KR102537043B1 - 조합 치료요법용 약학 조성물 - Google Patents

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Abstract

본 발명은 조합 생성물 및 치료요법에서의 이의 용도에 관한 것이다.

Description

조합 치료요법용 약학 조성물
본 발명은 치료요법을 위해 PPAR 아고니스트와 조합된 니타족사니드 (NTZ) 또는 이의 유도체의 조합에 관한 것이다.
1975 년에 최초로 기재된 (Rossignol and Cavier, 1975) [2-[(5-니트로-1,3-티아졸-2-일)카르바모일]페닐]에타노에이트 (또는 니타족사니드, 또는 NTZ) 는 혐기성 원생동물, 연충류, 및 혐기성 및 호기성 박테리아 모두를 포함하는 광범위한 미생물에 대해 매우 효과적인 것으로 나타났다 (Rossignol and Maisonneuve, 1984; Dubreuil, Houcke et al., 1996; Megraudd, Occhialini et al., 1998; Fox and Saravolatz, 2005; Pankuch and Appelbaum, 2006; Finegold, Molitoris et al., 2009). 이는 장 조충류의 치료를 위해 인간에서 최초로 연구되었으며 (Rossignol and Maisonneuve, 1984), 이제 원생동물 기생충 크리스토스포리디움 파르붐 (Crystosporidium parvum) 및 지아르디아 인테스티날리스 (Giardia intestinalis) 에 의해 유발된 설사의 치료를 위해 미국에서 허가받았다 (Alinia®, Romark laboratories). NTZ 는 또한 라틴 아메리카와 인도에서 광범위하게 상용화되어, 광범위한 장 기생충 감염 치료를 위한 것으로 나타난다 (Hemphill, Mueller et al., 2006). NTZ 가 항기생충 활성을 발휘하는 제안된 작용 메커니즘은 혐기성 대사에 필수적인 피루베이트:페레독신 산화환원효소 (PFOR) 효소-의존적 전자 이동 반응의 저해를 통한 것이다 (Hoffman, Sisson et al., 2007). NTZ 는 또한, PFOR 의 상동체를 갖지 않아, 따라서 대안적인 작용 메커니즘을 제안하는 결핵균 (Mycobacterium tuberculosis) 에 대해 활성을 나타내었다. 실제로, 저자는 NTZ 가 또한 막 전위 및 유기체내 pH 항상성을 방해하는 언커플러 (uncoupler) 로서 작용할 수 있음을 보여주었다 (de Carvalho, Darby et al., 2011).
NTZ 의 약리학적 효과는 항기생충 또는 항박테리아 활동에 국한되지 않으며 최근 몇년 동안 여러 연구가, NTZ 가 항바이러스 활동을 부여할 수도 있다는 것을 밝혀내었다 (Di Santo and Ehrisman, 2014; Rossignol, 2014). NTZ 는 헤마글루티닌 (인플루엔자) 또는 VP7 (로타바이러스) 단백질의 성숙 차단 또는 선천적 면역 반응에 관여하는 단백질 PKR 의 활성화를 포함하여 다양한 방식으로 바이러스 복제를 방해한다 (검토를 위해, (Rossignol, 2014) 참조). NTZ 는 또한 중요한 대사 및 전사멸 (prodeath) 신호전달 경로를 방해함으로써 광범위한 항암 특성을 갖는 것으로 나타났다 (Di Santo and Ehrisman, 2014).
PPAR (α, β/δ (이하 δ), 및 γ) 은 호르몬 활성화 핵 수용체 패밀리에 속한다. PPAR, 또는 "퍼옥시좀 증식체 활성화 수용체 (Peroxisome Proliferator Activated Receptors)" 는 다음 리간드에 의해 활성화된 전사 인자의 슈퍼패밀리로부터의 핵 수용체이다: 스테로이드/갑상선 호르몬/레티노이드. 현재까지, 3 가지 PPAR 이소타입이 마우스 및 인간에서 확인되었다: PPARα, PPARδ 및 PPARγ. 인간에서의 PPARβ/δ 발현은 편재하는 것으로 보이며, PPARα 및 γ 는 차등적인 조직 분포를 나타낸다 (Braissant O and Wahli W, 1998). PPARα 는 높은 지방산 이화작용 활성을 갖는 세포 및 높은 과산화수소 활성을 갖는 세포 (간세포, 심근세포, 신장 근위 세뇨관, 장 점막) 에서 발현된다. PPARβ/δ 는 대부분의 조직에서 편재하고 풍부하게 발현된다. PPARγ 발현이 관련되는 한, 이는 주로 지방 조직, 특정 면역계 세포 및 망막에 제한되며 다른 기관에서는 미량으로만 존재한다 (Braissant O and Wahli W, 1998).
PPARα 의 예를 들자면, 그의 작용은 지질-저하 효과를 갖는 피브레이트와 같은 화합물의 클래스에 의해 매개된다. 천연 리간드가 또한 예를 들어 지방산, 에이코사노이드 (류코트리엔 B4) 및 8(S)-히드록시에이코사테트라엔산으로 확인되었다 (Kliewer SA et al., 1997). PPAR 은 주로 지질 및 글루코오스 대사와 관련되어있다. PPAR 활성화제, 예컨대 피브레이트는 PPARα 의 활성화를 통해 혈장 콜레스테롤 및 트리글리세라이드 농도의 조절을 가능하게 한다 (Hourton D et al., 2001). 피브레이트 치료요법은 간에서의 지방산 산화 증가를 초래한다. 피브레이트는 또한 트리글리세라이드의 합성을 감소시킨다 (Staels B and Auwerx J, 1998). PPARα 활성화제는 또한 고혈당 및 인슐린 수준을 교정할 수 있다. 피브레이트는 또한 음식 섭취 및 렙틴 유전자 발현과 무관한 메커니즘을 통해 지방 조직 질량을 감소시킨다 (Guerre-Millo M et al., 2000). PPARγ 아고니스트의 치료적 관심은 제 2 형 당뇨병의 치료에서 널리 연구되어왔다 (Spiegelman BM, 1998). PPARγ 아고니스트는 표적 조직에서 인슐린 감수성을 회복시키고 제 2 형 당뇨병 동물 모델 및 인간 둘 모두에서 혈장 글루코오스, 지질 및 인슐린 수준을 감소시키는 것으로 나타났다 (Ram VJ, 2003). 리간드에 의한 PPAR 활성화는 또한 염증, 혈관신생, 세포 증식 및 분화와 같은 과정, 세포 자멸사, 및 iNOS, MMPase 및 TIMP 의 활동에 참여하는 유전자의 발현을 조절하는 역할을 한다. 각질세포에서 PPARα 의 활성화는 분화에 관여하는 유전자의 발현 및 그의 증식의 중단을 초래한다 (Komuves LG et al., 2000). PPAR 은 NF-κB 와 같은 다른 전사 인자 또는 STAT 및 AP-1 과 같은 전사 활성화제를 포함하는 전사 메카니즘을 부정적으로 방해하므로 항염증 특성을 갖는다 (Desvergne B and Wahli W, 1999). 상기 항염증 및 항증식 특성은 PPAR (및 특히 PPARα) 을, 질환 예컨대 혈관 폐색 성 질환 (동맥경화증 등), 고혈압, 신혈관형성 관련 질환 (당뇨병성 망막병증 등), 염증성 질환 (염증성 장 질환, 건선 등) 및 신생물성 질환 (발암 등) 의 치료를 위한 흥미로운 치료 표적으로 만든다.
본 발명은 NTZ 유사체, 및 PPAR 아고니스트의 신규한 조합 및 치료요법, 특히 염증성, 대사성, 섬유증성 및 담즙울체성 질환의 치료에서의 이들의 용도를 기재한다.
본 발명자들은 PPAR 아고니스트와 조합된 NTZ, 합성 원생동물 작용제 또는 이의 유도체 또는 이의 대사산물이 치료요법, 특히 면역, 염증성, 대사성, 섬유증성 또는 담즙울체성 질환의 치료에 유용한 치료 활성을 나타낸다는 것을 발견하였다.
따라서 본 발명은 하기를 포함하는 조합 생성물에 관한 것이다:
(i) NTZ 및 이의 유사체에서 선택되는 화합물; 및
(ii) 적어도 하나의 PPAR 아고니스트.
특정 구현예에서, 조합 생성물의 성분 (i) 의 화합물은 하기 식 (I) 의 화합물 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염이며:
Figure 112019085009871-pct00001
식 중에서:
R1 은 수소 원자 (H), 중수소 원자 (D), 할로겐 원자, (C6-C14)아릴기, 헤테로시클릭기, (C3-C14)시클로알킬기, (C1-C6)알킬기, 술포닐기, 술폭시드기, (C1-C6)알킬카르보닐기, (C1-C6)알킬옥시, 카르복실기, 카르복실레이트기, 니트로기 (NO2), 아미노기 (NH2), (C1-C6)알킬아미노기, 아미도기, (C1-C6)알킬아미도기, (C1-C6)디알킬아미도기를 나타낸다.
R2 는 수소 원자, 중수소 원자, NO2 기, (C6-C14)아릴기, 헤테로시클릭기, 할로겐 원자, (C1-C6)알킬기, (C3-C14)시클로알킬기, (C2-C6)알키닐기, (C1-C6)알킬옥시기, (C1-C6)알킬티오기, (C1-C6)알킬카르보닐기, (C1-C6)알킬카르보닐아미노기, (C6-C14)아릴카르보닐아미노기, 카르복실 또는 카르복실레이트기, 아미도기, (C1-C6)알킬아미도기, (C1-C6)디알킬아미도기, NH2 기, (C1-C6)알킬아미노기를 나타내거나,
R1 및 R2 는 이들이 부착되는 탄소 원자와 함께, 치환 또는 비치환 5- 내지 8-원 시클로알킬, 헤테로시클릭 또는 아릴기를 형성하고,
동일하거나 상이한 R3, R4, R5, R6 및 R7 은 수소 원자, 중수소 원자, 할로겐 원자, 히드록실기, (C1-C6)알킬카르보닐기, (C1-C6)알킬기, (C1-C6)알킬옥시기, (C1-C6)알킬티오기, (C1-C6)알킬카르보닐옥시기, (C6-C14)아릴옥시기, (C6-C14)아릴기, 헤테로시클릭기, (C3-C14)시클로알킬기, NO2 기, 술포닐아미노알킬기, NH2 기, 아미노(C1-C6)알킬기, (C1-C6)알킬카르보닐아미노기, 카르복실기, 카르복실레이트기, 또는 R9 기를 나타내고;
R9 는 O-R8 기, 또는 알라닌, 아르기닌, 아스파라긴, 아스파르트산, 시스테인, 글루타민, 글루탐산, 글리신, 히스티딘, 이소류신, 류신, 리신, 메티오닌, 페닐알라닌, 프롤린, 세린, 트레오닌, 트립토판, 티로신, 발린으로 이루어지는 군에서 선택되는 아미노산, 또는 식 (A) 의 모이어티를 나타낸다:
Figure 112019085009871-pct00002
[식 중,
R' 는 (C1-C6)알킬기, (C2-C6)알케닐기, (C2-C6)알키닐기, (C3-C14)시클로알킬기, (C3-C14)시클로알킬알킬기, (C3-C14)시클로알킬(C2-C6)알케닐기, (C3-C14)시클로알케닐기, (C3-C14)시클로알케닐(C1-C6)알킬기, (C3-C14)시클로알케닐(C2-C6)알케닐기, (C3-C14)시클로알케닐(C2-C6)알키닐기를 나타내고; R" 및 R"' 은 독립적으로, 수소 원자, (C1-C6)알킬기, 또는 질소 보호기를 나타냄].
R8 은 수소 원자, 중수소 원자, 글루쿠로니딜기, 또는
Figure 112019085009871-pct00003
기 (여기서, 동일하거나 상이한 R8a, R8b 및 R8c 는 수소 원자 또는 중수소 원자를 나타냄) 를 나타낸다.
추가 특정 구현예에서, 조합 생성물의 성분 (i) 의 화합물은 하기 식 (I) 의 화합물 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염이며:
Figure 112019085009871-pct00004
식 중에서:
R1 은 수소 원자 (H), 중수소 원자 (D), 할로겐 원자, (C6-C14)아릴기, 헤테로시클릭기, (C3-C14)시클로알킬기, (C1-C6)알킬기, 술포닐기, 술폭시드기, (C1-C6)알킬카르보닐기, (C1-C6)알킬옥시, 카르복실기, 카르복실레이트기, NO2 기, NH2 기, (C1-C6)알킬아미노기, 아미도기, (C1-C6)알킬아미도기, (C1-C6)디알킬아미도기를 나타낸다.
R2 는 수소 원자, 중수소 원자, NO2 기, (C6-C14)아릴기, 헤테로시클릭기, 할로겐 원자, (C1-C6)알킬기, (C3-C14)시클로알킬기, (C2-C6)알키닐기, (C1-C6)알킬옥시기, (C1-C6)알킬티오기, (C1-C6)알킬카르보닐기, (C1-C6)알킬카르보닐아미노기, (C6-C14)아릴카르보닐아미노기, 카르복실 또는 카르복실레이트기, 아미도기, (C1-C6)알킬아미도기, (C1-C6)디알킬아미도기, NH2 기, (C1-C6)알킬아미노기를 나타내거나,
R1 및 R2 는 이들이 부착되는 탄소 원자와 함께, 치환 또는 비치환 5- 내지 8-원 시클로알킬, 헤테로시클릭 또는 아릴기를 형성하고,
R3 은 수소 원자, 중수소 원자, 할로겐 원자, O-R8 기, (C1-C6)알킬카르보닐기, (C1-C6)알킬기, (C1-C6)알킬옥시기, (C1-C6)알킬티오기, (C1-C6)알킬카르보닐옥시기, (C6-C14)아릴옥시기, (C6-C14)아릴기, 헤테로시클릭기, (C3-C14)시클로알킬기, NO2, 술포닐아미노알킬기, NH2 기, 아미노(C1-C6)알킬기, (C1-C6)알킬카르보닐아미노기, 카르복실기, 카르복실레이트기, 알라닌, 아르기닌, 아스파라긴, 아스파르트산, 시스테인, 글루타민, 글루탐산, 글리신, 히스티딘, 이소류신, 류신, 리신, 메티오닌, 페닐알라닌, 프롤린, 세린, 트레오닌, 트립토판, 티로신, 발린으로 이루어지는 군에서 선택되는 아미노산, 또는 식 (A) 의 모이어티를 나타낸다:
Figure 112019085009871-pct00005
[식 중,
R' 는 (C1-C6)알킬기, (C2-C6)알케닐기, (C2-C6)알키닐기, (C3-C14)시클로알킬기, (C3-C14)시클로알킬알킬기, (C3-C14)시클로알킬(C2-C6)알케닐기, (C3-C14)시클로알케닐기, (C3-C14)시클로알케닐(C1-C6)알킬기, (C3-C14)시클로알케닐(C2-C6)알케닐기, (C3-C14)시클로알케닐(C2-C6)알키닐기를 나타내고; R" 및 R"' 는 독립적으로, 수소 원자, (C1-C6)알킬기, 또는 질소 보호기를 나타냄].
R8 은 수소 원자, 중수소 원자, 또는
Figure 112019085009871-pct00006
기 (여기서, 동일하거나 상이한 R8a, R8b 및 R8c 는 수소 원자 또는 중수소 원자를 나타냄) 를 나타낸다.
동일하거나 상이한 R4, R5, R6 및 R7 은 수소 원자, 중수소 원자, 할로겐 원자, 히드록실기, (C1-C6)알킬카르보닐기, (C1-C6)알킬기, (C1-C6)알킬옥시기, (C1-C6)알킬티오기, (C1-C6)알킬카르보닐옥시기, (C6-C14)아릴옥시기, (C6-C14)아릴기, 헤테로시클릭기, (C3-C14)시클로알킬기, NO2, 술포닐아미노(C1-C6)알킬기, NH2 기, 아미노(C1-C6)알킬기, (C1-C6)알킬카르보닐아미노기, 카르복실기, 카르복실레이트기, 알라닌, 아르기닌, 아스파라긴, 아스파르트산, 시스테인, 글루타민, 글루탐산, 글리신, 히스티딘, 이소류신, 류신, 리신, 메티오닌, 페닐알라닌, 프롤린, 세린, 트레오닌, 트립토판, 티로신, 발린으로 이루어지는 군에서 선택되는 아미노산, 또는 하기 식 (A) 의 모이어티를 나타낸다:
Figure 112019085009871-pct00007
[식 중,
R' 는 (C1-C6)알킬기, (C2-C6)알케닐기, (C2-C6)알키닐기, (C3-C14)시클로알킬기, (C3-C14)시클로알킬(C1-C6)알킬기, (C3-C14)시클로알킬(C1-C6)알케닐기, (C3-C14)시클로알케닐기, (C3-C14)시클로알케닐(C1-C6)알킬기, (C3-C14)시클로알케닐(C2-C6)알케닐기, (C3-C14)시클로알케닐(C2-C6)알키닐기를 나타내고; R" 및 R"' 는 독립적으로, 수소 원자, (C1-C6)알킬기, 또는 질소 보호기를 나타냄],
또는 이의 약학적으로 허용가능한 염.
특정 구현예에서, 본 발명의 식 (I) 의 화합물에서:
(C1-C6)알킬기는 치환 또는 비치환 (C1-C6)알킬기, 특히 치환 또는 비치환 (C1-C4)알킬기일 수 있고;
(C2-C6)알키닐기는 치환 또는 비치환 (C2-C6)알키닐기일 수 있고;
(C3-C14)시클로알킬기는 치환 또는 비치환 (C3-C14)시클로알킬기일 수 있고;
(C1-C6)알킬옥시기는 치환 또는 비치환, 예컨대 치환 또는 비치환 (C1-C4)알킬옥시기일 수 있고;
(C1-C6)알킬티오기는 치환 또는 비치환, 예컨대 치환 또는 비치환 (C1-C4)알킬티오기일 수 있고;
(C1-C6)알킬아미노기는 (C1-C4)알킬아미노기일 수 있고;
(C1-C6)디알킬아미노기는 (C1-C4)디알킬아미노기일 수 있고;
(C6-C14)아릴기는 치환 또는 비치환 (C6-C14)아릴기일 수 있고;
헤테로시클릭기는 치환 또는 비치환 헤테로시클로알킬 또는 헤테로아릴기일 수 있다.
특정 구현예에서, 조합 생성물의 성분 (i) 의 화합물은 하기 식 (II) 의 화합물 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염이며:
Figure 112019085009871-pct00008
식 중에서,
R9 는 수소 원자, 중수소 원자, O-R8 기 (R8 은 상기 정의됨), 또는 알라닌, 아르기닌, 아스파라긴, 아스파르트산, 시스테인, 글루타민, 글루탐산, 글리신, 히스티딘, 이소류신, 류신, 리신, 메티오닌, 페닐알라닌, 프롤린, 세린, 트레오닌, 트립토판, 티로신, 발린으로 이루어지는 군에서 선택되는 아미노산, 또는 식 (A) 의 모이어티를 나타낸다:
Figure 112019085009871-pct00009
[식 중,
R' 는 (C1-C6)알킬기, (C2-C6)알케닐기, (C2-C6)알키닐기, (C3-C14)시클로알킬기, (C3-C14)시클로알킬(C1-C6)알킬기, (C3-C14)시클로알킬(C1-C6)알케닐기, (C3-C14)시클로알케닐기, (C3-C14)시클로알케닐(C1-C6)알킬기, (C3-C14)시클로알케닐(C2-C6)알케닐기, (C3-C14)시클로알케닐(C2-C6)알키닐기를 나타내고; R" 및 R"' 은 독립적으로, 수소 원자, (C1-C6)알킬기, 또는 질소 보호기를 나타냄].
특정 구현예에서, 본 발명의 조합 생성물의 성분 (i) 은 하기에서 선택된다:
- NTZ:
Figure 112019085009871-pct00010
;
- 티족사니드:
Figure 112019085009871-pct00011
; 또는
- 티족사니드 글루쿠로니드 (TZG):
Figure 112019085009871-pct00012
.
또 다른 구현예에서, 조합 생성물의 성분 (i) 은, R8 이 수소 원자, 중수소 원자 또는
Figure 112019085009871-pct00013
기 (여기서, 동일하거나 상이한 R8a, R8b 및 R8c 는 수소 원자 또는 중수소 원자를 나타냄) 를 나타내고/내거나;
동일하거나 상이한 R1, R3, R4, R5 및 R6 이, 수소 원자 또는 중수소 원자를 나타내는 식 (I) 또는 (II) 의 화합물이며, 단, R1, R2, R2a, R2b, R2c, R3, R4, R5 및 R6 은 동시에 수소 원자가 아니다.
특정 구현예에서, 성분 (i) 은 [(5-니트로-1,3-티아졸-2-일)카르바모일]페닐 (d3)에타노에이트, 2-[(5-니트로-1,3-티아졸-2-일)카르바모일]페닐 (d2) 에타노에이트; 또는 2-[(5-니트로-1,3-티아졸-2-일)카르바모일]페닐 (d1) 에타노에이트이다.
또 다른 특정 구현예에서, 성분 (i) 은 하기 식의 ((S)-2-(5-니트로티아졸-2-일카르바모일)페닐 2-아미노-3,3-디메틸부타노에이트 히드로클로라이드) (RM5061) 이다:
Figure 112019085009871-pct00014
.
또 다른 특정 구현예에서, 성분 (i) 은 하기 식의 ((2S,3S)-2-(5-니트로티아졸-2-일카르바모일)페닐 2-아미노-3-메틸펜타노에이트 히드로클로라이드) (RM5066) 이다:
Figure 112019085009871-pct00015
.
추가 특정 구현예에서, PPAR 아고니스트는 PPAR-알파 아고니스트, PPAR-감마 아고니스트, PPAR-델타 아고니스트, PPAR-알파/감마 이중 아고니스트, PPAR 알파/델타 이중 아고니스트, PPAR 감마/델타 이중 아고니스트 또는 PPAR 알파/감마/델타 pan 아고니스트이다.
본 발명에 따르면, 본 발명의 조합에 포함된 PPAR 아고니스트(들) 및 성분 (i) 은, 본 발명의 조합의 상기 PPAR 아고니스트(들) 및 성분 (i) 의 조합이 염증성, 대사성, 섬유증성 및 담즙울체성 질환에 대하여 상승작용적 작용을 제공하도록 선택될 수 있다. 이러한 상승작용은 예컨대 실시예에서 기재된 블리스에 대한 초과량 (Excess Over Bliss) (EOB) 방법을 사용하여, 당업계에 널리 공지된 방법에 따라 측정될 수 있다.
특정 구현예에서, 조합 생성물의 성분 (ii) 는 하기의 것이다:
- 적어도 하나의 PPAR-알파 아고니스트;
- 적어도 하나의 PPAR-감마 아고니스트;
- 적어도 하나의 PPAR-델타 아고니스트;
- 적어도 하나의 PPAR-알파/델타 이중 아고니스트;
- 적어도 하나의 PPAR-알파 아고니스트 및 적어도 하나의 PPAR 델타 아고니스트;
- 적어도 하나의 PPAR-알파/감마 이중 아고니스트;
- 적어도 하나의 PPAR-알파 아고니스트 및 적어도 하나의 PPAR 감마 아고니스트;
- 적어도 하나의 PPAR-감마/델타 이중 아고니스트;
- 적어도 하나의 PPAR-감마 아고니스트 및 적어도 하나의 PPAR 델타 아고니스트;
- 적어도 하나의 PPAR-알파/감마/델타 pan 아고니스트; 및
- 적어도 하나의 PPAR-알파 아고니스트, 적어도 하나의 PPAR-감마 아고니스트 및 적어도 하나의 PPAR-델타 아고니스트.
본 발명에 따르면, 용어 "PPAR(들) 아고니스트" 는 지질 및 글루코오스 항상성에서 중심 역할을 하는 약물의 클래스인 퍼옥시좀 증식체 활성화 수용체 아고니스트를 지칭한다. PPARα 는 주로 지방산 대사에 영향을 주며, 그의 활성화는 지질 수준을 저하시키는 한편, PPARγ 는 대부분 지방생성, 에너지 균형 및 지질 생합성의 조절에 관여한다. PPARδ 는 대부분 골격근 및 심장근에서의 지방산 산화에 참여하지만, 혈중 글루코오스 및 콜레스테롤 수준을 또한 조절한다.
본 발명에 따르면, 본원에서 사용되는 바와 같은 용어 "PPAR 알파 아고니스트" 는 비제한적으로, 페노피브레이트, 시프로피브레이트, 페마피브레이트, 겜피브로질, 클로피브레이트, 비니피브레이트, 클리노피브레이트, 클로피브릭산, 니코피브레이트, 피리피브레이트, 플라피브리드, 로니피브레이트, 테오피브레이트, 토코피브레이트 및 SR10171 을 포함한다.
본 발명에 따르면, 본원에서 사용되는 바와 같은 용어 "PPAR 감마 아고니스트" 는 비제한적으로, 로시글리타존, 피오글리타존, 중수소화된 피오글리타존, 에파투타존, ATx08-001, OMS-405, CHS-131, THR-0921, SER-150-DN, KDT-501, GED-0507-34-Levo, CLC-3001 및 ALL-4 를 포함한다.
본 발명에 따르면, 본원에서 사용되는 바와 같은 용어 "PPAR 델타 아고니스트" 는 비제한적으로, GW501516 (엔두라볼 또는 ({4-[({4-메틸-2-[4-(트리플루오로메틸)페닐]-1,3-티아졸-5-일}메틸)술파닐]-2-메틸페녹시}아세트산)), MBX8025 (셀라델파르 또는 {2-메틸-4-[5-메틸-2-(4-트리플루오로메틸-페닐)-2H-[l,2,3]트리아졸-4-일메틸술파닐]-페녹시}-아세트산), GW0742 ([4-[[[2-[3-플루오로-4-(트리플루오로메틸)페닐]-4-메틸-5-티아졸릴]메틸]티오]-2-메틸 페녹시]아세트산), L165041, HPP-593 및 NCP-1046 을 포함한다.
본 발명에 따르면, 본원에서 사용되는 바와 같은 용어 "PPAR 알파/감마 아고니스트" (글리타자로도 지칭됨) 는 비제한적으로, 사로글리타자르, 알레글리타자, 무라글리타자, 테사글리타자 및 DSP-8658 을 포함한다.
본 발명에 따르면, 본원에서 사용되는 바와 같은 용어 "PPAR 알파/델타 아고니스트" 는 비제한적으로, 엘라피브라노 (GFT505) 또는 T913659 를 포함한다.
본 발명에 따르면, 본원에서 사용되는 바와 같은 용어 "PPAR 감마/델타 아고니스트" 는 비제한적으로, 접합된 리놀레산 (CLA), T3D-959 를 포함한다.
본 발명에 따르면, 본원에서 사용되는 바와 같은 용어 "PPAR 알파/감마/델타 아고니스트" 는 비제한적으로, IVA337 (라니피브라노), TTA (테트라데실티오아세트산), 바바치닌, GW4148, GW9135, 베자피브레이트, 로베글리타존 및 CS038 을 포함한다. 추가 구현예에서, PPAR 알파/감마/델타 아고니스트는 2-(4-(5,6-메틸렌디옥시벤조[d]티아졸-2-일)-2-메틸페녹시)-2-메틸프로판산 (MHY2013) 이다.
PPAR 아고니스트는 염, 히드레이트, 용매화물, 다형체, 또는 공결정의 형태일 수 있다. PPAR 아고니스트는 또한 염의 히드레이트, 용매화물, 다형체 또는 공결정의 형태일 수 있다.
보다 특정 구현예에서, PPAR 아고니스트는 하기 식 (III) 의 화합물, 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염이며:
Figure 112019085009871-pct00016
식 중에서:
Y1 은 할로겐, Ra 또는 Ga-Ra 기를 나타내고;
A 는 CH=CH 또는 CH2-CH2 기를 나타내고;
Y2 는 Gb-Rb 기를 나타내고;
동일하거나 상이한 Ga 및 Gb 는 산소 또는 황의 원자를 나타내고;
Ra 는 수소 원자, 비치환 (C1-C6)알킬기, (C6-C14)아릴기 또는 (C1-C6)알킬기 (하나 이상의 할로겐 원자에 의해 치환됨), (C1-C6)알콕시 또는 (C1-C6)알킬티오기, (C3-C14)시클로알킬기, (C3-C14)시클로알킬티오기 또는 헤테로시클릭기를 나타내고;
Rb 는 적어도 -COORc 기에 의해 치환된 (C1-C6)알킬기를 나타내고, 여기서 Rc 는 수소 원자, 또는 (C1-C6)알킬기 (하나 이상의 할로겐 원자에 의해 치환되거나 치환되지 않음), (C3-C14)시클로알킬기 또는 헤테로시클릭기를 나타내고;
동일하거나 상이한 Y4 및 Y5 는 (C1-C6)알킬기 (하나 이상의 할로겐 원자에 의해 치환되거나 치환되지 않음), (C3-C14)시클로알킬기 또는 헤테로시클릭기를 나타낸다.
식 (III) 의 화합물의 특정 구현예에서:
Y1 은 할로겐, Ra 또는 Ga-Ra 기를 나타내고;
A 는 CH=CH 기를 나타내고;
Y2 는 Gb-Rb 기를 나타내고;
동일하거나 상이한 Ga 및 Gb 는 산소 또는 황의 원자를 나타내고;
Ra 는 (C1-C6)알킬 또는 (C3-C14)시클로알킬기, 특히 하나 이상의 할로겐 원자에 의해 치환되거나 치환되지 않는 (C1-C7)알킬 또는 (C3-C14)시클로알킬기를 나타내고;
Rb 는 -COOR3 기에 의해 치환된 (C1-C6)알킬기를 나타내고, 여기서 Rc 는 수소 원자, 또는 1 내지 4 개의 탄소 원자를 갖는 알킬기를 나타내고;
Y4 및 Y5 는 독립적으로 (C1-C4)알킬기를 나타낸다.
식 (III) 의 화합물의 특정 구현예에서:
Y1 은 Ra 또는 Ga-Ra 기를 나타내고;
A 는 CH2-CH2 기를 나타내고;
Y2 는 Gb-Rb 기를 나타내고;
Ga 는 산소 또는 황의 원자를 나타내고, Gb 는 산소의 원자를 나타내고;
Ra 는 (C1-C6)알킬 또는 (C3-C7)시클로알킬기를 나타내고;
Rb 는 적어도 -COORc 기에 의해 치환된 (C1-C6)알킬기를 나타내고, 여기서 Rc 는 수소 원자 또는 (C1-C4)알킬기를 나타내고;
Y4 및 Y5 는 독립적으로 (C1-C4)알킬기를 나타낸다.
식 (III) 의 화합물의 특정 구현예에서:
Y1 은 할로겐 원자, 또는 Ra 또는 Ga-Ra 기를 나타내고;
A 는 CH2-CH2 기를 나타내고;
Y2 는 Gb-Rb 기를 나타내고;
Ga 는 산소 또는 황의 원자를 나타내고, Gb 는 산소의 원자를 나타내고;
Ra 는 하나 이상의 할로겐 원자에 의해 치환되는 (C1-C6)알킬 또는 (C3-C14)시클로알킬기를 나타내고;
Rb 는 하나 이상의 할로겐 원자에 의해 치환되거나 치환되지 않으며 적어도 -COORc 기 (여기서 Rc 는 수소 원자 또는 (C1-C4)알킬기를 나타냄) 에 의해 치환되는 (C1-C6)알킬기를 나타내고;
Y4 및 Y5 는 (C1-C4)알킬기를 나타낸다.
식 (III) 의 화합물의 특정 구현예에서, Gb 는 산소 원자이고, Rb 는 -COORc 기 (여기서 Rc 는 수소 원자 또는 비치환된 선형 또는 분지형 (C1-C4)알킬기를 나타냄) 에 의해 치환되는 (C1-C6)알킬기이다.
식 (III) 의 화합물의 특정 구현예에서, Y1 은 하나 이상의 할로겐 원자에 의해 치환되거나 치환되지 않는 선형 또는 분지형인 (C1-C6)알킬기를 포함하는 (C1-C6)알킬티오기이다.
특정 구현예에서, 식 (III) 의 화합물은 1-[4-메틸티오페닐]-3-[3,5-디메틸-4-카르복시디메틸메틸옥시 페닐]프로프-2-엔-1-온 (엘라피브라노 또는 GFT505), 1-[4-메틸티오페닐]-3-[3,5-디메틸-4-이소프로필옥시 카르보닐디메틸메틸옥시페닐]프로프-2-엔-1-온, 1-[4-메틸티오페닐]-3-[3,5-디메틸-4-tert부틸옥시카르보닐디메틸메틸옥시페닐] 프로프-2-엔-1-온, 1-[4-트리플루오로메틸페닐]-3-[3,5-디메틸-4-tert부틸옥시카르보닐 디메틸메틸옥시페닐]프로프-2-엔-1-온, 1-[4-트리플루오로메틸페닐]-3-[3,5-디메틸-4-카르복시디메틸메틸옥시페닐]프로프-2-엔-1-온, 1-[4-트리플루오로메틸 옥시페닐]-3-[3,5-디메틸-4-tert부틸옥시카르보닐디메틸메틸옥시 페닐] 프로프-2-엔-1-온, 1-[4-트리플루오로메틸옥시페닐]-3-[3,5-디메틸-4-카르복시디메틸메틸 옥시페닐]프로프-2-엔-1-온, 2-[2,6-디메틸-4-[3-[4-(메틸티오)페닐]-3-옥소-프로필] 페녹시]-2-메틸프로판산 및 2-[2,6-디메틸-4-[3-[4-(메틸티오) 페닐]-3-옥소-프로필]페녹시]-2-메틸-프로판산 이소프로필 에스테르로 이루어지는 군에서 선택된다.
보다 특정 구현예에서, PPAR 아고니스트는 1-[4-메틸티오페닐]-3-[3,5-디메틸-4-카르복시디메틸메틸옥시 페닐]프로프-2-엔-1-온 (또는 엘라피브라노 - GFT505), 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염이다.
본 발명의 조합 생성물의 특정 구현예에서:
- 성분 (ii) 는 엘라피브라노, 사로글리타자르, 셀라델파르 및 라니피브라노로 이루어지는 군에서 선택되고, 성분 (ii) 는 보다 특히 엘라피브라노이고;
- 성분 (i) 은 NTZ, TZ, 2-[(5-니트로-1,3-티아졸-2-일)카르바모일]페닐 (d3)에타노에이트, 2-[(5-니트로-1,3-티아졸-2-일)카르바모일]페닐 (d2) 에타노에이트, 2-[(5-니트로-1,3-티아졸-2-일)카르바모일]페닐 (d1) 에타노에이트, ((S)-2-(5-니트로티아졸-2-일카르바모일)페닐 2-아미노-3,3-디메틸부타노에이트 히드로클로라이드) 또는 ((2S,3S)-2-(5-니트로티아졸-2-일카르바모일)페닐 2-아미노-3-메틸펜타노에이트 히드로클로라이드) 에서 선택된다.
추가 구현예에서, 성분 (i) 은 TZG, 2-(5-니트로티아졸-2-일카르바모일)페닐 2-아미노-3,3-디메틸부타노에이트 (예컨대 (S)-2-(5-니트로티아졸-2-일카르바모일)페닐 2-아미노-3,3-디메틸부타노에이트 또는 이의 히드로클로라이드 염), 2-(5-니트로티아졸-2-일카르바모일)페닐 2-아미노-3-메틸펜타노에이트 (예컨대 (2S,3S)-2-(5-니트로티아졸-2-일카르바모일)페닐 2-아미노-3-메틸펜타노에이트 또는 이의 히드로클로라이드 염), 2-(5-클로로티아졸-2-일카르바모일)페닐 2-아미노-3,3-디메틸부타노에이트 (예컨대 (S)-2-(5-클로로티아졸-2-일카르바모일)페닐 2-아미노-3,3-디메틸부타노에이트 또는 이의 히드로클로라이드 염), 및 2-(5-클로로티아졸-2-일카르바모일)페닐 2-아미노-3-메틸펜타노에이트 (예컨대 (2S,3S)-2-(5-클로로티아졸-2-일카르바모일)페닐 2-아미노-3-메틸펜타노에이트 또는 이의 히드로클로라이드 염) 에서 선택된다. 이 구현예의 추가 변형에서, 성분 (ii) 는 엘라피브라노, 사로글리타자르, 셀라델파르 및 라니피브라노로 이루어지는 군에서 선택되고, 성분 (ii) 는 보다 특히 엘라피브라노이고; 성분 (i) 은 TZG, 2-(5-니트로티아졸-2-일카르바모일)페닐 2-아미노-3,3-디메틸부타노에이트 (예컨대 (S)-2-(5-니트로티아졸-2-일카르바모일)페닐 2-아미노-3,3-디메틸부타노에이트 또는 이의 히드로클로라이드 염), 2-(5-니트로티아졸-2-일카르바모일)페닐 2-아미노-3-메틸펜타노에이트 (예컨대 (2S,3S)-2-(5-니트로티아졸-2-일카르바모일)페닐 2-아미노-3-메틸펜타노에이트 또는 이의 히드로클로라이드 염), 2-(5-클로로티아졸-2-일카르바모일)페닐 2-아미노-3,3-디메틸부타노에이트 (예컨대 (S)-2-(5-클로로티아졸-2-일카르바모일)페닐 2-아미노-3,3-디메틸부타노에이트 또는 이의 히드로클로라이드 염), 및 2-(5-클로로티아졸-2-일카르바모일)페닐 2-아미노-3-메틸펜타노에이트 (예컨대 (2S,3S)-2-(5-클로로티아졸-2-일카르바모일)페닐 2-아미노-3-메틸펜타노에이트 또는 이의 히드로클로라이드 염) 에서 선택된다.
특정 구현예에서, 본 발명의 조합 생성물은 적어도 하나의 다른 치료적 활성제 예컨대 항섬유화제, 항염증제 또는 면역억제 작용제를 추가로 포함한다.
예시적인 항섬유화제는 피르페니돈 또는 수용체 티로신 키나아제 저해제 (RTKI) 예컨대 닌테다닙, 소라페닙 및 다른 RTKI, 또는 안지오텐신 II (AT1) 수용체 차단제, 또는 CTGF 저해제, 또는 TGFβ 및 BMP-활성화 경로를 방해하기 쉬운 임의의 항섬유화 화합물 (잠재적 TGFβ 복합체의 활성화제 예컨대 MMP2, MMP9, THBS1 또는 세포-표면 인테그린, TGFβ 수용체 유형 I (TGFBRI) 또는 유형 II (TGFBRII) 및 그의 리간드 예컨대 TGFβ, 액티빈, 인히빈, Nodal, 항-뮐러 호르몬, GDF 또는 BMP, 보조 공수용체 (유형 III 수용체로도 공지됨) 포함), 또는 SMAD-의존적 표준 경로의 성분 (호흡 또는 저해성 SMAD 단백질 포함), 또는 SMAD-비의존적 또는 비-표준 경로의 일원 (MAPK 신호전달, TAK1, Rho-유사 GTPase 신호전달 경로, 포스파티딜이노시톨-3 키나아제/AKT 경로, TGFβ-유도 EMT 과정의 다양한 분지 포함), 또는 표준 및 비-표준 헤지호그 신호전달 경로의 일원 (Hh 리간드 또는 표적 유전자 포함), 또는 WNT, 또는 노치 경로 (TGFβ 에 영향받기 쉬움) 의 임의의 일원을 포함한다.
예시적인 항염증 및/또는 면역억제 작용제는 글루코코르티코이드, NSAIDS, 시클로포스파미드, 니트로소우레아, 엽산 유사체, 푸린 유사체, 피리미딘 유사체, 메토트렉세이트, 아자티오프린, 머캅토푸린, 시클로스포린, 미리오신, 타클로리무스, 시롤리무스, 미코페놀산 유도체, 핑골리모드 및 다른 스핑고신-1-포스페이트 수용체 조절인자, 전염증성 사이토카인 및 전염증성 사이토카인 수용체, T-세포 수용체 및 인테그린과 같은 표적에 대한 모노클로날 및/또는 폴리클로날 항체를 포함한다.
특정 구현예에서, 본 발명의 조합 생성물은 상기 기재한 바와 같은 성분 (i) 및 (ii), 및 약학적으로 허용가능한 담체를 포함하는 조성물이다.
특정 구현예에서, 조합 생성물은 순차적, 개별 또는 동시 사용을 위한 상기 기재한 바와 같은 성분 (i) 및 (ii) 를 포함하는 파트의 키트 (kit of parts) 이다.
추가 구현예에서, 성분 (i) 및 (ii) 는 주사가능 현탁액, 겔, 오일, 알약, 정제, 좌제, 분말, 캡슐, 에어로졸, 연고, 크림, 패치, 또는 지속방출 및/또는 서방출을 위한 생약 형태의 수단으로 제형화된다.
또 다른 구현예에서, 조합 생성물의 성분 (i) 및 (ii) 는 상기 언급된 질환 중 임의의 것의 치료에 사용된다.
본 발명은 또한 약제로서 사용하기 위한 본 발명에 따른 조합 생성물에 관한 것이다.
본 발명은 또한, 질환의 치료 방법에서 사용하기 위한, 본원에 개시된 조합 생성물에 관한 것이다. 또 다른 구현예에서, 본 발명은 치료적 유효량의 본원에 개시된 조합 생성물을 이를 필요로 하는 대상에게 투여하는 것을 포함하는, 질환의 치료 방법에 관한 것이다. 또 다른 구현예에서, 질환 치료용 약제의 제조를 위한 본 발명에 따른 조합 생성물의 용도가 제공된다.
특히, 본 발명의 조합 생성물은 면역성, 염증성, 대사성, 섬유증성 및 담즙울체성 질환과 같은 질환의 치료에 유용하다. 특정 구현예에서, 질환은 대사성 간 질환, 비-알코올성 지방간 질환 (NAFLD), 비-알코올성 지방간염 (NASH), 약물-유도 간 질환, 알코올-유도 간 질환, 감염체 유도 간 질환, 염증성 간 질환, 면역계 기능이상-매개 간 질환, 이상지질혈증, 심혈관 질환, 재발협착증, X 증후군, 대사 증후군, 당뇨병, 비만, 고혈압, 만성 담관병증 (chronic cholangiopathy) 예컨대 원발 경화성 담관염 (PSC), 원발 담즙성 담관염 (PBC), 담도 폐쇄증, 가족성 간내 담즙정체증 3 형 (PFIC3), 염증성 장 질환, 크론병, 궤양성 대장염, 켈로이드, 진구성 심근경색, 피부경화증/전신 경화증, 염증성 질환, 신경변성 질환, 암, 간암, 간세포 암종, 위장관암, 위암, 신경섬유종증과 연관된 뇌수막종, 췌장 신경내분비 종양, 췌장 신경외분비 종양, 백혈병, 골수증식성/골수이형성 질환, 비만세포증, 피부섬유육종, 고형 종양 예컨대 유방암, 폐암, 갑상선암 또는 대장암, 전립선 암, 임의 기원의 간 섬유증 또는 간경변증, 대사 질환-유도 간 섬유증 또는 간경변증, NAFLD-유도 섬유증 또는 간경변증, NASH-유도 섬유증 또는 간경변증, 알코올-유도 간 섬유증 또는 간경변증, 약물-유도 간 섬유증 또는 간경변증, 감염체-유도 간 섬유증 또는 간경변증, 기생충 감염-유도 간 섬유증 또는 간경변증, 박테리아 감염-유도 간 섬유증 또는 간경변증, 바이러스 감염-유도 섬유증 또는 간경변증, HBV-감염 유도 간 섬유증 또는 간경변증, HCV-감염 유도 간 섬유증 또는 간경변증, HIV-감염 유도 간 섬유증 또는 간경변증, 이중 HCV 및 HIV-감염 유도 간 섬유증 또는 간경변증, 방사선- 또는 화학요법-유도 섬유증 또는 간경변증, 쓸개관 섬유증, 임의의 만성 담즙울체성 질환으로 인한 간 섬유증 또는 간경변증, 임의 병인의 소화관 (gut) 섬유증, 크론병-유도 섬유증, 궤양성 대장염-유도 섬유증, 장 (예를 들어 소장) 섬유증, 결장 섬유증, 위 섬유증, 피부 섬유증, 표피 섬유증, 내피 섬유증, 피부경화증/전신 경화증으로 인한 피부 섬유증, 폐 (lung) 섬유증, 만성 염증성 기도 질환, 예컨대 COPD, 천식, 폐기종, 흡연자의 폐, 결핵, 폐 (pulmonary) 섬유증, 특발성 폐 (pulmonary) 섬유증 (IPF) 에 연이은 폐 (lung) 섬유증, 심장 섬유증, 신장 섬유증, 신원성 전신 섬유증, 근육 섬유증, 연조직 (예를 들어 종격 또는 복막후강) 섬유증, 골수 섬유증, 관절 섬유증, 건 섬유증, 연골 섬유증, 췌장 섬유증, 자궁 섬유증, 신경계 섬유증, 고환 섬유증, 난소 섬유증, 부신 섬유증, 동맥 섬유증, 정맥 섬유증, 안구 섬유증, 심근내막 섬유증, 종격동 섬유증, 골수섬유증, 후복막 섬유증, 진행성 거대 섬유증 (탄광부 진폐증의 합병증), 증식성 섬유증, 신생물성 섬유증, 이식부 주변 섬유증 및 석면증, 관절섬유증, 유착성관절낭염으로 이루어지는 군에서 선택된다.
가장 바람직한 구현예에서, 질환은 대사성 간 질환, 비-알코올성 지방간 질환 (NAFLD), 비-알코올성 지방간염 (NASH), 약물-유도 간 질환, 알코올-유도 간 질환, 감염체 유도 간 질환, 염증성 간 질환, 면역계 기능이상-매개 간 질환, 이상지질혈증, 심혈관 질환, 재발협착증, X 증후군, 대사 증후군, 당뇨병, 비만, 고혈압, 만성 담관병변증 예컨대 원발 경화성 담관염 (PSC), 원발 담즙성 담관염 (PBC), 담도 폐쇄증, 가족성 간내 담즙정체증 3 형 (PFIC3), 염증성 장 질환, 크론병, 궤양성 대장염, 간암, 간세포 암종, 위장관암, 위암, 대장암, 대사 질환-유도 간 섬유증 또는 간경변증, NAFLD-유도 섬유증 또는 간경변증, NASH-유도 섬유증 또는 간경변증, 알코올-유도 간 섬유증 또는 간경변증, 약물-유도 간 섬유증 또는 간경변증, 감염체-유도 간 섬유증 또는 간경변증, 기생충 감염-유도 간 섬유증 또는 간경변증, 박테리아 감염-유도 간 섬유증 또는 간경변증, 바이러스 감염-유도 섬유증 또는 간경변증, HBV-감염 유도 간 섬유증 또는 간경변증, HCV-감염 유도 간 섬유증 또는 간경변증, HIV-감염 유도 간 섬유증 또는 간경변증, 이중 HCV 및 HIV-감염 유도 간 섬유증 또는 간경변증, 방사선- 또는 화학요법-유도 섬유증 또는 간경변증, 쓸개관 섬유증, 임의의 만성 담즙울체성 질환으로 인한 간 섬유증 또는 간경변증, 임의 병인의 소화관 섬유증, 크론병-유도 섬유증, 궤양성 대장염-유도 섬유증, 장 (예를 들어 소장) 섬유증, 결장 섬유증, 위 섬유증, 폐 (lung) 섬유증, 만성 염증성 기도 질환, 예컨대 COPD, 천식, 폐기종, 흡연자의 폐, 결핵, 폐 (pulmonary) 섬유증, 특발성 폐 섬유증 (IPF) 에 연이은 폐 (lung) 섬유증으로 이루어지는 군에서 선택된다.
추가 양태에서, 본 발명은 콜라겐 섬유 생성에 책임이 있고/있거나 세포외 매트릭스의 생성에 책임이 있는 섬유아세포의 증식 및/또는 활성화의 저해에서 사용하기 위한 본 발명의 조합에 관한 것이다.
본 발명에 따르면, 용어 "자가면역 질환" 은 신체 내 보통 존재하는 물질 및 조직에 대한 신체의 비정상적 면역 반응으로부터 발생하는 상태를 지정하는데 사용된다. 질환은 특정 기관 (예를 들어 I 형 당뇨병 또는 자가면역성 갑상선염에서) 에 국한될 수 있거나 상이한 장소에서의 특정 조직을 포함할 수 있다 (예를 들어 굿파스쳐 병, 폐 및 신장에서의 기저막의 질병에서).
용어 "염증" 은 숙주 세포, 혈관 및 단백질 및 세포/조직 상해의 원인을 제거하는 역할을 할 수 있는 다른 매개물질 뿐만 아니라 본래의 손상으로부터 발생하는 괴사성 세포/조직을 포함하는 보호성 반응으로부터 발생하는 상태를 지정하고 회복 과정을 개시하는데 사용된다. 염증성 반응은 통증, 열, 발적, 팽윤, 혈관 확장, 혈류 증가 및 기능 손실에 의해 분명해질 수 있다.
용어 "섬유증", "섬유증성 질환", "섬유증성 장애" 및 이의 편차물은 기관 또는 조직에서의 섬유성 결합 조직의 과다한 침착의 병리학적 상태를 나타낸다. 보다 특히, 섬유증은 조직 손상에 대한 반응으로서 결합 조직에 의한 지속적 섬유증성 반흔 형성 및 세포외 매트릭스의 과잉생산을 포함하는 병리학적 과정이다. 생리학적으로, 결합 조직의 침착은 기저 기관 또는 조직의 구조 및 기능을 없앨 수 있다.
본 발명에 따르면, 섬유증 또는 섬유증성 장애는 임의의 기관 또는 조직 섬유증과 연관될 수 있다. 특정 기관 섬유증의 예시적이고 비제한적인 예는 간, 신장, 피부, 표피, 내피, 근육, 건, 연골, 심장, 췌장, 폐, 자궁, 신경계, 고환, 음경, 난소, 부신, 동맥, 정맥, 결장, 장 (예를 들어 소장), 쓸개관, 연조직 (예를 들어 종격 또는 복막후강), 골수, 관절 (예를 들어 무릎, 어깨 또는 다른 관절) 또는 위 섬유증을 포함한다.
특정 구현예에서, 섬유증성 장애는 간, 신장, 피부, 표피, 내피, 근육, 건, 연골, 심장, 췌장, 폐, 자궁, 신경계, 고환, 난소, 부신, 동맥, 정맥, 결장, 장 (예를 들어 소장), 쓸개관, 연조직 (예를 들어 종격 또는 복막후강), 골수, 관절 (예를 들어 무릎, 어깨 또는 다른 관절), 안구 또는 위 섬유증으로 이루어지는 군에서 선택된다.
바람직한 구현예에서, 섬유증성 장애는 간, 소화관, 폐, 심장, 신장, 근육, 피부, 연조직 (예를 들어 종격 또는 복막후강), 골수, 장 및 관절 (예를 들어 무릎, 어깨 또는 다른 관절) 섬유증으로 이루어지는 군에서 선택된다.
보다 바람직한 구현예에서, 섬유증성 장애는 간, 폐, 장, 심장, 피부, 신장 및 장 섬유증으로 이루어지는 군에서 선택된다.
또 다른 구현예에서, 섬유증성 장애는 간, 폐, 심장 및 장 섬유증으로 이루어지는 군에서 선택된다. 보다 특정 구현예에서, 섬유증성 장애는 간, 폐, 피부, 신장 및 장 섬유증으로 이루어지는 군에서 선택된다. 또 다른 구현예에서, 섬유증성 장애는 간 섬유증이다.
본 발명의 보다 바람직한 구현예에서, 치료된 섬유증성 장애는 하기의 섬유증성 장애의 상세한 목록으로 이루어지는 군에서 선택된다: 비-알코올성 지방간염 (NASH), 폐 (pulmonary) 섬유증, 특발성 폐 섬유증, 피부 섬유증, 안구 섬유증 (예컨대 캡슐 섬유증), 심근내막 섬유증, 종격동 섬유증, 골수섬유증, 후복막 섬유증, 진행성 거대 섬유증 (탄광부 진폐증의 합병증), 증식성 섬유증, 신생물성 섬유증, 만성 염증성 기도 질환 (COPD, 천식, 폐기종, 흡연자의 폐, 결핵, IPF) 에 연이은 폐 (lung) 섬유증, 알코올 또는 약물-유도 간 섬유증, 간 간경변증, 감염-유도 간 섬유증, 방사선 또는 화학치료-유도 섬유증, 신원성 전신 섬유증, 크론병, 궤양성 대장염, 켈로이드, 진구성 심근경색, 피부경화증/전신 경화증, 관절섬유증, 일부 형태의 유착성관절낭염, 만성 섬유화 담관병변증 예컨대 원발 경화성 담관염 (PSC) 및 원발 담즙성 담관염 (PBC), 담도 폐쇄증, 가족성 간내 담즙정체증 3 형 (PFIC3), 이식부 주변 섬유증 및 석면증.
담즙정체증은 간세포에 의한 분비 장애 (간세포 담즙정체증) 또는 간내 또는 간외 담관 (폐색성 담즙정체증) 을 통한 담즙 유동의 방해로 인한 담즙 흐름의 감소로서 정의된다. 임상 실행에서, 담즙정체증은 간으로부터의 담즙 흐름이 느려지거나 차단되는 임의의 상태이다. 본 발명의 특정 구현예에 따르면, 담즙정체성 질환은 원발 담즙성 담관염 (PBC), 원발 경화성 담관염 (PSC), 임신중 간내 담즙정체증, 진행성 가족성 간내 담즙정체증, 담도 폐쇄증, 담석증, 감염성 담관염, 랑게르한스 세포 조직구증과 연관된 담관염, 알라질 증후군, 무증후군성 관 부족, 약물-유도 담즙정체증 및 완전 비경구 영양-연관 담즙정체증으로 이루어지는 군에서 선택된다. 바람직한 구현예에서, 담즙울체성 질환은 PBC 또는 PSC, 특히 PBC 이다.
염증성 질환, 섬유증성 질환, 대사 질환 및 담즙울체성 질환의 예는 대사성 간 질환, 비-알코올성 지방간 질환 (NAFLD), 비-알코올성 지방간염 (NASH), 약물-유도 간 질환, 알코올-유도 간 질환, 감염체 유도 간 질환, 염증성 간 질환, 면역계 기능이상-매개 간 질환, 이상지질혈증, 심혈관 질환, 재발협착증, X 증후군, 대사 증후군, 당뇨병, 비만, 고혈압, 만성 담관병변증 예컨대 원발 경화성 담관염 (PSC), 원발 담즙성 담관염 (PBC), 담도 폐쇄증, 가족성 간내 담즙정체증 3 형 (PFIC3), 염증성 장 질환, 크론병, 궤양성 대장염, 켈로이드, 진구성 심근경색, 피부경화증/전신 경화증, 염증성 질환, 신경변성 질환, 암, 간암, 간세포 암종, 위장관암, 위암, 신경섬유종증과 연관된 뇌수막종, 췌장 신경내분비 종양, 췌장 신경외분비 종양, 백혈병, 골수증식성/골수이형성 질환, 비만세포증, 피부섬유육종, 고형 종양 예컨대 유방암, 폐암, 갑상선암 또는 대장암, 전립선암, 임의 기원의 간 섬유증 또는 간경변증, 대사 질환-유도 간 섬유증 또는 간경변증, NAFLD-유도 섬유증 또는 간경변증, NASH-유도 섬유증 또는 간경변증, 알코올-유도 간 섬유증 또는 간경변증, 약물-유도 간 섬유증 또는 간경변증, 감염체-유도 간 섬유증 또는 간경변증, 기생충 감염-유도 간 섬유증 또는 간경변증, 박테리아 감염-유도 간 섬유증 또는 간경변증, 바이러스 감염-유도 섬유증 또는 간경변증, HBV-감염 유도 간 섬유증 또는 간경변증, HCV-감염 유도 간 섬유증 또는 간경변증, HIV-감염 유도 간 섬유증 또는 간경변증, 이중 HCV 및 HIV-감염 유도 간 섬유증 또는 간경변증, 방사선- 또는 화학요법-유도 섬유증 또는 간경변증, 쓸개관 섬유증, 임의의 만성 담즙울체성 질환으로 인한 간 섬유증 또는 간경변증, 임의 병인의 소화관 섬유증, 크론병-유도 섬유증, 궤양성 대장염-유도 섬유증, 장 (예를 들어 소장) 섬유증, 결장 섬유증, 위 섬유증, 피부 섬유증, 표피 섬유증, 내피 섬유증, 피부경화증/전신 경화증으로 인한 피부 섬유증, 폐 (lung) 섬유증, 만성 염증성 기도 질환, 예컨대 COPD, 천식, 폐기종, 흡연자의 폐, 결핵, 폐 (pulmonary) 섬유증, 특발성 폐 섬유증 (IPF) 에 연이은 폐 (lung) 섬유증, 심장 섬유증, 신장 섬유증, 신원성 전신 섬유증, 근육 섬유증, 연조직 (예를 들어 종격 또는 복막후강) 섬유증, 골수 섬유증, 관절 섬유증, 건 섬유증, 연골 섬유증, 췌장 섬유증, 자궁 섬유증, 신경계 섬유증, 고환 섬유증, 난소 섬유증, 부신 섬유증, 동맥 섬유증, 정맥 섬유증, 안구 섬유증, 심근내막 섬유증, 종격동 섬유증, 골수섬유증, 후복막 섬유증, 진행성 거대 섬유증 (탄광부 진폐증의 합병증), 증식성 섬유증, 신생물성 섬유증, 이식부 주변 섬유증 및 석면증, 관절섬유증, 유착성관절낭염을 포함한다.
바람직하게는, 질환은 대사성 간 질환, 비-알코올성 지방간 질환 (NAFLD), 비-알코올성 지방간염 (NASH), 약물-유도 간 질환, 알코올-유도 간 질환, 감염체 유도 간 질환, 염증성 간 질환, 면역계 기능이상-매개 간 질환, 이상지질혈증, 심혈관 질환, 재발협착증, X 증후군, 대사 증후군, 당뇨병, 비만, 고혈압, 만성 담관병변증 예컨대 원발 경화성 담관염 (PSC), 원발 담즙성 담관염 (PBC), 담도 폐쇄증, 가족성 간내 담즙정체증 3 형 (PFIC3), 염증성 장 질환, 크론병, 궤양성 대장염, 간암, 간세포 암종, 위장관암, 위암, 대장암, 대사 질환-유도 간 섬유증 또는 간경변증, NAFLD-유도 섬유증 또는 간경변증, NASH-유도 섬유증 또는 간경변증, 알코올-유도 간 섬유증 또는 간경변증, 약물-유도 간 섬유증 또는 간경변증, 감염체-유도 간 섬유증 또는 간경변증, 기생충 감염-유도 간 섬유증 또는 간경변증, 박테리아 감염-유도 간 섬유증 또는 간경변증, 바이러스 감염-유도 섬유증 또는 간경변증, HBV-감염 유도 간 섬유증 또는 간경변증, HCV-감염 유도 간 섬유증 또는 간경변증, HIV-감염 유도 간 섬유증 또는 간경변증, 이중 HCV 및 HIV-감염 유도 간 섬유증 또는 간경변증, 방사선- 또는 화학요법-유도 섬유증 또는 간경변증, 쓸개관 섬유증, 임의의 만성 담즙울체성 질환으로 인한 간 섬유증 또는 간경변증, 임의 병인의 소화관 섬유증, 크론병-유도 섬유증, 궤양성 대장염-유도 섬유증, 장 (예를 들어 소장) 섬유증, 결장 섬유증, 위 섬유증, 폐 (lung) 섬유증, 만성 염증성 기도 질환, 예컨대 COPD, 천식, 폐기종, 흡연자의 폐, 결핵, 폐 (pulmonary) 섬유증, 특발성 폐 섬유증 (IPF) 에 연이은 폐 (lung) 섬유증으로 이루어지는 군에서 선택된다.
용어 "치료" 또는 "치료하는" 은 이를 필요로 하는 대상에서의 섬유증성 장애의 치유 또는 예방을 지칭한다. 치료는 본 발명의 조합을 공표된 장애를 갖는 대상, 즉 환자에게 투여하여 장애의 진행을 예방, 치유, 지연, 역전 또는 둔화시켜 대상의 상태를 개선시키는 것을 포함한다. 치료는 건강하거나 섬유증성 장애가 발생할 위험이 있는 대상에게도 투여될 수 있다.
따라서 본 발명에 따르면, 면역성, 염증성, 대사성, 섬유증성 및 담즙울체성 질환의 치료는, 예를 들어 성분 (i) 및 (ii) 를 함유하는 약학 조성물 형태로의 본 발명의 조합을, 공표된 장애를 갖는 대상에게 투여하여 장애의 진행을 치유, 지연, 역전 또는 둔화시켜 환자 또는 건강한 대상, 특히 이러한 질환이 발생할 위험이 있는 대상의 상태를 개선시키는 것을 포함한다.
치료는, 본 발명의 조합을 공표된 장애를 갖는 환자에게 투여하여 진행을 치유, 지연 또는 둔화시켜 그에 따라 환자 또는 건강한 대상, 특히 염증성, 대사성, 섬유증성 및 담즙울체성 질환이 발생할 위험이 있는 대상의 상태를 개선시키는 것을 포함한다.
치료할 대상은 포유동물, 바람직하게는 인간이다. 본 발명에 따라 치료할 대상은 이전 약물 치료, 연관 병리학, 유전자형, 위험 인자에 대한 노출, 바이러스 감염과 같은 섬유증성 질환에 연관된 여러 기준을 기초로 할 뿐만 아니라 이미징 방법 및 면역학적, 생화학적, 효소적, 화학적 또는 핵산 검출 방법에 의해 평가될 수 있는 임의의 관련 바이오마커의 검출을 기초로 하여 선택될 수 있다.
본 발명에 따라 치료할 대상은, 이전 약물 치료, 연관 병리학, 유전자형, 위험 인자에 대한 노출, 바이러스 감염과 같은 염증성, 대사성, 섬유증성 및 담즙울체성 질환과 연관된 여러 기준을 기초로 할 뿐만 아니라 이미징 방법 및 면역학적, 생화학적, 효소적, 화학적 또는 핵산 검출 방법에 의해 평가될 수 있는 임의의 다른 관련 바이오마커를 기초로 하여 선택될 수 있다.
NTZ 또는 유사체의 합성은 예를 들어 [Rossignol and Cavier, 1975] 에서 기재된 바와 같이, 또는 당업자에게 공지된 임의의 다른 합성 방법에 의해 실행될 수 있다.
특정 구현예에서, 염증성, 대사성, 섬유증성 및 담즙울체성 질환의 치료는 NTZ 및 NTZ 유사체에서 선택되는 적어도 2 개의 화합물을 포함하는 조성물의 투여를 포함할 수 있다. 이러한 구현예에서, 투여된 적어도 하나의 PPAR 아고니스트는 2 개 화합물과 동일한 조성물로, 또는 상이한 조성물과 같은 개별 형태로 제공된다.
또 다른 구현예에서, 본 발명의 조합은 치료요법에서 동시, 순차적 또는 개별 투여를 위한 것이며, 따라서 상이한 조성물에 포함될 수 있다. 순차적 투여의 경우, NTZ 및/또는 NTZ 유사체(들) 가 PPAR 아고니스트(들) 전에 투여될 수 있거나, PPAR 아고니스트(들) 가 NTZ 및/또는 NTZ 유사체(들) 전에 투여된다.
NTZ 및 NTZ 유사체(들) 는 약학적으로 허용가능한 염, 특히 약학적 용도와 양립가능한 산 또는 염기 염으로서 제형화될 수 있다. NTZ 및 NTZ 유사체(들) 의 염은 약학적으로 허용가능한 산 부가 염, 약학적으로 허용가능한 염기 부가 염, 약학적으로 허용가능한 금속 염, 암모늄 및 알킬화 암모늄 염을 포함한다. 이러한 염은 화합물의 최종 정제 단계 동안, 또는 염을 사전에 정제된 화합물에 혼입시킴으로써 수득될 수 있다.
식 (I) 또는 (II) 의 화합물과 하나 이상의 PPAR 아고니스트(들) 의 조합은, PPAR 아고니스트(들) 또는 식 (I) 또는 (II) 의 화합물의 유기 또는 무기 염기 또는 산으로부터 수득한 약학적으로 허용가능한 비독성 염으로서 제형화될 수 있다. 이러한 염은 화합물의 최종 정제 단계 동안, 또는 염을 사전에 정제된 화합물에 혼입시킴으로써 수득될 수 있다.
식 (I) 또는 (II) 의 화합물 및 하나 이상의 PPAR 아고니스트(들) 를 포함하는 본 발명의 약학 조성물은 또한 약학적 맥락 내에서 허용가능한 하나 또는 여러 부형제 또는 비히클 (예를 들어 약학적 용도와 양립가능하며 당업자에게 널리 공지된 식염수 용액, 생리학적 용액, 등장성 용액 등) 을 포함할 수 있다.
이들 조성물은 또한 분산제, 가용화제, 안정화제, 보존제 등 중에서 선택된 하나 또는 여러 작용제 또는 비히클을 포함할 수 있다. 이들 제형에 유용한 작용제 또는 비히클 (액체 및/또는 주사가능 및/또는 고체) 은 특히 메틸셀룰로오스, 히드록시메틸셀룰로오스, 카르복시메틸셀룰로오스, 폴리소르베이트 80, 만니톨, 젤라틴, 락토오스, 식물성 오일, 아카시아, 리포좀 등이다.
이들 조성물은 주사가능한 현탁액, 겔, 오일, 연고, 알약, 좌제, 분말, 겔 캡, 캡슐, 에어로졸 등의 형태로, 궁극적으로 지속방출 및/또는 서방출을 보장하는 생약 형태 또는 장치에 의해 제형화될 수 있다. 이러한 종류의 제형을 위해, 셀룰로오스, 카르보네이트 또는 전분과 같은 작용제가 유리하게 사용될 수 있다.
식 (I) 또는 (II) 의 화합물 및 하나 이상의 PPAR 아고니스트(들) 를 포함하는 본 발명의 약학 조성물은 상이한 경로에 의해 및 상이한 형태로 투여될 수 있다. 예를 들어, 화합물(들) 은 전신 방식, 경구, 비경구, 흡입, 비강 스프레이, 비강 주입, 또는 예를 들어 정맥내, 근육내 경로, 피하 경로, 경피 경로, 국소 경로, 동맥내 경로 등과 같은 주사에 의해 투여될 수 있다.
물론, 투여 경로는 당업자에게 널리 공지된 절차에 따라 하나 이상의 PPAR 아고니스트(들) 와 조합된 NTZ 및/또는 NTZ 유사체(들) 의 형태에 따라 조정될 것이다.
하나 이상의 PPAR 아고니스트(들) 와 조합된 NTZ 및/또는 NTZ 유사체(들) 는 치료적 유효량으로 투여된다. 본 발명의 맥락 내에서, 용어 "유효량" 은 원하는 치료 결과를 생성하기에 충분한 화합물의 양을 지칭한다.
투여에 대한 빈도 및/또는 용량은 환자의 기능, 병리학, 투여 형태 등에 있어서 당업자에 의해 조정될 수 있다. 전형적으로, 본 발명의 조합 (예컨대 약학 조성물 또는 파트의 키트 (kit-of-parts)) 는 섬유증성 질환의 치료를 위해 0.01 mg/일 내지 4000 mg/일, 예컨대 50 mg/일 내지 2000 mg/일, 특히 100 mg/일 내지 1000 mg/일로 구성된 NTZ, 또는 NTZ 유사체 또는 PPAR 아고니스트, 예컨대 식 (I) 또는 (II) 또는 (III) 의 화합물에 대한 용량으로 투여될 수 있다.
상기 조합에서 PPAR 아고니스트(들) 의 용량은 PPAR 아고니스트 자체에 따라 가변적일 수 있다. 용량은 PPAR 아고니스트의 효율에 따라 조정된다.
본 발명의 바람직한 구현예에서, NTZ 는 NTZ 에 대해 100 mg/일 내지 1000 mg/일 (예컨대 1000 mg/일) (특히 20 mg/일 내지 40 mg/일), 및 엘라피브라노에 대해 80 내지 120 mg/일로 구성된 용량에서 엘라피브라노와 조합으로 사용된다.
또 다른 바람직한 구현예에서, 활성 성분은 경구 섭취용으로 의도된 알약의 형태로 하나 이상의 약학 조성물(들) 로서 투여된다.
투여는 매일, 또는 필요시 1 일 당 수 회 수행될 수 있다.
본 발명을 하기 비제한적인 실시예를 참조하여 추가로 기재한다.
도 1: TGFβ -유도 hHSC 에서의 엘라피브라노 및 니타족사니드의 항섬유화 효과
혈청-제거 HSC 를, 전섬유생성 사이토카인 TGFβ1 (1 ng/㎖) 으로 활성화하기 전에 엘라피브라노 (A) 또는 니타족사니드 (B), 또는 베자피브레이트 (C) 와 함께 1 시간 동안 사전인큐베이션하였다. 인큐베이션 48 시간 후, α-SMA 의 발현을 ELISA 에 의해 측정하였다. 수득한 값을 TGFβ1 대조군에 대한 저해 백분율로 변형시켰다. 데이터를 [평균 (삼반복) ± 표준 편차 (SD)] 로서 표시한다. 반 최고치 (half maximal) 저해 농도 (IC50) 의 계산 및 곡선 피팅을 XLFit 소프트웨어 5.3.1.3 으로 수행하였다.
도 2: 엘라피브라노와 니타족사니드의 조합은 TGFβ1 -유도 hHSC 에서의 α-SMA 를 상승작용적으로 저해함
조합을 용량-반응 매트릭스 포맷에서 시험하고, 블리스에 대한 초과량 (EOB) additivism 모델에 따라 분석하였다. 각각의 DMSO 대조군을 포함하여, 엘라피브라노 (행) 및 니타족사니드 (열) 의 연속 희석물을 제조하였다. 생성 믹스를, 전섬유생성 사이토카인 TGFβ1 (1 ng/㎖) 으로 활성화하기 1 시간 전에 혈청-제거 HSC 에 첨가하였다. (A) 모든 조합 쌍에서 TGFβ1 대조군에 대한 α-SMA 저해 백분율. 데이터를 사반복의 평균으로서 표시한다. (B) EOB 스코어를 재료 및 방법에서 기재한 바와 같이 계산하였다. 양성 EOB 값을 갖는 임의의 화합물 쌍을 상승작용적인 것으로 간주하였다 (밝은 회색에서 흑색으로 채색됨). 모든 조합을 포함하는 총 EOB 스코어를 또한 계산하였다. (C) 상승작용적 조합 쌍에서 유래한 데이터 값을 막대 그래프 표현으로 플로팅하였다. 데이터를 평균 (사반복) ± 표준 편차 (SD) 로서 표시한다. EOHSA 모델을 재료 및 방법에서 기재한 바와 같이 사용하여, 선택된 NTZ/ELA 조합 쌍의 상승작용을 확인하였다.
도 3: PPAR 아고니스트와 니타족사니드의 조합은 TGFβ1 -유도 hHSC 에서의 α-SMA 를 상승작용적으로 저해함
조합을 용량-반응 매트릭스 포맷에서 시험하고, 블리스에 대한 초과량 (EOB) additivism 모델에 따라 분석하였다. 각각의 DMSO 대조군을 포함하여, 사로글리타자르, 셀라델파르 및 라니피브라노, 및 니타족사니드의 연속 희석물을 제조하였다. 생성 믹스를, 전섬유생성 사이토카인 TGFβ1 (1 ng/㎖) 으로 활성화하기 1 시간 전에 혈청-제거 HSC 에 첨가하였다. 모든 조합 쌍에서 TGFβ1 대조군에 대한 α-SMA 저해 백분율을 계산하였다. EOB 스코어를 재료 및 방법에서 기재된 바와 같이 계산하였다. 양성 EOB 값을 갖는 임의의 화합물 쌍을 상승작용적인 것으로 간주하였다 (밝은 회색에서 흑색으로 채색됨).
(A) 사로글리타자르 (SARO)
(B) 셀라델파르 (SELA)
(C) 라니피브라노 (LANI)
상승작용적 조합 쌍에서 유래한 TGFβ1 대조군에 대한 α-SMA 저해 백분율을 막대 그래프 표현으로 플로팅하였다. 데이터를 평균 (사반복) ± 표준 편차 (SD) 로서 표시한다. EOHSA 모델을 재료 및 방법에서 기재된 바와 같이 사용하여, 조합 쌍의 상승작용을 확인하였다.
도 4: 간 콜라겐 함량
6 주령 C57BL/6 마우스에게 대조군 (CSAA) 식이, CDAA + 1% CHOL (CDAAc) 식이, 또는 NTZ (12 주 동안 30 mg/kg/일 또는 100 mg/kg/일) 또는 엘라피브라노 (1 mg/kg/일 또는 3 mg/kg/일) 또는 엘라피브라노와 NTZ 의 조합 (각각 1+30 mg/kg/일, 1 +100 mg/kg/일, 3 + 30 mg/kg/일 및 3 + 100 mg/kg/일) 이 보충된 CDAAc 식이를 공급하였다.
각각의 그래프에 대해 정확한 양의 노출량을 표시하였다.
희생시킨 후, 간 콜라겐 함량을 측정하였다.
도 5: 간 섬유증 백분율
6 주령 C57BL/6 마우스에게 대조군 (CSAA) 식이, CDAA + 1% CHOL (CDAAc) 식이, 또는 NTZ (12 주 동안 30 mg/kg/일 또는 100 mg/kg/일) 또는 엘라피브라노 (1 mg/kg/일 또는 3 mg/kg/일) 또는 엘라피브라노와 NTZ 의 조합 (각각 1+30 mg/kg/일, 1 +100 mg/kg/일, 3 + 30 mg/kg/일 및 3 + 100 mg/kg/일) 이 보충된 CDAAc 식이를 공급하였다.
각각의 그래프에 대해 정확한 양의 노출량을 표시하였다.
희생시킨 후, 간 섬유증 영역을 측정하였다.
도 6: 간 αSMA 유전자 발현
도 7: 간 CCR2 유전자 발현
도 8: 간 CCR5 유전자 발현
도 9: 간 Col1α2 유전자 발현
도 10: 간 MMP2 유전자 발현
도 11: 간 TIMP2 유전자 발현
도 12: 간 TGFβ1 유전자 발현
도면, 표 및 본문에 사용된 약어:
AP-1: 활성화제 단백질 1
ASBTi: 정단 소듐-종속적 담즙산 수송체 저해제
ASK1: 신호-조절 키나아제 1
AT1: 안지오텐신 1
COPD: 만성 폐쇄성 폐 질환
CTGF: 결합 조직 성장 인자
DGAT: 디아실글리세롤-O-아실트랜스퍼라아제
DMSO: 디메틸술폭시드
DNA: 데옥시리보핵산
DPP4: 디펩티딜 펩티다아제
ELISA: 효소-결합 면역 검정
EOB: 블리스에 대한 초과량
FABAC: 지방산 담즙산 접합체
FBS: 소 태아 혈청
FGF: 섬유아세포 성장 인자
FXR: 파네소이드 X 수용체
GDF: 성장 분화 인자
GLP-1: 글루카곤-유사 펩티드-1
GPCR: G-단백질 결합 수용체
HBV: B 형 간염 바이러스
HCV: C 형 간염 바이러스
15-HEPE: 5-히드록시에이코사펜타엔산
HIV: 인간 면역결핍 바이러스
HSC: 간 성상 세포
IC50: 반 최고치 저해 농도
iNOS: 유도성 산화질소 신타아제
IPF: 특발성 폐 섬유증
LANI: 라니피브라노
LBD: 리간드 결합 도메인
LPS: 리포다당류
LT: 류코트리엔
MAPK: 미토겐-활성화 단백질 키나아제
MMP-9: 메탈로프로테아제 9
MMPase: 메탈로프로테아제
NADPH: 니코틴아미드 아데닌 디뉴클레오티드 포스페이트
NAFLD: 비-알코올성 지방간 질환
NASH: 비-알코올성 지방간염
NF-κB: 핵 인자-카파 B
NOX: NADPH 옥시다아제
NSAID: 비-스테로이드 항염증성 약물
NTZ: 니타족사니드
PAR: 프로테아제-활성화 수용체
PBC: 원발 담즙성 담관염
PDE: 포스포디에스테라아제
PDGF: 혈소판-유래 성장 인자
PFIC3: 가족성 간내 담즙정체증 3 형
PFOR: 피루베이트:페레독신 옥시도리덕타아제
PPAR: 퍼옥시좀 증식체 활성화 수용체
PPRE: PPAR 반응 요소
PSC: 원발 경화성 담관염
ROCK: Rho-연관 단백질 키나아제
RTK: 수용체 티로신 키나아제
SARO: 사로글리타자르
SD: 표준 편차
SELA: 셀라델파르
SGLT: 소듐-글루코오스 이송
STAT: 신호 전달체 및 전사 활성화제
TGFβ: 형질전환 성장 인자 β
TGFBRI: TGFβ 수용체 유형 I
TGFBRII: TGFβ 수용체 유형 II
THBS1: 트롬보스폰딘 1
THR β: 갑상선 수용체 β
TIMP: 메탈로프로테아제의 조직 저해제
TLR-4: 톨 (Toll) 유사 수용체 4
TZ: 티족사니드
TZG: 티족사니드 글루쿠로니드
VAP-1: 혈관 부착 단백질-1
실시예
재료 및 방법
화합물을 디메틸 술폭시드 (DMSO, Fluka cat# 41640) 에 용해하였다. 니타족사니드 (INTERCHIM cat#RQ550U), 티족사니드 (INTERCHIM cat#RP253), 라니피브라노 (ARK PHARM cat# AK689102), 셀라델파르 (ARK PHARM cat# AK689146) 및 사로글리타자르 (CHEMEXPRESS cat# YY-1997A) 를 상업적으로 입수하였다.
hHSC 배양
인간 일차 간 성상 세포 (hHSC) (Innoprot) 를, 2% 소 태아 혈청 (FBS, ScienCell cat# 0010), 1% 페니실린 / 스트렙토마이신 (ScienCell cat# 0503) 및 성상 세포 성장 보충물 (SteCGS; ScienCell cat# 5352) 이 보충된 STeCM 배지 (ScienCell cat# 5301) 에서 배양하였다. 세포-배양 플라스크를 보다 양호한 부착을 위해 폴리-L 리신 (Sigma cat# P4707) 으로 코팅하였다.
조성물의 제조
2 성분 조합 매트릭스 ( NTZ / 엘라피브라노 )
이들 실험을 위해, 체커보드 매트릭스를 생성시켰다. NTZ 및 엘라피브라노 스톡을 96-웰 플레이트 또는 384-웰 플레이트의 행으로 5-지점에서 (PPAR 아고니스트 엘라피브라노) 및 열로 6-지점에서 (NTZ) DMSO 중 연속 희석하였다. 이후, 모든 단일 작용제 농도의 1:1 혼합에 의해 5X6 조합 매트릭스를 생성시켰다. 각각의 화합물에 대한 시험 농도를, TGF-β1 로 자극한 HSC 모델에서의 α-SMA 함량을 측정함으로써 수득한 단일 작용제로서 각 화합물의 각각의 IC50 을 기반으로 하여 선택하였다.
그런 다음, 2-배 및 4-배 더 높은 농도 및 더 낮은 농도를 선택하였다.
TGF - β1 및 화합물 처리로의 hHSC 의 활성화
인간 일차 간 성상 세포 (hHSC) (Innoprot) 를 상기 기재한 바와 같은 표준 조건 하에 배양하였다. 이후 세포를, ELISA 에 의해 α-SMA 를 측정하기 위해 2 x 104 세포/웰의 밀도로 96-웰 플레이트에, 그리고 6 500 세포/웰의 밀도로 384-웰 플레이트에 플레이팅하였다. 다음날, 세포-배양 배지를 제거하고, 세포를 인산완충식염수 (PBS) (Invitrogen cat# 14190) 로 세척하였다. hHSC 를 무-혈청 및 무-SteCGS 배지에서 24 시간 동안 제거하였다.
NTZ, 엘라피브라노 또는 다른 PPAR 아고니스트 및 각각의 NTZ/엘라피브라노 또는 PPAR 아고니스트 조합으로의 처리를 위해, 혈청-제거 hHSC 를 화합물과 함께 1 시간 동안 사전인큐베이션한 후, 무-혈청 및 무-SteCGS 배지에서 추가 48 시간 동안 전섬유생성 자극 TGF-β1 (PeproTech cat# 100-21, 1 ng/㎖) 을 첨가하였다.
α- SMA ELISA
α-SMA 의 수준을 샌드위치 ELISA 를 사용하여 측정하였다. 간략하게, ELISA 플레이트의 웰을 먼저, 4℃ 에서 밤새 포획 항체 (마우스 모노클로날 항-ACTA2, Abnova) 로 코팅하였다. PBS + 0.2% Tween 20 중 3 회 세척한 후, PBS + 0.2% BSA 로 이루어지는 블로킹 용액을 1 시간 동안 첨가한 다음, 추가의 세척 주기를 실시하였다. 세포 용해물을 웰에 옮겨 실온에서 2 시간 동안 포획 항체에 결합시켰다. 세척 절차 후, 검출 항체 (비오틴화 마우스 모노클로날 항-ACTA2, Abnova) 를 실온에서 2 시간 동안 첨가한 다음, 3 회 세척하였다. 검출을 위해, HRP-접합 스트렙타비딘 (R&D Systems cat# DY998) 을 먼저 실온에서 30 분 동안 적용하였다. 세척한 후, HRP 기질 TMB (BD,#555214) 를 첨가하고 암환경 하에 실온에서 7 분 동안 인큐베이션하였다. 산화시, TMB 는 수용성 청색 반응 생성물을 형성하는데, 이는 황산을 첨가하면 황색이 되어 (용액 중단), 분광광도계를 사용하여 450 nm 에서 세기를 정확하게 측정할 수 있게 한다. 발생한 색은 용해물에 존재하는 α-SMA 의 양에 정비례한다.
블리스에 대한 초과량 ( EOB ) 에 의한 상승작용 측정 방법 및 EOSHA (최고 단일 작용제에 대한 초과량 (Excess over Highest Single Agent)) 에 의한 확인
αSMA ELISA 검정에서 수득한 값을 먼저 TGF-β1 대조군에 대한 저해 백분율로 변형시켰다. 그런 다음, 이들 저해 백분율을 사용하여, EOB (블리스에 대한 초과량) 를 측정하여 약물 조합의 상승작용적 효과를 정의하였다. 예측된 블리스 additivism 스코어 (E) 를 하기 식에 의해 첫 번째로 측정하였고:
E = (A + B) - (A x B)
식 중에서, A 및 B 는 NTZ (A) 및 엘라피브라노, 사로글리타자르, 셀라델파르 또는 라니피브라노 (B) 의 주어진 용량에서의 저해 백분율이다. 블리스 예측과, 조합된 NTZ/엘라피브라노, 사로글리타자르, 셀라델파르 또는 라니피브라노의 동일 용량에서의 관찰된 저해 사이의 차이는 '블리스에 대한 초과량' 스코어이다.
- 블리스에 대한 초과량 스코어 = 0 은, 조합 치료가 가산 (additive) 임을 나타냄 (비의존 경로 효과에 대해 예상된 바와 같음);
- 블리스에 대한 초과량 스코어 > 0 은, 가산을 초과하는 활성을 나타냄 (상승작용); 및
- 블리스에 대한 초과량 스코어 < 0 은, 조합이 가산 미만임을 나타냄 (길항작용).
조합 NTZ + 엘라피브라노에 대해, 모든 EOB 를 합하여 추가적인 총 블리스 스코어를 계산하였다.
EOHSA 는 약물 조합의 평가를 위해 FDA 에 의해 사용된 상승작용의 표준 척도이며, 약물 조합에 의해 생성된 효과와, 조합시와 동일한 농도에서 조합의 단일 작용제 각각에 의해 생성된 최대 효과의 차이로서 계산된다 (Borisy et al., 2003). EOB 방법에 의해 확인된 상승작용성 조합에 대해, 실험적 저해% 를 막대 그래프로 플로팅하고, NTZ/ELA 와 단일 작용제 사이의 관찰된 차이의 유의성을 일원 ANOVA 및 미보정 피셔 LSD 사후 검정에 의해 추정하였다 (*: p<0.05; **: p<0.01; ***: p<0.001).
섬유화 NASH 의 경우 ( 12 주 ) 만성 CDAA + 1% 콜레스테롤 모델에서의 엘라피브라노 , 니타족사니드 , 및 조합 엘라피브라노 + 니타족사니드의 평가
실험 설계
콜린-결핍 및 L-아미노산-한정 (CDAA) 식이는 콜린이 결여되어 있는데, 이는 간 β-산화 및 매우 저밀도 지단백질 생성에 필수적이며 간세포가 지방을 저장하도록 유도하여 이후 세포 손상을 유발하는 것으로 여겨진다. CDAA 식이-유도 설치류 모델은 상대적으로 짧은 기간 내에 섬유증을 발생시키며, NASH 병리, 특히 섬유증의 가역성을 신속하게 연구하기에 이상적이다.
증가한 콜레스테롤 섭취는 NASH 의 여러 마우스 모델에서 간 섬유증을 가속화한다. 간 섬유증의 악화는 주로 간 성상 세포에서의 자유 콜레스테롤 축적을 수반하여, 세포를 형질전환 성장 인자 β (TGFβ) 에 민감화시키고 이후 간 섬유증을 악화시킨다.
현재의 연구에서, 1% 콜레스테롤이 보충된 CDAA 식이를 공급한 C57Bl/6J 마우스에서의 간 섬유증에 대한 니타족사니드의 효과를 조사하였다.
엘라피브라노 단독, NTZ 단독, 및 둘 모두의 조합의 예방 효과를, CDAA + 1% 콜레스테롤 식이를 공급한 마우스의 섬유화 NASH-모델에서 평가하였다. 6 주령 수컷 C57Bl/6J 마우스에게 12 주 동안 대조군 (CSAA) 식이, CDAA + 1% 콜레스테롤 식이, 또는 엘라피브라노 1 및 3 mg/kg/일, NTZ 30 및 100 mg/kg/일 또는 조합된 약물 (엘라피브라노 1 및 3 mg/kg/일을 NTZ 30 및 100 mg/kg/일에 조합) 이 보충된 CDAA + 1% 콜레스테롤 식이를 공급하였다.
체중 및 음식물 섭취를 주당 2 회 모니터링하였다. 치료 마지막 날에, 6 시간의 공복 기간 후 마우스를 희생시켰다. 간을 생화학적 및 조직학적 연구를 위해 신속하게 절제하였다.
모든 동물 절차는 표준 프로토콜 및 실험실 동물의 적절한 관리 및 사용에 대한 표준 권고에 따라 수행하였다.
6 주령 C57BL/6 수컷 마우스를 표 1 에 상세히 나타낸 실험 계획에 따라 12 주 동안 공급하였다:
표 1: 실험 계획
Figure 112019085009871-pct00017
대조군은 CSAA 식이였다.
일부 마우스에는 CDAAc 식이가 공급되었다.
일부 마우스에는 1 또는 3 mg/kg/일로 엘라피브라노가 보충된 CDAAc 식이가 공급되었다.
일부 마우스에는 30 또는 100 mg/kg/일로 NTZ 가 보충된 CDAAc 식이가 공급되었다.
일부 마우스에는 1 + 30, 1 + 100, 3 + 30 및 3 + 100 mg/kg/일의 상이한 비로 엘라피브라노 + NTZ 조합이 보충된 CDAAc 식이가 공급되었다.
30 mg/kg 으로 NTZ 가 보충된 CDAAc 식이에 상응하는 군을 또한, 30 mg/kg/일의 이론적 용량에 상응하는 CDAA 식이 + 니타족사니드 0.02% (wt/wt) 가 공급된 C57Bl/6J 마우스로 명명한다.
100 mg/kg 으로 NTZ 가 보충된 CDAAc 식이에 상응하는 군을 또한, 100 mg/kg/일의 이론적 용량에 상응하는 CDAA 식이 + 니타족사니드 0.0667% (wt/wt) 가 공급된 C57Bl/6J 마우스로 명명한다.
음식물을 Ssniff® company (Soest, Germany) 로부터 구입하였다.
니타족사니드 (표 1 에서의 참조번호 참고) 를 Ssniff® 에 의해 분말 형태의 CDAA + 1% 콜레스테롤 (chol) 식이에, 필요 용량으로 혼입하였다.
니타족사니드의 참조번호 및 뱃치 번호를 하기 표 2 에 요약한다:
표 2: 니타족사니드 참조번호
Figure 112019085009871-pct00018
각각의 용량에 대해, 정확한 용량의 계산은 하기 실시예에 따라 수행하였다. 이는 각각의 마우스 군에 의해 정확히 소비된 각각의 생성물의 정확한 용량을 고려할 수 있게 한다.
실제 치료 용량의 계산: 니타족사니드 0.02% (wt/wt) 로의 예
ㆍ 음식물 섭취는 음식물 g / 동물 g / 일로 표시한다.
ㆍ 식이에서 0.02% 의 니타족사니드
o 0.02 g 의 cpd /100 g 의 음식물 = 0.2 mg 의 cpd/음식물 g
ㆍ cpd 의 실제 용량:
o 0.2 mg 의 cpd/음식물 g/동물 g/일
o (0.2 mg 의 cpd/음식물 g/동물 g/일) x 1000 = (0.2 mg 의 cpd/음식물 g/동물 kg/일) = 200 mg 의 cpd/음식물 g/동물 kg (1 일 당)
결과적으로, 음식물 g / 동물 g / 일로 표시된 음식물 섭취 값에 200 을 곱하여; 수득한 값은 NTZ mg/동물 kg/일로 표시된 실제 투여 용량에 상응한다.
동일한 방식으로:
ㆍ NTZ 0.00667% wt/wt 의 용량에 대해, 음식물 섭취 값 (음식물 g / 동물 g / 일) 에 66.7 을 곱하여 실제 치료 용량을 수득하였다.
ㆍ NTZ 0.0667% wt/wt 의 용량에 대해, 음식물 섭취 값 (음식물 g / 동물 g / 일) 에 667 을 곱하여 실제 치료 용량을 수득하였다.
계산에 따라, 계산 용량 대 추정 용량을 하기 표 3 및 4 에 제공한다.
표 3: 상이한 용량에서 각각의 화합물에 대한 추정 및 계산 용량
Figure 112019085009871-pct00019
표 4: 상이한 용량에서 각각의 조합에 대한 추정 및 계산 용량
Figure 112019085009871-pct00020
체중 및 음식물 섭취를, 연구 전체에 걸쳐 주당 2 회 기록하였다.
처리 기간의 말에, 이소플루란으로 동물을 마취시키고, 하기 기재된 바와 같이 혈액 샘플을 채취하였다. 그런 다음, 동물을 자궁 경부 탈구에 의해 희생시키고, 뇌 절제 및 칭량을 위해 참수하였다. 간 또한 수집하고 칭량하였다. 간의 일부를 4% 포르말린에 고정시키고, 파라핀에 포매하고, 조직학적 분석에 사용하였다. 나머지 간을 액체 질소에서 급속 냉동시키고, 추가 분석에 사용할 때까지 -80℃ 에서 유지하였다.
6 시간의 금식 기간 후에 희생시 혈액 샘플링을 수행하였다. 눈뒤 천자 (retro orbital puncture) 에 의해 마취 하 혈액 샘플을 빼내었다. 혈액을 함유하는 헤파린 튜브를 빠르게 원심분리하고 (4,000 rpm/4℃에서 15 분), 혈장 분획을 수집하였다. 추가 분석이 있을 때까지 혈장 분취액을 -20℃ 에서 저장하였다.
혈장 생화학
알라닌 아미노 트랜스퍼라아제 (ALT)
ALT 의 혈장 농도를 Daytona automate (Randox, cat# AL 3801) 에 대한 적절한 Randox 키트를 사용하여 측정하였다. 간략하게, 혈장 샘플 내의 ALT 는 α-옥소글루타레이트 및 L-알라닌을 L-글루타메이트 및 피루베이트로 효소적으로 변형시킨다. NADH 의 존재 하에, 생성된 피루베이트는 락테이트 데히드로게나아제에 의해 전환되어 L-락테이트 및 NAD+ 를 형성한다. 반응의 동력학을 연구하고 ALT 의 혈장 수준이 계산될 수 있게 한다. 결과를 U/L 로 표시한다.
아스파르테이트 아미노 트랜스퍼라아제 ( AST )
AST 의 혈장 농도를 Daytona automate (Randox, cat# AS 3804) 에 대한 적절한 Randox 키트를 사용하여 측정하였다. 간략하게, 혈장 샘플 내의 AST 는 α-옥소글루타레이트 및 L-아스파르테이트를 L-글루타메이트 및 옥살로아세테이트로 효소적으로 변형시킨다. NADH 의 존재 하에, 생성된 옥살로아세테이트는 말레이트 데히드로게나아제에 의해 전환되어 L-말레이트 및 NAD+ 를 형성한다. 반응의 동력학을 연구하고 AST 의 혈장 수준이 계산될 수 있게 한다. 결과를 U/L 로 표시한다.
조직학
희생시, 간 샘플을 조직학적 분석을 위해 처리하고 하기와 같이 검사하였다.
조직 포매 및 절편화
간 슬라이스를 먼저 포르말린 4% 용액에서 12 시간 동안 고정시켰다. 그런 다음, 간 조각을 PBS 에서 30 분 동안 세척하고, 에탄올 용액 (70, 80, 95 및 100% 에탄올의 연속적인 배쓰) 에서 탈수시켰다. 간 조각을 자일렌의 3 개 상이한 배쓰 (Sigma-Aldrich cat# 534056) 에서 인큐베이션한 후, 액체 파라핀 (60℃) 중 2 개 배쓰에서 인큐베이션하였다. 그런 다음, 간 조각을, 조직을 완전히 덮기 위해 Histowax® 로 부드럽게 채워진 랙에 넣었다.
조직 조각을 함유하는 파라핀 블록을 랙에서 제거하고, 실온에서 저장하였다. 간 블록을 3 ㎛ 슬라이스로 절단하였다.
피크로시리우스 레드 염색
간 절편을 탈파라핀화, 재수화하고, Fast Green FCF 0.04% (Sigma-Aldrich, cat# F7258) 의 용액에서 15 분 동안 인큐베이션한 후, 0.5% 아세트산 (Sigma-Aldrich, cat# 695092) 의 배쓰에서 헹구었다. 그런 다음, 간 절편을 물에서 헹구고, 포화 수성 피크르산 (Sigma-Aldrich cat# P6744) 중 Fast Green FCF 0.04% - 0.1% 시리우스 레드 (Direct Red 80, Fluka cat# 43665) 의 용액에서 30 분 동안 인큐베이션하였다. 그런 다음, 절편을 탈수하고, CV 마운트 배지 (Leica, cat# 14046430011) 를 사용하여 마운트하였다.
조직학적 검사
각각의 간 표본의 공급원에 대해 맹검화된 기술자가 조직학적 검사를 수행하였다. 3D Histech 로부터의 Pannoramic 250 스캐너를 가상 슬라이드를 생성하였다. Quant Center 소프트웨어 (3D Histech, Pattern Quant 및 Histo Quant 모듈을 포함함) 를 사용하여, 콜라겐-염색 영역을 정량화하였다. 간략하게, Pattern Quant 를 사용하여 조직을 검출하고 그 표면을 측정하였다. 그런 다음, Histo Quant 를 사용하여 염색된 콜라겐 함량을 검출하고 색상 임계값 방법을 기반으로 하여 그 표면을 측정하였다. 이후, 섬유증 영역을 각 동물의 전체 조직에 대한 콜라겐 표면의 백분율로서 표시하였다.
CRN 섬유증 기준을 사용하여 간 섬유증 병기결정 (staging) 을 맹검-평가하였다.
매개변수, 정량/계수 및 고려되는 필드 수에 대한 세부 사항을 하기 표 5 에 제공한다.
표 5: 섬유증에 대한 CRN 의 기준
Figure 112019085009871-pct00021
통계학적 분석
실험 결과를 평균 ± 표준 편차 (SD) 로서 표시하고, 막대 그래프 또는 곡선으로서 플로팅하였다. 통계학적 분석을 하기와 같이 Prism Version 7 을 사용하여 수행하였다:
희생 후 수행한 측정에 대해, CSAA 대 CDAA + 1% 콜레스테롤 (chol) 군을 스튜던트 t-검정 (#: p<0.05; ##: p<0.01; ###: p<0.001) 또는 만-휘트니 시험 ($: p<0.05; $$: p<0.01; $$$: p<0.001) 에 의해 비교하였다. 치료군을 일원 ANOVA 및 미보정 피셔 LSD 사후 검정에 의해 CDAA + 1% chol 식이와 비교하였다 (*: p<0.05; **: p<0.01; ***: p<0.001).
간 콜라겐 함량의 측정
간 콜라겐 함량을 적절한 QuickZyme 키트 (총 콜라겐 검정, cat# QZB-totcol5) 를 사용하여 측정하였다. 검정은 콜라겐의 3중 나선에서 주로 발견되는 비-단백질성 아미노산인 히드록시프롤린의 검출을 기반으로 한다. 따라서, 조직 가수분해물 중의 히드록시프롤린은 조직에 존재하는 콜라겐 양의 직접 측정으로서 사용될 수 있다 (프로콜라겐, 성숙 콜라겐 및 콜라겐 분해 생성물 사이의 구별 없이).
히드록시프롤린을 투여하기 전에, 95℃ 에서 6M HCl 중 조직 샘플의 완전한 가수분해가 요구된다. 검정으로, 570 nm 에서 최대 흡광도를 갖는 발색체의 발생이 초래된다. 결과를 콜라겐 mg / 간 g 으로서 표시한다.
프로콜라겐 III N-말단 프로펩티드 ( PIIINP )
PIIINP 의 혈장 농도를, 제조사의 지시사항에 따라 Cloud-Clone Corp (cat# SEA573Ra) 로부터의 ELISA 검정을 사용하여 측정하였다. 마이크로타이터 플레이트를 PIIINP 에 특이적인 항체로 사전-코팅한다. 표준 또는 샘플을 PIIINP 에 특이적인 비오틴-접합 항체와 함께 적절한 마이크로타이터 플레이트 웰에 첨가한다. 다음으로, 서양고추냉이 퍼옥시다아제 (HRP) 에 접합된 아비딘을 각각의 마이크로플레이트 웰에 첨가하고 인큐베이션한다. TMB 기질 용액을 첨가한 후, PIIINP, 비오틴-접합 항체 및 효소-접합 아비딘을 함유하는 웰만이 색 변화를 나타낼 것이다. 효소-기질 반응을 황산 용액 첨가에 의해 종료시키고, 색 변화를 450 nm ± 10 nm 의 파장에서 분광광도계로 측정한다. 그런 다음, 샘플의 OD 를 표준 곡선과 비교함으로써 샘플 중 PIIINP 의 농도를 측정한다. 결과를 pg/㎖ 로 표시한다.
유전자 발현
RNA 추출
간 총 RNA 를 제조사의 지시사항에 따라 Nucleospin® 96 키트 (Macherey Nagel) 를 사용하여 단리하였다. 150 ng 의 총 RNA 를, RT 완충액 1x (Invitrogen cat#P/NY02321), 1 mM DTT (Invitrogen cat#P/NY00147), 0.5 mM dNTP (Promega), 200 ng pdN6 (Roche cat#11034731001) 및 40U 의 리보뉴클레아제 저해제 (Promega cat#N2515) 의 존재 하에 M-MLV-RT (몰로니 쥐과 백혈병 바이러스 역전사효소 (Moloney Murine Leukemia Virus Reverse Transcriptase)) (Invitrogen cat# 28025) 를 사용하여 cDNA 에서 역전사하였다.
그런 다음, CFX96 Touch™ 실시간 PCR 검출 시스템 (Biorad) 을 사용하여 정량적 PCR 을 실행하였다. 간략하게, iQ SYBR Green Supermix 키트 (Biorad cat#170887) 를 사용하여 5 ㎕ 의 5x 희석 역전사 믹스에서 96 웰 플레이트에서 PCR 반응을 수행하였다. 실험 조건은 하기와 같았다: 20 ㎕ 의 부피 반응 및 0.5 ㎕ 의 각각의 역방향 및 정방향 프라이머 (10 pMol).
Figure 112019085009871-pct00022
GAPDH 유전자의 발현을 참조로서 사용하여 발현 수준을 정규화하였다.
각각의 유전자에 대해, 100% 에 가까운 PCR 반응 효율 및 1 에 가까운 상관 계수를 갖기 위하여 최상의 지점 (적어도 3 개의 지점) 을 선택함으로써 표준 곡선을 그렸다. 하우스키핑 유전자 및 표적 유전자 (각각의 표적 유전자의 특이적 PCR 효율을 고려하여) 둘 모두에 대한 표준 곡선 방정식을 사용하여 발현 수준을 측정하였다.
결과 및 결론 :
분화된 근섬유아세포의 비정상적인 지속성은 많은 섬유증성 질환의 특징이다.
간 손상 후, 정지성 HSC 는 (α-SMA)-양성 근섬유아세포로의 분화를 특징으로 하는 활성화 과정을 겪는다.
단일 작용제로서의 NTZ 는 TGFβ-유도 hHSC 에서 항-섬유화 활성을 부여하는 것으로 나타났다 (도 1B). NTZ 가 활성 대사산물 티족사니드 (TZ) 로 신속하게 가수분해되는 것으로 알려져 있으므로 (Broekhuysen, Stockis et al., 2000), 이러한 대사산물을 HSC 에서의 그의 항섬유화 활성에 대해서도 평가하였다. TZ 는 모체 약물과 유사한 프로파일을 나타내었다 (데이터는 나타내지 않음). 한편, 엘라피브라노와 같은 일부 PPAR 아고니스트는 또한 TGFβ 유도 HSC 모델에서 항섬유화 프로파일을 나타내었다 (도 1A). 베자피브레이트와 같은 다른 PPAR 아고니스트는 약한 활성을 나타내었는데, 이는 PPAR 아고니스트가 그의 항섬유화 특성에 관하여 동등하지 않다는 것을 제시한다 (도 1C).
엘라피브라노와 NTZ 의 조합이 상승작용적 방식으로 섬유증을 감소시킬 수 있는지를 평가하기 위하여, 조합 매트릭스 실험을 TGFβ-유도 HSC 에서 수행하였다. 간략하게, NTZ 및 엘라피브라노 용액을 체커보드 포맷으로 연속 희석하여, 엘라피브라노/NTZ 비의 큰 패널을 덮는 42 개의 조합 매트릭스를 생성하였다. 블리스에 대한 초과량 스코어를 계산하여 상승작용을 먼저 측정하였다. 이들 실험은 NTZ 가 엘라피브라노와 상승작용하여, 활성화된 HSC 에서 α-SMA 생성을 감소시켰다는 것을 나타내었다. 여러 조합 쌍은 10 이상의 EOB 스코어를 나타내었으며, 이는 상승작용을 나타내는 것이다 (도 2B).
상승작용을 검증하기 위해, 최고 EOB 스코어에 상응하는 실험 값을 막대 그래프로 플로팅하였다 (도 2C). 이들 그래프는 NTZ 와 엘라피브라노의 조합이, 가장 높은 단일 작용제 (NTZ 또는 엘라피브라노) 와 비교하여 통계적으로 유의한 우수한 항섬유화 효과를 나타낸다는 것을 보여준다. 가장 인상적인 예를 0.6 μM 에서의 NTZ 및 5 μM 에서의 엘라피브라노의 조합 쌍으로 나타낸다. NTZ 가 0.6 μM 에서 거의 항섬유화 활성을 나타내지 않지만, 5 μM 에서의 엘라피브라노의 첨가가 αSMA 의 강력한 감소 (55%) 를 초래하여, 이는 단일 작용제 단독으로 관찰된 효과보다 훨씬 더 강력하다.
다른 PPAR 아고니스트, 사로글리타자르, 셀라델파르 및 라니피브라노와 NTZ 의 조합이 상승작용적 방식으로 섬유증을 감소시킬 수 있는지를 평가하기 위하여, 조합 매트릭스 실험을 또한 TGFβ-유도 HSC 에서 수행하고 EOB 스코어를 측정하였다. NTZ 와 사로글리타자르의 조합으로의 상승작용을 평가하기 위해, 셀라델파르 및 라니피브라노를 항-섬유화 활성에 대해 검증하였다. NTZ 와 사로글리타자르, 셀라델파르 또는 라니피브라노의 조합이 EOB 스코어 > 0 을 나타내었는데, 이는 상승작용을 나타내는 것이다. 2.5 μM 에서의 사로글리타자르 및 0.625 μM 에서의 NTZ 의 조합은 또한 αSMA 의 강력한 감소 (52%) 를 초래하여, 이는 단일 작용제 단독으로 관찰된 효과보다 훨씬 더 강력하다 (도 3A). 20 μM 에서의 셀라델파르 및 2.5 μM 에서의 NTZ 의 조합은 또한 αSMA 의 강력한 감소 (72%) 를 초래하여, 이는 단일 작용제 단독으로 관찰된 효과보다 훨씬 더 강력하다 (도 3B). 더 적은 정도로, 10 μM 에서의 라니피브라노 및 1.25 μM 에서의 NTZ 의 조합은 NTZ 와 비교하여 활성화된 HSC 에서 α-SMA 생성을 감소시키기에 유의미한 경향이 있다 (p=0.06) (도 3C).
결론적으로, 본 출원인은 식 (I) 의 화합물과 특정 PPAR 아고니스트 (들) 의 조합에 대한 예상치 못한 항섬유화 활성을 발견하였다. 이들 결과는 식 (I) 의 화합물과 PPAR 아고니스트의 조합이 상승작용적일 수 있으며 다수 유형의 섬유증성 질환에서 치료적 이점을 제공할 수 있음을 제시한다.
콜린-결핍 및 L-아미노산-결핍 (CDAA) + 1% 콜레스테롤 식이를 마우스에 투여하는 것은, 병리학적으로 인간 비-알코올성 지방간염 (NASH) 과 유사한 진행성 섬유화 지방간염을 유발한다.
CDAA + 1% 콜레스테롤 식이는 특히, 도 4 에 나타낸 바와 같이 간 콜라겐의 상당한 증가를 유도한다.
이 도면은 또한 엘라피브라노 또는 NTZ 단독의 투여가 간 콜라겐 함량을 감소시킨다는 것을 보여준다. 콜라겐의 감소는 투여된 엘라피브라노 또는 NTZ 의 용량에 비례한다.
엘라피브라노와 NTZ 의 조합이 투여되는 경우, 생성된 콜라겐의 감소는 개별적으로 취해진 각각의 화합물에 대해 관찰된 감소보다 더 크다.
따라서, 콜라겐 생성의 감소에 대한 엘라피브라노와 NTZ 의 조합의 상승작용적 효과가 존재한다. 즉, 엘라피브라노와 NTZ 를 조합하는 경우, 눈에 띄는 항섬유화 효과가 존재한다.
계산된 용량으로 표시된 2.8 mpk (kg 당 mg) 의 엘라피브라노 및 77.7 mpK 의 NTZ 를 포함하는 조합에 대해 더 우수한 효과가 관찰된다.
도 5 는 조직학, 즉 각 동물의 전체 조직에 대한 콜라겐 표면의 백분율로 표시한 섬유증 영역의 측정으로 수득한 결과를 나타낸다.
CDAA + 1% 콜레스테롤 식이는 특히, 섬유증 백분율의 상당한 증가를 유도한다.
도 5 는 또한 엘라피브라노 또는 NTZ 단독의 투여가 섬유증 백분율을 감소시킨다는 것을 보여준다. 감소는 투여된 엘라피브라노 또는 NTZ 의 용량에 비례한다.
엘라피브라노와 NTZ 의 조합이 투여되는 경우, 섬유증 백분율의 감소는 개별적으로 취해진 각각의 화합물에 대해 관찰된 감소보다 더 크다.
따라서, 섬유증 백분율의 감소에 대한 엘라피브라노와 NTZ 의 조합의 상승작용적 효과가 존재한다. 즉, 엘라피브라노와 NTZ 를 조합하는 경우, 눈에 띄는 항섬유화 효과가 존재한다.
계산된 용량으로 표시된 2.8 mpk (kg 당 mg) 의 엘라피브라노 및 77.7 mpK 의 NTZ 를 포함하는 조합에 대해 더 우수한 효과가 관찰된다.
도 6 ~ 12 는 섬유증의 상이한 간 마커의 유전자 발현을 나타낸다. 모든 마커에 대해, CDAA + 1% 콜레스테롤 식이는 특히, 유전자 발현의 상당한 증가를 유도한다.
엘라피브라노 또는 NTZ 단독의 투여가 상이한 유전자 발현의 수준을 감소시킨다는 것에 또한 주목할 수 있다. 감소는 투여된 엘라피브라노 또는 NTZ 의 용량에 비례한다.
엘라피브라노와 NTZ 의 조합이 투여되는 경우, 유전자 발현의 감소는 개별적으로 취해진 각각의 화합물에 대해 관찰된 감소보다 더 크다.
따라서, 섬유증의 상이한 간 마커의 유전자 발현의 감소에 대한 엘라피브라노와 NTZ 의 조합의 상승작용적 효과가 존재한다. 즉, 엘라피브라노와 NTZ 를 조합하는 경우, 눈에 띄는 상승작용적 항섬유화 효과가 존재한다.
결론적으로, 본 출원인은 식 (I) 의 화합물과 특정 PPAR 아고니스트 (들) 의 조합에 대한 예상치 못한 상승작용적 항섬유화 활성을 발견하였다. 이들 결과는 식 (I) 의 화합물과 PPAR 아고니스트의 조합이 상승작용적일 수 있고/있거나 추가적인 효과를 가질 수 있으며 또한 다수 유형의 섬유증성 질환에서 치료적 이점을 제공할 수 있음을 제시한다.
참고문헌
Figure 112019085009871-pct00023
Figure 112019085009871-pct00024
SEQUENCE LISTING <110> GENFIT <120> PHARMACEUTICAL COMPOSITIONS FOR COMBINATION THERAPY <130> B2428PC00 <160> 22 <170> PatentIn version 3.5 <210> 1 <211> 20 <212> DNA <213> artificial <220> <223> alpha-SMA forward <400> 1 ctgacagagg caccactgaa 20 <210> 2 <211> 20 <212> DNA <213> artificial <220> <223> alpha-SMA reverse <400> 2 catctccaga gtccagcaca 20 <210> 3 <211> 20 <212> DNA <213> artificial <220> <223> Col1a1 forward <400> 3 aggcgaacaa ggtgacagag 20 <210> 4 <211> 19 <212> DNA <213> artificial <220> <223> Col1a1 reverse <400> 4 gccaggagaa ccagcagag 19 <210> 5 <211> 20 <212> DNA <213> artificial <220> <223> Col1a2 forward <400> 5 attggaagcc gaggtcccag 20 <210> 6 <211> 20 <212> DNA <213> artificial <220> <223> Col1a2 reverse <400> 6 tttgccccca ggtatgccag 20 <210> 7 <211> 20 <212> DNA <213> artificial <220> <223> TGFb1 forward <400> 7 ttgcttcagc tccacagaga 20 <210> 8 <211> 20 <212> DNA <213> artificial <220> <223> TGFb1 reverse <400> 8 tggttgtaga gggcaaggac 20 <210> 9 <211> 20 <212> DNA <213> artificial <220> <223> TIMP1 forward <400> 9 attcaaggct gtgggaaatg 20 <210> 10 <211> 20 <212> DNA <213> artificial <220> <223> TIMP1 reverse <400> 10 ctcagagtac gccagggaac 20 <210> 11 <211> 20 <212> DNA <213> artificial <220> <223> TIMP2 forward <400> 11 gcatcaccca gaagaagagc 20 <210> 12 <211> 20 <212> DNA <213> artificial <220> <223> TIMP2 reverse <400> 12 gggtcctcga tgtcaagaaa 20 <210> 13 <211> 20 <212> DNA <213> artificial <220> <223> MMP2 forward <400> 13 tccctaagct catcgcagac 20 <210> 14 <211> 20 <212> DNA <213> artificial <220> <223> MMP2 reverse <400> 14 gcttccaaac ttcacgctct 20 <210> 15 <211> 20 <212> DNA <213> artificial <220> <223> MMP7 forward <400> 15 taattggctt cgcaaggaga 20 <210> 16 <211> 22 <212> DNA <213> artificial <220> <223> MMP7 reverse <400> 16 aaggcatgac ctagagtgtt cc 22 <210> 17 <211> 27 <212> DNA <213> artificial <220> <223> CCR2 forward <400> 17 taatatgtta cctcagttca tccacgg 27 <210> 18 <211> 26 <212> DNA <213> artificial <220> <223> CCR2 reverse <400> 18 tgctcttcag ctttttacag cctatc 26 <210> 19 <211> 20 <212> DNA <213> artificial <220> <223> CCR5 forward <400> 19 attctccaca ccctgtttcg 20 <210> 20 <211> 20 <212> DNA <213> artificial <220> <223> CCR5 reverse <400> 20 gaattcctgg aaggtggtca 20 <210> 21 <211> 20 <212> DNA <213> artificial <220> <223> GAPDH forward <400> 21 tatgactcca ctcacggcaa 20 <210> 22 <211> 20 <212> DNA <213> artificial <220> <223> GAPDH reverse <400> 22 tccacgacat actcagcacc 20

Claims (18)

  1. 하기를 포함하는 약학 조성물로서, 섬유증성 또는 담즙울체성 질환의 치료 방법에서 사용하기 위한 약학 조성물:
    (i) 니타족사니드 (NTZ), 티족사니드, 및 이들의 약학적으로 허용가능한 염에서 선택되는 화합물; 및
    (ii) 엘라피브라노, 셀라델파르, 사로글리타자르, 라니피브라노, 및 이들의 약학적으로 허용가능한 염으로 이루어지는 군에서 선택되는 적어도 하나의 PPAR 아고니스트.
  2. 제 1 항에 있어서, 하기를 포함하는, 사용하기 위한 약학 조성물:
    (i) 니타족사니드, 티족사니드; 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염에서 선택되는 화합물; 및
    (ii) 엘라피브라노 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염.
  3. 제 1 항 또는 제 2 항에 있어서, 조성물이 성분 (i) 및 (ii) 및 약학적으로 허용가능한 담체를 포함하는, 사용하기 위한 약학 조성물.
  4. 제 1 항 또는 제 2 항에 있어서, 성분 (i) 및 (ii) 가 주사가능한 현탁액, 겔, 오일, 알약, 정제, 좌제, 분말, 캡슐, 에어로졸, 연고, 크림, 패치, 또는 지속방출 및/또는 서방출을 위한 생약 형태의 수단으로 제형화되는, 사용하기 위한 약학 조성물.
  5. 제 1 항 또는 제 2 항에 있어서, 섬유증성 질환이 간, 신장, 피부, 표피, 내피, 근육, 건, 연골, 심장, 췌장, 폐, 자궁, 신경계, 고환, 난소, 부신, 동맥, 정맥, 결장, 장, 쓸개관, 연조직, 골수, 관절 및 위 섬유증으로 이루어지는 군에서 선택되는, 사용하기 위한 약학 조성물.
  6. 제 1 항 또는 제 2 항에 있어서, 섬유증성 질환이 간, 소화관, 폐, 심장, 신장, 근육, 피부, 연조직, 골수, 장 및 관절 섬유증으로 이루어지는 군에서 선택되는, 사용하기 위한 약학 조성물.
  7. 제 1 항 또는 제 2 항에 있어서, 질환이 원발 경화성 담관염 (PSC) 및 원발 담즙성 담관염 (PBC)로 이루어지는 군에서 선택되는, 사용하기 위한 약학 조성물.
  8. 대상에게 순차적, 개별 또는 동시 투여를 위한, 하기를 포함하는 키트로서, 섬유증성 또는 담즙울체성 질환의 치료 방법에서 사용하기 위한, 키트:
    (i) 니타족사니드 (NTZ), 티족사니드, 및 이들의 약학적으로 허용가능한 염으로 이루어지는 군에서 선택되는 화합물을 포함하는 조성물; 및
    (ii) 엘라피브라노, 셀라델파르, 사로글리타자르, 라니피브라노, 및 이들의 약학적으로 허용가능한 염으로 이루어지는 군에서 선택되는 적어도 하나의 PPAR 아고니스트를 포함하는 조성물.
  9. 제 8 항에 있어서, 하기를 포함하는, 사용하기 위한 키트:
    (i) 니타족사니드, 티족사니드; 및 이들의 약학적으로 허용가능한 염으로 이루어지는 군에서 선택되는 화합물을 포함하는 조성물; 및
    (ii) 엘라피브라노 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염을 포함하는 조성물.
  10. 제 8 항 또는 제 9 항에 있어서, 성분 (i) 및 (ii) 가 주사가능한 현탁액, 겔, 오일, 알약, 정제, 좌제, 분말, 캡슐, 에어로졸, 연고, 크림, 패치, 또는 지속방출 및/또는 서방출을 위한 생약 형태의 수단으로 제형화되는, 사용하기 위한 키트.
  11. 제 8 항 또는 제 9 항에 있어서, 섬유증성 질환이 간, 신장, 피부, 표피, 내피, 근육, 건, 연골, 심장, 췌장, 폐, 자궁, 신경계, 고환, 난소, 부신, 동맥, 정맥, 결장, 장, 쓸개관, 연조직, 골수, 관절 및 위 섬유증으로 이루어지는 군에서 선택되는, 사용하기 위한 키트.
  12. 제 8 항 또는 제 9 항에 있어서, 섬유증성 질환이 간, 소화관, 폐, 심장, 신장, 근육, 피부, 연조직, 골수, 장 및 관절 섬유증으로 이루어지는 군에서 선택되는, 사용하기 위한 키트.
  13. 제 8 항 또는 제 9 항에 있어서, 질환이 원발 경화성 담관염 (PSC) 및 원발 담즙성 담관염 (PBC)로 이루어지는 군에서 선택되는, 사용하기 위한 키트.
  14. 삭제
  15. 삭제
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Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
KR20190119097A (ko) * 2017-02-24 2019-10-21 장피트 조합 치료를 위한 약학 조성물

Families Citing this family (8)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN110025621A (zh) * 2019-03-13 2019-07-19 中国农业科学院上海兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心上海分中心) 替唑尼特和硝唑尼特在制备抗炎药物中的应用
JP2022527840A (ja) * 2019-04-09 2022-06-06 ジェンフィット 免疫疾患又は炎症を治療するためのニタゾキサニド及びエラフィブラノールの組合せ
US20220193042A1 (en) * 2019-04-12 2022-06-23 Genfit Nitazoxanide and thiazolides for use in the treatment of diseases associated with oxidative stress
KR102199640B1 (ko) * 2020-01-06 2021-01-07 브렉소젠 주식회사 라니피브라노르를 포함하는 줄기세포 유래 엑소좀 생성 촉진 및 줄기세포기능 강화용 조성물
EP4051257A1 (en) * 2019-10-28 2022-09-07 Genfit Combination therapy having antioxydant properties
US11478533B2 (en) 2020-04-27 2022-10-25 Novo Nordisk A/S Semaglutide for use in medicine
WO2022051323A1 (en) * 2020-09-03 2022-03-10 Coherus Biosciences, Inc. Fixed dose combinations of chs-131 and a ppar agonist
CN114044761B (zh) * 2021-02-24 2022-05-17 成都贝诺科成生物科技有限公司 一种新的硝基噻唑衍生物及其应用

Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JP2009522371A (ja) 2006-01-09 2009-06-11 ロマーク ラボラトリーズ エル．シー． ウイルス性肝炎の処置

Family Cites Families (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
GB1437800A (en) 1973-08-08 1976-06-03 Phavic Sprl Derivatives of 2-benzamido-5-nitro-thiazoles
CN103443098B (zh) * 2011-01-30 2016-03-16 广州源生医药科技有限公司 作为溶血磷脂酸受体的拮抗剂的化合物、组合物及其应用
KR20200006177A (ko) 2011-03-02 2020-01-17 제롬 쉔타그 단독으로 또는 c형 간염 바이러스 감염과 결합되는 간 지방증의 치료를 위한 조성물, 방법 및 진단

Patent Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JP2009522371A (ja) 2006-01-09 2009-06-11 ロマーク ラボラトリーズ エル．シー． ウイルス性肝炎の処置

Non-Patent Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
Alimentary Pharmacology & Therapeutics, 27(10), 866-884, 2008.
Gastroenterology, 150, 1147-1159, 2016.
Nature Biotechnology, 30(11), 1125-1130, 2012.

Cited By (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
KR20190119097A (ko) * 2017-02-24 2019-10-21 장피트 조합 치료를 위한 약학 조성물
KR102633249B1 (ko) 2017-02-24 2024-02-02 장피트 조합 치료를 위한 약학 조성물

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