KR20070095709A - Ｓｒｅｂｐ-1 생성 및 활성 저해용 화장료 조성물 - Google Patents

Abstract

본 발명은 스테롤 조절인자 결합단백질-1(sterol regulatory element binding protein-1, 이하 SREBP-1)의 생성 및 활성을 저해하는 녹차 추출 성분을 유효성분으로 함유하는 화장료 조성물에 관한 것으로, 보다 상세하게는 전사 조절 인자(transcription factor)인 SREBP-1의 생성 및 활성을 저해하는 에피갈로카테킨 갈레이트(EGCG), 갈로카테킨 갈레이트(GCG) 등의 카테킨류(catechins); 및 퀘르세틴(quercetin), 캄페롤(kaempferol) 및 미리세틴(myricetin) 등의 플라보놀류(flavonols)로 이루어진 군에서 선택된 1종 이상을 유효성분으로 함유함을 특징으로 하는 화장료 조성물에 관한 것이다. 상기 성분을 함유하는 화장료 조성물은 SREBP-1의 생성 및 활성화 저해, 지질 생합성 관련 효소의 발현 억제 등 피지 대사 과정의 전사 활성화 기능을 감소시킴으로써 항여드름 효과 등의 피지 억제효과를 나타낸다.

녹차, SREBP-1, 카테킨, 플라보놀, 여드름, 피지

Description

ＳＲＥＢＰ-1 생성 및 활성 저해용 화장료 조성물 {Cosmetic composition blocking SREBP-1 production and activation}

도 1은 피지 세포 분화시 본 발명의 녹차 추출 성분을 포함한 각각의 시료 처리 후, SREBP-1 활성 저해 수준을 검정한 것으로, 도 1-A는 SREBP-1에 대한 웨스턴 블로팅(Western blotting) 결과이며, 도 1-B는 A밴드의 정량화 그래프이다.

도 2는 본 발명의 녹차 추출 성분의 햄스터 플랭크기관에서의 SREBP-1 활성 저해 수준을 검정한 것으로, 도 2-A는 SREBP-1에 대한 웨스턴 블로팅(Western blotting) 결과이며, 도 2-B는 A밴드의 정량화 그래프이다.

본 발명은 스테롤 조절인자 결합단백질-1(sterol regulatory element binding protein-1, 이하 SREBP-1)의 생성 및 활성을 저해하는 녹차 추출 성분을 유효성분으로 함유하는 화장료 조성물에 관한 것으로, 보다 상세하게는 전사 조절 인자(transcription factor)인 SREBP-1의 생성 및 활성을 저해하는 에피갈로카테킨 갈레이트(EGCG) , 갈로카테킨 갈레이트(GCG) 등의 카테킨류(catechins); 및 퀘르세틴(quercetin), 캄페롤(kaempferol) 및 미리세틴(myricetin) 등의 플라보놀류 (flavonols)로 이루어진 군에서 선택된 1종 이상을 유효성분으로 함유함을 특징으로 하는 화장료 조성물에 관한 것이다. 상기 성분을 함유하는 화장료 조성물은 SREBP-1의 생성 및 활성화 저해, 지질 생합성 관련 효소의 발현 억제 등 피지 대사 과정의 전사 활성화 기능을 감소시킴으로써 항여드름 효과 등의 피지 억제효과를 나타낸다.

일반적으로 두피 및 얼굴을 포함한 피부에서 피지는 피부의 보습유지나 미생물의 침입을 막는 역할을 담당하지만, 사춘기 이후에는 여드름을 촉진시킨다. 특히, 30대 이후의 여성의 경우에는 피지의 과분비로 피부의 번들거림, 화장의 들뜸 및 모공의 넓어짐을 유발하기도 하여 미용학적인 측면에서 피지 조절물질에 대한 요구는 끊임없이 제기되고 있다. 이러한 피지 과분비가 일어나는데는 여러 원인이 관여하고 있는데, 그 중에서도 가장 중요한 요인은 피지선의 활성에 있어 피지 분비를 촉진하는데 관여하는 호르몬인 안드로겐(Androgen)에 의해서 피지선의 세포가 증가하고 활성화되어 피지 생성 및 과분비가 일어난다고 알려져 있다.

피부와 피지선은 안드로겐을 생성하고 대사하는 기능을 가지고 있다. 이러한 안드로겐은 지질 대사에 관여하는 대부분의 효소에 대해서 유전자 수준의 발현을 증가시키는데, 해당하는 효소로는 지방산 합성효소(fatty acid synthase(FAS)), 아세틸- CoA 카르복실라아제(acetyl-CoA carboxylase(ACC)), 말산효소(malic enzyme), ATP-시트르산 분해효소(ATP-citrate lyase), 3-히드록시-3메틸글루타릴-CoA 환원효소(3-hydroxy-3methylglutaryl-CoA reductase(HMG-CoA reductase)), HMG-CoA 합성효소(HMG-CoA synthase), 저지방 지질단백질 수용체(Low density lipoprotein receptor(LDLR)), SREBP 분해 활성 단백질(SREBP-cleavage-activating protein(SCAP)), 스테롤 조절인자 결합 단백질(Sterol-regulatory element-binding protein(SREBP)) 등이다(J Steroid Biochem Mol Bio., 92, 2004). 이런 지질대사 관련 효소들은 공통적으로 SRE라는 전사조절부위를 가지고 있는데, 안드로겐은 SRE에 결합하는 SREBP를 조절함으로써 위의 효소들을 조절하는 것으로 보고되었다.

'SRE(sterol regulatory element)'란 스테롤에 의해 조절되는 유전자의 전사조절부위를 가리킨다. 또한 'SREBP(sterol regulatory element binding protein)'란 SRE에 결합하는 SRE 결합단백질을 가리킨다. 일반적으로, 대부분의 포유류 세포에서 세포막의 콜레스테롤 함량은 SRE에 결합하는 SREBP의 부류에 의해 조절되는 것으로 알려져 있다.

SREBP는 3가지 이성질체 구조(isoform)로 존재한다. SREBP-1a 및 SREBP-1c는 하나의 유전자로부터 유래되며, 다른 전사개시위치(transcription initiation site)를 사용한다고 알려져 있고, SREBP-2는 다른 유전자로부터 전사되며, SREBP-1c 이성구조와 50% 정도의 유사 염기 서열을 가진다. 쥐(rat)에서 발현하는 SREBP-1c는 ADD1(adipocyte determination and differentiation dependent factor 1)이라고도 불리우며 주로 지방산 합성에 관련된 많은 유전자의 전사를 조절하는 트랜스-액팅 인자(trans-acting factor)이다. SREBP-2는 콜레스테롤 합성에 주로 관여한다.

SREBP는 보통의 경우 소포체(endothelium reticulum(ER))의 세포막에 발현되는 막단백질로 존재하며 크기는 약 128킬로달톤(kDa) 정도이다. 특정 시그날 (signal)에 의해 활성화 되기까지는 비활성화 형태(Inactivated form)로 머무르다가, 시그날에 의해 골지체(golgi complex)로 이동하면서 SREBP의 아미노 말단이 분해(cleavage)가 되면서 65킬로달톤 크기를 가진 활성화 형태(activated form)로 전환되어 핵으로 이동하고, 특정 유전자의 SRE에 결합하여 발현을 증가시키게 된다. 따라서, 지질합성에 관여하는 SREBP-1의 활성화를 조절하는 것은 피지생성조절에 매우 중요한 요인이다.

화장품 분야에서 피지의 과분비는 화장의 들뜸이나 모공이 넓어지게 하는 요인으로서 중요한 관심의 대상임에도 불구하고, 그 연구가 미미한 실정이다. 현재 피지억제 화장품은, 일시적으로 피지를 흡착시키는 다공성 파우더를 사용하거나, 기존에 피지를 억제한다고 알려진 생약추출물인 아이비 추출물 등을 화장품 원료로 사용하고 있으며, 현재까지의 연구는 5α-리덕타아제 효소의 억제제를 사용하여 여드름 치료제 및 피지분비 억제제를 개발하려는 연구들이 활발히 진행되고 있다.

녹차는 차나무과(Theaceae) 식물인 차(Camellia sinensis)의 잎을 채취하여 햇빛에 말리거나 쪄서 만든 것으로서, 항균, 간염, 심장 순환계 질환 및 동맥경화에 효과가 있으며, 특히 항암 작용, 피부 청정 및 수렴 효과 등 피부에 대한 이점도 있는 것으로 알려져 있다. 주성분으로는 flavan-3-ol류로 표현되는 다양한 카테킨류(catechins)와 플라보놀 (flavonol)류를 들 수 있다. 국제특허 PCT/US1998/23041 "5α-리덕타아제 효소 활성을 조절하는 방법 및 조성물"에서는 녹차 카테킨의 5α-리덕타아제 효소 활성 저해 능력을 이용하여 피지 생성 저해를 소구하고 있으며, 국내특허 1998-56996 "약제 조성물"에서는 녹차의 항산화 성질을 이용한 치주질환, 항염증 효과의 조성물을 소구하고 있다. 또한 국제특허 PCT/US1998/21675 "피부의 지성이고/이거나 번들거리는 외관을 조절하기 위한 국소용 조성물"에서는 피지 분비의 억제 및 소염효과를 위해 녹차 추출물의 이용을 실시예로서 언급하고 있다. 그러나 녹차 성분이 SREBP-1의 활성화를 억제하여 피지 생성 및 분비를 억제했다는 보고는 전무한 실정이다.

이에 본 발명자들은 녹차에 함유된 카테킨류 및 플라보놀류 성분이 SREBP-1의 생성 및 활성화를 억제하여 피지 세포에서 생산되는 피지량을 억제함으로써 효과적으로 피지 대사 개선 및 여드름 개선에 효과가 있음을 발견하고 본 발명을 완성하게 되었다.

따라서, 본 발명의 목적은 SREBP-1의 생성 및 활성화를 저해하고 그 대사 과정을 억제하여, 궁극적으로 피지 생성량을 감소시킴으로써 피지 대사 개선 또는 여드름 개선에 효과가 있는 화장료 조성물을 제공하는 것이다.

상기 목적을 달성하기 위하여, 본 발명에서는 유효성분으로서 카테킨류 및 플라보놀류로 이루어진 군에서 선택된 1종 이상을 함유하여 전사 조절 인자인 SREBP-1의 생성 및 활성 저해를 특징으로 하는 화장료 조성물을 제공한다.

상기 카테킨류는 에피갈로카테킨 갈레이트(EGCG), 갈로카테킨 갈레이트(GCG) 또는 이들의 혼합물임을 특징으로 한다.

상기 플라보놀류는 퀘르세틴(quercetin), 캄페롤(kaempferol) 및 미리세틴 (myricetin)으로 이루어진 군에서 선택된 1종 이상을 함유하는 것을 특징으로 한다.

이하, 본 발명을 구체적으로 설명한다.

본 발명에서 녹차의 구성 성분 중 에피갈로카테킨 갈레이트(EGCG), 갈로카테킨 갈레이트(GCG) 등의 카텐킨류(catechins); 및 퀘르세틴(quercetin), 캄페롤(kaempferol) 및 미리세틴(myricetin) 등의 플라보놀류(flavonol)는 65킬로달톤 크기의 활성화된 SREBP-1의 생성 및 활성을 저해하고, 그 대사 과정을 억제하여 궁극적으로 피지선세포에서 생산하는 피지량을 감소시킴으로써 그로 인한 피부 부작용을 억제한다(시험예 1~6).

본 발명은 상기 녹차에 함유된 카테킨류 및 플라보놀류로 이루어진 군에서 선택된 1종 이상을 함유하는 화장료 조성물을 제공한다(실시예 1 ~ 5, 비교예 1). 본 발명의 화장료 조성물에 첨가되는 카테킨류 및 플라보놀류의 양은 조성물 총 중량에 대하여 0.001 ~ 30 중량%이고, 바람직하게는 0.01 ~ 20 중량%이다. 이는 제형 내에서의 효능과 제형의 안정화를 유지하기 위한 목적 때문이다.

본 발명에 의한 피부 화장료 조성물은 그 제형에 있어서 특별히 한정되는 바가 없으며, 구체적으로는 로션, 유연화장수, 영양화장수, 영양크림, 마사지크림, 팩, 젤 및 에센스 등 다양한 피부 점착 타입 화장료의 제형일 수 있다.

이하, 실시예를 들어 본 발명을 보다 상세히 설명하지만, 본 발명이 이들에 의해 한정되는 것은 아니다.

[시험예 1] 피지 세포 분화시 녹차 추출 성분을 포함한 각각의 시료에 대한 SREBP-1 활성 저해 수준 검정

본 실험에 사용된 에피갈로카테킨 갈레이트(EGCG), 갈로카테킨 갈레이트(GCG), 퀘르세틴(quercetin), 캄페롤(kaempferol) 및 미리세틴(myricetin)은 미국 시그마社(St. Louis, MO, USA)를 통해 구입하여 사용하였다.

실험에 사용한 세포는 다음의 과정을 통해 일차배양하였다. 피지세포는 제휴 병원의 협조를 얻어, 모낭(hair follicle)에 부속되어 있는 피지선(sebaceous glands)에서 추출하였다. 추출 방법은 우선 얻어진 모낭 조각에 3 unit/ml의 디파아제(dipase)를 4℃에서 20시간 처리하여 상피세포(epidermis cell)를 분리하였다. 분리된 상피세포는 37℃에서 15분간 0.02% 디옥시리보뉴클레아제(deoxyribonuclease)로 처리한 후, 피지선을 미세절제하여 취하였다. 분리된 피지 소엽(sebocyte lobule)은 미토마이신 C-inactivated 3T3 세포(mitomycin C-inactivated 3T3 cell)와 함께 배양하였다. 배지는 DMEM:F12 (3:1)에 10% 소혈청(fetal bovine serum (FBS)), 10ng/ml 인간 재조합 상피 성장인자(human recombinant epidermal growth factor (EGF)), 10ng/ml 케라티노사이트 성장인자(keratinocyte growth factor (KGF)), 10-9M 콜레라 톡신(cholera toxin)(Sigma社), 2mM 글루타맥스(Glutamax)(200mM stock, Gibco社), 10ug/ml 젠타마이신(Gentamycin)(Amresco社)을 첨가하여 배양하였다. 실험을 위해 사용된 피지 세포의 계대배양수(passage number)는 4 이하로 제한하여 사용하였다. (J. Invest. Dermatol., 110:84-89, 1998)

배양 중인 피지 세포의 분화는 배지 조성의 변화를 통해 유도하였다. 시험을 위해 60mm 시험용 접시(dish)에 1X10⁵개로 분주하고 1일간 배양한 후, 각 세포를 PBS로 두 번 세척하고, FBS는 첨가되지 않고, 50ug/ml 소의 뇌하수체 추출물(bovine pituitary extract (BPE)), 1mg/ml 유리지방산 소혈청 알부민(fatty acid-free bovine serum albumin(faf-BSA)) 및 0.042ug/ml 리놀레산(linoleic acid (LIN))을 첨가시킨 DMEM:F12 (1:1)로 교환하고 48시간을 더 배양하였다. 그 후, 각 실험군 별로 시료를 처리하였다. 시료는 디메틸술폭시드(dimethylsulfoxide (DMSO))에 1000X 의 농도로 녹여 배지로 희석한 후 각 실험군별로 시험용 접시에 첨가해 주었다. 시험물질을 처리한 후 48시간 후에 cold PBS로 두번 세척하고, 시험용 접시에 세포추출용 버퍼(cell lysis buffer)를 이용하여 단백질을 추출하고 10% 비스-트리스 겔(Bis-Tris Gel)(invitrogen life technologies社)에 30μg의 단백질을 전기영동한 후 나이트로셀루로즈 멤브레인에 이동시켜 SREBP-1을 인식하는 항체를 처리한 후 발색반응을 하였다. SREBP-1의 발현 정도는 발색 반응으로 표현된 밴드의 강도를 농도계(densitometer)를 이용하여 측정하였다.

각 시험에 사용된 시험물질은 에피갈로카테킨 갈레이트(EGCG) 10μM, 갈로카테킨 갈레이트(GCG) 10μM, 퀘르세틴(quercetin) 10μM, 캄페롤(kaempferol) 10μM 및 미리세틴(myricetin) 10μM이며, 시험결과를 비교하기 위한 대조군으로서 피지세포의 분화를 유도하여 피지생성량을 증가시킨 실험군(control,CTL), 피지 생성 및 여드름 발생에 중요한 인자로 작용하는 안드로겐의 생합성 효소인 5α-리덕타아 제의 저해물질로 사용한 피나스테라이드(finasteride) 처리군(Fina) 10μM, 안드로겐 생합성 효소로서 5α-리덕타아제 전 단계에서 작용하는 3β-히드록시스테로이드 디하이드로게나아제 저해제인 사이프로테론 아세테이트 처리군(CPA) 1μM, PPAR-감마 억제제로서 피지세포의 분화에 관여하는 GW-9662 처리군(GW) 10μM을 피지세포 분화 유도 후 사용하였다. 실험에 사용한 모든 시약은 시그마사에서 구입하였다. (도 1-A, 1-B)

(도 1-A, 1-B)의 결과에서 보는 바와 같이, 피지세포 분화 유도시 활성화된 SREBP-1의 단백질 양이 녹차 추출 성분인 에피갈로카테킨 갈레이트(EGCG), 갈로카테킨 갈레이트(GCG), 퀘르세틴(quercetin), 캄페롤(kaempferol) 및 미리세틴(myricetin)을 처리한 군과 비교하여 볼 때, 그 발현 정도가 감소됨을 확인할 수 있었다.

따라서, 상기 녹차 추출 성분은 SREBP-1의 생성 및 활성화를 저해하여 이 단백질이 관여하는 각종 지질 생성 관련 유전자 발현을 감소시킴으로써 피지 생성을 억제하는 효능을 나타내리라 사료된다.

[시험예 2] 피지세포 증식 억제 시험

상기의 시험예 1에 기술한 방법과 동일한 방법으로 피지세포를 배양한 후에, 시험을 위해 96 웰 플레이트에 각 웰당 1X10⁴개로 피지세포를 분주하고 1일간 배양한 후 PBS로 2회 세척하였다. 이후 FBS는 첨가되지 않고, 1mg/ml 유리지방산 소혈 청 알부민(faf-BSA), 1mM Ca²⁺ 및 1ug/ml 리놀레산(LIN)을 첨가시킨 DMEM:F12 (1:1)로 교환하고 배지에 각 시험물질을 처리하여 각 웰에 200㎕을 가하고 72시간을 더 배양하였다. 증식 억제능의 평가는 프로메가社(Promega Co. USA)의 Cell Titer 96 AQ Non-Radioactive cell proliferation kit에서 제공하는 방법에 준하여 측정하였다.

실험에 사용한 시험물질은 시험예 1과 동일한 물질과 농도로 사용하였다. 시험결과를 비교하기 위해 세포 증식을 위한 배지만 처리한 군을 대조군(CTL)으로 하였으며, 양성 대조군으로는 3β-히드록시스테로이드 디하이드로게나아제 저해제로 알려진 사이프로테론 아세테이트(CPA)를 미국 시그마社(St. Louis, MO, USA)에서 구입하여 사용하였다.

상기 결과는 하기 [표 1]에 나타내었다.

녹차 추출 성분의 피지세포 증식 억제효과 (N=5, 평균값)

실험군	세포증식 유도군	CPA 1μM	EGCG 10μM	GCG 10μM	Quercetin 10μM	Kampferol 10μM	Myricetin 10μM
증식능(%)	100	72	78	73	80	68	75

상기의 [표 1]에서 보는 바와 같이, 피지세포의 증식이 녹차성분인 에피갈로카테킨 갈레이트(EGCG), 갈로카테킨 갈레이트(GCG), 퀘르세틴(quercetin), 캄페롤(kaempferol) 및 미리세틴(myricetin)을 처리한 군에 있어서 그 피지세포의 증식 정도가 현저하게 감소됨을 확인할 수 있었다.

따라서, 상기 녹차 추출 성분은 피지선에서의 피지세포의 증식을 저해함으로써 피지선의 피지분비를 억제하고 그로 인한 부작용을 억제하는 효능을 나타내리라 사료된다.

[시험예 3] 녹차 추출 성분의 피지세포에서의 피지 생성 억제 효능 검증 실험

상기의 시험예 1에 기술한 방법과 동일한 방법으로 피지세포를 배양한 후에 시료를 처리하고 72시간 경과 후, 각 세포에 HyQtase (detaching solution, Hyclone社)를 37℃에서 15분간 처리하여 세포를 플레이트에서 떼어내고, 배지를 가하여 중화시킨 후, 250g에서 10분간 원심분리하여 세포를 가라앉힌다. 그 후 세포에 형광색소(Nile red, Sigma社) stock solution (10mg/ml)를 PBS에 희석한 후 가하여, 최종 농도 10ug/ml가 되도록 염색한다. 염색은 차광 상태로 37℃에서 30분간 실시한다. 염색 후 세포를 가라앉힌 후 PBS에 분산하여 FACScalibur(Becton Dickinson, Plymouth, UK)를 이용하여, 샘플별로 10,000개의 세포에 대해 형광 정도를 측정한다. 형광색소(Nile red)에 의한 형광은 녹색 형광(FL-1)을 측정하였다. 녹색 형광은 피지 세포내의 중성 지방을 염색하여 형광을 나타낸다. 피지의 주 구성성분은 트리글리세라이드(triglyceride)로 대표적인 중성 지방에 해당한다. 실험군별 비교는 실험군 각각의 형광값의 평균치(means)를 구하여 무처리군과 비교하여 백분율로 표시하였다. 각 형광값은 각 실험군의 지방축적 정도(lipid content)를 반영한다. (ref. J. Invest. Dermatol., 121:441-447, 2003)

대조군으로 시료를 첨가하지 않은 무처리군을 사용하였고, 양성 대조군으로 피나스테라이드(finasteride, Cipla 社)를 이용하였다. 사용 시료와 양은 하기 [표 2]와 같다.

녹차 추출 성분의 피지세포 피지생성 억제효과 (N=3, 평균값)

처리시료	% of FL-1	억제율 (%)
무처리군	100.0 ± 4.9	-
+ Finasteride (10uM)	86.6 ± 11.4	13.6
+ EGCG (10uM)	86.2 ± 5.1	13.8
+ GCG (10uM)	89.1 ± 2.5	10.9
+ Quercetin (10uM)	88.8 ± 0.3	11.2
+ Kaempferol (10uM)	88.8 ± 1.5	11.2
+ Myricetin (10uM)	94.6 ± 3.4	5.4

상기 [표 2]에서 알 수 있듯이, 녹차 추출 성분인 에피갈로카테킨 갈레이트(EGCG), 갈로카테킨 갈레이트(GCG), 퀘르세틴(quercetin), 캄페롤(kaempferol) 및 미리세틴(myricetin)에 의해 피지선 세포의 피지 생성이 억제됨을 확인하였다.

상기 시험예 1 ~ 3에서 녹차 추출 성분의 피지세포에 대한 효능을 관찰한 결과, 상기 녹차 추출 성분은 매우 우수한 피지 생성 억제 효과를 나타냄으로써 여드름, 번들거림 등과 같은 각종 피부 부작용을 개선시키는데 뛰어난 효능을 가진다고 사료된 바, 하기의 시험예 4 ~ 5를 통하여 그 효능을 생체 조건내(in vivo) 테스트를 통해 확인하고자 하였다.

[시험예 4] 햄스터 피지선 억제 실험

상기 혼합물의 피지선 생장 억제 효과를 동물실험을 통하여 테스트하였다. 생후 4 ~ 5주 된 햄스터(Syrian golden hamster) 수컷을 구입하여 1주일 간 새로운 환경에 적응시키고, 등 부위의 털을 제거하여 플랭크 기관(flank organ)이 보이게 한 후, 사용 가능한 것을 골라 물질군마다 3마리씩 선정하여, 매일 2회, 2주간 실험 물질을 도포하였다. 플랭크 기관은 멜라노사이트(dermal melanocyte), 피지선(sebaceous gland), 모낭(hair follicle)의 집합 기관으로서 안드로겐(androgen) 효과를 측정하는데 널리 이용되어 왔다. 실험시작 2주 경과 후, 시간 경과에 따른 플랭크 기관의 크기를 측정하여 각각 비교하였다. 대조군에는 전달체(vehicle)로 사용된 알코올만 처리한 무처리군, 대표적인 안드로겐인 테스토스테론(testosterone, 이하T, Sigam社), 피나스테라이드(finasteride, Cipla社)를 도포하였다. 1회 도포시, 실험 물질의 총 부피는 5ul가 되도록 하였으며, 테스토스테론은 1ug, 각 실험 물질은 1mg을 도포하였다. 그 결과를 하기 [표 3]에 나타내었다.

녹차 추출 성분의 햄스터 피지선 발달 억제 효과 (N=6, 평균값)

처리시료	2주간 증가된 플랭크 기관의 면적 (mm2)	저해율 (%)
무처리군	20.41 ± 6.07	-
T	42.32 ± 12.57	-
T+ Finasteride	16.32 ± 7.22	61.4
T+ EGCG	29.55 ± 9.75	30.2
T+ GCG	19.85 ± 8.61	53.1
T+ Quercetin	20.06 ± 5.81	52.6
T+ Kaempferol	11.63 ± 15.21	72.5
T+ myricetin	19.56 ± 10.76	53.8

상기 [표 3]에서 저해율은 테스토스테론만 처리한 대조군을 기준으로 산정된 결과이다.

상기의 결과와 같이 테스토스테론 처리군은 무처리군에 비해 플랭크기관의 면적이 2배 이상 증가를 하였지만, 테스토스테론과 녹차 추출 성분을 동시에 처리한 군에 대해서는 면적 증가가 현저하게 억제되는 것을 확인할 수 있었다.

[시험예 5] 녹차 추출 성분의 햄스터 플랭크기관내 SREBP-1 활성 저해 수준 검정

상기 시험예 4에서 실험한 햄스터 플랭크기관의 일부를 획득하여 SREBP-1 단백질을 추출한 후, 상기 시험예 1과 동일한 방법으로 SREBP-1의 발현정도를 살펴보았다.(도 2-A, 2-B)

햄스터 플랭크기관을 이용하여 동물에서 녹차 추출 성분이 SREBP-1의 활성화 저해에 관여하고 있는지를 조사한 실험 결과, 각각의 녹차 성분이 효과적으로 SREBP-1의 활성화를 저해하고 있다는 것을 알 수 있었다.

[시험예 6] 피지분비 억제

시험예 1의 시험물질이 피지분비를 억제하는지 여부 및 그 정도를 확인하고자 얼굴에 피지분비가 많다고 느끼는 피검자를 선별하여 각 군당 5명씩을 대상으로 하기 [표 4]와 같이 유연화장수를 제조하여 실험을 하였다.

유연화장수의 제조

성분(함량: 중량%)	비교예1	실시예1	실시예2	실시예3	실시예4	실시예5
에피갈로카테킨 갈레이트	-	1.0	-	-	-	-
갈로카테킨 갈레이트	-	-	1.0	-	-	-
퀘르세틴	-	-	-	1.0	-	-
캄페롤	-	-	-	-	1.0	-
미리세틴	-	-	-	-	-	1.0
밀납	4.0	4.0	4.0	4.0	4.0	4.0
폴리솔베이트60	1.5	1.5	1.5	1.5	1.5	1.5
솔비탄세스퀴올레이드	0.7	0.7	0.7	0.7	0.7	0.7
유동파라핀	5.0	5.0	5.0	5.0	5.0	5.0
스쿠알란	5.0	5.0	5.0	5.0	5.0	5.0
가프리릭/카프릭트리글리세라이드	5.0	5.0	5.0	5.0	5.0	5.0
글리세린	3.0	3.0	3.0	3.0	3.0	3.0
부틸렌글리콜	3.0	3.0	3.0	3.0	3.0	3.0
프로펠렌글리콜	3.0	3.0	3.0	3.0	3.0	3.0
카르복시비닐폴리머	0.1	0.1	0.1	0.1	0.1	0.1
트리에탄올아민	0.2	0.2	0.2	0.2	0.2	0.2
메틸파라벤	0.12	0.12	0.12	0.12	0.12	0.12
프로필파라벤	0.03	0.03	0.03	0.03	0.03	0.03
향료	0.1	0.1	0.1	0.1	0.1	0.1
정제수	잔액	잔액	잔액	잔액	잔액	잔액
계	100.0	100.0	100.0	100.0	100.0	100.0

1) 매일 저녁 세안 후, 각 실험군 별로 실시예 1 ~ 5 및 비교예 1의 유연화장수를 한달 동안 발랐다.

2) 피지 측정은 세안 후 30분간 항온 항습실에서 안정시킨 후, 피지측정기(sebumeter)를 이용하여 이마, 뺨 및 턱의 3부위의 피지량을 측정하였다.

3) 실시예 1 ~ 5 및 비교예 1의 유연화장수 사용 전에 측정된 피지량을 초기값으로 설정하여 실시예 1 ~ 5 및 비교예 1의 유연화장수를 지속적으로 사용하고, 2주 간격으로 2회 피지량을 측정하였다.

4) 초기값과 비교하여 실시예 1 ~ 5 및 비교예 1의 유연화장수의 피지 억제 효능을 판정하였다.

그 결과는 하기 [표 5]에 나타나 있다.

녹차 추출 성분이 함유된 유연화장수의 피지분비 억제 효능 (㎍/cm² hr, N=5, 평균값)

구분	이마			뺨			턱
측정시기	초기	2주후	4주후	초기	2주후	4주후	초기	2주후	4주후
비교예1	104.8	95.6	87.6	80.2	77.5	73.0	90.5	84.9	80.0
실시예1	98.2	95.8	81.5	71.6	69.0	65.4	88.0	85.8	79.7
실시예2	95.9	89.4	78.4	70.5	68.1	61.2	82.4	78.4	71.1
실시예3	96.2	94.8	85.1	73.8	65.9	62.8	80.1	78.2	70.8
실시예4	99.1	90.1	77.6	72.9	69.6	65.0	89.2	75.1	69.2
실시예5	97.3	97.0	89.3	75.2	67.5	65.5	86.6	80.4	75.0

상기의 [표 5]에서 보는 바와 같이, 본 발명의 녹차 추출 성분인 에피갈로카테킨 갈레이트(EGCG), 갈로카테킨 갈레이트(GCG), 퀘르세틴(quercetin), 캄페롤(kaempferol) 및 미리세틴(myricetin)은 피지분비를 효과적으로 억제하는 효과가 있음을 확인할 수 있었다.

이상에서 상술한 바와 같이, 상기 녹차에 함유된 카테킨류 및 플라보놀류를 유효성분으로 함유하는 화장료 조성물은 SREBP-1의 생성 및 활성화 저해, 지질 생합성 관련 효소의 발현 억제 등 피지 대사 과정의 전사 활성화 기능을 감소시킴으로써, 궁극적으로는 피지선 세포의 피지 생성 및 피지 축적을 억제하여 항여드름 효과 등의 피부 보호 효과를 갖는 피지 억제용 조성물 등으로 사용할 수 있다.

Claims (6)

1. 유효성분으로서 카테킨류 및 플라보놀류로 이루어진 군에서 선택된 1종 이상을 함유하여 전사 조절 인자(transcription factor)인 SREBP-1(sterol regulatory element binding protein-1)의 생성 및 활성 저해를 특징으로 하는 화장료 조성물.
2. 제 1항에 있어서, 상기 카테킨류는 에피갈로카테킨 갈레이트(EGCG), 갈로카테킨 갈레이트(GCG) 또는 이들의 혼합물임을 특징으로 하는 화장료 조성물.
3. 제 1항에 있어서, 상기 플라보놀류는 퀘르세틴(quercetin), 캄페롤(kaempferol) 및 미리세틴(myricetin)으로 이루어진 군에서 선택된 1종 이상을 함유하는 것임을 특징으로 하는 화장료 조성물.
4. 제 1항에 있어서, 상기 유효성분은 화장료 총 중량에 대하여 0.001~30 중량%로 함유함을 특징으로 하는 화장료 조성물.
5. 제 1항에 있어서, 상기 조성물은 로션, 유연화장수, 영양화장수, 영양크림, 마사지크림, 팩, 젤 또는 에센스임을 특징으로 하는 화장료 조성물.
6. 제 1항 내지 제 3항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 조성물은 항여드름용임 을 특징으로 하는 화장료 조성물.

Images