KR20010006358A - 오크라 종자에서 추출된 단백질 분획물이 화장품으로 사용되는 용도 - Google Patents
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Abstract
본 발명은 Hibiscus esculentus 종자에서 추출된 적어도 하나의 단백질 분획물의 용도 및 이러한 분획물을 함유하는 화장품 조성물에 관한 것이다.
또한, 본 발명은 카제인 대용물로서 화장품 조성물 또는 화장품에서의 Hibiscus esculentus 또는 오크라 종자에서 추출된 적어도 하나의 단백질 분획물의 용도에 관한 것이며, 상기 조성물은 0.01 내지 50.00%의 상기 분획물을 함유한다.
Description
Hibiscus esculentus (당아욱과(Malvaceae family)에 속하는 Abelmoshus esculentus 또는 오크라)는 검보(gumbo)라는 스페인 이름으로 미국 및 동인도 제도에 유입된 아프리카산 식물이다. 이는 2,000년 이상 그 꼬투리 수확을 목적으로 경작되어온 식물종(種) 중 하나 이다.
오크라는 인도, 말레이시아, 필리핀, (중앙-서부) 아메리카, 지중해 연안, 아프리카, 보다 일반적으로는 열대기후 지역에 속하는 세계 여러 지역에서 자란다.
식용인 이들의 어린 열매(꼬투리)는 녹색의 길고 가느다란 초 모양을 하고 있으며 미세한 분말 및 점액질의 내부 조직을 가진다.
함유하는 고무질 때문에 관심을 끄는 꼬투리와는 별도로, 새로운 단백질 공급원으로서 이들의 가능성을 연구하기 위하여 Hibiscus esculentus 종자에 관한 연구가 이루어지고 있다.
이러한 목적을 위하여, 다양한 품종의 오크라 종자(외피 및 배젖)에 대한 화학 조성이 조사되었다.
마찬가지로, 종자에서 얻어지는 다양한 제품(껍질을 벗긴 종자로 제조된 분말, 탈지 분말, 단백질 분획물 및 농축물)의 특성(단백질 용해도, 아미노산 조성, 유화 능력, 발포 능력, 영양가)이 식량 목적으로 연구되어 왔다(예를 들면, Bryant LA, Montecalvo J, Morey KS, Loy B: "Processing, functional and nutritional properties of okra seed products", Journal of food science, vol. 53, No. 3, 818-816을 참조한다).
오크라 종자는 주로 하기의 성분을 함유하며(하기 비율은 중량%이며, 건조 물질에 상대적임):
- 단백질 17.7 내지 21.8%
- 지질 14.7 내지 20.06%
- 무기질 4.33 내지 4.62%
- 물 6.84 내지 7.92%
- 고시폴(gossypol) 0.0032%
특히, 하기 물질 약간을 함유한다:
- 칼슘 282.26 mg/100 g
- 철 10.26 mg/100 g
- 티아민 0.96 mg/100 g
- 리보플라빈 0.14 mg/100 g
- 니아신 4.01 mg/100 g
- α-토코페롤 282.26 mg/100 g.
(Karakoltsidis PA, Constantidines SM; "okra seed: a new protein source", J. Agric Food Chem., 1975, 23 No. 6, 1204-1207/Wandawi AL: "Chemical composition of seeds of two okra cultivars Abelmoshus esculentus", Journal of agricultural and food chemistry, 1983, 31 No. 6, 1355-1358을 참조한다.)
농축 Hibiscus esculentus 종자 단백질 또는 단백질 분리물의 아미노산 조성은 대두 단백질의 아미노산 조성과 비슷하며 카제인의 아미노산 조성과 유사하다 (하기 표를 참조한다).
아미노산g/질소16g | 하이비스커스 (종자) Karakolt- sidis 외 | 하이비스커스 (종자)Bryant외 | 단백질 농출물 Bryant LA 외 | 단백질 분획물 Bryant LA 외 | 대두(종자)Karakolt-sidis 외 | 카제인Karakolt-sidis 외 |
Asp | 11.8-15.47 | 11.57 | 10.89 | 12.12 | 17.00 | 7.11 |
Thr | 3.02-4.38 | 2.86 | 3.37 | 2.90 | 5.47 | 4.65 |
Ser | 5.25-6.71 | 5.07 | 5.23 | 4.97 | 7.42 | 6.02 |
Glu | 20.48-22.08 | 15.91 | 19.15 | 17.35 | 21.05 | 21.19 |
Pro | 3.83-6.06 | 3.79 | 4.88 | 4.98 | 7.71 | 11.54 |
Gly | 5.79-6.66 | 4.78 | 7.77 | 4.16 | 4.32 | 1.97 |
Ala | 5.89-6.66 | 4.83 | 4.53 | 4.59 | 6.13 | 3.07 |
Val | 4.0-6.4 | 4.24 | 4.42 | 4.33 | 5.26 | 6.72 |
Cys | 1.54-2.53 | 3.63 | 1.89 | 1.90 | 1.61 | 0.36 |
Met | 1.2-1.85 | 1.83 | 2.18 | 2.21 | 1.25 | 2.78 |
Ile | 3.1-4.65 | 2.96 | 3.06 | 3.13 | 4.46 | 5.40 |
Lue | 6.6-8.47 | 6.21 | 6.96 | 6.97 | 9.35 | 9.49 |
Tyr | 3.6-3.83 | 3.46 | 5.15 | 4.03 | 3.72 | 5.81 |
Phe | 3.39-4.7 | 4.41 | 4.80 | 4.85 | 5.26 | 5.23 |
Lys | 7.24-8.9 | 6.22 | 6.19 | 6.47 | 8.00 | 8.80 |
His | 1.7-2.99 | 2.34 | 3.61 | 3.83 | 2.67 | 2.91 |
Arg | 11.0-12.46 | 11.17 | 10.02 | 9.98 | 10.07 | 3.74 |
Trp | 0.8-0.96 | 2.02 | 2.57 | 2.03 | nd | nd |
카제인에 관하여 트레오닌, 세린, 글루탐산, 발린, 아이소루신, 루신, 페닐알라닌, 라이신, 및 히스티딘의 정확한 함량을 특별히 기록하였다.
따라서 상기의 다양한 연구는 식품의 관점에서 잠재된 단백질 공급원으로서 Hibiscus esculentus 종자의 가치를 입증해준다.
더욱이, 점성 액체 Hibiscus esculentus 열매로부터 고압 하에서 고온 추출 및/또는 추출하여 얻은 점성 액체 산물을 피부치료 목적으로 사용하거나(FR-A-2-679 443) 완숙되지 않은 Hibiscus esculentus 종자에서 추출된 다당류로 구성된 분말 물질의 화장품에서의 용도(JP-A-57/199969)가 공지되어 있다.
본 발명은 화장품 분야, 특히 피부 및 모발용 화장품 분야에 관한 것으로서 Hibiscus esculentus에서 추출된 단백질 분획물의 용도 및 이러한 추출물을 적어도 하나 함유하는 조성물에 관한 것이다.
도 1은 Hibiscus esculentus 종자 전체의 분말 추출물에 대한(추출: 실온, 2시간 동안, 용매=물, pH=9) 단백질의 분자량 분포를 도시한 것이다.
도 2는 껍질을 제거한 Hibiscus esculentus 종자 분말 추출물에 대한(추출: 실온, 1.5시간 동안, 용매=물, pH=9) 단백질의 분자량 분포를 도시한 것이다.
도 3은 껍질을 제거한 Hibiscus esculentus 종자 분말 추출물에 대한(추출: 실온, 1.5시간 동안, 용매=NaCl 10 g/ℓ, pH=9) 단백질의 분자량 분포를 도시한 것이다.
도 4는 껍질을 제거한 Hibiscus esculentus 종자 분말 추출물에 대한(추출: 초음파 시험관 내에서, 1시간 동안, 용매=NaCl 10 g/ℓ, pH=7.5) 단백질의 분자량 분포를 도시한 것이다.
도 5는 Hibiscus esculentus 종자 전체의 분말 추추물을 pH4에서 침전시켜 얻은 단백질 농축물의 분자량 분포를 도시한 것이다.
도 6은 Hibiscus esculentus 종자 전체의 분말 추추물을 pH5에서 침전시켜 얻은 단백질 농축물의 분자량 분포를 도시한 것이다.
본 발명자들은 Hibiscus esculentus 종자의 추출물이 화장품에 직접 사용될 수 있으며 Hibiscus esculentus 또는 오크라 종자에서 추출된 적어도 하나의 바람직한 가용성 단백질 분획물이 카제인의 대용물로서 화장품 조성물 또는 화장품에 사용되어 놀랍고도 유용한 특성을 가지는 조성물 또는 제품을 생성시킬 수 있음을 발견하였다.
따라서, 자극 방지, 광-보호, 진정 효과(soothing), 및 피부 노화 방지 효과뿐 아니라 강력한 세포 영양력, 스무딩(smoothing) 및 생체막(biofilm) 형성 효과, 컨디셔닝, 재생 및 회복 효과를 가짐이 밝혀졌다.
상기 추출물은 피부 관리 및 위생 분야(얼굴 및 신체 전용 제품, 낮 또는 밤 전용 제품, 일광 제품, 링클 방지 제품, 또는 슬리밍(slimming) 제품)뿐 아니라 모발 괸리 및 위생 분야(로션 또는 샴푸; 크림; 무스; 보호 제품, 회복 제품, 연화제, 막 형성 제 및 광 보호제; 퍼머 또는 염색용 제품)에도 사용될 수 있다.
단백질은 식물 단백질의 추출 및 단백질 농축물 또는 분리물의 제조에 관하여 당업자에게 공지된 종래의 방법, 특히 Bryant LA, Montecalvo J, Morey KS, 및 Loy B의 논문에 개시된 방법으로 제조될 수 있다.
가공되지 않은 물질은 Hibiscus esculentus 종자 또는 종자의 분말로 이루어진다(단백질 함량 = 건조 물질의 21.6%).
따라서 얻어진 분말은 45℃에서 헥산으로 추출하여(3회 연속 추출하는 것이 바람직함) 지질을 제거할 수 있다.
오일의 수득율은 16.2 내지 23.9 중량%이며, 출발 물질이 전체 종자 분말이냐 또는 체질하여 외피 또는 껍질을 부분적으로 제거한 종자의 분말이냐에 따라 약간씩 달라진다.
종자 껍질을 부분적으로 제거한 탈지 분말은 37 내지 44 중량%의 단백질을 함유한다(N ×6.25).
Hibiscus esculentus 또는 오크라 종자의 추출물을 얻고 제조하는 다양한 방법을 하기 실시예에 개략적으로 기재하였다. 그러나 이들 실시예로 본 발명이 제한되는 것은 아니다.
실시예 1
지방을 제거하지 않은 강화된 분말 (껍질 부스러기를 부분적으로 제거함) 100g을 하기 배지 1ℓ에 첨가한다:
- 증류수
- NaCl 1 g/ℓ를 함유하는 증류수,
- NaCl 5 g/ℓ를 함유하는 증류수,
- NaCl 10 g/ℓ를 함유하는 증류수.
15분 동안 교반한 후, 4 N의 NaOH를 사용하여 용액의 pH를 9로 조절한다.
pH9를 유지하며 실온에서 1시간 30분 동안 추출을 수행한다.
원심분리한 후, 상층 지질을 제거하고 수계 상청액을 수집한다.
황금색 상청액의 pH를 7.5로 조절한 후 0.22 μm로 여과시킨다: 용매의 염류 함량이 높을수록 여과가 용이해진다.
여과물의 단백질 함량은 뷰렛 방법으로 측정한다. 상청액은 유백광(乳白光)을 띤다.
하기와 같은 결과를 얻었다:
추출 용매 | 뷰렛 여과 추출물 중의 단백질 (g/ℓ) |
증류수 | 16.9 |
NaCl 1 g/ℓ | 13.3 |
NaCl 5 g/ℓ | 9.5 |
NaCl 10 g/ℓ | 10.2 |
실시예 2
강화된 탈지분말 (껍질 잔여물이 제거됨) 25g을 5 g/ℓ의 염화나트륨을 함유하는 250 ㎖의 증류수에 첨가한다:
15분 동안 교반한 후, 용액의 pH를 실험에 따라 하기 pH로 조절한다: 6-6.5-7-7.5.
실온에서 1시간 동안 추출을 수행한다.
원심분리한 후, 상청액을 제거하고 5 μm로 여과한다:
하기와 같은 결과를 얻었다:
pH | 뷰렛 단백질(g/ℓ) | 단백질(N ×6.25)(g/ℓ) |
6 | 12.5 | 13.8 |
6.5 | 13.3 | 14.8 |
7 | 14.6 | 15.1 |
7.5 | 15.5 | 16.1 |
실시예 3
강화된 탈지 분말 25 g을 5 g/ℓ의 염화나트륨을 함유하는 250㎖의 증류수에 첨가한다.
15분 동안 교반한 후, 용액의 pH를 8로 조절한다.
실온에서 6시간 동안 추출을 수행한다.
원심분리한 후, 상청액을 제거하고 pH를 7.5로 조절한 다음 용액을 5μm로 여과한다:
하기와 같은 결과를 얻었다:
존속 기간(hour) | 뷰렛 단백질 (g/ℓ) |
2 | 18.45 |
4 | 20.3 |
6 | 19.7 |
실시예 4
강화된 탈지분말 25 g을 5 g/ℓ의 염화나트륨을 함유하는 250㎖의 증류수에 첨가한다.
15분 동안 교반한 후, 용액의 pH를 7.5로 조절한다.
45℃에서 6시간 동안 추출을 수행한다.
원심분리한 후, 상청액을 제거하고 pH를 7.5로 조절한 다음 용액을 5μm로 여과한다:
하기와 같은 결과를 얻었다:
존속 기간(hour) | 뷰렛 단백질 (g/ℓ) |
2 | 18.00 |
4 | 18.1 |
6 | 13.8 |
실시예 5
강화된 탈지분말 300 g을 5 g/ℓ의 염화나트륨을 함유하는 3 ℓ의 증류수에 첨가한다.
15분 동안 교반한 후, 용액의 pH를 7.5로 조절한다.
50℃에서 2시간 동안 추출을 수행한다.
원심분리한 후, 상청액을 제거하고 용액을 5μm로 여과한다:
이라하여 하기와 같은 결과를 얻었다:
뷰렛 단백질 : 13.7 g/ℓ
켈달 단백질(kjeldahl protein) : 14.6 g/ℓ.
상청액 1 ℓ를 제거하고 4 N의 황산(sulphuric acid)을 사용하여 pH를 4.5로 조절한다.
30분 동안 교반한 후, 용액을 원심분리하고 침전물을 수집한 다음 pH 4.5의 물로 세척하여 냉동 건조한다: 이리하여 단백질 함량이 85.3 중량%인 분말을 얻었다.
실시예 6
5 g/ℓ의 염화나트륨을 함유하는 6 ℓ의 증류수 중의 강화된 탈지분말 600 g을 열적으로 안정화된 반응기에 교반하면서 첨가한다. 측정 pH를 7.5로 조절한다.
연동식 펌프(초음파력 600 W - 진동수 20,000 Hz)를 사용하여 상기 용액을 일체로 성형된 통로(integral passage)를 가지는 초음파 시험관에 60 ℓ/h의 유속으로 넣는다.
연속 전하(successive charge)에 의한 두 개의 불연속적 통과가 이루어진다(추출물은 제2 반응기 내의 초음파 시험관을 통과한 후 수집된다).
원심분리한 후, 5μm로 여과하여 하기와 같은 결과를 얻었다:
- 제1 통과 후 추출물의 단백질 : 14.2 g/ℓ
- 제2 통과 후 추출물의 단백질 : 15.2 g/ℓ
실시예 7
5 g/ℓ의 염화나트륨을 함유하는 6 ℓ의 증류수 중의 강화된 탈지분말 300 g을 열적으로 안정화된 반응기에 교반하면서 첨가한다. 측정 pH를 7.5로 조절한다.
상기 용액을 실시예 6의 일체로 성형된 통로를 가지는 초음파 시험관(초음파력 700 W - 진동수 20,000 Hz) 내의 밀페된 순환로에 1시간 동안 60 ℓ/h의 유속으로 연속적으로 주입한다.
차가운 물을 순환시켜 반응기 내의 용액의 온도를 약 33℃로 유지한다.
15분, 30분, 및 45분 추출한 후 샘플을 취한다.
원심분리한 후, 추출물을 5 μm로 여과하여 하기와 같은 결과를 얻었다.
추출 시간 (min) | 뷰렛 여과 추출물 내의 단백질 (g/ℓ) |
15 | 8.23 |
30 | 8.56 |
45 | 8.89 |
60 | 9.89 |
실시예 8
증류수 25.0 kg을 반응기에 넣고 하기 과정을 연속적으로 수행한다.
- 하이비스커스 종자 전체를 분쇄하여(crushing) 얻은 전체 분말 2.5 kg을 교반하면서 분산시킨다.
- 15분 동안 분산시킨 후 4 N의 NaOH를 사용하여 pH를 9로 조절한다.
- 4N의 NaOH를 첨가하여 pH를 9로 유지하면서 실온에서 2시간 동안 교반하며 추출한다.
- 5,000 g로 10분 동안 원심분리한다.
- 베이지색의 차가운 상청액을 회수한다.
- 4 N의 H2SO4를 첨가하여 pH를 7.5로 조절한다.
- 원심분리한다.
- 재 원심분리하여 정제한다.
- 유백광의 상청액을 회수한다.
- 0.5 μm로 여과한다.
- 상청액을 회수한다.
- 분무한다.
이리하여 분무 수득율 62.7 중량%의 투명한 베이지색의 분말을 회수할 수 있었다.
실시예 9
실시예 8의 제1 변형으로서 하기 조작을 수행할 수 있다:
- 4N의 H2SO4를 첨가하여 실시예 8에 따라 제조된 일부 추출물의 pH를 4.1로 조절한다.
- 나머지는 4℃에 방치한다 (침전물의 형성-전체 부피의 약 50%);
- 15분 동안 5,000 g로 원심분리한다.
- 수용성 단백질(caps)을 pH 4.1의 증류수로 세척한다.
- 15분 동안 5,000 g로 원심분리한다.
- 침전물을 수집한다.
- 침전물을 물에(침전 전 부피의 10%) 넣어 다시 액상으로 만든다 (reconstructing).
- 교반하면서 4N의 NaOH를 첨가하여 pH를 7.5로 조절한다.
- 용해 및 균질화를 조력하기 위하여 섞어준다(homogenising).
- 10분 동안 5,000 g로 원심분리하여 불용성 물질을 제거한다.
- 단백질 농축물을 분무한다(건조 추출물을 기준으로한 분무 수득율: 82.90 중량%).
실시예 10
실시예 8의 제2 변형으로서 하기 조작을 수행할 수 있다:
- 4N의 H2SO4를 첨가하여 실시예 8에 따라 제조된 일부 추출물의 pH를 5로 조절한다.
- 나머지는 실온에 1시간 동안 방치한다 (침전의 형성-전체 부피의 약 50%).
- 원심분리한다.
- 침전물을 수집한다.
- 세척 단계 없이 침전 전 부피의 10%에 전물을 넣어 다시 액상으로 만든다.
- 교반하면서 4N의 NaOH를 첨가하여 pH를 7.5로 조절한다.
- 용해 및 균질화를 조력하기 위하여 섞어준다.
- 10분 동안 5,000 g로 원심분리하여 불용성 물질을 제거한다.
- 단백질 농축물을 분무한다.
상기에 개시된 다양한 방법으로 추출된 분획물을 수퍼로스(superose) 12 HR 타입의 칼럼으로 겔 투과 분석하여 적어도 6 종류의 상이한 분획물을 밝혀내어 첨부된 도면의 도 1 내지 도 6에 도시하였다.
하기의 요약표(두 부분)는 추출된 다양한 단백질 분획물의 분포를 도시한 것이다.
추출 조건 | pH = 9물 | pH = 9NaCl 1g/ℓ | pH = 9NaCl 5g/ℓ | pH = 9NaCl 10g/ℓ | pH = 6.5NaCl 5g/ℓ | pH = 8NaCl 5g/ℓ |
4 h | ||||||
> 500,000 Da | 13.7 | 9.8 | 4.4 | 3.7 | 2.9 | 2.7 |
100,00-500,000 Da | 12.2 | 11.2 | 10.7 | 14.4 | 9.7 | 17.3 |
30,000-100,000 Da | 4 | 3.3 | 7.6 | 7.7 | 14.7 | 7.9 |
5,000-30,000 Da | 41.2 | 44.7 | 46.3 | 51.2 | 49.6 | 45.9 |
5,000 Da 이하 | 28.9 | 31 | 31 | 23 | 23.1 | 26.2 |
추출 조건 | pH = 7.5NaCl 5g/ℓ | pH = 7.5NaCl 5g/ℓ | pH = 7.5NaCl 5g/ℓ | pH = 9H2O | 단백질농축물 | 단백질농축물 |
6 h | 15 minUS | 60 minUS | 전체 분말 | (pH4.1) | (pH5.1) | |
PM > 500,000 Da | 4 | 13 | 20.9 | 30.5 | 35.5 | 46.6 |
100,000-500,000 Da | 13.1 | 14.2 | 3.8 | 15 | 12.2 | 17.5 |
30,000-100,000 Da | 4.3 | 6.1 | 15.1 | 5.9 | 8.1 | 7.3 |
5,000-30,000 Da | 50.2 | 46 | 35.3 | 26.4 | 35.4 | 22.6 |
5,000 Da 이하 | 28.4 | 20.7 | 24.9 | 22.2 | 8.8 | 6 |
상기 6 종류의 단백질 분획물은 하기와 같이 이루어진다:
- 큰 분자량(칼럼 검정(column calibration)에 따라 1,000,000 내지 1,500,000 Da)을 가지는 분획물(F1로 표시됨);
- 전체 종자 분말의 추출물에서 주로 볼수 있는 250,000 내지 350,000 Da에 해당하는 분자량을 가지는 분획물(F2로 표시됨);
- 130,000 내지 180,000 Da에 해당하는 분자량을 가지는 분획물(F3로 표시됨);
- 17,000 내지 22,000 Da에 해당하는 분자량을 가지는 분획물(F4로 표시됨);
- 약 3,300 Da에 해당하는 분자량을 가지는 분획물(F5) 및 약 2,300 내지 2,600 Da에 해당하는 분자량을 가지는 분획물(F6)
추출 조건에 따라 분획물 F1은 단백질의 2.7 내지 50.00%를 구성하며 분획물 F4는 전체 단백질의 16 내지 52%(평균 40%)를 구성한다.
초기 추출 용매의 염류 함량이 높아질수록 분획물 F1이 적어짐이 관찰된다.
상기 실시예에 기재된 방법에 의하여 얻어지는 추출물은 액체 형태에 직접 사용되거나 종래의 탈수법(분무건조, 냉동건조 등)으로 건조한 후 사용될 수 있다.
천연 상태의 종자에서 발생한 것과 비교하여 상기 실시예에 따라 추출된 단백질 분획물은 동일한 천연 화학 구조를 가지며 부분적으로 또는 완전하게 정제(지질, 섬유질 또는 당류 등과 같은 종자의 다른 성분 제거)될 수 있고 사용되는 추출 및/또는 정제 방법에 따라 변형될 수 있는 조성(가공하지 않은 추출물 전체의 단백질, 단백질 농축물 또는 정제된 단백질 분획물)을 가진다는 장점을 가진다.
락트 카제인(lactic casein)에 비하여 화장품 분야에서의 바람직하고 신규한 식물원(vegetable origin)이라는 점외에 피부 또는 외피 성장에 대한 영양, 수분, 및 필름 형성 특성이 공지된 카제인과 유사한 아미노산 조성과 동시에 개선된 용해도가 주목되고 있다.
상기 단백질 분획물은 변형시키지 않은 천연 형태 또는 첨부된 도면에 도시된 크로마토그램의 다양한 피크(peak)에 해당하는 추출 분획물 둘 또는 모두를 자연적으로 회합시킨 형태 또는 상기 크로마토그램의 하나 또는 그 이상에 해당하는 재분리된 형태로 사용될 수 있다.
또한, 상기 단백질 분획물은 하기 처리방법 중 하나에 의하여 변형된 형태 또는 기능화된 형태로 사용될 수 있다:
- 중합(polymerization),
- 하이비스커스 단백질의 화학적 가수분해,
- 하이비스커스 단백질의 효소적 가수분해. 이러한 목적을 위하여 동물, 식물, 미생물, 또는 균류의 추출물에서 유래된 단백질 분해제가 하기의 하이비스커스 단백질을 변형시키는데 사용될 수 있다: 펩신, 트립신, 키모트립신/파파인, 프로나제, 브로멜라인(bromelain)/엔도프로티나제, 터미타제(thermitase), 또는 바실러스 서브틸러스(Bacillus subtilus), 아스퍼질러스 나이거(Aspergillus niger) 및 아스퍼질러스 오리재(Aspergillus orygae)/서브틸리신, 알칼라제, 뉴트라제의 단백질 분해효소.
- 효모(Saccharomyces), 곰팡이(Aspergillus) 또는 박테리아(Bacillus 등)와 같은 다양한 미생물에 의한 발효 기질로서 하이비스커스 단백질을 사용하는 미생물적 형질전환,
- 탈아마이드화(desamidation), 숙신화, 또는 인산화와 같은 방법에 의한 화학적 또는 효소적 기능화,
- 사차화(quaternisation), 및
- 당류 또는 지질 분자의 접합(grafting).
또한, 본 발명은 카제인 대용물로 Hibiscus esculentus 종자에서 추출된 적어도 하나의 가용성 단백질 분획물을 함유하는 화장품 조성물로서, 특히 피부 및/또는 외피 성장을 위한 국부적인 용도의 화장품 조성물에 관한 것이다.
본 발명의 특성에 따라 단백질 분획물은 전체 또는 껍질이 제거된 Hibiscus esculentus 종자의 탈지분말 또는 그렇지 않은 분말에서 다양한 pH의 염류용액 또는 물로 추출된다.
본 발명의 바람직한 실시예에 따라 단백질 분획물은 초음파 유입 하에서 수용액 내에서 추출되며 이 분획물은 침전, 흡입, 이온 또는 친화성 교환 크로마토그래피, 및 한외여과(ultrafiltration)으로 이루어진 군에서 선택되는 정제법으로 정제된다.
전체 또는 천연 단백질 분획물은 Hibiscus esculentus 종자에서 추출된 것으로서 겔 상에서 여과될 때 1,000,000 내지 1,500,000 Da, 250,000 내지 350,000 Da, 130,000 내지 180,000 Da, 17,000 내지 22,000 Da, 3,300 Da, 및 2,300 내지 2,600 Da의 겉보기 분자량을 가지는 전체 또는 천연 단백질 분획물 군에서 선택된다.
상기 단백질 분획물은 천연 단백질에서 제조된 화학적 또는 효소적 가수분해물로 이루어질 수 있으며, 천연 단백질을 중합 또는 해중합(depolymerisation)하여 얻을 수 있고 접합하여 화학적으로 변형시킬 수도 있다.
본 발명의 제1 구현예의 화장품 조성물은 상이한 겉보기 분자량을 가지는 적어도 두 개의 가용성 단백질 분획물을 함유한다.
본 발명의 졔2 구현예의 화장품 조성물은 본래 이들 종자에 존재하는 모든 가용성 단백질 분획물로 이루어진 Hibiscus esculentus 종자의 추출물을 함유한다.
제1 내지 제11 청구항 중 어느 한 항의 화장품 조성물은 상기 실시예의 방법 중 하나를 사용하여 어어지는 Hibiscus esculentus 종자에서 추출된 단백질 분획물을 0.01 내지 50.00 중량%, 바람직하게는 1 내지 25 중량%를 함유하는 것으로 특정화된 것이다.
본 발명의 구현예로서 Hibiscus esculentus 또는 오크라 종자에서 추출된 가용성 단백질 분획물을 적어도 하나 이상 함유하는 다양한 화장품 또는 화장품 조성물을 하기에 기재하였다. 그러나 이들 구현예로 본 발명의 범위가 제한되는 것은 않는다.
구현예 1
본 발명의 얼굴 및 신체용 모이스쳐링 스무딩 데이(day) 크림 형태의 화장품 조성물은 예를 들면, 하기 분획물 A, B, C, 및 D로 이루어지는 중량 조성을 가질 수 있다:
분획물 A :
- Cutina MD 14.00%
- Eutanol 6.00%
- Cetiol B 6.00%
- Eumulgin B1 1.50%
- Eumulgin B2 1.50%
분획물 B :
- 상기 실시예 1에 따라 하이비스커스에서 추출된 전체 천연 단백질 8.00%
분획물 C :
- 알란토인 0.20%
- 메틸파라벤 0.20%
- Germall 115 0.30%
- 증류수 62.00%
분획물 D :
- 방향제 0.30%
상기 데이 크림의 준비 및 제조 공정에는 분획물을 75℃로 가열하여 75℃의 분획물 C를 준비하고, 터빈 교반하면서 분획물 A를 분획물 B에 첨가하고 약 50℃에서 분획물 C를 첨가한 후, 실온에 도달할 때까지 부정(不定) 교반한 다음 최종적으로 분획물 D를 첨가하는 과정이 반드시 수반된다.
구현예 2
본 발명의 재생, 주름 방지 나리싱 리페어링 나이트(nigth) 크림 형태의 화장품 조성물은 하기 분획물 A, B, C, 및 D로 이루어지는 중량 조성을 가질 수 있다:
분획물 A :
- Miglyol 810 6.00%
- Myrj 51 3.00%
- Arlatone 983 S 2.00%
- 스테아르산 TP 4.00%
- 세틸 알콜 3.00%
분획물 B:
- 프로필렌 글리콜 3.00%
- Elestab LS 388
(Laboratoires Serobiologiques) 2.50%
- 증류수 61.20%
분획물 C :
- 상기 실시예 9의
천연 하이비스커스 단백질의 분무 추출물 2.00%
- 증류수 13.00%
분획물 D :
- 방향제 0.30%
상기 나이트 크림의 준비 및 제조 공정에는 분획물 A 및 B를 75℃로 가열하여 준비하고, 터빈 교반하면서 분획물 A를 분획물 B에 첨가한 후, 증류수에서 분무물을 교반하여 분획물 C의 용질을 준비하고 (개별적으로 즉석에서), 약 50℃로 냉각하면서 분획물 C를 분획물 A + B에 첨가한 다음 45℃에서 실온에 도달할 때까지 부정(不定) 교반하면서 약 40℃에 방향제를 첨가하는 과정이 반드시 수반된다.
구현예 3
본 발명의 모발용 보호 컨디셔닝 커버링 광보호성 마이크로에멀젼 (microemulsion) 형태의 화장품 조성물은 하기 분획물 A, B, C, 및 D로 이루어지는 중량 조성을 가질 수 있다:
분획물 A :
- Brij 96 11.80%
- Arlatone G 10.00%
- 파라핀유 13.00%
분획물 B :
- 증류수 53.70%
- 메틸파라벤 0.20%
- Elestab 4112
(Laboratoires Serobiologiques) 0.30%
분획물 C :
- 상기 실시예 6의 단백질 농축물 형태의
천연 하이비스커스 단백질 5.00%
- 증류수 5.00%
분획물 D :
- 방향제 0.20%
- Tween 20 0.80%
상기 마이크로 에멀젼의 준비 및 제조 공정에는 분획물 A 및 B를 75℃로 가열하여 준비하고, 터빈 교반하면서 분획물 A를 분획물 B에 첨가한 후, 약 50℃ 까지 점진적으로 냉각하여, 분획물 C를 분획물 D에 첨가하고 실온에 도달할 때까지 교반하여 완전하게 균질화하는 과정이 반드시 수반된다.
첨부된 도면에 개략적으로 도시된 상기 실시예로 본 발명이 제한되지는 않으며, 본 발명의 범위를 벗어나지 않는 한 다양한 요소의 조성 또는 기술 장치의 대체를 통한 변형을 실행할 수 있다.
본 발명은 Hibiscus esculentus 종자의 추출물을 카제인의 대용물로서 화장품 조성물 또는 화장품에 사용하여 자극 방지, 광-보호, 진정 효과(soothing), 및 피부 노화 방지 효과뿐 아니라 강력한 세포 영양력, 스무딩(smoothing) 및 생체막(biofilm) 형성 효과, 컨디셔닝, 재생 및 회복 효과를 가지는 조성물 또는 제품을 제공할 수 있다.
Claims (12)
- 화장품 조성물 또는 화장품에서의 Hibiscus esculentus 또는 오크라 종자에서 추출된 적어도 하나의 단백질 분획물의 용도.
- 카제인 대용물로서 Hibiscus esculentus 또는 오크라 종자에서 추출된 적어도 하나의 단백질 분획물을 함유하는 화장품 조성물.
- 제2항에 있어서,상기 단백질 분획물이 온전한 Hibiscus esculentus 종자 또는 껍질을 제거한 상기 종자의 탈지(脫脂) 분말 또는 비탈지(非脫脂) 분말에서 다양한 pH의 염류 용액 또는 물에 의하여 추출되는 화장품 조성물.
- 제2항에 있어서,상기 단백질 분획물이 초음파 조건하에서 수용액으로 추출되는 화장품 조성물.
- 제2항 내지 제4항 중 어느 한 항에 있어서,상기 단백질 분획물이 침전, 흡수, 이온 교환 크로마토그래피 또는 친화도 교환 크로마토그래피, 및 한외여과로 이루어지는 군에서 선택되는 정제법에 의하여 정제되는 화장품 조성물.
- 제2항 내지 제5항 중 어느 한 항에 있어서,상기의 전체 또는 천연 단백질 분획물이 Hibiscus esculentus 종자에서 추출된 것으로서 겔 상에서 여과될 때 1,000,000 내지 1,500,000 Da, 250,000 내지 350,000 Da, 130,000 내지 180,000 Da, 17,000 내지 22,000 Da, 3,300 Da, 및 2,300 내지 2,600 Da의 겉보기 분자량을 가지는 전체 또는 천연 단백질 분획물 군에서 선택되는 화장품 조성물.
- 제2항 내지 제6항 중 어느 한 항에 있어서,상기 단백질 분획물이 천연 단백질로 제조되는 화학적 또는 효소적 가수분해 생성물로 이루어지는 화장품 조성물.
- 제2항 내지 제6항 중 어느 한 항에 있어서,상기 단백질 분획물이 천연 단백질을 중합하여 얻어지는 화장품 조성물.
- 제2항 내지 제7항 중 어느 한 항에 있어서,상기 단백질 분획물이 접합에 의하여 화학적으로 변형되는 화장품 조성물.
- 제2항 내지 제9항 중 어느 한 항에 있어서,상기 화장품 조성물이 상이한 겉보기 분자량을 가지는 적어도 두 개의 단백질 분획물을 함유하는 화장품 조성물.
- 제2항 내지 제9항 중 어느 한 항에 있어서,상기 화장품 조성물이 자연적으로 상기 종자에 존재하는 모든 가용성 단백질 분획물로 이루어진 Hibiscus esculentus 종자의 추출물을 함유하는 화장품 조성물.
- 제2항 내지 제9항 중 어느 한 항에 있어서,상기 화장품 조성물이 Hibiscus esculentus 종자에서 추출되는 단백질 분획물을 0.01 내지 50.00 중량% 함유하는 화장품 조성물.
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