KR102339450B1 - 독활에서 유래한 신규 화합물 및 이를 포함한 항염증성 조성물 - Google Patents

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Abstract

본 개시내용은 독활로부터 분리된 신규 화합물 및 이의 용도에 관한 것으로, 구체적으로 독활로부터 분리 및 정제된 신규화합물 및 신규 화합물을 포함하는 항염증성 조성물에 관한 것이다. 본 개시내용에 따른 조성물은 의약, 식품 및 화장품 소재로 유용하게 사용될 수 있다.

Description

독활에서 유래한 신규 화합물 및 이를 포함한 항염증성 조성물{A novel constituent derived from Aralia cordata and an anti-inflammatory composition comprising thereof}
독활 추출물로부터 분리한 화합물을 유효성분으로 포함하는 항염증성 조성물에 관한 것이다.
염증은 외부의 자극 또는 박테리아, 곰팡이 또는 바이러스와 같은 미생물의 침입 등에 의해 생체 조직이 손상되는 것을 막기 위한 생체의 방어 반응기작 중 하나이다. 염증 신호는 발생하여 전달되면 생체 내에서는 여러 가지 변화가 일어나는데, 그 중 하나로 염증이 필요한 부위의 혈관을 확장시켜 혈액 공급이 왕성하게 일어나도록 하여, 호중구 등 염증반응에 필요한 혈액 세포가 집중 공급되는 현상을 들 수 있다. 그러나 이러한 생체의 방어 반응이 비정상적으로 과도하게 일어나면 여러 염증성 질환들이 발병하게 되므로, 이를 방지하고자 염증 신호 경로의 효소를 억제하여 염증 신호 경로를 차단함으로써, 과도한 염증 반응을 억제할 수 있는 약물들이 개발되고 있다.
염증을 유발하는 인자에는 펩티드성 인자 이외에 프로스타글란딘, 루코트리엔, 혈소판활성인자와 같은 지질성 인자, 염증인자 합성효소, NO(nitric oxide)와 같은 자유라디칼, 여러 종류의 세포접착분자, 면역계, 응고인자 등이 관여한다. 따라서, 최근 효과적인 염증 완화를 위하여, 상기 염증 관련 단백질의 발현을 억제할 수 있는 물질에 대한 연구가 진행되고 있다.
독활은 두릅 또는 땃두릅의 뿌리이다. 땃두릅은 두릅나무과에 속하는 다년생 초본식물로 한국, 중국 일본둥지에서 야생 또는 재배되고 있는 식물로서, 독활은 진통, 부종, 해열, 치통, 관절염 등의 치료에 사용되어 온 생약제이며, 어린잎과 줄기는 특유의 향이 있어 인기있는 나물로 해외에 수출되기도 하는 유용한 식물자원이다. 특히 독활은 항염증작용, 혈소판응집억제작용 또는 해열작용 등의 효과를 갖고 있는 것으로 알려져 있다.
따라서 항염증효과가 뛰어난 독활로부터 화합물을 분리하여 항염증성 의약의 선도물질 내지 후보물질로 제시할 필요가 있다.
본 개시내용의 일 구체예에 따르면, 독활로부터 분리한 화합물, 이의 이성질체, 용매화물 또는 약제학적으로 허용되는 염을 포함하는 항염증성 조성물에 관한 것이다.
다른 구체예에 따르면, 상기 화합물을 포함하는 항염증성 조성물, 건강기능식품 또는 화장료 조성물을 제공하고자 한다.
본 개시내용의 구체예에 따르면,
하기 화학식 1로 표시되는 화합물, 이의 이성질체, 용매화물 또는 약제학적으로 허용되는 염이 제공된다.
[화학식 1]
Figure 112019122761373-pat00001
상기 R1, R2, R3, R4 및 R5는 각각 독립적으로 수소, 수산화기, 탄소수 1 내지 6개의 알킬기, 탄소수 1 내지 6개의 알콕시기, 카보닐기(-CO-R6), 카복실기(-CO-OR6) 또는 탄소수 1 내지 6의 알코올기이고,
상기 R6는 수소, 수산화기, 탄소수 1 내지 6개의 알킬기, 탄소수 1 내지 6개의 알콕시기이다.
본 개시내용의 다른 구체예에 의하면,
상기 화합물은 항염증성 화합물인 것을 특징으로 하는 화합물, 이의 이성질체, 용매화물 또는 약제학적으로 허용되는 염이 제공된다.
본 개시내용의 화학식 1 또는 화학식 2로 표시되는 화합물, 이의 이성질체, 용매화물 또는 약제학적으로 허용가능한 염은 염증반응을 일으키는 다수의 경로를 차단함으로써 우수한 항염증성 효과가 있다. 또한 상기 화합물, 이의 이성질체, 용매화물 또는 약제학적으로 허용가능한 염을 포함하는 항염증 조성물, 항염증 건강기능식품, 항염증 화장료 조성물 또는 항염증 약학적 조성물을 제공할 수 있다.
도 1은 본 개시내용의 18-nor-ent-pimara-9(11),15-diene-4β-ol 분리를 위한 과정으로 독활로부터 추출물 및 분획물을 수득하는 공정을 나타낸 모식도이다.
도 2는 독활로부터 수득한 헥산분획물로부터 본 개시내용의 18-nor-ent-pimara-9(11),15-diene-4β-ol를 분리하는 공정을 나타낸 모식도이다.
도 3은 본 개시내용에 따른 18-nor-ent-pimara-9(11),15-diene-4β-ol의 산화질소 생성억제 활성을 측정한 것이다. 구체적으로 도 3A는 18-nor-ent-pimara-9(11),15-diene-4β-ol의 농도에 따라 산화질소 생성억제능을 확인한 것이고, 도 3B는 18-nor-ent-pimara-9(11),15-diene-4β-ol이 세포사멸로 인해 산화질소 생성을 억제한 것인지 확인한 것이며, 도 3C는 18-nor-ent-pimara-9(11),15-diene-4β-ol의 산화질소 생성억제능의 기전을 단백질 발현으로 확인한 것이다.
도 4는 본 개시내용에 따른 18-nor-ent-pimara-9(11),15-diene-4β-ol의 NF-κB 억제 활성을 측정한 것이다. 구체적으로 도 4A는 18-nor-ent-pimara-9(11),15-diene-4β-ol이 NF-κB 억제 단백질인 IκB-α의 인산화를 억제하는지 확인한 것이고, 도 4B는 18-nor-ent-pimara-9(11),15-diene-4β-ol이 NF-κB의 subunit인 p65의 발현을 억제하는지를 확인한 것이다.
도 5는 본 개시내용에 따른 18-nor-ent-pimara-9(11),15-diene-4β-ol의 MAPK 신호경로 억제활성을 측정한 것이다. 구체적으로 18-nor-ent-pimara-9(11),15-diene-4β-ol이 LPS에 의해 유도되는 p38과 ERK1/2의 인산화를 억제하는지 측정한 것이다.
본 개시내용은 하기의 설명에 의하여 모두 달성될 수 있다. 하기의 설명은 본 개시내용의 구체예를 기술하는 것으로 이해되어야 하며, 본 개시내용이 반드시 이에 한정되는 것은 아니다. 또한, 첨부된 도면은 이해를 돕기 위한 것으로, 본 개시내용이 이에 한정되는 것이 아님을 이해하여야 한다.
본 개시내용의 실시예는 다양한 변경을 가할 수 있고, 다양한 형태로 실시할 수 있다. 따라서, 본 개시내용의 사상 및 기술적 특징의 동일성이 인정되는 범위의 모든 변경, 균등물 내지 대체물을 포함하는 것으로 이해하여야 한다.
달리 명시하지 않았더라도, 본 개시내용에 사용된 모든 숫자는 모든 경우마다 “약”이란 용어가 수식하고 있는 것으로 이해되어야 한다. 수식어 “약”은 통상적으로 인식되는 대략적으로의 의미를 갖도록 하기 위한 것인데, 이는 수식된 값의 특정 퍼센트 이내의 의미로서 더욱 정확하게 해석될 수 있고, 보다 구체적으로는 ±20%, ±10%, ±5%, ±2% 또는 ±1% 또는 그 미만을 의미할 수 있다.
본 개시내용에 사용되는 용어는 하기와 같이 정의될 수 있다. 본 개시내용에 정의되어 있지 않은 용어에 대하여는 본 발명이 속한 기술분야에서 통상적으로 이해되거나 습득될 수 있는 범주로 정의될 수 있다.
“알킬기”는 직쇄 또는 분지쇄의 포화 탄화수소에서 유래되는 1가의 그룹을 의미할 수 있으며, 치환되거나 치환되지 않을 수 있다. 이러한 탄소수 1 내지 6인 알킬기의 예로는 메틸(Me, -CH3), 에틸(Et, -CH2CH3), 1-프로필(n-Pr, n-프로필, -CH2CH2CH3), 2-프로필(i-Pr, i-프로필, -CH(CH3)2), 1-부틸(n-Bu, n-부틸, -CH2CH2CH2CH3), 2-메틸-1-프로필(i-Bu, i-부틸, -CH2CH(CH3)2), 2-부틸(s-Bu, s-부틸, -CH(CH3)CH2CH3), 2-메틸-2-프로필(t-Bu, t-부틸, -C(CH3)3), 1-펜틸(n-펜틸, -CH2CH2CH2CH2CH3), 2-펜틸(-CH(CH3)CH2CH2CH3), 3-펜틸(-CH(CH2CH3)2), 2-메틸-2-부틸(-C(CH3)2CH2CH3), 3-메틸-2-부틸(-CH(CH3)CH(CH3)2), 3-메틸-1-부틸(-CH2CH2CH(CH3)2), 2-메틸-1-부틸(-CH2CH(CH3)CH2CH3), 1-헥실(-CH2CH2CH2CH2CH2CH3), 2-헥실(-CH(CH3)CH2CH2CH2CH3),3-헥실(-CH(CH2CH3)(CH2CH2CH3)), 2-메틸-2-펜틸(-C(CH3)2CH2CH2CH3), 3-메틸-2-펜틸(-CH(CH3)CH(CH3)CH2CH3), 4-메틸-2-펜틸(-CH(CH3)CH2CH(CH3)2), 3-메틸-3-펜틸(-C(CH3)(CH2CH3)2), 2-메틸-3-펜틸(-CH(CH2CH3)CH(CH3)2), 2,3-디메틸-2-부틸(-C(CH3)2CH(CH3)2) 및 3,3-디메틸-2-부틸(-CH(CH3)C(CH3)3이 있지만 이는 예시일 뿐, 본 개시내용의 알킬기는 탄소수 1 내지 6에 한정되지 않는다.
“알콕시기”는 -O-알킬기를 갖는 1가의 그룹으로서, 직쇄, 분지쇄 또는 사이클릭 구조를 모두 포함하는 것으로 이해될 수 있다. 알킬기에 대해서는 앞서 정의한 알킬기를 모두 포함하며, 알킬기가 치환되거나 치환되지 않을 수 있다. 이러한 알콕시기의 예로는 메톡시, 에톡시, 프로폭시, 부톡시, 이소부톡시 등을 들 수 있지만, 이에 한정되는 것은 아니다.
본 개시내용의 일 구체예에 의하면,
하기 화학식 1로 표시되는 화합물, 이의 이성질체, 용매화물 또는 약제학적으로 허용가능한 염이 제공될 수 있다.
다른 구체예에 의하면,
하기 화학식 1로 표시되는 화합물, 이의 이성질체, 용매화물 또는 약제학적으로 허용가능한 염을 포함하는 항염증성 조성물이 제공될 수 있다.
[화학식 1]
Figure 112019122761373-pat00002
상기 R1, R2, R3, R4 및 R5는 각각 독립적으로 수소, 수산화기, 탄소수 1 내지 6개의 알킬기, 탄소수 1 내지 6개의 알콕시기, 카보닐기(-CO-R6), 카복실기(-CO-OR6) 또는 탄소수 1 내지 6의 알코올기일 수 있다. 상기 R6는 수소, 수산화기, 탄소수 1 내지 6개의 알킬기, 탄소수 1 내지 6개의 알콕시기일 수 있다. 구체적으로 상기 R1, R2, R3, R4 및 R5는 각각 독립적으로 수소, 수산화기, 메틸기, 포름기 또는 아세틸기일 수 있다.
특정 구체예에 의하면, 하기 화학식 2로 표시되는 화합물, 이의 이성질체, 용매화물 또는 약제학적으로 허용가능한 염일 수 있다.
다른 구체예에 의하면, 하기 화학식 2로 표시되는 화합물, 이의 이성질체, 용매화물 또는 약제학적으로 허용가능한 염을 포함하는 항염증성 조성물이 제공될 수 있다.
[화학식 2]
Figure 112019122761373-pat00003
상기 화학식 2로 표시되는 화합물은 18-nor-ent-pimara-9(11),15-diene-4β-ol로 지칭될 수 있다.
본 개시내용에 다른 구체예에 의하면,
상기 화학식 1 및 2로 표시되는 화합물은 독활(Aralia cordata) 추출물로부터 분리되어 얻어진 것일 수 있다. 상기 독활은 땃두릅(땅두릅)의 지하부일 수 있다. 구체적으로 땃두릅(땅두릅)의 뿌리일 수 있다.
상기 독활 추출물은 용매로 추출한 것일 수 있다. 상기 용매는 추출수행시 액체상태를 유지하여 독활로부터 유효성분을 추출할 수 있는 용매면 충분할 것이다. 구체적으로 물, 알코올, 염화 탄화수소, 아세토니트릴, 테트라하이드로퓨란, 알킬(메틸 또는 에틸) 아세테이트 및 아세톤으로 이루어진 군에서 선택되는 적어도 하나일 수 있으나 이에 한정되지 않는다. 구체적으로 용매는 친수성 용매일 수 있다. 상기 친수성 용매는 물, 탄소수 1 내지 10의 알코올이거나 이들의 혼합물일 수 있다. 상기 알코올은 보다 구체적으로 탄소수 1 내지 4의 알코올일 수 있다. 상기 알코올은 메탄올, 에탄올, n-프로판올, 이소프로판올, n-부탄올, sec-부탄올, 이소부탄올, tert-부탄올 또는 이들의 혼합물일 수 있다.
본 개시내용의 일 구체예에 의하면,
상기 용매는 물, 탄소수 1 내지 4의 알코올 또는 이들의 혼합물인 알코올 수용액일 수 있다. 예를 들어 물 100% 로 추출할 수 있고, 예를 들어 메탄올 또는 에탄올 100%로 추출할 수 있다. 상기 알코올 수용액은 5%(v/v), 10%(v/v), 20%(v/v), 30%(v/v), 40%(v/v), 50%(v/v), 60%(v/v), 70%(v/v), 80%(v/v), 90%(v/v), 95%(v/v) 및 99%(v/v)로 이루어진 군에서 선택되는 임의의 두 수치로 표현되는 범위의 농도를 가진 알코올 수용액일 수 있다. 구체적으로 상기 알콜 수용액의 알코올 농도는 약 1 내지 약 99%(v/v), 예를 들면, 약 10 내지 약 99%(v/v), 약 30 내지 약 95%(v/v), 약 50 내지 약 90%(v/v), 약 60 내지 약 80%(v/v), 약 50 내지 약 80%(v/v), 약 50 내지 약 70%(v/v), 또는 약 60 내지 약 90%(v/v)일 수 있다. 상기 알코올 수용액은 메탄올 수용액 또는 에탄올 수용액일 수 있다.
상기 추출은 독활에 대하여 상기 추출 용매를 약 1 내지 약 100 (부피/중량)배, 예를 들면, 약 1 내지 약 50 (부피/중량)배, 약 3 내지 약 20 (부피/중량)배, 약 3 내지 약 50 (부피/중량)배, 약 5 내지 약 25 (부피/중량)배, 또는 약 4 내지 약 30배 첨가하는 것을 포함할 수 있다. 예를 들면, 상기 독활의 건조중량 1kg에 대하여 상기 추출 용매를 약 1 내지 약 100 L 첨가하는 것일 수 있고, 예를 들어 약 3 내지 약 15 L를 첨가하는 것일 수 있고, 예를 들어 약 5 내지 약 50 L를 첨가하는 것일 수 있고, 예를 들어 약 10 내지 약 30 L 첨가하는 것일 수 있고, 예를 들어 약 20 내지 약 30 내지 약 75 L 첨가하는 것일 수 있고, 예를 들어 약 1 내지 약 15 L 첨가하는 것일 수 있다.
상기 추출은 가온된 액체 추출, 가압된 액체 추출 (pressurized liquid extraction: PLE), 초음파 도움을 받은 추출 (microwave assisted extraction: MAE), 아임계 추출 (subcritical extraction: SE), 또는 이들의 조합에 의하여 수행될 수 있다. 상기 아임계 추출은 아임계 수추출 (subcritical water extraction: SWE)일 수 있다. 아임계 수추출은 초가열된 수추출 (superheated water extraction) 또는 가압된 열수 추출 (pressurized hot water extraction: PHWE)라고도 한다. 상기 가온된 액체 추출은 환류 추출일 수 있다.
상기 추출은 1℃, 10℃, 20℃, 30℃, 40℃, 50℃, 60℃, 70℃, 80℃, 90℃, 100℃ 중 선택되는 임의의 두 개의 수치의 범위로 표시될 수 있다. 구체적으로 예를 들어 약 1℃ 내지 약 100℃, 예를 들어, 약 10℃ 내지 약 80℃, 약 10℃ 내지 약 70℃, 약 10℃ 내지 약 30℃, 약 10℃ 내지 약 50℃, 약 20℃ 내지 약 70℃, 약 20℃ 내지 약 60℃, 약 30℃ 내지 약 50℃에서 수행하는 것일 수 있다.
상기 추출 시간은 예를 들어 약 0.1 시간 내지 약 2개월, 예를 들어 약 0.1 시간 내지 약 10일, 예를 들어 약 0.1 시간 내지 약 3일, 예를 들어 약 0.1 시간 내지 약 1일, 예를 들어 약 0.1 시간 내지 12시간, 예를 들어 약 0.1 시간 내지 약 6시간, 예를 들어 약 0.1 시간 내지 약 1시간, 예를 들어 약 0.5 시간 내지 약 2개월, 예를 들어 약 1 시간 내지 약 1개월, 예를 들어 약 1 시간 내지 약 15일, 에를 들어 약 1 시간 내지 약 10일, 에를 들어 약 1 시간 내지 약 5일, 예를 들어 약 1 시간 내지 약 3일, 예를 들어 약 1 시간 내지 약 2일, 예를 들어 약 1 시간 내지 약 1일, 예를 들어 약 3 시간 내지 약 1개월, 예를 들어 약 5 시간 내지 약 15일, 예를 들어 약 5 시간 내지 약 10일, 예를 들어 약 5 시간 내지 약 5일, 예를 들어 약 5 시간 내지 약 3일, 예를 들어 약 5 시간 내지 약 2일, 예를 들어 약 5 시간 내지 약 1일, 예를 들어 약 10 시간 내지 약 1개월, 예를 들어 약 10 시간 내지 약 15일, 예를 들어 약 10 시간 내지 약 10일, 예를 들어 약 10 시간 내지 약 5일, 예를 들어 약 10 시간 내지 약 3일, 또는 예를 들어 약 10 시간 내지 약 2일일 수 있다.
상기 추출은 1 내지 5회 반복될 수 있다. 상기 반복은 추출이 1회 이상 진행되고, 추출액을 여과하고 남은 독활을 다시 추출용매에 침지시켜 추출을 진행하는 것을 의미할 수 있다.
상기 독활추출물은 조추출물, 분획물 또는 그 조합일 수 있다. 상기 조추출물은 상기 독활을 추출 용매와 일정조건에서 접촉시켜 얻어지는 것으로서 많은 성분을 포함하고 특정성분만을 분리하지 않은 것을 의미할 수 있다. 상기 분획물은 용매 분획화 (fractionation)에 의하여 얻어진 것일 수 있다. 상기 용매 분획화는 조추출물을 용매와 혼합하고 상기 용매에 존재하는 물질을 분리하는 것일 수 있다. 상기 분획은 1 내지 5회 반복될 수 있다. 상기 분획물은 상기 독활 추출물을 물에 현탁시킨 후 헥산, 디클로로메탄, 에틸아세테이트 및 n-부탄올로 순차적으로 분획화하여 얻어진 헥산 분획물, 디클로로메탄 분획물, 에틸아세테이트 분획물, n-부탄올 분획물, 물 분획물 또는 이들의 조합일 수 있다. 구체적으로 헥산 분획물 또는 디클로로메탄 분획물이거나 이들의 조합일 수 있다.
본 개시내용의 다른 구체예에 의하면,
상기 분획물은 추출물이나 분획물에 대하여 크로마토그래피를 수행하여 세분화시킨 조성물일 수 있다. 구체적으로 예를 들어 극성에 따른 크로마토그래피일 수 있고, 예를 들어 분자량에 따른 크로마토그래피일 수 있고, 또는 예를 들어 이들 조합에 따른 크로마토그래피일 수 있다. 보다 구체적으로 섞이지 않는 서로 다른 용매들에 의한 액체-액체 크로마토그래피에 의한 분획물일 수 있고, 점차적인 용매의 극성변화에 의해 컬럼을 통과시켜 나누는 컬럼 크로마토그래피에 의한 분획물일 수 있고, 다공성 입자로 구성된 컬럼을 통과시켜 분자크기에 따른 분획물일 수 있으나 이에 한정되지 않는다. 또는, 상기 추출물이나 분획물에 대해 컬럼크로마토그래피를 이용하여 서로 다른 극성의 용매를 점차적으로 비율을 달리하여 얻어진 또 다른 분획물일 수 있다. 구체적으로 서로 다른 두 용매 A와 B에 있어서 A:B의 비율이 약 0:100, 1:100, 1:90, 1:80, 1:60, 1:50, 1:40, 1:30, 1:20, 1:10, 1:7, 1:5, 1:3, 1:2, 1:1 및 1:0으로 단계적으로 극성변화를 일으키는 혼합물에 의한 컬럼 크로마토그래피를 이용하여 얻어진 분획물일 수 있다. 예를 들어 A는 에틸아세테이트이고 B는 n-헥산일 수 있다. 상기 컬럼 크로마토그래피의 충진제는 순상 또는 역상 실리카겔일 수 있고, 다공성 입자를 가진 충진제일 수 있다. 상기 크로마토그래피를 서로 다른 조건으로 1 내지 5회 수행할 수 있다. 상기 크로마토그래피는 MPLC일 수 있고, 또는 HPLC일 수 있다. 상기 HPLC는 반분취(semi-preparative) HPLC일 수 있다.
본 개시내용의 일 구체예에 의하면,
상기 화학식 1 또는 2로 표시된 화합물, 이의 이성질체, 용매화물 또는 약제학적으로 허용되는 염을 포함한 조성물은 항염증성 효능이 우수하여 과염증반응에 의한 염증질환을 예방, 치료 또는 개선할 수 있다.
특정이론에 제한되는 것은 아니나, 상기 조성물은 세포내 염증인자인 NO(nitric oxide)의 생성을 억제함으로써 염증질환을 예방, 치료 또는 개선할 수 있다. 구체적으로 상기 조성물은 과도한 NO 생성을 초래하는 생체내 신호인자인 iNOS, COX-2, IL-1β 및 TNF-α 중 적어도 하나를 저해함으로써 염증질환을 예방, 치료 또는 개선하는 것일 수 있다.
특정이론에 제한되는 것은 아니나, 상기 조성물은 염증활성신호인자인 NF-κB(nuclear factor kappa-B)를 억제함으로써 염증질환을 예방, 치료 또는 개선할 수 있다. 구체적으로 LPS에 의해 IkB의 저하와 IkB의 인산화가 일어나고, 이어서 IkB 인산화형태에 의해 NF-κB가 핵내로 진입하여 염증반응을 유도하게 할 수 있는데, 상기 조성물은 IkB 인산화를 저해시킴으로써 NF-κB를 억제하여 염증질환을 예방, 치료 또는 개선할 수 있다.
특정이론에 제한되는 것은 아니나, 상기 조성물은 MAPK 신호활성을 저해함으로써 염증질환을 예방, 치료 또는 개선할 수 있다. 구체적으로 MAPK 신호에서 p38 단백질의 인산화와 ERK1/2 인산화를 저해함으로써 MAPK 신호활성을 억제하여 염증질환을 예방, 치료 또는 개선할 수 있다.
따라서 상기 조성물은 NO생성 억제기작, NF-κB 억제기작 및 MAPK 신호활성을 억제기작 중 적어도 하나의 기작을 통해 항염증 효능을 갖는 것일 수 있다. 상기 조성물은 항염증 효능에 의해 염증질환을 예방, 치료 또는 개선하는 것일 수 있다.
본 개시내용에서 염증질환(inflammatory disease)은 염증이 과도하게 발현되어 인체내에서 질환을 초래할 수 있거나 초래한 상태를 의미할 수 있다. 상기 염증성 반응에 의하여 초래되는 질환은 피부염, 결막염, 치주염, 비염, 중이염, 인후염, 편도염, 폐렴, 위궤양, 위염, 크론병, 대장염, 치질, 통풍, 강직성 척추염, 류마티스 열, 루푸스, 섬유근통 (fibromyalgia), 건선관절염, 골관절염, 류마티스 관절염, 견관절주위염, 건염, 건초염, 건주위염, 근육염, 간염, 방광염, 신장염, 쇼그렌 증후군(sjogren's syndrome), 다발성 경화증 및 급성 및 만성 염증 질환으로 이루어지는 군으로부터 선택되는 적어도 하나일 수 있으나 이에 한정되지 않는다. 상기 피부염은 아토피성 피부염, 접촉성 피부염 또는 지루성 피부염인 것일 수 있다.
본 개시내용의 일 구체예에 따르면,
상기 화학식 1 또는 2로 표시된 화합물, 이의 이성질체, 용매화물 또는 약제학적으로 허용되는 염은 상기 조성물 총 중량에 대하여 0.001 중량%, 0.01 중량%, 0.05 중량%, 0.1 중량%, 0.5 중량%, 1.0 중량%, 3 중량%, 5 중량%, 10 중량%, 20 중량%, 30 중량%, 40 중량%, 50 중량%, 60 중량%, 70 중량%, 80 중량% 및 90 중량% 중 선택되는 임의의 두 수치의 범위만큼 포함될 수 있다. 예를 들면, 조성물 총 중량에 대하여 약 0.001 중량% 내지 약 95 중량%, 약 0.01 중량% 내지 약 90 중량%, 약 0.01 중량% 내지 80 중량%, 약 0.01 중량% 내지 70 중량%, 약 0.01 중량% 내지 60 중량%, 약 0.01 중량% 내지 약 50 중량%, 약 0.01 중량% 내지 약 30 중량%, 약 0.05 중량% 내지 25 중량%, 약 0.05 중량% 내지 15 중량%, 약 0.05 중량% 내지 5 중량%, 약 0.1 중량% 내지 약 20 중량%, 약 1.0 중량% 내지 10 중량%, 약 1.0 중량% 내지 약 5 중량%, 약 5 중량% 내지 약 50 중량%, 약 5 중량% 내지 약 40 중량% 또는 약 10 중량% 내지 약 50 중량%의 상기 화학식 1 또는 2로 표시된 화합물, 이의 이성질체, 용매화물 또는 약제학적으로 허용되는 염을 포함할 수 있다.
본 개시내용의 특정 구체예에 의하면, 상기 조성물은 약학적 조성물일 수 있다. 상기 조성물에 약제학적으로 허용 가능한 담체를 포함할 수 있다. 약제학적으로 허용되는 담체는 경구 투여 시에는 결합제, 활탁제, 붕해제, 부형제, 가용화제, 분산제, 안정화제, 현탁화제, 색소 및 향료로 이루어진 군에서 선택되는 적어도 하나를 사용할 수 있으나 이에 한정되는 것은 아니다. 주사제의 경우에는 완충제, 보존제, 무통화제, 가용화제, 등장제 또는 안정화제 등을 혼합하여 사용할 수 있으며, 국소투여용의 경우에는 기제, 부형제, 윤활제 또는 보존제 등을 혼합하여 사용할 수 있다.
본 개시내용의 약학적 조성물의 제형은 상술한 바와 같은 약학적으로 허용되는 담체와 혼합하여 다양하게 제조될 수 있다. 예를 들어, 경구 투여시에는 정제, 트로키, 캡슐, 엘릭서(elixir), 서스펜션, 시럽, 웨이퍼 등의 형태로 제조할 수 있으며, 주사제의 경우에는 단위 투약 앰플 또는 다수회 투약 형태로 제조할 수 있고, 또한 용액, 현탁액, 정제, 캡슐, 서방형 제제 등으로 제형할 수 있다.
한편, 제제화에 적합한 담체, 부형제 또는 희석제의 예로는, 락토즈, 덱스트로즈, 수크로즈, 솔비톨, 만니톨, 자일리톨, 에리스리톨, 말디톨, 전분, 아카시아 고무, 알지네이트, 젤라틴, 칼슘 포스페이트, 칼슘 실리케이트, 셀룰로즈, 메틸 셀룰로즈, 미정질 셀룰로즈, 폴리비닐피롤리돈, 물, 메틸하이드록시벤조에이트, 프로필하이드록시벤조에이트, 탈크, 마그네슘 스테아레이트 또는 광물유 등이 사용될 수 있다. 또한, 충진제, 항응집제, 윤활제, 습윤제, 향료, 유화제, 방부제 등을 추가로 포함할 수 있다.
본 개시내용에 따른 약학적 조성물의 투여 경로는 이들로 한정되는 것은 아니지만 구강, 정맥 내, 근육 내, 동맥 내, 골수 내, 경막 내, 심장 내, 경피, 피하, 복강 내, 비강 내, 장관, 국소, 설하 또는 직장이 포함된다. 경구 또는 비경구 투여가 바람직하다. 상기 투여는 전신적으로 또는 국부적으로 투여될 수 있다.
본 개시내용에서, "비경구"는 피하, 피내, 정맥내, 근육내, 관절내, 활액낭내, 흉골내, 경막내, 병소내 및 두개골내 주사 또는 주입기술을 포함한다. 본 개시내용의 약학적 조성물은 또한 직장 투여를 위한 좌제의 형태로 투여될 수 있다. 상기 투여는 독활 추출물 또는 그 분획물을 1회 투여시 0.1 mg 내지 1,000 mg, 예를 들면, 0.1 mg 내지 500 mg, 0.1mg 내지 100 mg, 0.1 mg 내지 50 mg, 0.1 mg 내지 25 mg, 1 mg 내지 1,000 mg, 1 mg 내지 500 mg, 1 mg 내지 100 mg, 1 mg 내지 50 mg, 1 mg 내지 25 mg, 5mg 내지 1,000 mg, 5 mg 내지 500 mg, 5 mg 내지 100 mg, 5 mg 내지 50 mg, 5 mg 내지 25 mg, 10mg 내지 1,000 mg, 10 mg 내지 500 mg, 10 mg 내지 100 mg, 10 mg 내지 50mg, 또는 10 mg 내지 25 mg을 투여하는 것일 수 있다.
상기 조성물의 투여량은 예를 들어, 성인 기준으로 약 0.001 mg/kg 내지 약 100 mg/kg일 수 있고, 예를 들어 약 0.01 mg/kg 내지 약 10 mg/kg일 수 있고, 또는 에를 들어 약 0.1 mg/kg 내지 약 1 mg/kg 일 수 있다. 상기 투여횟수는 1 일 1회, 1 일 다회, 1주 2 내지 3회, 1달 1 내지 4회 또는 1년 1 내지 12회 투여될 수 있다.
본 개시내용에 따르면, 상기 약학적 조성물에 유사질환에 대한 예방, 개선 또는 치료용 조성물이 더 포함될 수 있다. 구체적으로, 항염증성 조성물이 더 포함될 수 있고, 항산화 조성물이 더 포함될 수 있고, 간기능 개선용 조성물이 더 포함될 수 있고, 위장관 보호용 조성물이 더 포함될 수 있으나, 이에 한정되지 않는다.
본 개시내용의 다른 구체예에 의하면,
상기 화학식 1 또는 2로 표시된 화합물, 이의 이성질체, 용매화물 또는 약제학적으로 허용되는 염을 포함하는 조성물은 화장료 조성물일 수 있다. 상기 화장료 조성물은 화장품학적으로, 허용가능한 부형제 또는 담체를 더 포함할 수 있다. 상기 담체는 부형제, 붕해제, 결합제, 활택제 또는 그 조합일 수 있다. 상기 부형제는 미결정 셀룰로오즈, 유당, 저치환도 히드록시셀룰로오즈 또는 그 조합일 수 있다. 상기 붕해제는 전분글리콜산 나트륨, 무수인산일수소 칼슘 또는 그 조합일 수 있다. 상기 결합제는 폴리비닐피롤리돈, 저치환도 히드록시프로필셀룰로오즈, 히드록시프로필셀룰로오즈 또는 그 조합일 수 있다. 상기 활택제는 스테아린산 마그네슘, 이산화규소, 탈크, 또는 그 조합일 수 있다.
상기 화장료 조성물은 비경구 투여 제형으로 제형화될 수 있다. 비경구 투여 제형은 주사제, 또는 피부외용제일 수 있다. 피부외용제는 크림, 겔, 연고, 피부 유화제, 피부 현탁액, 경피전달성 패치, 약물 함유 붕대, 로션 또는 그 조합일 수 있다. 상기 피부외용제는 통상 화장품이나 의약품 등의 피부외용제에 사용되는 성분, 예를 들면 수성성분, 유성성분, 분말성분, 알코올류, 보습제, 증점제, 자외선흡수제, 미백제, 방부제, 산화방지제, 계면활성제, 향료, 색제, 각종 피부 영양제등을 필요에 따라서 적절하게 배합할 수 있다. 상기 피부외용제는, 에데트산이나트륨, 에데트산삼나트륨, 시트르산나트륨, 폴리인산나트륨, 메타인산나트륨, 글루콘산 등의 금속봉쇄제, 카페인, 탄닌, 벨라파밀, 감초추출물, 글라블리딘, 칼린의 과실의 열수추출물, 각종 생약, 아세트산토코페롤, 글리틸리틴산, 트라넥삼산 및 그 유도체 또는 그 염등의 약제, 비타민 C, 아스코르브산 인산마그네슘, 아스코르브산글루코시드, 알부틴, 코지산, 글루코스, 프룩토스, 트레할로스 등의 당류등도 적절하게 배합할 수 있다.
본 개시내용의 다른 구체예에 따르면,
조성물은 화장수(스킨로션), 스킨소프너, 스킨토너, 아스트린젠트, 로션, 밀크로션, 모이스쳐 로션, 영양 로션, 마사지크림, 영양 크림, 모이스쳐 크림, 핸드크림, 파운데이션, 에센스, 영양 에센스, 팩, 비누, 클렌징폼, 클렌징로션, 클렌징크림, 바디로션, 바디클렌저, 현탁액, 겔, 분말, 페이스트, 마스크팩 또는 시트 또는 에어로졸 조성물을 포함하는 제형으로 제조될 수 있다. 이러한 제형의 조성물은 당해 분야에서 통상적인 방법에 따라 제조될 수 있다. 상기 화장료 조성물은 보존제, 안정화제, 계면활성제, 용해제, 보습제, 에몰리언트제, 자외선 흡수제, 방부제, 살균제, 산화 방지제, pH 조정제, 유기 및 무기 안료, 향료, 냉감제 또는 제한제 등을 더 포함할 수 있다. 상기 보습제 등의 추가 성분의 배합량은 본 개시내용의 목적 및 효과를 손상시키지 않는 범위 내에서 당업자가 용이하게 선정 가능하며, 그 배합량은 조성물 전체 중량을 기준으로 약 0.001 내지 약 10 중량%, 구체적으로 약 0.01 내지 약 3 중량%일 수 있다.
본 개시내용의 일 구체예에 의하면,
상기 화학식 1 또는 2로 표시된 화합물, 이의 이성질체, 용매화물 또는 약제학적으로 허용되는 염을 포함하는 조성물은 식품 조성물일 수 있다. 상기 조성물에 통상의 식품조성물과 같이 여러 가지 향미제 또는 천연 탄수화물 등을 추가 성분으로서 함유할 수 있다. 상술한 천연 탄수화물의 예는 모노사카라이드, 예를 들어, 포도당, 과당 등; 디사카라이드, 예를 들어 말토스, 슈크로스 등; 및 폴리사카라이드, 예를 들어 덱스트린, 시클로덱스트린 등과 같은 통상적인 당, 및 자일리톨, 소르비톨, 에리트리톨 등의 당알콜이다. 상술한 향미제는 천연 향미제 (타우마틴), 스테비아 추출물(예를 들어 레바우디오시드 A, 글리시르히진 등) 및 합성 향미제 (사카린, 아스파르탐 등)를 유리하게 사용할 수 있다.
상기 식품 조성물은 상기 약제학적 조성물과 동일한 방식으로 제제화되어 기능성 식품으로 이용하거나, 각종 식품에 첨가할 수 있다. 상기 식품 조성물을 첨가할 수 있는 식품으로는 예를 들어, 음료류, 육류, 초코렛, 식품류, 과자류, 피자, 라면, 기타 면류, 껌류, 사탕류, 아이스크림류, 알코올 음료류, 비타민 복합제 및 건강보조식품류 등이 있다.
다른 구체예에 의하면,
상기 식품 조성물은 여러 가지 영양제, 비타민, 광물(전해질), 합성 풍미제 및 천연 풍미제 등의 풍미제, 착색제 및 중진제 (치즈, 초콜릿 등), 펙트산 및 그의 염, 알긴산 및 그의 염, 유기산, 보호성 콜로이드 증점제, pH 조절제, 안정화제, 방부제, 글리세린, 알콜, 탄산음료에 사용되는 탄산화제 등을 더 포함할 수 있다. 그밖에 본 발명의 식품 조성물은 천연 과일 쥬스 및 과일 쥬스 음료 및 야채 음료의 제조를 위한 과육을 더 포함할 수 있다.
상기 화학식 1 또는 2로 표시된 화합물, 이의 이성질체, 용매화물 또는 약제학적으로 허용되는 염을 포함하는 조성물은 천연물로부터 추출될 물질로서 부작용이 거의 없으므로 장기간 복용시에도 안심하고 사용할 수 있다.
상기 식품조성물을 포함하는 염증질환 예방, 개선 또는 치료용 건강기능식품을 제공할 수 있다. 상기 건강기능식품은 정제, 캅셀, 분말, 과립, 액상, 환 등의 형태로 제조 및 가공할 수 있다. “건강기능식품”이라 함은 건강기능식품에 관한 법률 제6727호에 따른 인체에 유용한 기능성을 가진 원료나 성분을 사용하여 제조 및 가공한 식품을 말하며, 인체의 구조 및 기능에 대하여 영양소를 조절하거나 생리학적 작용 등과 같은 보건 용도에 유용한 효과를 얻을 목적으로 섭취하는 것을 의미한다. 상기 건강기능식품은 통상의 식품 첨가물을 포함할 수 있으며, 식품 첨가물로서의 적합 여부는 다른 규정이 없는 한, 식품의약품안전청에 승인된 식품 첨가물 공전의 총칙 및 일반시험법 등에 따라 해당 품목에 관한 규격 및 기준에 의하여 판정한다. 상기 “식품 첨가물 공전”에 수재된 품목으로는 예를 들어, 케톤류, 글리신, 구연산칼슘, 니코틴산, 계피산 등의 화학적 합성물; 감색소, 감초추출물, 결정셀룰로오스, 고량색소, 구아검 등의 천연첨가물; L-글루타민산 나트륨제제, 면류첨가알칼리제, 보존료제제, 타르색소제제 등의 혼합제제류 등을 들 수 있다. 예를 들어, 정제 형태의 건강기능식품은 상기 화학식 1 또는 2로 표시된 화합물, 이의 이성질체, 용매화물 또는 약제학적으로 허용되는 염을 포함하는 조성물과 부형제, 결합제, 붕해제 및 다른 첨가제와 혼합한 혼합물을 통상의 방법으로 과립화한 다음, 활택제 등을 넣어 압축성형하거나, 상기 혼합물을 직접 압축 성형할 수 있다. 또한 상기 정제 형태의 건강기능식품은 필요에 따라 교미제 등을 함유할 수도 있다.
예를 들어, 캅셀 형태의 건강기능식품 중 경질 캅셀제는 통상의 경질 캅셀에 상기 화학식 1 또는 2로 표시된 화합물, 이의 이성질체, 용매화물 또는 약제학적으로 허용되는 염을 포함하는 조성물과 부형제 등의 첨가제와 혼합한 혼합물을 충진하여 제조할 수 있으며, 연질 캅셀제는 상기 화학식 1 또는 2로 표시된 화합물, 이의 이성질체, 용매화물 또는 약제학적으로 허용되는 염을 포함하는 조성물과 부형제 등의 첨가제와 혼합한 혼합물을 젤라틴과 같은 캅셀기제에 충진하여 제조할 수 있다. 상기 연질 캅셀제는 필요에 따라 글리세린 또는 소르비톨 등의 가소제, 착색제, 보존제 등을 함유할 수 있다.
예를 들어, 환 형태의 건강기능식품은 상기 화학식 1 또는 2로 표시된 화합물, 이의 이성질체, 용매화물 또는 약제학적으로 허용되는 염을 포함하는 조성물과 부형제, 결합제, 붕해제 등을 혼합한 혼합물을 기존에 공지된 방법으로 성형하여 조제할 수 있으며, 필요에 따라 백당이나 다른 제피제로 제피할 수 있으며, 또는 전분, 탈크와 같은 물질로 표면을 코팅할 수도 있다.
예를 들어 과립 형태의 건강기능식품은 상기 화학식 1 또는 2로 표시된 화합물, 이의 이성질체, 용매화물 또는 약제학적으로 허용되는 염을 포함하는 조성물과 부형제, 결합제, 붕해제 등을 혼합한 혼합물을 기존에 공지된 방법으로 입상으로 제조할 수 있으며, 필요에 따라 착향제, 교미제 등을 함유할 수 있다.
상기 건강기능식품은 음료류, 육류, 초코렛, 식품류, 과자류, 피자, 라면, 기타 면류, 껌류, 사탕류, 아이스크림류, 알코올 음료류, 비타민 복합제 및 건강보조식품류 등 일 수 있다.
실시예 1-1 : 18-nor-ent-pimara-9(11),15-diene-4β-ol의 성분분리
도 1에서 도시된 바와 같이, 건조된 독활분말을 70% 에탄올(EtOH)로 실온에서 침적시켜 2회 추출하였으며, filter paper로 여과 후 감압농축기(BuChi, 50L)를 이용하여 용매를 제거하여 EtOH 추출물을 얻었다. 독활 추출물을 n-hexane, CH2Cl2, EtOAc, n-BuOH를 사용하여 순차적 용매분획을 수행하였다. 독활추출물의 n-헥산분획물에 대하여 각종 레진을 이용하여 open column chromatography와 MPLC, recycling 및 preparative HPLC를 반복적으로 수행하여 18-nor-ent-pimara-9(11),15-diene-4β-ol를 분리정제 하였다.
실시예 1-2 : 18-nor-ent-pimara-9(11),15-diene-4β-ol의 구조동정
700 MHz NMR(cryo probe)을 이용하여 분석한 NMR data (1H-, 13C-NMR, 1H-1H COSY, HSQC, HMBC)를 통한 프로톤과 카본의 연결관계에 대한 정보 및 Mass data를 이용한 molecular formula의 확인하여 구조를 규명하였다.
Figure 112019122761373-pat00004
 18-nor-ent-Pimara-9(11),15-diene-4β-ol
White amorphous powder
1H-NMR (700 MHz, CDCl3) δ 5.82 (1H, dd, J = 17.5, 10.5 Hz, H-15), 5.38 (1H, qui, J = 2.1 Hz, H-11), 4.93 (1H, dd, J = 17.5, 2.1 Hz, Ha-16), 4.87 (1H, dd, J = 10.5, 2.1 Hz, Hb-16), 2.36 (1H, m, H-8), 2.03 (1H, m, Ha-12), 1.99 (1H, m, Ha-6), 1.82 (1H, m, Ha-1), 1.79 (1H, m, Ha-3), 1.77 (1H, m, Hb-12), 1.74 (1H, m, H-5), 1.73 (1H, m, Ha-7), 1.60 (1H, dt, J = 7.0, 3.5 Hz, Ha-2), 1.56 (1H, m, Hb-6), 1.47 (1H, dt, J = 14.0, 3.5 Hz, Hb-2), 1.41 (1H, dq, J = 12.6, 2.1 Hz, Ha-14), 1.36 (1H, m, Ha-3), 1.26 (1H, m, Hb-7), 1.24 (1H, m, Hb-1), 1.21 (3H, s, H-19), 1.04 (1H, m, Hb-14), 1.03 (3H, s, H-20), 0.97 (3H, s, H-17); 13C-NMR (175 MHz, CDCl3) δ 150.5 (C-9), 150.3 (C-15), 116.3 (C-11), 109.1 (C-16), 73.2 (C-4), 47.3 (C-5), 43.1 (C-3), 41.7 (C-14), 40.3 (C-1), 38.7 (C-10), 37.6 (C-12), 34.9 (C-13), 29.4 (C-8), 26.5 (C-7), 24.3 (C-20), 23.4 (C-19), 22.4 (C-17), 20.9 (C-2), 17.5 (C-6); ESI-MS m/z 297 [M + Na]+.
실시예 2 : 18-nor-ent-pimara-9(11),15-diene-4β-ol의 항염증효능 측정
실시예 2-1 : 18-nor-ent-pimara-9(11),15-diene-4β-ol의 NO 생성 억제활성
18-nor-ent-Pimara-9(11),15-diene-4β-ol의 항염증 활성을 측정하기 위하여, LPS(lipopolysaccharide)에 의해 활성화된 RAW 264.7 세포에 상기 화합물을 처리여부에 따라 염증인자인 산화질소(NO) 생성 억제 여부를 관찰하였다. 구체적으로 12-웰플레이트에 RAW 264.7세포를 밤새 배양시킨다. 18-nor-ent-pimara-9(11),15-diene-4β-ol를 일정 농도로 전처리하여 6시간을 배양하고, LPS 1μg/ml로 함께 처리하여 18시간 배양한다. NO 농도는 Griess 어세이를 통해 확인하였다. 상층액 50μl에 Griess 용액 50μl를 섞고 실온에서 10분간 반응시킨다. 10분 후 540nm에서 흡광도를 측정하여 NO생성정도를 확인하였다.
도 3에서 확인할 수 있듯이, 18-nor-ent-pimara-9(11),15-diene-4β-ol는 LPS에 의해 활성화되는 NO 생성을 억제하는 것을 확인하였다(도 3A). 또한 MTT 어세이를 통해 세포독성을 확인했으나 가장 강한 농도인 20μM에서도 세포독성이 발견되지 않는 바, 세포사멸에 의해 NO생성을 억제하는 것이 아님을 확인하였다(도 3B). RT-PCR과 웨스턴블랏을 통해 NO 생성을 억제하는 기전을 확인하였다. 도 3C에서 확인할 수 있듯이, 18-nor-ent-pimara-9(11),15-diene-4β-ol는 NO 생성과 관련한 COX-2, iNOS, TNF-α와 IL-1β의 발현을 억제하였다.
실시예 2-2 : 18-nor-ent-pimara-9(11),15-diene-4β-ol의 NF-κB 억제활성
18-nor-ent-Pimara-9(11),15-diene-4β-ol의 항염증 활성을 측정하기 위하여, LPS(lipopolysaccharide)에 의해 활성화된 RAW 264.7 세포의 IκB-α의 감소와 인산화를 웨스턴블랏으로 측정하였다. NF-κB는 IκB-α단백질에 의해 저해된다. 따라서 IκB-α 단백질이 인산화를 막음으로써 NF-κB를 억제할 수 있다. 도 4A에서 볼 수 있듯이, 18-nor-ent-pimara-9(11),15-diene-4β-ol를 처리하지 않고 LPS 처리시 30분만에 IκB-α가 발현되었다. 그러나 18-nor-ent-pimara-9(11),15-diene-4β-ol를 일정 농도로 전처리한 경우, 농도의존적으로 IκB-α의 수준이 증가하였고, IκB-α의 인산화가 억제되었다.
한편 NF-κB는 다수의 subunit으로 이루어져있다. 특히 NF-κB의 염증활성과 관련하여 RelA(p65)가 주요한 역할을 한다. 따라서 p65의 발현을 억제한다면 NF-κB를 억제하여 항염증효과를 얻을 수 있을 것이다. 도 4B에서 확인할 수 있듯이, 18-nor-ent-pimara-9(11),15-diene-4β-ol를 처리하지 않고 LPS 처리시 p65가 발현되었다. 한편 18-nor-ent-pimara-9(11),15-diene-4β-ol를 처리시 LPS에 의해 활성화되는 p65의 발현을 억제하는 것을 확인하였다(도 4B).
실시예 2-3 : 18-nor-ent-pimara-9(11),15-diene-4β-ol의 MAPK 신호억제활성
MAPK 경로는 T 세포, 상피 세포, 수지상 세포 및 대식세포를 포함하는 다양한 세포에서 염증성 사이토카인의 활성화에 중요한 조절제이다. MAPK 신호에 있는 몇몇 결점은 염증성 사이토카인의 전구체를 활성화하는 중요인자이다. 따라서 MAPK 경로를 억제하는 것은 항염증 효능에서 중요하다.
18-nor-ent-Pimara-9(11),15-diene-4β-ol에 의한 MAPK 활성화의 감소 여부를 조사하기 위해, LPS에 의해 활성화된 RAW264.7 세포에서 p38 및 ERK1/2의 인산화발현정도를 측정하여 18-nor-ent-pimara-9(11),15-diene-4β-ol의 효과를 평가하였다. 도 5에 나타낸 바와 같이, LPS만 처리시 ERK1/2 및 p38 인산화가 증가하였다. 그러나 18-nor-ent-pimara-9(11),15-diene-4β-ol을 전처리한 경우 p38 및 ERK1/2의 인산화를 억제하였고, 이는 18-nor-ent-pimara-9(11),15-diene-4β-ol가 LPS에 의해 활성화된 RAW264.7 세포의 p38 및 ERK1/2 활성화를 억제함으로써 염증 반응을 차단하는 효과가 있음을 확인하였다.

Claims (13)

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  3. 화학식 2로 표시되는 것을 특징으로 하는 화합물, 용매화물 또는 약제학적으로 허용되는 염을 포함하는 항염증용 조성물에 있어서,
    상기 항염증은 염증유발 단백질의 발현을 억제하는 것이고,
    상기 염증유발 단백질은 COX-2, iNOS, TNF-α, IL-1β, phospho-IκB-α, p65, phospho-p38 및 phospho-ERK1/2이고,
    상기 화합물은 독활(Aralia cordata)로부터 분리된 것인 항염증용 조성물;
    [화학식 2]
    Figure 112021105183140-pat00006
    .
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  11. 제 3항의 항염증용 조성물을 포함하는 항염증용 건강기능식품.
  12. 제 3항의 항염증용 조성물을 포함하는 항염증용 화장료 조성물.
  13. 제 3항의 항염증용 조성물을 포함하는 항염증용 약학적 조성물.
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