KR20050003905A - 항암 활성을 갖는 방향족 알킬 술폰 아미드 유도체 및 이화합물을 함유하는 약학조성물 - Google Patents

항암 활성을 갖는 방향족 알킬 술폰 아미드 유도체 및 이화합물을 함유하는 약학조성물 Download PDF

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Abstract

본 발명은 항암활성을 가진 새로운 화합물인 세라마이드(ceramide) 유도체로써 방향족 알킬 술폰 아미드(aromatic alkyl sulfone amide) 유도체 화합물 및 이 화합물을 함유하는 약학조성물에 관한 것으로서, 암의 예방 및 치료에 유용한 약학조성물을 제공한다.

Description

항암 활성을 갖는 방향족 알킬 술폰 아미드 유도체 및 이 화합물을 함유하는 약학조성물{Pharmaceutical composition comprising aromatic alkyl sulfone amide derivatives having anti-cancer activity and pharmaceutical composition containing the same}
본 발명의 목적은 항암 활성을 갖는 유용한 신규 화학구조의 방향족 알킬 술폰 아미드 유도체(aromatic alkyl sulfone amide derivatives) 화합물 및 이를 함유하는 약학조성물 및 이의 제조방법에 관한 것이다.
암의 발병 기전으로 인식되고 있는 암세포의 증식과 사멸 기전은 최근 생물학의 급속한 발달로 분자 수준에서의 연구가 활발히 진행되고 있다.
세포막의 구성성분인 지질 및 그 분해 산물은 세포기능 조절에 관여하는 인자로써 중요한 생화학적 기능을 갖고 있다. 이들 중 하나인 세라마이드(ceramide)는 세포막의 구성성분인 스핑고리피드(sphingolipids)의 일종으로 세포기능을 조절하는 인자로써 중요한 생리 화학적 기능을 갖고 있는데, 단백질 키나제(protein kinase), MAP 키나제 등을 활성화시키고 포스포리파제 D(phospholipase D)를 억제시킴으로써 세포의 성장, 분화, 사멸, 노화 및 신경 퇴화 등에 관여하는 것으로 보고 되어 있다(Merrill, A. H. J., et al.,Toxicol. appl. Pharmcol.142, pp208-225, 1997). 특히 세라마이드는 류케미아(leukemia) 세포나 다른 여러 형태의 세포들에서 세포사멸(Obeid,Science,259, pp1769-1771, 1933), 세포분화(Okazaki,J. Biol. Chem., 264, pp19076-19086, 1989), 세포성장억제(Jayadev,J. Biol. Chem.,269, pp5757-5763, 1995) 및 세포 노화(Venable,J. Biol. Chem.,270, pp30701-30708, 1995 : Kim,Biochem. Biophys. Res. Commun.,28, 583-587, 1997) 등에 관여하는 중요한 이차전달 물질로 보고되고 있으며, 또한 퍼킨슨씨 질환(Hunot,Proc. Natl. Acade. Sci. U.S.A., 94, pp7531-7536, 1997)과 알쯔하이머 질환(Fiebich.,J. Neuroimmunol., 63, pp207-211, 1995) 등의 퇴행성 뇌질환과의 관련성도 알려져 있다.
세라마이드의 세포내 농도 증가와 관련된 여러 생리작용 중 세포사멸은 매우 중요하며 치밀하게 조절되는 세포의 중요한 기능으로, 개체의 정상적인 기능과 항상성을 유지하기 위한 세포의 필요에 의해 고유의 신호 전달 체계를 통하여 이루어지고 있음이 밝혀졌다(Obeid,Science,259, pp1769-1771, 1993). 그리고 세라마이드의 농도가 증가하면 암세포의 성장도 억제될 수 있음이 보고 되었다.
세포사멸의 생리기전에 기능장애가 오면 세포의 암화 및 암세포의 분화를 촉진하게 되고, 이러한 결함을 정상화시키면 정상세포에는 독성이 없고 암세포의 세포사멸만을 선택적으로 촉진시킨다(Selzner.,Cancer Research,61, pp1233-1240, 2001). 세라마이드의 농도는 암세포에서 정상세포에서보다 50 % 이하의 농도를 나타내었으며, 세라마이드 계열이나 세라마이드 분해효소 억제제 등을 암세포에 처리하면 암세포내의 세라마이드 농도가 증가하여 시토크롬 c(cytochrome c)의 유리를 촉진시키고, 이것이 카스파아제(caspase)를 활성화시켜 세포 사멸을 일으켰다. 이때 정상세포에 대한 독성은 없었다고 보고되었다(Selzner,Cancer Research,61, pp1233-1240, 2001).
그러므로 세라마이드 계열 화합물이나 세라마이드 농도를 높여줄 수 있는 화합물은 암세포에 대해서만 선택적인 독성을 나타내는 새로운 치료전략을 가능케 하는 화합물이 될 수 있다.
그 동안 세라마이드 유도체가 많이 합성되었는데, 그 중 C2, C6또는 C8-세라마이드 등의 단쇄형 세포막 투과성 세라마이드 유도체들을 세포에 처리할 때, 그 작용이 정상 세포내의 세라마이드 증가에 의한 것과 유사하게 나타났다(Witty, J. P.,et al.,Endocrinology,137, pp5269-5277, 1996). 특히, 최근의 연구에서, 6-에틸-5-테트라데실-1H-피리미딘-2,4-디온과6-에틸-5-테트라데실-2-티옥소-2,3-디하이드로-1H-피리미딘-4-원은 CCRF-CEM 인간 백혈병 세포(human leukemia cells)에 처리할 경우, C2-세라마이드 보다 항암 활성이 더 좋다고 보고 되었다(Macchia, M.,et al.,J. Med. Chem.,44, pp3994-4000, 2001). 세라마이드 농도저하에 작용하는 효소를 억제하는 PDMP(Radin, N. S.,et al.,Adv. Lipid. Res.,26, pp183-213, 1993)와 D-e-MAPP(Bielawska, A.,et al.,J. Biol. Chem.,271, pp12646-12654, 1996)를 사용한 실험에서 이들 화합물은 모두 세포 사멸을 일으키고, 세라마이드의 세포내 농도를 증가시키는 것으로 보고되었다.
천연의 세라마이드는 스핑고신과 아실기가 아미드 결합에 의해 결합된 화합물로써, 하기 화학식 1과 같이 1번과 3번 탄소에 각각 1개씩의 히드록시기와 2번 탄소에 1개의 아민기를 지니며 4, 5번 탄소에 트란스 이중결합을 가진 (2S,3R)-D-에리스로 구조의 화합물이다.
이러한 세라마이드의 기본구조를 근간으로하여 분자수식 전략을 통하여 새로운 구조의 세라마이드 유도체를 연구하였다. 먼저, 천연의 세라마이드는 C18스핑고신 기(sphingosin group)기와 C14-C16 N-아실 기(acyl group)를 포함하고 있어서 친유성이 매우 높아 생체 내에 분포가 잘되지 않으므로, 세라마이드의 세포막 투과성을 높이고 약물동력학적인 성질을 개선하기 위하여 스핑고신 부분의 지용성(aliphatic)기를 다양한 종류의 페닐 아미노 알콜(phenyl amino alchols)로 치환한 세라마이드 유도체를 설계하였다. 또한, 지방산의 R-CH2CO-NH- 부위 중 CH2CO 부위를 바이오이소스테릭 기(bioisosteric group)인 SO2로 대치하여 R-SO2로 변환하였다. 그리고 세라마이드의 친유성을 개선하고 우수한 활성을 갖는 세라마이드 유도체를 합성할 목적으로 R 부위에 다양한 길이의 알킬기를 도입시키거나 방향족 고리를 도입시키고자 하였으며, 합성 화합물의 입체 화학적 특이성을 보기 위하여 키랄(chiral) 탄소의 입체 화학이 다른 화합물을 합성하여 세포 독성 활성을 비교하였으며, 합성한 화합물에 대하여 암세포를 대상으로 세포 사멸 효과를 측정하였다.
이에 본 발명자들은 신규한 방향족 알킬 술폰 아미드 유도체 화합물이 암세포에 대한 탁월한 세포사멸 활성을 갖음을 확인하여 본 발명을 완성하였다.
본 발명의 목적은 세라마이드의 유사 구조형인, 항암 활성을 갖는 신규 화학구조의 방향족 알킬 술폰 아미드 유도체 화합물을 제공하고자 한다.
도 1a 내지 1d는 다양한 인간 암세포 라인에 대한 각기 다른 알킬기를 가진 합성 화합물들의 세포 독성 효과를 측정한 것으로,
도 1a는 화합물(1) 내지 (5)의 세포 독성 효과를 측정한 도이고,
도 1b는 화합물 (6) 내지 (10)의 세포 독성 효과를 측정한 도이며,
도 1c는 화합물 (11) 내지 (15)의 세포 독성 효과를 측정한 도이고,
도 1d는 화합물 (16) 내지 (20)의 세포 독성 효과를 측정한 도이며,
도 2a 내지 2e는 다양한 인간 암세포 라인에 대한 각기 다른 알킬기를 가진 합성 화합물들과 대조군의 세포 독성 효과를 측정한 것으로,
도 2a는 신장암 세포주 Caki-2에 대한 세포 독성 효과를 측정한 도이며,
도 2b는 결장암 세포주 HT-90에 대한 세포 독성 효과를 측정한 도이고,
도 2c는 폐암 세포주 A549에 대한 세포 독성 효과를 측정한 도이며,
도 2d는 전립선암 세포주 PC-3에 대한 세포 독성 효과를 측정한 도이고,
도 2e는 백혈병 세포주 HL-90에 대한 세포 독성 효과를 측정한 도이다.
상기 목적을 달성하기 위하여, 본 발명은 방향족 알킬 술폰 아미드(aromatic alkyl sulfone amide) 유도체로서 하기 일반식 (Ⅰ)로 표기되는 화합물 또는 이들의 약학적으로 허용가능한 염 및 그 이성질체를 제공한다.
( I )
상기 일반식에서,
R1은 히드록시기 또는 C1내지 C3알콕시기이고;
R2는 수소원자 또는 히드록시기 또는 C1내지 C3알콕시기이고;
R3는 C5내지 C30의 알킬기이고;
R4는 수소원자, 니트로기, 아민기, 할로겐 원자 또는 C1내지 C3알킬기이다.
본 발명의 바람직한 화합물군은 상기 일반식 (I)에서, R1은 히드록시기이고, R2가 수소원자이고, R3는C7내지 C13의 알킬기이며, R4는 수소원자 또는 니트로기인 화합물군 및 그 이성질체이며, 보다 바람직한 화합물로는
(1R, 2S) 2-(1-헵탄술포닐아미도)-1-페닐-1-프로판올,
(1R, 2S) 2-(1-옥탄술포닐아미도)-1-페닐-1-프로판올,
(1R, 2S) 2-(1-노난술포닐아미도)-1-페닐-1-프로판올,
(1R, 2S) 2-(1-운데칸술포닐아미도)-1-페닐-1-프로판올,
(1R, 2S) 2-(1-트리데칸술포닐아미도)-1-페닐-1-프로판올,
(1S, 2R) 2-(1-헵탄술포닐아미도)-1-페닐-1-프로판올,
(1S, 2R) 2-(1-옥탄술포닐아미도)-1-페닐-1-프로판올,
(1S, 2R) 2-(1-노난술포닐아미도)-1-페닐-1-프로판올,
(1S, 2R) 2-(1-운데칸술포닐아미도)-1-페닐-1-프로판올,
(1S, 2R) 2-(1-트리데칸술포닐아미도)-1-페닐-1-프로판올,
(1R, 2R)2-(1-헵탄술포닐아미도)-1-(4'-니트로페닐)-1,3-프로판디올,
(1R, 2R)2-(1-옥탄술포닐아미도)-1-(4'-니트로페닐)-1,3-프로판디올,
(1R, 2R)2-(1-노난술포닐아미도)-1-(4'-니트로페닐)-1,3-프로판디올,
(1R, 2R)2-(1-운데칸술포닐아미도)-1-(4'-니트로페닐)-1,3-프로판디올,
(1R, 2R) 2-(1-트리데칸술포닐아미도)-1-(4'-니트로페닐)- 1,3-프로판디올,
(1S, 2S)2-(1-헵탄술포닐아미도)-1-(4'-니트로페닐)-1,3-프로판디올,
(1S, 2S)2-(1-옥탄술포닐아미도)-1-(4'-니트로페닐)-1,3-프로판디올,
(1S, 2S) 2-(1-노난술포닐아미도)-1-(4'-니트로페닐)-1,3-프로판디올,
(1S, 2S)2-(1-운데칸술포닐아미도)-1-(4'-니트로페닐)-1,3-프로판디올,
(1S, 2S) 2-(1-트리데칸술포닐아미도)-1-(4'-니트로페닐)- 1,3-프로판디올을 포함한다.
상기 일반식 (Ⅰ)에서, 방향족 알킬 술폰 아미드의 키랄 중심 1-와 2-의 입체화학은 칸-인골드와 프리로그의 규칙(R. S. Cahn, C. Ingold, and Prelog,Angewandte Chemie, International Edition English,5, p385, 1966:5, p511, 1966)의 "S" 또는 "R"의 입체화학을 갖는 화합물이므로, 상기 일반식 (Ⅰ)의 라세미 혼합물 및 R 또는 S형 입체이성질체들도 본 발명의 범위에 포함된다. 그리고, 본 발명은 약제학적으로 허용 가능한 염 형태의 모든 화합물들도 포함한다.
또한, 본 발명에 따른 상기 일반식 (Ⅰ)로 표기되는 방향족 알킬 술폰 아미드 유도체 화합물은 당해 기술 분야에서 통상적인 방법에 따라 허용되는 산부가염을 형성할 수 있는 바, 예컨대 적절히 선택된 용매에 화합물을 용해시키고 이를 과량의 무기산 또는 유기산으로 처리함으로써 제조한다. 약제학적으로 허용되는 산부가염으로는 염산, 브롬산, 황산, 인산 또는 질산 등과 같은 무기산염; 그리고 아세트산, 메탄술폰산, 시트르산, 퓨마르산, 말레인산, 아스코르브산, 숙신산, 타르타르산, 벤젠술폰산 등과 같은 유기산 염을 포함한다.
상기의 일반식 (Ⅰ)의 약학적으로 허용가능한 염은, 달리 지시되지 않는 한, 일반식 (Ⅰ)의 화합물에 존재할 수 있는 산성 또는 염기성 기의 염을 포함한다. 예를 들면, 약학적으로 허용가능한 염으로는 히드록시기의 나트륨, 칼슘 및 칼륨 염이 포함되며, 아미노기의 기타 약학적으로 허용가능한 염으로는 히드로브로마이드, 황산염, 수소 황산염, 인산염, 수소 인산염, 이수소 인산염, 아세테이트, 숙시네이트, 시트레이트, 타르트레이트, 락테이트, 만델레이트, 메탄설포네이트(메실레이트) 및p-톨루엔설포네이트(토실레이트) 염이 있으며, 당업계에서 알려진 염의 제조방법이나 제조과정을 통하여 제조될 수 있다.
상기의 일반식 (Ⅰ)의 화합물은 비대칭 중심을 가지므로 상이한 거울상 이성질체 형태로 존재할 수 있으며, 일반식 (Ⅰ)의 화합물의 모든 광학 이성질체 및 입체 이성질체 및 이들의 혼합물도 본 발명의 범주내에 포함되는 것으로 한다. 본 발명은 라세미체, 하나 이상의 거울상 이성질체 형태, 하나 이상의 부분 입체 이성질체 형태 또는 이들의 혼합물의 용도를 포함하며, 당업계에서 알려진 이성질체의 분리 방법이나 제조과정을 포함한다.
본 발명의 다른 목적은 상기 일반식 (Ⅰ) 화합물의 제조방법을 제공하는데, 이하에 구체적으로 설명한다.
상기의 일반식 (Ⅰ)로 표기되는 방향족 알킬 술폰 아미드 유도체는, 일반식(Ⅱ)의 알킬 술폰산(alkyl sulfonic acid)금속염(M)과 SOCl2와 같은 설폰화 시약을 반응시켜 얻은 일반식(Ⅲ)의 알킬 술폰 클로리드(alkyl sulfonyl chloride)에 R1, R2및 R4치환기 정의에 상응하는 일반식(Ⅳ)의 페닐 아민 유도체를 반응시킴으로서 제조될 수 있다.
R3-SO3-M (Ⅱ)
상기 식에서,
R3는 일반식(Ⅰ)에 정의된 바와 같고,
M은 Na, K, Mg와 같은 중금속 양이온 염이다.
R3-SO2-Cl (Ⅲ)
상기 식에서,
R3는 일반식(Ⅰ)에 정의된 바와 같다.
(Ⅳ)
상기 식에서,
R1, R2및 R4는 일반식(Ⅰ)에 정의된 바와 같다.
본 발명의 화합물은 하기의 반응식들에 도시된 방법에 의해 화학적으로 합성될 수 있지만, 이들 예로만 한정되는 것은 아니다. 하기의 반응식들은 본 발명의 대표적인 화합물들의 제조방법을 제조 단계별로 나타내는 것으로 다른 화합물들은 당업자들에 의해 숙지된 시약 및 출발물질의 적당한 변화에 의해 제조될 수 있다.
보다 구체적으로, 일반식 (Ⅰ) 화합물을 제조하는 방법은 하기 반응식 1에 기재된 바에 의하여 상세히 설명되어진다.
본원의 화합물을 제조하기 위하여 먼저 일반식 (Ⅱ)의 화합물은 공지의 방법에 의해 얻을 수 있으며, 상기 일반식 (Ⅲ)의 화합물은 일반식 (Ⅱ)의 화합물을 적당한 용매에 녹인 후, DMF를 적가하고, 빙상에서 SOCl2를 서서히 가한 후, 일정시간 동안 환류(reflux)한 다음, 반응물을 단순증류 장치로 여분의 SOCl2를 제거한 후, 남은 반응물을 농축하여 제조할 수 있다. 상기 반응에 사용될 수 있는 적절한 용매로는 벤젠, 크실렌 또는 톨루엔 중에서 선택된 단독 또는 혼합용매로, 바람직하게는 톨루엔이다. 전형적인 반응온도는 -20 내지 100 ℃ 범위이고, 바람직하게는 0 ℃이며, 반응시간은 수 분 내지 1일 범위로, 바람직하게는 4시간이다.
상기 일반식 (Ⅳ)의 화합물은 THF 및 30 % 아세트산 나트륨과 같은 약산염에 녹인 후 적당한 온도에서 일반식 (Ⅲ)의 화합물을 천천히 적가한 후, 일정시간 동안 교반하면서 반응시킨 후, 그 반응액에 EtOAc와 같은 유기용매를 가하고, NaHCO3포화용액과 5 % 시트릭산과 같은 약산과 포화 염화나트륨으로 세척하고 유기 층을 무수 Na2SO4와 같은 건조제로 건조한 후, 여과하고 감압농축하여 조화합물을 얻은 다음, 실리카겔 칼럼 크로마토그래피로 정제하여 순수한 목적화합물을 수득할 수 있다. 전형적인 반응온도로는 -20 내지 100℃ 범위, 바람직하게는 실온이고, 반응시간은 수 분 내지 2일 범위 내로, 바람직하게는 24시간이다.
본 발명의 또 다른 목적은 활성성분으로써 암을 치료하는데 유효한 양의 상기 일반식 (Ⅰ) 화합물과 약제학적으로 허용가능한 담체와 함께 함유하는 약학 조성물을 제공하는 것이다.
본 발명의 화합물을 활성성분으로 하는 약학 조성물은 암의 치료 및 예방에 사용될 수 있다.
상기의 암은 폐암, 골암, 췌장암, 피부암, 두부 또는 경부 암, 피부 또는 안구내 흑색종, 자궁암, 난소암, 직장암, 위암, 항문부근암, 결장암, 유방암, 나팔관암종, 자궁내막암종, 자궁경부암종, 질암종, 음문암종, 호지킨병(Hodgkin's disease), 식도암, 소장암, 내분비선암, 갑상선암, 부갑상선암, 부신암, 연조직 육종, 요도암, 음경암, 전립선암, 만성 또는 급성 백혈병, 림프구 림프종, 방광암, 신장 또는 수뇨관 암, 신장세포 암종, 신장골반 암종, 중추신경계(CNS; central nervous system) 종양, 1차 CNS 림프종, 척수 종양, 뇌간 신경교종, 뇌하수체 선종, 또는 이들 암의 하나 이상의 조합을 포함하는 것을 의미한다.
본 발명의 일반식 (Ⅰ)의 화합물은 약제학적으로 허용가능한 담체, 보조제또는 희석액과 함께 약학적 조성물을 제공할 수 있는데, 통상의 무독성 약제학적으로 허용가능한 담체, 보강제 및 부형제를 첨가하여 약제학적 분야에서 통상적인 제제로 제형화(예를 들면 경구, 비경구, 정맥내, 복강내, 피하, 국소)하여 고체 또는 액체 형태로 투여할 수 있으며, 특히 바람직하기로는 경구투여 및 정맥 주사로 투여하는 것이다. 예를 들면, 본 발명의 화합물은 주사 용액의 제조에 통상적으로 사용되는 오일, 프로필렌글리콜 또는 다른 용매에 용해시킬 수 있으며, 적당한 담체로는 특별히 한정되지 않지만, 예를 들면, 생리식염수, 폴리에틸렌글리콜, 에탄올, 식물성 오일 및 이소프로필미리스테이트 등이 있고, 국소 적용을 위해서는 본 발명의 화합물을 연고나 크림으로 제형화할 수 있다.
이하, 제형방법 및 부형제를 설명하지만, 이들 예로만 한정되는 것은 아니다.
본 발명의 화합물의 약학적 투여 형태는 이들의 약학적 허용가능한 염의 형태로도 사용될 수 있고, 또한 단독으로 또는 타 약학적 활성 화합물과 결합뿐만 아니라 적당한 집합으로 사용될 수 있다.
본 발명의 약제조성물을 임상적으로 이용시에는 약제학적 분야에서 통상적으로 담체와 배합하여 약제학적 분야에서 통상적인 제제, 예를 들면 정제, 캅셀제, 트로키제, 엘릭시르제, 액제, 현탁제 등의 경구투여용 제제; 주사용 용액, 주사용 동결 건조된 분말 또는 현탁액 등의 주사용 제제; 연고제, 크림제, 액제 등의 국소적용형 제제 등의 다양한 형태로 제형화 할 수 있다. 본 발명의 약제 조성물에 사용될 수 있는 담체는 약제학적 분야에서 통상적으로 적용되고 있는 무독성의 것이어야 한다.
본 발명의 화합물은 일반적인 식염수, 5 % 덱스트로스와 같은 수용성 용매 또는 식물성 오일, 합성 지방산 글리세라이드, 고급 지방산 에스테르 또는 프로필렌글리콜과 같은 비수용성 용매에 화합물을 용해시키거나, 현탁시키거나 또는 유화시켜 주사제로 제형화될 수 있다. 본 발명의 제형은 용해제, 등장화제(isotonic agents), 현탁화제, 유화제, 안정화제 및 방부제와 같은 종래의 첨가제를 포함할 수 있다.
경구투여용 제제의 경우는 미세결정 셀룰로오스, 검트라가칸쓰(gumtragacanth) 또는 젤라틴 등의 결합제; 알긴산, 프리노겔(PrinogelTM), 옥수수 전분 등의 붕해제; 마그네슘 스테아레이트, 스테로테스(sterotesTM) 등의 윤활제; 콜로이드성 실리카 등의 글리단트(glidant); 설탕, 사카린 등의 감미료 및 페퍼민트, 메틸 살리실레이트, 오렌지향 및 이의 유사체 등의 조미료 등이 적용될 수 있다. 단위 투여 형태가 캡슐인 경우, 상기한 첨가제 이외에도 지방기름과 같은 액체 담체를 포함할 수 있으며, 다른 형태의 단위 투여형에서는 투여단위의 물리적 형태를 개선할 수 있는 재료, 예를 들면 쿠팅제 등을 포함 할 수 있다. 따라서, 정제(tablets) 또는 환제(pills)의 경우는 설탕 셀락(shellac)으로 코팅하거나 또는 다른 장용피로 피복시킬 수 있다. 시럽(syrup)의 경우는 활성화합물 이외에 감미료로서 설탕과 전통적인 보존제, 염료, 착색제, 조미료 등을 함유할 수 있다.
비경구 투여용 제제는 활성성분을 용액이나 동결건조된 분말 또는 현탁액으로 제조하여 이용할 수 있다. 그러한 용액이나 동결건조된 분말 또는 현탁액에 포함될 수 있는 성분으로는 무균 희석제, 예를 들면 주사용 물, 식염수, 경화유, 폴리에틸렌 글리콜, 글리세린, 프로필렌 글리콜, 또는 다른 합성용매; 항균제, 예를 들면 벤질알콜 또는 메틸파라벤; 항산화제, 예를 들면 아스코르브산 또는 소듐 바이설파이드; 킬레이트제, 예를 들면 에틸렌 디아민테트라아세테이트산(EDTA); 완충제, 예를 들면 아세테이트, 시트레이트 또는 포스페이트; 그리고 긴장성(tonicity)을 조절해주는 시약 예를 들면 염화나트륨, 덱스트로스, 만노오스 등이 있다. 비경구적 조제는 앰플, 일회용 주사기, 또는 유리나 플라스틱으로 만들어진 다용량 바이알(multiple dose vials)에 넣어 사용할 수 있다.
본 발명의 화합물의 바람직한 투여량은 환자의 상태 및 체중, 질병의 정도, 약물형태, 투여경로 및 기간에 따라 다르지만, 당업자에 의해 적절하게 선택될 수 있으며, 특히 바람직한 효과를 위해서, 본 발명의 화합물은 1일 0.0001 ∼ 100 mg/kg으로, 바람직하게는 0.001 ~ 100 mg/kg으로 투여하는 것이 좋으며, 하루에 한번 투여할 수도 있고, 수회 나누어 투여할 수 있다. 조성물에서 본 발명의 화합물은 전체 조성물 총 중량에 대하여 0.0001 ~ 10 중량 %, 바람직하게는 0.001 ~ 1 중량 %의 양으로 존재하여야 한다.
본 발명의 약학 조성물은 쥐, 생쥐, 가축, 인간 등의 포유동물에 다양한 경로로 투여될 수 있다. 투여의 모든 방식은 예상될 수 있는데, 예를 들면, 경구, 직장 또는 정맥, 근육, 피하, 자궁내 경막 또는 뇌혈관내(intracerebroventricular) 주사에 의해 투여될 수 있다. 본 발명은 항암 및 급성, 만성, 염증성 질환의 예방 및 치료를 위한 약학적 조성물을 제공한다.
이하, 본 발명을 실시예에 의해 상세히 설명한다.
단, 하기 참조예, 실시예 및 실험예는 본 발명을 예시하는 것일 뿐, 본 발명의 내용이 하기 참조예, 실시예 및 실험예에 한정되는 것은 아니다.
참조예 1. 실험 기기 및 시약
본원의 제조된 화합물들의 분석 기기로는1H-NMR(300㎒, Varian Gemini 2000, 미국)과 질량분석기(Autospec M363, Micromass사, 영국)이고, NMR의 내부 표준물질로는 테트라메틸 실란(tetramethyl silane, TMS)을 사용하였으며, 박층크로마토그래피(TLC)는 실리카겔 60 F254(두께 0.2 ㎛, Merck사)를 사용하여 스팟을 자외선(UV: ultra violet) 램프로 확인하였으며, 실리카겔 컬럼 크로마토그래피는 실리카겔(머크 타입 9355, 230~400 메쉬)을 사용하여 분리하였고, 모든 시약은 알드리치사(Aldrich사)에서 구입하여 사용하였다. 그 외에 선광도(DIP-370, JASCO사) 및 흡광도(UV-900C, CERES사)를 측정하여 분석을 하였다.
실시예 1. 알킬술포닐클로라이드 화합물의 제조
알킬술포닐산나트륨(2.5 mM)을 톨루엔 (50 ㎖)에 녹이고, DMF (5방울)를 적가하고, 빙욕 상태에서 SOCl2(5 mM)를 적가한 후, 4시간 환류한 다음 반응물을 단순증류장치로 여분의 SOCl2를 제거한 후, 남은 반응물을 농축하여 알킬술포닐클로라이드를 얻었다.
실시예 2. 티오우레이도 화합물의 제조
페닐아미노알콜(1.2 mM)을 THF(20 ㎖)와 30 % 소디움아세테이트 (20㎖)에 녹이고 실온에서 실시예 1에서 얻은 알킬술포닐클로라이드(2 mM)를 천천히 적가한 후 24시간 동안 교반하여 반응시킨 후, 반응 액에 에틸아세테이트(50 ㎖)를 가한 후 중탄산나트륨 포화용액(75 ㎖ ×3)과 5 % 구연산(75 ㎖ ×3)과 포화 염화나트륨(75 ㎖ ×3)으로 세척하고 유기 층을 무수 황산나트륨으로 건조한 후 여과하고 감압 농축하고 실리카겔 칼럼 크로마토그래피로 정제하여 순수한 티오우레이드 화합물을 수득하였다.
실시예 3. (1R, 2S) 2-(1-헵탄술포닐아미도)-1-페닐-1-프로판올 [1] 의 제조
1-헵탄술폰산 505 ㎎(2.5 mM)과 SOCl2594.85 ㎎(5 mM)를 사용하여 실시예 1에 기재된 제조방법에 따라 1-헵탄술포닐클로라이드를 합성하였다.
(1R, 2S) 2-아미노-1-페닐-1-프로판올 181.32 ㎎(1.2 mM)과 상기에서 합성한 1-헵탄술포닐클로라이드 397.42 ㎎(2 mM)을 사용하여 실시예 2에 기재된 제조방법에 따라 합성하였고, 전개용매(헥산: 에틸아세테이트 = 2 : 1)를 사용하여 실리카겔 컬럼 크로마토그래피로 정제하여 표적 화합물 [1] 184.8 ㎎ (수율 49 %)을 합성하였다.
TLC (헥산 : 에틸아세테이트 = 2 : 1), R f = 0.43
= +14.000 (c=0.01, CH3OH)
1H-NMR [CD3OD] δ: 0.97 (t, 3H, J=6.6 Hz, CH3), 1.25 (d, 3H, J=6.9 Hz, C2-CH3), 1.26~1.38 (m, 8H, (CH2)4), 1.38~1.70 (m, 2H, SO2-CH2CH2), 2.68~2.74 (m, 2H, SO2-CH2), 3.60~3.72 (m, 1H, C2-H), 4.67 (d, 1H, J=5.7 Hz, C1-H), 7.30~7.48 (m, 5H, 페닐)
FABMS (M+H)+for C16H27NO3S: 측정치 296.15(314-18); 계산치 313.46
실시예 4.(1R, 2S) 2-(1-옥탄술포닐아미도)-1-페닐-1-프로판올 [2]의 제조
(1R, 2S) 2-아미노-1-페닐-1-프로판디올 181.32 ㎎(1.2 mM)과 1-옥탄술포닐클로라이드 425.48 ㎎(2 mM)을 사용하여 실시예 2에 기재된 방법에 따라 합성하였고, 전개용매(헥산: 에틸아세테이트 = 2 : 1)를 사용하여 실리카겔 컬럼 크로마토그래피로 정제하여 표적 화합물 [2] 147 ㎎(수율37.4 %)을 합성하였다.
TLC (헥산 : 에틸아세테이트 = 2 : 1) R f = 0.41
= +12.000 (c=0.01, CH3OH)
1H-NMR [CD3OD] δ : 0.95 (t, 3H, J=6.6 Hz, CH3), 1.23 (d, 3H, J=6.3 Hz, C2-CH3), 1.25~1.44 (m, 10H, (CH2)5), 1.44~1.68 (m, 2H, SO2-CH2CH2), 2.58~2.80 (m, 2H, SO2-CH2), 3.58~3.72 (m, 1H, C2-H), 4.65 (d, 1H, J=5.7 Hz, C1-H), 7.25~7.52 (m, 5H, 페닐)
FABMS (M+H)+for C17H29NO3S: 측정치 310.12(328-148); 계산치 327.19
실시예 5. (1R, 2S) 2-(1-노난술포닐아미도)-1-페닐-1-프로판올 [3]의 제조
1-노난술포닉산 575.75 ㎎(2.5 mM)과 SOCl2594.85 ㎎(5 mM)을 사용하여 실시예 1에 기재된 제조방법에 따라 1-노난술포닐클로라이드를 합성하였다.
(1R, 2S) 2-아미노-1-페닐-1-프로판올 181.32 ㎎(1.2 mM)과 상기에서 합성한 1-노난술포닐클로라이드 453.52 ㎎(2 mM)을 사용하여 실시예 2에 기재된 제조방법에 따라 합성하였고, 전개용매(헥산: 에틸아세테이트 = 2 : 1)를 사용하여 실리카겔 컬럼 크로마토그래피로 정제하여 표적 화합물 [3] 140 ㎎(수율 34.1 %)을 합성하였다.
TLC (헥산 : 에틸아세테이트 = 2 : 1) R f = 0.43
= +12.000 (c=0.01, CH3OH)
1H-NMR [CD3OD] δ : 0.92 (t, 3H, J=6.9 Hz, CH3), 1.20 (d, 3H, J=6.6 Hz, C2-CH3), 1.22~1.40 (m, 12H, (CH2)6), 1.40~1.62 (m, 2H, SO2-CH2CH2), 2.48~2.71 (m, 2H, SO2-CH2), 3.54~3.64 (m, 1H, C2-H), 4.59 (d, 1H, J=6.0 Hz, C1-H), 7.21~7.42 (m, 5H, 페닐)
FABMS (M+H)+for C18H31NO3S: 측정치 324.19 (342-18); 계산치 341.20
실시예 6. (1R, 2S) 2-(1-운데칸술포닐아미도)-1-페닐-1-프로판올[4] 의 제조
1-운데칸술포닉산 645.87 ㎎(2.5 mM)과 SOCl2594.85 ㎎(5mM)을 사용하여 실시예 1에 기재된 제조방법에 따라 1-운데칸술포닐클로라이드를 합성하였다.
(1R, 2S) 2-아미노-1-페닐-1-프로판올 181.32 ㎎(1.2 mM)과 상기에서 합성한 1-운데칸술포닉클로라이드 509.64 ㎎(2 mM)을 사용하여 실시예 2에 기재된 제조방법에 따라 합성하였고, 전개용매(헥산: 에틸아세테이트 = 2 : 1)를 사용하여 실리카겔 컬럼 크로마토그래피로 정제하여 표적 화합물 [4] 107 ㎎(수율 24 %)을 합성하였다.
TLC (헥산 : 에틸아세테이트 = 2 : 1) R f = 0.45
= +15.000 (c=0.01, CH3OH)
1H-NMR [CD3OD] δ : 0.91 (t, 3H, J=6.6 Hz, CH3), 1.19 (d, 3H, J=6.6 Hz, C2-CH3), 1.22~1.38 (m, 16H, (CH2)8), 1.38~1.62 (m, 2H, SO2-CH2CH2), 2.58~2.75 (m, 2H, SO2-CH2), 3.54~3.64 (m, 1H, C2-H), 4.59 (d, 1H, J=5.7 Hz, C1-H), 7.22~7.44 (m, 5H, 페닐)
FABMS (M+H)+for C19H33NO3S: 측정치 352.32(370-18); 계산치 369.23
실시예 7. (1R, 2S) 2-(1-트리데칸술포닐아미도)-1-페닐-1-프로판올 [5]의 제조
1-트리데칸술포닉산 716 ㎎(2.5 mM)과 SOCl2594.85 ㎎(5 mM)을 사용하여 실시예 1에 기재된 제조방법에 따라 1-트리데칸술포닐클로라이드를 합성하였다.
(1R, 2S) 2-아미노-1-페닐-1-프로판올 181.32㎎(1.2 mM)과 상기에서 합성한 1-트리데칸술포닐클로라이드 565.74㎎(2 mM)을 사용하여 실시예 2에 기재된 방법에 따라 합성하였고, 전개용매(헥산: 에틸아세테이트 = 2 : 1)를 사용하여 실리카겔 컬럼 크로마토그래피로 정제하여 표적 화합물 [5] 72 ㎎(수율 15 %)을 합성하였다.
TLC (헥산 : 에틸아세테이트 = 2: 1) R f = 0.45
= +15.000 (c=0.01, CH3OH)
1H-NMR [CD3OD] δ : 0.91 (t, 3H, J=6.6 Hz, CH3), 1.19 (d, 3H, J=6.6 Hz,C2-CH3), 1.22~1.38 (m, 20H, (CH2)10), 1.38~1.62 (m, 2H, SO2-CH2CH2), 2.58~2.75 (m, 2H, SO2-CH2), 3.54~3.64 (m, 1H, C2-H), 4.59 (d, 1H, J=5.7 Hz, C1-H), 7.22~7.44 (m, 5H, 페닐)
FABMS (M+H)+for C20H35NO3S: 측정치 380.24(398-18); 계산치 397.27
실시예 8. (1S, 2R) 2-(1-헵탄술포닐아미도)-1-페닐-1-프로판올 [6]의 제조
1-헵탄술포닉산 505 ㎎(2.5 mM)과 SOCl2594.85 ㎎(5 mM)을 사용하여 실시예 1에 기재된 제조방법에 따라 1-헵탄술포닐클로라이드를 합성하였다.
(1S, 2R) 2-아미노-1-페닐-1-프로판올 181.32 ㎎(1.2 mM)과 상기에서 합성한 1-헵탄술포닐클로라이드 397.42㎎(2 mM)을 사용하여 실시예 2에 기재된 제조방법에 따라 합성하였고, 전개용매(헥산: 에틸아세테이트 = 2 : 1)를 사용하여 실리카겔 컬럼 크로마토그래피로 정제하여 표적 화합물 [6] 200 ㎎(수율 53 %)을 합성하였다.
TLC (헥산 : 에틸아세테이트 = 2 : 1) R f = 0.43
= -5.000 (c=0.01, CH3OH)
1H-NMR [CD3OD] δ : 0.92 (t, 3H, J=6.9 Hz, CH3), 1.19 (d, 3H, J=6.9 Hz, C2-CH3), 1.22~1.42 (m, 8H, (CH2)4), 1.42~1.68 (m, 2H, SO2-CH2CH2), 2.56~2.74 (m,2H, SO2-CH2), 3.54~3.64 (m, 1H, C2-H), 4.59 (d, 1H, J=6.0 Hz, C1-H), 7.22~7.42 (m, 5H, 페닐)
FABMS (M+H)+for C16H27NO3S: 측정치 296.16 (314-18); 계산치 313.46
실시예 9. (1S, 2R) 2-(1-옥탄술포닐아미도)-1-페닐-1-프로판올 [7]의 제조
(1S, 2R) 2-아미노-1-페닐-1-프로판올 181.32 ㎎(1.2 mM)과1-옥탄술포닐클로라이드 425.48㎎(2 mM)을 사용하여 실시예 2에 기재된 제조방법에 따라 합성하였고, 전개용매(헥산: 에틸아세테이트 = 2 : 1)를 사용하여 실리카겔 컬럼 크로마토그래피로 정제하여 표적 화합물 [7] 94 ㎎(수율 23.9 %)을 합성하였다.
TLC (헥산 : 에틸아세테이트 = 2 : 1) R f = 0.41
= -3.000 (c=0.01, CH3OH)
1H-NMR [CD3OD] δ : 0.92 (t, 3H, J=6.6 Hz, CH3), 1.20 (d, 3H, J=6.6 Hz, C2-CH3), 1.22~1.42 (m, 10H, (CH2)5), 1.42~1.68 (m, 2H, SO2-CH2CH2), 2.48~2.86 (m, 2H, SO2-CH2), 3.52~3.62 (m, 1H, C2-H), 4.60 (d, 1H, J=6.0 Hz, C1-H), 7.22~7.48 (m, 5H, 페닐)
FABMS (M+H)+for C17H29NO3S : 측정치 310.20(328-18); 계산치 327.19
실시예 10. (1S, 2R) 2-(1-노난술포닐아미도)-1-페닐-1-프로판올 [8]의 제조
1-노난술포닉산 575.75 ㎎(2.5 mM)과 SOCl2594.85㎎(5 mM)을 사용하여 실시예 1에 기재된 제조방법에 따라 1-노난술포닐클로라이드를 합성하였다.
(1S, 2R) 2-아미노-1-페닐-1-프로판올 181.32 ㎎(1.2 mM)과 상기에서 합성한 1-노난술포닐클로라이드 453.52 ㎎(2 mM)을 사용하여 실시예 2에 기재된 제조방법에 따라 합성하였고 전개용매(헥산: 에틸아세테이트 = 2 : 1)를 사용하여 실리카겔 컬럼 크로마토그래피로 정제하여 표적 화합물 [8] 195 ㎎(수율 47.5 %)을 합성하였다.
TLC (헥산 : 에틸아세테이트 = 2 : 1) R f = 0.42
= -5.000 (c=0.01, CH3OH)
1H-NMR [CD3OD] δ : 0.92 (t, 3H, J=6.6 Hz, CH3), 1.20 (d, 3H, J=6.9 Hz, C2-CH3), 1.22~1.42 (m, 12H, (CH2)6), 1.42~1.64 (m, 2H, SO2-CH2CH2), 2.58~2.78 (m, 2H, SO2-CH2), 3.56~3.68 (m, 1H, C2-H), 4.60 (d, 1H, J=5.7 Hz, C1-H), 7.22~7.52 (m, 5H, 페닐)
FABMS (M+H)+for C18H31NO3S: 측정치 324.17(342-18); 계산치 341.20
실시예 11. (1S, 2R) 2-(1-운데칸술포닐아미도)-1-페닐-1-프로판올 [9]의 제조
1-운데칸술포닉산 645.87 ㎎(2.5 mM)과 SOCl2594.85 ㎎(5 mM)을 사용하여 실시예 1에 기재된 제조방법에 따라 1-운데칸술포닐클로라이드를 합성하였다.
(1S, 2R) 2-아미노-1-페닐-1-프로판올 181.32 ㎎(1.2 mM)과 상기에서 합성한 1-운데칸술포닐클로라이드 509.64 ㎎(2 mM)을 사용하여 실시예 2에 기재된 제조방법에 따라 합성하였고 전개용매(헥산: 에틸아세테이트 = 2 : 1)를 사용하여 실리카겔 컬럼 크로마토그래피로 정제하여 표적 화합물 [9] 179 ㎎(수율 40.4 %)을 합성하였다.
TLC (헥산 : 에틸아세테이트 = 2 : 1) R f = 0.44
= -3.000 (c=0.01, CH3OH)
1H-NMR [CD3OD] δ : 0.91 (t, 3H, J=6.6 Hz, CH3), 1.19 (d, 3H, J=6.6 Hz, C2-CH3), 1.11~1.21 (m, 16H, (CH2)8), 1.21~1.62 (m, 2H, SO2-CH2CH2), 2.56~2.74 (m, 2H, SO2-CH2), 3.56~3.68 (m, 1H, C2-H), 4.59 (d, 1H, J=6.0 Hz, C1-H), 7.22~7.42 (m, 5H, 페닐)
FABMS (M+H)+for C19H33NO3S : 측정치 352.20(370-18); 계산치 369.23
실시예 12. (1S, 2R) 2-(1-트리데칸술포닐아미도)-1-페닐-1-프로판올 [10]의 제조
1-트리데칸술포닉산 716 ㎎(2.5 mM)과 SOCl2594.85 ㎎(5 mM)을 사용하여 실시예 1에 기재된 제조방법에 따라 1-트리데칸술포닐클로라이드를 합성하였다.
(1S, 2R) 2-아미노-1-페닐-1-프로판올 181.32 ㎎(1.2 mM)과 상기에서 합성한 1-트리데칸술포닐클로라이드 565.74 ㎎(2 mM)을 사용하여 실시예 2에 기재된 제조방법에 따라 합성하였고 전개용매(헥산: 에틸아세테이트 = 2 : 1)를 사용하여 실리카겔 컬럼 크로마토그래피로 정제하여 표적 화합물 [10] 35 ㎎(수율 7.5 %)을 합성하였다.
TLC (Hexane : EtOAc = 2 : 1) R f = 0.44
= -4.000 (c=0.01, CH3OH)
1H-NMR [CD3OD] δ : 0.91 (t, 3H, J=6.6 Hz, CH3), 1.19 (d, 3H, J=6.6 Hz, C2-CH3), 1.22~1.38 (m, 20H, (CH2)10), 1.38~1.62 (m, 2H, SO2-CH2CH2), 2.58~2.75 (m, 2H, SO2-CH2), 3.54~3.64 (m, 1H, C2-H), 4.59 (d, 1H, J=5.7 Hz, C1-H), 7.22~7.44 (m, 5H, 페닐)
FABMS (M+H)+for C20H33NO3S: 측정치 380.25(398-18); 계산치 397.27
실시예 13.(1R, 2R)2-(1-헵탄술포닐아미도)-1-(4'-니트로페닐)-1,3-프로판디올 [11]의 제조
1-헵탄술포닉산 505 ㎎(2.5 mM)과 SOCl2594.85 ㎎(5 mM)을 사용하여 실시예 1에 기재된 제조방법에 따라 1-헵탄술포닐클로라이드를 합성하였다.
(1R, 2R) 2-아미노-1-(4'-니크로페닐)-1,3-프로판디올 255 ㎎(1.2 mM)과 상기에서 합성한 1-헵탄술포닐클로라이드 397.42 ㎎(2 mM)을 사용하여 실시예 2에 기재된 제조방법에 따라 합성하였고 전개용매(헥산: 에틸아세테이트 = 2 : 1)를 사용하여 실리카겔 컬럼 크로마토그래피로 정제하여 표적 화합물 [11] 45 ㎎(수율 10 %)을 합성하였다.
TLC (Hexane : EtOAc = 2 : 1) R f = 0.23
=-41.000 (c=0.01, CH3OH)
1H-NMR [CD3OD] δ : 0.90 (t, 3H, J=6.9 Hz, CH3), 1.08~1.38 (m, 8H, (CH2)4, 1.38~1.48 (m, 2H, SO2-CH2CH2), 2.54 (t, 2H, J=8.1 Hz SO2-CH2), 3.50~3.68 (m, 2H, C3-2H), 3.74~3.84 (m, 1H, C2-H), 5.13 (d, 1H,J=2.4 Hz C1-H), 7.72 (d, 2H, J=8.7 Hz, 2H-페닐), 8.24 (d, 2H, J=8.7 Hz, 2H-페닐)
FABMS (M+H)+for C16H26N2O6S: 측정치 375.13 ; 계산치 374.15
실시예 14.(1R, 2R)2-(1-옥탄술포닐아미도)-1-(4'-니트로페닐)-1,3-프로판디올 [12]의 제조
(1R, 2R) 2-아미노-1-(4'-니트로페닐)-1,3-프로판디올 255 ㎎(1.2 mM)과 1-옥탄술포닐클로라이드 425.48 ㎎(2 mM)을 사용하여 실시예 2에 기재된 제조방법에 따라 합성하였고, 전개용매(헥산: 에틸아세테이트 = 2 : 1)를 사용하여 실리카겔 컬럼 크로마토그래피로 정제하여 표적 화합물 [12] 60 ㎎(수율 12.8 %)을 합성하였다.
TLC (헥산 : 에틸아세테이트 = 2 : 1) R f = 0.24
= -45.000 (c=0.01, CH3OH)
1H-NMR [CD3OD] δ : 0.91 (t, 3H, J=6.6 Hz, CH3), 1.02~1.38 (m, 10H, (CH2)5), 1.38~1.48 (m, 2H, SO2-CH2CH2), 2.53 (t, 2H, J=8.1Hz SO2-CH2), 3.50~3.68 (m, 2H, C3-2H), 3.72~3.88 (m, 1H, C2-H), 3.13 (d, 1H, J=2.7 Hz, C1-H), 7.72 (d, 2H, J=9.0 Hz, 2H-페닐), 8.24 (d, 2H, J=6.9 Hz, 2H-페닐)
FABMS (M+H)+for C17H28N2O6S: 측정치 389.18 ; 계산치 388.17
실시예 15.(1R, 2R)2-(1-노난술포닐아미도)-1-(4'-니트로페닐)-1,3-프로판디올 [13]의 제조
1-노난술포닉산 575.75 ㎎(2.5 mM)과 SOCl2594.85 ㎎(5 mM)을 사용하여 실시예 1에 기재된 방법에 따라 1-노난술포닐클로라이드를 합성하였다.
(1R, 2R) 2-아미노-1-(4'-니트로페닐)-1,3-프로판디올 255 ㎎(1.2 mM)과 상기에서 합성한 1-노난술포닐클로라이드 453.52 ㎎(2 mM)을 사용하여 실시예 2에 기재된 제조방법에 따라 합성하였고 전개용매(헥산: 에틸아세테이트 = 2 : 1)를 사용하여 실리카겔 컬럼 크로마토그래피로 정제하여 표적 화합물 [13] 60 ㎎(수율 10.9 %)을 합성하였다.
TLC(헥산 : 에틸아세테이트 = 2 : 1) R f = 0.24
= -32.000 (c=0.01, CH3OH)
1H-NMR [CD3OD] δ : 0.90 (t, 3H, J=6.9 Hz, CH3), 1.08~1.38 (m, 12H, (CH2)6, 1.38~1.48 (m, 2H, SO2-CH2CH2), 2.54 (t, 2H, J=8.1 Hz SO2-CH2), 3.50~3.68 (m, 2H, C3-2H), 3.74~3.84 (m, 1H, C2-H), 5.13 (d, 1H,J=2.4 Hz C1-H), 7.72 (d, 2H, J=8.7 Hz, 2H-페닐), 8.24 (d, 2H, J=8.7 Hz, 2H-페닐)
FABMS (M+H)+for C18H30N2O6S: 측정치 403.16 ; 계산치 402.18
실시예 16.(1R, 2R)2-(1-운데칸술포닐아미도)-1-(4'-니트로페닐)-1,3-프로판디올 [14]의 제조
1-운데칸술포닉산 645.87 ㎎(2.5 mM)과 SOCl2594.85 ㎎(5 mM)를 사용하여 일반적인 합성방법 A에 따라 1-운데칸술포닐클로라이드를 합성하였다.
(1R, 2R) 2-아미노-1-(4'-니트로페닐)-1,3-프로판디올 255 ㎎(1.2 mM)과 상기에서 합성한 1-운데칸술포닐클로라이드 509.64 ㎎(2 mM)을 사용하여 실시예 1에 기재된 제조방법에 따라 합성하였고, 전개용매(헥산: 에틸아세테이트 = 2 : 1)를 사용하여 실리카겔 컬럼 크로마토그래피로 정제하여 표적 화합물 [14] 75 ㎎(수율 14.5 %)을 합성하였다.
TLC (Hexane : EtOAc = 2 : 1) R f =0.21
= -40.000 (c=0.01, CH3OH)
1H-NMR [CD3OD] δ: 0.92 (t, 3H, J=6.9 Hz, CH3), 1.20~1.40 (m, 16H, (CH2)8, 1.40~1.50 (m, 2H, SO2-CH2CH2), 2.54 (t, 2H, J=8.1 Hz SO2-CH2), 3.50~3.68 (m, 2H, C3-2H), 3.76~3.86 (m, 1H, C2-H), 5.14 (d, 1H,J=2.4 Hz C1-H), 7.73 (d, 2H, J=8.7 Hz, 2H-페닐), 8.24 (d, 2H, J=8.7 Hz, 2H-페닐)
FABMS (M+H)+for C19H32N2O6S: 측정치 431.20 ; 계산치 430.21
실시예 17. (1R, 2R) 2-(1-트리데칸술포닐아미도)-1-(4'-니트로페닐)- 1,3-프로판디올 [15]의 제조
1-트리데칸술포닉산 716 ㎎(2.5 mM)과 SOCl2594.85 ㎎(5 mM)을 사용하여 실시예 1에 기재된 제조방법에 따라 1-트리데칸술포닐클로라이드를 합성하였다.
(1R, 2R) 2-아미노-1-(4'-니토로페닐)-1,3-프로판디올 255 ㎎(1.2 mM)과 상기에서 합성한 1-트리데칸술포닐클로라이드 565.74 ㎎(2 mM)을 사용하여 실시예 2에 기재된 제조방법에 따라 합성하였고, 전개용매(헥산: 에틸아세테이트 = 2 : 1)를 사용하여 실리카겔 컬럼 크로마토그래피로 정제하여 표적 화합물 [15] 60 ㎎(수율 10.9 %)을 합성하였다.
TLC (Hexane : EtOAc = 2 : 1) R f = 0.25
= -42.000 (c=0.01, CH3OH)
1H-NMR [CD3OD] δ: 0.92 (t, 3H, J=6.9 Hz, CH3), 1.08~1.39 (m, 20H, (CH2)10, 1.39~1.50 (m, 2H, SO2-CH2CH2), 2.55 (t, 2H, J=8.1 Hz SO2-CH2), 3.52~3.68 (m, 2H, C3-2H), 3.78~3.86 (m, 1H, C2-H), 5.15 (d, 1H,J=2.7 Hz C1-H), 7.76 (d, 2H, J=8.7 Hz, 2H-페닐), 8.25 (d, 2H, J=8.7 Hz, 2H-페닐)
FABMS (M+H)+for C20H34N2O6S: 측정치 459.19 ; 계산치 458.25
실시예 18. (1S, 2S)2-(1-헵탄술포닐아미도)-1-(4'-니트로페닐)-1,3-프로판디올 [16]의 제조
1-헵탄술포닉산 505 ㎎(2.5 mM)과 SOCl2594.85 ㎎(5 mM)을 사용하여 실시예1에 기재된 방법에 따라 1-헵탄술포닐클로라이드를 합성하였다.
(1S, 2S) 2-아미노-1-(4'-니트로페닐)-1,3-프로판디올 255 ㎎(1.2 mM)과 상기에서 합성한 1-헵탄술포닐클로라이드 397.42 ㎎(2 mM)을 사용하여 실시예 2에 기재된 방법에 따라 합성하였고 전개용매(헥산: 에틸아세테이트 = 2 : 1)를 사용하여 실리카겔 컬럼 크로마토그래피로 정제하여 표적 화합물 [16] 58 ㎎(수율 12.9 %)을 합성하였다.
TLC (헥산 : 에틸아세테이트 = 2 : 1) R f = 0.23
= +56.000 (c=0.01, CH3OH)
1H-NMR [CD3OD] δ: 0.90 (t, 3H, J=6.9 Hz, CH3), 1.08~1.38 (m, 8H, (CH2)4, 1.38~1.48 (m, 2H, SO2-CH2CH2), 2.54 (t, 2H, J=8.1 Hz SO2-CH2), 3.50~3.68 (m, 2H, C3-2H), 3.74~3.84 (m, 1H, C2-H), 5.13 (d, 1H,J=2.4 Hz C1-H), 7.72 (d, 2H, J=8.7 Hz, 2H-페닐), 8.24 (d, 2H, J=8.7 Hz, 2H-페닐)
FABMS (M+H)+for C16H26N2O6S: 측정치 375.15 ; 계산치 374.15
실시예 19. (1S, 2S)2-(1-옥탄술포닐아미도)-1-(4'-니트로페닐)-1,3-프로판디올 [17]의 제조
(1S, 2S) 2-아미노-1-(4'-니트로페닐)-1,3-프로판디올 255 ㎎(1.2 mM)과 1-옥탄술포닐클로라이드 425.48 ㎎(2 mM)을 사용하여 실시예 2에 기재된 제조방법에 따라 합성하였고, 전개용매(헥산: 에틸아세테이트 = 2 : 1)를 사용하여 실리카겔 컬럼 크로마토그래피로 정제하여 표적 화합물 [17] 40 ㎎(수율 8.5 %)을 합성하였다.
TLC (Hexane : EtOAc = 2 : 1) R f = 0.24
= +42.000 (c=0.01, CH3OH)
1H-NMR [CD3OD] δ : 0.92 (t, 3H, J=6.9 Hz, CH3), 1.04~1.38 (m, 10H, (CH2)5, 1.38~1.52 (m, 2H, SO2-CH2CH2), 2.55 (t, 2H, J=7.9 Hz SO2-CH2), 3.52~3.68 (m, 2H, C3-2H), 3.78~3.84 (m, 1H, C2-H), 5.15 (d, 1H,J=2.4 Hz C1-H), 7.74 (d, 2H, J=9.0 Hz, 2H-페닐), 8.25 (d, 2H, J=9.0 Hz, 2H-페닐)
FABMS (M+H)+for C17H28N2O6S: 측정치 389.12 ; 계산치 388.17
실시예 20. (1S, 2S) 2-(1-노난술포닐아미도)-1-(4'-니트로페닐)-1,3-프로판디올 [18]의 제조
1-노난술포닉산 575.75 ㎎(2.5 mM)과 SOCl2594.85 ㎎(5 mM)을 사용하여 실시예 1에 기재된 제조방법에 따라 1-노난술포닐클로라이드를 합성하였다.
(1S, 2S) 2-아미노-1-(4'-니트로페닐)-1,3-프로판디올 255 ㎎(1.2 mM)과 상기에서 합성한 1-노난술포닐클로라이드 453.52 ㎎(2 mM)을 사용하여 실시예 2에 기재된 제조방법에 따라 합성하였고, 전개용매(헥산: 에틸아세테이트 = 2 : 1)를 사용하여 실리카겔 컬럼 크로마토그래피로 정제하여 표적 화합물 [18] 30 ㎎(수율 6.1 %)을 합성하였다.
TLC (Hexane : EtOAc = 2 : 1) R f = 0.21
= +48.000 (c=0.01, CH3OH)
1H-NMR [CD3OD] δ: 0.91 (t, 3H, J=6.9 Hz, CH3), 1.00~1.38 (m, 12H, (CH2)6, 1.38~1.50 (m, 2H, SO2-CH2CH2), 2.53 (t, 2H, J=7.9 Hz SO2-CH2), 3.46~3.66 (m, 2H, C3-2H), 3.74~3.84 (m, 1H, C2-H), 5.13 (d, 1H,J=2.4 Hz C1-H), 7.72 (d, 2H, J=8.2 Hz, 2H-페닐), 8.24 (d, 2H, J=8.6 Hz, 2H-페닐)
FABMS (M+H)+for C18H30N2O6S: 측정치 431.31 ; 계산치 430.21
실시예 21. (1S, 2S)2-(1-운데칸술포닐아미도)-1-(4'-니트로페닐)-1,3-프로판디올 [19]의 제조
1-운데칸술포닉산 645.87 ㎎(2.5 mM)과 SOCl2594.85 ㎎(5 mM)을 사용하여 실시예 1에 기재된 제조방법에 따라 1-운데칸술포닐클로라이드를 합성하였다.
(1S, 2S) 2-아미노-1-(4'-니트로페닐)-1,3-프로판디올 255 ㎎(1.2 mM)과 상기에서 합성한 1-운데칸술포닐클로라이드 509.64 ㎎(2 mM)을 사용하여 실시예 2에 기재된 제조방법에 따라, 합성하였고 전개용매(헥산: 에틸아세테이트 = 2 : 1)를 사용하여 실리카겔 컬럼 크로마토그래피로 정제하여 표적 화합물 [19] 81 ㎎(수율 15.6 %)을 합성하였다.
TLC (헥산 : 에틸아세테이트 = 2 : 1) R f = 0.22
= +45.000 (c=0.01, CH3OH)
1H-NMR [CD3OD] δ : 0.92 (t, 3H, J=6.6 Hz, CH3), 1.04~1.38 (m, 16H, (CH2)8, 1.38~1.48 (m, 2H, SO2-CH2CH2), 2.54 (t, 2H, J=8.1 Hz SO2-CH2), 3.50~3.68 (m, 2H, C3-2H), 3.78~3.86 (m, 1H, C2-H), 5.14 (d, 1H, J=2.7 Hz C1-H), 7.72 (d, 2H, J=9.0 Hz, 2H-페닐), 8.24 (d, 2H, J=9.0 Hz, 2H-페닐)
FABMS (M+H)+for C19H32N2O6S: 측정치 431.31 ; 계산치 430.21
실시예 22. (1S, 2S) 2-(1-트리데칸술포닐아미도)-1-(4'-니트로페닐)- 1,3-프로판디올 [20]의 제조
1-트리데칸술포닉산 716 ㎎(2.5 mM)과 SOCl2594.85 ㎎(5 mM)을 사용하여 실시예 1에 기재된 제조방법에 따라 1-트리데칸술포닐클로라이드를 합성하였다.
(1S, 2S) 2-아미노-1-(4'-니트로페닐)-1,3-프로판디올 255 ㎎(1.2 mM)과 상기에서 합성한 1-트리데칸술포닐클로라이드 565.74 ㎎(2 mM)을 사용하여 실시예 2에 기재된 제조방법에 따라 합성하였고, 전개용매(헥산: 에틸아세테이트 = 2 : 1)를 사용하여 실리카겔 컬럼 크로마토그래피로 정제하여 표적 화합물 [20] 32 ㎎(수율 5.7 %)을 합성하였다.
TLC (Hexane : EtOAc = 2 : 1) R f = 0.24
= +50.000 (c=0.01, CH3OH)
1H-NMR [CD3OD] δ: 0.90 (t, 3H, J=6.9 Hz, CH3), 1.06~1.38 (m, 20H, (CH2)10, 1.38~1.48 (m, 2H, SO2-CH2CH2), 2.53 (t, 2H, J=8.1 Hz SO2-CH2), 3.50~3.66 (m, 2H, C3-2H), 3.74~3.84 (m, 1H, C2-H), 5.13 (d, 1H, J=2.4 Hz C1-H), 7.72 (d, 2H, J=9.0 Hz, 2H-페닐), 8.24 (d, 2H, J=8.7 Hz, 2H-페닐)
FABMS (M+H)+for C20H34N2O6S : 측정치 459.16 ; 계산치 458.25
실험예 1. 독성 실험(MTT 시험법)
본 발명의 실시예 화합물들의 세포 독성 및 세포의 생존력을 평가하기 위해,인간의 결장암 세포주인 HT-29(Colon cancer cell line, ATCC, HTB-38), 신장암 세포주인 Caki-2(Renal cancer cell line, ATCC, HTB-47), 폐암 세포주인 A549(Lung cancer cell line, ATCC, CCL-185), 전립선암 세포주인 PC-3 (Prostate cancer cell line, ATCC, CRL-1435), 인간의 급성 골수 백혈병의 세포주인 HL-60(Human myelocytic leukemia cell line, ATCC, CCL-240)을 사용하여 MTT(3-(4,5-디메틸티아졸-2-일)-2,5-디페닐테트라졸리움 브로마이드 티아졸일 블루; Sigma사, 미국) 시험법을 사용하였다.
MTT 시험법은 살아있고 대사적으로 왕성한 세포내 미토콘드리아 탈수소 효소가 MTT를 환원시켜 생성한 포마잔(formazan)의 흡광도를 측정하여 대조군에 대한 퍼센트로 세포 독성을 측정하는 방법으로서, 측정된 흡광도는 살아있고 대사적으로 왕성한 세포의 농도를 반영한다. 2,3,5-트리페닐 테트라졸리움 클로라이드(TTC)는 살아있는 세포에서 포마잔(formazan)으로 환원되며, 이 포마잔은 불용성의 자주색을 나타내는 것으로 색의 정도로 호흡률을 측정할 수 있다. 포마잔의 흡광도는 540 nm의 파장에서 최대이며, 이 파장에서 측정된 흡광도는 살아있고 대사적으로 왕성한 세포의 농도를 반영하는데, 측정할 웰 내의 세포의 농도가 너무 낮거나 높은 범위에 있으면 살아있는 세포의 농도와 흡광도 사이의 직선적 관계가 성립되지 않게 되므로 최적의 세포 농도를 결정하는 과정을 거쳤다.
1-1. 세포주의 배양, 단일 세포 부유액의 조제 및 세포 농도의 측정
1-1-1. 세포주의 배양
본 발명의 실시예 화합물들의 인간의 결장암 세포주인 HT-29, 신장암 세포주인 Caki-2, 폐암 세포주인 A549, 전립선암 세포주인 PC-3, 급성 골수 백혈병의 세포주인 HL-60에 대한 세포독성을 평가하기 위하여, 모든 세포주들은 액체 질소 탱크에 보관 중이던 것을 녹여 T 플라스크에서 2-3번 계대한 것을 사용하였으며 RPMI 1640 배지 (10 % FBS, 0.2 % NaHCO3, 0.05 ㎎/㎖ 젠타마이신(gentamicin))로 37 ℃, 5 % CO2조건에서 각각 배양하였다.
1-1-2. 단일 세포 부유액의 조제
부유성 세포인 경우에는 멸균피펫을 통한 반복흡입으로 단일세포 부유액을 얻는다. 부착성세포인 경우에는 트립신을 3분간 처리하여 세포를 플라스틱 바닥으로부터 떼어낸 후 배양용 배지용액(culture media, RPMI 1640에 10 %FBS 첨가)으로 중화시킨 후 멸균피펫을 통한 반복흡입으로 단일세포 부유액을 얻는다. 이 부유액을 100 x g, 5 분동안 원심분리하여 세포를 침전시킨 후 적당한 양의 배지용액에 다시 부유시키고, 이 부유액을 PBS(phosphate buffered saline)로 10배 희석하여 혈구측정기(hemocytometer, SEQUOIA-TURNER사, 영국)로 세포밀도를 측정한다(세포수/㎖).
1-1-3. 세포농도 측정
세포의 농도는 혈구측정기를 이용하여 현미경으로 직접 세포수를 측정하였으며, 부유시킨 세포의 일부를 채취하여 부피를 측정한 후, 10배의 PBS(pH 7.2) 완충용액을 가하고 10배로 희석한 후 혈구측정기를 이용하여 세포농도를 측정하였다.
1-2. 적정 접종 세포수의 결정
각 세포주마다 MTT 어세이(assay)에 사용할 각 웰의 적정 접종세포수(optimal seeding density)를 결정한다. 이 세포수는 약물을 처리하지 않은 대조군에서 세포접종 당시와 4일 후 MTT 실험종료 시에도 암세포가 활발히 증식하면서 OD540가 충분히 높은 값을 나타낼 수 있는 최적의 접종(seeding)세포수를 대개 세포수/웰로 나타낸다. 이 세포수를 결정하기 위해 한 웰 당 1 ~ 100 x 103개의 범위에서 몇 가지 세포밀도로 96-웰 평판에 접종하고 항암제나 검체 대신 PBS만을 가해주어 2일간 배양한 후 아래의 기술된 MTT검색법의 과정을 동일하게 시행해 준다. 실험종료시 흡광도(OD540)를 측정하여 가장 적당한 세포밀도를 결정한 후 이후의 실험에 이용한다.
1-3. 세포접종, 검체 투여 및 배양
결정된 적정 농도를 기준으로 세포의 농도를 결정한 후, 검색의 대상이 되는 시험물질을 DMSO에 녹인 후 PBS로 희석하여 10배 희석 용액으로 만들어 20 ㎕씩 각 웰에 첨가하고, 대조군의 열에는 검체 대신 PBS만을 20 ㎕가하여 100 % 생존군(control survival)으로 삼는다. 흡광도 측정시 사용할 무처리군으로 한 컬럼에는 세포부유액 대신 배지만을 180 ㎕가하고 PBS를 20 ㎕첨가하였다. 예비실험에서 결정된 적정수의 세포를 180 ㎕의 배지에 부유시켜 96-웰 평판의 각 웰에 동일하게 접종하였고, 암세포와 검체가 접종된 평판을 37 ℃, 5 % CO2하에서 4일간 배양하였다.
1-4. 생존 세포 수의 측정
4일 후, 플레이트의 각 웰에 0.1 mg (50 ㎕ of 2 mg/㎖)의 MTT (3-[4,5-dimethyl thiazol-2-yl]-2,5-diphenyl tetrazolium bromide, Sigma사)를 가해주고, 다시 37 ℃에서 4시간 더 배양하여 MTT가 환원되도록 한하였다.
배양 종료 시, 플레이트를 450 x g 원심분리하여 생성된 포마잔 결정을 침전시키고 각 웰에 형성된 결정이 흐트러지지 않도록 주의하면서 배지를 30 ㎕정도만 남기고 멀티디스펜서를 이용하여 모두 제거하였다.
배지가 제거된 각 웰에 생성된 포마잔 결정을 용해시키기 위하여. 각 웰에 DMSO(dimethyl sulfoxide, Sigma사)를 150 ㎕씩 가한 후에 포마잔 결정이 녹을 때까지 약 5분간 가볍게 진탕해 주고 바로 96-웰 플레이트용 광도계(micro plate reader, scanning multi well spectrophotometer)로 540 nm에서의 흡광도를 측정하였으며, 이 흡광도는 MTT가 세포에 의해 환원된 양을 나타내며 따라서 각 웰에 존재하는 생존 세포수와 비례했다.
시험 군에서 각 웰로부터 한 컬럼의 평균 OD540값을 구하여 대조군(100 % 생존군)의 평균값에 대한 백분율 값을 산출하였으며, 그 평균치는 하기의 수학식 1에 의해 계산하였다.
평균치 = (시험군의 평균 광학 밀도/대조군의 평균 광학 밀도)×100
이 백분율은 대조군과 비교한 시험군의 세포 생존율에 해당하는 값으로, 약물학적 계산 프로그램(pharmacological calculation program)의 분석을 이용하여 각 검체의 IC50를 구하였고, 50 % 억제농도(IC50)는 대조군에 대해 생존율이 50 %가 되도록 하는 약물의 농도로 정의되며, 이 IC50값을 항암 효과의 지표로 삼는다.
본 발명의 합성한 방향족 알킬 술폰 아미드 유도체 화합물 20종의 인간의 결장암 세포주인 HT-29, 신장암 세포주인 Caki-2, 폐암 세포주인 A549, 전립선암 세포주인 PC-3, 급성 골수 백혈병의 세포주인 HL-60에 대한 세포독성을 평가하기 위하여 독성실험(MTT 분석법)을 행한 결과, 하기 표 1와 같았다. 신장암 세포주인 Caki-2에 대한 세포독성 실험에서는, 전반적으로 술폰아미드기에 치환된 지방족 사슬의 길이가 C7에서 C13으로 길어질수록 높은 세포독성 효과를 나타내었다(도 1a 내지 도 1d 참조).
또한, 대조약물인 B13보다 화합물 [3], [4], [5], [8], [9], [10], [13], [14], [15], [18], [19]및 [20]이 높은 세포독성효과를 나타내었다. 특히, 화합물[4], [9], [14], [15], [20]는 35.6, 46.2, 42.1, 39.4, 42.9 mM로 대조약물인 B-13의 IC50101.8 mM 보다 높게 나타났다(도 2a참조).
결장암 세포주인 HT-29에 대한 세포독성 실험결과 역시 전반적으로 알킬기의 길이가 길어질수록 높은 세포독성 효과가 관찰되었다(도 1a 내지 도 1d 참조). 대조약물인 B13 ( IC50= 68.4 mM) 보다 여러 화합물([4], [5], [8], [9], [10], [12], [13], [14], [15], [18], [19], [20])이 높은 세포독성 효과를 나타내었다. 특히 화합물 [13], [14], [15], [18], [19], [20]은 약 2.5배 더 높게 나타났다(도 2b 참조).
폐암 세포주인 A549에 대한 세포독성 실험결과 전반적으로 알킬기의 길이가 길어질수록 세포독성 효과가 증가하였다(도 1a 내지 도 1d 참조). 대조약물인 B13(IC50= 94.2 mM) 보다 여러 화합물([3], [4], [5], [8], [9], [10], [12], [13], [14], [15], [17], [18], [19], [20])이 높은 세포독성 효과를 나타내었다. 특히, [4], [13], [14], [19]는 2배 이상, [15], [20]은 3배 이상 높은 효과를 나타내었다(도 2c 참조).
전립선암 세포주인 PC-3에 대한 세포독성 실험결과 전반적으로 알킬 기의 길이가 길어질수록 세포독성 효과가 증가하였다(도 1a 내지 도 1d 참조). 대조약물인 B13( IC50=79.3 mM)보다 화합물 [4], [5], [8], [9], [10], [12], [13], [14], [15], [17], [18], [19], [20]가 높은 세포 독성을 나타내었다. 특히, [13], [14], [15], [20]은 2배 이상의 효과를 나타내었다(도 2d 참조).
급성 골수 백혈병의 세포주인 HL-60에 대한 세포독성 실험결과 전반적으로 알킬기의 길이가 길어질수록 세포독성 효과가 증가되었다(도 1a 내지 도 1d 참조). 화합물 [4], [9], [13], [14], [15], [20]이 대조 화합물인 B13보다 높은 효과를 나타내었다(도 2e 참조).
(Ⅰ)
화합물 분자의구성 R1 R2 R3 R4 인간 암세포주의 IC50
신장암 결장암 폐암 전립선암 백혈병
Caki-2 HT-20 A549 PC-3 HL-60
B13a) 101.8 68.4 94.2 79.3 33.6
1 1R, 2S OH H C7H15 H 191.5 191.5 207.3 189.3 129.8
2 1R, 2S OH H C8H17 H 127.6 93.8 148.7 95.3 77.6
3 1R, 2S OH H C9H19 H 66.6 83.2 90.5 81.7 53.7
4 1R, 2S OH H C11H23 H 35.6 44.2 46.0 44.9 28.5
5 1R, 2S OH H C13H27 H 75.7 35.9 49.3 45.1 34.3
6 1S, 2R OH H C7H15 H 205.5 183.0 205.7 188.5 130.4
7 1S, 2R OH H C8H17 H 102.7 96.6 96.6 80.8 62.8
8 1S, 2R OH H C9H19 H 72.0 60.0 73.0 64.3 44.9
9 1S, 2R OH H C11H23 H 46.2 37.8 74.2 40.5 33.1
10 1S, 2R OH H C13H27 H 78.8 39.2 80.7 67.8 44.4
11 1R, 2R OH OH C7H15 NO2 233.1 101.0 >267.3 98.4 116.6
12 1R, 2R OH OH C8H17 NO2 138.7 53.3 84.6 52.8 54.9
13 1R, 2R OH OH C9H19 NO2 63.3 27.9 42.7 31.8 27.6
14 1R, 2R OH OH C11H23 NO2 42.1 25.7 41.1 39.1 24.7
15 1R, 2R OH OH C13H27 NO2 39.4 27.0 28.7 29.2 20.7
16 1S, 2S OH OH C7H15 NO2 >267.3 161.6 267.3 >267.3 160.6
17 1S, 2S OH OH C8H17 NO2 141.2 100.3 89.0 75.1 67.6
18 1S, 2S OH OH C9H19 NO2 75.8 52.2 69.1 51.0 41.4
19 1S, 2S OH OH C11H23 NO2 68.3 61.3 40.9 56.0 37.7
20 1S, 2S OH OH C13H27 NO2 42.9 28.2 30.8 35.9 23.0
a)B13: D-쓰레오-2-(N-미리스토일아미노)-1-(4'-니트로페닐)-1,3-프로판디올*세포접종수- HT-29, Caki-2, A549, PC-3 : 5 ×103세포/웰HL-90 : 1.5 ×104세포/웰*배양시간- 48시간
상기의 제조방법에 의한 실시예 3 내지 실시예 22의 화합물을 함유하는 약학조성물을 하기와 같이 제제화하여 사용하였다.
제제예 1. 산제의 제조
화합물 3 500mg
옥수수전분 100mg
유 당 100mg
탈 크 10mg
상기의 성분들을 혼합하고 기밀포에 충진하여 산제를 제조한다.
제제예 2. 정제의 제조
화합물 19 100mg
옥수수전분 100mg
유 당 100mg
스테아린산 마그네슘 2mg
상기의 성분들을 혼합한 후 통상의 정제의 제조방법에 따라서 타정하여 정제를 제조한다.
제제예 3. 캡슐제의 제조
화합물 4 50mg
유 당 50mg
스테아린산 마그네슘 1mg
상기의 성분들을 혼합한 후 통상의 캡슐제의 제조방법에 따라서 타정하여 젤라틴 캡슐에 충진하여 제조한다.
제제예 4. 주사제의 제조
화합물 5 10mg
주사용 멸균 증류수 적량 적량
pH 조절제 적량 적량
통상의 주사제의 제조방법에 따라서 활성성분을 주사용 증류수에 용해하고 pH를 약 7.5로 조절한 다음 전체를 주사용 증류수로 2㎖ 용량의 앰플에 충진하여 멸균시켜서 주사제를 제조한다.
제제예 5. 액제의 제조
화합물 9 1g
이성화당 10g
서 당 10g
레몬향 적량
정제수 적량
통상의 액제의 제조방법에 따라서 정제수에 각각의 성분을 가하고 용해시키고 레몬향을 적량 가한 다음 정제수를 가하여 전체를 100 ㎖로 조절한 후 갈색병에 충진하여 멸균시켜서 액제를 제조한다.
상기 조성비는 비교적 기호음료에 적합한 성분을 바람직한 실시예로 혼합 조성하였지만, 수요계층, 수요국가, 사용 용도 등 지역적, 민족적 기호도에 따라서 그 배합비를 변형 실시하여도 무방하다.
본 발명의 신규한 화학구조를 갖는 방향족 알킬 술폰 유도체 화합물및 이들의 이성체 및 이를 함유하는 약학적 조성물은 암세포에 대한 탁월한 세포사멸 활성을 가지고 있을 뿐만 아니라 무독성이므로 암의 치료 및 예방에 매우 효과적으로 사용될 수 있다.

Claims (6)

  1. 하기 일반식 (Ⅰ)의 방향족 알킬 술폰 아미드 유도체 화합물 또는 이들의 약학적으로 허용 가능한 염 및 그 이성질체:
    ( I )
    상기 일반식에서,
    R1은 히드록시기 또는 C1내지 C3알콕시기이고;
    R2는 수소원자 또는 히드록시기 또는 C1내지 C3알콕시기이고;
    R3는 C5내지 C30의 알킬기이고;
    R4는 수소원자, 니트로기, 아민기, 할로겐 원자 또는 C1내지 C3알킬기이다.
  2. 제 1항에 있어서, R1은 히드록시기이고, R2가 수소원자이고, R3는C7내지 C13의 알킬기이며, R4는 수소원자 또는 니트로기인 화합물군 및 그 이성질체.
  3. 제 2항에 있어서,
    (1R, 2S) 2-(1-헵탄술포닐아미도)-1-페닐-1-프로판올,
    (1R, 2S) 2-(1-옥탄술포닐아미도)-1-페닐-1-프로판올,
    (1R, 2S) 2-(1-노난술포닐아미도)-1-페닐-1-프로판올,
    (1R, 2S) 2-(1-운데칸술포닐아미도)-1-페닐-1-프로판올,
    (1R, 2S) 2-(1-트리데칸술포닐아미도)-1-페닐-1-프로판올,
    (1S, 2R) 2-(1-헵탄술포닐아미도)-1-페닐-1-프로판올,
    (1S, 2R) 2-(1-옥탄술포닐아미도)-1-페닐-1-프로판올,
    (1S, 2R) 2-(1-노난술포닐아미도)-1-페닐-1-프로판올,
    (1S, 2R) 2-(1-운데칸술포닐아미도)-1-페닐-1-프로판올,
    (1S, 2R) 2-(1-트리데칸술포닐아미도)-1-페닐-1-프로판올,
    (1R, 2R)2-(1-헵탄술포닐아미도)-1-(4'-니트로페닐)-1,3-프로판디올,
    (1R, 2R)2-(1-옥탄술포닐아미도)-1-(4'-니트로페닐)-1,3-프로판디올,
    (1R, 2R)2-(1-노난술포닐아미도)-1-(4'-니트로페닐)-1,3-프로판디올,
    (1R, 2R)2-(1-운데칸술포닐아미도)-1-(4'-니트로페닐)-1,3-프로판디올,
    (1R, 2R) 2-(1-트리데칸술포닐아미도)-1-(4'-니트로페닐)- 1,3-프로판디올,
    (1S, 2S)2-(1-헵탄술포닐아미도)-1-(4'-니트로페닐)-1,3-프로판디올,
    (1S, 2S)2-(1-옥탄술포닐아미도)-1-(4'-니트로페닐)-1,3-프로판디올,
    (1S, 2S) 2-(1-노난술포닐아미도)-1-(4'-니트로페닐)-1,3-프로판디올,
    (1S, 2S)2-(1-운데칸술포닐아미도)-1-(4'-니트로페닐)-1,3-프로판디올,
    (1S, 2S) 2-(1-트리데칸술포닐아미도)-1-(4'-니트로페닐)- 1,3-프로판디올인 화합물.
  4. 일반식(Ⅱ)의 알킬 술폰산(alkyl sulfonic acid)금속염(M)과 SOCl2와 같은 설폰화 시약을 반응시켜 얻은 일반식(Ⅲ)의 알킬 술폰 클로리드(alkyl sulfonyl chloride)에 R1, R2및 R4치환기 정의에 상응하는 일반식(Ⅳ)의 페닐 아민 유도체를 반응시킴을 특징으로 일반식 (Ⅰ)로 표기되는 제 1항의 방향족 알킬 술폰 아미드 유도체 화합물의 제조방법.
    R3-SO3-M (Ⅱ)
    R3-SO2-Cl (Ⅲ)
    (Ⅳ)
  5. 제 1항 내지 제 3항 중 어느 한 항의 일반식 화합물을 유효 활성 성분으로 하고 약학적으로 허용되는 담체를 포함하는 항암 치료용 약학 조성물.
  6. 제 5항에 있어서, 상기 암은 폐암, 골암, 췌장암, 피부암, 두부 또는 경부 암, 피부 또는 안구내 흑색종, 자궁암, 난소암, 직장암, 위암, 항문부근암, 결장암, 유방암, 나팔관암종, 자궁내막암종, 자궁경부암종, 질암종, 음문암종, 호지킨병(Hodgkin's disease), 식도암, 소장암, 내분비선암, 갑상선암, 부갑상선암, 부신암, 연조직 육종, 요도암, 음경암, 전립선암, 만성 또는 급성 백혈병, 림프구 림프종, 방광암, 신장 또는 수뇨관 암, 신장세포 암종, 신장골반 암종, 중추신경계(CNS; central nervous system) 종양, 1차 CNS 림프종, 척수 종양, 뇌간 신경교종, 뇌하수체 선종, 또는 이들 암의 하나 이상의 조합을 포함하는 약학 조성물.
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