KR20180088173A

KR20180088173A - 큰실말 추출물을 유효성분으로 포함하는 화장료 조성물

Info

Publication number: KR20180088173A
Application number: KR1020170012919A
Authority: KR
Inventors: 이재화; 김인혜
Original assignee: 신라대학교 산학협력단
Priority date: 2017-01-26
Filing date: 2017-01-26
Publication date: 2018-08-03

Abstract

본 발명은 큰실말(Cladosiphon novae - caledoniae kylin) 추출물을 유효성분으로 포함하는 항노화 화장료 조성물 또는 주름 예방 또는 개선용 화장료 조성물에 관한 것이다.
본 발명은 큰실말 추출물 엘라스타제 저해 활성이 우수하다는 것을 확인하였고, 추가로 큰실말 수용성 식이섬유 추출물이 다른 추출물에 비하여 주름 예방 또는 개선능과 관련하여 엘라스타제 저해 활성이 더 우수할 뿐만 아니라, 미백 활성과 관련하여 타이로시나아제 저해활성이 더 뛰어나고, 항산화 활성이 우수하다는 것을 확인하여, 상기 큰실말 추출물이 주름 예방 또는 개선뿐만 아니라, 미백 등 항노화 화장품의 원재료로 사용될 수 있다는 것을 확인하여 완성한 것으로, 본 발명의 유효성분인 큰실말 추출물은 에스터라제 저해 활성 즉, 항주름 활성이 우수할 뿐만 아니라, 식품으로 사용되던 해조류와 가장 안전한 용매인 수용매와 주정을 이용하는 것으로 부작용 등에 대한 안전성도 보장되어, 본 발명의 화장료 조성물은 산업적 측면에서 그 효과가 매우 클 것으로 기대된다.

Description

큰실말 추출물을 유효성분으로 포함하는 화장료 조성물{A COSMETIC COMPOSITION COMPRISING EXTRACTS OF CLADOSIPHON NOVAE - CALEDONIAE KYLIN}

본 발명은 피부미용기능성을 갖는 천연물질을 유효성분으로 포함하는 화장료 조성물에 관한 것이다.

사람의 피부는 외부로부터 피부 안쪽의 다양한 기관을 보호하고 있는 인체를 구성하는 기관들 중 가장 큰 기관으로서, 내부의 수분 및 유용성 성분의 피부 밖으로의 유출을 막아주는 장벽기능, 온도조절기능, 배설기능, 호흡기능 등 다양한 생리적 역할을 감당하고 있다.

그러나, 나이가 들면 피부의 생리적 기능이 저하되고 피부의 두께가 얇아져 피부장벽으로서의 기능이 저하될 뿐만 아니라, 자외선, 대기오염, 냉난방 시설 등 외적 요인과 과도한 피로, 스트레스 및 연령에 따른 호르몬 변화 등 내적 요인에 의해 피부의 건성화가 이루어지게 되며, 이와 같은 피부 건성화는 역시 피부의 생리적 기능을 떨어뜨려 외부의 작은 자극원에 의해서도 피부자극 및 손상이 쉽게 일어나게 하는 원인이 된다.

통상적으로 성장기에는 내부 및 외부로부터의 노화 요인에 대하여 피부의 다양한 방어 시스템에 의해 쉽게 대응을 할 수 있으나, 연령이 높아짐에 따라 자외선 등의 원인으로 생성된 활성산소종에 의해 항산화 시스템이 파괴되고 이로 인해 방어능력이 현저하게 저하된다. 상기한 바와 같이, 방어능력이 저하된 경우, 피부에 산화적 스트레스가 가해지면, 지질과산화, 단백질 산화, 탄력섬유인 콜라겐과 엘라스틴의 사슬절단 및 비정상적인 교차결합, 히알루론산 사슬의 절단, DNA 산화 등 생체 구성성분의 손상을 가져오게 된다. 상기한 생체 구성성분의 손상으로 인하여, 피부 주름의 초기증상인 피부의 처짐, 거칠어짐, 건조함 등이 유발되며, 결과적으로 피부 주름이 형성되게 된다.

과거에는 여성들이 사용하는 제품이라고 생각되던 화장품은 오늘날에는 단순한 아름다움의 표현 도구만이 아닌 생활용품으로 남녀노소를 불문하고 사용하고 있으며, 산업의 발전에 따라 화장품에 대한 고급화와 다양화의 요구가 증대됨에 따라, 특별한 효과나 효능을 기대하는 기능성 제품에 대한 관심도가 높아지고 있는 실정이다.

우리나라에서 현재 인정되고 있는 기능성 화장품은 피부의 미백에 도움을 주는 미백제품, 피부의 주름개선에 도움을 주는 주름개선 제품 및 피부를 곱게 태워주거나 자외선으로부터 피부를 보호하는데 도움을 주는 자외선 차단 제품이 있다.

일반적으로 이러한 기능성 화장품은 미용 효과뿐만 아니라 신체의 구조나 기능에 영향을 주고, 예방, 개선 및 치료 작용을 하는 화장품으로 해석되고 있다. 특히, 최근에는 화장품 전체 매출에서 기능성 화장품의 매출비중이 현저하게 증가하면서, 인체에 미치는 새로운 효능 성분을 모색하고, 이를 피부에 효율적으로 이용하고자 하는 연구가 활발히 이루어지고 있다.

특히, 최근 인구고령화 추세에 따른 노인 인구의 증가 현상 및 경제 발전에 따른 삶의 질의 향상에 따라, 노화에 자연스럽게 수반된다고 하였던 피부의 주름 등을 억제 또는 제어할 수 있는 제품에 대한 요구가 증가하고 있다. 특히, 노인 인구의 사회활동 기회의 증가로 인하여, 노령 인구의 미용에 대한 관심이 증대되는 한편, 자외선 등과 같은 피부에 대한 자극 및 노화 촉진의 요인이 증대되고 있어서, 피부의 주름개선 및 예방과 관련된 기능성 화장품에 대한 수요 및 사용량이 현저하게 증가하고 있는 실정이다.

상기 피부의 주름개선과 관련하여, 피부의 탄력성이 상실되어 느슨해진 상태 즉, 피부외관에 주름살이 형성되는 원인은 자연적 노화에 의한 주름의 생성과 자외선 노출(광노화)에 의한 주름의 생성으로 크게 나눌 수 있는 데, 두 가지 원인에 의한 주름 형성 메커니즘은 아직까지 정확하게 밝혀져 있지 않은 상태이다. 상기 주름과 밀접하게 관련된 피부노화 또한 크게 두 가지로 구분되는데, 자연적 노화 즉, 시간의 흐름에 따른 생리적 노화(chronological aging)와 자외선 노출을 포함하여 바람, 온도, 습도, 담배연기 및 공해 등과 같은 외재적 요인에 의한 노화(extrinsic aging)가 있다.

상기 두 가지 주름의 원인 즉, 자연적 노화와 광노화에 의한 피부변화와 관련되어 발견되는 공통적인 현상은 진피 내의 주 구성단백질인 콜라겐 및 엘라스틴의 감소 및 변형 및 진피의 기질인 히알루론산의 감소에 의한 피부 탄력 감소이다. 특히, 지금까지의 연구결과에 의하면 상기 진피 내 주 단백질인 콜라겐 및 엘라스틴의 감소 및 변형이 주름의 생성 및 피부의 탄력저하에 직접적으로 관여하는 것으로 알려져 있다.

상기 콜라겐은 세포 외 기질(extracellular matrix)의 주요 구성 성분으로, 피부의 섬유아세포에서 생성되는 주요 기질 단백질로서 세포 외 간질에 존재한다. 또한, 생체 단백질 총 중량의 약 30%를 차지하는 중요한 단백질로서 견고한 3중 나선구조를 가지고 있다. 콜라겐은 피부, 건(tendon), 뼈 및 치아의 유기 물질의 대부분을 형성하는데, 특히 뼈와 피부의 진피에 그 포함량이 높다. 대부분의 다른 체 구조물에서는 섬유상 봉입체로서 존재한다.

상기 콜라겐의 주된 기능으로는 피부에 강도와 장력을 부여하여 피부의 기계적 견고성 확보, 결합조직의 저항력 유도, 조직의 결합, 세포 접착의 지탱, 세포 분할과 분화(유기체의 성장 혹은 상처 치유 시)의 유도 등으로 알려져 있다. 또한, 콜라겐은 상처 치유에 있어서 중요한 역할을 담당하며, 손상된 상피에서 콜라겐의 합성을 촉진시켜서 상처를 신속하게 흉터 없이 회복시킬 수 있는 것으로 알려져 있다.

특히, 진피층의 90%를 차지하고 있는 콜라겐의 감소는 피부의 노화와 매우 밀접한 관계를 가진다고 보고되어 있다. 보다 구체적으로, 생체 내에서 콜라겐과 같은 세포외 기질의 합성과 분해는 적절하게 조절되나 노화의 진행이나 자외선 조사는 콜라겐을 분해하는 효소인 기질 금속단백질 분해효소(matrix metalloproteinase, MMP)의 발현을 촉진시키며, 이러한 콜라게나제에 의한 콜라겐 분해로 인하여 피부의 탄력이 저하되고 주름이 형성된다.

또한, 지금까지 알려진 피부 노화 억제제로는 피부 노화 억제 기전에 따라 종류가 다양하다. 대표적인 예로는 콜라겐 생성 촉진제, 엘라스틴 활성화제, 히알루론산 생성 증가제, 자유라디칼 소거제, 세포 증식제, 광노화 억제제, 각질세포 증식억제제, 보습제, 유해 활성산소 생성방지제, 세포 재생물질 등이 있다.

또한, 피부 주름을 개선시키기 위한 방법으로 콜라겐을 포함시킨 화장품 또는 연고 등과 같은 피부 외용제 조성물을 사용하는 방법이 제시되었다. 이는 콜라겐의 주름 개선 및 피부 회복 효과를 이용하기 위하여 제시된 것이나, 고분자 물질인 콜라겐의 경피 흡수가 어려워 보습작용 또는 상처치유 효과를 기대할 수 없으므로 본질적인 피부기능 개선 및 상처치유의 기능을 나타낼 수 없다는 문제점이 지적되었다.

종래의 문제점을 해결하기 위해 제시된 것으로, 자유 라디칼의 형성이나 반응을 억제하는 비타민 C, 비타민 E 또는 카로티노이드와 같은 항산화제에 의해 주름의 형성을 예방하는 방법, 레티놀과 같이 진피 내의 콜라겐 생합성을 증가시키는 방법, 콜라겐을 피부내로 주입하는 방법 또는 보툴리눔 독소를 피부에 주사하는 방법 등이 제시되었다.

그러나, 상기 비타민 C, 비타민 E, 카로티노이드 및 레티놀은 모두 상온에서 쉽게 부서진다는 단점이 있고, 상기 레티놀은 처리농도가 높아지면 피부에 부작용을 나타내는 단점이 있는 것으로 알려져 있다. 또한, 콜라겐이나 보툴리눔 독소의 경우 피부적용시 자극과 발적 등의 안전성의 문제로 사용량의 제한이 있거나 효과가 미미하여 실질적으로 피부 기능 개선 또는 상처 치유의 효과를 기대할 수 없다는 단점이 지적되어 왔다.

이런 기능성 화장품의 원료와 관련하여, 기능성 소재와 관련된 최근 연구는 친환경 열풍과 맞물려 주로 천연물로부터 유래한 천연물질 소재에 집중이 되고 있으며, 주로 허브(herb)류나 한방에서 약재로 사용되던 물질들에 관해 연구가 진행되고 있다.

또한, 이러한 천연물 소재와 관련하여, 주로 허브(herb)류나 한방에서 약재로 사용되던 물질들에 관해 연구가 진행되고 있을 뿐, 해조류에 대한 연구는 일부 지역에서 제한적으로만 진행되고 있다.

따라서, 3면이 바다여서, 해양자원이 풍부한 우리나라의 지리적 환경을 고려하여, 해조류를 포함한 해양 자원으로부터 기능성 화장품의 소재, 특히 주름 예방 및 개선 효과를 가진 소재에 대한 연구의 필요성이 증대되고 있다.

KR

0750870

B

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0879283

B

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1192033

B

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10-2013-0071202

A

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10-2012-0000251

A

본 발명은 상기와 같은 종래기술의 문제점을 개선하기 위한 것으로, 천연물질을 유효성분으로 포함하는 화장료 조성물을 제공하는 것을 목적으로 한다.

상기 목적을 달성하기 위하여, 본 발명은 큰실말(Cladosiphon novae - caledoniae kylin) 추출물을 유효성분으로 포함하는 항노화 화장료 조성물을 제공한다.

상기 항노화 화장료 조성물은 주름 개선 및 미백 활성을 가진 것을 특징으로 하는 항노화 화장료 조성물일 수 있다.

상기 큰실말 추출물은 바람직하게는 큰실말 수용성 식이섬유 추출물일 수 있다.

구체적으로, 상기 큰실말 수용성 식이섬유 추출물은 큰실말에 수용매를 첨가하고, 100℃ 내지 140℃에서 10분 내지 120분 동안 고압 추출하여 조추출물을 제조하는 조추출물 제조 단계; 상기 조추출물을 2,500 rpm 내지 4,500 rpm의 조건으로 5분 내지 60분간 원심분리한 후, 상등액을 수득하는 큰실말 수용성 식이섬유 분리 단계; 및 상기 상등액에 부피 기준으로 상기 상등액의 0.5배 내지 5배에 해당하는 에탄올을 첨가하고, 1℃ 내지 10℃에서 1시간 내지 48시간 동안 추출하여 큰실말 수용성 식이섬유를 추출하는 단계를 포함하는 방법으로 제조한 것일 수 있다.

더욱 구체적으로, 상기 큰실말 수용성 식이섬유 추출물은 큰실말에 수용매를 첨가하고, 121℃에서 1시간 동안 고압 추출하여 조추출물을 제조하는 조추출물 제조 단계; 상기 조추출물을 3,500 rpm의 조건으로 20분간 원심분리한 후, 상등액을 수득하는 큰실말 수용성 식이섬유 분리 단계; 및 상기 상등액에 부피 기준으로 상기 상등액의 2배에 해당하는 에탄올을 첨가하고, 4℃에서 24시간 동안 추출하여 큰실말 수용성 식이섬유를 추출하는 단계를 포함하는 방법으로 제조한 것일 수 있다.

상기 큰실말 수용성 식이섬유를 추출하는 단계 상기 상등액에 에탄올을 첨가하고 추출하는 추출과정 및 상기 추출과정을 수행한 추출액을 여과지를 이용하여 여과하거나 3,500 rpm의 조건으로 20분간 원심분리한 다음, 침전물을 수득하는 과정 또는 상기 상등액에 에탄올을 첨가하고 추출하는 추출과정, 상기 추출과정을 수행한 추출액을 여과지를 이용하여 여과하거나 3,500 rpm의 조건으로 20분간 원심분리한 다음, 침전물을 수득하는 과정 및 상기 수득한 침전물을 동결건조하는 과정을 포함하는 방법으로 수행할 수 있다.

또한, 본 발명은 상기 목적을 달성하기 위하여 큰실말(Cladosiphon novae - caledoniae kylin) 추출물, 바람직하게는 큰실말 수용성 식이섬유 추출물을 유효성분으로 포함하는 주름 예방 또는 개선용 화장료 조성물을 제공한다.

또한, 본 발명은 큰실말로부터 항주름 활성이 가장 우수할 뿐만 아니라 추출수율도 가장 높은 큰실말 추출물의 제조방법에 관한 것이다.

구체적으로, 상기 큰실말 추출물, 바람직하게는 큰실말 수용성 식이섬유 추출물의 제조방법은 큰실말(Cladosiphon novae - caledoniae kylin)에 물을 첨가하고, 121℃에서 1시간 동안 고압 추출하여 조추출물을 제조하는 조추출물 제조 단계; 상기 조추출물을 3,500 rpm의 조건으로 20분간 원심분리한 후, 상등액을 수득하는 큰실말 수용성 식이섬유 분리 단계; 및 상기 상등액에 부피 기준으로 상기 상등액의 2배에 해당하는 에탄올을 첨가하고, 4℃에서 24시간 동안 추출하여 큰실말 수용성 식이섬유를 추출하는 단계를 포함하는 것일 수 있다.

상기 큰실말 수용성 식이섬유를 추출하는 단계는 상기 상등액에 에탄올을 첨가하고 추출하는 추출과정 및 상기 추출과정을 수행한 추출액을 여과지를 이용하여 여과하거나 3,500 rpm의 조건으로 20분간 원심분리한 다음, 침전물을 수득하는 과정 또는 상기 상등액에 에탄올을 첨가하고 추출하는 추출과정, 상기 추출과정을 수행한 추출액을 여과지를 이용하여 여과하거나 3,500 rpm의 조건으로 20분간 원심분리한 다음, 침전물을 수득하는 과정 및 상기 수득한 침전물을 동결건조하는 과정을 포함하는 방법으로 수행할 수 있다.

본 발명자들은 기존에 다양하게 연구가 진행된 육상 식물과 달리 연구가 제한적으로 진행된 해양자원에 대해 연구하던 중, 주로 후코이단을 수득하기 위해 사용하는 해조류 중에서 큰실말의 경우에는 주름 개선 활성이 우수하다는 것을 확인하였고, 더욱 연구를 진행하여 주름개선과 관련된 효능이 기존 조추출물 보다 큰실말 내에 식이섬유가 많이 포함된 추출물 즉, 후코이단을 추출하기 위해 조추출물을 제조하고 남은 부산물 중 식이섬유가 많이 포함된 추출물에서 엘라스타제 저해활성을 가지고, 이 뿐만 아니라 미백 활성도 우수한 것을 확인하여, 이로부터 본 발명을 완성하였다.

본 발명에 있어서, 화장료 조성물이란 인체를 청결 및 미화하여 매력을 더하고 용모를 밝게 변화시키거나 피부 및 모발의 건강을 유지 또는 증진하기 위하여 인체에 사용되는 조성물로 세정제(detergents) 및 화장제(cosmetics)를 포함하는 개념이다.

본 발명에 있어서, 유효성분이란 피부 상태에 적용하여 피부주름의 예방, 개선 또는 보완 효과를 제공하는 화장료 조성물의 성분을 의미한다.

이하, 본 발명을 보다 상세하게 설명한다.

본 발명은 큰실말 추출물을 유효성분으로 포함하는 화장료 조성물에 관한 것이다

상기 큰실말(Cladosiphon novae - caledoniae kylin)은 갈조류로 주로 식용 및 기능성식품 원료로 사용되고 있으며, 남태평양의 섬나라인 통가의 해안이나 일본 오키나와 해안에서 주로 서식하는 것으로 알려져 있다. 상기 큰실말은 주로 봄부터 여름에 걸쳐 채취되며, 주로 보습제나 피부보호제 등의 화장품 원료로 사용되던 물질로, 상기 큰실말에는 비타민과 함께 칼슘, 망간, 철, 아연 등의 각종 미네랄이 함유되어 있는 것으로 알려져 있다. 상기 큰실말은 최근 미역이나 다시마보다 후코이단의 함량이 4배 이상 높은 것으로 알려져, 후코이단의 생산 원재료로서 각광을 받고 있다.

상기 큰실말 추출물은 추출용매로 추출하거나 추출용매로 추출하여 제조한 추출물에 분획용매를 가하여 분획하여 제조할 수 있다.

상기 큰실말 추출물의 추출용매는 물, 유기용매 및 이들의 조합으로 이루어진 군에서 선택된 어느 하나 일 수 있고, 상기 유기용매는 탄소수 1 내지 5의 알코올, 상기 알코올 희석수 에틸아세테이트 또는 아세톤 등의 극성용매와 에테르, 클로로포름, 벤젠, 헥산 또는 디클로로메탄의 비극성 용매 도는 이들의 혼합용매 일 수 있다. 상기 탄소수 1 내지 5의 알코올 메탄올, 에탄올, 프로판올, 부탄올, 이소프로판올 등 일 수 있으나, 이에 한정되는 것은 아니다. 또한 알코올 희석수는 알코올 50%(v/v) 내지 99.9%(v/v)로 물에 희석한 것 일 수 있다.

상기 큰실말 추출물의 추출용매는 바람직하게는 물, 탄소수 1내지 5의 알코올, 알코올 희석수 및 이들의 혼합물로 이루어진 군에서 선택된 1종 이상일 수 있고, 더욱 바람직하게는 물, 탄소수 1 내지 4의 알코올 및 이들의 혼합물로 이루어진 군에서 선택된 어느 하나일 수 있으며, 더더욱 바람직하게는 물 일 수 있다.

상기 큰실말 추출물의 추출방법은 통상의 식물 추출물의 제조방법에 따라 제조된 것 일 수 있고, 일 예로 냉침 추출법, 온침 추출법, 열 추출법, 초음파 추출법 등 일 수 있으며, 통상의 추출기기, 초음파 분쇄 추출기 또는 분획기를 이용할 수 있다.

상기 큰실말 추출물의 추출시간은 특별히 한정되지 않으나, 10분 이상 추출할 수 있고, 일 예로 10분 내지 120분 또는 30분 내지 90분 또는 60분 동안 추출할 수 있다.

상기 큰실말 추출물은 바람직하게는 열수 추출법으로 수행할 수 있으며, 상기 열수 추출의 추출온도는 100℃ 내지 140℃ 또는 110℃ 내지 130℃ 또는 121℃에서 행해질 수 있다.

상기 분획물은 추출용매로 추출한 추출물을 헥산, 메틸렌클로라이드, 아세톤, 에틸아세테이트, 에틸에테르, 클로로포름, 물 및 이들의 혼합물로 이루어진 군으로부터 선택된 어느 하나의 용매, 바람직하게는 헥산, 메틸렌클로라이드 및 에틸아세테이트로 이루어진 군으로부터 선택된 1종 이상의 용매로 분획과정을 더욱 실시한 것 일 수 있다.

상기 분획 시 용매는 2종 이상 사용할 수 있으며, 용매의 극성에 따라 순차적으로 사용하거나 혼합하여 사용하여, 각 추출물의 분획물을 제조할 수 있다.

상기 분획과정은 일 예로, 4℃ 내지 120℃, 또는 50℃ 내지 100℃, 또는 60℃ 내지 95℃에서 수행될 수 있으나, 이에 한정되지는 않는다.

상기 큰실말 추출물 또는 상기 분획과정을 수행하여 수득한 분획물은 이후 여과하거나 농축 또는 건조과정을 수행하여 용매를 제거할 수 있으며, 여과, 농축 및 건조를 모두 수행할 수 있다. 구체적으로 상기 여과는 여과지를 이용하거나 감압여과기를 이용할 수 있으며, 상기 농축은 감압 농축기, 일 예로 회전 증발기를 이용하여 감압 농축할 수 있으며, 상기 건조는 일 예로 동결건조법으로 수행할 수 있다.

상기 큰실말 추출물, 바람직하게는 큰실말 수용성 식이섬유 추출물은 상기 추출 후에 여과공정, 농축공정 또는 건조공정을 선택적으로 추가할 수 있으며, 상기 여과공정은 여과지를 이용하여 수행할 수 있고, 상기 농축공정은 감압농축 등을 통하여 수행할 수 있으며, 상기 건조공정은 냉동건조 등의 방법으로 수행할 수 있다.

상기 큰실말 수용성 식이섬유 추출물은 바람직하게는 큰실말에 수용매를 첨가하고, 100℃ 내지 140℃에서 10분 내지 120분 동안 고압 추출하여 조추출물을 제조하는 조추출물 제조 단계; 상기 조추출물을 2,500 rpm 내지 4,500 rpm의 조건으로 5분 내지 60분간 원심분리한 후, 상등액을 수득하는 큰실말 수용성 식이섬유 분리 단계; 및 상기 상등액에 부피 기준으로 상기 상등액의 0.5배 내지 5배에 해당하는 에탄올을 첨가하고, 1℃ 내지 10℃에서 1시간 내지 48시간 동안 추출하여 큰실말 수용성 식이섬유를 추출하는 단계를 포함하는 방법으로 제조한 것일 수 있다.

더욱 바람직하게는, 상기 큰실말 수용성 식이섬유 추출물은 큰실말에 수용매를 첨가하고, 121℃에서 1시간 동안 고압 추출하여 조추출물을 제조하는 조추출물 제조 단계; 상기 조추출물을 3,500 rpm의 조건으로 20분간 원심분리한 후, 상등액을 수득하는 큰실말 수용성 식이섬유 분리 단계; 및 상기 상등액에 부피 기준으로 상기 상등액의 2배에 해당하는 에탄올을 첨가하고, 4℃에서 24시간 동안 추출하여 큰실말 수용성 식이섬유를 추출하는 단계를 포함하는 방법으로 제조한 것일 수 있다.

상기한 바와 같이, 엘라스타제를 저해할 수 있는 경우, 주름 예방 또는 개선 효과가 우수할 뿐만 아니라, 실험을 통하여 확인한 결과, 다른 추출조건에 비하여 세포독성도 적고, 미백효과도 우수하며, 항산화 활성도 우수한 것으로 확인되었고, 천연물질인 해조류 즉, 큰실말 및 물 또는 주정에 의해 제조된 물질이 유효성분이므로 부작용도 문제되지 않고, 안전하다는 점에서, 본 발명의 화장료 조성물은 항노화 활성 또는 주름 개선 활성이 요구되는 피부에 적용될 수 있다

따라서, 본 발명의 화장료 조성물은 항노화 화장료 조성물, 바람직하게는 주름 개선 및 미백 활성을 가진 것을 특징으로 하는 항노화 화장료 조성물일 수 있다.

또한, 본 발명의 화장료 조성물은 주름개선용 화장료 조성물, 주름 예방 또는 개선용 화장료 조성물 또는 항주름용 화장료 조성물일 수 있다.

상기 화장료 조성물은 피부에 상기 큰실말 아임계수 추출물이 전체 조성물에 대하여 0.0001 중량% 내지 50 중량%, 바람직하게는 0.001 중량% 내지 30중량% 포함될 수 있다. 즉, 큰실말 아임계수 추출물의 함량은 피부 관련 기능성, 구체적으로 주름 개선 및 미백 활성에 의한 항노화 효과 또는 주름 방지 효과의 달성을 위하여 최소치 이상의 함량이어야 하나, 피부자극 여부 및 과량 첨가에 따른 사용감 저하 및 각종 제형에의 적용 가능성을 고려하여, 상기 범위 이내에서 자유롭게 조절될 수 있다. 이때, 유효성분의 함량 및 추가 성분의 함량은 제형 또는 화장료 조성물에 함유되는 성분들의 함량에 따라 상기 범위 내에서 적절히 조절될 수 있다.

본 발명의 화장료 조성물은 피부 외용연고, 기초화장품, 메이크업 화장품, 바디 화장품 또는 면도용 화장품 등의 용도로 제공될 수 있으며, 상기 기초화장품의 예로는 에센스, 로션, 크림, 젤, 화장수, 팩, 마사지 크림, 유액 등이 있을 수 있고, 상기 메이크업 화장품의 예로는 파운데이션, 립스틱, 아이새도, 아이라이너, 마스카라, 아이브로우 펜슬, 메이크업 베이스 등이 있을 수 있으며, 바디 화장품으로는 비누, 액체 세정제, 입욕제, 썬 스크린 크림, 썬 오일 등이 있을 수 있고, 면도용 화장품으로는 애프터셰이브로션, 셰이빙 크림 등이 있다.

본 발명의 화장료 조성물에는 유효성분으로 큰실말 아임계수 추출물을 포함하는 것 외에, 추가로 항노화 효과 또는 주름개선 효과가 있는 기능성 물질이나 다른 기능성 구체적으로, UV차단 또는 보습효과가 있는 기능성 물질이나 물성 개선을 위한 부형제, 희석제 등의 물질이 추가로 포함될 수 있다.

일 예로, 상기 화장료 조성물에는 물성 개선을 위하여 향료, 색소, 살균제, 산화방지제, 방부제, 보습제, 점증제, 무기염류 또는 합성 고분자 물질 등이 추가로 첨가될 수 있다. 이외에 첨가해도 되는 배합 성분으로 유지 성분, 에몰리엔트제, 계면 활성제, 유기 안료, 무기 안료, 유기 분체, 자외선 흡수제, pH 조정제, 알콜, 혈행 촉진제, 냉감제, 제한제 또는 정제수 등일 수 있다.

또한, 상기 화장료 조성물은 수용성 비타민, 유용성 비타민, 고분자 펩타이드, 고분자 다당, 스핑고 지질 및 해초 엑기스로 이루어진 군 중에서 선택된 1종 이상을 더욱 포함할 수 있다.

상기 유효성분 이외의 첨가해도 되는 배합 성분은 이에 한정되지 않으며, 상기 어느 성분도 본 발명의 목적 및 효과를 손상시키지 않는 범위 내에서 배합 가능하다.

또한, 상기 화장료 조성물은 용액, 유화물, 점성형 혼합물 등의 형상을 취할 수 있으며, 당업계에서 통상적으로 제조되는 어떠한 제형 일 예로 유액, 크림, 화장수, 팩, 파운데이션, 로션, 미용액, 모발화장료 등의 제형일 수 있다.

보다 구체적으로 본 발명의 화장료 조성물은 스킨로션, 스킨소프너, 스킨토너, 아스트리젠트, 로션, 밀크로션, 모이스쳐 로션, 영양로션, 맛사지크림, 영양크림, 모이스처크림, 핸드크림, 파운데이션, 에센스, 영양에센스, 팩, 비누, 클렌징폼, 클렌징로션, 클렌징크림, 바디로션 및 바디클린저의 제형을 포함할 수 있다.

일 예로, 본 발명의 제형이 페이스트, 크림 또는 겔인 경우에는 담체 성분으로서 동물섬유, 식물섬유, 왁스, 파라핀, 전분, 트라칸트, 셀룰로오스 유도체, 폴리에틸렌 글리콜, 실리콘, 벤토나이트, 실리카, 탈크 또는 산화아연 등이 이용될 수 있다.

본 발명의 제형이 파우더 또는 스프레이인 경우에는 담체 성분으로서 락토스, 탈크, 실리카, 알루미늄 히드록시드, 칼슘 실리케이트 또는 폴리아미드 파우더가 이용될 수 있으며, 특히 본 발명의 제형이 스프레이인 경우에는 추가적으로 클로로플루오로히드로카본, 프로판/부탄 또는 디메틸 에테르와 같은 추진체를 포함할 수 있다.

본 발명의 제형이 용액 또는 유탁액의 경우에는 담체 성분으로서 용매, 용매화제, 또는 유탁화제가 이용되고, 예컨대 물, 에탄올, 이소프로판올, 에틸 카보네이트, 에틸 아세테이트, 벤질 알코올, 벤질 벤조에이트, 프로필렌 글리콜, 1,3-부틸글리콜 오일, 글리세롤 지방족 에스테르, 폴리에틸렌 글리콜 또는 소르비탄의 지방산 에스테르일 수 있다.

본 발명의 제형이 현탁액인 경우에는 담체 성분으로서 물, 에탄올 또는 프로필렌 글리콜과 같은 액상 희석제, 에톡실화 이소스테아릴 알코올, 폴리옥시에틸렌 소르비톨 에스테르 및 폴리옥시에틸렌 소르비탄 에스테르와 같은 현탁제, 미소결정성 셀룰로오스, 알루미늄 메타히드록시드, 벤토나이트, 아가 또는 트라칸트 등이 이용될 수 있다.

본 발명의 제형이 계면-활성제 함유 클린징인 경우에는 담체 성분으로서 지방족 알코올 설페이트, 지방족 알코올 에테르 설페이트, 설포숙신산 모노에스테르, 이세티오네이트, 이미다졸리늄 유도체, 메틸타우레이트, 사르코시네이트, 지방산 아미드 에테르 설페이트, 알킬아미도베타인, 지방족 알코올, 지방산 글리세리드, 지방산 디에탄올아미드, 식물성 유, 리놀린 유도체 또는 에톡실화 글리세롤 지방산 에스테르 등이 이용될 수 있다.

상기한 바와 같이, 다른 추출 방법에서 추출된 큰실말 추출물에 비하여, 본 발명의 제조방법에 의해 제조된 큰실말 수용성 식이섬유 추출물의 경우, 엘라스타제 저해 활성 효과가 우수하며, 천연물질 유래의 물질이어서 부작용이 문제되지 않고, 안전할 수 있으므로, 화장품의 유효성분으로 사용될 수 있다.

이러한 측면에서 본 발명은 타이로시나아제 저해 활성 및 엘라스타제 저해 활성을 가진 큰실말 추출물의 제조방법에 관한 것일 수 있다.

본 발명의 큰실말 추출물의 제조방법에 의해 제조된 추출물은 항주름 활성이 가장 우수할 뿐만 아니라, 본 발명의 제조방법은 다른 추출방법 또는 다른 추출조건에 비하여 추출수율도 가장 높다는 장점을 갖는다.

구체적으로, 상기 큰실말 추출물의 제조방법은 큰실말(Cladosiphon novae - caledoniae kylin)을 분쇄하여 큰실말 분쇄물을 제조하는 단계; 상기 큰실말 분쇄물에 물을 첨가하고, 100℃ 내지 140℃에서 10분 내지 120분 동안 고압 추출하여 조추출물을 제조하는 조추출물 제조 단계; 상기 조추출물을 2,500 rpm 내지 4,500 rpm의 조건으로 5분 내지 60분간 원심분리한 후, 상등액을 수득하는 큰실말 수용성 식이섬유 분리 단계; 및 상기 상등액에 부피 기준으로 상기 상등액의 0.5배 내지 5배에 해당하는 에탄올을 첨가하고, 1℃ 내지 10℃에서 1시간 내지 48시간 동안 추출하여 큰실말 수용성 식이섬유를 추출하는 단계를 포함하는 타이로시나아제 저해 활성 및 엘라스타제 저해 활성을 가진 큰실말 추출물 제조방법일 수 있다.

상기 상기 조추출물 제조 단계는 121℃에서 1시간 동안 고압 추출하는 것을 특징으로 하고, 상기 큰실말 수용성 식이섬유 분리 단계는 상기 조추출물을 3,500 rpm의 조건으로 20분간 원심분리한 후, 상등액을 수득하는 방법으로 수행하는 것을 특징으로 하며, 상기 큰실말 수용성 식이섬유를 추출하는 단계는 상기 상등액에 부피 기준으로 상기 상등액의 2배에 해당하는 에탄올을 첨가하고, 4℃에서 24시간 동안 추출하는 방법으로 수행할 수 있다.

상기 큰실말 수용성 식이섬유를 추출하는 단계는 상기 상등액에 에탄올을 첨가하고 추출하는 추출과정, 상기 추출과정을 수행한 추출액을 여과지를 이용하여 여과하한 다음, 침전물을 수득하는 과정 및 상기 수득한 침전물을 동결건조하는 과정을 포함하는 방법으로 수행할 수 있다.

상기한 바와 같이, 본 발명의 제조방법을 이용하여 타이로시나아제 저해 활성 및 엘라스타제 저해 활성을 가진 큰실말 추출물 제조방법은 기존 방법에 비하여, 항주름 활성도 현저하게 개선되고, 수율도 상승되는 장점이 있다.

본 발명의 큰실말 추출물은 추출방법에 따라 에스터라제 저해 활성 즉, 항주름 활성을 개선시킬 수 있을 뿐만 아니라, 추출수율도 개선되고, 미백 활성도 개선되며, 상한화 활성도 우수하고, 추출물의 재료인 큰실말은 식품으로 사용되던 해조류와 가장 안전한 용매인 수용매 및 주정을 이용하는 것으로 부작용 등에 대한 안전성도 보장되고, 실험결과에 의해 독성도 없는 것으로 확인되었으며, 본 발명의 화장료 조성물은 산업적 측면에서 그 효과가 매우 크다 할 것이다.

도 1은 본 발명의 일 실시예에 따른, 추출용매에 따른 큰실말 추출물의 식이섬유 함량을 측정한 결과로, 가로축은 추출용매에 따른 추출물의 종류, 구체적으로 수용매 추출물(control), 산성 용액(0.05N HCl) 또는 염기성 용액(sodium salt, 0.02N Na2EDTA)을 의미하고, 세로축은 함량 즉, 식이섬유의 함량(g)을 의미한다.
도 2는 본 발명의 일 실시예에 따른 각 추출물의 종류에 따른 타이로시나아제 저해 활성을 나타낸 그래프로, 가로축의 수치는 추출물 처리량을 의미하고, 세로축은 타이로시나아제 활성을 의미하며, 도 2a는 큰실말 조추출물(MC)을 처리한 것이고, 도 2b는 큰실말 불용성 추출물(MI)을 처리한 것이며, 도 2c는 큰실말 수용성 식이섬유 추출물(MS)을 처리한 것을 나타낸다.
도 3은 본 발명의 일 실시예에 따른 각 추출물의 종류에 따른 세포독성을 확인한 그래프로, 가로축의 수치는 추출물 투여량을 의미하고, 세로축은 대조군(0% 투여) 대비 세포 생존률을 의마하며, MS(Mozuku Soluble)는 큰실말 가용성 식이섬유 추출물을 의미하고, MI(Mozuku insoluble)는 큰실말 가용성 식이섬유 추출물을 의미한다.

이하 본 발명의 실시예를 기재한다. 하기 실시예는 본 발명을 예시하기 위한 것일 뿐 본 발명의 권리범위가 하기 실시예에 의해 한정되는 것은 아니다. 그러나, 하기 제조예 및 실시예는 본 발명의 이해를 돕기 위하여 예시한 것을 뿐, 여러 가지 다른 형태로 변형될 수 있으며, 본 발명의 범위가 하기 예들에 한정되는 것은 아니다.

모든 실험결과는 최소한 3회 이상 반복하여 평균치로 표시하였고, 각 군과의 비교는 ANOVA test를 이용하여 각각 p<0.05인 경우를 유의성 있는 것으로 판정하였다.

< 실시예 1> 큰실말 추출물의 제조

본 연구에 사용한 큰실말(Cladosiphon novae - caledoniae kylin)은 남태평양 중부에 위치한 통가(The Kingdom of Tonga)에서 2013년 (주)만승수산(MS bioglobal, 부산, 대한민국)이 수입한 큰실말을 사용하였다. 상기 큰실말은 드라이오븐을 이용하여, 60℃에서 24시간 건조한 후, 분쇄기(ball mill, Daesung Artlon, 대한민국)를 사용하여 파쇄하여 분말로 제조하였다. 상기 큰실말 분말은 실험 전까지 -20℃에 보관하면서 사용하였다.

상기 큰실말 분말의 추출물은 추출용매를 달리하면서 제조하였다. 구체적으로, 큰실말 추출물은 큰실말 분말 시료 2 g에 염기(Na₂EDTA) 및 산(HCl) 용액과 수용매(3차 증류수)를 각각 100 ml 첨가하고, 121℃의 조건에서 1시간 동안 열수 추출하는 방법으로 제조하였다. 상기 용매 추출물은 각각 원심분리기를 이용하여 3,500 rpm의 조건으로 20분 동안 원심분리한 후, 상등액만을 분리하여, 수용성 식이섬유를 수득하였다. 상기 상등액을 분리한 남은 침전물은 동결건조 후, 함량을 측정하여, 불용성 식이섬유 함량으로 사용하였다.

상기 각각 용매 추출물로부터 수득한 각각의 수용성 식이섬유를 포함한 상등액에 각 상등액 부피 대비 2배 부피의 100% 에탄올을 첨가하고, 4℃의 조건에서 24시간 동안 냉장 보관하였으며, 이 후, 여과지를 이용하여 여과하여 상등액을 제거하고 침전물을 수득한 후, 동결건조하여 최종적으로 수용성 식이섬유를 수득하여, 이 함량을 제조하였다. 상기 측정결과를 도 1에 나타내었다.

상기 도 1에 나타낸 바와 같이, 3차 증류수를 이용한 열수 추출물에는 0.93 g/L의 불용성 식이섬유와 0.175 g/L의 수용성 식이섬유가 추출됨이 확인되었다. 또한, 0.05N HCl를 이용한 추출물에는 0.6 g/L의 불용성 식이섬유와 0.06 g/L의 수용성 식이섬유가 추출됨이 확인되었다. 또한, 0.02N Na₂EDTA를 이용한 추출물에는 0.87g/L의 불용성 식이섬유와 0.035 g/L의 수용성 식이섬유가 추출됨이 확인되었다. 상기 결과로부터, 기존에 산 또는 염기를 이용하는 것에 비하여 물을 이용하여 열수 추출하는 경우, 식이섬유 추출에 더 효과적인 것, 특히 수용성 식이섬유 추출에 현저하게 효과적인 것이 확인되었다.

상기 가장 추출수율이 우수한 것으로 확인된 물을 이용한 추출법을 기준으로, 큰실말 열수 추출물(Mozuku Crude, MC), 상기 큰실말 열수 추출물 상등액에 에탄올을 첨가하고 추출된 큰실말 가용성 식이섬유 추출물(Mozuku Soluble, MS) 및 상등액 분리 후 남은 침전물인 큰실말 불용성 식이섬유 추출물 (Mozuku Insoluble, MI)을 시료로 사용하였다.

< 실시예 2> 추출법에 따른 큰실말 추출물의 항노화활성 확인

상기 실시예 1에서 제조된 큰실말 추출물에 대하여 추출법, 추출용매 및 추출조건에 따른 항주름 활성을 확인하였고, 추가로 세포독성을 확인하였다.

2-1. 타이로시나아제 저해 효과를 통한 미백활성 측정

타이로신(Tyrosine)에 대한 타이로시나아제 저해 활성(tyrosinase inhibition assay)은 다음과 같이 측정하였다.

우선, 0.1 M potassium phosphate buffer (pH 6.8) 200 ?, 상기 실시예 1에서 제조된 추출물 시료 20 ?, tyrosinase(1,000~1,500 U/mL) 20 ?에 1.5 mM L-tyrosine 20 ?를 혼합하여 37℃에서 15분 동안 반응 시킨 후, ELISA Multiscan Reader (Thermo scientific, Finland)을 이용하여 490 nm에서 흡광도를 측정하였다.

타이로시나아제 저해 활성은 하기 식 1로 계산하였고, 표준물질로는 arbutin (Sigma, St. Louis, MO. USA)을 사용하였다.

[계산식 1]

Tyrosinase inhibition ratio(%) = 〔1-(Exp-Blank)/Control〕ⅹ 100

상기 실험결과를 측정하여 도 2에 나타내었다.

상기 도 2(L-tyrosine) 에 나타낸 바와 같이, 측정결과 큰실말 추출물은 농도 의존적으로 활성을 억제하는 경향을 나타내었다. 추출물 종류에 따른 항주름 활성과 관련하여, 양성대조군인 arbutin 200 ug/mL 처리 시 35.7% 효소활성 억제능이 확인되었고, 큰실말 열수 추출물에서는 20.9%, 큰실말 불용성 식이섬유 추출물에서는 20.3%로 양성대조군 보다 낮은 효소활성 억제 효과를 나타낸 반면, 큰실말 가용성 식이섬유 추출물에서는 49.8%의 타이로시나아제 억제 효과를 나타내어, 양성대조군의 약 150% 억제 효과를 갖는 것으로 평가되어, 매우 우수한 미백 활성을 갖는 것으로 확인되었다.

큰실말 추출물이 멜라닌 합성에 미치는 영향을 관찰한 결과 농도 의존적으로 타이로시나아제 저해 활성을 나타내었고, 대조군인 arbutin보다 미백 효능이 우수한 것으로 나타났다. 따라서, 큰실말 추출물은 미백효과가 매우 우수함을 알 수 있었고 화장품 소재로서의 좋은 재료임을 확인할 수 있었다.

2-2. 엘라스타제 저해능을 통한 항주름활성 측정

피부는 주름 증가와 탄력감소, 색소침착 등이 노화의 형태로 나타나며 주름이 가장 대표적인 노화 현상이다. 엘라스타제는 진피 내 피부 탄력을 유지하는 엘라스틴(elastin)을 분해함으로써 피부의 탄력성 저하와 주름 형성과 거칠어짐이 발생하여 노화를 촉진 한다. 따라서, 피부 주름의 생성 원인 중 하나로 알려진 엘라스타제에 대한 저해활성을 통하여 큰실말 추출물의 항주름활성을 측정하기 위해, 상기 실시예 1에서 제조된 큰실말 추출물에 대하여 엘라스타제 저해활성을 측정하였다.

엘라스타제 저해활성 측정(Elastase inhibition assay)을 위하여 엘라스타제 는 porcine pancreatic elastase를 사용하였고, 실험은 다음과 같은 방법으로 진행하였다.

우선, 50 mM Tris-HCl buffer (pH 8.6)를 넣어 반응조건을 만든 다음, 실시예 1에서 제조된 각 농도 별 추출물 100 ?, porcine pancreatic elastase 20 ? (2,500 U/mL)에 특이적인 기질인 8.8 mM STANA (N-succinyl-(Ala)3-p-nitroanilide) 20 ?를 혼합하여 25℃ 조건에서 15분 동안 반응 시킨 후, ELISA Multiscan Reader(Thermo scientific, Finland)을 이용하여 410 nm에서 흡광도를 측정하였다.

엘라스타제 저해 활성은 하기 식 2로 계산하였고, 표준물질로는 urosolic을 사용하였다. 상기 측정 결과를 하기 표 1에 나타내었다.

[계산식 2]

엘라스타제 저해도 (%) = 〔1-(Exp-Blank)/Control〕ⅹ 100

구분	조추출물 (MC)	수용성 식이섬유(MS)	불용성 식이섬유(MI)	양성대조군 (Ursolic acid)
엘라스타제 저해 활성(%)	17.1	18.8	17.6	56.5

상기 표 1에 나타낸 바와 같이, 측정결과 큰실말 추출물은 농도 의존적으로 활성을 억제하는 경향을 나타내었다. 또한, 양성대조군인 Ursolic acid 200 ug/mL 처리 시 56.5% 효소활성 억제능이 확인되었고, 큰실말 조추출물에서는 17.1%, 큰실말 불용성 식이섬유 추출물에서는 17.6%을 나타내었고, 큰실말 가용성 식이섬유 추출물에서는 18.8%의 엘라스타아제 저해 효과를 나타내어, 항주름 활성에서도 추출물 중 수용성 식이섬유 추출물이 가장 우수한 항주름 활성을 갖는 것으로 확인되었다.

2-3. 세포독성 측정

상기 실시예 1에서 제조된 큰실말 추출물에 대하여 세포독성을 측정하기 위해, 멜라닌 세포(B16F10 mouse melanoma cell line)를 이용하여 MTT assay를 수행하였다.

구체적으로, B16F10 mouse melanoma cell line을 한국 세포주 은행에서 분양 받아 100 units/mL penicillin-streptomycin과 10% PBS가 함유된 DMEM 배지를 사용하여 배양하였다. 상기 배양된 B16F10 mouse melanoma cell line을 96 well plate에 1 × 10⁴cells/well의 농도로 분주하여, 24시간 동안 배양하여 부착 및 안정화 시킨 후, 농도별로 희석한 실시예 1의 큰실말 수용성 식이섬유 추출물과 큰실말 불용성 식이섬유 추출물 시료를 처리하고 24 시간 동안 추가 배양하였다. PBS에 5 mg/mL의 농도로 용해시켜 제조한 MTT 용액을 각각의 well에 10 ?씩 첨가하여 37℃ 및 5% CO₂조건에서 4시간 동안 반응시켜 MTT가 환원되도록 하였다. 배지를 제거한 후, 각 well에 100 ?의 DMSO를 첨가하여 생성된 formazan 결정을 용해시켜 570 nm에서 흡광도를 측정하였으며, 시료 대신 PBS를 사용한 Blank의 흡광도를 기준으로 세포의 생존률(cell viability)을 산출하였다. 산출 결과를 도 3에 나타내었다.

상기 도 3에 나타낸 바와 같이, 큰실말 수용성 식이섬유 추출물의 경우 50 ?/mL의 농도일 때 80%, 100 ?/mL의 농도에서는 78%의 세포활성을 나타낸 반면, 큰실말 불용성 식이섬유 추출물은 50 ?/mL의 농도일 때 60%, 100 ?/mL의 농도에서는 59%의 세포활성을 나타내어, 세포독성이 더 강한 것으로 확인되었다.

따라서, 큰실말 수용성 식이섬유 추출물은 미백활성과 항주름 활성이 우수하면서도, 세포독성도 낮아 안전한 것으로 평가되어, 화장품 소재로서 우수한 기능을 갖는 것으로 확인되었다.

Claims

큰실말(Cladosiphon novae - caledoniae kylin) 추출물을 유효성분으로 포함하는 항노화 화장료 조성물.
제1항에 있어서,
상기 항노화 화장료 조성물은 주름 개선 및 미백 활성을 가진 것을 특징으로 하는 항노화 화장료 조성물.
제2항에 있어서,
상기 큰실말 추출물은 큰실말 수용성 식이섬유 추출물인 것을 특징으로 하는 항노화 화장료 조성물.
제3항에 있어서,
상기 큰실말 수용성 식이섬유 추출물은 큰실말에 수용매를 첨가하고, 100℃ 내지 140℃에서 10분 내지 120분 동안 고압 추출하여 조추출물을 제조하는 조추출물 제조 단계; 상기 조추출물을 2,500 rpm 내지 4,500 rpm의 조건으로 5분 내지 60분간 원심분리한 후, 상등액을 수득하는 큰실말 수용성 식이섬유 분리 단계; 및 상기 상등액에 부피 기준으로 상기 상등액의 0.5배 내지 5배에 해당하는 에탄올을 첨가하고, 1℃ 내지 10℃에서 1시간 내지 48시간 동안 추출하여 큰실말 수용성 식이섬유를 추출하는 단계를 포함하는 방법으로 제조하는 것을 특징으로 항노화 화장료 조성물.
제3항에 있어서,
상기 큰실말 수용성 식이섬유 추출물은 큰실말에 수용매를 첨가하고, 121℃에서 1시간 동안 고압 추출하여 조추출물을 제조하는 조추출물 제조 단계; 상기 조추출물을 3,500 rpm의 조건으로 20분간 원심분리한 후, 상등액을 수득하는 큰실말 수용성 식이섬유 분리 단계; 및 상기 상등액에 부피 기준으로 상기 상등액의 2배에 해당하는 에탄올을 첨가하고, 4℃에서 24시간 동안 추출하여 큰실말 수용성 식이섬유를 추출하는 단계를 포함하는 방법으로 제조하는 것을 특징으로 항노화 화장료 조성물.
큰실말(Cladosiphon novae - caledoniae kylin) 추출물을 유효성분으로 포함하는 주름 예방 또는 개선용 화장료 조성물.
제6항에 있어서,
상기 큰실말 추출물은 큰실말에 수용매를 첨가하고, 100℃ 내지 140℃에서 10분 내지 120분 동안 고압 추출하여 조추출물을 제조하는 조추출물 제조 단계; 상기 조추출물을 2,500 rpm 내지 4,500 rpm의 조건으로 5분 내지 60분간 원심분리한 후, 상등액을 수득하는 큰실말 수용성 식이섬유 분리 단계; 및 상기 상등액에 부피 기준으로 상기 상등액의 0.5배 내지 5배에 해당하는 에탄올을 첨가하고, 1℃ 내지 10℃에서 1시간 내지 48시간 동안 추출하여 큰실말 수용성 식이섬유를 추출하는 단계를 포함하는 방법으로 제조하는 것인 주름 예방 또는 개선용 화장료 조성물.
제7항에 있어서,
상기 큰실말 추출물은 식이섬유 추출물은 큰실말에 수용매를 첨가하고, 121℃에서 1시간 동안 고압 추출하여 조추출물을 제조하는 조추출물 제조 단계; 상기 조추출물을 3,500 rpm의 조건으로 20분간 원심분리한 후, 상등액을 수득하는 큰실말 수용성 식이섬유 분리 단계; 및 상기 상등액에 부피 기준으로 상기 상등액의 2배에 해당하는 에탄올을 첨가하고, 4℃에서 24시간 동안 추출하여 큰실말 수용성 식이섬유를 추출하는 단계를 포함하는 방법으로 제조하는 것인 주름 예방 또는 개선용 화장료 조성물.
큰실말(Cladosiphon novae - caledoniae kylin)을 분쇄하여 큰실말 분쇄물을 제조하는 단계; 상기 큰실말 분쇄물에 물을 첨가하고, 100℃ 내지 140℃에서 10분 내지 120분 동안 고압 추출하여 조추출물을 제조하는 조추출물 제조 단계; 상기 조추출물을 2,500 rpm 내지 4,500 rpm의 조건으로 5분 내지 60분간 원심분리한 후, 상등액을 수득하는 큰실말 수용성 식이섬유 분리 단계; 및 상기 상등액에 부피 기준으로 상기 상등액의 0.5배 내지 5배에 해당하는 에탄올을 첨가하고, 1℃ 내지 10℃에서 1시간 내지 48시간 동안 추출하여 큰실말 수용성 식이섬유를 추출하는 단계
를 포함하는 타이로시나아제 저해 활성 및 엘라스타제 저해 활성을 가진 큰실말 추출물 제조방법.
제9항에 있어서,
상기 조추출물 제조 단계는 121℃에서 1시간 동안 고압 추출하는 것을 특징으로 하고, 상기 큰실말 수용성 식이섬유 분리 단계는 상기 조추출물을 3,500 rpm의 조건으로 20분간 원심분리한 후, 상등액을 수득하는 방법으로 수행하는 것을 특징으로 하며, 상기 큰실말 수용성 식이섬유를 추출하는 단계는 상기 상등액에 부피 기준으로 상기 상등액의 2배에 해당하는 에탄올을 첨가하고, 4℃에서 24시간 동안 추출하는 방법으로 수행하는 것을 특징으로 하는
타이로시나아제 저해 활성 및 엘라스타제 저해 활성을 가진 큰실말 추출물 제조방법.
제10항에 있어서,
상기 큰실말 수용성 식이섬유를 추출하는 단계는 상기 상등액에 에탄올을 첨가하고 추출하는 추출과정, 상기 추출과정을 수행한 추출액을 여과지를 이용하여 여과하한 다음, 침전물을 수득하는 과정 및 상기 수득한 침전물을 동결건조하는 과정을 포함하는 방법으로 수행하는 것인 주름 예방 또는 개선능을 가진 큰실말 아임계수 추출물 제조방법.