료에 첨가될 수 있다. 이 때, 식품 또는 음료 중의 상기 추출물의 양은 전체 식품 중량의 0.01 내지 15 중량%로 가할 수 있으며, 건강 음료 조성물은 100 ㎖을 기준으로 0.02 내지 5 g, 바람직하게는 0.3 내지 1 g의 비율로 가할 수 있다.
또한, 본 발명은 블루베리 추출물을 유효성분을 함유하는 장내 유익균의 증식 촉진 또는 장내 유해균 증식으로 기인한 질환의 예방 및 개선을 위한 식품 또는 식품 첨가제를 제공한다.
상기 "식품첨가물공전"에 수재된 품목으로 예를 들어, 케톤류, 글리신, 구연산칼륨, 니코틴산, 계피산 등의 화학적 합성품, 감색소, 감초추출물, 결정셀롤로오스, 구아검 등의 천연첨가물, L-글루타민산나트륨제제, 면류첨가알칼리제, 보존료제제, 타르색소제제 등의 혼합 제제류들을 들 수 있다.
본 발명의 추출물이 포함된 기능성 식품으로는 빵, 떡류, 건과류, 캔디류, 초콜릿류, 츄잉껌, 쨈류와 같은 과자류 아이스크림류, 빙과류, 아이스크림 분말류와 같은 아이스크림 제품류 우유류, 저지방 우유류, 유당분해우유, 가공유류, 산양유, 발효유류, 버터유류, 농축유류, 유크림류, 버터유, 자연치즈, 가공치즈, 분유류, 유청류와 같은 유가공품류 식육가공품, 알가공품, 햄버거와 같은 식육제품류 어묵, 햄, 소세지, 베이컨 등의 어육가공품과 같은 어육제품류 라면류, 건면류, 생면류, 유탕면류, 호화건먼류, 개량숙면류, 냉동면류, 파스타류와 같은 면류 과실음료, 채소류음료, 탄산음료, 두유류, 요구르트 등의 유산균음료, 혼합음료와 같은 음료 간장, 된장, 고추장, 춘장, 청국장, 혼합장, 식초, 소스류, 토마토케첩, 카레, 드레싱과 같은 조미식품 마가린, 쇼트닝 및 피자를 들 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다.
상기 건강기능식품을 제조하는 과정에서 음료를 포함한 식품에 첨가되는 본 발명에 따른 추출물은 필요에 따라 그 함량을 적절히 가감할 수 있다.
본 발명의 블루베리 추출물이 장내 유익균을 강력하게 증식하고, 장내 유해균에 대하여 강력한 생육저해효과가 있으며, DPPH 자유 라디칼 및 ABTS 자유 라디칼 소거 활성이 강력하여 우수한 전자공여능을 나타냄을 확인하였으며, 총 폴리페놀 함량, 당 함량 면에서 장내 유익균인 프로바이오틱스의 증식을 촉진하는 것으로 확인함으로서, 블루베리 추출물을 포함하는 프리바이오틱스에 의하여 장내 유익균을 모두 조절 할 수 있는 장점뿐만 아니라 이의 우수한 전자공여능 제공특성으로 강력한 항산화 작용도 가능한 장점도 있어, 약학조성물, 건강기능식품 및 건강보조식품으로 유용하게 이용할 수 있다.
도 1은 블루베리 추출물 제조 방법을 나타내며;
도 2는 블루베리 각 추출물이 락토바실러스 아시도필루스 ATCC 4356(1a)의 증식에 미치는 효과를 나타내며(2a), 도 2b는 BL30E의 농도별 첨가가 락토바실러스 아시도필루스 ATCC 4356(1a)의 증식에 미치는 효과를 나타매며;
도 3는 BL30E 첨가에 의한 Staphylococcus aureus에 대한 저해효과를 나타내며(3a); 도 3b는 BL30E 첨가에 의한 Listeria monocytogenes에 대한 저해효과를 나타내며;
도 4는 블루베리 추출물의 DPPH 자유 라디칼 소거능에 의한 항산화 활성을 나타내며;
도 5는 블루베리 추출물의 ABTS 자유 라디칼 소거능에 의한 항산화 활성을 나타낸다.
도 2는 블루베리 각 추출물이 락토바실러스 아시도필루스 ATCC 4356(1a)의 증식에 미치는 효과를 나타내며(2a), 도 2b는 BL30E의 농도별 첨가가 락토바실러스 아시도필루스 ATCC 4356(1a)의 증식에 미치는 효과를 나타매며;
도 3는 BL30E 첨가에 의한 Staphylococcus aureus에 대한 저해효과를 나타내며(3a); 도 3b는 BL30E 첨가에 의한 Listeria monocytogenes에 대한 저해효과를 나타내며;
도 4는 블루베리 추출물의 DPPH 자유 라디칼 소거능에 의한 항산화 활성을 나타내며;
도 5는 블루베리 추출물의 ABTS 자유 라디칼 소거능에 의한 항산화 활성을 나타낸다.
이하, 본 발명을 하기 실시예 및 실험예에 의해 상세히 설명한다.
단, 하기 실시예 및 실험예는 본 발명을 예시하는 것일 뿐, 본 발명의 내용이 하기 실시예 및 실험예에 의해 한정되는 것은 아니다.
실시예 1. 블루베리 추출물의 제조
1-1. 물 추출물의 제조예 (도 1 참조)
건조 상태의 블루베리(유기농러브팜, 전라북도 순창) 부피의 20배 부피(v/v)의 물을 가하여 250°C에서 3시간 동안 증류하는 환류 추출법을 수행하여 농축하였다. 농축된 불루베리 물 추출물을 이어 여과망으로 여과하고, 감압 농축기(1ton, (주)명일이엔지)로 농축을 하고 동결건조기(PVTFD10R, 일신랩)로 5~7일 간 동결건조하여 본 발명의 물 추출물(이하, BLW라 함)을 수득하였고 냉동실에 보관하면서 하기 실험예의 시료로 사용하였다.
1-2. 30% 에탄올 추출물의
제조예
건조 상태의 블루베리(유기농러브팜, 전라북도 순창) 무게의 20배 부피(w/v)의 30% 에탄올을 가하여 250°C에서 3시간 동안 증류하는 환류 추출법을 수행하여 농축하였다. 농축된 불루베리 30% 에탄올 추출물을 이어 여과망으로 여과하고, 감압 농축기(1ton, (주)명일이엔지)로 농축을 하고 동결건조기(PVTFD10R, 일신랩)로 5~7일 간 동결건조하여 본 발명의 30% 에탄올 추출물(이하, BL30E라 함)을 수득하였고 냉동실에 보관하면서 하기 실험예의 시료로 사용하였다.
1-3. 70% 에탄올 추출물의
제조예
건조 상태의 블루베리(유기농러브팜, 전라북도 순창) 무게의 20배 부피(w/v)의 70% 에탄올을 가하여 250°C에서 3시간 동안 증류하는 환류 추출법을 수행하여 농축하였다. 농축된 불루베리 30% 에탄올 추출물을 여과망으로 여과하고, 감압 농축기(1ton, (주)명일이엔지)로 농축을 하고 동결건조기(PVTFD10R, 일신랩)로 5~7일 간 동결건조하여 본 발명의 70% 에탄올 추출물(이하, BL70E라 함)을 수득하였고 냉동실에 보관하면서 하기 실험예의 시료로 사용하였다.
실험예 1. 장내 유익균 증식에 미치는 영향
상기 실시예 1에서 수득한 본 발명의 시료의 장내 유익균 증식에 미치는 영향을 확인하기 위하여 문헌에 개시된 방법을 응용하여 하기와 같이 실험 하였다(정혜미 등, 대추 추출물이 장내 미생물의 생육에 미치는 영향 및 항산화 활성2011, J Korean Soc Food Sci Nutr 40(4), 500～508).
1-1. 실험 균주
균주는 한국미생물보존센터(KCCM: Korean Culture Center of Microorganisms, 대한민국)에서 분양 받았으며, 장내 유익균으로는 락토바실러스 아시도필루스 ATCC 4356 (ATCC: American Type Culture Collection)을 사용하였다. 장내 유익균을 배양하기 위한 증식배지로는 락토바실리(Lactobacilli) MRS 브로스(288130, BD difco, 미국)를 사용하였으며, 균주는 실험에 사용하기 전 3회 이상 계대 배양하여 활성화시킨 후 사용하였다.
1-2. 실험 과정
생성된 집락수를 계측하고 그 평균 집락수에 희석배수를 곱하여 배양액 mL당 생균수를 산출하였다. 5mL MRS 브로스에 블루베리 추출 분말(BLW, BL30E, BL70E)을 각각 1 (v/w)%씩 첨가한 후 멸균하여 사용하였다.
멸균한 5 mL MRS 브로스 배지에 시험균(락토바실러스 아시도필루스, ATCC 4356)을 660 nm 흡광도(optical density) 값이 0.70이 되도록 균 농도를 조절하여 MRS 브로스에 1% 접종한 후 37°C에서 배양하여, 0, 20, 72시간에 균수를 측정하였다. 대조군은 블루베리 추출물을 첨가하지 않은 MRS 브로스를 사용하였다.
1-3. 실험 결과
블루베리 추출물과 장내 유익균 증식과의 관계는 도 2와 같다. 락토바실러스 아시도필루스의 경우, 35시간까지는 블루베리 추출물이 초기 증식에 효과가 없었으나, 35시간 이후부터 균 증식에 효과를 보이는 것으로 나타났다. BLW와 BL70E보다 BL30E의 대수기는 유의성이 나타나지 않았으나 BL30E의 경우 정지기에 5.89 CFU/mL로 블루베리를 첨가하지 않은 대조군(5.43 CFU/mL)보다 높은 균수 보였으며(P<0.05), 사멸기가 시작되는 72시간에서 5.94 CFU/mL 로 대조군의 5.43 CFU/mL보다 유의적으로 높은 균수를 유지하여, 장내 유익균의 증식에 영향을 미치는 것으로 검토되었다. BL30E은 도2B와 같이 농도별로 대조군에 비하여 유의하게 높은 균수를 보였다.
실험예 2. 장내 유해균 증식에 미치는 영향
상기 실시예 1에서 수득한 본 발명의 시료의 장내 유해균 증식에 미치는 영향을 확인하기 위하여 문헌에 개시된 방법을 응용하여 하기와 같이 실험 하였다(Xie et al. Effects of Ligustrum robustum on gut microbes and obesityi n rats, World J Gastroenterol. 2015, 21(46):13042-13054)
2-1. 실험 과정
유해균은 리스테리아 모노사이토겐스(Listeria monocytogenes ATCC 19111), 스타필로코커스 아우레우스 (Staphylococcus aureus ATCC 6538p)에 관하여 실시하였다. 리스테리아 모노사이토겐스(Listeria monocytogenes ATCC 19111)의 경우, 멸균한 Brain Heart Infusion 액체배지(237500,BD difco, 미국)에 스타필로코커스 아우레우스 (Staphylococcus aureus ATCC 6538p)은 Soybean-Casein Digest 액체배지(211768, BD difco,미국)에 1% 접종하여 37℃, 혐기환경에서 배양하였다.
배양액의 600nm에서 흡광도(optical density)값이 0.70이 되도록 균농도를 조절한 후 Brain Heart lnfusion 액체배지에 1% 접종하여 억제율을 측정하였으며, 블루베리 추출물은 각각 전체 부피의 0.5, 1, 5, 10 %(v/w)가 되도록 제조하여 균배양 시 동시에 처리하였다.
배양액은 96well plate에 200μl양으로 한 소재 당 4개 분주하여 실시하였으며, 37℃ 온도의 배양기 (incubator, JISICO)에서 24시간 배양하여 분광기(microplate spetrophotometer, epoch, BioTek)를 이용하여 600nm 파장에서 흡광도를 측정하였다.
대조군은 시료를 첨가하지 않은 각 액체배지를 사용하였고, 억제율은 하기 수학식 1에 따라 각 농도에 대한 시료의 억제효율(inhibition %)로 나타내었다.
2-2. 실험 결과
블루베리 추출물과 장내 유해균 증식과의 관계는 도 3와 같다. 스타필로코커스 아우레우스 (Staphylococcus aureus ATCC 6538p)의 경우 도 3A와 같이 BL30E을 5, 10% 첨가하였을 때 각각 42.8%와 65.4%의 저해효과를 보였으며, 리스테리아 모노사이토겐스(Listeria monocytogenes ATCC 19111)의 경우 도 3B와 같이 BL30E를 5, 10% 첨가하였을 때 각각 279.8 % 및 98.4%의 저해효과를 나타내었다.
실험예 3. 총 폴리페놀 함량 측정
상기 실시예 1에서 수득한 본 발명의 시료의 총 폴리페놀 함량을 확인하기 위하여 페놀성 물질인 포스포몰리브덴산(phosphomolybdic acid)과 반응하여 청색을 나타내는 것을 이용한 폴린 데니스(Folin Deinis)법(AOAC., Association of official analytical chemists, Official methods of analysis. 15th ed., Washington D C. Cd 8-35(1990))을 일부 변형하여 비색정량을 실시하였다.
블루베리 추출물 20μl에 증류수 80μl 첨가하여 섞은 후 20μl의 폴린-시오칼토시약(Folin-Ciocalteu reagent, F9252, 시그마社, 미국)을 혼합하였다. 5분간 방치 후 7% Na2Co3(S7795, 시그마社, 미국) 140μl를 첨가하여 암실에서 1시간동안 실온방치 후 750nm에서 흡광도를 측정하였으며 표준물질로는 갈산(gallic acid, G7384, 시그마社, 미국)을 사용하였다.
블루베리의 추출방법에 따른 총 폴리페놀 함량은 표 1과 같다. 갈산을 표준물질로 사용하였을 때 BLW의 폴리페놀 함량은 137.31 mg/g로 나타났고, BL30E는 275.12 mg/g, BL70E는 206.17 mg/g으로 나타나 추출용매에 따른 총 폴리페놀 함량에 유의적 차이가 있었다. 블루베리의 폴리페놀 함량은 BL30E가 가장 높았다.
| 블루베리 추출물 | 총 폴리페놀(mg GAE/g)1 ) |
| BLW | 137.31±2.00 |
| BL30E | 275.12±2.97 |
| BL70E | 206.17±14.70 |
| 1): 갈산을 표준물질로 사용하였을 때 블루베리 추출물 1 g당 총 폴리페놀 | |
실험예
4.
DPPH
라디칼
소거능
시험
상기 실시예 1에서 수득한 본 발명의 시료의 DPPH 라디칼 소거능 시험에 미치는 영향을 확인하기 위하여 블루아 등의 방법(Bllis MS et al., Nature, Antioxidant determination by the use of stable free radicals. 181:1199-1200(1958))에 따라 시험하였다.
5-1. 실험 과정
DPPH(α, α-diphenyl-ß-picrylhydrazyl) 라디칼에 대한 소거활성은 하기와 같이 실험을 수행하였다. 블루베리 추출물 20μl에 100μl DPPH 용액 380μl를 첨가하여 암실에서 상온으로 30분간 반응시킨 후 분광기 (microplate spectrophotometer, Epoch, BioTek Instruments, Inc., Winooski, VT, USA))를 사용하여 515nm에서 흡광도를 측정하였다. 대조구로는 비타민C (아스코르브산, SMB00390, Sigma, USA)를 사용하였다.
5-2. 실험 결과
DPPH법은 안정한 자유라디칼인 DPPH가 수소공여체(H-donor)와 반응하는 능력을 바탕으로 측정하는 방법이다. DPPH는 비교적 안정한 자유라디칼로서, 항산화 물질에 의해 환원되어 변색되므로 항산화 효능을 측정할 때 많이 이용된다. 대조구로 천연항산화제인 아스코르브산을 사용하여 DPPH 자유 라디칼 소거능에 의한 항산화 활성을 검색한 결과는 도 4로 나타났다. 대조군의 농도가 250μM 이었을때 BL30E의 항산화 효능이 69.6%로 EGCG의 92.7%에 달하여 58.4%의 BL70E이나 53.2%의 BLW중 가장 높게 나타났다.
실험예 6. ABTS 라디칼 소거능 시험
상기 실시예 1에서 수득한 본 발명의 시료의 ABTS 라디칼 소거능 시험에 미치는 영향을 확인하기 위하여 Re등(Re R et al., Free Radical Biol Med 26: 1231-1237(1999))에 따라 시험하였다.
6-1. 실험 과정
ABTS(2,2’-azino-bis)(3-ethlybenzothiazoline-6-sulphnoic acid) 라디칼에 대한 소거활성은 하기와 같이 실험을 수행하였다. 7 mM ABTS 인산칼륨(potassium phosphate) 용액에 7mM ABTS (A1888, 시그마社, 미국)와 2.45mM 과황산칼륨(potassium persulfate)을 70:1로 용해시켜 ABTS+라디칼 용액을 만들었다. ABTS+라디칼 용액 390μl에 블루베리 추출물 10μl을 잘 혼합시킨 후 분광기 (microplate spectrophotometer, Epoch, BioTek Instruments, Inc., Winooski, VT, USA)를 사용하여 734nm에서 흡광도를 측정하였다.
6-2. 실험 결과
ABTS법은 대표적인 라디칼 소거활성을 나타내는 방법으로 대조구로 EGCG(epigallocatechin gallate)를 사용하여 ABTS 자유 라디칼 소거능에 의한 항산화 활성결과는 도 5로 나타났다. EGCG의 농도가 10mg/mL일 때 96.5%의 라디칼 소거능 효능이 나타났으며, BL30E은 92.14%로 높은 항산화 효능이 나타났고, 이에 따라 BL70E은 83.75%, BLW은 70.78%를 타나냈다. 따라서 블루베리 추출물은 장내 유익균을 증진시킬 뿐 아니라 항산화 활성 역시 우수할 것으로 판단된다.
실험예
7
BL30E의
당 구성비교
상기 실시예 1에서 수득한 본 발명의 시료의 당 구성 비교를 위하여 공인분석기관((주)한국바이오분석연구원, 경기도 성남시 중원구 둔천대로519)에 의뢰하였으며, 과당, 포도당, 자당, 맥아당, 유당에 대한 함량을 분석하였다.
BL30E의 당분석 결과는 표 2와 같다. 당분석 결과, 과장 37.68 g/100g, 포도당 35.89 g/100g 이었으며, 자당, 맥아당, 유당은 검출되지 않았다.
| 추출물 | 과당 | 포도당 | 자당 | 맥아당 | 유당 |
| 블루베리 30% 추출물 | 30.62 g/100 g | 28. 69g/100 g | - | - | - |
상기 실험 결과, 본 발명의 블루베리 추출물에 대상으로 한 장내 유익균 락토바실러스 아시도필루스 ATCC 4356의 증식에 미치는 영향실험 (실험예 1), 장내 유해균의 증식에 미치는 영향실험 (실험예 2), 장내 유익균 증식인자를 알아보기 위한 총 폴리페놀 함량(실험예 3), 총 플라보노이드 함량(실험예 4), DPPH 라디칼 소거능 측정실험 (실험예 5), ABTS 라디칼 소거능 측정실험 (실험예 6), 및 당구성분석 실험(실험예 7)등을 수행한 결과, 본 발명의 블루베리 추출물이 장내 유익균을 강력하게 증식하고, 장내 유해균에 대하여 강력한 생육저해효과가 있으며, DPPH 자유 라디칼 및 ABTS 자유 라디칼 소거 활성이 강력하여 우수한 전자공여능을 나타냄을 확인하였으며, 총 폴리페놀 함량, 총 플라보노이드 함량 및 당 함량 면에서 장내 유익균인 프로바이오틱스의 증식을 촉진하는 것으로 확인되었다.
하기에 본 발명의 추출물을 포함하는 조성물의 제제예를 설명하나, 본 발명은 이를 한정하고자 함이 아닌 단지 구체적으로 설명하고자 함이다.
제제예 1. 산제의 제조
블루베리 추출물 (BLW) ----------------------------------- 20 mg
유당 --------------------------------------------------- 100 mg
탈크 ---------------------------------------------------- 10 mg
상기의 성분들을 혼합하고 기밀포에 충진하여 산제를 제조한다.
제제예 2. 정제의 제조
블루베리 추출물 BL30E) --------------------------------- 10 mg
옥수수전분 -------------------------------------------- 100 mg
유당 -------------------------------------------------- 100 mg
스테아린산 마그네슘 ------------------------------------- 2 mg
상기의 성분들을 혼합한 후 통상의 정제의 제조방법에 따라서 타정하여 정제를 제조한다.
제제예 3. 캅셀제의 제조
블루베리 추출물 (BL70E) -------------------------------- 10 mg
결정성 셀룰로오스 --------------------------------------- 3 mg
락토오스 --------------------------------------------- 14.8 mg
마그네슘 스테아레이트 --------------------------------- 0.2 mg
통상의 캡슐제 제조방법에 따라 상기의 성분을 혼합하고 젤라틴 캡슐에 충전하여 캡슐제를 제조한다.
제제예 4. 주사제의 제조
블루베리 추출물 (BLW) ---------------------------------- 10 mg
만니톨 ------------------------------------------------ 180 mg
주사용 멸균 증류수 ----------------------------------- 2974 mg
Na2HPO4,12H2O ------------------------------------------- 26 mg
통상의 주사제의 제조방법에 따라 1 앰플당(2 ㎖) 상기의 성분 함량으로 제조한다.
제제예 5. 액제의 제조
블루베리 추출물 (BL30E) --------------------------------- 20 mg
이성화당 ------------------------------------------------- 10 g
만니톨 ---------------------------------------------------- 5 g
정제수 --------------------------------------------------- 적량
통상의 액제의 제조방법에 따라 정제수에 각각의 성분을 가하여 용해시키고 레몬향을 적량 가한 다음 상기의 성분을 혼합한 다음 정제수를 가하여 전체를 정제수를 가하여 전체 100 ㎖으로 조절한 후 갈색병에 충진하여 멸균시켜 액제를 제조한다.
제제예
6.
건강 식품의
제조
블루베리 추출물 ( BL70E ) ------------------------------- 1000 ㎎
비타민 혼합물 -------------------------------------------- 적량
비타민 A 아세테이트 ------------------------------------- 70 ㎍
비타민 E ----------------------------------------------- 1.0 ㎎
비타민 B1 --------------------------------------------- 0.13 ㎎
비타민 B2 --------------------------------------------- 0.15 ㎎
비타민 B6 ---------------------------------------------- 0.5 ㎎
비타민 B12 --------------------------------------------- 0.2 ㎍
비타민 C ------------------------------------------------ 10 ㎎
비오틴 -------------------------------------------------- 10 ㎍
니코틴산아미드 ----------------------------------------- 1.7 ㎎
엽산 ---------------------------------------------------- 50 ㎍
판토텐산 칼슘 ------------------------------------------ 0.5 ㎎
무기질 혼합물 -------------------------------------------- 적량
황산제1철 --------------------------------------------- 1.75 ㎎
산화아연 ---------------------------------------------- 0.82 ㎎
탄산마그네슘 ------------------------------------------ 25.3 ㎎
제1인산칼륨 --------------------------------------------- 15 ㎎
제2인산칼슘 --------------------------------------------- 55 ㎎
구연산칼륨 ---------------------------------------------- 90 ㎎
탄산칼슘 ----------------------------------------------- 100 ㎎
염화마그네슘 ------------------------------------------ 24.8 ㎎
상기의 비타민 및 미네랄 혼합물의 조성비는 비교적 건강식품에 적합한 성분을 바람직한 실시예로 혼합 조성하였지만, 그 배합비를 임의로 변형 실시하여도 무방하며, 통상의 건강식품 제조방법에 따라 상기의 성분을 혼합한 다음, 과립을 제조하고, 통상의 방법에 따라 건강식품 조성물 제조에 사용할 수 있다.
제제예 7. 건강 음료의 제조
블루베리 추출물 ( BLW ) ----------------------------------- 1000㎎
구연산 ------------------------------------------------- 1000 ㎎
올리고당 ------------------------------------------------- 100 g
매실농축액 ------------------------------------------------- 2 g
타우린 ----------------------------------------------------- 1 g
정제수를 가하여 ------------------------------------ 전체 900 ㎖
통상의 건강음료 제조방법에 따라 상기의 성분을 혼합한 다음, 약 1시간 동안 85℃에서 교반 가열한 후, 만들어진 용액을 여과하여 멸균된 2ℓ 용기에 취득하여 밀봉 멸균한 뒤 냉장 보관한 다음 본 발명의 건강음료 조성물 제조에 사용한다.
상기 조성비는 비교적 기호음료에 적합한 성분을 바람직한 실시예로 혼합 조성하였지만, 수요계층, 수요국가, 사용용도 등 지역적, 민족적 기호도에 따라서 그 배합비를 임의로 변형 실시하여도 무방하다.
Claims (9)
- 블루베리 추출물을 포함하는 장내 유익균의 증식 촉진을 위한 프리바이오틱스.
- 제 1항에 있어서,
상기 장내 유익균은 락토바실러스속(Lactobacillus), 비피도박테리움 속 균주(Bifidobacterium), 바실러스속 (Bacillus), 스트렙토코카스속(Streptococcus), 또는 엔테로코카스속(Enterococcus)의 미생물임을 특징으로 하는 프리바이오틱스. - 제 1항에 있어서,
상기 추출물은 물, 주정, 메탄올, 에탄올, 부탄올 등의 C1 내지 C4의 저급 알코올 또는 이들의 혼합용매에 가용한 추출물임을 특징으로 하는 프리바이오틱스. - 블루베리 추출물을 유효성분을 함유하는 장내 유익균의 증식 촉진 또는 장내 유해균 증식으로 기인한 질환의 예방 및 치료용 약학 조성물.
- 제 4항에 있어서,
상기 장내 유해균 증식으로 기인한 질환”은 항생제 연관 설사, 수양성 설사, 구토, 메스꺼움을 동반한 궤양성 대장염, 크론병과 같은 염증성 장질환, 복부 팽만감, 변비, 급성 또는 만성 과민성 대장염, 방사선 유발성 장염, 헬리코박터 감염증을 특징으로 하는 약학 조성물. - 블루베리 추출물을 유효성분을 함유하는 장내 유익균의 증식 촉진 또는 장내 유해균 증식으로 기인한 질환의 예방 또는 개선용 건강기능식품.
- 제 6항에 있어서,
상기 건강기능식품은 산제, 과립제, 정제, 캡슐제, 환제, 현탁액, 에멀젼, 시럽의 약학 투여형태 또는 티백제, 침출차, 건강 음료의 형태인 건강기능식품. - 블루베리 추출물을 유효성분을 함유하는 장내 유익균의 증식 촉진 또는 장내 유해균 증식으로 기인한 질환의 예방 또는 개선용 건강보조식품.
- 블루베리 추출물을 유효성분을 함유하는 장내 유익균의 증식 촉진 또는 장내 유해균 증식으로 기인한 질환의 예방 또는 개선용 식품첨가물.
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| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| KR20200098224A (ko) | 2019-02-12 | 2020-08-20 | 주식회사 비케이바이오 | 청귤 추출박 또는 청피 유래의 다당을 포함하는 프리바이오틱스 및 이를 유효성분으로 포함하는 장내 프로바이오틱스 증식 촉진용 조성물 |
| KR20210066246A (ko) | 2019-11-28 | 2021-06-07 | 김숙영 | 머루포도를 함유하는 조청의 제조방법 |
| CN117143795A (zh) * | 2023-10-18 | 2023-12-01 | 广东华南医药技术有限责任公司 | 一种提高益生菌抗氧化能力及促进增殖的方法及其组合物 |
| EP4144833A4 (en) * | 2020-05-29 | 2024-03-06 | Univ Jiangnan | LACTOBACILLUS CRISPATUS STRAIN FOR PREVENTING AND/OR TREATING HELICOBACTER PYLORI INFECTION |
-
2017
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