KR102634762B1 - 알파-v 베타-6 인테그린 리간드 및 그의 용도 - Google Patents

알파-v 베타-6 인테그린 리간드 및 그의 용도 Download PDF

Info

Publication number
KR102634762B1
KR102634762B1 KR1020197012274A KR20197012274A KR102634762B1 KR 102634762 B1 KR102634762 B1 KR 102634762B1 KR 1020197012274 A KR1020197012274 A KR 1020197012274A KR 20197012274 A KR20197012274 A KR 20197012274A KR 102634762 B1 KR102634762 B1 KR 102634762B1
Authority
KR
South Korea
Prior art keywords
xaa
amino acid
misc
feature
delete delete
Prior art date
Application number
KR1020197012274A
Other languages
English (en)
Other versions
KR20190075937A (ko
Inventor
애론 알메이다
젠 리
에릭 더블유 부시
타오 페이
안기에스즈카 글레보카
앤써니 니콜라스
제프리 칼슨
매튜 파울러-와터스
Original Assignee
애로우헤드 파마슈티컬스 인코포레이티드
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by 애로우헤드 파마슈티컬스 인코포레이티드 filed Critical 애로우헤드 파마슈티컬스 인코포레이티드
Publication of KR20190075937A publication Critical patent/KR20190075937A/ko
Application granted granted Critical
Publication of KR102634762B1 publication Critical patent/KR102634762B1/ko

Links

Images

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K7/00—Peptides having 5 to 20 amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
    • C07K7/04—Linear peptides containing only normal peptide links
    • C07K7/06—Linear peptides containing only normal peptide links having 5 to 11 amino acids
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/70—Carbohydrates; Sugars; Derivatives thereof
    • A61K31/7088—Compounds having three or more nucleosides or nucleotides
    • A61K31/713—Double-stranded nucleic acids or oligonucleotides
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
    • A61K38/04—Peptides having up to 20 amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
    • A61K38/08—Peptides having 5 to 11 amino acids
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/50—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates
    • A61K47/51—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent
    • A61K47/56—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an organic macromolecular compound, e.g. an oligomeric, polymeric or dendrimeric molecule
    • A61K47/59—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an organic macromolecular compound, e.g. an oligomeric, polymeric or dendrimeric molecule obtained otherwise than by reactions only involving carbon-to-carbon unsaturated bonds, e.g. polyureas or polyurethanes
    • A61K47/60—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an organic macromolecular compound, e.g. an oligomeric, polymeric or dendrimeric molecule obtained otherwise than by reactions only involving carbon-to-carbon unsaturated bonds, e.g. polyureas or polyurethanes the organic macromolecular compound being a polyoxyalkylene oligomer, polymer or dendrimer, e.g. PEG, PPG, PEO or polyglycerol
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/50—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates
    • A61K47/51—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent
    • A61K47/62—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being a protein, peptide or polyamino acid
    • A61K47/64—Drug-peptide, drug-protein or drug-polyamino acid conjugates, i.e. the modifying agent being a peptide, protein or polyamino acid which is covalently bonded or complexed to a therapeutically active agent
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P43/00—Drugs for specific purposes, not provided for in groups A61P1/00-A61P41/00
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K16/00—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
    • C07K16/18—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans
    • C07K16/28—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K16/00—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
    • C07K16/18—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans
    • C07K16/28—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants
    • C07K16/2839—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants against the integrin superfamily
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K5/00—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
    • C07K5/04—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof containing only normal peptide links
    • C07K5/06—Dipeptides
    • C07K5/06008—Dipeptides with the first amino acid being neutral
    • C07K5/06017—Dipeptides with the first amino acid being neutral and aliphatic
    • C07K5/06026—Dipeptides with the first amino acid being neutral and aliphatic the side chain containing 0 or 1 carbon atom, i.e. Gly or Ala
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K7/00—Peptides having 5 to 20 amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
    • C07K7/02—Linear peptides containing at least one abnormal peptide link
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N15/00—Mutation or genetic engineering; DNA or RNA concerning genetic engineering, vectors, e.g. plasmids, or their isolation, preparation or purification; Use of hosts therefor
    • C12N15/09—Recombinant DNA-technology
    • C12N15/11—DNA or RNA fragments; Modified forms thereof; Non-coding nucleic acids having a biological activity
    • C12N15/113—Non-coding nucleic acids modulating the expression of genes, e.g. antisense oligonucleotides; Antisense DNA or RNA; Triplex- forming oligonucleotides; Catalytic nucleic acids, e.g. ribozymes; Nucleic acids used in co-suppression or gene silencing
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N15/00—Mutation or genetic engineering; DNA or RNA concerning genetic engineering, vectors, e.g. plasmids, or their isolation, preparation or purification; Use of hosts therefor
    • C12N15/09—Recombinant DNA-technology
    • C12N15/11—DNA or RNA fragments; Modified forms thereof; Non-coding nucleic acids having a biological activity
    • C12N15/113—Non-coding nucleic acids modulating the expression of genes, e.g. antisense oligonucleotides; Antisense DNA or RNA; Triplex- forming oligonucleotides; Catalytic nucleic acids, e.g. ribozymes; Nucleic acids used in co-suppression or gene silencing
    • C12N15/1138—Non-coding nucleic acids modulating the expression of genes, e.g. antisense oligonucleotides; Antisense DNA or RNA; Triplex- forming oligonucleotides; Catalytic nucleic acids, e.g. ribozymes; Nucleic acids used in co-suppression or gene silencing against receptors or cell surface proteins
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2319/00—Fusion polypeptide
    • C07K2319/30—Non-immunoglobulin-derived peptide or protein having an immunoglobulin constant or Fc region, or a fragment thereof, attached thereto
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N2310/00—Structure or type of the nucleic acid
    • C12N2310/10—Type of nucleic acid
    • C12N2310/14—Type of nucleic acid interfering N.A.
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N2310/00—Structure or type of the nucleic acid
    • C12N2310/30—Chemical structure
    • C12N2310/35—Nature of the modification
    • C12N2310/351—Conjugate
    • C12N2310/3513—Protein; Peptide
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N2320/00—Applications; Uses
    • C12N2320/30—Special therapeutic applications
    • C12N2320/32—Special delivery means, e.g. tissue-specific

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Biophysics (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Wood Science & Technology (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • General Engineering & Computer Science (AREA)
  • Physics & Mathematics (AREA)
  • Plant Pathology (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Gastroenterology & Hepatology (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
  • Peptides Or Proteins (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
  • Medicinal Preparation (AREA)
  • Medicines Containing Material From Animals Or Micro-Organisms (AREA)
  • Steroid Compounds (AREA)
  • Organic Low-Molecular-Weight Compounds And Preparation Thereof (AREA)
  • Materials For Medical Uses (AREA)
  • Medicines Containing Antibodies Or Antigens For Use As Internal Diagnostic Agents (AREA)

Abstract

혈청 안정성 및 αvβ6 인테그린에 대한 친화성을 갖는 인테그린 리간드가 기재되어 있다. 혈청 안정성을 가지며 αvβ6 인테그린에 대한 친화성을 갖는 αvβ6 인테그린 리간드를 포함하는 조성물 및 이들의 사용 방법이 또한 기재되어 있다.

Description

알파-v 베타-6 인테그린 리간드 및 그의 용도
관련 출원에 대한 상호-참조
본 출원은 2016년 11월 1일에 출원된 미국 특허 가출원 번호 62/415,752에 대한 우선권을 주장하며, 그의 내용은 본원에 참조로 포함된다.
발명의 분야
αvβ6 인테그린의 표적화 및/또는 αvβ6 인테그린을 발현하는 세포의 표적화에 유용한 펩티드-기반 알파-v 베타-6 (αvβ6) 인테그린 리간드가 개시되어 있다. αvβ6 인테그린 리간드는 1종 이상의 화물 분자에 접합되어, 화물 분자의 αvβ6 인테그린을 발현하는 세포, 예컨대 상피 세포로의 전달을 용이하게 할 수 있다.
다양한 상피 세포에서 발현되는 인테그린 알파-v 베타-6 (αvβ6)은 TGF-β의 잠복-연관 펩티드 (LAP) 및 (ECM) 단백질 피브로넥틴, 비트로넥틴 및 테나신에 대한 수용체이다.
αvβ6 인테그린은 정상적인 건강한 성체 상피에서는 거의 검출할 수 없지만, 상처 치유 동안 및 다양한 암 (예를 들어, 결장암, 난소암, 자궁내막암 및 위암)에서 상향조절되며, 종종 나쁜 암 예후와 연관된다. αvβ6 인테그린은 전이에서의 세포 침습 및 이동을 촉진하며 아폽토시스를 억제할 수 있는 것으로 제시된 바 있다. αvβ6 인테그린은 또한 매트릭스 메탈로프로테아제 (MMP)의 발현을 조절하며 TGF-β1을 활성화시킬 수 있다. 주로 시험관내 연구로부터, αvβ6 인테그린이 암종 진행을 촉진할 수 있다는 것을 시사하는 증거가 증가하고 있다. 따라서, 인테그린 αvβ6은 종양 바이오마커 및 잠재적인 치료 표적으로서 및 매트릭스 메탈로프로테아제 (MMP)의 발현 및 TGF-β1의 활성화에서의 그의 역할로 인해 매력적이다.
신규, 조작된 비-자연 발생의 펩티드-기반 αvβ6 인테그린 리간드 (또한 αvβ6 리간드로 칭해짐)가 본원에 기재되어 있다. 본원에 개시된 αvβ6 인테그린 리간드는 혈청에서 안정적이고, αvβ6 인테그린에 대한 친화성을 가지며 그에 특이적으로 결합할 수 있다. αvβ6 인테그린 리간드를 포함하는 조성물, 및 본원에 기재된 αvβ6 인테그린 리간드 및 조성물의 사용 방법이 추가로 본원에 기재되어 있다.
본원에 기재된 αvβ6 인테그린 리간드는 다른 공지된 αvβ6 인테그린-결합 펩티드, 예컨대 천연 펩티드 RGDLATLRQL (서열식별번호: 1)과 비교하여 개선된 안정성을 갖는다. 본원에 기재된 신규 αvβ6 리간드는 증가된 혈청 안정성을 가지면서, αvβ6 인테그린에 대한 결합능 (친화성)을 유지한다.
제1 측면에서, 본 개시내용은 조작된, 비-자연 발생의 αvβ6 인테그린 리간드를 제공한다. 일부 실시양태에서, αvβ6 인테그린 리간드는 화학식: Z-RG1DLXaa1Xaa2L (서열식별번호: 85) (화학식 I)을 포함하며, 여기서 Z는 아민-말단 캡 (예를 들어, 본원에 기재되어 있거나 또는 관련 기술분야에 공지된 임의의 아민-말단 캡)이고; R은 L-아르기닌이고; G1은 L-글리신 또는 N-메틸 글리신이고; D는 L-아스파르트산 (L-아스파르테이트)이고; L은 L-류신이고; Xaa1은 L-α 아미노산 (예를 들어, 본원에 기재되어 있거나 또는 관련 기술분야에 공지된 임의의 L-α 아미노산), L-β 아미노산 (예를 들어, 본원에 기재되어 있거나 또는 관련 기술분야에 공지된 임의의 L-β 아미노산) 또는 α,α-이치환된 아미노산 (예를 들어, 본원에 기재되어 있거나 또는 관련 기술분야에 공지된 임의의 α,α-이치환된 아미노산)이고; Xaa2는 L-α 아미노산 (예를 들어, 본원에 기재되어 있거나 또는 관련 기술분야에 공지된 임의의 L-α 아미노산), L-β 아미노산 (예를 들어, 본원에 기재되어 있거나 또는 관련 기술분야에 공지된 임의의 L-β 아미노산) 또는 α,α-이치환된 아미노산 (예를 들어, 본원에 기재되어 있거나 또는 관련 기술분야에 공지된 임의의 α,α-이치환된 아미노산)이다.
일부 실시양태에서, αvβ6 인테그린 리간드는 화학식: Z-RG1DLXaa1Xaa2L-J-R1 (서열식별번호: 86) (화학식 II)을 포함하며, 여기서 Z는 아민-말단 캡 (예를 들어, 본원에 기재되어 있거나 또는 관련 기술분야에 공지된 임의의 아민-말단 캡)이고; R은 L-아르기닌이고; G1은 L-글리신 또는 N-메틸 글리신이고; D는 L-아스파르트산 (L-아스파르테이트)이고; L은 L-류신이고; Xaa1은 L-α 아미노산 (예를 들어, 본원에 기재되어 있거나 또는 관련 기술분야에 공지된 임의의 L-α 아미노산), L-β 아미노산 (예를 들어, 본원에 기재되어 있거나 또는 관련 기술분야에 공지된 임의의 L-β 아미노산) 또는 α,α-이치환된 아미노산 (예를 들어, 본원에 기재되어 있거나 또는 관련 기술분야에 공지된 임의의 α,α-이치환된 아미노산)이고; Xaa2는 L-α 아미노산 (예를 들어, 본원에 기재되어 있거나 또는 관련 기술분야에 공지된 임의의 L-α 아미노산), L-β 아미노산 (예를 들어, 본원에 기재되어 있거나 또는 관련 기술분야에 공지된 임의의 L-β 아미노산) 또는 α,α-이치환된 아미노산 (예를 들어, 본원에 기재되어 있거나 또는 관련 기술분야에 공지된 임의의 α,α-이치환된 아미노산)이고; J는 임의적이며, 존재하는 경우에, 1종 이상 (예를 들어, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 21, 22, 23, 24, 25, 26, 27, 28, 29 또는 30; 또는 1 내지 30, 1 내지 25, 1 내지 20, 1 내지 15, 1 내지 10, 1 내지 5, 5 내지 30, 5 내지 25, 5 내지 20, 5 내지 15, 5 내지 10, 10 내지 30, 10 내지 25, 10 내지 20, 10 내지 15, 15 내지 30, 15 내지 25, 15 내지 20, 20 내지 30, 20 내지 25 또는 25 내지 30종)의 L-α 아미노산 (예를 들어, 본원에 기재되어 있거나 또는 관련 기술분야에 공지된 임의의 L-α 아미노산), L-β 아미노산 (예를 들어, 본원에 기재되어 있거나 또는 관련 기술분야에 공지된 임의의 L-β 아미노산) 또는 α,α-이치환된 아미노산 (예를 들어, 본원에 기재되어 있거나 또는 관련 기술분야에 공지된 임의의 α,α-이치환된 아미노산) 또는 그의 조합을 포함하고; R1은 임의적이며, 존재하는 경우에, 폴리에틸렌 글리콜 (PEG) 및/또는 연결기를 포함한다.
일부 실시양태에서, 본원에 개시된 αvβ6 인테그린 리간드는 반응성 기 또는 보호된 반응성 기를 포함할 수 있고, 화학식: Z-RG1DLXaa1Xaa2L-J-R1-R2 (서열식별번호: 87) (화학식 III)를 포함하며, 여기서 Z는 아민-말단 캡 (예를 들어, 본원에 기재되어 있거나 또는 관련 기술분야에 공지된 임의의 아민-말단 캡)이고; R은 L-아르기닌이고; G1은 L-글리신 또는 N-메틸 글리신이고; D는 L-아스파르트산 (L-아스파르테이트)이고; L은 L-류신이고; Xaa1은 L-α 아미노산 (예를 들어, 본원에 기재되어 있거나 또는 관련 기술분야에 공지된 임의의 L-α 아미노산), L-β 아미노산 (예를 들어, 본원에 기재되어 있거나 또는 관련 기술분야에 공지된 임의의 L-β 아미노산) 또는 α,α-이치환된 아미노산 (예를 들어, 본원에 기재되어 있거나 또는 관련 기술분야에 공지된 임의의 α,α-이치환된 아미노산)이고; Xaa2는 L-α 아미노산 (예를 들어, 본원에 기재되어 있거나 또는 관련 기술분야에 공지된 임의의 L-α 아미노산), L-β 아미노산 (예를 들어, 본원에 기재되어 있거나 또는 관련 기술분야에 공지된 임의의 L-β 아미노산) 또는 α,α-이치환된 아미노산 (예를 들어, 본원에 기재되어 있거나 또는 관련 기술분야에 공지된 임의의 α,α-이치환된 아미노산)이고; J는 임의적이며, 존재하는 경우에, 1종 이상 (예를 들어, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 21, 22, 23, 24, 25, 26, 27, 28, 29 또는 30; 또는 1 내지 30, 1 내지 25, 1 내지 20, 1 내지 15, 1 내지 10, 1 내지 5, 5 내지 30, 5 내지 25, 5 내지 20, 5 내지 15, 5 내지 10, 10 내지 30, 10 내지 25, 10 내지 20, 10 내지 15, 15 내지 30, 15 내지 25, 15 내지 20, 20 내지 30, 20 내지 25 또는 25 내지 30종)의 L-α 아미노산 (예를 들어, 본원에 기재되어 있거나 또는 관련 기술분야에 공지된 임의의 L-α 아미노산), L-β 아미노산 (예를 들어, 본원에 기재되어 있거나 또는 관련 기술분야에 공지된 임의의 L-β 아미노산) 또는 α,α-이치환된 아미노산 (예를 들어, 본원에 기재되어 있거나 또는 관련 기술분야에 공지된 임의의 α,α-이치환된 아미노산) 또는 그의 조합을 포함하고; R1은 임의적이며, 존재하는 경우에, 폴리에틸렌 글리콜 (PEG) 및/또는 연결기를 포함하고; R2는 반응성 기 또는 보호된 반응성 기를 포함한다.
일부 실시양태에서, αvβ6 인테그린 리간드는 1종 이상 (예를 들어, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 21, 22, 23, 24, 25, 26, 27, 28, 29 또는 30; 또는 1 내지 30, 1 내지 25, 1 내지 20, 1 내지 15, 1 내지 10, 1 내지 5, 5 내지 30, 5 내지 25, 5 내지 20, 5 내지 15, 5 내지 10, 10 내지 30, 10 내지 25, 10 내지 20, 10 내지 15, 15 내지 30, 15 내지 25, 15 내지 20, 20 내지 30, 20 내지 25 또는 25 내지 30종)의 화물 분자 (예를 들어, 본원에 기재되어 있거나 또는 관련 기술분야에 공지된 임의의 화물 분자)에 접합될 수 있으며, 여기서 αvβ6 인테그린 리간드는 화학식: (Z-RG1DLXaa1Xaa2L-J-R1)n-R3 (서열식별번호: 88) (화학식 IV)을 포함하며, 여기서 Z는 아민-말단 캡 (예를 들어, 본원에 기재되어 있거나 또는 관련 기술분야에 공지된 임의의 아민-말단 캡)이고; R은 L-아르기닌이고; G1은 L-글리신 또는 N-메틸 글리신이고; D는 L-아스파르트산 (L-아스파르테이트)이고; L은 L-류신이고; Xaa1은 L-α 아미노산 (예를 들어, 본원에 기재되어 있거나 또는 관련 기술분야에 공지된 임의의 L-α 아미노산), L-β 아미노산 (예를 들어, 본원에 기재되어 있거나 또는 관련 기술분야에 공지된 임의의 L-β 아미노산) 또는 α,α-이치환된 아미노산 (예를 들어, 본원에 기재되어 있거나 또는 관련 기술분야에 공지된 임의의 α,α-이치환된 아미노산)이고; Xaa2는 L-α 아미노산 (예를 들어, 본원에 기재되어 있거나 또는 관련 기술분야에 공지된 임의의 L-α 아미노산), L-β 아미노산 (예를 들어, 본원에 기재되어 있거나 또는 관련 기술분야에 공지된 임의의 L-β 아미노산) 또는 α,α-이치환된 아미노산 (예를 들어, 본원에 기재되어 있거나 또는 관련 기술분야에 공지된 임의의 α,α-이치환된 아미노산)이고; J는 임의적이며, 존재하는 경우에, 1종 이상 (예를 들어, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 21, 22, 23, 24, 25, 26, 27, 28, 29 또는 30; 또는 1 내지 30, 1 내지 25, 1 내지 20, 1 내지 15, 1 내지 10, 1 내지 5, 5 내지 30, 5 내지 25, 5 내지 20, 5 내지 15, 5 내지 10, 10 내지 30, 10 내지 25, 10 내지 20, 10 내지 15, 15 내지 30, 15 내지 25, 15 내지 20, 20 내지 30, 20 내지 25 또는 25 내지 30종)의 L-α 아미노산 (예를 들어, 본원에 기재되어 있거나 또는 관련 기술분야에 공지된 임의의 L-α 아미노산), L-β 아미노산 (예를 들어, 본원에 기재되어 있거나 또는 관련 기술분야에 공지된 임의의 L-β 아미노산) 또는 α,α-이치환된 아미노산 (예를 들어, 본원에 기재되어 있거나 또는 관련 기술분야에 공지된 임의의 α,α-이치환된 아미노산) 또는 그의 조합을 포함하고; R1은 임의적이며, 존재하는 경우에, 폴리에틸렌 글리콜 (PEG) 및/또는 연결기를 포함하고; n은 0 초과의 정수 (예를 들어, 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 21, 22, 23, 24, 25, 26, 27, 28, 29 또는 30; 또는 1 내지 30, 1 내지 25, 1 내지 20, 1 내지 15, 1 내지 10, 1 내지 5, 5 내지 30, 5 내지 25, 5 내지 20, 5 내지 15, 5 내지 10, 10 내지 30, 10 내지 25, 10 내지 20, 10 내지 15, 15 내지 30, 15 내지 25, 15 내지 20, 20 내지 30, 20 내지 25 또는 25 내지 30)이고; R3은 1종 이상의 화물 분자를 포함한다. 일부 실시양태에서, R3은 1종의 화물 분자를 포함한다. 일부 실시양태에서, R3은 1종 초과의 화물 분자를 포함한다.
일부 실시양태에서, αvβ6 인테그린 리간드는 1종 이상 (예를 들어, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 21, 22, 23, 24, 25, 26, 27, 28, 29 또는 30; 또는 1 내지 30, 1 내지 25, 1 내지 20, 1 내지 15, 1 내지 10, 1 내지 5, 5 내지 30, 5 내지 25, 5 내지 20, 5 내지 15, 5 내지 10, 10 내지 30, 10 내지 25, 10 내지 20, 10 내지 15, 15 내지 30, 15 내지 25, 15 내지 20, 20 내지 30, 20 내지 25 또는 25 내지 30종)의 화물 분자 (예를 들어, 본원에 기재되어 있거나 또는 관련 기술분야에 공지된 임의의 화물 분자)에 접합될 수 있으며, 여기서 αvβ6 인테그린 리간드는 화학식: (Z-RG1DLXaa1Xaa2L-J-R1)n-R4-(R3)p (서열식별번호: 89) (화학식 V)를 포함하며, 여기서 Z는 아민-말단 캡 (예를 들어, 본원에 기재되어 있거나 또는 관련 기술분야에 공지된 임의의 아민-말단 캡)이고; R은 L-아르기닌이고; G1은 L-글리신 또는 N-메틸 글리신이고; D는 L-아스파르트산 (L-아스파르테이트)이고; L은 L-류신이고; Xaa1은 L-α 아미노산 (예를 들어, 본원에 기재되어 있거나 또는 관련 기술분야에 공지된 임의의 L-α 아미노산), L-β 아미노산 (예를 들어, 본원에 기재되어 있거나 또는 관련 기술분야에 공지된 임의의 L-β 아미노산) 또는 α,α-이치환된 아미노산 (예를 들어, 본원에 기재되어 있거나 또는 관련 기술분야에 공지된 임의의 α,α-이치환된 아미노산)이고; Xaa2는 L-α 아미노산 (예를 들어, 본원에 기재되어 있거나 또는 관련 기술분야에 공지된 임의의 L-α 아미노산), L-β 아미노산 (예를 들어, 본원에 기재되어 있거나 또는 관련 기술분야에 공지된 임의의 L-β 아미노산) 또는 α,α-이치환된 아미노산 (예를 들어, 본원에 기재되어 있거나 또는 관련 기술분야에 공지된 임의의 α,α-이치환된 아미노산)이고; J는 임의적이며, 존재하는 경우에, 1종 이상 (예를 들어, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 21, 22, 23, 24, 25, 26, 27, 28, 29 또는 30; 또는 1 내지 30, 1 내지 25, 1 내지 20, 1 내지 15, 1 내지 10, 1 내지 5, 5 내지 30, 5 내지 25, 5 내지 20, 5 내지 15, 5 내지 10, 10 내지 30, 10 내지 25, 10 내지 20, 10 내지 15, 15 내지 30, 15 내지 25, 15 내지 20, 20 내지 30, 20 내지 25 또는 25 내지 30종)의 L-α 아미노산 (예를 들어, 본원에 기재되어 있거나 또는 관련 기술분야에 공지된 임의의 L-α 아미노산), L-β 아미노산 (예를 들어, 본원에 기재되어 있거나 또는 관련 기술분야에 공지된 임의의 L-β 아미노산) 또는 α,α-이치환된 아미노산 (예를 들어, 본원에 기재되어 있거나 또는 관련 기술분야에 공지된 임의의 α,α-이치환된 아미노산) 또는 그의 조합을 포함하고; R1은 임의적이며, 존재하는 경우에, 폴리에틸렌 글리콜 (PEG) 및/또는 연결기를 포함하고; n은 0 초과의 정수 (예를 들어, 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 21, 22, 23, 24, 25, 26, 27, 28, 29 또는 30; 또는 1 내지 30, 1 내지 25, 1 내지 20, 1 내지 15, 1 내지 10, 1 내지 5, 5 내지 30, 5 내지 25, 5 내지 20, 5 내지 15, 5 내지 10, 10 내지 30, 10 내지 25, 10 내지 20, 10 내지 15, 15 내지 30, 15 내지 25, 15 내지 20, 20 내지 30, 20 내지 25 또는 25 내지 30)이고; R3은 1종 이상의 화물 분자를 포함하고; p는 0 초과의 정수 (예를 들어, 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 21, 22, 23, 24, 25, 26, 27, 28, 29 또는 30; 또는 1 내지 30, 1 내지 25, 1 내지 20, 1 내지 15, 1 내지 10, 1 내지 5, 5 내지 30, 5 내지 25, 5 내지 20, 5 내지 15, 5 내지 10, 10 내지 30, 10 내지 25, 10 내지 20, 10 내지 15, 15 내지 30, 15 내지 25, 15 내지 20, 20 내지 30, 20 내지 25 또는 25 내지 30)이고; R4는 임의적이며, 존재하는 경우에, 각각의 리간드에 대한 적어도 하나의 부착 지점 및 각각의 화물 분자에 대한 적어도 하나의 부착 지점을 포함하는 스캐폴드 및/또는 연결기를 포함한다. 일부 실시양태에서, R3은 1종의 화물 분자를 포함한다. 일부 실시양태에서, R3은 1종 초과의 화물 분자를 포함한다.
본원에 사용된 "아민-말단 캡" (본원의 화학식에서 "Z"로서 제시됨)은 RGDLATL 천연 펩티드의 프로테아제 내성 및/또는 혈청 안정성 특징을 증가시키고/거나 달리 개선시킬 수 있는 화학적 모이어티를 포함한다. 이러한 개선은, 예를 들어, αvβ6 인테그린 리간드, αvβ6 인테그린 리간드-화물 분자 접합체 또는 αvβ6 인테그린 리간드-함유 조성물의 생체내 및/또는 시험관내 반감기를 결정하는 것을 예를 들어 포함하나 이에 제한되지는 않는, 관련 기술분야에 일반적으로 공지된 방법을 사용하여 결정될 수 있다. 일부 실시양태에서, Z는 본원에 개시된 αvβ6 인테그린 리간드의 N-말단 아민의 프로테아제 내성 아실화, 술포닐화 또는 알킬화를 포함한다. 일부 실시양태에서, 아민-말단 캡 Z는 알킬-CO, ArCO, 알킬-SO2, ArSO2, 알킬 또는 아릴 기일 수 있다. 일부 실시양태에서, 알킬 기는 선형 또는 분지형 지방족 알킬 기일 수 있고, 아릴 기는 방향족 또는 헤테로방향족 기일 수 있다. 일부 실시양태에서, 아민-말단 캡 Z는 CH3CO, CH3CH2CO, CH3(CH2)2CO, (CH3)2CHCO, CH3(CH2)3CO, (CH3)2CHCH2CO, CH3CH2CH(CH3)CO, (CH3)3CCO, CH3(CH2)4CO, CH3SO2, CH3CH2SO2, CH3(CH2)2SO2, (CH3)2CHSO2, CH3(CH2)3SO2, (CH3)2CHCH2SO2, CH3CH2CH(CH3)SO2, (CH3)3CSO2, PhCO, PhSO2, 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9 또는 10개의 탄소 원자를 갖는 알킬 기, 메틸, 에틸, 프로필, 부틸, 펜틸, NH2NH, PEG, 구아니디닐, CH3OCH2CH2OCH2CH2CO, CH3O(CH2CH2O)2CH2CH2CO, CH3O(CH2CH2O)3CH2CH2CO, CH3O(CH2CH2O)4CH2CH2CO, CH3O(CH2CH2O)5CH2CH2CO, CH3OCH2CH2OCH2CO, CH3O(CH2CH2O)2CH2CO, CH3O(CH2CH2O)3CH2CO, CH3O(CH2CH2O)4CH2CO, CH3O(CH2CH2O)5CH2CO, CH3OCH2CH2OCO, CH3O(CH2CH2O)2CO, CH3O(CH2CH2O)3CO, CH3O(CH2CH2O)4CO, CH3O(CH2CH2O)5CO, HOCH2CH2OCH2CH2CO, HO(CH2CH2O)2CH2CH2CO, HO(CH2CH2O)3CH2CH2CO, HO(CH2CH2O)4CH2CH2CO, HO(CH2CH2O)5CH2CH2CO, HOCH2CH2OCH2CO, HO(CH2CH2O)2CH2CO, HO(CH2CH2O)3CH2CO, HO(CH2CH2O)4CH2CO, HO(CH2CH2O)5CH2CO, HOCH2CH2OCO, HO(CH2CH2O)2CO, HO(CH2CH2O)3CO, HO(CH2CH2O)4CO, HO(CH2CH2O)5CO, CH3CH2OCH2CH2OCH2CH2CO, CH3CH2O(CH2CH2O)2CH2CH2CO, CH3CH2O(CH2CH2O)3CH2CH2CO, CH3CH2O(CH2CH2O)4CH2CH2CO, CH3CH2O(CH2CH2O)5CH2CH2CO, CH3CH2OCH2CH2OCH2CO, CH3CH2O(CH2CH2O)2CH2CO, CH3CH2O(CH2CH2O)3CH2CO, CH3CH2O(CH2CH2O)4CH2CO, CH3CH2O(CH2CH2O)5CH2CO, CH3CH2OCH2CH2OCO, CH3CH2O(CH2CH2O)2CO, CH3CH2O(CH2CH2O)3CO, CH3CH2O(CH2CH2O)4CO, CH3CH2O(CH2CH2O)5CO, CH3OCH2CH2CO, HOCH2CH2CO 또는 CH3CH2OCH2CH2CO일 수 있으나 이에 제한되지는 않는다.
일부 실시양태에서, 아민-말단 캡 Z는 CH3CO이다. 일부 실시양태에서, 아민-말단 캡 Z는 CH3CH2CO이다. 일부 실시양태에서, 아민-말단 캡 Z는 CH3(CH2)2CO이다. 일부 실시양태에서, 아민-말단 캡 Z는 CH3(CH2)3CO이다. 일부 실시양태에서, 아민-말단 캡 Z는 CH3(CH2)4CO이다.
일부 실시양태에서, αvβ6 인테그린 리간드는 화학식: Z-RG1DLAXaauL (서열식별번호: 90) (화학식 Ic)을 포함하며, 여기서 Z, R, G1, D 및 L은 각각 본원의 화학식 I에 대해 정의된 바와 같고; A는 L-알라닌이고; Xaau는 비-표준 아미노산이다.
일부 실시양태에서, αvβ6 인테그린 리간드는 화학식: Z-RG1DLAAbuL (서열식별번호: 91) (화학식 Id)을 포함하며, 여기서 Z, R, G1, D 및 L은 각각 본원의 화학식 I에 대해 정의된 바와 같고; A는 L-알라닌이고; Abu는 L-α-아미노-부티르산 (2-아미노부티르산)이다.
일부 실시양태에서, αvβ6 인테그린 리간드는 화학식: Z-RG1DLXaa1Xaa2L-Xaa3Xaa4L-R1 (서열식별번호: 92) (화학식 VI)을 포함하며, 여기서 Z는 아민-말단 캡 (예를 들어, 본원에 기재되어 있거나 또는 관련 기술분야에 공지된 임의의 아민-말단 캡)이고; R은 L-아르기닌이고; G1은 L-글리신 또는 N-메틸 글리신이고; D는 L-아스파르트산 (L-아스파르테이트)이고; L은 L-류신이고; Xaa1은 L-α 아미노산 (예를 들어, 본원에 기재되어 있거나 또는 관련 기술분야에 공지된 임의의 L-α 아미노산), L-β 아미노산 (예를 들어, 본원에 기재되어 있거나 또는 관련 기술분야에 공지된 임의의 L-β 아미노산) 또는 α,α-이치환된 아미노산 (예를 들어, 본원에 기재되어 있거나 또는 관련 기술분야에 공지된 임의의 α,α-이치환된 아미노산)이고; Xaa2는 L-α 아미노산 (예를 들어, 본원에 기재되어 있거나 또는 관련 기술분야에 공지된 임의의 L-α 아미노산), L-β 아미노산 (예를 들어, 본원에 기재되어 있거나 또는 관련 기술분야에 공지된 임의의 L-β 아미노산) 또는 α,α-이치환된 아미노산 (예를 들어, 본원에 기재되어 있거나 또는 관련 기술분야에 공지된 임의의 α,α-이치환된 아미노산)이고; Xaa3은 L-α 아미노산 (예를 들어, 본원에 기재되어 있거나 또는 관련 기술분야에 공지된 임의의 L-α 아미노산), L-β 아미노산 (예를 들어, 본원에 기재되어 있거나 또는 관련 기술분야에 공지된 임의의 L-β 아미노산) 또는 α,α-이치환된 아미노산 (예를 들어, 본원에 기재되어 있거나 또는 관련 기술분야에 공지된 임의의 α,α-이치환된 아미노산)이고; Xaa4는 L-α 아미노산 (예를 들어, 본원에 기재되어 있거나 또는 관련 기술분야에 공지된 임의의 L-α 아미노산), L-β 아미노산 (예를 들어, 본원에 기재되어 있거나 또는 관련 기술분야에 공지된 임의의 L-β 아미노산) 또는 α,α-이치환된 아미노산 (예를 들어, 본원에 기재되어 있거나 또는 관련 기술분야에 공지된 임의의 α,α-이치환된 아미노산)이고; R1은 임의적이며, 존재하는 경우에, 폴리에틸렌 글리콜 (PEG) 및/또는 연결기를 포함한다.
일부 실시양태에서, αvβ6 인테그린 리간드는 화학식: Z-RG1DLAXaauL-Xaa3Xaa4L-R1 (서열식별번호: 93) (화학식 VIb)을 포함하며, 여기서 Z, R, G1, D, L 및 R1은 각각 본원의 화학식 VI에 대해 정의된 바와 같고; A는 L-알라닌이고; Xaau는 비-표준 아미노산이고; Xaa3은 L-α 아미노산 (예를 들어, 본원에 기재되어 있거나 또는 관련 기술분야에 공지된 임의의 L-α 아미노산), L-β 아미노산 (예를 들어, 본원에 기재되어 있거나 또는 관련 기술분야에 공지된 임의의 L-β 아미노산) 또는 α,α-이치환된 아미노산 (예를 들어, 본원에 기재되어 있거나 또는 관련 기술분야에 공지된 임의의 α,α-이치환된 아미노산)이고; Xaa4는 L-α 아미노산 (예를 들어, 본원에 기재되어 있거나 또는 관련 기술분야에 공지된 임의의 L-α 아미노산), L-β 아미노산 (예를 들어, 본원에 기재되어 있거나 또는 관련 기술분야에 공지된 임의의 L-β 아미노산) 또는 α,α-이치환된 아미노산 (예를 들어, 본원에 기재되어 있거나 또는 관련 기술분야에 공지된 임의의 α,α-이치환된 아미노산)이다.
일부 실시양태에서, αvβ6 인테그린 리간드는 화학식: Z-RG1DLAAbuL-Xaa3Xaa4L-R1 (서열식별번호: 94) (화학식 VIc)을 포함하며, 여기서 Z, R, G1, D, L 및 R1은 각각 본원의 화학식 VI에 대해 정의된 바와 같고; A는 L-알라닌이고; Abu는 L-α-아미노-부티르산 (2-아미노부티르산)이고; Xaa3은 L-α 아미노산 (예를 들어, 본원에 기재되어 있거나 또는 관련 기술분야에 공지된 임의의 L-α 아미노산), L-β 아미노산 (예를 들어, 본원에 기재되어 있거나 또는 관련 기술분야에 공지된 임의의 L-β 아미노산) 또는 α,α-이치환된 아미노산 (예를 들어, 본원에 기재되어 있거나 또는 관련 기술분야에 공지된 임의의 α,α-이치환된 아미노산)이고; Xaa4는 L-α 아미노산 (예를 들어, 본원에 기재되어 있거나 또는 관련 기술분야에 공지된 임의의 L-α 아미노산), L-β 아미노산 (예를 들어, 본원에 기재되어 있거나 또는 관련 기술분야에 공지된 임의의 L-β 아미노산) 또는 α,α-이치환된 아미노산 (예를 들어, 본원에 기재되어 있거나 또는 관련 기술분야에 공지된 임의의 α,α-이치환된 아미노산)이다.
일부 실시양태에서, αvβ6 인테그린 리간드는 화학식: Z-RG1DLAXaauL-XaauXaauL-R1 (서열식별번호: 95) (화학식 VId)을 포함하며, 여기서 Z, R, G1, D, L 및 R1은 각각 본원의 화학식 VI에 대해 정의된 바와 같고; A는 L-알라닌이고; Xaau는 비-표준 아미노산이다.
일부 실시양태에서, 본원의 임의의 화학식 또는 리간드에서 Z-R은 R'로 대체되며, 여기서 R'는 Dap(구아니디노)이다:
Figure 112019043490420-pct00001
일부 실시양태에서, αvβ6 인테그린 리간드는 화학식: RG1DLXaa1Xaa2L-Xaa3Xaa4L-R1 (서열식별번호: 96) (화학식 VIII)을 포함하며, 여기서 R은 L-아르기닌이고; G1은 L-글리신 또는 N-메틸 글리신이고; D는 L-아스파르트산 (L-아스파르테이트)이고; L은 L-류신이고; Xaa1은 L-α 아미노산 (예를 들어, 본원에 기재되어 있거나 또는 관련 기술분야에 공지된 임의의 L-α 아미노산), L-β 아미노산 (예를 들어, 본원에 기재되어 있거나 또는 관련 기술분야에 공지된 임의의 L-β 아미노산) 또는 α,α-이치환된 아미노산 (예를 들어, 본원에 기재되어 있거나 또는 관련 기술분야에 공지된 임의의 α,α-이치환된 아미노산)이고; Xaa2는 L-α 아미노산 (예를 들어, 본원에 기재되어 있거나 또는 관련 기술분야에 공지된 임의의 L-α 아미노산), L-β 아미노산 (예를 들어, 본원에 기재되어 있거나 또는 관련 기술분야에 공지된 임의의 L-β 아미노산) 또는 α,α-이치환된 아미노산 (예를 들어, 본원에 기재되어 있거나 또는 관련 기술분야에 공지된 임의의 α,α-이치환된 아미노산)이고; Xaa3은 L-α 아미노산 (예를 들어, 본원에 기재되어 있거나 또는 관련 기술분야에 공지된 임의의 L-α 아미노산), L-β 아미노산 (예를 들어, 본원에 기재되어 있거나 또는 관련 기술분야에 공지된 임의의 L-β 아미노산) 또는 α,α-이치환된 아미노산 (예를 들어, 본원에 기재되어 있거나 또는 관련 기술분야에 공지된 임의의 α,α-이치환된 아미노산)이고; Xaa4는 L-α 아미노산 (예를 들어, 본원에 기재되어 있거나 또는 관련 기술분야에 공지된 임의의 L-α 아미노산), L-β 아미노산 (예를 들어, 본원에 기재되어 있거나 또는 관련 기술분야에 공지된 임의의 L-β 아미노산) 또는 α,α-이치환된 아미노산 (예를 들어, 본원에 기재되어 있거나 또는 관련 기술분야에 공지된 임의의 α,α-이치환된 아미노산)이고; R1은 임의적이며, 존재하는 경우에, 폴리에틸렌 글리콜 (PEG) 및/또는 연결기를 포함하고; Xaa1, Xaa2, Xaa3 및 Xaa4 중 적어도 1종은 비-표준 아미노산이다. 일부 실시양태에서, αvβ6 인테그린 리간드는 화학식: RG1DLXaa1Xaa2L-Xaa3Xaa4L-R1 (서열식별번호: 96) (화학식 VIII)을 포함하며, 여기서 Xaa1, Xaa2, Xaa3 및 Xaa4 중 적어도 2종은 비-표준 아미노산이다. 일부 실시양태에서, αvβ6 인테그린 리간드는 화학식: RG1DLXaa1Xaa2L-Xaa3Xaa4L-R1 (서열식별번호: 96) (화학식 VIII)을 포함하며, 여기서 Xaa1, Xaa2, Xaa3 및 Xaa4 중 적어도 3종은 비-표준 아미노산이다.
일부 실시양태에서, αvβ6 인테그린 리간드는 화학식: RG1DLAAbuL-CitAibL-R1 (서열식별번호: 97) (화학식 VIIIa)을 포함하며, 여기서 R, G1, D, L 및 R1은 각각 본원의 화학식 VIII에 대해 정의된 바와 같고; A는 L-알라닌이고; Abu는 L-α-아미노-부티르산 (2-아미노부티르산)이고; Cit는 시트룰린이고, Aib는 α-아미노-이소부티르산 (2-아미노이소부티르산)이다.
일부 실시양태에서, αvβ6 인테그린 리간드는 도 1의 구조를 포함하거나, 그로 이루어지거나, 또는 그로 본질적으로 이루어진다.
일부 실시양태에서, αvβ6 인테그린 리간드는 도 2의 구조를 포함하거나, 그로 이루어지거나, 또는 그로 본질적으로 이루어진다.
일부 실시양태에서, αvβ6 인테그린 리간드는 도 3의 구조를 포함하거나, 그로 이루어지거나, 또는 그로 본질적으로 이루어진다.
일부 실시양태에서, αvβ6 인테그린 리간드는 도 4의 구조를 포함하거나, 그로 이루어지거나, 또는 그로 본질적으로 이루어진다.
일부 실시양태에서, αvβ6 인테그린 리간드는 도 5의 구조를 포함하거나, 그로 이루어지거나, 또는 그로 본질적으로 이루어진다.
일부 실시양태에서, αvβ6 인테그린 리간드는 도 6의 구조를 포함하거나, 그로 이루어지거나, 또는 그로 본질적으로 이루어진다.
일부 실시양태에서, αvβ6 인테그린 리간드는 도 7의 구조를 포함하거나, 그로 이루어지거나, 또는 그로 본질적으로 이루어진다.
일부 실시양태에서, αvβ6 인테그린 리간드는 도 8의 구조를 포함하거나, 그로 이루어지거나, 또는 그로 본질적으로 이루어진다.
일부 실시양태에서, αvβ6 인테그린 리간드는 도 9의 구조를 포함하거나, 그로 이루어지거나, 또는 그로 본질적으로 이루어진다.
일부 실시양태에서, αvβ6 인테그린 리간드는 도 10의 구조를 포함하거나, 그로 이루어지거나, 또는 그로 본질적으로 이루어진다.
일부 실시양태에서, αvβ6 인테그린 리간드는 도 11의 구조를 포함하거나, 그로 이루어지거나, 또는 그로 본질적으로 이루어진다.
일부 실시양태에서, 본원에 개시된 임의의 αvβ6 인테그린 리간드는 화물 분자, 반응성 기 및/또는 보호된 반응성 기에 연결될 수 있다. 반응성 기는 αvβ6 인테그린 리간드의, 분자, 예컨대 1종 이상의 화물 분자 (예를 들어, 본원에 기재되어 있거나 또는 관련 기술분야에 공지된 임의의 화물 분자)에 대한 접합을 용이하게 하기 위해 사용될 수 있다. 본원에 개시된 αvβ6 인테그린 리간드는 화물 분자의 αvβ6 인테그린 또는 αvβ6 인테그린을 발현하는 세포에 대한 표적화를 증가시킬 수 있다. 화물 분자는 제약 활성 성분 또는 화합물, 약물 제품, 전구약물 또는 치료상 가치있는 물질일 수 있으나 이에 제한되지는 않는다. 일부 실시양태에서, 화물 분자는 소분자, 항체, 항체 단편, 이뮤노글로불린, 모노클로날 항체, 표지 또는 마커, 지질, 천연 또는 변형된 핵산 또는 폴리뉴클레오티드 (예를 들어, 올리고머성 화합물 예컨대 안티센스 올리고뉴클레오티드 또는 RNAi 작용제), 펩티드, 압타머, 중합체, 폴리아민, 단백질, 독소, 비타민, 폴리에틸렌 글리콜, 합텐, 디곡시게닌, 비오틴, 방사성 원자 또는 분자, 또는 형광단일 수 있으나 이에 제한되지는 않는다. 일부 실시양태에서, 화물 분자는 제약 활성 성분, 약물 제품 또는 전구약물을 포함한다. 일부 실시양태에서, 화물 분자는 제약 활성 성분으로서의 올리고머성 화합물을 포함한다. 일부 실시양태에서, 화물 분자는 제약 활성 성분으로서의 RNAi 작용제를 포함한다.
화물 분자를 αvβ6 발현 세포에 대해 표적화하기 위한 기재된 αvβ6 리간드의 용도가 본원에 기재되어 있다. 세포는 시험관내, 상피내, 생체외 또는 생체내 세포일 수 있다.
또 다른 측면에서, 본 개시내용은 본원에 기재된 조작된, 비-자연 발생의 αvβ6 리간드 중 1종 이상을 포함하는 조성물을 제공한다. 예를 들어, 일부 실시양태에서, 본원에 개시된 1종 이상의 αvβ6 인테그린 리간드를 포함하는 조성물은 생체내 세포로 전달될 1종 이상의 올리고머성 화합물(들), 예컨대 1종 이상의 RNAi 작용제(들)를 포함한다. 일부 실시양태에서, RNAi 작용제를 생체내 세포에 전달하기 위한 조성물로서, 여기서 RNAi 작용제는 1종 이상의 αvβ6 리간드에 접합되는 것인 조성물이 본원에 기재되어 있다.
1종 이상의 αvβ6 리간드를 포함하는 조성물이 기재되어 있다. 일부 실시양태에서, 조성물은 제약상 허용되는 부형제를 포함한다. 일부 실시양태에서, 1종 이상의 αvβ6 리간드를 포함하는 조성물은 1종 이상의 다른 제약 물질 또는 제약 활성 성분 또는 화합물을 포함한다.
다른 실시양태에서, 조성물은 본원에 기재된 바와 같은 1종 이상의 αvβ6 리간드를 포함하는 의약을 포함한다. 일부 실시양태에서, 의약은 제약상 허용되는 부형제를 추가로 포함한다.
본원에 개시된 1종 이상의 αvβ6 인테그린 리간드를 포함하는 조성물은, 예를 들어, I형 및 II형 폐포 상피 세포, 배상 세포, 분비성 상피 세포, 섬모 상피 세포, 각막 및 결막 상피 세포, 피부 상피 세포, 담관세포, 장세포, 관상피 세포, 선상피 세포, 신세관 및 상피 종양 (암종)에 생체내 또는 시험관내 전달될 수 있다.
또 다른 측면에서, 본 개시내용은 본원에 기재된 바와 같은 1종 이상의 αvβ6 리간드 및/또는 조성물의 사용을 포함하고, 원하는 경우에 개시된 αvβ6 리간드 및/또는 조성물을 제약 제품으로서 투여에 적합한 형태가 되도록 하는 것을 포함하는 방법을 제공한다. 다른 실시양태에서, 본 개시내용은 본원에 기재된 리간드 및 조성물, 예를 들어, 의약의 제조 방법을 제공한다.
1종 이상의 αvβ6 인테그린 리간드를 포함하는 조성물은, 예를 들어, 정맥내, 피하, 복강내, 피내, 경피, 경구, 설하, 국소, 종양내, 비강내 또는 흡입 (에어로졸 또는 건조 분말 제제) 투여를 포함한, 투여하고자 하는 화물 분자를 고려하여 투여에 적합한 것으로 관련 기술분야에 공지된 투여 경로를 사용하여 대상체에게 생체내 투여될 수 있다. 일부 실시양태에서, 1종 이상의 αvβ6 인테그린 리간드를 포함하는 조성물은 전신 전달을 위해, 예를 들어, 정맥내 또는 피하 투여에 의해 투여될 수 있다. 일부 실시양태에서, 1종 이상의 αvβ6 인테그린 리간드를 포함하는 조성물은 국부 전달을 위해, 예를 들어, 건조 분말 흡입기 또는 네뷸라이저를 통한 흡입 전달에 의해 투여될 수 있다. 일부 실시양태에서, 1종 이상의 αvβ6 인테그린 리간드를 포함하는 조성물은 국부 전달을 위해 국소 투여에 의해 투여될 수 있다.
일부 실시양태에서, 1종 이상의 목적하는 화물 분자(들)를 생체내 I형 폐포 상피 세포에 전달하는 방법으로서, 1종 이상의 화물 분자에 접합된 1종 이상의 αvβ6 인테그린 리간드를 대상체에게 투여하는 것을 포함하는 방법이 본원에 개시되어 있다.
일부 실시양태에서, 1종 이상의 목적하는 화물 분자(들)를 생체내 II형 폐포 상피 세포에 전달하는 방법으로서, 1종 이상의 화물 분자에 접합된 1종 이상의 αvβ6 인테그린 리간드를 대상체에게 투여하는 것을 포함하는 방법이 본원에 개시되어 있다.
일부 실시양태에서, 1종 이상의 목적하는 화물 분자(들)를 생체내 배상 세포에 전달하는 방법으로서, 1종 이상의 화물 분자에 접합된 1종 이상의 αvβ6 인테그린 리간드를 대상체에게 투여하는 것을 포함하는 방법이 본원에 개시되어 있다.
일부 실시양태에서, 1종 이상의 목적하는 화물 분자(들)를 생체내 분비성 상피 세포에 전달하는 방법으로서, 1종 이상의 화물 분자에 접합된 1종 이상의 αvβ6 인테그린 리간드를 대상체에게 투여하는 것을 포함하는 방법이 본원에 개시되어 있다.
일부 실시양태에서, 1종 이상의 목적하는 화물 분자(들)를 생체내 섬모 상피 세포에 전달하는 방법으로서, 1종 이상의 화물 분자에 접합된 1종 이상의 αvβ6 인테그린 리간드를 대상체에게 투여하는 것을 포함하는 방법이 본원에 개시되어 있다.
일부 실시양태에서, 1종 이상의 목적하는 화물 분자(들)를 생체내 각막 상피 세포에 전달하는 방법으로서, 1종 이상의 화물 분자에 접합된 1종 이상의 αvβ6 인테그린 리간드를 대상체에게 투여하는 것을 포함하는 방법이 본원에 개시되어 있다.
일부 실시양태에서, 1종 이상의 목적하는 화물 분자(들)를 생체내 결막 상피 세포에 전달하는 방법으로서, 1종 이상의 화물 분자에 접합된 1종 이상의 αvβ6 인테그린 리간드를 대상체에게 투여하는 것을 포함하는 방법이 본원에 개시되어 있다.
일부 실시양태에서, 1종 이상의 목적하는 화물 분자(들)를 생체내 피부 상피 세포에 전달하는 방법으로서, 1종 이상의 화물 분자에 접합된 1종 이상의 αvβ6 인테그린 리간드를 대상체에게 투여하는 것을 포함하는 방법이 본원에 개시되어 있다.
일부 실시양태에서, 1종 이상의 목적하는 화물 분자(들)를 생체내 담관세포에 전달하는 방법으로서, 1종 이상의 화물 분자에 접합된 1종 이상의 αvβ6 인테그린 리간드를 대상체에게 투여하는 것을 포함하는 방법이 본원에 개시되어 있다.
일부 실시양태에서, 1종 이상의 목적하는 화물 분자(들)를 생체내 장세포에 전달하는 방법으로서, 1종 이상의 화물 분자에 접합된 1종 이상의 αvβ6 인테그린 리간드를 대상체에게 투여하는 것을 포함하는 방법이 본원에 개시되어 있다.
일부 실시양태에서, 1종 이상의 목적하는 화물 분자(들)를 생체내 관상피 세포에 전달하는 방법으로서, 1종 이상의 화물 분자에 접합된 1종 이상의 αvβ6 인테그린 리간드를 대상체에게 투여하는 것을 포함하는 방법이 본원에 개시되어 있다.
일부 실시양태에서, 1종 이상의 목적하는 화물 분자(들)를 생체내 선상피 세포에 전달하는 방법으로서, 1종 이상의 화물 분자에 접합된 1종 이상의 αvβ6 인테그린 리간드를 대상체에게 투여하는 것을 포함하는 방법이 본원에 개시되어 있다.
일부 실시양태에서, 1종 이상의 목적하는 화물 분자(들)를 생체내 신세관에 전달하는 방법으로서, 1종 이상의 화물 분자에 접합된 1종 이상의 αvβ6 인테그린 리간드를 대상체에게 투여하는 것을 포함하는 방법이 본원에 개시되어 있다.
일부 실시양태에서, 1종 이상의 목적하는 화물 분자(들)를 생체내 상피 종양 (암종)에 전달하는 방법으로서, 1종 이상의 화물 분자에 접합된 1종 이상의 αvβ6 인테그린 리간드를 대상체에게 투여하는 것을 포함하는 방법이 본원에 개시되어 있다.
일부 실시양태에서, 올리고머성 화합물을 생체내 I형 폐포 상피 세포에 전달하는 방법으로서, 1종 이상의 올리고머성 화합물에 접합된 1종 이상의 αvβ6 인테그린 리간드를 대상체에게 투여하는 것을 포함하는 방법이 본원에 개시되어 있다. 일부 실시양태에서, RNAi 작용제를 생체내 I형 폐포 상피 세포에 전달하는 방법으로서, 1종 이상의 RNAi 작용제에 접합된 1종 이상의 αvβ6 인테그린 리간드를 대상체에게 투여하는 것을 포함하는 방법이 본원에 개시되어 있다. 일부 실시양태에서, 생체내 I형 폐포 상피 세포에서의 표적 유전자의 발현을 억제하는 방법으로서, αvβ6 인테그린에 대해 친화성을 갖는 1종 이상의 리간드에 접합된 RNAi 작용제를 대상체에게 투여하는 것을 포함하는 방법이 본원에 개시되어 있다.
일부 실시양태에서, 1종 이상의 올리고머성 화합물에 접합된 1종 이상의 αvβ6 인테그린 리간드를 대상체에게 투여하는 것을 포함하는, 올리고머성 화합물을 생체내 II형 폐포 상피 세포에 전달하는 방법이 본원에 개시되어 있다. 일부 실시양태에서, 1종 이상의 RNAi 작용제에 접합된 1종 이상의 αvβ6 인테그린 리간드를 대상체에게 투여하는 것을 포함하는, RNAi 작용제를 생체내 II형 폐포 상피 세포에 전달하는 방법이 본원에 개시되어 있다. 일부 실시양태에서, 생체내 II형 폐포 상피 세포에서의 표적 유전자의 발현을 억제하는 방법으로서, αvβ6 인테그린에 대해 친화성을 갖는 1종 이상의 리간드에 접합된 RNAi 작용제를 대상체에게 투여하는 것을 포함하는 방법이 본원에 개시되어 있다.
일부 실시양태에서, 1종 이상의 올리고머성 화합물에 접합된 1종 이상의 αvβ6 인테그린 리간드를 대상체에게 투여하는 것을 포함하는, 올리고머성 화합물을 생체내 배상 세포에 전달하는 방법이 본원에 개시되어 있다. 일부 실시양태에서, 1종 이상의 RNAi 작용제에 접합된 1종 이상의 αvβ6 인테그린 리간드를 대상체에게 투여하는 것을 포함하는, RNAi 작용제를 생체내 배상 세포에 전달하는 방법이 본원에 개시되어 있다. 일부 실시양태에서, 생체내 배상 세포에서의 표적 유전자의 발현을 억제하는 방법으로서, αvβ6 인테그린에 대해 친화성을 갖는 1종 이상의 리간드에 접합된 RNAi 작용제를 대상체에게 투여하는 것을 포함하는 방법이 본원에 개시되어 있다.
일부 실시양태에서, 1종 이상의 올리고머성 화합물에 접합된 1종 이상의 αvβ6 인테그린 리간드를 대상체에게 투여하는 것을 포함하는, 올리고머성 화합물을 생체내 분비성 상피 세포에 전달하는 방법이 본원에 개시되어 있다. 일부 실시양태에서, 1종 이상의 RNAi 작용제에 접합된 1종 이상의 αvβ6 인테그린 리간드를 대상체에게 투여하는 것을 포함하는, RNAi 작용제를 생체내 분비성 상피 세포에 전달하는 방법이 본원에 개시되어 있다. 일부 실시양태에서, 생체내 분비성 상피 세포에서의 표적 유전자의 발현을 억제하는 방법으로서, αvβ6 인테그린에 대해 친화성을 갖는 1종 이상의 리간드에 접합된 RNAi 작용제를 대상체에게 투여하는 것을 포함하는 방법이 본원에 개시되어 있다.
일부 실시양태에서, 1종 이상의 올리고머성 화합물에 접합된 1종 이상의 αvβ6 인테그린 리간드를 대상체에게 투여하는 것을 포함하는, 올리고머성 화합물을 생체내 섬모 상피 세포에 전달하는 방법이 본원에 개시되어 있다. 일부 실시양태에서, 1종 이상의 RNAi 작용제에 접합된 1종 이상의 αvβ6 인테그린 리간드를 대상체에게 투여하는 것을 포함하는, RNAi 작용제를 생체내 섬모 상피 세포에 전달하는 방법이 본원에 개시되어 있다. 일부 실시양태에서, 생체내 섬모 상피 세포에서의 표적 유전자의 발현을 억제하는 방법으로서, αvβ6 인테그린에 대해 친화성을 갖는 1종 이상의 리간드에 접합된 RNAi 작용제를 대상체에게 투여하는 것을 포함하는 방법이 본원에 개시되어 있다.
일부 실시양태에서, 1종 이상의 올리고머성 화합물에 접합된 1종 이상의 αvβ6 인테그린 리간드를 대상체에게 투여하는 것을 포함하는, 올리고머성 화합물을 생체내 각막 상피 세포에 전달하는 방법이 본원에 개시되어 있다. 일부 실시양태에서, 1종 이상의 RNAi 작용제에 접합된 1종 이상의 αvβ6 인테그린 리간드를 대상체에게 투여하는 것을 포함하는, RNAi 작용제를 생체내 각막 상피 세포에 전달하는 방법이 본원에 개시되어 있다. 일부 실시양태에서, 생체내 각막 상피 세포에서의 표적 유전자의 발현을 억제하는 방법으로서, αvβ6 인테그린에 대해 친화성을 갖는 1종 이상의 리간드에 접합된 RNAi 작용제를 대상체에게 투여하는 것을 포함하는 방법이 본원에 개시되어 있다.
일부 실시양태에서, 1종 이상의 올리고머성 화합물에 접합된 1종 이상의 αvβ6 인테그린 리간드를 대상체에게 투여하는 것을 포함하는, 올리고머성 화합물을 생체내 결막 상피 세포에 전달하는 방법이 본원에 개시되어 있다. 일부 실시양태에서, 1종 이상의 RNAi 작용제에 접합된 1종 이상의 αvβ6 인테그린 리간드를 대상체에게 투여하는 것을 포함하는, RNAi 작용제를 생체내 결막 상피 세포에 전달하는 방법이 본원에 개시되어 있다. 일부 실시양태에서, 생체내 결막 상피 세포에서의 표적 유전자의 발현을 억제하는 방법으로서, αvβ6 인테그린에 대해 친화성을 갖는 1종 이상의 리간드에 접합된 RNAi 작용제를 대상체에게 투여하는 것을 포함하는 방법이 본원에 개시되어 있다.
일부 실시양태에서, 1종 이상의 올리고머성 화합물에 접합된 1종 이상의 αvβ6 인테그린 리간드를 대상체에게 투여하는 것을 포함하는, 올리고머성 화합물을 생체내 피부 상피 세포에 전달하는 방법이 본원에 개시되어 있다. 일부 실시양태에서, 1종 이상의 RNAi 작용제에 접합된 1종 이상의 αvβ6 인테그린 리간드를 대상체에게 투여하는 것을 포함하는, RNAi 작용제를 생체내 피부 상피 세포에 전달하는 방법이 본원에 개시되어 있다. 일부 실시양태에서, 생체내 피부 상피 세포에서의 표적 유전자의 발현을 억제하는 방법으로서, αvβ6 인테그린에 대해 친화성을 갖는 1종 이상의 리간드에 접합된 RNAi 작용제를 대상체에게 투여하는 것을 포함하는 방법이 본원에 개시되어 있다.
일부 실시양태에서, 1종 이상의 올리고머성 화합물에 접합된 1종 이상의 αvβ6 인테그린 리간드를 대상체에게 투여하는 것을 포함하는, 올리고머성 화합물을 생체내 담관세포에 전달하는 방법이 본원에 개시되어 있다. 일부 실시양태에서, 1종 이상의 RNAi 작용제에 접합된 1종 이상의 αvβ6 인테그린 리간드를 대상체에게 투여하는 것을 포함하는, RNAi 작용제를 생체내 담관세포에 전달하는 방법이 본원에 개시되어 있다. 일부 실시양태에서, 생체내 담관세포에서의 표적 유전자의 발현을 억제하는 방법으로서, αvβ6 인테그린에 대해 친화성을 갖는 1종 이상의 리간드에 접합된 RNAi 작용제를 대상체에게 투여하는 것을 포함하는 방법이 본원에 개시되어 있다.
일부 실시양태에서, 1종 이상의 올리고머성 화합물에 접합된 1종 이상의 αvβ6 인테그린 리간드를 대상체에게 투여하는 것을 포함하는, 올리고머성 화합물을 생체내 장세포에 전달하는 방법이 본원에 개시되어 있다. 일부 실시양태에서, 1종 이상의 RNAi 작용제에 접합된 1종 이상의 αvβ6 인테그린 리간드를 대상체에게 투여하는 것을 포함하는, RNAi 작용제를 생체내 장세포에 전달하는 방법이 본원에 개시되어 있다. 일부 실시양태에서, 생체내 장세포에서의 표적 유전자의 발현을 억제하는 방법으로서, αvβ6 인테그린에 대해 친화성을 갖는 1종 이상의 리간드에 접합된 RNAi 작용제를 대상체에게 투여하는 것을 포함하는 방법이 본원에 개시되어 있다.
일부 실시양태에서, 1종 이상의 올리고머성 화합물에 접합된 1종 이상의 αvβ6 인테그린 리간드를 대상체에게 투여하는 것을 포함하는, 올리고머성 화합물을 생체내 관상피 세포에 전달하는 방법이 본원에 개시되어 있다. 일부 실시양태에서, 1종 이상의 RNAi 작용제에 접합된 1종 이상의 αvβ6 인테그린 리간드를 대상체에게 투여하는 것을 포함하는, RNAi 작용제를 생체내 관상피 세포에 전달하는 방법이 본원에 개시되어 있다. 일부 실시양태에서, 생체내 관상피 세포에서의 표적 유전자의 발현을 억제하는 방법으로서, αvβ6 인테그린에 대해 친화성을 갖는 1종 이상의 리간드에 접합된 RNAi 작용제를 대상체에게 투여하는 것을 포함하는 방법이 본원에 개시되어 있다.
일부 실시양태에서, 1종 이상의 올리고머성 화합물에 접합된 1종 이상의 αvβ6 인테그린 리간드를 대상체에게 투여하는 것을 포함하는, 올리고머성 화합물을 생체내 선상피 세포에 전달하는 방법이 본원에 개시되어 있다. 일부 실시양태에서, 1종 이상의 RNAi 작용제에 접합된 1종 이상의 αvβ6 인테그린 리간드를 대상체에게 투여하는 것을 포함하는, RNAi 작용제를 생체내 선상피 세포에 전달하는 방법이 본원에 개시되어 있다. 일부 실시양태에서, 생체내 선상피 세포에서의 표적 유전자의 발현을 억제하는 방법으로서, αvβ6 인테그린에 대해 친화성을 갖는 1종 이상의 리간드에 접합된 RNAi 작용제를 대상체에게 투여하는 것을 포함하는 방법이 본원에 개시되어 있다.
일부 실시양태에서, 1종 이상의 올리고머성 화합물에 접합된 1종 이상의 αvβ6 인테그린 리간드를 대상체에게 투여하는 것을 포함하는, 올리고머성 화합물을 생체내 신세관에 전달하는 방법이 본원에 개시되어 있다. 일부 실시양태에서, 1종 이상의 RNAi 작용제에 접합된 1종 이상의 αvβ6 인테그린 리간드를 대상체에게 투여하는 것을 포함하는, RNAi 작용제를 생체내 신세관에 전달하는 방법이 본원에 개시되어 있다. 일부 실시양태에서, 생체내 신세관에서의 표적 유전자의 발현을 억제하는 방법으로서, αvβ6 인테그린에 대해 친화성을 갖는 1종 이상의 리간드에 접합된 RNAi 작용제를 대상체에게 투여하는 것을 포함하는 방법이 본원에 개시되어 있다.
일부 실시양태에서, 1종 이상의 올리고머성 화합물에 접합된 1종 이상의 αvβ6 인테그린 리간드를 대상체에게 투여하는 것을 포함하는, 올리고머성 화합물을 생체내 상피 종양 (암종)에 전달하는 방법이 본원에 개시되어 있다. 일부 실시양태에서, 1종 이상의 RNAi 작용제에 접합된 1종 이상의 αvβ6 인테그린 리간드를 대상체에게 투여하는 것을 포함하는, RNAi 작용제를 생체내 상피 종양 (암종)에 전달하는 방법이 본원에 개시되어 있다. 일부 실시양태에서, 생체내 상피 종양 (암종)에서의 표적 유전자의 발현을 억제하는 방법으로서, αvβ6 인테그린에 대해 친화성을 갖는 1종 이상의 리간드에 접합된 RNAi 작용제를 대상체에게 투여하는 것을 포함하는 방법이 본원에 개시되어 있다.
본원에 사용된 용어 "알킬"은 달리 명시되지 않는 한 1 내지 10개의 탄소 원자를 갖는, 직쇄 또는 분지형의 포화 지방족 탄화수소 기를 지칭한다. 예를 들어, "C1-C6 알킬"은 선형 또는 분지형 배열의 1, 2, 3, 4, 5 또는 6개의 탄소를 갖는 알킬 기를 포함한다. 알킬 기의 비제한적 예는 메틸, 에틸, 이소-프로필, tert-부틸, n-헥실을 포함한다. 본원에 사용된 용어 "아미노알킬"은 정상 원자가에 의해 허용될 때 임의의 위치에서 1개 이상의 아미노 기로 치환된, 상기 정의된 바와 같은 알킬 기를 지칭한다. 아미노 기는 비치환, 일치환 또는 이치환될 수 있다. 아미노알키 기의 비제한적 예는 아미노메틸, 디메틸아미노메틸 및 2-아미노프로프-1-일을 포함한다.
본원에 사용된 용어 "시클로알킬"은 달리 명시되지 않는 한 3 내지 14개의 탄소 원자를 갖는 포화 또는 불포화 비방향족 탄화수소 고리 기를 의미한다. 시클로알킬 기의 비제한적 예는 시클로프로필, 메틸-시클로프로필, 2,2-디메틸-시클로부틸, 2-에틸-시클로펜틸 및 시클로헥실을 포함하나 이에 제한되지는 않는다. 시클로알킬은 다중 스피로- 또는 융합 고리를 포함할 수 있다. 시클로알킬 기는 정상 원자가에 의해 허용될 때 임의의 위치에서 임의로 일치환, 이치환, 삼치환, 사치환 또는 오치환된다.
본원에 사용된 용어 "알케닐"은 달리 명시되지 않는 한 적어도 1개의 탄소-탄소 이중 결합을 함유하며 2 내지 10개의 탄소 원자를 갖는, 직쇄형 또는 분지형의 비-방향족 탄화수소 라디칼을 지칭한다. 5개 이하의 탄소-탄소 이중 결합이 이러한 기에 존재할 수 있다. 예를 들어, "C2-C6" 알케닐은 2 내지 6개의 탄소 원자를 갖는 알케닐 라디칼로서 정의된다. 알케닐 기의 예는 에테닐, 프로페닐, 부테닐 및 시클로헥세닐을 포함하나 이에 제한되지는 않는다. 알케닐 기의 직쇄형, 분지형 또는 시클릭 부분은 이중 결합을 함유할 수 있으며, 정상 원자가에 의해 허용될 때 임의의 위치에서 임의로 일치환, 이치환, 삼치환, 사치환 또는 오치환된다. 용어 "시클로알케닐"은 명시된 수의 탄소 원자 및 적어도 1개의 탄소-탄소 이중 결합을 갖는 모노시클릭 탄화수소 기를 의미한다.
본원에 사용된 용어 "알키닐"은 달리 명시되지 않는 한 2 내지 10개의 탄소 원자를 함유하며 적어도 1개의 탄소-탄소 삼중 결합을 함유하는, 직쇄형 또는 분지형 탄화수소 라디칼을 지칭한다. 5개 이하의 탄소-탄소 삼중 결합이 존재할 수 있다. 따라서, "C2-C6 알키닐"은 2 내지 6개의 탄소 원자를 갖는 알키닐 라디칼을 의미한다. 알키닐 기의 예는 에티닐, 2-프로피닐 및 2-부티닐을 포함하나 이에 제한되지는 않는다. 알키닐 기의 직쇄형 또는 분지형 부분은 정상 원자가에 의해 허용될 때 임의의 위치에서 임의로 일치환, 이치환, 삼치환, 사치환 또는 오치환될 수 있다.
본원에 사용된 "알콕실" 또는 "알콕시"는 나타낸 수의 탄소 원자를 갖는 -O-알킬 라디칼을 지칭한다. 예를 들어, C1-6 알콕시는 C1, C2, C3, C4, C5 및 C6 알콕시 기를 포함하도록 의도된다. 예를 들어, C1-8 알콕시는 C1, C2, C3, C4, C5, C6, C7 및 C8 알콕시 기를 포함하도록 의도된다. 알콕시의 예는 메톡시, 에톡시, n-프로폭시, i-프로폭시, n-부톡시, s-부톡시, t-부톡시, n-펜톡시, s-펜톡시, n-헵톡시 및 n-옥톡시를 포함하나 이에 제한되지는 않는다.
본원에 사용된 "케토"는 카르보닐 가교를 통해 부착된, 본원에 정의된 바와 같은 임의의 알킬, 알케닐, 알키닐, 시클로알킬, 시클로알케닐, 헤테로시클릴, 헤테로아릴, 또는 아릴 기를 지칭한다. 케토 기의 예는 알카노일 (예를 들어, 아세틸, 프로피오닐, 부타노일, 펜타노일 또는 헥사노일), 알케노일 (예를 들어, 아크릴로일), 알키노일 (예를 들어, 에티노일, 프로피노일, 부티노일, 펜티노일 또는 헥시노일), 아릴로일 (예를 들어, 벤조일), 헤테로아릴로일 (예를 들어, 피롤로일, 이미다졸로일, 퀴놀리노일 또는 피리디노일)을 포함하나 이에 제한되지는 않는다.
본원에 사용된 "알콕시카르보닐"은 카르보닐 가교를 통해 부착된, 상기 정의된 바와 같은 임의의 알콕시 기 (즉, -C(O)O-알킬)를 지칭한다. 알콕시카르보닐 기의 예는 메톡시카르보닐, 에톡시카르보닐, 이소-프로폭시카르보닐, n-프로폭시카르보닐, t-부톡시카르보닐, 벤질옥시카르보닐 또는 n-펜톡시카르보닐을 포함하나 이에 제한되지는 않는다.
본원에 사용된 "아릴옥시카르보닐"은 옥시카르보닐 가교를 통해 부착된, 본원에 정의된 바와 같은 임의의 아릴 기 (즉, -C(O)O-아릴)를 지칭한다. 아릴옥시카르보닐 기의 예는 페녹시카르보닐 및 나프틸옥시카르보닐을 포함하나 이에 제한되지는 않는다.
본원에 사용된 "헤테로아릴옥시카르보닐"은 옥시카르보닐 가교를 통해 부착된, 본원에 정의된 바와 같은 임의의 헤테로아릴 기 (즉, -C(O)O-헤테로아릴)를 지칭한다. 헤테로아릴옥시카르보닐 기의 예는 2-피리딜옥시카르보닐, 2-옥사졸릴옥시카르보닐, 4-티아졸릴옥시카르보닐 또는 피리미디닐옥시카르보닐을 포함하나 이에 제한되지는 않는다.
본원에 사용된 "아릴" 또는 "방향족"은 각각의 고리에 6개 이하의 원자를 가지며, 여기서 적어도 1개의 고리는 방향족인, 임의의 안정한 모노시클릭 또는 폴리시클릭 탄소 고리를 의미한다. 아릴 기의 예는 페닐, 나프틸, 안트라세닐, 테트라히드로나프틸, 인다닐 및 비페닐을 포함하나 이에 제한되지는 않는다. 아릴 치환기가 비시클릭이고 1개의 고리가 비-방향족인 경우에, 방향족 고리를 통해 부착이 이루어지는 것으로 이해된다. 아릴 기는 정상 원자가에 의해 허용될 때 임의의 위치에서 임의로 일치환, 이치환, 삼치환, 사치환 또는 오치환된다.
본원에 사용된 용어 "헤테로아릴"은 각각의 고리에 7개 이하의 원자를 가지며, 여기서 적어도 1개의 고리는 방향족이고, O, N 및 S로 이루어진 군으로부터 선택된 1 내지 4개의 헤테로원자를 함유하는 것인, 안정한 모노시클릭 또는 폴리시클릭 고리를 나타낸다. 헤테로아릴 기의 예는 아크리디닐, 카르바졸릴, 신놀리닐, 퀴녹살리닐, 피라졸릴, 인돌릴, 벤조트리아졸릴, 푸라닐, 티에닐, 벤조티에닐, 벤조푸라닐, 벤즈이미다졸로닐, 벤족사졸로닐, 퀴놀리닐, 이소퀴놀리닐, 디히드로이소인돌로닐, 이미다조피리디닐, 이소인돌로닐, 인다졸릴, 옥사졸릴, 옥사디아졸릴, 이속사졸릴, 인돌릴, 피라지닐, 피리다지닐, 피리디닐, 피리미디닐, 피롤릴 및 테트라히드로퀴놀린을 포함하나 이에 제한되지는 않는다. "헤테로아릴"은 또한 임의의 질소-함유 헤테로아릴의 N-옥시드 유도체를 포함하는 것으로 이해된다. 헤테로아릴 치환기가 비시클릭이고 1개의 고리가 비-방향족이거나 또는 헤테로원자를 함유하지 않는 경우에, 방향족 고리 또는 헤테로원자 함유 고리를 통해 부착이 이루어지는 것으로 이해된다. 헤테로아릴 기는 정상 원자가에 의해 허용될 때 임의의 위치에서 임의로 일치환, 이치환, 삼치환, 사치환 또는 오치환된다.
본원에 사용된 용어 "헤테로사이클", "헤테로시클릭" 또는 "헤테로시클릴"은 폴리시클릭 기를 포함한, O, N 및 S로 이루어진 군으로부터 선택된 1 내지 4개의 헤테로원자를 함유하는 3- 내지 14-원 방향족 또는 비방향족 헤테로사이클을 의미한다. 본원에 사용된 용어 "헤테로시클릭"은 또한 용어 "헤테로사이클" 및 "헤테로시클릴"과 동의어인 것으로 간주되며, 또한 본원에 제시된 동일한 정의를 갖는 것으로 이해된다. "헤테로시클릴"은 상기 언급된 헤테로아릴, 뿐만 아니라 그의 디히드로 및 테트라히드로 유사체를 포함한다. 헤테로시클릴 기의 예는 아제티디닐, 벤조이미다졸릴, 벤조푸라닐, 벤조푸라자닐, 벤조피라졸릴, 벤조트리아졸릴, 벤조티오페닐, 벤족사졸릴, 카르바졸릴, 카르볼리닐, 신놀리닐, 푸라닐, 이미다졸릴, 인돌리닐, 인돌릴, 인돌라지닐, 인다졸릴, 이소벤조푸라닐, 이소인돌릴, 이소퀴놀릴, 이소티아졸릴, 이속사졸릴, 나프트피리디닐, 옥사디아졸릴, 옥소옥사졸리디닐, 옥사졸릴, 옥사졸린, 옥소피페라지닐, 옥소피롤리디닐, 옥소모르폴리닐, 이속사졸린, 옥세타닐, 피라닐, 피라지닐, 피라졸릴, 피리다지닐, 피리도피리디닐, 피리다지닐, 피리딜, 피리디노닐, 피리미딜, 피리미디노닐, 피롤릴, 퀴나졸리닐, 퀴놀릴, 퀴녹살리닐, 테트라히드로피라닐, 테트라히드로푸라닐, 테트라히드로티오피라닐, 테트라히드로이소퀴놀리닐, 테트라졸릴, 테트라졸로피리딜, 티아디아졸릴, 티아졸릴, 티에닐, 트리아졸릴, 1,4-디옥사닐, 헥사히드로아제피닐, 피페라지닐, 피페리디닐, 피리딘-2-오닐, 피롤리디닐, 모르폴리닐, 티오모르폴리닐, 디히드로벤조이미다졸릴, 디히드로벤조푸라닐, 디히드로벤조티오페닐, 디히드로벤족사졸릴, 디히드로푸라닐, 디히드로이미다졸릴, 디히드로인돌릴, 디히드로이소옥사졸릴, 디히드로이소티아졸릴, 디히드로옥사디아졸릴, 디히드로옥사졸릴, 디히드로피라지닐, 디히드로피라졸릴, 디히드로피리디닐, 디히드로피리미디닐, 디히드로피롤릴, 디히드로퀴놀리닐, 디히드로테트라졸릴, 디히드로티아디아졸릴, 디히드로티아졸릴, 디히드로티에닐, 디히드로트리아졸릴, 디히드로아제티디닐, 디옥시도티오모르폴리닐, 메틸렌디옥시벤조일, 테트라히드로푸라닐 및 테트라히드로티에닐, 및 그의 N-옥시드를 포함하나 이에 제한되지는 않는다. 헤테로시클릴 치환기의 부착은 탄소 원자 또는 헤테로원자를 통해 발생할 수 있다. 헤테로시클릴 기는 정상 원자가에 의해 허용될 때 임의의 위치에서 임의로 일치환, 이치환, 삼치환, 사치환 또는 오치환된다.
본원에 사용된 용어 "치료하다", "치료" 등은 대상체에서 질환 또는 상태의 1종 이상의 증상의 수, 중증도 및/또는 빈도의 경감 또는 완화를 제공하기 위해 취해지는 방법 또는 단계를 의미한다.
달리 언급되지 않는 한, 본원에 사용된 기호
Figure 112019043490420-pct00002
의 사용은 본원에 기재된 본 발명의 범주에 따라 임의의 기 또는 기들이 상기 기호에 연결될 수 있다는 것을 의미한다.
본원에 사용된 용어 "이성질체"는 동일한 분자식을 갖지만, 그의 원자의 성질 또는 결합 순서에 있어서 또는 그의 원자의 공간 배열에 있어서 상이한 화합물을 지칭한다. 그의 원자의 공간 배열이 상이한 이성질체는 "입체이성질체"로 칭해진다. 서로 거울상이 아닌 입체이성질체는 "부분입체이성질체"로 칭해지고, 중첩가능하지 않은 거울상인 입체이성질체는 "거울상이성질체" 또는 때때로 광학 이성질체로 칭해진다. 4개의 동일하지 않은 치환기에 결합된 탄소 원자는 "키랄 중심"으로 칭해진다.
본원에 사용된 연결기는 하나의 분자 또는 분자의 부분을 또 다른 내지 제2 분자 또는 분자의 제2 부분에 연계시키는 1개 이상의 원자이다. 관련 기술분야에서, 연결기 및 스페이서라는 용어는 때때로 상호교환가능하게 사용된다. 유사하게, 관련 기술분야에서 사용되는 바와 같이, 스캐폴드라는 용어가 때때로 연결기와 상호교환가능하게 사용된다. 일부 실시양태에서, 연결기는 펩티드-절단가능한 연결기를 포함할 수 있다. 일부 실시양태에서, 연결기는 펩티드 FCitFP (서열식별번호: 131)를 포함할 수 있거나 또는 그로 이루어질 수 있다.
본원에 사용된 용어 "연결된"은, 2개의 분자 사이의 연계를 지칭하는 경우에, 2개의 분자가 공유 결합에 의해 이어지거나 또는 2개의 분자가 비공유 결합 (예를 들어, 수소 결합 또는 이온 결합)을 통해 회합되는 것을 의미한다. 일부 예에서, 용어 "연결된"이 비공유 결합을 통한 2개의 분자 사이의 회합을 지칭하는 경우에, 2개의 상이한 분자 사이의 회합은 생리학상 허용되는 완충제 (예를 들어, 포스페이트 완충 염수) 중에서 1 x 10-4 M 미만 (예를 들어, 1 x 10-5 M 미만, 1 x 10-6 M 미만, 또는 1 x 10-7 M 미만)의 KD를 갖는다. 언급되지 않는 한, 본원에 사용된 용어 연결된은 임의의 개재 원자 또는 원자단을 갖거나 또는 갖지 않는, 제1 화합물과 제2 화합물 사이의 연계를 지칭할 수 있다.
본원에 사용된 "표준 아미노산" 또는 "천연 아미노산"은 알라닌, 시스테인, 아스파르트산 (아스파르테이트), 글루탐산 (글루타메이트), 페닐알라닌, 글리신, 히스티딘, 이소류신, 리신, 류신, 메티오닌, 아스파라긴, 프롤린, 글루타민, 아르기닌, 세린, 트레오닌, 발린, 트립토판, 티로신을 포함한다.
본원에 사용된 "비-표준 아미노산"은 셀레노시스테인, 피롤리신, N-포르밀메티오닌, 히드록시프롤린, 셀레노메티오닌, α-아미노-이소부티르산 (Aib), L-α-아미노-부티르산 (Abu), α,γ-디아미노부티르산, 데히드로알라닌, 노르류신, 알로이소류신, t-류신, α-아미노-n-헵탄산, α,β-디아미노프로피온산, β-N-옥살릴-α,β-디아미노프로피온산, 알로트레오닌, 호모시스테인, 호모세린, β-호모-알라닌 (β3-hA), 이소발린, 노르발린 (Nva), 시트룰린 (Cit), 오르니틴, α-메틸-아스파르테이트 (αMeD), α-메틸-류신 (αMeL), N-메틸 알라닌, N-메틸-글리신 (NMeG), N-메틸 류신 (NMeL), β-시클로헥실-알라닌 (Cha), N-에틸 알라닌, N,N-ε-디메틸 리신 (K(Me)2), 디메틸 아르기닌 (R(Me)2), Dap(Ac), n-알킬화된 L-α 아미노산, 및 자연 발생 아미노산과 유사한 방식으로 기능하는 다른 아미노산 유사체 또는 아미노산 모방체를 포함하나 이에 제한되지는 않는다.
본원에 사용되는 바와 같이, 비대칭 중심이 존재하며, 따라서 거울상이성질체, 부분입체이성질체 또는 다른 입체이성질체 배위를 발생시키는 각각의 구조에 대해, 특정한 입체형태를 갖는 것으로 구조에서 구체적으로 확인되지 않는 한, 본원에 개시된 각각의 구조는 그의 광학적으로 순수한 형태 및 라세미 형태를 포함한, 모든 이러한 가능한 이성질체를 나타내는 것으로 의도된다. 예를 들어, 본원에 개시된 구조는 부분입체이성질체의 혼합물 뿐만 아니라 단일 입체이성질체를 포함하도록 의도된다.
관련 기술분야의 통상의 기술자라면, 본원에 개시된 화합물 또는 조성물이 위치하는 환경에 따라, 화합물 및 조성물이 특정 원자 (예를 들어, N, O 또는 S 원자)를 양성자화 또는 탈양성자화된 상태로 가질 수 있다는 것을 용이하게 이해하고 인지할 것이다. 따라서, 본원에 사용되는 바와 같이, 본원에 개시된 구조는 특정 관능기, 예컨대, 예를 들어, OH, SH 또는 NH가 양성자화 또는 탈양성자화될 수 있는 것으로 고려된다. 본원의 개시내용은, 관련 기술분야의 통상의 기술자에 의해 용이하게 이해되는 바와 같이, 개시된 화합물 및 조성물을 환경의 pH에 기반한 그의 양성자화 상태와 상관없이 포함하도록 의도된다.
본원의 청구항에 사용된 어구 "로 이루어진"은 그 청구항에 명시되지 않은 임의의 요소, 단계 또는 성분을 배제한다. 본원의 청구항에 사용되는 경우에, 어구 "로 본질적으로 이루어진"은 청구항의 범주를 명시된 물질 또는 단계 및 청구된 발명의 기본적이며 신규한 특징(들)에 실질적으로 영향을 미치지 않는 것들로 제한한다.
달리 정의되지 않는 한, 본원에 사용된 모든 기술 과학 용어는 본 발명이 속하는 기술분야의 통상의 기술자가 통상적으로 이해하는 것과 동일한 의미를 갖는다. 본원에 기재된 것들과 유사하거나 또는 등가의 방법 및 물질이 본 발명의 실시 또는 시험에 사용될 수 있지만, 적합한 방법 및 물질이 하기 기재된다. 본원에 언급된 모든 간행물, 특허 출원, 특허 및 다른 참고문헌은 그 전문이 참조로 포함된다. 상충하는 경우에, 정의를 포함하여 본 명세서가 우선할 것이다. 추가로, 물질, 방법 및 실시예는 단지 예시적인 것으로, 제한하는 것으로 의도되지 않는다.
약동학은 펩티드-기반 약물 제품 및 펩티드를 포함하는 제약 조성물에 있어서 일반적 관심사이다. 예를 들어, 많은 펩티드는 효소적 분해로 인해 수분 넘게 혈액 중에서 순환하지 않는다. 이는 종종 치료제로서의 또는 약물 제품의 구성요소로서의 그의 유용성을 유의하게 감소시키거나 또는 심지어 방해한다.
다양한 혈청 제제에서의 안정성 연구 (예를 들어, 혈청 및/또는 혈장에서의 펩티드의 시험관내 분해를 측정함)는 펩티드-기반 약물 개발에서 중요한 스크리닝 검정이 되었다. 특히 이러한 연구에 의해 제시된 바와 같이, 본원에 개시된 αvβ6 인테그린 리간드는 혈청에서 안정적이고, αvβ6 인테그린에 대한 친화성을 갖거나 또는 그에 결합할 수 있다.
본 발명의 다른 특색 및 이점은 하기 상세한 설명 및 청구범위로부터 명백할 것이다.
도 1은 테트라플루오로페닐 (TFP) 에스테르로서 합성된, 본원에 개시된 αvβ6 인테그린 리간드의 한 예의 화학 구조를 나타낸다. αvβ6 인테그린 리간드는 PEG20 (20개의 에틸렌 옥시드 (CH2-CH2-O) 단위) 및 FCitFP 연결기를 포함한다.
도 2는 테트라플루오로페닐 (TFP) 에스테르로서 합성된, 본원에 개시된 αvβ6 인테그린 리간드의 한 예의 화학 구조를 나타낸다. αvβ6 인테그린 리간드는 PEG5 (5개의 에틸렌 옥시드 (CH2-CH2-O) 단위)를 포함한다.
도 3은 아민-말단 캡으로서의 CH3CO, PEG20 및 FCitFP 연결기를 포함하는, 본원에 개시된 αvβ6 인테그린 리간드의 한 예의 화학 구조를 나타낸다.
도 4는 아민-말단 캡으로서의 CH3CO 및 PEG5를 포함하는, 본원에 개시된 αvβ6 인테그린 리간드의 한 예의 화학 구조를 나타낸다.
도 5는 아민-말단 캡을 갖지 않는, 본원에 개시된 αvβ6 인테그린 리간드의 한 예의 화학 구조를 나타낸다. αvβ6 인테그린 리간드는 PEG20 및 FCitFP 연결기를 포함한다.
도 6은 아민-말단 캡을 갖지 않는, 본원에 개시된 αvβ6 인테그린 리간드의 한 예의 화학 구조를 나타낸다. αvβ6 인테그린 리간드는 PEG5를 포함한다.
도 7은 아민-말단 캡으로서의 CH3CO를 포함하는, 본원에 개시된 αvβ6 인테그린 리간드의 한 예의 화학 구조를 나타낸다.
도 8은 아민-말단 캡으로서의 CH3CO, PEG20 및 FCitFP 연결기를 포함하는, 본원에 개시된 αvβ6 인테그린 리간드의 한 예의 화학 구조를 나타낸다. 20 킬로달톤 (kDa)의 PEG 모이어티가 구조에 추가로 제시되어 있다.
도 9는 아민-말단 캡으로서의 CH3CO, PEG20 및 FCitFP 연결기를 포함하는, 본원에 개시된 αvβ6 인테그린 리간드의 한 예의 화학 구조를 나타낸다. 20 킬로달톤 (kDa)의 PEG 모이어티가 구조에 추가로 제시되어 있으며, 구조는 올리고머성 화합물, 예컨대 RNAi 작용제에 연결된 것으로 제시되어 있다.
도 10은 아민-말단 캡으로서의 CH3CO 및 비스-글루탐산 스캐폴드에 연결된 PEG5 및 PEG-아지드 반응성 기를 포함하는, 본원에 개시된 세자리 αvβ6 인테그린 리간드의 한 예의 화학 구조를 나타낸다.
도 11은 아민-말단 캡으로서의 CH3CO 및 비스-글루탐산 스캐폴드에 연결된 PEG5를 포함하는, 본원에 개시된 세자리 αvβ6 인테그린 리간드의 한 예의 화학 구조를 나타낸다.
도 12는 표적화 리간드를 갖지 않는 네이키드 알파-ENaC RNAi 작용제 및 폴리-L-리신 스캐폴드 및 도 4의 구조에 의해 나타내어진 αvβ6 인테그린 리간드에 접합된 동일한 알파-ENaC RNAi 작용제의 스프라그-돌리 래트에서의 래트 전체 폐 알파 ENaC 발현을 제시하는 그래프이다.
혈청 안정성 및 αvβ6 인테그린에 대한 친화성을 갖는 신규, 조작된 비-자연 발생의 펩티드-기반 αvβ6 인테그린 리간드가 본원에 기재되어 있다. αvβ6 인테그린 리간드는 시험관내, 상피내, 생체외 및/또는 생체내 αvβ6 인테그린 발현 세포를 표적화하는데 사용될 수 있다. 일부 실시양태에서, αvβ6 인테그린 리간드는 1종 이상의 화물 분자에 접합되어, 화물 분자를 시험관내, 상피내, 생체외 및/또는 생체내 αvβ6 인테그린 발현 세포로 유도할 수 있다. 일부 실시양태에서, 화물 분자는 제약 활성 화합물을 포함하거나 또는 그로 이루어진다. 일부 실시양태에서, 본원에 개시된 αvβ6 인테그린 리간드는 화물 분자에 접합되어, 화물 분자를 생체내 상피 세포로 유도한다.
일부 실시양태에서, αvβ6 인테그린 리간드는 하기를 포함하며:
Z-RG1DLXaa1Xaa2L (서열식별번호: 85) (화학식 I)
여기서
Z는 아민-말단 캡 (예를 들어, 본원에 기재되어 있거나 또는 관련 기술분야에 공지된 임의의 아민-말단 캡)이고;
R은 L-아르기닌이고;
G1은 L-글리신 또는 N-메틸 글리신이고;
D는 L-아스파르트산 (L-아스파르테이트)이고;
L은 L-류신이고;
Xaa1은 L-α 아미노산 (예를 들어, 본원에 기재되어 있거나 또는 관련 기술분야에 공지된 임의의 L-α 아미노산), L-β 아미노산 (예를 들어, 본원에 기재되어 있거나 또는 관련 기술분야에 공지된 임의의 L-β 아미노산) 또는 α,α-이치환된 아미노산 (예를 들어, 본원에 기재되어 있거나 또는 관련 기술분야에 공지된 임의의 α,α-이치환된 아미노산)이고;
Xaa2는 L-α 아미노산 (예를 들어, 본원에 기재되어 있거나 또는 관련 기술분야에 공지된 임의의 L-α 아미노산), L-β 아미노산 (예를 들어, 본원에 기재되어 있거나 또는 관련 기술분야에 공지된 임의의 L-β 아미노산) 또는 α,α-이치환된 아미노산 (예를 들어, 본원에 기재되어 있거나 또는 관련 기술분야에 공지된 임의의 α,α-이치환된 아미노산)이다.
일부 실시양태에서, 화학식 I의 아민-말단 캡 (Z)은 CH3CO (또한 본원에서 'Ac'로 지칭됨)를 포함한다. 일부 실시양태에서, 화학식 I의 아민-말단 캡 (Z)은 CH3CO이다.
일부 실시양태에서, αvβ6 인테그린 리간드는 하기를 포함하며:
R'G1DLXaa1Xaa2L (서열식별번호: 98) (화학식 Ia)
여기서
R'는 Dap(구아니디노)이고;
G1, D, L, Xaa1 및 Xaa2는 각각 본원의 화학식 I에 대해 정의된 바와 같다.
일부 실시양태에서, αvβ6 인테그린 리간드는 하기 화학식을 포함하며:
Z-RG1DLXaa1XaauL (서열식별번호: 99) (화학식 Ib)
여기서
Z, R, G1, D, L 및 Xaa1은 각각 본원의 화학식 I에 대해 정의된 바와 같고;
Xaau는 비-표준 아미노산이다.
일부 실시양태에서, αvβ6 인테그린 리간드는 하기 화학식을 포함하며:
Z-RG1DLAXaauL (서열식별번호: 90) (화학식 Ic)
여기서
Z, R, G1, D 및 L은 각각 본원의 화학식 I에 대해 정의된 바와 같고;
A는 L-알라닌이고;
Xaau는 비-표준 아미노산이다.
일부 실시양태에서, 하기를 포함하는 αvβ6 인테그린 리간드가 기재되어 있으며:
Z-RG1DLXaa1Xaa2L-J-R1 (서열식별번호: 86) (화학식 II)
여기서
Z는 아민-말단 캡 (예를 들어, 본원에 기재되어 있거나 또는 관련 기술분야에 공지된 임의의 아민-말단 캡)이고;
R은 L-아르기닌이고;
G1은 L-글리신 또는 N-메틸 글리신이고;
D는 L-아스파르트산 (L-아스파르테이트)이고;
L은 L-류신이고;
Xaa1은 L-α 아미노산 (예를 들어, 본원에 기재되어 있거나 또는 관련 기술분야에 공지된 임의의 L-α 아미노산), L-β 아미노산 (예를 들어, 본원에 기재되어 있거나 또는 관련 기술분야에 공지된 임의의 L-β 아미노산) 또는 α,α-이치환된 아미노산 (예를 들어, 본원에 기재되어 있거나 또는 관련 기술분야에 공지된 임의의 α,α-이치환된 아미노산)이고;
Xaa2는 L-α 아미노산 (예를 들어, 본원에 기재되어 있거나 또는 관련 기술분야에 공지된 임의의 L-α 아미노산), L-β 아미노산 (예를 들어, 본원에 기재되어 있거나 또는 관련 기술분야에 공지된 임의의 L-β 아미노산) 또는 α,α-이치환된 아미노산 (예를 들어, 본원에 기재되어 있거나 또는 관련 기술분야에 공지된 임의의 α,α-이치환된 아미노산)이고;
J는 임의적이며, 존재하는 경우에, 1종 이상 (예를 들어, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 21, 22, 23, 24, 25, 26, 27, 28, 29 또는 30; 또는 1 내지 30, 1 내지 25, 1 내지 20, 1 내지 15, 1 내지 10, 1 내지 5, 5 내지 30, 5 내지 25, 5 내지 20, 5 내지 15, 5 내지 10, 10 내지 30, 10 내지 25, 10 내지 20, 10 내지 15, 15 내지 30, 15 내지 25, 15 내지 20, 20 내지 30, 20 내지 25 또는 25 내지 30종)의 L-α 아미노산 (예를 들어, 본원에 기재되어 있거나 또는 관련 기술분야에 공지된 임의의 L-α 아미노산), L-β 아미노산 (예를 들어, 본원에 기재되어 있거나 또는 관련 기술분야에 공지된 임의의 L-β 아미노산) 또는 α,α-이치환된 아미노산 (예를 들어, 본원에 기재되어 있거나 또는 관련 기술분야에 공지된 임의의 α,α-이치환된 아미노산) 또는 그의 조합을 포함하고;
R1은 임의적이며, 존재하는 경우에, PEG 및/또는 연결기를 포함한다.
일부 실시양태에서 L은 아미드 결합을 통해 J에 연결된다.
일부 실시양태에서, 하기를 포함하는 αvβ6 인테그린 리간드가 기재되어 있으며:
R'G1DLXaa1Xaa2L-J-R1 (서열식별번호: 100) (화학식 IIa)
여기서
R'는 Dap(구아니디노)이고;
G1, D, L, Xaa1, Xaa2, J 및 R1은 각각 본원의 화학식 II에 대해 정의된 바와 같다.
일부 실시양태에서 L은 아미드 결합을 통해 J에 연결된다.
일부 실시양태에서, 하기를 포함하는 αvβ6 인테그린 리간드는 반응성 기 또는 보호된 반응성 기를 포함할 수 있으며:
Z-RG1DLXaa1Xaa2L-J-R1-R2 (서열식별번호: 87) (화학식 III)
여기서
Z는 아민-말단 캡 (예를 들어, 본원에 기재되어 있거나 또는 관련 기술분야에 공지된 임의의 아민-말단 캡)이고;
R은 L-아르기닌이고;
G1은 L-글리신 또는 N-메틸 글리신이고;
D는 L-아스파르트산 (L-아스파르테이트)이고;
L은 L-류신이고;
Xaa1은 L-α 아미노산 (예를 들어, 본원에 기재되어 있거나 또는 관련 기술분야에 공지된 임의의 L-α 아미노산), L-β 아미노산 (예를 들어, 본원에 기재되어 있거나 또는 관련 기술분야에 공지된 임의의 L-β 아미노산) 또는 α,α-이치환된 아미노산 (예를 들어, 본원에 기재되어 있거나 또는 관련 기술분야에 공지된 임의의 α,α-이치환된 아미노산)이고;
Xaa2는 L-α 아미노산 (예를 들어, 본원에 기재되어 있거나 또는 관련 기술분야에 공지된 임의의 L-α 아미노산), L-β 아미노산 (예를 들어, 본원에 기재되어 있거나 또는 관련 기술분야에 공지된 임의의 L-β 아미노산) 또는 α,α-이치환된 아미노산 (예를 들어, 본원에 기재되어 있거나 또는 관련 기술분야에 공지된 임의의 α,α-이치환된 아미노산)이고;
J는 임의적이며, 존재하는 경우에, 1종 이상 (예를 들어, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 21, 22, 23, 24, 25, 26, 27, 28, 29 또는 30; 또는 1 내지 30, 1 내지 25, 1 내지 20, 1 내지 15, 1 내지 10, 1 내지 5, 5 내지 30, 5 내지 25, 5 내지 20, 5 내지 15, 5 내지 10, 10 내지 30, 10 내지 25, 10 내지 20, 10 내지 15, 15 내지 30, 15 내지 25, 15 내지 20, 20 내지 30, 20 내지 25 또는 25 내지 30종)의 L-α 아미노산 (예를 들어, 본원에 기재되어 있거나 또는 관련 기술분야에 공지된 임의의 L-α 아미노산), L-β 아미노산 (예를 들어, 본원에 기재되어 있거나 또는 관련 기술분야에 공지된 임의의 L-β 아미노산) 또는 α,α-이치환된 아미노산 (예를 들어, 본원에 기재되어 있거나 또는 관련 기술분야에 공지된 임의의 α,α-이치환된 아미노산) 또는 그의 조합을 포함하고;
R1은 임의적이며, 존재하는 경우에, PEG 및/또는 연결기를 포함하고,
R2는 반응성 기 또는 보호된 반응성 기를 포함한다.
반응성 기 또는 보호된 반응성 기는 αvβ6 인테그린 리간드를 관심 분자, 즉 화물 분자에 부착시키는데 사용될 수 있다. 일부 실시양태에서, L은 아미드 결합을 통해 J에 연결된다.
일부 실시양태에서, 하기 화학식을 포함하는, 반응성 기 또는 보호된 반응성 기를 갖는 αvβ6 인테그린 리간드가 합성되며:
R'G1DLXaa1Xaa2L-J-R1-R2 (서열식별번호: 101) (화학식 IIIa)
여기서
R'는 Dap(구아니디노)이고;
G1, D, L, Xaa1, Xaa2, J, R1 및 R2는 각각 본원의 화학식 III에 대해 정의된 바와 같다.
일부 실시양태에서, 하기를 포함하는 1종 이상의 αvβ6 인테그린 리간드(들)는 1종 이상의 화물 분자(들)에 접합될 수 있으며:
(Z-RG1DLXaa1Xaa2L-J-R1)n-R3 (서열식별번호: 88) (화학식 IV)
여기서
Z는 아민-말단 캡 (예를 들어, 본원에 기재되어 있거나 또는 관련 기술분야에 공지된 임의의 아민-말단 캡)이고;
R은 L-아르기닌이고;
G1은 L-글리신 또는 N-메틸 글리신이고;
D는 L-아스파르트산 (L-아스파르테이트)이고;
L은 L-류신이고;
Xaa1은 L-α 아미노산 (예를 들어, 본원에 기재되어 있거나 또는 관련 기술분야에 공지된 임의의 L-α 아미노산), L-β 아미노산 (예를 들어, 본원에 기재되어 있거나 또는 관련 기술분야에 공지된 임의의 L-β 아미노산) 또는 α,α-이치환된 아미노산 (예를 들어, 본원에 기재되어 있거나 또는 관련 기술분야에 공지된 임의의 α,α-이치환된 아미노산)이고;
Xaa2는 L-α 아미노산 (예를 들어, 본원에 기재되어 있거나 또는 관련 기술분야에 공지된 임의의 L-α 아미노산), L-β 아미노산 (예를 들어, 본원에 기재되어 있거나 또는 관련 기술분야에 공지된 임의의 L-β 아미노산) 또는 α,α-이치환된 아미노산 (예를 들어, 본원에 기재되어 있거나 또는 관련 기술분야에 공지된 임의의 α,α-이치환된 아미노산)이고;
J는 임의적이며, 존재하는 경우에, 1종 이상 (예를 들어, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 21, 22, 23, 24, 25, 26, 27, 28, 29 또는 30; 또는 1 내지 30, 1 내지 25, 1 내지 20, 1 내지 15, 1 내지 10, 1 내지 5, 5 내지 30, 5 내지 25, 5 내지 20, 5 내지 15, 5 내지 10, 10 내지 30, 10 내지 25, 10 내지 20, 10 내지 15, 15 내지 30, 15 내지 25, 15 내지 20, 20 내지 30, 20 내지 25 또는 25 내지 30종)의 L-α 아미노산 (예를 들어, 본원에 기재되어 있거나 또는 관련 기술분야에 공지된 임의의 L-α 아미노산), L-β 아미노산 (예를 들어, 본원에 기재되어 있거나 또는 관련 기술분야에 공지된 임의의 L-β 아미노산) 또는 α,α-이치환된 아미노산 (예를 들어, 본원에 기재되어 있거나 또는 관련 기술분야에 공지된 임의의 α,α-이치환된 아미노산) 또는 그의 조합을 포함하고;
R1은 임의적이며, 존재하는 경우에, 폴리에틸렌 글리콜 (PEG) 및/또는 연결기를 포함하고;
n은 0 초과의 정수 (예를 들어, 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 21, 22, 23, 24, 25, 26, 27, 28, 29 또는 30; 또는 1 내지 30, 1 내지 25, 1 내지 20, 1 내지 15, 1 내지 10, 1 내지 5, 5 내지 30, 5 내지 25, 5 내지 20, 5 내지 15, 5 내지 10, 10 내지 30, 10 내지 25, 10 내지 20, 10 내지 15, 15 내지 30, 15 내지 25, 15 내지 20, 20 내지 30, 20 내지 25 또는 25 내지 30)이고;
R3은 화물 분자를 포함한다.
일부 실시양태에서, L은 아미드 결합을 통해 J에 연결된다. 일부 실시양태에서, 화물 분자는 αvβ6 인테그린-발현 세포에 대해 표적화되는 것이 바람직한 임의의 분자일 수 있다. 일부 실시양태에서, n은 1 내지 4의 정수이다. 일부 실시양태에서, n은 1이다. 일부 실시양태에서, n은 3이다. n이 1일 때, αvβ6 인테그린 리간드는 본원에서 "한자리" αvβ6 인테그린 리간드로 지칭될 수 있다. n이 3일 때, αvβ6 인테그린 리간드는 본원에서 "세자리" αvβ6 인테그린 리간드로 지칭될 수 있다. n이 2일 때, αvβ6 인테그린 리간드는 본원에서 "두자리" αvβ6 인테그린 리간드로 지칭될 수 있다. n이 4일 때, αvβ6 인테그린 리간드는 본원에서 "네자리" αvβ6 인테그린 리간드로 지칭될 수 있다.
일부 실시양태에서, 하기를 포함하는 1종 이상의 αvβ6 인테그린 리간드(들)는 1종 이상의 화물 분자(들)에 접합될 수 있으며:
(R'G1DLXaa1Xaa2L-J-R1)n-R3 (서열식별번호: 102) (화학식 IVa)
여기서
R'는 Dap(구아니디노)이고;
G1, D, L, Xaa1, Xaa2, J, R1, n 및 R3은 각각 본원의 화학식 IV에 대해 정의된 바와 같다.
일부 실시양태에서, L은 아미드 결합을 통해 J에 연결된다. 일부 실시양태에서, n은 1 내지 4의 정수이다. 일부 실시양태에서, n은 3이다. 일부 실시양태에서, 화물 분자는 αvβ6 인테그린-발현 세포에 대해 표적화되는 것이 바람직한 임의의 분자일 수 있다.
일부 실시양태에서, 하기를 포함하는 1종 이상의 αvβ6 인테그린 리간드는 1종 이상의 화물 분자에 접합될 수 있으며:
(Z-RG1DLXaa1Xaa2L-J-R1)n-R4-(R3)p (서열식별번호: 89) (화학식 V)
여기서
Z는 아민-말단 캡 (예를 들어, 본원에 기재되어 있거나 또는 관련 기술분야에 공지된 임의의 아민-말단 캡)이고;
R은 L-아르기닌이고;
G1은 L-글리신 또는 N-메틸 글리신이고;
D는 L-아스파르트산 (L-아스파르테이트)이고;
L은 L-류신이고;
Xaa1은 L-α 아미노산 (예를 들어, 본원에 기재되어 있거나 또는 관련 기술분야에 공지된 임의의 L-α 아미노산), L-β 아미노산 (예를 들어, 본원에 기재되어 있거나 또는 관련 기술분야에 공지된 임의의 L-β 아미노산) 또는 α,α-이치환된 아미노산 (예를 들어, 본원에 기재되어 있거나 또는 관련 기술분야에 공지된 임의의 α,α-이치환된 아미노산)이고;
Xaa2는 L-α 아미노산 (예를 들어, 본원에 기재되어 있거나 또는 관련 기술분야에 공지된 임의의 L-α 아미노산), L-β 아미노산 (예를 들어, 본원에 기재되어 있거나 또는 관련 기술분야에 공지된 임의의 L-β 아미노산) 또는 α,α-이치환된 아미노산 (예를 들어, 본원에 기재되어 있거나 또는 관련 기술분야에 공지된 임의의 α,α-이치환된 아미노산)이고;
J는 임의적이며, 존재하는 경우에, 1종 이상 (예를 들어, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 21, 22, 23, 24, 25, 26, 27, 28, 29 또는 30; 또는 1 내지 30, 1 내지 25, 1 내지 20, 1 내지 15, 1 내지 10, 1 내지 5, 5 내지 30, 5 내지 25, 5 내지 20, 5 내지 15, 5 내지 10, 10 내지 30, 10 내지 25, 10 내지 20, 10 내지 15, 15 내지 30, 15 내지 25, 15 내지 20, 20 내지 30, 20 내지 25 또는 25 내지 30종)의 L-α 아미노산 (예를 들어, 본원에 기재되어 있거나 또는 관련 기술분야에 공지된 임의의 L-α 아미노산), L-β 아미노산 (예를 들어, 본원에 기재되어 있거나 또는 관련 기술분야에 공지된 임의의 L-β 아미노산) 또는 α,α-이치환된 아미노산 (예를 들어, 본원에 기재되어 있거나 또는 관련 기술분야에 공지된 임의의 α,α-이치환된 아미노산) 또는 그의 조합을 포함하고;
R1은 임의적이며, 존재하는 경우에, PEG 및/또는 연결기를 포함하고;
n은 0 초과의 정수 (예를 들어, 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 21, 22, 23, 24, 25, 26, 27, 28, 29 또는 30; 또는 1 내지 30, 1 내지 25, 1 내지 20, 1 내지 15, 1 내지 10, 1 내지 5, 5 내지 30, 5 내지 25, 5 내지 20, 5 내지 15, 5 내지 10, 10 내지 30, 10 내지 25, 10 내지 20, 10 내지 15, 15 내지 30, 15 내지 25, 15 내지 20, 20 내지 30, 20 내지 25 또는 25 내지 30)이고;
R4는 임의적이며, 존재하는 경우에, 존재하는 각각의 리간드에 대한 적어도 하나의 부착 지점 (즉, 적어도 부착 지점 수가 n과 같음) 및 존재하는 각각의 화물 분자에 대한 적어도 하나의 부착 지점 (즉, 적어도 부착 지점 수가 p와 같음)을 포함하는 스캐폴드 및/또는 연결기를 포함하고;
p는 0 초과의 정수 (예를 들어, 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 21, 22, 23, 24, 25, 26, 27, 28, 29 또는 30; 또는 1 내지 30, 1 내지 25, 1 내지 20, 1 내지 15, 1 내지 10, 1 내지 5, 5 내지 30, 5 내지 25, 5 내지 20, 5 내지 15, 5 내지 10, 10 내지 30, 10 내지 25, 10 내지 20, 10 내지 15, 15 내지 30, 15 내지 25, 15 내지 20, 20 내지 30, 20 내지 25 또는 25 내지 30)이고;
R3은 1종 이상의 화물 분자를 포함한다.
일부 실시양태에서 L은 아미드 결합을 통해 J에 연결된다. 일부 실시양태에서, 화물 분자는 αvβ6 인테그린-발현 세포에 대해 표적화되는 것이 바람직한 임의의 분자일 수 있다.
본원에 개시된 αvβ6 인테그린 리간드는 1종 이상의 스캐폴드를 포함할 수 있다. 관련 기술분야에서 또한 때때로 연결기 또는 링커로 지칭되는, 스캐폴드는 1종 이상의 화물 분자의 본원에 개시된 1종 이상의 αvβ6 인테그린 리간드에 대한 연결을 용이하게 하기 위해 사용될 수 있다. 본원에 개시된 리간드와 상용성을 갖는 유용한 스캐폴드는 관련 기술분야에 일반적으로 공지되어 있다. 본원에 개시된 αvβ6 인테그린 리간드와 함께 사용될 수 있는 스캐폴드의 비제한적 예는 중합체 (예를 들어, 폴리아크릴레이트 중합체, 폴리비닐 에스테르 중합체 등), 아미노산 중합체 (예를 들어, 비스-글루탐산, 비스-리신, 폴리-L-리신 (PLL) 등), 및 시스테인을 포함하나 이에 제한되지는 않는다. 일부 실시양태에서, 스캐폴드는 단지 링커로서 작용하는 것 이외에도, 추가의 바람직한 특성, 예컨대, 예를 들어, 약동학적 (PK) 특성의 증진을 제공할 수 있다.
일부 실시양태에서, 하기를 포함하는 1종 이상의 αvβ6 인테그린 리간드는 1종 이상의 화물 분자에 접합될 수 있으며:
(R'G1DLXaa1Xaa2L-J-R1)n-R4-(R3)p (서열식별번호: 103) (화학식 Va)
여기서
R'는 Dap(구아니디노)이고;
G1, D, L, Xaa1, Xaa2, J, R1, n, R4, p 및 R3은 각각 본원의 화학식 V에 대해 정의된 바와 같다.
일부 실시양태에서 L은 아미드 결합을 통해 J에 연결된다. 화물 분자는 αvβ6 인테그린-발현 세포에 대해 표적화되는 것이 바람직한 임의의 분자일 수 있다.
일부 실시양태에서, 본원의 임의의 화학식의 J는 1종, 2종, 3종 또는 3종 초과의 L-α 아미노산, L-β 아미노산 또는 α,α-이치환된 아미노산을 포함한다. 1종, 2종, 3종 또는 3종 초과의 아미노산은 독립적으로 자연 발생 L-α 아미노산, 자연 발생 단백질생성 아미노산, 자연 발생 표준 아미노산 (즉, 정규 아미노산의 코드화된 아미노산으로도 칭해지는, 보편적 유전자 코드의 코돈에 의해 직접 코딩되는 20종의 아미노산) 또는 비-표준 아미노산 (또한 비-천연, 비-코드화 또는 비-정규 아미노산으로 칭해짐)이다.
표준 또는 천연 아미노산은 알라닌, 시스테인, 아스파르트산 (아스파르테이트), 글루탐산 (글루타메이트), 페닐알라닌, 글리신, 히스티딘, 이소류신, 리신, 류신, 메티오닌, 아스파라긴, 프롤린, 글루타민, 아르기닌, 세린, 트레오닌, 발린, 트립토판 및 티로신을 포함한다.
비-표준 아미노산은 셀레노시스테인, 피롤리신, N-포르밀메티오닌, 히드록시프롤린, 셀레노메티오닌, α-아미노-이소부티르산 (Aib), L-α-아미노-부티르산 (Abu), α,γ-디아미노부티르산, 데히드로알라닌, 노르류신, 알로이소류신, t-류신, α-아미노-n-헵탄산, α,β-디아미노프로피온산, β-N-옥살릴-α,β-디아미노프로피온산, 알로트레오닌, 호모시스테인, 호모세린, β-호모-알라닌 (β3-hA), 이소발린, 노르발린 (Nva), 시트룰린 (Cit), 오르니틴, α-메틸-아스파르테이트 (αMeD), α-메틸-류신 (αMeL), N-메틸 알라닌, N-메틸-글리신 (NMeG), N-메틸 류신 (NMeL), β-시클로헥실-알라닌 (Cha), N-에틸 알라닌, N,N-ε-디메틸 리신 (K(Me)2), 디메틸 아르기닌 (R(Me)2), Dap(Ac), n-알킬화된 L-α 아미노산, 및 자연 발생 아미노산과 유사한 방식으로 기능하는 다른 아미노산 유사체 또는 아미노산 모방체를 포함하나 이에 제한되지는 않는다.
일부 실시양태에서, J는 적어도 1종의 비-표준 아미노산을 포함한다. 일부 실시양태에서, J는 Aib, Cit, CitAib, CitAibL, CitE, CitF, CitG, CitK, CitP, CitQ, CitQL, EAib, FAib, KAib, PAib, QAib, RabuL, RAibL, RCitL, RDap(Ac)L, RLQ 또는 RNvaL이거나 또는 그를 포함한다.
일부 실시양태에서, 본원에 기재된 임의의 화학식의 J는 Xaa3Xaa4L을 포함하거나 또는 그로 이루어지며, 여기서 L은 L-류신이고; Xaa3은 L-α 아미노산 (예를 들어, 본원에 기재되어 있거나 또는 관련 기술분야에 공지된 임의의 L-α 아미노산), L-β 아미노산 (예를 들어, 본원에 기재되어 있거나 또는 관련 기술분야에 공지된 임의의 L-β 아미노산) 또는 α,α-이치환된 아미노산 (예를 들어, 본원에 기재되어 있거나 또는 관련 기술분야에 공지된 임의의 α,α-이치환된 아미노산)이고; Xaa4는 L-α 아미노산 (예를 들어, 본원에 기재되어 있거나 또는 관련 기술분야에 공지된 임의의 L-α 아미노산), L-β 아미노산 (예를 들어, 본원에 기재되어 있거나 또는 관련 기술분야에 공지된 임의의 L-β 아미노산) 또는 α,α-이치환된 아미노산 (예를 들어, 본원에 기재되어 있거나 또는 관련 기술분야에 공지된 임의의 α,α-이치환된 아미노산)이다.
일부 실시양태에서, J는 Xaa3Xaa4이거나 또는 그를 포함하며, 여기서 Xaa3은 L-α 아미노산 (예를 들어, 본원에 기재되어 있거나 또는 관련 기술분야에 공지된 임의의 L-α 아미노산), L-β 아미노산 (예를 들어, 본원에 기재되어 있거나 또는 관련 기술분야에 공지된 임의의 L-β 아미노산) 또는 α,α-이치환된 아미노산 (예를 들어, 본원에 기재되어 있거나 또는 관련 기술분야에 공지된 임의의 α,α-이치환된 아미노산)이고; Xaa4는 L-α 아미노산 (예를 들어, 본원에 기재되어 있거나 또는 관련 기술분야에 공지된 임의의 L-α 아미노산), L-β 아미노산 (예를 들어, 본원에 기재되어 있거나 또는 관련 기술분야에 공지된 임의의 L-β 아미노산) 또는 α,α-이치환된 아미노산 (예를 들어, 본원에 기재되어 있거나 또는 관련 기술분야에 공지된 임의의 α,α-이치환된 아미노산)이다.
일부 실시양태에서, αvβ6 인테그린 리간드는 하기를 포함하며:
Z-RG1DLXaa1Xaa2LXaa3Xaa4L-R1 (서열식별번호: 92) (화학식 VI)
여기서
Z는 아민-말단 캡 (예를 들어, 본원에 기재되어 있거나 또는 관련 기술분야에 공지된 임의의 아민-말단 캡)이고;
R은 L-아르기닌이고;
G1은 L-글리신 또는 N-메틸 글리신이고;
D는 L-아스파르트산 (L-아스파르테이트)이고;
L은 L-류신이고;
Xaa1은 L-α 아미노산 (예를 들어, 본원에 기재되어 있거나 또는 관련 기술분야에 공지된 임의의 L-α 아미노산), L-β 아미노산 (예를 들어, 본원에 기재되어 있거나 또는 관련 기술분야에 공지된 임의의 L-β 아미노산) 또는 α,α-이치환된 아미노산 (예를 들어, 본원에 기재되어 있거나 또는 관련 기술분야에 공지된 임의의 α,α-이치환된 아미노산)이고;
Xaa2는 L-α 아미노산 (예를 들어, 본원에 기재되어 있거나 또는 관련 기술분야에 공지된 임의의 L-α 아미노산), L-β 아미노산 (예를 들어, 본원에 기재되어 있거나 또는 관련 기술분야에 공지된 임의의 L-β 아미노산) 또는 α,α-이치환된 아미노산 (예를 들어, 본원에 기재되어 있거나 또는 관련 기술분야에 공지된 임의의 α,α-이치환된 아미노산)이고;
Xaa3은 L-α 아미노산 (예를 들어, 본원에 기재되어 있거나 또는 관련 기술분야에 공지된 임의의 L-α 아미노산), L-β 아미노산 (예를 들어, 본원에 기재되어 있거나 또는 관련 기술분야에 공지된 임의의 L-β 아미노산) 또는 α,α-이치환된 아미노산 (예를 들어, 본원에 기재되어 있거나 또는 관련 기술분야에 공지된 임의의 α,α-이치환된 아미노산)이고;
Xaa4는 L-α 아미노산 (예를 들어, 본원에 기재되어 있거나 또는 관련 기술분야에 공지된 임의의 L-α 아미노산), L-β 아미노산 (예를 들어, 본원에 기재되어 있거나 또는 관련 기술분야에 공지된 임의의 L-β 아미노산) 또는 α,α-이치환된 아미노산 (예를 들어, 본원에 기재되어 있거나 또는 관련 기술분야에 공지된 임의의 α,α-이치환된 아미노산)이고;
R1은 임의적이며, 존재하는 경우에, PEG 및/또는 연결기를 포함한다.
일부 실시양태에서, Xaa1은 L-α 아미노산, L-β 아미노산 또는 α,α-이치환된 아미노산이다. Xaa1은 자연 발생 L-α 아미노산, 자연 발생 단백질생성 아미노산, 자연 발생 표준 아미노산 (즉, 정규 아미노산의 코드화된 아미노산으로도 칭해지는, 보편적 유전자 코드의 코돈에 의해 직접 코딩되는 20종의 아미노산) 또는 비-표준 (또한 비-천연, 비-코드화 또는 비-정규로 칭해짐) 아미노산일 수 있으나 이에 제한되지는 않는다.
일부 실시양태에서, Xaa2는 L-α 아미노산, L-β 아미노산 또는 α,α-이치환된 아미노산이다. Xaa2는 자연 발생 L-α 아미노산, 자연 발생 단백질생성 아미노산, 자연 발생 표준 아미노산 (즉, 정규 아미노산의 코드화된 아미노산으로도 칭해지는, 보편적 유전자 코드의 코돈에 의해 직접 코딩되는 20종의 아미노산) 또는 비-표준 (또한 비-천연, 비-코드화 또는 비-정규로 칭해짐) 아미노산일 수 있으나 이에 제한되지는 않는다.
일부 실시양태에서, Xaa3은 L-α 아미노산, L-β 아미노산 또는 α,α-이치환된 아미노산이다. Xaa3은 자연 발생 L-α 아미노산, 자연 발생 단백질생성 아미노산, 자연 발생 표준 아미노산 (즉, 정규 아미노산의 코드화된 아미노산으로도 칭해지는, 보편적 유전자 코드의 코돈에 의해 직접 코딩되는 20종의 아미노산) 또는 비-표준 (또한 비-천연, 비-코드화 또는 비-정규로 칭해짐) 아미노산일 수 있으나 이에 제한되지는 않는다.
일부 실시양태에서, Xaa4는 L-α 아미노산, L-β 아미노산 또는 α,α-이치환된 아미노산이다. Xaa4는 자연 발생 L-α 아미노산, 자연 발생 단백질생성 아미노산, 자연 발생 표준 아미노산 (즉, 정규 아미노산의 코드화된 아미노산으로도 칭해지는, 보편적 유전자 코드의 코돈에 의해 직접 코딩되는 20종의 아미노산) 또는 비-표준 (또한 비-천연, 비-코드화 또는 비-정규로 칭해짐) 아미노산일 수 있으나 이에 제한되지는 않는다.
일부 실시양태에서, Xaa1 또는 Xaa2는 비-표준 아미노산이다. 일부 실시양태에서, Xaa1은 비-표준 아미노산이다. 일부 실시양태에서, Xaa2는 비-표준 아미노산이다. 일부 실시양태에서, Xaa1 및 Xaa2 둘 다는 비-표준 아미노산이다.
일부 실시양태에서, Xaa1 및/또는 Xaa2는 Abu이다. 일부 실시양태에서, Xaa1은 Abu이다. 일부 실시양태에서, Xaa2는 Abu이다.
일부 실시양태에서, Xaa1 또는 Xaa2는 비하전된다. 일부 실시양태에서, Xaa1은 비하전된다. 일부 실시양태에서, Xaa2는 비하전된다. 일부 실시양태에서, Xaa1 및 Xaa2는 비하전된다.
일부 실시양태에서, Xaa1은 비하전되고, Xaa2는 비-표준 아미노산이다. 일부 실시양태에서, Xaa2는 비하전되고, Xaa1은 비-표준 아미노산이다. 일부 실시양태에서 Xaa1은 비하전되고, Xaa2는 Abu이다. 일부 실시양태에서 Xaa2는 비하전되고, Xaa1은 Abu이다.
일부 실시양태에서, Xaa1Xaa2는 AAbu, KAbu, EAbu, FAbu, QAbu, GAbu, PAbu, AK, AE, AF, AQ, AG 및 AP이며, 여기서 A는 L-알라닌이고, Abu는 L-α-아미노부티르산이고, K는 L-리신이고, E는 L-글루탐산 (글루타메이트)이고, F는 L-페닐알라닌이고, Q는 L-글루타민이고, G는 L-글리신이고, P는 L-프롤린이다.
일부 실시양태에서, RG1DLXaa1Xaa2L (서열식별번호: 117)은 RGDLAAbuL (서열식별번호: 118), RGDLKAbuL (서열식별번호: 119), RGDLEAbuL (서열식별번호: 120), RGDLFAbuL (서열식별번호: 121), RGDLQAbuL (서열식별번호: 122), RGDLGAbuL (서열식별번호: 123), RGDLPAbuL (서열식별번호: 124), RGDLAKL (서열식별번호: 125), RGDLAEL (서열식별번호: 126), RGDLAFL (서열식별번호: 127), RGDLAQL (서열식별번호: 128), RGDLAGL (서열식별번호: 129) 및 RGDLAPL (서열식별번호: 130)로 이루어진 군으로부터 선택되며; 여기서, R은 L-아르기닌이고; G는 L-글리신이고; D는 L-아스파르트산 (아스파르테이트)이고; L은 L-류신이고; A는 L-알라닌이고; Abu는 L-α-아미노부티르산이고; K는 L-리신이고; E는 L-글루탐산 (글루타메이트)이고; F는 L-페닐알라닌이고; Q는 L-글루타민이고; P는 L-프롤린이다. 일부 실시양태에서, 임의의 상기 화학식에서 G (L-글리신)는 MeGly (N-메틸 글리신)로 대체된다.
일부 실시양태에서, Xaa3 또는 Xaa4는 비-표준 아미노산이다. 일부 실시양태에서, Xaa3은 비-표준 아미노산이다. 일부 실시양태에서, Xaa4는 비-표준 아미노산이다. 일부 실시양태에서, Xaa3 및 Xaa4 둘 다는 비-표준 아미노산이다.
일부 실시양태에서 Xaa3 및/또는 Xaa4는 Cit이다. 일부 실시양태에서, Xaa3은 Cit이다. 일부 실시양태에서, Xaa4는 Cit이다.
일부 실시양태에서, Xaa3 또는 Xaa4는 비하전된다. 일부 실시양태에서, Xaa3은 비하전된다. 일부 실시양태에서, Xaa4는 비하전된다. 일부 실시양태에서, Xaa3 및 Xaa4는 비하전된다.
일부 실시양태에서 Xaa3은 비하전되고, Xaa4는 비-표준 아미노산이다. 일부 실시양태에서 Xaa3은 비하전되고, Xaa4는 비-표준 아미노산이다. 일부 실시양태에서 Xaa3은 Aib이다. 일부 실시양태에서 Xaa4는 Aib이다.
일부 실시양태에서, Xaa3Xaa4는 CitAib, CitE, CitF, CitG, CitK, CitP, CitQ, EAib, FAib, KAib, PAib 또는 QAib이며, 여기서 Cit는 시트룰린이고, Aib는 아미노이소부티르산 (α-메틸알라닌)이고, K는 L-리신이고, E는 L-글루탐산 (글루타메이트)이고, F는 L-페닐알라닌이고, Q는 L-글루타민이고, G는 L-글리신이고, P는 L-프롤린이다.
일부 실시양태에서, αvβ6 인테그린 리간드는 하기를 포함하며:
R'G1DLXaa1Xaa2LXaa3Xaa4L-R1 (서열식별번호: 104) (화학식 VIa)
여기서
R'는 Dap(구아니디노)이고;
G1, D, L, Xaa1, Xaa2, Xaa3, Xaa4 및 R1은 각각 본원의 화학식 VI에 대해 정의된 바와 같다.
일부 실시양태에서, αvβ6 인테그린 리간드는 반응성 기 또는 보호된 반응성 기를 포함하고, 하기를 포함하며:
(Z-RG1DLXaa1Xaa2L-J-R1)n-R4-(R2)p (서열식별번호: 105) (화학식 VII)
여기서
Z는 아민-말단 캡 (예를 들어, 본원에 기재되어 있거나 또는 관련 기술분야에 공지된 임의의 아민-말단 캡)이고;
R은 L-아르기닌이고;
G1은 L-글리신 또는 N-메틸 글리신이고;
D는 L-아스파르트산 (L-아스파르테이트)이고;
L은 L-류신이고;
Xaa1은 L-α 아미노산 (예를 들어, 본원에 기재되어 있거나 또는 관련 기술분야에 공지된 임의의 L-α 아미노산), L-β 아미노산 (예를 들어, 본원에 기재되어 있거나 또는 관련 기술분야에 공지된 임의의 L-β 아미노산) 또는 α,α-이치환된 아미노산 (예를 들어, 본원에 기재되어 있거나 또는 관련 기술분야에 공지된 임의의 α,α-이치환된 아미노산)이고;
Xaa2는 L-α 아미노산 (예를 들어, 본원에 기재되어 있거나 또는 관련 기술분야에 공지된 임의의 L-α 아미노산), L-β 아미노산 (예를 들어, 본원에 기재되어 있거나 또는 관련 기술분야에 공지된 임의의 L-β 아미노산) 또는 α,α-이치환된 아미노산 (예를 들어, 본원에 기재되어 있거나 또는 관련 기술분야에 공지된 임의의 α,α-이치환된 아미노산)이고;
J는 임의적이며, 존재하는 경우에, 1종 이상 (예를 들어, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 21, 22, 23, 24, 25, 26, 27, 28, 29 또는 30; 또는 1 내지 30, 1 내지 25, 1 내지 20, 1 내지 15, 1 내지 10, 1 내지 5, 5 내지 30, 5 내지 25, 5 내지 20, 5 내지 15, 5 내지 10, 10 내지 30, 10 내지 25, 10 내지 20, 10 내지 15, 15 내지 30, 15 내지 25, 15 내지 20, 20 내지 30, 20 내지 25 또는 25 내지 30종)의 L-α 아미노산 (예를 들어, 본원에 기재되어 있거나 또는 관련 기술분야에 공지된 임의의 L-α 아미노산), L-β 아미노산 (예를 들어, 본원에 기재되어 있거나 또는 관련 기술분야에 공지된 임의의 L-β 아미노산) 또는 α,α-이치환된 아미노산 (예를 들어, 본원에 기재되어 있거나 또는 관련 기술분야에 공지된 임의의 α,α-이치환된 아미노산) 또는 그의 조합을 포함하고;
R1은 임의적이며, 존재하는 경우에, 폴리에틸렌 글리콜 (PEG) 및/또는 연결기를 포함하고;
n은 0 초과의 정수 (예를 들어, 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 21, 22, 23, 24, 25, 26, 27, 28, 29 또는 30; 또는 1 내지 30, 1 내지 25, 1 내지 20, 1 내지 15, 1 내지 10, 1 내지 5, 5 내지 30, 5 내지 25, 5 내지 20, 5 내지 15, 5 내지 10, 10 내지 30, 10 내지 25, 10 내지 20, 10 내지 15, 15 내지 30, 15 내지 25, 15 내지 20, 20 내지 30, 20 내지 25 또는 25 내지 30)이고;
R4는 임의적이며, 존재하는 경우에, 각각의 리간드에 대한 적어도 하나의 부착 지점 및 각각의 화물 분자에 대한 적어도 하나의 부착 지점을 포함하는 스캐폴드 및/또는 연결기를 포함하고;
p는 0 초과의 정수 (예를 들어, 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 21, 22, 23, 24, 25, 26, 27, 28, 29 또는 30; 또는 1 내지 30, 1 내지 25, 1 내지 20, 1 내지 15, 1 내지 10, 1 내지 5, 5 내지 30, 5 내지 25, 5 내지 20, 5 내지 15, 5 내지 10, 10 내지 30, 10 내지 25, 10 내지 20, 10 내지 15, 15 내지 30, 15 내지 25, 15 내지 20, 20 내지 30, 20 내지 25 또는 25 내지 30)이고;
R2는 반응성 기 또는 보호된 반응성 기를 포함한다.
일부 실시양태에서 L은 아미드 결합을 통해 J에 연결된다. 일부 실시양태에서, 1개 이상의 반응성 기 또는 보호된 반응성 기를 포함하는 αvβ6 인테그린 리간드는 화물 분자와 반응되어 αvβ6 인테그린 리간드-화물 분자 접합체를 형성할 수 있다.
일부 실시양태에서, αvβ6 인테그린 리간드는 반응성 기 또는 보호된 반응성 기를 포함하고, 하기를 포함하며:
(R'G1DLXaa1Xaa2L-J-R1)n-R4-(R2)p (서열식별번호: 106) (화학식 VIIa)
여기서
R'는 Dap(구아니디노)이고;
G1, D, L, Xaa1, Xaa2, J, R1, n, R4, p 및 R2는 각각 본원의 화학식 VII에 대해 정의된 바와 같다.
일부 실시양태에서 L은 아미드 결합을 통해 J에 연결된다. 화물 분자는 αvβ6 인테그린-발현 세포에 대해 표적화되는 것이 바람직한 임의의 분자일 수 있다.
일부 실시양태에서, 특히 국부 전달 (예를 들어, 분말 또는 에어로졸의 흡입 또는 공기주입, 예컨대 네뷸라이저, 기관내, 비강내, 또는 국소 투여)만이 바람직한 경우에, αvβ6 인테그린 리간드는 아민 말단 캡의 존재 없이 합성될 수 있으며, 단 적어도 1종 이상의 아미노산이 비-표준 아미노산이다. 일부 실시양태에서, αvβ6 인테그린 리간드는 하기를 포함하며:
RG1DLXaa1Xaa2L-Xaa3Xaa4L-R1 (서열식별번호: 96) (화학식 VIII)
여기서
R은 L-아르기닌이고;
G1은 L-글리신 또는 N-메틸 글리신이고;
D는 L-아스파르트산 (L-아스파르테이트)이고;
L은 L-류신이고;
Xaa1은 L-α 아미노산 (예를 들어, 본원에 기재되어 있거나 또는 관련 기술분야에 공지된 임의의 L-α 아미노산), L-β 아미노산 (예를 들어, 본원에 기재되어 있거나 또는 관련 기술분야에 공지된 임의의 L-β 아미노산) 또는 α,α-이치환된 아미노산 (예를 들어, 본원에 기재되어 있거나 또는 관련 기술분야에 공지된 임의의 α,α-이치환된 아미노산)이고;
Xaa2는 L-α 아미노산 (예를 들어, 본원에 기재되어 있거나 또는 관련 기술분야에 공지된 임의의 L-α 아미노산), L-β 아미노산 (예를 들어, 본원에 기재되어 있거나 또는 관련 기술분야에 공지된 임의의 L-β 아미노산) 또는 α,α-이치환된 아미노산 (예를 들어, 본원에 기재되어 있거나 또는 관련 기술분야에 공지된 임의의 α,α-이치환된 아미노산)이고;
Xaa3은 L-α 아미노산 (예를 들어, 본원에 기재되어 있거나 또는 관련 기술분야에 공지된 임의의 L-α 아미노산), L-β 아미노산 (예를 들어, 본원에 기재되어 있거나 또는 관련 기술분야에 공지된 임의의 L-β 아미노산) 또는 α,α-이치환된 아미노산 (예를 들어, 본원에 기재되어 있거나 또는 관련 기술분야에 공지된 임의의 α,α-이치환된 아미노산)이고;
Xaa4는 L-α 아미노산 (예를 들어, 본원에 기재되어 있거나 또는 관련 기술분야에 공지된 임의의 L-α 아미노산), L-β 아미노산 (예를 들어, 본원에 기재되어 있거나 또는 관련 기술분야에 공지된 임의의 L-β 아미노산) 또는 α,α-이치환된 아미노산 (예를 들어, 본원에 기재되어 있거나 또는 관련 기술분야에 공지된 임의의 α,α-이치환된 아미노산)이고;
R1은 임의적이며, 존재하는 경우에, PEG 및/또는 연결기를 포함하고;
Xaa1, Xaa2, Xaa3 및 Xaa4 중 적어도 1종은 비-표준 아미노산이다.
일부 실시양태에서, αvβ6 인테그린 리간드는, 각각의 변수가 화학식 VIII에 대해 상기 정의된 바와 같으며, 여기서 Xaa1, Xaa2, Xaa3 및 Xaa4 중 적어도 2종이 비-표준 아미노산인, RG1DLXaa1Xaa2L-Xaa3Xaa4L-R1 (서열식별번호: 96) (화학식 VIII)을 포함한다.
일부 실시양태에서, αvβ6 인테그린 리간드는, 각각의 변수가 화학식 VIII에 대해 상기 정의된 바와 같으며, 여기서 Xaa1, Xaa2, Xaa3 및 Xaa4 중 적어도 3종이 비-표준 아미노산인, RG1DLXaa1Xaa2L-Xaa3Xaa4L-R1 (서열식별번호: 96) (화학식 VIII)을 포함한다.
일부 실시양태에서, αvβ6 인테그린 리간드는, 각각의 변수가 화학식 VIII에 대해 상기 정의된 바와 같으며, 여기서 Xaa2, Xaa3 및 Xaa4가 비-표준 아미노산인, RG1DLXaa1Xaa2L-Xaa3Xaa4L-R1 (서열식별번호: 96) (화학식 VIII)을 포함한다.
일부 실시양태에서, αvβ6 인테그린 리간드는 하기를 포함하며:
RG1DLAAbuLCitAibL-R1 (서열식별번호: 97) (화학식 VIIIa)
여기서
R은 L-아르기닌이고;
G1은 L-글리신 또는 N-메틸 글리신이고;
D는 L-아스파르트산 (L-아스파르테이트)이고;
L은 L-류신이고;
A는 L-알라닌이고;
Abu는 L-α-아미노-부티르산이고;
Cit는 시트룰린이고;
Aib는 α-아미노-이소부티르산이고;
R1은 임의적이며, 존재하는 경우에, PEG 및/또는 연결기를 포함한다.
일부 실시양태에서, αvβ6 인테그린 리간드는 반응성 기 또는 보호된 반응성 기를 포함하고, 하기를 포함하며:
(RG1DLAAbuLCitAibL-R1)n-R4-(R2)p (서열식별번호: 107) (화학식 VIIIb)
여기서
R은 L-아르기닌이고;
G1은 L-글리신 또는 N-메틸 글리신이고;
D는 L-아스파르트산 (L-아스파르테이트)이고;
L은 L-류신이고;
A는 L-알라닌이고;
Abu는 L-α-아미노-부티르산이고;
Cit는 시트룰린이고;
Aib는 α-아미노-이소부티르산이고;
R1은 임의적이며, 존재하는 경우에, PEG 및/또는 연결기를 포함하고;
n은 0 초과의 정수 (예를 들어, 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 21, 22, 23, 24, 25, 26, 27, 28, 29 또는 30; 또는 1 내지 30, 1 내지 25, 1 내지 20, 1 내지 15, 1 내지 10, 1 내지 5, 5 내지 30, 5 내지 25, 5 내지 20, 5 내지 15, 5 내지 10, 10 내지 30, 10 내지 25, 10 내지 20, 10 내지 15, 15 내지 30, 15 내지 25, 15 내지 20, 20 내지 30, 20 내지 25 또는 25 내지 30)이고;
R4는 임의적이며, 존재하는 경우에, 각각의 리간드에 대한 적어도 하나의 부착 지점 및 각각의 화물 분자에 대한 적어도 하나의 부착 지점을 포함하는 스캐폴드 또는 연결기를 포함하고;
p는 0 초과의 정수 (예를 들어, 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 21, 22, 23, 24, 25, 26, 27, 28, 29 또는 30; 또는 1 내지 30, 1 내지 25, 1 내지 20, 1 내지 15, 1 내지 10, 1 내지 5, 5 내지 30, 5 내지 25, 5 내지 20, 5 내지 15, 5 내지 10, 10 내지 30, 10 내지 25, 10 내지 20, 10 내지 15, 15 내지 30, 15 내지 25, 15 내지 20, 20 내지 30, 20 내지 25 또는 25 내지 30)이고;
R2는 반응성 기 또는 보호된 반응성 기를 포함한다.
일부 실시양태에서, 1종 이상의 화물 분자는 하기를 포함하는 1종 이상의 αvβ6 인테그린 리간드에 접합되며:
(RG1DLAAbuLCitAibL-R1)n-R4-(R3)p (서열식별번호: 108) (화학식 VIIIc)
여기서
R은 L-아르기닌이고;
G1은 L-글리신 또는 N-메틸 글리신이고;
D는 L-아스파르트산 (L-아스파르테이트)이고;
L은 L-류신이고;
R1은 임의적이며, 존재하는 경우에, PEG 및/또는 연결기를 포함하고;
n은 0 초과의 정수 (예를 들어, 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 21, 22, 23, 24, 25, 26, 27, 28, 29 또는 30; 또는 1 내지 30, 1 내지 25, 1 내지 20, 1 내지 15, 1 내지 10, 1 내지 5, 5 내지 30, 5 내지 25, 5 내지 20, 5 내지 15, 5 내지 10, 10 내지 30, 10 내지 25, 10 내지 20, 10 내지 15, 15 내지 30, 15 내지 25, 15 내지 20, 20 내지 30, 20 내지 25 또는 25 내지 30)이고;
R4는 임의적이며, 존재하는 경우에, 각각의 리간드에 대한 적어도 하나의 부착 지점 및 각각의 화물 분자에 대한 적어도 하나의 부착 지점을 포함하는 스캐폴드 또는 연결기를 포함하고;
p는 0 초과의 정수 (예를 들어, 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 21, 22, 23, 24, 25, 26, 27, 28, 29 또는 30; 또는 1 내지 30, 1 내지 25, 1 내지 20, 1 내지 15, 1 내지 10, 1 내지 5, 5 내지 30, 5 내지 25, 5 내지 20, 5 내지 15, 5 내지 10, 10 내지 30, 10 내지 25, 10 내지 20, 10 내지 15, 15 내지 30, 15 내지 25, 15 내지 20, 20 내지 30, 20 내지 25 또는 25 내지 30)이고;
R3은 1종 이상의 화물 분자를 포함한다.
1종 이상의 화물 분자는 αvβ6 인테그린-발현 세포에 대해 표적화되는 것이 바람직한 임의의 분자일 수 있다.
본원에 사용되는 바와 같이, 일부 실시양태에서, R1이 존재하며, 1-100개의 에틸렌 옥시드 (CH2-CH2-O) 단위 (예를 들어, 1 내지 90, 1 내지 80, 1 내지 70, 1 내지 60, 1 내지 50, 1 내지 40, 1 내지 30, 1 내지 20, 1 내지 10, 1 내지 5, 2 내지 100, 2 내지 90, 2 내지 80, 2 내지 70, 2 내지 60, 2 내지 50, 2 내지 40, 2 내지 30, 2 내지 20, 2 내지 10, 2 내지 5, 5 내지 100, 5 내지 90, 5 내지 80, 5 내지 70, 5 내지 60, 5 내지 50, 5 내지 40, 5 내지 30, 5 내지 20, 5 내지 10, 10 내지 100, 10 내지 90, 10 내지 80, 10 내지 70, 10 내지 60, 10 내지 50, 10 내지 40, 10 내지 30, 10 내지 20, 20 내지 100, 20 내지 90, 20 내지 80, 20 내지 70, 20 내지 60, 20 내지 50, 20 내지 40, 20 내지 30, 30 내지 100, 30 내지 90, 30 내지 80, 30 내지 70, 30 내지 60, 30 내지 50, 30 내지 40, 40 내지 100, 40 내지 90, 40 내지 80, 40 내지 70, 40 내지 60, 40 내지 50, 50 내지 100, 50 내지 90, 50 내지 80, 50 내지 70, 50 내지 60, 60 내지 100, 60 내지 90, 60 내지 80, 60 내지 70, 70 내지 100, 70 내지 90, 70 내지 80, 80 내지 100, 80 내지 90 또는 90 내지 100개의 에틸렌 옥시드 단위)를 갖는 PEG 기를 포함한다. 일부 실시양태에서, R1이 존재하며, 2-30개의 에틸렌 옥시드 단위를 갖는 PEG 기를 포함한다. 일부 실시양태에서, R1이 존재하며, 2-20개의 에틸렌 옥시드 단위를 갖는 PEG 기를 포함한다. 일부 실시양태에서, R1이 존재하며, 2-10개의 에틸렌 옥시드 단위를 갖는 PEG 기를 포함한다. 일부 실시양태에서, R1이 존재하며, 5-20개의 에틸렌 옥시드 단위를 갖는 PEG 기를 포함한다. 일부 실시양태에서, R1이 존재하며, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19 또는 20개의 에틸렌 옥시드 단위를 갖는 PEG 기를 포함한다.
반응성 기는 관련 기술분야에 널리 공지되어 있으며, 2개의 분자 또는 반응물 사이의 공유 연결의 형성을 제공한다. 본원 발명의 범주에서 사용하기에 적합한 반응성 기는 아미노 기, 아미드 기, 카르복실산 기, 아지드, 알킨, 프로파르길 기, BCN (비시클로[6.1.0]노닌), DBCO (디벤조시클로옥틴) 티올, 말레이미드 기, 아미노옥시 기, N-히드록시숙신이미드 (NHS) 또는 다른 활성화된 에스테르 (예를 들어, PNP, TFP, PFP), 브로모 기, 알데히드, 카르보네이트, 토실레이트, 테트라진, 트랜스-시클로옥텐 (TCO), 히드라지드, 히드록실 기, 디술피드 및 오르토피리딜 디술피드 기를 포함하나 이에 제한되지는 않는다.
반응성 기의 혼입은 본원에 개시된 αvβ6 인테그린 리간드의 화물 분자에 대한 접합을 용이하게 할 수 있다. 접합 반응은 관련 기술분야에 널리 공지되어 있으며, 2개의 분자 또는 반응물 사이의 공유 연결의 형성을 제공한다. 본원 발명의 범주에서 사용하기에 적합한 접합 반응은 아미드 커플링 반응, 마이클 첨가 반응, 히드라존 형성 반응 및 클릭 화학 고리화첨가 반응을 포함하나 이에 제한되지는 않는다.
일부 실시양태에서, 본원에 개시된 αvβ6 인테그린 표적화 리간드는 화물 분자를 부착시키기 위해 반응성 아미노 기에 의해 대체될 수 있는, 테트라플루오로페닐 (TFP) 에스테르로서 합성된다.
보호된 반응성 기 또한 관련 기술분야에서 통상적으로 사용된다. 보호기는, 예를 들어 후속 화학 반응에서 화학-선택성을 제공하기 위해, 비-보호된 기가 반응하는 조건 하에 반응하지 않는 기로의 반응성 기의 일시적인 화학적 변환을 제공한다. 본원 발명의 범주에서 사용하기에 적합한 보호된 반응성 기는 BOC 기 (t-부톡시카르보닐), Fmoc (9-플루오레닐메톡시카르보닐), 카르복시벤질 (CBZ) 기, 벤질 에스테르 및 PBF (2,2,4,6,7-펜타메틸디히드로벤조푸란-5-술포닐)를 포함하나 이에 제한되지는 않는다.
화물 분자는, αvβ6 인테그린 또는 αvβ6 인테그린을 발현하는 세포에 대한 표적화가 바람직할 수 있는 임의의 분자이다. 화물 분자는 제약 성분, 약물 제품, 전구약물, 치료상 가치있는 물질, 소분자, 항체, 항체 단편, 이뮤노글로불린, 모노클로날 항체, 표지 또는 마커, 지질, 천연 또는 변형된 핵산 또는 폴리뉴클레오티드, 펩티드, 중합체, 폴리아민, 단백질, 압타머, 독소, 비타민, PEG, 합텐, 디곡시게닌, 비오틴, 방사성 원자 또는 분자, 또는 형광단일 수 있으나 이에 제한되지는 않는다. 일부 실시양태에서, 화물 분자를 αvβ6 인테그린을 발현하는 세포에 대해 표적화하기 위해 1종 이상의 화물 분자 (예를 들어, 동일하거나 상이한 화물 분자)는 1종 이상의 αvβ6 인테그린 리간드에 연결된다.
일부 실시양태에서, 1종 이상의 화물 분자는 제약 성분 또는 제약 조성물이다. 일부 실시양태에서, 1종 이상의 화물 분자는 올리고머성 화합물이다. 본원에 사용된 "올리고머성 화합물"은 약 10-50 (예를 들어, 10 내지 48, 10 내지 46, 10 내지 44, 10 내지 42, 10 내지 40, 10 내지 38, 10 내지 36, 10 내지 34, 10 내지 32, 10 내지 30, 10 내지 28, 10 내지 26, 10 내지 24, 10 내지 22, 10 내지 20, 10 내지 18, 10 내지 16, 10 내지 14, 10 내지 12, 12 내지 50, 12 내지 48, 12 내지 46, 12 내지 44, 12 내지 42, 12 내지 40, 12 내지 38, 12 내지 36, 12 내지 34, 12 내지 32, 12 내지 30, 12 내지 28, 12 내지 26, 12 내지 24, 12 내지 22, 12 내지 20, 12 내지 18, 12 내지 16, 12 내지 14, 14 내지 50, 14 내지 48, 14 내지 46, 14 내지 44, 14 내지 42, 14 내지 40, 14 내지 38, 14 내지 36, 14 내지 34, 14 내지 32, 14 내지 30, 14 내지 28, 14 내지 26, 14 내지 24, 14 내지 22, 14 내지 20, 14 내지 18, 14 내지 16, 16 내지 50, 16 내지 48, 16 내지 46, 16 내지 44, 16 내지 42, 16 내지 40, 16 내지 38, 16 내지 36, 16 내지 34, 16 내지 32, 16 내지 30, 16 내지 28, 16 내지 26, 16 내지 24, 16 내지 22, 16 내지 20, 16 내지 18, 18 내지 50, 18 내지 48, 18 내지 46, 18 내지 44, 18 내지 42, 18 내지 40, 18 내지 38, 18 내지 36, 18 내지 34, 18 내지 32, 18 내지 30, 18 내지 28, 18 내지 26, 18 내지 24, 18 내지 22, 18 내지 20, 20 내지 50, 20 내지 48, 20 내지 46, 20 내지 44, 20 내지 42, 20 내지 40, 20 내지 38, 20 내지 36, 20 내지 34, 20 내지 32, 20 내지 30, 20 내지 28, 20 내지 26, 20 내지 24, 20 내지 22, 22 내지 50, 22 내지 48, 22 내지 46, 22 내지 44, 22 내지 42, 22 내지 40, 22 내지 38, 22 내지 36, 22 내지 34, 22 내지 32, 22 내지 30, 22 내지 28, 22 내지 26, 22 내지 24, 24 내지 50, 24 내지 48, 24 내지 46, 24 내지 44, 24 내지 42, 24 내지 40, 24 내지 38, 24 내지 36, 24 내지 34, 24 내지 32, 24 내지 30, 24 내지 28, 24 내지 26, 26 내지 50, 26 내지 48, 26 내지 46, 26 내지 44, 26 내지 42, 26 내지 40, 26 내지 38, 26 내지 36, 26 내지 34, 26 내지 32, 26 내지 30, 26 내지 28, 28 내지 50, 28 내지 48, 28 내지 46, 28 내지 44, 28 내지 42, 28 내지 40, 28 내지 38, 28 내지 36, 28 내지 34, 28 내지 32, 28 내지 30, 30 내지 50, 30 내지 48, 30 내지 46, 30 내지 44, 30 내지 42, 30 내지 40, 30 내지 38, 30 내지 36, 30 내지 34, 30 내지 32, 32 내지 50, 32 내지 48, 32 내지 46, 32 내지 44, 32 내지 42, 32 내지 40, 32 내지 38, 32 내지 36, 32 내지 34, 34 내지 50, 34 내지 48, 34 내지 46, 34 내지 44, 34 내지 42, 34 내지 40, 34 내지 38, 34 내지 36, 36 내지 50, 36 내지 48, 36 내지 46, 36 내지 44, 36 내지 42, 36 내지 40, 36 내지 38, 38 내지 50, 38 내지 48, 38 내지 46, 38 내지 44, 38 내지 42, 38 내지 40, 40 내지 50, 40 내지 48, 40 내지 46, 40 내지 44, 40 내지 42, 42 내지 50, 42 내지 48, 42 내지 46, 42 내지 44, 44 내지 50, 44 내지 48, 44 내지 46, 46 내지 50, 46 내지 48 또는 48 내지 50)개의 뉴클레오티드들 또는 뉴클레오티드 염기 쌍들을 함유하는 뉴클레오티드 서열이다. 일부 실시양태에서, 올리고머성 화합물은 세포 내에서 발현되는 표적 핵산 또는 표적 유전자에서의 코딩 서열에 적어도 부분적으로 상보적인 핵염기 서열을 갖는다. 일부 실시양태에서, 올리고머성 화합물은, 유전자를 발현하는 세포에 전달 시, 기저 유전자의 발현을 억제할 수 있으며, 본원에서 "발현-억제성 올리고머성 화합물"로 지칭된다. 유전자 발현은 시험관내 또는 생체내 억제될 수 있다.
"올리고머성 화합물"은 올리고뉴클레오티드, 단일-가닥 올리고뉴클레오티드, 단일-가닥 안티센스 올리고뉴클레오티드, 짧은 간섭 RNA (siRNA), 이중-가닥 RNA (dsRNA), 마이크로 RNA (miRNA), 짧은 헤어핀 RNA (shRNA), 리보자임, 간섭 RNA 분자 및 다이서 기질을 포함하나 이에 제한되지는 않는다. 일부 실시양태에서, 올리고머성 화합물은 단일-가닥 올리고머성 화합물이다. 일부 실시양태에서, 올리고머성 화합물은 이중-가닥 올리고머성 화합물이다.
일부 실시양태에서, 1종 이상의 화물 분자는 "RNAi 작용제"이며, 이는 본원에 정의된 바와 같이, 서열 특이적 방식으로 표적 mRNA의 메신저 RNA (mRNA) 전사체의 번역을 저하시키거나 또는 억제할 수 있는 RNA 또는 RNA-유사 (예를 들어, 화학적으로 변형된 RNA) 올리고뉴클레오티드 분자를 함유하는 작용제이다. 본원에 사용된 RNAi 작용제는 RNA 간섭 메카니즘 (즉, 포유동물 세포의 RNA 간섭 경로 기구 (RNA-유도된 침묵화 복합체 또는 RISC)와의 상호작용을 통해 RNA 간섭을 유도함)을 통해, 또는 임의의 대안적 메카니즘(들) 또는 경로(들)에 의해 작용할 수 있다. RNAi 작용제는, 이 용어가 본원에 사용될 때, 주로 RNA 간섭 메카니즘을 통해 작용하는 것으로 생각되지만, 개시된 RNAi 작용제는 임의의 특정한 작용 경로 또는 메카니즘에 구애받지 않거나 또는 그로 제한되지 않는다. RNAi 작용제는 단일-가닥 올리고뉴클레오티드, 단일-가닥 안티센스 올리고뉴클레오티드, 짧은 간섭 RNA (siRNA), 이중-가닥 RNA (dsRNA), 마이크로 RNA (miRNA), 짧은 헤어핀 RNA (shRNA) 및 다이서 기질을 포함하나 이에 제한되지는 않는다.
전형적으로, RNAi 작용제는 적어도, 제1 서열을 포함하는 센스 가닥 (또한 패신저 가닥으로 지칭됨) 및 제2 서열을 포함하는 안티센스 가닥 (또한 가이드 가닥으로 지칭됨)으로 구성될 수 있다. RNAi 작용제의 센스 및 안티센스 가닥의 길이는 각각 16 내지 49개 뉴클레오티드 길이일 수 있다. 일부 실시양태에서, RNAi 작용제의 센스 및 안티센스 가닥은 독립적으로 17 내지 26개 뉴클레오티드 길이이다. 일부 실시양태에서, 센스 및 안티센스 가닥은 독립적으로 19 내지 26개 뉴클레오티드 길이이다. 일부 실시양태에서, 센스 및 안티센스 가닥은 독립적으로 21 내지 26개 뉴클레오티드 길이이다. 일부 실시양태에서, 센스 및 안티센스 가닥은 독립적으로 21 내지 24개 뉴클레오티드 길이이다. 센스 및 안티센스 가닥은 동일한 길이 또는 상이한 길이일 수 있다. RNAi 작용제는 표적 유전자에서의 서열에 적어도 부분적으로 상보적인 안티센스 가닥 서열을 포함하고, 표적을 발현하는 세포에 전달 시, RNAi 작용제는 생체내 또는 시험관내 1종 이상의 표적 유전자의 발현을 억제할 수 있다.
일반적으로 올리고머성 화합물, 및 구체적으로 RNAi 작용제는 변형된 뉴클레오티드 및/또는 1개 이상의 비-포스포디에스테르 연결로 구성될 수 있다. 본원에 사용된 "변형된 뉴클레오티드"는 리보뉴클레오티드 (2'-히드록실 뉴클레오티드) 이외의 뉴클레오티드이다. 일부 실시양태에서, 뉴클레오티드의 적어도 50% (예를 들어, 적어도 60%, 적어도 70%, 적어도 80%, 적어도 90%, 적어도 95%, 적어도 97%, 적어도 98%, 적어도 99% 또는 100%)가 변형된 뉴클레오티드이다. 본원에 사용된, 변형된 뉴클레오티드는 데옥시리보뉴클레오티드, 뉴클레오티드 모방체, 무염기 뉴클레오티드, 2'-변형된 뉴클레오티드, 3'-3' 연결 (역위) 뉴클레오티드, 비-천연 염기-포함 뉴클레오티드, 가교 뉴클레오티드, 펩티드 핵산, 2',3'-seco 뉴클레오티드 모방체 (비-잠금형 핵염기 유사체, 잠금형 뉴클레오티드, 3'-O-메톡시 (2' 뉴클레오시드간 연결) 뉴클레오티드, 2'-F-아라비노 뉴클레오티드, 5'-Me, 2'-플루오로 뉴클레오티드, 모르폴리노 뉴클레오티드, 비닐 포스포네이트 데옥시리보뉴클레오티드, 비닐 포스포네이트 함유 뉴클레오티드, 및 시클로프로필 포스포네이트 함유 뉴클레오티드를 포함하나 이에 제한되지는 않는다. 2'-변형된 뉴클레오티드 (즉, 5-원 당 고리의 2' 위치에 히드록실 기 이외의 기를 갖는 뉴클레오티드)는 2'-O-메틸 뉴클레오티드, 2'-데옥시-2'-플루오로 뉴클레오티드, 2'-데옥시 뉴클레오티드, 2'-메톡시에틸 (2'-O-2-메톡실에틸) 뉴클레오티드, 2'-아미노 뉴클레오티드 및 2'-알킬 뉴클레오티드를 포함하나 이에 제한되지는 않는다.
더욱이, 올리고머성 화합물, 예컨대 RNAi 작용제의 1개 이상의 뉴클레오티드는 비-표준 연결 또는 백본 (즉, 변형된 뉴클레오시드간 연결 또는 변형된 백본)에 의해 연결될 수 있다. 변형된 뉴클레오시드간 연결은 비-포스페이트-함유 공유 뉴클레오시드간 연결일 수 있다. 변형된 뉴클레오시드간 연결 또는 백본은 5'-포스포로티오에이트 기, 키랄 포스포로티오에이트, 티오포스페이트, 포스포로디티오에이트, 포스포트리에스테르, 아미노알킬-포스포트리에스테르, 알킬 포스포네이트 (예를 들어, 메틸 포스포네이트 또는 3'-알킬렌 포스포네이트), 키랄 포스포네이트, 포스피네이트, 포스포르아미데이트 (예를 들어, 3'-아미노 포스포르아미데이트, 아미노알킬포스포르아미데이트 또는 티오노포스포르아미데이트), 티오노알킬-포스포네이트, 티오노알킬포스포트리에스테르, 모르폴리노 연결, 정상적인 3'-5' 연결을 갖는 보라노포스페이트, 보라노포스페이트의 2'-5' 연결 유사체, 또는 뉴클레오시드 단위의 인접해 있는 쌍이 3'-5'에서 5'-3'으로 또는 2'-5'에서 5'-2'로 연결된 역극성을 갖는 보라노포스페이트를 포함하나 이에 제한되지는 않는다.
주어진 화합물에서 모든 위치가 균일하게 변형될 필요는 없다. 반대로, 1종 초과의 변형이 단일 올리고머성 화합물에 또는 심지어 그의 단일 뉴클레오티드에 혼입될 수 있다.
RNAi 작용제의 센스 가닥 및 안티센스 가닥은 관련 기술분야에 공지된 방법에 의해 합성 및/또는 변형될 수 있다. 예를 들어, 알파-ENaC 발현의 억제에 대해 지시된 RNAi 작용제의 개시내용은, 예를 들어, 국제 특허 출원 공개 번호 WO 2008/152131에서 찾아볼 수 있으며, 상기 공개는 그 전문이 본원에 참조로 포함된다. RNAi 작용제에 관한 추가의 개시내용, 예를 들어, 변형의 개시내용은, 예를 들어, 국제 특허 출원 번호 PCT/US2017/0455446 (애로우헤드 파마슈티컬스 인코포레이티드(Arrowhead Pharmaceuticals, Inc.))에서 찾아볼 수 있으며, 상기 출원 또한 그 전문이 본원에 참조로 포함된다.
일부 실시양태에서, 1종 이상의 화물 분자(들)는 약동학적 (PK) 조정제로서 작용할 수 있는 PEG 모이어티를 포함할 수 있거나 또는 그로 이루어질 수 있다. 일부 실시양태에서, 1종 이상의 화물 분자는 약 20-900개의 에틸렌 옥시드 (CH2-CH2-O) 단위 (예를 들어, 20 내지 850, 20 내지 800, 20 내지 750, 20 내지 700, 20 내지 650, 20 내지 600, 20 내지 550, 20 내지 500, 20 내지 450, 20 내지 400, 20 내지 350, 20 내지 300, 20 내지 250, 20 내지 200, 20 내지 150, 20 내지 100, 20 내지 75, 20 내지 50, 100 내지 850, 100 내지 800, 100 내지 750, 100 내지 700, 100 내지 650, 100 내지 600, 100 내지 550, 100 내지 500, 100 내지 450, 100 내지 400, 100 내지 350, 100 내지 300, 100 내지 250, 100 내지 200, 100 내지 150, 200 내지 850, 200 내지 800, 200 내지 750, 200 내지 700, 200 내지 650, 200 내지 600, 200 내지 550, 200 내지 500, 200 내지 450, 200 내지 400, 200 내지 350, 200 내지 300, 200 내지 250, 250 내지 900, 250 내지 850, 250 내지 800, 250 내지 750, 250 내지 700, 250 내지 650, 250 내지 600, 250 내지 550, 250 내지 500, 250 내지 450, 250 내지 400, 250 내지 350, 250 내지 300, 300 내지 900, 300 내지 850, 300 내지 800, 300 내지 750, 300 내지 700, 300 내지 650, 300 내지 600, 300 내지 550, 300 내지 500, 300 내지 450, 300 내지 400, 300 내지 350, 350 내지 900, 350 내지 850, 350 내지 800, 350 내지 750, 350 내지 700, 350 내지 650, 350 내지 600, 350 내지 550, 350 내지 500, 350 내지 450, 350 내지 400, 400 내지 900, 400 내지 850, 400 내지 800, 400 내지 750, 400 내지 700, 400 내지 650, 400 내지 600, 400 내지 550, 400 내지 500, 400 내지 450, 450 내지 900, 450 내지 850, 450 내지 800, 450 내지 750, 450 내지 700, 450 내지 650, 450 내지 600, 450 내지 550, 450 내지 500, 500 내지 900, 500 내지 850, 500 내지 800, 500 내지 750, 500 내지 700, 500 내지 650, 500 내지 600, 500 내지 550, 550 내지 900, 550 내지 850, 550 내지 800, 550 내지 750, 550 내지 700, 550 내지 650, 550 내지 600, 600 내지 900, 600 내지 850, 600 내지 800, 600 내지 750, 600 내지 700, 600 내지 650, 650 내지 900, 650 내지 850, 650 내지 800, 650 내지 750, 650 내지 700, 700 내지 900, 700 내지 850, 700 내지 800, 700 내지 750, 750 내지 900, 750 내지 850, 750 내지 800, 800 내지 900, 850 내지 900 또는 850 내지 900개의 에틸렌 옥시드 단위)를 갖는 PEG 모이어티를 포함할 수 있다. 일부 실시양태에서, 1종 이상의 화물 분자(들)는 대략 455개의 에틸렌 옥시드 단위를 갖는 PEG 모이어티 (약 20 킬로달톤 (kDa)의 분자량)로 이루어진다. 일부 실시양태에서, PEG 모이어티는 약 2 킬로달톤의 분자량을 갖는다. 일부 실시양태에서, PEG 모이어티는 약 20 킬로달톤의 분자량을 갖는다. 일부 실시양태에서, PEG 모이어티는 약 40 킬로달톤의 분자량을 갖는다. 본원에 기재된 PEG 모이어티는 선형 또는 분지형일 수 있다. PEG 모이어티는 이산형 (단분산형) 또는 비-이산형 (다분산형)일 수 있다. PK 증진 화물 분자로서 사용하기 위한 PEG 모이어티는 상업적으로 구입할 수 있다. 일부 실시양태에서, 1종 이상의 화물 분자(들)는 PK 조정제 또는 증진제로서 작용할 수 있는 PEG 모이어티, 뿐만 아니라 상이한 화물 분자, 예컨대 제약 활성 성분 또는 화합물을 포함한다.
기재된 αvβ6 인테그린 리간드는 그의 염 또는 용매화물을 포함한다. αvβ6 리간드의 용매화물은 상호 인력으로 인해 형성된, αvβ6 인테그린 리간드 상의 불활성 용매 분자의 부가물을 의미하는 것으로 이해된다. 용매화물은, 예를 들어, 1수화물 또는 2수화물, 또는 알콜, 예컨대, 예를 들어, 메탄올 또는 에탄올과의 부가 화합물이다.
유리 아미노 기 또는 유리 히드록실 기는 상응하는 보호기와 함께 αvβ6 인테그린 리간드의 치환기로서 제공될 수 있다.
αvβ6 인테그린 리간드는 또한, 예를 들어, 유도체, 즉 시험관내 또는 유기체에서 절단되는, 예를 들어, 알킬 또는 아실 기, 당 또는 올리고펩티드로 변형된 αvβ6 인테그린 리간드를 포함한다.
일부 실시양태에서, 본원에 개시된 αvβ6 인테그린 리간드는 리간드-매개 세포내이입, 음세포작용을 통한, 또는 다른 수단에 의한, 그의 표면 상에서 αvβ6 인테그린을 제시하는 세포의 시토졸로의 화물 분자의 전달을 용이하게 한다. 일부 실시양태에서, 본원에 개시된 αvβ6 인테그린 리간드는 αvβ6 인테그린을 제시하는 세포의 원형질 막으로의 화물 분자의 전달을 용이하게 한다.
일부 실시양태에서, αvβ6 인테그린 리간드는 하기에 의해 나타내어지는 구조를 포함하며:
Figure 112019043490420-pct00003
여기서 Z는 아민-말단 캡 (예를 들어, 본원에 기재되어 있거나 또는 관련 기술분야에 공지된 임의의 아민-말단 캡)을 포함하고, R5 및 R6은 각각 아미노산 Xaa1 및 Xaa2의 측쇄이다.
일부 실시양태에서, αvβ6 인테그린 리간드는 하기 구조를 포함하며, 여기서 Z 및 R1은 본원의 화학식 III 및 화학식 IV에 대해 정의된 바와 같고, R7은 OH, J, J-R1, J-R1-R2 또는 Y-R1-R3 (각각 본원의 화학식 III 및 화학식 IV에 대해 정의된 바와 같음)일 수 있다:
Figure 112019043490420-pct00004
Figure 112019043490420-pct00005
Figure 112019043490420-pct00006
Figure 112019043490420-pct00007
Figure 112019043490420-pct00008
Figure 112019043490420-pct00009
Figure 112019043490420-pct00010
일부 실시양태에서, 기재된 αvβ6 리간드는 자연 발생 αvβ6 인테그린-결합 펩티드 RGDLATLRQL (서열식별번호: 1)과 비교하여 증가된 혈청 안정성을 제시하였다. 본원의 실시예에서 제시된 바와 같이, 37℃의 마우스 혈장 중에서 4 h 인큐베이션 후에 자연 발생 펩티드 RGDLATLRQL (서열식별번호: 1)의 단지 약 5%만이 검출가능하다. 펩티드 RGDLATLRQL (서열식별번호: 1)은 37℃의 마우스 혈장 중에서 8시간 후에 검출할 수 없었다. 일부 실시양태에서, 본원에 개시된 αvβ6 인테그린 리간드는 37℃의 마우스 혈장 중에서 12-시간 인큐베이션 후에 HLPC에 의해 검출 시 20% 초과의 리간드 잔류율을 나타낸다. 기재된 αvβ6 인테그린 리간드는 천연 펩티드보다 증가된 혈청 안정성을 가지면서, αvβ6 인테그린에 대한 결합능 (친화성)을 유지하였다.
제약 조성물
일부 실시양태에서, 본 개시내용은 본원에 개시된 αvβ6 인테그린 리간드 중 1종 이상을 포함하거나 또는 그로 이루어지거나 또는 그로 본질적으로 이루어지는 제약 조성물을 제공한다.
본원에 사용된 "제약 조성물"은 약리학상 유효량의 활성 제약 성분 (API), 및 임의로 1종 이상의 제약상 허용되는 부형제를 포함한다. 제약상 허용되는 부형제 (부형제)는 약물 전달 시스템에 의도적으로 포함되는, 활성 제약 성분 (API, 치료 제품) 이외의 물질이다. 부형제는 의도된 투여량에서 치료 효과를 발휘하지 않거나 또는 치료 효과를 발휘하도록 의도되지 않는다. 부형제는 a) 제조 동안 약물 전달 시스템의 가공을 보조하고/거나, b) API의 안정성, 생체이용률 또는 환자 용인성을 보호, 지원 또는 증진시키고/거나, c) 제품 식별을 돕고/거나, d) 저장 또는 사용 동안 API의 전반적인 안전성, 유효성, 전달의 임의의 다른 속성을 증진시키는 작용을 할 수 있다. 제약상 허용되는 부형제는 불활성 물질일 수 있거나 또는 불활성 물질이 아닐 수 있다.
부형제는 흡수 증진제, 부착방지제, 소포제, 항산화제, 결합제, 완충제, 담체, 코팅제, 착색제, 전달 증진제, 전달 중합체, 덱스트란, 덱스트로스, 희석제, 붕해제, 유화제, 증량제, 충전제, 향미제, 활택제, 함습제, 윤활제, 오일, 중합체, 보존제, 염수, 염, 용매, 당, 현탁화제, 지속 방출 매트릭스, 감미제, 증점제, 장성 작용제, 비히클, 발수제 및 습윤제를 포함하나 이에 제한되지는 않는다.
본원에 기재된 제약 조성물은 제약 조성물에서 통상적으로 발견되는 다른 추가의 구성요소를 함유할 수 있다. 일부 실시양태에서, 추가의 구성요소는 제약 활성 물질이다. 제약 활성 물질은 항소양제, 수렴제, 국부 마취제 또는 항염증제 (예를 들어, 항히스타민제, 디펜히드라민 등), 소분자 약물, 항체, 항체 단편, 압타머 및/또는 백신을 포함하나 이에 제한되지는 않는다.
제약 조성물은 또한 보존제, 가용화제, 안정화제, 습윤제, 유화제, 감미제, 착색제, 부취제, 삼투압의 변동을 위한 염, 완충제, 코팅제 또는 항산화제를 함유할 수 있다. 이들은 또한 다른 치료상 가치있는 작용제를 함유할 수 있다.
제약 조성물은 국부 치료가 바람직한지 또는 전신 치료가 바람직한지의 여부 및 치료하려는 부위에 따라 다수의 방식으로 투여될 수 있다. 투여는 관련 기술분야에 통상적으로 공지된 임의의 방식에 의해, 예컨대, 비제한적으로, 국소 (예를 들어, 경피 패치), 폐 (예를 들어, 분말 또는 에어로졸의 흡입 또는 공기주입, 예컨대 네뷸라이저, 기관내, 비강내), 표피, 경피, 경구 또는 비경구로 이루어질 수 있다. 비경구 투여는 정맥내, 동맥내, 피하, 복강내 또는 근육내 주사 또는 주입; 진피하 (예를 들어, 이식된 장치를 통해), 두개내, 실질내, 척수강내 및 뇌실내 투여를 포함하나 이에 제한되지는 않는다. 일부 실시양태에서, 본원에 기재된 제약 조성물은 피하 주사에 의해 투여된다. 제약 조성물은 경구로, 예를 들어 정제, 코팅된 정제, 당의정, 경질 또는 연질 젤라틴 캡슐, 용액, 에멀젼 또는 현탁액의 형태로 투여될 수 있다. 투여는 또한 직장으로, 예를 들어 좌제를 사용하여; 국부로 또는 경피로, 예를 들어 연고, 크림, 겔 또는 용액을 사용하여; 또는 비경구로, 예를 들어 주사액을 사용하여 수행될 수 있다.
주사 용도에 적합한 제약 조성물은 멸균 수성 용액 (수용성인 경우) 또는 분산액, 및 멸균 주사액 또는 분산액의 즉석 제조를 위한 멸균 분말을 포함한다. 정맥내 투여를 위해 적합한 담체는 생리 염수, 정균수, 크레모포르 ELTM (뉴저지주 파시파니 소재 바스프(BASF)) 또는 포스페이트 완충 염수를 포함한다. 이는 제조 및 저장 조건 하에 안정적이어야 하며, 미생물 예컨대 박테리아 및 진균의 오염 작용에 대해 보존되어야 한다. 담체는, 예를 들어, 물, 에탄올, 폴리올 (예를 들어, 글리세롤, 프로필렌 글리콜 및 액체 폴리에틸렌 글리콜) 및 그의 적합한 혼합물을 함유하는 용매 또는 분산 매질일 수 있다. 적절한 유동성은, 예를 들어, 코팅 예컨대 레시틴의 사용에 의해, 분산액의 경우에는 요구되는 입자 크기의 유지에 의해 및 계면활성제의 사용에 의해 유지될 수 있다. 다수의 경우에, 등장화제, 예를 들어, 당, 폴리알콜 예컨대 만니톨, 소르비톨, 및 염화나트륨을 조성물에 포함시키는 것이 바람직할 것이다. 주사가능한 조성물의 지속 흡수는 흡수를 지연시키는 작용제, 예를 들어, 알루미늄 모노스테아레이트 및 젤라틴을 조성물에 포함시킴으로써 야기될 수 있다.
멸균 주사액은 요구되는 양의 활성 화합물을, 필요에 따라 상기 열거된 성분 중 1종 또는 그의 조합과 함께 적절한 용매 중에 혼입한 다음, 여과 멸균함으로써 제조될 수 있다. 일반적으로, 분산액은 활성 화합물을 기본 분산 매질 및 상기 열거된 것들 중 요구되는 다른 성분을 함유하는 멸균 비히클 중에 혼입함으로써 제조된다. 멸균 주사액의 제조를 위한 멸균 분말의 경우에, 제조 방법은 그의 이전에 멸균-여과된 용액으로부터 활성 성분과 임의의 추가의 목적하는 성분의 분말을 생성하는 진공 건조 및 동결-건조를 포함한다.
관절내 투여에 적합한 제제는 미세결정질 형태, 예를 들어, 수성 미세결정질 현탁액의 형태일 수 있는, 본원에 기재된 임의의 리간드의 멸균 수성 제제의 형태일 수 있다. 리포솜 제제 또는 생분해성 중합체 시스템이 또한 관절내 및 안과적 투여 둘 다를 위한 본원에 기재된 임의의 리간드를 제공하기 위해 사용될 수 있다.
활성 화합물은, 이식물 및 마이크로캡슐화 전달 시스템을 포함한 제어 방출 제제와 같이, 체내로부터의 급속 제거에 대해 화합물을 보호할 담체와 함께 제조될 수 있다. 생분해성 생체적합성 중합체, 예컨대 에틸렌 비닐 아세테이트, 폴리무수물, 폴리글리콜산, 콜라겐, 폴리오르토에스테르 및 폴리락트산이 사용될 수 있다. 이러한 제제의 제조 방법은 관련 기술분야의 통상의 기술자에게 명백할 것이다. 리포솜 현탁액이 또한 제약상 허용되는 담체로서 사용될 수 있다. 이들은 관련 기술분야의 통상의 기술자에게 공지된 방법에 따라, 예를 들어, 미국 특허 번호 4,522,811에 기재된 바와 같이 제조될 수 있다.
제약 조성물은 제약 조성물에서 통상적으로 발견되는 다른 추가의 구성요소를 함유할 수 있다. 이러한 추가의 구성요소는 항소양제, 수렴제, 국부 마취제 또는 항염증제 (예를 들어, 항히스타민제, 디펜히드라민 등)를 포함하나 이에 제한되지는 않는다. 본원에 사용된 "약리학상 유효량", "치료 유효량" 또는 간단하게 "유효량"은 약리학적, 치료적 또는 예방적 결과를 발생시키기 위한 제약 활성제의 양을 지칭한다.
αvβ6 리간드를 함유하는 의약이 또한 본 발명의 목적이며, αvβ6 리간드를 함유하는 1종 이상의 화합물 및 원하는 경우에 1종 이상의 다른 치료상 가치있는 물질을 인간 대상체에게 투여하기에 적합한 투여 형태가 되도록 하는 것을 포함하는, 이러한 의약의 제조 방법도 마찬가지로 본 발명의 목적이다.
세포, 조직 및 비-인간 유기체
본원에 기재된 αvβ6 리간드 중 적어도 1종을 포함하는 세포, 조직 및 비-인간 유기체가 고려된다. 상기 세포, 조직 또는 비-인간 유기체는 관련 기술분야에서 이용가능한 임의의 수단에 의해 αvβ6 리간드를 세포, 조직 또는 비-인간 유기체에 전달함으로써 이루어진다. 일부 실시양태에서, 세포는 인간 세포를 포함하나 이에 제한되지는 않는, 포유동물 세포이다.
기재된 αvβ6 리간드, 및 본원에 개시된 αvβ6 리간드를 포함하는 제약 조성물은 키트, 용기, 팩 또는 디스펜서에 패키징되거나 또는 포함될 수 있다. αvβ6 리간드, 및 αvβ6 리간드를 포함하는 제약 조성물은 사전-충전 시린지 또는 바이알에 패키징될 수 있다.
상기 제공된 실시양태 및 아이템은 이제 하기 비제한적 실시예로 예시된다.
실시예
실시예 1. 혈청 안정성 연구를 위한 αvβ6 리간드의 합성
켐-매트릭스 링크 아미드 수지를 프릿 폴리프로필렌 시린지에 넣고, 사용 전 30분 동안 DCM 중에서 휘저었다. 하기 표준 고체 상 펩티드 합성 조건을 사용하였다. Fmoc 탈보호는 1 mmol의 수지당 40 ml의 피페리딘:DMF 용액 (20:80 v/v)을 20 min 동안 침지시킴으로써 수행하였다. 아미드 커플링은 40분 동안 DMF 중 Fmoc-아미노산의 0.1 M 농도에서 DMF 중 4 몰 당량의 Fmoc-아미노산, 4 몰 당량의 HBTU 및 10 몰 당량의 디이소프로필에틸아민으로 수지를 침지시킴으로써 수행하였다. Fmoc-Dap(DNP)-OH를 사용하여 수지에 DNP 발색단을 부착시키고, 펩티드를 Dap α-아민으로부터 합성하였다. 수지로부터의 절단은 2시간 동안 트리플루오로아세트산 용액 중에서 수행하였다. 용매를 가압 공기를 통해 원래 부피의 10%로 감소시키고, Et2O를 사용하여 침전시켰다. TFA를 통한 마이크로절단 및 분석용 HPLC-MS로 생성물의 정체를 확인하였다. 이어서, 펩티드를 슈펠코 "디스커버리 바이오" 와이드 포어 C18 칼럼 (25 cm x 21 mm, 10 um 입자)을 사용하며 대략 1 ml/min의 선형 구배로 용리하는 정제용 스케일 시마즈 HPLC 상에서 > 95%의 순도까지 정제하였다. 순도는 워터스 엑스브리지 BEH130 C18 칼럼 (250 mm x 6.6 mm, 5μm 입자)이 장착된 분석용 시마즈 HPLC 상에서 50분에 걸쳐 10-90% B 용매를 사용하여 산정하였다. A 용매는 H2O:F3CCO2H 100:0.1 v/v를 나타내고, B 용매는 CH3CN: F3CCO2H 100:0.1 v/v를 나타내었다.
Figure 112019043490420-pct00011
실시예 2. αvβ6 리간드의 혈청 안정성
αvβ6 리간드의 혈청 안정성을, 마우스 혈청 중에서 αvβ6 리간드를 인큐베이션하고, 다양한 시점에 소화되지 않은 펩티드의 백분율을 분석함으로써 시험하였다. 소화되지 않은 αvβ6 리간드는 분석용 HPLC에 의해 결정되었다. 펩티드를 H2O 중에 >10 mg/ml의 농도로 용해시킴으로써 αvβ6 리간드의 개별 스톡 용액을 제조하였다. αvβ6 리간드의 농도는 UV/Vis 흡수를 사용하여 산정하였다 (DNP : λ=365, ε=17300 M-1Cm-1). αvβ6 리간드를 90% 마우스 혈장 중에 1 mg/ml의 리간드로 희석하고, 37℃에서 인큐베이터에 넣어 두었다. 주어진 시점 (4, 8, 12 및 24시간)에, 샘플을 50분에 걸쳐 10-90% B 용매를 사용하는 워터스 엑스브리지 BEH130 C18 칼럼 (250 mm x 6.6 mm, 5μm 입자)이 장착된 분석용 HPLC (시마즈 HPLC) 상에 주입하였다. A 용매는 H2O:F3CCO2H 100:0.1 v/v를 나타내고; B 용매는 CH3CN: F3CCO2H 100:0.1 v/v를 나타낸다.
혈청 인큐베이션 이후의 퍼센트 리간드 잔류율을 하기 방정식을 사용하여 계산하였다:
% 잔류율 = [(t=x에서의 면적) ÷ (t=0에서의 면적)] x 100%
여기서 t=0에서의 면적은 혈장 중에 리간드를 희석한 직후의 리간드의 피크하 면적이고, t=x에서의 면적은 시간 = x일 때의 펩티드의 피크하 면적이었다.
각각의 펩티드를 화물 분자 PEG8-Dap(DNP)에 공유 연결시켰다. 이어서, PEG8-Dap(DNP)는 분석을 용이하게 하기 위해 사용되었다.
Figure 112019043490420-pct00012
펩티드 유도체를 화물 분자 PEG8-Dap(DNP)에 연결시키고, 4, 8, 12 또는 24시간 동안 37℃의 마우스 혈청 중에서 인큐베이션하였다. 펩티드 유도체 안정성을 HPLC에 의해 측정하였다. 데이터가 하기 표 1에 제시되어 있다 (아민-말단 캡 및 Xaa1Xaa2는 밑줄 표시되어 있음):
표 1. αvβ6 리간드의 혈청 안정성
Figure 112019043490420-pct00013
Figure 112019043490420-pct00014
본원에 제시된 바와 같이, 아민-말단 캡 (Z)의 존재는 증가된 혈청 안정성을 제공할 수 있다. 추가로, 본원에 제시된 바와 같이, 본원에 개시된 화학식에서 Xaa1, Xaa2 및/또는 J (예를 들어, Xaa3 및 Xaa4)에서의 비-표준 아미노산의 존재가 또한 서열식별번호: 1의 천연 펩티드와 비교하여 증가된 혈청 안정성을 제공한다.
실시예 3. αvβ6 리간드의 인테그린 결합
A. αvβ6 리간드-화물 분자 접합. 각각의 αvβ6 리간드를 가역적으로 변형된 1170-100B 중합체 화물 분자에 부착시켰다. 1170-100B 중합체 화물 분자 (약 45000의 MW를 갖는, 56:44 에톡시에틸아민 아크릴레이트:프로필 아크릴레이트 공중합체)를 Cy5 (NHS 링커)로 표지하고, RT에서 1 h 동안 50 mM HEPES pH 9.0 완충제 중에서 2:1 (중합체:알데히드-PEG24-ACit)의 중량비로 알데히드-PEG24-ACit와 조합하여 (알데히드-PEG24-ACit)n-1170-100B를 형성하였으며, 여기서 n은 0 초과의 정수이다. 전형적으로, n은 약 10이었다.
Figure 112019043490420-pct00015
이어서, 알데히드-PEG24-ACit-변형된 중합체를 RT에서 1 h 동안 50 mM HEPES pH 9.0 완충제 중에서 1:8 (중합체:PEG12-ACit)의 중량비로 PEG12-ACit와 반응시켜 (알데히드-PEG24-ACit)n-1170-100B-(CitA-PEG12)m을 형성하였으며, 여기서 m은 0 초과의 정수이다.
Figure 112019043490420-pct00016
이어서, 변형된 중합체를 세파덱스 G-50 스핀 칼럼을 사용하여 정제하고, 농도를 결정하였다:
Figure 112019043490420-pct00017
각각의 αvβ6 리간드를 화물 분자에 대한 접합을 용이하게 하기 위해 HyNic로 변형시켰다. 정제된 중합체를 RT에서 밤새 50 mM NaOAC-HOAc pH 5.0 완충제 중에서 1:1.9 (중합체:αvβ6 리간드)의 중량비로 αvβ6 리간드-(PEG)8-K-HyNic와 조합하여 αvβ6 리간드-중합체 접합체를 형성하였다. αvβ6 리간드-중합체 접합체를 세파덱스 G-50 스핀 칼럼을 사용하여 정제하였다.
Figure 112019043490420-pct00018
접합 효율을, 비스-아릴 히드라존 결합에 대한 2.9x101 M-1cm-1의 흡광 계수를 사용하여, 354 nm에서의 αvβ6-중합체 접합체의 흡광도를 측정함으로써 정량화하였다.
Figure 112019043490420-pct00019
αvβ6-중합체 접합체를 추가의 분석을 위해 목적하는 농도까지 등장성 글루코스 용액으로 희석하였다.
B. αvβ6 리간드 결합 (유동 세포측정 분석). αvβ6 리간드의 αvβ6 인테그린에 대한 결합 특이성을 산정하기 위해, 각각의 αvβ6 리간드 또는 음성 대조군 펩티드를 Cy5-표지된 중합체에 접합시키고 (상기 기재된 바와 같음), 세포에 대한 결합에 대해 평가하였다. HUH7 (인간 간세포성 암종) 및 SKOV3 (인간 난소 암종) 세포는 매우 낮은 αvβ6 세포 표면 발현을 나타내는 것으로 결정되었으며, 이를 음성-대조군 세포주로서 이용하였다. H2009 (인간 폐 상피 선암종) 및 CAPAN-2 (인간 췌장 선암종) 세포는 αvβ6 양성-대조군 세포주로서 기능하였다. 세포를 아큐타제를 사용하여 배양 플라스크로부터 분리하고, PBS로 세척하고, 5 ml 폴리스티렌 둥근-바닥 튜브에 200 μl 완전 배지 (보충제 및 소 태아 혈청이 함유된 배양 배지) 중 200,000개 세포로 시딩하였다. αvβ6 리간드-중합체 접합체 또는 리간드 없는 중합체 접합체를 5 μg/ml (중합체-Cy5 농도)로 세포에 첨가하고, 혼합하고, 3 h 동안 37℃에서 인큐베이션하였다. 37℃에서의 인큐베이션은 리간드/수용체 상호작용을 용이하게 하며, 이는 세포 밖의 세포 표면에 대한 고정된 결합 및/또는 내재화된 리간드/수용체 복합체를 초래할 수 있다. 혼합물을 1 h 간격으로 재현탁시켰다. 3 h의 인큐베이션 이후, 세포를 4 ml 냉각 완충제 (PBS-2% FCS)로 2x 세척하고, 생/사멸 세포 게이팅을 위해 10 μM 사이톡스 블루 염색제를 함유하는 200 μl 완충제 중에 재현탁시켰다. 샘플을 바이올렛 (405nm), 블루 (488nm) 및 레드 (633nm) 레이저가 장착된 비디 바이오사이언시스 칸토 II 세포측정기 상에서 분석하였다.
처음에 생존 세포를 바이올렛 레이저를 사용하여 C 검출기 상에서 사이톡스 블루 음성 집단으로서 게이팅하였다. 이어서, 이들 생존 세포를 레드 레이저를 사용하여 Cy5 형광단의 평균 형광 강도 (MFI)로서 접합체 결합/흡수에 대해 산정하였다. 데이터 분석은 플로우조 v10.1 소프트웨어로 수행하였다. 각각의 αvβ6 리간드에 대한 고유 MFI 비 (sMFIr)를 하기 식에 의해 결정하였다:
고유 샘플 MFI 값/리간드가 없을 때의 MFI 값.
하기 표 2에 제시된 바와 같이, 펩티드 Ac-RGDLAAbuLCitAibL은 단지 SKOV3 세포에 대해 적당한 결합을 제시하였다. 이 펩티드는 HUH7 세포에 대해서는 유의한 결합을 제시하지 않았다. 따라서, 시험한 펩티드 어느 것도 비-특이적 결합을 나타내지 않았다. RGD를 함유하지 않는, 음성 대조군 펩티드 AcRGαMeDLAAbuLCitAib, AcRGDαMeLAAbuLCitAib, RGELATLRQL, AcCitGDLATLCitQL, AcK(Me)2GDLATLRQL 및 AcR(Me)2GDLATLRQL은 H2009 또는 CAPAN-2 αvβ6 인테그린-양성 대조군 세포에 대해 유의한 결합을 제시하지 않았으며, 이는 αvβ6 인테그린에 대한 친화성의 결여를 나타낸다. 대부분의 다른 펩티드는 H2009 또는 CAPAN-2 세포에 대해 천연 펩티드, RGDLATLRQL 및 RGDLATL과 비슷하거나 또는 그보다 더 높은 결합을 제시하였으며, 이는 αvβ6 인테그린에 대한 우수한 친화성을 나타낸다.
표 2. αvβ6 인테그린 발현 (H2009 및 CAPAN-2) 및 비-발현 세포 (HUH7 및 SKOV3)에 대한 αvβ6 리간드 결합
Figure 112019043490420-pct00020
Figure 112019043490420-pct00021
Figure 112019043490420-pct00022
Figure 112019043490420-pct00023
상기 표에서 확인되는 비-표준 아미노산 및 다른 화학적 기의 특정 약어는 하기와 같은 화학 구조를 갖는다:
Figure 112019043490420-pct00024
Figure 112019043490420-pct00025
Figure 112019043490420-pct00026
실시예 4. αvβ6 인테그린 리간드에 접합된, 알파-ENaC를 표적화하는 RNAi 작용제의 래트에서의 생체내 기관내 투여
26개 미만의 뉴클레오티드를 각각 갖는 센스 가닥 및 안티센스 가닥을 포함하는 이중-가닥 올리고뉴클레오티드 조성물 (즉, RNAi 작용제의 한 유형)을 관련 기술분야에 공지되어 있으며 올리고뉴클레오티드 합성에서 통상적으로 사용되는 일반적 절차에 따른 고체 상 포스포르아미다이트 기술에 따라 합성하였다. 본원에서 RNAi 작용제의 합성은 규모에 따라 합성을 위해 머메이드(MerMade)96E® (바이오오토메이션(Bioautomation)), 머메이드12® (바이오오토메이션), 또는 OP 파일럿 100 (지이 헬스케어(GE Healthcare))을 사용하여, 상업적으로 구입된 제어 세공 유리 (CPG, 500 Å 또는 600 Å, 미국 펜실베니아주 애스턴 소재 프라임 신세시스(Prime Synthesis)로부터 입수됨)로 만들어진 고체 지지체 상에서 수행하였다. 모든 RNA 및 2'-변형된 RNA 포스포르아미다이트는 상업적으로 구입하였다 (써모 피셔 사이언티픽(Thermo Fisher Scientific) (미국 위스콘신주 밀워키)). 절단 및 탈보호를 위해, 고체 상 합성의 마무리 후에, 건조된 고체 지지체를 30℃에서 1.5시간 동안 물 중 40 wt.% 메틸아민 및 28% 수산화암모늄 용액 (알드리치(Aldrich))의 1:1 부피 용액으로 처리하였다. 용액을 증발시키고, 고체 잔류물을 물 중에 재구성하였다. 정제를 위해, 조 올리고머를 TSKgel SuperQ-5PW 13μm 칼럼 및 시마즈 LC-8 시스템을 사용하여 음이온 교환 HPLC에 의해 정제하였다. 완충제 A는 20 mM 트리스, 5 mM EDTA, pH 9.0이며, 20% 아세토니트릴을 함유하였고, 완충제 B는 완충제 A와 동일하나, 1.5 M 염화나트륨이 첨가되었다. 260 nm에서의 UV 트레이스를 기록하였다. 적절한 분획을 풀링한 다음, 100mM 중탄산암모늄, pH 6.7 및 20% 아세토니트릴의 전개 완충제와 함께 세파덱스 G-25 파인이 패킹된 지이 헬스케어 XK 26/40 칼럼을 사용하여 크기 배제 HPLC 상에서 전개시켰다. 어닐링을 위해, 등몰 RNA 용액 (센스 및 안티센스)을 1xPBS (포스페이트-완충 염수, 1x, 코닝, 셀그로) 중에서 조합함으로써 상보적 가닥을 혼합하여 RNAi 작용제를 형성하였다. 일부 RNAi 작용제를 동결건조시키고, -15 내지 -25℃에서 저장하였다. 듀플렉스 농도를 1x PBS 중에서 UV-Vis 분광계로 용액 흡광도를 측정함으로써 결정하였다. 이어서, 260 nm에서의 용액 흡광도에 환산 계수 및 희석 배율을 곱하여 듀플렉스 농도를 결정하였다. 달리 언급되지 않는 한, 모든 환산 계수는 0.037 mg/(mL·cm)였다. 일부 실험의 경우에는, 환산 계수를 실험적으로 결정된 흡광 계수로부터 계산하였다.
실시예 4를 위해 합성된 RNAi 작용제는 아밀로리드-감수성 상피 나트륨 채널의 알파 서브유닛 (통상적으로 알파-ENaC 또는 SCNN1A로 지칭됨)을 발현하는 유전자에 대해 적어도 부분적으로 상보적인 핵염기 서열을 갖는 안티센스 가닥을 포함하였다. 알파-ENaC RNAi 작용제는 서열 특이적 방식으로 알파-ENaC의 메신저 RNA (mRNA) 전사체의 번역을 저하시키거나 또는 억제하며, 이에 의해 알파-ENaC 유전자의 발현을 억제할 수 있도록 설계되었다. RNAi 작용제는 변형된 뉴클레오티드 및 1개 초과의 비-포스포디에스테르 연결로 구성되었다.
연구 제1일 및 제2일에, 수컷 스프라그-돌리 래트에게 미세분무기 장치 (펜실베니아주 필라델피아 소재 펜 센추리(Penn Century))를 통해 200 마이크로리터의 용량을 기관내로 투여하였으며, 이는 하기 투여 그룹을 포함하였다: (1) 물 중 5% 덱스트로스 비히클 (D5W); (2) 5% 덱스트로스 중에 제제화된, 리간드를 갖지 않는 알파-ENaC RNAi 작용제 ("네이키드 RNAi 작용제") 1.5 mg/kg; (3) 5% 덱스트로스 중에 제제화된, 도 3의 αvβ6 인테그린 리간드에 접합된 알파-ENaC RNAi 작용제 (센스 가닥의 5' 말단 단부에서 접합된 αvβ6 인테그린 리간드) 1.5 mg/kg; 또는 (4) 음성 대조군 리간드로서 기능하는 Ac-RGELAAbuL-CitAibL (서열식별번호: 132)의 구조를 갖는 불활성화된 αvβ6 인테그린 리간드에 접합된 알파-ENaC RNAi 작용제 1.5 mg/kg. 'RGD' 모티프의 아스파르트산 (D)은 알파-v 인테그린 수용체에 대한 리간드 결합을 위해 요구되는 것으로 생각되고, 글루탐산 (E)의 치환을 갖는 리간드는 유의하게 감소된 av 인테그린 결합 친화성을 갖는다. 동일한 알파-ENaC RNAi 작용제를 그룹 2, 3 및 4에 사용하였다.
사용되는 αvβ6 인테그린 리간드를, TFA 절단 대신에, 30분 내지 1시간 동안 DCM (디클로로메탄) 중 20% HFIP (헥소플루오로이소프로판올)를 사용하여 달성되는 수지 절단을 제외하고는, 관련 기술분야에 널리 공지되어 있으며 본원의 실시예 1에 제시된 것들과 유사한 일반적 펩티드 합성 기술을 사용하여 TFP 에스테르 (도 1에 제시된 바와 같음)로서 합성하였다. RNAi 작용제의 센스 가닥의 5' 말단 단부를 C6 아민 (-NH2)으로 변형시켰다. 이어서, TFP-에스테르 αvβ6 인테그린 리간드를 실온에서, DMSO:물 9:1 중 3 당량의 TFP-에스테르 αvβ6 인테그린 리간드 및 염기로서의 과량의 트리에틸아민을 사용하여, RNAi 작용제의 변형된 센스 가닥의 5' 말단 단부에 위치하는 아미노 기에 접합시켰다. 용액에 ACN을 첨가하여 생성물을 침전시키고, 고진공 하에 건조시킴으로써 정제를 수행하였다.
그룹당 4마리의 래트에게 투여하였다. 래트를 연구 제5일에 안락사시키고, 수집 및 균질화 이후 양쪽 폐로부터 총 RNA를 단리하였다. 알파-ENaC의 mRNA 존재비를 프로브-기반 정량적 PCR에 의해 정량화하고, GAPDH 발현에 대해 정규화하고, 비히클 대조군 그룹의 분율로서 표현하였다 (기하 평균, +/- 95% 신뢰 구간).
표 3. 실시예 4의 대조군에 대해 정규화된 mRNA의 상대 알파-ENaC 발현
Figure 112019043490420-pct00027
상기 표 3에 제시된 바와 같이, 알파-ENaC RNAi 작용제에 접합된 도 3의 αvβ6 리간드는 네이키드 RNAi 작용제 (46% 녹다운) 및 RGE-대조군 리간드에 접합된 RNAi 작용제 (57% 녹다운)와 비교하여, 생체내 알파-ENaC 폐 표적의 알파-ENaC mRNA의 증가된 상대 녹다운 (대략 78% 녹다운)을 제시하였다.
실시예 5. αvβ6 인테그린 리간드에 접합된, 알파-ENaC를 표적화하는 RNAi 작용제의 래트에서의 생체내 기관내 투여
실시예 4에 기재된 것들과 유사한 알파-ENaC RNAi 작용제를 동일한 합성 절차에 따라 합성하였다. 연구 제1일 및 제2일에, 수컷 스프라그-돌리 래트에게 미세분무기 장치 (펜실베니아주 필라델피아 소재 펜 센추리)를 통해 200 마이크로리터의 용량을 투여하였으며, 이는 하기 투여 그룹을 포함하였다: (1) D5W 비히클; (2) D5W 중에 제제화된, 리간드를 갖지 않는 RNAi 작용제 ("네이키드 RNAi 작용제") 1.5 mg/kg; (3) D5W 중에 제제화된, 도 3의 αvβ6 인테그린 리간드에 접합된 알파-ENaC RNAi 작용제 1.5 mg/kg; 또는 (4) 도 11에 제시된 구조를 갖는 세자리 αvβ6 인테그린 리간드에 접합된 알파-ENaC RNAi 작용제 1.5 mg/kg. RNAi 작용제는 알파-ENaC 유전자의 발현을 억제하도록 설계되었다. 동일한 알파-ENaC RNAi 작용제를 그룹 2, 3 및 4에 사용하였다. RNAi 작용제의 센스 가닥의 5' 말단 단부를 실시예 4에서와 같이 C6 아민 (-NH2)으로 변형시켰다. 도 3의 αvβ6 인테그린 리간드를 실시예 4의 동일한 절차에 따라 합성하고 알파-ENaC RNAi 작용제에 접합시켰다. 도 11에 제시된 avb6 리간드에 접합시킬 때는, 알파-ENaC-RNAi 작용제를 먼저 염기로서 트리에틸아민을 사용하여 센스 가닥의 5' 아민 관능화된 말단 단부에 접합시킴으로써 DBCO-PEG5-NHS 에스테르로 관능화시켰다. 세자리 avb6 인테그린 리간드를 도 10에 제시된 바와 같이, PEG-아지드 반응성 기를 갖도록 합성하였다. 포스페이트 완충 염수/아세토니트릴 용매 시스템 중에서의 침전 후에, 세자리 avb6 인테그린 리간드를 구리-무함유 고리화첨가를 사용하여 RNAi 작용제에 접합시켰다.
그룹당 5마리의 래트에게 투여하였다. 래트를 연구 제5일에 안락사시키고, 수집 및 균질화 이후 양쪽 폐로부터 총 RNA를 단리하였다. 표적의 mRNA 존재비를 프로브-기반 정량적 PCR에 의해 정량화하고, GAPDH 발현에 대해 정규화하고, 비히클 대조군 그룹의 분율로서 표현하였다 (기하 평균, +/- 95% 신뢰 구간).
표 4. 실시예 5의 대조군에 대해 정규화된 mRNA의 상대 알파-ENaC 발현
Figure 112019043490420-pct00028
상기 표 4에 제시된 바와 같이, 알파-ENaC RNAi 작용제에 도 11에 제시된 바와 같은 3개의 αvβ6 리간드를 접합시키는 것 ("세자리" 리간드를 형성함)은 생체내에서 1개의 αvβ6 리간드 (도 3)에 접합된 RNAi 작용제 (71%) 및 네이키드 RNAi 작용제 (66%)와 비교하여, 증가된 상대 녹다운 (대략 79%)을 제시하였다.
실시예 6. αvβ6 인테그린 리간드에 접합된, 알파-ENaC를 표적화하는 RNAi 작용제의 래트에서의 생체내 기관내 투여
실시예 4에 기재된 것들과 유사한 알파-ENaC RNAi 작용제를 동일한 합성 절차에 따라 합성하였다. 연구 제1일 및 제2일에, 수컷 스프라그-돌리 래트에게 미세분무기 장치 (펜실베니아주 필라델피아 소재 펜 센추리)를 통해 200 마이크로리터의 용량을 투여하였으며, 이는 하기 투여 그룹을 포함하였다: (1) D5W 비히클; (2) D5W 중에 제제화된, 리간드를 갖지 않는 RNAi 작용제 ("네이키드 RNAi 작용제") 3 mg/kg; 또는 (3) D5W 중에 제제화된, 도 3의 αvβ6 인테그린 리간드에 접합된 알파-ENaC RNAi 작용제 3.0 mg/kg. 알파-ENaC RNAi 작용제 및 αvβ6 인테그린 리간드를 실시예 4에 제시된 동일한 절차에 따라 합성하고 접합시켰다.
그룹당 5마리의 래트에게 투여하였다. 래트를 연구 제5일에 안락사시키고, 수집 및 균질화 이후 양쪽 폐로부터 총 RNA를 단리하였다. 표적의 mRNA 존재비를 프로브-기반 정량적 PCR에 의해 정량화하고, GAPDH 발현에 대해 정규화하고, 비히클 대조군 그룹의 분율로서 표현하였다 (기하 평균, +/- 95% 신뢰 구간).
표 5. 실시예 6의 대조군에 대해 정규화된 mRNA의 상대 알파-ENaC 발현
Figure 112019043490420-pct00029
상기 표 5에 제시된 바와 같이, RNAi 작용제에 접합된 도 3의 αvβ6 리간드는 네이키드 RNAi 작용제 (대략 51% 녹다운)와 비교하여, 생체내에서 폐 표적의 증가된 상대 녹다운 (대략 83% 녹다운)을 제시하였다.
실시예 7. αvβ6 인테그린 리간드에 접합된, 폐에서 발현되는 유전자를 표적화하는 RNAi 작용제의 래트에서의 생체내 구인두 흡인
실시예 4에 기재된 것들과 유사한 알파-ENaC RNAi 작용제를 동일한 합성 절차에 따라 합성하였다. 연구 제1일에, 수컷 스프라그-돌리 래트에게 200 마이크로리터의 용량을 구인두 흡인을 통해 투여하였으며, 이는 하기 투여 그룹을 포함하였다: (1) 등장성 염수; (2) 등장성 염수 중에 제제화된, 도 3의 αvβ6 인테그린 리간드에 접합된 알파-ENaC를 표적화하는 RNAi 작용제 0.5 mg/kg; 또는 (3) 등장성 염수 중에 제제화된, 도 5의 αvβ6 인테그린 리간드에 접합된 알파-ENaC를 표적화하는 RNAi 작용제 0.5 mg/kg. 동일한 알파-ENaC RNAi 작용제를 그룹 2 및 3에 사용하였다. RNAi 작용제의 센스 가닥의 5' 말단 단부를 실시예 4에 제시된 바와 같이 C6 아민 (-NH2)으로 변형시켰다. 알파-ENaC RNAi 작용제 및 도 3의 αvβ6 인테그린 리간드를 실시예 4에 제시된 동일한 절차에 따라 합성하고 접합시켰다. 도 5의 αvβ6 인테그린 리간드의 경우에는 TFP-에스테르로서 합성하였고, 추가적으로 αvβ6 인테그린 리간드의 N-말단을 fmoc 기에 의해 보호하였다. 이어서, RNAi 작용제에 대한 접합을 실시예 4에 제시된 것과 동일한 방식으로 수행한 다음, 염기로서 트리에틸아민을 사용하여 fmoc 탈보호를 수행하였다.
그룹당 5마리의 래트에게 투여하였다. 래트를 연구 제9일에 안락사시키고, 수집 및 균질화 이후 양쪽 폐로부터 총 RNA를 단리하였다. 표적의 mRNA 존재비를 프로브-기반 정량적 PCR에 의해 정량화하고, GAPDH 발현에 대해 정규화하고, 비히클 대조군 그룹의 분율로서 표현하였다 (기하 평균, +/- 95% 신뢰 구간).
표 6. 실시예 7의 대조군에 대해 정규화된 mRNA의 상대 알파-ENaC 발현
Figure 112019043490420-pct00030
상기 표 6에 제시된 바와 같이, RNAi 작용제에 접합된 도 3 및 도 5의 αvβ6 리간드 둘 다는 생체내에서 알파-ENaC 폐 표적의 녹다운을 제시하였다.
실시예 8. αvβ6 인테그린 리간드 및 폴리-L-리신 스캐폴드에 접합된, 알파-ENaC를 표적화하는 RNAi 작용제의 래트에서의 생체내 기관내 투여
실시예 4에 기재된 것들과 유사한 알파-ENaC RNAi 작용제를 동일한 합성 절차에 따라 합성하였다. 연구 제1일 및 제2일에, 수컷 스프라그-돌리 래트에게 미세분무기 장치 (펜실베니아주 필라델피아 소재 펜 센추리)를 통해 하기의 200 마이크로리터의 용량을 투여하였다: (1) D5W (물 중 5% 덱스트로스); (2) D5W 중에 제제화된, 리간드를 갖지 않는 RNAi 작용제 ("네이키드 RNAi 작용제") 0.5 mg/kg; (3) D5W 중에 제제화된, 네이키드 RNAi 작용제 1.5 mg/kg; (4) D5W 중에 제제화된, 네이키드 RNAi 작용제 5 mg/kg; (5) D5W 중에 제제화된, 폴리-L-리신 (PLL) 스캐폴드를 통해 도 4의 αvβ6 인테그린 리간드에 접합된 알파-ENaC RNAi 작용제 0.5 mg/kg; (6) D5W 중에 제제화된, PLL 스캐폴드를 통해 도 4의 αvβ6 인테그린 리간드에 접합된 알파-ENaC RNAi 작용제 1.5 mg/kg; 또는 (7) D5W 중에 제제화된, PLL 스캐폴드를 통해 도 4의 αvβ6 인테그린 리간드에 접합된 알파-ENaC RNAi 작용제 5 mg/kg. RNAi 작용제는 알파-ENaC 유전자의 발현을 억제하도록 설계되었다. 동일한 알파-ENaC RNAi 작용제를 그룹 2 내지 7에 사용하였다. αvβ6 인테그린 리간드를 처음에 TFP-에스테르 (도 2에 제시됨)로서 합성하였다. 실시예 8의 그룹 5, 6 및 7에 사용된 PLL 스캐폴드는 대략 100개의 L-리신 단량체 단위 (대략 12 킬로달톤)였다. 폴리-L-리신 중합체를 3 당량의 SMPT (4-숙신이미딜옥시카르보닐-알파-메틸-α(2-피리딜디티오)톨루엔)로 변형시켰고, RNAi 작용제의 (C6 아민 변형된) 센스 가닥의 5' 아민을 SATA (N-숙신이미딜 S-아세틸티오아세테이트)로 변형시켰다. 그 다음에, 도 2의 αvβ6 인테그린 리간드 (15 당량)를 고체로서 첨가하고, 1시간 동안 교반하였다. 이어서, 프로테아제-절단가능한 관능화된 알라닌-시트룰린-PEG12 (10 당량; 파라-니트로페닐카르보네이트로 관능화됨)를 첨가하였다. 15분 후에, pH를 8.6으로 유지하면서, SATA-변형된 RNAi 작용제 (1 당량)를 적가하였다. 잔류하는 리신 기를 프로테아제-절단가능한 관능화된 알라닌-시트룰린-PEG12로 관능화시켰다. 생성물을 접선 유동 여과에 의해 정제하였다.
그룹당 5마리의 래트에게 투여하였다. 래트를 연구 제5일에 안락사시키고, 수집 및 균질화 이후 양쪽 폐로부터 총 RNA를 단리하였다. 표적의 mRNA 존재비를 프로브-기반 정량적 PCR에 의해 정량화하고, GAPDH 발현에 대해 정규화하고, 비히클 대조군 그룹의 분율로서 표현하였다 (기하 평균, +/- 95% 신뢰 구간). 데이터가 도 12의 그래프에 기록되어 있다.
도 12에 제시된 바와 같이, 폴리-L-리신 스캐폴드 및 RNAi 작용제에 접합된 도 4의 αvβ6 리간드는 모든 3개의 용량 수준에서 네이키드 RNAi 작용제와 비교하여 증가된 상대 녹다운을 제시하였다 (0.5 mg/kg 용량에서는 47% 녹다운 대비 68% 녹다운, 1.5 mg/kg 용량에서는 47% 녹다운 대비 78% 녹다운, 및 5 mg/kg 용량에서는 75% 녹다운 대비 86% 녹다운).
실시예 9. 시험관내 1차 상피 세포에 의한 표지된 αvβ6 리간드 접합체의 선택적 흡수
1차 인간 폐 상피, 내피 및 평활근 세포를 배양하고, 24시간 동안 (1) 리간드를 갖지 않는 Cy3-표지된 (레드) 폴리아크릴레이트 중합체 스캐폴드 (리간드 부재-접합체); 또는 (2) 도 7의 αvβ6 인테그린 리간드에 접합된 Cy3-표지된 (레드) 폴리아크릴레이트 중합체 스캐폴드 (αvβ6 리간드-접합체)에 노출시켰다. 세포를 FITC-팔로이딘 (F-액틴, 그린) 및 훽스트 염색제 (DNA, 블루)로 염색하고, 형광 현미경검사에 의해 영상화하였다.
형광 현미경검사 영상은 관련 기술분야에 공지된 표준 방법을 사용하여 제작하였다. 형광 영상은 αvβ6 인테그린 리간드를 갖지 않는 Cy3 표지된-접합체가 어떠한 세포 유형에 의해서도 내재화되지 않았다는 것을 제시하였다. 한편, 도 7의 αvβ6 리간드를 갖는 Cy3 접합체는 1차 폐 상피 세포에 의해 내재화되었지만 (영상에서 1차 폐 상피 세포의 엔도솜 구획 내 레드 신호의 축적에 의해 제시된 바와 같음), 1차 내피 및 평활근 세포에 의해서는 내재화되지 않았다. 이는 본원에 개시된 αvβ6 인테그린 리간드가 αvβ6 인테그린을 발현하는 상피 세포에 의해 선택적으로 내재화될 수 있다는 것을 제시한다.
실시예 10. 생체내 상피 조직에 의한 표지된 αvβ6 리간드 접합체의 선택적 흡수
C57bl/6 마우스에게 하기의 120 마이크로그램의 정맥내 용량을 주사하였다: (1) 리간드를 갖지 않는 Cy3-표지된 (레드) 폴리아크릴레이트 중합체 스캐폴드 (리간드 부재-접합체) 또는 (2) 도 7의 αvβ6 인테그린 리간드에 접합된 Cy3-표지된 (레드) 폴리아크릴레이트 중합체 스캐폴드 (αvβ6 리간드-접합체) 또는 (3) 실시예 4에 이미 기재된 바와 같이 음성 대조군 리간드로서 사용되는 Ac-RGELAAbuL-CitAibL (서열식별번호: 132)의 구조를 갖는 불활성화된 αvβ6 인테그린 리간드에 접합된 Cy3-표지된 (레드) 폴리아크릴레이트 중합체 스캐폴드. 주사한 지 24시간 후에, 마우스를 희생시키고, 조직을 수거하고, 고정시키고, 가공하고, 절편화하였다. 조직 절편을 FITC-팔로이딘 (F-액틴, 그린) 및 훽스트 염색제 (DNA, 블루)로 염색하고, 형광 현미경검사에 의해 영상화하였다.
A. 폐 세기관지 상피 세포. 실시예 10의 마우스로부터의 폐 세기관지 상피 세포의 형광 현미경검사 영상을 표준 방법을 사용하여 제작하였다. 이들 영상으로부터, 도 7의 αvβ6 리간드를 갖는 Cy3-표지된 접합체 (영상에서 레드 표시에 의해 제시됨)는 생체내 폐 세기관지 상피 세포에 의해 엔도솜 구획 안으로 선택적으로 내재화되었으며, 반면 리간드를 포함하지 않는 구축물 또는 RGE-리간드 대조군 접합체로는 상피 내재화가 본질적으로 관찰되지 않았다 (즉, 이들 영상에서 레드가 보이지 않았음).
B. 신장 상피 조직. 실시예 10의 마우스로부터의 신세관 상피 조직의 형광 현미경검사 영상을 표준 방법을 사용하여 제작하였다. 이들 영상으로부터, 도 7의 αvβ6 리간드를 갖는 Cy3-표지된 접합체는 생체내 신세관 상피 세포에 의해 엔도솜 구획 안으로 선택적으로 내재화되었으며 (영상에서 레드 표시에 의해 제시됨), 반면 리간드를 갖지 않는 대조군 접합체로는 상피 내재화가 본질적으로 관찰되지 않았다.
C. 위장관 상피 세포. 실시예 10의 마우스로부터의 신장 상피 조직의 형광 현미경검사 영상을 표준 방법을 사용하여 제작하였다. 도 7의 αvβ6 리간드를 갖는 Cy3-표지된 접합체는 소장 및 담낭 둘 다에서 생체내 GI 관 상피 세포에 의해 엔도솜 구획 안으로 선택적으로 내재화되었으며 (영상에서 레드 표시에 의해 제시됨), 반면 리간드를 갖지 않는 대조군 접합체로는 상피 내재화가 본질적으로 관찰되지 않았다.
다른 실시양태
본 발명이 그의 상세한 설명과 함께 기재되었지만, 상기 설명은 예시하기 위한 것이며, 첨부된 청구범위의 범주에 의해 정의되는 본 발명의 범주를 제한하지 않도록 의도되는 것으로 이해되어야 한다. 다른 측면, 이점 및 변형은 하기 청구범위의 범주 내에 있다.
SEQUENCE LISTING <110> Arrowhead Pharmaceuticals, Inc. Almeida, Aaron Li, Zhen Bush, Erik W. Pei, Tao Glebocka, Agnieszka Nicholas, Anthony Carlson, Jeffrey Fowler-Watters, Matthew <120> Alpha-v Beta-6 Integrin Ligands <130> 30639-WO1 <150> 62415752 <151> 2016-11-01 <160> 132 <210> 1 <211> 10 <212> PRT <213> Artificial sequence <220> <223> synthetic natural peptide ligand <400> 1 Arg Gly Asp Leu Ala Thr Leu Arg Gln Leu 1 5 10 <210> 2 <211> 10 <212> PRT <213> Artificial sequence <220> <223> synthetic peptide ligand <220> <221> misc_feature <222> (1)..(1) <223> N-terminal Ac <400> 2 Arg Gly Asp Leu Ala Thr Leu Thr Gln Leu 1 5 10 <210> 3 <211> 10 <212> PRT <213> Artificial sequence <220> <223> synthetic peptide ligand <220> <221> misc_feature <222> (6)..(6) <223> Xaa = Abu <220> <221> misc_feature <222> (8)..(8) <223> Xaa = Cit <220> <221> misc_feature <222> (9)..(9) <223> Xaa = Aib <400> 3 Arg Gly Asp Leu Ala Xaa Leu Xaa Xaa Leu 1 5 10 <210> 4 <211> 10 <212> PRT <213> Artificial sequence <220> <223> synthetic peptide ligand <220> <221> misc_feature <222> (1)..(1) <223> N-terminal Ac <220> <221> misc_feature <222> (6)..(6) <223> Xaa = Abu <220> <221> misc_feature <222> (8)..(8) <223> Xaa = Cit <220> <221> misc_feature <222> (9)..(9) <223> Xaa = Aib <400> 4 Arg Gly Asp Leu Ala Xaa Leu Xaa Xaa Leu 1 5 10 <210> 5 <211> 9 <212> PRT <213> Artificial sequence <220> <223> synthetic peptide ligand <220> <221> misc_feature <222> (1)..(1) <223> N-terminal Ac <220> <221> misc_feature <222> (6)..(6) <223> Xaa = Abu <220> <221> misc_feature <222> (8)..(8) <223> Xaa = Cit <220> <221> misc_feature <222> (9)..(9) <223> Xaa = Aib <400> 5 Arg Gly Asp Leu Ala Xaa Leu Xaa Xaa 1 5 <210> 6 <211> 8 <212> PRT <213> Artificial sequence <220> <223> synthetic peptide ligand <220> <221> misc_feature <222> (1)..(1) <223> N-terminal Ac <220> <221> misc_feature <222> (6)..(6) <223> Xaa = Abu <220> <221> misc_feature <222> (8)..(8) <223> Xaa = Cit <400> 6 Arg Gly Asp Leu Ala Xaa Leu Xaa 1 5 <210> 7 <211> 7 <212> PRT <213> Artificial sequence <220> <223> synthetic peptide ligand <220> <221> misc_feature <222> (1)..(1) <223> N-terminal Ac <220> <221> misc_feature <222> (6)..(6) <223> Xaa = Abu <400> 7 Arg Gly Asp Leu Ala Xaa Leu 1 5 <210> 8 <211> 9 <212> PRT <213> Artificial sequence <220> <223> synthetic peptide ligand <220> <221> misc_feature <222> (1)..(1) <223> N-terminal Ac <220> <221> misc_feature <222> (6)..(6) <223> Xaa = Abu <220> <221> misc_feature <222> (8)..(8) <223> Xaa = Cit <400> 8 Arg Gly Asp Leu Ala Xaa Leu Xaa Lys 1 5 <210> 9 <211> 9 <212> PRT <213> Artificial sequence <220> <223> synthetic peptide ligand <220> <221> misc_feature <222> (1)..(1) <223> N-terminal Ac <220> <221> misc_feature <222> (6)..(6) <223> Xaa = Abu <220> <221> misc_feature <222> (8)..(8) <223> Xaa = Cit <400> 9 Arg Gly Asp Leu Ala Xaa Leu Xaa Glu 1 5 <210> 10 <211> 9 <212> PRT <213> Artificial sequence <220> <223> synthetic peptide ligand <220> <221> misc_feature <222> (1)..(1) <223> N-terminal Ac <220> <221> misc_feature <222> (6)..(6) <223> Xaa = Abu <220> <221> misc_feature <222> (8)..(8) <223> Xaa = Cit <400> 10 Arg Gly Asp Leu Ala Xaa Leu Xaa Phe 1 5 <210> 11 <211> 9 <212> PRT <213> Artificial sequence <220> <223> synthetic peptide ligand <220> <221> misc_feature <222> (1)..(1) <223> N-terminal Ac <220> <221> misc_feature <222> (6)..(6) <223> Xaa = Abu <220> <221> misc_feature <222> (8)..(8) <223> Xaa = Cit <400> 11 Arg Gly Asp Leu Ala Xaa Leu Xaa Gln 1 5 <210> 12 <211> 9 <212> PRT <213> Artificial sequence <220> <223> synthetic peptide ligand <220> <221> misc_feature <222> (1)..(1) <223> N-terminal Ac <220> <221> misc_feature <222> (6)..(6) <223> Xaa = Abu <220> <221> misc_feature <222> (8)..(8) <223> Xaa = Cit <400> 12 Arg Gly Asp Leu Ala Xaa Leu Xaa Gly 1 5 <210> 13 <211> 9 <212> PRT <213> Artificial sequence <220> <223> synthetic peptide ligand <220> <221> misc_feature <222> (1)..(1) <223> N-terminal Ac <220> <221> misc_feature <222> (6)..(6) <223> Xaa = Abu <220> <221> misc_feature <222> (9)..(9) <223> Xaa = Aib <400> 13 Arg Gly Asp Leu Ala Xaa Leu Lys Xaa 1 5 <210> 14 <211> 9 <212> PRT <213> Artificial sequence <220> <223> synthetic peptide ligand <220> <221> misc_feature <222> (1)..(1) <223> N-terminal Ac <220> <221> misc_feature <222> (6)..(6) <223> Xaa = Abu <220> <221> misc_feature <222> (9)..(9) <223> Xaa = Aib <400> 14 Arg Gly Asp Leu Ala Xaa Leu Glu Xaa 1 5 <210> 15 <211> 9 <212> PRT <213> Artificial sequence <220> <223> synthetic peptide ligand <220> <221> misc_feature <222> (1)..(1) <223> N-terminal Ac <220> <221> misc_feature <222> (6)..(6) <223> Xaa = Abu <220> <221> misc_feature <222> (9)..(9) <223> Xaa = Aib <400> 15 Arg Gly Asp Leu Ala Xaa Leu Phe Xaa 1 5 <210> 16 <211> 9 <212> PRT <213> Artificial sequence <220> <223> synthetic peptide ligand <220> <221> misc_feature <222> (1)..(1) <223> N-terminal Ac <220> <221> misc_feature <222> (6)..(6) <223> Xaa = Abu <220> <221> misc_feature <222> (9)..(9) <223> Xaa = Aib <400> 16 Arg Gly Asp Leu Ala Xaa Leu Gln Xaa 1 5 <210> 17 <211> 9 <212> PRT <213> Artificial sequence <220> <223> synthetic peptide ligand <220> <221> misc_feature <222> (1)..(1) <223> N-terminal Ac <220> <221> misc_feature <222> (6)..(6) <223> Xaa = Abu <220> <221> misc_feature <222> (9)..(9) <223> Xaa = Aib <400> 17 Arg Gly Asp Leu Ala Xaa Leu Gly Xaa 1 5 <210> 18 <211> 9 <212> PRT <213> Artificial sequence <220> <223> synthetic peptide ligand <220> <221> misc_feature <222> (1)..(1) <223> N-terminal CH3CH2CO <220> <221> misc_feature <222> (6)..(6) <223> Xaa = Abu <220> <221> misc_feature <222> (8)..(8) <223> Xaa = Cit <220> <221> misc_feature <222> (9)..(9) <223> Xaa = Aib <400> 18 Arg Gly Asp Leu Ala Xaa Leu Xaa Xaa 1 5 <210> 19 <211> 9 <212> PRT <213> Artificial sequence <220> <223> synthetic peptide ligand <220> <221> misc_feature <222> (1)..(1) <223> N-terminal CH3(CH2)2CO <220> <221> misc_feature <222> (6)..(6) <223> Xaa = Abu <220> <221> misc_feature <222> (8)..(8) <223> Xaa = Cit <220> <221> misc_feature <222> (9)..(9) <223> Xaa = Aib <400> 19 Arg Gly Asp Leu Ala Xaa Leu Xaa Xaa 1 5 <210> 20 <211> 9 <212> PRT <213> Artificial sequence <220> <223> synthetic peptide ligand <220> <221> misc_feature <222> (1)..(1) <223> N-terminal CH3(CH2)3CO <220> <221> misc_feature <222> (6)..(6) <223> Xaa = Abu <220> <221> misc_feature <222> (8)..(8) <223> Xaa = Cit <220> <221> misc_feature <222> (9)..(9) <223> Xaa = Aib <400> 20 Arg Gly Asp Leu Ala Xaa Leu Xaa Xaa 1 5 <210> 21 <211> 9 <212> PRT <213> Artificial sequence <220> <223> synthetic peptide ligand <220> <221> misc_feature <222> (1)..(1) <223> N-terminal CH3(CH2)4CO <220> <221> misc_feature <222> (6)..(6) <223> Xaa = Abu <220> <221> misc_feature <222> (8)..(8) <223> Xaa = Cit <220> <221> misc_feature <222> (9)..(9) <223> Xaa = Aib <400> 21 Arg Gly Asp Leu Ala Xaa Leu Xaa Xaa 1 5 <210> 22 <211> 9 <212> PRT <213> Artificial sequence <220> <223> synthetic peptide ligand <220> <221> misc_feature <222> (1)..(1) <223> N-terminal Ac <220> <221> misc_feature <222> (6)..(6) <223> Xaa = Abu <220> <221> misc_feature <222> (8)..(8) <223> Xaa = Cit <220> <221> misc_feature <222> (9)..(9) <223> Xaa = Aib <400> 22 Arg Gly Asp Leu Lys Xaa Leu Xaa Xaa 1 5 <210> 23 <211> 9 <212> PRT <213> Artificial sequence <220> <223> synthetic peptide ligand <220> <221> misc_feature <222> (1)..(1) <223> N-terminal Ac <220> <221> misc_feature <222> (6)..(6) <223> Xaa = Abu <220> <221> misc_feature <222> (8)..(8) <223> Xaa = Cit <220> <221> misc_feature <222> (9)..(9) <223> Xaa = Aib <400> 23 Arg Gly Asp Leu Glu Xaa Leu Xaa Xaa 1 5 <210> 24 <211> 9 <212> PRT <213> Artificial sequence <220> <223> synthetic peptide ligand <220> <221> misc_feature <222> (1)..(1) <223> N-terminal Ac <220> <221> misc_feature <222> (6)..(6) <223> Xaa = Abu <220> <221> misc_feature <222> (8)..(8) <223> Xaa = Cit <220> <221> misc_feature <222> (9)..(9) <223> Xaa = Aib <400> 24 Arg Gly Asp Leu Phe Xaa Leu Xaa Xaa 1 5 <210> 25 <211> 9 <212> PRT <213> Artificial sequence <220> <223> synthetic peptide ligand <220> <221> misc_feature <222> (1)..(1) <223> N-terminal Ac <220> <221> misc_feature <222> (6)..(6) <223> Xaa = Abu <220> <221> misc_feature <222> (8)..(8) <223> Xaa = Cit <220> <221> misc_feature <222> (9)..(9) <223> Xaa = Aib <400> 25 Arg Gly Asp Leu Gln Xaa Leu Xaa Xaa 1 5 <210> 26 <211> 9 <212> PRT <213> Artificial sequence <220> <223> synthetic peptide ligand <220> <221> misc_feature <222> (1)..(1) <223> N-terminal Ac <220> <221> misc_feature <222> (6)..(6) <223> Xaa = Abu <220> <221> misc_feature <222> (8)..(8) <223> Xaa = Cit <220> <221> misc_feature <222> (9)..(9) <223> Xaa = Aib <400> 26 Arg Gly Asp Leu Pro Xaa Leu Xaa Xaa 1 5 <210> 27 <211> 9 <212> PRT <213> Artificial sequence <220> <223> synthetic peptide ligand <220> <221> misc_feature <222> (1)..(1) <223> N-terminal Ac <220> <221> misc_feature <222> (8)..(8) <223> Xaa = Cit <220> <221> misc_feature <222> (9)..(9) <223> Xaa = Aib <400> 27 Arg Gly Asp Leu Ala Lys Leu Xaa Xaa 1 5 <210> 28 <211> 9 <212> PRT <213> Artificial sequence <220> <223> synthetic peptide ligand <220> <221> misc_feature <222> (1)..(1) <223> N-terminal Ac <220> <221> misc_feature <222> (8)..(8) <223> Xaa = Cit <220> <221> misc_feature <222> (9)..(9) <223> Xaa = Aib <400> 28 Arg Gly Asp Leu Ala Glu Leu Xaa Xaa 1 5 <210> 29 <211> 9 <212> PRT <213> Artificial sequence <220> <223> synthetic peptide ligand <220> <221> misc_feature <222> (1)..(1) <223> N-terminal Ac <220> <221> misc_feature <222> (8)..(8) <223> Xaa = Cit <220> <221> misc_feature <222> (9)..(9) <223> Xaa = Aib <400> 29 Arg Gly Asp Leu Ala Phe Leu Xaa Xaa 1 5 <210> 30 <211> 9 <212> PRT <213> Artificial sequence <220> <223> synthetic peptide ligand <220> <221> misc_feature <222> (1)..(1) <223> N-terminal Ac <220> <221> misc_feature <222> (6)..(6) <223> Xaa = Abu <220> <221> misc_feature <222> (8)..(8) <223> Xaa = Cit <220> <221> misc_feature <222> (9)..(9) <223> Xaa = Aib <400> 30 Arg Gly Asp Leu Gly Xaa Leu Xaa Xaa 1 5 <210> 31 <211> 9 <212> PRT <213> Artificial sequence <220> <223> synthetic peptide ligand <220> <221> misc_feature <222> (1)..(1) <223> N-terminal Ac <220> <221> misc_feature <222> (8)..(8) <223> Xaa = Cit <220> <221> misc_feature <222> (9)..(9) <223> Xaa = Aib <400> 31 Arg Gly Asp Leu Ala Gly Leu Xaa Xaa 1 5 <210> 32 <211> 9 <212> PRT <213> Artificial sequence <220> <223> synthetic peptide ligand <220> <221> misc_feature <222> (1)..(1) <223> N-terminal Ac <220> <221> misc_feature <222> (8)..(8) <223> Xaa = Cit <220> <221> misc_feature <222> (9)..(9) <223> Xaa = Aib <400> 32 Arg Gly Asp Leu Ala Pro Leu Xaa Xaa 1 5 <210> 33 <211> 9 <212> PRT <213> Artificial sequence <220> <223> synthetic peptide ligand <220> <221> misc_feature <222> (1)..(1) <223> N-terminal Ac <220> <221> misc_feature <222> (6)..(6) <223> Xaa = Abu <220> <221> misc_feature <222> (8)..(8) <223> Xaa = Cit <400> 33 Arg Gly Asp Leu Ala Xaa Leu Xaa Pro 1 5 <210> 34 <211> 9 <212> PRT <213> Artificial sequence <220> <223> synthetic peptide ligand <220> <221> misc_feature <222> (1)..(1) <223> N-terminal Ac <220> <221> misc_feature <222> (3)..(3) <223> Xaa = alpha-methyl aspartate <220> <221> misc_feature <222> (6)..(6) <223> Xaa = Abu <220> <221> misc_feature <222> (8)..(8) <223> Xaa = Cit <220> <221> misc_feature <222> (9)..(9) <223> Xaa = Aib <400> 34 Arg Gly Xaa Leu Ala Xaa Leu Xaa Xaa 1 5 <210> 35 <211> 9 <212> PRT <213> Artificial sequence <220> <223> synthetic peptide ligand <220> <221> misc_feature <222> (1)..(1) <223> N-terminal Ac <220> <221> misc_feature <222> (4)..(4) <223> Xaa = alpha-methyl leucine <220> <221> misc_feature <222> (6)..(6) <223> Xaa = Abu <220> <221> misc_feature <222> (8)..(8) <223> Xaa = Cit <220> <221> misc_feature <222> (9)..(9) <223> Xaa = Aib <400> 35 Arg Gly Asp Xaa Ala Xaa Leu Xaa Xaa 1 5 <210> 36 <211> 8 <212> PRT <213> Artificial sequence <220> <223> synthetic peptide ligand <220> <221> misc_feature <222> (1)..(1) <223> N-terminal Ac <220> <221> misc_feature <222> (6)..(6) <223> Xaa = Abu <220> <221> misc_feature <222> (8)..(8) <223> Xaa = Aib <400> 36 Arg Gly Asp Leu Ala Xaa Leu Xaa 1 5 <210> 37 <211> 10 <212> PRT <213> Artificial sequence <220> <223> synthetic natural peptide ligand <400> 37 Arg Gly Glu Leu Ala Thr Leu Arg Gln Leu 1 5 10 <210> 38 <211> 14 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> synthetic peptide ligand <220> <221> misc_feature <222> (1)..(1) <223> C-terminal HyNic <400> 38 Arg Gly Asp Leu Ala Thr Leu Arg Gln Leu Glu Glu Glu Lys 1 5 10 <210> 39 <211> 10 <212> PRT <213> Artificial sequence <220> <223> synthetic peptide ligand <220> <221> misc_feature <222> (1)..(1) <223> N-terminal meta-guanidino-benzoic <400> 39 Gly Asp Leu Ala Leu Thr Leu Arg Gln Leu 1 5 10 <210> 40 <211> 10 <212> PRT <213> Artificial sequence <220> <223> synthetic peptide ligand <220> <221> misc_feature <222> (1)..(1) <223> C-terminal Me <400> 40 Arg Gly Asp Leu Ala Thr Leu Arg Gln Leu 1 5 10 <210> 41 <211> 10 <212> PRT <213> Artificial sequence <220> <223> synthetic peptide ligand <220> <221> misc_feature <222> (1)..(1) <223> N-terminal Guanidinyl <400> 41 Arg Gly Asp Leu Ala Thr Leu Arg Gln Leu 1 5 10 <210> 42 <211> 10 <212> PRT <213> Artificial sequence <220> <223> synthetic peptide ligand <220> <221> misc_feature <222> (1)..(1) <223> N-terminal Me0-PEG8 <400> 42 Arg Gly Asp Leu Ala Thr Leu Arg Gln Leu 1 5 10 <210> 43 <211> 10 <212> PRT <213> Artificial sequence <220> <223> synthetic peptide ligand <220> <221> misc_feature <222> (1)..(1) <223> N-terminal Ac <400> 43 Arg Gly Asp Leu Ala Leu Leu Arg Gln Leu 1 5 10 <210> 44 <211> 10 <212> PRT <213> Artificial sequence <220> <223> synthetic peptide ligand <220> <221> misc_feature <222> (1)..(1) <223> N-terminal Ac <220> <221> misc_feature <222> (6)..(6) <223> Xaa = Abu <400> 44 Arg Gly Asp Leu Ala Xaa Leu Arg Gln Leu 1 5 10 <210> 45 <211> 10 <212> PRT <213> Artificial sequence <220> <223> synthetic peptide ligand <220> <221> misc_feature <222> (1)..(1) <223> N-terminal Ac <400> 45 Arg Gly Asp Leu Ala Ile Leu Arg Gln Leu 1 5 10 <210> 46 <211> 10 <212> PRT <213> Artificial sequence <220> <223> synthetic peptide ligand <220> <221> misc_feature <222> (1)..(1) <223> N-terminal Ac <400> 46 Arg Gly Asp Leu Ala Val Leu Arg Gln Leu 1 5 10 <210> 47 <211> 10 <212> PRT <213> Artificial sequence <220> <223> synthetic peptide ligand <220> <221> misc_feature <222> (1)..(1) <223> N-terminal Ac <220> <221> misc_feature <222> (1)..(1) <223> Xaa = Cit <400> 47 Xaa Gly Asp Leu Ala Thr Leu Arg Gln Leu 1 5 10 <210> 48 <211> 10 <212> PRT <213> Artificial sequence <220> <223> synthetic peptide ligand <220> <221> misc_feature <222> (1)..(1) <223> N-terminal Ac <220> <221> misc_feature <222> (8)..(8) <223> Xaa = Cit <400> 48 Arg Gly Asp Leu Ala Thr Leu Xaa Gln Leu 1 5 10 <210> 49 <211> 10 <212> PRT <213> Artificial sequence <220> <223> synthetic peptide ligand <220> <221> misc_feature <222> (1)..(1) <223> N-terminal Ac <220> <221> misc_feature <222> (1)..(1) <223> Xaa = Cit <220> <221> misc_feature <222> (8)..(8) <223> Xaa = Cit <400> 49 Xaa Gly Asp Leu Ala Thr Leu Xaa Gln Leu 1 5 10 <210> 50 <211> 10 <212> PRT <213> Artificial sequence <220> <223> synthetic peptide ligand <220> <221> misc_feature <222> (1)..(1) <223> N-terminal Ac <220> <221> misc_feature <222> (9)..(9) <223> Xaa = Abu <400> 50 Arg Gly Asp Leu Ala Thr Leu Arg Xaa Leu 1 5 10 <210> 51 <211> 10 <212> PRT <213> Artificial sequence <220> <223> synthetic peptide ligand <220> <221> misc_feature <222> (1)..(1) <223> N-terminal Ac <220> <221> misc_feature <222> (9)..(9) <223> Xaa = Aib <400> 51 Arg Gly Asp Leu Ala Thr Leu Arg Xaa Leu 1 5 10 <210> 52 <211> 10 <212> PRT <213> Artificial sequence <220> <223> synthetic peptide ligand <220> <221> misc_feature <222> (1)..(1) <223> N-terminal Ac <220> <221> misc_feature <222> (9)..(9) <223> Xaa = Dap(Ac) <400> 52 Arg Gly Asp Leu Ala Thr Leu Arg Xaa Leu 1 5 10 <210> 53 <211> 10 <212> PRT <213> Artificial sequence <220> <223> synthetic peptide ligand <220> <221> misc_feature <222> (1)..(1) <223> N-terminal Ac <220> <221> misc_feature <222> (9)..(9) <223> Xaa = Cit <400> 53 Arg Gly Asp Leu Ala Thr Leu Arg Xaa Leu 1 5 10 <210> 54 <211> 10 <212> PRT <213> Artificial sequence <220> <223> synthetic peptide ligand <220> <221> misc_feature <222> (1)..(1) <223> N-terminal Ac <220> <221> misc_feature <222> (9)..(9) <223> Xaa = Nva <400> 54 Arg Gly Asp Leu Ala Thr Leu Arg Xaa Leu 1 5 10 <210> 55 <211> 10 <212> PRT <213> Artificial sequence <220> <223> synthetic natural peptide <400> 55 Arg Gly Asp Leu Ala Thr Leu Arg Gln Leu 1 5 10 <210> 56 <211> 10 <212> PRT <213> Artificial sequence <220> <223> synthetic peptide ligand <220> <221> misc_feature <222> (1)..(1) <223> N-terminal Ac <220> <221> misc_feature <222> (1)..(1) <223> Xaa = N,N-epsilon-dimethyl lysine <400> 56 Xaa Gly Asp Leu Ala Thr Leu Arg Gln Leu 1 5 10 <210> 57 <211> 10 <212> PRT <213> Artificial sequence <220> <223> synthetic peptide ligand <220> <221> misc_feature <222> (1)..(1) <223> N-terminal Ac <220> <221> misc_feature <222> (1)..(1) <223> Xaa = dimethyl arginine <400> 57 Xaa Gly Asp Leu Ala Thr Leu Arg Gln Leu 1 5 10 <210> 58 <211> 9 <212> PRT <213> Artificial sequence <220> <223> synthetic peptide ligand <220> <221> misc_feature <222> (1)..(1) <223> N-terminal Dap(guanidino) <400> 58 Gly Asp Leu Ala Thr Leu Arg Gln Leu 1 5 <210> 59 <211> 10 <212> PRT <213> Artificial sequence <220> <223> synthetic peptide ligand <220> <221> misc_feature <222> (1)..(1) <223> N-terminal des-amino <400> 59 Arg Gly Asp Leu Ala Thr Leu Arg Gln Leu 1 5 10 <210> 60 <211> 11 <212> PRT <213> Artificial sequence <220> <223> synthetic peptide ligand <220> <221> misc_feature <222> (1)..(1) <223> N-terminal Ac <220> <221> misc_feature <222> (5)..(5) <223> Xaa = Beta-homo-alanine <400> 60 Arg Gly Asp Leu Xaa Ala Thr Leu Arg Gln Leu 1 5 10 <210> 61 <211> 10 <212> PRT <213> Artificial sequence <220> <223> synthetic peptide ligand <220> <221> misc_feature <222> (1)..(1) <223> N-terminal Ac <220> <221> misc_feature <222> (5)..(5) <223> Xaa = Aib <400> 61 Arg Gly Asp Leu Xaa Thr Leu Arg Gln Leu 1 5 10 <210> 62 <211> 10 <212> PRT <213> Artificial sequence <220> <223> synthetic peptide ligand <220> <221> misc_feature <222> (1)..(1) <223> N-terminal Ac <220> <221> misc_feature <222> (5)..(5) <223> Xaa = Beta-cyclohexyl alanine <400> 62 Arg Gly Asp Leu Xaa Thr Leu Arg Gln Leu 1 5 10 <210> 63 <211> 9 <212> PRT <213> Artificial sequence <220> <223> synthetic natural peptide <400> 63 Arg Gly Asp Leu Ala Thr Leu Arg Gln 1 5 <210> 64 <211> 8 <212> PRT <213> Artificial sequence <220> <223> synthetic natural peptide <400> 64 Arg Gly Asp Leu Ala Thr Leu Arg 1 5 <210> 65 <211> 7 <212> PRT <213> Artificial sequence <220> <223> synthetic natural peptide <400> 65 Arg Gly Asp Leu Ala Thr Leu 1 5 <210> 66 <211> 6 <212> PRT <213> Atrificial sequence <220> <223> synthetic natural peptide <400> 66 Arg Gly Asp Leu Ala Thr 1 5 <210> 67 <211> 9 <212> PRT <213> Artificial sequence <220> <223> synthetic peptide ligand <220> <221> misc_feature <222> (1)..(1) <223> N-terminal Ac <220> <221> misc_feature <222> (5)..(5) <223> Xaa = Aib <220> <221> misc_feature <222> (6)..(6) <223> Xaa = Abu <220> <221> misc_feature <222> (8)..(8) <223> Xaa = Cit <220> <221> misc_feature <222> (9)..(9) <223> Xaa = Aib <400> 67 Arg Gly Asp Leu Xaa Xaa Leu Xaa Xaa 1 5 <210> 68 <211> 9 <212> PRT <213> Artificial sequence <220> <223> synthetic peptide ligand <220> <221> misc_feature <222> (1)..(1) <223> N-terminal Ac <220> <221> misc_feature <222> (5)..(5) <223> Xaa = Beta-homo alanine <220> <221> misc_feature <222> (6)..(6) <223> Xaa = Abu <220> <221> misc_feature <222> (8)..(8) <223> Xaa = Cit <220> <221> misc_feature <222> (9)..(9) <223> Xaa = Aib <400> 68 Arg Gly Asp Leu Xaa Xaa Leu Xaa Xaa 1 5 <210> 69 <211> 9 <212> PRT <213> Artificial sequence <220> <223> synthetic peptide ligand <220> <221> misc_feature <222> (1)..(1) <223> N-terminal Ac <220> <221> misc_feature <222> (5)..(5) <223> Xaa = Beta-cyclohexyl alanine <220> <221> misc_feature <222> (6)..(6) <223> Xaa = Abu <220> <221> misc_feature <222> (8)..(8) <223> Xaa = Cit <220> <221> misc_feature <222> (9)..(9) <223> Xaa = Aib <400> 69 Arg Gly Asp Leu Xaa Xaa Leu Xaa Xaa 1 5 <210> 70 <211> 10 <212> PRT <213> Artificial sequence <220> <223> synthetic peptide ligand <220> <221> misc_feature <222> (1)..(1) <223> N-terminal Ac <220> <221> misc_feature <222> (2)..(2) <223> Xaa = N-methyl-Glycine <400> 70 Arg Xaa Asp Leu Ala Thr Leu Arg Gln Leu 1 5 10 <210> 71 <211> 9 <212> PRT <213> Artificial sequence <220> <223> synthetic peptide ligand <220> <221> misc_feature <222> (1)..(1) <223> N-terminal Ac <220> <221> misc_feature <222> (2)..(2) <223> Xaa = N-methyl-Glycine <220> <221> misc_feature <222> (6)..(6) <223> Xaa = Abu <220> <221> misc_feature <222> (8)..(8) <223> Xaa = Cit <220> <221> misc_feature <222> (9)..(9) <223> Xaa = Aib <400> 71 Arg Xaa Asp Leu Ala Xaa Leu Xaa Xaa 1 5 <210> 72 <211> 9 <212> PRT <213> Artificial sequence <220> <223> synthetic peptide ligand <220> <221> misc_feature <222> (1)..(1) <223> N-terminal Ac <220> <221> misc_feature <222> (4)..(4) <223> Xaa = N-methyl Leucine <220> <221> misc_feature <222> (6)..(6) <223> Xaa = Abu <220> <221> misc_feature <222> (8)..(8) <223> Xaa = Cit <220> <221> misc_feature <222> (9)..(9) <223> Xaa = Aib <400> 72 Arg Gly Asp Xaa Ala Xaa Leu Xaa Xaa 1 5 <210> 73 <211> 9 <212> PRT <213> Artificial sequence <220> <223> synthetic peptide ligand <220> <221> misc_feature <222> (1)..(1) <223> N-terminal Ac <220> <221> misc_feature <222> (6)..(6) <223> Xaa = Abu <220> <221> misc_feature <222> (7)..(7) <223> Xaa = N-methyl Leucine <220> <221> misc_feature <222> (8)..(8) <223> Xaa = Cit <220> <221> misc_feature <222> (9)..(9) <223> Xaa = Aib <400> 73 Arg Gly Asp Leu Ala Xaa Xaa Xaa Xaa 1 5 <210> 74 <211> 9 <212> PRT <213> Artificial sequence <220> <223> synthetic peptide ligand <220> <221> misc_feature <222> (1)..(1) <223> N-terminal CH3CH2 <220> <221> misc_feature <222> (6)..(6) <223> Xaa = Abu <220> <221> misc_feature <222> (8)..(8) <223> Xaa = Cit <220> <221> misc_feature <222> (9)..(9) <223> Xaa = Aib <400> 74 Arg Gly Asp Leu Ala Xaa Leu Xaa Xaa 1 5 <210> 75 <211> 9 <212> PRT <213> Artificial sequence <220> <223> synthetic peptide ligand <220> <221> misc_feature <222> (1)..(1) <223> N-terminal CH3(CH2)2 <220> <221> misc_feature <222> (6)..(6) <223> Xaa = Abu <220> <221> misc_feature <222> (8)..(8) <223> Xaa = Cit <220> <221> misc_feature <222> (9)..(9) <223> Xaa = Aib <400> 75 Arg Gly Asp Leu Ala Xaa Leu Xaa Xaa 1 5 <210> 76 <211> 9 <212> PRT <213> Artificial sequence <220> <223> synthetic peptide ligand <220> <221> misc_feature <222> (1)..(1) <223> N-terminal CH3(CH2)3 <220> <221> misc_feature <222> (6)..(6) <223> Xaa = Abu <220> <221> misc_feature <222> (8)..(8) <223> Xaa = Cit <220> <221> misc_feature <222> (9)..(9) <223> Xaa = Aib <400> 76 Arg Gly Asp Leu Ala Xaa Leu Xaa Xaa 1 5 <210> 77 <211> 9 <212> PRT <213> Artificial sequence <220> <223> synthetic peptide ligand <220> <221> misc_feature <222> (1)..(1) <223> N-terminal CH3(CH2)4 <220> <221> misc_feature <222> (6)..(6) <223> Xaa = Abu <220> <221> misc_feature <222> (8)..(8) <223> Xaa = Cit <220> <221> misc_feature <222> (9)..(9) <223> Xaa = Aib <400> 77 Arg Gly Asp Leu Ala Xaa Leu Xaa Xaa 1 5 <210> 78 <211> 9 <212> PRT <213> Artificial sequence <220> <223> synthetic peptide ligand <220> <221> misc_feature <222> (1)..(1) <223> N-terminal Ac <220> <221> misc_feature <222> (8)..(8) <223> Xaa = Cit <220> <221> misc_feature <222> (9)..(9) <223> Xaa = Aib <400> 78 Arg Gly Asp Leu Ala Gln Leu Xaa Xaa 1 5 <210> 79 <211> 9 <212> PRT <213> Artificial sequence <220> <223> synthetic peptide ligand <220> <221> misc_feature <222> (1)..(1) <223> N-terminal Ac <220> <221> misc_feature <222> (6)..(6) <223> Xaa = Abu <220> <221> misc_feature <222> (9)..(9) <223> Xaa = Aib <400> 79 Arg Gly Asp Leu Ala Xaa Leu Pro Xaa 1 5 <210> 80 <211> 9 <212> PRT <213> Artificial sequence <220> <223> synthetic peptide ligand <220> <221> misc_feature <222> (1)..(1) <223> N-terminal CH3(CH2)1CO <220> <221> misc_feature <222> (6)..(6) <223> Xaa = Abu <220> <221> misc_feature <222> (8)..(8) <223> Xaa = Cit <220> <221> misc_feature <222> (9)..(9) <223> Xaa = Aib <400> 80 Arg Gly Asp Leu Ala Xaa Leu Xaa Xaa 1 5 <210> 81 <211> 9 <212> PRT <213> Artificial sequence <220> <223> synthetic peptide ligand <220> <221> misc_feature <222> (1)..(1) <223> N-terminal CH3O(CH2CH2O)1CH2CH2CO <220> <221> misc_feature <222> (6)..(6) <223> Xaa = Abu <220> <221> misc_feature <222> (8)..(8) <223> Xaa = Cit <220> <221> misc_feature <222> (9)..(9) <223> Xaa = Aib <400> 81 Arg Gly Asp Leu Ala Xaa Leu Xaa Xaa 1 5 <210> 82 <211> 9 <212> PRT <213> Artificial sequence <220> <223> synthetic peptide ligand <220> <221> misc_feature <222> (1)..(1) <223> N-terminal CH3O(CH2CH2O)2CH2CH2CO <220> <221> misc_feature <222> (6)..(6) <223> Xaa = Abu <220> <221> misc_feature <222> (8)..(8) <223> Xaa = Cit <220> <221> misc_feature <222> (9)..(9) <223> Xaa = Aib <400> 82 Arg Gly Asp Leu Ala Xaa Leu Xaa Xaa 1 5 <210> 83 <211> 9 <212> PRT <213> Artificial sequence <220> <223> synthetic peptide ligand <220> <221> misc_feature <222> (1)..(1) <223> N-terminal CH3O(CH2CH2O)3CH2CH2CO <220> <221> misc_feature <222> (6)..(6) <223> Xaa = Abu <220> <221> misc_feature <222> (8)..(8) <223> Xaa = Cit <220> <221> misc_feature <222> (9)..(9) <223> Xaa = Aib <400> 83 Arg Gly Asp Leu Ala Xaa Leu Xaa Xaa 1 5 <210> 84 <211> 9 <212> PRT <213> Artificial sequence <220> <223> synthetic peptide ligand <220> <221> misc_feature <222> (1)..(1) <223> N-terminal CH3O(CH2CH2O)5CH2CH2CO <220> <221> misc_feature <222> (6)..(6) <223> Xaa = Abu <220> <221> misc_feature <222> (8)..(8) <223> Xaa = Cit <220> <221> misc_feature <222> (9)..(9) <223> Xaa = Aib <400> 84 Arg Gly Asp Leu Ala Xaa Leu Xaa Xaa 1 5 <210> 85 <211> 7 <212> PRT <213> Artificial sequence <220> <223> synthetic peptide ligand <220> <221> misc_feature <222> (1)..(1) <223> N-terminal cap <220> <221> misc_feature <222> (2)..(2) <223> Xaa = G1 <220> <221> misc_feature <222> (5)..(5) <223> Xaa = Xaa1 <220> <221> misc_feature <222> (6)..(6) <223> Xaa = Xaa2 <400> 85 Arg Xaa Asp Leu Xaa Xaa Leu 1 5 <210> 86 <211> 7 <212> PRT <213> Artificial sequence <220> <223> synthetic peptide ligand <220> <221> misc_feature <222> (1)..(1) <223> N-terminal cap <220> <221> misc_feature <222> (2)..(2) <223> Xaa = G1 <220> <221> misc_feature <222> (5)..(5) <223> Xaa = Xaa1 <220> <221> misc_feature <222> (6)..(6) <223> Xaa = Xaa2 <220> <221> misc_feature <222> (7)..(7) <223> C-terminal -J-R1 <400> 86 Arg Xaa Asp Leu Xaa Xaa Leu 1 5 <210> 87 <211> 7 <212> PRT <213> Artificial sequence <220> <223> synthetic peptide ligand <220> <221> misc_feature <222> (1)..(1) <223> N-terminal cap <220> <221> misc_feature <222> (2)..(2) <223> Xaa = G1 <220> <221> misc_feature <222> (5)..(5) <223> Xaa = Xaa1 <220> <221> misc_feature <222> (6)..(6) <223> Xaa = Xaa2 <220> <221> misc_feature <222> (7)..(7) <223> C-terminal -J-R1-R2 <400> 87 Arg Xaa Asp Leu Xaa Xaa Leu 1 5 <210> 88 <211> 7 <212> PRT <213> Artificial sequence <220> <223> synthetic peptide ligand <220> <221> misc_feature <222> (1)..(1) <223> N-terminal cap <220> <221> misc_feature <222> (2)..(2) <223> Xaa = G1 <220> <221> misc_feature <222> (5)..(5) <223> Xaa = Xaa1 <220> <221> misc_feature <222> (6)..(6) <223> Xaa = Xaa2 <220> <221> misc_feature <222> (7)..(7) <223> C-terminal -J-R1)n-R3 <400> 88 Arg Xaa Asp Leu Xaa Xaa Leu 1 5 <210> 89 <211> 7 <212> PRT <213> Artificial sequence <220> <223> synthetic peptide ligand <220> <221> misc_feature <222> (1)..(1) <223> N-terminal cap <220> <221> misc_feature <222> (2)..(2) <223> Xaa = G1 <220> <221> misc_feature <222> (5)..(5) <223> Xaa = Xaa1 <220> <221> misc_feature <222> (6)..(6) <223> Xaa = Xaa2 <220> <221> misc_feature <222> (7)..(7) <223> C-terminal -J-R1)n-R4-(R3)p <400> 89 Arg Xaa Asp Leu Xaa Xaa Leu 1 5 <210> 90 <211> 7 <212> PRT <213> Artificial sequence <220> <223> synthetic peptide ligand <220> <221> misc_feature <222> (1)..(1) <223> N-terminal cap <220> <221> misc_feature <222> (2)..(2) <223> Xaa = G1 <220> <221> misc_feature <222> (6)..(6) <223> Xaa = XaaU <400> 90 Arg Xaa Asp Leu Ala Xaa Leu 1 5 <210> 91 <211> 7 <212> PRT <213> Artificial sequence <220> <223> synthetic peptide ligand <220> <221> misc_feature <222> (1)..(1) <223> N-terminal cap <220> <221> misc_feature <222> (2)..(2) <223> Xaa = G1 <220> <221> misc_feature <222> (6)..(6) <223> Xaa = Abu <400> 91 Arg Xaa Asp Leu Ala Xaa Leu 1 5 <210> 92 <211> 10 <212> PRT <213> Artificial sequence <220> <223> synthetic peptide ligand <220> <221> misc_feature <222> (1)..(1) <223> N-terminal cap <220> <221> misc_feature <222> (2)..(2) <223> Xaa = G1 <220> <221> misc_feature <222> (5)..(5) <223> Xaa = Xaa1 <220> <221> misc_feature <222> (6)..(6) <223> Xaa = Xaa2 <220> <221> misc_feature <222> (8)..(8) <223> Xaa = Xaa3 <220> <221> misc_feature <222> (9)..(9) <223> Xaa = Xaa4 <220> <221> misc_feature <222> (10)..(10) <223> C-terminal -R1 <400> 92 Arg Xaa Asp Leu Xaa Xaa Leu Xaa Xaa Leu 1 5 10 <210> 93 <211> 10 <212> PRT <213> Artificial sequence <220> <223> synthetic peptide ligand <220> <221> misc_feature <222> (1)..(1) <223> N-terminal cap <220> <221> misc_feature <222> (2)..(2) <223> Xaa = G1 <220> <221> misc_feature <222> (6)..(6) <223> Xaa = XaaU <220> <221> misc_feature <222> (6)..(6) <223> Xaa = Xaa2 <220> <221> misc_feature <222> (8)..(8) <223> Xaa = Xaa3 <220> <221> misc_feature <222> (9)..(9) <223> Xaa = Xaa4 <220> <221> misc_feature <222> (10)..(10) <223> C-terminal -R1 <400> 93 Arg Xaa Asp Leu Ala Xaa Leu Xaa Xaa Leu 1 5 10 <210> 94 <211> 10 <212> PRT <213> Artificial sequence <220> <223> synthetic peptide ligand <220> <221> misc_feature <222> (1)..(1) <223> N-terminal cap <220> <221> misc_feature <222> (2)..(2) <223> Xaa = G1 <220> <221> misc_feature <222> (6)..(6) <223> Xaa = Abu <220> <221> misc_feature <222> (8)..(8) <223> Xaa = Xaa3 <220> <221> misc_feature <222> (9)..(9) <223> Xaa = Xaa4 <220> <221> misc_feature <222> (10)..(10) <223> C-terminal -R1 <400> 94 Arg Xaa Asp Leu Ala Xaa Leu Xaa Xaa Leu 1 5 10 <210> 95 <211> 10 <212> PRT <213> Artificial sequence <220> <223> synthetic peptide ligand <220> <221> misc_feature <222> (1)..(1) <223> N-terminal cap <220> <221> misc_feature <222> (2)..(2) <223> Xaa = G1 <220> <221> misc_feature <222> (6)..(6) <223> Xaa = XaaU <220> <221> misc_feature <222> (8)..(9) <223> Xaa = XaaU <220> <221> misc_feature <222> (10)..(10) <223> C-terminal -R1 <400> 95 Arg Xaa Asp Leu Ala Xaa Leu Xaa Xaa Leu 1 5 10 <210> 96 <211> 10 <212> PRT <213> Artificial sequence <220> <223> synthetic peptide ligand <220> <221> misc_feature <222> (2)..(2) <223> Xaa = G1 <220> <221> misc_feature <222> (5)..(5) <223> Xaa = Xaa1 <220> <221> misc_feature <222> (6)..(6) <223> Xaa = Xaa2 <220> <221> misc_feature <222> (8)..(8) <223> Xaa = Xaa3 <220> <221> misc_feature <222> (9)..(9) <223> Xaa = Xaa4 <220> <221> misc_feature <222> (10)..(10) <223> C-terminal -R1 <400> 96 Arg Xaa Asp Leu Xaa Xaa Leu Xaa Xaa Leu 1 5 10 <210> 97 <211> 10 <212> PRT <213> Artificial sequence <220> <223> synthetic peptide ligand <220> <221> misc_feature <222> (2)..(2) <223> Xaa = G1 <220> <221> misc_feature <222> (6)..(6) <223> Xaa = Abu <220> <221> misc_feature <222> (8)..(8) <223> Xaa = Cit <220> <221> misc_feature <222> (9)..(9) <223> Xaa = Aib <220> <221> misc_feature <222> (10)..(10) <223> C-terminal -R1 <400> 97 Arg Xaa Asp Leu Ala Xaa Leu Xaa Xaa Leu 1 5 10 <210> 98 <211> 7 <212> PRT <213> Artificial sequence <220> <223> synthetic peptide ligand <220> <221> misc_feature <222> (2)..(2) <223> Xaa = G1 <220> <221> misc_feature <222> (5)..(5) <223> Xaa = Xaa1 <220> <221> misc_feature <222> (6)..(6) <223> Xaa = Xaa2 <400> 98 Arg Xaa Asp Leu Xaa Xaa Leu 1 5 <210> 99 <211> 7 <212> PRT <213> Artificial sequence <220> <223> synthetic peptide ligand <220> <221> misc_feature <222> (1)..(1) <223> N-terminal cap <220> <221> misc_feature <222> (2)..(2) <223> Xaa = G1 <220> <221> misc_feature <222> (5)..(5) <223> Xaa = Xaa1 <220> <221> misc_feature <222> (6)..(6) <223> Xaa = XaaU <400> 99 Arg Xaa Asp Leu Xaa Xaa Leu 1 5 <210> 100 <211> 7 <212> PRT <213> Artificial sequence <220> <223> synthetic peptide ligand <220> <221> misc_feature <222> (2)..(2) <223> Xaa = G1 <220> <221> misc_feature <222> (5)..(5) <223> Xaa = Xaa1 <220> <221> misc_feature <222> (6)..(6) <223> Xaa = Xaa2 <220> <221> misc_feature <222> (7)..(7) <223> C-terminal -J-R1 <400> 100 Arg Xaa Asp Leu Xaa Xaa Leu 1 5 <210> 101 <211> 7 <212> PRT <213> Artificial sequence <220> <223> synthetic peptide ligand <220> <221> misc_feature <222> (2)..(2) <223> Xaa = G1 <220> <221> misc_feature <222> (5)..(5) <223> Xaa = Xaa1 <220> <221> misc_feature <222> (6)..(6) <223> Xaa = Xaa2 <220> <221> misc_feature <222> (7)..(7) <223> C-terminal -J-R1-R2 <400> 101 Arg Xaa Asp Leu Xaa Xaa Leu 1 5 <210> 102 <211> 7 <212> PRT <213> Artificial sequence <220> <223> synthetic peptide ligand <220> <221> misc_feature <222> (2)..(2) <223> Xaa = G1 <220> <221> misc_feature <222> (5)..(5) <223> Xaa = Xaa1 <220> <221> misc_feature <222> (6)..(6) <223> Xaa = Xaa2 <220> <221> misc_feature <222> (7)..(7) <223> C-terminal -J-R1)n-R3 <400> 102 Arg Xaa Asp Leu Xaa Xaa Leu 1 5 <210> 103 <211> 7 <212> PRT <213> Artificial sequence <220> <223> synthetic peptide ligand <220> <221> misc_feature <222> (2)..(2) <223> Xaa = G1 <220> <221> misc_feature <222> (5)..(5) <223> Xaa = Xaa1 <220> <221> misc_feature <222> (6)..(6) <223> Xaa = Xaa2 <220> <221> misc_feature <222> (7)..(7) <223> C-terminal -J-R1)n-R4-(R3)p <400> 103 Arg Xaa Asp Leu Xaa Xaa Leu 1 5 <210> 104 <211> 10 <212> PRT <213> Artificial sequence <220> <223> synthetic peptide ligand <220> <221> misc_feature <222> (2)..(2) <223> Xaa = G1 <220> <221> misc_feature <222> (5)..(5) <223> Xaa = Xaa1 <220> <221> misc_feature <222> (6)..(6) <223> Xaa = Xaa2 <220> <221> misc_feature <222> (8)..(8) <223> Xaa = Xaa3 <220> <221> misc_feature <222> (9)..(9) <223> Xaa = Xaa4 <220> <221> misc_feature <222> (10)..(10) <223> C-terminal -R1 <400> 104 Arg Xaa Asp Leu Xaa Xaa Leu Xaa Xaa Leu 1 5 10 <210> 105 <211> 7 <212> PRT <213> Artificial sequence <220> <223> synthetic peptide ligand <220> <221> misc_feature <222> (1)..(1) <223> N-terminal cap <220> <221> misc_feature <222> (2)..(2) <223> Xaa = G1 <220> <221> misc_feature <222> (5)..(5) <223> Xaa = Xaa1 <220> <221> misc_feature <222> (6)..(6) <223> Xaa = Xaa2 <220> <221> misc_feature <222> (7)..(7) <223> C-terminal -J-R1)n-R4-(R2)p <400> 105 Arg Xaa Asp Leu Xaa Xaa Leu 1 5 <210> 106 <211> 7 <212> PRT <213> Artificial sequence <220> <223> synthetic peptide ligand <220> <221> misc_feature <222> (2)..(2) <223> Xaa = G1 <220> <221> misc_feature <222> (5)..(5) <223> Xaa = Xaa1 <220> <221> misc_feature <222> (6)..(6) <223> Xaa = Xaa2 <220> <221> misc_feature <222> (7)..(7) <223> C-terminal -J-R1)n-R4-(R2)p <400> 106 Arg Xaa Asp Leu Xaa Xaa Leu 1 5 <210> 107 <211> 10 <212> PRT <213> Artificial sequence <220> <223> synthetic peptide ligand <220> <221> misc_feature <222> (2)..(2) <223> Xaa = G1 <220> <221> misc_feature <222> (6)..(6) <223> Xaa = Abu <220> <221> misc_feature <222> (8)..(8) <223> Xaa = Cit <220> <221> misc_feature <222> (9)..(9) <223> Xaa = Aib <220> <221> misc_feature <222> (10)..(10) <223> C-terminal -R1)n-R4-(R2)p <400> 107 Arg Xaa Asp Leu Ala Xaa Leu Xaa Xaa Leu 1 5 10 <210> 108 <211> 10 <212> PRT <213> Artificial sequence <220> <223> synthetic peptide ligand <220> <221> misc_feature <222> (2)..(2) <223> Xaa = G1 <220> <221> misc_feature <222> (6)..(6) <223> Xaa = Abu <220> <221> misc_feature <222> (8)..(8) <223> Xaa = Cit <220> <221> misc_feature <222> (9)..(9) <223> Xaa = Aib <220> <221> misc_feature <222> (10)..(10) <223> C-terminal -R1)n-R4-(R3)p <400> 108 Arg Xaa Asp Leu Ala Xaa Leu Xaa Xaa Leu 1 5 10 <210> 109 <211> 7 <212> PRT <213> Artificial sequence <220> <223> synthetic peptide ligand <220> <221> misc_feature <222> (1)..(1) <223> N-terminal cap <220> <221> misc_feature <222> (5)..(5) <223> Xaa = Xaa1 <220> <221> misc_feature <222> (6)..(6) <223> Xaa = Xaa2 <400> 109 Arg Gly Asp Leu Xaa Xaa Leu 1 5 <210> 110 <211> 7 <212> PRT <213> Artificial sequence <220> <223> synthetic peptide ligand <220> <221> misc_feature <222> (1)..(1) <223> N-terminal cap <220> <221> misc_feature <222> (6)..(6) <223> Xaa = Abu <220> <221> misc_feature <222> (7)..(7) <223> C-terminal -R7 <400> 110 Arg Gly Asp Leu Glu Xaa Leu 1 5 <210> 111 <211> 7 <212> PRT <213> Artificial sequence <220> <223> synthetic peptide ligand <220> <221> misc_feature <222> (1)..(1) <223> N-terminal cap <220> <221> misc_feature <222> (6)..(6) <223> Xaa = Abu <220> <221> misc_feature <222> (7)..(7) <223> C-terminal -R7 <400> 111 Arg Gly Asp Leu Gln Xaa Leu 1 5 <210> 112 <211> 7 <212> PRT <213> Artificial sequence <220> <223> synthetic peptide ligand <220> <221> misc_feature <222> (1)..(1) <223> N-terminal cap <220> <221> misc_feature <222> (6)..(6) <223> Xaa = Abu <220> <221> misc_feature <222> (7)..(7) <223> C-terminal -R7 <400> 112 Arg Gly Asp Leu Gly Xaa Leu 1 5 <210> 113 <211> 7 <212> PRT <213> Artificial sequence <220> <223> synthetic peptide ligand <220> <221> misc_feature <222> (1)..(1) <223> N-terminal cap <220> <221> misc_feature <222> (6)..(6) <223> Xaa = Abu <220> <221> misc_feature <222> (7)..(7) <223> C-terminal -R7 <400> 113 Arg Gly Asp Leu Pro Xaa Leu 1 5 <210> 114 <211> 7 <212> PRT <213> Artificial sequence <220> <223> synthetic peptide ligand <220> <221> misc_feature <222> (1)..(1) <223> N-terminal R1 <220> <221> misc_feature <222> (6)..(6) <223> Xaa = Abu <400> 114 Arg Gly Asp Leu Ala Xaa Leu 1 5 <210> 115 <211> 7 <212> PRT <213> Artificial sequence <220> <223> synthetic peptide ligand <220> <221> misc_feature <222> (1)..(1) <223> N-terminal R1 <220> <221> misc_feature <222> (6)..(6) <223> Xaa = Abu <400> 115 Arg Gly Asp Leu Phe Xaa Leu 1 5 <210> 116 <211> 7 <212> PRT <213> Artificial sequence <220> <223> synthetic peptide ligand <220> <221> misc_feature <222> (1)..(1) <223> N-terminal R1 <220> <221> misc_feature <222> (6)..(6) <223> Xaa = Abu <220> <221> misc_feature <222> (7)..(7) <223> C-terminal -R7 <400> 116 Arg Gly Asp Leu Lys Xaa Leu 1 5 <210> 117 <211> 7 <212> PRT <213> Artificial sequence <220> <223> synthetic peptide ligand <220> <221> misc_feature <222> (2)..(2) <223> Xaa = G1 <220> <221> misc_feature <222> (5)..(5) <223> Xaa = Xaa1 <220> <221> misc_feature <222> (6)..(6) <223> Xaa = Xaa2 <400> 117 Arg Xaa Asp Leu Xaa Xaa Leu 1 5 <210> 118 <211> 7 <212> PRT <213> Artificial sequence <220> <223> synthetic peptide ligand <220> <221> misc_feature <222> (6)..(6) <223> Xaa = Abu <400> 118 Arg Gly Asp Leu Ala Xaa Leu 1 5 <210> 119 <211> 7 <212> PRT <213> Artificial sequence <220> <223> synthetic peptide ligand <220> <221> misc_feature <222> (6)..(6) <223> Xaa = Abu <400> 119 Arg Gly Asp Leu Lys Xaa Leu 1 5 <210> 120 <211> 7 <212> PRT <213> Artificial sequence <220> <223> synthetic peptide ligand <220> <221> misc_feature <222> (6)..(6) <223> Xaa = Abu <400> 120 Arg Gly Asp Leu Glu Xaa Leu 1 5 <210> 121 <211> 7 <212> PRT <213> Artificial sequence <220> <223> synthetic peptide ligand <220> <221> misc_feature <222> (6)..(6) <223> Xaa = Abu <400> 121 Arg Gly Asp Leu Phe Xaa Leu 1 5 <210> 122 <211> 7 <212> PRT <213> Artificial sequence <220> <223> synthetic peptide ligand <220> <221> misc_feature <222> (6)..(6) <223> Xaa = Abu <400> 122 Arg Gly Asp Leu Gln Xaa Leu 1 5 <210> 123 <211> 7 <212> PRT <213> Artificial sequence <220> <223> synthetic peptide ligand <220> <221> misc_feature <222> (6)..(6) <223> Xaa = Abu <400> 123 Arg Gly Asp Leu Gly Xaa Leu 1 5 <210> 124 <211> 7 <212> PRT <213> Artificial sequence <220> <223> synthetic peptide ligand <220> <221> misc_feature <222> (6)..(6) <223> Xaa = Abu <400> 124 Arg Gly Asp Leu Pro Xaa Leu 1 5 <210> 125 <211> 7 <212> PRT <213> Artificial sequence <220> <223> synthetic natural peptide <400> 125 Arg Gly Asp Leu Ala Lys Leu 1 5 <210> 126 <211> 7 <212> PRT <213> Artificial sequence <220> <223> synthetic natural peptide <400> 126 Arg Gly Asp Leu Ala Glu Leu 1 5 <210> 127 <211> 7 <212> PRT <213> Artificial sequence <220> <223> synthetic natural peptide <400> 127 Arg Gly Asp Leu Ala Phe Leu 1 5 <210> 128 <211> 7 <212> PRT <213> Artificial sequence <220> <223> synthetic natural peptide <400> 128 Arg Gly Asp Leu Ala Gln Leu 1 5 <210> 129 <211> 7 <212> PRT <213> Artificial sequence <220> <223> synthetic natural peptide <400> 129 Arg Gly Asp Leu Ala Gly Leu 1 5 <210> 130 <211> 7 <212> PRT <213> Artificial sequence <220> <223> synthetic natural peptide <400> 130 Arg Gly Asp Leu Ala Pro Leu 1 5 <210> 131 <211> 4 <212> PRT <213> Artificial sequence <220> <223> synthetic peptide ligand <220> <221> misc_feature <222> (2)..(2) <223> Xaa = Cit <400> 131 Phe Xaa Phe Pro 1 <210> 132 <211> 10 <212> PRT <213> Artificial sequence <220> <223> synthetic peptide ligand <220> <221> misc_feature <222> (1)..(1) <223> N-terminal Ac <220> <221> misc_feature <222> (6)..(6) <223> Xaa = Abu <220> <221> misc_feature <222> (8)..(8) <223> Xaa = Cit <220> <221> misc_feature <222> (9)..(9) <223> Xaa = Aib <400> 132 Arg Gly Glu Leu Ala Xaa Leu Xaa Xaa Leu 1 5 10

Claims (49)

  1. RG1DLXaa1Xaa2L-Xaa3Xaa4L-R1 (서열식별번호: 96) (화학식 VIII)
    의 아미노산 서열로 이루어진 αvβ6 인테그린 리간드이며,
    여기서
    R은 L-아르기닌이고;
    G1은 L-글리신 또는 N-메틸 글리신이고;
    D는 L-아스파르트산 (L-아스파르테이트)이고;
    L은 L-류신이고;
    Xaa1은 L-알라닌이고;
    Xaa2는 L-α-아미노부티르산(Abu)이고;
    Xaa3은 시트룰린(Cit)이고;
    Xaa4는 아미노이소부티르산이고;
    R1은 존재 또는 부재하며, 존재하는 경우에, PEG 및/또는 연결기를 포함하고;
    αvβ6 인테그린 리간드가 화물 분자에 추가로 접합되는
    αvβ6 인테그린 리간드.
  2. 제1항에 있어서, R1이 2-20 에틸렌 옥시드 단위를 갖는 폴리에틸렌 글리콜을 포함하는 αvβ6 인테그린 리간드.
  3. 제1항에 있어서, 아민-말단 캡을 포함하는 αvβ6 인테그린 리간드.
  4. 제1항에 있어서, 아민-말단 캡이 CH3CO, CH3CH2CO, CH3(CH2)2CO, (CH3)2CHCO, CH3(CH2)3CO, (CH3)2CHCH2CO, CH3CH2CH(CH3)CO, (CH3)3CCO, CH3(CH2)4CO, CH3SO2, CH3CH2SO2, CH3(CH2)2SO2, (CH3)2CHSO2, CH3(CH2)3SO2, (CH3)2CHCH2SO2, CH3CH2CH(CH3)SO2, (CH3)3CSO2, PhCO, PhSO2, 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9 또는 10개의 탄소 원자를 갖는 알킬기, 메틸, 에틸, 프로필, 부틸, 펜틸, NH2NH, PEG, 구아니디닐, CH3OCH2CH2OCH2CH2CO, CH3O(CH2CH2O)2CH2CH2CO, CH3O(CH2CH2O)3CH2CH2CO, CH3O(CH2CH2O)4CH2CH2CO, CH3O(CH2CH2O)5CH2CH2CO, CH3OCH2CH2OCH2CO, CH3O(CH2CH2O)2CH2CO, CH3O(CH2CH2O)3CH2CO, CH3O(CH2CH2O)4CH2CO, CH3O(CH2CH2O)5CH2CO, CH3OCH2CH2OCO, CH3O(CH2CH2O)2CO, CH3O(CH2CH2O)3CO, CH3O(CH2CH2O)4CO, CH3O(CH2CH2O)5CO, HOCH2CH2OCH2CH2CO, HO(CH2CH2O)2CH2CH2CO, HO(CH2CH2O)3CH2CH2CO, HO(CH2CH2O)4CH2CH2CO, HO(CH2CH2O)5CH2CH2CO, HOCH2CH2OCH2CO, HO(CH2CH2O)2CH2CO, HO(CH2CH2O)3CH2CO, HO(CH2CH2O)4CH2CO, HO(CH2CH2O)5CH2CO, HOCH2CH2OCO, HO(CH2CH2O)2CO, HO(CH2CH2O)3CO, HO(CH2CH2O)4CO, HO(CH2CH2O)5CO, CH3CH2OCH2CH2OCH2CH2CO, CH3CH2O(CH2CH2O)2CH2CH2CO, CH3CH2O(CH2CH2O)3CH2CH2CO, CH3CH2O(CH2CH2O)4CH2CH2CO, CH3CH2O(CH2CH2O)5CH2CH2CO, CH3CH2OCH2CH2OCH2CO, CH3CH2O(CH2CH2O)2CH2CO, CH3CH2O(CH2CH2O)3CH2CO, CH3CH2O(CH2CH2O)4CH2CO, CH3CH2O(CH2CH2O)5CH2CO, CH3CH2OCH2CH2OCO, CH3CH2O(CH2CH2O)2CO, CH3CH2O(CH2CH2O)3CO, CH3CH2O(CH2CH2O)4CO, CH3CH2O(CH2CH2O)5CO, CH3OCH2CH2CO, HOCH2CH2CO 및 CH3CH2OCH2CH2CO로 이루어진 군으로부터 선택되는 αvβ6 인테그린 리간드.
  5. 제4항에 있어서, 아민-말단 캡이 CH3CO인 αvβ6 인테그린 리간드.
  6. 제1항에 있어서, 서열식별번호: 4 (Ac-RGDLAAbuLCitAibL)의 서열로 이루어진 αvβ6 인테그린 리간드.
  7. 제1항에 있어서, αvβ6 인테그린 리간드가 소분자, 항체, 항체 단편, 이뮤노글로불린, 모노클로날 항체, 표지 또는 마커, 지질, 천연 또는 변형된 핵산 또는 폴리뉴클레오티드, 펩티드, 압타머, 중합체, 폴리아민, 단백질, 독소, 비타민, 폴리에틸렌 글리콜, 합텐, 디곡시게닌, 비오틴, 방사성 원자 또는 분자, 또는 형광단을 포함하는 화물 분자에 접합되는 αvβ6 인테그린 리간드.
  8. 제1항에 있어서, αvβ6 인테그린 리간드가 활성 제약 성분을 포함하는 화물 분자에 접합된 αvβ6 인테그린 리간드.
  9. 제1항에 있어서, αvβ6 인테그린 리간드가 올리고머성 화합물을 포함하는 화물 분자에 접합된 αvβ6 인테그린 리간드.
  10. 제9항에 있어서, 올리고머성 화합물이 RNAi 작용제인 αvβ6 인테그린 리간드.
  11. 암 치료를 위해 세포에서 표적 유전자의 발현을 억제함에 사용하기 위한, 올리고머성 화합물에 접합된 제1항 내지 제10항 중 어느 한 항의 αvβ6 인테그린 리간드를 포함하는 제약 조성물.
  12. 제11항에 있어서, 올리고머성 화합물이 RNAi 작용제인 제약 조성물.
  13. 삭제
  14. 삭제
  15. 삭제
  16. 삭제
  17. 삭제
  18. 삭제
  19. 삭제
  20. 삭제
  21. 삭제
  22. 삭제
  23. 삭제
  24. 삭제
  25. 삭제
  26. 삭제
  27. 삭제
  28. 삭제
  29. 삭제
  30. 삭제
  31. 삭제
  32. 삭제
  33. 삭제
  34. 삭제
  35. 삭제
  36. 삭제
  37. 삭제
  38. 삭제
  39. 삭제
  40. 삭제
  41. 삭제
  42. 삭제
  43. 삭제
  44. 삭제
  45. 삭제
  46. 삭제
  47. 삭제
  48. 삭제
  49. 삭제
KR1020197012274A 2016-11-01 2017-11-01 알파-v 베타-6 인테그린 리간드 및 그의 용도 KR102634762B1 (ko)

Applications Claiming Priority (3)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US201662415752P 2016-11-01 2016-11-01
US62/415,752 2016-11-01
PCT/US2017/059550 WO2018085415A1 (en) 2016-11-01 2017-11-01 Alpha-v beta-6 integrin ligands and uses thereof

Publications (2)

Publication Number Publication Date
KR20190075937A KR20190075937A (ko) 2019-07-01
KR102634762B1 true KR102634762B1 (ko) 2024-02-06

Family

ID=62076333

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
KR1020197012274A KR102634762B1 (ko) 2016-11-01 2017-11-01 알파-v 베타-6 인테그린 리간드 및 그의 용도

Country Status (21)

Country Link
US (2) US11180529B2 (ko)
EP (2) EP3535397B1 (ko)
JP (2) JP7291624B2 (ko)
KR (1) KR102634762B1 (ko)
CN (2) CN109952376B (ko)
AU (2) AU2017354041B2 (ko)
BR (1) BR112019008965A2 (ko)
CA (1) CA3039618A1 (ko)
DK (1) DK3535397T3 (ko)
EA (1) EA201991102A1 (ko)
ES (1) ES2906109T3 (ko)
HR (1) HRP20220181T1 (ko)
IL (2) IL266343B2 (ko)
JO (1) JOP20190084B1 (ko)
MX (3) MX2019004909A (ko)
PL (1) PL3535397T3 (ko)
SA (1) SA519401709B1 (ko)
SI (1) SI3535397T1 (ko)
TW (1) TWI776821B (ko)
WO (1) WO2018085415A1 (ko)
ZA (1) ZA201901905B (ko)

Families Citing this family (10)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
TWI776821B (zh) * 2016-11-01 2022-09-11 美商愛羅海德製藥公司 α-V β-6整合素配位子
EP4159727A1 (en) 2017-02-28 2023-04-05 Morphic Therapeutic, Inc. Inhibitors of (alpha-v)(beta-6) integrin
MA52117A (fr) 2017-02-28 2022-04-06 Morphic Therapeutic Inc Inhibiteurs de l'intégrine (alpha-v) (bêta-6)
US10590416B2 (en) 2017-07-06 2020-03-17 Arrowhead Pharmaceuticals, Inc. RNAi agents for inhibiting expression of alpha-ENaC and methods of use
PE20211640A1 (es) 2018-08-29 2021-08-24 Morphic Therapeutic Inc INHIBICION DE LA INTEGRINA xvß6
KR102663798B1 (ko) 2019-06-25 2024-05-03 주식회사 엘지에너지솔루션 배터리 시스템
MX2023002854A (es) * 2020-09-11 2023-04-03 Arrowhead Pharmaceuticals Inc Plataformas de suministro al musculo esqueletico y metodos de uso.
JP2023541422A (ja) * 2020-09-11 2023-10-02 アローヘッド ファーマシューティカルズ インコーポレイテッド インテグリン標的化リガンド及びその使用
EP4211243A2 (en) * 2020-09-11 2023-07-19 Arrowhead Pharmaceuticals, Inc. Rnai agents for inhibiting expression of dux4, compositions thereof, and methods of use
WO2024006999A2 (en) 2022-06-30 2024-01-04 Alnylam Pharmaceuticals, Inc. Cyclic-disulfide modified phosphate based oligonucleotide prodrugs

Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JP2009509562A (ja) * 2005-10-03 2009-03-12 キャンサー・リサーチ・テクノロジー・リミテッド αｖβ６ペプチドリガンド及びその活用
WO2015160770A1 (en) * 2014-04-15 2015-10-22 The Regents Of The University Of California Bi-terminal pegylated integrin-binding peptides and methods of use thereof
WO2016164357A1 (en) 2015-04-06 2016-10-13 The Board Of Regents Of The University Of Oklahoma Phages for biomarker capture and methods of use

Family Cites Families (12)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US4522811A (en) 1982-07-08 1985-06-11 Syntex (U.S.A.) Inc. Serial injection of muramyldipeptides and liposomes enhances the anti-infective activity of muramyldipeptides
DE19929410A1 (de) * 1999-06-26 2000-12-28 Merck Patent Gmbh Inhibitoren des Integrins avß6
WO2001081377A2 (en) * 2000-04-21 2001-11-01 Amgen, Inc. Integrin/adhesion antagonists
DE10118550A1 (de) * 2001-04-14 2002-10-17 Merck Patent Gmbh Liganden des Integrins alpha¶nu¶beta¶6¶
MX2009001293A (es) * 2006-08-03 2009-02-11 Astrazeneca Ab Anticuerpos dirigidos a (v(6 y usos de los mismos.
AR066984A1 (es) 2007-06-15 2009-09-23 Novartis Ag Inhibicion de la expresion de la subunidad alfa del canal epitelial de sodio (enac) por medio de arni (arn de interferencia)
WO2009069727A1 (ja) 2007-11-28 2009-06-04 Fujifilm Corporation 生体高分子およびポリペプチドの化学修飾方法
CN113278077A (zh) * 2010-11-26 2021-08-20 分子组合公司 设计的与血清白蛋白结合的重复蛋白
SG11201404354UA (en) * 2012-02-17 2014-10-30 Seattle Genetics Inc ANTIBODIES TO INTEGRIN αVβ6 AND USE OF SAME TO TREAT CANCER
EP3130912B1 (de) 2015-08-14 2017-06-28 Sick Ag Verfahren zur bestimmung der konzentration einer gaskomponente und spektrometer dafür
JOP20170161A1 (ar) 2016-08-04 2019-01-30 Arrowhead Pharmaceuticals Inc عوامل RNAi للعدوى بفيروس التهاب الكبد ب
TWI776821B (zh) * 2016-11-01 2022-09-11 美商愛羅海德製藥公司 α-V β-6整合素配位子

Patent Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JP2009509562A (ja) * 2005-10-03 2009-03-12 キャンサー・リサーチ・テクノロジー・リミテッド αｖβ６ペプチドリガンド及びその活用
WO2015160770A1 (en) * 2014-04-15 2015-10-22 The Regents Of The University Of California Bi-terminal pegylated integrin-binding peptides and methods of use thereof
WO2016164357A1 (en) 2015-04-06 2016-10-13 The Board Of Regents Of The University Of Oklahoma Phages for biomarker capture and methods of use

Also Published As

Publication number Publication date
KR20190075937A (ko) 2019-07-01
WO2018085415A1 (en) 2018-05-11
JP7291624B2 (ja) 2023-06-15
EA201991102A1 (ru) 2019-09-30
HRP20220181T1 (hr) 2022-04-29
MX2019004909A (es) 2019-08-12
JOP20190084A1 (ar) 2019-04-16
TWI776821B (zh) 2022-09-11
JOP20190084B1 (ar) 2023-09-17
SI3535397T1 (sl) 2022-04-29
IL305158A (en) 2023-10-01
EP3535397A4 (en) 2020-06-03
US20220024975A1 (en) 2022-01-27
US20190248832A1 (en) 2019-08-15
CN117285626A (zh) 2023-12-26
BR112019008965A2 (pt) 2019-07-09
JP2019535685A (ja) 2019-12-12
CN109952376B (zh) 2023-09-05
IL266343B2 (en) 2024-01-01
ES2906109T3 (es) 2022-04-13
JP2023105046A (ja) 2023-07-28
CN109952376A (zh) 2019-06-28
DK3535397T3 (da) 2022-01-31
SA519401709B1 (ar) 2023-06-04
AU2017354041B2 (en) 2024-02-01
IL266343A (en) 2019-06-30
CA3039618A1 (en) 2018-05-11
TW201829445A (zh) 2018-08-16
EP3981780A1 (en) 2022-04-13
ZA201901905B (en) 2022-11-30
EP3535397A1 (en) 2019-09-11
US11180529B2 (en) 2021-11-23
MX2023007051A (es) 2023-06-23
EP3535397B1 (en) 2022-01-05
AU2024202695A1 (en) 2024-05-16
AU2017354041A1 (en) 2019-04-11
PL3535397T3 (pl) 2022-03-07
MX2023007046A (es) 2023-06-23
IL266343B1 (en) 2023-09-01

Similar Documents

Publication Publication Date Title
KR102634762B1 (ko) 알파-v 베타-6 인테그린 리간드 및 그의 용도
US8058068B2 (en) Peptide-enhanced transfections
US6376248B1 (en) Peptide-enhanced transfections
KR20160035081A (ko) 생체 내에서 RNAi 유발제를 종양 세포로 전달하기 위한 폴리콘주게이트
US11597701B2 (en) Integrin ligands and uses thereof
JP6495714B2 (ja) 新規膜透過性ペプチド
EP4211101A1 (en) Integrin targeting ligands and uses thereof
EA042923B1 (ru) Альфа-v бета-6 лиганды интегрина и варианты их применения
CN107614002B (zh) 生物学可切割四肽连接剂
RU2377247C2 (ru) Молекулярный конъюгат на основе синтетических аналогов люлиберина и его применение в качестве средства доставки днк в клетки гормон-чувствительных опухолей (варианты)
KR20240087591A (ko) 타겟 세포 내로 올리고뉴클레오티드를 전달하기 위한 펩타이드 기반 결합체를 포함하는 나노입자 및 이를 포함하는 약학적 조성물

Legal Events

Date Code Title Description
AMND Amendment
E902 Notification of reason for refusal
AMND Amendment
E601 Decision to refuse application
AMND Amendment
X701 Decision to grant (after re-examination)
GRNT Written decision to grant