KR20150022434A

KR20150022434A - 나노 에멀젼 제조방법

Info

Publication number: KR20150022434A
Application number: KR20130100283A
Authority: KR
Inventors: 이준배; 박천호; 윤명석; 유희창
Original assignee: 코스맥스 주식회사
Priority date: 2013-08-23
Filing date: 2013-08-23
Publication date: 2015-03-04
Also published as: WO2015026095A1; US9687423B2; US20160199269A1; CN105813632A; CN105813632B; KR101529480B1

Abstract

본 발명은 세라마이드 또는 그 유도체, 콜레스테롤, 비이온성 계면활성제, 인지질, 폴리올로 조성된 유상부(A), 향 성분, 비이온성 계면활성제, 알코올로 조성된 향 파트(B) 및 폴리올, 기타 수용성 효능성분으로 조성된 수상부(C)를 혼합하여 제조되는 제조방법에 관한 것이다.
본 발명에 따르면, 본 발명의 제조방법으로 나노 에멀젼를 제조할 경우, 고압유화 과정 없이 비이온성 계면활성제를 사용하기 때문에 공정시간 및 비용을 줄일 수 있을 뿐만 아니라 다른 가용화 제형보다 온도변화에 안정하다는 것을 확인하고 본 발명을 완성하게 되었다.

Description

나노 에멀젼 제조방법{Preparing methods nano emulsion}

본 발명은 나노 에멀젼 제조방법에 관한 것으로, 더욱 구체적으로 세라마이드 또는 그 유도체, 콜레스테롤, 비이온성 계면활성제, 인지질, 폴리올로 조성된 유상부(A), 향 성분, 비이온성 계면활성제, 알코올로 조성된 향 파트(B) 및 폴리올, 기타 수용성 효능성분으로 조성된 수상부(C)를 혼합하여 제조되는 나노 에멀젼 제조방법에 관한 것이다.

외부 유해물질의 피부 침투에 대항하는 피부장벽은 주로 피부 중 표피의 각질층에 존재한다. 이러한 각질층은 외부로부터의 물리적 손상 및 화학물질로부터 인체를 보호하고 인체 내의 수분이 증발하는 것을 차단하여 피부의 건조한 상태를 막아준다. 각질층의 구조 중 지질 성분에 대한 연구는 이전부터 활발하게 진행되어, Elias 등은 각질층 내의 지질성분이 형성하는 라멜라 구조가 피부장벽기능의 근원이라는 연구결과를 보고하였다(J. Invest. Dermatol. 69: 535-546, 1977). 또한, 실험방법과 피부조직의 위치 등에 따라 차이는 있지만, 세포간 지질은 대략적으로 세라마이드 50%, 콜레스테롤 20 ~ 25%, 자유지방산 20 ~ 25%, 10% 정도의 콜레스테롤 에스테르, 1 ~ 2% 콜레스테롤 설페이트 및 소량의 인지질로 구성되어 있다고 알려져 있다.

이러한 피부장벽기능을 화장품에 적용하고자, 많은 연구자들이 피부장벽기능을 모사하여 액정에멀젼 등 다양한 제형을 개발하였다. 이러한 제형의 주된 목적은 피부장벽기능의 주성분인 세포간 지질을 안정하게 배합하는 것으로 주로 세라마이드, 콜레스테롤, 인지질을 중심으로 연구되어 왔다. 이 중, 세라마이드와 콜레스테롤은 피부장벽의 주성분인 세포간 지질의 주성분이자 강력한 보습성분으로 알려진 이후, 이의 안정화에 대한 수많은 연구가 수행되어 왔다. 하지만, 일반적인 유화 제형에 사용 시 경시적으로 겔화되는 특성을 갖기 때문에 대부분의 화장품 제형에서는 극소량 사용하거나 또는 마이크로플루다이저(microfludizer)와 같은 고압유화 방식을 이용한 별도의 전처리를 거쳐 안정화한 원료를 제조한 후 화장품에 이용되어 왔다. 하지만, 이러한 고압유화 방식은 특수한 설비가 필요하고 공정이 번거로우며 비용 또한 증가하여 바람직한 방법이라 할 수 없다. 이를 극복하기 위해 많은 연구자들은 오래전부터 세라마이드를 가용화시키거나 또는 고압유화의 방식으로 나 나노리포좀 등으로 만드는 연구를 수행하였다.

예를 들어, 한국 특허출원 제10-2003-0062910호인 ‘세포간 지질 성분의 나노리포좀을 함유하는 피부자극완화용 화장료 조성물’과 한국 특허출원 제10-2009- 0132670호인 ‘자기유화형 나노 리포좀/다중층 액정 함유 베지클, 이의 제조방법 및 용도’에서는 모두 세라마이드와 콜레스테롤, 인지질을 포함하는 세포간 지질 성분을 안정화하기 위하여 고압유화를 사용하여 나노리포좀을 제조하였다. 하지만, 이와 같은 방식은 고압유화기라는 별도의 장비를 사용해야 하고 이에 따른 별도의 비용과 시간이 필요하기 때문에 바람직한 방법이라 할 수 없다. 또한 한국 특허출원 제10-2009-0018953호인 세포간 지질 성분의 마이셀을 함유하는 가용화 제형에서는 고압유화를 사용하지 않고 1 ~ 200 nm 크기의 마이셀을 함유하는 안정한 가용화 제형을 만든다. 하지만, 이와 같은 가용화 제형은 1 ~ 200nm 정도의 선택적인 크기만을 갖는 제형에 제한되고 또한 본 발명자의 연구에 따르면 이러한 제형은 45℃ 및 50℃ 보관, 그리고 -20℃ 냉동보관 후 해동 과정에서 세포간 지질성분의 석출 등 안정도에 문제가 있음을 알게 되었다. 가용화 제형은 일반적으로 양친성, 즉 친수성 및 소수성기를 동시에 갖는 물질(가용화제)이 향이나 오일과 같은 물에 잘 안 녹는 소수성 특징을 가진 난용성/불용성 물질들을 물에 녹여 열역학적으로 안정하고 균일한 구형의 구조를 갖는 하나의 상(相), 즉 one phase를 갖는다고 알려져 있다. 이러한 가용화 제형은 열역학적으로 안정하기 때문에 온도나 조성 등의 조건이 맞으면 혼합방법이나 순서에 무관하게 매우 안정적이다. 하지만, 일반적으로는 세라마이드나 콜레스테롤과 같이 소수성이 매우 큰 피가용화 물질들은 가용화제의 내부, 즉 코어(core) 공간에서만 가용화가 가능하기 때문에 가용화 공간이 부족하다. 따라서, 소수성이 매우 큰 피가용화 물질들은 향이나 오일 등의 가용화 과정에 비하여 매우 많은 가용화제를 사용해야 하는데, 이럴 경우 끈적임과 같은 사용감 문제와 인체 자극 등의 우려가 있기 때문에 바람직하지 못하다.

이에, 본 발명자들은 상기 종래기술들의 문제점들을 극복하기 위하여 예의 연구노력한 결과, 세포간 지질성분들을 다량 함유하는 나노 에멀젼의 안정도 향상을 위해서는 계면 사이에서 물질 이동이 최소화되어야 한다는 사실을 발견하고 이를 이용하여 세포간 지질성분을 다량 함유하는 나노 에멀젼의 신규한 제조방법을 찾아내고, 본 발명의 제조방법으로 나노 에멀젼를 제조할 경우, 고압유화 과정 없이 비이온성 계면활성제를 사용하기 때문에 공정시간 및 비용을 줄일 수 있을 뿐만 아니라 다른 가용화 제형보다 온도변화에 안정하다는 것을 확인하고 본 발명을 완성하게 되었다.

따라서, 본 발명의 주된 목적은 고압유화 과정 없이 비이온성 계면활성제를 사용하기 때문에 공정시간 및 비용을 줄일 수 있을 뿐만 아니라 다른 가용화 제형보다 온도변화에 안정한 나노 에멀젼 제조방법을 제공하는 데 있다.

본 발명의 다른 목적은 상기 제조방법을 이용하여 제조된 나노 에멀젼을 포함하는 화장료 조성물을 제공하는데 있다.

본 발명의 한 양태에 따르면, 본 발명은 하기 단계들을 포함하는 나노 에멀젼의 제조방법을 제공한다:

a) 세라마이드 또는 그 유도체, 콜레스테롤, 비이온성 계면활성제, 인지질, 폴리올을 혼합하고 가온 용해한 유상부(A)를 제조하는 단계;

b) 향 성분 및 비이온성 계면활성제를 알코올에 용해시켜 향 파트(B)를 제조하는 단계;

c) 폴리올 및 기타 수용성 효능성분을 물에 분산 및 용해시켜 수상부(C)를 제조하는 단계;

d) 상기 유상부(A)를 상기 수상부(C)에 첨가한 후 상기 향 파트(B)를 다시 수상부(C)에 첨가하여 교반하는 단계; 및

e) 상기 교반 후 반응물을 여과지 또는 여과포로 여과하는 단계.

본 발명에서, 상기 용어 “에멀젼”은 하나의 액상에 섞이지 않는 하나 이상의 액상이 분산되어 있는 액-액 분산계를 말하는데, 일반적으로 수 μm에서 수십 μm의 입자크기를 가진다. 이러한 입자 크기를 갖는 에멀젼은 열역학적으로 불안정하고 종국에는 응집(flocculation), 침강(sedimentation), 크리밍(creaming), 입자성장(ostwald ripening) 및 유착(coalescence) 등과 같은 다양한 경로를 통해 분리된다. 또한 일반적으로 연구자나 문헌에 따라 조금씩 차이는 있으나 분산상 입자의 평균 직경이 20 ~ 500nm인 에멀젼을 “나노 에멀젼”(Flockhart, I. R. et al., J. Pharm. pharmacol., 50(Supplement)1998, 141)이라고 한다. 나노 에멀젼은 입자의 크기가 작기 때문에 중력의 영향을 덜 받아 입자들 사이에서 브라운 운동을 하게 되고, 따라서 일반적인 에멀젼에 비하여 침강, 크리밍 등에 대하여 안정하다. 역시 에멀젼이기 때문에 열역학적으로 안정하다고 할 수 없지만, 상기와 같은 브라운 운동의 영향으로 인해 일반적인 에멀젼에 비해서는 동적(kiinetic) 안정도가 향상되었다고 할 수 있다. 또한 나노 에멀젼은 마이크로 에멀젼이나 일반 에멀젼과 달리 입자의 크기변화 없이 수상과의 희석이 가능하다(Colloid Surface A 2004; 251: 53-8).

이러한 나노 에멀젼을 만들 수 있는 계면활성제로는 세포간 인지질인 레시틴이 가장 대표적이다. 레시틴은 충분한 수성 매질과 혼합했을 때 자기 유화되어 이중층 또는 다중층 형태의 라멜라를 형성하며 나노 크기의 입자를 형성하는데, 이것이 바로 입자이다. 레시틴의 자기 유화과정에서 고압 유화를 이용할 경우, 수 나노에서 수십 나노미터 크기의 매우 미세한 나노 에멀젼이 만들어질 수 있다.

그러나, 고압유화 방식은 특수한 설비가 필요하고 공정이 번거로우며 비용 또한 증가하여 바람직한 방법이라 할 수 없다. 또한, 고압유화를 사용하지 않고 1 ~ 200nm 크기의 마이셀을 함유하는 안정한 사용화 제형을 만들 경우 가용화 제형이 1 ~ 200nm 정도의 선택적인 크기를 갖는 제형에 제한되고 온도변화에 안정하지 않다. 또한, 피가용화 물질들의 경우 가용화제의 내부, 즉 코어(core) 공간에서만 가용화가 가능한데, 소수정이 매우 큰 피가용화 물질들은 매우 많은 가용화제를 필요로 하며, 가용화제를 많이 사용할 경우 끈적임과 같은 사용감 문제와 인체 자극 들의 우려가 있기 때문에 바람직하지 못하다.

따라서, 본 발명의 세포간 지질 성분인 세라마이드와 콜레스테롤을 이용한 나노 에멀젼을 제조함에 있어, 고압 유화를 사용하지 않고서도 비이온성 계면활성제를 이용하면 세포간 지질성분들을 다량 함유하는 인정한 나노 에멀젼을 만들 수 있고, 이에 가용화 제형의 안정성을 더욱 향상시킬 수 있다는 점을 발견하고 본 발명을 완성한 것이다.

세포간 지질성분들을 다량 함유하는 나노 에멀젼의 안정도 향상을 위해서는 계면 사이에 물질 이동이 최소화되어야 한다. 물이 이동이 최소화한다는 것은, 보통 나노 에멀젼을 제조 시 방부제를 대신하여 글라이콜(glycol)류를 첨가하게 되는데, 이때, 이 방부제(글라이콜류)는 나노 에멀젼을 공격하게 되고 나노 에멀젼이 공격받게 되면 리포좀 안에 있는 세포간 지질들이 리포좀 밖으로 나오게 되어 안정도가 떨어지게 되므로 리포좀 안에 존재하는 물질들이 밖으로 빠져나오면 안 된다는 것을 뜻한다. 따라서 물질 이동이 최소화되어야 나노 에멀젼의 안정도를 향상시킬 수 있다.

본 발명의 제조방법에서, 상기 향 파트(B)에도 비이온성 계면활성제를 향 성분과 함께 알코올에 용해시켜 향 파트를 따로 제조 후 사용하는데, 향 파트를 따로 사용하지 않고 향 성분을 유상부에 함께 혼합하여 사용할 경우 이 향 성분은 나노 리포좀 안에 존재하게 된다. 이때, 함께 첨가된 방부제(글라이콜류)에 의해 나노 리포좀이 공격을 받게 되면서 리포좀 안의 향 성분이 빠져나오게 되는 현상이 발생한다. 향 성분이 빠져나오게 되면 시간이 지남에 따라 제형이 탁해지게 되면서 안정도가 떨어지게 된다. 반면에, 향 파트를 비이온성 계면활성제와 함께 따로 사용할 경우 향 파트는 비이온성 계면활성제에 의해 가용화되어 수상 중에 안정한 형태로 존재하기 때문에 글라이콜류와 같은 방부제에 의한 공격으로부터 안정화를 유지할 수 있다.

본 발명의 제조방법에서, 상기 수상부는 폴리올 및 물 이외에 수용성 효능성분을 더 포함할 수 있다. 상기 수용성 효능성분은 예를 들어, 주름개선 기능성 원료, 미맥 기능성 원료 및 천연 추출물과 같이 물에 용해되어 수상부를 구성할 수 있는 것이면 어떤 것도 사용될 수 있다.

상기 주름개선 기능성 원료로는 아데노신이 있고, 미백 기능성 원료로는 알부틴, 니아신아마이드 등이 있다. 또한, 천연추출물은 알로에, 녹차, 감귤, 은행잎 등으로부터 추출된 식물, 동물 또는 광물의 천연추출물 등이 있으며, 상기 수용성 효능성분은 상기 종류에 한정되지 않는다.

본 발명의 제조방법에서, 상기 d) 단계와 같이 유상부(내상, dispersion phase)를 수상부(외상, continuous phase)에 넣고 혼합하면 100 ~ 200nm 크기의 입자를 지닌 나노 에멀젼이 형성된다. 또한 상기 향 파트(B)에 대해 설명한 바와 같이 종래에는 향을 유상부에 넣고 이를 다시 수상부에 첨가하여 나노 에멀젼을 만들었으며, 이 경우에는 향이 나노 에멀젼 내부에 존재하게 된다. 그러나 내상인 입자내부에 존재하는 향은 고온 보관 조건에서 외상인 수상부로 이동하게 되고 이렇게 될 경우, 나노 에멀젼이 부분적으로 뿌옇게 되는 현상(Haze 현상)이 발생하게 되면서 안정도가 저하되게 된다. 그러나 본 발명에서와 같이 향을 알코올 및 비이온성 계면활성제에 혼합한 향 파트를 상온에서 다시 수상부에 투입할 경우, 향이 내부에 존재하지 않고 가용화 되어 수상 중에 안정한 형태로 존재하게 되어 고온 보관 중에도 Haze 현상이 발생 되지 않아 안정한 형태로 존재하는 것을 알 수 있다. 즉, 향은 유상부에 투입하는 것이 아니라 가용화 시킨 후, 수상부에 첨가하는 것이 나노 에멀젼의 고온 보관 조건에서의 안정화도를 향상시킬 수 있으므로 상기 d)단계와 같은 제조방법을 통해 안정한 나노 에멀젼을 제조하였다.

본 발명에 있어서, 상기 비이온성 계면활성제는 하이드로제네이티드캐스터오일(hydrogenated castor oil), 옥틸도데세스(octyldodeceth) 또는 콜레스(Choleth)을 인지질과 혼합하여 사용할 수 있고 바람직하게는, 하이드로제네이티드캐스터오일(hydrogenated castor oil)-5, 7, 10, 20, 30, 40, 50, 60, 80, 100, 옥틸도데세스(octyldodeceth)-5, 10, 16, 20, 25 또는 콜레스(Choleth)-5, 10, 15, 20, 24, 30 을 인지질과 혼합하여 사용하는 것을 특징으로 한다.

상기 비이온성 계면활성제에 함께 기재되는 숫자는 PEG(polyethylen Glycol) 그룹의 개수를 나타낸다. 이 PEG 숫자가 증가할수록 친수성이 증가한다는 의미로 HLB(hydrophilic lipophilic balance)가 증가한다는 것과 같은 의미를 나타낸다.

본 발명의 실험예에 따르면, 인지질만 단독으로 또는 인지질을 제외한 한 종류의 비이온성 계면활성제만을 사용할 경우(실시예 1 내지 4) 고온 및 냉동에서 안정도가 저하되는 반면에 인지질과 비이온성 계면활성제를 혼용하여 사용한 경우(실시예 5 및 6) 한 종류의 비이온성 계면활성제를 사용한 경우보다 안정성이 향상되었고 더욱이 인지질과 콜레스-20을 함께 혼용하여 사용 한 경우(실시예 7)에는 모든 온도에서 안정하였다. 이러한 결과로 볼 때, 인지질 또는 비이온성 계면활성제만을 단독으로 사용하여도 가용화되지만 안정성이 저하되므로 인지질과 비이온성 계면활성제를 함께 혼용할 경우 가용화와 더불어 안정성도 향상되는 것을 알 수 있다(실험예 1).

본 발명에 있어서, 상기 폴리올은 프로필렌글리콜, 디프로필렌글리콜, 1,3-부틸렌글리콜, 펜틸렌글리콜 및 1,2-헥산디올로 구성된 군으로부터 단독 또는 혼합하여 사용될 수 있으며 그 사용량은 에멀젼 총 중량에 대하여 0.1 내지 10 중량% 범위이다.

본 발명에 있어서, 상기 (a)단계에서 사용되는 비이온성 계면활성제와 (b)단계에서 사용되는 비이온성 계면활성제는 동일한 것을 특징으로 한다.

구체적으로는 (a) 단계에서 사용되는 비이온성 계면활성제가 하이드로제네이티드캐스터오일(hydrogenated castor oil)-5, 7, 10, 20, 30, 40, 50, 60, 80, 100, 옥틸도데세스(octyldodeceth)-5, 10, 16, 20, 25 또는 콜레스(Choleth)-5, 10, 15, 20, 24, 30 중의 하나이고, (b) 단계에서 사용되는 비이온성 계면활성제는 (a)단계에서 사용되는 것과 동일한 것으로 사용된다.

본 발명에 있어서, 상기 향 성분은 향료로 사용되는 오일, 향료 또는 이들의 혼합물인 것을 특징으로 한다.

본 발명에 따르면, 상기 향 성분은 에멀젼 내 형성된 마이셀 구조 내 포집 될 수 있는 유용성분으로서 화장학적으로 향료 또는 그에 상응하는 향료 대용물질을 말하며 단순히 향기나는 성분만을 지칭하는 것은 아니다. 바람직하게는 향료로 사용되는 오일, 향료 또는 이들의 혼합물일 수 있으며, 예들 들어 에스테르계 합성 오일, 디메치콘 및 사이크로메치콘계 오일과 같은 실리콘 오일, 호호바유 및 스쿠알란과 같은 동식물성 오일 및 합성 향료와 천연 향료로 구성된 군에서 선택되어 사용될 수 있으며, 이외에 당업계에 화장학적으로 유용한 난용성 물질로 알려진 원료가 선택될 수 있다.

본 발명의 다른 양태에 따르면, 본 발명은 상기 방법으로 제조된 나노 에멀젼을 포함하는 화장료 조성물을 제공한다.

본 발명의 실험예에 따르면, 본 발명의 실시예 7에서 제조된 각 제형으로 피부 안전성 테스트를 한 결과, 피부 자극이 1 미만으로 저자극이라는 것을 확인하였다. 이러한 결과로 볼 때, 본 발명의 제조방법으로 만들어진 나노 에멀젼을 포함하는 화장료의 조성물의 경우 피부에 사용하여도 안전하다는 것을 알 수 있다(실험예 2).

본 발명에 있어서, 상기 화장료 조성물은 본 발명에 따른 방법으로 제조된 나노 에멀젼을 포함하여 당업계에서 통상적으로 제조되는 어떠한 제형으로도 제조될 수 있으며, 예들 들어 용액, 현탁액, 유탁액, 페이스트, 겔, 크림, 로션, 파우더, 비누, 오일, 분말 파운데이션, 유탁액 파운데이션, 왁스 파운데이션, 스프레이 등으로 제형화 될 수 있으나, 이에 한정되지는 않는다. 보다 상세하게는 스킨, 로션, 유연 화장수, 영양 화장수, 영양 크림, 마사지 크림, 에센스, 아이 크림, 클렌징크림, 클렌징폼, 클렌징워터, 팩, 스프레이 또는 파우더의 제형으로 제조될 수 있다.

상기 조성물의 제형이 페이스트, 크림 또는 겔인 경우에는 담체 성분으로서 동물성유, 식물성유, 왁스, 파라핀, 전분, 트라칸트, 셀룰로오스 유도체, 폴리에틸렌 글리콜, 실리콘, 벤토나이트, 실리카, 탈크 또는 산화아연 등이 이용될 수 있다.

상기 조성물의 제형이 파우더 또는 스프레이인 경우에는 담체 성분으로서 락토스, 탈크, 실리카, 알루미늄 히드록시드, 칼슘 실리케이트 또는 폴리아미드 파우더가 이용될 수 있고, 특히 스프레이인 경우에는 추가적으로 클로로플루오로히드로카본, 프로판/부탄 또는 디메틸 에테르와 같은 추진체를 포함할 수 있다.

상기 조성물의 제형이 용액 또는 유탁액인 경우에는 담체 성분으로서 용매, 용해화제 또는 유탁화제가 이용되고, 예컨대 물, 에탄올, 이소프로판올, 에틸 카보네이트, 에틸 아세테이트, 벤질 알코올, 벤질 벤조에이트, 프로필렌 글리콜, 1,3-부틸글리콜 오일, 글리세롤 지방족 에스테르, 폴리에틸렌 글리콜 또는 소르비탄의 지방산 에스테르가 있다.

또한 상기 조성물의 제형이 현탁액인 경우에는 담체 성분으로서 물, 에탄올 또는 프로필렌 글리콜과 같은 액상의 희석제, 에톡실화 이소스테아릴 알코올, 폴리옥시에틸렌 소르비톨 에스테르 및 폴리옥시에틸렌 소르비탄 에스테르와 같은 현탁제, 미소결정성 셀룰로오스, 알루미늄 메타히드록시드, 벤토나이트, 아가 또는 트라칸트 등이 이용될 수 있다.

이상 설명한 바와 같이, 본 발명에서는 고압유화 없이 인지질 및 비이온성 계면활성제를 이용한 간단한 공정만으로 만든 나노 에멀젼을 이용하여 세포간 지질 성분을 안정화시킨다. 이럴 경우, 기존의 고압유화 방식보다 공정시간 및 비용을 줄일 수 있고 또한 기존의 다른 가용화 제형에서보다 세포간 지질 성분에 대한 고온 및 냉동에서의 안정도를 향상시킬 수 있다는 장점을 갖는다.

도 1은 본 발명에 따라 제조된 나노 에멀젼의 비교예와 실시예에 대한 외관 이미지를 관찰한 결과이다(왼쪽부터 비교예 1, 실시예 1, 실시예 2, 실시예 3, 실시예 4, 실시예 5, 실시예 6, 실시예 7).
도 2은 본 발명에 따라 제조된 안정한 나노 에멀젼을 동적광산란장치(DLS)를 사용하여 입자의 크기분포를 측정한 결과이다.
도 3는 본 발명에 따라 제조된 안정한 나노 에멀젼을 cryo-TEM 장비를 이용하여 관찰한 결과이다.

이하, 실시예를 통하여 본 발명을 더욱 상세히 설명하기로 한다. 이들 실시예는 단지 본 발명을 예시하기 위한 것이므로, 본 발명의 범위가 이들 실시예에 의해 제한되는 것으로 해석되지는 않는다.

실시예 1 : 비교예 및 실시예의 제조

본 발명의 세포간 지질성분을 안정화시키기 위한 나노 에멀젼을 다음의 조성으로 제조하였다. 구체적으로는 A상을 70 ~ 80℃로 가온 용해시킨 후, 실온의 C상에 서서히 투입한다. 이때, C상은 일정하게 교반을 한다. 그 후, 상온 또는 40℃까지 가온한 B상을 다시 C상에 서서히 투입하면서 교반하고, 냉각 및 여과 과정을 거쳐 각각의 제형을 제조하였다. 표 1에서, HCO(hydrogenated castor oil)-40, OD(octyldodeceth)-16, 콜레스(Choleth)-20은 비이온성 계면활성제이며, 수첨 레시틴은 인지질이며, DPG, 1,3-BG는 폴리올이다.

		비교예1	실시예1	실시예2	실시예3	실시예4	실시예5	실시예6	실시예7
A	세라마이드	0.1	0.1	0.1	0.1	0.1	0.1	0.1	0.1
	콜레스테롤	0.1	0.1	0.1	0.1	0.1	0.1	0.1	0.1
	HCO-40	-	0.2	-	-	-	0.2	-	-
	OD-16	-	-	0.2	-	-	-	0.2	-
	Choleth-20	-	-	-	0.2	-	-	-	0.2
	수첨 레시틴	-	-	-	-	0.2	0.2	0.2	0.2
	DPG	5	5	5	5	5	5	5	5
B	알코올	5	5	5	5	5	5	5	5
	향	0.05	0.05	0.05	0.05	0.05	0.05	0.05	0.05
	HCO-40	-	0.1	-	-	-	0.1	-	-
	OD-16	-	-	0.1	-	-	-	0.1	-
	Choleth-20	-	-	-	0.1	-	-	-	0.1
	수첨 레시틴	-	-	-	-	0.1
C	물	잔량	잔량	잔량	잔량	잔량	잔량	잔량	잔량
C	1,3-BG	5	5	5	5	5	5	5	5

비교예 1은 A 파트와 B파트에 계면활성제를 함유하지 않은 것이고 실시예 1 내지 4는 계면활성제를 A 파트와 B 파트에 한 종류씩 함유한 것이며 실시예 5 내지 7은 인지질 및 비이온성 계면활성제 두 가지를 함유하는 것이다. A 파트와 B 파트에 한 종류씩 비이온성 계면활성제를 함유한 것은 계면활성제 단독으로 계면에서의 물질이동을 억제하여 안정한 나노 에멀젼을 만들 수 있는지를 검증한 것이다. 하지만, 실험 결과 고온 및 냉동에서의 안정도가 파괴된 것을 알 수 있다. 이후, 추가 실험을 통해 인지질 및 비이온성 계면활성제 조합을 사용 시 고온 및 냉동보관 후 해동과정에서의 안정도가 향상된 것을 알 수 있었다. 특히, choleth 계열의 계면활성제(특히, Choleth-15,20) 사용 시 안정도 향상이 좀 더 우수한 것으로 확인되었는데, 이것은 cholesterol과 유사한 구조를 갖는 choleth 계열의 계면활성제가 계면에서 좀 더 안정한 구조를 만드는 데 기여한 것으로 판단된다. 실제로 choleth 계열을 사용하지 않거나, 다른 HCO 계열 또는 OD 계열의 계면활성제를 사용할 경우, 나노 에멀젼의 안정도가 저하되는 것을 확인하였다(실험예 1 참조).

실험예 1 : 나노 에멀젼의 제형 안정도 측정

세포간 지질성분을 함유한 안정한 제형인 실시예들과 그 비교예에 대한 50℃, 상온 및 냉온보관 조건에서의 안정도 실험을 아래와 같이 실시하였다. 제형의 안정성을 확인하기 위해 실시예와 비교예를 50℃, 상온 및 냉온 항온조에서 투명 용기에 담아 보관하고 일정한 시간간격을 두고 안정도를 육안으로 평가하였다. 또한, 제형의 안정성 테스트 중 냉동보관 항온조에서의 안정도는 상기 평가법과 달리 냉동항온조에 3일간 보관하여 완전히 얼린 후, 상온에서 현탁 또는 석출현상을 관찰하였다.

실험항목		비교예	실시예 1	실시예 2	실시예 3	실시예 4	실시예 5	실시예 6	실시예 7
냉온	1주	X	○	○	O	O	O	O	O
	2주	X	○	○	O	O	O	O	O
	4주	X	△	△	△	△	O	O	O
상온	1주	X	○	○	O	O	O	O	O
	2주	X	○	○	O	O	O	O	O
	4주	X	△	△	△	△	△	O	O
50°C	1주	X	△	△	△	X	O	O	O
	2주	X	X	X	X	X	△	△	O
	4주	X	X	X	X	X	X	X	O
냉동	1회	X	X	X	△	X	△	△	O
	2회	X	X	X	X	X	X	X	O
	3회	X	X	X	X	X	X	X	O

○: 양호, △: 처음과 차이 있음, X: 현탁 또는 석출

그 결과, 표 2와 같이 계면활성제가 없는 비교예는 모든 조건에서 현탁 또는 석출현상을 보여주는 등 안정도에 큰 문제가 있었다. 그리고 실시예 1 내지 4처럼 한 종류의 계면활성제만을 사용한 경우, 고온 및 냉동에서의 안정도가 저하되었다. 비록 2가지 계면활성제를 혼용한 실시예 5와 실시예 6에서는 고온에서의 안정도가 일부 개선되기는 했으나, 냉동 후 해동과정에서 2회 만에 석출현상이 관찰되는 등 제형 안정도가 저하되었다. 이에 비해 실시예 7은 모든 항온보관 조건에서 안정한 제형을 보여주었다.

실험예 2 : 나노 에멀젼의 피부 안전성 테스트

피부 질환이 없는 성인 남녀 20명을 대상으로 하여 상기 비교예와 실시예 7에서 제조된 각 제형의 자극 정도를 다음과 같이 평가하였다. 시험자들의 팔 전박에 20μl의 시료를 도포한 후, 시험 부위를 밀폐한 후 24시간 동안 첩포하고, 첩포를 제거한 후 30분과 24시간 후에 피부에서의 반응을 CTFA 가이드라인에 제시된 terminology에 의거하여 검사한다. 판정기준은 다음과 같다. 판정기준에 의해 얻어진 시험자들의 점수를 평균하여 1 미만이면 저자극, 3 미만이면 경자극, 5 미만이면 중자극, 5 이상이면 강자극으로 평가한다.

실험항목	비교예	실시예7
피부자극지수(PII)	0.21	0.24

상기와 같이 비교예와 실시예 7에서 세포간 지질성분을 함유한 나노 에멀젼의 피부 자극은 모두 1미만으로 제품에 사용가능한 저자극 수준임을 알 수 있다.

실험예 3 : 나노 에멀젼의 입자크기 측정 및 성상관측

동적광산란장치(Dynamic Light Scattering, DLS)와 동결 주사전자현미경(Cryo-Transmission Electron Microscopy, Cryo-TEM)을 사용하여 세포간 지질성분을 함유한 안정한 제형의 입자크기 분포와 성상관측을 수행하였다. 도 2에서와 같이 실시예 7의 입자분포는 intensity 기준으로 약 109 nm 정도임을 알 수 있다. 또한, 도 3에서와 같이 실시예 7은 약 100nm 정도의 크기를 갖는 원형의 나노입자를 균일하게 형성하고 있음을 알 수 있다.

Claims

하기 단계들을 포함하는 나노 에멀젼의 제조방법:
a) 세라마이드 또는 그 유도체, 콜레스테롤, 비이온성 계면활성제, 인지질, 폴리올을 혼합하고 가온 용해한 유상부(A)를 제조하는 단계;
b) 향 성분 및 비이온성 계면활성제를 알코올에 용해시켜 향 파트(B)를 제조하는 단계;
c) 폴리올 및 기타 수용성 효능성분을 물에 분산 및 용해시켜 수상부(C)를 제조하는 단계;
d) 상기 유상부(A)를 상기 수상부(C)에 첨가한 후 상기 향 파트(B)를 다시 수상부(C)에 첨가하여 교반하는 단계; 및
e) 상기 교반 후 반응물을 여과지 또는 여과포로 여과하는 단계.
제 1항에 있어서, 상기 비이온성 계면활성제는 하이드로제네이티드캐스터오일(hydrogenated castor oil), 옥틸도데세스(octyldodeceth) 또는 콜레스(Choleth)을 인지질과 혼합하여 사용하는 것을 특징으로 하는 나노 에멀젼 제조방법.
제 1항에 있어서, 상기 폴리올은 프로필렌글리콜, 디프로필렌글리콜, 1,3-부틸렌글리콜, 펜틸렌글리콜 및 1,2-헥산디올로 구성된 군으로부터 선택된 하나 이상인 것을 특징으로 하는 나노 에멀젼 제조방법.
제 1항에 있어서, 상기 (a)단계에서 사용되는 비이온성 계면활성제와 (b)단계에서 사용되는 비이온성 계면활성제는 동일한 것을 특징으로 하는 나노 에멀젼 제조방법.
제 1항에 있어서, 상기 향 성분은 향료로 사용되는 오일, 향료 또는 이들의 혼합물인 것을 특징으로 하는 나노 에멀젼 제조방법.
제 1항에 따른 방법으로 제조된 나노 에멀젼을 포함하는 화장료 조성물.
제 6항에 있어서, 상기 조성물은 용액, 현탁액, 유탁액, 페이스트, 겔, 크림, 로션, 파우더, 비누, 오일, 분말 파운데이션, 유탁액 파운데이션, 왁스 파운데이션 및 스프레이로 구성된 군으로부터 선택되는 제형을 갖는 것을 특징으로 하는 화장료 조성물.