KR102034432B1 - 류코노스톡 메센테로이데스 신균주 및 이를 이용해 제조한 브로컬리 발효물을 유효성분으로 포함하여 대장염 예방, 치료 또는 개선 기능을 갖는 조성물 - Google Patents

류코노스톡 메센테로이데스 신균주 및 이를 이용해 제조한 브로컬리 발효물을 유효성분으로 포함하여 대장염 예방, 치료 또는 개선 기능을 갖는 조성물 Download PDF

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Abstract

본 발명은 β-글루코시다제의 활성이 높은 류코노스톡 메센테로이데스(Leuconostoc mesenteroides) CJNU 0041 균주를 제공하며, 상기에 기재된 류코노스톡 메센테로이데스 CJNU 0041 균주로 발효시킨 브로컬리 발효물을 유효성분으로 포함하는 대장염 예방, 치료 또는 개선용 조성물에 관한 기술내용을 제공한다.
본 발명에 따른 조성물은 β-글루코시다제의 활성이 높은 류코노스톡 메센테로이데스 균주(CJNU 0041)로 브로컬리를 발효시켜 제조한 브로컬리 발효물을 유효성분으로 포함함에 따라, 대장염을 유발하는 원인균인 클로스트리듐 디피실리(Clostridium difficile) 균주의 생육을 효과적으로 저해할 수 있어 대장염 예방, 치료 또는 개선을 위한 용도로 활용이 가능하다.

Description

류코노스톡 메센테로이데스 신균주 및 이를 이용해 제조한 브로컬리 발효물을 유효성분으로 포함하여 대장염 예방, 치료 또는 개선 기능을 갖는 조성물{NOVEL LACTIC ACID BACTERIA STRAIN LEUCONOSTOC MESENTEROIDES CJNU 0041 AND COMPOSITIONS FOR PREVENTING, TREATING AND IMPROVING COLITIS DISEASES COMPRISING BROCCOLI PRODUCT FERMENTED BY LEUCONOSTOC MESENTEROIDES CJNU 0041}
본 발명은 신균주인 류코노스톡 메센테로이데스 CJNU 0041(Leuconostoc mesenteroides CJNU 0041) 균주 및 이를 이용해 제조한 브로컬리 발효물을 유효성분으로 포함하여 대장염 예방, 치료 또는 개선 기능을 갖는 조성물에 관한 것이다.
클로스트리듐 디피실리(Clostridium difficile, CD) 균주는, 혐기성 아포 형성 그람양성균의 일종인 병원균으로, 대장 내에서 과증식될 경우 독소(toxin)를 분비함으로써 급성 대장염을 유발하는 것으로 알려져 있다.
클로스트리듐 디피실리균의 주요 감염원인은 암피실린(ampicillin), 아목시실린(amoxicillin), 세팔로스포린(cephalosporin), 클린다마이신(clindamycin) 등과 같은 광범위한 항생제의 사용에 의한 것으로, 이와 같은 항생제들은 클로스트리듐 디피실리균의 과증식을 유도하고, 증식된 클로스트리듐 디피실리균은 대장 내에 존재하는 유익균의 성장을 억제하고, 대장점막에 염증을 유도하며, 항생제 유발설사, 위막성 대장염, 클로스트리듐 디피실리균에 의한 설사(C. difficile-associated diarrhea, CDAD) 등과 같은 질병을 유발하는 것으로 알려져 있다.
상기와 같은 CDAD를 개선 또는 치료하기 위해서 반코마이신(vancomycin), 메트로니다졸(metronidazole) 등과 같은 항생제를 사용하여 일차적으로 치료하고 있으나, 항생제 오ㅇ남용으로 인해 클로스트리듐 디피실리균의 항생제 내성으로 인해 재발률이 크게 증가하여 장염이나 설사의 발생빈도가 높아지고 있다.
이에 따라, 최근에는 화학적으로 합성한 항생제 약물 치료를 대체할 수 있도록 새로운 천연 항균성 소재를 개발하기 위한 다양한 연구가 진행되고 있으나, 종래에는 브로컬리 발효물이 갖는 대장염 예방, 치료 및 개선 효과에 대한 기술내용은 개시된 바 없어 이에 대한 연구가 필요하다.
한국등록특허 제10-1396134호 (공개일 : 2014.12.24) 한국등록특허 제10-1164876호 (공개일 : 2011.09.16) 한국공개특허 제10-2016-0133152호 (공개일 : 2016.11.22)
본 발명은 클로스트리듐 디피실리균에 생육을 저해할 수 있는 천연물에 관한연구를 수행하던 중, 류코노스톡 메센테로이데스 균주로 발효시킨 브로컬리 발효물이 클로스트리듐 디피실리균의 생육을 효과적으로 저해한다는 사실을 확인할 수 있었다.
따라서, 본 발명은 류코노스톡 메센테로이데스(Leuconostoc mesenteroides) CJNU 0041 균주 및 해당 균주로 발효시킨 브로컬리 발효물을 유효성분으로 포함하는 대장염 예방, 치료 또는 개선용 조성물에 관한 기술 내용을 제공하고자 하는 것이다.
상기한 바와 같은 기술적 과제를 달성하기 위해서 본 발명은, β-글루코시다제의 활성을 갖는 류코노스톡 메센테로이데스(Leuconostoc mesenteroides) CJNU 0041 균주를 제공한다.
또한, 상기 류코노스톡 메센테로이데스 CJNU 0041 균주는 서열번호 1의 16s rRNA를 포함하는 것을 특징으로 한다.
또한, 본 발명은 상기에 기재된 류코노스톡 메센테로이데스 CJNU 0041 균주로 발효시킨 브로컬리 발효물을 유효성분으로 포함하는 대장염 예방, 치료 또는 개선용 조성물을 제공한다.
또한, 상기 브로컬리 발효물은 브로컬리 추출물 또는 브로컬리 분말 포함 수용액에 상기 류코노스톡 메센테로이데스 CJNU 0041 균주를 접종하여 6 내지 48시간 동안 발효시켜 제조한 것을 특징으로 한다.
또한, 상기 브로컬리 발효물은 클로스트리듐 디피실리(Clostridium difficile) 균주의 생육을 저해하는 항미생물 활성을 갖는 것을 특징으로 한다.
본 발명에 따른 조성물은 β-글루코시다제의 활성이 높은 류코노스톡 메센테로이데스 균주(CJNU 0041)로 브로컬리를 발효시켜 제조한 브로컬리 발효물을 유효성분으로 포함함에 따라, 대장염을 유발하는 원인균인 클로스트리듐 디피실리(Clostridium difficile) 균주의 생육을 효과적으로 저해할 수 있어 대장염 예방, 치료 또는 개선을 위한 용도로 활용이 가능하다.
도 1은 실시예 1에 따라 류코노스톡 메센테로이데스 균주인 CJNU 0041, CJNU 0044 및 CJNU 0048 균주가 갖는 β-글루코시다제의 활성을 분석한 결과이다.
도 2는 실시예 2에 따라 류코노스톡 메센테로이데스 CJNU 0041 균주를 접종하여 발효시킨 발효물의 세포수(Log CFU/mL) 및 산도(pH) 변화를 분석한 결과이다.
도 3은 실시예 2에 따라 류코노스톡 메센테로이데스 CJNU 0041 균주를 접종하여 발효시킨 발효물의 대사산물 변화를 분석하기 위한 HPLC 분석결과이다.
도 4는 실시예 2에 따른 방법으로 제조한 브로컬리 발효물이 갖는 항미생물 활성을 분석한 결과이다.
이하, 본 발명을 상세히 설명하도록 한다.
또한, 본 발명은 β-글루코시다제의 활성을 갖는 류코노스톡 메센테로이데스(Leuconostoc mesenteroides) CJNU 0041 균주를 제공한다.
상기 류코노스톡 균주는 과산화수소 분해효소(catalase) 음성 그람양성 구균으로, 사람과 동물의 대장과 점막 등에 상재균으로 존재하고, 우유, 낙농제품과 다양한 발효음식을 제조하는데 사용있으며, 사람에게 감염을 일으키지 않는 유용한 균주로서, 유제품, 김치, 포유류의 배변, 청국장 등에 서식하는 다양한 류코노스톡 균주를 배양, 동정 및 분리한 균주에서 상기 류코노스톡 메센테로이데스 CJNU 0041 균주는 하기 서열번호 1의 16s rRNA를 포함하고, β-글루코시다아제 활성이 우수하다.
[서열번호 1]
Figure 112017041835328-pat00001
본 발명은 상기에 기재된 바와 같이, 선별된 β-글루코시다아제 활성이 우수한 류코노스톡 메센테로이데스 CJNU 0041 균주를 이용하고, 브로컬리 추출물 또는 브로컬리의 유효성분을 포함하는 수용액에 상기 CJNU 0041를 접종하여 발효시켜 제조한 브로컬리 발효물이 대장염을 유발하는 클로스트리듐 디피실리균(Clostridium difficile) 균주의 생육을 저해하여 대장염 예방, 치료 또는 개선을 위한 용도로 활용가능함을 확인하였으며, 이에 따라, 발명은 류코노스톡 메센테로이데스 CJNU 0041 균주로 발효시킨 브로컬리 발효물을 유효성분으로 포함하는 대장염 예방, 치료 또는 개선용 조성물에 관한 기술 내용을 제공한다.
상기 브로컬리(Brassica oleracea var. italica)는 양귀비목 겨자과에 속하는 한해살이 쌍떡잎식물로 오래전부터 식용으로 다양하게 이용되며 그 영양을 인정받고 있다. 브로컬리에는 흔히 위장병에 좋은 식품으로 꼽히는 양배추보다 고함량으로 비타민을 포함하여 위장을 튼튼하게 해주고 만성위염, 위궤양 등을 예방하고 치료하는 효과가 탁월하다. 특히, 브로컬리의 풍부한 식이섬유는 장 속의 유해물질을 흡착해 몸 밖으로 배출시키는 작용을 하여 대장암 예방에 탁월한 효과가 있으며, 활성산소를 억제하는 효능이 탁월하고 해독작용도 뛰어나 노화를 예방하는 효과가 있다.
상기 브로컬리 발효물은 브로컬리 잎, 줄기 등으로부터 수득한 브로컬리 추출물 또는 브로컬리 분말을 증류수와 혼합하여 제조한 브로컬리 분말 포함 수용액 등을 브로컬리 원재료로 사용하고, 상기 브로컬리 원재료에 CJNU 0041 균주를 접종하여 발효시킨 브로컬리 발효물이라면 제한받지 않고 사용할 수 있으며, 상기와 같은 브로컬리 발효물은, 브로컬리 원재료에 CJNU 0041 균주를 접종한 후 발효시켜 브로컬리 발효물을 제조하고, 브로컬리 발효물에서 상층액을 수득한 후 상층액을 감압 농축 등과 같은 통상적인 농축 방법으로 농축하여 제조한 브로컬리 발효 농축물일 수 있다.
바람직하게는, 상기 조성물에 포함된 상기 브로컬리 발효물은 브로컬리 원재료에 상기 류코노스톡 메센테로이데스 균주를 접종하여 6 내지 72시간 동안 발효시켜 제조한 것을 사용할 수 있으며, 보다 바람직하게는, 상기 브로컬리 원재료는 산도가 pH 5 내지 7일 수 있고, 상기 발효는 제조되는 브로컬리 발효액의 산도가 pH 3 내지 4의 범위일 때 까지 발효시키는 것이 좋고, 12 내지 48시간 동안 발효시켜 상기 브로컬리 발효물을 제조할 수 있다.
본 발명은 상기에 기재된 CJNU 0041 균주를 접종하여 발효시킨 브로컬리 발효물을 포함하는 대장염 예방, 치료 또는 개선용 기능성 식품를 제공한다.
상기 기능성 식품은 식품 제조 시 통상적으로 첨가되는 다양한 성분을 포함할 수 있으며, 상기 성분으로 단백질, 탄수화물, 지방, 영양소, 감미제, 풍미제, 생리활성 성분, 미네랄 등을 대표적인 예로 들 수 있다.
또한, 상기 기능성 식품은 차, 쥬스, 탄산음료, 이온음료 등의 음료류, 우유, 요구루트 등의 가공 유류, 껌류, 떡, 한과, 빵, 과자, 면 등의 식품류, 산제, 정제, 캡슐제 등의 건강 기능성 식품 등의 형태일 수 있다.
상기 감미제는 식품에 단맛을 부여하는 역할을 하고, 천연 또는 합성 소재를 모두 사용할 수 있다. 바람직하게는, 옥수수 시럽, 꿀, 글루코오스, 프럭토오스 등과 같은 단당류, 말토오스, 수크로오스 등과 같은 이당류, 자일리톨, 소르비톨, 에리쓰리톨 등과 같은 올리고당류, 덱스트린, 사이클로 덱스트린 등과 같은 다당류를 감미제로 활용할 수 있다.
상기 풍미제는 기능성 식품의 맛과 향을 부여하는 역할을 하며, 사과, 레몬, 감귤, 포도, 딸기, 복숭아 등과 같은 과일에서 수득한 추출물, 녹차잎, 둥굴레, 대잎, 계피, 국화 잎, 자스민 등에서 수득한 허브 추출물, 또는 인삼, 죽순, 알로에 베라, 은행 등에서 수득한 식물 추출물을 사용할 수 있다.
상기 생리 활성 물질은 카테킨, 에피카테킨, 갈로가테킨, 에피갈로카테킨 등의 카테킨류나, 레티놀, 아스코르브산, 토코페롤, 칼시페롤, 티아민, 리보플라빈 등의 비타민류 등이 사용될 수 있고, 상기 미네랄은 칼슘, 마그네슘, 크롬, 코발트, 구리, 불소화물, 게르마늄, 요오드, 철, 리튬, 마그네슘, 망간, 몰리브덴, 인, 칼륨, 셀레늄, 규소, 나트륨, 황, 바나듐, 아연 등을 사용할 수 있다.
또한 본 발명의 식품 조성물은 상기 감미제 등 이외에도 필요에 따라 보존제, 유화제, 산미료, 점증제 등을 포함할 수 있다.
본 발명은 상기에 기재된 조성물을 포함하는 장염 예방, 치료 또는 개선용 조성물은 약제학적 조성물을 제공한다.
구체적으로, 본 발명의 조성물은 (a) 류코노스톡 메센테로이데스 CJNU 0041 균주로 발효시킨 브로컬리 발효물의 약제학적 유효량; 및 (b) 약제학적으로 허용되는 담체를 포함하는 약제학적 조성물일 수 있으며, 상기 "약제학적 유효량"은 류코노스톡 메센테로이데스 CJNU 0041 균주로 발효시킨 브로컬리 발효물의 효능 또는 활성을 달성하는 데 충분한 양을 의미한다.
본 발명에 따른 조성물을 약제학적 조성물로 제조하는 경우, 상기 약제학적 조성물은 약제학적으로 허용되는 담체를 포함하며, 상기 담체는 제제시에 통상적으로 이용되는 락토오스, 덱스트로오스, 수크로오스, 솔비톨, 만니톨, 전분, 아카시아 고무, 인산 칼슘, 알지네이트, 젤라틴, 규산 칼슘, 결정성 셀룰로오스, 폴리비닐피롤리돈, 셀룰로오스, 물, 메틸 셀룰로오스, 메틸히드록시벤조에이트, 프로필히드록시벤조에이트, 활석, 스테아르산 마그네슘, 미네랄 오일 또는 이들의 혼합물을 사용할 수 있으며, 이에 제한받는 것은 아니다.
또한, 상기 약제학적 조성물은 상기 성분들 이외에 윤활제, 습윤제, 감미제, 향미제, 유화제, 현탁제, 보존제 또는 이들의 혼합물 등을 추가로 포함할 수 있다.
상기 약제학적 조성물은 경구 또는 비경구 투여할 수 있으며, 바람직하게는 경구 투여 방식으로 사용될 수 있으며, 제제화 방법, 투여 방식, 사용자의 연령, 체중, 성별, 병적 상태, 음식, 투여 시간, 투여 경로, 배설 속도 또는 반응 감응성 등과 같은 요인들에 의해 다양한 투여량으로 처방될 수 있으며, 조성물의 일반적인 투여량은 0.001 내지 1,000 ㎎/kg 범위일 수 있다.
또한, 상기 약제학적 조성물은 약제학적으로 허용되는 담체 또는 부형제를 이용하여 제제화함으로써 단위 용량 형태로 제조되거나 또는 다용량 용기 내에 내입시켜 제조될 수 있으며, 오일 또는 수성 매질중의 용액, 현탁액, 시럽제 또는 유화액 형태이거나 엑스제, 산제, 분말제, 과립제, 정제 또는 캅셀제 형태 등과 같은 제형으로 제조될 수 있고, 분산제 또는 안정화제를 추가적으로 포함할 수 있다.
이하, 본 발명을 실시예를 들어 더욱 상세히 설명하도록 한다.
제시된 실시예는 본 발명의 구체적인 예시일 뿐이며, 본 발명의 범위를 제한하기 위한 것은 아니다.
<실시예 1> β-글루코시다아제 활성이 우수한 균주의 분리 및 선별
β-글루코시다아제 활성이 우수한 김치 유산균을 수득하기 위해서, 신균주인 CJNU 0041, CJNU 0044 및 CJNU 0048 균주가 갖는 β-글루코시다아제 활성(β-glucosidase activity)을 분석하였으며, 그 결과를 도 1에 나타내었다.
β-글루코시다아제 활성 분석을 위해서, 에스쿨린(esculin) 1 g, 구연산 철(ferric citrate) 0.5 g, 심장즙(heart infusion) 25 g 및 아가(agar) 15 g/1L을 혼합하여 제조한 에스쿨린 아가를 플레이트에 주입하여 배양 플레이트를 제조하고, 제조한 배양 플레이트에 1 ㎕의 CJNU 0041, CJNU 0044 및 CJNU 0048 균주 배양액을 각각 분주한 후 24시간 동안 배양하였으며, 12시간 및 24시간 경과한 시점에 배양 플레이트의 분해능을 확인하는 방법으로 각각의 균주가 나타내는 β-글루코시다아제 활성을 분석하였으며, 그 결과를 도 1에 나타내었다.
도 1에 나타난 바와 같이, 신균주인 CJNU 0041 균주의 β-글루코시다아제 활성이 가장 우수한 것으로 확인되었으며, 상기 CJNU 0041 균주의 16s rRNA의 염기서열분석을 수행한 결과, 하기 서열번호 1과 같은 16s rRNA를 갖는다는 사실을 확인할 수 있었다.
[서열번호 1]
Figure 112017041835328-pat00002
<실시예 2> 균주의 발효 특성 분석
균주가 갖는 발효 특성을 분석하기 위해서, 브로컬리 분말 40 g에 800 mL의 증류수를 가해 5% 브로컬리 현탁액을 제조하고, 멸균기(autoclave)에서 브로컬리 현탁액을 멸균처리하였다. 멸균한 브로컬리 현탁액에 0.5%의 CJNU 0041 균주를 배양액(v/v)을 접종하고 발효조(3L jar fermenter)에서 발효시켰으며, 발효되는 공정 중에 브로컬리 추출물에 접종된 균주의 세포 성장 및 pH 변화를 분석하였고, 브로컬리 현탁액에 포함된 세포수(viable cell count, log CFU/mL) 및 pH 변화는 CJNU 0041 균주를 접종한 직후, 6, 12, 24 및 48시간 경과한 시점에서 각각 측정하였고, 그 결과를 도 2에 나타내었다.
도 2에 나타난 바와 같이, 균주의 세포수 증가는 24시간 경과하는 시점이 가장 높은 것을 확인할 수 있었으며, 발효액의 산도가 pH 3 부근이 되는 시점에서 세포수가 급격히 저하되는 것을 확인할 수 있었다.
또한, CJNU 0041 균주의 발효에 의한 브로컬리 발효액의 대사산물 변화를 분석하기 위해서, 브로컬리 현탁액 및 브로컬리 발효물의 성분변화를 PDA 디텍터가 구비된 고속액체 크로마토그래피 장치로 240 nm 및 260 nm 파장의 빛으로 분석하였으며, 그 결과를 도 3에 나타내었다.
도 3에 나타낸 바와 같이, HPLC 분석 결과, 240 nm[도 3(a)] 및 260 nm[도 3(b)] 파장의 빛으로 확인한 결과, CJNU 0041 균주의 발효에 의한 브로컬리 발효액의 대사산물이 변화되었음을 확인할 수 있었다.
<실시예 3> 브로컬리 발효물이 갖는 항미생물 활성 분석
제조한 브로컬리 발효물이 갖는 항미생물 활성(antimicrobial activity)을 분석하기 위해서, 급성 대장균을 유발하는 클로스트리듐 디피실리 균주 KCTC 5009(Clostridium difficile KCTC 5009)를 플래이트에 접종하여 배양하였다.
실시예 2에 따른 방법으로 CJNU 0041 균주를 접종하여 48시간 동안 발효시켜 브로컬리 발효물을 제조하였으며, 제조한 브로컬리 발효물에서 상층액을 수득하여 상층액을 10배 농축하여 브로컬리 발효 농축액을 제조하였다.
상기 대장염 유발 균주를 배양한 플래이트에 브로컬리 포함 수용액 및 브로컬리 발효 농축액 2 ㎕를 각각 떨어뜨려, 브로컬리 발효 농축액이 갖는 항미생물 활성을 분석하였으며, 그 결과를 도 4에 나타내었다.
도 4(A)에 나타난 바와 같이, 브로컬리 포함 수용액으로 처리한 플래이트에는 저해환이 형성되지 않아 브로컬리 포함 수용액은 대장염 유발 균주에 대한 저해활성이 없다는 사실을 확인할 수 있었던 반면에, 도 4(B)에 나타난 바와 같이, 브로컬리 발효 농축액으로 처리한 플레이트에서는 저해환이 뚜렷하게 형성된 것을 확인할 수 있어, 브로컬리 발효 농축액이 대장균 유발균인 클로스트리듐 디피실리 균주의 생육을 효과적으로 저해한다는 사실을 확인할 수 있었다.
<110> SEOWON UNIVERSITY INSTITUTE OF INDUSTRY-ACADEMY COLLABORATION KOREA NATIONAL UNIVERSITY OF TRANSPORTATION Industry-Academic Cooperation Foundation NOVAREX Co., Ltd. <120> NOVEL LACTIC ACID BACTERIA STRAIN LEUCONOSTOC MESENTEROIDES CJNU 0041 AND COMPOSITIONS FOR PREVENTING, TREATING AND IMPROVING COLITIS DISEASES COMPRISING BROCCOLI PRODUCT FERMENTED BY LEUCONOSTOC MESENTEROIDES CJNU 0041 <130> P170313 <160> 1 <170> KopatentIn 2.0 <210> 1 <211> 1512 <212> RNA <213> Leuconostoc mesenteroides <400> 1 ccccttctat attggttttt tttttctgct caggatgaac gctggcggcg tgcctaatac 60 atgcaagtcg aacgcacagc gaaaggtgct tgcacctttc aagtgagtgg cgaacgggtg 120 agtaacacgt ggacaacctg cctcaaggct ggggataaca tttggaaaca gatgctaata 180 ccgaataaaa cttagtgtcg catgacaaaa agttaaaagg cgcttcggcg tcacctagag 240 atggatccgc ggtgcattag ttagttggtg gggtaaaggc ctaccaagac aatgatgcat 300 agccgagttg agagactgat cggccacatt gggactgaga cacggcccaa actcctacgg 360 gaggctgcag tagggaatct tccacaatgg gcgaaagcct gatggagcaa cgccgcgtgt 420 gtgatgaagg ctttcgggtc gtaaagcact gttgtatggg aagaacagct agaataggaa 480 atgattttag tttgacggta ccataccaga aagggacggc taaatacgtg ccagcagccg 540 cggtaatacg tatgtcccga gcgttatccg gatttattgg gcgtaaagcg agcgcagacg 600 gtttattaag tctgatgtga aagcccggag ctcaactccg gaatggcatt ggaaactggt 660 taacttgagt gcagtagagg taagtggaac tccatgtgta gcggtggaat gcgtagatat 720 atggaagaac accagtggcg aaggcggctt actggactgc aactgacgtt gaggctcgaa 780 agtgtgggta gcaaacagga ttagataccc tggtagtcca caccgtaaac gatgaacact 840 aggtgttagg aggtttccgc ctcttagtgc cgaagctaac gcattaagtg ttccgcctgg 900 ggagtacgac cgcaaggttg aaactcaaag gaattgacgg ggacccgcac aagcggtgga 960 gcatgtggtt taattcgaag caacgcgaag aaccttacca ggtcttgaca tcctttgaag 1020 cttttagaga tagaagtgtt ctcttcggag acaaagtgac aggtggtgca tggtcgtcgt 1080 cagctcgtgt cgtgagatgt tgggttaagt cccgcaacga gcgcaaccct tattgttagt 1140 tgccagcatt cagatgggca ctctagcgag actgccggtg acaaaccgga ggaaggcggg 1200 gacgacgtca gatcatcatg ccccttatga cctgggctac acacgtgcta caatggcgta 1260 tacaacgagt tgccaacccg cgagggtgag ctaatctctt aaagtacgtc tcagttcgga 1320 ttgtagtctg caactcgact acatgaagtc ggaatcgcta gtaatcgcgg atcagcacgc 1380 cgcggtgaat acgttcccgg gtcttgtaca caccgcccgt cacaccatgg gagtttgtaa 1440 tgcccaaagc cggtggccta accttttagg aaggagccgt ctaaggcagg acagatgact 1500 ggggtgaagt cg 1512

Claims (5)

  1. β-글루코시다제의 활성을 갖는 류코노스톡 메센테로이데스(Leuconostoc mesenteroides) 균주를 선별하는 단계; 및
    상기 선별된 류코노스톡 메센테로이데스 균주를, 브로컬리 분말:물을 1:20(g/mL) 비율로 혼합하여 멸균처리한 브로컬리 추출물에 접종하여 48시간 동안 발효시킨 후 그 상층액을 10배 농축시켜 브로컬리 발효물을 제조하는 단계
    를 포함하는, 클로스트리듐 디피실리균의 생육 저해용 브로컬리 발효물의 제조방법.
  2. 삭제
  3. 삭제
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