KR20040065233A

KR20040065233A - ２-구아니디노-４-헤테로사이클일퀴나졸린

Info

Publication number: KR20040065233A
Application number: KR10-2004-7008399A
Authority: KR
Inventors: 게리케롤프; 바이에르노르베르트; 빌름클라우디아
Original assignee: 메르크 파텐트 게엠베하
Priority date: 2001-12-15
Filing date: 2002-11-21
Publication date: 2004-07-21
Also published as: AU2002342918A1; MXPA04005692A; DE10161767A1; AR037821A1; CA2470030A1; WO2003051866A1; PL370174A1; EP1453823A1; BR0214875A; US20050113396A1

Abstract

본 발명은 화학식 I의 화합물:

[화학식 I]

(단, Y는이고, Het, R¹, R², R⁵, R⁶, R⁷및 R⁸는 주어진 의미를 가진다), 염 및 용매화물, 및 NHE-3 저해제로서의 이의 용도에 관한 것이다.

Description

２-구아니디노-４-헤테로사이클일퀴나졸린{２-GUANIDINO-４-HETEROCYCLYLQUINAZOLINES}

나트륨/양성자 교환기 서브타입 3의 다른 저해제는 예를 들어 EP 0 825 178에 이미 기재되어 있다.

퀴나졸린일구아니딘 유도체는 문헌[V.I.Shvedov et al. in Pharm. Chem. J.(Engl. Transl.)1980, 14, 532-538 또는 Khim. Farm. Zh.1980, 14, 38-43, 및S.C.Bell et al. in J. Med. Pharm. Chem.1962, 5, 63-69]에 기재되어 있다.

본 발명은 화학식 I의 화합물:

(단, 상기 식에서,

Y는이고,

Het는, 비치환되거나, R³및/또는 R⁴로 일치환 또는 다치환된, 포화, 불포화 또는 방향족 헤테로고리 라디칼이고,

R¹, R², R³및 R⁴는 각각 상호 독립적으로 H, A, OA, Hal, CF₃, CH₂CONH₂, CH₂CO₂H, CH₂CO₂A, CH₂NH₂, CH₂NA₂, CH₂NHA, CH₂OH, CH₂OA, OH, NO₂, NH₂, NHA, NA₂, NH-CO-A, NH-CO-Ph, SA, SO-A, SO₂-A, SO₂-Ph, CN, OCF₃, CO-A, CO₂H, CO₂A, CO-NH₂, CO-NHA, CO-NA₂, SO₂NH₂, SO₂NHA, SO₂NA₂, CHO, 또는 각각 비치환되거나 A, OH, OA, Hal, CN 또는 CF₃으로 일치환 또는 다치환된 페닐, 벤질 또는 사이클로헥실메틸, 또는 A, OH, OA, Hal, CN 또는 CF₃으로 일치환 또는 다치환된 헤테로고리 라디칼이고,

A는 탄소수 1, 2, 3, 4, 5 또는 6의 알킬이고,

Hal은 F, Cl, Br 또는 I이고,

R⁵, R⁶, R⁷및 R⁸은 각각 상호 독립적으로 H, 벤질, 알릴 또는 다른 아미노-보호기, A, 또는 비치환되거나 A, OA, CN, Hal 또는 CF로 일치환 또는 다치환된 페닐이고, R⁵와 R⁷, R⁵와 R⁶, 및 R⁷과 R⁸은 5-7원 고리를 형성할 수 있다)

및, 이의 염, 용매화물 및 입체 이성질체(이의 모든 비율의 혼합물을 포함), 및 이의 약제학적으로 사용가능한 유도체, 특히 이의 생리학적으로 허용가능한 염 및 용매화물에 관한 것이다.

본 발명은 또한, NHE-3 저해제로서의 화학식 I의 화합물 및 이의 염 및 용매화물의 용도에 관한 것이다.

본 발명은 유용한 특성, 특히 약제 제조에 사용가능한 특성을 갖는 신규 화합물을 찾아내는 것을 목적으로 한다.

놀랍게도, 화학식 I의 화합물 및 이의 염은 내약성이 우수하고, 나트륨/양성자 교환기 서브타입 3을 저해하는 것으로 밝혀졌다.

화학식 I의 화합물은 인간 및 동물의 의약에서 약제 활성 성분으로 사용될 수 있다.

Na⁺/H⁺교환기는, 모두 이미 클로닝된, 6개 이상의 다른 아이소형태(isoforms)(NHE-1 내지 NHE-6)를 갖는 부류를 나타내는 것으로 알려져 있다. 서브타입 NHE-1은 신체 전체의 모든 조직에 어디에나 분포되어 있으나, 다른 NHE 서브타입은 신장 또는 소장의 내강 벽 및 외강벽에서와 같은 특정 장기에서 선택적으로 발현된다. 이러한 분포는, 다양한 아이소형태가 갖는 특정 기능, 즉 한편으로는 서브타입 NHE-1가 세포내 pH 및 세포 부피를 조절하고, 다른 한편으로는 아이소형태 NHE-2 및 NHE-3가 장 및 신장에서 Na⁺를 흡수 및 재흡수하는 것을 반영한다. 아이소형태 NHE-4는 주로 위에서 발견되었다. NHE-5의 발현은 뇌 및 뉴런 조직에 제한된다. NHE-6은 미토콘드리아에서 나트륨/양성자 교환기를 형성하는 아이소형태이다.

아이소형태 NHE-3은 특히 근위 세뇨관의 선단막에서 발현된다; 따라서 NHE-3저해제는 특히 신장에 대해 보호 작용을 한다.

NHE-3 아이소형태에 대한 선택성 저해제는 치료에 다양하게 사용된다. NHE-3 저해제는, 신장 허혈증동안이나, 신장 이식시에 신장을 제거, 수송 및 재관류하는 동안 의 경우와 같이, NHE 활성을 활성화시키게 되는 병태생리학적 저산소 및 허혈 상황 후의 조직 손상 및 세포 괴사를 저해하거나 감소시킨다.

화학식 I의 화합물은, 산소 공급이 부족한 장기의 세포에 나트륨 및 물이 과도하게 흡수되는 것을 막는다는 점에서 세포보호 작용을 한다.

화학식 I의 화합물은 저혈압 작용을 하며, 긴장항진을 치료하기 위한 약제 활성 성분으로 적합하다. 화학식 I의 화합물은 또한 이뇨제로 적합하다.

화학식 I의 화합물은, 단독으로 또는 다른 서브타입 특이성을 갖는 NHE 저해제와 조합되어 항허혈 작용을 하고, 혈전증, 아테롬성 동맥경화증, 도관 경련의 경우에, 수술 전 및 수술동안에 예를 들어 신장 및 간과 같은 장기의 보호를 위하여 사용될 수 있으며, 만성 또는 급성 신부전의 경우에 사용될 수 있다.

또한, 이들은 졸중, 뇌부종, 신경계의 허혈증, 예를 들어 알러지성, 신장병성, 혈액량 감소성 또는 박테리아성 쇼크와 같은 다양한 형태의 쇼크를 치료하기 위하여 사용될 수 있으며, 호흡이 예를 들어 중추신경 수면성 무호흡(central sleep apnoea), 코트 사망(cot death), 수술후 산소압저하 및 다른 호흡 장애 등에 이르는 것을 개선하기 위하여 사용될 수 있다.

카르보안하이드라제 저해제와 조합함으로써 호흡활성을 더 개선시킬 수 있다.

화학식 I의 화합물은 예를 들어 섬유아세포 증식 및 평활 관상 근세포의 증식과 같은 세포의 증식에 대해 저해 작용을 하므로, 세포 증식이 1차 또는 2차 요인인 질환을 치료하기 위하여 사용될 수 있다.

화학식 I의 화합물은 당뇨병, 암질환, 섬유증 질환, 내피 기능장애, 장기 비대 및 과형성, 특히 전립선 과형성 또는 전립선 비대의 지연된 합병증에 대하여 사용될 수있다.

이들은 또한 특정 형태의 긴장항진, 아테롬성 동맥경화증, 당뇨병 및 증식성 질환을 확인 및 구별하기 위한 진단제로서 적합하다.

화학식 I의 화합물은 또한 혈청 지단백질 수준에 유리하게 작용하므로, 혈액의 지방 수준이 증가된 것을 치료하기 위하여 단독으로 또는 다른 약제와 조합하여 사용할 수 있다.

본 발명은, 혈전증, 심장, 말초 및 중추 신경계 및 졸중의 허혈 상태, 주변 장기 및 수족의 허혈 상태의 치료, 및 쇼크 상태의 치료용 약제를 제조하기 위한, 특허청구범위 제 1항에 따른 화학식 I의 화합물, 및 이의 생리학적으로 허용가능한 염 및/또는 용매화물의 용도에 관한 것이다.

본 발명은 또한, 외과적 수술 및 장기 이식용, 및 외과적 처치를 위한 장기의 보존 및 저장용 약제를 제조하기 위한, 특허청구범위 제 1항의 화학식 I의 화합물 및 이의 생리학적으로 허용가능한 염 및/또는 용매화물의 용도에 관한 것이다.

본 발명은 또한, 세포 증식이 1차 또는 2차 요인인 질환의 치료용 약제를 제조하기 위한, 및 지방 대사 또는 장애가 있는 호흡(breathing drive)의 질병을 치료 또는 예방하기 위한, 특허청구범위 제 1항의 화학식 I의 화합물 및 이의 생리학적으로 허용가능한 염 및/또는 용매화물의 용도에 관한 것이다.

본 발명은 또한, 신장 허혈증, 허혈성 장 질환의 치료용, 또는 급성 또는 만성 신장 질환의 예방용 약제를 제조하기 위한, 특허청구범위 제 1항에 따른 화학식 I의 화합물 및 이의 생리학적으로 허용가능한 염 및/또는 용매화물의 용도에 관한 것이다.

나트륨/양성자 교환기 서브타입 3을 저해하는 물질의 확인 방법은 예를 들어 US 5,871,919에 기재되어 있다.

화학식 I의 화합물은 또한 박테리아 및 기생충 질환의 치료에 적합하다.

예를 들어 A와 같이, 일회 이상 나타나는 화학식 I의 화합물의 모든 라디칼은 의미가 상호 독립적이다.

화학식 I의 화합물의 용매화물이라는 용어는, 이들의 상호 인력에 의해 형성되는, 화학식 I의 화합물 상의 물 또는 다른 용매 분자의 부가물을 의미하기 위한 것이다. 용매화물에는 예를 들어, 헤미-, 일- 또는 이수화물, 예를 들어 메탄올 또는 에탄올과의 알콜 부가 화합물, 또는 에테르 부가 화합물이 있다.

상기 화학식에서, A는 선형 또는 분지형 알킬로, 탄소수 1, 2, 3, 4, 5 또는 6이다. A는 바람직하게는 메틸, 또한 에틸, 프로필, 이소프로필, 부틸, 이소부틸, 2차-부틸 또는 3차-부틸, 또한 펜틸, 1-, 2- 또는 3-메틸부틸, 1,1-, 1,2- 또는 2,2-디메틸프로필, 1-에틸프로필, 헥실, 1-, 2-, 3- 또는 4-메틸펜틸, 1,1-, 1,2-, 1,3-, 2,2-, 2,3- 또는 3,3-디메틸부틸, 1- 또는 2-에틸부틸, 1-에틸-1-메틸프로필, 1-에틸-2-메틸프로필, 1,1,2- 또는 1,2,2-트리메틸프로필이다.

OA는 바람직하게는 메톡시, 에톡시, 프로폭시, 이소프로폭시 또는 부톡시이다.

Hal은 바람직하게는 F, Cl 또는 Br, 특히 F 또는 Cl이다.

"아미노 보호기"라는 용어는, 일반적으로 공지되어 있으며, 아미노기를 화학 반응으로부터 보호(차단)하기에 적합하고, 분자의 다른 곳에서 원하는 화학 반응이 일어난 후 쉽게 제거될 수 있는 기를 의미한다. 전형적인 이런 기로는 특히, 비치환 또는 치환된 아실, 아릴, 아르알콕시메틸 또는 아르알킬기가 있다. 아미노 보호기는 원하는 반응(또는 일련반응)후 제거되므로, 그 성질과 크기는 중요하지 않다; 그러나, 탄소수 1 내지 20, 특히 1 내지 8인 것이 바람직하다. "아실기" 라는 용어는, 지방족, 방향성지방족, 방향족 또는 헤테로고리 카르복실산 또는 술폰산에서 유도되는 아실기와, 특히, 알콕시카르보닐기, 아릴옥시카르보닐기 및 특히 아르알콕시카르보닐기를 포함한다. 이러한 형태의 아미노-보호기의 예로는, 아세틸, 프로피오닐, 부티릴과 같은 알카노일; 페닐아세틸과 같은 아르알카노일; 벤조일 및 톨루일과 같은 아로일; POA와 같은 아릴옥시알카노일; 메톡시카르보닐, 에톡시카로보닐, 2,2,2-트리클로로에톡시카르보닐, BOC(3차-부톡시카르보닐) 및 2-요오도에톡시카르보닐과 같은 알콕시카르보닐; 알릴옥시카르보닐(Aloc)과 같은 알켄일옥시카르보닐, CBZ("카르보벤족시", Z와 동의어), 4-메톡시벤질옥시카르보닐(MOZ), 4-니트로벤질옥시카르보닐 및 9-플루오렌일메톡시카르보닐(FMOC)과 같은 아르알킬옥시카르보닐; 2-(페닐술포닐)-에톡시카르보닐; 트리메틸실릴에톡시카르보닐(Teoc), 또는 4-메톡시-2,3,6-트리메틸페닐술포닐(Mtr)과 같은 아릴술포닐을 들 수 있다. 아미노 보호기로는 바람직하게는 포르밀, 아세틸, 프로피오닐, 부티릴, 페닐아세틸, 벤조일, 톨루일, POA, 메톡시카르보닐, 에톡시-카르보닐, 2,2,2-트리클로로에톡시카르보닐, BOC, 2-요오도에톡시카르보닐, CBZ("카르보벤족시"), 4-메톡시벤질옥시카르보닐, FMOC, Mtr 또는 벤질이다.

상기 및 하기에서, Ph는 달리 언급되지 않는다면, 비치환된 페닐 라디칼이 바람직하다.

Het는 바람직하게는, 비치환되거나 A, OA 및/또는 Hal로 치환된 방향족 및 특히 포화된 헤테로고리 라디칼이다. 이 헤테로고리 라디칼은 일환 또는 다환이 될 수 있으며, 일환 또는 이환이 바람직하고, 특히 일환이 바람직하다.

상기 및 하기에서, 헤테로고리 라디칼은 바람직하게는 예를 들어 2- 또는 3-푸릴, 2- 또는 3-티에닐, 1-, 2-, 또는 3-피롤일, 1-, 2-, 4- 또는 5-이미다졸일, 1-, 3-, 4- 또는 5-피라졸일, 2-, 4- 또는 5-옥사졸일, 3-, 4- 또는 5-이속사졸일, 2-, 4- 또는 5-티아졸일, 3-, 4- 또는 5-이소티아졸일, 2-, 3- 또는 4-피리딜, 2-, 4-, 5- 또는 6-피리미딘일, 또한 바람직하게는 1,2,3-티아졸-1-, -4-, 또는 -5-일, 1,2,4-트리아졸-1-, -3- 또는 5-일, 1- 또는 5-테트라졸일, 1,2,3-옥사디아졸-4- 또는 -5-일, 1,2,4-옥사디아졸-3- 또는 -5-일, 1,3,4-티아디아졸-2- 또는 -5-일, 1,2,4-티아디아졸-3- 또는 -5-일, 1,2,3-티아디아졸-4- 또는 5-일, 3- 또는 4-피리다진일, 피라진일, 1-, 2-, 3-, 4-, 5-, 6- 또는 7-인돌일, 4- 또는 5-이소인돌일, 1-, 2-, 4- 또는 5-벤즈이미다졸일, 1-, 3-, 4-, 5-, 6- 또는 7-벤조피라졸일, 2-,4-, 5-, 6- 또는 7-벤족사졸일, 3-, 4-, 5-, 6- 또는 7-벤즈이속사졸일, 2-, 4-, 5-, 6- 또는 7-벤조티아졸일, 2-, 4-, 5-, 6- 또는 7-벤즈이소티아졸일, 4-, 5-, 6- 또는 7-벤즈-2,1,3-옥사디아졸일, 2-, 3-, 4-, 5-, 6-, 7- 또는 8-퀴놀일, 1-, 3-, 4-, 5-, 6-, 7- 또는 8-이소퀴놀일, 3-, 4-, 5-, 6-, 7- 또는 8-시놀린일, 2-, 4-, 5-, 6-, 7- 또는 8-퀴나졸린일, 5- 또는 6-퀴녹살린일, 2-, 3-, 5-, 6-, 7- 또는 8-2H-벤조-1,4-옥사진일, 또한 바람직하게는 1,3-벤조디옥솔-5-일, 1,4-벤조디옥산-6-일, 2,1,3-벤조티아디아졸-4- 또는 -5-일 또는 2,1,3-벤족사디아졸-5-일이다.

헤테로고리 라디칼은 또한 일부 또는 전부 수소화될 수 있다. 사용되는 헤테로고리 라디칼은 또한 예를 들어 2,3-디하이드로-2-, -3-, -4- 또는 5-푸릴, 2,5-디하이드로-2-, -3-, -4- 또는 -5-푸릴, 테트라하이드로-2- 또는 -3-푸릴, 1,3-디옥솔란-4-일, 테트라하이드로-2- 또는 -3-티에닐, 2,3-디하이드로-1-, -2-, -3-, -4- 또는 -5-피롤일, 2,5-디하이드로-1-, -2-, -3-, -4- 또는 -5-피롤일, 1-, 2- 또는 3-피롤리딘일, 테트라하이드로-1-, -3- 또는 -4-이미다졸일, 2,3-디하이드로-1-, -2-, -3-, -4- 또는 -5-피라졸일, 테트라하이드로-1-, -2- 또는-4-피라졸일, 1,4-디하이드로-1-, -2-, -3- 또는 -4-피리딜, 1,2,3,4-테트라하이드로-1-, -2-, -3-, -4-, -5- 또는 -6-피리딜, 1-, 2-, 3- 또는 4-피페리딘일, 2-, 3- 또는 4-모르폴린일, 테트라하이드로-2-, -3- 또는 -4-피란일, 1,4-디옥산일, 1,3-디옥산-2-, -4- 또는 -5-일, 헥사하이드로-1-, -3- 또는 -4-피리다진일, 헥사하이드로-1-, -2-, -4- 또는 -5-피리미딘일, 1-, 2- 또는 3-피페라진일, 1,2,3,4-테트라하이드로-1-,-2-, -3-, -4-, -5-, -6-, -7- 또는 -8-퀴놀일, 1,2,3,4-테트라하이드로-1-, -2-, -3-, -4-, -5-, -6-, -7- 또는 -8-이소퀴놀일, 2-, 3-, 5-, 6-, 7- 또는 8-3,4-디하이드로-2H-벤조-1,4-옥사진일, 또한 바람직하게는 2,3-메틸렌디옥시페닐, 3,4-메틸렌디옥시-페닐, 2,3-에틸렌디옥시페닐, 3,4-에틸렌디옥시페닐, 3,4-(디플루오로메틸렌디옥시)페닐, 2,3-디하이드로벤조퓨란-5- 또는 -6-일, 2,3-(2-옥소메틸렌디옥시)페닐 또는 3,4-디하이드로-2H-1,5-벤조디오제핀-6- 또는 -7-일, 또한 바람직하게는 2,3-디하이드로벤조퓨란일 또는 2,3-디하이드로-2-옥소퓨란일이 될 수 있다.

상기 헤테로고리 라디칼은 추가적으로 A, OA 및/또는 Hal로 치환될 수 있다.

헤테로 고리 라디칼은 또한 바람직하게는 다음의 기로부터 선택될 수 있다:

헤테로고리 라디칼은 특히 바람직하게는, 2- 또는 3-퓨릴, 2- 또는 3-티에닐, 1-, 2- 또는 3-피롤일, 특히 1-피롤일, 1-, 2-, 4- 또는 5-이미다졸일, 1-, 3-, 4- 또는 5-피라졸일, 2-, 4- 또는 5-옥사졸일, 3-, 4- 또는 5-이속사졸일, 2-, 4- 또는 5-티아졸일, 3-, 4- 또는 5-이소티아졸일, 2-, 3- 또는 4-피리딜, 2-, 4-, 5- 또는 6-피리미딘일, 또한 바람직하게는 1,2,3-트리아졸-1-, -4- 또는 -5-일, 1,2,4-티아졸-1-, -3- 또는 -5-일, 1- 또는 5-테트라졸일, 1,2,3-옥사디아졸-4- 또는 -5-일, 1,2,4-옥사디아졸-3- 또는 -5-일, 1,3,4-티아디아졸-2- 또는 -5-일, 1,2,4-티아디아졸-3- 또는 -5-일, 1,2,3-티아디아졸-4- 또는 -5-일, 3- 또는 4-피리다진일, 피라진일, 1-, 2- 또는 3-피롤리딘일, 1-, 2-, 3- 또는 4-피페리딘일, 2-, 3- 또는 4-모르폴린일, 1,4-디옥산일, 1,3-디옥산-2-, -4- 또는 -5-일, 1-, 2- 또는 3-피페라진일이다.

헤테로고리 라디칼은 또한 바람직하게는 다음의 기로부터 선택된다:

화학식 I의 화합물에서 다수의 헤테로고리 라디칼이 생성된다면, 이들은 동일하거나 상이한 의미를 가질 수 있다.

R¹, R², R³및 R⁴는 바람직하게는 상호 독립적으로, H, A, OA, Hal, CF₃, CH₂CONH₂, CH₂CO₂H, CH₂CO₂A, CH₂NH₂, CH₂NA₂, CH₂NHA, CH₂OH, CH₂OA, OH, NO₂, NH₂,NHA, NA₂, NH-CO-A, NH-CO-Ph, SA, SO-A, SO₂-A, SO₂-Ph, CN, OCF₃, CO-A, CO₂H, CO₂A, CO-NH₂, CO-NHA, CO-NA₂, SO₂NH₂, SO₂NHA 또는 SO₂NA₂, 특히 H, A, OA, Hal, CF₃, CH₂CONH₂, CH₂CO₂H, CH₂CO₂A, CH₂NH₂, OH, NO₂, NH₂, NHA, NA₂또는 NH-CO-A이다.

R⁵및 R⁷은 특히 바람직하게는 동시에 H이고, R⁶또는 R⁸은 H 또는 A이고, 특히 H이다.

하나 이상의 라디칼 R⁵, R⁶, R⁷및 R⁸이 H인 경우, 구아니디노기 Y는 일반적으로 공지된 조건 하에서 이중 결합에 대하여 이성질체화될 수 있다. 화학식 I은 이러한 모든 이성질체기를 포함한다.

R⁵및 R⁷이 함께 고리를 형성하는 경우, Y는 바람직하게는 하기 구조 중 하나를 선택하는 것이 바람직하다:

(단, 상기 식에서, R⁶및 R⁸은 상기 정의된 바와 같고, n은 1, 2 또는 3, 바람직하게는 1 또는 2이다)

R⁷및 R⁸이 함께 고리를 형성하는 경우, Y는 바람직하게는 하기 구조 중 하나를 선택하는 것이 바람직하다:

(단, 상기 식에서, R⁵및 R⁶은 상기 정의된 바와 같고, n은 1, 2 또는 3, 바람직하게는 1 또는 2이다)

R⁵및 R⁶이 함께 고리를 형성하는 경우, Y는 바람직하게는 하기 구조 중 하나를 선택하는 것이 바람직하다:

(단, 상기 식에서, R⁷및 R⁸은 상기 정의된 바와 같고, n은 1, 2 또는 3, 바람직하게는 1 또는 2이다)

본 발명은 특히, 상기 라디칼 중 하나 이상이 상기된 바람직한 의미 중 하나를 가지는 화학식 I의 화합물 및 이의 용도에 관한 것이다. 화합물의 몇가지 바람직한 기는, 화학식 I과 일치하고 상세한 언급이 없는 라디칼은 화학식 I에서의 의미를 갖는 하기 화학식 Ia 내지 Ie로 표현할 수 있다.

Ia에서, R¹은 H, OH, OA, SA 또는 Hal, 특히 H이고;

Ib에서, R¹은 H, OH, OA, SA 또는 Hal, 특히 H이고,

R²는 H, Hal, OH, A, NH₂, NO₂또는 CN, 특히 H, Cl, OH, CH₃또는 NH₂이고;

Ic에서, R¹은 H, OH, OA, SA 또는 Hal, 특히 H, OH, OCH₃또는 CH₃이고,

Het는 2- 또는 3-퓨릴, 2- 또는 3-티엔일, 1-, 2- 또는 3-피롤일, 특히 1-피롤일, 1-, 2-, 4- 또는 5-이미다졸일, 1-, 3-, 4- 또는 5-피라졸일, 2-, 4- 또는 5-옥사졸일, 3-, 4- 또는 5-이속사졸일, 2-, 4- 또는 5-티아졸일, 3-, 4- 또는 5-이소티아졸일, 2-, 3- 또는 4-피리딜, 2-, 4-, 5- 또는 6-피리미딘일, 또한 바람직하게는 1,2,3-트리아졸-1-, -4- 또는 -5-일, 1,2,4-트리아졸-1-, -3- 또는 -5-일, 1- 또는 5-테트라졸일, 1,2,3-옥사디아졸-4- 또는 -5-일, 1,2,4-옥사디아졸-3- 또는 -5-일, 1,3,4-티아디아졸-2- 또는 -5-일, 1,2,4-티아디아졸-3- 또는 -5-일, 1,2,3-티아디아졸-4- 또는 -5-일, 3- 또는 4-피리다진일, 피라진일, 1-, 2- 또는 3-피롤리딘일, 1-, 2-, 3- 또는 4-피페리딘일, 2-, 3- 또는 4-모르폴린일, 1,4-디옥산일, 1,3-디옥산-2-, -4- 또는 -5-일, 1-, 2- 또는 3-피페라진일이고,

R³및 R⁴는 H, A, OA 또는 Hal, 특히 H, Br, Cl, CH₃또는 OCH₃이고;

Id에서, R¹은 H, OH, OA, SA 또는 Hal, 특히 H이고,

Het는

이다.

하나 이상의 라디칼, R¹, R², R³및 R⁴중 하나 이상이 다음 의미 중 하나를 갖는 화학식 I의 화합물 및 이의 염 및 용매화물도 바람직하다:

OH, NO₂, NH₂, NHA, NA₂, NH-CO-A, NH-CO-Ph, SA, SO-A, SO₂-A, SO₂-Ph, CN, OCF₃, CO-A, CO₂H, CO₂A, CO-NH₂, CO-NHA, CO-NA₂, SO₂NH₂, SO₂NHA, SO₂NA₂, 또는 비치환되거나 A, OA, Hal 또는 CF₃로 일치환 또는 다치환된 페닐.

하기 화학식 IA, IB 및 IC의 화합물이 특히 바람직하다:

(단 ,상기 식에서,

R¹, R², Het 및 Y는 상기 정의된 바와 같고, R²는 바람직하게는 Hal, 특히 Cl이다)

화학식 ID의 화합물이 특히 바람직하다:

(단 ,상기 식에서,

Hal은 상기 정의된 바와 같고, 특히 Cl이다)

라디칼 R³이 메틸인 화학식 I의 화합물은 특히 NHE-3 수용체에 대한 결합의 선택성이 우수하다.

라디칼 R⁴가 NH₂인 화학식 I의 화합물은 수용액에서 특히 우수한 가용성을 갖는다.

화학식 I1 내지 I14의 화합물 및 이의 염 및 용매화물이 특히 바람직하다:

R²는 바람직하게는 H, Cl, A, NH₂, NO₂, SCH₃, SOCH₃, SO₂CH₃, OCH₃, OH, CN, CF₃, OCF₃또는 F, 특히 H, Cl, F, Br, OH, CH₃, NO₂또는 NH₂이다. R²는 매우 특히 바람직하게는 Cl이다.

R³은 바람직하게는 H, Cl, OA, NH₂, NO₂, SCH₃, CN, C₂H₅, OCF₃또는 C₆H₅, 특히, H, OA 또는 CH₃이다. R³은 매우 특히 바람직하게는 H 또는 OCH₃이다.

R⁴는 바람직하게는 H, F, NH₂또는 NO₂, 특히 H 또는 NH₂이다. R⁴는 매우 특히 바람직하게는 H 또는 NH₂이다.

Y는 바람직하게는 하기 의미 중 하나를 선택한다:

Y는 특히 바람직하게는 하기 의미 중 하나를 갖는다:

화학식 I의 화합물의 하이드로클로라이드 및 p-톨루엔술포네이트가 매우 특히 바람직하다.

화학식 I의 화합물은 하나 이상의 비대칭적으로 치환된 탄소 원자를 가질 수 있으며, 따라서 순수한 거울상 이성질체 또는 거울상 이성질체의 혼합물로 존재할 수 있다. 또한, 다수의 비대칭적으로 치환된 탄소 원자의 존재 하에 다른 부분입체 이성질체로 존재할 수 있다. 본 발명은 또한 다양한 부분입체 이성질체 및 거울상 이성질체 및 이의 혼합물에 관한 것이다.

화학식 I의 화합물과 이의 제조를 위한 출발물질은, 또한, 문헌(예를 들어, Houben-Weyl, Methoden der organischen Chemie[유기화학의 방법], Georg-Tieme-Verlag, Stuttgart와 같은 표준작업서)에 기재된 바와 같이 그 자체로 공지된 방법에 의해 상기 반응에 공지되고 적합한 반응 조건하에서 정확하게 제조된다. 그 자체로 공지되었지만 본 명세서에서 상세히 언급되지 않은 변형법이 또한 사용될 수 있다.

필요시, 상기 출발물질은 그것이 반응 혼합물로부터 분리되지 않고 대신 화학식 I의 화합물로 즉시 전환되도록 그 자리에서 형성될 수 있다.

화학식 I의 화합물은 o-아미노페닐헤테로사이클일 케톤 또는 화학식 II의 화합물:

(단, 상기 식에서,

R¹, R²및 Het는 특허청구범위 제 1항에서 정의된 바와 같다)

을, 1-시아노구아니딘, 또는 화학식 NC-Y(단, Y는 상기 정의된 바와 같다)의 대응하는 N-알킬화 또는 N-아릴화된 1-시아노구아니딘과 반응시켜 제조하는 것이 바람직하다.

반응은 용매, 바람직하게는 불활성 용매 중에서 실시할 수 있다.

적당한 용매로는 예를 들어, 헥산, 석유 에테르, 벤젠, 톨루엔 및 자일렌과 같은 탄화수소류; 트리클로로에틸렌, 1,2-디클로로에탄, 테트라클로로메탄, 클로로포름 또는 디클로로메탄과 같은 염화 탄화수소류; 메탄올, 에탄올, 이소프로판올, n-프로판올, n-부탄올 또는 3차-부탄올과 같은 알콜류; 디에틸 에테르, 디이소프로필 에테르, 테트라히드로퓨란(THF) 및 디옥산과 같은 에테르류; 에틸렌 글리콜 모노메틸 에테르 및 모노에틸 에테르, 에틸렌 글리콜 디메틸 에테르(디글림)와 같은 글리콜 에테르류; 아세톤 또는 부탄온과 같은 케톤류; 아세트아미드, 디메틸아세트아미드, N-메틸피롤리돈(NMP) 또는 디메틸포름아미드(DMF)와 같은 아미드류; 아세토니트릴과 같은 니트릴류; 디메틸 술폭사이드(DMSO)와 같은 술폭사이드류; 이황화탄소; 포름산 또는 아세트산과 같은 카르복실산류; 니트로메탄 또는 니트로벤젠과 같은 니트로 화합물류; 에틸 아세테이트와 같은 에스테르류, 또는 상기 용매의 혼합물을 들 수 있다.

DMF, 물 또는 알콜을 사용하는 것이 바람직하다. 반응은 100 내지 200℃의 온도에서 용매 없이, 즉 용융물 상태로 실시하는 것이 특히 바람직하다.

AlCl₃, TiCl₄, p-톨루엔술폰산, BF₃, 아세트산, 황산, 옥살산, POCl₃또는 오산화인과 같은 산성 촉매가 존재하는 것이 유리하다.

바람직한 변형법은, 하나 이상의 반응물을 예를 들어 하이드로클로라이드와 같은, 이미 염으로서 사용하는 것을 포함하여 이루어진다.

더 유용한 화학식 I의 화합물의 제조 방법은, 화학식 NC-Y의 화합물의 대신에, 화학식 III의 화합물:

HN=CX-Y

(단, 상기 식에서,

X는 -S-알킬, -S-아릴, -O-알킬 또는 -O-아릴이고,

알킬은 바람직하게는 A에 대해 상기 정의된 바와 같고, 아릴은 바람직하게는 비치환되거나 A, OH, OA, Hal, CN 또는 CF₃에 의해 일치환 또는 다치환되는 페닐이다)

을 화학식 II의 화합물과 반응시키는 것을 포함하여 이루어진다.

마지막으로, 화학식 I의 화합물은 화학식 IV의 화합물:

(단, 상기 식에서, Het, R¹및 R²는 상기 정의된 바와 같다)

을 화학식 HY의 화합물(단, Y는 상기 정의된 바와 같다)과 반응시켜 제조할 수 있다. HY는 특히 바람직하게는 구아니딘이다. 이 반응은 바람직하게는 알칼리 금속 알콕사이드와 같은 강염기 또는 강염기성 아민의 존재 하에 실시하는 것이 바람직하다. 사용되는 염기는 특히 바람직하게는 나트륨 메톡사이드, 나트륨 에톡사이드, 칼륨 메톡사이드, 칼륨 에톡사이드, 칼륨 3차-부톡사이드, DBN, DBU 또는 DABCO이다.

화학식 IV의 화합물과 화학식 HY의 화합물과의 반응에 사용되는 용매는 바람직하게는 DMSO, NMP 또는 DMF이다.

화학식 IV의 화합물은 그 자체로 공지된 제조 방법에 따라 얻을 수 있다.

화학식 IV의 화합물은 특히 바람직하게는 화학식 V의 화합물:

을,

a) 예를 들어 비스(트리페닐포스핀)팔라듐(II) 클로라이드와 같은 팔라듐 화합물의 존재 하에 화학식 Het-B(OH)₂의 헤테로고리 붕산과 스즈키 커플링의 형태로 반응시켜 얻는다. 이러한 반응의 많은 변형법이 이미 문헌(예를 들어, S.L.Buchwald and J.M. Fox, The Strem Chemiker 200, 18, 1)에 개시되어 있다.

또는, b) 화학식 Het-Sn(n-C₂H₅)₃의 헤테로고리 트리부틸틴 화합물과 스틸(Stille) 커플링(예를 들어, J. K Stille Angew. Chem. Int. Ed. Engl. 1986, 25, 508)의 형태로 반응시켜 얻는다.

또는, c) 예를 들어 피리돈 또는 피롤과 같은 유리 NH 작용기를 갖는 헤테로고리 질소 화합물과 함께 친핵성 치환의 형태로 반응시켜 얻는다. 이 때, 이 헤테로고리는 N을 통해 결합된다. 이 반응은 예를 들어 수소화나트륨 또는 탄산칼륨과 같은 산 스캐빈저의 존재 하에, 및 DMSO, NMP 또는 DMF와 같은 극성 용매의 존재 하에 실시하는 것이 바람직하다.

본 출원은 또한 화학식 V의 화합물의 제조 방법에 관한 것이다.

본 출원은 또한 화학식 II 및 IV의 신규 화합물에 관한 것이다.

경우에 따라, 예를 들어 보호기를 제거하거나, 에테르 분해하거나 또는 니트로기를 아미노기로 수소화함으로써, 화학식 II의 화합물을 화학식 NC-Y의 화합물 또는 화학식 III의 화합물과 반응시킨 후 라디칼 R¹, R², R³및 R⁴및 다른 작용기를 형성시키는 것만이 적합할 수 있다.

따라서, 또한 상기 방법으로, 화학식 IV의 화합물을 화학식 HY의 화합물과 반응시킨 후 라디칼 R¹, R², R³및 R⁴및 다른 작용기를 형성시키는 것만이 적합할 수 있다.

화학식 I의 염기는, 예를 들어, 에탄올과 같은 불활성 용매 중에서 등량의염기와 산을 반응시킨 후 증발시킴으로써, 산을 사용하여 관련 산-부가염으로 전환시킬 수 있다. 이 반응에 적합한 산은, 특히, 생리학적으로 허용가능한 염을 생성하는 산이다. 그러므로, 예를 들어 황산, 질산, 염산 또는 브롬산과 같은 할로겐화수소산, 오르소인산과 같은 인산, 또는 술팜산과 같은 무기산, 또한 유기산, 특히, 지방족, 지환족, 방향성지방족, 방향족 또는 헤테로사이클릭 일염기 또는 다염기 카르복실산, 술폰산 또는 황산, 예를 들어 포름산, 아세트산, 프로피온산, 피발산, 디에틸아세트산, 말론산, 숙신산, 피멜산, 푸마르산, 말레산, 락트산, 타르타르산, 말산, 시트르산, 글루콘산, 아스코르브산, 니코틴산, 이소니코틴산, 메탄- 또는 에탄술폰산, 에탄디술폰산, 2-하이드록시에탄술폰산, 벤젠술폰산, p-톨루엔술폰산, 나프탈렌모노- 및 -디술폰산, 및 라우릴황산을 사용할 수 있다. 예를 들면, 화학식 I의 화합물과 피크레이트와 같은 생리학적으로 허용가능하지 않은 산과의 염이 화학식 I의 화합물의 분리 및/또는 정제에 사용될 수 있으며, 또한 본발명에 속한다.

본 발명은 또한, 특히 비화학적 방법을 사용하여 약제학적 제제를 제조하기 위한, NHE-3 저해제로서의 화학식 I의 화합물 및/또는 이의 생리학적으로 허용가능한 염의 용도에 관한 것이다. 이 때, 이들은 하나 이상의 고체, 액체 및/또는 반-액체 부형제 또는 보조제와 함께, 및 필요시 하나 이상의 추가의 활성 성분과 조합하여 적합한 투여 형태로 전환될 수 있다.

본 발명은 또한 하나 이상의 화학식 I의 NHE-3 저해제 및/또는 이의 생리학적으로 허용가능한 염 및 용매화물 중 하나를 포함하여 이루어지는 약제학적 제제에 관한 것이다.

이러한 제제는 인간 또는 동물의 의약에서 약제로 사용될 수 있다. 적합한 부형제는, 장내(예를 들어, 경구적), 비경구적 또는 국소적 투여에 적합하고, 예를 들어, 물, 식물성 기름, 벤질 알콜, 알킬렌 글리콜, 폴리에틸렌 글리콜, 글리세롤 트리아세테이트, 젤라틴, 락토오스 또는 녹말과 같은 탄수화물, 마그네슘 스테아레이트, 탈크 또는 바셀린과 같이 신규 화합물과 반응하지 않는 유기 또는 무기 물질이다. 특히, 정제, 환제, 제피정, 캅셀제, 산제, 과립제, 시럽제, 주스제 또는 드롭제가 경구 투여에 적합하고, 좌제가 직장 투여에 적합하며, 용액, 바람직하게 오일계 용액 또는 수용액, 또한 현탁액, 에멀젼 또는 임플란트가 비경구 투여에 적합하며, 연고제, 크림제 또는 산제가 국소 투여에 적합하고 패치는 경피에 사용된다. 신규 화합물은 동결건조될 수 있고, 얻어진 동결건조물은 예를 들어 주사제 제조에 사용될 수 있다. 상기 제제는 멸균처리되고 및/또는 윤활제, 방부제, 안정화제 및/또는 습윤제, 유화제, 삼투압 조절용 염, 완충 물질, 착색제 및 향미제 및/또는 예를 들어 하나 이상의 비타민과 같은 다수의 추가 활성 물질과 같은 보조제를 포함할 수 있다.

에어로졸 또는 스프레이의 형태로 투여하기 위한 적당한 약제학적 제제는, 예를 들어 약제학적으로 허용가능한 용매 중의 화학식 I의 활성 성분의 용액, 현탁액, 또는 에멀젼이다.

화학식 I의 화합물 및 이의 생리학적으로 허용가능한 염 및 용매화물은 상기된 질환 또는 질환 상태의 치료 및/또는 예방을 위해 사용될 수 있다.

일반적으로, 본 발명에 따른 물질은, 바람직하게 투여용량 단위 당 약 0.1내지 100 mg, 특히 1 내지 10 mg의 투여량으로 투여된다. 1일 투여량은 바람직하게 체중 1 kg 당 약 0.001 내지 10 mg이다. 그러나, 각각의 환자에 대한 특정한 투여량은, 예를 들어, 사용된 특정 화합물의 효능, 나이, 체중, 일반적인 건강 상태, 성별, 식이, 투여 시간 및 방법, 배설 속도, 병용 약제 및 상기 치료법이 적용되는 특정질환의 심각도와 같은 다양한 요인에 따라 결정된다. 경구 투여가 바람직하다.

상기 및 하기에서, 모든 온도는 ℃로 나타낸다. 다음 실시예에서 "통상의 반응 마무리"란 필요시 물을 첨가하고, 필요시 최종 산물의 구성에 따라 혼합물의 pH를 2 내지 10으로 조절하고, 혼합물은 에틸아세테이트 또는 디클로로메탄으로 추출하고, 상을 분리해내고, 유기상을 황산나트륨으로 건조 및 증발시키고, 생성물을 실리카겔 상에서 크로마토그래피 및/또는 결정화에 의해 정제하는 것을 의미한다.

질량 분광분석법(MS):EI(전자 충격 이온화) M⁺

FAB(고속 원자 충격) (M+H)⁺

실시예 1:

화합물 1 10.0g, 시아노구아니딘( 2 ) 7.0g 및 p-톨루엔술폰산 22.0g의 혼합물을 160℃에서 1시간동안 가열한다. 반응 혼합물을 80㎖ 메탄올과 함께 가열하고, 수산화나트륨 1N 수용액을 사용하여 알칼리성으로 만들고 여과한다. 잔사를 통상의 반응마무리하고, 이소프로판올 중의 염화수소 가스 용액을 사용하여 처리하고, 여과 후에 생성물( 3 )(m.p.:345℃)을 얻는다.

실시예 2

메탄올 40㎖ 중의 화합물 3a (대응하는 하이드로클로라이드로부터 염기를 분리하여 수득) 200mg 용액을 Pt/C(5%)의 존재 하에 대기압에서 수소화한다. 용매를 제거하고, 잔사를 통사의 반응마무리하고, 메탄올성 염산 용액을 첨가하고 여과한 후 생성물( 4 )를 얻는다.

실시예 3

디에틸렌 글리콜 디메틸 에테르 19㎖ 중의 화합물 7 [문헌(Okabe et al., Tetrahedron 1995, 51, 1861-1866)의 방법으로 수득] 1.35g, 붕산( 8 ) 0.75g, 수산화나트륨 309mg 및 테트라키스(트리페닐포스핀)-팔라듐(0) 116mg의 혼합물을 130℃에서 6시간동안 가열한다. 이어서, 물을 반응 혼합물에 첨가하고, 반응마무리하여 생성물( 9 )(m.p.:174-176℃)을 얻는다.

실시예 4

1-메틸-2-피롤리돈 10.0㎖ 중의 화합물 5 1.10g, 구아니디늄 클로라이드1.82g 및 1,8-디아자바이사이클로[5.4.0]운데크-7-엔 2.89g의 혼합물을 실온에서 밤새 교반한다. 반응 혼합물을 통상의 반응마무리하고, 메탄올성 염산 용액을 첨가한 후 생성물 6 (m.p.:294-297℃)을 얻는다.

실시예 5

디옥산 25㎖ 중의 화합물 7 0.50g, 2-(트리부틸스탄닐)퓨란( 10 ) 0.765g 및 비스(트리페닐포스핀)팔라듐(II) 클로라이드 0.150g의 혼합물을 두시간동안 환류한다. 용매를 제거하고, 잔사를통상의 반응마무리하여 화합물 11 을 얻는다.

실시예 6

구아니디늄 클로라이드 0.901g을 메탄올 중의 나트륨 메톡사이드 30% 용액1.75㎖와 함께 실온에서 30분동안 교반한다. 이어서 용매를 제거하고, 디메틸포름아미드 10㎖ 중의 화합물 11 0.25g 용액을 잔사에 첨가한다. 혼합물을 실온에서 두시간동안 교반한 후 통상의 반응마무리하여 화합물 12 (m.p.:209-212℃)를 얻는다.

실시예 7

화합물 7 1.05g, 13 0.55g, 및 탄산칼륨 2.0g을 디메틸포름아미드 15㎖ 중에 실온에서 밤새 교반한다. 반응 혼합물을 이어서 물로 희석시켜 여과한다. 잔사를 통상의 반응마무리하여 생성물 14 를 얻는다.

실시예 8

화합물 14 250mg을 디메틸 술폭사이드 3㎖ 중에 용해시키고, DABCO 100mg을첨가한다. 이어서 디메틸 술폭사이드 중의 화학량론적 양의 구아니딘 염기(나트륨 메톡사이드를 사용하여 구아니디늄 클로라이드로부터 분리)를 첨가하고, 혼합물을 실온에서 30분동안 교반한다. 물을 첨가한 후, 혼합물을 여과하고, 잔사를 통상의 반응마무리하고, 이소프로판올 중의 HCl 용액을 첨가하고 여과한 후, 생성물 15 (m.p.:285°)로 전환시킨다.

실시예 9

백색 오일 상태의 나트륨 340mg을 질소 대기 하에 디메틸 술폭사이드 10㎖ 중의 피롤 0.70ml 용액에 첨가하고, 혼합물을 30분동안 교반한다. 수득 용액을 디메틸 술폭사이드 10㎖ 중의 화합물 7 2.33g 용액에 냉각시키면서 적가하고, 혼합물을 두시간 더 교반한다. 이어서 물을 반응 혼합물에 첨가하고, 통상의 반응마무리하여 생성물 16 을 얻는다.

실시예 10

DABCO 225mg을 디메틸 술폭사이드 5㎖ 중의 화합물 16 528mg 용액에 첨가하고, 혼합물을 30분동안 교반한다. 이어서 구아니딘 염기 0.10㎖를 첨가하고, 혼합물을 30분 더 교반한다. 물을 첨가한 후, 혼합물을 통상의 반응마무리하여, 생성물 17 (m.p.: 153℃)을 얻는다.

실시예 11

화합물 16 530mg을 테트라하이드로퓨란 10㎖ 에 용해시키고, NBS 340mg을 첨가하고, 혼합물을 실온에서 2시간동안 교반한다. NBS 250mg을 더 첨가한 후, 반응 혼합물을 두시간동안 교반하고, 물로 희석하여 통상의 반응마무리함으로써 생성물 18 을 얻는다.

대응하는 구아니딘 화합물을 실시예 10과 유사하게 화합물 18 로부터 얻는다.

대응하는 전구체를 사용하여 상기 방법과 유사하게 하기 화합물을 NHE-3 저해제로서 이의 바람직한 산-부가염의 형태로 얻는다.

이하에서 pTsOH는 p-톨루엔술폰산을 의미한다.

실시예 12-19

실시예 30-47

실시예 48-65

실시예 66-83

실시예 84-101

실시예 102-119

실시예 120-137

실시예 138-155

실시예 156-173

실시예 174-191

실시예 192-212

실시예 213-232

실시예 233-252

약리학적 시험

NHE-3 저해제로서의 화학식 I의 화합물의 특징을 나타내기 위하여 하기 방법을 사용한다.

NHE-1 내지 NHE-3 아이소형태에 대한 이들의 선택성에 대하여, 화학식 I의 화합물의 특징을 나타낸다. 세 이성질체는 마우스 섬유아세포주에서 안정한 형태로 발현된다. 화합물의 저해 작용은, 세포내 산과다증 후 세포 내로의²²Na⁺의 EIPA-민감성 흡수를 확인하여 평가한다.

재료 및 방법

다른 NHE 아이소형태를 발현하는 LAP1 세포주

NHE-1, -2 및 -3 아이소형태를 발현하는 LAP1 세포주(마우스 섬유아세포주)는 J. Pouyssegur 교수(Nice, France)에게서 얻었다. 문헌[Frachi et al.(1986)]의 방법으로 트랜스펙션을 실시한다. 세포를 불활성화된 우태아혈청(FCS)를 10% 포함하는 둘베코스(Dulbeccos) 변형된 이글 배지(DMEM)에서 배양한다. NHE-발현 세포를 선택하기 위하여, 문헌[Sardet et al.(1989)]의 소위 "산 사멸법(acid killing method)"을 사용한다. 세포를 우선 NH₄Cl를 함유하고 바이카르보네이트- 및 나트륨이 없는 완충액 중에서 30분간 배양한다. 이어서, 바이카르보네이트, NH₄Cl 및 나트륨이 없는 완충액을 사용하여 세척함으로써 세포외 NH₄Cl을 제거한다. 그리고나서, 세포를 바이카르보네이트가 없고 NaCl 을 함유하는 완충액 중에서 배양한다. 기능적으로 NHE를 발현시키는 세포만이, 이들이 세포내 산성화되는 경우에 생존할 수 있다.

이들의 아이소형태 선택성에 대한 NHE 저해제의 특징 부여

NHE-1, NHE-2 및 NHE-3 아이소형태를 발현하는 상기 마우스 섬유아세포주에 대하여, 문헌[Counillon et al.(1993) 및 Scholz et al.(1995)]에 기재된 방법으로, 화합물의 아이소형태에 대한 선택성을 시험한다. 세포를 NH₄Cl 프리펄스(prepulse) 법에 이어 바이카르보네이트가 없는²²Na⁺함유 완충액 중에서 배양하여 세포내 산성화한다. 세포내 산성화에 의해 NHE는 활성화되고 나트륨은 세포 내에 흡수된다. 시험 화합물의 효과는 EIPA(에틸이소프로필아밀로라이드)-민감성²²Na⁺흡수의 저해로 나타난다.

NHE-1, NHE-2 및 NHE-3 를 발현하는 세포를 24-웰 미량역가 플레이트 중에 웰당 5-7.5×10⁴세포의 밀도로 뿌리고, 24 내지 48시간동안 배양한다. 배지를 흡인 제거하고, 세포를 60분동안 37℃에서 NH₄Cl 완충액(50mM NH₄Cl, 70mM 콜린 클로라이드, 15mM MOPS, pH 7.0) 중에 배양한다. 이어서, 완충액을 제거하고, 세포를 신속하게 콜린 클로라이드 세척 완충액(120mM 콜린 클로라이드, 15mM PIPES/트리스, 0.1mM 아우아바인, 1mM MgCl₂, 2mM CaCl₂, pH 7.4)으로 두번 도포하고, 흡인 여과해낸다. 이어서, 세포를 콜린 클로라이드 포함 완충액(120mM 콜린 클로라이드, 15mM PIPES/트리스, 0.1mM PIPES/트리스, 0.1mM 아우아바인, 1mM MgCl₂, 2mM CaCl₂, pH 7.4, 22Na±(0.925kBg/100㎖의 포함 완충액))으로 도포한 후, 이 완충액에서 6분간 배양한다. 배양시간의 완료 후, 배양 완충액을 흡인 제거한다. 세포외 방사능을 제거하기 위하여, 세포를 얼음같이 찬 포스페이트 완충 염수 용액(PBS)을 사용하여 4회 신속히 세척한다. 이어서, 웰당 0.1N NaOH를 0.3㎖ 첨가하여 세포를 가용화한다. 세포 단편-함유 용액을 신틸레이션(scintillation) 튜브에 옮긴다. 이어서, 각 웰을 0.1N NaOH 0.3㎖ 를 사용하여 2회 세척하고, 세척 용액을 또한 대응하는 신틸레이션 튜브에 도입한다. 신틸레이션 칵테일을 세포 용융물을 함유하는 튜브에 첨가하고, β 방사선을 측정함으로써 세포 내에 흡수되는 방사능을 측정한다.

참고문헌:

Counillon et al. (1993) Mol. Pharmacol. 44:1041-1045

Franchi et al.(1986) Proc. Natl. Acad. Sci. USA 83:9388-9392

Sardet et al. (1989) Cell 56:271-280

Scholz et al. (1995) Cardiovasc. Res. 29:260-268

하기 실시예는 약제학적 제제에 관한 것이다:

실시예 A: 주사용 바이알

화학식 I의 NHE-3 저해제 100g과 제2 인산나트륨 5g의 용액을 이차 증류수 3ℓ중에서 2N의 염산을 사용하여 pH 6.5로 조절한 다음, 멸균 여과하고, 주사용 바이알에 충전하고, 멸균 조건하에 동결 건조하고, 멸균 방법으로 밀봉하였다. 활성 화합물을 5mg 함유하는 주사용 바이알을 얻었다.

실시예 B: 좌제

화학식 I의 NHE-3 저해제 20g의 혼합물을 소야 레시틴 100g 및 코코아 버터 1400g과 함께 용융시킨 후 몰드에 붓고 냉각시켰다. 활성 화합물을 20mg 함유하는좌제를 얻었다.

실시예 C: 액제

화학식 I의 NHE-3 저해제 1g, NaH₂PO₄ㆍ2H₂O 9.38g, Na₂HPO₄ㆍ12H₂0 28.48g 및 벤즈알코늄 클로라이드 0.1g을 이차 증류수 940㎖중에 용해시켜 용액을 제조하였다. 이 용액을 pH 6.8로 조절하고, 1ℓ로 채우고, 조사에 의해 멸균 처리하였다. 이 용액은 점안제 형태로 사용할 수 있다.

실시예 D: 연고제

화학식 I의 NHE-3 저해제 500mg을 무균 조건하에서 와셀린 99.5g과 혼합하였다.

실시예 E: 정제

화학식 I의 NHE-3 저해제 1kg, 락토오스 4kg, 감자전분 1.2kg, 탈크 0.2kg 및 마그네슘 스테아레이트 0.1kg의 혼합물을 각 정제가 활성 성분 10mg을 함유하도록 통상의 방법으로 압착하여 정제를 제조하였다.

실시예 F: 제피정

실시예 E와 유사하게, 정제를 압착하고, 이어서 슈크로오스, 감자 전분, 탈크, 트라가칸트 및 착색제로 이루어진 제피물을 사용하여 통상의 방법으로 제피하였다.

실시예 G: 캅셀제

경질 젤라틴 캅셀에 화학식 I의 활성 성분 2kg을 각 캅셀이 활성 화합물 20mg을 함유하도록 통상의 방법으로 충전하여 캅셀제를 제조하였다.

실시예 H: 앰플

화학식 I의 NHE-3 저해제 1kg을 이차 증류수 60ℓ중에 용해시킨 용액을 멸균여과하고, 앰플에 충전하고, 멸균 조건하에서 동결 건조하고, 멸균 방법으로 밀봉하였다. 활성 성분을 10mg 함유하는 앰플을 얻었다.

Claims

화학식 I의 화합물:

[화학식 I]

(단, 상기 식에서,

Y는이고,

Het는, 비치환되거나, R³및/또는 R⁴로 일치환 또는 다치환된, 포화, 불포화 또는 방향족 헤테로고리 라디칼이고,

R¹, R², R³및 R⁴는 각각 상호 독립적으로 H, A, OA, Hal, CF₃, CH₂CONH₂, CH₂CO₂H, CH₂CO₂A, CH₂NH₂, CH₂NA₂, CH₂NHA, CH₂OH, CH₂OA, OH, NO₂, NH₂, NHA, NA₂, NH-CO-A, NH-CO-Ph, SA, SO-A, SO₂-A, SO₂-Ph, CN, OCF₃, CO-A, CO₂H, CO₂A, CO-NH₂, CO-NHA, CO-NA₂, SO₂NH₂, SO₂NHA, SO₂NA₂, CHO, 또는 각각 비치환되거나 A, OH, OA, Hal, CN 또는 CF₃으로 일치환 또는 다치환된 페닐, 벤질 또는 사이클로헥실메틸, 또는 A,OH, OA, Hal, CN 또는 CF₃으로 일치환 또는 다치환된 헤테로고리 라디칼이고,

A는 탄소수 1, 2, 3, 4, 5 또는 6의 알킬이고,

Hal은 F, Cl, Br 또는 I이고,

R⁵, R⁶, R⁷및 R⁸은 각각 상호 독립적으로 H, 벤질, 알릴 또는 다른 아미노-보호기, A, 또는 비치환되거나 A, OA, CN, Hal 또는 CF₃로 일치환 또는 다치환된 페닐이고, R⁵와 R⁷, R⁵와 R⁶, 및 R⁷과 R⁸은 5-7원 고리를 형성할 수 있다)

및, 이의 염, 용매화물 및 입체 이성질체(이의 모든 비율의 혼합물을 포함), 및 이의 약제학적으로 사용가능한 유도체.
제 1항에 있어서,

Het는 2- 또는 3-퓨릴, 2- 또는 3-티엔일, 1-, 2- 또는 3-피롤일, 특히 1-피롤일, 1-, 2-, 4- 또는 5-이미다졸일, 1-, 3-, 4- 또는 5-피라졸일, 2-, 4- 또는 5-옥사졸일, 3-, 4- 또는 5-이속사졸일, 2-, 4- 또는 5-티아졸일, 3-, 4- 또는 5-이소티아졸일, 2-, 3- 또는 4-피리딜, 2-, 4-, 5- 또는 6-피리미딘일, 또한 바람직하게는 1,2,3-트리아졸-1-, -4- 또는 -5-일, 1,2,4-트리아졸-1-, -3- 또는 -5-일, 1- 또는 5-테트라졸일, 1,2,3-옥사디아졸-4- 또는 -5-일, 1,2,4-옥사디아졸-3- 또는 -5-일, 1,3,4-티아디아졸-2- 또는 -5-일, 1,2,4-티아디아졸-3- 또는 -5-일, 1,2,3-티아디아졸-4- 또는 -5-일, 3- 또는 4-피리다진일, 피라진일, 1-, 2- 또는3-피롤리딘일, 1-, 2-, 3- 또는 4-피페리딘일, 2-, 3- 또는 4-모르폴린일, 1,4-디옥산일, 1,3-디옥산-2-, -4- 또는 -5-일 또는 1-, 2- 또는 3-피페라진일이거나, 하기된 기:

에서 선택되는 것을 특징으로 하는 화학식 I의 화합물.
제 1항 또는 제 2항에 있어서,

R¹, R², R³및 R⁴는 상호 독립적으로, H, A, OA, Hal, CF₃, CH₂CONH₂, CH₂CO₂H,CH₂CO₂A, CH₂NH₂, OH, NO₂, NH₂, NHA, NA₂또는 NH-CO-A인 것을 특징으로 하는 화학식 I의 화합물.
제 1항 내지 제 3항 중의 어느 한 항에 있어서,

R⁵및 R⁷은 동시에 H이고, R⁶또는 R⁸은 H 또는 A인 것을 특징으로 하는 화학식 I의 화합물.
하기 화학식 IA, IB 및 IC의 화합물:

[화학식 IA]

[화학식 IB]

[화학식 IC]

(단 ,상기 식에서,

R¹, R², Het 및 Y는 제 1항에서 정의된 바와 같다)
제 5항에 있어서,

R²가 Cl인 것을 특징으로 하는 화학식 IA, IB 및 IC의 화합물.
화학식 I1 내지 I14의 화합물 및 이의 염 및 용매화물:

[화학식 I1]

[화학식 I2]

[화학식 I3]

[화학식 I4]

[화학식 I5]

[화학식 I6]

[화학식 I7]

[화학식 I8]

[화학식 I9]

[화학식 I10]

[화학식 I11]

[화학식 I12]

[화학식 I13]

[화학식 I14]
NHE3 저해제로서의 제 1항 내지 제 7항 중의 어느 한 항에 따른 화학식 I의 화합물 및 이의 염 및/또는 용매화물.
질환 퇴치에 사용하기 위한 제 1항 내지 제 7항 중의 어느 한 항에 따른 화학식 I의 화합물 및 이의 염 및/또는 용매화물.
약제를 제조하기 위한, 제 1항 내지 제 7항 중의 어느 한 항에 따른 화학식 I의 화합물 및/또는 이의 생리학적으로 허용가능한 염 또는 용매화물의 용도.
긴장항진, 혈전증, 심장, 말초 및 중추 신경계 및 졸중의 허혈 상태, 주변 장기 및 수족의 허혈 상태의 치료 및 예방용, 및 쇼크 상태의 치료용 약제를 제조하기 위한, 제 1항 내지 제 7항 중의 어느 한 항에 따른 화학식 I의 화합물 및/또는 이의 생리학적으로 허용가능한 염 및/또는 용매화물의 용도.
외과적 수술 및 장기 이식용, 및 외과적 처치를 위한 장기의 보존 및 저장용약제를 제조하기 위한, 제 1항 내지 제 7항 중의 어느 한 항에 따른 화학식 I의 화합물 및/또는 이의 생리학적으로 허용가능한 염 및/또는 용매화물의 용도.
세포 증식이 1차 또는 2차 요인인 질환의 치료 및 예방용, 지방 대사 또는 장애가 있는 호흡(breathing drive)의 질병의 치료 또는 예방용 약제를 제조하기 위한, 제 1항 내지 제 7항 중의 어느 한 항에 따른 화학식 I의 화합물 및/또는 이의 생리학적으로 허용가능한 염/또는 및 용매화물의 용도.
신장 허혈증, 허혈성 장 질환의 치료 및 예방용, 또는 급성 또는 만성 신장 질환의 예방용 약제를 제조하기 위한, 제 1항 내지 제 7항 중의 어느 한 항에 따른 화학식 I의 화합물 및/또는 이의 생리학적으로 허용가능한 염 및/또는 용매화물의 용도.
박테리아 및 기생충 질환의 치료 및 예방용 약제를 제조하기 위한, 제 1항 내지 제 7항 중의 어느 한 항에 따른 화학식 I의 화합물 및/또는 이의 생리학적으로 허용가능한 염 및/또는 용매화물의 용도.
제 1항 내지 제 7항 중의 어느 한 항에 따른 하나 이상의 NHE-3 저해제 및/또는 이의 생리학적으로 허용가능한 염 및/또는 용매화물 중 하나를 함유하는 것을 특징으로 하는 약제학적 제제.
제 1항 내지 제 7항 중의 어느 한 항에 따른 하나 이상의 화학식 I의 화합물 및/또는 이의 생리학적으로 허용가능한 염 및 용매화물 중 하나를, 하나 이상의 고체, 액체 또는 반-액체 부형제 또는 보조제와 함께 적당한 투여 형태로 전환시키는 것을 특징으로 하는, 약제학적 제제의 제조 방법.
NHE 활성이 증가함으로써 발생되고 및/또는 NHE 활성이 감소함으로써 영향받을 수 있는 질환의 치료 및 예방용 약제를 제조하기 위한, 제 1항 내지 제 7항 중의 어느 한 항에 따른 화학식 I의 화합물 및/또는 이의 생리학적으로 허용가능한 염 및/또는 용매화물의 용도.
산소 공급이 부족한 장기의 세포에 나트륨 이온 및 물이 과도하게 흡수됨으로써 발생되는 질환 또는 상태의 치료 및 예방용 약제를 제조하기 위한, 제 1항 내지 제 7항 중의 어느 한 항에 따른 화학식 I의 화합물 및/또는 이의 생리학적으로 허용가능한 염 및/또는 용매화물의 용도.
하나 이상의 제 1항 내지 제 7항 중의 어느 한 항에 따른 화학식 I의 화합물 및/또는 이의 생리학적으로 허용가능한 염 및 용매화물 및 하나 이상의 추가적인 약제 활성 성분을 포함하여 이루어지는 약제.
(a) 유효량의 제 1항 내지 제 7항 중의 어느 한 항에 따른 화학식 I의 화합물 및/또는 이의 생리학적으로 허용가능한 염 및 용매화물, 및

(b) 유효량의 추가적인 약제 활성 성분의 개별 팩으로 구성되는 세트(키트).
약제 활성 성분으로서의 제 1항 내지 제 7항 중의 어느 한 항에 따른 화합물.
(a) 화학식 II의 화합물:

[화학식 II]

(단, 상기 식에서,

R¹, R²및 Het는 제 1항에서 정의된 바와 같다)

을, 1-시아노구아니딘, 또는 화학식 NC-Y(단, Y는 제 1항에서 정의된 바와 같다)의 대응하는 N-알킬화 또는 N-아릴화된 시아노구아니딘과 반응시키거나,

(b) 화학식 NC-Y의 화합물의 대신에, 화학식 III의 화합물:

[화학식 III]

HN=CX-Y

(단, 상기 식에서,

X는 -S-알킬, -S-아릴, -O-알킬 또는 -O-아릴이다)

을 화학식 II의 화합물과 반응시키거나, 또는

(c) 화학식 IV의 화합물:

[화학식 IV]

(단, 상기 식에서, Het, R¹및 R²는 제 1항에서 정의된 바와 같다)

을 화학식 HY의 화합물(단, Y는 제 1항에서 정의된 바와 같다)과 반응시키고, 필요시, 단계 (a), (b) 또는 (c) 후에, 화학식 I의 염기성 및 산성 화합물을 산 또는 염기로 처리하여 이의 염 또는 용매화물 중 하나로 전환시키는 것을 특징으로 하는, 화학식 I의 화합물 및 이의 염 및 용매화물의 제조 방법.
화학식 II의 화합물:

[화학식 II]

(단, 상기 식에서,

R¹, R²및 Het는 제 1항에서 정의된 바와 같다).
화학식 IV의 화합물:

[화학식 IV]

(단, 상기 식에서, Het, R¹및 R²는 제 1항에서 정의된 바와 같다).