KR20100001167A

KR20100001167A - 쿼시트린 및/또는 미리시트린을 유효성분으로 함유하는화장료 조성물

Info

Publication number: KR20100001167A
Application number: KR1020080060978A
Authority: KR
Inventors: 이정노; 박숙경; 이강태; 이건국
Original assignee: 주식회사 코리아나화장품
Priority date: 2008-06-26
Filing date: 2008-06-26
Publication date: 2010-01-06

Abstract

본 발명은 쿼시트린(quercitrin) 및/또는 미리시트린(myricitrin)을 유효성분으로 함유하는 화장료 조성물에 관한 것이다. 더 상세하게는 쿼시트린(quercitrin) 및/또는 미리시트린(myricitrin)을 유효성분으로 함유하는 피부 노화 방지 및 피부 주름 개선용 화장료 조성물에 관한 것이다. 본 발명의 쿼시트린(quercitrin) 및 미리시트린(myricitrin)을 함유하는 조성물은 단백질 합성 증진 효과, 콜라겐 합성증진 효과 MMP-1 생성억제 효과 및 피부 주름 개선효과가 탁월하므로, 이를 함유하는 화장료는 노화 방지 및 피부 주름 개선용으로 활용도가 높다.

쿼시트린, 미리시트린, 주름 개선

Description

쿼시트린 및/또는 미리시트린을 유효성분으로 함유하는 화장료 조성물{Cosmetic Composition Comprising Quercitrin and/or Myricitrin as Active Ingredients}

본 발명은 쿼시트린(quercitrin) 및/또는 미리시트린(myricitrin)을 유효성분으로 함유하는 피부 주름 개선용 화장료 조성물에 관한 것이다.

사람의 피부는 노화 과정에서 다양한 물리, 화학적인 변화가 일어난다. 그 원인으로는 크게 내적인 노화(intrinsic aging)와 광노화(photo-aging)로 구분되며 이에 관한 연구가 활발히 이루어져 왔다. 자외선, 스트레스, 질병상태, 환경인자, 상처, 나이가 들어감에 따라 프리라디칼이 활성화되어 야기될 수 있으며, 이런 상태가 심화될 경우 생체 내에 존재하는 항산화 방어망을 파괴하고, 세포 및 조직을 손상시켜 성인병 및 노화를 촉진하게 된다. 좀 더 구체적으로 말하자면, 피부의 주요 구성물질인 지질, 단백질, 다당류 및 핵산 등이 산화되어 피부세포 및 조직이 파괴되고, 결국 피부노화 현상이 생겨나는 것이다. 특히 단백질의 산화는 피부의 결합조직인 콜라겐(collagen), 히아루론산(hyaluronic acid), 엘라스틴(elastin), 프로테오글리칸(proteoglycan), 피브로넥틴(fibronectin) 등이 절단되어 심한 과다 염증반응과 피부의 탄력에 지장을 주고 이것이 더 심해질 경우 DNA의 변이에 의해 돌연변이, 암의 유발, 면역기능 저하의 사태에 이르게 된다.

그러므로, 신체의 대사 과정 중 발생하는 프리라디칼이나 자외선 조사, 염증반응에 의해 매개되는 프리라디칼을 소거하여 세포막을 보호하고, 또 이미 손상 받은 세포는 활발한 신진대사에 의해 재생시켜서 세포를 증식시켜야 피부는 빠르게 회복되고 건강한 피부를 유지할 수 있다. 노화에는 프리라디칼 뿐만 아니라 기질 금속단백질 분해효소(Matrix Metalloprotease; MMP)라는 효소가 관여하는데 생체 내에서 콜라겐과 같은 세포외기질의 합성과 분해는 적절하게 조절되나 노화가 진행되면서 그 합성이 감소하며 콜라겐을 분해하는 효소인 기질 금속단백질 분해효소(MMP)의 발현이 촉진되어 피부의 탄력이 저하되고 주름이 형성된다. 또한 자외선 조사에 의해 이러한 분해효소가 활성화되기도 한다. 그러므로 세포내에서 활성화가 유도되는 MMP 발현을 조절하거나 그 활성을 억제할 수 있는 물질의 개발이 요구되고 있다. 이제까지 화장품의 소재로서 사용된 원료들은 단순히 효소 활성만을 억제하는 것이 대부분이었다. 이에 세포내 자연노화와 광노화에 의해 그 발현이 유도되는 MMP 발현량 및 활성을 조절하고자 하였다.

한편, 화장료 조성성분으로 다양한 화학물질을 사용하고 있으나, 최근 이러한 화학물질 등에 의한 피부 자극을 줄이기 위해 천연물을 사용한 화장품이 많이 개발되고 있다. 천연 재료는 피부에 부작용이 적을 뿐만 아니라, 최근 천연재료를 이용한 화장품에 대한 소비자들의 호응이 높아짐에 따라 화장품 원료로서 개발가치가 한층 늘어나고 있다.

최근, 많은 화장품 회사에서 상기와 같은 문제점을 극복하기 위한 다양한 연구개발이 이루어지고 있으며, 진달래, 자초 및 오약 등의 다양한 천연물이 피부노화 방지에 효과가 있음을 밝혀내고 있다. 그러나, 이들 대부분의 성분들은 다양한 성분이 서로 혼합된 추출물로서 높은 농도로 사용할 경우 화장료의 안정성, 피부 자극 및 농도에 따른 상대적인 효과가 약화되는 등의 문제점이 있다.

본 발명자들은 자외선 등에 의해 손상되는 피부 단백질의 합성을 촉진함으로써 피부 노화 현상을 개선하고자 예의 연구 노력한 결과, 쿼시트린(quercitrin)과 미리시트린(myricitrin)을 함유하는 조성물이 섬유아세포의 단백질 합성을 증진하고, 진피층 콜라겐 합성 증진 효과가 탁월하며, MMP-1의 생성 억제 효과 및 피부 주름 개선에 탁월한 효과가 있음을 발견함으로써 본 발명을 완성하였다.

따라서, 본 발명의 목적은 쿼시트린(quercitrin) 및 미리시트린(myricitrin)중 어느 하나 이상을 함유하는 유효성분으로 함유하는 피부 노화 방지용 화장료 조성물을 제공하는 데 있다.

본 발명의 다른 목적은 쿼시트린(quercitrin) 및 미리시트린(myricitrin) 중 어느 하나 이상을 유효성분으로 함유하는 피부 주름 개선용 화장료 조성물을 제공하는데 있다.

본 발명의 다른 목적은 쿼시트린(quercitrin) 및 미리시트린(myricitrin)중 어느 하나 이상을 함유하는 화장료 조성물을 인간의 피부에 도포하는 것을 특징으로 하는 화장 방법을 제공하는데 있다.

본 발명의 다른 목적 및 이점은 하기의 실시예 및 청구범위에 의해 보다 명확하게 된다.

본 발명은 쿼시트린 및 미리시트린을 유효성분으로 하는 화장료 조성물을 제공한다. 더 상세하게는, 쿼시트린(quercitrin) 및 미리시트린(myricitrin) 중 어느 하나 이상을 유효성분으로 함유하는 피부 노화 방지용 및 피부 주름개선용 화장료 조성물에 관한 것이다. 본 발명의 쿼시트린(quercitrin) 및 미리시트린(myricitrin)을 함유하는 조성물은 단백질 합성 증진 효과, 콜라겐 합성증진 효과 MMP-1 생성억제 효과 및 피부 주름 개선효과가 탁월하다.

본 발명은 쿼시트린(quercitrin) 및 미리시트린(myricitrin) 중 어느 하나 이상을 유효성분으로 포함하는 피부 노화 방지용 및 피부주름개선용 화장료 조성물에 관한 것이다.

본 발명의 유효 성분으로 포함되는 '쿼시트린(quercitrin)'은 분자식은 C₂₁H₂₀O₁₁이며, 3,3',4',5,7-펜타하이드록시플라본-3-Ο-a-L-남노피라노사이드 (3,3',4',5,7-pentahydroxyflavone-3-Ο-a-L-rhamnopyranoside)로 표기되는 하기 화학식 1의 구조를 가지는 분자량이 448인 화합물이다.

본 발명의 또 하나의 유효성분인 '미리시트린(myricitrin)'은 하기 화학식 2의 구조를 갖는, 분자식이 C₂₁H₂₀O₁₂이고 분자량이 464인 화합물이다.

본 발명에 사용된 쿼시트린(quercitrin) 및 미리시트린(myricitrin)는 메타세콰이어, 굴피나무수피, 진달래꽃 등의 자연원으로부터 분리할 수 있으며, 화학적으로 합성될 수 있다.

한편, 본 발명에서 사용된 쿼시트린 및 미리시트린은 구과목의 낙우송과 식물인 메타세콰이어(Metasequoia glyptostroboides)로부터 분리하였으며, 메타세콰이어는 중국 쓰촨성, 후베이성 및 한국에 분포되어 있다. 한 개체의 평균 크기는 높이 35m, 지름 2m에 달하나, 환경 및 수명에 따라 더 크고 더 굵게 자라는 것이 특징이다. 가지는 옆으로 퍼지며 수피는 갈색으로 벗겨진다. 작은가지는 녹색이며 마주난다. 잎은 줄 모양으로 마주나며 길이 10∼23cm, 나비 1.5∼2mm이다. 깃꼴로 배열되고 끝이 갑자기 뾰족해진다. 가을에는 붉은빛을 띤 갈색 단풍이 들고 작은 가지와 더불어 떨어진다. 주로 가로수나 풍치수로 사용되며, 실내의 방음장치 또는 포장재 등으로도 사용된다.

본 발명의 바람직한 구현예에 따르면, 쿼시트린(quercitrin) 및 미리시트린(myricitrin)은 전체 조성물에 대하여 각각 0.000001-15.0 중량%이며, 바람직하게는 각각 0.0001-10.0 중량% 이다.

이때 화장료 조성물에 포함되는 쿼시트린(quercitrin) 및 미리시트린(myricitrin)의 각 함량이 상기 최소 함량 미만일 경우에는 기대효과가 나타나기 어렵고, 상기 최대 함량을 초과하는 경우에는 효과가 더 이상 증가하지 않고 피부에 자극을 유발할 가능성이 높으며 제형의 안정화에도 큰 영향을 미친다.

본 발명에 따르면, 쿼시트린(quercitrin) 및 미리시트린(myricitrin)은 단백질 합성 촉진 효과(실험예 1), 진피층 콜라겐 합성 증진 효과(실험예 2), MMP-1 생성 억제효과(실험예 3)가 뛰어나다. 뿐만 아니라, 상기 혼합물을 함유하는 화장료 조성물은 피부주름 개선효과(실험예 4)도 뛰어나다.

따라서, 이러한 다양한 기능을 가진 쿼시트린(quercitrin) 및 미리시트린(myricitrin)의 혼합물을 유효성분으로 포함하는 화장료 조성물은 단백질 합성 촉진, 진피층 콜라겐 합성 증진, MMP-1 생성 억제 및 피부주름 개선에 탁월한 효과를 갖는다.

또한, 상기 화학식 1, 2의 쿼시트린(quercitrin) 및 미리시트린(myricitrin) 화합물에 대하여 당업계에서 통상적으로 실시되는 치환기의 부가 또는 치환 반응을 하여 얻어지는 유도체와의 혼합물도 본 발명의 범위에 포함된다는 것은 당업계의 기술수준을 고려하여 당업자에 명확하다.

본 발명의 조성물은 피부에 국소적으로 바르거나 뿌리는 것에 의해 그 효과를 달성할 수 있다. 따라서, 본 발명의 바람직한 구현예에 따르면, 본 발명의 조성물은 크림, 로션 및 유연수 등의 화장료 조성물 또는 스프레이 및 연고 등의 약제학적 조성물 형태로 제조될 수 있다

본 발명의 화장료 조성물에 포함되는 성분은 유효 성분으로서 상기 유효성분 이외에 화장품 조성물에 통상적으로 이용되는 성분들을 포함하며, 예컨대 항산화제, 안정화제, 용해화제, 비타민, 안료 및 향료와 같은 통상적인 보조제, 그리고 담체를 포함한다.

본 발명의 화장료 조성물은 당 업계에서 통상적으로 제조되는 어떠한 제형으로도 제조될 수 있으며, 예를 들어, 용액, 현탁액, 유탁액, 페이스트, 겔, 크림, 로션, 파우더, 비누, 계면활성제-함유 클렌징, 오일, 분말 파운데이션, 유탁액 파운데이션, 왁스 파운데이션 및 스프레이 등으로 제형화될 수 있으나, 이에 한정되는 것은 아니다. 보다 상세하게는, 유연 화장수, 영양 화장수, 영양 크림, 마사지 크림, 에센스, 아이 크림, 클렌징 크림, 클렌징 포옴, 클렌징 워터, 팩, 스프레이 또는 파우더의 제형으로 제조될 수 있다.

본 발명의 제형이 페이스트, 크림 또는 겔인 경우에는 담체 성분으로서 동물성유, 식물성유, 왁스, 파라핀, 전분, 트라칸트, 셀룰로오스 유도체, 폴리에틸렌 글리콜, 실리콘, 벤토나이트, 실리카, 탈크 또는 산화아연 등이 이용될 수 있다.

본 발명의 제형이 파우더 또는 스프레이인 경우에는 담체 성분으로서 락토스, 탈크, 실리카, 알루미늄 히드록시드, 칼슘 실리케이트 또는 폴리아미드 파우더가 이용될 수 있고, 특히 스프레이인 경우에는 추가적으로 클로로플루오로히드로카본, 프로판/부탄 또는 디메틸 에테르와 같은 추진체를 포함할 수 있다.

본 발명의 제형이 용액 또는 유탁액인 경우에는 담체 성분으로서 용매, 용해화제 또는 유탁화제가 이용되고, 예컨대 물, 에탄올, 이소프로판올, 에틸 카보네이트, 에틸 아세테이트, 벤질 알코올, 벤질 벤조에이트, 프로필렌 글리콜, 1,3-부틸글리콜 오일, 글리세롤 지방족 에스테르, 폴리에틸렌 글리콜 또는 소르비탄의 지방산 에스테르가 있다.

본 발명의 제형이 현탁액인 경우에는 담체 성분으로서 물, 에탄올 또는 프로필렌 글리콜과 같은 액상의 희석제, 에톡실화 이소스테아릴 알코올, 폴리옥시에틸렌 소르비톨 에스테르 및 폴리옥시에틸렌 소르비탄 에스테르와 같은 현탁제, 미소 결정성 셀룰로오스, 알루미늄 메타히드록시드, 벤토나이트, 아가 또는 트라칸트 등이 이용될 수 있다.

본 발명의 제형이 계면-활성제 함유 클렌징인 경우에는 담체 성분으로서 지 방족 알코올 설페이트, 지방족 알코올 에테르 설페이트, 설포숙신산 모노에스테르, 이세티오네이트, 이미다졸리늄 유도체, 메틸타우레이트, 사르코시네이트, 지방산 아미드 에테르 설페이트, 알킬아미도베타인, 지방족 알코올, 지방산 글리세리드, 지방산 디에탄올아미드, 식물성 유, 라놀린 유도체 또는 에톡실화 글리세롤 지방산 에스테르 등이 이용될 수 있다.

또한, 본 발명은 본 발명의 쿼시트린(quercitrin) 및 미리시트린(myricitrin) 중 어느 하나 이상을 함유하는 화장료 조성물을 인간의 피부에 도포하는 것을 특징으로 하는 화장방법을 제공한다.

본 발명의 화장 방법은 본 발명의 화장료 조성물을 인간의 피부에 도포하는 모든 화장 방법을 일컫는다. 즉, 화장료 조성물을 피부에 도포하는 당업계에 공지된 모든 방법이 본 발명의 화장 방법에 속한다.

본 발명의 화장료 조성물은 단독 또는 중복 도포하여 사용하거나, 본 발명 이외의 다른 화장료 조성물과 중복 도포하여 사용할 수 있다. 또한 본 발명에 따른 피부 보호 효과가 우수한 화장료 조성물은 통상적인 사용방법에 따라 사용될 수 있으며, 사용자의 피부 상태 또는 취향에 따라 그 사용횟수를 달리할 수 있다.

본 발명의 화장료 조성물이 비누, 계면활성제 함유 클렌징 또는 계면활성제 비함유 클렌징 제형일 경우, 피부에 도포한 후 닦아내거나 떼거나 물로 씻어낼 수도 있다. 구체적인 예로서, 상기 비누는 액상비누, 가루비누, 고형비누 및 오일비 누이며, 상기 계면활성제 함유 클린징 제형은 클렌징폼, 클렌징 워터, 클렌징 수건 및 클렌징 팩이며, 상기 계면활성제 비함유 클렌징 제형은 클렌징크림, 클렌징 로션, 클렌징 워터 및 클렌징 겔이며, 이에 한정되는 것은 아니다.

본 발명의 쿼시트린(quercitrin) 및 미리시트린(myricitrin) 중 어느 하나 이상을 포함하는 화장료 조성물을 인간의 피부에 도포하는 화장방법을 수행하면, 탁월한 주름개선 효과를 얻을 수 있다.

이하, 실시예를 통하여 본 발명을 더욱 상세히 설명하고자 한다. 이들 실시예는 오로지 본 발명을 보다 구체적으로 설명하기 위한 것으로, 본 발명의 요지에 따라 본 발명의 범위가 이들 실시예에 의해 제한되지 않는다는 것은 당업계에서 통상의 지식을 가진 자에 있어서 자명할 것이다.

제조예 1. 쿼시트린(quercitrin) 및 미리시트린(myricitrin)의 분리 및 확인

본 발명에 사용된 쿼시트린(quercitrin) 및 미리시트린(myricitrin)은 다음과 같은 방법으로 분리 및 확인하였다.

음건한 메타세콰이어 잎 약 1.1 kg을 70% 에탄올 5L에 5일간 침적시킨 후 여과하고 상기 여액을 감압 건조하였다. 이를 2회 반복하여 농축물(메타세콰이어 크루드 추출물) 약 100g을 얻었다. 이를 증류수에 녹인 후, n-hex, EA(에틸아세테이트), n-BuOH, 물 층으로 분획을 실시하여 에틸아세테이트 층을 실리카 230-400메 쉬가 충진된 컬럼관에 로드하고 전개용매로서 에틸아세테이트와 메탄올을 30:1에서 0:1 구배로 흘러주면서 20 ㎖씩을 분획하였다. 얇은 막 크로마트그래프로 정성분석하여 Rf=0.35-4.0까지의 분획을 농축하였으며, 이 분획물을 세파덱스(sepadex)20이 충진된 컬럼에 MeOH로 분획하였다.

상기의 분획에 의하여 특히 유효효과가 큰 MG-1, MG-2를 최종적으로 얻었으 며, NMR을 이용하여 구조를 분석하였다(하기 결과 참조). 그 결과 MG-1, MG-2는 쿼시트린과 미리시트린으로 확인되었다.

쿼시트린 1H NMR (CD3OD, 400 MHz) :7.33(1H, d, J=2.0Hz, H-2'), 7.30 (1H, dd, J= 8.2, 2.0 Hz, H-6'), 6.95 (1H, d, J=8.2 Hz, H-5'), 6.36 (1H, d, J=2.0Hz, H-8), 6.19 (1H, d, J=2.0Hz, H-6), 5.35 (1H, d, H-1''), 4.23 (1H, m, H-5''), 3.75 (1H, dd, H-2''), 3.41 (1H, m, H-3''), 3.35 (1H, m, H-4''), 0.94 (3H, d, J=6.0Hz, H-6'')。 13C NMR (CD3OD, 100 MHz) :157.3 (C-2), 135.0 (C-3), 178.4 (C-4), 162.0 (C-5), 98.6(C-6), 164.6 (C-7), 93.5 (C-8), 158.1 (C-9), 104.7(C-10), 121.8 (C-1'), 115.2 (C-2'), 145.2 (C-3'), 148.6 (C-4'), 115.8 (C-5'), 121.7 (C-6'), 102.3 (C-1''), 70.8 (C-2''), 70.9 (C-3''), 72.1 (C-4''), 70.7 (C-5''), 16.5 (C-6'').

미리시트린 1H NMR (CD3OD, 400 MHz) :6.95 (2H, s, H-2', 6'), 6.35 (1H, d, J=2.0Hz, H-8), 6.19 (1H, d, J=2.0Hz, H-6), 5.31 (1H, d, H-1''), 4.22 (1H, m, H-5''), 3.78 (1H, dd, H-2''), 3.50 (1H, m, H-3''), 3.36 (1H, m, H-4''), 0.96 (3H, d, J=6.4Hz, H-6'')。 13C NMR (CD3OD, 100 MHz) :157.3 (C-2), 135.1 (C-3), 178.5 (C-4), 162.0 (C-5), 98.6(C-6), 164.6 (C-7), 93.5 (C-8), 158.2 (C-9), 104.7(C-10), 120.7 (C-1'), 108.4 (C-2'), 145.6 (C-3'), 136.7 (C-4'), 145.6 (C-5'), 108.4 (C-6'), 102.4 (C-1''), 70.8 (C-2''), 70.9 (C-3''), 72.1 (C-4''), 70.7 (C-5''), 16.5 (C-6'').

실험예 1. 쿼시트린 및 미리시트린의 단백질 합성 촉진 효과 실험

인체 정상 섬유아세포 (한국 세포주 은행)를 48-웰 마이크로 플레이트의 각 웰에 1 x 106 세포가 되도록 접종하고, DMEM배지에서 37℃에서 24시간 동안 배양하였다. 그 다음, 배지를 제조예 1에서 얻은 쿼시트린 및 미리시트린을 최종 농도가 각각 5, 10, 20, 50 및 100 ppm이 되도록 제조한 무혈청 DMEM 배지(실험군)로 교체하고 24시간 동안 추가로 배양하였다. 배양 후, 각 웰의 상층액을 모아 단백질 분석 키트 (Protein assay kit, 바이오 래드사, 미합중국)를 이용하여 새로 합성된 단백질의 양을 측정하였다. 그 결과는 하기 표 1에 나타나 있다. 이 때 대조구로는 본 발명의 상기 유효성분 대신 정제수로 대체한 무혈청 배지로 교체 배양하였고, 비교실험군으로서 메타세콰이어를 70% 에탄올에서 추출한 다음 여과 농축하여 얻은 메타세콰이어 크루드 추출물을 함유하는 무혈청 배지로 교체 배양하였다.

단백질 합성 촉진효과(단백질 생성량 (㎍/㎖))

농도 (㎍/㎖)	쿼시트린	미리시트린	메타세콰이어 크루드 추출물
5	94.2	87.6	68.3
10	99.3	95.3	77.3
50	108.3	1003.7	84.2
100	115.2	109.8	88.6
대조군	50.3

표 1의 결과에서도 알 수 있듯이, 본 발명의 쿼시트린 및 미리시트린을 첨가한 실험군 및 메타세콰이어 크루드 추출물을 첨가한 비교실험군에서 생성된 단백질의 양은 대조군에서 생성된 단백질의 양보다 월등히 많았다. 특히 여러 가지 다양한 혼합물이 혼합되어 존재하는 메타세콰이어 크루드 추출물을 첨가한 비교실험군은 쿼시트린 또는 미리시트린 각각을 첨가한 실험군보다 높은 단백질 합성 효과를 확인하였다.

실험예 2. 쿼시트린 및 미리시트린의 진피층 콜라겐 합성 증진 효과

인체 정상 섬유아세포 (한국세포주 은행)를 48-웰 마이크로 플레이트의 각 웰에 1 x 106 세포가 되도록 접종하고, DMEM 배지에서 37℃에서 24시간 동안 배양하였다. 이어, 배지를 제조예 1에서 얻은 쿼시트린 및 미리시트린의 최종 농도가 각각 5, 10, 20, 50 및 100 ppm되도록 제조한 무혈청-DMEM 배지 (실험군) 및 메타세콰이어 크루드 추출물이 포함된 무혈청-DMEM 배지 (비교실험군)로 교체하고 24시간 동안 추가로 배양하였다. 각 웰의 상층액을 모아 키트 (PICP collagen assay kit, Takara, 일본국)를 이용하여 새로 합성된 프로콜라겐 타입 I의 C-펩타이드 (PICP) 양을 측정하였다. PICP 양은 ng/㎖으로 환산하였으며, 하기 수학식 1을 이용하여 콜라겐 생성 증가율을 계산하였다. 그 결과는 하기 표 2에 나타내었다. 이때, 양성 대조군으로는 TGF-β(10ng/ml, Roche, 미합중국)를 포함하는 무혈청-DMEM 배지를, 음성 대조군으로는 상기 성분들 중 아무것도 포함되지 않은 무혈청-DMEM 배지를 사용하였다.

농도 (㎍/㎖)	쿼시트린	미리시트린	메타세콰이어 크루드 추출물
음성대조군	130.4
5	247.5	198.6	210.3
10	335.4	295.3	250.5
50	408.3	401.5	280.6
100	415.2	409.8	350.8
TGF-β 10ng/ml	410.3

표 2에서 나타난 바와 같이, 본 발명의 쿼시트린 또는 미리시트린을 첨가한 실험군 및 메타세콰이어 크루드 추출물을 첨가한 비교실험군에서 생성된 콜라겐의 양은 아무것도 넣지 않은 음성대조군에서 생성된 콜라겐의 양보다 월등히 많았으며, 양성대조군으로 사용한 TGF-b 100㎍/㎖와 유사한 결과를 얻었다. 특히, 여러 가지 다양한 혼합물이 혼합되어 존재하는 메타세콰이어 크루드 추출물을 첨가한 비교실험군은 쿼시트린 또는 미리시트린을 첨가한 실험군보다 높은 단백질 합성 효과를 확인하였다.

실험예 3. 쿼시트린 및 미리시트린의 MMP-1 생성 억제 효과

인간 정상 피부세포인 섬유아세포(한국 세포주 은행, 대한민국)를 48-웰 마이크로 플레이트(Nunc, 덴마크)에 각 웰당 1× 10⁶ 세포가 되도록 접종하고, DMEM 배지(Sigma, 미합중국) 및 37℃의 조건에서 24시간 동안 배양한 후 상기 제조예 1에서 얻은 쿼시트린과 미리시트린 및 메타세콰이어 크루드 추출물을 최종 농도 1%로 첨가한 무혈청 DMEM 배지 및 대조군으로 상기 성분 중 아무것도 넣지 않은 무혈청 DMEM 배지에서 48시간 동안 추가로 배양하였다. 배양 후, 각 웰의 상층액을 모아 MMP-1 분석 킷트(Amersham, 미합중국)를 이용하여 새로 합성된 MMP-1의 양(ng/㎖)을 측정하고, 하기 수학식 1에 따라 MMP-1 생성 억제율을 계산하였으며, 그 결과는 표 3에 나타내었다. 이때, MMP-1 생성 억제율의 양성 대조군으로 TGF-β(10ng/ml, Roche, 미합중국)을 사용하였다.

MMP-1 생성억제율(%)

시험 물질	MMP-1 생성 억제율(%)
쿼시트린	83.3
미리시트린	83.2
메타세콰이어 크루드 추출물	63.5
TGF-b	79.5

이하, 제형예에는 본 발명의 제조예 1로부터 획득한 쿼시트린 및 미리시트린을 사용하였으나 이에 한정되지 않는다.

제형예 1. 유연화장수

유연화장수의 제형예는 통상의 방법에 따라 다음과 같이 제조하였다.

성분	함량(단위:중량%)	함량(단위:중량%)
쿼시트린 미리시트린 글리세린 1.3-부틸렌글리콜 PEG 1500 알란토인 DL-판테놀 이.디.티.에이-2NA 벤조페논-9 소듐 히아루로네이트 에탄올 옥틱도데세스-16 폴리솔베이트 20 방부제, 향, 색소 증류수	1.0 - 5.0 3.0 1.0 0.1 0.3 0.02 0.04 5.0 10.0 0.2 0.2 미량 잔량	- 1.0 5.0 3.0 1.0 0.1 0.3 0.02 0.04 5.0 10.0 0.2 0.2 미량 잔량
합계	100	100

제형예 2. 수렴화장수

수렴화장수의 제형예는 통상의 방법에 따라 다음과 같이 제조하였다.

성 분	함량(단위:중량%)	함량(단위:중량%)
쿼시트린 미리시트린 글리세린 1.3-부틸렌글리콜 알란토인 DL-판테놀 이.디.티.에이-2NA 벤조페논-9 소듐 히아루로네이트 에탄올 폴리솔베이트 20 위치하젤 추출물 구연산 방부제, 향, 색소 증류수	1.0 - 2.0 2.0 0.2 0.2 0.02 0.04 3.0 15.0 0.3 2.0 미량 미량 잔량	- 1.0 2.0 2.0 0.2 0.2 0.02 0.04 3.0 15.0 0.3 2.0 미량 미량 잔량
합 계	100	100

제형예 3. 영양화장수

영양화장수의 제형예는 통상의 방법에 따라 다음과 같이 제조하였다.

성분	함량(단위:중량%)	함량(단위:중량%)
쿼시트린 미리시트린 글리세릴 스테아레이트SE 스테아릴 알콜 라놀린 폴리솔베이트 60 솔비탄스테아레이트 경화식물유 광물유 스쿠알란 트리옥타노인 디메치콘 초산토코페롤 카르복시비닐폴리머 글리세린 1.3-부틸렌글리콜 소듐히아루로네이트 트리 에탄올아민 방부제, 향, 색소 증류수	1.5 - 1.5 1.5 1.5 1.3 0.5 1.0 5.0 3.0 2.0 0.8 0.5 0.12 5.0 3.0 5.0 0.12 미량 잔량	- 1.5 1.5 1.5 1.5 1.3 0.5 1.0 5.0 3.0 2.0 0.8 0.5 0.12 5.0 3.0 5.0 0.12 미량 잔량
합계	100	100

제형예 4. 영양크림

영양크림의 제형예는 통상의 방법에 따라 다음과 같이 제조하였다.

성 분	함량(단위:중량%)	함량(단위:중량%)
쿼시트린 미리시트린 친유형 모노스테아린산글리세린 세테아릴알콜 스테아린산 밀납 폴리솔베이트 60 솔비탄스테아레이트 경화식물유 스쿠알란 광물유 트리옥타노인 디메치콘 소듐마그네슘실리케이트 글리세린 베타인 트리에타올아민 소듐히아루로네이트 방부제, 향, 색소 증류수	1.0 - 2.0 2.2 1.5 1.0 1.5 0.6 1.0 3.0 5.0 5.0 1.0 0.1 5.0 3.0 1.0 4.0 미량 잔량	- 1.0 2.0 2.2 1.5 1.0 1.5 0.6 1.0 3.0 5.0 5.0 1.0 0.1 5.0 3.0 1.0 4.0 미량 잔량
합계	100	100

제형예 5. 맛사지크림

맛사지크림의 제형예는 통상의 방법에 따라 다음과 같이 제조하였다.

성분	함량(단위:중량%)	함량(단위:중량%)
쿼시트린 미리시트린 친유형 모노스케아린산 글리세린 스테아릴알콜 스테아린산 폴리솔베이트 60 솔비탄스테아레이트 이소스테아릴이소스테레이트 스쿠알란 광물유 디메치콘 히드록시에칠셀룰로오스 글리세린 트리에타올아민 방부제, 향, 색소 증류수	2.0 - 1.5 1.5 1.0 1.5 0.6 5.0 5.0 35.0 0.5 0.12 6.0 0.7 미량 잔량	- 2.0 1.5 1.5 1.0 1.5 0.6 5.0 5.0 35.0 0.5 0.12 6.0 0.7 미량 잔량
합계	100	100

제형예 6. 에센스

에센스의 제형예는 통상의 방법에 따라 다음과 같이 제조하였다.

성분	함량(단위:중량%)	함량(단위:중량%)
쿼시트린 미리시트린 글리세린 베타인 피이지 1500 알란토인 DL-판테놀 이.디.티.에이-2Na 벤조페논 - 9 히드록시에칠 셀룰로오스 소듐히아루로네이트 카르복시비닐폴리머 트리에탄올아민 옥틸도데칸올 옥틸도데세스 -16 에탄올 방부제, 향, 색소 증류수	2.0 2.0 10.0 5.0 2.0 0.1 0.3 0.02 0.04 0.1 8.0 0.2 0.18 0.3 0.4 6.0 미량 잔량	2.0 2.0 10.0 5.0 2.0 0.1 0.3 0.02 0.04 0.1 8.0 0.2 0.18 0.3 0.4 6.0 미량 잔량
합계	100	100

제형예 7. 팩

팩의 제형예는 통상의 방법에 따라 다음과 같이 제조하였다.

성 분	함량(단위:중량%)	함량(단위:중량%)
쿼시트린 미리시트린 폴리비닐알콜 셀룰로오스 검 글리세린 피이지1500 사이크로데스트린 DL - 판테놀 알란토인 글리시리진산모노암모늄 니코틴아미드 에탄올 피이지 40 경화피마자유 향, 색소, 방부제 증류수	1.0 - 15.0 0.15 3.0 2.0 0.15 0.4 0.1 0.3 0.5 6.0 0.3 미량 잔량	- 1.0 15.0 0.15 3.0 2.0 0.15 0.4 0.1 0.3 0.5 6.0 0.3 미량 잔량
합계	100	100

실험예 4. 피부 주름 및 탄력 개선 효과

본 발명의 쿼시트린 및 미리시트린을 함유하는 크림 화장료의 피부 주름개선 효과에 대한 임상 시험을 실시하였다. 임상시험은 각 화장료의 실제 사용 테스트를 통하여 평가하였다.

실험은 제조예1로부터 획득된 쿼시트린 또는 미리시트린을 함유하고 있는 제형예 4의 영양 크림 및 제형예 4에서 상기 성분을 정제수로 대체한 크림을 비교예로 하여 각각의 대상자의 한쪽 뺨에 함께 사용하게 하였다. 40명의 30-40세 여성 중 외부 활동을 많이 하는 여성을 무작위로 2개 군으로 나누어 제형예 4와 비교예의 크림을 매일 아침 저녁 2회씩 세안 후 적당량을 눈가를 중심으로 2개월간 연속적으로 바르게 하였다. 각 피검자의 주름 개선 효과를 숙련된 의사의 육안 관찰을 통하여 평가하였다. 실험 결과는 하기의 표 11에 나타낸 바와 같다.

본 발명 화장료의 주름 개선 효과(육안평가)

	주름 개선 효과			유효율(%)
	우수	약간	없음	유효율(%)
쿼시트린 함유 크림	10	11	4	62.2
미리시트린 함유 크림	9	14	2	63.3
비교예의 크림	3	4	23	44.4

상기 표 11의 결과에서도 알 수 있듯이, 쿼시트린 또는 미리시트린을 함유한 제형예 4의 크림은 아무것도 넣지 않은 비교예의 크림에 비해서 높은 주름개선 효과를 보였다. 또한 본 발명의 화장료 조성물을 피부에 도포한 피검자들의 피부에서는 피부자극을 관찰할 수 없었다.

이상으로 본 발명의 특정한 부분을 상세히 기술하였는바, 당업계의 통상의 지식을 가진 자에게 있어서 이러한 구체적인 기술은 단지 바람직한 구현예일 뿐이며, 이에 본 발명의 범위가 제한되는 것이 아닌 점은 명백하다. 따라서 본 발명의 실질적인 범위는 첨부된 청구항과 그의 등가물에 의하여 정의된다고 할 것이다.

Claims

쿼시트린 및 미리시트린 중 어느 하나 이상을 유효성분으로 함유하는 피부 노화 방지용 화장료 조성물.
쿼시트린 및 미리시트린 중 어느 하나 이상을 유효성분으로 함유하는 피부 주름 개선용 화장료 조성물.
제 1 항 또는 제 2 항에 있어서, 상기 쿼시트린 및 미리시트린의 함량은 화장료의 조성물의 총 중량에 대하여 각각 0.000001-15.0 %로 포함되는 것을 특징으로 하는 화장료 조성물.
제 1 항 또는 제 2 항에 있어서, 상기 화장료 조성물은 용액, 현탁액, 유탁액, 페이스트, 겔, 크림, 로션, 파우더, 비누, 계면활성제-함유 클린싱, 오일, 분말 파운데이션, 유탁액 파운데이션, 왁스 파운데이션 및 스프레이로 구성된 군으로부터 선택되는 제형을 갖는 것을 특징으로 하는 화장료 조성물.
제 1 항 내지 제 4 항 중 어느 한 항의 화장료 조성물을 인간의 피부에 도포하는 것을 특징으로 하는 화장 방법.