KR101914345B1

KR101914345B1 - 발효콩, 발효쌀, 발효감자, 발효인삼 및 발효율무 추출물을 유효성분으로 하는 피부 보습력과 미백 효능을 가지는 화장료 조성물

Info

Publication number: KR101914345B1
Application number: KR1020160170796A
Authority: KR
Inventors: 장문식; 이하연; 유은경; 황혜리; 김영헌; 이제성
Original assignee: 주식회사 더가든오브내추럴솔루션
Priority date: 2016-12-14
Filing date: 2016-12-14
Publication date: 2019-01-15
Also published as: KR20180069199A

Abstract

본 발명은 발효콩, 발효쌀, 발효인삼, 발효율무 및 발효감자의 5가지 발효원료를 혼합한 화장료 조성물에 관한 것으로 더욱 상세하게는 고체 발효공정과 액체 발효공정의 2단계 발효공정을 통한 보습 및 미백 기능성 발효추출물로 기능성 화장료 조성물로 이용할 수 있는 뛰어난 효과가 있다.

Description

발효콩, 발효쌀, 발효감자, 발효인삼 및 발효율무 추출물을 유효성분으로 하는 피부 보습력과 미백 효능을 가지는 화장료 조성물{A moisturizing and anti-wrinkle cosmetic composition comprising fermented soybean, fermented rice, fermented potato, fermented ginseng and fermented adlay extract and preparation method of thereof}

본 발명은 콩, 쌀, 율무, 감자 및 인삼의 5가지 발효원료를 동량의 비율로 혼합한 보습 및 미백 기능성 화장료 조성물 및 그 제조방법에 관한 것이다.

세계의 장수마을과 식품을 살펴보면 발효음식을 즐긴다는 것이다. 대표적인 장수국가인 불가리아는 요구르트의 고향으로 일컬어지고 스페인은 하몽이 대표적 건강음식이며 일본인들의 대부분은 낫또를 즐긴다. 요구르트, 하몽, 낫또는 모두 발효음식이다. 발효는 단순히 음식을 삭히는 것이 아니라 음식을 우리 몸에 소화·흡수되기 쉬운 형태로 바꾸어 준다. 천연원료 속에 이미 존재하는 이로운 성분들은 발효과정 중 효소작용에 의해 생전환 반응을 거쳐 활성화되고 발효미생물에 의해 발효 전 원료보다 고부가가치의 기능성 물질이 생성된다.

대두는 일반적으로 35%의 단백질, 17%의 지방과 31%의 탄수화물 등 영양소 외에 Phytochemical, Phytate, Trypsin inhibitor, 사포닌, 올리고당, 비타민 B군, 철분, 식이섬유 등의 비영양소인 생리활성 물질을 함유한다. 생리활성물질 중 대표적인 Phytochemical 인 isoflavones은 대두속에 약 0.1-0.4% 정도 들어 있으며, 그 구조 및 활성이 에스트로겐(estrogen)과 유사하여 Phytoestrogen이라고도 한다. 대두의 효능에 관한 연구로는 항산화 활성과 Free radical 소거능이 있어 LDL-콜레스테롤 산화를 억제하고 세포내 산화적 스트레스에 대한 방어효과가 보고되었고, in vivo에서는 혈중 과산화물저하와 간세포에서의 catalase 활성 증가가 보고되었다.

최근 들어 콩 및 콩 가공 식품이 주목받는 이유는 일반 성분 이외에도 다양한 기능성 성분을 포함하고 있기 때문인데 대표적인 기능성 성분으로는 여성 호르몬인 estrogen과 구조적으로 유사하며, 항암 및 고혈압, 동백 경화 등 순환기 질환, 골다공증에 효과가 있는 이소플라본(isoflavon)이 있다. 또한 사포닌은 항암 및 노화 방지에 효과적이고 phytic acid 는 인체에 해로운 중금속이온들과 용이하게 결합하여 체외로 쉽게 배설시키는 기능이 있으며 이외에도 trypsin inhibitor, hemaglutinin, 올리고당 등이 콩에 함유된 생리활성 물질로 알려져 있다. 이처럼 콩은 단백질과 지방의 영양공급원뿐 아니라 여러 기능성 물질을 함유함으로써 영양학적으로 가치가 있지만 조직이 견고하여 흡수가 어려운 단점이 있다.

쌀은 삼국시대부터 한민족의 주식의 하나로 재배되기 시작하여 현재 한국의 식 문화에서 빠질 수 없는 중요한 위치를 차지하고 있다. 우리가 쌀이라고 할때는 주로 벼를 도정한 흰쌀 즉, 백미를 뜻한다. 벼를 탈곡하여 겉껍질인 왕겨를 벗겨낸 것을 현미라고 하고, 현미를 도정하여 속껍질을 벗겨낸 것을 백미라고 하는데 쌀겨는 현미에서 백미로 도정하는 과정에서 생기는 쌀눈과 쌀겨로 이루어진 속껍질을 말하며 현미의 약 8%차지한다. 쌀의 주성분은 전분으로써 70∼80% (현미 73%, 백미 76%)를 차지하며 그밖에 덱스트린 (dextrin) 1%, 당분 0.5%, 펜토산 (pentosan) 1%, 조섬유 0.3%를 함유한다.

쌀의 주요 단백질은 80% 전후가 오리제닌(oryzenin, 쌀 glutelin의 명칭)이며 글로블린(globulin, 3∼6%), 알부민(albumin, 1∼3%), 프롤라민 (prolamin, 2∼3%)의 순으로 들어 있는데 이중 알부민(albumin)과 프롤라민 (prolamin)의 함량은 적다. 쌀의 지방 함량은 현미에 약 3%, 백미에는 1% 이하의 적은 양이나 쌀겨의 배아에는 20% 정도로 많이 들어 있다. 지방산 조성은 올레산(oleic acid, 45%), 리놀레산(linoleic acid, 30%), 팔미트산(palmitic acid, 20%) 등이 많다. 현미에는 올레산(oleic acid), 백미에는 리놀레산(linoleic acid)가 각각 40% 정도로 가장 많이 들어 있다. 쌀의 풍부한 영양 성분이 혈액순환을 좋게 하고, 인간 본래의 자연치유력을 활발하게 하여, 혈액을 적절한 알칼리성으로 보존, 체내의 노폐물이나 유해금속을 배출 시킨다. 쌀은 피부에 영양공급, 미백효과, 생체유지 능력이 있어 주근깨, 피부노화에 좋으며, 어깨 통증, 요통, 알레르기 등에 좋다.

인삼 및 홍삼은 한국을 대표하는 자양강장 약재로 수 천년 전부터 우리나라 및 중국 등 한방의학에서 매우 가치가 높은 천연물 소재로 각광받고 있다. 인삼(Panax ginseng C.A. Meyer)은 오가피 나무과 (Araliaceae) 인삼속(Panax)에 속하는 다년생 음지성 숙근초로서 한반도를 중심으로 극동지역에 분포하고 있다. 인삼의 주요 약리활성 성분은 사포닌 즉, 진세노사이드 (ginsenoside)성분으로 알려지고 있으나, 인삼 중에는 비사포닌계도 여러 가지 약리활성 성분도 함유하고 있다. 사포닌 일부 성분들이 홍삼 제조과정 중 화학구조가 변환되어 새로운 사포닌 성분이 생성되기도 하고 일부 생리활성 성분의 함량이 증가하기도 한다.

2010년 8월 식품의약품안전청은 인삼 흡수와 관련해 ‘인삼이 모든 사람에게 유용한 것은 아니고 인삼사포닌을 분해할 수 있는 장내미생물을 많이 가진 경우에 유용하다’는 내용을 발표했다. 인삼사포닌은 먹은 그대로 우리 몸에 흡수되는 것이 아니라 장에 서식하는 미생물에 의해 흡수 가능한 활성성분인 저분자 사포닌으로 분해되는데, 조사대상자 10명 가운데 4명에게 이 미생물이 부족하다는 결과가 나왔다. 홍삼주요기능성 성분은 사포닌이기 때문에 아무리 많이 먹어도 장내에서 이를 분해하지 못하면 소용이 없다는 것을 식품의약품안전청이 공인한 것이다. 반면 발효홍삼은 홍삼에 미생물을 투입하여 미리 발효시켰기 때문에 사포닌이 몸에 바로 흡수될 수 있도록 변환된 상태이다. 따라서 사포닌을 분해하는 장내미생물이 부족한 사람도 발효홍삼을 통해 유효한 사포닌 성분을 흡수할 수 있다. 사포닌 분해효소가 있는 사람도 일반 홍삼을 먹는 것보다 체내 흡수가 더 잘 된다.

인삼의 화학적 성분은 사포닌 성분, 정유 성분, poly acetylene 성분, phenol 성분, 알칼로이드 성분, 다당체, 아미노산, 유기산,유리당, 비타민 및 무기성분 등으로 이루어져있다. 인삼은 항암작용, 항산화작용, 동맥경화 예방, 고혈압 예방, 간 기능의 촉진, 숙취제거, 항피로, 항스트레스, 노화방지, 두뇌활동 촉진 및 항염활성, 콜라겐합성 등 다양한 효능이 보고되었다.

율무의 재배는 주로 봉에 파종해서 가을에 수확하며, 높이는 1.5m 가량이고 꽃은 7월에 피는 열매는 타원형, 율무의 껍질을 벗긴 율무쌀은 보통 쌀보다는 알갱이가 조금 작고, 서민 사이에서는 구황식품으로 이용해 온 역사가 오래되었다. 율무의 일반성분은 수분 10.4%, 단백질 21.3%, 지방 3.7%, 탄수화물 61.1%, 섬유 2.0%, 무기질 1.4%이며, 다른 곡류와 같이 녹말이 탄수화물의 주성분이고 단백질, 지방이 많은 편이다. 율무쌀에는 자양강장의 효과가 있어 강장효과와 이뇨, 미용에도 좋은 것으로 알려져 있고, 본초강목에는 위에 좋으며 비장을 튼튼하게 하고 폐를 보한다고 했으며, 그 밖에 열과풍을 없애주며 습(濕)을 이기게 한다고 한다.

율무에는 단백질과 수분함량이 풍부할 뿐만 아니라 칼륨, 코익셀로라이드 성분이 함유돼 있다. 특히 단백질 중 류신과 글루탐산 함량이 기타 아미노산 성분보다 높다. 수분함량이 풍부해 가을철 건조해진 피부에 수분과 탄력을 줘 피부노화 방지에 효과가 있다. 또한 율무의 칼륨은 부종을 유발하는 나트륨을 배출해준다. 더불어 만성피로, 근육 위축, 장 마비 등을 방지한다. 또한 리놀렌산이 풍부하여 피부 보습 및 항노화에 도움을 주며, 항염, 항암 효능이 보고 되었다.

감자는 마령서(馬鈴薯)·하지감자·북감저(北甘藷)라고도 하며, 페루·칠레 등의 안데스 산맥 원산으로 온대지방에서 널리 재배되고 높이는 60∼100cm이고 독특한 냄새가 난다. 세계적인 장수마을로 유명한 『불가리아의훈자』와 『에콰도르의 비루카밤바』지방 주민들의 식생활을 조사해본 결과 유카라는 감자류 를 주식으로 하고 있다는 공통점이 발견되었다. 장수를 연구하는미국의 한 의학연구소는 장수의 비밀 은 바로 감자를 주식으로 하는데 있으며, 장수자와 감자의 소비량 을 조사한 결과에서도 감자를 주식 으로 하고 있는 민족일수록 장수자가 많은 것으로 입증되었다. 감자하면 대체로 탄수화물을 떠올리지만, 감자에는 그 외에도 몸에 좋은 성분이 많이 들어있고, 유럽에서는 감자를 ‘대지의 사과’라고 부른다. 감자에 들어있는 비타민 C 때문이다. 감자는 사과보다 비타민C가 2개 정도 더 많이 들어 있어 콜라겐 조직을 강화해 피부노화를 방지해주고, 멜라닌 색소의 형성과 침착을 억제해 주근깨, 기미, 검버섯 등을 예방해 준다. 대부분의 비타민 C 조리 시 파괴되어 버리지만 이와 달리 감자의 비타민 C는 익혀도 쉽게 파괴되지 않는다. 감자의 비타민 B1은 뇌의 작용을 도와 심리적인 스트레스가 많은 사람에게 좋고, 판토텐산으로 불리는 비타민 B5는 점막의 회복을 돕는다. 또한 감자는 항산화, 항염, 미백, 항균 능이 있다고 보고되었다.

본 발명과 관련된 선행기술로는 대한민국 등록특허 10-1566320호에 봉선화, 영실, 마카, 비파나무 잎 및 얌빈 뿌리 복합발효추출물을 포함하는 피부재생, 진정 및 자극완화용 화장료 조성물에 관한 것으로 현재까지 쌀, 인삼, 율무, 감자 및 콩 등 5종의 식품 원료의 발효추출물을 함유하는 보습 및 미백 기능성 화장료 조성물 및 그 제조방법에 대하여는 공지된 바 없다.

따라서, 본 발명의 목적은 콩, 쌀, 인삼, 율무 및 감자 등 5종의 식품 원료 발효추출물을 함유하는 보습 및 미백 기능성 화장료 조성물 및 그 제조방법을 제공하는 데 있다.

본 발명의 상기 목적은 a)콩 10 내지 50중량%에 물을 혼합하여 수세 후 도기에서 121℃에서 15분 내지 1시간 동안 가압 멸균하는 단계와; 상기 단계에서 얻은 콩에 Lactobacillus속 균주, 가장 바람직하게는 Lactobacillus casei, Lactobacillus plantarum 또는 Lactobacillus brevis 균주 중에서 어느 하나의 유산균주를 10⁶ ~ 10⁷cell/mL 농도로 2 ~ 10%(w/w) 접종하고 pH 6~8, 온도 30~40℃ 및 습도 60~80% 조건에서 24~96시간 발효시키는 단계와; 상기 단계에서 얻은 콩의 유산균 발효물을 정제수 또는 유기용매로 추출하여 콩 발효추출액을 얻는 단계와;

b)이와 별도로 쌀 10 내지 50중량%에 물을 혼합하여 수세 후 도기에 투입하여 121℃에서 15분 내지 1시간 동안 가압 멸균하는 단계와; 상기 단계에서 얻은 쌀에 Lactobacillus속 균주, 가장 바람직하게는 Lactobacillus casei, Lactobacillus plantarum 또는 Lactobacillus brevis 균주 중에서 어느 하나의 유산균주를 10⁶ ~ 10⁷cell/mL 농도로 2 ~ 10%(w/w) 접종하고 pH 6~8, 온도 35~45℃ 및 습도 60~80% 조건에서 24~96시간 배양하는 단계와; 상기 단계에서 얻은 쌀의 유산균 발효물을 정제수 또는 유기용매로 추출하여 쌀 발효추출액을 얻는 단계와;

c)또 이와 별도로 인삼의 표면을 세척한 후 분쇄기를 이용하여 분쇄시키는 단계와; 상기 단계에서 얻은 인삼에 Lactobacillus속 균주, 가장 바람직하게는 Lactobacillus casei, Lactobacillus plantarum 또는 Lactobacillus brevis 균주 중에서 어느 하나의 유산균주를 10⁶ ~ 10⁷cell/mL 농도로 2 ~ 20%(w/w) 접종하고 pH 6~8, 온도 30~40℃ 및 습도 60~80% 조건에서 24~96시간 발효시키는 단계와; 상기 단계에서 얻은 인삼분말의 유산균 발효물을 정제수 또는 유기용매로 추출하여 인삼 발효 추출액을 얻는 단계와;

d)이와 별도로 율무 10 내지 50중량%에 물을 혼합하여 수세 후 도기에 투입하여 121℃에서 15분 내지 1시간 동안 가압 멸균하는 단계와; 상기 단계에서 얻은 율무에 Saccharomyces속 균주, 가장 바람직하게는 Saccharomyces cerevisiae 또는 Saccharomyces boulardii 효모균주를 10⁶ ~ 10⁷cell/mL 농도로 2 ~ 10%(w/w) 접종하고 pH 6~8, 온도 25~35℃ 및 습도 60~80% 조건에서 24~96시간 발효시키는 단계와; 상기 단계에서 얻은 율무의 효모발효물을 정제수 또는 유기용매로 추출하여 율무 추출액을 얻는 단계와;

e)이와 별도로 감자의 표면을 세척한 후 껍질, 과육 및 씨앗부분을 homogenizer를 이용하여 습식 분쇄시키는 단계와; 상기 단계에서 얻은 분쇄된 감자에 Saccharomyces속 균주, 가장 바람직하게는 Saccharomyces cerevisiae 또는 Saccharomyces boulardii 효모균주 10⁶ ~ 10⁷cell/mL 농도로 2 ~ 5%(w/w) 접종하고 pH 6~8, 온도 25~30℃ 및 습도 60~80% 조건에서 24~96시간 발효시키는 단계와; 상기 단계에서 얻은 감자의 효모발효물을 정제수 또는 유기용매로 추출하여 감자 발효 추출액을 얻는 단계와;

상기 a)~e) 단계에서 얻은 콩, 쌀, 인삼, 율무 및 감자의 5종 원료 발효추출액을 중량비 1:1:1:1:1의 비율로 배합된 화장료 조성물의 피부 보습 및 미백 효과를 평가함으로써 달성하였다.

본 발명은 콩, 쌀, 인삼, 율무 및 감자의 5종 원료 발효추출물은 피부 미백 및 보습 효과가 뛰어난 효과가 있다.

도1은 본 발명에 따른 전기용량을 이용한 수분함량 측정을 통해 5종 원료 발효추출물의 보습 효과를 나타낸 그래프이다.
도2는 본 발명에 따른 경표피 수분증발량 측정을 통해 5종 원료 발효추출물의 보습 효과를 나타낸 그래프이다.
도2는 본 발명에 따른 멜라닌 형성 억제 효과를 통해 5종 원료 발효추출물의 미백 효과를 나타낸 그래프이다.
도3은 본 발명에 따른 타이로시네이즈 저해 활성을 통해 5종 원료 발효추출물의 미백 효과를 나타낸 그래프이다.

본 발명은 피부 미백 및 보습 효과가 뛰어난 콩, 쌀, 인삼, 율무 및 감자등의 5종 원료 발효추출물을 제공한다.

본 발명에 따르면 상기 콩, 쌀 및 인삼의 발효에 사용할 수 있는 유산균은 바람직하게는 Lactobacillus속 균주를 가장 바람직하게는 Lactobacillus casei, Lactobacillus plantarum 또는 Lactobacillus brevis이다.

또, 본 발명에 따르면 상기 율무 및 감자의 발효에 사용할 수 있는 효모균은 바람직하게는 Saccharomyces속 균주를 가장 바람직하게는 Saccharomyces cerevisiae 또는 Saccharomyces boulardii이다.

본 발명에 따라 제조된 상기 콩, 쌀, 인삼, 율무 및 감자의 5종 원료 발효추출물을 유효성분으로 함유하는 화장료 조성물은 당 업계에서 통상적으로 제조되는 어떠한 제형으로도 제조될 수 있으며, 예컨대 화장수, 로션, 크림 및 에센스 등으로 제형화 할 수 있다.

본 발명은 하기의 구체적인 실시예, 실험예, 비교예 및 제조예에 의해 보다 구체적으로 설명되나, 하기 실시예, 실험예, 비교예 및 제조예는 본 발명을 예시하기 위한 것으로 본 발명의 권리범위가 이에 한정하는 것으로 의도되지는 않는다.

실시예1. 본 발명 발효콩 추출물 제조

본 발명에 사용되는 발효콩 추출물은 하기와 같이 제조하였다. 먼저 콩 10 내지 50중량%을 물에 혼합하여 수세 후 가열 멸균된 도기에 1/3 수준으로 채우고, 121℃, 15분~1시간 동안 가압 멸균하였다. 상기 가압 멸균한 콩에 Lactobacillus casei, Lactobacillus plantarum 또는 Lactobacillus brevis를 10⁶ ~ 10⁷ cell/mL 농도로 2~10%(w/w) 접종하고 pH 6~8 온도 30~40℃ 및 습도 60~80%를 유지하며 24~96시간 배양하여 발효하였다. 상기와 같이 발효한 후 정제수, 메탄올, 에탄올, 글리세린, 에틸아세테이트, 부틸렌글리콜, 프로필렌글리콜, 디클로로메탄, 클로로포름, 에틸에테르, 부틸렌글리콜, 헥산 등의 용매를 사용하여 추출하였다.

실시예2. 본 발명 발효쌀 추출물 제조

본 발명 발효쌀 추출물은 하기와 같이 제조하였다. 먼저 쌀 10 내지 50중량%을 물에 혼합하여 수세 후 가열 멸균된 도기에 1/3 수준으로 채우고, 121℃, 15분~1시간 동안 가압 멸균하였다. 상기 가압 멸균한 쌀에 Lactobacillus casei, Lactobacillus plantarum 또는 Lactobacillus brevis를 10⁶ ~ 10⁷ cell/mL 농도로 2~10%(w/w) 접종하고 pH 6~8 온도 35~45℃ 및 습도 60~80%를 유지하며 24~96시간 배양하여 발효하였다. 상기와 같이 발효한 후 정제수, 메탄올, 에탄올, 글리세린, 에틸아세테이트, 부틸렌글리콜, 프로필렌글리콜, 디클로로메탄, 클로로포름, 에틸에테르, 부틸렌글리콜, 헥산 등의 용매를 사용하여 추출하였다.

실시예3. 본 발명 발효인삼 추출물 제조

본 발명 발효인삼은 하기와 같이 제조하였다. 먼저 인삼 10 내지 50중량%을 물에 혼합하여 수세 후 가열 멸균된 도기에 1/3 수준으로 채우고, 121℃, 15분~1시간 동안 가압 멸균하였다. 상기 가압 멸균한 인삼을 Lactobacillus casei, Lactobacillus plantarum 또는 Lactobacillus brevis를 10⁶ ~ 10⁷ cell/mL 농도로 2~20%(w/w) 접종하고 pH 6~8 온도 30~40℃ 및 습도 60~80%를 유지하며 24~96시간 배양하여 발효하였다. 상기와 같이 발효한 후 정제수, 메탄올, 에탄올, 글리세린, 에틸아세테이트, 부틸렌글리콜, 프로필렌글리콜, 디클로로메탄, 클로로포름, 에틸에테르, 부틸렌글리콜, 헥산 등의 용매를 사용하여 추출하였다.

실시예4. 본 발명 발효율무 추출물 제조

본 발명 발효율무는 하기와 같이 제조하였다. 먼저 율무 10 내지 50중량%을 물에 혼합하여 수세 후 가열 멸균된 도기에 1/3 수준으로 채우고, 121℃, 15분~1시간 동안 가압 멸균하였다. 상기 가압 멸균한 율무에 Saccharomyces cerevisiae 또는 Saccharomyce boulardii 균주를 10⁶ ~ 10⁷ cell/mL 농도로 2~10%(w/w) 접종하고 pH 6~8 온도 25~35℃ 및 습도 60~80%를 유지하며 24~96시간 배양하여 발효하였다. 상기와 같이 발효한 후 정제수, 메탄올, 에탄올, 글리세린, 에틸아세테이트, 부틸렌글리콜, 프로필렌글리콜, 디클로로메탄, 클로로포름, 에틸에테르, 부틸렌글리콜, 헥산 등의 용매를 사용하여 추출하였다.

실시예5. 본 발명 발효감자 추출물 제조

본 발명 발효감자는 하기와 같이 제조하였다. 먼저 감자 10 내지 50중량%을 물에 혼합하여 수세 후 가열 멸균된 도기에 1/3 수준으로 채우고, 121℃, 15분~1시간 동안 가압 멸균하였다. 상기 가압 멸균한 감자에 Saccharomyces cerevisiae 또는 Saccharomyce boulardii를 10⁶ ~ 10⁷ cell/mL 농도로 2~10%(w/w) 접종하고 pH 6~8 온도 25~35℃ 및 습도 60~80%를 유지하며 24~96시간 배양하여 발효하였다. 상기와 같이 발효한 후 정제수, 메탄올, 에탄올, 글리세린, 에틸아세테이트, 부틸렌글리콜, 프로필렌글리콜, 디클로로메탄, 클로로포름, 에틸에테르, 부틸렌글리콜, 헥산 등의 용매를 사용하여 추출하였다.

실시예6. 5종의 식품 원료 발효 추출물 제조

상기 실시예1~4에 따라 수득한 5종의 식품 원료들의 발효 추출물을 동량의 중량비(1:1:1:1:1)로 혼합하고 4℃의 냉장 상태로 저장하고 공시재료로 사용하였다.

실험예1. 전기용량을 이용한 수분 함량 측정

상기 실시예6에서 수득한 본 발명 콩, 쌀, 인삼, 율무 및 감자 등의 5종 식품 원료의 미생물 발효추출물의 피부 수분 함량을 측정하기 위해 각질층의 전기적 특성을 이용하여 전기용량(capacitance)에 의해 측정하였다. 이를 위해 건강한 피험자(n=6, 28~40세, 평균 34세)를 선발하여 10% 발효추출물을 첨가한 화장품을 전박부분에 도포(2cm x 2cm 구역에 5분간 흡수)하고 시간에 따른 전기용량의 변화와 경표피 수분증발량(TEWL: Transepidermal waterloss)을 측정하였다. 수분측정 장치는 Skin-O-mat(cosmomed, 독일)을 이용하여 전기용량을 측정하였고, 수분 증발량은 Tewameter로 측정하였다.

실험 결과, 도1에서 알 수 있듯이 1시간 경과시 본 발명 발효 추출물이 대조군에 비해 약 10% 정도의 우수한 보습력을 나타냈으며 2시간 경과시까지 대조군에 비해 높은 보습력을 나타냈다.

또, 도2에서 알 수 있듯이 경표피 수분증발량(TEWL) 측정 결과 본 발명 발효추출물을 10% 첨가한 크림은 첨가하지 않은 크림에 비해 수분증발량이 감소하는 것을 확인하였다.

실험예2. 멜라닌 형성 억제 실험을 통한 미백 효과 측정

상기 실시예6에서 수득한 본 발명 콩, 쌀, 인삼, 율무 및 감자등의 5종 식품 원료의 미생물 발효추출물의 미백 효과를 측정하기 위해 멜라닌 형성 억제 실험을 하였다. 이를 위해 murine melanoma(B-16 F1) 세포를 FBS가 함유된 DMEM 배지로 6-well palte에 well당 1x10⁵ 농도로 접종한 후 37℃, 5% CO₂ incubator에서 세포가 약 80% 이상 부착될 때까지 배양하였다. 배양 후 배지를 제거하고 시료가 적당 농도로 희석된 배지로 교체 후 37℃, 5% CO2 incubator에서 배양하였다. 다시 배지를 제거하고 PBS로 세척한 후 트립신 처리하여 세포를 회수하였다. 회수한 세포를 5,000~10,000rpm으로 10분간 원심분리 한 다음 상등액을 제거하여 pellet을 얻었다. 상기 단계에서 얻은 pellet을 60℃에서 건조한 후 10% DMSO가 함유된 1M 수산화나트륨액 100uL의 cell lysis buffer를 넣어 60℃ 항온수조에서 세포 내 멜라닌을 수득하였고, 마이크로플레이트 측정기로 405nm에서 흡광도를 측정하여 멜라닌 함량을 측정하였다.

실험 결과, 도3에서 알 수 있듯이 본 발명 콩, 쌀, 인삼, 율무 및 감자등의 5종 식품 원료의 미생물 발효추출물을 첨가한 배지에서 대조군에 비해 감소하였으며, 1%의 농도에서 약 15%의 멜라닌 형성 억제 효능을 나타냈다.

실험예3. 타이로시네이즈(tyrosinase) 저해 활성을 통한 미백 효과 측정

상기 실시예6에서 수득한 본 발명 콩, 쌀, 인삼, 율무 및 감자 등의 5종 식품 원료의 미생물 발효추출물의 미백 효과를 측정하기 위해 타이로시네이즈 저해 활성 실험을 Tomita의 방법을 이용하여 측정하였다. 이를 위해 0.1M 인산완충액(phosphate buffer, pH 6.5) 0.5mL, 0.05M 인산완충액(phosphate buffer, pH 6.5) 50uL, 버섯 타이로시네이즈(mushroom tyrosinase, 2,000U/mL, 시그마 알드리치, 미국) 50uL, 1.5mM Ltyrosine(Acros, 미국) 0.2mL 및 5종 원료 발효추출물 3.13~100% 농도로 0.1mL를 혼합하여 반응액을 제조하였고 1.5mL 마이크로튜브에 반응액을 첨가하여 25℃ 온탕기(heating bath)에서 10분간 반응시켰다. 반응 후 얼음에서 5분간 효소반응을 정지시킨 후, micro plate reader를 이용하여 470㎚에서 흡광도를 측정하였다. 대조군으로는 상기 반응액에서 5종 원료 발효추출물 대신 인산완충식염수 0.1mL를 넣었다. 타이로시네이즈 활성저해율을 하기 수학식1의 방법으로 계산하였다.

실험 결과, 도4에서 알 수 있듯이 100%의 농도에서 73%의 tyrosinase 형성 억제 효능을 나타냈다.

비교예1. 본 발명 5종의 식품 원료 발효추출물의 효과 비교

상기 실시예1의 방법으로 수득한 본 발명 콩, 쌀, 인삼, 율무 및 감자 등의 5종 식품 원료의 미생물 발효추출물(실험군)과 발효추출물이 첨가되지 않은 Base cream(대조군1), 쌀 발효추출물(대조군2), 인삼 발효추출물(대조군3), 율무 발효추출물(대조군4), 감자 발효추출물(대조군5) 및 콩 발효추출물(대조군6) 등의 각 보습 및 미백 효과 비교실험을 실시하기 위해 상기 실험예1 내지 2와 동일한 방법으로 비교실험하였다. 수분 함량은 도포 후 1시간 후에 측정하였고, 수분증발량은 4시간 후에 측정하였다. 또, 멜라닌 함량은 1%(v/v) 농도로 첨가하였을 때의 값을 측정하였다.

실험결과, 하기 표1에서 알 수 있듯이 본 발명 콩, 쌀, 인삼, 율무 및 감자의 5종의 식품 원료 발효추출물(실험군)이 대조군 1 내지 5보다 각각 현저히 뛰어난 효과가 있음을 확인하였다.

	피부 수분함량(%)	수분증발량(%)	멜라닌 함량(%)
실험군	122.7	82.9	80.5
대조군1	100.0	100.0	100.0
대조군2	104.5	94.1	85.1
대조군3	109.1	91.2	90.2
대조군4	110.9	93.5	92.7
대조군5	111.8	92.9	91
대조군6	117.3	88.2	96.2

이하, 본 발명을 사용하기에 바람직하고 다양한 화장품 제형을 개시하지만 본 발명의 권리범위가 개시된 제형에 제한되지 않음은 물론이다.

제조예1. 화장수

상기 실시예1에서 수득한 본 발명 콩, 쌀, 인삼, 율무 및 감자 등의 5종의 식품 원료 발효추출물이 함유된 화장수를 하기 표2와 같이 제조하였다.

원료	원 료	함량(중량%)
1	본 발명 발효추출물	10.0
2	글리세린	3.0
3	부틸렌 글리콜	2.0
4	프로필렌 글리콜	2.0
5	폴리옥시에칠렌 경화피마자유	1.0
6	에탄올	10.0
7	트리에탄올아민	0.1
8	방부제	미량
9	색소	미량
10	향료	미량
11	정제수	잔량

제조예2. 로션

상기 실시예1에서 수득한 본 발명 콩, 쌀, 인삼, 율무 및 감자 등의 5종의 식품 원료 발효추출물이 함유된 로션을 하기 표3과 같이 제조하였다.

원료	원 료	함량(중량%)
1	본 발명 발효추출물	10.0
2	밀납	1.0
3	폴리솔베이트 60	1.5
4	솔비단 세스퀴올레이트	0.5
5	유동 파라핀	10.0
6	소르비단 스테아레이트	1.0
7	친유형 모노스테아린신 글리세린	0.5
8	스테아린산	1.5
9	글리세릴스테아레이트/피이지-400 스테아레이트	1.0
10	프로필렌글리콜	3.0
11	카르복시폴리머	0.1
12	트리에탄올아민	0.2
13	방부제	미량
14	색소	미량
15	향료	미량
16	정제수	잔량

제조예3. 크림

상기 실시예1에서 수득한 본 발명 콩, 쌀, 인삼, 율무 및 감자 등의 5종의 식품 원료 발효추출물이 함유된 크림을 하기 표4와 같이 제조하였다.

함량	원 료	함량(중량%)
1	본 발명 발효추출물	10.0
2	스테아린산	2.0
3	세틸알콜	2.0
4	글리세릴모노스테아레이트	2.0
5	폴리옥시에틸렌소르비단모소스테아레이트	0.5
6	솔비단세스퀴올레이트	0.5
7	글리세릴모노스테아레이트/글리세릴스테아레이트/폴리옥시에틸렌스테아레이트	1.0
8	왁스	1.0
9	유동파라핀스	4.0
10	스쿠알란	4.0
11	카프릴릭/카프릭트리글리세라이드	4.0
12	카르복시비닐폴리머	0.3
13	부틸렌글리콜	5.0
14	글리세린	3.0
15	트리에탄올아민	0.5
16	정제수	잔량

제조예4. 에센스 제조

상기 실시예1에서 수득한 본 발명 콩, 쌀, 인삼, 율무 및 감자 등의 5종의 식품 원료 발효추출물이 함유된 에센스를 하기 표5와 같이 제조하였다.

함량	원 료	함량(중량%)
1	본 발명 발효추출물	10.0
2	시토 스테롤	1.7
3	폴리글리세릴 2-올레이트	1.5
4	세라마이드	0.7
5	스테아레스-4	1.2
6	콜레스테롤	1.5
7	디세틸포스페이트	0.4
8	농글리세린	5.0
9	마카다미아 오일	15.0
10	카르복시비닐폴리머	0.2
11	산탄검	0.2
12	방부제	미량
13	향료	미량
14	젱제수	잔량

이상 설명한 바와 같이 본 발명 콩, 쌀, 인삼, 율무 및 감자 등의 5종의 식품 원료 발효추출물은 피부 내 수분 함량을 증가시키고 멜라닌 형성을 억제 및 타이로시네이즈 저해 활성을 억제하는 피부 보습 및 미백효과가 뛰어나므로 화장료 산업상 매우 유용한 발명인 것이다.

Claims

a)콩에 물을 혼합하여 수세 후 도기에서 가압 멸균하는 단계와; 상기 단계에서 얻은 콩을 유산균주를 접종하여 발효시키는 단계와; 상기 단계에서 얻은 발효물을 정제수 또는 유기용매로 추출하는 단계와;
b)쌀에 물을 혼합하여 수세 후 도기에서 가압 멸균하는 단계와; 상기 단계에서 얻은 쌀을 유산균주를 접종하고 발효하는 단계와; 상기 단계에서 얻은 발효물을 정제수 또는 유기용매로 추출하는 단계와;
c)인삼의 표면을 세척 후 분쇄기를 이용하여 분쇄시키는 단계와; 상기 단계에서 얻은 인삼을 유산균주를 접종하고 발효시키는 단계와; 상기 단계에서 얻은 발효물을 정제수 또는 유기용매로 추출하는 단계와;
d)율무에 물을 혼합하여 수세 후 도기에서 가압 멸균하는 단계와; 상기 단계에서 얻은 율무를 효모균주를 접종하고 발효시키는 단계와; 상기 단계에서 얻은 발효물을 정제수 또는 유기용매로 추출하는 단계와;
e)감자의 표면을 세척 후 껍질, 과육 및 씨앗부분을 homogenizer를 이용하여 습식 분쇄시키는 단계와; 상기 단계에서 얻은 감자를 효모균주를 접종하고 발효시키는 단계와; 상기 단계에서 얻은 발효물을 정제수 또는 유기용매로 추출하는 단계에 있어서,
상기 가압 멸균은 121℃에서 15분 내지 1시간 동안 수행하고, 상기 유산균주는 Lactobacillus casei, Lactobacillus plantarum 또는 Lactobacillus brevis 중에서 선택되는 어느 하나의 유산균주이고, 상기 효모균주는 Saccharomyces cerevisiae나 Saccharomyces boulardi 중에서 선택되는 어느 하나의 효모균주이고, 상기 5종의 식품 원료 미생물 발효추출물은 중량비 1:1:1:1:1로 배합하는 것을 특징으로 하는 미생물 발효추출물의 제조방법.
제 1항의 방법에 따라 제조된 미생물 발효추출물.
제 2항의 미생물 발효추출물을 유효성분으로 함유하는 것이 특징인 미백 기능성 화장료 조성물
제 3항에 있어서, 상기 화장료 조성물은 화장수, 로션, 크림 및 에센스 중에서 선택되는 어느 하나의 제형인 것이 특징인 미백 기능성 화장료 조성물.