KR102295067B1 - 인산 가용화, 우레아 가용화 및 항진균 활성을 갖는 신규 슈도모나스 클로로라피스 knu-10 균주 및 이의 용도 - Google Patents

인산 가용화, 우레아 가용화 및 항진균 활성을 갖는 신규 슈도모나스 클로로라피스 knu-10 균주 및 이의 용도 Download PDF

Info

Publication number
KR102295067B1
KR102295067B1 KR1020200026842A KR20200026842A KR102295067B1 KR 102295067 B1 KR102295067 B1 KR 102295067B1 KR 1020200026842 A KR1020200026842 A KR 1020200026842A KR 20200026842 A KR20200026842 A KR 20200026842A KR 102295067 B1 KR102295067 B1 KR 102295067B1
Authority
KR
South Korea
Prior art keywords
strain
solubilization
knu
urea
pseudomonas chlororaphis
Prior art date
Application number
KR1020200026842A
Other languages
English (en)
Inventor
신재호
강기웅
김민철
김민성
김민지
아흐마드 사자드
조영재
Original Assignee
경북대학교 산학협력단
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by 경북대학교 산학협력단 filed Critical 경북대학교 산학협력단
Priority to KR1020200026842A priority Critical patent/KR102295067B1/ko
Application granted granted Critical
Publication of KR102295067B1 publication Critical patent/KR102295067B1/ko

Links

Images

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N1/00—Microorganisms, e.g. protozoa; Compositions thereof; Processes of propagating, maintaining or preserving microorganisms or compositions thereof; Processes of preparing or isolating a composition containing a microorganism; Culture media therefor
    • C12N1/20—Bacteria; Culture media therefor
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A01—AGRICULTURE; FORESTRY; ANIMAL HUSBANDRY; HUNTING; TRAPPING; FISHING
    • A01N—PRESERVATION OF BODIES OF HUMANS OR ANIMALS OR PLANTS OR PARTS THEREOF; BIOCIDES, e.g. AS DISINFECTANTS, AS PESTICIDES OR AS HERBICIDES; PEST REPELLANTS OR ATTRACTANTS; PLANT GROWTH REGULATORS
    • A01N63/00—Biocides, pest repellants or attractants, or plant growth regulators containing microorganisms, viruses, microbial fungi, animals or substances produced by, or obtained from, microorganisms, viruses, microbial fungi or animals, e.g. enzymes or fermentates
    • A01N63/20—Bacteria; Substances produced thereby or obtained therefrom
    • A01N63/27—Pseudomonas
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12R—INDEXING SCHEME ASSOCIATED WITH SUBCLASSES C12C - C12Q, RELATING TO MICROORGANISMS
    • C12R2001/00—Microorganisms ; Processes using microorganisms
    • C12R2001/01—Bacteria or Actinomycetales ; using bacteria or Actinomycetales

Landscapes

  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Wood Science & Technology (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Virology (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Tropical Medicine & Parasitology (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • General Engineering & Computer Science (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Agronomy & Crop Science (AREA)
  • Pest Control & Pesticides (AREA)
  • Plant Pathology (AREA)
  • Dentistry (AREA)
  • Environmental Sciences (AREA)
  • Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)

Abstract

본 발명은 인산 가용화, 우레아 가용화 및 항진균 활성을 갖는 신규 슈도모나스 클로로라피스 KNU-10 균주 및 이의 용도에 관한 것으로, 식물용 미생물 제제로 활용 가능한 슈도모나스 클로로라피스 KNU-10 균주는 인산, 우레아 가용화, 항진균 능을 가지고 있으므로, 친환경 농법에 유용하게 활용될 수 있다.

Description

인산 가용화, 우레아 가용화 및 항진균 활성을 갖는 신규 슈도모나스 클로로라피스 KNU-10 균주 및 이의 용도{Novel Pseudomonas chlororaphis KNU-10 Strain with Phosphate Solubilization, Urea Solubilization and Antifungal Activity, and Uses thereof}
본 발명은 인산 가용화, 우레아 가용화 및 항진균 활성을 갖는 신규 슈도모나스 클로로라피스 KNU-10 균주 및 이의 용도에 관한 것이다.
화학 농약의 안전 불감과 이에 의한 환경 오염 문제가 제기되면서 친환경 농법과 지속 가능한 농법이 대두되고 있으며, 사용 가능한 화학 농약 및 비료의 수가 점차 줄어들고 있다. 최근 소비자들 사이에서도 친환경 농산물인증제도를 거친 농산물의 수요가 높아짐에 따라 친환경 농법 및 농업 유용 미생물을 이용한 연구가 지속적으로 이뤄지고 있다.
농업 유용 미생물로써 사용되기 위해서는 식물 생장 촉진, 식물 병원성 미생물에 대한 길항효과, 토양 내 무기 영양분의 가용화 등의 작물 유용 활성을 가지고 있어야 한다. 또한, 농업 유용 미생물로써 사용될 수 있는 식물병 방지용 생물학적 제제의 경우 균주 자체가 방제에 사용될 수 있고, 활성 균주 자체가 분비하는 사이드로포어(siderophore), 셀룰라아제(cellulase) 및 키티나아제(chitinase)와 같은 진균의 생장을 억제하는 효소, 및/또는 균주에 의해 생산되는 TMC(tautomycetin), 2,4-diacetylphloroglucinol(DAPG), viscosinamide 및 tensin과 같은 2차 대사산물에 의해 식물병이 방제될 수 있다.
현재 전국 시·군 농업기술센터 혹은 농업관련 회사에서 다양한 농업용 미생물 제제를 보급 및 판매하고 있다. 하지만, 현재 보급되거나 시판되고 있는 농업 유용 미생물의 정확한 작물 유용 활성에 대한 검증이 없거나 미비한 것으로 알려져 있어, 활성을 담보할 수 없으므로, 식물병의 방제 및 식물 생장 촉진에 효과적으로 이용될 수 없어 문제가 되고 있다.
이에, 본 발명자들은 농업 유용 미생물 제제로 사용 가능한 미생물을 개발하기 위한 연구를 수행하여 본 발명을 완성하였다.
대한민국 특허등록 제10-0531502호
본 발명의 하나의 목적은 인산 가용화, 우레아 가용화 및 항진균 활성을 갖는 슈도모나스 클로로라피스(Pseudomonas chlororaphis) KNU-10 균주(수탁번호 KCTC14128BP)를 제공하는 것이다.
본 발명의 다른 목적은 슈도모나스 클로로라피스(Pseudomonas chlororaphis) KNU-10 균주, 상기 균주의 배양물, 상기 배양물의 농축물, 및 상기 배양물의 건조물로 이루어진 군에서 선택되는 하나 이상을 유효성분으로 포함하는 항진균용 미생물 제제를 제공하는 것이다.
본 발명의 또 다른 목적은 슈도모나스 클로로라피스(Pseudomonas chlororaphis) KNU-10 균주, 상기 균주의 배양물, 상기 배양물의 농축물, 및 상기 배양물의 건조물로 이루어진 군에서 선택되는 하나 이상을 유효성분으로 포함하는 식물 생장 촉진용 조성물을 제공하는 것이다.
본 발명의 일 양상은 인산 가용화, 우레아 가용화 및 항진균 활성을 갖는 슈도모나스 클로로라피스(Pseudomonas chlororaphis) KNU-10 균주(수탁번호 KCTC14128BP)를 제공한다.
본 발명에서는 인산 가용화, 우레아 가용화 및 항진균 활성을 갖는 균주를 선별하였으며, 상기 균주를 '슈도모나스 클로로라피스(Pseudomonas chlororaphis) KNU-10'으로 동정하고, 이를 2020년 02월 06일 부로 한국생명공학연구원 미생물자원센터(KCTC)에 기탁하였다(수탁번호: KCTC14128BP).
본 발명의 슈도모나스 클로로라피스(Pseudomonas chlororaphis) KNU-10 균주는 동결 건조하여 보존할 수 있고, 0.02% 폴리소르베이트 80을 함유한 40% 글리세롤 수용액과 상기 균주 배양액을 1 대 1로 혼합한 뒤, -80℃에서 냉동하는 등의 통상의 방법으로 보관할 수 있으나, 이에 한정되는 것은 아니다.
본 발명의 슈도모나스 클로로라피스 KNU-10 균주를 대량생산하기 위하여, 글리세린, 포도당, 효모 추출물, 인산염 등으로 구성된 군에서 선택되는 하나 또는 둘 이상이 추가로 첨가된 물과 밀기울을 등을 혼합한 배지가 사용될 수 있으나 이에 한정되는 것은 아니다. 예를 들어, 상기 배지에 첨가된 효모 추출물은 미량 원소 및 질소원의 제공 등을 위해 사용되고, 글리세린은 배지의 물성 및 수분 함유도를 개선하기 위한 보조제로서 사용되며, 인산염은 pH 완충제로 사용될 수 있다.
본 발명의 일 구체예에 따르면, 상기 균주는 서열번호 1로 표시되는 16S rRNA 유전자 염기서열을 포함할 수 있다.
본 발명의 다른 양상은 슈도모나스 클로로라피스(Pseudomonas chlororaphis) KNU-10 균주, 상기 균주의 배양물, 상기 배양물의 농축물, 및 상기 배양물의 건조물로 이루어진 군에서 선택되는 하나 이상을 유효성분으로 포함하는 항진균용 미생물 제제를 제공한다.
본 발명의 미생물 제제는 슈도모나스 클로로라피스(Pseudomonas chlororaphis) KNU-10 균주(수탁번호 KCTC14128BP), 상기 균주의 배양물, 상기 배양물의 농축물, 또는 상기 배양물의 건조물에 계면활성제, 중량제, 영양제등의 부가제를 첨가하여 제조될 수 있다. 이때, 계면활성제로는 폴리카복실레이트, 소듐 리그노설포네이트, 칼슘 리그노설포네이트, 소듐 다이알킬 설포석시네이트, 소듐 알킬 아릴 설포네이트, 폴리옥시에틸렌 알킬 페닐 에테르, 소듐 트리폴리포스페이트, 폴리옥시에틸렌 알킬 아릴포스포릭 에스테르, 폴리옥시에틸렌 알킬 아릴 에테르, 폴리옥시에틸렌 알킬 아릴폴리머, 폴리옥시알킬온 알킬 페닐 에테르, 폴리옥시에틸렌 노닐 페닐 에테르, 소듐 설포네이트 나프탈렌 포름알데히드, 트리톤 100 및 트윈 80으로 이루어진 군으로부터 선택되는 하나 이상을 사용하며, 증량제 및 영양제로는 콩가루, 쌀, 밀, 황토, 규조토, 덱스트린, 포도당 및 전분으로 이루어진 군으로부터 선택되는 하나 이상을 사용하며, 붕해제로는 벤토나이트(bentonite), 탈크(talc), 다이아라이트(dialite), 카올린(kaolin) 및 칼슘 카보네이트(calcium carbonate)로 이루어진군으로부터 선택되는 하나 이상을 사용할 수 있다.
본 발명의 미생물 제제는 상기 균주의 안정적인 제제화를 목적으로 입제, 수화제 또는 캡슐화 제형의 형태로 제조될 수 있으나 이에 한정되는 것은 아니며, 상기 입제의 경우 표면 활성제, 비활성 담체, 보존제, 습윤제, 공급촉진제, 유인제, 캡슐화제, 결합제, 유화제, 염료, UV 보호제, 완충제 및 흐름제, 저비산 분제, 미분제, 수면전개제로 이루어진 제형군으로부터 선택되는 하나 이상의 것을 추가로 선택하여 제조될 수 있다.
본 발명의 미생물 제제는 당업계에서 수행되는 일반적인 방법으로 제제화될 수 있으며, 그 적용방법은 일반적으로 행하고 있는 방법, 예를 들어, 살포(분무, 미스팅, 아토마이징, 분말 살포, 과립 살포, 수면시용, 상시용 등), 토양시용(혼입, 관주 등), 표면사용(도포, 도말법, 피복 등), 침지, 독이 및 훈연 시용 등에 의해 수행될 수 있으나, 이에 한정되는 것은 아니다.
본 발명의 미생물 제제의 사용량은, 그 체형, 피해상황, 적용방법, 적용장소 등에 따라 당업자에 의해 적절히 선택될 수 있다.
본 발명의 또 다른 양상은 슈도모나스 클로로라피스(Pseudomonas chlororaphis) KNU-10 균주, 상기 균주의 배양물, 상기 배양물의 농축물, 및 상기 배양물의 건조물로 이루어진 군에서 선택되는 하나 이상을 유효성분으로 포함하는 식물 생장 촉진용 조성물을 제공한다.
본 발명의 식물 생장 촉진용 조성물은 슈도모나스 클로로라피스(Pseudomonas chlororaphis) KNU-10 균주, 상기 균주의 배양물, 상기 배양물의 농축물, 및 상기 배양물의 건조물 외에 무기질 비료, 유기질 비료 및 암석 분말로 이루어진 군 중 선택된 1종 이상의 것을 추가로 포함할 수 있다.
본 발명의 식물 생장 촉진용 조성물에 포함될 수 있는 무기질 비료는 무기염류의 성분에 따라 질소, 인산, 가리 또는 석회 등의 단일 성분, 또는 이들 성분이 적당한 비율로 혼합된 것일 수 있다. 예를 들어, 질소 비료로는 황산암모늄(Ammonium sulfate), 요소(Urea), 석회질소(lime nitrogen), 초석(niter), 질산암모늄(ammonium nitrate), 염화암모늄(ammonium chloride) 등이 사용될 수 있고, 인산질 비료로는 과린산석회(superphosphate), 중과린산석회(triple superphosphate), 용성인비(fused phosphate), 토마스인비(thomas phosphate) 등이 사용될 수 있으며, 가리질 비료로는 염화가리(potassium chloride), 소석회(slaked lime), 탄산석회(calcium carbonate), 농용석회(agricultural lime) 등이 사용될 수 있으나 이에 한정되는 것은 아니다.
본 발명의 식물 생장 촉진용 조성물에 포함될 수 있는 유기질 비료는 어박(fish scrap), 유박(깻묵, expeller cake), 골분(bone dust), 계분(鷄糞), 퇴비(compost) 및/또는 우분이 사용될 수 있으나 이에 한정되는 것은 아니다.
인산 가용화, 우레아 가용화 및 항진균 활성을 갖는 신규 슈도모나스 클로로라피스 KNU-10 균주 및 이의 용도에 따르면, 식물용 미생물 제제로 활용 가능한 슈도모나스 클로로라피스 KNU-10 균주는 인산, 우레아 가용화, 항진균 능을 가지고 있으므로, 친환경 농법에 유용하게 활용될 수 있다.
도 1은 본 발명의 슈도모나스 클로로라피스(Pseudomonas chlororaphis) KNU-10 균주의 인산 가용화 효소(phosphatase) 활성을 나타낸 사진이다.
도 2는 본 발명의 슈도모나스 클로로라피스 KNU-10 균주의 우레아 가용화 효소(urease) 활성을 나타낸 사진이다.
도 3은 본 발명의 슈도모나스 클로로라피스 KNU-10 균주의 항진균 활성의 지표로 사용되는 사이드로포어 활성을 나타낸 사진이다.
도 4는 본 발명의 슈도모나스 클로로라피스 KNU-10 균주의 항진균 활성의 지표로 사용되는 셀룰라아제 활성을 나타낸 사진이다.
도 5는 본 발명의 슈도모나스 클로로라피스 KNU-10 균주의 16S rRNA를 암호화하고 있는 유전자(rDNA)의 염기서열(bp)을 공지 균주와 비교하여 계통발생학적 모식도로 나타낸 그림이다.
이하 본 발명을 하나 이상의 실시예를 통하여 보다 상세하게 설명한다. 그러나, 이들 실시예는 본 발명을 예시적으로 설명하기 위한 것으로 본 발명의 범위가 이들 실시예에 한정되는 것은 아니다.
실시예 1. 토양으로부터 식물용 미생물 제제로써 활용 가능한 미생물 분리
식물용 미생물 제제로써 활용 가능한 미생물을 분리하기 위하여, 경상북도 영주시 가흥동 상추밭에서 토양시료를 수집하였다. 토양으로부터 미생물을 분리하기 위하여, 토양 시료 1g을 0.85% NaCl 용액 9mL에 넣어 충분히 교반하고, 0.85% NaCl 용액 9mL를 이용하여 단계별 희석을 실시하였다. 희석한 각 시료 구간에서 100μL의 시료를 덜어낸 다음, nutrient agar에 도말하였다. 단일 콜로니로 자란 미생물들은 콜로니 외형을 이용한 형태학적 분류방법을 이용하여 분리하였다.
그 후, 분리한 미생물을 이용하여 식물용 미생물 제제로써의 활성을 평가하고, 최종 선별된 균주에 대해 16S rRNA gene 영역을 증폭하여 염기서열을 분석하여 동정하였다.
실시예 2. 분리 균주의 인산 가용화, 우레아 가용화 및 항진균 활성 측정
2-1. 인산 가용화 효소 활성 확인 방법
실시예 1에서 분리한 미생물 중, 인산 가용화 효소 활성이 우수한 균주를 다음과 같은 방법으로 선별하였다.
구체적으로, 분리균주를 5mL의 nutrient broth 배지에 접종한 다음 동일 배양조건에서 24시간 배양하였다. 분리균주의 액체 배양액을 이용하여 nutrient agar에 획선 도말을 하고 동일 조건에서 24시간 배양하였다. 배양한 분리균주는 포스파타아제(phosphatase) 활성을 측정할 수 있는 phosphate agar(Glucose 10g, (NH4)2SO4 0.5g, Yeast extract 0.5g, MgSO4·7H2O 0.1g, Ca3(PO4)2 5g, MnSO4 0.0001g, FeSO4 0.0001g 및 Agar 15g)에 toothpick을 이용하여 접종하고, 동일 조건에서 24시간 배양하였다. 그 후, 배지 조성 내 calcium phosphate가 분해되면 불투명했던 배지가 투명하게 변하므로, 균주 주위에 투명 환을 형성하는 미생물을 인산 가용화 효소 활성이 있는 균주로 선정하였다.
2-2. 우레아 가용화 효소 활성 확인 방법
실시예 1에서 분리한 미생물 중, 우레아 가용화 효소 활성이 우수한 균주를 다음과 같은 방법으로 선별하였다.
구체적으로, 분리균주를 5mL의 nutrient broth 배지에 접종한 다음 동일 배양조건에서 24시간 배양하였다. 분리균주의 액체 배양액을 이용하여 nutrient agar에 획선 도말을 하고 동일 조건에서 24시간 배양하였다. 배양한 분리균주는 urease 활성을 측정할 수 있는 urea agar(Peptone 1g, Dextrose 1g, NaCl 5g, KH2PO4 2g, Urea 20g, Phenol red 0.012g 및 Agar 15g)에 toothpick을 이용하여 접종하고 동일 조건에서 24시간 배양하였다. 그 후, 배지 조성 내 urea가 분해되어 나오는 암모니아에 의해 pH 변화가 발생하면 노란색이었던 phenol red의 색깔이 분홍색으로 변하므로, 균주 주위에 분홍색 환을 형성하는 미생물을 우레아 가용화 효소 활성이 있는 균주로 선정하였다.
2-3. 항진균 활성 확인 방법
실시예 1에서 분리한 미생물 중, 항진균 활성이 우수한 균주를 다음과 같은 방법으로 선별하였다.
구체적으로, 분리균주를 β(1-3) glucan 또는 β(1-4) glucan을 분해하는 셀룰라아제(cellulase) 활성 및 Fe를 킬레이팅(chelating)하는 사이드로포어(siderophore) 활성 확인을 위하여, CMC-Congo red agar(CMC 10g, NaNO3 1g, Na2HPO4 1g, KCl 0.05g, FeCl3 0.01g 및 Agar 15g)배지, 및 CAS agar(PIPES 27.216g, Nutrient broth 8g, Agar 2% 및 Dark blue solution 100mL)배지를 사용하였다. 분리균주를 Nutrient broth 배지에 접종하여 30℃에서 24시간 동안 배양한 후, 이를 CMC-Conco red agar와 CAS agar에 접종하여 24시간 배양하였다. 그 후, 각 배지에 균주 주위로 생성되는 투명환의 유무 및 크기를 관찰하여 항진균 활성을 확인하였다. 대조 균주로는 대장균(Escherichia coli)을 사용하였으며, 분리균주의 배양에 사용한 동일한 배양법으로 배양하여 실험에 사용하였다.
2-4. 인산 가용화, 우레아 가용화 및 항진균 활성이 모두 우수한 균주의 선별
실시예 1에서 분리한 균주 중, 인산 가용화, 우레아 가용화 및 항진균 활성이 모두 우수한 균주를 선별하기 위하여, 실시예 2-1 내지 2-3를 수행하였다.
그 결과, 인산 가용화 활성(도 1), 우레아 가용화 활성(도 2) 및 항진균 활성(도 3 및 도 4)이 모두 우수한 균주를 선별하였다.
실시예 3. 슈도모나스 클로로라피스( Pseudomonas chlororaphis ) KNU-10 균주의 동정
실시예 2에서 인산 가용화, 우레아 가용화 및 항진균 활성이 우수한 것으로 선별된 균주의 동정을 위하여 회수한 균체로부터 유전체 DNA(genomic DNA)를 추출한 후(Thompson, 1980), 분리한 유전체 DNA를 주형으로 사용하여 중합효소 연쇄반응(polymerase chain reaction; PCR)에 의하여 16S rRNA gene을 증폭하였으며, 27F(5'-AGAGTTTGATCCTGGCTCAG-3'; 서열번호 1) 및 1492R(5'-GGTTACCTTGTTACGACTT-3'; 서열번호 2)을 사용하였다(Lane 1991). 증폭한 PCR 산물은 PCR 정제 시스템(Macrogen, Daejeon, Korea)을 이용하여 정제하였다. 정제한 PCR 산물의 전체 염기서열을 분석하기 위한 염기서열분석(sequencing)은 마크로젠(Macrogen, Daejeon, Korea)에 의뢰하여 실시하였다.
분석한 염기서열 결과는 NCBI의 BLASTN을 이용하여 비교하였으며, 염기서열의 상동성 및 계통발생학적 모식도(phylogenetic tree)는 Bioedit와 Mega7 프로그램을 통해 인접결합방법(neighbor-joining methods)을 사용하여 분석하였다.
그 결과, 분리균주의 16S rRNA를 암호화하는 유전자(rDNA)의 염기서열을 확인하였으며(표 1), 기존에 보고된 공시 균주인 슈도모나스 클로로라피스 Pseudomonas chlororaphis subsp. chlororaphis DSM 50083T와 99%의 상동성을 가지는 것으로 확인하였다(도 6).
염기서열(5'→3') 서열번호
TAGTGGGGGATAACGTTCGGAAACGGACGCTAATACCGCATACGTCCTACGGGAGAAAGCAGGGGACCTTCGGGCCTTGCGCTATCAGATGAGCCTAGGTCGGATTAGCTAGTTGGTGAGGTAATGGCTCACCAAGGCGACGATCCGTAACTGGTCTGAGAGGATGATCAGTCACACTGGAACTGAGACACGGTCCAGACTCCTACGGGAGGCAGCAGTGGGGAATATTGGACAATGGGCGAAAGCCTGATCCAGCCATGCCGCGTGTGTGAAGAAGGTCTTCGGATTGTAAAGCACTTTAAGTTGGGAGGAAGGGTACTTACCTAATACGTGAGTATTTTGACGTTACCGACAGAATAAGCACCGGCTAACTCTGTGCCAGCAGCCGCGGTAATACAGAGGGTGCAAGCGTTAATCGGAATTACTGGGCGTAAAGCGCGCGTAGGTGGTTCGTTAAGTTGGATGTGAAATCCCCGGGCTCAACCTGGGAACTGCATCCAAAACTGGCGAGCTAGAGTATGGTAGAGGGTGGTGGAATTTCCTGTGTAGCGGTGAAATGCGTAGATATAGGAAGGAACACCAGTGGCGAAGGCGACCACCTGGACTGATACTGACACTGAGGTGCGAAAGCGTGGGGAGCAAACAGGATTAGATACCCTGGTAGTCCACGCCGTAAACGATGTCAACTAGCCGTTGGGAGCCTTGAGCTCTTAGTGGCGCAGCTAACGCATTAAGTTGACCGCCTGGGGAGTACGGCCGCAAGGTTAAAACTCAAATGAATTGACGGGGGCCCGCACAAGCGGTGGAGCATGTGGTTTAATTCGAAGCAACGCGAAGAACCTTACCAGGCCTTGACATCCAATGAACTTTCCAGAGATGGATTGGTGCCTTCGGGAACATTGAGACAGGTGCTGCATGGCTGTCGTCAGCTCGTGTCGTGAGATGTTGGGTTAAGTCCCGTAACGAGCGCAACCCTTGTCCTTAGTTACCAGCACGTCATGGTGGGCACTCTAAGGAGACTGCCGGTGACAAACCGGAGGAAGGTGGGGATGACGTCAAGTCATCATGGCCCTTACGGCCTGGGCTACACACGTGCTACAATGGTCGGTACAGAGGGTTGCCAAGCCGCGAGGTGGAGCTAATCCCATAAAACCGATCGTAGTCCAGATCGCAGTCTGCAACTCGACTGCGTGAAGTCGGAATCGCTAGTAATCGCGAATCAGAATGTCGCGGTGAATACGTTCCCGGG 서열번호 3
상기 균주는 기존의 슈도모나스 클로로라피스 Pseudomonas chlororaphis subsp. chlororaphis DSM 50083T와 1% 상이하기 때문에, 콜로라피스 종에 속하는 신규한 균주로 인정받아, 이를 슈도모나스 클로로라피스(Pseudomonas chlororaphis) KNU-10으로 명명하고, 상기 균주를 한국생명공학연구원 생물자원센터에 기탁하였다(수탁번호 KCTC14128BP).
이제까지 본 발명에 대하여 그 실시예들을 중심으로 살펴보았다. 본 발명이 속하는 기술 분야에서 통상의 지식을 가진 자는 본 발명이 본 발명의 본질적인 특성에서 벗어나지 않는 범위에서 변형된 형태로 구현될 수 있음을 이해할 수 있을 것이다. 그러므로 개시된 실시예들은 한정적인 관점이 아니라 설명적인 관점에서 고려되어야 한다. 본 발명의 범위는 전술한 설명이 아니라 청구범위에 나타나 있으며, 그와 동등한 범위 내에 있는 모든 차이점은 본 발명에 포함된 것으로 해석되어야 할 것이다.
<110> Kyungpook National University Industry-Academic Cooperation Foundation <120> Novel Pseudomonas chlororaphis KNU-10 Strain with Phosphate Solubilization, Urea Solubilization and Antifungal Activity, and Uses thereof <130> PN190350 <160> 3 <170> KoPatentIn 3.0 <210> 1 <211> 20 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> 27F <400> 1 agagtttgat cctggctcag 20 <210> 2 <211> 19 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> 1492R <400> 2 ggttaccttg ttacgactt 19 <210> 3 <211> 1249 <212> DNA <213> Pseudomonas chlororaphis <400> 3 tagtggggga taacgttcgg aaacggacgc taataccgca tacgtcctac gggagaaagc 60 aggggacctt cgggccttgc gctatcagat gagcctaggt cggattagct agttggtgag 120 gtaatggctc accaaggcga cgatccgtaa ctggtctgag aggatgatca gtcacactgg 180 aactgagaca cggtccagac tcctacggga ggcagcagtg gggaatattg gacaatgggc 240 gaaagcctga tccagccatg ccgcgtgtgt gaagaaggtc ttcggattgt aaagcacttt 300 aagttgggag gaagggtact tacctaatac gtgagtattt tgacgttacc gacagaataa 360 gcaccggcta actctgtgcc agcagccgcg gtaatacaga gggtgcaagc gttaatcgga 420 attactgggc gtaaagcgcg cgtaggtggt tcgttaagtt ggatgtgaaa tccccgggct 480 caacctggga actgcatcca aaactggcga gctagagtat ggtagagggt ggtggaattt 540 cctgtgtagc ggtgaaatgc gtagatatag gaaggaacac cagtggcgaa ggcgaccacc 600 tggactgata ctgacactga ggtgcgaaag cgtggggagc aaacaggatt agataccctg 660 gtagtccacg ccgtaaacga tgtcaactag ccgttgggag ccttgagctc ttagtggcgc 720 agctaacgca ttaagttgac cgcctgggga gtacggccgc aaggttaaaa ctcaaatgaa 780 ttgacggggg cccgcacaag cggtggagca tgtggtttaa ttcgaagcaa cgcgaagaac 840 cttaccaggc cttgacatcc aatgaacttt ccagagatgg attggtgcct tcgggaacat 900 tgagacaggt gctgcatggc tgtcgtcagc tcgtgtcgtg agatgttggg ttaagtcccg 960 taacgagcgc aacccttgtc cttagttacc agcacgtcat ggtgggcact ctaaggagac 1020 tgccggtgac aaaccggagg aaggtgggga tgacgtcaag tcatcatggc ccttacggcc 1080 tgggctacac acgtgctaca atggtcggta cagagggttg ccaagccgcg aggtggagct 1140 aatcccataa aaccgatcgt agtccagatc gcagtctgca actcgactgc gtgaagtcgg 1200 aatcgctagt aatcgcgaat cagaatgtcg cggtgaatac gttcccggg 1249

Claims (4)

  1. 인산 가용화, 우레아 가용화, 셀룰라아제 활성 및 사이드로포어 활성을 갖고,
    서열번호 3으로 표시되는 16S rRNA 유전자 염기서열을 포함하고,
    한국의 토양에서 유래한 슈도모나스 클로로라피스(Pseudomonas chlororaphis) KNU-10 균주(수탁번호 KCTC14128BP).
  2. 삭제
  3. 삭제
  4. 제 1 항의 슈도모나스 클로로라피스(Pseudomonas chlororaphis) KNU-10 균주, 상기 균주의 배양물, 상기 배양물의 농축물, 및 상기 배양물의 건조물로 이루어진 군에서 선택되는 하나 이상을 유효성분으로 포함하는 한국의 토양에서 재배되는 식물의 생장 촉진용 조성물.
KR1020200026842A 2020-03-03 2020-03-03 인산 가용화, 우레아 가용화 및 항진균 활성을 갖는 신규 슈도모나스 클로로라피스 knu-10 균주 및 이의 용도 KR102295067B1 (ko)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
KR1020200026842A KR102295067B1 (ko) 2020-03-03 2020-03-03 인산 가용화, 우레아 가용화 및 항진균 활성을 갖는 신규 슈도모나스 클로로라피스 knu-10 균주 및 이의 용도

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
KR1020200026842A KR102295067B1 (ko) 2020-03-03 2020-03-03 인산 가용화, 우레아 가용화 및 항진균 활성을 갖는 신규 슈도모나스 클로로라피스 knu-10 균주 및 이의 용도

Publications (1)

Publication Number Publication Date
KR102295067B1 true KR102295067B1 (ko) 2021-08-30

Family

ID=77501966

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
KR1020200026842A KR102295067B1 (ko) 2020-03-03 2020-03-03 인산 가용화, 우레아 가용화 및 항진균 활성을 갖는 신규 슈도모나스 클로로라피스 knu-10 균주 및 이의 용도

Country Status (1)

Country Link
KR (1) KR102295067B1 (ko)

Cited By (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
KR102551903B1 (ko) * 2022-12-27 2023-07-06 (주)에코비즈넷 포타슘 가용화 활성을 가지는 신규한 슈도모나스 구아리코넨시스 eco-k-3-3 및 이의 최적 활성 배양 조건
CN117965395A (zh) * 2024-03-28 2024-05-03 内蒙古农业大学 一株绿针假单胞菌及其应用

Citations (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
KR20050025466A (ko) * 2003-09-08 2005-03-14 대한민국(전남대학교총장) 슈도모나스 크로로라피스 06 균주 및 이를 이용한 식물병방제 및 가뭄 피해 감소 방법
KR100531502B1 (ko) 1997-05-20 2005-11-28 노바팜 리서치(오스트레일리아)피티와이리미티드 슈도모나스균의 살균에 효과적인 살균세정조성물
KR101759826B1 (ko) * 2016-03-04 2017-07-20 경북대학교 산학협력단 식물 생장 촉진 활성을 가지는 바실러스 메가터리움 knu-01 균주 및 이의 이용
KR20180032407A (ko) * 2016-09-22 2018-03-30 경북대학교 산학협력단 작물 생육 촉진 또는 항진균 활성을 가지는 신규한 락토바실러스 플랜타럼(Lactobacillus plantarum) KNU-03 균주 및 이의 이용
KR101910275B1 (ko) * 2017-04-27 2018-10-19 경북대학교 산학협력단 신규한 스트렙토마이세스 그리세우스 knu-05 균주 및 이의 이용

Patent Citations (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
KR100531502B1 (ko) 1997-05-20 2005-11-28 노바팜 리서치(오스트레일리아)피티와이리미티드 슈도모나스균의 살균에 효과적인 살균세정조성물
KR20050025466A (ko) * 2003-09-08 2005-03-14 대한민국(전남대학교총장) 슈도모나스 크로로라피스 06 균주 및 이를 이용한 식물병방제 및 가뭄 피해 감소 방법
KR101759826B1 (ko) * 2016-03-04 2017-07-20 경북대학교 산학협력단 식물 생장 촉진 활성을 가지는 바실러스 메가터리움 knu-01 균주 및 이의 이용
KR20180032407A (ko) * 2016-09-22 2018-03-30 경북대학교 산학협력단 작물 생육 촉진 또는 항진균 활성을 가지는 신규한 락토바실러스 플랜타럼(Lactobacillus plantarum) KNU-03 균주 및 이의 이용
KR101910275B1 (ko) * 2017-04-27 2018-10-19 경북대학교 산학협력단 신규한 스트렙토마이세스 그리세우스 knu-05 균주 및 이의 이용

Non-Patent Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
Genomics Data, Vol.4, pp.33-42(Epub.2015.01.22.)* *
Scientific Reports, Vol.6, Article:27393, pp.1-14(Epub.2016.06.07.)* *

Cited By (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
KR102551903B1 (ko) * 2022-12-27 2023-07-06 (주)에코비즈넷 포타슘 가용화 활성을 가지는 신규한 슈도모나스 구아리코넨시스 eco-k-3-3 및 이의 최적 활성 배양 조건
CN117965395A (zh) * 2024-03-28 2024-05-03 内蒙古农业大学 一株绿针假单胞菌及其应用

Similar Documents

Publication Publication Date Title
Alvarez et al. Microalgae, soil and plants: A critical review of microalgae as renewable resources for agriculture
CN106947725B (zh) 微生物菌剂及其在盐碱地土壤改良中的应用
CN104017750B (zh) 一种耐盐性甲基营养型芽孢杆菌菌株lj及其应用
Mehta et al. Tricalcium phosphate solubilisation by new endophyte Bacillus methylotrophicus CKAM isolated from apple root endosphere and its plant growth-promoting activities
CN103045511B (zh) 一株具有解磷解钾功能的产纤维素酶地衣芽孢杆菌及其应用
CN104263679B (zh) 一种高效解磷菌及其应用
CN113174351B (zh) 一种抗病促生型混合微生物菌群
US10000427B2 (en) Phosphate solubilizing rhizobacteria bacillus firmus as biofertilizer to increase canola yield
KR102161296B1 (ko) 옥신 및 사이드로포어를 생산하고, 식물병 원인균에 대한 항진균 활성, 인산가용화능 및 질소고정능을 가지는 바실러스 서틸리스 srcm103571 균주 및 이의 용도
KR102295067B1 (ko) 인산 가용화, 우레아 가용화 및 항진균 활성을 갖는 신규 슈도모나스 클로로라피스 knu-10 균주 및 이의 용도
CN102627499A (zh) 黄瓜专用生物有机肥
TWI409242B (zh) 耐高溫多功能溶磷微生物及其生物肥料製作
CN113234616A (zh) 地衣芽孢杆菌、耐盐碱菌剂及生物质盐碱地土壤改良剂的制备方法
CN113321547A (zh) 一种根际促生型水溶性微生物菌肥及其制备方法
CN103571770A (zh) 一种高效花生根瘤固氮菌株及其应用
CN107162852B (zh) 一种土壤磷素活化剂及其制备方法和应用
CN113234446A (zh) 一种生物质盐碱地土壤改良剂
KR101910275B1 (ko) 신규한 스트렙토마이세스 그리세우스 knu-05 균주 및 이의 이용
CN115960744A (zh) 一种地衣芽孢杆菌及其应用
US20150040629A1 (en) Novel Mycorrhizae-based Biofertilizer Compositions &amp; Method for mass production &amp; formulations of Same
KR20160128533A (ko) 인산가용화 활성을 갖는 신규 미생물 엔테로박터 에스피 04-p-1 균주 및 이를 포함하는 토양미생물 비료
CN101905993A (zh) 一种高效生物活性稀土生态有机肥及其制备方法
KR102161293B1 (ko) 옥신 및 사이드로포어를 생산하고, 식물병 원인균에 대한 항진균 활성, 인산가용화능 및 질소고정능을 가지는 바실러스 벨레젠시스 srcm103702 균주 및 이의 용도
Jayaswal et al. Influence of physiological and environmental factors on growth and sporulation of an antagonistic strain of Trichoderma viride RSR 7
US20240246878A1 (en) Halotolerant bacterial strains as bio-fertilizer with growth-promoting and abiotic stress alleviation benefits for plants and application thereof

Legal Events

Date Code Title Description
AMND Amendment
AMND Amendment
X701 Decision to grant (after re-examination)
GRNT Written decision to grant