KR102234296B1

KR102234296B1 - 반하 유래 캘러스 추출물 및 그 배양액을 유효성분으로 포함하는 피부 미백용 조성물

Info

Publication number: KR102234296B1
Application number: KR1020190048695A
Authority: KR
Inventors: 서정훈; 신동규; 차정단; 고은실; 조상민; 정지혜; 정종훈; 강제란
Original assignee: 제너럴바이오(주)
Priority date: 2019-04-25
Filing date: 2019-04-25
Publication date: 2021-04-01
Also published as: KR20200125831A

Abstract

본 발명은 반하 유래 캘러스 추출물 및 그 배양액을 유효성분으로 포함하는 피부미백용 조성물에 관한 것이다.
이에 따라, 반하 유래 캘러스를 이용함에 따라 인체에 사용했을 경우 독성이 없어 높은 안정성을 담보할 수 있다. 또한 멜라닌 형성을 억제하는 등 피부 미백활성에 대한 효과가 우수하고, 이를 화장수, 수용성 리퀴드, 크림, 젤, 에센스, 에멀젼 등의 화장품에 적용할 수 있다. 또한, 식물을 채집하는 것이 아니라 식물세포 배양을 통해 원료를 취득하므로 원료의 생산성과 효능의 일정성을 유지할 수 있다.

Description

반하 유래 캘러스 추출물 및 그 배양액을 유효성분으로 포함하는 피부 미백용 조성물 {COMPOSITION FOR SKIN WHITENING CONTAINING CALLUS EXTRACT FROM Pinellia ternata AND ITS CULTURE MEDIUM}

본 발명은 반하 유래 캘러스 추출물 및 그 배양액을 유효성분으로 포함하는 피부미백용 조성물에 관한 것으로, 더욱 상세하게는 다년생 초본 식물인 반하(Pinellia ternata)로부터 유래한 캘러스의 추출물 또는 그 배양액을 이용하여 피부의 미백상태를 개선할 수 있는 피부미백용 조성물에 관한 것이다.

피부는 물리적, 화학적인 외부의 자극으로부터 1차적으로 체내를 보호하는 기능을 갖는다. 피부에 존재하는 멜라닌(melanin)은 자연계에 널리 분포하는 페놀류의 생 고분자 물질로 검은 색소와 단백질의 복합체이다. 멜라닌은 자외선 등 외부 환경으로부터 신체를 보호하며, 환경에 대한 세포의 생존력과 경쟁력을 높여주는 물질로 알려져 있다. 반면, 멜라닌의 과잉생산은 기미, 주근깨, 검버섯 등을 생성하고 피부노화를 촉진시키고 피부암 유발과도 관련이 있다고 보고되고 있다.

피부 미백과 밀접한 관련이 있는 색소 침착(pigmentation)은 피부 표피 기저층에 있는 멜라닌 세포(melanocyte)에서 일어난다. 색소 침착은 티로시나아제(tyrosinase)의 활성에 의하여 크게 영향을 받는 것으로 알려져 있는데 주로 자외선, 염증, DNA 손상, 활성산소에 의하여 과색소 침착(hyperpigmentation)이 유도된다.

미용에 대한 관심과 수요가 증가함에 따라 미용의 중심에 있는 피부를 관리하기 위한 다양한 방법이 생겼는데, 특히 우리나라는 하얗고 깨끗한 피부에 대한 선호도가 높은 탓에 미백, 노화방지, 주름개선, 자외선 차단 등 다양한 기능성을 갖는 기능성 화장품에 대한 수요가 증가했다. 이러한 수요에 맞춰 여러 종류의 화장품들이 우후죽순으로 출시되었고, 높은 수준의 판매량을 기록하였다.

하지만 화장품 시장이 커짐에 따라, 경쟁이 과도해지고 가격경쟁력을 높이는 과정에서 화장품에 포함되는 물질이 유전자 변형 물질이거나, 환경호르몬을 포함하는 경우가 있어 오히려 피부나 건강상에 문제가 종종 발생했다. 이에 따라 장기적으로 인체에 유해하지 않고 안전하게 사용할 수 있는 천연물질 추출물을 주성분으로 하는 기능성 화장품에 대한 기대가 높아지고 있다(특허문헌 1 참조).

다만 천연물로부터 직접 추출하여 이용되는 식물유래 유용성분들은 인체에 사용 시 안정성이 보장된다는 점에서 높은 이점이 있지만, 추출물의 수득율이 낮고, 계절, 장소, 기후 등 재배조건과 부위별 등의 다양한 환경적 요인에 따라 생산성과 효능의 차이가 날 수 있어 안정적인 원료 공급이 어렵다는 단점이 있다.

KR 10-1997-0005272 A1 (1997. 02. 19.)

본 발명은 위와 같은 문제점을 해결하기 위하여 안출된 것으로, 본 발명에서 해결하고자 하는 과제는 인체에 대한 안정성이 높은 식물로부터 추출된 물질을 이용하여 피부미백을 개선시킬 수 있는 조성물을 제공하되, 그 조성물의 공급과 품질의 일정성도 함께 유지할 수 있는 조성물을 제공하는데 있다.

위와 같은 과제를 해결하기 위한 본 발명에 따른 반하 유래 캘러스 추출물 및 그 배양액을 유효성분으로 포함하는 피부미백용 조성물은 식물인 반하의 세포조직에 의해 배양된 캘러스 추출물과 캘러스 배양액을 각각 또는 함께 이용하여 피부의 미백을 개선시킬 수 있는 조성물을 제공하는 것을 기술적 특징으로 한다.

본 발명에 따른 반하 유래 캘러스 추출물 및 그 배양액을 유효성분으로 포함하는 피부미백용 조성물은 반하 유래 캘러스를 이용함에 따라 인체에 사용했을 경우 독성이 없어 높은 안정성을 담보할 수 있다.

또한 본 발명에 따른 반하 유래 캘러스 추출물 및 그 배양액을 유효성분으로 포함하는 피부미백용 조성물은 멜라닌 형성을 억제하는 등 피부 미백활성에 대한 효과가 우수하고, 이를 화장수, 수용성 리퀴드, 크림, 젤, 에센스, 에멀젼 등의 화장품에 적용할 수 있다.

또한, 본 발명에 따른 반하 유래 캘러스 추출물 및 그 배양액을 유효성분으로 포함하는 피부미백용 조성물은 식물을 채집하는 것이 아니라 식물세포 배양을 통해 원료를 취득하므로 원료의 생산성과 효능의 일정성을 유지할 수 있다.

도 1은 반하 유래 캘러스 추출물과 B16F10 세포의 멜라닌 합성률간의 관계를 나타내는 그래프
도 2는 반하 유래 캘러스 추출물이 B16F10 세포의 생존률에 미치는 영향을 나타내는 그래프
도 3은 반하 유래 캘러스 추출물과 SK-MEL-5 세포의 멜라닌 합성률간의 관계를 나타내는 그래프
도 4는 반하 유래 캘러스 추출물이 SK-MEL-5 세포의 생존률에 미치는 영향을 나타내는 그래프
도 5는 반하 유래 캘러스 배양액과 B16F10 세포의 멜라닌 합성률간의 관계를 나타내는 그래프
도 6은 반하 유래 캘러스 배양액이 B16F10 세포의 생존률에 미치는 영향을 나타내는 그래프
도 7은 반하 유래 캘러스 추출물을 농도별로 제브라피시 배아에 처리한 뒤 Leica inverted microscope를 통해 촬영한 사진
도 8은 반하 유래 캘러스 추출물과 제브라피시 배아의 멜라닌 합성률간의 관계를 나타내는 그래프

본 명세서 및 청구범위에 사용된 용어나 단어는 "발명자는 그 자신의 발명을 가장 최선의 방법으로 설명하기 위해 용어의 개념을 적절하게 정의할 수 있다는 원칙"에 입각하여 본 발명의 기술적 사상에 부합하는 의미와 개념으로 해석되어야지, 통상적이거나 사전적인 의미로 한정해서 해석되서는 안 된다.

따라서 본 명세서에 기재된 실시예와 도면에 도시된 구성은 본 발명의 가장 바람직한 실시예에 불과할 뿐이고, 본 발명의 기술적 사상을 모두 대변하는 것은 아니므로, 본 출원시점에 있어서 이들을 대체할 수 있는 다양한 균등물과 변형 예들이 있을 수 있음을 이해해야 한다.

본 발명에서 “추출물”은 반하(Pinellia ternata)로부터 유래된 캘러스(callus) 자체를 의미하거나, 캘러스를 분말화하여, 열수추출법, 알코올 추출물 등 종래 알려진 다양한 추출법에 의해 수득한 추출물을 의미한다.

극성 용매로서 적합한 것은, (i) 물, (ii) 탄소수 1 내지 6의 알코올(바람직하게는, 메탄올, 에탄올, 프로판올, 부탄올, 노말-프로판올, 이소-프로판올, 노말-부탄올, 1-펜탄올, 2-부톡시에탄올 또는 에틸렌글리콜), (iii) 아세트산, (iv) DMFO(Dimethyl-formamide) 및 (v) DMSO(Dimethyl sulfoxide) 등이 있다.

비극성 용매로서 적합한 것은, 아세톤, 아세토나이트릴, 에틸 아세테이트, 메틸 아세테이트, 플루오로알칸, 펜탄, 헥산, 2,2,4-트리메틸펜탄, 데칸, 시클로헥산, 시클로펜탄, 디이소부틸렌, 1-펜텐, 1-클로로부탄, 1-클로로펜탄, o-자일렌, 디이소프로필 에테르, 2-클로로프로판, 톨루엔, 1-클로로프로판, 클로로벤젠, 벤젠, 디에틸 에테르, 디에틸 설파이드, 클로로포름, 디클로로메탄, 1,2-디클로로에탄, 어닐린, 디에틸아민, 에테르, 사염화탄소, 메틸렌클로라이드, 석유에테르 및 THF 등이 있다.

본 발명에서 추출 방법은 특별히 하나의 방법으로 제한되지 않고 다양한 방법의 추출 방법을 이용할 수 있다. 가령 냉침 추출, 초음파 추출, 환류 추출, 열수 추출 등을 이용할 수 있다. 구체적으로 열수 추출의 경우에는 열탕증류기에서 8~48 시간동안, 80~100℃의 온도로 가열하여 열수 추출물을 얻는다. 냉수 추출의 경우에는 냉수(15~25℃)에 캘러스 배양물 자체 또는 그것의 건조된 분말을 혼합한 뒤 3일 동안 추출함으로써 냉수추출물을 얻는다. 이 외에 물, 유기용매, 또는 이의 혼합용매를 사용하여 추출하는 방법으로 제조될 수도 있다. 추출한 액은 바로 사용하거나 필터 후 농축 및/또는 건조하여 사용할 수 있다.

본 발명의 화장료 조성물은 수성, 수성-알콜성 또는 오일성 용액, 수중유 또는 유증수 또는 다중 에멀전, 수성 또는 오일성 겔, 액체, 페이스트성 또는 고체 무수 생성물, 소구체를 사용한 수성상에서의 오일분산물의 형태일 수 있으며, 이온성 및/또는 비이온성 형태의 지질 소포체의 형태일 수 있다.

본 발명의 화장료 조성물은 유체일 수 있으며, 구체적으로 백색 또는 유색크림, 연고, 밀크로션, 유액(serum), 에센스, 페이스트 또는 무스와 같은 형태일 수 있다. 이는 선택적으로 에어로졸 형태로 피부에 적용될 수도 있고, 스틱과 같은 고체일 수도 있다. 이는 피부용 케어 제품 및/또는 메이크업 제품으로서 사용될 수도 있다.

본 발명에 따른 조성물은 또한 화장 분야에서 통상적인 보조제, 예컨대 친수성 또는 친지성 겔화제, 친수성 또는 친지성 활성제, 보존제, 항산화제, 용매, 방향제, 충전제, 차단제, 안료, 흡취제 및 염료를 함유할 수 있다. 이들 다양한 보조제의 양은 당해 분야에서 통상적으로 사용되는 양이다. 그 성질에 따라 이러한 보조제는 지방상, 수성상, 지질 소포체 및/또는 나노 입자에 도입될 수 있다.

또한, 본 발명에 따른 조성물은 치료제로서 연고, 크림과 같은 외용제의 구성이 될 수 있다.

본 발명은 반하로부터 유래한 캘러스를 이용하여 피부 미백 효능을 가지는 조성물을 제공할 수 있고, 특히 야생 또는 재배한 식물을 이용하는 것이 아닌 식물세포 배양을 통해 획득한 캘러스를 이용한다.

식물세포 배양은 지역적, 계절적인 환경적 영향을 받지 않고 안정한 조건에서 일정하게 공급이 가능하며, 배양 조건의 조절을 통해 특정 유용성분의 발생을 촉진시켜 생산 효율을 증가시킬 수 있다. 또한 지속적인 세포선별을 통해 함유하고 있는 유용성분의 종류와 생산성이 높은 식물세포를 확보할 수 있는 장점이 있다.

본 발명에서 사용된 캘러스의 기원 식물 조직은 반하의 잎에서 유도된 것이다. 본 발명의 추출물은 캘러스를 반하 잎으로부터 배양하고 추출한 다음 이의 배양액을 의미한다.

실시예 1. 반하 식물체 절편 조직배양을 통한 캘러스 취득

반하의 조직별 절편 시료를 배양하였다. 배양 개시 약 2주 후부터 절단면에서 팽창이 이루어지면서 황색 캘러스가 형성되기 시작하였고, 배양 개시 약 4주 후에는 황색 캘러스의 증식과 함께 구조물의 크기 신장이 이루어지면서 그 크기가 약 1 mm 정도에 이르렀다.

한편, 식물생장조절제가 반하의 조직별 절편 시료의 조직배양 체계 확립에 미치는 영향을 알아보기 위해 시료를 약 4주간 배양하였다. 배양한 반하 절편 시료로부터 캘러스 형성 효율을 조사한 결과, MS 기본배지에 1 mg/L 2,4-D를 첨가한 처리구에서 반하의 뿌리 절편으로부터 유래된 캘러스의 형성 효율이 가장 높았다. 배양한지 약 6주 후에는 동일 조성의 새로운 배지들로 계대 보존하였고, 4주 주기로 계대 보존을 반복하면서 반하 유래 캘러스의 인공세포주를 확보하였다.

확보한 반하 유래 캘러스를 이용하여 추출물을 제조하는데, 본 실시예에서는 n-헥산 추출물, 메탄올 추출물, 에탄올 추출물 및 열수 추출물을 제조하였다. 구체적으로, 배양한 반하 유래 캘러스 건조 분말과 물을 1:1 내지 1:10 비율로 80℃의 온도로 3시간 동안 환류 추출을 하여 열수추출물을 제조하였다. 또한, 배양한 반하 유래 캘러스 건조 분말과 n-헥산, 메탄올, 에탄올 용매를 1:1 내지 1:10의 비율로 침지한 다음, 실온에서 24시간동안 추출하여 농축한다. 그리고 용매를 제거함으로써 n-헥산 추출물, 메탄올 추출물, 에탄올 추출물을 제조하였다.

실시예 2. 반하 유래 캘러스 현탁배양

1 mg/L 2,4-D{(2, 4-dichlorophenoxy) acetic acid}가 첨가된 MS 액체배지 20 mL를 250 mL 크기의 삼각플라스크(erlenmeyer flask)에 넣고, 실시예 1에서 증식된 약 1 g의 반하 유래 캘러스를 배지에 옮겼다.

현탁배양은 gyratory shaker(100 rpm)에서 25 ℃ 온도로 암배양을 실시하였다. 약 2주간 배양한 다음 새로운 액체배지 20 mL를 추가하였다. 그로부터 약 4주간 더 배양한 다음, 반하 유래 캘러스의 현탁배양세포와 배양배지 5 mL을 20 mL의 새로운 액체배지가 있는 다른 삼각플라스크에 옮겨 계대배양을 실시하였다. 새로운 액체배지는 1 mg/L 2,4-D가 첨가된 MS 액체배지다. 그리고 계대배양은 약 4주 간격으로 실시하였다.

이와 같은 현탁배양은 기내 대량생산을 위한 초기 단계로서 현탁배양 체계를 확립하기 위한 작업이다.

이하에서는 실험예를 통해 본 발명에 따른 조성물이 미백효과가 있는지를 증명한다. 실험예 1 내지 3에서 사용될 실험대상세포는 마우스로부터 유래된 B16F10 마우스 멜라노마 세포(이하 “B16F10 세포”라 한다)와 인간으로부터 유래된 SK-MEL-5 휴먼 멜라노마 세포(이하 “SK-MEL-5 세포”라 한다)이다. 각 실험예는 세포생존율과 멜라닌합성 저해 활성을 중심으로 실험을 수행하였다.

실험예 1. 반하 유래 캘러스 추출물의 B16F10 세포에서 미백 효과 확인 실험 1

1-1. 실험 준비(B16F10 세포의 배양 및 정량)

본 발명에서 사용한 B16F10 세포는 우태아혈청(fetal bovine serum, 이하 “FBS”라 한다)이 10% 함유된 RPMI-1640 배지에서 배양하였다. 구체적으로 175 ㎠ 플라스틱 플라스크(SPL life science Co., Ltd. Korea)에 멜라노마 세포주를 10 % FBS 및 1% 항생제(antibiotic)/항진균제(antimycotics)가 함유된 RPMI-1640 배지에서 37℃, 5% CO₂의 조건 하에서 배양하였다. 2~3일마다 한 번씩 2차 배양하여 세포주를 유지하였다.

그리고 멜라노마 세포가 자란 175 ㎠ 플라스틱 플라스크에서 배지액을 제거하고, CMF-PBS(calcium magnesium free-phosphate buffered saline, pH 7.2)로 세척한 후, 0.25 % 트립신/EDTA를 처리하여 세포를 플라스크 바닥으로부터 떼어낸 다음 세포 배양액으로 중화시킨 후 원심분리(1000 rpm, 3 min)하였다. 남은 세포의 펠렛(pellet)에 배양액을 가한 다음, 멸균 피펫으로 반복 흡입하여 단일 세포 부유액을 제조하였다. 제조한 세포 부유액과 트립판 블루(trypan blue)를 1:1의 비율로 혼합하고, 광학 현미경상에서 혈구계산판(hemocytometer)을 이용하여 세포 정량을 실시하였다.

1-2. 실험 과정

1-1.에서 준비된 B16F10 세포를 1X10³ cells/well 의 농도로 5% FBS을 포함하는 RPMI-1640 배지에 현탁시켜 96웰 세포배양플레이트(96well cell culture plate)에 넣은 후 1일간 두어 세포를 플레이트에 부착시킨다. 부착된 세포에 100, 50, 25, 12.5, 6.25 ug/mL 농도의 시료(실시예 1)를 각각 첨가하고, 24시간 뒤 α-MSH(melanin stimulating hormone)을 처리한 다음 다시 4일간 배양하였다. 배양을 마친 B16F10 세포를 인산완충생리식염수(phosphate buffered saline, 이하 “PBS”라 한다)로 씻고, 1N NaOH 용액을 넣어 세포를 녹인 다음, 마이크로플레이트 리더(microplate reader)로 490 nm에서 흡광도를 측정하여 멜라닌합성(melanogenesis) 저해율을 구하였다. 순수한 DMSO만 처리한 세포에 α-MSH를 처리하여 멜라닌합성을 유발한 그룹을 대조군으로 하여 수학식 1에 따라 계산하여 백분율로 표시하였다.

1-3. 실험 결과

도 1에 도시된 바와 같이 반하 유래 캘러스 추출물은 B16F10 세포에서 멜라닌합성을 억제하였다. 반하 유래 캘러스 추출물이 29.8 ug/mL 농도인 경우, 멜라닌합성률이 50%로 감소됨(IC₅₀)을 확인하였고, 도 2에 도시된 바와 같이 반하 유래 캘러스 추출물이 50 ug/mL 이하의 농도에서는 세포 독성이 없음을 확인하였다.

실험예 2. 반하 유래 캘러스 추출물의 SK-MEL-5 세포에서 미백 효과 확인 실험

2-1. 실험 준비

실험예 1-1과 같은 방법으로 준비하되, B16F10 세포 대신 SK-MEL-5 세포를 준비하였다.

2-2. 실험 과정

2-1.에서 준비된 SK-MEL-5 세포를 1X10³ cells/well 의 농도로 10% FBS을 포함하는 RPMI-1640 배지에 현탁시켜 96웰 세포배양플레이트(96well cell culture plate)에 넣은 후 1일간 두어 세포를 플레이트에 부착시킨다. 부착된 세포에 100, 50, 25, 12.5, 6.25 ug/mL 농도의 시료(실시예 1)를 각각 첨가하고, 24시간 뒤 α-MSH을 처리한 다음 다시 4일간 배양하였다. 배양을 마친 SK-MEL-5 세포를 PBS로 씻고 1N NaOH 용액을 넣어 세포를 녹인 다음, 마이크로플레이트 리더로 490 nm에서 흡광도를 측정하여 멜라닌합성 저해율을 구하였다. 순수한 DMSO만 처리한 세포에 α-MSH를 처리하여 멜라닌합성을 유발한 그룹을 대조군으로 하여 수학식 1 에 따라 계산하여 백분율로 표시하였다.

2-3. 실험 결과

도 3에 도시된 바와 같이 반하 유래 캘러스 추출물은 SK-MLE-5 세포에서 멜라닌합성을 억제하였다. 반하 유래 캘러스 추출물이 30.3 ug/mL 농도인 경우, 멜라닌합성률이 50%로 감소됨(IC₅₀)을 확인하였고, 도 4에 도시된 바와 같이 반하 유래 캘러스 추출물이 50 ug/mL 이하의 농도에서는 세포 독성이 없음을 확인하였다.

실험예 3. 반하 유래 캘러스 배양액의 B16F10 세포에서 미백 효과 확인 실험 2

3-1. 실험 준비

실험예 1-1과 같은 방법으로 B16F10 세포를 준비하였다.

3-2. 실험 과정

3-1.에서 준비된 B16F10 세포를 1X10³ cells/well 의 농도로 5% FBS을 포함하는 RPMI-1640 배지에 현탁시켜 96웰 세포배양플레이트(96well cell culture plate)에 넣은 후 1일간 두어 세포를 플레이트에 부착시킨다. 부착된 세포에 0.5, 0.2, 0.1, 0.05, 0.01, 0.001, 0.0001, 0.00001, 0.000001, 0.0000001 uL/uL 농도의 배양액(실시예 2)을 각각 첨가하고 24시간 뒤 멜라닌합성 저해율을 구하였다. 순수한 DMSO만 처리한 세포에 α-MSH를 처리하여 멜라닌합성을 유발한 그룹을 대조군으로 하여 하기 수학식에 따라 계산하여 백분율로 표시하였다.

3-3. 실험 결과

도 5에 도시된 바와 같이 반하 유래 캘러스 배양액은 B16F10 세포에서 멜라닌합성을 억제하였다. 반하 유래 캘러스 배양액이 6/1,000,000의 희석 농도인 경우 멜라닌합성률이 50%로 감소됨(IC₅₀)을 확인하였고, 도 6에 도시된 바와 같이 1/10 이하로 희석한 농도에서는 세포 독성이 없음을 확인하였다.

실험예 4. 반하 유래 캘러스 추출물의 제브라피시 배아(embryo)에서 미백 효과 확인

4-1. 실험 준비

제브라피쉬를 교배시키고 아침에 불을 켜서 산란을 유도한 후, 산란 시 배출된 배아를 수거하여 준비한다.

4-2. 실험 과정

6웰 플레이트(6well plate)의 각 웰(well)에 12~15 개의 배아를 넣는다. 반하 유래 캘러스 추출물을 100, 200, 400 μg/mL 농도로 9hpf(수정후 시간, postfertilization)부터 72 hpf까지(63시간) 투여한 후 Leica inverted microscope를 통해 촬영하여 이미지를 얻는다. 이미지를 mage J를 통해 분석하여 형성된 멜라닌을 수치화하고, 각각의 미백효과를 대조군(DMSO)와 비교하였다.

4-3. 실험 결과

그 결과는 도 7과 같다. 즉 도 8에 도시된 바와 같이 반하 유래 캘러스 추출물을 400, 200 μg/mL 로 처리한 그룹에서 멜라닌 형성이 각각 28%, 12% 감소함을 확인하였다.

살펴본 바와 같이, 본 발명에 따른 조성물은 멜라닌의 활성을 억제함으로써 피부미백 기능을 갖으며, 기미, 검버섯, 여드름, 주근깨, 모반에 의해 발생하는 피부 색소침착을 예방하거나 치료하는데 사용될 수 있다.

Claims

반하(Pinellia ternata) 유래 캘러스(callus) 추출물을 유효성분으로 함유하되, B16F10 세포 1X10³ cells/well 기준으로 상기 추출물이 30 ug/mL ~ 50 ug/mL로 함유되는 것을 특징으로 하는 피부 미백 개선용 화장료 조성물.
반하(Pinellia ternata) 유래 캘러스(callus) 배양액을 유효성분으로 함유하되, B16F10 세포 1X10³ cells/well 기준으로 상기 배양액이 6/1,000,000 ~ 1/10 희석 농도로 함유되는 것을 특징으로 하는 피부 미백 개선용 화장료 조성물.
청구항 1 또는 청구항 2에 있어서,
상기 반하 유래 캘러스는 반하 잎으로부터 유래된 것을 특징으로 하는 피부 미백 개선용 화장료 조성물.
청구항 1 또는 청구항 2에 있어서,
상기 피부 미백 개선은 멜라닌의 합성을 억제함으로써 개선하는 것을 특징으로 하는 피부 미백 개선용 화장료 조성물.
반하(Pinellia ternata) 유래 캘러스(callus) 추출물을 유효성분으로 함유하되, B16F10 세포 1X10³ cells/well 기준으로 상기 추출물이 30 ug/mL ~ 50 ug/mL로 함유되는 것을 특징으로 하는 피부 색소침착 예방 또는 치료용 조성물.
반하(Pinellia ternata) 유래 캘러스(callus) 배양액을 유효성분으로 함유하되, B16F10 세포 1X10³ cells/well 기준으로 상기 배양액이 6/1,000,000 ~ 1/10 희석 농도로 함유되는 것을 특징으로 하는 피부 색소침착 예방 또는 치료용 조성물.
청구항 5 또는 청구항 6에 있어서,
상기 반하 유래 캘러스는 반하 잎으로부터 유래된 것을 특징으로 하는 피부 색소침착 예방 또는 치료용 조성물.
청구항 5 또는 청구항 6에 있어서,
상기 피부 색소침착은 기미, 검버섯, 여드름, 주근깨, 모반에 의한 것을 특징으로 하는 피부 색소침착 예방 또는 치료용 조성물.