KR101910720B1 - 키나제 억제제로서의 아미노헤테로아릴 벤즈아미드 - Google Patents

키나제 억제제로서의 아미노헤테로아릴 벤즈아미드 Download PDF

Info

Publication number
KR101910720B1
KR101910720B1 KR1020167009455A KR20167009455A KR101910720B1 KR 101910720 B1 KR101910720 B1 KR 101910720B1 KR 1020167009455 A KR1020167009455 A KR 1020167009455A KR 20167009455 A KR20167009455 A KR 20167009455A KR 101910720 B1 KR101910720 B1 KR 101910720B1
Authority
KR
South Korea
Prior art keywords
mmol
alkyl
cancer
amino
lcms
Prior art date
Application number
KR1020167009455A
Other languages
English (en)
Other versions
KR20160078957A (ko
Inventor
제프리 티. 바그다노프
유. 딩
우석 한
지린 후앙
쿤 지앙
제프 시안밍 진
시앙 코우
패트릭 리
미카 린드발
종쳉 민
위에 판
사비나 페키
키스 브루스 피스터
다니엘 푼
비베크 라우니야르
시아오징 마이클 왕
퀴옹 장
지안구앙 조우
세진 주
Original Assignee
노파르티스 아게
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by 노파르티스 아게 filed Critical 노파르티스 아게
Publication of KR20160078957A publication Critical patent/KR20160078957A/ko
Application granted granted Critical
Publication of KR101910720B1 publication Critical patent/KR101910720B1/ko

Links

Images

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/495—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with two or more nitrogen atoms as the only ring heteroatoms, e.g. piperazine or tetrazines
    • A61K31/4965—Non-condensed pyrazines
    • A61K31/497—Non-condensed pyrazines containing further heterocyclic rings
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/435—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom
    • A61K31/44—Non condensed pyridines; Hydrogenated derivatives thereof
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/435—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom
    • A61K31/44—Non condensed pyridines; Hydrogenated derivatives thereof
    • A61K31/4418—Non condensed pyridines; Hydrogenated derivatives thereof having a carbocyclic group directly attached to the heterocyclic ring, e.g. cyproheptadine
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/435—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom
    • A61K31/44—Non condensed pyridines; Hydrogenated derivatives thereof
    • A61K31/4427—Non condensed pyridines; Hydrogenated derivatives thereof containing further heterocyclic ring systems
    • A61K31/4433—Non condensed pyridines; Hydrogenated derivatives thereof containing further heterocyclic ring systems containing a six-membered ring with oxygen as a ring hetero atom
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/435—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom
    • A61K31/44—Non condensed pyridines; Hydrogenated derivatives thereof
    • A61K31/4427—Non condensed pyridines; Hydrogenated derivatives thereof containing further heterocyclic ring systems
    • A61K31/4436—Non condensed pyridines; Hydrogenated derivatives thereof containing further heterocyclic ring systems containing a heterocyclic ring having sulfur as a ring hetero atom
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/435—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom
    • A61K31/44—Non condensed pyridines; Hydrogenated derivatives thereof
    • A61K31/4427—Non condensed pyridines; Hydrogenated derivatives thereof containing further heterocyclic ring systems
    • A61K31/4439—Non condensed pyridines; Hydrogenated derivatives thereof containing further heterocyclic ring systems containing a five-membered ring with nitrogen as a ring hetero atom, e.g. omeprazole
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/495—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with two or more nitrogen atoms as the only ring heteroatoms, e.g. piperazine or tetrazines
    • A61K31/4965—Non-condensed pyrazines
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/535—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with at least one nitrogen and one oxygen as the ring hetero atoms, e.g. 1,2-oxazines
    • A61K31/5355—Non-condensed oxazines and containing further heterocyclic rings
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/535—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with at least one nitrogen and one oxygen as the ring hetero atoms, e.g. 1,2-oxazines
    • A61K31/5375—1,4-Oxazines, e.g. morpholine
    • A61K31/5377—1,4-Oxazines, e.g. morpholine not condensed and containing further heterocyclic rings, e.g. timolol
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/55—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having seven-membered rings, e.g. azelastine, pentylenetetrazole
    • A61K31/553—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having seven-membered rings, e.g. azelastine, pentylenetetrazole having at least one nitrogen and one oxygen as ring hetero atoms, e.g. loxapine, staurosporine
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K45/00—Medicinal preparations containing active ingredients not provided for in groups A61K31/00 - A61K41/00
    • A61K45/06—Mixtures of active ingredients without chemical characterisation, e.g. antiphlogistics and cardiaca
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P3/00—Drugs for disorders of the metabolism
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P3/00—Drugs for disorders of the metabolism
    • A61P3/08—Drugs for disorders of the metabolism for glucose homeostasis
    • A61P3/10—Drugs for disorders of the metabolism for glucose homeostasis for hyperglycaemia, e.g. antidiabetics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • A61P35/02—Antineoplastic agents specific for leukemia
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P43/00—Drugs for specific purposes, not provided for in groups A61P1/00-A61P41/00
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D213/00—Heterocyclic compounds containing six-membered rings, not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom and three or more double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
    • C07D213/02—Heterocyclic compounds containing six-membered rings, not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom and three or more double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
    • C07D213/04—Heterocyclic compounds containing six-membered rings, not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom and three or more double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having no bond between the ring nitrogen atom and a non-ring member or having only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom
    • C07D213/60—Heterocyclic compounds containing six-membered rings, not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom and three or more double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having no bond between the ring nitrogen atom and a non-ring member or having only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom with hetero atoms or with carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals, directly attached to ring carbon atoms
    • C07D213/72—Nitrogen atoms
    • C07D213/73—Unsubstituted amino or imino radicals
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D241/00—Heterocyclic compounds containing 1,4-diazine or hydrogenated 1,4-diazine rings
    • C07D241/02—Heterocyclic compounds containing 1,4-diazine or hydrogenated 1,4-diazine rings not condensed with other rings
    • C07D241/10—Heterocyclic compounds containing 1,4-diazine or hydrogenated 1,4-diazine rings not condensed with other rings having three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
    • C07D241/14—Heterocyclic compounds containing 1,4-diazine or hydrogenated 1,4-diazine rings not condensed with other rings having three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members with hetero atoms or with carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals, directly attached to ring carbon atoms
    • C07D241/20—Nitrogen atoms
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D401/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom
    • C07D401/02—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom containing two hetero rings
    • C07D401/04—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom containing two hetero rings directly linked by a ring-member-to-ring-member bond
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D401/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom
    • C07D401/02—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom containing two hetero rings
    • C07D401/06—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom containing two hetero rings linked by a carbon chain containing only aliphatic carbon atoms
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D401/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom
    • C07D401/02—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom containing two hetero rings
    • C07D401/12—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom containing two hetero rings linked by a chain containing hetero atoms as chain links
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D403/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D401/00
    • C07D403/02—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D401/00 containing two hetero rings
    • C07D403/06—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D401/00 containing two hetero rings linked by a carbon chain containing only aliphatic carbon atoms
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D405/00—Heterocyclic compounds containing both one or more hetero rings having oxygen atoms as the only ring hetero atoms, and one or more rings having nitrogen as the only ring hetero atom
    • C07D405/02—Heterocyclic compounds containing both one or more hetero rings having oxygen atoms as the only ring hetero atoms, and one or more rings having nitrogen as the only ring hetero atom containing two hetero rings
    • C07D405/04—Heterocyclic compounds containing both one or more hetero rings having oxygen atoms as the only ring hetero atoms, and one or more rings having nitrogen as the only ring hetero atom containing two hetero rings directly linked by a ring-member-to-ring-member bond
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D405/00—Heterocyclic compounds containing both one or more hetero rings having oxygen atoms as the only ring hetero atoms, and one or more rings having nitrogen as the only ring hetero atom
    • C07D405/14—Heterocyclic compounds containing both one or more hetero rings having oxygen atoms as the only ring hetero atoms, and one or more rings having nitrogen as the only ring hetero atom containing three or more hetero rings
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D409/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having sulfur atoms as the only ring hetero atoms
    • C07D409/02—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having sulfur atoms as the only ring hetero atoms containing two hetero rings
    • C07D409/04—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having sulfur atoms as the only ring hetero atoms containing two hetero rings directly linked by a ring-member-to-ring-member bond
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D413/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and oxygen atoms as the only ring hetero atoms
    • C07D413/14—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and oxygen atoms as the only ring hetero atoms containing three or more hetero rings
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D498/00—Heterocyclic compounds containing in the condensed system at least one hetero ring having nitrogen and oxygen atoms as the only ring hetero atoms
    • C07D498/02—Heterocyclic compounds containing in the condensed system at least one hetero ring having nitrogen and oxygen atoms as the only ring hetero atoms in which the condensed system contains two hetero rings
    • C07D498/04—Ortho-condensed systems
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K2121/00—Preparations for use in therapy
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K2300/00—Mixtures or combinations of active ingredients, wherein at least one active ingredient is fully defined in groups A61K31/00 - A61K41/00
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/435—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom
    • A61K31/44—Non condensed pyridines; Hydrogenated derivatives thereof
    • A61K31/445—Non condensed piperidines, e.g. piperocaine
    • A61K31/4523—Non condensed piperidines, e.g. piperocaine containing further heterocyclic ring systems
    • A61K31/4545—Non condensed piperidines, e.g. piperocaine containing further heterocyclic ring systems containing a six-membered ring with nitrogen as a ring hetero atom, e.g. pipamperone, anabasine
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/495—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with two or more nitrogen atoms as the only ring heteroatoms, e.g. piperazine or tetrazines
    • A61K31/505—Pyrimidines; Hydrogenated pyrimidines, e.g. trimethoprim
    • A61K31/506—Pyrimidines; Hydrogenated pyrimidines, e.g. trimethoprim not condensed and containing further heterocyclic rings
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/535—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with at least one nitrogen and one oxygen as the ring hetero atoms, e.g. 1,2-oxazines
    • A61K31/5375—1,4-Oxazines, e.g. morpholine
    • A61K31/5383—1,4-Oxazines, e.g. morpholine ortho- or peri-condensed with heterocyclic ring systems

Abstract

본 발명은 하기 화학식 I의 화합물 또는 그의 염; 및 이들 화합물의 치료 용도를 제공한다. 본 발명은 이들 화합물, 및 이들 화합물과 치료 공동-작용제를 포함하는 조성물을 추가로 제공한다.
<화학식 I>

Description

키나제 억제제로서의 아미노헤테로아릴 벤즈아미드 {AMINOHETEROARYL BENZAMIDES AS KINASE INHIBITORS}
단백질 키나제는 생존 및 증식을 포함한 대부분의 세포 기능을 조절하는 매우 복잡한 신호전달 캐스케이드에 수반된다. 이들 신호전달 경로는, 특히 조절이상 세포 기능에 의해 유발되는 장애, 예컨대 암의 맥락에서 중점적으로 연구된 바 있다. 세포외 신호-조절 키나제 (ERK)는 세포 및 세포하 소기관 내로 세포외 신호를 운반하는데 수반되는 신호전달 키나제의 한 부류이다. ERK1 및 2 (ERK1/2)는 미토겐 활성화 단백질 키나제 (MAPK) 경로에서의 키나제이고, 또한 각각 p42 및 p44로서 지칭된다. ERK1 및 ERK2는 세포에서 비교적 대량 (세포당 ~107개 분자)으로 존재하고, 폭넓은 범위의 활성을 조절하는데 수반된다. 사실상, ERK1/2 캐스케이드의 조절이상은 신경변성 질환, 발달 질환, 당뇨병 및 암을 포함한 다양한 병리상태의 원인이 되는 것으로 공지되어 있다. 2011년 5월 9일에 온라인 공개된 문헌 [Wortzel and Seger, Genes & Cancer, 2:195-209 (2011)].
암에서의 ERK1/2의 역할은, 그의 신호전달 캐스케이드에서 ERK1/2의 돌연변이 상류를 활성화시키는 것이 모든 암 중 절반 초과에 대한 원인이 되는 것으로 여겨지기 때문에 특별한 관심대상이다. 더욱이, 과도한 ERK1/2 활성은 또한 상류 성분이 돌연변이되지 않은 암에서 발견되었으며, 이는 ERK1/2 신호전달이 심지어 돌연변이 활성화를 갖지 않는 암에서의 발암에서 역할을 한다는 것을 시사한다. ERK 경로는 또한 종양 세포 이동 및 침습을 제어하는 것으로 제시된 바 있으며, 따라서 전이와 연관될 수 있다. 2012년 2월 10일 온라인 공개 문헌 [A. von Thun, et al., ERK2 drives tumour cell migration in 3D microenvironments by suppressing expression of Rab17 and Liprin-β2, J. Cell Sciences]을 참조한다. 또한, shRNA를 사용하는 ERK1 또는 ERK2의 침묵화는 배양에서 흑색종 세포를 사멸하였고, 또한 흑색종 세포가 BRAF의 억제제에 대해 보다 감수성이 되었다는 것으로 보고된 바 있다. 문헌 [J. Qin, et al., J. Translational Med. 10:15 (2012)]. ERK1 및 2의 억제제가 MEK 억제제에 대해 내성인 종양 세포에 효과적이고, MEK 및 ERK의 억제가 동시에 상승작용적 활성을 제공하는 것으로 또한 보고되어 있다. 문헌 [Molec. Cancer Therapeutics, vol. 11, 1143 (May 2012)].
ERK 억제제로서 작용하는 인다졸 유도체는 암을 치료하기 위한 치료제로서 보고된 바 있다. WO2012/030685; WO2007/070398; WO2008/153858. 피리돈 또는 유사한 고리에 대한 비아릴 연결을 갖는 특정 2-아미노 피리딘/피리미딘 화합물은 또한 암 및 과다증식성 장애를 치료하는데 유용한 ERK의 억제제로서 보고된 바 있다: WO2013/130976. ERK의 다른 억제제는 또한 치료제로서 개시된 바 있으며, 예를 들어, WO2004/016597을 참조한다. 그의 치료 가치로 인해, ERK1 및/또는 ERK2의 신규 억제제는 ERK1/2 활성의 바람직하지 않은 수준과 연관된 장애를 치료하는 것을 필요로 한다. 본 발명은 ERK1 및/또는 ERK2의 과도한 활성과 연관되어 있는 질환 예컨대 암을 치료하는데 사용하기 위한, ERK1 또는 ERK2 또는 둘 다를 억제하는 신규 화합물을 제공한다.
한 측면에서, 본 발명은 하기 화학식 I의 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염 예컨대 이들 화합물의 제약상 허용되는 염, 예를 들어 HCl 염 형태, 및 상기 화합물 및 염의 동위원소 농축 버전, 특히 상기 화합물의 중수소화 버전 및 그의 염을 제공한다.
<화학식 I>
Figure 112016034409922-pct00001
상기 식에서,
R1은 C3-8 시클로알킬, 고리원으로서 N, O 및 S로부터 선택된 1-2개의 헤테로원자를 함유하는 5-8원 헤테로시클릴, 페닐, -SO2-페닐, -C(O)-페닐, -C(R8)2-페닐, 및 5-6원 헤테로아릴 고리로부터 선택된 임의로 치환된 기이고, 여기서 상기 헤테로시클릴 및 헤테로아릴은 고리원으로서 N, O 및 S로부터 선택된 1-2개의 헤테로원자를 함유하고,
여기서 R1에 대한 임의적인 치환기는 D, 할로, 히드록시, 아미노, -N(R8)2, CN, C1-4 알킬, C1-4 알콕시, -S(C1-4 알킬), C1-4 할로알킬, C1-4 할로알콕시, C3-6 시클로알킬, N, O 및 S로부터 선택된 1-2개의 헤테로원자를 함유하는 3-6원 헤테로시클릴, 옥소 (방향족 고리 상에서는 제외), CN, COOR8, CON(R8)2, -NR8-C(O)R8, -NR8-C(O)OR8, -SO2R8, -NR8SO2R8, 및 SO2N(R8)2로부터 독립적으로 선택된 1-3개의 기이고, 여기서 각각의 R8은 독립적으로 H 또는 C1-4 알킬이고;
L은 결합이거나, 또는 L은 C1-4 알킬렌, C2-4 알케닐렌, C1-4 알키닐렌, C3-6 시클로알킬 또는 고리원으로서 N, O 및 S로부터 선택된 1-2개의 헤테로원자를 함유하는 4-7원 헤테로시클로일일 수 있고, 여기서 L은 R11, D, OH, NH2, -NHR11, -NHC(=O)R11, -NHC(=O)-OR11, -NHC(=O)-NH2, -NHC(=O)-NHR11, -N(R11)2, CN, 할로, N3, CON(R7)2, 및 COOR7로부터 독립적으로 선택된 1-3개의 기로 임의로 치환되고; 여기서 각각의 R11은 독립적으로 C1-4 알킬이고, 이는 D, 할로, OH, NH2, -NHMe, -NMe2, -OP(O)(OH)2 및 O-C1-4 알킬로부터 독립적으로 선택된 3개 이하의 기로 치환될 수 있고;
X 및 Y는 독립적으로 H, D, 할로, CN, 아미노, 히드록시, C1-4 알킬, C1-4 할로알킬, C1-4 알콕시, 및 C1-4 할로알콕시로부터 선택되고;
R2는 H, C1-4 알킬, 또는 아릴-C1-2-알킬-이고, 여기서 아릴 및 C1-4 알킬은 할로, CN, C1-4 알킬, C1-4 할로알킬, C3-6 시클로알킬, C1-4 알콕시, C1-4 할로알콕시, 또는 C1-4 알킬술포닐로 임의로 치환되거나;
또는 R2는 X와 고리화하여 X가 부착되어 있는 페닐 고리에 융합된, N, O 및 S로부터 선택된 1-2개의 헤테로원자를 함유하는 5-7원 헤테로시클릭 고리를 형성할 수 있거나,
또는 R2는 L과 고리화하여 N, O 및 S로부터 선택된 1-2개의 헤테로원자를 함유하는 5-7원 헤테로시클릭 고리를 형성할 수 있고,
여기서 X와 고리화하는 R2에 의해, 또는 L과 고리화하는 R2에 의해 형성된 임의적인 헤테로시클릭 고리는 CN, 할로, C1-4 알킬, C1-4 알콕시, C1-4 할로알킬, C1-4 할로알콕시, 옥소, CN, COOR7, CON(R7)2, 및 -SO2R7로부터 독립적으로 선택된 1 또는 2개의 기로 임의로 치환될 수 있고;
각각의 R7은 독립적으로 H 또는 C1-4 알킬이고;
Z는 N 또는 CR4이고;
R4는 H, D, 할로, C1-4 알킬, C1-4 할로알킬, 또는 C1-4 알콕시이고;
R5는 -C(O)-R5a 및 R5a로부터 선택되고; 여기서 R5a는 임의로 치환된 C3-8 시클로알킬, C3-8 시클로알케닐, N, O 및 S로부터 선택된 1-2개의 헤테로원자를 함유하는 포화 또는 불포화 3-8원 헤테로시클릭 고리, 페닐, 또는 N, O 및 S로부터 선택된 1-3개의 헤테로원자를 함유하는 5-6원 헤테로아릴 고리이고, 여기서 R5에 대한 임의적인 치환기는 D, 할로, 히드록시, 아미노, CN, C1-4 알킬, C1-4 알콕시, C1-4 할로알킬, C1-4 히드록시알킬, C1-4 할로알콕시, C3-6 시클로알킬, N, O 및 S로부터 선택된 1-2개의 헤테로원자를 함유하는 3-6원 헤테로시클릴, 옥소 (방향족 고리 상에서는 제외), CN, -COOR9, -C(O)R9, CON(R9)2, -NR9C(O)R9, -NR9CO2R9, -SO2R9, -NR9SO2R9, 및 -SO2N(R9)2로부터 독립적으로 선택된 1-4개의 기이고, 여기서 각각의 R9는 독립적으로 H, 또는 D, 할로, OH, NH2, NHMe 및 NMe2로부터 독립적으로 선택된 1-3개의 기로 임의로 치환된 C1-4 알킬이고; R5의 동일한 또는 인접한 탄소 원자 상의 2개의 치환기는 임의로 함께, 포화 또는 방향족일 수 있고, N, O 및 S로부터 선택된 1-2개의 헤테로원자를 함유하고, D, Me, 할로, OH, 옥소, O(C1-4 알킬), NH2, C1-4 알킬아미노, 디(C1-4 알킬)아미노로부터 독립적으로 선택된 1-2개의 기로 임의로 치환될 수 있는 5-6원 고리를 형성할 수 있고;
R6은 H, D, 할로, C1-4 알킬, 또는 C1-4 할로알킬이다.
이들 화합물은 ERK1 및/또는 ERK2의 억제제이고, 따라서 ERK1 및/또는 ERK2의 과도한 또는 바람직하지 않은 수준의 활성과 연관된 상태, 특히 ERK1 및/또는 ERK2의 억제제에 반응성인 암을 치료하는데 유용하다.
또 다른 측면에서, 본 발명은 적어도 1종의 제약상 허용되는 담체 또는 부형제와 혼합된, 2종 이상의 제약상 허용되는 담체 또는 부형제와 임의로 혼합된, 화학식 I의 화합물 또는 본원에 기재되어 있는 그의 하위-부류 중 임의의 것을 포함하는 제약 조성물을 제공한다. 이들 조성물은 또한 ERK1 및/또는 ERK2의 과도한 또는 바람직하지 않은 수준의 활성과 연관된 상태, 특히 ERK1 및/또는 ERK2의 억제제에 반응성인 암을 치료하는데 유용하다. 조성물은 또한 치료되는 상태 또는 상기 상태의 연관된 증상의 치료를 증진시키는 1종 이상의 공동-치료제, 예컨대 본원에 기재된 것들을 포함할 수 있다.
또 다른 측면에서, 본 발명은 ERK1 및 ERK2 중 하나 또는 둘 다의 과도한 또는 바람직하지 않은 수준의 활성을 특징으로 하는 상태의 치료를 필요로 하는 대상체에게 유효량의 본원에 기재된 바와 같은 화학식 I의 화합물 또는 그의 임의의 아속, 또는 이러한 화합물을 포함하는 제약 조성물을 투여하는 것을 포함하는, 상기 상태를 치료하는 방법을 제공한다. 대상체는 포유동물일 수 있고, 바람직하게는 인간이고, 전형적으로 ERK1 및/또는 ERK2의 과도한 활성과 연관된 상태를 진단받은 대상체이다. 본원에 기재된 화합물 및 방법에 의해 치료가능한 상태는 ERK1/2 억제제에 반응성인 다양한 형태의 암, 예컨대 고형 종양, 선종, 방광암, 뇌암, 유방암, 자궁경부암, 결장직장암, 결장암, 표피 암종, 여포성 암종, 비뇨생식기암, 교모세포종, 두경부암, 호지킨병, 비-호지킨 림프종, 간세포암, 신장암, 폐암 예컨대 소세포 또는 비소세포 폐암, 백혈병 예컨대 AML 또는 CML, 다발성 골수종, 림프성 장애, 흑색종을 포함한 피부암, 신경모세포종, 난소암, 췌장암, 전립선암, 직장암, 육종, 고환암 및 갑상선암을 포함한다. 화합물은 특히, 흑색종, 난소암, 갑상선암, 결장암, 폐암, 췌장암, 자궁경부암, 두경부암 및 백혈병 예컨대 만성 골수단핵구성 백혈병 (CMML), AML 및 CML을 치료하는데 사용하기 위해 지시된다. 본 발명의 화합물의 사용을 위한 특별한 관심의 지표는 BRAF 돌연변이 예컨대 V600E가 존재하는 암, 예를 들어, 흑색종, 난소암, 갑상선암, 결장직장암 및 폐암; MAPK 및/또는 PI3K 경로가 이상조절된 유방암; KRAS 돌연변이와 연관된 암 예컨대 폐암, 췌장암 및 결장직장암; ERK2 돌연변이를 갖는 암 예컨대 자궁경부암 또는 두경부암; 및 특히 NF-1 돌연변이를 나타내는 경우에 백혈병; 및 EGFR이 돌연변이된 비소세포 폐암을 포함한다.
한 측면에서, 본 발명은 본원에 기재된 화학식 I의 화합물 및 화학식 I의 아속, 뿐만 아니라 이들 화합물의 제약상 허용되는 염, 및 모든 입체이성질체 (부분입체이성질체 및 거울상이성질체 포함), 호변이성질체 및 그의 동위원소 농축 버전 (중수소 치환 포함)을 제공한다. 본 발명의 화합물은 또한 화학식 I (또는 그의 하위화학식)의 화합물의 다형체 및 그의 염을 포함한다. 이들 화합물은 ERK1/2 억제제에 반응성인 상태, 예컨대 본원에 기재된 것들을 치료하기 위한 용도 및 이들 장애를 치료하기 위한 의약의 제조에서의 용도일 수 있고, 이들 장애를 치료하는 공동-치료제와 조합되어 사용될 수 있다. 본원에 기재된 제약 조성물 및 방법은 또한 공동-치료제와 함께 사용되거나 제제화될 수 있으며; 예를 들어, 화학식 I의 화합물 및 그의 하위-화학식은 B-RAF의 억제제 및 본원에 추가로 기재된 바와 같은 다른 치료제와 함께 사용되거나 제제화될 수 있다.
또 다른 측면에서, 본 발명은 화학식 I의 화합물 뿐만 아니라 본 발명의 화합물을 제조하는데 유용한 주요 중간체 화합물을 제조하는 방법을 제공한다.
도 1은 4-(3-아미노-6-((1S,3S,4S)-3-플루오로-4-히드록시시클로헥실)피라진-2-일)-N-((S)-1-(3-브로모-5-플루오로페닐)-2-(메틸아미노)에틸)-2-플루오로벤즈아미드의 유리 염기의 X선 분말 회절 패턴을 제시한다.
도 2는 4-(3-아미노-6-((1S,3S,4S)-3-플루오로-4-히드록시시클로헥실)피라진-2-일)-N-((S)-1-(3-브로모-5-플루오로페닐)-2-(메틸아미노)에틸)-2-플루오로벤즈아미드의 유리 염기의 DSC/TGA 온도그래프이다.
도 3은 4-(3-아미노-6-((1S,3S,4S)-3-플루오로-4-히드록시시클로헥실)피라진-2-일)-N-((S)-1-(3-브로모-5-플루오로페닐)-2-(메틸아미노)에틸)-2-플루오로벤즈아미드의 HCl 염 형태의 X선 분말 회절 패턴을 제시한다.
도 4는 4-(3-아미노-6-((1S,3S,4S)-3-플루오로-4-히드록시시클로헥실)피라진-2-일)-N-((S)-1-(3-브로모-5-플루오로페닐)-2-(메틸아미노)에틸)-2-플루오로벤즈아미드의 HCl 염 형태의 DSC/TGA 온도그래프이다.
달리 제공되거나 문맥으로부터 명백하지 않는 한, 하기 정의가 적용된다:
본원에 사용된 용어 "할로겐" (또는 할로)은 플루오린, 브로민, 염소 또는 아이오딘을 지칭한다. 할로겐-치환된 기 및 모이어티, 예컨대 할로겐에 의해 치환된 알킬 (할로알킬)은 모노할로겐화, 폴리할로겐화 또는 퍼할로겐화될 수 있다. 클로로 및 플루오로는, 달리 명시되지 않는 한, 알킬 또는 시클로알킬 기에 대해 바람직한 할로 치환기이고; 플루오로, 클로로 및 브로모는, 달리 명시되지 않는 한, 아릴 또는 헤테로아릴 기에 대해 종종 바람직하다.
본원에 사용된 용어 "헤테로 원자"는, 달리 제공되지 않는 한, 질소 (N), 산소 (O) 또는 황 (S) 원자, 특히 질소 또는 산소를 지칭한다.
본원에 사용된 용어 "임의로 치환된"은 기재된 기가 비치환될 수 있거나 또는 이는 치환될 수 있음을 나타낸다. 치환된 기는 제약 작용제로서 투여되기에 적어도 충분히 긴 시간 동안 실온에서 물 중에 안정할 것으로 예상되지 않는 화합물을 생성할 치환기의 수, 위치 또는 선택을 포괄하는 것으로 의도되지 않는다. 다중 치환기가 존재하는 경우에, 치환기는 달리 나타내지 않는 한, 독립적으로 선택되어, 예를 들어, 동일하거나 상이한 것일 수 있는 2 또는 3개의 치환기가 존재한다.
본원에 사용된 용어 "알킬"은 10개 이하의 탄소 원자를 갖는 완전 포화 분지형 또는 비분지형 탄화수소 모이어티를 지칭한다. 달리 제공되지 않는 한, 알킬은 1 내지 6개의 탄소 원자, 또는 1 내지 4개의 탄소 원자를 갖는 탄화수소 모이어티를 지칭한다. 알킬의 대표적인 예는 메틸, 에틸, n-프로필, 이소-프로필, n-부틸, sec-부틸, 이소-부틸, tert-부틸, n-펜틸, 이소펜틸, 네오펜틸, n-헥실, 3-메틸헥실, 2,2-디메틸펜틸, 2,3-디메틸펜틸, n-헵틸, n-옥틸, n-노닐, n-데실 등을 포함하나, 이에 제한되지는 않는다.
치환된 알킬은 비치환된 알킬의 수소 원자 대신에 비치환된 알킬 기에 존재하는 수소의 개수 이하의, 1개 이상의 치환기, 예컨대 1, 2 또는 3개의 치환기, 또는 1-4개의 치환기를 함유하는 알킬 기이다. 알킬 기에 적합한 치환기는, 달리 명시되지 않는 한, 할로겐, D, CN, 옥소, 히드록시, 치환 또는 비치환된 C1-4 알콕시, 치환 또는 비치환된 C3-6 시클로알킬, 고리원으로서 N, O 및 S로부터 선택된 1 또는 2개의 헤테로원자를 함유하는 치환 또는 비치환된 3-7원 헤테로시클로알킬, 치환 또는 비치환된 페닐, 아미노, (C1-4 알킬)아미노, 디(C1-4 알킬)아미노, C1-4 알킬티오, C1-4 알킬술포닐, -C(=O)-C1-4 알킬, COOH, COO(C1-4 알킬), -O(C=O)-C1-4 알킬, -NHC(=O)C1 -4 알킬 및 -NHC(=O)OC1 -4 알킬 기로부터 선택될 수 있고; 여기서 치환된 C1-4 알콕시, 치환된 C3-6 시클로알킬, 3-7원 헤테로시클로알킬 및 치환된 페닐에 대한 치환기는 할로, C1-4 알킬, C1-4 할로알킬, D, C1-4 알콕시, 아미노, C1-4 알킬아미노, 디(C1-4 알킬)아미노, 히드록시 및 CN으로부터 독립적으로 선택된 3개 이하의 기이다. 알킬 기에 대해 바람직한 치환기는, 달리 명시되지 않는 한, 할로겐, CN, 옥소, 히드록시, C1-4 알콕시, C3-6 시클로알킬, 페닐, 아미노, (C1-4 알킬)아미노, 디(C1-4 알킬)아미노, C1-4 알킬티오, C1-4 알킬술포닐, -C(=O)-C1-4 알킬, COOH, -COO(C1-4 알킬), -O(C=O)-C1-4 알킬, -NHC(=O)C1 -4 알킬 및 -NHC(=O)O C1-4 알킬 기를 포함한다.
본원에 사용된 용어 "알킬렌"은 1 내지 10개의 탄소 원자 및 다른 분자 성분에 부착된 2개의 개방 원자가를 갖는 2가 알킬 기를 지칭한다. 알킬렌에 부착된 2개의 분자 성분은 동일한 탄소 원자 또는 상이한 탄소 원자 상에 존재할 수 있고; 따라서 예를 들어 프로필렌은 1,1-이치환된, 1,2-이치환된 또는 1,3-이치환될 수 있는 3-탄소 알킬렌이다. 달리 제공되지 않는 한, 알킬렌은 1 내지 6개의 탄소 원자, 또는 1 내지 4개의 탄소 원자를 갖는 모이어티를 지칭한다. 알킬렌의 대표적인 예는 메틸렌, 에틸렌, n-프로필렌, 이소-프로필렌, n-부틸렌, sec-부틸렌, 이소-부틸렌, tert-부틸렌, n-펜틸렌, 이소펜틸렌, 네오펜틸렌, n-헥실렌, 3-메틸헥실렌, 2,2-디메틸펜틸렌, 2,3-디메틸펜틸렌, n-헵틸렌, n-옥틸렌, n-노닐렌, n-데실렌 등을 포함하나, 이에 제한되지는 않는다. 치환된 알킬렌은 1개 이상, 예컨대 1, 2 또는 3개의 치환기를 함유하는 알킬렌 기이고; 달리 명시되지 않는 한, 적합하고 바람직한 치환기는 알킬 기에 대해 적합하고 바람직한 것으로서 기재된 치환기로부터 선택된다.
유사하게, "알케닐렌" 및 "알키닐렌"은 각각 이중 결합 또는 삼중 결합을 갖는 알킬렌 기를 지칭하고; 이들은 전형적으로 2-6개 및 종종 2-4개의 탄소 원자의 길이이고, 일반적으로 알킬렌 기에 대해 설명된 바와 같이 치환될 수 있다.
본원에 사용된 용어 "할로알킬"은 본원에 정의된 바와 같은 1개 이상의 할로 기에 의해 치환된 본원에 정의된 바와 같은 알킬을 지칭한다. 달리 명시되지 않는 한, 할로알킬의 알킬 부분은 1-4개의 탄소 원자를 갖는다. 할로알킬은 퍼할로알킬을 포함한 모노할로알킬, 디할로알킬, 트리할로알킬 또는 폴리할로알킬일 수 있다. 모노할로알킬은 알킬 기 내에 1개의 아이오도, 브로모, 클로로 또는 플루오로를 가질 수 있다. 디할로알킬 및 폴리할로알킬 기는 알킬 내에 2개 이상의 동일한 할로 원자 또는 상이한 할로 기의 조합을 가질 수 있다. 전형적으로 폴리할로알킬은 6, 또는 4, 또는 3, 또는 2개 이하의 할로 기를 함유한다. 할로알킬의 비제한적 예는 플루오로메틸, 디플루오로메틸, 트리플루오로메틸, 클로로메틸, 디클로로메틸, 트리클로로메틸, 펜타플루오로에틸, 헵타플루오로프로필, 디플루오로클로로메틸, 디클로로플루오로메틸, 디플루오로에틸, 디플루오로프로필, 디클로로에틸 및 디클로로프로필을 포함한다. 퍼할로-알킬은 모든 수소 원자가 할로 원자로 대체된 알킬, 예를 들어, 트리플루오로메틸을 지칭한다. 바람직한 할로알킬 기는, 달리 명시되지 않는 한, 모노플루오로-, 디플루오로- 및 트리플루오로-치환된 메틸 및 에틸 기, 예를 들어 CF3, CF2H, CFH2 및 CH2CF3을 포함한다.
본원에 사용된 용어 "알콕시"는 알킬이 상기 정의되어 있는 바와 같은 것인 알킬-O-를 지칭한다. 알콕시의 대표적인 예는 메톡시, 에톡시, 프로폭시, 2-프로폭시, 부톡시, tert-부톡시, 펜틸옥시, 헥실옥시 등을 포함하나, 이에 제한되지는 않는다. 전형적으로, 알콕시 기는 1-6개의 탄소, 보다 통상적으로 1-4개의 탄소 원자를 갖는다.
"치환된 알콕시"는 알콕시의 알킬 부분 상에 1개 이상, 예컨대 1, 2 또는 3개의 치환기를 함유하는 알콕시 기이다. 달리 명시되지 않는 한, 적합하고 바람직한 치환기는, 히드록실 및 아미노가 치환된 '알킬-O' 기의 산소에 직접 부착되어 있는 탄소 상에 통상적으로 존재하지 않는다는 것을 제외하고는 알킬 기에 대해 상기 열거된 치환기로부터 선택된다.
본원에 사용된 용어 "할로알콕시"는 할로알킬이 상기 정의되어 있는 것인 할로알킬-O-를 지칭한다. 할로알콕시의 대표적인 예는 플루오로메톡시, 디플루오로메톡시, 트리플루오로메톡시, 트리클로로메톡시, 2-클로로에톡시, 2,2,2-트리플루오로에톡시, 1,1,1,3,3,3-헥사플루오로-2-프로폭시 등을 포함하나, 이에 제한되지는 않는다. 전형적으로, 할로알킬옥시 기는 1-4개의 탄소 원자 및 3개 이하의 할로겐, 예를 들어, 모노플루오로, 디플루오로 및 트리플루오로 치환된 메톡시 기 및 에톡시 기를 갖는다.
유사하게, "알킬아미노카르보닐", "알콕시알킬", "알콕시카르보닐", "알콕시-카르보닐알킬", "알킬술포닐", "알킬술폭실", "알킬아미노", "할로알킬"과 같은 다른 기의 각 알킬 부분은 "알킬"의 상기 언급된 정의에 기재된 바와 동일한 의미를 가질 것이다. 이 방식으로 사용되는 경우에, 달리 나타내지 않는 한, 알킬 기는 종종 1-4개의 탄소 알킬이고, 언급된 성분 이외의 기에 의해 추가로 치환되지 않는다. 이러한 알킬 기가 치환되는 경우에, 적합한 치환기는 달리 명시되지 않는 한, 알킬 기에 대해 상기 언급된 적합하거나 바람직한 치환기로부터 선택된다.
본원에 사용된 용어 "시클로알킬"은 3-12개의 탄소 원자의 포화 또는 불포화 비-방향족 모노시클릭, 비시클릭, 트리시클릭 또는 스피로시클릭 탄화수소 기를 지칭한다: 시클로알킬 기는 불포화일 수 있고, 포화, 불포화 또는 방향족일 수 있는 또 다른 고리에 융합될 수 있으며, 단 관심 분자식에 연결되어 있는 시클로알킬 기의 고리 원자는 방향족 고리 원자가 아니다. 달리 제공되지 않는 한, 시클로알킬은 3 내지 9개의 고리 탄소 원자 또는 3 내지 7개의 고리 탄소 원자를 갖는 시클릭 탄화수소 기를 지칭한다. 바람직하게는, 시클로알킬 기는, 달리 명시되지 않는 한, 3-7개의 고리 원자, 예를 들어, 시클로프로필, 시클로부틸, 시클로펜틸, 시클로헥실 또는 시클로헵틸을 갖는 포화 모노시클릭 고리이다.
치환된 시클로알킬은 비치환된 기 상의 수소의 개수 이하의, 1-3개 (1, 2, 3개), 또는 3개 초과의 치환기에 의해 치환된 시클로알킬 기이다. 전형적으로, 치환된 시클로알킬은 1-4 또는 1-2개의 치환기를 가질 것이다. 적합한 치환기는, 달리 명시되지 않는 한, 할로겐, 히드록실, 티올, 시아노, 니트로, 옥소, C1-4-알킬이미노, C1-4-알콕시이미노, 히드록시이미노, C1-4-알킬, C2-4-알케닐, C2-4-알키닐, C1-4-알콕시, C1-4-티오알킬, C2-4-알케닐옥시, C2-4-알키닐옥시, C1-4-알킬카르보닐, 카르복시, C1-4-알콕시카르보닐, 아미노, C1-4-알킬아미노, 디-C1-4-알킬아미노, C1-4-알킬아미노카르보닐, C1-4-알킬아미노카르보닐, C1-4-알킬카르보닐아미노, C1-4-알킬카르보닐(C1-4-알킬)아미노, C1-4-알킬술포닐, C1-4-알킬술파모일 및 C1-4-알킬아미노술포닐로 이루어진 군으로부터 독립적으로 선택되며, 여기서 각각의 상기 언급된 탄화수소 기 (예를 들어, 알킬, 알케닐, 알키닐, 알콕시 잔기)는 본원에서의 '알킬' 기에 대한 치환기의 목록으로부터의 각각의 경우에 독립적으로 선택된 1개 이상의 기에 의해 추가로 치환될 수 있다. 시클로알킬에 대해 바람직한 치환기는, 달리 명시되지 않는 한, C1-4 알킬 및 알킬 기에 대해 바람직한 치환기로서 상기 열거된 치환기를 포함한다.
예시적인 모노시클릭 탄화수소 기는 시클로프로필, 시클로부틸, 시클로펜틸, 시클로펜테닐, 시클로헥실 및 시클로헥세닐 등을 포함하나, 이에 제한되지는 않는다.
유사하게, "시클로알킬옥시", "시클로알콕시알킬", "시클로알콕시카르보닐", "시클로알콕시-카르보닐알킬", "시클로알킬술포닐", "할로시클로알킬"과 같은 다른 기의 각 시클로알킬 부분은 "시클로알킬"의 상기 정의에 기재된 바와 동일한 의미를 가질 것이다. 이들 용어가 사용되는 경우에, 시클로알킬은 전형적으로 비치환되거나 또는 1-4개의 기, 통상적으로 1-2개의 기로 치환된 모노시클릭 3-7개 탄소 고리이다. (임의로) 치환되는 경우에, 치환기는 달리 명시되지 않는 한, 전형적으로 C1-4 알킬 및 알킬 기에 대해 적합하거나 바람직한 치환기로서 상기 제시된 기로부터 선택된다.
본원에 사용된 용어 "아릴"은 고리 부분에 6-14개의 탄소 원자를 갖는 방향족 탄화수소 기를 지칭한다. 전형적으로, 아릴은 6-14개의 탄소 원자, 종종 6-10개의 탄소 원자를 갖는 모노시클릭, 비시클릭 또는 트리시클릭 아릴, 예를 들어, 페닐 또는 나프틸이다. 페닐이 때때로 바람직하다. 게다가, 본원에 사용된 용어 "아릴"은 단일 방향족 고리, 또는 함께 융합되어 있는 다중 방향족 고리일 수 있는 방향족 치환기를 지칭한다. 비제한적 예는 페닐, 나프틸 및 1,2,3,4-테트라히드로나프틸을 포함하며, 단 테트라히드로나프틸은 테트라히드로나프틸 기의 방향족 고리의 탄소를 통해 기재된 화학식에 연결된다.
치환된 아릴은 히드록실, 티올, 시아노, 니트로, C1-4-알킬, C2-4-알케닐, C2-4-알키닐, C1-4-알콕시, C1-4-티오알킬, C2-4-알케닐옥시, C2-4-알키닐옥시, 할로겐, C1-4-알킬카르보닐, 카르복시, C1-4-알콕시카르보닐, 아미노, C1-4-알킬아미노, 디-C1-4-알킬아미노, C1-4-알킬아미노카르보닐, 디-C1-4-알킬아미노카르보닐, C1-4-알킬카르보닐아미노, C1-4-알킬카르보닐(C1-4-알킬)아미노, C1-4-알킬술포닐, 술파모일, C1-4-알킬술파모일 및 C1-4-알킬아미노술포닐로 이루어진 군으로부터 독립적으로 선택된 1-5개 (예컨대 1, 또는 2, 또는 3개)의 치환기에 의해 치환된 아릴 기이며, 여기서 각각의 상기 언급된 탄화수소 기 (예를 들어, 알킬, 알케닐, 알키닐, 알콕시 잔기)는 알킬 기에 대해 바람직한 치환기로서 상기 열거된 기로부터의 각 경우에 독립적으로 선택된 1개 이상의 기에 의해 추가로 치환될 수 있다. 치환된 아릴 기에 대해 바람직한 치환기는, 달리 명시되지 않는 한, C1-4 알킬, 할로겐, CN, 히드록시, 치환 또는 비치환된 C1-4 알킬, 치환 또는 비치환된 C1-4 알콕시, 치환 또는 비치환된 C3-6 시클로알킬, 고리원으로서 N, O 및 S로부터 선택된 1-2개의 헤테로원자를 함유하는 치환 또는 비치환된 3-6원 헤테로시클로알킬, 아미노, (C1-4 알킬)아미노, 디(C1-4 알킬)아미노, C1-4 알킬티오, C1-4 알킬술포닐, -C(=O)-C1-4 알킬, COOH, COO(C1-4 알킬), -O(C=O)-C1-4 알킬, -NHC(=O) C1-4 알킬 및 -NHC(=O)O C1-4 알킬 기이며; 여기서 치환된 C1-4 알콕시, 치환된 C3-6 시클로알킬, 3-6원 헤테로시클로알킬 및 치환된 알킬에 대한 치환기는 할로, 옥소, C1-4 알킬, C1-4 할로알킬, C1-4 알콕시, 아미노, 히드록시 및 CN으로부터 독립적으로 선택된 3개 이하의 기이다.
유사하게, "아릴옥시", "아릴옥시알킬", "아릴옥시카르보닐", "아릴옥시-카르보닐알킬"과 같은 다른 기의 각 아릴 부분은 "아릴"의 상기 언급된 정의에 기재된 바와 동일한 의미를 가질 것이다.
본원에 사용된 용어 "헤테로시클릴" 또는 "헤테로시클로알킬"은 포화 또는 부분 불포화이지만 방향족이 아닌 헤테로시클릭 라디칼을 지칭하고, 모노시클릭 또는 융합 또는 가교된 비시클릭, 트리시클릭 또는 스피로시클릭 고리계를 포함한 폴리시클릭 고리일 수 있다. 헤테로사이클 또는 헤테로시클릴은 달리 명시되지 않는 한, 고리원으로서 적어도 1개의 비-탄소 원자, 전형적으로 N, O 또는 S를 함유한다. 달리 명시되지 않는 한, 헤테로시클릴 기는 3 내지 10개, 및 바람직하게는 4 내지 7개의 고리 원자를 가지며; 여기서 1개 이상, 바람직하게는 1 내지 4개, 특히 1 또는 2개의 고리 원자는 O, S 및 N으로부터 독립적으로 선택된 헤테로원자이다 (나머지 고리 원자는 따라서 탄소임). 비치환된 헤테로시클릴은 1 또는 2개의 이중 결합을 가질 수 있으나, 방향족이 아니다. 바람직하게는, 불포화로서 기재되지 않는 한, 본 발명의 화합물에서 헤테로시클릴 기는 포화 단일 고리이다. 심지어, 예를 들어, C5-6 원자 기로서 기재된 경우일지라도, 헤테로사이클은 고리 원자로서 적어도 1개의 헤테로원자를 함유하고, 언급된 총 개수의 고리 원자, 예를 들어 이 예에서 5 또는 6개를 가지며; 따라서 C5-6 헤테로시클릴 기는 적어도 1개의 고리원이 헤테로원자인 5-6원 헤테로시클릭 고리를 지칭한다. 바람직하게는, 헤테로시클릴 기는 고리 원자로서 1 또는 2개의 헤테로원자를 갖고, 바람직하게는 헤테로원자는 서로 직접 연결되어 있지 않다. 결합 고리 (즉 관심 화학식에 연결된 고리)는 바람직하게는 4 내지 7개의 고리 원자를 갖는다. 헤테로시클릭 기는 방향족 고리에 융합될 수 있으며, 단 관심 화학식에 부착된 헤테로시클릭 기의 원자는 방향족이 아니다. 헤테로시클릭 기는 헤테로시클릭 기의 헤테로원자 (전형적으로 질소) 또는 탄소 원자를 통해 관심 화학식에 부착될 수 있다. 헤테로시클릴은 융합 또는 가교된 고리 뿐만 아니라 스피로시클릭 고리계 (예를 들어, 2-옥사-6-아자스피로[3.3]헵탄)를 포함할 수 있고, 폴리시클릭 헤테로시클릭 기 중 오직 1개의 고리는 고리 원자로서 헤테로원자를 함유할 필요가 있다. 헤테로사이클의 예는 테트라히드로푸란 (THF), 디히드로푸란, 1,4-디옥산, 모르폴린, 1,4-디티안, 피페라진, 피페리딘, 1,3-디옥솔란, 이미다졸리딘, 이미다졸린, 피롤린, 피롤리딘, 테트라히드로피란, 디히드로피란, 옥사티올란, 디티올란, 1,3-디옥산, 1,3-디티안, 옥사티안, 티오모르폴린 등을 포함한다.
치환된 헤테로시클릴은, 달리 명시되지 않는 한, 시클로알킬 기에 대해 적합하거나 바람직한 것으로서 상기 기재된 치환기로부터 선택된 1-5개 (예컨대 1, 또는 2, 또는 3개)의 치환기에 의해 독립적으로 치환된 헤테로시클릭 기이다.
유사하게, "헤테로시클릴옥시", "헤테로시클릴옥시알킬", "헤테로시클릴옥시카르보닐"과 같은 다른 기의 각 헤테로시클릴 부분은 "헤테로시클릴"의 상기 언급된 정의에 기재된 바와 동일한 의미를 가질 것이다.
본원에 사용된 "시클릭 에테르"는 고리 원자로서 O를 함유하는 헤테로시클릭 고리, 전형적으로 4-8원 고리, 예를 들어, 옥세탄, 테트라히드로푸란 또는 테트라히드로피란을 지칭한다. 5-8원의 시클릭 에테르는 고리원으로서 2개의 비-인접한 산소 원자, 예를 들어, 디옥산 및 디옥솔란을 함유할 수 있다. 이들 고리는 헤테로시클릭 고리에 대한 것으로서 치환될 수 있으며; 바람직한 치환기는 달리 명시되지 않는 한, C1-4 알킬 (예를 들어, 메틸, 에틸), CN, OH, NH2, NHR, NR2, COOH, COOR, CONR2 및 OR을 포함하며, 여기서 각각의 R은 독립적으로 C1-4 알킬이다. 전형적으로, 안정성 이유를 위해, OH, NH2, NHR 및 NR2 치환기는 고리 내 산소 원자에 직접 결합된 고리 탄소에 부착되어 있지 않다.
본원에 사용된 용어 "헤테로아릴"은 고리원으로서 1 내지 8개의 헤테로원자를 갖는 5-14원 모노시클릭- 또는 비시클릭- 또는 트리시클릭-방향족 고리계를 지칭하며; 헤테로원자는 N, O 및 S로부터 선택된다. 전형적으로, 헤테로아릴은 5-10원 고리계, 예를 들어, 5-6원 모노시클릭 또는 8-10원 비시클릭 기이다. 전형적인 헤테로아릴 기는 2- 또는 3-티에닐, 2- 또는 3-푸릴, 2- 또는 3-피롤릴, 2-, 4-, 또는 5-이미다졸릴, 1-, 3-, 4-, 또는 5-피라졸릴, 2-, 4-, 또는 5-티아졸릴, 3-, 4-, 또는 5-이소티아졸릴, 2-, 4-, 또는 5-옥사졸릴, 3-, 4-, 또는 5-이속사졸릴, 3- 또는 5-(1,2,4-트리아졸릴), 4 또는 5-(1,2,3-트리아졸릴), 1- 또는 2- 또는 3-테트라졸릴, 2-, 3-, 또는 4-피리딜, 3- 또는 4-피리다지닐, 2-피라지닐 및 2-, 4-, 또는 5-피리미디닐을 포함한다.
용어 "헤테로아릴"은, 헤테로방향족 고리가 1개 이상의 아릴, 시클로알킬, 또는 헤테로시클릴 고리에 융합되어 있으며, 여기서 라디칼 또는 관심 화학식에 대한 부착 지점은 헤테로방향족 고리에 존재하는 것인 기를 또한 지칭한다. 비제한적 예는 1-, 2-, 3-, 5-, 6-, 7-, 또는 8-인돌리지닐, 1-, 3-, 4-, 5-, 6-, 또는 7-이소인돌릴, 2-, 3-, 4-, 5-, 6-, 또는 7-인돌릴 및 2-, 3-, 4-, 5-, 6-, 또는 7-인다졸릴을 포함한다.
치환된 헤테로아릴은, 달리 명시되지 않는 한, 비치환된 헤테로아릴 상에 존재할 수 있는 수소 원자를 대체하여 헤테로아릴 고리 상에 1개 이상의 치환기, 전형적으로 아릴 기에 대해 적합하거나 바람직한 것으로서 상기 기재된 치환기로부터 선택된 1, 2 또는 3개의 치환기를 갖는 헤테로아릴 기이다.
유사하게, "헤테로아릴옥시", "헤테로아릴옥시알킬", "헤테로아릴옥시카르보닐"과 같은 다른 기의 각 헤테로아릴 부분은 "헤테로아릴"의 상기 언급된 정의에 기재된 바와 동일한 의미를 가질 것이다.
본 발명의 다양한 실시양태가 본원에 기재되어 있다. 각 실시양태에 명시된 특색은 다른 명시된 특색과 조합되어 본 발명의 추가 실시양태를 제공할 수 있음이 인지될 것이다. 하기 열거된 실시양태는 본 발명을 대표한다.
실시양태 1. 하기 화학식 I의 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염.
<화학식 I>
Figure 112016034409922-pct00002
상기 식에서,
R1은 C3-8 시클로알킬, 고리원으로서 N, O 및 S로부터 선택된 1-2개의 헤테로원자를 함유하는 5-8원 헤테로시클릴, 페닐, -SO2-페닐, -C(O)-페닐, -C(R8)2-페닐, 및 5-6원 헤테로아릴 고리로부터 선택된 임의로 치환된 기이고, 여기서 상기 헤테로시클릴 및 헤테로아릴은 고리원으로서 N, O 및 S로부터 선택된 1-2개의 헤테로원자를 함유하고,
여기서 R1에 대한 임의적인 치환기는 D, 할로, 히드록시, 아미노, -N(R8)2, CN, C1-4 알킬, C1-4 알콕시, -S(C1-4 알킬), C1-4 할로알킬, C1-4 할로알콕시, C3-6 시클로알킬, N, O 및 S로부터 선택된 1-2개의 헤테로원자를 함유하는 3-6원 헤테로시클릴, 옥소 (방향족 고리 상에서는 제외), CN, COOR8, CON(R8)2, -NR8-C(O)R8, -NR8-C(O)OR8, -SO2R8, -NR8SO2R8, 및 SO2N(R8)2로부터 독립적으로 선택된 1-3개의 기이고, 여기서 각각의 R8은 독립적으로 H 또는 C1-4 알킬이고;
L은 결합이거나, 또는 L은 C1-4 알킬렌, C2-4 알케닐렌, C1-4 알키닐렌, C3-6 시클로알킬 또는 고리원으로서 N, O 및 S로부터 선택된 1-2개의 헤테로원자를 함유하는 4-7원 헤테로시클로일일 수 있고, 여기서 L은 R11, D, OH, NH2, -NHR11, -NHC(=O)R11, -NHC(=O)-OR11, -NHC(=O)-NH2, -NHC(=O)-NHR11, -N(R11)2, CN, 할로, N3, CON(R7)2, 및 COOR7로부터 독립적으로 선택된 1-3개의 기로 임의로 치환되고; 여기서 각각의 R11은 독립적으로 C1-4 알킬이고, 이는 D, 할로, OH, NH2, -NHMe, -NMe2, -OP(O)(OH)2 및 O-C1-4 알킬로부터 독립적으로 선택된 3개 이하의 기로 치환될 수 있고;
X 및 Y는 독립적으로 H, D, 할로, CN, 아미노, 히드록시, C1-4 알킬, C1-4 할로알킬, C1-4 알콕시, 및 C1-4 할로알콕시로부터 선택되고;
R2는 H, C1-4 알킬, 또는 아릴-C1-2-알킬-이고, 여기서 아릴 및 C1-4 알킬은 할로, CN, C1-4 알킬, C1-4 할로알킬, C3-6 시클로알킬, C1-4 알콕시, C1-4 할로알콕시, 또는 C1-4 알킬술포닐로 임의로 치환되거나;
또는 R2는 X와 고리화하여 X가 부착되어 있는 페닐 고리에 융합된, N, O 및 S로부터 선택된 1-2개의 헤테로원자를 함유하는 5-7원 헤테로시클릭 고리를 형성할 수 있거나,
또는 R2는 L과 고리화하여 N, O 및 S로부터 선택된 1-2개의 헤테로원자를 함유하는 5-7원 헤테로시클릭 고리를 형성할 수 있고,
여기서 X와 고리화하는 R2에 의해, 또는 L과 고리화하는 R2에 의해 형성된 임의적인 헤테로시클릭 고리는 CN, 할로, C1-4 알킬, C1-4 알콕시, C1-4 할로알킬, C1-4 할로알콕시, 옥소, CN, COOR7, CON(R7)2, 및 -SO2R7로부터 독립적으로 선택된 1 또는 2개의 기로 임의로 치환될 수 있고;
각각의 R7은 독립적으로 H 또는 C1-4 알킬이고;
Z는 N 또는 CR4이고;
R4는 H, D, 할로, C1-4 알킬, C1-4 할로알킬, 또는 C1-4 알콕시이고;
R5는 -C(O)-R5a 및 R5a로부터 선택되고; 여기서 R5a는 임의로 치환된 C3-8 시클로알킬, C3-8 시클로알케닐, N, O 및 S로부터 선택된 1-2개의 헤테로원자를 함유하는 포화 또는 불포화 3-8원 헤테로시클릭 고리, 페닐, 또는 N, O 및 S로부터 선택된 1-3개의 헤테로원자를 함유하는 5-6원 헤테로아릴 고리이고, 여기서 R5에 대한 임의적인 치환기는 D, 할로, 히드록시, 아미노, CN, C1-4 알킬, C1-4 알콕시, C1-4 할로알킬, C1-4 히드록시알킬, C1-4 할로알콕시, C3-6 시클로알킬, N, O 및 S로부터 선택된 1-2개의 헤테로원자를 함유하는 3-6원 헤테로시클릴, 옥소 (방향족 고리 상에서는 제외), CN, -COOR9, -C(O)R9, CON(R9)2, -NR9C(O)R9, -NR9CO2R9, -SO2R9, -NR9SO2R9, 및 -SO2N(R9)2로부터 독립적으로 선택된 1-4개의 기이고, 여기서 각각의 R9는 독립적으로 H, 또는 D, 할로, OH, NH2, NHMe 및 NMe2로부터 독립적으로 선택된 1-3개의 기로 임의로 치환된 C1-4 알킬이고; R5의 동일한 또는 인접한 탄소 원자 상의 2개의 치환기는 임의로 함께, 포화 또는 방향족일 수 있고, N, O 및 S로부터 선택된 1-2개의 헤테로원자를 함유하고, D, Me, 할로, OH, 옥소, O(C1-4 알킬), NH2, C1-4 알킬아미노, 디(C1-4 알킬)아미노로부터 독립적으로 선택된 1-2개의 기로 임의로 치환될 수 있는 5-6원 고리를 형성할 수 있고;
R6은 H, D, 할로, C1-4 알킬, 또는 C1-4 할로알킬이다.
실시양태 2. 실시양태 1에 있어서, Z가 N인 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염.
실시양태 3. 실시양태 1에 있어서, Z가 CH인 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염.
실시양태 4. 실시양태 1 내지 3 중 어느 한 실시양태에 있어서, R2가 H 또는 Me인 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염.
실시양태 5. 실시양태 1 내지 4 중 어느 한 실시양태에 있어서, R6이 H인 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염.
실시양태 6. 실시양태 1 내지 5 중 어느 한 실시양태에 있어서, R5가 -C(O)-R5a 및 R5a로부터 선택되고; 여기서 R5a가 C3-8 시클로알킬, N, O 및 S로부터 선택된 1-2개의 헤테로원자를 함유하는 5-8원 헤테로시클릴, 페닐, 및 5-6원 헤테로아릴로부터 선택되고, D, 할로, CN, 히드록시, C1-4 알콕시, C1-4 알킬, C1-4 할로알킬, C1-4 히드록시알킬, C1-4 할로알콕시, -SO2R', -N(R')2, -NR'-C(O)-R', 및 -SO2NR'2로부터 독립적으로 선택된 1-3개의 기로 임의로 치환되고, 여기서 각각의 R'가 독립적으로 H 또는 C1-4 알킬인 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염.
실시양태 7. 실시양태 1 내지 6 중 어느 한 실시양태에 있어서, R5가 -C(O)-R5a 및 R5a로부터 선택되고; 여기서 R5a가 페닐, 피리딘, 피리돈, 피라진, 피리다진, 피라졸, 트리아졸, 테트라졸, 티아졸, 옥사졸, 이미다졸, 이소티아졸, 이속사졸, 푸란, 및 티오펜으로부터 선택되고, 이들 각각이 할로, D, CN, C1-4 알킬, C1-4 알콕시, C1-4 할로알킬, C1-4 히드록시알킬, C1-4 할로알콕시, CN, COOR9, CON(R9)2, 및 -SO2R9로부터 독립적으로 선택된 1 또는 2개의 기로 임의로 치환되고, 여기서 각각의 R9가 독립적으로 H 또는 C1-4 알킬인 화합물.
실시양태 8. 실시양태 3에 있어서, R5가 -C(O)-R5a 및 R5a로부터 선택되고; 여기서 R5a가 고리원으로서 적어도 1개의 N을 함유하는 C5-6 헤테로아릴이고, 이것이 할로, CN, C1-4 알킬, C1-4 할로알킬, C1-4 히드록시알킬, C1-4 알콕시, 및 C1-4 할로알콕시로부터 독립적으로 선택된 1-2개의 기로 임의로 치환된 것인 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염.
실시양태 9. 실시양태 8에 있어서, R5가 -C(O)-R5a 및 R5a로부터 선택되고; 여기서 R5a가 피라졸 또는 트리아졸이고, 할로, CN, C1-4 알킬, C1-4 할로알킬, C1-4 히드록시알킬, C1-4 알콕시, 및 C1-4 할로알콕시로부터 독립적으로 선택된 1-2개의 기로 임의로 치환된 것인 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염.
실시양태 10. 실시양태 1 내지 6 중 어느 한 실시양태에 있어서, R5가 -C(O)-R5a 및 R5a로부터 선택되고; 여기서 R5a가 시클로부틸, 시클로펜틸, 시클로헥실, 시클로헥세닐, 테트라히드로피란, 디히드로피란, 테트라히드로푸란, 옥세탄, 아제티딘, 피롤리딘, 피페리딘, 피페라진, 모르폴린, 테트라히드로티오피란 (티아시클로헥산), 및 테트라히드로티오푸란 (티아시클로펜탄)으로부터 선택되고, 이들 각각이 할로, D, CN, N(R9)2, 히드록시, C1-4 알킬, C1-4 알콕시, C1-4 할로알킬, C1-4 히드록시알킬, C1-4 할로알콕시, 옥소, CN, COOR9, CON(R9)2, -NHC(O)R9, -NHCOOR9, -NHSO2R9, 및 -SO2R9로부터 독립적으로 선택된 1-3개의 기로 임의로 치환되고, 여기서 각각의 R9가 독립적으로 H 또는 C1-4 알킬인 화합물.
실시양태 11. 실시양태 1 내지 10 중 어느 한 실시양태에 있어서, R1이 페닐이고, 할로, D, CN, C1-4 알콕시, C1-4 알킬, C1-4 할로알킬, C1-4 할로알콕시, SR', -SO2R', -N(R')2, -NR'-C(O)-R', 및 -SO2NR'2로부터 독립적으로 선택된 3개 이하의 기로 임의로 치환되고, 여기서 각각의 R'가 독립적으로 H, C1-4 알킬 또는 C1-4 할로알킬인 화합물.
실시양태 12. 실시양태 1 내지 10 중 어느 한 실시양태에 있어서, R1이 티오펜, 티아졸, 피리딘, 피리미딘, 피라진 또는 피리다진이고, 할로, CN, C1-4 알콕시, C1-4 알킬, C1-4 할로알킬, C1-4 할로알콕시, -SO2R', -N(R')2, -NR'-C(O)-R', 및 -SO2NR'2로부터 독립적으로 선택된 3개 이하의 기로 임의로 치환되고, 여기서 각각의 R'가 독립적으로 H 또는 C1-4 알킬인 화합물.
실시양태 13. 실시양태 1 내지 12 중 어느 한 실시양태에 있어서, L이 시클로프로판-1,1-디일; 시클로프로판-1,2-디일; 및 -CHR"-로 이루어진 군으로부터 선택되고, 여기서 R"가 H, D; 또는 D, 히드록시, 할로, 아미노, C1-2 알킬아미노, 디(C1-2 알킬)아미노, 및 C1-2 알콕시로부터 독립적으로 선택된 3개 이하의 기로 임의로 치환된 C1-2 알킬인 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염.
실시양태 14. 실시양태 13에 있어서, L이
Figure 112016034409922-pct00003
이고,
여기서 R"는 메틸 또는 에틸이고, 플루오로, 아미노, 히드록시, 메틸아미노, 에틸아미노, 디메틸아미노, -OP(O)(OH)2, 메톡시 또는 에톡시로 임의로 치환된 것인
화합물.
실시양태 15. 실시양태 1 내지 14 중 어느 한 실시양태에 있어서, R2 및 L이 함께 연결되어, R1에 부착되어 있고 C1-4 알킬, C1-4 알콕시, 옥소, CN, COOR7, CON(R7)2, 및 -SO2R7로부터 독립적으로 선택된 1 또는 2개의 기로 또한 임의로 치환된, 모르폴린, 피페리딘, 티오모르폴린, 피페라진, 및 피롤리딘으로부터 선택된 헤테로시클릭 기를 형성하고, 여기서 각각의 R7이 독립적으로 H 또는 C1-4 알킬인 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염.
실시양태 16. 실시양태 1 내지 15 중 어느 한 실시양태에 있어서, Y가 H, 메틸, 또는 할로인 화합물.
실시양태 17. 실시양태 1 내지 16 중 어느 한 실시양태에 있어서, X가 H이거나, 또는 R2가 X와 고리화하여 X가 부착되어 있는 페닐 고리에 융합된 5-7원 헤테로시클릭 고리를 형성하고, 여기서 5-7원 고리가 실시양태 1에 기재된 바와 같이 임의로 치환된 것인 화합물.
실시양태 18. 실시양태 1에 있어서, 하기 화학식 IA의 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염.
<화학식 IA>
Figure 112016034409922-pct00004
상기 식에서, R5는 피라졸, 이미다졸, 이속사졸, 이소티아졸, 옥사졸, 트리아졸, 또는 티아졸이고, 이는 D, F, Cl, CN, Me, OMe, Et, iPr, OEt, 및 CF3으로부터 독립적으로 선택된 2개 이하의 기로 치환될 수 있고;
Y는 H, F, Cl, 또는 Me이고;
R10은 H 또는 -CH2-R*이고, 여기서 R*는 H, -OH, F, -NH2, -NHMe, -NMe2, -OP(O)(OH)2 또는 -OMe이고;
R1은 할로, CN, C1-4 알킬, C1-4 알콕시, C1-4 할로알킬, C1-4 할로알콕시, CN, COOR8, CON(R8)2, -SMe, 및 -SO2R8로부터 독립적으로 선택된 1-2개의 기로 임의로 치환된, 페닐 또는 티에닐이고, 여기서 각각의 R8은 독립적으로 H 또는 C1-4 알킬이다.
실시양태 19. 실시양태 1에 있어서, 하기 화학식 IB의 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염.
<화학식 IB>
Figure 112016034409922-pct00005
상기 식에서, R5는 4-7원 시클릭 에테르 또는 C5-6 시클로알킬이고, R5는 D, F, Cl, CN, 아미노, NHMe, NMe2, -CH2OH, -NHC(O)Me, -NHCOOMe, -NHSO2Me, Me, OMe, OH, 옥소, Et, iPr, OEt, CN, 및 CF3으로부터 독립적으로 선택된 4개 이하의 기로 치환될 수 있고;
Y는 H, F, Cl, 또는 Me이고;
R10은 H 또는 -CH2-R*이고, 여기서 R*는 H, -OH, F, -NH2, -NHMe, -NMe2, -OP(O)(OH)2 또는 -OMe이고;
R1은 할로, CN, C1-4 알킬, C1-4 알콕시, C1-4 할로알킬, C1-4 할로알콕시, CN, COOR8, CON(R8)2, 및 -SO2R8로부터 독립적으로 선택된 1-2개의 기로 임의로 치환된 페닐이고, 여기서 각각의 R8은 독립적으로 H 또는 C1-4 알킬이다.
실시양태 20. 실시양태 1 내지 6 및 19 중 어느 한 실시양태에 있어서, R5가 D, F, Cl, CN, 아미노, NHMe, NMe2, Me, NHSO2Me, NHCOMe, OMe, OH, Et, CN, -CH2OH, 및 CF3으로부터 독립적으로 선택된 1-3개의 기로 치환된 시클로헥실인 화합물.
실시양태 20에 대한 대안에서, 실시양태 1 내지 6 및 19 중 어느 한 실시양태에 있어서, R5가 테트라히드로피라닐, 특히 4-테트라히드로피라닐인 화합물.
또 다른 대안에서, 실시양태 1 내지 6 및 19 중 어느 한 실시양태에 있어서, R5가
Figure 112016034409922-pct00006
로부터 선택된 것인 화합물.
실시양태 21. 실시양태 1 내지 20 중 어느 한 실시양태에 있어서, R1이 F, Cl, Br, I, SMe, SO2Me, 및 CH3으로부터 독립적으로 선택된 0, 1 또는 2개의 기로 치환된 페닐인 화합물.
실시양태 22. 실시양태 1에 있어서, 실시예 1-452의 화합물 및 그의 제약상 허용되는 염으로 이루어진 군으로부터 선택된 화합물.
실시양태 23. 적어도 1종의 제약상 허용되는 부형제와 혼합된 실시양태 1 내지 22 중 어느 한 실시양태에 따른 화합물을 포함하는 제약 조성물.
실시양태 24. 실시양태 23에 있어서, 치료 공동-작용제를 추가로 포함하는 제약 조성물.
실시양태 25. 실시양태 24에 있어서, 치료 공동-작용제가 항암 화합물, 진통제, 및 항염증 화합물로부터 선택된 것인 제약 조성물.
실시양태 26. 암의 치료를 필요로 하는 대상체에게 치료 유효량의 실시양태 1 내지 20 중 어느 한 실시양태에 따른 화합물 또는 실시양태 23 내지 25 중 어느 한 실시양태의 제약 조성물을 투여하는 것을 포함하는, 암을 치료하는 방법.
실시양태 27. 실시양태 26에 있어서, 암이 선종, 방광암, 뇌암, 유방암, 자궁경부암, 결장직장암, 결장암, 표피 암종, 여포성 암종, 비뇨생식기암, 교모세포종, 두경부암, 호지킨병, 비-호지킨 림프종, 간세포암, 두경부암, 신장암, 폐암 예컨대 소세포 또는 비소세포 폐암, 백혈병 예컨대 AML 또는 CML, 다발성 골수종, 림프성 장애, 흑색종을 포함한 피부암, 신경모세포종, 난소암, 췌장암, 전립선암, 직장암, 육종, 고환암, 및 갑상선암으로부터 선택된 것인 방법.
실시양태 28. 실시양태 1 내지 22 중 어느 한 실시양태에 있어서, 의약으로서 사용하기 위한 화합물.
실시양태 29. 암의 치료를 위한 의약의 제조에서의 실시양태 1 내지 22 중 어느 한 실시양태에 따른 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염의 용도; 또는 특히 실시양태 27에 언급된 것들과 같은 암의 치료를 위한 의약에서의 실시양태 1 내지 22 중 어느 한 실시양태에 따른 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염의 용도.
실시양태 30. 본 발명의 화합물을 합성하는 방법. 예를 들어, 4-(3-아미노-6-((1S,3S,4S)-3-플루오로-4-히드록시시클로헥실)피라진-2-일)-N-((S)-1-(3-브로모-5-플루오로페닐)-2-(메틸아미노)에틸)-2-플루오로벤즈아미드를 합성하는 방법이며,
(a). Pd(dppf)Cl2, DCM, Na2CO3 및 DME의 존재 하에 5-((1S,3S,4S)-4-((tert-부틸디메틸실릴)옥시)-3-플루오로시클로헥실)피라진-2-아민을 tert-부틸 2-플루오로-4-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-디옥사보롤란-2-일)벤조에이트와 반응시켜 tert-부틸 4-(3-아미노-6-((1S,3S,4S)-4-((tert-부틸디메틸실릴)옥시)-3-플루오로시클로헥실)피라진-2-일)-2-플루오로벤조에이트를 형성하는 단계;
(b). HCl, ETOH 및 NaOH의 존재 하에 tert-부틸 4-(3-아미노-6-((1S,3S,4S)-4-((tert-부틸디메틸실릴)옥시)-3-플루오로시클로헥실)피라진-2-일)-2-플루오로벤조에이트를 반응시켜 4-(3-아미노-6-((1S,3S,4S)-3-플루오로-4-히드록시시클로헥실)피라진-2-일)-2-플루오로벤조산을 형성하는 단계;
(c). EDCI 및 HOAT의 존재 하에 4-(3-아미노-6-((1S,3S,4S)-3-플루오로-4-히드록시시클로헥실)피라진-2-일)-2-플루오로벤조산을 (S)-N-(2-아미노-2-(3-브로모-5-플루오로페닐)에틸)-N-메틸-2-니트로벤젠술폰아미드 히드로클로라이드와 반응시켜 4-(3-아미노-6-((1S,3S,4S)-3-플루오로-4-히드록시시클로헥실)피라진-2-일)-N-((S)-1-(3-브로모-5-플루오로페닐)-2-(N-메틸-2-니트로페닐술폰아미도)에틸)-2-플루오로벤즈아미드를 생성하는 단계; 및
(d). LiOH, DMF 및 4-메르캅토벤조산의 존재 하에 4-(3-아미노-6-((1S,3S,4S)-3-플루오로-4-히드록시시클로헥실)피라진-2-일)-N-((S)-1-(3-브로모-5-플루오로페닐)-2-(N-메틸-2-니트로페닐술폰아미도)에틸)-2-플루오로벤즈아미드를 반응시켜 4-(3-아미노-6-((1S,3S,4S)-3-플루오로-4-히드록시시클로헥실)피라진-2-일)-N-((S)-1-(3-브로모-5-플루오로페닐)-2-(메틸아미노)에틸)-2-플루오로벤즈아미드를 생성하는 단계
를 포함하는 방법.
실시양태 31. 본 발명은 4-(3-아미노-6-((1S,3S,4S)-3-플루오로-4-히드록시시클로헥실)피라진-2-일)-N-((S)-1-(3-브로모-5-플루오로페닐)-2-(메틸아미노)에틸)-2-플루오로벤즈아미드의 높은 결정화도 HCl 염을 제공하며, 상기 형태는 하기 특징 중 적어도 하나를 갖는다:
a) 실시예 184에 제시된 바와 같은 도 2-세타 (여기서 각 변동은 +/- 0.3, 0.2 또는 0.1 도임)에서의 2개 이상의 피크 (바람직하게는 3개의 피크, 바람직하게는 모든 피크)를 갖는 X선 분말 회절 패턴;
b) 도 3에 도시된 바와 실질적으로 동일한 피크를 갖는 X선 분말 회절 패턴; 또는
c) 실질적으로 도 4에 제시된 바에 따른 열 중량측정 분석 곡선.
화학식 I 또는 IA 또는 IB의 일부 실시양태에서, Y는 H 또는 할로, 특히 F 또는 Cl이다. 할로, 특히 F가 바람직하다. Y가 이들 화학식에 도시된 카르보닐에 대해 '오르토'에 위치할 수 있다.
상기 기재된 화합물의 다수의 실시양태에서, X는 H이다. 다른 실시양태에서, X는 화학식 I에 제시된 카르보닐에 대해 오르토인 기, 예컨대 F, Me 또는 Cl이고, 일부 이러한 실시양태에서, X는 본원에 기재된 바와 같은 R2와 함께 화학식 I에 제시된 페닐 기에 융합된 고리를 형성하는 기이다. 이 융합된 고리는 전형적으로 5, 6 또는 7개의 원자 고리이고, R2에 부착되어 있는 N에 더하여, 고리원으로서 추가의 N, O 또는 S를 함유할 수 있다. 융합된 고리는 치환 또는 비치환될 수 있고; 치환되는 경우에, 이는 화학식 I에 대해 기재된 바와 같은 1 또는 2개의 치환기를 가질 수 있으며, 달리 명시되지 않는 한, 바람직한 치환기로서 할로, C1-4 알킬, 옥소 및 히드록시를 갖는다.
화학식 I의 화합물의 일부 실시양태 및 상기 기재된 다른 실시양태에서, R2는 H 또는 Me이고, 바람직하게는 H이다. 대안적 실시양태에서, R2 및 X는 함께, X가 화학식 I에 도시된 카르보닐 기에 대해 오르토 위치에서 페닐 기에 부착되어 있는 경우에 상기 화학식 I에 기재된 바와 같은 5-7원 헤테로시클릭 고리를 형성한다.
특정의 상기 실시양태에서, L은 직쇄 또는 분지형일 수 있고, 비치환되거나 화학식 I에 대해 기재된 바와 같은 1-3개의 기로 치환될 수 있는 C1-4 알킬렌이다. 일부 실시양태에서, L은 RL이 C1-3 알킬 또는 C1-2 알킬이고, 화학식 I에 대해 기재된 바와 같은 1-3개의 기로 임의로 치환된 것인 화학식 -CH(RL)-의 기이다. 바람직하게는, L은 C1-2 알킬이고, 히드록시, 할로, 아미노, OMe, -NHMe, -OP(O)(OH)2 및 -NMe2로부터 독립적으로 선택된 1 또는 2개의 기에 의해 치환된다. 특히 R1이 아릴 또는 헤테로아릴 기인 일부 실시양태에서, L은 -CH2-, 또는 R*가 H, Me, OH, F, NH2, NHMe, -OP(O)(OH)2 또는 OMe인 화학식 -CH(CH2R*)-의 치환된 알킬렌이다. 다른 실시양태에서, L은 -CH2CH2-이다. L이 치환되는 경우에, 이는 종종 메틸, 히드록시메틸, 아미노메틸, 메틸아미노, 메틸아미노메틸, 플루오로메틸 또는 메톡시메틸로 치환된다.
L이 치환된 알킬렌 (예를 들어, 상기 기재된 바와 같은 화학식 -CHR"-의 기)인 실시양태에서, L은 키랄 중심을 함유하고; 특정의 이들 실시양태에서, L은 이러한 입체화학을 갖는다:
Figure 112016034409922-pct00007
여기서 [N] 및 [R1]은 -CH(R")-가 NR2 및 R1에 각각 연결되어 있는 위치를 나타낸다. 바람직하게는, R"는 -CH3, -CH2OH, -CH2NH2, -CH2NHMe, -CH2NMe2, -CH2F, -CH2OMe, -CH(OH)Me, -CH2OP(O)(OH)2 또는 -CH(OH)CH2OH이다. 일부 실시양태에서, 화학식 I의 화합물은 그의 거울상이성질체에 비해 과잉으로 제시된 키랄 배위를 갖는 L을 포함하며, 화합물은 광학 활성이다. 바람직하게는, 본 발명의 이러한 화합물은 반대의 거울상이성질체가 실질적으로 없으며, 즉, 화합물 중 적어도 95%가 상기 제시된 키랄성을 갖는다.
상기 화합물의 일부 실시양태에서, R1은 하기 기재된 바와 같이 임의로 치환된, 아릴 또는 헤테로아릴이고, 통상적으로 R1은 페닐, 티에닐, 티아졸릴, 피리디닐, 피리다지닐, 피라지닐 및 피리미디닐로부터 선택된 임의로 치환된 기이다. 치환된 페닐은 R1에 대해 바람직하다.
R1은 상기 기재된 실시양태에 대해 기재된 것들로부터 선택된 적어도 1개의 기로 종종 치환된다. 일부 실시양태에서, R1은 비치환되거나 또는 할로 (F, Cl, Br 또는 I), 메틸, 메톡시, -SMe, 메틸술포닐, 시아노 및 시클로프로필로부터 독립적으로 선택된 1-2개의 기로 치환된, 페닐, 3-티에닐, 2-티아졸릴, 2-피리디닐 또는 3-피리디닐이다. 일부 실시양태에서, R1은 페닐이고, [L]에 대해 적어도 하나의 위치 '메타' (L에 부착되어 있는 R1의 위치)에서 F, Cl, Br, I, SMe, CH2F, CHF2 또는 메틸술포닐로 치환된다.
일부 실시양태에서, 화학식 I의 구조의 -C(=O)-NR2-L-R1 부분은, W1 및 W2가 하기로 독립적으로 선택된 것인 하기 화학식을 갖는다:
Figure 112016034409922-pct00008
이들 실시양태에서, W1 및 W2 중 적어도 1개는 전형적으로 H 이외의 것이고, 바람직하게는 W1 및 W2 중 적어도 1개는 할로, 특히 Cl, Br 또는 I이다.
본 발명의 화합물의 일부 실시양태에서, R6은 H 또는 Me이고; 종종 R6은 H이다.
상기 기재된 화합물 중 임의의 것의 일부 실시양태에서, Z는 N이다. 상기 기재된 화합물 중 임의의 것의 대안적 실시양태에서, Z는 CR4, 바람직하게는 CH이다.
일부 실시양태에서, R5는 5-6원 헤테로아릴 고리 또는 페닐이고, 상기 화학식 I에 대해 기재된 바와 같이 치환될 수 있다. 이러한 실시양태에서, R5는 상기 기재된 바와 같이 임의로 치환된, 페닐, 피리딜, 피리다지닐 또는 피리미디닐일 수 있다. 다른 이러한 실시양태에서, R5는 상기 기재된 바와 같이 임의로 치환된, 질소-함유 5-원 헤테로아릴 고리, 예컨대 피라졸, 이미다졸, 이속사졸, 옥사졸, 티아졸, 트리아졸, 테트라졸, 이소티아졸, 피롤 등이고; 이들 실시양태에서, Z는 바람직하게는 CH이다. 피라졸, 트리아졸 및 이미다졸은 때때로 R5에 대한 바람직한 옵션이다.
R5가 헤테로아릴인 실시양태에서, R5는 비치환될 수 있거나 또는 이는 Me, Et, 이소프로필, 프로필, 부틸, t-부틸, sec-부틸, 이소부틸, CF3, CN, Cl 및 F로부터 독립적으로 선택된 1-3개의 기로 치환될 수 있다.
이들 R5 기의 일부 바람직한 실시양태는 하기를 포함한다:
Figure 112016034409922-pct00009
여기서 각각의 R5A는 독립적으로 H, Me, Et, 프로필 및 이소프로필로부터 선택된다. 바람직하게는 R5 상의 R5a 기 중 1 또는 2개 이하는 H 이외의 것이고, 대부분의 실시양태에서, 이들 기에서 N 상의 R5A는 메틸, 에틸, 또는 이소프로필이다. 구체적 적합한 기는 1-메틸-4-피라졸, 1-에틸-4-피라졸, 1-이소프로필-4-피라졸 및 3-피라졸 및 그의 호변이성질체; 1-메틸이미다졸-2-일, 1-메틸이미다졸-4-일, 1-메틸이미다졸-5-일; 및 이들의 메틸-치환된 버전을 포함한다.
다른 실시양태에서, R5는 비-방향족 시클로알킬 또는 헤테로시클릭 기 예컨대 시클로헥실, 시클로펜틸, 테트라히드로피라닐 (예를 들어, 4-테트라히드로피라닐), 3-옥세타닐, 3- 또는 4-피페리디닐, 4- 또는 3- 피페리딘-2-오닐, 3- 또는 4-티아시클로펜탄, 3-티아시클로헥산, 3-테트라히드로푸란 등이다. 이들 실시양태에서, 고리 황은 술폭시드 또는 술폰 산화 상태로 산화될 수 있고, 각각의 이들 고리는 옥소, Me, Et, 이소프로필, CF3, CN, Cl 및 F로부터 선택된 1-3개의 기, 전형적으로 1-2개의 기로 치환될 수 있다. 이들 실시양태의 일부 바람직한 예는 하기를 포함한다:
Figure 112016034409922-pct00010
1,4-이치환된 시클로헥실 실시양태는 위치 1 및 4에 부착된 기 사이의 시스 또는 트랜스 상대 입체화학을 가질 수 있고; 일부 실시양태에서, 이들 기 사이의 트랜스 상대 배향이 바람직하다. R5의 적합한 시클로알킬 및 헤테로시클릴 실시양태는 하기를 포함한다:
Figure 112016034409922-pct00011
R5의 바람직한 실시양태는 하기를 포함한다:
Figure 112016034409922-pct00012
R5가 헤테로시클릭 또는 시클로알킬이고, 치환되는 경우에, 이는 종종 적어도 1개의 키랄 중심을 함유할 것이다. 이들 키랄 화합물에서, R 및 S 이성질체 둘 다는 개별적으로, 뿐만 아니라 라세미 혼합물을 포함한 R 및 S의 혼합물로서 사용될 수 있다. 본 발명의 화합물은 또한 헤테로아릴-아릴(헤테로아릴) 결합에 대한 회전이 치환기의 존재에 의해 방해되는 것인 회전장애이성질체를 포함하며; 이들 상황에서, 각각의 회전장애이성질체가 포함된다. 1종의 이성질체 (거울상이성질체, 부분입체이성질체, 회전장애이성질체 또는 기하 이성질체)가 그의 반대 이성질체에 비해 ERK1 또는 ERK2의 억제제로서의 보다 더 높은 내인성 활성을 갖는 경우에, 보다 더 활성인 이성질체가 전형적으로 바람직하다.
본원에 사용된 용어 "광학 이성질체" 또는 "입체이성질체"는 주어진 본 발명의 화합물에 대해 존재할 수 있는 다양한 입체 이성질체 배위 중 임의의 것을 지칭하고, 기하 이성질체를 포함한다. 치환기는 탄소 원자의 키랄 중심에 부착될 수 있는 것으로 이해된다. 용어 "키랄"은 그의 거울상 파트너 상에 비-중첩가능한 특성을 갖는 분자를 지칭하는 한편, 용어 "비키랄"은 그의 거울상 파트너 상에 중첩가능한 분자를 지칭한다. 본 발명은 화합물의 거울상이성질체, 부분입체이성질체 또는 라세미체를 포함한다. "거울상이성질체"는 서로 비-중첩가능한 거울상인 한 쌍의 입체이성질체이다. 한 쌍의 거울상이성질체의 1:1 혼합물은 "라세미" 혼합물이다. 용어는 적절한 경우에 라세미 혼합물을 지정하는데 사용된다. "부분입체이성질체"는 적어도 2개의 비대칭 원자를 갖지만 서로 거울상이 아닌 입체이성질체이다. 절대 입체화학은 칸-인골드-프렐로그(Cahn-Ingold-Prelog) 'R-S' 시스템에 따라 명시된다. 화합물이 순수한 거울상이성질체인 경우에, 각각의 키랄 탄소에서의 입체화학은 R 또는 S에 의해 명시될 수 있다. 그의 절대 배위가 비공지되어 있는 분해된 화합물은 이들이 나트륨 D 선의 파장에서 평면 편광을 회전시키는 방향 (우선성 또는 좌선성)에 따라 (+) 또는 (-)로 지정될 수 있다. 본원에 기재된 특정 화합물은 1개 이상의 비대칭 중심 및 축을 함유하고, 따라서 거울상이성질체, 부분입체이성질체, 및 절대 입체화학의 관점에서 (R)- 또는 (S)-로서 정의될 수 있는 다른 입체이성질체 형태를 생성할 수 있다.
출발 물질 및 합성 절차의 선택에 따라, 화합물은 비대칭 탄소 원자의 개수에 따라, 가능한 이성질체 중 1종의 형태로 또는 그의 혼합물로서, 예를 들어 순수한 광학 이성질체로서 또는 이성질체 혼합물, 예컨대 라세미체 및 부분입체이성질체 혼합물로서 존재할 수 있다. 본 발명은 라세미 혼합물, 부분입체이성질체 혼합물 및 광학적으로 순수한 형태를 포함하는 모든 이러한 가능한 이성질체를 포함함을 의미한다. 광학 활성 (R)- 및 (S)- 이성질체는 키랄 합성단위체 또는 키랄 시약을 사용하여 제조되거나, 또는 통상의 기술을 사용하여 분해될 수 있다. 화합물이 이중 결합을 함유하는 경우에, 치환기는 명시되지 않은 경우에 E 또는 Z 배위일 수 있다. 화합물이 이치환된 시클로알킬을 함유하는 경우에, 시클로알킬 치환기는 달리 명시되지 않는 한, 시스- 또는 트랜스-배위를 가질 수 있다. 모든 호변이성질체 형태가 또한 포함되는 것으로 의도된다.
다수의 경우에, 본 발명의 화합물은 아미노 및/또는 카르복실 기 또는 그와 유사한 기의 존재에 의해 산 및/또는 염기 염을 형성할 수 있다. 본원에 사용된 용어 "염" 또는 "염들"은 본 발명의 화합물의 산 부가염 또는 염기 부가염을 지칭한다. "염"은 특히 "제약상 허용되는 염"을 포함한다. 용어 "제약상 허용되는 염"은, 본 발명의 화합물의 생물학적 유효성 및 특성을 보유하고, 전형적으로 생물학적으로 또는 달리 바람직하지 않은 것이 아닌 염을 지칭한다.
제약상 허용되는 산 부가염은 무기 산 및 유기 산과 형성될 수 있으며, 예를 들어, 아세테이트, 아디페이트, 알루미늄, 아스코르베이트, 아스파르테이트, 벤조에이트, 베실레이트, 브로마이드/히드로브로마이드, 비카르보네이트/카르보네이트, 비술페이트/술페이트, 캄포르술포네이트, 카프로에이트, 클로라이드/히드로클로라이드, 클로로프로카인, 클로르테오필로네이트, 시트레이트, 에데테이트, 에데트산칼슘, 에탄디술포네이트, 에틸술포네이트, 에틸렌 디아민, 푸마레이트, 갈락타레이트 (뮤케이트), 글루셉테이트, 글루코네이트, 글루쿠로네이트, 글루타메이트, 글리콜레이트, 헥실 레조르시네이트, 히푸레이트, 히드로아이오다이드/아이오다이드, 히드록시나프토에이트 (크시나포에이트), 이세티오네이트, 락테이트, 락토비오네이트, 라우릴술페이트, 리튬, 말레이트, 말레에이트, 말로네이트, 만델레이트, 메실레이트, 메틸술페이트, 나프토에이트, 나프실레이트, 니코티네이트, 니트레이트, 옥타데카노에이트, 올레에이트, 옥살레이트, 팔미테이트, 파모에이트, 판토테네이트, 포스페이트/히드로겐 포스페이트/디히드로겐 포스페이트, 폴리갈락투로네이트, 프로카인, 프로피오네이트, 살리실레이트, 세바케이트, 스테아레이트, 서브아세테이트, 숙시네이트, 술페이트, 술포살리실레이트, 탄네이트, 타르트레이트, 비타르트레이트, 토실레이트, 트리페닐아세테이트 및 트리플루오로아세테이트 염이다. 추가의 적합한 염의 목록은, 예를 들어 문헌 [Remington's Pharmaceutical Sciences, 20th ed., Mack Publishing Company, Easton, Pa., (1985); 및 Handbook of Pharmaceutical Salts: Properties, Selection, and Use, by Stahl and Wermuth (Wiley-VCH, Weinheim, Germany, 2002)]에서 찾아볼 수 있다.
한 실시양태에서, 본 발명은 아세테이트, 아스코르베이트, 아디페이트, 아스파르테이트, 벤조에이트, 베실레이트, 브로마이드/히드로브로마이드, 비카르보네이트/카르보네이트, 비술페이트/술페이트, 캄포르술포네이트, 카프레이트, 클로라이드/히드로클로라이드, 클로르테오필로네이트, 시트레이트, 에탄디술포네이트, 푸마레이트, 글루셉테이트, 글루코네이트, 글루쿠로네이트, 글루타메이트, 글루타레이트, 글리콜레이트, 히푸레이트, 히드로아이오다이드/아이오다이드, 이세티오네이트, 락테이트, 락토비오네이트, 라우릴술페이트, 말레이트, 말레에이트, 말로네이트, 만델레이트, 메실레이트, 메틸술페이트, 뮤케이트, 나프토에이트, 나프실레이트, 니코티네이트, 니트레이트, 옥타데카노에이트, 올레에이트, 옥살레이트, 팔미테이트, 파모에이트, 포스페이트/히드로겐 포스페이트/디히드로겐 포스페이트, 폴리갈락투로네이트, 프로피오네이트, 세바케이트, 스테아레이트, 숙시네이트, 술포살리실레이트, 술페이트, 타르트레이트, 토실레이트 트리페나테이트, 트리플루오로아세테이트 또는 크시나포에이트 염 형태의 4-(3-아미노-6-((1S,3S,4S)-3-플루오로-4-히드록시시클로헥실)피라진-2-일)-N-((S)-1-(3-브로모-5-플루오로페닐)-2-(메틸아미노)에틸)-2-플루오로벤즈아미드를 제공한다.
또 다른 실시양태에서, 본 발명은 히드로클로라이드 염 형태의 4-(3-아미노-6-((1S,3S,4S)-3-플루오로-4-히드록시시클로헥실)피라진-2-일)-N-((S)-1-(3-브로모-5-플루오로페닐)-2-(메틸아미노)에틸)-2-플루오로벤즈아미드를 제공한다.
염이 유도될 수 있는 무기 산은, 예를 들어, 염산, 브로민화수소산, 황산, 질산, 인산 등을 포함한다.
염이 유도될 수 있는 유기 산은, 예를 들어, 아세트산, 프로피온산, 글리콜산, 옥살산, 말레산, 말론산, 숙신산, 푸마르산, 타르타르산, 시트르산, 벤조산, 만델산, 메탄술폰산, 에탄술폰산, 톨루엔술폰산, 트리플루오로아세트산, 술포살리실산 등을 포함한다.
제약상 허용되는 염기 부가염은 무기 또는 유기 염기와 형성될 수 있고, 무기 또는 유기 반대이온을 가질 수 있다.
이러한 염기 염을 위한 무기 반대이온은, 예를 들어, 암모늄 염 및 주기율표의 I 내지 XII족으로부터의 금속을 포함한다. 특정 실시양태에서, 반대이온은 나트륨, 칼륨, 암모늄, 1 내지 4개의 C1-C4 알킬 기를 갖는 알킬암모늄, 칼슘, 마그네슘, 철, 은, 아연 및 구리로부터 선택되고; 특히 적합한 염은 암모늄, 칼륨, 나트륨, 칼슘 및 마그네슘 염을 포함한다.
염이 유도될 수 있는 유기 염기는, 예를 들어, 1급, 2급 및 3급 아민, 자연 발생의 치환된 아민을 포함하는 치환된 아민, 시클릭 아민, 염기성 이온 교환 수지 등이다. 적합한 유기 아민은 이소프로필아민, 벤자틴, 콜리네이트, 디에탄올아민, 디에틸아민, 리신, 메글루민, 피페라진 및 트로메타민을 포함한다.
본 발명의 제약상 허용되는 염은 통상의 화학적 방법에 의해 염기성 또는 산성 모이어티로부터 합성될 수 있다. 일반적으로, 이러한 염은 유리 산 형태의 이들 화합물을 화학량론적 양의 적절한 염기 (예컨대 Na, Ca, Mg 또는 K 히드록시드, 카르보네이트, 비카르보네이트 등)와 반응시키거나, 유리 염기 형태의 이들 화합물을 화학량론적 양의 적절한 산과 반응시킴으로써 제조될 수 있다. 이러한 반응은 전형적으로 물 중에서 또는 유기 용매 중에서, 또는 상기 둘의 혼합물 중에서 수행된다. 일반적으로, 실행가능한 경우에, 비-수성 매질 예컨대 에테르, 에틸 아세테이트, 테트라히드로푸란, 톨루엔, 클로로포름, 디클로로메탄, 메탄올, 에탄올, 이소프로판올 또는 아세토니트릴의 사용이 바람직하다.
본원에 주어진 임의의 화학식은 비표지된 형태 (즉, 모든 원자가 천연 동위원소 존재비로 존재하고, 동위원소 농축이 아닌 화합물) 뿐만 아니라 화합물의 동위원소 농축 또는 표지된 형태를 나타내는 것으로 의도된다. 동위원소 농축 또는 표지된 화합물은, 화합물 중 적어도 1개의 원자가 동일한 원소이지만 자연 발생한 원자 질량 또는 원자 질량 분포와 상이한 원자 질량 또는 질량수를 갖는 원자에 의해 대체된 것을 제외하고는 본원에 주어진 화학식에 의해 도시된 구조를 갖는다. 본 발명의 농축 또는 표지된 화합물 내로 혼입될 수 있는 동위원소의 예는 수소, 탄소, 질소, 산소, 인, 플루오린 및 염소의 동위원소, 예컨대 각각 2H, 3H, 11C, 13C, 14C, 15N, 18F 31P, 32P, 35S, 36Cl, 125I를 포함한다. 본 발명은 본원에 정의된 바와 같은 다양한 동위원소 표지된 화합물, 예를 들어 방사성 동위원소, 예컨대 3H 및 14C, 또는 비-방사성 동위원소, 예컨대 2H 및 13C가 이들 동위원소에 대한 천연 존재비를 상당히 초과하는 수준으로 존재하는 것들을 포함한다. 이들 동위원소 표지된 화합물은 대사 연구 (14C 사용), 반응 동역학 연구 (예를 들어, 2H 또는 3H 사용), 검출 또는 영상화 기술, 예컨대 약물 또는 기질 조직 분포 검정을 포함한 양전자 방출 단층촬영 (PET) 또는 단일-광자 방출 컴퓨터 단층촬영 (SPECT), 또는 환자의 방사성 치료에 유용하다. 특히, 18F 또는 표지된 화합물은 PET 또는 SPECT 연구에 특히 바람직할 수 있다. 동위원소-표지된 화학식 I의 화합물은 일반적으로 이전에 사용된 비-표지된 시약 대신 적절한 동위원소-표지된 시약을 사용하여, 관련 기술분야의 통상의 기술자에게 공지된 통상의 기술에 의해 또는 첨부된 실시예 및 제조예에 기재된 것들과 유사한 방법에 의해 제조될 수 있다.
추가로, 보다 무거운 동위원소, 특히 중수소 (즉, 2H 또는 D)로의 치환은 보다 큰 대사 안정성, 예를 들어 증가된 생체내 반감기 또는 감소된 투여량 요건 또는 치료 지수에서의 개선으로부터 유발되는 특정의 치료 이점을 제공할 수 있다. 이 문맥에서 중수소는 이것이 천연 동위원소 존재비를 실질적으로 초과하는 수준에서 혼입되는 경우에 화학식 I의 화합물의 치환기로서 간주되는 것으로 이해된다. 본 발명은 화합물의 동위원소 농축 버전, 예를 들어, 중수소화 버전 뿐만 아니라 비-중수소화 버전을 포함한다. 중수소화 버전은 단일 부위에서 또는 다중 부위에서 중수소화될 수 있다.
동위원소-농축 화합물 내의 이러한 동위원소, 특히 중수소의 혼입 정도는 동위원소 농축 계수에 의해 정의될 수 있다. 본원에 사용된 용어 "동위원소 농축 계수"는 샘플 내 명시된 동위원소의 동위원소 존재비와 비-농축된 샘플 내 동위원소의 천연 존재비 사이의 비를 의미한다. 본 발명의 화합물 내의 치환기가 표시된 중수소인 경우에, 이러한 화합물은 각각의 지정된 중수소 원자에 대해 적어도 3500 (각각의 지정된 중수소 원자에서 52.5% 중수소 혼입), 적어도 4000 (60% 중수소 혼입), 적어도 4500 (67.5% 중수소 혼입), 적어도 5000 (75% 중수소 혼입), 적어도 5500 (82.5% 중수소 혼입), 적어도 6000 (90% 중수소 혼입), 적어도 6333.3 (95% 중수소 혼입), 적어도 6466.7 (97% 중수소 혼입), 적어도 6600 (99% 중수소 혼입), 또는 적어도 6633.3 (99.5% 중수소 혼입)의 동위원소 농축 계수를 갖는다.
본 발명에 따른 제약상 허용되는 용매화물은 결정화의 용매가 동위원소 치환될 수 있는 것들, 예를 들어 D2O, d6-아세톤, d6-DMSO, 뿐만 아니라 비-농축 용매와의 용매화물을 포함한다.
수소 결합에 대한 공여자 및/또는 수용자로서 작용할 수 있는 기를 함유하는 본 발명의 화합물, 예를 들어 화학식 I의 화합물은 적합한 공-결정 형성제와 공-결정을 형성할 수 있다. 이들 공-결정은 공지된 공-결정 형성 절차에 의해 화학식 I의 화합물로부터 제조될 수 있다. 이러한 절차는 분쇄, 가열, 공-승화, 공-용융, 또는 결정화 조건 하에 용액 중에서 화학식 I의 화합물을 공-결정 형성제와 접촉시키고, 그에 의해 형성된 공-결정을 단리시키는 것을 포함한다. 적합한 공-결정 형성제는 WO 2004/078163에 기재된 것들을 포함한다. 따라서 본 발명은 화학식 I의 화합물을 포함하는 공-결정을 추가로 제공한다.
본원에 사용된 용어 "제약상 허용되는 담체"는 관련 기술 분야의 통상의 기술자에게 공지된 바와 같은 임의의 및 모든 용매, 분산 매질, 코팅, 계면활성제, 항산화제, 보존제 (예를 들어, 항박테리아제, 항진균제), 등장화제, 흡수 지연제, 염, 보존제, 약물 안정화제, 결합제, 부형제, 붕해제, 윤활제, 감미제, 향미제, 염료 등 및 그의 조합을 포함한다 (예를 들어, 문헌 [Remington's Pharmaceutical Sciences, 18th Ed. Mack Printing Company, 1990, pp. 1289-1329] 참조). 임의의 통상의 담체가 활성 성분과 비상용성인 경우를 제외하고는, 치료 또는 제약 조성물에서의 그의 사용이 고려된다.
본 발명의 화합물의 용어 "치료 유효량"은 대상체의 생물학적 또는 의학적 반응, 예를 들어, 효소 또는 단백질 활성의 감소 또는 억제, 또는 증상의 향상, 상태의 완화, 질환 진행의 둔화 또는 지연, 또는 질환의 예방 등을 도출할 본 발명의 화합물의 양을 지칭한다. 하나의 비제한적 실시양태에서, 용어 "치료 유효량"은, 대상체에게 투여되는 경우에, (1) (i) ERK1/2와 같은 키나제에 의해 매개되거나, 또는 (ii) ERK1/2와 같은 키나제의 활성과 연관되거나, 또는 (iii) ERK1/2의 활성 (정상적 또는 비정상적)을 특징으로 하는 상태, 또는 장애 또는 질환을 적어도 부분적으로 완화, 억제, 예방 및/또는 향상시키는데 효과적이거나; 또는 (2) ERK1/2의 활성을 감소 또는 억제하는데 효과적이거나 또는 (3) ERK1/2의 발현을 감소 또는 억제하는데 효과적인 본 발명의 화합물의 양을 지칭한다.
또 다른 비제한적 실시양태에서, 용어 "치료 유효량"은, 세포, 또는 조직, 또는 비-세포 생물학적 물질, 또는 배지에 투여되는 경우에 ERK1/2의 활성을 적어도 부분적으로 감소 또는 억제하는데 효과적이거나, 또는 ERK1/2의 발현을 적어도 부분적으로 감소 또는 억제하는데 효과적인 본 발명의 화합물의 양을 지칭한다.
본원에 사용된 용어 "대상체"는 동물을 지칭한다. 전형적으로 동물은 포유동물이다. 대상체는 또한 예를 들어, 영장류 (예를 들어, 인간, 수컷 또는 암컷), 소, 양, 염소, 말, 개, 고양이, 토끼, 래트, 마우스, 어류, 조류 등을 지칭한다. 특정 실시양태에서, 대상체는 영장류이다. 구체적 실시양태에서, 대상체는 인간이다.
본원에 사용된 용어 "억제하다", "억제" 또는 "억제하는"은 주어진 상태, 활성, 효과, 증상, 또는 장애, 또는 질환의 감소 또는 억제, 또는 생물학적 활성 또는 과정의 기저 활성의 상당한 감소를 지칭한다.
본원에 사용된 임의의 질환 또는 장애에 대한 용어 "치료하다", "치료하는" 또는 "치료"는, 한 실시양태에서, 질환 또는 장애의 향상 (즉, 질환 또는 그의 임상 증상 중 적어도 하나의 발달의 둔화 또는 정지 또는 감소)을 지칭한다. 또 다른 실시양태에서 "치료하다", "치료하는" 또는 "치료"는 환자에 의해 식별가능하지 않을 수 있는 것들을 포함하는 적어도 하나의 물리적 파라미터의 완화 또는 향상을 지칭한다. 또 다른 실시양태에서, "치료하다", "치료하는" 또는 "치료"는 질환 또는 장애를, 물리적으로 (예를 들어, 식별가능한 증상의 안정화), 생리학적으로 (예를 들어, 물리적 파라미터의 안정화), 또는 이들 둘 다로 조정하는 것을 지칭한다. 또 다른 실시양태에서, "치료하다", "치료하는" 또는 "치료"는 질환 또는 장애의 발달 또는 진행의 지연을 지칭한다.
본원에 사용된 바와 같이, 대상체가 치료로부터 생물학적으로, 의학적으로 또는 삶의 질에 있어서 유익할 것으로 예상되는 경우에, 상기 대상체는 이러한 치료를 "필요로 한다".
본원에 사용된 바와 같이, 본 발명의 문맥에서 (특히, 청구범위의 문맥에서) 사용된 단수 용어 및 유사한 용어들은, 본원에 달리 나타내거나 또는 문맥상 명백히 모순되지 않는 한, 단수형 및 복수형 둘 다를 포괄하는 것으로 해석되어야 한다.
본원에 기재된 모든 방법은 본원에 달리 나타내거나 또는 달리 문맥상 명백히 모순되지 않는 한, 임의의 적합한 순서로 수행될 수 있다. 본원에 제공된 임의의 및 모든 예, 또는 예시적인 어휘 (예를 들어 "예컨대")의 사용은 본 발명을 보다 잘 예시하기 위해 의도된 것이고, 달리 청구된 본 발명의 범주에 대한 제한을 제시하는 것은 아니다.
본 발명의 화합물(들)의 임의의 비대칭 원자 (예를 들어, 탄소 등)는 라세미 또는 거울상이성질체적으로 풍부한, 예를 들어 (R)-, (S)- 또는 (R,S)- 배위로 존재할 수 있다. 특정 실시양태에서, 각각의 비대칭 원자는 (R)- 또는 (S)- 배위의 적어도 50% 거울상이성질체 과잉률, 적어도 60% 거울상이성질체 과잉률, 적어도 70% 거울상이성질체 과잉률, 적어도 80% 거울상이성질체 과잉률, 적어도 90% 거울상이성질체 과잉률, 적어도 95% 거울상이성질체 과잉률, 또는 적어도 99% 거울상이성질체 과잉률을 가지며; 즉, 광학 활성 화합물에 대해, 다른 거울상이성질체를 실질적으로 배제한 1종의 거울상이성질체를 사용하는 것이 종종 바람직하다. 탄소-탄소 이중 결합을 갖는 원자에서의 치환기는, 가능한 경우에, 시스- (Z)- 또는 트랜스- (E)- 형태로 존재할 수 있고, 이들 둘 다는 달리 나타내지 않는 한, 본 발명에 포함된다.
따라서, 본원에 사용된 바와 같은 본 발명의 화합물은 가능한 이성질체, 회전이성질체, 회전장애이성질체 또는 호변이성질체 또는 그의 혼합물 중 하나의 형태로, 예를 들어 실질적으로 순수한 기하 (시스 또는 트랜스) 이성질체, 부분입체이성질체, 광학 이성질체 (대장체), 라세미체 또는 그의 혼합물일 수 있다. 본원에 사용된 '실질적으로 순수한' 또는 '다른 이성질체가 실질적으로 없는'은 생성물이 바람직한 이성질체의 양과 관련하여, 5 중량% 미만, 바람직하게는 2 중량% 미만의 다른 이성질체를 함유한다는 것을 의미한다.
이성질체의 임의의 생성된 혼합물은 구성성분의 물리화학적 차이에 기초하여, 예를 들어, 크로마토그래피 및/또는 분별 결정화에 의해 순수한 또는 실질적으로 순수한 기하 또는 광학 이성질체, 부분입체이성질체, 라세미체로 분리될 수 있다.
최종 생성물 또는 중간체의 임의의 생성된 라세미체는 공지된 방법에 의해, 예를 들어, 광학 활성 산 또는 염기를 사용하여 수득된 그의 부분입체이성질체 염을 분리하고, 광학 활성 산성 또는 염기성 화합물을 유리시킴으로써 광학 대장체로 분해될 수 있다. 특히, 염기성 모이어티는 따라서, 예를 들어, 광학 활성 산, 예를 들어, 타르타르산, 디벤조일 타르타르산, 디아세틸 타르타르산, 디-O,O'-p-톨루오일 타르타르산, 만델산, 말산 또는 캄포르-10-술폰산을 사용하여 형성된 염의 분별 결정화에 의해, 본 발명의 화합물을 그의 광학 대장체로 분해하는데 사용될 수 있다. 라세미 생성물은 또한 키랄 크로마토그래피, 예를 들어, 키랄 흡착제를 사용하는 고압 액체 크로마토그래피 (HPLC)에 의해 분해될 수 있다.
게다가, 그의 염을 포함하는 본 발명의 화합물은 또한 그의 수화물 형태로 수득될 수 있거나, 또는 그의 결정화에 사용되는 다른 용매를 포함할 수 있다. 본 발명의 화합물은 본질적으로 또는 설계에 의해 제약상 허용되는 용매 (물 포함)와의 용매화물을 형성할 수 있으며; 따라서 본 발명은 용매화 및 비용매화 형태 둘 다를 포괄하는 것으로 의도된다. 용어 "용매화물"은 본 발명의 화합물 (그의 제약상 허용되는 염 포함)과 1종 이상의 용매 분자와의 분자 복합체를 지칭한다. 이러한 용매 분자는 수용자에게 무해한 것으로 공지되어 있는, 제약 기술분야에서 통상적으로 사용되는 것들, 예를 들어 물, 에탄올 등이다. 용어 "수화물"은 용매 분자가 물인 복합체를 지칭한다.
본 발명의 화합물 (그의 염, 수화물 및 용매화물 포함)은 본질적으로 또는 설계에 의해 다형체를 형성할 수 있다.
화학식 I의 화합물은 본원에 제공된 반응식 및 실시예에 따라 제조될 수 있다. 일부 경우에 반응식은 L이 메틸렌 또는 치환된 알킬렌 기인 화합물의 제조를 예시하지만, L이 결합 또는 화학식 I에 의해 포괄된 다른 옵션인 적합한 벤즈아미드를 제조하는 방법은 필요한 벤즈아미드 중간체를 제조하기 위한 다수의 공지된 방법의 관점에서 통상의 기술자에게 용이하게 명백하여, 이들 방법은 L의 다른 실시양태를 갖는 화합물의 제조에 동등하게 적용가능하다.
반응식 A.
Figure 112016034409922-pct00013
전구체 A 및 B는 공지된 펩티드 결합 형성 조건을 사용하여 커플링되어 중간체 C를 제공할 수 있다. 중간체 C는 헤테로아릴 보론산 예컨대 중간체 G와 널리 공지된 팔라듐-지지된 조건 하에 커플링되어, 화학식 I의 화합물인 화학식 H의 생성물을 형성할 수 있다. 화합물 C와 커플링하기 위한 필요한 아미노피리딘/피라진 화합물 (G)은 목적하는 R5 기를 팔라듐 화학 (상기 중간체 E 참조)을 사용하여 도입하고, 이어서 아미노 기에 인접하게 브로민화시키고, 보론산 또는 에스테르 (G)로 전환시킴으로써 브로모피리딘/피라진으로부터 제조될 수 있다. 반응식 C는 R5가 테트라히드로피란인 화학식 G의 화합물에 도달하는 올레핀의 수소화를 포함하는 이러한 순서의 적용을 예시한다.
대안적으로, 반응식 B에 제시된 바와 같이, 화합물 C는 아릴보론산 또는 에스테르로 전환될 수 있고, 공지된 팔라듐 촉매 커플링 조건을 다시 사용하여 헤테로아릴 브로마이드 F에 커플링되어 본 발명의 화합물을 제공할 수 있다.
반응식 B.
Figure 112016034409922-pct00014
중간체 F는 관련 기술분야에 공지된 방법 및 본원에 개시된 방법에 의해 제조될 수 있다. 화학식 F의 다수의 화합물은 반응식 C에 예시된 바와 같이 공지된 아미노-브로모-피리딘 및 -피라진으로부터 합성될 수 있다. 다양한 아릴, 헤테로아릴 및 비닐 보론산 에스테르는 관련 기술분야에 공지되어 있는 바와 같은 팔라듐 촉매를 사용하여 브로모피리딘 또는 브로모피라진에 커플링되어 목적하는 R5 기를 도입할 수 있다. 이 방법은 화학식 I 내의 R5로서 아릴 또는 헤테로아릴 기를 도입하는데 특히 유용하다. 초기 커플링 생성물이 반응식 C에 예시된 바와 같이 R5 위치에서 부분 불포화 기를 도입하는 경우에, 불포화는 통상의 방법에 의해 감소되어 R5로서 포화 기 (예를 들어, 헤테로시클릴 또는 시클로알킬)를 갖는 화합물을 제공할 수 있다. R5로서 4-테트라히드로피라닐을 갖는 화합물의 제조가 제시되어 있는 경우에 이 옵션은 반응식 C에 예시되어 있다.
반응식 C.
Figure 112016034409922-pct00015
반응식 D는 또 다른 합성 경로를 예시하며, 여기서 화학식 I 내의 R5에 상응하는 기는 피리딘 또는 피리미딘이 벤즈아미드 부분에 커플링된 후 부착된다. 상기 방법은 다양한 배열의 아릴, 헤테로아릴 또는 비닐계 (불포화) R5 기의 혼입을 가능하게 하고, 본원에 예시된 바와 같이, 비닐계 R5 기는 커플링 반응 후에 감소되어 포화 R5 기를 제공할 수 있다. 다시, 경로는 L = 임의로 치환된 알킬렌, 및 R1 = 임의로 치환된 페닐에 상응하는, 아미드 질소 상의 벤질계 기를 사용하여 도시되지만, 출발 물질 및 아미드 중간체를 제조하는 방법의 폭넓은 이용가능성으로 인해, 다른 L 및 R1 기를 갖는 화합물의 합성에 동등하게 적용가능하다. 헤테로아릴 기가 벤즈아미드 페닐 고리에 커플링될 시, R5는 팔라듐 커플링에 의해 부착될 수 있으며, 여기서 보론산 / 에스테르는 R5 상에 또는 아미노피리딘 / 아미노피라진 고리 상에 존재할 수 있다. 이 반응식에서 R1*는 화학식 I 내의 R1 상의 치환기에 상응하도록 선택된 페닐 기 상의 임의적인 치환기를 나타낸다.
반응식 D.
Figure 112016034409922-pct00016
반응식 E는 3-브로모-2-아미노피리딘 또는 상응하는 피라진, 및 보론산 또는 에스테르로 치환된 벤조에이트 에스테르로부터 출발하여 화학식 I의 화합물을 제조하는 방법을 예시한다. 비아릴 기를 형성하기 위해 커플링한 후, 아미노피리딘은 온화한 조건 하에 용이하게 브로민화될 수 있고, 목적하는 아미드 기가 생성될 수 있다. R5는 피리딘 고리로부터 Br의 팔라듐-촉매화 치환에 의해 도입될 수 있다. 여기서 다시, 보론산 에스테르는 아미노피리딘 고리 상에, 또는 아릴, 헤테로아릴 또는 비닐계 R5 기 상에 존재할 수 있다.
반응식 E.
Figure 112016034409922-pct00017
본 발명은 본 발명의 방법의 임의의 변형을 추가로 포함하며, 여기서 그의 임의의 스테이지에서 수득가능한 중간체는 출발 물질로서 사용되고, 나머지 단계가 수행되거나, 또는 여기서 출발 물질은 반응 조건 하에 계내 형성되거나, 또는 여기서 반응 성분은 그의 염 또는 광학적으로 순수한 물질 형태로 사용된다. 본 발명의 화합물 및 중간체는 관련 기술분야의 통상의 기술자에게 일반적으로 공지된 방법에 따라 상호전환될 수 있다.
또 다른 측면에서, 본 발명은 하기 화학식 II의 화합물을 포함한 화학식 I의 화합물의 합성에 유용한 중간체를 제공한다.
<화학식 II>
Figure 112016034409922-pct00018
상기 식에서, Z2는 CH 또는 N이고;
G는 Br 또는 -B(OR21)2이고;
여기서 각각의 R21은 H 또는 C1-4 알킬이거나, 또는 2개의 R21은 이들이 부착되어 있는 연결 -O-B-O-와 함께 시클릭 보레이트 에스테르를 형성하고;
J는 H, F, Cl 또는 Me이고;
R20은 H 또는 C1-6 알킬이다.
일부 실시양태에서, J는 유리하게는 플루오로 (F)이고, 다른 실시양태에서 J는 Cl이다. 일부 실시양태에서 G는 시클릭 보레이트 에스테르 기 예컨대 4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-디옥사보롤란-2-일 또는 1,3,2-디옥사보롤란-2-일이다.
또 다른 측면에서, 본 발명은 본 발명의 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염, 및 적어도 1종의 제약상 허용되는 담체 또는 부형제를 포함하는 제약 조성물을 제공한다. 제약 조성물은 특정한 투여 경로 예컨대 경구 투여, 비경구 투여 및 직장 투여 등을 위해 제제화될 수 있다. 또한, 본 발명의 제약 조성물은 고체 형태 (비제한적으로 캡슐, 정제, 환제, 과립, 분말 또는 좌제 포함), 또는 액체 형태 (비제한적으로 용액, 현탁액 또는 에멀젼 포함)로 제조될 수 있다. 환제 또는 정제는 관련 기술분야에 공지된 방법에 따라 필름 코팅 또는 장용 코팅될 수 있다. 제약 조성물은 통상의 제약 작업 예컨대 멸균에 적용될 수 있고/거나 통상의 불활성 희석제, 윤활제, 또는 완충제, 뿐만 아니라 아주반트, 예컨대 보존제, 안정화제, 습윤제, 유화제 및 완충제 등을 함유할 수 있다.
전형적으로, 본 발명의 화합물을 포함하는 제약 조성물은 활성 성분으로서의 화학식 I의 화합물을 하기 부형제 중 1종 이상과 함께 포함하는 정제 또는 젤라틴 캡슐이다:
a) 희석제, 예를 들어, 락토스, 덱스트로스, 수크로스, 만니톨, 소르비톨, 셀룰로스 및/또는 글리신;
b) 윤활제, 예를 들어, 실리카, 활석, 스테아르산, 그의 마그네슘 또는 칼슘 염 및/또는 폴리에틸렌글리콜; 정제의 경우에 또한
c) 결합제, 예를 들어, 규산알루미늄마그네슘, 전분 페이스트, 젤라틴, 트라가칸트, 메틸셀룰로스, 소듐 카르복시메틸셀룰로스 및/또는 폴리비닐피롤리돈; 원하는 경우에
d) 붕해제, 예를 들어, 전분, 한천, 알긴산 또는 그의 나트륨 염 또는 발포성 혼합물; 및/또는
e) 흡수제, 착색제, 향미제 및 감미제.
캡슐화를 위한 적합한 캡슐, 및 경구 투여 형태를 제조하기 위해 화학식 I의 화합물을 제제화하는데 적합한 부형제의 선택은 기술의 통상의 수준 내에 있다. 정제는 관련 기술분야에 공지된 방법을 사용하여 필름 코팅 또는 장용 코팅될 수 있다.
경구 투여에 적합한 조성물은 유효량의 본 발명의 화합물을 정제, 로젠지, 수성 또는 유성 현탁액, 분산성 분말 또는 과립, 에멀젼, 경질 또는 연질 캡슐, 또는 시럽 또는 엘릭시르의 형태로 포함한다. 경구 사용을 위해 의도된 조성물은 제약 조성물의 제조를 위해 관련 기술분야에 공지된 임의의 방법에 따라 제조되고, 이러한 조성물은 제약상 우아하고 맛우수한 제제를 제공하기 위해 감미제, 향미제, 착색제 및 보존제로 이루어진 군으로부터 선택된 1종 이상의 작용제를 함유할 수 있다. 정제는 활성 성분을 정제의 제조에 적합한 비독성 제약상 허용되는 부형제, 예컨대 상기 열거된 것들과 혼합하여 함유할 수 있다. 이들 부형제는, 예를 들어, 불활성 희석제, 예컨대 탄산칼슘, 탄산나트륨, 락토스, 인산칼슘 또는 인산나트륨; 과립화제 및 붕해제, 예를 들어, 옥수수 전분, 또는 알긴산; 결합제, 예를 들어, 전분, 젤라틴 또는 아카시아; 및 윤활제, 예를 들어 스테아르산마그네슘, 스테아르산 또는 활석이다. 정제는 코팅되지 않거나 또는 공지된 기술에 의해 코팅되어 위장관에서의 붕해 및 흡수를 지연시키고, 그에 의해 보다 오랜 기간에 걸쳐 지속되는 작용을 제공한다. 예를 들어, 시간 지연 물질 예컨대 글리세릴 모노스테아레이트 또는 글리세릴 디스테아레이트가 사용될 수 있다. 경구 사용을 위한 제제는 활성 성분이 불활성 고체 희석제, 예를 들어, 탄산칼슘, 인산칼슘 또는 카올린과 혼합된 것인 경질 젤라틴 캡슐로서, 또는 활성 성분이 연질 캡슐 내부에 용액, 에멀젼 또는 분산액을 형성하는 물 또는 오일 매질, 예를 들어, 땅콩 오일, 액상 파라핀 또는 올리브 오일과 혼합된 것인 연질 젤라틴 캡슐로서 나타내어질 수 있다.
특정의 주사가능한 조성물은 수성 등장성 용액 또는 현탁액이고, 좌제는 지방 에멀젼 또는 현탁액으로부터 유리하게 제조된다. 상기 조성물은 멸균될 수 있고/거나, 아주반트, 예컨대 보존제, 안정화제, 습윤제 또는 유화제, 용해 촉진제, 삼투압 조절을 위한 염 및/또는 완충제를 함유할 수 있다. 또한, 이들은 또한 다른 치료상 유익한 물질을 함유할 수 있다. 상기 조성물은 통상의 혼합, 과립화 또는 코팅 방법에 따라 각각 제조되고, 약 0.1-75% 또는 약 1-50%의 활성 성분을 함유한다.
경피 적용에 적합한 조성물은 유효량의 본 발명의 화합물과 적합한 담체를 포함한다. 경피 전달에 적합한 담체는 흡수가능한 약리학상 허용되는 용매를 포함하여 숙주의 피부를 통한 통과를 보조한다. 예를 들어, 경피 장치는 백킹 부재, 화합물을 임의로 담체와 함께 함유하는 저장소, 임의로 연장된 기간에 걸쳐 제어되고 미리 결정된 속도로 숙주의 피부에 화합물을 전달하기 위한 속도 제어 장벽, 및 장치가 피부에 부착되도록 하는 수단을 포함하는 붕대 형태이다.
예를 들어, 피부 및 눈에 대한 국소 적용에 적합한 조성물은 수용액, 현탁액, 연고, 크림, 겔, 또는 예를 들어, 에어로졸 등에 의한 전달을 위한 분무가능한 제제를 포함한다. 이러한 국소 전달 시스템은, 예를 들어, 피부암의 치료를 위해, 예를 들어, 예방적 사용을 위해 선 크림, 로션, 스프레이 등으로의 피부 적용에 특히 적절할 것이다. 이들은 따라서 관련 기술분야에 널리 공지된 국소 (화장품 포함) 제제에 사용하기에 특히 적합하다. 이들은 가용화제, 안정화제, 장성 증진제, 완충제 및 보존제를 함유할 수 있다.
본원에 사용된 국소 적용은 또한 흡입 또는 비강내 적용에 관한 것일 수 있다. 이는 편리하게는 적합한 추진제를 사용하거나 사용하지 않고, 가압 용기, 펌프, 스프레이, 아토마이저 또는 네뷸라이저로부터의 건조 분말 흡입기 또는 에어로졸 스프레이 제공물로부터 건조 분말의 형태로 (단독으로, 혼합물로서, 예를 들어 락토스와의 건조 블렌드로서, 또는 예를 들어 인지질과의 혼합 성분 입자로서) 전달될 수 있다.
본 발명은 활성 성분으로서의 본 발명의 화합물을 포함하는 무수 제약 조성물 및 투여 형태를 추가로 제공하며, 여기서 투여 전에 물에 대한 화합물의 노출을 최소화하는 것이 바람직하다. 본 발명의 무수 제약 조성물 및 투여 형태는 무수 또는 저수분 함유 성분, 및 저수분 또는 저습 조건을 사용하여 제조될 수 있다. 무수 제약 조성물은 그의 무수 특성이 유지되도록 제조되고 보관될 수 있다. 따라서, 무수 조성물은 이들이 적합한 규정 키트에 포함될 수 있도록, 물에 대한 노출을 방지하는 것으로 공지된 물질을 사용하여 포장된다. 적합한 포장의 예는 기밀 호일, 플라스틱, 단위 투여 용기 (예를 들어, 바이알), 블리스터 팩 및 스트립 팩을 포함하나, 이에 제한되지는 않는다.
본 발명은 활성 성분으로서의 본 발명의 화합물이 분해되는 속도를 감소시키는 1종 이상의 작용제를 포함하는 제약 조성물 및 투여 형태를 추가로 제공한다. 본원에 "안정화제"로서 지칭되는 이러한 작용제는 항산화제 예컨대 아스코르브산, pH 완충제 또는 염 완충제 등을 포함하나, 이에 제한되지는 않는다.
유리 형태 또는 염 형태의 화학식 I의 화합물은 유익한 약리학적 특성을 나타내고, 예를 들어 이들은 하기 섹션에 제공된 시험 데이터에 의해 나타내어진 바와 같이 ERK1 및/또는 ERK2의 활성을 조정 또는 억제하고, 따라서 본원에 기재된 바와 같은 요법을 위해, 또는 EKR1/2 억제 또는 생화학적 경로 (MAPK)의 억제의 효과의 추가 이해를 위한 연구 화학물질, 예를 들어 도구 화합물로서의 용도를 위해 나타내어진다.
따라서, 추가 실시양태로서, 본 발명은 요법에서의 또는 의약의 제조를 위한, 본원에 기재된 바와 같은 화학식 I의 화합물 또는 화학식 I의 범주 내의 임의의 실시양태의 용도를 제공한다. 추가 실시양태에서, 요법 또는 의약은 ERK1 및/또는 ERK2의 억제에 의해 치료될 수 있는 질환을 위한 것이다. 또 다른 실시양태에서, 본 발명의 화합물은 본원에 언급된 것들을 포함하나 이에 제한되지는 않는 암을 치료하는데 유용하다.
또 다른 실시양태에서, 본 발명은 치료 유효량의 본원에 기재된 바와 같은 화학식 I 또는 IA의 화합물 또는 본 발명의 임의의 실시양태의 화합물을 투여하는 것을 포함하는, ERK1 및/또는 ERK2의 억제에 의해 치료가능한 질환을 치료하는 방법을 제공한다. 추가 실시양태에서, 질환은 적합한 조건의 상기 언급된 목록으로부터 선택된다. 상기 방법은 전형적으로 이러한 치료를 필요로 하는 대상체에게 유효량의 본원에 기재된 바와 같은 화합물 또는 이러한 화합물을 포함하는 제약 조성물을 투여하는 것을 포함한다. 화합물은 본원에 기재된 것들과 같은 임의의 적합한 방법에 의해 투여될 수 있고, 투여는 치료하는 의사에 의해 선택된 간격으로 반복될 수 있다. 본 발명은 따라서 상기 언급된 것들을 포함한, 과도한 또는 바람직하지 않은 수준의 ERK1/2 활성에 의해 매개되거나 이와 연관된 상태를 치료하는데 사용하기 위한 본원에 기재된 바와 같은 화학식 I 및 IA의 화합물 또는 그의 임의의 아속을 제공한다.
따라서, 추가 실시양태로서, 본 발명은 의약의 제조를 위한 본원에 기재된 화학식 I의 화합물 또는 이러한 화합물의 임의의 실시양태의 화합물의 용도를 제공한다. 추가 실시양태에서, 의약은 ERK1 및/또는 ERK2의 억제에 의해 치료될 수 있는 질환의 치료를 위한 것이다. 또 다른 실시양태에서, 질환은 암, 예를 들어, 적합하게는 상기 언급된 목록으로부터 선택된 암이다.
일부 실시양태에서, 화합물은 1종 이상의 공동-치료제와 조합되어 사용된다. 적합한 공동-치료제는 항암제, 진통제, 항염증제 등을 포함한다. 일부 실시양태에서, 조성물은 RAF 경로에 대해 작용하는 공동-치료제, 예컨대 B-RAF 억제제 또는 C-Raf 억제제를 포함한다.
한 실시양태에서, 본 발명은 2종 이상의 개별 제약 조성물을 포함하며, 이들 중 적어도 1종은 화학식 I의 화합물을 함유하는 것인 키트를 제공한다. 한 실시양태에서, 키트는 상기 조성물을 개별적으로 보유하기 위한 수단, 예컨대 용기, 분할된 병 또는 분할된 호일 패킷을 포함한다. 이러한 키트의 예는 정제, 캡슐 등의 포장에 전형적으로 사용되는 것과 같은 블리스터 팩이다.
본 발명의 키트는 상이한 투여 형태, 예를 들어, 경구 및 비경구로 투여하기 위해, 개별 조성물을 상이한 투여 간격으로 투여하기 위해, 또는 개별 조성물을 서로에 대해 적정하기 위해 사용될 수 있다. 순응도를 보조하기 위해, 본 발명의 키트는 전형적으로 투여 지침서를 포함한다.
본 발명의 조합 요법에서, 본 발명의 화합물 및 다른 치료 공동-작용제는 동일하거나 상이한 제조업체에 의해 제조 및/또는 제제화될 수 있다. 더욱이, 본 발명의 화합물 및 다른 치료제는 (i) 의사에게 조합 제품으로 배포되기 전에 (예를 들어 본 발명의 화합물 및 다른 치료제를 포함하는 키트의 경우에); (ii) 투여 직전에 의사 자신에 의해 (또는 의사의 지시 하에); (iii) 예를 들어, 본 발명의 화합물 및 다른 치료제의 순차적 투여 동안 환자 자신에서, 조합 요법으로 합해질 수 있다.
따라서, 본 발명은 ERK1 및/또는 ERK2에 의해 매개되는 질환 또는 상태를 치료하기 위한 화학식 I의 화합물의 용도를 제공하며, 여기서 의약은 또 다른 치료제와의 투여를 위해 제조된다. 본 발명은 또한 질환 또는 상태를 치료하기 위한 또 다른 공동-치료제의 용도를 제공하며, 여기서 공동-작용제는 화학식 I의 화합물과 함께 투여된다.
본 발명은 또한 ERK1 및/또는 ERK2에 의해 매개되는 질환 또는 상태를 치료하는 방법에 사용하기 위한 화학식 I의 화합물을 제공하며, 여기서 화학식 I의 화합물은 또 다른 치료제와의 투여를 위해 제조된다. 본 발명은 또한 ERK1 및/또는 ERK2에 의해 매개되는 질환 또는 상태를 치료하는 방법에 사용하기 위한 또 다른 치료 공동-작용제를 제공하며, 여기서 다른 치료 공동-작용제는 화학식 I의 화합물과의 투여를 위해 제조된다. 본 발명은 또한 ERK1 및/또는 ERK2에 의해 매개되는 질환 또는 상태를 치료하는 방법에 사용하기 위한 화학식 I의 화합물을 제공하며, 여기서 화학식 I의 화합물은 또 다른 치료 공동-작용제와 함께 투여된다. 본 발명은 또한 ERK1 및/또는 ERK2에 의해 매개되는 질환 또는 상태를 치료하는 방법에 사용하기 위한 또 다른 공동-치료제를 제공하며, 여기서 다른 치료 공동-작용제는 화학식 I의 화합물과 함께 투여된다.
본 발명은 또한 ERK1 및/또는 ERK2에 의해 매개되는 질환 또는 상태를 치료하기 위한 화학식 I의 화합물의 용도를 제공하며, 여기서 환자는 또 다른 치료제로 이전에 또는 후속적으로 (예를 들어 24시간 이내에) 치료되는 자이다. 본 발명은 또한 ERK1 및/또는 ERK2에 의해 매개되는 질환 또는 상태를 치료하기 위한 공동-치료제의 용도를 제공하며, 여기서 환자는 화학식 I의 화합물로 이전에 (예를 들어 24시간 이내에) 치료된 바 있다.
한 실시양태에서, 다른 치료제 (공동-치료제 또는 단지 공동-작용제)는 암을 치료하는데 유용한 화합물이고, 전형적으로 적어도 한 유형의 암을 치료하기 위해 승인된 FDA 승인된 약물이다. 적합한 공동-치료제는 에를로티닙, 보르테조밉, 풀베스트란트, 수니티닙 이마티닙 메실레이트, 레트로졸, 피나수네이트, 플라틴 예컨대 옥살리플라틴, 카르보플라틴, 및 시스플라틴, 피나수네이트, 플루오로우라실, 라파마이신, 류코보린, 라파티닙, 로나파밉, 소라페닙, 게피티닙, 캄프토테신, 토포테칸, 브리오스타틴, 아데젤레신, 안트라시클린, 카르젤레신, 비젤레신, 돌라스타틴, 아우리스타틴, 두오카르마이신, 엘레우테로빈, 탁솔 예컨대 파클리탁셀 또는 도세탁셀, 시클로포스파미드, 독소루비신, 빈크리스틴, 프레드니손 또는 프레드니솔론, 다른 알킬화제 예컨대 메클로레타민, 클로람부실, 및 이포스파미드, 항대사물 예컨대 아자티오프린 또는 메르캅토퓨린, 다른 미세관 억제제 (빈카 알칼로이드 예컨대 빈크리스틴, 빈블라스틴, 비노렐빈 및 빈데신, 뿐만 아니라 탁산), 포도필로톡신 (에토포시드, 테니포시드, 에토포시드 포스페이트, 및 에피포도필로톡신), 토포이소머라제 억제제, 다른 세포독소 예컨대 악티노마이신, 다우노루비신, 발루비신, 이다루비신, 에드레콜로맙, 에피루비신, 블레오마이신, 플리카마이신, 미토마이신, 뿐만 아니라 다른 항암 항체 (세툭시맙, 베바시주맙, 이브리투모맙, 아바고보맙, 아데카투무맙, 아푸투주맙, 알라치주맙, 알렘투주맙, 아나투모맙, 아폴리주맙, 바비툭시맙, 벨리무맙, 비바투주맙 메르탄신, 블리나투모맙, 브렌툭시맙 베도틴, 칸투주맙 메르탄신, 카투막소맙, 세툭시맙, 시타투주맙 보가톡스, 식수투무맙, 클리바투주맙 테트락세탄, 코나투무맙, 다세투주맙, 다클리주맙, 데투모맙, 에크로멕시맙, 에드레콜로맙, 엘로투주맙, 에프라투주맙, 에르투막소맙, 에타라시주맙, 파를레투주맙, 피기투무맙, 프레솔리무맙, 갈릭시맙, 글렘바투무맙 베도틴, 겜투주맙, 이브리투모맙 티욱세탄, 이노투주맙 오조가미신, 인테투무맙, 이필리무맙, 이라투무맙, 라베투주맙, 렉사투무맙, 린투주맙, 루카투무맙, 루밀릭시맙, 마파투무맙, 마투주맙, 밀라투주맙, 미투모맙, 나콜로맙 타페나톡스, 나프투모맙 에스타페나톡스, 네시투무맙, 니모투주맙, 오파투무맙, 올라라투맙, 오포르투주맙 모나톡스, 오레고보맙, 파니투무맙, 펨투모맙, 페르투주맙, 핀투모맙, 프리투무맙, 라무시루맙, 릴로투무맙, 로바투무맙, 리툭시맙, 시브로투주맙, 타카투주맙 테트락세탄, 타플리투모맙 팝톡스, 테나투모맙, 티실리무맙, 티가투주맙, 토시투모맙 또는 131I-토시투모맙, 트라스투주맙, 트레멜리무맙, 투오코투주맙 셀모류킨, 벨투주맙, 비실리주맙, 볼로식시맙, 보투무맙, 잘루투무맙, 자놀리무맙, IGN-101, MDX-010, ABX-EGR, EMD72000, ior-t1, MDX-220, MRA, H-11 scFv, huJ591, TriGem, TriAb, R3, MT-201, G-250, ACA-125, 오니박스(Onyvax)-105, CD:-960, Cea-Vac, 브레바렉스(BrevaRex) AR54, IMC-1C11, 글리오맙(GlioMab)-H, ING-1, 항-LCG MAb, MT-103, KSB-303, 테렉스(Therex), KW2871, 항-HMI.24, 항-PTHrP, 2C4 항체, SGN-30, TRAIL-RI MAb, 전립선암 항체, H22xKi-r, ABX-Mai, 이뮤테란(Imuteran), 모노팜(Monopharm)-C), 및 상기 작용제 (특히 아우리스타틴 MMAE 및 MMAF, 메이탄시노이드 예컨대 DM-1, 칼리케아미신, 또는 다양한 세포독소) 중 임의의 것을 포함하는 항체-약물 접합체를 포함한다. 바람직한 공동-치료제는, 달리 명시되지 않는 한, 베무라페닙, 다브라페닙, LGX818, 트라메티닙, MEK162, LEE011, PD-0332991, 파노비노스타트, 보리노스타트, 로미뎁신, 세툭시맙, 게피티닙, 에를로티닙, 라파티닙, 파니투무맙, 반데타닙, INC280, 에베롤리무스, 시롤리무스, BMK120, BYL719, 및 CLR457을 포함한다.
본 발명의 제약 조성물 또는 조합물은 약 50-70 kg의 대상체에 대해 약 1-2000 mg의 활성 성분(들), 또는 약 1-500 mg 또는 약 1-250 mg 또는 약 1-150 mg 또는 약 0.5-100 mg 또는 약 1-50 mg의 활성 성분의 단위 투여량일 수 있다. 화합물, 제약 조성물 또는 그의 조합물의 치료 유효 투여량은 대상체의 종, 체중, 연령 및 개별 상태, 치료할 장애 또는 질환 또는 그의 중증도에 의존한다. 통상의 기술을 갖는 의사, 임상의 또는 수의사는 장애 또는 질환의 진행을 예방, 치료 또는 억제하는데 필요한 각각의 활성 성분의 유효량을 용이하게 결정할 수 있다.
상기 언급된 투여량 특성은 유리하게는 포유동물, 예를 들어, 마우스, 래트, 개, 원숭이 또는 그의 단리된 기관, 조직 및 제제를 사용하여 시험관내 및 생체내 시험에서 입증가능하다. 본 발명의 화합물은 용액, 예를 들어, 수용액의 형태로 시험관내 적용될 수 있고, 경장으로, 비경구로, 유리하게는 정맥내로, 예를 들어, 현탁액으로서 또는 수용액으로 생체내 적용될 수 있다. 시험관내 투여량은 약 10-3 몰 내지 10-9 몰 농도의 범위일 수 있다. 생체내 치료 유효량은 투여 경로에 따라 약 0.1-500 mg/kg 사이, 또는 약 1-100 mg/kg 사이의 범위일 수 있다.
본 발명의 화합물은 공동-작용제(들)로서 본원에서 또한 지칭되는 1종 이상의 공동-치료제와 동시에, 또는 이전에 또는 이후에 투여될 수 있다. 본 발명의 화합물은 동일하거나 상이한 투여 경로에 의해 개별적으로, 또는 공동-작용제(들)로서 동일한 제약 조성물 중에 함께 투여될 수 있다.
한 실시양태에서, 본 발명은 요법에 동시, 개별 또는 순차적으로 사용하기 위한 조합 제제로서 화학식 I의 화합물 및 적어도 1종의 다른 치료 공동-작용제를 포함하는 제품을 제공한다. 한 실시양태에서, 요법은 ERK1 및/또는 ERK2에 의해 매개되는 질환 또는 상태, 예컨대 암의 치료이다. 조합 제제로서 제공되는 생성물은, 동일한 제약 조성물 중에 화학식 I의 화합물 및 다른 치료 공동-작용제(들)를 함께 포함하는 조성물, 또는 개별 형태로, 예를 들어 키트의 형태로 화학식 I의 화합물 및 다른 치료 공동-작용제(들)를 포함하는 조성물을 포함한다.
한 실시양태에서, 본 발명은 화학식 I의 화합물 및 또 다른 치료 공동-작용제(들)를 포함하는 제약 조성물을 제공한다. 임의로, 제약 조성물은 상기 기재된 바와 같은 제약상 허용되는 담체를 포함할 수 있다.
한 실시양태에서, 본 발명은 2종 이상의 개별 제약 조성물을 포함하며, 이들 중 적어도 1종은 화학식 I의 화합물을 함유하는 것인 키트를 제공한다. 한 실시양태에서, 키트는 상기 조성물을 개별적으로 보유하기 위한 수단, 예컨대 용기, 분할된 병 또는 분할된 호일 패킷을 포함한다. 이러한 키트의 예는 정제, 캡슐 등의 포장에 전형적으로 사용되는 것과 같은 블리스터 팩이다.
본 발명의 키트는 상이한 투여 형태, 예를 들어, 경구 및 비경구로 투여하기 위해, 개별 조성물을 상이한 투여 간격으로 투여하기 위해, 또는 개별 조성물을 서로에 대해 적정하기 위해 사용될 수 있다. 순응도를 보조하기 위해, 본 발명의 키트는 전형적으로 투여 지침서를 포함한다.
본 발명의 조합 요법에서, 본 발명의 화합물 및 다른 치료 공동-작용제는 동일하거나 상이한 제조업체에 의해 제조 및/또는 제제화될 수 있다. 더욱이, 본 발명의 화합물 및 다른 치료제는 (i) 의사에게 조합 제품으로 배포되기 전에 (예를 들어 본 발명의 화합물 및 다른 치료제를 포함하는 키트의 경우에); (ii) 투여 직전에 의사 자신에 의해 (또는 의사의 지시 하에); (iii) 예를 들어, 본 발명의 화합물 및 다른 치료제의 순차적 투여 동안 환자 자신에서, 조합 요법으로 합해질 수 있다.
따라서, 본 발명은 ERK1 및/또는 ERK2에 의해 매개되는 질환 또는 상태를 치료하기 위한 화학식 I의 화합물의 용도를 제공하며, 여기서 의약은 또 다른 치료제와의 투여를 위해 제조된다. 본 발명은 또한 질환 또는 상태를 치료하기 위한 또 다른 치료 공동-작용제의 용도를 제공하며, 여기서 의약은 화학식 I의 화합물과 함께 투여된다. 본 발명의 화합물과 함께 사용하기 위한 적합한 공동-치료제는 전형적으로 치료를 위한 상태를 기준으로 하여 선택된다. 예를 들어, 흑색종의 치료에서, 공동-치료제는 알데스류킨, 다브라페닙, 다카르바진, DTIC-Dome (다카르바진), 인트론 A (재조합 인터페론 알파-2b), 이필리무맙, 메키니스트 (트라메티닙), 페그인터페론 알파-2b, PEG-인트론 (페그인터페론 알파-2b), 프로류킨 (알데스류킨), 재조합 인터페론 알파-2b, 실라트론 (페그인터페론 알파-2b), 타핀라 (다브라페닙), 트라메티닙, 베무라페닙, 예르보이 (이필리무맙), 및 젤보라프 (베무라페닙)로부터 선택될 수 있다. 난소암의 치료를 위해, 공동-치료제는 아드리아마이신 PFS (독소루비신 히드로클로라이드), 아드리아마이신 RDF (독소루비신 히드로클로라이드), 카르보플라틴, 클라펜 (시클로포스파미드), 시스플라틴, 시클로포스파미드, 시톡산 (시클로포스파미드), 독소루비신 히드로클로라이드, Dox-SL (독소루비신 히드로클로라이드 리포솜), 독실 (독소루비신 히드로클로라이드 리포솜), 독소루비신 히드로클로라이드 리포솜, 에바셋 (독소루비신 히드로클로라이드 리포솜), 겜시타빈 히드로클로라이드, 겜자르 (겜시타빈 히드로클로라이드), 하이캄틴 (토포테칸 히드로클로라이드), 리포독스 (독소루비신 히드로클로라이드 리포솜), 네오사르 (시클로포스파미드), 파클리탁셀, 파라플라트 (카르보플라틴), 파라플라틴 (카르보플라틴), 플라티놀 (시스플라틴), 플라티놀-AQ (시스플라틴), 탁솔 (파클리탁셀), 및 토포테칸 히드로클로라이드로부터 선택될 수 있다. 갑상선암의 치료를 위해, 공동-치료제는 아드리아마이신 PFS (독소루비신 히드로클로라이드), 아드리아마이신 RDF (독소루비신 히드로클로라이드), 카보잔티닙-S-말레이트, 카프렐사 (반데타닙), 코메트리크 (카보잔티닙-S-말레이트), 독소루비신 히드로클로라이드, 및 반데타닙으로부터 선택될 수 있다. 결장암의 치료를 위해, 공동-치료제는 아드루실 (플루오로우라실), 아바스틴 (베바시주맙), 베바시주맙, 캄프토사르 (이리노테칸 히드로클로라이드), 카페시타빈, 세툭시맙, 에푸덱스 (플루오로우라실), 엘록사틴 (옥살리플라틴), 에르비툭스 (세툭시맙), 플루오로플렉스 (플루오로우라실), 플루오로우라실, 이리노테칸 히드로클로라이드, 류코보린 칼슘, 옥살리플라틴, 파니투무맙, 레고라페닙, 스티바르가 (레고라페닙), 벡티빅스 (파니투무맙), 웰코보린 (류코보린 칼슘), 젤로다 (카페시타빈), 잘트랩 (Ziv-아플리베르셉트), 및 Ziv-아플리베르셉트로부터 선택될 수 있다. 폐암의 치료를 위해, 공동-치료제는 아비트렉세이트 (메토트렉세이트), 아브락산 (파클리탁셀 알부민-안정화된 나노입자 제제), 아파티닙 디말레에이트, 알림타 (페메트렉세드 이나트륨), 아바스틴 (베바시주맙), 베바시주맙, 카르보플라틴, 시스플라틴, 크리조티닙, 에를로티닙 히드로클로라이드, 폴렉스 (메토트렉세이트), 폴렉스 PFS (메토트렉세이트), 게피티닙, 글리오트리프 (아파티닙 디말레에이트), 겜시타빈 히드로클로라이드, 겜자르 (겜시타빈 히드로클로라이드), 이레사 (게피티닙), 메토트렉세이트, 메토트렉세이트 LPF (메토트렉세이트), 멕세이트 (메토트렉세이트), 멕세이트-AQ (메토트렉세이트), 파클리탁셀, 파클리탁셀 알부민-안정화된 나노입자 제제, 파라플라트 (카르보플라틴), 파라플라틴 (카르보플라틴), 페메트렉세드 이나트륨, 플라티놀 (시스플라틴), 플라티놀-AQ (시스플라틴), 타르세바 (에를로티닙 히드로클로라이드), 탁솔 (파클리탁셀), 및 잘코리 (크리조티닙)로부터 선택될 수 있다. 췌장암의 치료를 위해, 공동-치료제는 아드루실 (플루오로우라실), 에푸덱스 (플루오로우라실), 에를로티닙 히드로클로라이드, 플루오로플렉스 (플루오로우라실), 플루오로우라실, 겜시타빈 히드로클로라이드, 겜자르 (겜시타빈 히드로클로라이드), 미토마이신 C, 미토지트렉스 (미토마이신 C), 뮤타마이신 (미토마이신) 및 타르세바 (에를로티닙 히드로클로라이드)로부터 선택될 수 있다. 자궁경부암의 치료를 위해, 공동-치료제는 블레녹산 (블레오마이신), 블레오마이신, 시스플라틴, 하이캄틴 (토포테칸 히드로클로라이드), 플라티놀 (시스플라틴), 플라티놀-AQ (시스플라틴), 및 토포테칸 히드로클로라이드로부터 선택될 수 있다. 두경부암의 치료를 위해, 공동-치료제는 아비트렉세이트 (메토트렉세이트), 아드루실 (플루오로우라실), 블레녹산 (블레오마이신), 블레오마이신, 세툭시맙, 시스플라틴, 도세탁셀, 에푸덱스 (플루오로우라실), 에르비툭스 (세툭시맙), 플루오로플렉스 (플루오로우라실), 플루오로우라실, 폴렉스 (메토트렉세이트), 폴렉스 PFS (메토트렉세이트), 메토트렉세이트, 메토트렉세이트 LPF (메토트렉세이트), 멕세이트 (메토트렉세이트), 멕세이트-AQ (메토트렉세이트), 플라티놀 (시스플라틴), 플라티놀-AQ (시스플라틴), 및 탁소테레 (도세탁셀)로부터 선택될 수 있다. CMML을 포함한 백혈병의 치료를 위해, 공동-치료제는 보술리프 (보수티닙), 보수티닙, 클라펜 (시클로포스파미드), 시클로포스파미드, 시타라빈, 시토사르-U (시타라빈), 시톡산 (시클로포스파미드), 다사티닙, 글리벡 (이마티닙 메실레이트), 이클루식 (포나티닙 히드로클로라이드), 이마티닙 메실레이트, 네오사르 (시클로포스파미드), 닐로티닙, 오마세탁신 메페숙시네이트, 포나티닙 히드로클로라이드, 스프리셀 (다사티닙), 신리보 (오마세탁신 메페숙시네이트), 타라빈 PFS (시타라빈), 및 타시그나 (닐로티닙)로부터 선택될 수 있다.
본 발명은 또한 ERK1 및/또는 ERK2에 의해 매개되는 질환 또는 상태를 치료하는 방법에 사용하기 위한 화학식 I의 화합물을 제공하며, 여기서 화학식 I의 화합물은 또 다른 치료제와의 투여를 위해 제조된다. 본 발명은 또한 ERK1 및/또는 ERK2에 의해 매개되는 질환 또는 상태를 치료하는 방법에 사용하기 위한 또 다른 치료 공동-작용제를 제공하며, 여기서 다른 치료 공동-작용제는 화학식 I의 화합물과의 투여를 위해 제조된다. 본 발명은 또한 ERK1 및/또는 ERK2에 의해 매개되는 질환 또는 상태를 치료하는 방법에 사용하기 위한 화학식 I의 화합물을 제공하며, 여기서 화학식 I의 화합물은 또 다른 치료 공동-작용제와 함께 투여된다. 본 발명은 또한 ERK1 및/또는 ERK2에 의해 매개되는 질환 또는 상태를 치료하는 방법에 사용하기 위한 또 다른 치료 공동-작용제를 제공하며, 여기서 다른 치료 공동-작용제는 화학식 I의 화합물과 함께 투여된다.
본 발명은 또한 ERK1 및/또는 ERK2에 의해 매개되는 질환 또는 상태를 치료하기 위한 화학식 I의 화합물의 용도를 제공하며, 여기서 환자는 또 다른 치료제로 이전에 (예를 들어 24시간 이내에) 치료된 바 있다. 본 발명은 또한 ERK1 및/또는 ERK2에 의해 매개되는 질환 또는 상태를 치료하기 위한 또 다른 치료제의 용도를 제공하며, 여기서 환자는 화학식 I의 화합물로 이전에 (예를 들어 24시간 이내에) 치료된 바 있다.
특정한 치료 이익을 제공할 수 있는 구체적 개별 조합물은 본 발명의 화합물과 BRAF, MEK, CDK4/6, SHP-2, HDAC, EGFR, MET, mTOR, PI3K, 및 AKT의 억제제로부터 선택된 적어도 1종의 화합물을 포함한다. 이들 억제제의 예는 베무라페닙, 다브라페닙, LGX818, 트라메티닙, MEK162, LEE011, PD-0332991, 파노비노스타트, 보리노스타트, 로미뎁신, 세툭시맙, 게피티닙, 에를로티닙, 라파티닙, 파니투무맙, 반데타닙, INC280, 에베롤리무스, 시롤리무스, BMK120, BYL719 및 CLR457을 포함한다.
하기 실시예는 본 발명을 예시하기 위한 것으로 의도되고, 이에 제한되는 것으로 해석되어서는 안된다. 온도는 섭씨 온도로 주어진다. 달리 언급되지 않는 한, 모든 증발은 감압, 전형적으로 약 15 mm Hg 내지 100 mm Hg (= 20-133 mbar) 하에 수행된다. 최종 생성물, 중간체 및 출발 물질의 구조는 표준 분석 방법, 예를 들어, 미량분석 및 분광학적 특성, 예를 들어, MS, IR, NMR에 의해 확인된다.
본 발명의 화합물을 합성하는데 이용되는 모든 출발 물질, 빌딩 블록, 시약, 산, 염기, 탈수제, 용매 및 촉매는 상업적으로 입수가능하거나, 또는 관련 기술분야의 통상의 기술자에게 공지된 유기 합성 방법 (Houben-Weyl 4th Ed. 1952, Methods of Organic Synthesis, Thieme, Volume 21)에 의해 제조될 수 있다. 추가로, 본 발명의 화합물은 하기 실시예의 관점에서 관련 기술분야의 통상의 기술자에게 공지된 유기 합성 방법에 의해 제조될 수 있다.
화합물 및/또는 중간체는 2695 세퍼레이션 모듈(Separation Module) (매사추세츠주 밀포드)을 갖는 워터스 밀레니엄(Waters Millennium) 크로마토그래피 시스템을 사용하는 고성능 액체 크로마토그래피 (HPLC)에 의해 특징화되었다. 분석 칼럼은 알테크(Alltech) (일리노이주 디어필드)로부터의 역상 페노메넥스 루나(Phenomenex Luna) C18 -5 μ, 4.6 x 50 mm였다. 5% 아세토니트릴/95% 물로 출발하여 100% 아세토니트릴까지 10분의 기간에 걸쳐 진행하는 구배 용리가 사용되었다 (유량 2.5 mL/분). 모든 용매는 0.1% 트리플루오로아세트산 (TFA)을 함유하였다. 화합물은 220 또는 254 nm에서 자외선 (UV) 흡수에 의해 검출되었다. HPLC 용매는 버딕 앤 잭슨(Burdick and Jackson) (미시간주 머스케간) 또는 피셔 사이언티픽(Fisher Scientific) (펜실베니아주 피츠버그)으로부터의 것이었다.
질량 분광측정 분석은 워터스 시스템(Waters System) 상에서 수행되었다 (워터스 액퀴티(Waters Acquity) UPLC 및 워터스 SQD 질량 분광계 검출기; 칼럼: 페노메넥스 키네텍스(Phenomenex Kinetex) 2.6 um C18, 칼럼 크기 4.6 x 50 mm; 칼럼 온도 50℃. 구배: 1.5분 기간에 걸쳐 0.1% TFA를 함유한 물 중 2-98% 아세토니트릴; 유량 1.2 mL/분 (또는 1.3분에 걸쳐 극성 구배 1-30%, 1.3분에 걸쳐 비극성 구배 55-98%); 질량 분광계 분자량 스캔 범위 150-850; 또는 150-1900. 콘 전압 20 V. 모든 질량은 달리 나타내지 않는 한, 양성화된 모 이온의 질량으로서 보고되었다. 핵 자기 공명 (NMR) 분석은 배리안(Varian) 400 MHz NMR (캘리포니아주 팔로 알토)을 사용하여 선택된 화합물 상에서 수행되었다. 스펙트럼 기준은 TMS 또는 용매의 공지된 화학적 이동이었다.
X선 분말 회절 (XRPD)은 하기와 같이 수행되었다:
Figure 112016034409922-pct00019
통상의 기술자에 의해 인지될 바와 같이, "도 3에 대한 표" 내의 다양한 피크의 상대 강도는 X선 빔에서 결정의 배향 효과 또는 분석될 물질의 순도 또는 샘플의 결정화도와 같은 다수의 인자로 인해 달라질 수 있다. 피크 위치는 또한 샘플 높이에서의 변동에 대해 이동할 수 있지만, 피크 위치는 실질적으로 "도 3에 대한 표"에 정의된 바와 같이 유지될 것이다. 통상의 기술자는 또한 상이한 파장을 사용한 측정은, 브래그(Bragg) 방정식 - nλ = 2d sin θ에 따라 상이한 이동을 발생시킬 것임을 인지할 것이다. 대안적 파장의 사용에 의해 생성된 이러한 대안적 XRPD 패턴은 그럼에도 불구하고 동일한 물질을 나타낸다.
시차 주사 열량측정/열중량측정 분석 (DSC/TGA)은 하기와 같이 수행되었다:
Figure 112016034409922-pct00020
관련 기술분야의 통상의 기술자에 의해 이해될 바와 같이, 관찰된 피크에서의 미세한 변동은 이용된 구체적 분광계 및 분석가의 샘플 제조 기술을 기반으로 하여 예상된다. 일부 오차 한계는 각각의 피크 할당 (+/- cm- 1)에 존재한다.
본원에 사용된 약어는 달리 나타내지 않는 한, 관련 기술분야에서 그의 통상의 의미를 갖거나 또는 하기 목록에 정의되어 있는 의미를 갖는다:
ATP 아데노신 5'-트리포스페이트
BINAP 라세미 2,2'-비스(디페닐포스피노)-1,1'-비나프틸
BOC 3급 부톡시카르보닐
br 넓음
BSA 소 혈청 알부민
d 이중선
dd 이중선의 이중선
DCM 디클로로메탄
DIEA 디에틸이소프로필아민
DME 1,4-디메톡시에탄
DMF N,N-디메틸포름아미드
DMSO 디메틸술폭시드
DTT 디티오트레이톨
EDTA 에틸렌디아민 테트라아세트산
ESI 전기분무 이온화
EtOAc 에틸 아세테이트
FCC 플래쉬 칼럼 크로마토그래피
h 시간
HBTU 1-[비스(디메틸아미노)메틸렌]-1H-벤조트리아졸륨헥사플루오로포스페이트(1-) 3-옥시드
HOBt 1-히드록시-7-아자벤조트리아졸
HPLC 고압 액체 크로마토그래피
IR 적외선 분광분석법
LCMS 액체 크로마토그래피 및 질량 분광측정법
MeOH 메탄올
MS 질량 분광측정법
MW 마이크로웨이브
m 다중선
min 분
mL 밀리리터
m/z 질량 대 전하 비
NMR 핵 자기 공명
ppm 백만분율
PyBOP 벤조트리아졸-1-일옥시트리피롤리디노포스포늄 헥사플루오로포스페이트
rac 라세미
rt 실온
s 단일선
t 삼중선
TFA 트리플루오로아세트산
THF 테트라히드로푸란
Tris·HCl 아미노트리스(히드록시메틸)메탄 히드로클로라이드
실시예
하기 실시예는 본 발명의 특정 실시양태 및 그들을 어떻게 제조하고 사용하는지를 예시하며, 이들은 본 발명의 범주를 제한하는 것으로 의도되지 않는다.
방법 1
실시예 1
(S)-4-(3-아미노-6-(테트라히드로-2H-피란-4-일)피라진-2-일)-N-(2-히드록시-1-페닐에틸)벤즈아미드의 합성
반응식 1
Figure 112016034409922-pct00021
단계 1. 5-(3,6-디히드로-2H-피란-4-일)피라진-2-아민
보론산 에스테르 (6.64 g, 31.6 mmol), 5-브로모피라진-2-아민 (5 g, 28.7 mmol), 및 PdCl2(dppf) (2.1 g, 2.87 mmol)의 용액에 DME (71.8 mL) 및 2 M Na2CO3 용액 (24 mL)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 90℃에서 15시간 동안 가열하였다. 반응 혼합물을 EtOAc로 후처리하였다. 유기 층을 물 및 염수로 세척하고, 무수 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 진공 하에 농축시켰다. 조 생성물을 플래쉬 크로마토그래피 (구배: 헵탄 중 EtOAc)에 의해 정제하여 5-(3,6-디히드로-2H-피란-4-일)피라진-2-아민을 57% 수율로 수득하였다. LCMS (m/z): 178.1 (MH+), 0.34분;
1H NMR (400MHz, CDCl3) δ ppm 8.17 - 8.03 (m, 1 H), 8.04 - 7.88 (m, 1 H), 6.57 - 6.41 (m, 1 H), 4.68 - 4.42 (m, 2 H), 4.42 - 4.29 (m, 2 H), 4.06 - 3.84 (m, 2 H), 2.68 - 2.47 (m, 2 H).
단계 2. 5-(테트라히드로-2H-피란-4-일)피라진-2-아민
MeOH (50 mL) 중 5-(3,6-디히드로-2H-피란-4-일)피라진-2-아민 (2.7 g, 15.24 mmol) 및 Pd-C (10%, 데구사(Degussa) 유형) (1.6 g, 1.5 mmol)의 용액을 N2 스트림에 의해 15분 동안 탈기시켰다. 수소 기체 풍선을 장착한 후, 반응 혼합물을 실온에서 15시간 동안 교반하였다. 조 생성물을 셀라이트 패드를 통해 여과하고, EtOAc로 세척하였다. 휘발성 물질을 진공 하에 농축시켜 5-(테트라히드로-2H-피란-4-일)피라진-2-아민을 수득하고, 이를 후속 단계에 사용하였다. LCMS (m/z): 180.3 (MH+), 0.28분.
단계 3. 3-브로모-5-(테트라히드로-2H-피란-4-일)피라진-2-아민
CH3CN (52 mL) 중 5-(테트라히드로-2H-피란-4-일)피라진-2-아민 (2.8 g, 15.6 mmol)의 빙냉 용액에 0℃에서 NBS (2.78 g, 15.62 mmol)를 2 부분으로 첨가하였다. 반응 혼합물을 0℃에서 1시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 에틸 아세테이트로 희석하고, 포화 탄산나트륨 용액, 물, 염수로 세척하고, 건조시키고, 농축시켰다. 조 3-브로모-5-(테트라히드로-2H-피란-4-일)피라진-2-아민 (3.9 g, 97%)을 후속 단계에 추가 정제 없이 사용하였다. LCMS (m/z): 258/260 (MH+), 0.52분;
1H NMR (400MHz, CDCl3) δ ppm 7.83 (s, 1H), 4.90 (br. s., 2H), 4.14 - 4.02 (m, 2H), 3.59 - 3.43 (m, 2H), 2.83 (d, J=5.5 Hz, 1H), 1.91 - 1.77 (m, 4H).
단계 4. (S)-4-브로모-N-(2-히드록시-1-페닐에틸)벤즈아미드
THF (9.9 mL) 중 4-브로모벤조산 (892 mg, 4.44 mmol)의 용액에 (S)-2-아미노-2-페닐에탄올 (609 mg, 4.44 mmol), DIEA (1.9 mL, 11.1 mmol), PyBroP (2.5 g, 5.32 mmol), 및 HOBT (815 mg, 5.32 mmol)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 20시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 EtOAc로 추출하였다. 유기 층을 물 및 염수로 세척하였다. 무수 황산나트륨 상에서 건조시킨 후, 여과하고, 진공 하에 농축시키고, 조 생성물을 플래쉬 크로마토그래피 (구배: DCM 중 EtOAc)에 의해 정제하여 (S)-4-브로모-N-(2-히드록시-1-페닐에틸)벤즈아미드 (850 mg, 60%)를 수득하였다. LCMS (m/z): 338.1 (MH+), 0.61분.
단계 5. (S)-N-(2-히드록시-1-페닐에틸)-4-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-디옥사보롤란-2-일)벤즈아미드
디옥산 (1.562 mL) 중 (S)-4-브로모-N-(2-히드록시-1-페닐에틸)벤즈아미드, 4,4,4',4',5,5,5',5'-옥타메틸-2,2'-비(1,3,2-디옥사보롤란 (B2(PIN)2) (238 mg, 0.937 mmol), Pd2(dba)3 (21.45 mg, 0.023 mmol), 트리시클로헥실포스핀 (19.71 mg, 0.070 mmol)의 용액에 아세트산칼륨 (138 mg, 1.405 mmol)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 N2 스트림에 의해 15분 동안 탈기시켰다. 반응 혼합물을 100℃에서 밤새 가열하였다. EtOAc로 희석한 후, 반응 혼합물을 셀라이트를 통해 여과하였다. 농축시킨 후, (S)-N-(2-히드록시-1-페닐에틸)-4-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-디옥사보롤란-2-일)벤즈아미드를 후속 단계에 추가 정제 없이 사용하였다. LCMS (m/z): 368.3 (MH+), 0.88분 (보론산 에스테르에 대해) 및 286.1 (MH+), 0.49분 (상응하는 보론산에 대해).
단계 6. (S)-4-(3-아미노-6-(테트라히드로-2H-피란-4-일)피라진-2-일)-N-(2-히드록시-1-페닐에틸)벤즈아미드
3-브로모-5-(테트라히드로-2H-피란-4-일)피라진-2-아민 (154 mg, 0.418 mmol), (S)-N-(2-히드록시-1-페닐에틸)-4-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-디옥사보롤란-2-일)벤즈아미드 (90 mg, 0.349 mmol), 및 PdCl2(dppf) (25.5 mg, 0.035 mmol)의 용액에 디옥산 (2.3 mL) 및 2 M Na2CO3 용액 (1.163 mL)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 마이크로웨이브 합성기 (120℃, 10분)에서 가열하였다. 반응 혼합물을 EtOAc로 후처리하였다. 유기 층을 물 및 염수로 세척하고, 무수 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 진공 하에 농축시켰다. 조 생성물을 정제용 HPLC에 의해 정제하였다. 순수한 분획을 합하고, 탄산나트륨 용액으로 유리-염기화시키고, EtOAc로 추출하였다. 유기 층을 무수 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 진공 하에 건조시켰다. 순수한 고체를 MeCN/물 (1:1, 6 mL) 중에 용해시키고, 동결건조시켜 (S)-4-(3-아미노-6-(테트라히드로-2H-피란-4-일)피라진-2-일)-N-(2-히드록시-1-페닐에틸)벤즈아미드를 유리 염기 (46%)로서 수득하였다. LCMS (m/z): 419.2 (MH+), 0.58분;
1H NMR (400MHz, DMSO-d6) δ ppm 8.74 (d, J = 12 Hz, 1 H), 7.99 (d, J = 8 Hz, 2 H), 7.88 (s, 1 H), 7.79 (d, J = 12 Hz, 2 H), 7.37 (d, J = 8 Hz, 2 H), 7.29 (m, 2 H), 7.22 (m, 1 H), 5.99 (bs, 1 H), 5.07 (m, 1 H), 3.91 (m, 2 H), 3.67 (m, 2 H), 3.41 (m, 2 H), 2.82 (m, 1 H), 1.72 (m, 4 H).
3-플루오로-4-(3-(메틸술포닐)벤질카르바모일)페닐보론산의 합성
반응식 2
Figure 112016034409922-pct00022
DMF (2 mL) 중 4-보로노-2-플루오로벤조산 (218 mg, 1.2 mmol), (3-(메틸술포닐)페닐)-메탄아민 (200 mg, 1.08 mmol), DIEA (0.754 mL, 4.32 mmol) 및 TBTU (381 mg, 1.2 mmol)의 혼합물을 실온에서 2일 동안 교반한 다음, 반응 혼합물을 물 (10 mL)로 희석하고, 생성물을 검으로서 침전시키고, 상청액을 원심분리를 통해 분리하고, 점착성 잔류물을 물 (3 mL)로 초음파처리하고, 점착성 잔류물을 고진공 하에 추가로 건조시켜 3-플루오로-4-(3-(메틸술포닐)벤질카르바모일)-페닐보론산 (335 mg, 88%)을 백색 발포체로서 수득하였다. LCMS (m/z): 352.1 (MH+), 0.51분.
(+/-)-(3-플루오로-4-((2,2,2-트리플루오로-1-페닐에틸)카르바모일)페닐)보론산의 합성
반응식 3
Figure 112016034409922-pct00023
DCM (1468 μL) 중 4-보로노-2-플루오로벤조산 (54 mg, 0.294 mmol)의 혼합물을 0℃로 냉각시켰다. 이어서, 고세즈 시약 N,N,3-트리메틸부트-2-엔-2-아민 (65.8 μL, 0.587 mmol)을 첨가하고, 전체 혼합물을 실온에서 20분 동안 교반하였다. 혼합물을 TEA (246 μL, 1.762 mmol), 2,2,2-트리플루오로-1-페닐에탄아민 (59.1 mg, 0.338 mmol) 및 DCM (1468 μL)의 혼합물에 첨가하였다. 반응물을 실온에서 2시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물에 EtOAc를 첨가하고, 포화 중탄산나트륨, 물로 세척하고, Na2SO4 상에서 건조시켰다. 여과하고, 농축시켜 조 생성물을 수득하였으며, 이를 후속 단계에 추가 정제 없이 사용하였다. LCMS (m/z): 342.2 (MH+), 0.84분.
(R)-1-(2-플루오로페닐술포닐)피페리딘-3-아민의 합성
Figure 112016034409922-pct00024
(R)-3-Boc-아미노피페리딘 (1.05 g, 5.25 mmol)을 DCM (10 mL) 중에 용해시킨 다음, 트리에틸아민 (1.10 mL, 7.89 mmol)을 첨가하였다. 실온에서 이 용액에 2-플루오로벤젠술포닐클로라이드 (1.127 g, 5.79 mmol)를 첨가하였다. 2시간 후, 반응은 LCMS에 의해 완결된 것으로 간주되었고, 물로 희석하고, DCM (30 mL)으로 추출하고, 유기 층을 분리하고, 황산마그네슘 상에서 건조시키고, 여과하고, 농축시키고, 후속 단계에 그대로 사용하였다. 상기로부터의 조 생성물을 DCM (25 mL) 중에 용해시키고, TFA (10 mL)를 한번에 첨가하였다. 반응 혼합물에 이어서 LCMS를 수행하였다. 1시간 후, TFA를 진공 하에 스트리핑한 다음, 잔류물을 3N HCl 중에 현탁시키고, 에테르로 세척하였다. 수성 층을 염기성화시키고, DCM으로 추출하고, DCM 층을 분리하고, 황산마그네슘 상에서 건조시키고, 여과하고, 진공 하에 농축시켜 (R)-1-((2-플루오로페닐)술포닐)피페리딘-3-아민 873 mg을 유리 염기로서의 목적 생성물로서 수득하였다. LCMS (m/z): 255.5 (MH+), 0.49분.
(R)-1-(페닐술포닐)피페리딘-3-아민의 합성
Figure 112016034409922-pct00025
(R)-3-Boc-아미노피페리딘 (0.843g, 4.21 mmol)을 DCM (10 mL) 중에 용해시킨 다음, 트리에틸아민 (0.88 mL, 6.31 mmol)을 첨가하였다. 실온에서 이 용액에 벤젠술포닐클로라이드 (0.818g, 4.63 mmol)를 첨가하였다. 2시간 후, 반응은 LCMS에 의해 완결된 것으로 간주되었고, 물로 희석하고, DCM (30 mL)으로 추출하고, 유기 층을 분리하고, 황산마그네슘 상에서 건조시키고, 여과하고, 농축시키고, 후속 단계에 그대로 사용하였다. 상기로부터의 조 생성물을 DCM (25 mL) 중에 용해시키고, TFA (10 mL)를 한번에 첨가하였다. 반응 혼합물에 이어서 LCMS를 수행하였다. 3시간 후, 완전한 Boc-탈보호가 관찰되었다. 이 스테이지에서, TFA를 진공 하에 스트리핑한 다음, 잔류물을 3N HCl 중에 현탁시키고, 에테르로 세척하였다. 수성 층을 염기성화시키고, DCM으로 추출하고, DCM 층을 분리하고, 황산마그네슘 상에서 건조시키고, 여과하고, 진공 하에 농축시켜 (R)-1-(페닐술포닐)피페리딘-3-아민 850 mg을 유리 염기로서의 목적 생성물로서 수득하였다. LCMS (m/z): 241.4 (MH+), 0.43분.
(R)-3-플루오로-4-(1-(2-플루오로페닐술포닐)피페리딘-3-일카르바모일)페닐보론산의 합성
반응식 4
Figure 112016034409922-pct00026
THF (1450 μL) 및 DMF (1450 μL) 중 4-보로노-2-플루오로벤조산 (160 mg, 0.870 mmol), (R)-1-(2-플루오로페닐술포닐)피페리딘-3-아민 (225 mg, 0.870 mmol), 및 DIEA (456 μL, 2.61 mmol)의 용액에 HOAt (237 mg, 1.740 mmol) 및 EDC (417 mg, 2.175 mmol)를 첨가하였다. 실온에서 3시간 교반한 후, 반응 혼합물을 EtOAc로 추출하였다. 유기 층을 NaHCO3, 물 및 염수로 세척하고, 무수 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 진공 하에 농축시켜 (R)-3-플루오로-4-(1-(2-플루오로페닐술포닐)피페리딘-3-일카르바모일)페닐보론산을 수득하였으며, 이를 후속 단계 반응에 정제 없이 사용하였다. LCMS (m/z): 425.2 (MH+), 0.72분.
4-(2,2-디플루오로-1-페닐에틸카르바모일)-3-플루오로페닐보론산의 합성
반응식 5
Figure 112016034409922-pct00027
단계 1. 2,2-디플루오로-1-페닐에탄아민
실온에서 톨루엔 (32 mL) 중 2,2-디플루오로-1-페닐에타논 (1 g, 6.4 mmol)의 용액에 LiHMDS (THF 중 1M) (7.05 mL, 7.05 mmol)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 30분 동안 교반하고, 이어서 BH3-DMS (1.216 mL, 12.81 mmol)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 1시간 동안 교반하였다. 0℃에서 냉각시킨 후, 수성 2 N NaOH 용액을 조심스럽게 5분에 걸쳐 첨가하였다 (주의! 기체 발생). 반응물을 1시간 동안 교반하였다. 층을 분리하고, 물 및 염수로 세척하였다. 황산나트륨 상에서 건조시킨 후, MeOH 중 HCl (7.17 mL, 8.97 mmol)을 첨가하여 백색 침전물을 형성하였다. 침전물을 여과하고, 에테르로 세척하고, 진공 하에 건조시켜 2,2-디플루오로-1-페닐에탄아민 (21%)을 수득하였다.
1H NMR (400MHz, CDCl3) δ ppm 7.49 (s, 5 H), 6.52 - 6.07 (m, 1 H), 4.78 - 4.69 (m, 2 H).
단계 2. 4-(2,2-디플루오로-1-페닐에틸카르바모일)-3-플루오로페닐보론산
THF (3.866 mL) 및 DMF (0.483 mL) 중 4-보로노-2-플루오로벤조산 (200 mg, 1.087 mmol), 2,2-디플루오로-1-페닐에탄아민 (232 mg, 1.196 mmol), 및 DIEA (0.570 mL, 3.26 mmol)의 용액에 HOAt (296 mg, 2.175 mmol) 및 EDC (521 mg, 2.72 mmol)를 첨가하였다. 실온에서 3시간 교반한 후, 10% 시트르산 용액을 첨가 (pH ~3)하고, 2-메틸 THF 및 EtOAc (1:1)로 추출하였다. 유기 층을 무수 Na2SO4 상에서 건조시키고, 여과하고, 농축시켰다. 조 4-(2,2-디플루오로-1-페닐에틸카르바모일)-3-플루오로페닐보론산을 수득하고 (90%), 후속 단계에 정제 없이 사용하였다. LCMS (m/z): 375.3 (MH+), 0.48분.
4-벤질-8-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-디옥사보롤란-2-일)-3,4-디히드로벤조[f][1,4]옥사제핀-5(2H)-온의 합성
반응식 6
Figure 112016034409922-pct00028
단계 1. N-벤질-4-브로모-2-플루오로-N-(2-히드록시에틸)벤즈아미드
THF (14.04 mL) 중 4-브로모-2-플루오로벤조일 클로라이드 (1 g, 4.21 mmol)의 용액에 실온에서 DIEA (1.103 mL, 6.32 mmol) 및 2-(벤질아미노)에탄올 (0.764 g, 5.05 mmol)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 밤새 교반하였다. 반응 혼합물을 EtOAc로 추출하였다. 유기 층을 물 및 염수로 세척하였다. 무수 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 진공 하에 농축시키고, 조 N-벤질-4-브로모-2-플루오로-N-(2-히드록시에틸)벤즈아미드를 후속 단계에 사용하였다 (83%). LCMS (m/z): 352/354 (MH+), 0.83분.
단계 2. 4-벤질-8-브로모-3,4-디히드로벤조[f][1,4]옥사제핀-5(2H)-온
DMF (14.00 mL) 중 N-벤질-4-브로모-2-플루오로-N-(2-히드록시에틸)벤즈아미드 (494 mg, 1.403 mmol)의 용액에 NaH (오일 중 60%) (61.7 mg, 1.543 mmol)를 천천히 첨가하였다. H2 기체가 발생한 후, 반응 혼합물을 90℃에서 24시간 동안 가열하였다. 물로 켄칭한 후, 반응 혼합물을 EtOAc로 추출하였다. 유기 층을 물 및 염수로 세척하였다. 무수 황산나트륨 상에서 건조시킨 후, 여과하고, 유기 층을 진공 하에 증발시켰다. 유성 조 4-벤질-8-브로모-3,4-디히드로벤조[f][1,4]옥사제핀-5(2H)-온을 플래쉬 크로마토그래피 (구배: 헵탄 중 EtOAc)에 의해 84% 수율로 정제하였다. LCMS (m/z): 332.1/334.1 (MH+), 0.94분.
단계 3. 4-벤질-8-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-디옥사보롤란-2-일)-3,4-디히드로벤조[f][1,4]옥사제핀-5(2H)-온
디옥산 (3.35 mL) 중 4-벤질-8-브로모-3,4-디히드로벤조[f][1,4]옥사제핀-5(2H)-온 (111.3 mg, 0.335 mmol), B2(PIN)2 (170 mg, 0.670 mmol), Pd2(dba)3 (15.34 mg, 0.017 mmol), 트리시클로헥실포스핀 (14.09 mg, 0.050 mmol)의 용액에 아세트산칼륨 (99 mg, 1.005 mmol)을 탈기 직후 첨가하였다. 반응 혼합물을 100℃에서 밤새 가열하였다. EtOAc로 희석한 후, 반응 혼합물을 셀라이트를 통해 여과하였다. 농축시킨 후, 조 4-벤질-8-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-디옥사보롤란-2-일)-3,4-디히드로벤조[f][1,4]옥사제핀-5(2H)-온을 수득하고 (>99%), 후속 단계에 추가 정제 없이 사용하였다. LCMS (m/z): 298.1 (보론산에 대한 MH+), 0.63분 및 380.2 (MH+), 1.05분.
(S)-2-(메틸아미노)-2-페닐에탄올의 합성
반응식 7
Figure 112016034409922-pct00029
THF (20.18 mL) 중 LiAlH4 (0.689 g, 18.16 mmol)의 현탁액에 THF (20mL) 중 (S)-2-(메틸아미노)-2-페닐아세트산 (1 g, 6.05 mmol)을 0℃에서 10분에 걸쳐 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 밤새 교반하였다. 물 (0.7 mL), NaOH (2.1 mL), 물 (0.7 mL)로 켄칭한 후, 반응 혼합물을 여과하였다. 여과물을 EtOAc로 3회 추출하였다. 합한 유기 층을 물 및 염수로 세척하고, 무수 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 진공 하에 농축시켰다. 조 생성물을 플래쉬 크로마토그래피 (DCM 중 10% 메탄올)에 의해 정제하여 (S)-2-(메틸아미노)-2-페닐에탄올을 무색 오일로서 55% 수율로 수득하였다. LCMS (m/z): 152.1 (MH+), 0.31분;
1H NMR (400MHz,CDCl3) δ7.40 - 7.33 (m, 2 H), 7.32 - 7.27 (m, 3 H), 3.77 - 3.69 (m, 1 H), 3.69 - 3.63 (m, 1 H), 3.58 (d, J = 9.8 Hz, 1 H), 2.36 (s, 3 H).
(S)-4-페닐옥사졸리딘의 합성
반응식 8
Figure 112016034409922-pct00030
메탄올 (36.4 mL) 중 (S)-2-아미노-2-페닐에탄올 (1.5 g, 10.93 mmol)의 용액에 실온에서 포름알데히드 (1.065 g, 13.12 mmol)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 2일 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 농축 건조시켰다. 조 물질을 플래쉬 크로마토그래피 (0-50% EtOAc/헵탄)에 의해 정제하여 (S)-4-페닐옥사졸리딘을 40% 수율로 수득하였다. LCMS (m/z): 150.1 (MH+), 0.31분.
(S)-tert-부틸 (2-아미노-2-(3-클로로페닐)에틸)카르바메이트의 합성
반응식 9
Figure 112016034409922-pct00031
단계 1. (R)-2-아미노-1-(3-클로로페닐)에탄올
THF (84 mL) 중 (R)-2-(3-클로로페닐)옥시란 (13 g, 84 mmol)의 용액에 NaHMDS (THF 중 1 M) (252 mL, 252 mmol)를 0℃에서 천천히 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온으로 가온하고, 밤새 교반하였다. 반응 혼합물에, 물 (33 mL, 2.5 mL/g)을 첨가하였다. 실온에서 5시간 동안 교반한 후, 용매를 진공 하에 약 1/4로 제거하고, DCM에 의해 분배하였다. 하부 층은 약간 탁하였고, 상부 층은 갈색 용액이었다. 상기 층 둘 다를 농축시켰으며, 이는 목적 (R)-2-아미노-1-(3-클로로페닐)에탄올 (14 g, 97%)을 함유하였다. 합한 생성물을 후속 단계에 추가 정제 없이 사용하였다. LCMS (m/z): 172.1 (MH+), 0.37분.
단계 2. (R)-tert-부틸 (2-(3-클로로페닐)-2-히드록시에틸)카르바메이트
THF (272 mL) 중 (R)-2-아미노-1-(3-클로로페닐)에탄올 (14 g, 82 mmol)의 용액에 디-tert-부틸 디카르보네이트 (24.92 g, 114 mmol)를 첨가하였다. 혼합물을 실온에서 밤새 교반하였다. 반응 혼합물을 DCM으로 희석한 다음, 포화 중탄산나트륨 용액으로 세척하였다. 이어서, 분리된 유기 층을 무수 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 진공 하에 농축시켰다. 조 생성물을 플래쉬 크로마토그래피 (헵탄 중 0에서 50% 에틸 아세테이트)에 의해 정제하여 (R)-tert-부틸 (2-(3-클로로페닐)-2-히드록시에틸)카르바메이트 (49.2%)를 수득하였다. LCMS (m/z): 216 (MH+-tBu), 0.85분;
1H NMR (400 MHz, CD3OD) δ ppm 1.40 (s, 9 H) 3.18 (s, 1 H) 3.26 (d, J=4.70 Hz, 1 H) 4.69 (br. s., 1 H) 7.20 - 7.34 (m, 3 H) 7.35 - 7.41 (m, 1 H).
단계 3. (S)-tert-부틸 (2-(3-클로로페닐)-2-(1,3-디옥소이소인돌린-2-일)에틸)카르바메이트
THF (100 mL) 중 (R)-tert-부틸 (2-(3-클로로페닐)-2-히드록시에틸)카르바메이트 (8.12 g, 29.9 mmol)의 용액에 프탈이미드 (6.16 g, 41.8 mmol)를 첨가하고, 중합체-결합된 트리페닐포스핀 (3 mmol의 PPh3/1 g 수지, 9.8 g). THF (20 mL) 중 DTBAD (7.09 g, 30.8 mmol)를 반응 혼합물에 실온에서 천천히 첨가하였으며, 이어서 이를 실온에서 밤새 교반하였다. 반응 혼합물을 셀라이트를 통해 여과하고, EtOAc로 세척하였다. 생성된 여과물을 Na2CO3 용액, 물 및 염수로 세척하고, 무수 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 진공 하에 농축시켰다. 조 물질을 플래쉬 크로마토그래피 (0-30% EtOAc/헵탄)에 의해 정제하여 (S)-tert-부틸 (2-(3-클로로페닐)-2-(1,3-디옥소이소인돌린-2-일)에틸)카르바메이트 (58.4%)를 수득하였다. LCMS (m/z): 301.1 (MH+-Boc), 1.06분.
단계 4. (S)-tert-부틸 (2-아미노-2-(3-클로로페닐)에틸)카르바메이트
에탄올 (41.6 mL) 중 (S)-tert-부틸 (2-(3-클로로페닐)-2-(1,3-디옥소이소인돌린-2-일)에틸)카르바메이트 (5.0 g, 12.47 mmol)의 용액에 히드라진 수화물 (6.06 mL, 125 mmol)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 60℃에서 2시간 동안 가열하였다. 반응 혼합물을 셀라이트 패드를 통해 여과하였다. 여과물을 농축시키고, 잔류물을 DCM으로 희석하고, 셀라이트를 통해 여과하였다. 동일한 과정을 어떠한 백색 침전물도 나타나지 않을 때까지 반복하였다. 백색 부산물을 완전히 제거하기 위해, 생성물을 1N HCl (30 mL) 중에 용해시키고, EtOAc로 세척하고, 수성 상을 pH 7로 중화시킨 다음, EtOAc에 의해 역추출하였다. 유기부를 무수 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 진공 하에 농축시켜 (S)-tert-부틸 (2-아미노-2-(3-클로로페닐)에틸)카르바메이트 (89%)를 수득하였다. LCMS (m/z): 271.1 (MH+), 0.58분.
<표 1> 아미드 결합 형성 및/또는 보론산 에스테르 형성으로부터 수득된 상응하는 아릴 할라이드 또는 보론산 에스테르/산
Figure 112016034409922-pct00032
Figure 112016034409922-pct00033
Figure 112016034409922-pct00034
실시예 2
(S)-4-(2-아미노-5-(피페리딘-4-일)피리딘-3-일)-2-플루오로-N-(2-히드록시-1-페닐에틸)벤즈아미드의 합성
반응식 10
Figure 112016034409922-pct00035
단계 1. tert-부틸 6-아미노-5',6'-디히드로-[3,4'-비피리딘]-1'(2'H)-카르복실레이트
DME (10 mL) 중 5-브로모피리딘-2-아민 (0.84 g, 4.85 mmol)의 용액에 N-Boc-5,6-디히드로피리딘-1(2H)-카르복실레이트 (1 g, 3.23 mmol), 및 탄산나트륨 (4.85 mL, 9.70 mmol)을 첨가하였다. 혼합물을 질소로 5분 동안 퍼징하고, 이어서 PdCl2(dppf)-CH2Cl2 (0.26 g, 0.32 mmol)를 첨가하였다. 생성된 혼합물을 오일 조에서 120℃로 2시간 동안 가열하였다. 반응 혼합물을 에틸 아세테이트로 희석하고, 물, 염수로 세척하고, 건조시키고, 농축시켰다. 잔류물을 실리카 겔 상에서 플래쉬 칼럼 크로마토그래피 (이스코(ISCO))에 의해 헵탄 중 0-90% 에틸 아세테이트로 용리시키면서 정제하여 tert-부틸 6-아미노-5',6'-디히드로-[3,4'-비피리딘]-1'(2'H)-카르복실레이트 (560 mg, 63%)를 갈색 고체로서 수득하였다. LCMS (m/z): 276 (MH+), 0.59분.
단계 2. tert-부틸 4-(6-아미노피리딘-3-일)피페리딘-1-카르복실레이트
메탄올 (30 mL) 중 tert-부틸 6-아미노-5',6'-디히드로-[3,4'-비피리딘]-1'(2'H)-카르복실레이트 (560 mg, 2.03 mmol), 5% Pd/C (1082 mg, 0.5 mmol)의 현탁액을 질소로 2분 동안 퍼징하였다. 반응 혼합물을 주위 온도에서 수소 하에 16시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 디클로로메탄 (50 mL)으로 희석하고, 셀라이트 패드를 통해 여과하였다. 여과물을 농축시키고, 잔류물을 실리카 겔 상에서 플래쉬 칼럼 크로마토그래피 (이스코)에 의해 헵탄 중 0-90% 에틸 아세테이트로 용리시키면서 정제하여 tert-부틸 4-(6-아미노피리딘-3-일)피페리딘-1-카르복실레이트 (180 mg, 31.9%)를 황색 고체로서 수득하였다. LCMS (m/z): 278 (MH+), 0.57분.
단계 3. tert-부틸 4-(6-아미노-5-브로모피리딘-3-일)피페리딘-1-카르복실레이트
DCM (18 mL) 중 tert-부틸 4-(6-아미노-5-브로모피리딘-3-일)피페리딘-1-카르복실레이트 (180 mg, 0.65 mmol)의 빙냉 용액에 NBS (116 mg, 0.65 mmol)를 2 부분으로 첨가하였다. 반응 혼합물을 0℃에서 빙조에서 30분 동안 교반하였다. 반응 용액을 에틸 아세테이트로 희석하고, 물, 포화 수성 중탄산나트륨, 염수로 세척하고, 황산나트륨 상에서 건조시키고, 농축시켰다. 생성된 잔류물을 실리카 겔 상에서 플래쉬 칼럼 크로마토그래피 (이스코)에 의해 헵탄 중 0-100% 에틸 아세테이트로 용리시키면서 정제하여 tert-부틸 4-(6-아미노-5-브로모피리딘-3-일)피페리딘-1-카르복실레이트 (180 mg, 78%)를 황색 오일로서 수득하였다. LCMS (m/z): 300/302 (MH+), 0.67분.
단계 4. tert-부틸 4-(6-아미노-5-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-디옥사보롤란-2-일)피리딘-3-일)피페리딘-1-카르복실레이트
1,4-디옥산 (8 mL) 중 tert-부틸 4-(6-아미노-5-브로모피리딘-3-일)피페리딘-1-카르복실레이트 (180 mg, 0.50 mmol)의 현탁액에 비스(피나콜레이토)디보론 (385 mg, 1.51 mmol) 및 아세트산칼륨 (248 mg, 2.53 mmol)을 첨가하였다. 혼합물을 질소로 3분 동안 퍼징한 다음, PdCl2(dppf)-CH2Cl2부가물 (49.5 mg, 0.061 mmol)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 오일 조에서 20시간 동안 110℃로 가열하고, 중성 알루미나 (1 g)를 통해 여과하였다. 여과물을 농축시켜 조 tert-부틸 4-(6-아미노-5-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-디옥사보롤란-2-일)피리딘-3-일)피페리딘-1-카르복실레이트를 수득하였으며, 이를 직접 후속 단계에 어떠한 정제도 없이 사용하였다. LCMS (m/z): 322 (보론산에 대한 MH+), 0.60분.
단계 5. (S)-4-(2-아미노-5-(피페리딘-4-일)피리딘-3-일)-2-플루오로-N-(2-히드록시-1-페닐에틸)벤즈아미드
DME (5 mL) 중 (S)-4-브로모-2-플루오로-N-(2-히드록시-1-페닐에틸)벤즈아미드 (67.1 mg, 0.20 mmol)의 현탁액에 tert-부틸 4-(6-아미노-5-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-디옥사보롤란-2-일)피리딘-3-일)피페리딘-1-카르복실레이트 (40 mg, 0.099 mmol) 및 탄산나트륨 (0.24 mL, 0.49 mmol)을 첨가하였다. 혼합물을 질소로 10분 동안 퍼징한 다음, PdCl2(dppf)-CH2Cl2부가물 (12.15 mg, 0.015 mmol)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 오일 조에서 120℃로 3시간 동안 가열하였다. 반응 혼합물을 에틸 아세테이트로 희석하였다. 유기 용액을 물, 염수로 세척하고, 황산나트륨 상에서 건조시키고, 농축시켰다. 생성된 잔류물을 DCM 중 30% TFA (20 mL)로 15분 동안 처리하였다. 반응 혼합물을 농축시키고, 조 생성물을 HPLC에 의해 정제하여 (S)-4-(2-아미노-5-(피페리딘-4-일)피리딘-3-일)-2-플루오로-N-(2-히드록시-1-페닐에틸)벤즈아미드 (9 mg, 20.8%)를 TFA 염으로서 수득하였다. LCMS (m/z): 435 (MH+), 0.44분;
1H NMR (300 MHz, CD3OD) δ ppm 8.63 (br. s., 1 H) 7.90 (t, J=7.77 Hz, 1 H) 7.84 (s, 2 H) 7.47 -7.24 (m, 7 H), 5.27 -5.17 (m, 1 H) 3.93- 3.79 (m, 2 H) 3.52 (d, J=12.60 Hz, 2 H) 3.21- 3.05 (m, 2 H) 2.96 (t, J=12.31 Hz, 1 H) 2.15 (d, J=14.07 Hz, 2 H) 1.96 -1.78 (m, 2 H).
3-브로모-5-(1-(메틸술포닐)피페리딘-4-일)피라진-2-아민 및 메틸 4-(5-아미노-6-브로모피라진-2-일)피페리딘-1-카르복실레이트의 합성
반응식 11
Figure 112016034409922-pct00036
반응식 10에서의 단계 1 내지 3에 따라, 5-브로모피라진-2-아민 및 N-Boc-5,6-디히드로피리딘-1(2H)-카르복실레이트를 사용하여, tert-부틸 4-(5-아미노-6-브로모피라진-2-일)피페리딘-1-카르복실레이트를 수득하였다. LCMS (m/z): 301.0/303.0 (MH+-tBu), 0.875분.
단계 1. 3-브로모-5-(피페리딘-4-일)피라진-2-아민
DCM (4 mL) 중 tert-부틸 4-(5-아미노-6-브로모피라진-2-일)피페리딘-1-카르복실레이트 (70 mg, 0.196 mmol)의 용액에 TFA (1 mL, 12.98 mmol)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 45분 동안 교반하였다. 톨루엔을 첨가한 후, 휘발성 물질을 증발시켜 3-브로모-5-(피페리딘-4-일)피라진-2-아민을 수득하였다. 조 생성물을 직접 후속 반응에 사용하였다 (99%). LCMS (m/z): 257.0/259.0 (MH+), 0.329분.
단계 2. 3-브로모-5-(1-(메틸술포닐)피페리딘-4-일)피라진-2-아민
빙조에 들은 DCM (2 mL) 중 3-브로모-5-(피페리딘-4-일)피라진-2-아민 (50 mg, 0.194 mmol)에 DIEA (340 μl, 1.945 mmol) 및 메탄술포닐 클로라이드 (16.67 μl, 0.214 mmol)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 60분 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 DCM으로 추출하였다. 유기 층을 염수로 세척하고, 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 진공 하에 증발시켰다 (30mg, 46%). LCMS (m/z): 335.2/337.2 (MH+), 0.572분.
단계 3. 메틸 4-(5-아미노-6-브로모피라진-2-일)피페리딘-1-카르복실레이트
빙조에 들은 DCM (2 mL) 중 3-브로모-5-(피페리딘-4-일)피라진-2-아민 (60 mg, 0.233 mmol)의 용액에 DIEA (408 μl, 2.333 mmol) 및 메틸 클로로포르메이트 (18.07 μl, 0.233 mmol)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 빙조 하에 30분 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 DCM과 물 사이에 분배하였다. 유기 층을 분리하고, 염수로 세척하고, 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 진공 하에 증발시켰다. 조 메틸 4-(5-아미노-6-브로모피라진-2-일)피페리딘-1-카르복실레이트를 후속 단계에 사용하였다. LCMS (m/z): 315.0/317.0 (MH+), 0.647분.
실시예 3
4-(2-아미노-5-(테트라히드로-2H-피란-4-일)피리딘-3-일)-2-플루오로-N-메틸-N-(피리미딘-2-일메틸)벤즈아미드의 합성
반응식 12
Figure 112016034409922-pct00037
단계 1. 3-브로모-5-(테트라히드로-2H-피란-4-일)피리딘-2-아민
반응식 10에서의 단계 1 내지 3에 따라, 5-브로모피리딘-2-아민을 사용하여, 3-브로모-5-(테트라히드로-2H-피란-4-일)피리딘-2-아민을 수득하였다. LCMS (m/z): 257/259 (MH+), 0.38분.
단계 2. 5-(테트라히드로-2H-피란-4-일)-3-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-디옥사보롤란-2-일)피리딘-2-아민
반응식 10에서의 단계 4에 따라, 3-브로모-5-(테트라히드로-2H-피란-4-일)피리딘-2-아민을 사용하여, 5-(테트라히드로-2H-피란-4-일)-3-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-디옥사보롤란-2-일)피리딘-2-아민을 수득하였다. LCMS (m/z): 233 (MH+), 0.36분.
단계 3. 4-브로모-2-플루오로-N-(피리미딘-2-일메틸)벤즈아미드
플라스크를 DMF (3 mL) 중 4-브로모-2-플루오로벤조산 (180 mg, 0.821 mmol), 피리미딘-2-일메탄아민 (89.6 mg, 0.821 mmol), DIEA (0.358 mL, 2.05 mmol)로 채우고, 생성된 용액에 PyBOP (513 mg, 0.915 mmol)를 첨가하고, 생성된 혼합물을 실온에서 밤새 교반한 다음, 감압 하에 농축시키고, 잔류물을 EtOAc (20 mL)로 희석하고, 물 (3 x 10 mL), 염수 (10 mL)로 세척하고, 건조 (Na2SO4)시키고, 농축시키고, 잔류물을 실리카 겔 상에서 플래쉬 크로마토그래피에 의해 구배 EtOAc/헵탄 (0-100%)으로 용리시키면서 정제하고, 4-브로모-2-플루오로-N-(피리미딘-2-일메틸)벤즈아미드 (74.5 mg, 29.3%)를 담색 고체로서 수득하였다. LCMS (m/z): 310.0/312.0 (MH+), 0.64분.
단계 4. 4-브로모-2-플루오로-N-메틸-N-(피리미딘-2-일메틸)벤즈아미드
플라스크를 DMF (2 mL) 중 4-브로모-2-플루오로-N-(피리미딘-2-일메틸)벤즈아미드 (74.5 mg, 0.24 mmol), NaH (미네랄 오일 중 60% 분산액, 11.5 mg, 0.288 mmol)로 채우고, 슬러리에 아이오도메탄 (20 μl, 0.312mmol)을 첨가하고, 생성된 혼합물을 실온에서 10분 동안 교반한 다음, 물 (20 μl)에 의해 켄칭하고, 농축시키고, 조 잔류물을 EtOAc 중에 용해시키고, 물 및 염수로 세척하고, 건조 (Na2SO4)시키고, 농축시키고, 4-브로모-2-플루오로-N-메틸-N-(피리미딘-2-일메틸)벤즈아미드를 오일 (55.3mg, 71%)로서 수득하였다. LCMS (m/z): 324.1/326.1 (MH+), 0.66분.
단계 5. 4-(2-아미노-5-(테트라히드로-2H-피란-4-일)피리딘-3-일)-2-플루오로-N-메틸-N-(피리미딘-2-일메틸)벤즈아미드
마이크로웨이브 반응기 바이알을 DME (1.5 mL) 중 5-(테트라히드로-2H-피란-4-일)-3-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-디옥사보롤란-2-일)피리딘-2-아민 (39.4 mg, 0.13 mmol), 4-브로모-2-플루오로-N-메틸-N-(피리미딘-2-일메틸)벤즈아미드 (28 mg, 0.086 mmol), 수성 Na2CO3 (2 M, 0.26 mL)으로 채우고, 혼합물을 아르곤으로 퍼징하고, 이어서 테트라키스(트리페닐포스핀) 팔라듐 (10 mg, 8.6 mmol)을 첨가하고, 최종 퍼징한 다음, 밀봉하고, 마이크로웨이브 합성기에서 115℃에서 15분 동안 가열하였다. DME 층을 수집하고, 농축시키고, 잔류물을 정제용 HPLC 정제로 처리하고, 최종 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 동결시키고, 4-(2-아미노-5-(테트라히드로-2H-피란-4-일)피리딘-3-일)-2-플루오로-N-메틸-N-(피리미딘-2-일메틸)벤즈아미드의 TFA 염을 백색 분말로서 수득하였다. LCMS (m/z): 422.2 (MH+), 0.49분;
1H NMR (400 MHz, CD3OD) δ 8.81 (d, J = 4.9 Hz, 1H), 8.77 (d, J = 4.9 Hz, 1H), 7.95 (d, J = 2.2 Hz, 1H), 7.88 (d, J = 2.2 Hz, 1H), 7.80 (dd, J = 2.2, 0.6 Hz, 1H), 7.76 (dd, J = 2.2, 0.6 Hz, 1H), 7.62 - 7.70 (m, 1H), 7.51 - 7.58 (m, 1H), 7.45 (s, 1H), 7.38 - 7.43 (m, 1H), 7.35 (dd, J = 10.0, 1.5 Hz, 1H), 7.28 (dd, J = 7.8, 1.6 Hz, 1H), 4.99 (s, 1H), 4.74 (s, 1H), 3.98 - 4.10 (m, 2H), 3.54 (tdd, J = 11.5, 8.8, 2.7 Hz, 2H), 3.15 - 3.24 (m, 3H), 2.78 - 2.93 (m, 1H), 1.65 - 1.89 (m, 4H).
4-(6-아미노-5-브로모피리딘-3-일)테트라히드로-2H-티오피란 1,1-디옥시드 및 4-(6-아미노-5-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-디옥사보롤란-2-일)피리딘-3-일)테트라히드로-2H-티오피란 1,1-디옥시드의 합성
반응식 13
Figure 112016034409922-pct00038
단계 1. 5-(3,6-디히드로-2H-티오피란-4-일)피리딘-2-아민
DME (6mL) 중 5-브로모피리딘-2-아민 (344 mg, 1.99 mmol)의 용액에 2-(3,6-디히드로-2H-티오피란-4-일)-4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-디옥사보롤란 (300 mg, 1.33 mmol), 및 탄산나트륨 (1.99 mL, 3.98 mmol)을 첨가하였다. 혼합물을 질소로 5분 동안 퍼징하고, 이어서 PdCl2(dppf)-CH2Cl2 (108 mg, 0.13 mmol)를 첨가하였다. 생성된 혼합물을 오일 조에서 115℃로 5시간 동안 가열하였다. 반응 혼합물을 에틸 아세테이트로 희석하고, 물, 염수로 세척하고, 건조시키고, 농축시켰다. 잔류물을 실리카 겔 상에서 플래쉬 칼럼 크로마토그래피 (이스코)에 의해 헵탄 중 0-90% 에틸 아세테이트로 용리시키면서 정제하였다. 분획을 합하고, 농축시켜 5-(3,6-디히드로-2H-티오피란-4-일)피리딘-2-아민 (120 mg, 47%)을 갈색 고체로서 수득하였다. LCMS (m/z): 193 (MH+), 0.44분.
단계 2. 5-(테트라히드로-2H-티오피란-4-일)피리딘-2-아민
메탄올 (16 mL) 중 5-(3,6-디히드로-2H-티오피란-4-일)피리딘-2-아민 (260 mg, 1.35 mmol), Pd/C (36 mg, 0.33 mmol)의 현탁액을 주위 온도에서 수소 하에 16시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 DCM (80 mL)으로 희석하고, 셀라이트를 통해 여과하였다. 여과물을 농축시켜 5-(테트라히드로-2H-티오피란-4-일)피리딘-2-아민 (240 mg, 91% 수율)을 황색 고체로서 수득하였다. LCMS (m/z): 195 (MH+), 0.46분.
단계 3. 4-(6-아미노피리딘-3-일)테트라히드로-2H-티오피란 1,1-디옥시드
DCM (15 mL) 중 5-(테트라히드로-2H-티오피란-4-일)피리딘-2-아민 (290 mg, 1.49 mmol)의 빙냉 용액에 3-클로로벤조퍼옥시산 (592 mg, 3.43 mmol)을 첨가하였다. 생성된 용액을 주위 온도에서 4시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 에틸 아세테이트로 희석하였다. 생성된 용액을 물, 포화 수성 중탄산나트륨으로 세척하고, 황산나트륨 상에서 건조시키고, 농축시켰다. 잔류물을 실리카 겔 상에서 플래쉬 칼럼 크로마토그래피 (이스코)에 의해 헵탄 중 0-100% 에틸 아세테이트로 용리시키면서 정제하여 4-(6-아미노피리딘-3-일)테트라히드로-2H-티오피란 1,1-디옥시드 (140 mg, 41.4%)를 백색 고체로서 수득하였다. LCMS (m/z): 227 (MH+), 0.25분.
단계 4. 4-(6-아미노-5-브로모피리딘-3-일)테트라히드로-2H-티오피란 1,1-디옥시드
DCM (15 mL) 중 4-(6-아미노피리딘-3-일)테트라히드로-2H-티오피란 1,1-디옥시드 (140 mg, 0.62 mmol)의 빙냉 용액에 NBS (110 mg, 0.62 mmol)를 2 부분으로 첨가하였다. 반응 혼합물을 0℃에서 20분 동안 교반하였다. 반응 용액을 에틸 아세테이트로 희석하고, 물, 포화 수성 중탄산나트륨 용액, 염수로 세척하고, 황산나트륨 상에서 건조시키고, 농축시켜 4-(6-아미노-5-브로모피리딘-3-일)테트라히드로-2H-티오피란 1,1-디옥시드 (190 mg, 0.62 mmol)를 수득하였다. LCMS (m/z): 305/307 (MH+), 0.33분.
단계 5. 4-(6-아미노-5-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-디옥사보롤란-2-일)피리딘-3-일)테트라히드로-2H-티오피란 1,1-디옥시드
1,4-디옥산 (7 mL) 중 4-(6-아미노-5-브로모피리딘-3-일)테트라히드로-2H-티오피란 1,1-디옥시드 (190 mg, 0.62 mmol)의 현탁액에 비스(피나콜레이토)디보론 (474 mg, 1.86 mmol) 및 아세트산칼륨 (305 mg, 3.11 mmol)을 첨가하고, 이어서 PdCl2(dppf)-CH2Cl2 (61.0 mg, 0.075 mmol)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 오일 조에서 100℃로 16시간 동안 가열하였다. 반응 혼합물을 에틸 아세테이트로 희석하고, 중성 알루미나 (5 g)를 통해 여과하였다. 여과물을 셀라이트를 통해 다시 재여과하였다. 여과물을 농축시키고, 잔류물을 헵탄으로 연화처리하고, 여과하여 4-(6-아미노-5-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-디옥사보롤란-2-일)피리딘-3-일)테트라히드로-2H-티오피란 1,1-디옥시드 (140 mg, 64% 수율)를 수득하였다. LCMS (m/z): 271 (MH+), 0.15분.
메틸 3-(6-아미노-5-브로모피리딘-3-일)피롤리딘-1-카르복실레이트의 합성
반응식 14
Figure 112016034409922-pct00039
단계 1. tert-부틸 3-(((트리플루오로메틸)술포닐)옥시)-2,5-디히드로-1H-피롤-1-카르복실레이트
N2 하에 오븐 건조된 플라스크에 tert-부틸 3-옥소피롤리딘-1-카르복실레이트 (2 g, 10.8 mmol) 및 THF (16 mL)를 첨가하였다. 용액을 아세톤 빙조 (-78℃) 중에 냉각시켰다. 여기에 리튬 비스(트리메틸실릴)아미드 (12.96 mL, 12.96 mmol) (THF 중 1 M 용액)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 -78℃에서 15분 동안 교반한 다음, THF (16 mL) 중 1,1,1-트리플루오로-N-페닐-N-((트리플루오로메틸)술포닐) 메탄술폰아미드 (4.05 g, 11.34 mmol)의 용액을 적가하였다. 반응 혼합물을 30분 동안 교반한 다음, 0℃로 가온하고, 1.5시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 포화 중탄산나트륨 용액으로 켄칭한 다음, 에틸 아세테이트로 추출하였다. 합한 추출물을 염수로 세척하고, 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 증발시켰다. 조 생성물을 이스코 칼럼 (0-30% EtOAc/헵탄)에 의해 정제하여 tert-부틸 3-(((트리플루오로메틸)술포닐)옥시)-2,5-디히드로-1H-피롤-1-카르복실레이트 (1.9 g, 55.5%)를 수득하였다.
단계 2. tert-부틸 3-(6-아미노피리딘-3-일)-2,5-디히드로-1H-피롤-1-카르복실레이트
THF (10 mL) 중 tert-부틸 3-(((트리플루오로메틸)술포닐)옥시)-2,5-디히드로-1H-피롤-1-카르복실레이트 (400 mg, 0.882 mmol)의 용액을 N2로 5분 동안 퍼징한 다음, 탄산칼륨 (610 mg, 4.41 mmol), 5-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-디옥사보롤란-2-일)피리딘-2-아민 (233 mg, 1.059 mmol), Pd(PPh3)4 (10.20 mg, 8.82 μmol) 및 물 (0.1 mL)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 가열하고, 70℃에서 밤새 교반하였다. 반응 혼합물을 포화 중탄산나트륨 용액에 붓고, 에틸 에테르로 추출하였다. 유기 층을 분리하고, 염수로 세척하고, 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 증발시켰다. 조 생성물을 플래쉬 크로마토그래피 (0-10%MeOH / DCM)에 의해 정제하여 목적 생성물 (180 mg, 54.6%)을 수득하였다. LCMS (m/z): 262.2 (MH+), 0.598분.
단계 3. tert-부틸 3-(6-아미노피리딘-3-일)피롤리딘-1-카르복실레이트
N2 분위기 하에 MeOH (10 mL) 중 tert-부틸 3-(6-아미노피리딘-3-일)-2,5-디히드로-1H-피롤-1-카르복실레이트 (180 mg, 0.482 mmol)에 Pd-C (103 mg, 0.096 mmol)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 H2 풍선 하에 실온에서 교반하였다. 2시간 후, 반응 혼합물을 셀라이트 패드를 통해 여과하고, 메탄올로 세척하고, 증발시켜 목적 생성물 (150 mg, 71%)을 수득하였으며, 이를 후속 단계에 정제 없이 진행하였다. LCMS (m/z): 264.2 (MH+), 0.565분.
단계 4. tert-부틸 3-(6-아미노-5-브로모피리딘-3-일)피롤리딘-1-카르복실레이트
빙조에 들은 아세토니트릴 (4 mL) 중 tert-부틸 3-(6-아미노피리딘-3-일)피롤리딘-1-카르복실레이트 (60 mg, 0.228 mmol)에 NBS (36.5 mg, 0.205 mmol)를 첨가하고, 교반하였다. 30분 후 LCMS는 출발 물질 및 목적 생성물의 ~1:1 혼합물을 나타내었다. 여기에 NBS 12mg (0.3 당량)을 첨가하고, 30분 교반하였다. LCMS는 완전한 반응을 나타내었다. 반응 혼합물에 수성 포화 NaHCO3을 첨가하고, 10분 동안 교반하고, 에틸 아세테이트로 추출하였다. 합한 추출물을 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 증발시켰다. 조 생성물 (65 mg, 83%)을 후속 단계에 정제 없이 사용하였다. LCMS (m/z): 342.1/344.1 (MH+), 0.624분.
단계 5. 3-브로모-5-(피롤리딘-3-일)피리딘-2-아민
DCM (2.4 mL) 중 tert-부틸 3-(6-아미노-5-브로모피리딘-3-일)피롤리딘-1-카르복실레이트 (65 mg, 0.171 mmol)에 TFA (0.6 mL, 7.79 mmol)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 45분 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 톨루엔으로의 희석 후 진공 하에 증발시켰다. 조 생성물을 후속 단계에 정제 없이 사용하였다. 조 수율은 정량적이었다. LCMS (m/z): 242.1/244.1 (MH+), 0.214분.
단계 6. 메틸 3-(6-아미노-5-브로모피리딘-3-일)피롤리딘-1-카르복실레이트
빙조에 들은 DCM 중 3-브로모-5-(피롤리딘-3-일)피리딘-2-아민 (20 mg, 0.083 mmol)에 DIEA (43.3 μl, 0.248 mmol) 및 메틸 클로로포르메이트 (6.40 μl, 0.083 mmol)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 빙조 중에서 30분 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 DCM과 물 사이에 분배하였다. DCM 층을 분리하고, 염수로 세척하고, 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 증발시켰다. 조 생성물을 후속 단계에 정제 없이 사용하였다. LCMS (m/z): 300.0, 302.0 (MH+), 0.421분.
단계 7. 3-브로모-5-(1-(메틸술포닐)피롤리딘-3-일)피리딘-2-아민
빙조에 들은 DCM 중 3-브로모-5-(피롤리딘-3-일)피리딘-2-아민 (20 mg, 0.083 mmol)에 DIEA (57.7 μl, 0.330 mmol) 및 메탄술포닐 클로라이드 (7.08 μl, 0.091 mmol)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 빙조 중에 30분 교반하였다. 반응 혼합물을 DCM과 물 사이에 분배하였다. DCM 층을 분리하고, 염수로 세척하고, 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 증발시켰다. 조 생성물을 후속 단계에 정제 없이 사용하였다. LCMS (m/z): 320.0/322.0 (MH+), 0.363분.
실시예 4, 5, 및 6
4-(2-아미노-5-(1,1-디옥시도테트라히드로티오펜-3-일)피리딘-3-일)-N-벤질-2-플루오로벤즈아미드, (S)-4-(2-아미노-5-(1,1-디옥시도테트라히드로티오펜-3-일)피리딘-3-일)-N-벤질-2-플루오로벤즈아미드, 및 (R)-4-(2-아미노-5-(1,1-디옥시도테트라히드로티오펜-3-일)피리딘-3-일)-N-벤질-2-플루오로벤즈아미드의 합성
반응식 15
Figure 112016034409922-pct00040
단계 1. 4,5-디히드로티오펜-3-일 트리플루오로메탄술포네이트
-75 내지 -65℃의 새로이 제조한 LDA (40 mL THF 중 10.5 mmol)에 디히드로티오펜-3-(2H)-온/THF 용액 (1.02 g/2 mL THF, 10 mmol)을 3분에 걸쳐 적가한 다음, 생성된 반응 혼합물을 -75℃에서 3시간 동안 교반하고, 이어서 N-(5-클로로피리딘-2-일)-1,1,1-트리플루오로-N-(트리플루오로메틸술포닐)메탄술폰아미드/THF (4.12 g, 5 mL THF 중 10.5 mmol)를 10분에 걸쳐 첨가한 다음, 반응 혼합물을 -75℃에서 적어도 1시간 동안 교반한 다음, 온도를 실온으로 밤새 서서히 가온하였다. 반응 혼합물을 농축시키고, 잔류물을 Et2O/H2O (100 mL/50 mL) 사이에 분배하고; 에테르 층을 순차적으로 물 (2 x 50 mL), 3 M 아세트산나트륨 pH 4.8 완충제 (2 x 50 mL), 3M NaOH (2 x 50 mL)로 세척하고, 황산마그네슘 상에서 건조시키고, 농축시키고, 갈색 오일을 조 생성물 (2.05 g)로서 수득하였으며, 이를 실리카 겔 상에서 플래쉬 크로마토그래피에 의해 구배 EtOAc/헵탄 (0-15%)으로 용리시키면서 정제하고, 목적 생성물 (0.9 g, 38.5% 수율)을 무색 오일로서 수득하였다.
단계 2. 5-(4,5-디히드로티오펜-3-일)피리딘-2-아민
바이알에 모든 시약: 4,5-디히드로티오펜-3-일 트리플루오로메탄술포네이트 (900 mg, 3.84 mmol), 5-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-디옥사보롤란-2-일)피리딘-2-아민 (1.69 g, 7.69 mmol), K3PO4 (2.45 g, 11.5 mmol), 및 PdCl2(dppf)-CH2Cl2 부가물 (314 mg, 0.384 mmol) 및 DME (16 mL)를 채우고, 혼합물을 아르곤으로 퍼징한 다음, 밀봉하고, 외부 오일 조 중에 90℃에서 밤새 가열하였다. 반응 혼합물을 실온으로 냉각시키고, 반응 혼합물 중 침전물을 여과에 의해 제거하고, 여과물을 감압 하에 농축시키고, 흑색 잔류물을 조 생성물로서 수득하였다. 조 생성물을 EtOAc (30 mL) 중에 용해시키고, 물 (20 mL)로 세척하고, 2개의 층 사이의 슬러그를 여과에 의해 제거하였다. EtOAc 층을 수집하고, 1N HCl (2 x 20 mL)으로 스트리핑하고, 수성 층을 합하고, EtOAc (20 mL)로 스크러빙하고, 수성 NaOH (10 mL 물 중 3 g)로 염기성화시키고, EtOAc (2 x 30 mL)로 추출하고, 수득된 EtOAc 추출물을 합하고, 염수 (30 mL)로 세척하고, 건조 (Na2SO4)시키고, 농축시키고, 목적 생성물을 담색 고체로서 수득하였다. LCMS (m/z): 179.0 (MH+), 0.41, 0.43분 (위치이성질체에 대해).
단계 3. 5-(테트라히드로티오펜-3-일)피리딘-2-아민
5-(4,5-디히드로티오펜-3-일)피리딘-2-아민 (0.78g, 4.38 mmol)을 에탄올 (30 mL) 중에 용해시키고, 여기에 Pd-C (데구사, 10%, 0.233 g)를 첨가하고, 혼합물을 H2 풍선 하에 밤새 교반하였다. 반응은 LCMS에 의해 완결되지 않았다. Pd-C 촉매를 셀라이트 패드를 통해 여과함으로써 제거하고, 여과물에 신규 Pd-C 촉매 (0.24 g)를 첨가하고, 혼합물을 H2 풍선 하에 동일한 조건 하에 추가로 6시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 셀라이트 패드를 통해 여과하고, 여과물을 감압 하에 농축시켜 5-(테트라히드로티오펜-3-일)피리딘-2-아민 (0.661 g, 84%)을 무색 오일로서 수득하였다. LCMS (m/z): 181.2 (MH+), 0.39분.
단계 4. 3-(6-아미노피리딘-3-일)테트라히드로티오펜 1,1-디옥시드
5-(테트라히드로티오펜-3-일)피리딘-2-아민 (0.33 g, 1.831 mmol)을 CH2Cl2 (15 mL) 중에 용해시키고, 여기에 mCPBA (70%, 0.903 g, 3.66 mmol)를 첨가하고, 혼합물을 실온에서 10분 동안 교반하고, 반응 혼합물을 감압 하에 농축시키고, 잔류물을 EtOAc/포화 NaHCO3 (30 mL/20 mL) 사이에 분배하고, EtOAc 층을 포화 Na2CO3 (20 mL), 염수 (20 mL)로 세척하고, 건조 (Na2SO4)시키고, 여과하고, 진공 하에 농축시켜 3-(6-아미노피리딘-3-일)테트라히드로티오펜 1,1-디옥시드를 담갈색 오일 (96 mg, 25%)로서 수득하였다. LCMS (m/z): 197.1 (MH+), 0.21분.
단계 5. 3-(6-아미노-5-브로모피리딘-3-일)테트라히드로티오펜 1,1-디옥시드
3-(6-아미노피리딘-3-일)테트라히드로티오펜 1,1-디옥시드 (96 mg, 0.452 mmol)를 아세토니트릴 (5 mL) 중에 용해시키고, 용액을 0℃로 냉각시키고, 여기에 NBS (80 mg, 0.452 mmol)를 첨가하고, 혼합물을 0℃에서 40분 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 감압 하에 농축시키고, 잔류물을 EtOAc/포화 NaHCO3 (30 mL/20 mL) 사이에 분배하고, EtOAc 층을 포화 Na2CO3 (20 mL), 염수 (20 mL)로 세척하고, 건조 (Na2SO4)시키고, 여과하고, 진공 하에 농축시켜 3-(6-아미노-5-브로모피리딘-3-일)테트라히드로티오펜 1,1-디옥시드를 담갈색 오일 (50 mg, 38% 수율)로서 수득하였다. LCMS (m/z): 293.0/291.0 (MH+), 0.29분.
단계 6. 4-(2-아미노-5-(1,1-디옥시도테트라히드로티오펜-3-일)피리딘-3-일)-N-벤질-2-플루오로벤즈아미드
마이크로웨이브 반응기를 3-(6-아미노-5-브로모피리딘-3-일)테트라히드로티오펜 1,1-디옥시드 (50 mg, 0.172 mmol), 4-(벤질카르바모일)-3-플루오로페닐보론산 (94 mg, 0.343 mmol), 2 M 수성 Na2CO3 (0.34 mL) 및 PdCl2(dppf)-DCM 부가물 (14 mg)로 채우고, 마이크로웨이브 바이알을 DME (3 mL)로 채우고, 혼합물을 아르곤으로 퍼징하고, 밀봉하고, 105℃에서 20분 동안 가열하였다. 반응 혼합물의 DME 층을 수집하고, 감압 하에 농축시키고, 잔류물을 EtOAc (5 mL) 중에 재용해시켰다. EtOAc 용액을 1N HCl (4 x 1 mL)로 스트리핑하고, 수성 층을 합하고, EtOAc (2 x 1 mL)로 스크러빙한 다음, 감압 하에 농축시키고, 잔류물을 EtOAc/포화 Na2CO3 (5 mL/1 mL) 사이에 분배하고, EtOAc 추출물을 포화 Na2CO3 (2 x 1 mL), 염수 (1 mL)로 세척하고, 건조 (Na2SO4)시키고, 농축시키고, 잔류물을 아세토니트릴/물 (6 mL/6 mL) 중에 재용해시키고, 동결시키고, 동결건조시켜 라세미 4-(2-아미노-5-(1,1-디옥시도테트라히드로티오펜-3-일)피리딘-3-일)-N-벤질-2-플루오로벤즈아미드를 담황색 분말로서 수득하였다. LCMS (m/z): 440.2 (MH+), 0.60분;
1H NMR (CD3OD) δ ppm 7.97 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 7.84 (t, J = 7.8 Hz, 1H), 7.50 (d, J = 2.3 Hz, 1H), 7.31 - 7.44 (m, 6H), 7.22 - 7.30 (m, 1H), 4.61 (s, 2H), 3.55 - 3.70 (m, 1H), 3.47 (dd, J = 13.3, 7.0 Hz, 1H), 3.33 - 3.39 (m, 1H), 3.08 - 3.25 (m, 2H), 2.53 (ddd, J = 13.1, 7.4, 5.7 Hz, 1H), 2.18 - 2.40 (m, 1H).
라세미 생성물을 키랄 SFC (키랄팩(ChiralPak) 5mic OJ 칼럼, 4.6x100 (mm), 5mL/분, MeOH+0.1% DEA= 50%)에 의해 추가로 분해하여 (S)-4-(2-아미노-5-(1,1-디옥시도테트라히드로티오펜-3-일)피리딘-3-일)-N-벤질-2-플루오로벤즈아미드 (Rt = 1.7분) 및 (R)-4-(2-아미노-5-(1,1-디옥시도테트라히드로티오펜-3-일)피리딘-3-일)-N-벤질-2-플루오로벤즈아미드 (Rt = 2.22분)를 수득하였다. 절대 입체화학을 임의적으로 지정하였다.
실시예 7
4-(2-아미노-5-((3R,5S)-5-(히드록시메틸)피롤리딘-3-일)피리딘-3-일)-N-((S)-1-(3-클로로페닐)-2-히드록시에틸)-2-플루오로벤즈아미드의 합성
반응식 16
Figure 112016034409922-pct00041
단계 1. (S)-1-tert-부틸 2-메틸 4-옥소피롤리딘-1,2-디카르복실레이트
DCM (100 mL) 중 (2S,4R)-1-tert-부틸 2-메틸 4-히드록시피롤리딘-1,2-디카르복실레이트 (10 g, 40.8 mmol)의 용액을 0℃로 냉각시킨 다음, 데스-마르틴 퍼아이오디난 (17.29 g, 40.8 mmol)을 20분에 걸쳐 조금씩 처리하였다. 반응물을 0℃에서 1시간 동안 유지한 다음, 냉각 조를 제거하였다. 실온에서 추가로 3시간 후, 반응물을 1:1 포화 수성 Na2SO3:포화 수성 NaHCO3 300 mL로 처리하였다. 반응물을 실온에서 밤새 격렬히 교반한 다음, 층을 분리하였다. 유기부를 물 및 염수로 세척한 다음, 황산마그네슘 상에서 건조시키고, 농축시켰다. 생성된 혼합물을 DCM (20 mL) 중에 슬러리화한 다음, 셀라이트 상에서 여과하였다. 유기부를 농축시켰다. 조 오일을 미세한 고체로부터의 직접 여과에 의해 추가로 정제하여 (S)-1-tert-부틸 2-메틸 4-옥소피롤리딘-1,2-디카르복실레이트 (8.53 g, 87% 수율)를 수득하였다. LCMS (m/z): 244.3 (MH+), 0.42분.
단계 2. 1-tert-부틸 2-메틸 4-(((트리플루오로메틸)술포닐)옥시)-1H-피롤-1,2(2H,5H)-디카르복실레이트
THF (30 mL) 중 (S)-1-tert-부틸 2-메틸 4-옥소피롤리딘-1,2-디카르복실레이트 (2.9 g, 11.92 mmol)의 용액을 -78℃로 냉각시킨 다음, THF 중 1.0 M LiHMDS (14.31 mL, 14.31 mmol)로 처리하였다. 반응물을 -78℃에서 1시간 동안 유지한 다음, THF (15 mL) 중 N-(5-클로로피리딘-2-일)-1,1,1-트리플루오로-N-((트리플루오로메틸)술포닐)메탄술폰아미드 (5.62 g, 14.31 mmol)의 용액으로 처리하였다. 반응물을 -78℃에서 1시간 동안 유지한 다음, -30℃ 냉장고에 밤새 두었다. 완결 시, 반응물을 물로 켄칭하고, 에테르로 희석하였다. 유기부를 1N 수용액, NaOH (40 mL)로 세척한 다음, 황산마그네슘으로 건조시키고, 농축시켰다. 잔류물을 클로로포름 (40 mL) 중에 용해시키고, 0℃로 30분 동안 냉각시켰다. 생성된 슬러리를 ~8 mL 총 부피로 농축시킨 다음, 점성 물질을 여과하고, 농축시켜 (S)-1-tert-부틸 2-메틸 4-(((트리플루오로메틸)술포닐)옥시)-1H-피롤-1,2(2H,5H)-디카르복실레이트 (4.4 g, 98% 수율)를 수득하였다. LCMS (m/z): 376.4 (MH+), 0.64분.
단계 3. (S)-1-tert-부틸 2-메틸 4-(6-아미노피리딘-3-일)-1H-피롤-1,2(2H,5H)-디카르복실레이트
THF (10 mL) 및 물 (2 mL) 중 (S)-1-tert-부틸 2-메틸 4-(((트리플루오로메틸)술포닐)옥시)-1H-피롤-1,2(2H,5H)-디카르복실레이트 (1.55 g, 4.13 mmol), 5-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-디옥사보롤란-2-일)피리딘-2-아민 (1.00 g, 4.54 mmol), Pd(PPh3)4 (0.239 g, 0.21 mmol) 및 Cs2CO3 (3.36 g, 10.32 mmol)의 혼합물을 100℃로 10분 동안 마이크로웨이브 가열하였다. 이어서, 반응물을 에틸 아세테이트 (50 mL) 및 물 (25 mL)로 희석하였다. 층을 분리하고, 유기부를 물 (25 mL) 및 염수 (25 mL)로 세척하고, 황산마그네슘 상에서 건조시키고, 농축시킨 다음, 플래쉬 크로마토그래피 [0-8% 메탄올/DCM 용리액]에 의해 정제하여 (S)-1-tert-부틸 2-메틸 4-(6-아미노피리딘-3-일)-1H-피롤-1,2(2H,5H)-디카르복실레이트 (0.955g, 72% 수율)를 수득하였다. LCMS (m/z): 320.4 (MH+), 0.50분.
단계 4. (2S,4R)-1-tert-부틸 2-메틸 4-(6-아미노피리딘-3-일)피롤리딘-1,2-디카르복실레이트
메탄올 (30 mL) 중 (S)-1-tert-부틸 2-메틸 4-(6-아미노피리딘-3-일)-1H-피롤-1,2(2H,5H)-디카르복실레이트 (0.955 g, 2.99 mmol)의 탈기된 용액을 10% Pd/C (0.183 g, 0.172 mmol)로 처리한 다음, 수소의 분위기 하에 3시간 동안 유지하였다. 완결 시, 이어서 반응물을 셀라이트의 패드 상에서 여과하고, 농축시켜 (2S,4R)-1-tert-부틸 2-메틸 4-(6-아미노피리딘-3-일)피롤리딘-1,2-디카르복실레이트 (0.95 g, 99% 수율)를 수득하였다. LCMS (m/z): 322.5 (MH+), 0.52분.
단계 5. (2S,4R)-tert-부틸 4-(6-아미노피리딘-3-일)-2-(히드록시메틸)피롤리딘-1-카르복실레이트
2-메틸 THF (18 mL) 중 (2S,4R)-1-tert-부틸 2-메틸 4-(6-아미노피리딘-3-일)피롤리딘-1,2-디카르복실레이트 (250 mg, 0.778 mmol)의 용액에 LiAlH4 (59 mg, 1.56 mmol)를 첨가하였다. 15분 후, 반응물을 물 (60 μL), 1 N NaOH 수용액 (60 μL) 및 물 (60 μL)의 순차적 첨가에 의해 켄칭하였다. 혼합물을 5분 동안 격렬히 교반한 다음, 셀라이트 상에서 여과하고, 2-메틸 THF로 헹구었다. 유기부를 농축시켜 (2S,4R)-tert-부틸 4-(6-아미노피리딘-3-일)-2-(히드록시메틸)피롤리딘-1-카르복실레이트 (230 mg, 100% 수율)를 수득하였다. LCMS (m/z): 294.1 (MH+), 0.49분.
단계 6. (2S,4R)-tert-부틸 4-(6-아미노-5-브로모피리딘-3-일)-2-(히드록시메틸)피롤리딘-1-카르복실레이트
MeCN (10 mL) 중 (2S,4R)-tert-부틸 4-(6-아미노피리딘-3-일)-2-(히드록시메틸)피롤리딘-1-카르복실레이트 (230 mg, 0.784 mmol)의 용액을 NBS (147 mg, 0.823 mmol)로 처리하였다. 10분 후, 반응이 완결되었다. 반응물을 10 mL 1:1 포화 수성 NaHCO3:포화 수성 Na2S2O3으로 처리하고, 혼합물을 10분 동안 격렬히 교반하였다. 혼합물을 에틸 아세테이트 (30 mL)로 희석하고, 층을 분리하였다. 유기부를 염수로 세척하고, 황산마그네슘 상에서 건조시키고, 농축시켜 (2S,4R)-tert-부틸 4-(6-아미노-5-브로모피리딘-3-일)-2-(히드록시메틸)피롤리딘-1-카르복실레이트 (290 mg, 100% 수율)를 수득하였다. LCMS (m/z): 372.1/374.0 (MH+), 0.55분.
단계 7. 4-(2-아미노-5-((3R,5S)-5-(히드록시메틸)피롤리딘-3-일)피리딘-3-일)-N-((S)-1-(3-클로로페닐)-2-히드록시에틸)-2-플루오로벤즈아미드
반응식 10에서의 단계 5에 따라, (2S, 4R)-tert-부틸 4-(6-아미노-5-브로모피리딘-3-일)-2-(히드록시메틸)피롤리딘-1-카르복실레이트 및 (S)-(4-((1-(3-클로로페닐)-2-히드록시에틸)카르바모일)-3-플루오로페닐)보론산을 사용하여, (2S,4R)-tert-부틸 4-(6-아미노-5-(4-(((S)-1-(3-클로로페닐)-2-히드록시에틸)카르바모일)-3-플루오로페닐)피리딘-3-일)-2-(히드록시메틸)피롤리딘-1-카르복실레이트 (30 mg, 35% 수율)를 TFA 염으로서 수득하였다. LCMS (m/z): 585.3, 587.3 (MH+), 0.74분. 이어서, (2S,4R)-tert-부틸 4-(6-아미노-5-(4-(((S)-1-(3-클로로페닐)-2-히드록시에틸)카르바모일)-3-플루오로페닐)피리딘-3-일)-2-(히드록시메틸)피롤리딘-1-카르복실레이트-TFA의 용액을 DCM (2 mL) 중에 용해시키고, TFA (2.0 mL)로 처리하였다. 30분 후, 반응물을 농축시킨 다음, 역상 정제용 HPLC에 의해 정제하여 4-(2-아미노-5-((3R,5S)-5-(히드록시메틸)피롤리딘-3-일)피리딘-3-일)-N-((S)-1-(3-클로로페닐)-2-히드록시에틸)-2-플루오로벤즈아미드 (15.0 mg, 54% 수율)를 비스-TFA 염으로서 수득하였다. LCMS (m/z): 485.2, 487.2 (MH+), 0.51분;
1H NMR (400 MHz, CD3OD) δ ppm 8.59 (dd, J = 4.50, 7.24 Hz, 1H), 7.87 - 7.77 (m, 4H), 7.39 - 7.31 (m, 3H), 7.29 - 7.24 (m, 2H), 7.24 -7.16 (m, 1H), 5.15 - 5.05 (m, 1H), 3.87 - 3.71 (m, 5H), 3.70 - 3.60 (m, 2H), 3.59 - 3.46 (m, 1H), 2.41 (td, J = 6.46, 12.91 Hz, 1H), 1.98 - 1.82 (m, 1H), 1.29 - 1.16 (m, 1H).
실시예 8
4-(2-아미노-5-((7R,8aS)-4-옥소헥사히드로-1H-피롤로[2,1-c][1,4]옥사진-7-일)피리딘-3-일)-N-((S)-1-(3-클로로페닐)-2-히드록시에틸)-2-플루오로벤즈아미드의 합성
반응식 17
Figure 112016034409922-pct00042
THF (2.5 mL) 중 4-(2-아미노-5-((3R,5S)-5-(히드록시메틸)피롤리딘-3-일)피리딘-3-일)-N-((S)-1-(3-클로로페닐)-2-히드록시에틸)-2-플루오로벤즈아미드 (45 mg, 0.063 mmol) (실시예 7 참조) 및 클로로아세트산 (7.2 mg, 0.076 mmol)의 용액을 HATU (36 mg, 0.095 mmol) 및 DIEA (55 μL, 0.316 mmol)로 처리하였다. 반응물을 실온에서 1시간 동안 유지하였다. 이어서, 반응 혼합물을 NaH (15.2 mg, 0.631 mmol)로 직접 처리하였다. 15분 후, 반응물을 물 (2 mL)로 켄칭하고, 반응 혼합물을 에틸 아세테이트 (10 mL)로 추출하였다. 유기부를 염수로 세척한 다음, Na2SO4 상에서 건조시키고, 농축시킨 다음, 역상 정제용 HPLC에 의해 정제하여 4-(2-아미노-5-((7R,8aS)-4-옥소헥사히드로-1H-피롤로[2,1-c][1,4]옥사진-7-일)피리딘-3-일)-N-((S)-1-(3-클로로페닐)-2-히드록시에틸)-2-플루오로벤즈아미드 (13.0 mg, 39% 수율)를 수득하였다. LCMS (m/z): 525.2, 527.2 (MH+), 0.59분;
1H NMR (400 MHz, CD3OD) δ ppm 8.61 (dd, J = 4.30, 7.04 Hz, 1H), 7.91 (d, J = 1.96 Hz, 1H), 7.84 - 7.76 (m, 2H), 7.40 - 7.31 (m, 3H), 7.30 - 7.24 (m, 2H), 7.24 - 7.16 (m, 1H), 5.16 - 5.05 (m, 1H), 4.18 - 4.08 (m, 2H), 3.99 - 3.85 (m, 2H), 3.85 - 3.70 (m, 3H), 3.53 - 3.42 (m, 2H), 3.39 - 3.29 (m, 1H), 2.34 - 2.19 (m, 1H), 1.67 (q, J = 11.48 Hz, 1H).
실시예 9
4-(2-아미노-5-((6R,7aS)-3-옥소헥사히드로피롤로[1,2-c]옥사졸-6-일)피리딘-3-일)-N-((S)-1-(3-클로로페닐)-2-히드록시에틸)-2-플루오로벤즈아미드의 합성
반응식 18
Figure 112016034409922-pct00043
아세토니트릴 (0.5 mL) 중 4-(2-아미노-5-((3R,5S)-5-(히드록시메틸)피롤리딘-3-일)피리딘-3-일)-N-((S)-1-(3-클로로페닐)-2-히드록시에틸)-2-플루오로벤즈아미드 (20 mg, 0.041 mmol) (실시예 7) 및 DIEA (72 μL, 0.412 mmol)의 용액을 카르보닐디이미다졸 (8.0 mg, 0.049 mmol)로 처리하였다. 1시간 후, 출발 물질을 완전히 소모하였다. 반응 혼합물을 1.0 N 수성 NaOH 용액 (1.0 mL)으로 켄칭하고, 혼합물을 5분 동안 격렬히 교반한 다음, DCM (10 mL)으로 희석하였다. 유기부를 염수 (2 mL)로 세척하고, Na2SO4 상에서 건조시키고, 농축시켰다. 조 물질을 역상 정제용 HPLC에 의해 정제하여 4-(2-아미노-5-((6R,7aS)-3-옥소헥사히드로피롤로[1,2-c]옥사졸-6-일)피리딘-3-일)-N-((S)-1-(3-클로로페닐)-2-히드록시에틸)-2-플루오로벤즈아미드 (2.0 mg, 7% 수율)를 수득하였다. LCMS (m/z): 511.3, 513.3 (MH+), 0.61분;
1H NMR (400 MHz, CD3OD) δ ppm 7.92 - 7.84 (m, 2H), 7.46 (s, 1H), 7.44 - 7.40 (m, 1H), 7.38 - 7.35 (m, 1H), 7.34 - 7.28 (m, 1H), 5.19 (t, J = 5.87 Hz, 1H), 4.61 - 4.56 (m, 1H), 4.34 (dd, J = 3.52, 9.00 Hz, 1H), 4.24 - 4.15 (m, 1H), 3.92 - 3.80 (m, 1H), 3.74 - 3.62 (m, 1H), 2.41 (td, J = 5.72, 11.64 Hz, 1H), 1.84 - 1.71 (m, 1H).
실시예 10
4-(2-아미노-5-((6R,7aS)-3-이미노헥사히드로피롤로[1,2-c]옥사졸-6-일)피리딘-3-일)-N-((S)-1-(3-클로로페닐)-2-히드록시에틸)-2-플루오로벤즈아미드의 합성
반응식 19
Figure 112016034409922-pct00044
에탄올 (0.75 mL) 중 4-(2-아미노-5-((3R,5S)-5-(히드록시메틸)피롤리딘-3-일)피리딘-3-일)-N-((S)-1-(3-클로로페닐)-2-히드록시에틸)-2-플루오로벤즈아미드 (12.5 mg, 0.026 mmol) (실시예 7) 및 탄산세슘 (33.6 mg, 0.103 mmol)의 실온 혼합물을 브로민화시아노겐 (6.2 μL, 0.031 mmol)으로 처리하였다. 1시간 후, 반응물을 물 (1.0 mL)로 희석하고, 에틸 아세테이트 (10 mL)로 추출하였다. 유기부를 염수 (2 mL)로 세척한 다음, Na2SO4 상에서 건조시키고, 농축시키고, 역상 정제용 HPLC에 의해 정제하여 4-(2-아미노-5-((6R,7aS)-3-이미노헥사히드로피롤로[1,2-c]옥사졸-6-일)피리딘-3-일)-N-((S)-1-(3-클로로페닐)-2-히드록시에틸)-2-플루오로벤즈아미드를 수득하였다. LCMS (m/z): 510.1, 512.1 (MH+), 0.52분.
1H NMR (400 MHz, CD3OD) δ ppm 8.63 - 8.54 (m, 1H), 7.92 - 7.85 (m, 2H), 7.80 (t, J = 7.83 Hz, 1H), 7.40 - 7.31 (m, 3H), 7.29 - 7.24 (m, 2H), 7.24 - 7.16 (m, 1H), 5.14 - 5.06 (m, 1H), 4.97 - 4.88 (m, 1H), 4.61 - 4.49 (m, 2H), 3.88 - 3.70 (m, 4H), 3.32 (s, 1H), 2.41- 2.31 (m, 1H), 2.02 -1.89 (m, 1H).
실시예 11
4-(2-아미노-5-((6R,7aS)-3-티옥소헥사히드로피롤로[1,2-c]옥사졸-6-일)피리딘-3-일)-N-((S)-1-(3-클로로페닐)-2-히드록시에틸)-2-플루오로벤즈아미드
반응식 20
Figure 112016034409922-pct00045
아세토니트릴 (0.75 mL) 및 DMF (0.5 mL) 중 (2S,4R)-tert-부틸 4-(6-아미노-5-(4-(((S)-1-(3-클로로페닐)-2-히드록시에틸)카르바모일)-3-플루오로페닐)피리딘-3-일)-2-(히드록시메틸)피롤리딘-1-카르복실레이트 (45 mg, 0.063 mmol) (실시예 7 참조)의 용액에 DIEA (42 μL, 0.240 mmol) 및 티오카르보닐 디이미다졸 (15.6 mg, 0.088 mmol)을 첨가하였다. 2시간 후, 반응물을 1 N 수용액, NaOH (1 mL)로 켄칭하고, 격렬히 교반하여 혼합된 티오카르바메이트 부산물의 분해를 수행하였다. 이어서, 반응물을 에틸 아세테이트 (10 mL)로 희석하고, 물 (5 mL) 및 염수 (5 mL)로 세척한 다음, 황산나트륨 상에서 건조시키고, 농축시켰다. 조 물질을 역상 정제용 HPLC에 의해 정제하여 4-(2-아미노-5-((6R,7aS)-3-티옥소헥사히드로피롤로[1,2-c]옥사졸-6-일)피리딘-3-일)-N-((S)-1-(3-클로로페닐)-2-히드록시에틸)-2-플루오로벤즈아미드 (3.2 mg, 11% 수율)를 수득하였다. LCMS (m/z): 527.3, 529.3 (MH+), 0.67분;
1H NMR (400 MHz, CD3OD) δ ppm 8.64 (dd, J = 3.91, 7.04 Hz, 1H), 7.85 (d, J = 1.96 Hz, 2H), 7.83 - 7.77 (m, 3H), 7.39 - 7.32 (m, 5H), 7.30 - 7.26 (m, 3H), 7.25 - 7.19 (m, 2H), 5.15 - 5.07 (m, 2H), 4.73 - 4.69 (m, 2H), 4.45 - 4.35 (m, 3H), 3.85 - 3.65 (m, 8H), 2.38 (td, J = 5.58, 11.54 Hz, 2H), 1.80 - 1.70 (m, 1H).
5-모르폴리노-3-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-디옥사보롤란-2-일)피리딘-2-아민의 합성
반응식 21
Figure 112016034409922-pct00046
단계 1. 에틸 (5-브로모피리딘-3-일)카르바메이트
5-브로모피리딘-3-아민 (20 g, 116 mmol)을 DCM (500 mL) 중에 용해시키고, 피리딘 (28.0 mL, 347 mmol)을 첨가하고, 이어서 에틸 클로로포르메이트 (11.44 mL, 119 mmol)를 적가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 1.5시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 DCM으로 희석하였다. 2개의 상을 분리하고, 유기 상을 10% CuSO4 용액 (2x), 포화 NaHCO3 용액 (1x), 염수 (1x)로 세척하고, 건조 (Na2SO4)시키고, 증발시켰다. 잔류물을 디에틸 에테르로 연화처리하고, 여과하고, 건조시켜 에틸 (5-브로모피리딘-3-일)카르바메이트 (21.58 g, 76%)를 백색 고체로서 수득하였다. LCMS (m/z): 247.0 (MH+), 0.58분;
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ ppm8.62 - 8.15 (m, 3 H) 7.00 (br. s., 1 H) 4.27 (q, J=7.0 Hz, 2 H) 1.34 (t, J=7.0 Hz, 3 H).
단계 2. 에틸 (5-브로모-2-니트로피리딘-3-일)카르바메이트
진한 H2SO4 (60 mL, 1126 mmol) 및 발연 HNO3 (40 mL, 895 mmol)의 혼합물에, 에틸 (5-브로모피리딘-3-일)카르바메이트 (21.5 g, 88 mmol)를 0℃에서 조금씩 첨가하였다. 0℃에서 5분 동안 교반한 후, 혼합물을 실온에서 밤새 교반하고, 빙수 상에 부었다. 석출물이 형성되었고, 이를 여과하고, 물로 완전히 세척하고, 건조시켰다. 에틸 (5-브로모-2-니트로피리딘-3-일)카르바메이트 (21.26 g, 84%)를 따라서 백색 고체로서 수득하였다. LCMS (m/z): 290.1 (MH+), 0.76분.
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ ppm 9.63 (br. s., 1 H) 9.33 (d, J=2.0 Hz, 1 H) 8.28 (d, J=2.0 Hz, 1 H) 4.32 (q, J=7.3 Hz, 3 H) 1.68 (br. s., 2 H) 1.38 (t, J=7.0 Hz, 4 H).
단계 3. 5-브로모-2-니트로피리딘-3-아민
에틸 (5-브로모피리딘-3-일)카르바메이트 (8 g, 27.6 mmol)를 EtOH (250 mL) 중에 용해시키고, 용액을 빙조를 사용하여 5℃로 냉각시켰다. 차가운 1M KOH (130 mL, 130 mmol)를 적가하고, 5℃ 미만으로 유지하였다. 반응 혼합물을 실온에서 밤새 교반하고, 감압 하에 농축시켰다. 석출물 형태로 농축 시, 이를 여과하고, 물로 세척하고, 건조시켜 5-브로모-2-니트로피리딘-3-아민 (5.02 g, 83%)을 수득하였다. LCMS (m/z): 220.1 (MH+), 0.46분;
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ ppm7.97 (d, J=1.6 Hz, 1 H) 7.50 (d, J=2.0 Hz, 1 H) 6.03 (br. s., 2 H).
단계 4. 5-모르폴리노-2-니트로피리딘-3-아민
5-브로모-2-니트로피리딘-3-아민 (2.32 g, 10.6 mmol)을 모르폴린 (5 mL, 57.4 mmol) 중에 현탁시키고, 용액을 140℃에서 1시간 동안 가열하였다. 반응 혼합물을 실온으로 냉각시키고, 고체 석출물을 물로 연화처리하고, 여과하였다. 수득된 고체를 물, EtOH로 세척하고, 건조시켜 5-모르폴리노-2-니트로피리딘-3-아민 (2.0 g, 8.92 mmol, 84%)을 담황색 분말로서 수득하였다. 이전 단계의 결과에 따라, 이 고체는 이전 단계로부터의 에톡시 유도체를 여전히 함유할 수 있고, 2종의 화합물을 실리카 겔 상에서 칼럼 크로마토그래피 (아날로직스, 2분 동안 헵탄 중 20% EtOAc, 15분까지 100% EtOAc, 이어서 20분까지 100% EtOAc)에 의해 분리할 수 있다. LCMS (m/z): 225.1(MH+), 0.43분;
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ ppm 10.54 (s, 1 H) 8.57 (d, J=2.7 Hz, 1 H) 7.85 (d, J=2.7 Hz, 1 H) 7.70 (d, J=2.3 Hz, 1 H) 6.32 (d, J=2.3 Hz, 1 H) 6.00 (br. s., 1 H) 3.93 - 3.83 (m, 7 H) 3.83 - 3.74 (m, 3 H) 3.63 - 3.55 (m, 3 H) 3.51 - 3.43 (m, 3 H) 3.41- 3.31 (m, 4 H).
단계 5. 4-(5-브로모-6-니트로피리딘-3-일)모르폴린
자기 교반 막대, 적하 깔때기 및 온도계가 장착된 3구 둥근 바닥 플라스크를 CuBr (629 mg, 4.4 mmol) 및 HBr (25 mL)로 채웠다. 용액을 -5℃ (얼음 염 조)로 냉각시켰다. 고체 5-모르폴리노-2-니트로피리딘-3-아민 (983 mg, 4.4 mmol)을 천천히 첨가하고, 이어서 H2O (25 mL) 중 NaNO2 (333 mg, 4.8 mmol)의 용액을 적하 깔때기를 통해 느리게 첨가하여 온도가 0℃ 초과로 상승하지 않도록 확실하게 하였다. 반응 혼합물을 -5℃에서 1시간 동안 교반하고, 실온으로 가온하고, 추가로 1.5시간 동안 교반하였다. 반응물은 LCMS에 의해 완결된 것으로 간주되었고, 혼합물을 0℃로 다시 냉각시키고, 6 N NaOH를 사용하여 pH 12로 켄칭하고, 물로 희석하고, EtOAc로 추출하였다. EtOAc를 물 (x2), 염수 (x1)로 세척하고, 건조시키고, 농축시켰다. 잔류물을 EtOH와 공비혼합하고, 고진공 하에 건조시켜 4-(5-브로모-6-니트로피리딘-3-일)모르폴린 (1.21 g, 4.20 mmol, 96% 수율)을 담황색 고체로서 수득하였다. LCMS (m/z): 288.2 (MH+), 0.65분.
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ ppm 8.08 - 7.99 (d, J=2.3 Hz, 1 H) 7.41 (d, J=2.3 Hz, 1 H) 3.98 - 3.81 (m, 4 H) 3.45 - 3.30 (m, 4 H).
단계 6. 3-브로모-5-모르폴리노피리딘-2-아민
4-(5-브로모-6-니트로피리딘-3-일)모르폴린 (95 mg, 0.33 mmol)을 EtOH (12 mL) 중에 용해시키고, 물 (3.0 mL)을 첨가하고, 이어서 SnCl2 (313 mg, 1.65 mmol)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 80℃로 2시간 동안 가열하고, 실온으로 냉각시키고, DCM으로 희석하였다. 2개의 상을 분리하고, 유기 상을 물로 세척하였다. 수상을 DCM으로 역추출하였다. pH를 6N NaOH를 사용하여 12로 조정하고, 혼합물을 DCM으로 추가로 추출하였다. 유기 추출물을 합하고, 건조 (Na2SO4)시키고, 감압 하에 증발시켜 목적 3-브로모-5-모르폴리노피리딘-2-아민 (71.5 mg, 84%)을 수득하였다. LCMS (m/z): 260.0 (MH+), 0.37분.
대안적 방법
둥근 바닥 플라스크에 들은 MeOH (150 mL) 중 4-(5-브로모-6-니트로피리딘-3-일)모르폴린 (2 g, 6.9 mmol)의 용액에 Zn 분진 (4.54 g, 69.4 mmol)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 0℃로 냉각시켰다. 고체 NH4Cl (3.71 g, 69.4 mmol)을 5분에 걸쳐 조금씩 첨가하였다. 불균질 반응 혼합물을 실온에서 2시간 동안 교반하고, 셀라이트의 플러그를 통해 여과하고, 메탄올 및 에탄올로 필터 케이크를 세척하였다. 여과물을 갈색빛 고체로 농축시켰으며, 이를 실리카 겔 상에서 플래쉬 칼럼 크로마토그래피 (이스코, 80 g 칼럼, 15분 내 0-70% EtOAc/헵탄 및 25분까지 70% EtOAc)에 의해 정제하여 3-브로모-5-모르폴리노피리딘-2-아민 (936 mg, 52.2%)을 약간 회백색 고체로서 수득하였다. LCMS (m/z): 258.2 (MH+), 0.35분;
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ ppm 7.75 (d, J=2.3 Hz, 1 H) 7.40 - 7.30 (m, 1 H) 4.66 (br. s., 2 H) 3.91- 3.74 (m, 4 H) 3.07 - 2.90 (m, 4 H).
단계 7. 5-모르폴리노-3-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-디옥사보롤란-2-일)피리딘-2-아민
3-브로모-5-모르폴리노피리딘-2-아민 (36 mg, 0.14 mmol), 비스(피나콜레이토)디보론 (70.8 mg, 0.28 mmol), 아세트산칼륨 (41.1 mg, 0.42 mmol) 및 트리시클로헥실포스핀 (5.9 mg, 0.021 mmol)을 압력 용기 중 1,4-디옥산 (1.5 mL) 중에 용해시켰다. 혼합물을 N2로 5분 동안 폭기하고, 팔라듐 디아세테이트 (3.1 mg, 0.014 mmol)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 110℃로 16시간 동안 가열하고, 실온으로 냉각시키고, 에틸 아세테이트로 희석하였다. 실리아본드(SyliaBond)DMT를 첨가하고, 혼합물을 1시간 동안 교반하고, 셀라이트 패드 상에서 여과하고, 농축시켜 목적 5-모르폴리노-3-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-디옥사보롤란-2-일)피리딘-2-아민을 함유하는 고체 21.3 mg을 수득하였다. 이 고체를 후속 단계에 추가 정제 없이 사용하였다. LCMS (m/z): 224.0 (MH+), 0.33분 (보론산에 대해).
3-브로모-5-((2R,4R)-2-메틸테트라히드로-2H-피란-4-일)피라진-2-아민 및 3-브로모-5-((2S,4S)-2-메틸테트라히드로-2H-피란-4-일)피라진-2-아민의 합성
반응식 22
Figure 112016034409922-pct00047
단계 1. 2-메틸-3,6-디히드로-2H-피란-4-일 트리플루오로메탄술포네이트
THF (8.76 mL) 중 2-메틸디히드로-2H-피란-4(3H)-온 (2g, 17.52 mmol)의 용액에 LiHMDS (18.40 mL, 18.40 mmol)를 -78℃에서 적가하였다. 반응 혼합물을 -78℃에서 1.5시간 동안 교반한 다음, THF (17 mL) 중 N-(5-클로로피리딘-2-일)-1,1,1-트리플루오로-N-((트리플루오로메틸)술포닐)메탄술폰아미드 (7.22 g, 18.40 mmol)를 -78℃에서 첨가하였다. 혼합물을 -78℃에서 1시간 동안 교반한 다음, 실온으로 가온되도록 하고, 밤새 교반하였다. 반응물을 TLC에 의해 모니터링하였다. 포화 NaHCO3으로 켄칭한 후, 반응 혼합물을 EtOAc로 3회 추출하였다. 합한 유기 층을 물, 염수로 세척하고, 무수 황산나트륨 상에서 건조시켰다. 여과하고, 진공 하에 농축시켰다. 목적 화합물 (4.2 g, 17.06 mmol)을 플래쉬 칼럼 크로마토그래피에 의해 헵탄 중 30% EtOAc로 용리시켜 갈색 오일로서 수득하였다.
단계 2. 5-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-디옥사보롤란-2-일)피라진-2-아민
디옥산 (16.42 mL) 중 5-브로모피라진-2-아민 (1 g, 5.75 mmol), 비스(피나콜레이토)디보론 (2.92 g, 11.49 mmol), 및 PdCl2(dppf)CH2Cl2 부가물 (0.469 g, 0.575 mmol)의 용액에 아세트산칼륨 (1.692 g, 17.24 mmol)을 탈기 직후에 첨가하였다. 반응 혼합물을 마이크로웨이브에서 120℃에서 20분 동안 가열하였다. EtOAc로 희석하고, 반응 혼합물을 셀라이트를 통해 여과하였다. 농축시키고, 조 생성물을 후속 단계에 추가 정제 없이 사용하였다. LCMS (m/z): 140 (보론산에 대한 MH+), 0.12분.
단계 3. 5-(2-메틸-3,6-디히드로-2H-피란-4-일)피라진-2-아민
DME (9.82 mL) 중 2-메틸-3,6-디히드로-2H-피란-4-일 트리플루오로메탄술포네이트 (0.637 g, 2.88 mmol), 5-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-디옥사보롤란-2-일)피라진-2-아민 (0.914 g, 3.74 mmol), 및 PdCl2(dppf)-CH2Cl2 부가물 (0.235 g, 0.288 mmol)의 용액에 2M Na2CO3 (3.27 mL)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 마이크로웨이브 합성기 (120℃, 10분)에서 가열하였다. 에틸을 첨가하고, 포화 NaHCO3 및 물로 세척하였다. 이어서, 목적 화합물을 1N HCl 수성 층에 대해 추출하고, EtOAc로 세척하였다. 2N NaOH로 염기성화시키고, 생성물을 EtOAc 층에 대해 추출하였다. EtOAc 유기 층을 물로 세척하고, Na2SO4 상에서 건조시켰다. 여과하고, 농축시켜 목적 화합물 250 mg을 수득하였다. LCMS (m/z): 192.2 (MH+), 0.40분.
단계 4. 5-((2R,4R)-2-메틸테트라히드로-2H-피란-4-일)피라진-2-아민
MeOH (13.100 mL) 중 5-(2-메틸-3,6-디히드로-2H-피란-4-일)피라진-2-아민 (250 mg, 1.307 mmol)의 용액에 Pd/C (278 mg, 0.261 mmol)를 첨가하였다. 용액을 N2 스트림에 의해 10분 동안 탈기시켰다. H2 기체에 의해 플러싱한 후, 수소 풍선을 장착하였다. 반응 혼합물을 25시간 동안 교반하였다. 셀라이트를 통해 여과한 후, 휘발성 물질을 제거하여 조 생성물을 생성하였으며, 이를 플래쉬 크로마토그래피에 의해 DCM 중 0-10%의 MeOH로 용리시키면서 정제하여 부분입체이성질체 180 mg을 수득하였다. 이어서, 키랄 분리 (키랄팩 5mic AD 칼럼, 4.6x100 (mm), 5mL/분, EtOH+0.1% DEA = 15%)로 5-((2R,4R)-2-메틸테트라히드로-2H-피란-4-일)피라진-2-아민 (Rt = 1.32분; LCMS (m/z): 194.2 (MH+), 0.44분) 40 mg을 22% 수율로 및 목적 5-((2S),4S)-2-메틸테트라히드로-2H-피란-4-일)피라진-2-아민 (Rt = 1.83분; LCMS (m/z): 194.2 (MH+), 0.44분) 30 mg을 16% 수율로 수득하였다.
단계 5. 3-브로모-5-((2R,4R)-2-메틸테트라히드로-2H-피란-4-일)피라진-2-아민 및 3-브로모-5-((2S,4S)-2-메틸테트라히드로-2H-피란-4-일)피라진-2-아민
아세토니트릴 (3 mL) 중 5-((2R,4R)-2-메틸테트라히드로-2H-피란-4-일)피라진-2-아민 (40 mg, 0.207 mmol)의 용액에 0℃에서 NBS (35.0 mg, 0.197 mmol)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 0℃에서 15분 동안 교반하였다. NaHCO3으로 켄칭한 후, 반응 혼합물을 EtOAc로 3회 추출하였다. 유기 층을 합하고, 물, 및 염수로 세척하였다. Na2SO4 상에서 건조시키고, 여과하고, 농축시켜 3-브로모-5-((2R,4R)-2-메틸테트라히드로-2H-피란-4-일)피라진-2-아민 47 mg을 수득하였으며, 이를 그대로 사용하였다. LCMS (m/z): 274 (MH+), 0.64분. 5-((2S,4S)-2-메틸테트라히드로-2H-피란-4-일)피라진-2-아민의 경우에, 상기 방법에 따라, 3-브로모-5-((2S,4S)-2-메틸테트라히드로-2H-피란-4-일)피라진-2-아민을 수득하였다. LCMS (m/z): 274 (MH+), 0.65분. 생성물의 절대 입체화학을 임의적으로 지정하였다.
3-브로모-5-시클로프로필피라진-2-아민의 합성
반응식 23
Figure 112016034409922-pct00048
단계 1. 5-시클로프로필피라진-2-아민
마이크로웨이브 바이알을 5-브로모피라진-2-아민 (400 mg, 2.3 mmol), 2-시클로프로필-4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-디옥사보롤란 (1.16 g, 6.9 mmol), KOt-Bu (t-BuOH 중 1M, 9.2 mL), 1,4-디옥산 (10 mL), 및 물 (0.10 mL)로 채우고, 혼합물을 아르곤으로 퍼징하고, 이어서 팔라듐 테트라키스 (266 mg, 0.23 mmol)를 첨가하고, 최종 아르곤 퍼징한 다음, 혼합물을 밀봉하고, 150℃에서 마이크로웨이브 반응기를 통해 20분 동안 가열하였다. 반응 혼합물에 팔라듐테트라키스의 제2 부분 (266 mg)을 첨가하고, 반응물을 160℃에서 마이크로웨이브 반응기를 통해 20분 동안 가열하였다. 반응 혼합물을 셀라이트의 박층을 통해 여과하고, 여과물을 농축시켰다. 잔류물을 EtOAc (6 mL)로 연화처리하고, 침전물을 원심분리 및 여과를 통해 제거하였다. EtOAc 상청액을 수성 TFA 용액 (3 x 3 mL, TFA/물- 1 mL/10 mL)으로 역추출하였다. TFA 용액을 합하고, 아세토니트릴 (10 mL)로 희석하고, 동결시키고, 동결건조시켜 황색 분말의 5-시클로프로필피라진-2-아민을 수득하였다. 동결건조 후의 생성물을 바이알에 옮기고, 포화 Na2CO3 (3mL)을 사용하여 pH > 12로 염기성화시키고, EtOAc (4 x 6 mL)로 추출하고, EtOAc 추출물을 합하고, 농축시키고, 고진공 하에 추가로 건조시키고, 최종 5-시클로프로필피라진-2-아민 유리 염기를 수득하였다 (79 mg, 25.4% 수율). LCMS (m/z): 136.1 (MH+), 0.30분.
1H NMR (CD3OD) δ ppm 8.29 (d, J = 1.2 Hz, 1H), 7.70 (d, J = 1.6 Hz, 1H), 2.00 - 2.08 (m, 1H), 0.94 - 1.00 (m, 2H), 0.87 - 0.93 (m, 2H).
단계 2. 3-브로모-5-시클로프로필피라진-2-아민
아세토니트릴 (10 mL) 중 5-시클로프로필피라진-2-아민 (79 mg, 0.584 mmol)의 용액을 0℃로 냉각시키고, NBS (140 mg, 1.46 mmol)의 점진적 첨가로 1시간의 과정에 걸쳐 처리하면서 LCMS에 의한 반응 진행을 밀접하게 모니터링하였다. 반응 혼합물을 농축시키고, 잔류물을 EtOAc (2 x 5 mL)로 연화처리하고, EtOAc 상청액을 원심분리를 통해 분리하고, 합하고, 1N NaOH (3 x 1 mL)로 세척하고, EtOAc 층을 건조 (Na2SO4 상에서)시키고, 농축시키고, 조 갈색 잔류물을 수득하였다. 조 생성물을 실리카 겔 상에서 플래쉬 크로마토그래피에 의해 구배 EtOAc/CH2Cl2 (0-30%)로 용리시키면서 정제하여 무색 고체의 3-브로모-5-시클로프로필피라진-2-아민 (38.2 mg, 38.5% 수율)을 수득하였다. LCMS (m/z): 214.0/216.0 (MH+), 0.64분.
3'-메틸-5-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-디옥사보롤란-2-일)-[3,4'-비피리딘]-6-아민의 합성
반응식 24
Figure 112016034409922-pct00049
단계 1. 3'-메틸-3,4'-비피리딘-6-아민
DME (45.4 mL) 중 (2 g, 9.09 mmol)의 용액에 4-클로로-3-메틸피리딘 (1.739 g, 13.63 mmol), 및 PdCl2(dppf)-CH2Cl2부가물 (0.742 g, 0.909 mmol) 및 2 M Na2CO3 (15.15 mL)을 첨가하고, 혼합물을 질소로 5분 동안 퍼징하였다. 밀봉된 유리 용기 중 반응 혼합물을 120℃로 밤새 가열하였다. 반응 혼합물을 EtOAc에 의해 추출하고, 유기 층을 염수, 물로 세척하였다. 유기부를 Na2SO4 무수에 의해 건조시키고, 여과하고, 농축시켜 조 생성물을 수득하였다. 조 물질을 플래쉬 크로마토그래피 (0-100% EtOAc/헵탄)에 의해 정제하여 3'-메틸-3,4'-비피리딘-6-아민 (255 mg, 1.377 mmol, 15.15% 수율)을 수득하였다. LCMS (m/z): 406.3 (MH+), 0.47분
단계 2. 5-브로모-3'-메틸-3,4'-비피리딘-6-아민
DCM (4499 μL) 중 3'-메틸-3,4'-비피리딘-6-아민 (250 mg, 1.350 mmol)의 빙냉 용액에 NBS (264 mg, 1.485 mmol)를 2 부분으로 첨가하였다. 반응 혼합물을 0℃에서 2시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 에틸 아세테이트로 희석하고, 물, 염수로 세척하고, 건조시키고, 농축시켰다. 잔류물을 헵탄으로 처리하고, 고체를 여과하여 5-브로모-3'-메틸-3,4'-비피리딘-6-아민 (350 mg, 1.325 mmol, 98% 수율)을 갈색 고체로서 수득하였으며, 후속 단계 반응에 정제 없이 사용하였다. LCMS (m/z): 264.4/266.4 (MH+), 0.32분;
1H NMR (400MHz, CDCl3) δ ppm 8.51 (s, 1 H), 8.47 (d, J = 5.1 Hz, 1 H), 8.04 (d, J = 2.0 Hz, 1 H), 7.69 (d, J = 2.0 Hz, 1 H), 7.12 (d, J = 5.1 Hz, 1 H), 5.06 (br. s., 2 H), 2.32 (s, 3 H).
단계 3. 3'-메틸-5-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-디옥사보롤란-2-일)-3,4'-비피리딘-6-아민
1,4-디옥산 (947 μL) 중 (5-브로모-3'-메틸-3,4'-비피리딘-6-아민 (100 mg, 0.379 mmol)의 현탁액에 비스핀B (288 mg, 1.136 mmol) 및 아세트산칼륨 (186 mg, 1.893 mmol)을 첨가하였다. 혼합물을 질소로 3분 동안 퍼징한 다음, PdCl2(dppf)CH2Cl2 부가물 (30.9 mg, 0.038 mmol)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 마이크로웨이브에서 120℃로 10분 동안 가열하였다. 목적 생성물의 형성이 확인되었다. 여전히 일부 출발 물질이 남아있으며, 마이크로웨이브 120℃에 대해 10분 동안 재수행하였다. 반응 혼합물을 필터를 통해 여과하고, 디옥산 (0.7 mL)으로 헹구고, 여과물 용액을 후속 단계 반응에 정제 없이 사용하였다. LCMS (m/z): 230.1 (보론산에 대한 MH+), 0.22분.
1-(4-(5-아미노-6-브로모피라진-2-일)피페리딘-1-일)에타논의 합성
반응식 25
Figure 112016034409922-pct00050
빙조에 들은 DCM (4 mL) 중 3-브로모-5-(피페리딘-4-일)피라진-2-아민 (50 mg, 0.194 mmol)에 DIEA (0.136 mL, 0.778 mmol) 및 아세틸 클로라이드 (0.017 mL, 0.233 mmol)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 빙조에서 30분 교반하였다. 반응 혼합물을 DCM과 물 사이에 분배하였다. DCM 층을 분리하고, 염수로 세척하였다. 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 증발시켰다. 후속 단계를 위해 진행하였다. LCMS (m/z): 299.1/301.1 (MH+), 0.508분.
1H NMR (400 MHz, CD3OD) δ ppm 7.81-7.69 (m, 2 H), 7.62-7.45 (m, 2 H), 7.37-7.09 (m, 6 H), 6.5 (dd, J=8.61, 2.35 Hz, 1 H), 6.50 (dd, J=13.50, 2.15 Hz, 1 H), 5.17-5.01 (m, 1 H), 4.55 (d, J=13.30 Hz, 1 H), 3.94 (d, J=13.69 Hz, 1 H), 3.83-3.63 (m, 2 H), 2.88 (tt, J=11.84, 3.62Hz, 1 H), 2.67 (td, J=12.91, 2.35 Hz, 1 H), 2.03 (s, 3 H), 1.96-1.79 (m, 2 H), 1.78-1.50 (m, 2 H).
3-브로모-5-(1-메틸-1H-피라졸-4-일)피리딘-2-아민의 합성
반응식 26
Figure 112016034409922-pct00051
단계 1. 5-(1-메틸-1H-피라졸-4-일)피리딘-2-아민
마이크로웨이브 바이알을 5-브로모피리딘-2-아민 (500 mg, 2.89 mmol), 1-메틸-4-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-디옥사보롤란-2-일)-1H-피라졸 (1.2 g, 5.78 mmol), 수성 Na2CO3 (2 M, 5.78 mL), PdCl2(dppf) CH2Cl2 (0.236 g) 및 DME (15 mL)로 채우고, 반응 혼합물을 아르곤으로 5분 동안 퍼징하고, 밀봉하고, 마이크로웨이브 반응기를 사용하여 115℃에서 20분 동안 가열하였다. 반응 혼합물의 DME 층을 수집하고, 농축시키고, 잔류물을 실리카 겔 상에서 플래쉬 칼럼 크로마토그래피에 의해 구배 메탄올/CH2Cl2로 용리시키면서 처리하고, 5-(1-메틸-1H-피라졸-4-일)피리딘-2-아민을 담갈색 고체 (383 mg, 76% 수율)로서 수득하였다. LCMS (m/z): 175.2 (MH+), 0.34분.
단계 2. 3-브로모-5-(1-메틸-1H-피라졸-4-일)피리딘-2-아민
0℃에서 5-(1-메틸-1H-피라졸-4-일)피리딘-2-아민 (380 mg, 2.18mmol) 아세토니트릴(30 mL) 용액에 NBS (388 mg, 2.18 mmol)를 첨가하고, 반응 혼합물을 0℃에서 30분 동안 교반한 다음, 실온에서 추가로 40분 동안 교반하였다. 이어서, 반응 혼합물을 농축시키고, 메탄올 중에 재용해시키고, 여기에 고체 LiOH (80 mg)를 첨가하고, 초음파처리하고, 농축시키고, 잔류물을 물 (2 x 5 mL)로 연화처리하고, 상청액을 버렸다. 잔류물을 고진공 하에 건조시킨 다음, EtOAc (2 x 8 mL)로 연화처리하고, 상청액을 수집하고, 합하고, 농축시키고, 담갈색 잔류물을 조 3-브로모-5-(1-메틸-1H-피라졸-4-일)피리딘-2-아민으로서 수득하였다. LCMS (m/z): 253.0/255.0 (MH+), 0.38분.
(S)-4-(2-아미노-4-플루오로-5-(1-메틸-1H-피라졸-4-일)피리딘-3-일)-2-플루오로-N-(2-히드록시-1-페닐에틸)벤즈아미드의 합성
반응식 27
Figure 112016034409922-pct00052
단계 1. 5-브로모-4-플루오로피리딘-2-아민
아세토니트릴 (35.7 mL) 중 4-플루오로피리딘-2-아민 (400 mg, 3.57 mmol)의 용액에 0℃에서 NBS (648 mg, 3.64 mmol)를 3 부분으로 첨가하였다. 반응 혼합물을 0℃에서 20분 동안 교반하였다. LCMS는 반응의 완결을 나타내었다. 포화 Na2S2O3 및 NaHCO3으로 켄칭한 후, 30분 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 EtOAc로 3회 추출하였다. 포화 NaHCO3, 물 및 염수에 의해 세척하였다. 건조시키고, 농축시켰다. 조 물질을 에테르로 연화처리하고, 후속 단계에 추가 정제 없이 사용하였다. LCMS (m/z): 192.9 (MH+), 0.32분.
단계 2. 4-플루오로-5-(1-메틸-1H-피라졸-4-일)피리딘-2-아민
5-브로모-4-플루오로피리딘-2-아민 (369 mg, 1.932 mmol), 1-메틸-4-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-디옥사보롤란-2-일)-1H-피라졸 (603 mg, 2.90 mmol), PdCl2(dppf)DCM (141 mg, 0.193 mmol) 및 DME (9.660 μL)의 반응 혼합물에 2M Na2CO3 (3.220 mL)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 마이크로웨이브 합성기 (120℃, 12분)에서 가열하였다. 반응 혼합물에 무수 황산나트륨을 첨가하고, 여과하고, 농축시켰다. 조 생성물을 플래쉬 크로마토그래피에 의해 0-100% EtOAc (10%의 MeOH 함유)/헵탄으로 용리시키면서 정제하여 목적 생성물 280 mg을 75% 수율로 수득하였다. LCMS (m/z): 193.1 (MH+), 0.35분.
단계 3. 3-브로모-4-플루오로-5-(1-메틸-1H-피라졸-4-일)피리딘-2-아민
아세토니트릴 (7.805 mL) 중 4-플루오로-5-(1-메틸-1H-피라졸-4-일)피리딘-2-아민 (150 mg, 0.780 mmol)의 용액에 0℃에서 NBS (142 mg, 0.796 mmol)를 3 부분으로 첨가하였다. 반응 혼합물을 0℃에서 20분 동안 교반하였다. LCMS는 반응의 완결을 나타내었다. 포화 Na2SO3 및 NaHCO3으로 켄칭한 후, 30분 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 EtOAc로 3회 추출하였다. 고체를 여과하였다. 고체는 목적 생성물이 아니었다. EtOAc 층을 포화 NaHCO3, 물 및 염수에 의해 세척하였다. 건조시키고, 농축시켰다. 조 물질을 플래쉬 크로마토그래피에 의해 0-100% EtOAc (10% MeOH 함유)/헵탄으로 용리시키면서 정제하여 목적 생성물 30 mg을 수득하였다. LCMS (m/z): 273.1 (MH+), 0.46분.
(+/-)-(1S,3R)-3-(5-아미노-6-브로모피라진-2-일)시클로펜탄올, (+/-)-(1R,3R)-3-(5-아미노-6-브로모피라진-2-일)시클로펜탄올, 및 (+/-)-3-브로모-5-((1R,3R)-3-메톡시시클로펜틸)피라진-2-아민의 합성
반응식 28
Figure 112016034409922-pct00053
단계 1. 3-브로모시클로펜트-2-에논
벤젠 (510 mL) 중 PPh3 (44.1 g, 168 mmol)의 용액에 Br2 (8.67 mL, 168 mmol)를 0℃에서 적가하였으며, 용액은 황색 현탁액으로 변하였고, 이어서 TEA (23.44 mL, 168 mmol)를 천천히 첨가하였다. 혼합물에 벤젠 (100 mL) 중 시클로펜탄-1,3-디온 (15 g, 153 mmol)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 밤새 교반하였다. 에테르 200 mL를 첨가한 다음, 반응 혼합물을 여과하였다. 여과물을 농축시키고, 잔류물을 Et2O로 처리하고, 고체를 여과하고, 1회 더 반복하였다. 조 생성물을 후속 단계 반응에 사용하였다. LCMS (m/z): 160.9 (MH+), 0.35분.
단계 2. 3-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-디옥사보롤란-2-일)시클로펜트-2-에논
디옥산 (161 mL) 중 3-브로모시클로펜트-2-에논 (13 g, 81 mmol)의 용액에 B2(PIN)2 (41.0 g, 161 mmol) 및 PdCl2(dppf)CH2Cl2 (2.95 g, 4.04 mmol)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 N2 버블링에 의해 15분 동안 탈기시켰다. 이어서, KOAc (23.77 g, 242 mmol)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 90℃에서 밤새 가열하였다. 냉각시킨 후, 반응 혼합물을 프릿 유리 필터를 통해 여과하고, 디옥산 (160 mL)으로 헹구고, 여과물을 진공 하에 농축시켜 조 3-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-디옥사보롤란-2-일)시클로펜트-2-에논을 수득하였으며, 이를 후속 단계에 정제 없이 사용하였다. LCMS (m/z): 126.9 (MH+), 0.17분.
단계 3. 3-(5-아미노피라진-2-일)시클로펜트-2-에논
3-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-디옥사보롤란-2-일)시클로펜트-2-에논 (2.99 g, 14.37 mmol) (최종 단계로부터의 여과물)에 2-아미노-5 브로모피라진 (2.5 g, 14.37 mmol), PdCl2(dppf)-CH2Cl2 (1.173 g, 1.437 mmol), Na2CO3 (7.61 g, 71.8 mmol) 및 물 (17.96 mL)을 첨가하고, 반응 혼합물을 100℃ 오일 조에서 밤새 교반하고, 셀라이트를 통해 여과하였다. 이어서, 반응 혼합물을 EtOAc로 추출하였다. 이어서, 유기부를 3N HCl (20mL)을 사용하여 2회 세척하고, 물 50mL로 1회 세척한 다음, AQ를 NaOH에 의해 pH= 8로 중화시킨 다음, 반응 혼합물을 CHCl3/IPA (7:3)에 의해 3회 추출하고, 유기부를 건조시키고, 농축시키고, 그대로 사용하였다. LCMS (m/z): 176.1 (MH+), 0.32분.
단계 4. N,N- 디-tert-부틸 (5-(3-옥소시클로펜트-1-엔-1-일)피라진-2-일)카르바메이트
DCM (9.5mL) 중 3-(5-아미노피라진-2-일)시클로펜트-2-에논 (500 mg, 2.85 mmol)의 용액에 Boc2O (1988 μl, 8.56 mmol) 및 DMAP (523 mg, 4.28 mmol)를 첨가하였으며, 반응 혼합물은 암색 용액이고, 반응 혼합물을 실온에서 5시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 농축시키고, 플래쉬 크로마토그래피 (0-40% EtOAc/헵탄)에 의해 정제하여 N,N- 디-tert-부틸 (5-(3-옥소시클로펜트-1-엔-1-일)피라진-2-일)카르바메이트를 47% 수율로 수득하였다. LCMS (m/z): 376.2 (MH+) 0.96분.
1H NMR (400MHz CDCl3) δ ppm 8.77 (d, J = 1.2 Hz, 1 H), 8.72 (d, J = 1.2 Hz, 1 H), 6.89 (s, 1 H), 3.15 (td, J = 2.3, 4.7 Hz, 2 H), 2.64 (td, J = 2.4,5.0 Hz, 2 H), 1.45 - 1.37 (m, 18H).
단계 5. (+/-)-N,N-디-tert-부틸 (5-(3-옥소시클로펜틸)피라진-2-일)카르바메이트
메탄올 중 N,N- 디-tert-부틸 (5-(3-옥소시클로펜트-1-엔-1-일)피라진-2-일)카르바메이트 (600 mg, 1.598 mmol)를 N2에 의해 10분 동안 퍼징하고, Pd/C (170 mg, 0.160 mmol)를 첨가하고, 반응 혼합물을 N2에 의해 추가로 5분 동안 퍼징한 다음, 반응 혼합물을 수소 풍선으로 채우고, 실온에서 2시간 동안 교반하였다. 셀라이트를 통해 여과하고, 여과물을 농축시키고, 조 물질을 후속 단계 반응에 정제 없이 사용하였다. LCMS (m/z): 378.1 (MH+), 0.83분.
단계 6. (+/-)-N,N-디-tert-부틸 (5-((1R,3R)-3-히드록시시클로펜틸)피라진-2-일)카르바메이트 및 (+/-)-N,N-디-tert-부틸 (5-((1R,3S)-3-히드록시시클로펜틸)피라진-2-일)카르바메이트
(+/-)-N,N-디-tert-부틸 (5-(3-옥소시클로펜틸)피라진-2-일)카르바메이트 (600 mg, 1.590 mmol)를 메탄올 (5299 μl) 중에 용해시키고, 이어서 NaBH4 (90 mg, 2.385 mmol)를 첨가하고, 반응 혼합물을 실온에서 30분 동안 교반하고, 포화 NH4Cl을 첨가한 다음, 반응 혼합물을 농축시켜 메탄올을 제거하였다. EtOAc에 의해 추출하고, 유기부를 포화 NaHCO3 용액, 물 및 염수로 세척하고, 무수 Na2SO4 상에서 건조시키고, 농축시켜 조 생성물을 수득하였다. 조 생성물을 플래쉬 크로마토그래피에 의해 정제하여 (+/-)-N,N-디-tert-부틸 (5-((1R,3R)-3-히드록시시클로펜틸)피라진-2-일)카르바메이트 (24.9%)를 수득하였다. LCMS (m/z): 280.1 (MH+), 0.86분.
1H NMR (400MHz,CDCl3) δ ppm 8.50 - 8.43 (m, 1 H), 8.43 - 8.33 (m, 1 H), 4.40 (br. s., 1 H), 3.58 - 3.45 (m, 1 H), 2.36 - 2.17 (m, 2 H), 2.02 - 1.75 (m, 5 H), 1.50 - 1.39 (m, 18 H).
(+/-)-N,N-디-tert-부틸 (5-((1R,3S)-3-히드록시시클로펜틸)피라진-2-일)카르바메이트 (4%), LCMS (m/z): 380.1 (MH+), 0.85분.
1H NMR (400MHz,CDCl3) δ ppm 8.43 (d, J = 1.2 Hz, 1 H), 8.36 - 8.32 (m, 1 H), 4.59 (d, J = 2.7 Hz, 1 H), 3.69 - 3.57 (m, 1 H), 2.37 - 2.13 (m, 2 H), 2.13 - 2.01 (m, 2 H), 1.93 - 1.68 (m, 2 H), 1.49 - 1.39 (m, 18 H).
단계 7. (+/-)-(1S,3R)-3-(5-아미노-6-브로모피라진-2-일)시클로펜탄올
DCM (461 μl) 중 N,N-디-tert-부틸 (5-((1R,3S)-3-히드록시시클로펜틸)피라진-2-일)카르바메이트 (35 mg, 0.092 mmol)에 HCl (922 μl, 3.69 mmol)을 첨가하고, 반응 혼합물을 실온에서 밤새 교반하고, 농축 건조시켜 HCl 염을 수득하였다. 조 생성물을 후속 단계 반응에 정제 없이 사용하였다. LCMS (m/z): 180.1 (MH+), 0.22분. (+/-)-(1S,3R)-3-(5-아미노피라진-2-일)시클로펜탄올 (15 mg, 0.084 mmol)을 아세토니트릴 (2 mL) 중에 용해시키고, 이어서 NBS (16.39 mg, 0.092 mmol)를 첨가하고, 반응 혼합물을 실온에서 30분 동안 교반하고, 물을 첨가한 다음, 반응 혼합물을 EtOAc에 의해 추출하고, 유기부를 건조시키고, 농축시키고, 조 물질을 후속 단계 반응에 사용하였다. LCMS (m/z): 258.1/260.2 (MH+), 0.45분. 상기 방법에 따라, (+/-)-N,N-디-tert-부틸 (5-((1R,3S)-3-히드록시시클로펜틸)피라진-2-일)카르바메이트를 사용하여, (+/-)-(1R,3R)-3-(5-아미노-6-브로모피라진-2-일)시클로펜탄올을 수득하였다. LCMS (m/z): 258.1/260.1 (MH+), 0.50분.
단계 8. N,N-디-tert-부틸 (5-(3-메톡시시클로펜틸)피라진-2-일)카르바메이트
MeI (2.635 mL) 중 N,N-디-tert-부틸 (5-(3-히드록시시클로펜틸)피라진-2-일)카르바메이트 (50 mg, 0.132 mmol)의 부분입체이성질체 혼합물의 용액에 산화은 (305 mg, 1.318 mmol)을 첨가하고, 반응 혼합물을 반응 바이알 중에 캡핑하고, 실온에서 밤새 교반하였다. 산화은 10 당량 및 MeI 2 mL를 첨가하고, 반응 혼합물을 실온에서 추가로 교반하였다. 반응 혼합물을 셀라이트 패드를 통해 여과하고, EtOAc 및 메탄올로 세척하였다. 여과물을 농축시킨 후, 조 생성물을 플래쉬 크로마토그래피 (0-40% EtOAc/헵탄)에 의해 정제하여 N,N-디-tert-부틸 (5-((1R,3R)-3-메톡시시클로펜틸)피라진-2-일)카르바메이트 (25 mg)를 수득하였다. LCMS (m/z): 394.1 (MH+), 1.06분.
실시예 12
(+/-)-4-(3-아미노-6-((1S,3R)-3-히드록시시클로헥실)피라진-2-일)-N-벤질-2-플루오로벤즈아미드의 합성
반응식 29
Figure 112016034409922-pct00054
단계 1. 3-옥소시클로헥스-1-엔-1-일 트리플루오로메탄술포네이트
시클로헥산-1,3-디온 (8 g, 71.3 mmol)을 500 mL 둥근 바닥 플라스크에 칭량하고, CH2Cl2 (160 mL)를 첨가하여 투명한 무색 슬러리를 0℃에서 N2 하에 생성하였다. 탄산나트륨 (8.32 g, 78 mmol)을 첨가하고, 현탁액을 15분 동안 교반하였다. 내부 온도를 1.9℃ 미만으로 유지하면서 DCM (16 mL) 중에 용해시킨 트리플루오로메탄술폰산 무수물 (13.26 mL, 78 mmol)을 1.2시간에 걸쳐 적가하여 비스-트리플레이트 형성을 회피하였다. 혼합물을 0℃에서 45분 동안 정치 되도록 한 다음, 10℃로 20분 동안 가온되도록 하였다. 소결 유리 깔때기를 통해 여과하여 Na2CO3을 제거하고, 포화 NaHCO3을 첨가하였다. 유기 층을 분리하고, 염수로 세척하였다. Na2SO4 상에서 건조시키고, 여과하고, 농축시키고, 감압 하에 건조시켜 목적 생성물 9.18 g을 수득하였다. LCMS (m/z): 245.1 (MH+), 0.81분.
단계 2. 3-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-디옥사보롤란-2-일)시클로헥스-2-에논
4,4,4',4',5,5,5',5'-옥타메틸-2,2'-비(1,3,2-디옥사보롤란) (19.09 g, 75 mmol) 및 아세트산칼륨 (11.07 g, 113 mmol)의 혼합물에 디옥산 (44.6 mL) 중 용액으로서 3-옥소시클로헥스-1-엔-1-일 트리플루오로메탄술포네이트 (9.18 g, 37.6 mmol)를 첨가하였다. 아르곤을 15분 동안 버블링한 다음, Pd(dppf)Cl2-DCM (0.824 g, 1.128 mmol)을 첨가하였다. 전체 반응 혼합물을 100℃에서 밤새 가열하였다. 셀라이트를 통해 용액을 여과하고, 모든 용매를 증발시켰다. 고진공 하에 건조시켜 정량적 생성물을 수득하였으며, 이를 그대로 사용하였다. LCMS (m/z): 141 (보론산에 대한 MH+), 0.43분.
단계 3. 3-(5-아미노피라진-2-일)시클로헥스-2-에논
500mL 유리에 칭량된 3-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-디옥사보롤란-2-일)시클로헥스-2-에논 (4.1 g, 18.46 mmol), 5-브로모피리딘-2-아민 (4.15 g, 24.00 mmol)을 디옥산 (69.2 mL) 중 용액으로서 첨가하고, 이어서 포화 Na2CO3 (23.08 mL) 및 Pd(dppf)Cl2-DCM (1.350 g, 1.846 mmol)을 첨가하였다. 이어서, 전체 혼합물을 Ar 버블링함으로써 15분 동안 탈기시키고, 밤새 환류하였다. EtOAc 및 물을 첨가하고, 30분 동안 교반하였다. 유기부를 분리하고, 수성 층을 EtOAc로 3회 추출하였다. 유기 층을 합하고, Na2SO4 상에서 건조시키고, 여과하고, 농축시켰다. 플래쉬 크로마토그래피에 의해 0-100% EtOAc (10%의 MeOH 함유)/헵탄으로 용리시키면서 정제하여 목적 생성물 2 g을 수득하였다. LCMS (m/z): 190 (MH+), 0.42분.
단계 4. 3-(5-아미노피라진-2-일)시클로헥스-2-엔올
에탄올 (2643 μL) 중 3-(5-아미노피라진-2-일)시클로헥스-2-에논 (150 mg, 0.793 mmol)의 용액에 실온에서 염화세륨 (III) (293 mg, 1.189 mmol)을 첨가하였다. 모든 물질이 용해될 때까지 반응 혼합물을 1시간 동안 실온에서 교반하였다. 이어서, 반응 혼합물을 0℃로 냉각시키고, 수소화붕소나트륨 (45.0 mg, 1.189 mmol)을 조금씩 첨가하였다. 2시간 동안 실온으로 가온 시 반응 혼합물을 교반하였다. 반응 혼합물을 0℃로 냉각시키고, 버블이 명확하게 나타난 다음 사라질 때까지 물 2 mL를 천천히 첨가하고, 30분 동안 교반을 계속하였다. 이어서, 황산나트륨을 첨가하고, 30분 동안 교반하였다. 여과하고, 고진공 하에 건조시켜 목적 생성물 149 mg을 수득하였다. LCMS (m/z): 192.1 (MH+), 0.46분.
단계 5. 5-(3-((tert-부틸디메틸실릴)옥시)시클로헥스-1-엔-1-일)피라진-2-아민
0℃에서 DMF (5.5 mL) 중 3-(5-아미노피라진-2-일)시클로헥스-2-엔올 (149 mg, 0.779 mmol)의 용액에 tert-부틸클로로디메틸실란 (294 mg, 1.95 mmol) 및 1H-이미다졸 (212 mg, 3.12 mmol)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 밤새 교반하였다. 포화 NaHCO3으로 켄칭한 후, 반응 혼합물을 EtOAc로 3회 추출하였다. 합한 유기 층을 무수 황산나트륨 상에서 건조시켰다. 여과하고, 진공 하에 농축시켰다. 조 생성물을 플래쉬 크로마토그래피에 의해 0-100%의 EtOAc/헵탄으로 용리시키면서 정제하여 조 생성물 238 mg을 수득하였으며, 이를 그대로 사용하였다. LCMS (m/z): 306.9 (MH+), 1.04분.
단계 6. 5-((1R,3S)-3-((tert-부틸디메틸실릴)옥시)시클로헥실)피라진-2-아민
MeOH (7.79 mL) 중 5-(3-((tert-부틸디메틸실릴)옥시)시클로헥스-1-엔-1-일)피라진-2-아민 (238 mg, 0.779 mmol) 및 Pd/C (10%) (50 mg, 0.779 mmol)의 혼합물을 H2 분위기 하에 3시간 동안 교반하였다. LCMS는 약 60% 전환을 나타내었다. 추가의 Pd/C (20 mg)를 첨가하고, 약 추가로 4시간 교반하였다. LCMS는 여전히 소량의 남은 출발 물질을 나타내었다. 추가의 Pd/C (20 mg)를 첨가하고, 밤새 교반하였다. 촉매를 여과하고, 용매를 증발시켰다. 잔류물을 플래쉬 크로마토그래피에 의해 0-100%의 EtOAc/헵탄으로 용리시키면서 정제하여 목적 시스 라세미체 화합물 110 mg을 수득하였다. LCMS (m/z): 308.4 (MH+), 1.01분.
단계 7. 3-브로모-5-(3-((tert-부틸디메틸실릴)옥시)시클로헥실)피라진-2-아민
아세토니트릴 (5.50 mL) 중 5-((1R,3S)-3-((tert-부틸디메틸실릴)옥시)시클로헥실)피라진-2-아민 (110 mg, 0.358 mmol)의 용액에 0℃에서 NBS (66.9 mg, 0.376 mmol)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 0℃에서 15분 동안 교반하였다. 포화 티오황산나트륨 및 포화 NaHCO3으로 켄칭한 후, EtOAc로 3회 추출하였다. 유기 층을 합하고, 염수로 세척하고, Na2SO4 상에서 건조시키고, 여과하고, 농축시켜 목적 시스 라세미체 화합물 138 mg을 수득하였으며, 이를 그대로 사용하였다. LCMS (m/z): 388 (MH+), 0.72분.
단계 8. 4-(3-아미노-6-(3-((tert-부틸디메틸실릴)옥시)시클로헥실)피라진-2-일)-N-벤질-2-플루오로벤즈아미드
2 mL MW 바이알에 들은 3-브로모-5-(3-((tert-부틸디메틸실릴)옥시)시클로헥실)피라진-2-아민 (68 mg, 0.176 mmol)에 (4-(벤질카르바모일)-3-플루오로페닐)보론산 (72.1 mg, 0.264 mmol), PdCl2(dppf)-DCM (12.88 mg, 0.018 mmol), DME (1.32 mL) 및 2M Na2CO3 용액 (0.44 mL)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 마이크로웨이브 합성기 (12분, 120℃)에서 가열하였다. 반응 혼합물을 EtOAc로 희석하고, 물로 3회 세척하고, Na2SO4 상에서 건조시키고, 여과하고, 농축시켰다. 조 생성물을 플래쉬 크로마토그래피에 의해 0-100%의 EtOAc (10%의 MeOH 함유)/헵탄으로 용리시키면서 정제하여 조 시스 라세미체 화합물 60 mg을 수득하였으며, 이를 후속 반응에 추가 정제 없이 사용하였다. LCMS (m/z): 535.4 (MH+), 1.31분.
단계 9. 4-(3-아미노-6-((1R,3S)-3-히드록시시클로헥실)피라진-2-일)-N-벤질-2-플루오로벤즈아미드
6N HCl (0.29 mL), THF (0.57 mL) 및 MeOH (0.285 mL) 중 4-(3-아미노-6-(3-((tert-부틸디메틸실릴)옥시)시클로헥실)피라진-2-일)-N-벤질-2-플루오로벤즈아미드 (61 mg, 0.114 mmol)의 혼합물을 2시간 동안 교반하였다. 고체 중탄산나트륨을 첨가하여 반응 혼합물을 중화시켰다. 용매를 증발시키고, 잔류물 중 25%를 DMSO 중에 용해시키고, 자동-정제용에 의해 정제하여 목적 시스 라세미체 화합물 15 mg을 TFA 염으로서 수득하였다. LCMS (m/z): 421.3 (MH+), 0.74분.
1H NMR (400 MHz, MeOD-d4) δ ppm 7.82 - 7.69 (m, 2 H) 7.62 - 7.45 (m, 2 H) 7.37 - 7.12 (m, 5 H) 4.52 (s, 2 H) 3.66 -3.52 (m, 1 H) 2.75 - 2.60 (m, 1 H) 2.11 - 2.01 (m, 1 H) 1.97 - 1.70 (m, 3 H) 1.52 - 1.29 (m, 3 H) 1.24 - 1.08 (m, 1 H).
(+/-)-3-브로모-5-((1R,3S)-3-메톡시시클로헥실)피라진-2-아민의 합성
반응식 30
Figure 112016034409922-pct00055
단계 1. (+/-)-N,N-디-Boc-3-(5-아미노피라진-2-일)시클로헥스-2-에논
DCM (34.0 mL) 중 3-(5-아미노피라진-2-일)시클로헥스-2-에논 (1.3 g, 6.87 mmol)에 디-tert-부틸 디카르보네이트 (4.50 g, 20.61 mmol) 및 N,N-디메틸피리딘-4-아민 (0.084 g, 0.69 mmol)을 첨가하고, 혼합물을 실온에서 밤새 교반하였다. 반응 혼합물을 DCM으로 희석한 다음, 포화 중탄산나트륨 용액으로 세척하였다. 이어서, 분리된 유기 층을 황산나트륨으로 건조시키고, 농축시켰다. 조 생성물을 플래쉬 크로마토그래피 (헵탄 중 0에서 50% 에틸 아세테이트)에 의해 정제하여 (+/-)-N,N-디-Boc-3-(5-아미노피라진-2-일)시클로헥스-2-에논 1.3 g을 수득하였다. LCMS (m/z): 390.3 (MH+), 1.02분.
단계 2. (+/-)-N,N-디-Boc-3-(5-아미노피라진-2-일)시클로헥사논
MeOH (33.4 mL) 중 (+/-)-N,N-디-Boc-3-(5-아미노피라진-2-일)시클로헥스-2-에논 (1.3 g, 3.34 mmol) 및 Pd/C (10%) (400 mg, 10.57 mmol)의 혼합물을 H2 분위기 하에 밤새 교반하였다. 반응 혼합물을 셀라이트를 통해 여과하고, MeOH 및 EtOAc로 잘 세척하였다. 여과물을 증발시켜 (+/-)-N,N-디-Boc-3-(5-아미노피라진-2-일)시클로헥사논을 수득하였으며, 이를 후속 단계에 추가 정제 없이 사용하였다. LCMS (m/z): 392.9 (MH+), 0.97분.
단계 3. (+/-)-N,N-디-Boc-(1S,3R)-3-(5-아미노피라진-2-일)시클로헥산올
(+/-)-N,N-디-Boc-3-(5-아미노피라진-2-일)시클로헥사논 (600 mg, 1.533 mmol)을 EtOH (17.2 mL) 중에 용해시킨 다음, NaBH4 (87 mg, 2.299 mmol)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 30분 동안 교반하였다. 물을 첨가하여 반응을 켄칭한 후, 반응 혼합물을 농축시켜 메탄올을 제거하고, EtOAc에 의해 추출하고, 유기 층을 NaHCO3 용액, 물 및 염수로 세척하고, 무수 Na2SO4 상에서 건조시키고, 농축시켜 조 (+/-)-N,N-디-Boc-(1S,3R)-3-(5-아미노피라진-2-일)시클로헥산올 (5% 트랜스 이성질체 함유)을 수득하였으며, 이를 후속 단계에 추가 정제 없이 사용하였다. LCMS (m/z): 394.2 (MH+), 0.89분.
단계 4. (+/-)-N,N-디-Boc-5-((1R,3S)-3-메톡시시클로헥실)피라진-2-아민
(+/-)-N,N-디-Boc-(1S,3R)-3-(5-아미노피라진-2-일)시클로헥산올 (350 mg, 0.89 mmol), 산화은 (2.06 g, 8.9 mmol), 아세토니트릴 (2.224 mL) 및 메틸 아이오다이드 (55.6 μL, 0.890 mmol)의 혼합물을 밤새 교반하였다. EtOAc를 첨가한 후, 반응 혼합물을 여과하였다. 휘발성 물질을 증발시킨 후, 조 생성물을 플래쉬 크로마토그래피 (헵탄 중 0-100% EtOAc)에 의해 정제하여 (+/-)-N,N-디-Boc-5-((1R,3S)-3-메톡시시클로헥실)피라진-2-아민 (184 mg, 0.452 mmol) 184 mg을 수득하였다. LCMS (m/z): 408.3 (MH+), 1.10분.
단계 5. (+/-)-3-브로모-5-((1R,3S)-3-메톡시시클로헥실)피라진-2-아민
DCM (4.515 mL) 중 (+/-)-N,N-디-Boc-5-((1R,3S)-3-메톡시시클로헥실)피라진-2-아민 (184 mg, 0.452 mmol)에 HCl (디옥산 중 4M) (4.515 mL, 18.06 mmol)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 밤새 교반하였다. 휘발성 물질을 진공 하에 제거한 후, 잔류물을 EtOAc 중에 용해시켰다. 유기 층을 NaHCO3 용액, 물 및 염수로 세척하고, 무수 Na2SO4 상에서 건조시키고, 농축시켜 정량적 수율의 (+/-)-5-((1R,3S)-3-메톡시시클로헥실)피라진-2-아민을 수득하였다. LCMS (m/z): 208 (MH+), 0.43분. 아세토니트릴 (4.008 μL) 중 (+/-)-5-((1R,3S)-3-메톡시시클로헥실)피라진-2-아민 (54 mg, 0.261 mmol)의 용액에 0℃에서 NBS (48.7 mg, 0.274 mmol)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 0℃에서 15분 동안 교반하였다. NaHCO3으로 켄칭한 후, EtOAc로 3회 추출하였다. 유기 층을 물 및 염수로 세척하고, 무수 Na2SO4 상에서 건조시키고, 농축시켜 정량적 수율의 (+/-)-3-브로모-5-((1R,3S)-3-메톡시시클로헥실)피라진-2-아민 75 mg을 수득하였다. LCMS (m/z): 286 (MH+), 0.73분.
실시예 13
(+/-)-4-(3-아미노-6-(3-(메틸술포닐)시클로헥실)피라진-2-일)-N-벤질-2-플루오로벤즈아미드의 합성
반응식 31
Figure 112016034409922-pct00056
단계 1. (+/-)-N-(3-브로모-5-(3-((tert-부틸디메틸실릴)옥시)시클로헥실)피라진-2-일)피발아미드
피발로일 클로라이드 (71.5 μL, 0.569 mmol)를 교반하는, 냉각시킨 (0℃) CH2Cl2 (949 μL) 중 (+/-)-3-브로모-5-((1R,3S)-3-((tert-부틸디메틸실릴)옥시)시클로헥실)피라진-2-아민 (110 mg, 0.285 mmol) 및 TEA (159 μL, 1.139 mmol)의 혼합물에 적가하였다. 적색 혼합물을 0℃에서 1시간 동안 교반한 다음, 실온에서 2시간 동안 교반하였다. EtOAc 및 포화 NaHCO3을 첨가하고, 잘 교반하였다. 유기 층을 분리하고, 수성 층을 EtOAc로 잘 추출하였다. 합한 EtOAc 층을 염수로 세척하고, Na2SO4 상에서 건조시키고, 여과하고, 농축시켰다. 잔류물을 실리카 겔 상에서 플래쉬 크로마토그래피에 의해 EtOAc/헵탄으로 용리시키면서 정제하여 (+/-)-N-(3-브로모-5-(3-((tert-부틸디메틸실릴)옥시)시클로헥실)피라진-2-일)피발아미드 97 mg을 72.4% 수율로 수득하였다. LCMS (m/z): 472.3 (MH+), 1.19분.
단계 2. (+/-)-N-(3-브로모-5-((1R,3S)-3-((tert-부틸디메틸실릴)옥시)시클로헥실)피라진-2-일)피발아미드
6N HCl (687 μL), THF (687 μL), MeOH (687 μL) 중 (+/-)-N-(3-브로모-5-(3-((tert-부틸디메틸실릴)옥시)시클로헥실)피라진-2-일)피발아미드 (97 mg, 0.206 mmol)의 혼합물을 2시간 동안 교반하였다. LCMS는 반응이 완결되었음을 나타내었다. 고체 중탄산나트륨을 첨가하여 HCl을 중화시켰다. EtOAc 및 물 중에 용해시켰다. 유기 층을 분리하고, 염수로 세척하고, Na2SO4 상에서 건조시키고, 여과하고, 농축시켜 조 (+/-)-N-(3-브로모-5-((1R,3S)-3-((tert-부틸디메틸실릴)옥시)시클로헥실)피라진-2-일)피발아미드 72 mg을 98% 수율로 수득하였다. LCMS (m/z): 358.6 (MH+), 0.70분.
단계 3. (+/-)-(1S,3R)-3-(6-브로모-5-피발아미도피라진-2-일)시클로헥실 메탄술포네이트
0℃에서 CH2Cl2 (2021 μL) 중 (+/-)-N-(3-브로모-5-((1R,3S)-3-((tert-부틸디메틸실릴)옥시)시클로헥실)피라진-2-일)피발아미드 (72 mg, 0.202 mmol)의 혼합물에 TEA (56.3 μL, 0.404 mmol) 및 메탄술포닐 클로라이드 (18.90 μL, 0.243 mmol)를 첨가하였다. 생성된 혼합물을 실온에서 3시간 동안 교반하였다. 추가의 TEA (56.3 μL, 0.404 mmol) 및 메탄술포닐 클로라이드 (18.90 μL, 0.243 mmol)를 첨가하고, 6시간 동안 교반하였다. 물을 첨가함으로써 반응을 후처리하였다. 유기 상을 염수로 세척하고, 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 농축시켰다. 조 생성물을 플래쉬 크로마토그래피에 의해 0-100% EtOAc/헵탄으로 용리시키면서 정제하여 (+/-)-(1S,3R)-3-(6-브로모-5-피발아미도피라진-2-일)시클로헥실 메탄술포네이트 54 mg을 61.5% 수율로 수득하였다. LCMS (m/z): 436.1 (MH+), 0.75분.
단계 4. (+/-)- (1S,3R)-3-(6-(4-(벤질카르바모일)-3-플루오로페닐)-5-피발아미도피라진-2-일)시클로헥실 메탄술포네이트
2.0 mL MW 바이알에 들은 시스 라세미체 (+/-)-3-(6-브로모-5-피발아미도피라진-2-일)시클로헥실 메탄술포네이트 (54 mg, 0.124 mmol)에 (4-(벤질카르바모일)-3-플루오로페닐)보론산 (50.9 mg, 0.186 mmol), PdCl2(dppf) (9.10 mg, 0.012 mmol), DME (1166 μL) 및 2M Na2CO3 용액 (389 μL)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 마이크로웨이브 합성기 (12분, 80℃)에서 가열하였다. 반응 혼합물을 EtOAc로 희석하고, 물로 3회 세척하고, Na2SO4 상에서 건조시키고, 여과하고, 농축시켰다. 조 생성물을 플래쉬 크로마토그래피에 의해 0-100%의 EtOAc (10%의 MeOH 함유)로 용리시키면서 정제하여 (+/-)-(1S,3R)-3-(6-(4-(벤질카르바모일)-3-플루오로페닐)-5-피발아미도피라진-2-일)시클로헥실 메탄술포네이트 73 mg을 수득하였으며, 이를 후속 반응에 추가 정제 없이 사용하였다. LCMS (m/z): 583.4 (MH+), 0.87분.
단계 5. (+/-)-N-벤질-2-플루오로-4-(6-((1R,3R)-3-(메틸티오)시클로헥실)-3-피발아미도피라진-2-일)벤즈아미드
MeOH (430 μL) 중 (+/-)-(1S,3R)-3-(6-(4-(벤질카르바모일)-3-플루오로페닐)-5-피발아미도피라진-2-일)시클로헥실 메탄술포네이트 (25 mg, 0.043 mmol) 및 소듐 메탄티올레이트 (24.09 mg, 0.344 mmol)의 혼합물을 80℃에서 2시간 동안 가열하였다. 용매를 제거하고, 잔류물을 플래쉬 크로마토그래피에 의해 EtOAc (10%의 MeOH 함유)/헵탄으로 용리시키면서 정제하여 조 (+/-)-N-벤질-2-플루오로-4-(6-((1R,3R)-3-(메틸티오)시클로헥실)-3-피발아미도피라진-2-일)벤즈아미드 25 mg을 수득하였으며, 이를 후속 단계에 추가 정제 없이 사용하였다. LCMS (m/z): 535.3 (MH+), 1.09분.
단계 6. (+/-)-N-벤질-2-플루오로-4-(6-((1R,3R)-3-(메틸술포닐)시클로헥실)-3-피발아미도피라진-2-일)벤즈아미드
0℃에서 MeOH (327 μL) 중 트랜스 라세미체 (+/-)-N-벤질-2-플루오로-4-(6-((1R,3R)-3-(메틸티오)시클로헥실)-3-피발아미도피라진-2-일)벤즈아미드 (35 mg, 0.065 mmol)에 물 (327 μL) 중 옥손 (52.3 mg, 0.085 mmol)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 0℃에서 교반하고, 그 후로 실온에서 3시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 0℃에서 2 당량의 2 mL 물 중 티오황산나트륨 (20.70 mg, 0.131 mmol)에 의해 켄칭하였다. 30분 동안 교반한 다음, 0℃에서 6N NaOH를 첨가함으로써 염기성화시켰다. EtOAc로 희석하고, 황산나트륨 상에서 3회 건조시켰다. 이어서, 여과하고, 농축시켜 (+/-)-N-벤질-2-플루오로-4-(6-((1R,3R)-3-(메틸술포닐)시클로헥실)-3-피발아미도피라진-2-일)벤즈아미드 25 mg을 67.4% 수율로 수득하였으며, 이를 후속 단계에 추가 정제 없이 사용하였다. LCMS (m/z): 567.4 (MH+), 0.90분.
단계 7. (+/-)-4-(3-아미노-6-((1R,3R)-3-(메틸술포닐)시클로헥실)피라진-2-일)-N-벤질-2-플루오로벤즈아미드
MeOH (221 μL) 중 (+/-)-N-벤질-2-플루오로-4-(6-((1R,3R)-3-(메틸술포닐)시클로헥실)-3-피발아미도피라진-2-일)벤즈아미드 (25 mg, 0.044 mmol)에 탄산칼륨 (61.0 mg, 0.441 mmol)을 첨가하였다. 생성된 혼합물을 80℃에서 4시간 동안 가열하였다. 반응 혼합물을 여과하고, 농축시켰다. 자동-정제용으로 정제하여 (+/-)-4-(3-아미노-6-((1R,3R)-3-(메틸술포닐)시클로헥실)피라진-2-일)-N-벤질-2-플루오로벤즈아미드 5.4 mg을 20.11% 수율로 수득하였다. LCMS (m/z): 483.1 (MH+), 0.78분.
1H NMR (400MHz, MeOD-d4) δ ppm 8.00 - 7.81 (m, 2 H) 7.76 - 7.56 (m, 2 H) 7.43 - 7.16 (m, 5 H) 4.65 - 4.55 (m, 2 H) 3.61 - 3.51 (m, 1 H), 3.46 - 3.36 (m, 2 H) 2.87 - 2.97 (m, 3 H) 2.61 - 2.48 (m, 1 H) 2.19 - 1.95 (m, 3 H) 1.92 - 1.78 (m, 3 H).
실시예 14
4-(3-아미노-6-((1r,4r)-4-히드록시시클로헥실)피라진-2-일)-N-벤질-2-플루오로벤즈아미드의 합성
반응식 32
Figure 112016034409922-pct00057
단계 1. 5-(1,4-디옥사스피로[4.5]데스-7-엔-8-일)피라진-2-아민
5-브로모피라진-2-아민 (225 mg, 1.293 mmol)에 4,4,5,5-테트라메틸-2-(1,4-디옥사스피로[4.5]데스-7-엔-8-일)-1,3,2-디옥사보롤란 (482 mg, 1.810 mmol), PdCl2(dppf)-CH2Cl2 부가물 (84 mg, 0.103 mmol), DME (3.5 mL)에 이어서 마지막 탄산나트륨 2M (1.616 mL, 3.23 mmol)을 첨가하였다. 반응물을 120℃에서 15분 동안 마이크로웨이브처리하였다. 반응물에 DCM 80 mL를 첨가하고, 물 (1x)로 세척하고, 황산나트륨으로 건조시키고, 여과하고, 잔류물로 농축시켰다. 조 물질을 실리카 겔 크로마토그래피에 의해 12 그램 칼럼 (고체 로드)을 사용하여 10-90% 에틸 아세테이트 및 헵탄으로 용리시키면서 정제하였다. 목적 분획을 일정한 질량으로 농축시켜 목적 생성물 173 mg을 유리 염기로서 수득하였으며, 그대로 사용하였다 (56% 수율). LCMS (m/z): 234.2 (MH+), 0.43분;
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 8.01 (d, J=1.2 Hz, 1H), 7.80 (d, J=1.2 Hz, 1H), 6.33 (s, 2H), 6.27 (t, J=3.9 Hz, 1H), 3.89 (s, 4H), 2.52 (d, J=1.6 Hz, 2H), 2.33 (br. s., 2H), 1.76 (t, J=6.7 Hz, 2H).
단계 2. 5-(1,4-디옥사스피로[4.5]데칸-8-일)피라진-2-아민
아르곤으로 플러싱한 둥근 바닥 플라스크 중 5-(1,4-디옥사스피로[4.5]데스-7-엔-8-일)피라진-2-아민 (645 mg, 2.77 mmol)에 Pd-C 10% 데구사 (294 mg, 0.277 mmol)를 첨가하였다. 이어서, 아르곤 하에 시린지를 사용하여 MeOH (10 mL)를 첨가한 다음, 마지막에 수소 풍선을 첨가하였다. 플라스크를 배기시키고, 수소 (6 X)로 재충전하였다. 반응물을 수소 풍선 하에 실온에서 총 16시간 동안 교반하고, 이어서 LCMS를 수행하였다. 반응물을 아르곤으로 플러싱하고, DCM 25 mL를 첨가하였다. 조 혼합물을 셀라이트 플러그를 통해 여과하고, 일정한 질량으로 농축시켜 목적 생성물 635 mg을 유리 염기로서 수득하였으며, 이를 그대로 사용하였다 (98% 수율). LCMS (m/z): 236.2 (MH+), 0.41분;
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 7.78 (d, J=1.2 Hz, 1H), 7.74 (d, J=1.2 Hz, 1H), 6.09 (s, 2H), 3.85 (s, 4H), 2.52-2.60 (m, 1H), 1.65-1.78 (m, 6H), 1.49-1.61 (m, 2H).
단계 3. 3-브로모-5-(1,4-디옥사스피로[4.5]데칸-8-일)피라진-2-아민
5-(1,4-디옥사스피로[4.5]데칸-8-일)피라진-2-아민 (620 mg, 2.64 mmol)에 아세토니트릴 (20 mL)을 첨가한 다음, NBS (469 mg, 2.64 mmol)를 2분에 걸쳐 조금씩 첨가하였다. 반응물을 실온에서 20분 동안 교반하고, 포화 중탄산나트륨 용액으로 켄칭하고, 에틸 아세테이트 250 mL를 첨가하였다. 수층을 추출하고, 유기 층을 포화 중탄산나트륨, 물 (2x), 포화 염 용액으로 세척한 다음, 황산나트륨으로 건조시키고, 여과하고, 잔류물로 농축시켜 목적 생성물 650 mg을 수득하였으며, 그대로 사용하였다 (79% 수율). LCMS (m/z): 314.1/316.1 (MH+), 0.61분.
단계 4. 4-(3-아미노-6-(1,4-디옥사스피로[4.5]데칸-8-일)피라진-2-일)-N-벤질-2-플루오로벤즈아미드
3-브로모-5-(1,4-디옥사스피로[4.5]데칸-8-일)피라진-2-아민 (630 mg, 2.005 mmol)에 (4-(벤질카르바모일)-3-플루오로페닐)보론산 (767 mg, 2.81 mmol), PdCl2(dppf)CH2Cl2 부가물 (164 mg, 0.201 mmol), DME (9 mL)에 이어서 마지막 탄산나트륨 2M (3.01 mL, 6.02 mmol)을 첨가하였다. 반응물을 115℃에서 12분 동안 마이크로웨이브처리하였다. 반응물에 에틸 아세테이트 400 mL를 첨가하고, 물 (2x)로 세척하고, 황산나트륨으로 건조시키고, 여과하고, 잔류물로 농축시켰다. 조 물질을 실리카 겔 크로마토그래피에 의해 40 그램 칼럼을 사용하여 20-100% 에틸 아세테이트 및 헵탄으로 용리시키면서 정제하였다. 목적 분획을 일정한 질량으로 농축시켜 목적 생성물 432 mg을 유리 염기로서 수득하였으며, 그대로 사용하였다 (47% 수율). LCMS (m/z): 463.2 (MH+), 0.82분;
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 8.94 - 8.81 (m, 1H), 7.89 (s, 1H), 7.80 - 7.69 (m, 1H), 7.67 - 7.52 (m, 2H), 7.33 (d, J=4.3 Hz, 4H), 7.27 -7.18 (m, 1H), 6.09 (s, 2H), 4.49 (d, J=5.9 Hz, 2H), 3.85 (s, 4H), 2.70 - 2.61 (m, 1H), 1.84 -1.67 (m, 6H), 1.65 -1.48 (m, 2H).
단계 5. 4-(3-아미노-6-(4-옥소시클로헥실)피라진-2-일)-N-벤질-2-플루오로벤즈아미드
4-(3-아미노-6-(1,4-디옥사스피로[4.5]데칸-8-일)피라진-2-일)-N-벤질-2-플루오로벤즈아미드 (170 mg, 0.368 mmol)에 아세토니트릴 (3 mL), 물 (2 mL)에 이어서 HCl 3M 수용액 (0.613 mL, 1.838 mmol)을 첨가하였다. 반응물을 실온에서 30분 동안 교반하고, 이어서 LCMS를 수행하였다. 반응물에 에틸 아세테이트 200 mL를 첨가하고, 과량의 1M NaOH로 염기성화시켰다. 수성 층을 추출하고, 유기 층을 물 (3x)로 세척하고, 여과하고, 잔류물로 농축시켜 목적 생성물을 유리 염기로서 수득하였다. 정량적 수율 (0.368 mmol)을 가정하였다. LCMS (m/z): 419.3 (MH+), 0.75분.
단계 6. 4-(3-아미노-6-((1r,4r)-4-히드록시시클로헥실)피라진-2-일)-N-벤질-2-플루오로벤즈아미드
4-(3-아미노-6-(4-옥소시클로헥실)피라진-2-일)-N-벤질-2-플루오로벤즈아미드 (77 mg, 0.184 mmol)에 MeOH (3 mL)를 첨가하고, 0℃로 냉각시켰다. 이어서, 수소화붕소나트륨 (6.96 mg, 0.184 mmol)을 첨가하였다. 반응물을 20분 동안 교반하면서 이것이 실온으로 가온되도록 하고, 이어서 LCMS를 수행하였다. 조 LCMS는 예상한 바와 같이 약 9:1 (트랜스/시스) 이성질체를 나타내었다. 반응물을 과량의 포화 염화나트륨으로 켄칭하고, 실온에서 1시간 동안 교반하였다. 이어서, 에틸 아세테이트 150 mL를 첨가하고, 포화 중탄산나트륨, 물 (2x), 포화 염 용액으로 세척하고, 황산나트륨으로 건조시키고, 여과하고, 잔류물로 농축시켜 조 생성물 73 mg을 수득하였다. 조 생성물의 절반 (36.5 mg)을 DMSO 2.0 mL 중에 용해시키고, 여과하고, 정제용 HPLC에 의해 정제하고, 동결건조시켜 목적 생성물 4-(3-아미노-6-((1r,4r)-4-히드록시시클로헥실)피라진-2-일)-N-벤질-2-플루오로벤즈아미드 16.3 mg을 TFA 염으로서 (32% 수율) 수득하였다. LCMS (m/z): 421.3 (MH+), 0.69분;
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 8.82 (br. s., 1H), 7.83 (s, 1H), 7.64-7.73 (m, 1H), 7.45-7.61 (m, 2H), 7.25-7.31 (m, 4H), 7.14-7.23 (m, 1H), 4.43 (d, J=5.9 Hz, 2H), 1.66-1.91 (m, 3H), 1.38-1.57 (m, 2H), 1.11-1.31 (m, 2H).
실시예 15
4-(3-아미노-6-((1s,4s)-4-히드록시시클로헥실)피라진-2-일)-N-벤질-2-플루오로벤즈아미드의 합성
반응식 33
Figure 112016034409922-pct00058
4-(3-아미노-6-(4-옥소시클로헥실)피라진-2-일)-N-벤질-2-플루오로벤즈아미드 (77 mg, 0.184 mmol)에 THF (3 mL)를 첨가하고, 0℃로 냉각시켰다. 이어서, L-셀렉트리드 1M THF (0.460 mL, 0.460 mmol)를 첨가하였다. 반응물을 실온으로 가온하면서 20분 동안 교반하고, 이어서 LCMS를 수행하였다. 조 물질 LCMS는 예상한 바와 같이 약 9:1 초과의 (시스/트랜스) 이성질체를 나타내었다. 반응물을 과량의 5M NaOH로 염기성화시키고, 실온에서 1시간 동안 교반하였다. 이어서, 에틸 아세테이트 150 mL를 첨가하고, 물 (3x), 포화 염 용액으로 세척하고, 황산나트륨으로 건조시키고, 여과하고, 잔류물로 농축시켜 생성물 75 mg을 수득하였으며, 이를 그대로 사용하였다. 조 생성물의 절반 (36.5 mg)을 DMSO 2.0 mL 중에 용해시키고, 여과하고, 정제용 HPLC에 의해 정제하고, 동결건조시켜 목적 생성물 4-(3-아미노-6-((1s,4s)-4-히드록시시클로헥실)피라진-2-일)-N-벤질-2-플루오로벤즈아미드 23 mg (45% 수율)을 TFA 염으로서 수득하였다. LCMS (m/z): 421.3 (MH+), 0.72분;
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 8.87 (br. s., 1H), 7.89 (s, 1H), 7.79 - 7.70 (m, 1H), 7.67 - 7.45 (m, 2H), 7.33 (d, J=4.3 Hz, 4H), 7.28 - 7.21 (m, 1H), 6.06 (s, 2H), 4.49 (d, J=5.9 Hz, 2H), 4.30 (br. s., 1H), 3.84 (br. s., 1H), 2.01 - 1.84(m, 2H), 1.75 - 1.64 (m, 2H), 1.60 - 1.43 (m, 4H).
실시예 16
4-(3-아미노-6-((1s,4s)-4-(메틸술포닐)시클로헥실)피라진-2-일)-N-벤질-2-플루오로벤즈아미드의 합성
반응식 34
Figure 112016034409922-pct00059
단계 1. N-벤질-2-플루오로-4-(6-((1r,4r)-4-히드록시시클로헥실)-3-피발아미도피라진-2-일)벤즈아미드
4-(3-아미노-6-((1r,4r)-4-히드록시시클로헥실)피라진-2-일)-N-벤질-2-플루오로벤즈아미드 (0.105 g, 0.25 mmol)에 DCM (2.5 mL), TEA (0.105 mL, 0.750 mmol)에 이어서 피발로일 클로라이드 (0.045 g, 0.375 mmol)를 첨가하였다. 반응물을 실온에서 3시간 동안 교반하고, 이어서 LCMS를 수행하였다. 반응물에 에틸 아세테이트 150 mL를 첨가하고, 과량의 포화 비카르보네이트로 염기성화시켰다. 유기 층을 물 (3x), 포화 염 용액으로 세척하고, 황산나트륨으로 건조시키고, 여과하고, 잔류물로 농축시켜 생성물을 유리 염기로서 수득하였으며, 이를 그대로 사용하였다. 정량적 수율 (0.25 mmol)을 가정하였다. LCMS (m/z): 505.4 (MH+), 0.82분.
단계 2. (1r,4r)-4-(6-(4-(벤질카르바모일)-3-플루오로페닐)-5-피발아미도피라진-2-일)시클로헥실 메탄술포네이트
N-벤질-2-플루오로-4-(6-((1r,4r)-4-히드록시시클로헥실)-3-피발아미도피라진-2-일)벤즈아미드 (125 mg, 0.248 mmol)에 DCM (2.5 mL), TEA (0.104 mL, 0.743 mmol)를 첨가하고, 0℃로 냉각시킨 다음, 메탄술포닐 클로라이드 (42.6 mg, 0.372 mmol)를 첨가하였다. 반응물을 실온으로 가온되도록 하고, 2시간 동안 교반하고, 이어서 LCMS를 수행하였다. 이어서, 추가의 TEA (0.104 mL, 0.743 mmol) 및 메탄술포닐 클로라이드 (42.6 mg, 0.372 mmol)를 첨가하고, 실온에서 추가로 3시간 동안 총 5시간 동안 교반하였다. 반응물에 에틸 아세테이트 150 mL를 첨가하고, 과량의 포화 비카르보네이트로 염기성화시켰다. 유기 층을 물 (3x), 포화 염 용액으로 세척하고, 황산나트륨으로 건조시키고, 여과하고, 잔류물로 농축시켜 생성물을 유리 염기로서 수득하였으며, 이를 그대로 사용하였다. 정량적 수율 (0.248 mmol)을 가정하였다. LCMS (m/z): 583.3 (MH+), 0.90분.
단계 3. N-벤질-2-플루오로-4-(6-((1s,4s)-4-(메틸티오)시클로헥실)-3-피발아미도피라진-2-일)벤즈아미드
(1r,4r)-4-(6-(4-(벤질카르바모일)-3-플루오로페닐)-5-피발아미도피라진-2-일)시클로헥실 메탄술포네이트 (130 mg, 0.223 mmol)에 t-부탄올 (3.5 mL), 소듐 티오메톡시드 (235 mg, 3.35 mmol)를 첨가하였다. 반응물을 80℃에서 1시간 동안 가열하고, 이어서 LCMS를 수행하였다. 반응물이 냉각되도록 하였다. 이어서, 에틸 아세테이트 75 mL를 첨가하고, 포화 중탄산나트륨, 물 (2x), 포화 염 용액으로 세척하고, 황산나트륨으로 건조시키고, 여과하고, 잔류물로 농축시켜 생성물을 유리 염기로서 수득하였으며, 이를 그대로 사용하였다. 정량적 수율 (0.223 mmol)을 가정하였다. LCMS (m/z): 535.3 (MH+), 1.06분.
단계 4. N-벤질-2-플루오로-4-(6-((1s,4s)-4-(메틸술포닐)시클로헥실)-3-피발아미도피라진-2-일)벤즈아미드
N-벤질-2-플루오로-4-(6-((1s,4s)-4-(메틸티오)시클로헥실)-3-피발아미도피라진-2-일)벤즈아미드 (118 mg, 0.221 mmol)에 DCM (4 mL)을 첨가하였다. 이어서, 실온에서 교반하는 DCM (1 mL) 중 mCPBA (118 mg, 0.527 mmol)의 용액을 반응이 일어날 때까지 서서히 연화처리하고, 이어서 LCMS를 수행하였다. 이어서, 에틸 아세테이트 75 mL를 첨가하고, 포화 중탄산나트륨, 물 (2x), 포화 염 용액으로 세척하고, 황산나트륨으로 건조시키고, 여과하고, 잔류물로 농축시켰다. 조 물질을 DMSO 5 mL 중에 용해시키고, 여과하고, 정제용 HPLC에 의해 정제하였다. 목적 분획을 합하였다. 0.1% TFA를 함유하는 아세토니트릴/물 중 100 mL 용액으로서의 생성물을 후속 단계에 그대로 사용하였다. 정량적 수율 (0.221 mmol)을 가정하였다. LCMS (m/z): 567.4 (MH+), 0.85분.
단계 5. 4-(3-아미노-6-((1s,4s)-4-(메틸술포닐)시클로헥실)피라진-2-일)-N-벤질-2-플루오로벤즈아미드
0.1% TFA를 함유하는 물 (60 mL) 및 아세토니트릴 (40 mL)의 용액 중 N-벤질-2-플루오로-4-(6-((1s,4s)-4-(메틸술포닐)시클로헥실)-3-피발아미도피라진-2-일)벤즈아미드 (120 mg, 0.212 mmol)에 진한 HCl (2 mL, 65.8 mmol)을 첨가하였다. 반응물을 60℃에서 12시간 동안 교반하고, 이어서 LCMS를 수행하였다. 조 물질을 잔류물로 동결건조시켰다. 잔류물을 DMSO 중에 용해시키고, 정제용 HPLC에 의해 정제하고, 동결건조시켜 목적 생성물 4-(3-아미노-6-((1s,4s)-4-(메틸술포닐)시클로헥실)피라진-2-일)-N-벤질-2-플루오로벤즈아미드 10.2 mg을 TFA 염으로서 6% 전체 수율로 수득하였다. LCMS (m/z): 483.2 (MH+), 0.72분;
1H NMR (CD3OD) δ ppm 7.80 (s, 1H), 7.76 (t, J=7.6 Hz, 1H), 7.63 (dd, J=8.2, 1.6 Hz, 1H), 7.55 (dd, J=11.7, 1.2 Hz, 1H), 7.22-7.34 (m, 4H), 7.10-7.20 (m, 1H), 4.52 (s, 2H), 3.12 (dt, J=8.9, 4.4 Hz, 1H), 2.96 (t, J=4.9 Hz, 1H), 2.81 (s, 3H), 2.16-2.30 (m, 2H), 1.99-2.13 (m, 2H), 1.86-1.96 (m, 2H), 1.70-1.85 (m, 2H).
실시예 17
4-(3-아미노-6-((1r,4r)-4-(메틸술포닐)시클로헥실)피라진-2-일)-N-벤질-2-플루오로벤즈아미드의 합성
반응식 35
Figure 112016034409922-pct00060
반응식 35에 따라, 4-(3-아미노-6-((1s,4s)-4-히드록시시클로헥실)피라진-2-일)-N-벤질-2-플루오로벤즈아미드 (실시예 15)를 사용하여, 목적 생성물 4-(3-아미노-6-((1r,4r)-4-(메틸술포닐)시클로헥실)피라진-2-일)-N-벤질-2-플루오로벤즈아미드 4.5 mg을 TFA 염으로서 3% 전체 수율로 수득하였다. LCMS (m/z): 483.2 (MH+), 0.71분;
1H NMR (CD3OD) δ ppm 7.80-7.89 (m, 2H), 7.68 (dd, J=8.0, 1.4 Hz, 1H), 7.60 (dd, J=11.7, 1.6 Hz, 1H), 7.31-7.42 (m, 4H), 7.19-7.30 (m, 1H), 4.61 (s, 2H), 3.05-3.15 (m, 1H), 2.92 (s, 3H), 2.67-2.78 (m, 1H), 2.34 (br. s., 2H), 2.11 (br. s., 2H), 1.60-1.82 (m, 4H).
실시예 18
N-((S)-2-아미노-1-(3-클로로페닐)에틸)-4-(3-아미노-6-((1r,4S)-4-메톡시시클로헥실)피라진-2-일)-2-플루오로벤즈아미드의 합성
반응식 36
Figure 112016034409922-pct00061
단계 1. 4-(5-아미노피라진-2-일)시클로헥사논
5-(1,4-디옥사스피로[4.5]데칸-8-일)피라진-2-아민 (8.68 g, 45.4 mmol)에 아세토니트릴 (368 mL), 물 (245 mL) 및 3M HCl (76 mL)을 첨가하였다. 반응물을 실온에서 30분 동안 교반하였다. 반응물을 과량의 1M NaOH로 염기성화시킨 다음, 에틸 아세테이트로 희석하였다. 유기 층을 분리하였다. 수성 층을 EtOAc/2-메틸 THF (1:1)로 3회 잘 추출하였다. 유기 층을 합하고, Na2SO4 상에서 건조시키고, 여과하고, 농축시켜 생성물 6.91 g을 유리 염기로서 수득하였다. LCMS (m/z): 192.12 (MH+), 0.30분.
단계 2. 이미도디탄산, 2-(5-(4-옥소시클로헥실)피라진-2-일)-, 1,3-비스(1,1-디메틸에틸) 에스테르
DCM (105 mL) 중 4-(5-아미노피라진-2-일)시클로헥사논 (3.0 g, 15.69 mmol)에 디-tert-부틸 디카르보네이트 (10.27 g, 47.1 mmol) 및 N,N-디메틸피리딘-4-아민 (0.192 g, 1.569 mmol)을 첨가하였다. 혼합물을 실온에서 밤새 교반하였다. 반응 혼합물을 DCM으로 희석한 다음, 포화 중탄산나트륨 용액으로 세척하였다. 분리된 유기 층을 황산나트륨 상에서 건조시키고, 농축시켰다. 플래쉬 크로마토그래피 상에서 정제하고, 헵탄 중 0에서 50% 에틸 아세테이트로 용리시켜 목적 생성물 2.2 g을 수득하였다. LCMS (m/z): 392.7 (MH+), 0.91분.
단계 3. 이미도디탄산, 2-(5-(4-히드록시시클로헥실)피라진-2-일)-, 1,3-비스(1,1-디메틸에틸) 에스테르
이미도디탄산, 2-(5-(4-옥소시클로헥실)피라진-2-일)-, 1,3-비스(1,1-디메틸에틸) 에스테르 (350 mg, 0.894 mmol)를 EtOH (10 mL) 중에 용해시킨 다음, NaBH4 (50.7 mg, 1.341 mmol)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 30분 동안 교반하였다. 트랜스 및 시스 비는 TLC로부터 약 85:15이다. 포화 NaHCO3 용액을 반응물에 첨가하여 켄칭하였다. 이어서, 반응 혼합물을 EtOAc/2-메틸 THF (1:1)로 추출하였다. 유기 층을 합하고, 무수 Na2SO4 상에서 건조시키고, 농축시켜 조 생성물을 수득하였으며, 이를 후속 단계에 추가 정제 없이 사용하였다. LCMS (m/z): 394.3 (MH+), 0.89분.
단계 4. 이미도디탄산, 2-(5-(4-메톡시시클로헥실)피라진-2-일)-, 1,3-비스(1,1-디메틸에틸) 에스테르
이미도디탄산, 2-(5-(4-히드록시시클로헥실)피라진-2-일)-, 1,3-비스(1,1-디메틸에틸) 에스테르 (350 mg, 0.890 mmol), 산화은 (1.649 g, 7.12 mmol), 아세토니트릴 (2.22 mL) 및 메틸 아이오다이드 (1.112 mL, 17.79 mmol)의 혼합물을 밤새 교반하였다. EtOAc를 첨가하고, 고체를 여과하였다. 용매를 증발시키고, 잔류물을 플래쉬 크로마토그래피에 의해 0-100% EtOAc/헵탄으로 용리시키면서 정제하여 목적 트랜스 화합물 168 mg을 46.3% 수율로 수득하였다. LCMS (m/z): 408.3 (MH+), 1.10분.
단계 5. 5-((1r,4r)-4-메톡시시클로헥실)피라진-2-아민
DCM (4.123 mL) 중 이미도디탄산, 2-(5-(4-메톡시시클로헥실)피라진-2-일)-, 1,3-비스(1,1-디메틸에틸) 에스테르 (168 mg, 0.412 mmol)에 HCl (디옥산 중 4M) (4.123 mL, 16.49 mmol)을 첨가하고, 반응 혼합물을 실온에서 밤새 교반하였다. 농축시키고, EtOAc를 첨가하였다. 포화 NaHCO3, 및 물로 세척하였다. 수성 층을 EtOAc 및 2-메틸 THF (1:1)로 3회 추출하였다. Na2SO4 상에서 건조시키고, 여과하고, 농축시켜 목적 트랜스 생성물을 수득하였다. LCMS (m/z): 208 (MH+), 0.42분.
단계 6. 3-브로모-5-((1r,4r)-4-메톡시시클로헥실)피라진-2-아민
아세토니트릴 (8.877 mL) 중 5-((1r,4r)-4-메톡시시클로헥실)피라진-2-아민 (92 mg, 0.444 mmol)의 용액에 0℃에서 NBS (83 mg, 0.466 mmol)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 0℃에서 15분 동안 교반하였다. 포화 Na2SO3 및 NaHCO3으로 켄칭한 후, EtOAc 및 2-메틸 THF (1:1)로 3회 추출하였다. 유기 층을 합하고, Na2SO4 상에서 건조시키고, 여과하고, 농축시켜 목적 트랜스 화합물 127 mg을 정량적 수율로 수득하였다. LCMS (m/z): 288 (MH+), 0.72분.
단계 7. tert-부틸 ((S)-2-(4-(3-아미노-6-((1r,4S)-4-메톡시시클로헥실)피라진-2-일)-2-플루오로벤즈아미도)-2-(3-클로로페닐)에틸)카르바메이트
2 mL MW 바이알에 들은 3-브로모-5-((1r,4r)-4-메톡시시클로헥실)피라진-2-아민 (35 mg, 0.122 mmol)에 (S)-(4-((2-((tert-부톡시카르보닐)아미노)-1-(3-클로로페닐)에틸)카르바모일)-3-플루오로페닐)보론산 (64.1 mg, 0.147 mmol), PdCl2(dppf) (8.95 mg, 0.012 mmol), DME (917 μL) 및 2M Na2CO3 용액 (306 μL)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 마이크로웨이브 합성기 (12분, 120℃)에서 가열하였다. 반응 혼합물을 EtOAc로 희석하고, 물로 3회 세척하고, Na2SO4 상에서 건조시키고, 여과하고, 농축시켰다. 조 생성물을 플래쉬 크로마토그래피에 의해 정제하여 목적 트랜스 생성물 28 mg을 38.3% 수율로 수득하였다.
단계 8. N-((S)-2-아미노-1-(3-클로로페닐)에틸)-4-(3-아미노-6-((1r,4S)-4-메톡시시클로헥실)피라진-2-일)-2-플루오로벤즈아미드
tert-부틸 ((S)-2-(4-(3-아미노-6-((1r,4S)-4-메톡시시클로헥실)피라진-2-일)-2-플루오로벤즈아미도)-2-(3-클로로페닐)에틸)카르바메이트 (28 mg, 0.047 mmol), TFA (0.4 mL, 0.047 mmol) 및 CH2Cl2 (1 mL)의 혼합물을 실온에서 30분 동안 교반하였다. 용매를 증발시키고, 잔류물을 DMSO 중에 용해시키고, 자동-정제용으로 정제하여 목적 트랜스 생성물 15 mg을 TFA 염으로서 51.3% 수율로 수득하였다. LCMS (m/z): 498.2 (MH+), 0.76분;
1H NMR (400 MHz, CD3OD) δ ppm 7.94 - 7.85 (m, 2 H) 7.70 (dd, J=8.22, 1.56 Hz, 1 H) 7.62 (dd, J=11.93, 1.37 Hz, 1 H) 7.55 (s, 1 H) 7.49 - 7.34 (m, 3 H) 5.49 (dd, J=9.00, 5.87 Hz, 1 H) 3.53 - 3.41 (m, 2 H) 3.38 (s, 3 H) 2.70- 2.59 (m, 2 H) 2.20 (d, J=9.78 Hz, 2 H) 1.98 (d, J=12.91 Hz, 2 H) 1.65 (qd, J=13.04, 3.13 Hz, 2 H) 1.41 - 1.27 (m, 2 H).
(1s,4s)-4-(5-아미노-6-브로모피라진-2-일)-1-메틸시클로헥산올 및 (1r,4r)-4-(5-아미노-6-브로모피라진-2-일)-1-메틸시클로헥산올의 합성
반응식 37
Figure 112016034409922-pct00062
단계 1. tert-부틸 (5-((1s,4s)-4-히드록시-4-메틸시클로헥실)피라진-2-일)카르바메이트 및 tert-부틸 (5-((1r,4r)-4-히드록시-4-메틸시클로헥실)피라진-2-일)카르바메이트
THF (11.8 mL) 중 N,N-디-Boc-4-(5-아미노피라진-2-일)시클로헥사논 (657 mg, 1.678 mmol)을 메틸리튬 (1.469 mL, 2.350 mmol)으로 -78℃에서 처리하였다. 반응물을 -78℃에서 2시간 동안 교반하였다. 메틸리튬 (1.469 mL, 2.350 mmol)을 추가로 첨가한 후, 반응 혼합물을 -78℃에서 추가로 2시간 동안 교반하였다. 이 과정을 1회 더 반복하였다. 이어서, 반응 혼합물을 메탄올 및 물로 켄칭하였다. 생성된 혼합물을 농축시키고, 잔류물을 에틸 아세테이트 중에 현탁시켰다. 유기 층을 물 및 염수로 세척하고, 무수 Na2SO4 상에서 건조시키고, 여과하고, 농축시켰다. 조 부분입체이성질체 혼합물을 크로마토그래피 (헥산 중 0-100% 에틸 아세테이트)에 의해 정제하였다. tert-부틸 (5-((1s,4s)-4-히드록시-4-메틸시클로헥실)피라진-2-일)카르바메이트 (26.7% 수율 중)에 대해, LCMS (m/z): 308.7 (MH+), 0.79분. tert-부틸 (5-((1r,4r)-4-히드록시-4-메틸시클로헥실)피라진-2-일)카르바메이트 (23.3% 수율)에 대해, LCMS (m/z): 308.7 (MH+), 0.75분.
단계 2. (1s,4s)-4-(5-아미노피라진-2-일)-1-메틸시클로헥산올
DCM 중 tert-부틸 (5-((1s,4s)-4-히드록시-4-메틸시클로헥실)피라진-2-일)카르바메이트 (138 mg, 0.449 mmol)에 HCl (디옥산 중 4 M) (4489 μL, 17.96 mmol)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 밤새 교반하였다. EtOAc로 희석하고, 포화 NaHCO3으로 세척하였다. 분리 없이, Na2SO4로 건조시켰다. 여과하고, EtOAc로 세척하였다. 농축시켜 목적 생성물 93 mg을 정량적 수율로 수득하였다. LCMS (m/z): 208 (MH+), 0.41분.
단계 3. (1s,4s)-4-(5-아미노-6-브로모피라진-2-일)-1-메틸시클로헥산올
아세토니트릴 (8974 μL) 중 (1s,4s)-4-(5-아미노피라진-2-일)-1-메틸시클로헥산올 (93 mg, 0.449 mmol)의 용액에 0℃에서 NBS (80 mg, 0.449 mmol)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 0℃에서 15분 동안 교반하였다. NaHCO3으로 켄칭한 후, EtOAc로 3회 추출하였다. 유기 층을 합하고, 물, 및 염수로 세척하였다. Na2SO4 상에서 건조시키고, 여과하고, 농축시켜 (1s,4s)-4-(5-아미노-6-브로모피라진-2-일)-1-메틸시클로헥산올 100 mg을 78% 수율로 수득하였다. LCMS (m/z): 288 (MH+), 0.60분.
단계 4. (1r,4r)-4-(5-아미노피라진-2-일)-1-메틸시클로헥산올 및 단계 5. (1r,4r)-4-(5-아미노-6-브로모피라진-2-일)-1-메틸시클로헥산올
단계 2 및 3에 따라, (1r,4r)-4-(5-아미노피라진-2-일)-1-메틸시클로헥산올을 사용하여, (1r,4r)-4-(5-아미노-6-브로모피라진-2-일)-1-메틸시클로헥산올을 수득하였다. LCMS (m/z): 288 (MH+), 0.57분.
실시예 19 및 20
메틸 3-(5-아미노-6-(4-(벤질카르바모일)-3-플루오로페닐)피라진-2-일)프로파노에이트 및 4-(3-아미노-6-(3-(메틸아미노)-3-옥소프로필)피라진-2-일)-N-벤질-2-플루오로벤즈아미드의 합성
반응식 38
Figure 112016034409922-pct00063
단계 1. 메틸 3-(5-아미노피라진-2-일)프로피올레이트
마이크로웨이브 바이알 5 mL에 5-아이오도피라진-2-아민 (100 mg, 0.452 mmol), 메틸 프로피올레이트 (161 μL, 1.810 mmol), 탄산칼륨 (125 mg, 0.905 mmol), 아이오딘화구리 (I) (3.45 mg, 0.018 mmol), 및 THF (1508 μL)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 65℃에서 2시간 동안 가열하였다. 반응 혼합물을 물로 희석하고, EtOAc로 추출하였다. 유기 층을 무수 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 진공 하에 증발시켰다. 조 생성물을 플래쉬 크로마토그래피 (DCM 중 20% EtOAc)에 의해 정제하여 메틸 3-(5-아미노피라진-2-일)프로피올레이트 (38%)를 수득하였다. LCMS (m/z): 178.4 (MH+), 0.48분.
단계 2. 메틸 3-(5-아미노피라진-2-일)프로파노에이트
MeOH (847 μL) 중 메틸 3-(5-아미노피라진-2-일)프로피올레이트 (30 mg, 0.169 mmol)의 용액에 Pd-C (36.0 mg, 0.034 mmol)를 첨가하였다. 용액을 N2 스트림에 의해 15분 동안 탈기시켰다. 수소 기체로 플러싱한 후, 수소 풍선을 장착하고, 반응 혼합물을 16시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 셀라이트를 통해 여과하였다. 휘발성 물질을 진공 하에 제거하였다. 조 메틸 3-(5-아미노피라진-2-일)프로파노에이트를 수득하고 (81%), 후속 단계에 추가 정제 없이 사용하였다. LCMS (m/z): 182.1 (MH+), 0.31분.
단계 3. 메틸 3-(5-아미노-6-브로모피라진-2-일)프로파노에이트
CH3CN (690 μL) 중 메틸 3-(5-아미노피라진-2-일)프로파노에이트 (25 mg, 0.138 mmol)의 용액에 NBS (24.56 mg, 0.138 mmol)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 1시간 동안 교반하였다. Na2S2O3 용액으로 켄칭한 후, 반응 혼합물을 NaHCO3 용액과 20분 동안 교반하고, EtOAc로 추출하였다. 유기 층을 물 및 염수로 세척하고, Na2SO4 상에서 건조시키고, 여과하고, 진공 하에 농축시켰다. 조 메틸 3-(5-아미노-6-브로모피라진-2-일)프로파노에이트를 수득하였다 (28%). LCMS (m/z): 260.2/262.2 (MH+), 0.54분.
단계 4. 메틸 3-(5-아미노-6-(4-(벤질카르바모일)-3-플루오로페닐)피라진-2-일)프로파노에이트
DME (256 μL) 중 메틸 3-(5-아미노-6-브로모피라진-2-일)프로파노에이트 (10 mg, 0.038 mmol), 4-(벤질카르바모일)-3-플루오로페닐보론산 (13.65 mg, 0.050 mmol) 및 PdCl2(dppf) (2.81 mg, 3.84 μmol)의 용액에 2M Na2CO3 (3.87 mL)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 마이크로웨이브 합성기 (120℃, 10분)에서 가열하였다. LCMS (m/z): 409.2 (에스테르에 대한 MH+), 0.75분; 395.2 (매우 소량의 산, 그러나 보론산 에스테르와 혼합된 것에 대한 MH+), 0.66분. 반응 혼합물에, 무수 황산나트륨을 첨가하고, 여과하고, 농축시켰다. 조 생성물을 정제용 HPLC에 의해 정제하고, 동결건조시켜 메틸 3-(5-아미노-6-(4-(벤질카르바모일)-3-플루오로페닐)피라진-2-일)프로파노에이트 (12%)를 TFA 염으로서 수득하였다. LCMS (m/z): 409.1 (MH+), 0.73분;
1H NMR (400MHz, MeOH-d4) δ ppm 7.89 - 7.76 (m, 2 H), 7.69 - 7.61 (m, 1 H), 7.60 - 7.51 (m, 1 H), 7.42 - 7.28 (m, 5 H), 7.28 - 7.20 (m, 1 H), 4.64 - 4.55 (m, 2 H), 3.62 (s, 3 H), 3.06 - 2.93 (m, 2 H), 2.79 - 2.67 (m, 2 H).
단계 5. 3-(5-아미노-6-브로모피라진-2-일)프로판산
MeOH (961 μL) 및 H2O (96 μL) 중 메틸 3-(5-아미노-6-브로모피라진-2-일)프로파노에이트 (55 mg, 0.211 mmol)의 용액에 탄산칼륨 (170 mg, 1.230 mmol)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 밤새 교반하였다. 반응 혼합물에, 무수 Na2SO4를 첨가하였다. EtOAc (3 mL)로 희석하고, 여과한 후, 휘발성 물질을 진공 하에 제거하였다. 조 3-(5-아미노-6-브로모피라진-2-일)프로판산을 수득하고, 후속 단계에 추가 정제 없이 사용하였다. LCMS (m/z): 246.0/248.0 (MH+, 주요), 0.26분.
단계 6. 3-(5-아미노-6-브로모피라진-2-일)-N-메틸프로판아미드
DMF (1300 μL) 중 3-(5-아미노-6-브로모피라진-2-일)프로판산 (32 mg, 0.130 mmol)의 용액에 TBTU (62.6 mg, 0.195 mmol), DIEA (68.1 μL, 0.390 mmol), 및 메탄아민 히드로클로라이드 (9.66 mg, 0.143 mmol)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 3시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 EtOAc로 추출하였다. 유기 층을 물 및 염수로 세척하고, Na2SO4 상에서 건조시키고, 여과하고, 진공 하에 농축시켰다. 조 3-(5-아미노-6-브로모피라진-2-일)-N-메틸프로판아미드 (74%)를 수득하고, 후속 단계에 추가 정제 없이 사용하였다. LCMS (m/z): 259/261 (MH+), 0.35분.
단계 7. 4-(3-아미노-6-(3-(메틸아미노)-3-옥소프로필)피라진-2-일)-N-벤질-2-플루오로벤즈아미드
반응식 38에서의 단계 4에 따라, 3-(5-아미노-6-브로모피라진-2-일)-N-메틸프로판아미드를 사용하여, 4-(3-아미노-6-(3-(메틸아미노)-3-옥소프로필)피라진-2-일)-N-벤질-2-플루오로벤즈아미드를 수득하였다 (24%). LCMS (m/z): 408.1 (MH+), 0.51분;
1H NMR (400MHz, MeOH-d4) δ ppm 7.89 - 7.78 (m, 2 H), 7.68 - 7.51 (m, 2 H), 7.41 - 7.29 (m, 4 H), 7.26 (d, J = 7.1 Hz, 1 H), 4.60 (s, 2 H), 2.98 (t, J = 7.3 Hz, 2 H), 2.66 (s, 3 H), 2.57 (t, J = 7.3 Hz, 2 H).
2-(5-아미노-6-브로모피라진-2-일)에탄올의 합성
반응식 39
Figure 112016034409922-pct00064
단계 1. 5-알릴피라진-2-아민
5-브로모피라진-2-아민 (1.3 g, 7.47 mmol)의 용액에 2-알릴-,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-디옥사보롤란 (1.883 g, 11.21 mmol), PdCl2(dppf)CH2Cl2 부가물 (0.610 g, 0.747 mmol) 및 CsF (3.40 g, 22.41 mmol)를 첨가하고, 반응 혼합물을 질소로 퍼징하였다. 이어서, 반응 혼합물을 100℃에서 오일 조 중에서 3시간 동안 가열하였다. 반응 혼합물을 셀라이트를 통해 여과하고, EtOAc에 의해 세척하고, 여과물을 EtOAc와 물 사이에 분배하였다. 유기부를 무수 황산나트륨 상에서 건조시키고, 진공 하에 농축시켰다. 조 물질을 플래쉬 크로마토그래피 칼럼에 의해 정제하여 5-알릴피라진-2-아민을 37% 수율로 수득하였다. LCMS (m/z): 136.0 (MH+), 0.30분.
단계 2. 2-(5-아미노피라진-2-일)에탄올
DCM (26.6 mL) 중 5-알릴피라진-2-아민 (180 mg, 1.332 mmol)을 -78℃로 냉각시킨 다음, 오존을 용액이 청색으로 변할 때까지 10분 동안 버블링하였다. 이어서, 질소를 5분 동안 퍼징하였다. 에탄올 (10 mL) 중 NaBH4 (151 mg, 4.00 mmol)를 천천히 첨가하였다. 반응 혼합물이 실온으로 돌아오도록 하였다. 1시간 후, 포화 NH4Cl을 천천히 첨가한 다음, 반응 혼합물을 CHCl3/IPA(7:3) (3회)에 의해 추출하고, 유기부를 건조시키고, 농축시켜 조 생성물을 수득하였다. 조 생성물을 후속 단계 반응에 정제 없이 사용하였다. LCMS (m/z): 140.0 (MH+), 0.21분.
단계 3. 2-(5-아미노-6-브로모피라진-2-일)에탄올
CH3CN (719 μL) 중 2-(5-아미노피라진-2-일)에탄올 (30 mg, 0.216 mmol)의 용액에 0℃에서 NBS (38.4 mg, 0.216 mmol)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 0℃에서 30분 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 포화 NaHCO3에 의해 켄칭한 다음, EtOAc에 의해 추출하였다. 합한 유기 층을 물 및 염수로 세척하고, 무수 황산나트륨 상에서 건조시켰다. 여과하고, 진공 하에 농축시켜 조 2-(5-아미노-6-브로모피라진-2-일)에탄올을 수득하였으며, 이를 후속 단계 반응에 정제 없이 사용하였다. LCMS (m/z): 218.0/220.0 (MH+), 0.33분.
3-브로모-5-(2-메톡시에틸)피라진-2-아민의 합성
반응식 40
Figure 112016034409922-pct00065
단계 1. N,N-디-tert-부틸 (5-알릴피라진-2-일)카르바메이트
CH2Cl2 (29.6 mL) 중 5-알릴피라진-2-아민 (1.2 g, 8.88 mmol)의 용액에 실온에서 Boc2O (4.07 g, 18.64 mmol) 및 DMAP (1.627 g, 13.32 mmol)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 밤새 교반하였다. 포화 NaHCO3으로 켄칭한 후, 반응 혼합물을 CH2Cl2로 3회 추출하였다. 합한 유기 층을 물 및 염수로 세척하고, 무수 황산나트륨 상에서 건조시켰다. 여과하고, 진공 하에 농축시켰다. 목적물을 플래쉬 칼럼 크로마토그래피에 의해 백색 고체 (1.1 g, 37% 수율)로서 수득하였다. Rf (TLC) = 0.3 (헥산 중 20% EtOAc). LCMS (m/z): 336.2 (MH+), 1.04분.
단계 2. N,N-디-tert-부틸 (5-(2-히드록시에틸)피라진-2-일)카르바메이트
DCM (32.8 mL) 중 N,N-디-tert-부틸 (5-알릴피라진-2-일)카르바메이트 (1.1 g, 3.28 mmol)의 용액을 -78℃로 냉각시키고, 오존을 청색이 나타날 때까지 버블링한 다음, 질소를 5분 동안 퍼징하였다. 메탄올 (20 mL) 중 NaBH4 (0.74 g, 19.6 mmol)를 천천히 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온으로 돌아오도록 하였다. 2시간 후, 포화 NH4Cl 용액을 첨가하고, 반응 혼합물을 EtOAc와 물 사이에 분배하였다. 유기부를 NaHCO3, 물 및 염수로 세척하고, 무수 Na2SO4 상에서 건조시키고, 여과하고, 농축시켰다. 조 생성물을 후속 단계 반응에 정제 없이 사용하였다. LCMS (m/z): 340.3 (MH+), 0.77분.
단계 3. N,N-디-tert-부틸 (5-(2-메톡시에틸)피라진-2-일)카르바메이트
MeI (7.7 mL) 중 N,N-디-tert-부틸 (5-(2-히드록시에틸)피라진-2-일)카르바메이트 (240 mg, 0.707 mmol)의 용액에 산화은 (983 mg, 4.24 mmol)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 밤새 교반하였다. 반응 혼합물을 셀라이트를 통해 여과하고, EtOAc 및 메탄올로 세척하고, 유기부를 포화 NaHCO3, 물 및 염수로 세척하고, 건조시키고, 농축시켰다. 조 물질을 후속 단계 반응에 정제 없이 사용하였다. LCMS (m/z): 354.2 (MH+), 0.92분.
단계 4. 5-(2-메톡시에틸)피라진-2-아민
DCM (1.9 mL) 중 N,N-디-tert-부틸 (5-(2-메톡시에틸)피라진-2-일)카르바메이트 (200 mg, 0.566 mmol)에 TFA (872 μL, 11.32 mmol)를 첨가하고, 반응 혼합물을 실온에서 1시간 동안 교반하고, 반응 혼합물에 5 mL 톨루엔을 첨가하고, 농축 건조시켰다. 조 물질을 후속 단계 반응에 정제 없이 사용하였다. LCMS (m/z): 154.1 (MH+), 0.27분.
단계 5. 3-브로모-5-(2-메톡시에틸)피라진-2-아민
DCM (1.7 mL) 중 5-(2-메톡시에틸)피라진-2-아민 (80 mg, 0.522 mmol)의 용액에 실온에서 NBS (93 mg, 0.522 mmol)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 1시간 동안 교반하였다. NaHCO3으로 켄칭한 후, 반응 혼합물을 DCM으로 3회 추출하였다. 합한 유기 층을 물 및 염수로 세척하고, 무수 황산나트륨 상에서 건조시켰다. 조 물질을 후속 단계 반응에 정제 없이 사용하였다. LCMS (m/z): 232.1/234.1 (MH+), 0.49분.
실시예 21
4-(3-아미노-6-(2-(메틸술포닐)에틸)피라진-2-일)-N-벤질-2-플루오로벤즈아미드의 합성
반응식 41
Figure 112016034409922-pct00066
단계 1. 2-(5-(비스(tert-부톡시카르보닐)아미노)피라진-2-일)에틸 메탄술포네이트
DCM (10 mL) 중 N,N-디-tert-부틸 (5-(2-히드록시에틸)피라진-2-일)카르바메이트 (450 mg, 1.326 mmol)에 피리딘 (0.429 mL, 5.30 mmol)을 첨가하고, 빙조를 사용하여 0℃로 냉각시켰다. 이어서, 메실-Cl (0.382 mL, 4.91 mmol)을 첨가하고, 반응물을 실온으로 가온되도록 하고, 16시간 동안 교반하였다. 반응물에 에틸 아세테이트 및 포화 중탄산나트륨 150 mL를 첨가하였다. 유기 층을 추출하고, 포화 중탄산나트륨, 물 (3x)로 다시 세척하고, 여과하고, 황산나트륨으로 건조시키고, 일정한 질량으로 농축시켜 목적 생성물 540 mg을 수득하였으며, 이를 그대로 사용하였다 (98% 수율). LCMS (m/z): 418.3 (MH+), 0.89분;
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ ppm 8.50 (s, 1H), 8.38 (s, 1H), 4.67 (t, J=6.3 Hz, 2H), 3.28 (t, J=6.3 Hz, 2H), 2.94 (s, 3H), 1.45 (s, 18H).
단계 2. tert-부틸 5-(2-(메틸티오)에틸)피라진-2-일카르바메이트
DMF (7 mL) 중 2-(5-(비스(tert-부톡시카르보닐)아미노)피라진-2-일)에틸 메탄술포네이트 (540 mg, 1.293 mmol)에 소듐 티오메톡시드 (408 mg, 5.82 mmol)를 첨가하고, 85℃에서 3시간 동안 교반하고, 이어서 LCMS를 수행하였다. 반응물이 냉각되도록 하고, 에틸 아세테이트 및 포화 중탄산나트륨 200 mL를 첨가하였다. 유기 층을 추출하고, 물 (3x), 포화 염 용액으로 세척하고, 황산나트륨으로 건조시키고, 2 cm 실리카 겔 플러그를 통해 여과하고, 에틸 아세테이트로 플러싱하였다. 용매를 일정한 질량으로 농축시켜 목적 생성물 294 mg을 유리 염기로서 수득하였으며, 이를 그대로 사용하였다 (84% 수율). LCMS (m/z): 270.4 (MH+), 0.84분.
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ ppm 9.19 (s, 1H), 8.08 (d, J=1.2 Hz, 1H), 7.20 (br. s., 1H), 2.99-3.08 (m, 2H), 2.79-2.94 (m, 2H), 2.12 (s, 3H), 1.54 (s, 9H).
단계 3. tert-부틸 5-(2-(메틸술포닐)에틸)피라진-2-일카르바메이트
DCM (10 mL) 중 tert-부틸 5-(2-(메틸티오)에틸)피라진-2-일카르바메이트 (292 mg, 1.084 mmol)에 실온에서 교반하는 DCM (8.7 mL) 중 40% (3.5 mL)의 mCPBA (972 mg, 4.34 mmol)의 새로이 제조한 용액을 첨가하고, 이어서 LCMS를 수행하였다. 30분 후, 추가 15% (상기 mCPBA 용액 1.3 mL)를 첨가하고, 30분 동안 교반하고, 이어서 LCMS를 수행하였다. 이어서, 추가 5% (상기 mCPBA 용액 0.044 mL)를 첨가하고, 30분 동안 추가로 교반하였다. 이어서, 반응물을 LCMS를 수행하였다. 반응물에 에틸 아세테이트 및 과량의 포화 중탄산나트륨 200 mL를 첨가하였다. 유기 층을 추출하고, 포화 중탄산나트륨, 물 (3x)로 다시 세척하고, 여과하고, 일정한 질량으로 농축시켜 목적 생성물 320 mg을 수득하였으며, 이를 그대로 사용하였다 (98% 수율). LCMS (m/z): 302.1 (MH+), 0.62분;
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ ppm 9.20 (s, 1H), 8.14 (s, 1H), 7.23 (br. s., 1H), 3.47-3.57 (m, 2H), 3.26-3.36 (m, 2H), 2.86-2.93 (m, 3H), 1.55 (s, 9H).
단계 4. 5-(2-(메틸술포닐)에틸)피라진-2-아민
DCM (6 mL) 중 tert-부틸 5-(2-(메틸술포닐)에틸)피라진-2-일카르바메이트 (320 mg, 1.062 mmol)에 TFA (2.5 mL, 32.4 mmol)를 첨가하고, 실온에서 1시간 동안 교반하였다. 용매를 일정한 질량으로 농축시켰다. 생성물을 고체 지지된 0.8 mmol/그램에서의 카르보네이트 2.5 그램과 아세토니트릴 6 mL를 사용하여 유리 염기성화시키고, 5분 동안 교반하였다. 고체 지지체를 여과하고, 아세토니트릴로 플러싱하였다. 생성물을 일정한 질량으로 농축시켜 목적 생성물을 수득하였으며, 이를 그대로 사용하여, 정량적 수율을 가정하였다 (1.062 mmol). LCMS (m/z): 202.1 (MH+), 0.20분.
단계 5. 3-브로모-5-(2-(메틸술포닐)에틸)피라진-2-아민
아세토니트릴 (6 mL) 중 5-(2-(메틸술포닐)에틸)피라진-2-아민 (213 mg, 1.06 mmol)에 NBS (179 mg, 1.007 mmol)를 첨가하고, 실온에서 1시간 동안 교반하였다. 용매를 잔류물로 농축시켰다. 조 물질에 에틸 아세테이트를 첨가하고, 포화 탄산나트륨, 물 (2x)로 세척하고, 황산나트륨으로 건조시키고, 여과하고, 일정한 질량으로 농축시켜 목적 생성물 210 mg을 유리 염기로서 수득하였으며, 이를 그대로 사용하였다 (71% 수율). LCMS (m/z): 280.0/282.0 (MH+), 0.38분.
단계 6. 4-(3-아미노-6-(2-(메틸술포닐)에틸)피라진-2-일)-N-벤질-2-플루오로벤즈아미드
3-브로모-5-(2-(메틸술포닐)에틸)피라진-2-아민 (126 mg, 0.405 mmol)에 N-벤질-2-플루오로-4-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-디옥사보롤란-2-일)벤즈아미드 (144 mg, 0.405 mmol), PdCl2(dppf)-CH2Cl2부가물 (33.1 mg, 0.040 mmol), DME (1.5 mL)에 이어서 탄산나트륨 2 M 수용액 (0.607 mL, 1.214 mmol)을 첨가하였다. 반응물을 125℃에서 12분 동안 마이크로웨이브처리하였고, 이어서 LCMS를 수행하였다. 반응물에 DME 5mL 및 MeOH 5 mL를 첨가하고, 여과하고, 잔류물로 농축시켰다. 조 물질을 DMSO 2.5 mL 중에 용해시키고, 정제용 HPLC에 의해 정제하고, 여과하고, TFA 염으로 동결건조시켰다. TFA 염에 에틸 아세테이트 200 mL를 첨가하고, 포화 탄산나트륨 (3x), 물 (3x)로 세척하고, 황산나트륨으로 건조시키고, 여과하고, 일정한 질량으로 농축시켜 목적 생성물 4-(3-아미노-6-(2-(메틸술포닐)에틸)피라진-2-일)-N-벤질-2-플루오로벤즈아미드 59 mg을 유리 염기로서 34% 수율로 수득하였다. LCMS (m/z): 429.2 (MH+), 0.65분;
1H NMR (400 MHz, CD3OD) δ ppm 7.95 (s, 1H), 7.83 (t, J=7.6 Hz, 1H), 7.67 (dd, J=8.0, 1.4 Hz, 1H), 7.59 (dd, J=11.7, 1.2 Hz, 1H), 7.29-7.42 (m, 4H), 7.20-7.28 (m, 1H), 4.59 (s, 2H), 3.48-3.57 (m, 2H), 3.18 (dd, J=9.0, 6.7 Hz, 2H), 2.96 (s, 3H).
실시예 22, 23, 및 24
(+/-)-4-(3-아미노-6-(2-히드록시프로필)피라진-2-일)-N-벤질-2-플루오로벤즈아미드, (R)-4-(3-아미노-6-(2-히드록시프로필)피라진-2-일)-N-벤질-2-플루오로벤즈아미드, 및 (S)-4-(3-아미노-6-(2-히드록시프로필)피라진-2-일)-N-벤질-2-플루오로벤즈아미드의 합성
반응식 42
Figure 112016034409922-pct00067
단계 1. 4,4,5,5-테트라메틸-2-(2-메틸알릴)-1,3,2-디옥사보롤란
THF (65.1 mL) 중 마그네슘 터닝 (1.139 g, 46.9 mmol)의 현탁액에 질소 하에 실온에서 4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-디옥사보롤란 (5.67 mL, 39.1 mmol)을 첨가하였다. 3-브로모-2-메틸프로프-1-엔 (3.97 mL, 39.1 mmol)을 천천히 첨가하고, 30분 후, 추가의 3-브로모-2-메틸프로프-1-엔 (3.97 mL, 39.1 mmol)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 1시간 동안 교반하였다. 헵탄을 첨가하고, 이어서 1N HCl을 첨가하였다. 이어서, 반응 혼합물을 헵탄으로 추출하였다. 유기부를 물 및 염수로 세척하고, 건조시키고, 농축시켜 4,4,5,5-테트라메틸-2-(2-메틸알릴)-1,3,2-디옥사보롤란을 수득하였다. 생성물을 후속 단계에 정제 없이 사용하였다.
1H NMR (400MHz,CDCl3) δ ppm 4.67 (d, J = 6.7 Hz, 2 H), 1.77 (s, 3 H), 1.34 - 1.20 (m, 12 H).
단계 2. 5-(2-메틸알릴)피라진-2-아민
5-브로모피라진-2-아민 (1 g, 5.75 mmol)의 용액에 4,4,5,5-테트라메틸-2-(2-메틸알릴)-1,3,2-디옥사보롤란 (1.360 g, 7.47 mmol), PdCl2(dppf)-DCM 부가물 (0.469 g, 0.575 mmol), CsF (2.62 g, 17.24 mmol)를 첨가하고, 질소를 통해 퍼징하였다. 반응 혼합물을 100℃에서 오일 조에서 3시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 EtOAc와 물 사이에 분배하였다. 유기부를 염수로 세척하고, 건조시키고, 농축시켰다. 잔류물을 1N HCl (10 mL) 중에 용해시켰다. 수성 층을 EtOAc로 역추출하였다. 이어서, 수층을 pH = 8로 중화시킨 다음, EtOAc로 3회 추출하였다. 이어서, 유기부를 건조시키고, 농축시켰다. 조 생성물을 후속 단계 반응에 사용하였다. LCMS (m/z): 150.5 (MH+), 0.28분.
단계 3. N,N-디-tert-부틸 (5-(2-메틸알릴)피라진-2-일)카르바메이트
DCM (5.2 mL) 중 5-(2-메틸알릴)피라진-2-아민 (235 mg, 1.575 mmol)의 용액에 Boc2O (731 μL, 3.15 mmol)를 첨가하고, 이어서 DMAP (385 mg, 3.15 mmol)를 첨가하였다. 반응물을 실온에서 밤새 교반하였다. 반응물에 DCM 30 mL를 첨가하고, 포화 중탄산나트륨 (2x), 물 (1x)로 세척하고, 황산나트륨으로 건조시키고, 여과하고, 잔류물로 농축시켰다. 조 물질을 실리카 겔 크로마토그래피에 의해 0-30% 에틸 아세테이트 및 헵탄으로 용리시키면서 정제하여 생성물 250 mg을 수득하였다. LCMS (m/z): 350.1 (MH+), 1.12분;
1H NMR (400MHz,CDCl3) δ ppm 8.45 (d, J = 1.2 Hz, 1 H), 8.41 - 8.33 (m, 1 H), 4.92 (s, 1 H), 4.75 (s, 1 H), 3.57 (s, 2 H), 1.73 (s, 3 H), 1.43 (s, 18 H).
단계 4. (+/-)-N,N-디-tert-부틸 (5-(2-히드록시프로필)피라진-2-일)카르바메이트
메탄올 (6.8 mL) 중 N,N-디-tert-부틸 (5-(2-메틸알릴)피라진-2-일)카르바메이트 (120 mg, 0.343 mmol)를 - 78℃로 냉각시키고, 오존을 6분 동안 버블링하였다. 이어서, 질소를 5분 동안 퍼징하였다. 메탄올 (5 mL) 중 NaBH4 (39.0 mg, 1.030 mmol)를 천천히 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온으로 돌아오도록 하였다. 1시간 후, 포화 NH4Cl을 천천히 첨가하였다. 반응 혼합물을 EtOAc와 물 사이에 분배하였다. 유기부를 포화 NaHCO3, 물 및 염수로 세척하고, 건조시키고, 농축시켰다. 조 생성물을 후속 단계 반응에 정제 없이 사용하였다. LCMS (m/z): 354.1 (MH+), 0.84분.
단계 5. (+/-)-1-(5-아미노피라진-2-일)프로판-2-올
DCM (3.11 mL) 중 (+/-)-N,N-디-tert-부틸 (5-(2-히드록시프로필)피라진-2-일)카르바메이트 (110 mg, 0.311 mmol)에 TFA (1 mL, 12.98 mmol)를 첨가하고, 반응 혼합물을 실온에서 30분 동안 교반하고, 반응 혼합물을 톨루엔과 공증발시켰다. 조 생성물을 후속 단계 반응에 정제 없이 사용하였다. LCMS (m/z): 154.1 (MH+), 0.24분.
단계 6. (+/-)-1-(5-아미노-6-브로모피라진-2-일)프로판-2-올
DCM (3.0 mL) 중 (+/-)-1-(5-아미노피라진-2-일)프로판-2-올 (47 mg, 0.307 mmol)의 용액에 0℃에서 NBS (49.1 mg, 0.276 mmol)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 0℃에서 10분 동안 교반하였다. 포화 NaHCO3으로 켄칭한 후, 반응 혼합물을 EtOAc로 3회 추출하였다. 합한 유기 층을 물 및 염수로 세척하고, 무수 황산나트륨 상에서 건조시켰다. 여과하고, 진공 하에 농축시켰다. 조 생성물을 후속 단계 반응에 정제 없이 사용하였다. LCMS (m/z): 234.0 (MH+), 0.40분.
단계 7. (+/-)-4-(3-아미노-6-(2-히드록시프로필)피라진-2-일)-N-벤질-2-플루오로벤즈아미드
DME (970 μL) 중 (+/-)-1-(5-아미노-6-브로모피라진-2-일)프로판-2-올 (30 mg, 0.129 mmol)의 용액에 4-(벤질카르바모일)-3-플루오로페닐보론산 (31.8 mg, 0.116 mmol), PdCl2(dppf)CH2Cl2 부가물 (10.56 mg, 0.013 mmol), 2M Na2CO3 (323 μL)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 마이크로웨이브 중에서 120℃에서 10분 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 EtOAc와 물 사이에 분배하였다. 유기부를 건조시키고, 농축시켰다. 조 생성물을 정제용 HPLC에 의해 정제하였다. 순수한 분획을 합하고, 탈염시켜 (+/-)-4-(3-아미노-6-(2-히드록시프로필)피라진-2-일)-N-벤질-2-플루오로벤즈아미드를 수득하였다. LCMS (m/z): 381.2 (MH+), 0.67분;
1H NMR (400MHz, CD3OD) δ ppm 7.95 - 7.81 (m, 2 H), 7.66 (dd, J = 1.6, 8.2 Hz, 1 H), 7.58 (dd, J = 1.6, 11.7 Hz, 1 H), 7.43 - 7.31 (m, 4 H), 7.31 - 7.19 (m, 1 H), 4.62 (s, 2 H), 4.16 - 4.04 (m, 1 H), 2.79 (d, J = 6.3 Hz, 2 H), 1.23 (d, J = 6.3 Hz, 3 H).
단계 8. (R)-4-(3-아미노-6-(2-히드록시프로필)피라진-2-일)-N-벤질-2-플루오로벤즈아미드 및 (S)-4-(3-아미노-6-(2-히드록시프로필)피라진-2-일)-N-벤질-2-플루오로벤즈아미드
라세미 (+/-)-4-(3-아미노-6-(2-히드록시프로필)피라진-2-일)-N-벤질-2-플루오로벤즈아미드를 키랄 SFC (키랄팩 5mic AD 칼럼, 4.6x100 (mm), 메탄올+0.1%DEA=40%, 5 mL/분)에 의해 분해하였다. 극성 거울상이성질체, (R)-4-(3-아미노-6-(2-히드록시프로필)피라진-2-일)-N-벤질-2-플루오로벤즈아미드를 RT = 1.39분에서 수득하였다. LCMS (m/z): 381.2 (MH+), 0.67분. 덜 극성의 거울상이성질체, (S)-4-(3-아미노-6-(2-히드록시프로필)피라진-2-일)-N-벤질-2-플루오로벤즈아미드를 RT = 1.97분에서 수득하였다. LCMS (m/z): 381.2 (MH+), 0.67분. 입체화학을 임의적으로 지정하였다.
3-브로모-5-(2-에톡시에틸)피라진-2-아민의 합성
반응식 43
Figure 112016034409922-pct00068
단계 1. (E)-5-(2-에톡시비닐)피라진-2-아민
DME (2874 μL) 중 5-브로모피라진-2-아민 (200 mg, 1.149 mmol)의 용액에 (E)-2-(2-에톡시비닐)-4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-디옥사보롤란 (341 mg, 1.724 mmol), PdCl2(dppf)-CH2Cl2 부가물 (94 mg, 0.115 mmol), 및 2M Na2CO3 (958 μL)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 130℃에서 마이크로웨이브 반응기에서 20분 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 셀라이트를 통해 여과하고, EtOAc로 세척하고, 여과물을 EtOAc와 물 사이에 분배하였다. 수층을 EtOAc에 의해 3회 추출하고, 합한 유기부를 건조시키고, 농축시켰다. 조 물질을 플래쉬 크로마토그래피에 의해 정제하여 (E)-5-(2-에톡시비닐)피라진-2-아민을 수득하였다. LCMS (m/z): 166.1(MH+), 0.41분.
단계 2. 5-(2-에톡시에틸)피라진-2-아민
에탄올 (4.54 mL) 중 (E)-5-(2-에톡시비닐)피라진-2-아민 (75 mg, 0.454 mmol)의 용액에 Pd/C (48.3 mg, 0.454 mmol)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 질소에 의해 10분 동안 퍼징한 다음, 실온에서 2시간 동안 수소 풍선 하에 교반하였다. 이어서, 반응 혼합물을 셀라이트를 통해 여과하고, 메탄올 및 EtOAc로 세척한 다음, 농축시켰다. 조 생성물을 후속 단계 반응에 정제 없이 사용하였다. LCMS (m/z): 168.1 (MH+), 0.33분.
단계 3. 3-브로모-5-(2-에톡시에틸)피라진-2-아민
DCM (897 μL) 중 5-(2-에톡시에틸)피라진-2-아민 (45 mg, 0.269 mmol)의 용액에 0℃에서 NBS (43.1 mg, 0.242 mmol)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 0℃에서 10분 동안 교반하였다. 포화 NaHCO3으로 켄칭한 후, 반응 혼합물을 EtOAc로 3회 추출하였다. 합한 유기 층을 물 및 염수로 세척하고, 무수 황산나트륨 상에서 건조시켰다. 여과하고, 진공 하에 농축시켰다. 조 생성물을 후속 단계 반응에 정제 없이 사용하였다. LCMS (m/z): 246.0 (MH+), 0.59분.
(+/-)-2-(5-아미노-6-브로모피라진-2-일)프로판-1-올의 합성
반응식 44
Figure 112016034409922-pct00069
단계 1. 5-(3-(벤질옥시)프로프-1-엔-2-일)피라진-2-아민
5-브로모피라진-2-아민 (200mg, 1.149 mmol)의 용액에 칼륨 (3-(벤질옥시)프로프-1-엔-2-일)트리플루오로보레이트 (350 mg, 1.379 mmol), PdCl2(dppf).CH2Cl2 부가물 (94 mg, 0.115 mmol), Cs2CO3 (1124 mg, 3.45 mmol)을 첨가하였다. 질소를 통해 퍼징하였다. 반응 혼합물을 100℃에서 오일 조에서 6시간 동안 교반하였다. 이어서, 반응 혼합물을 EtOAc와 물 사이에 분배하고, 유기 층을 합하고, 물 및 염수로 세척하고, 무수 황산나트륨 상에서 건조시키고, 농축시켰다. 조 생성물을 플래쉬 크로마토그래피에 의해 정제하여 5-(3-(벤질옥시)프로프-1-엔-2-일)피라진-2-아민을 61% 수율로 수득하였다. LCMS (m/z): 245.2 (MH+), 0.67분;
1H NMR (400MHz, CD3OD) δ ppm 8.26 (d, J = 1.2 Hz, 1 H), 7.96 (d, J = 1.2 Hz, 1 H), 7.34 (d, J = 4.3 Hz, 5 H), 5.91 (s, 1 H), 5.44 (d, J = 1.2 Hz, 1 H), 4.59 (s, 2 H), 4.49 (s, 2 H).
단계 2. (+/-)-5-(1-(벤질옥시)프로판-2-일)피라진-2-아민
메탄올 (3771 μL) 중 5-(3-(벤질옥시)프로프-1-엔-2-일)피라진-2-아민 (91 mg, 0.377 mmol)의 용액에 실온에서 Pd/C (40.1 mg, 0.377 mmol)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 수소 풍선 하에 실온에서 밤새 교반하였다. 반응 혼합물을 셀라이트를 통해 여과하고, 메탄올 및 EtOAc로 세척하였다. 조 물질을 후속 단계 반응에 정제 없이 사용하였다. LCMS (m/z): 244.2 (MH+), 0.62분.
단계 3. (+/-)-2-(5-아미노피라진-2-일)프로판-1-올
1N HCl (1096 μL) 중 5-(1-(벤질옥시)프로판-2-일)피라진-2-아민 (80 mg, 0.329 mmol)의 용액을 오일 조에서 7시간 동안 가열하고, 냉각시켰다. 반응 혼합물을 EtOAc에 의해 추출하고, 수성을 농축 건조시켜 조 생성물로 HCl 염으로서 수득하였고, 후속 단계 반응에 사용하였다. LCMS (m/z): 154.1 (MH+), 0.26분.
단계 4. (+/-)-2-(5-아미노-6-브로모피라진-2-일)프로판-1-올
DCM (653 μL) 중 2-(5-아미노피라진-2-일)프로판-1-올 (30 mg, 0.196 mmol)의 용액에 0℃에서 NBS (31.4 mg, 0.176 mmol)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 0℃에서 10분 동안 교반하였다. 포화 NaHCO3으로 켄칭한 후, 반응 혼합물을 EtOAc로 3회 추출하였다. 합한 유기 층을 물 및 염수로 세척하고, 무수 황산나트륨 상에서 건조시켰다. 여과하고, 진공 하에 농축시켰다. 조 생성물을 후속 단계 반응에 정제 없이 사용하였다. LCMS (m/z): 234.0 (MH+), 0.40분.
3-(5-아미노-6-브로모피라진-2-일)프로판니트릴의 합성
반응식 45
Figure 112016034409922-pct00070
단계 1. N,N-디-tert-부틸 (5-메틸피라진-2-일)카르바메이트
CH2Cl2 (30 mL) 중 5-메틸피라진-2-아민 (1 g, 9.16 mmol)의 용액에 Boc2O (4.47 mL, 19.24 mmol)를 첨가하고, 이어서 DMAP (1.679 g, 13.75 mmol)를 실온에서 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 밤새 교반하였다. 포화 NaHCO3으로 켄칭한 후, 반응 혼합물을 CH2Cl2로 3회 추출하였다. 합한 유기 층을 물 및 염수로 세척하고, 무수 황산나트륨 상에서 건조시켰다. 여과하고, 진공 하에 농축시켰다. 목적 생성물을 플래쉬 칼럼 크로마토그래피 (헵탄 중 20% EtOAc)에 의해 백색 고체로서 수득하였다. LCMS (m/z): 310.0 (MH+), 0.93분.
단계 2. N,N-디-tert-부틸 (5-(브로모메틸)피라진-2-일)카르바메이트
CCl4 (14.76 mL) 중 N,N-디-tert-부틸 (5-메틸피라진-2-일)카르바메이트 (1.37 g, 4.43 mmol)의 용액에 NBS (0.828 g, 4.65 mmol), 벤조일 퍼옥시드 (0.107 g, 0.443 mmol), AIBN (0.073 g, 0.443 mmol)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 환류 하에 8시간 동안 교반하였다. 후처리하고, 고체를 여과하고, 유기부를 농축시켰다. 조 생성물을 플래쉬 크로마토그래피에 의해 정제하여 표제 생성물을 36% 수율로 수득하였다. LCMS (m/z): 231.1 (MH+-Boc), 1.04분.
단계 3. tert-부틸 5-(2-시아노에틸)피라진-2-일카르바메이트
n-부틸 리튬 (헥산 103 μL 중 2.5 M, 0.258 mmol)을 0 ℃에서 아르곤 하에 건조 THF 중 디이소프로필아민 (39.3 μL, 0.276 mmol)에 첨가한 다음, 혼합물을 0 ℃에서 1시간 동안 교반한 다음, -78℃로 냉각시키고, 아세토니트릴 (14.12 μL, 0.270 mmol)을 천천히 첨가하고, 반응 혼합물을 실온으로 돌아오도록 하고, 실온에서 1시간 동안 교반하고, -78℃로 다시 냉각시키고, THF (0.5 mL) 중 N,N-디-tert-부틸 (5-(브로모메틸)피라진-2-일)카르바메이트 (100 mg, 0.258 mmol)를 천천히 첨가하고, 반응 혼합물을 -78℃에서 10분 동안 교반한 다음, 실온으로 돌아오도록 하고, 2시간 후, 반응물을 포화 NH4Cl 용액에 의해 켄칭한 다음, EtOAc로 추출하였다. 유기부를 염수로 세척하고, 건조시키고, 농축시켰다. 조 물질을 플래쉬 크로마토그래피 (40% EtOAc/헵탄)에 의해 정제하여 tert-부틸 5-(2-시아노에틸)피라진-2-일카르바메이트를 40% 수율로 수득하였다. LCMS (m/z): 193.1 (MH+-tBu), 0.70분;
1H NMR (400MHz,CDCl3) δ ppm 9.22 (s, 1 H), 8.12 (s, 1 H), 3.09 (t, J = 7.2 Hz, 2 H), 2.83 (t, J = 7.2 Hz, 2 H), 1.52 - 1.36 (m, 8 H).
단계 4. 3-(5-아미노피라진-2-일)프로판니트릴
DCM (0.336 mL) 중 tert-부틸 5-(2-시아노에틸)피라진-2-일카르바메이트 (25 mg, 0.101 mmol)의 용액에 실온에서 TFA (0.1 mL, 1.298 mmol)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 1시간 동안 교반하였다. 포화 NaHCO3으로 켄칭한 후, 반응 혼합물을 DCM으로 추출하였다. 합한 유기 층을 물 및 염수로 세척하고, 무수 황산나트륨 상에서 건조시켰다. 여과하고, 진공 하에 농축시켰다. 조 생성물을 후속 단계 반응에 정제 없이 사용하였다. LCMS (m/z): 149.1 (MH+), 0.24분.
단계 5. 3-(5-아미노-6-브로모피라진-2-일)프로판니트릴
DCM (1519 μL) 중 3-(5-아미노피라진-2-일)프로판니트릴 (45 mg, 0.304 mmol)의 용액에 0℃에서 NBS (48.7 mg, 0.273 mmol)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 0℃에서 10분 동안 교반하였다. NaHCO3으로 켄칭한 후, 반응 혼합물을 EtOAc로 3회 추출하였다. 합한 유기 층을 물 및 염수로 세척하고, 무수 황산나트륨 상에서 건조시켰다. 여과하고, 진공 하에 농축시켰다. 조 생성물을 후속 단계 반응에 정제 없이 사용하였다. LCMS (m/z): 227/229.1 (MH+), 0.45분.
5-(5-아미노-6-브로모피라진-2-일)피페리딘-2-온의 합성
반응식 46
Figure 112016034409922-pct00071
단계 1. tert-부틸 5-메틸피라진-2-일카르바메이트
95℃에서 1,4-디옥산 (12.5 mL) 중 용액 5-메틸피라진-2-카르복실산 (2.5 g, 18.1 mmol), tert-부탄올 (6.92 mL, 72.4 mmol), Et3N (3.78 mL, 27.1 mmol)에 디페닐포스포릴 아지드 (DPPA, 3.23 mL, 18.1 mmol)를 적가하고, 반응물을 95℃에서 1.5시간 동안 가열하고, 이어서 DPPA의 제2 부분 (1 mL, 5.6mmol)을 첨가하고, 추가로 1.5시간 동안 가열하였다. 반응 혼합물을 냉각시키고, 농축시키고, 잔류물을 EtOAc (50 mL)로 희석하고, 물 (30 mL), 3 M NaOH (30 mL), 포화 NaHCO3 (30 mL) 및 염수 (30 mL)로 세척하고, Na2SO4 상에서 건조시키고, 농축시켰다. 잔류물을 실리카 겔 상에서 플래쉬 크로마토그래피에 의해 구배 EtOAc/CH2Cl2 (0-20%)로 용리시키면서 정제하여 tert-부틸 5-메틸피라진-2-일카르바메이트를 백색 고체로서 수득하였다. LCMS (m/z): 210.1 (MH+), 0.69분;
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ ppm 9.17 (s, 1H), 8.09 (s, 1H), 7.75 (br. s., 1H), 2.51 (s, 3H), 1.56 (s, 9H).
단계 2. tert-부틸 5-(브로모메틸)피라진-2-일카르바메이트
CCl4 (45 mL) 중 tert-부틸 5-메틸피라진-2-일카르바메이트 (2.79 g, 13.33 mmol), NBS (2.61 g, 14.67 mmol) 및 AIBN (0.219 g, 1.33 mmol)의 용액을 아르곤으로 퍼징한 다음, 용액을 85℃ 오일 조를 사용하여 4시간 동안 가열하였다. 반응 혼합물을 실온으로 냉각시키고, 농축시키고, 잔류물을 EtOAc (~50 mL) 중에 재용해시키고, 묽은 수성 NaOH (20 mL H2O 중 희석된 10 mL 1 N NaOH), 염수 (30 mL)로 2회 세척하고, 건조 (Na2SO4)시키고, 농축시켰다. 잔류물을 실리카 겔 상에서 플래쉬 크로마토그래피에 의해 구배 EtOAc/CH2Cl2 (0-30%)로 용리시키면서 추가로 정제하고, tert-부틸 5-(브로모메틸)피라진-2-일카르바메이트를 회백색 고체로 수득하였다. LCMS (m/z): 288.1/290.1 (MH+), 0.82분;
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ ppm 9.26 (s, 1H), 8.32 (d, J = 1.2 Hz, 1H), 7.62 (br. s., 1H), 4.56 (s, 2H), 1.56 (s, 9H).
단계 3. tert-부틸 5-(시아노메틸)피라진-2-일카르바메이트
DMF (5 mL) 중 tert-부틸 5-(브로모메틸)피라진-2-일카르바메이트 (0.75 g, 2.60 mmol) 및 NaCN (0.255 g, 5.21 mmol)의 혼합물을 실온에서 50분 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 실온으로 냉각시키고, 0.5 N NaOH (10 mL)로 희석하고, EtOAc (2 x 20 mL)로 추출하고, EtOAc 층을 합하고, 0.5 N NaOH (10 mL)로 세척하고, 건조 (Na2SO4)시키고, 농축시키고, 조 잔류물을 실리카 겔 상에서 플래쉬 크로마토그래피에 의해 구배 EtOAc/CH2Cl2 (0-20%)로 용리시키면서 정제하여 tert-부틸 5-(시아노메틸)피라진-2-일카르바메이트 (0.40 g, 65.6% 수율)를 수득하였다. LCMS (MH+- tBu): 179.0 (MH+), 0.68분;
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ ppm 9.28 (s, 1H), 8.32 (s, 1H), 7.59 (br. s., 1H), 3.91 (s, 2H), 1.57 (s, 9H).
단계 4. 에틸 4-(5-(tert-부톡시카르보닐아미노)피라진-2-일)-4-시아노부타노에이트
에탄올/2-메틸테트라히드로푸란 (5mL/5mL)의 혼합물 용매 중 tert-부틸 5-(시아노메틸)피라진-2-일카르바메이트 (0.32 g, 1.37 mmol)에 새로이 제조한 소듐 에톡시드 (1 M, 1.366 mL)를 첨가하고, 혼합물을 0℃에서 10분 동안 교반하고, 이어서 에틸 아크릴레이트 (145 ul, 1.366 mmol)를 첨가하고, 혼합물을 0℃에서 2시간 동안 교반하였다. 반응물을 이 지점에서 포화 NaHCO3 (5 mL)을 첨가함으로써 켄칭하고, 반응 혼합물을 추가로 10분 동안 교반하고, EtOAc (20 mL)로 희석하고, 여과하고, 여과물을 농축시켰다. 잔류물을 EtOAc (20 mL) 중에 용해시키고, pH 7.0 인산나트륨 완충제로 세척하고, EtOAc 층을 농축시키고, 담갈색 잔류물 오일을 플래쉬 칼럼에 의해 구배 EtOAc/헵탄 (0-50%)으로 용리시키면서 정제하여 에틸 4-(5-(tert-부톡시카르보닐아미노)피라진-2-일)-4-시아노부타노에이트 (100 mg, 22% 수율)를 수득하였다. LCMS (m/z): 279.2 (MH+-tBu), 0.86분.
단계 5. tert-부틸 5-(6-옥소피페리딘-3-일)피라진-2-일카르바메이트
아르곤 하에, 에탄올 용액 (94 mg, 0.281 mmol/8 mL) 중 에틸 4-(5-(tert-부톡시카르보닐아미노)피라진-2-일)-4-시아노부타노에이트에 라니 니켈 촉매 에탄올 현탁액 (~2 mL 에탄올 중 니켈, 라니 니켈의 양은 정확히 측정되지 않았음)을 첨가하고, H2 풍선을 갖는 56℃에서의 외부 오일 조를 사용하여 밤새 가열된 3회의 공기 분위기 교환 후에 반응 혼합물을 H2 풍선 하에 교반하였다. 반응 혼합물을 실온으로 냉각시키고, 셀라이트의 패드를 통해 여과하고, 여과물을 농축시켜 tert-부틸 5-(6-옥소피페리딘-3-일)피라진-2-일카르바메이트를 황색 고체로 수득하였다.
단계 6. 5-(5-아미노피라진-2-일)피페리딘-2-온
메탄올 (2 mL) 중 tert-부틸 5-(6-옥소피페리딘-3-일)피라진-2-일카르바메이트 (60 mg, 0.205 mmol) 및 진한 HCl (1 mL)의 혼합물을 70℃ 오일 조를 사용하여 1시간 동안 가열하고, 반응 혼합물을 냉각시키고, 농축 건조시키고, 잔류물을 메탄올 (3 mL) 중에 재용해시키고, 여기에 NaHCO3 (200 mg)을 첨가하고, 혼합물을 70℃ 오일 조를 사용하여 2시간 동안 가열하였다. 반응 혼합물의 고체 현탁액을 여과에 의해 제거하고, 여과물을 농축시키고, 담황색 고체를 조 5-(5-아미노피라진-2-일)피페리딘-2-온으로서 수득하였으며, 이를 직접 후속 단계에 추가 정제 없이 사용하였다. LCMS (m/z): 193.1 (MH+), 0.22분.
단계 7. 5-(5-아미노-6-브로모피라진-2-일)피페리딘-2-온
0℃에서 5-(5-아미노피라진-2-일)피페리딘-2-온 (25 mg, 0.13 mmol) 아세토니트릴 (10 mL) 용액에 NBS (23.2 mg, 0.13 mmol)를 첨가하고, 반응 혼합물을 0℃에서 30분 동안 교반한 다음, 실온에서 4시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 농축시키고, 잔류물을 1 N NaOH (140 ul)에 의해 염기성화시키고, 메탄올 (2 mL)로 희석하고, 농축시켰다. 잔류물을 EtOAc (3 x 1 mL)로 연화처리하고, EtOAc 상청액을 수집하고, 합하고, 농축시키고, 담색 고체를 조 5-(5-아미노-6-브로모피라진-2-일)피페리딘-2-온으로서 수득하였으며, 이를 후속 단계에 추가 정제 없이 사용하였다. LCMS (m/z): 241/243 (MH+), 0.41분.
실시예 25
4-(2-아미노-5-(6-옥소피페리딘-3-일)피리딘-3-일)-N-((S)-1-(3-클로로페닐)-2-히드록시에틸)-2-플루오로벤즈아미드의 합성
반응식 47
Figure 112016034409922-pct00072
단계 1. 5-브로모-1-((2-(트리메틸실릴)에톡시)메틸)피리딘-2(1H)-온
0℃에서 DMF (30 mL) 중 5-브로모피리딘-2(1H)-온 (2.01 g, 11.55 mmol)의 용액에 수소화나트륨 (0.924 g, 23.10 mmol)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 1시간 동안 교반하였다. 여기에, (2-(클로로메톡시)에틸)트리메틸실란 (2.89 g, 17.33 mmol)을 천천히 첨가하였다. 반응 혼합물을 밤새 교반하였다. LCMS - 0.26분, MH+ 304.1 (비-극성 방법). 반응물을 포화 수성 NH4Cl로 켄칭한 다음, 에틸 아세테이트로 희석하였다. 반응 혼합물을 EtOAc로 추출하였다. 합한 유기부를 물 및 염수로 세척한 다음, 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 진공 하에 농축시켰다. 조 생성물을 플래쉬 크로마토그래피 칼럼에 의해 0-50% EtOAc / 헵탄을 사용하여 정제하였다. 5-브로모-1-((2-(트리메틸실릴)에톡시)메틸)피리딘-2(1H)-온을 황색 점성 액체로서 수득하였다. LCMS (m/z): 304/306 (MH+), 0.95분.
단계 2. 6'-플루오로-1-((2-(트리메틸실릴)에톡시)메틸)-[3,3'-비피리딘]-6(1H)-온
DME (6227 μL, 비: 2.000) 중 5-브로모-1-((2-(트리메틸실릴)에톡시)메틸)피리딘-2(1H)-온 (568 mg, 1.868 mmol)의 용액에 실온에서 PdCl2(dppf) (68.3 mg, 0.093 mmol), 2-플루오로-5-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-디옥사보롤란-2-일)피리딘 (500 mg, 2.242 mmol), 2M Na2CO3 (3113 μl, 비: 1.000)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 마이크로웨이브 합성기에서 10분 동안 120℃에서 가열하였다. 반응 혼합물에, 황산나트륨 및 EtOAc를 첨가하였다. 여과한 후, 휘발성 물질을 진공 하에 제거하였다. 조 생성물을 플래쉬 크로마토그래피 (구배: 헵탄 중 EtOAc)에 의해 정제하여 6'-플루오로-1-((2-(트리메틸실릴)에톡시)메틸)-[3,3'-비피리딘]-6(1H)-온 (52%)을 수득하였다. LCMS (m/z): 321.3 (MH+), 0.93분.
단계 3. 5-(6-플루오로피리딘-3-일)-1-((2-(트리메틸실릴)에톡시)메틸)피페리딘-2-온
강철 용기에, MeOH 중 6'-플루오로-1-((2-(트리메틸실릴)에톡시)메틸)-[3,3'-비피리딘]-6(1H)-온 (311 mg, 0.971 mmol)의 용액 (남은 60% 헤드 스페이스)에 이어서 Pd-C (207 mg, 0.194 mmol)를 첨가하였다. 질소 스트림으로 탈기시킨 후, 강철 용기를 수소 기체로 250 psi까지 감압하였다. 반응물을 실온에서 20시간 동안 교반하였다. LCMS - 0.9분 MH+ 325.1 (단일 주요). 반응 혼합물을 셀라이트 (EtOAc로 세척됨)을 통해 여과하였다. 휘발성 물질을 진공 하에 농축시켜 조 5-(6-플루오로피리딘-3-일)-1-((2-(트리메틸실릴)에톡시)메틸)피페리딘-2-온 (290 mg, 0.894 mmol, 92%)을 수득하였으며, 이를 후속 단계에 추가 정제 없이 사용하였다.
단계 4. 5-(6-아미노피리딘-3-일)피페리딘-2-온
강철 용기 중 -(6-플루오로피리딘-3-일)-1-((2-(트리메틸실릴)에톡시)메틸)피페리딘-2-온 (290 mg, 0.894 mmol)에 수산화암모늄 (34.8 μl, 0.894 mmol) 용액을 첨가하였다 (40% 헤드 부피가 남음). 강철 용기 반응기를 150℃에서 44시간 동안 가열하였다 (압력 게이지 상에서 250 psi). LCMS - 0.23분, MH+ 192.1 (SEM을 사용하지 않음); 0.66분, MH+ 322.1 (SEM을 사용함). MeOH 및 톨루엔으로 희석한 후, 휘발성 물질을 진공 하에 완전히 제거하였다. 5-(6-아미노피리딘-3-일)피페리딘-2-온을 후속 단계에 사용하였다.
단계 5. 5-(6-아미노-5-브로모피리딘-3-일)피페리딘-2-온
아세토니트릴 (8.00 mL) 중 5-(6-아미노피리딘-3-일)피페리딘-2-온 (132 mg, 0.690 mmol)의 용액에 0℃에서 NBS (98 mg, 0.552 mmol)를 첨가하였다. 실온으로 가온 시 반응 혼합물을 30분 동안 교반하였다. LCMS 0.28분, MH+ 270/272; 0.7분, MH+ 400.1/402.1 (SEM 보호된 것). Na2S2O3 용액으로 켄칭한 후, 반응 혼합물을 EtOAc로 추출하고, 이를 NaHCO3 용액 및 염수로 세척하였다. 유기 층을 무수 Na2SO4 상에서 건조시키고, 여과하고, 진공 하에 농축시켰다. 조 5-(6-아미노-5-브로모피리딘-3-일)피페리딘-2-온을 후속 단계에 사용하였다.
단계 6. 4-(2-아미노-5-(6-옥소피페리딘-3-일)피리딘-3-일)-N-((S)-1-(3-클로로페닐)-2-히드록시에틸)-2-플루오로벤즈아미드
마이크로웨이브 바이알에, 5-(6-아미노-5-브로모피리딘-3-일)피페리딘-2-온 (45 mg, 0.167 mmol), (S)-(4-((1-(3-클로로페닐)-2-히드록시에틸)카르바모일)-3-플루오로페닐)보론산 (56.2 mg, 0.167 mmol), PdCl2(dppf) (12.19 mg, 0.017 mmol), DME (1111 μl, 비: 2.000)에, Na2CO3 (2M 용액) (555 μL, 비: 1.000)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 마이크로웨이브 반응기에서 10분 동안 120℃에서 가열하였다. LCMS - 0.58분, MH+ 483.2; 0.85분, MH+ 613.3. 무수 황산나트륨을 첨가하여 물을 제거한 후, 반응 혼합물을 여과하고, 진공 하에 건조시켰다. 작은 부분을 정제용 HPLC에 의해 정제하여 4-(2-아미노-5-(6-옥소피페리딘-3-일)피리딘-3-일)-N-((S)-1-(3-클로로페닐)-2-히드록시에틸)-2-플루오로벤즈아미드를 부분입체이성질체 혼합물 (12%)로서 수득하였다. LCMS (m/z): 483.3 (MH+), 0.56분;
1H NMR (400MHz, CD3OD) δ ppm 7.89 (m, 1H), 7.80 (m, 2H), 7.42 - 7.30 (m, 3H), 7.30 - 7.24 (m, 2H), 7.25 - 7.15 (m, 1H), 5.18 - 5.03 (m, 1H), 3.87 - 3.64 (m, 2H), 3.47 - 3.35 (m, 2H), 3.11 - 2.97 (m, 1H), 2.46 - 2.30 (m, 2H), 2.08 - 1.91 (m, 2H).
(+/-)-4-(6-아미노-5-브로모피리딘-3-일)-1-메틸피페리딘-2-온의 합성
반응식 48
Figure 112016034409922-pct00073
단계 1. 6-플루오로-1'-메틸-[3,4'-비피리딘]-2'(1'H)-온
2-플루오로-5-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-디옥사보롤란-2-일)피리딘 (500 mg, 2.242 mmol)의 용액에 실온에서 PdCl2(dppf) (68.3 mg, 0.093 mmol), 4-브로모-1-메틸피리딘-2(1H)-온 (351 mg, 1.868 mmol), 2M Na2CO3 (4.1 mL) 및 DME (8.3 mL)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 마이크로웨이브 합성기에서 10분 동안 120℃에서 가열하였다. 반응 혼합물을 EtOAc로 추출하였다. 유기 층을 물 및 염수로 세척하고, 무수 Na2SO4 상에서 건조시키고, 여과하고, 진공 하에 농축시켰다. 조 6-플루오로-1'-메틸-[3,4'-비피리딘]-2'(1'H)-온을 플래쉬 크로마토그래피 (구배: DCM 중 EtOAc)에 의해 정제하였다. LCMS (m/z): 205.2 (MH+), 0.47분.
단계 2. (+/-)-4-(6-플루오로피리딘-3-일)-1-메틸피페리딘-2-온
강철 용기에, MeOH 중 6-플루오로-1'-메틸-[3,4'-비피리딘]-2'(1'H)-온 (340 mg, 1.665 mmol)의 용액 (남은 60% 헤드 스페이스)에 이어서 Pd-C (데구사) (354 mg, 0.333 mmol)를 첨가하였다. 질소 스트림으로 탈기시킨 후, 강철 용기를 수소 (250 psi)로 충전하였다. 반응 혼합물을 밤새 교반하였다. 반응 혼합물을 셀라이트 (EtOAc/MeOH로 세척됨)를 통해 여과하였다. 휘발성 물질을 진공 하에 농축시켜 조 (+/-)-4-(6-플루오로피리딘-3-일)-1-메틸피페리딘-2-온 (341 mg, 1.638 mmol, 98% 수율)을 수득하였으며, 이를 후속 단계에 추가 정제 없이 사용하였다. LCMS (m/z): 209.1 (MH+), 0.47분.
단계 3. (+/-)-4-(6-아미노피리딘-3-일)-1-메틸피페리딘-2-온
강철 용기에, (+/-)-4-(6-플루오로피리딘-3-일)-1-메틸피페리딘-2-온 (341 mg, 1.638 mmol)에 이어서 수산화암모늄 용액 (0.00 mmol) - 남은 40% 헤드 스페이스를 첨가하였다. 반응기를 150℃에서 20시간 동안 (내부 압력이 가열 시 100 psi까지 구축됨). 냉각시킨 후, 반응이 완결되었다. 전체 용매 (플라스크로 옮김)를 진공 하에 제공하였다. 톨루엔을 첨가하고, 공-증발시켜 물을 제거하였다. 조 생성물, (+/-)-4-(6-아미노피리딘-3-일)-1-메틸피페리딘-2-온을 후속 단계에 추가 정제 없이 사용하였다 (87%). LCMS (m/z): 206.1 (MH+), 0.24분.
단계 4. (+/-)-4-(6-아미노-5-브로모피리딘-3-일)-1-메틸피페리딘-2-온
아세토니트릴 (14.200 mL) 중 (+/-)-4-(6-아미노피리딘-3-일)-1-메틸피페리딘-2-온 (291 mg, 1.418 mmol)의 용액에 0℃에서 NBS (202 mg, 1.134 mmol)를 첨가하였다. 실온으로 가온 시 반응 혼합물을 30분 동안 교반하였다. Na2S2O3 용액으로 켄칭한 후, 반응 혼합물을 EtOAc로 추출하고, 이를 NaHCO3 용액 및 염수로 세척하였다. 유기 층을 무수 Na2SO4 상에서 건조시키고, 여과하고, 진공 하에 농축시켰다. 조 생성물 (+/-)-4-(6-아미노-5-브로모피리딘-3-일)-1-메틸피페리딘-2-온 (98%)을 후속 단계에 사용하였다. LCMS (m/z): 284/286 (MH+), 0.34분.
실시예 26, 27, 및 28
4-(2-아미노-5-(1-메틸-2-옥소피페리딘-4-일)피리딘-3-일)-N-((S)-1-(3-클로로페닐)-2-히드록시에틸)-2-플루오로벤즈아미드, 4-(2-아미노-5-((R)-1-메틸-2-옥소피페리딘-4-일)피리딘-3-일)-N-((S)-1-(3-클로로페닐)-2-히드록시에틸)-2-플루오로벤즈아미드, 및 4-(2-아미노-5-((S)-1-메틸-2-옥소피페리딘-4-일)피리딘-3-일)-N-((S)-1-(3-클로로페닐)-2-히드록시에틸)-2-플루오로벤즈아미드
Figure 112016034409922-pct00074
반응식 47에서의 단계 6에 따라, (+/-)-4-(6-아미노-5-브로모피리딘-3-일)-1-메틸피페리딘-2-온 및 (S)-(4-((1-(3-클로로페닐)-2-히드록시에틸)카르바모일)-3-플루오로페닐)보론산을 사용하여, 4-(2-아미노-5-(1-메틸-2-옥소피페리딘-4-일)피리딘-3-일)-N-((S)-1-(3-클로로페닐)-2-히드록시에틸)-2-플루오로벤즈아미드를 부분입체이성질체 혼합물 (분리할 수 없음) (35%)로서 수득하였다. LCMS (m/z): 497.3 (MH+), 0.59분;
1H NMR (400MHz, CD3OD) δ ppm 7.97 (m, 1H), 7.9 (m, 1H), 7.82 (m, 1H), 7.52 - 7.39 (m, 3H), 7.39 - 7.32 (m, 2H), 7.3 (m, 1H), 5.19 (m, 1H), 3.88 (m, 2H), 3.60 - 3.38 (m, 3H), 3.21 - 3.08 (m, 1H), 2.72 - 2.58 (m, 1H), 2.57 - 2.41 (m, 1H), 2.21 - 1.95 (m, 2H).
부분입체이성질체 혼합물을 키랄 SFC (키랄팩 5mic AD 칼럼, 4.6x100 (mm), 5mL/분, EtOH+0.1%, DEA= 5분 내 45%)에 의해 분리하였다. 극성 부분입체이성질체, 4-(2-아미노-5-((R)-1-메틸-2-옥소피페리딘-4-일)피리딘-3-일)-N-((S)-1-(3-클로로페닐)-2-히드록시에틸)-2-플루오로벤즈아미드를 RT = 1.82분에서 수득하였다. 덜 극성의 부분입체이성질체, 4-(2-아미노-5-((S)-1-메틸-2-옥소피페리딘-4-일)피리딘-3-일)-N-((S)-1-(3-클로로페닐)-2-히드록시에틸)-2-플루오로벤즈아미드를 RT = 2.35분에서 수득하였다. 2종의 부분입체이성질체에 대한 절대 입체화학을 임의적으로 지정하였다.
실시예 29, 30, 및 31
4-(2-아미노-5-(1-메틸-2-옥소피페리딘-4-일)피리딘-3-일)-2-플루오로-N-((R)-1-페닐에틸)벤즈아미드, 4-(2-아미노-5-((R)-1-메틸-2-옥소피페리딘-4-일)피리딘-3-일)-2-플루오로-N-((R)-1-페닐에틸)벤즈아미드, 및 4-(2-아미노-5-((S)-1-메틸-2-옥소피페리딘-4-일)피리딘-3-일)-2-플루오로-N-((R)-1-페닐에틸)벤즈아미드
Figure 112016034409922-pct00075
반응식 47에서의 단계 6에 따라, (+/-)-4-(6-아미노-5-브로모피리딘-3-일)-1-메틸피페리딘-2-온 및 (R)-(3-플루오로-4-((1-페닐에틸)카르바모일)페닐)보론산을 사용하여, 4-(2-아미노-5-(1-메틸-2-옥소피페리딘-4-일)피리딘-3-일)-2-플루오로-N-((R)-1-페닐에틸)벤즈아미드를 부분입체이성질체 혼합물 (분리할 수 없음) (34%)로서 수득하였다. LCMS (m/z): 447.3 (MH+), 0.58분;
1H NMR (400MHz, CD3OD) δ ppm 7.85 (m, 1H), 7.72 (m, 2H), 7.41 - 7.20 (m, 6H), 7.18 (m, 1H), 5.17 (m, 1H), 3.51 - 3.29 (m, 3H), 3.13 - 2.98 (m, 1H), 2.88 (s, 3H), 2.60 - 2.48 (m, 1H), 2.48 - 2.30 (m, 1H), 2.10 - 1.85 (m, 2H), 1.58 - 1.38 (m, 3H).
부분입체이성질체 혼합물을 키랄 SFC (키랄팩 5mic AD 칼럼, 4.6x100 (mm), 100mL/분, IPA+0.1%, DEA = 40%, 5ml/분)에 의해 분리하였다. 극성 부분입체이성질체, 4-(2-아미노-5-((R)-1-메틸-2-옥소피페리딘-4-일)피리딘-3-일)-2-플루오로-N-((R)-1-페닐에틸)벤즈아미드를 RT = 1.67분에서 수득하였다. LCMS (m/z): 447.3 (MH+), 0.64분. 덜 극성의 부분입체이성질체, 4-(2-아미노-5-((S)-1-메틸-2-옥소피페리딘-4-일)피리딘-3-일)-2-플루오로-N-((R)-1-페닐에틸)벤즈아미드를 RT = 2.37분에서 수득하였다. LCMS (m/z): 447.2 (MH+), 0.64분. 2종의 부분입체이성질체에 대한 절대 입체화학을 임의적으로 지정하였다.
실시예 32, 33, 및 34
4-(2-아미노-5-(1-메틸-2-옥소피페리딘-4-일)피리딘-3-일)-N-((R)-1-(3-클로로페닐)에틸)-2-플루오로벤즈아미드, 4-(2-아미노-5-((R)-1-메틸-2-옥소피페리딘-4-일)피리딘-3-일)-N-((R)-1-(3-클로로페닐)에틸)-2-플루오로벤즈아미드, 및 4-(2-아미노-5-((S)-1-메틸-2-옥소피페리딘-4-일)피리딘-3-일)-N-((R)-1-(3-클로로페닐)에틸)-2-플루오로벤즈아미드
Figure 112016034409922-pct00076
반응식 47에서의 단계 6에 따라, (R)-(4-((1-(3-클로로페닐)에틸)카르바모일)-3-플루오로페닐)보론산을 사용하여, 4-(2-아미노-5-(1-메틸-2-옥소피페리딘-4-일)피리딘-3-일)-N-((R)-1-(3-클로로페닐)에틸)-2-플루오로벤즈아미드를 부분입체이성질체 혼합물 (분리할 수 없음) (33%)로서 수득하였다. LCMS (m/z): 481.3 (MH+), 0.70분;
1H NMR (400MHz, CD3OD) δ ppm 7.86 (m, 1H), 7.73 (m, 2H), 7.39 - 7.20 (m, 5H), 7.19 (m, 1H), 5.14 (m, 1H), 3.52 - 3.28 (m, 3H), 3.14 - 2.98 (m, 1H), 2.88 (s, 3H), 2.62 - 2.48 (m, 1H), 2.46 - 2.30 (m, 1H), 2.12 - 1.84 (m, 2H), 1.48 (m, 3H).
부분입체이성질체 혼합물을 키랄 SFC (키랄팩 5mic AD 칼럼, 4.6x100 (mm), 5ml/분, EtOH+0.1% DEA=35%)로 분리하였다. 극성 부분입체이성질체, 4-(2-아미노-5-((R)-1-메틸-2-옥소피페리딘-4-일)피리딘-3-일)-N-((R)-1-(3-클로로페닐)에틸)-2-플루오로벤즈아미드를 RT = 2.83분에서 수득하였다. LCMS (m/z): 481.2 (MH+), 0.71분. 덜 극성의 부분입체이성질체, 4-(2-아미노-5-((S)-1-메틸-2-옥소피페리딘-4-일)피리딘-3-일)-N-((R)-1-(3-클로로페닐)에틸)-2-플루오로벤즈아미드를 RT = 3.53분에서 수득하였다. LCMS (m/z): 481.2 (MH+), 0.72. 2종의 부분입체이성질체에 대한 절대 입체화학을 임의적으로 지정하였다.
5-(6-아미노-5-브로모피리딘-3-일)-1-메틸피페리딘-2-온의 합성
반응식 49
Figure 112016034409922-pct00077
반응식 48에 따라, 5-브로모-1-메틸피리딘-2(1H)-온을 사용하여, 5-(6-아미노-5-브로모피리딘-3-일)-1-메틸피페리딘-2-온을 수득하였다. LCMS (m/z): 284/286 (MH+), 0.34분.
실시예 35, 36, 및 37
4-(2-아미노-5-(1-메틸-6-옥소피페리딘-3-일)피리딘-3-일)-N-((S)-1-(3-클로로페닐)-2-히드록시에틸)-2-플루오로벤즈아미드, 4-(2-아미노-5-((R)-1-메틸-6-옥소피페리딘-3-일)피리딘-3-일)-N-((S)-1-(3-클로로페닐)-2-히드록시에틸)-2-플루오로벤즈아미드, 및 4-(2-아미노-5-((S)-1-메틸-6-옥소피페리딘-3-일)피리딘-3-일)-N-((S)-1-(3-클로로페닐)-2-히드록시에틸)-2-플루오로벤즈아미드
Figure 112016034409922-pct00078
반응식 47에서의 단계 6에 따라, 5-(6-아미노-5-브로모피리딘-3-일)-1-메틸피페리딘-2-온 및 (S)-(4-((1-(3-클로로페닐)-2-히드록시에틸)카르바모일)-3-플루오로페닐)보론산을 사용하여, 4-(2-아미노-5-(1-메틸-6-옥소피페리딘-3-일)피리딘-3-일)-N-((S)-1-(3-클로로페닐)-2-히드록시에틸)-2-플루오로벤즈아미드를 수득하였다 (33%). LCMS (m/z): 497.2 (MH+), 0.61분;
1H NMR (400MHz, CD3OD) δ ppm 8.70 (m, 1H), 7.98 (m, 1H), 7.88 (m, 2H), 7.44 (m, 3H), 7.36 (m, 2H), 7.30 (m, 1H), 5.19 (m, 1H), 3.88 (m, 2H), 3.51 (m, 2H), 3.21 (m, 1H), 2.97 (s, 3H), 2.50 (m, 2H), 2.07 (m, 2H).
부분입체이성질체 혼합물을 키랄 SFC (키랄팩 5mic AD 칼럼, 4.6x100 (mm), EtOH+0.1%DEA=40%, 5ml/분)로 분리하였다. 극성 부분입체이성질체, 4-(2-아미노-5-((R)-1-메틸-6-옥소피페리딘-3-일)피리딘-3-일)-N-((S)-1-(3-클로로페닐)-2-히드록시에틸)-2-플루오로벤즈아미드를 RT = 2.22분에서 수득하였다. LCMS (m/z): 497.2 (MH+), 0.61분. 덜 극성의 부분입체이성질체, 4-(2-아미노-5-((S)-1-메틸-6-옥소피페리딘-3-일)피리딘-3-일)-N-((S)-1-(3-클로로페닐)-2-히드록시에틸)-2-플루오로벤즈아미드를 RT = 3.09분에서 수득하였다. LCMS (m/z): 497.3 (MH+), 0.59분.
실시예 38, 39, 및 40
4-(2-아미노-5-(1-메틸-6-옥소피페리딘-3-일)피리딘-3-일)-N-((R)-1-(3-클로로페닐)에틸)-2-플루오로벤즈아미드, 4-(2-아미노-5-((R)-1-메틸-6-옥소피페리딘-3-일)피리딘-3-일)-N-((R)-1-(3-클로로페닐)에틸)-2-플루오로벤즈아미드, 및 4-(2-아미노-5-((S)-1-메틸-6-옥소피페리딘-3-일)피리딘-3-일)-N-((R)-1-(3-클로로페닐)에틸)-2-플루오로벤즈아미드
Figure 112016034409922-pct00079
반응식 47에서의 단계 6에 따라, (R)-(4-((1-(3-클로로페닐)에틸)카르바모일)-3-플루오로페닐)보론산 및 5-(6-아미노-5-브로모피리딘-3-일)-1-메틸피페리딘-2-온을 사용하여, 4-(2-아미노-5-(1-메틸-6-옥소피페리딘-3-일)피리딘-3-일)-N-((S)-1-(3-클로로페닐)-2-히드록시에틸)-2-플루오로벤즈아미드를 부분입체이성질체 혼합물 (4%)로서 수득하였다. LCMS (m/z): 481.3 (MH+), 0.69분.
1H NMR (400MHz, CD3OD) δ ppm 8.79 - 8.65 (m, 1H), 7.93 - 7.83 (m, 1H), 7.83 - 7.76 (m, 1H), 7.75 - 7.65 (m, 1H), 7.40 - 7.29 (m, 3H), 7.29 - 7.21 (m, 2H), 7.21 - 7.13 (m, 1H), 5.22 - 5.07 (m, 1H), 3.52 - 3.32 (m, 3H), 3.16 - 3.01 (m, 1H), 2.88 (s, 3H), 2.48 - 2.34 (m, 2H), 2.07 - 1.92 (m, 2H), 1.55 - 1.40 (m, 3H).
부분입체이성질체 혼합물을 키랄 SFC (키랄팩 5mic AD 칼럼, 4.6x100 (mm), 5ml/분, MeOH+0.1% DEA = 35%)로 분리하였다. 극성 부분입체이성질체, 4-(2-아미노-5-((R)-1-메틸-6-옥소피페리딘-3-일)피리딘-3-일)-N-((R)-1-(3-클로로페닐)에틸)-2-플루오로벤즈아미드를 RT = 2.98분에서 수득하였다. LCMS (m/z): 481.2 (MH+), 0.71분. 덜 극성의 부분입체이성질체, 4-(2-아미노-5-((S)-1-메틸-6-옥소피페리딘-3-일)피리딘-3-일)-N-((R)-1-(3-클로로페닐)에틸)-2-플루오로벤즈아미드를 RT = 3.93분에서 수득하였다. LCMS (m/z): 481.1 (MH+), 0.71분.
실시예 41
4-(2-아미노-5-(5-옥소피롤리딘-3-일)피리딘-3-일)-2-플루오로-N-((S)-2-히드록시-1-페닐에틸)벤즈아미드
반응식 50
Figure 112016034409922-pct00080
단계 1. tert-부틸 4-(6-플루오로피리딘-3-일)-2-옥소-2,5-디히드로-1H-피롤-1-카르복실레이트
DME (27 mL) 중 tert-부틸 2-옥소-4-(토실옥시)-2,5-디히드로-1H-피롤-1-카르복실레이트 (0.8g, 2.037 mmol) (합성을 위해 실시예24 참조) 및 탄산나트륨 (7 mL, 14.00 mmol) (2M)에 (6-플루오로피리딘-3-일)보론산 (0.431 g, 3.06 mmol) 및 PdCl2(dppf).CH2Cl2 부가물 (0.333 g, 0.407 mmol)을 첨가하였다. N2로 5분 동안 퍼징하였다. 반응 혼합물을 오일 조 중에 90℃에서 2시간 동안 가열하였다. 반응 혼합물을 에틸아세테이트와 물 사이에 분배하였다. 유기 층을 분리하고, 염수로 세척하고, 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 증발시켰다. 플래쉬 크로마토그래피 칼럼에 의해 0-50% EtOAc / 헵탄을 사용하여 정제하였다. 생성물을 함유하는 분획을 합하고, 증발시켜 tert-부틸 4-(6-플루오로피리딘-3-일)-2-옥소-2,5-디히드로-1H-피롤-1-카르복실레이트를 회백색 고체 (54.7%)로서 수득하였다. LCMS (m/z): 223.2 (MH+-tBu), 0.743분.
단계 2. 4-(6-플루오로피리딘-3-일)-1H-피롤-2(5H)-온
DCM (4 mL) 중 tert-부틸 4-(6-플루오로피리딘-3-일)-2-옥소-2,5-디히드로-1H-피롤-1-카르복실레이트 (315 mg, 1.132 mmol)에 TFA (1 mL, 12.98 mmol)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 1시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 증발시켰다. 톨루엔 (x=3)과 공비혼합하여 4-(6-플루오로피리딘-3-일)-1H-피롤-2(5H)-온을 수득하였다. 후속 단계를 위해 진행하였다. LCMS (m/z): 179.2 (MH+), 0.373분. 조 수율은 정량적이었다.
단계 3. 4-(6-플루오로피리딘-3-일)피롤리딘-2-온
N2 분위기 하에 MeOH (10 mL) 중 4-(6-플루오로피리딘-3-일)-1H-피롤-2(5H)-온 (190 mg, 1.066 mmol)에 Pd-C (227 mg, 0.213 mmol)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 H2 풍선 하에 밤새 교반하였다. 반응 혼합물을 셀라이트를 통해 여과하고, MeOH로 세척하였다. 여과물을 증발시켰다. 톨루엔 (x=3)과 공비혼합하였다. 수율은 80%였다. 후속 단계를 위해 진행하였다. LCMS (m/z): 181.0 (MH+), 0.341분.
단계 4. 4-(6-플루오로피리딘-3-일)-1-메틸피롤리딘-2-온
빙조에 들은 DMF (4 mL) 중 4-(6-플루오로피리딘-3-일)피롤리딘-2-온 (200 mg, 0.888 mmol)에 NaH (42.6 mg, 1.066 mmol) 및 아이오도메탄 (0.067 mL, 1.066 mmol)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 빙조에서 30분 동안 및 실온에서 1시간 동안 교반하였다. LC-MS는 SM 및 생성물의 혼합물 (1:1)을 나타낸다. NaH (42.6 mg, 1.066 mmol) 및 아이오도메탄 (0.067 mL, 1.066 mmol)을 다시 첨가하고, 1시간 동안 실온에서 교반하였다. LC-MS에 의해 반응이 완결되었다. 반응 혼합물을 EtOAc로 희석하고, 물 및 염수로 세척하였다. 유기 층을 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 증발시켰다. 조 물질을 플래쉬 크로마토그래피 [0-50-80% EtOAc (10%MeOH 함유) / 헵탄]에 의해 정제하였다. LCMS (m/z): 195.2 (MH+), 0.492분. 수율 58%
단계 5. 4-(6-아미노피리딘-3-일)-1-메틸피롤리딘-2-온
4-(6-플루오로피리딘-3-일)-1-메틸피롤리딘-2-온 (100 mg, 0.515 mmol)에 수산화암모늄 (2 mL, 15.41 mmol)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 가열 블록에서 140℃에서 48시간 동안 가열하였다. LC-MS는 80% 생성물을 나타낸다. 반응 혼합물을 증발시켰다. 톨루엔 (x=3)과 공비혼합하고, 후속 단계를 위해 진행하였다. LCMS (m/z): 192.2 (MH+), 0.256분.
단계 6. 4-(6-아미노-5-브로모피리딘-3-일)-1-메틸피롤리딘-2-온
빙조에 들은 아세토니트릴 (3 mL) 중 4-(6-아미노피리딘-3-일)-1-메틸피롤리딘-2-온 (90 mg, 0.377 mmol)에 NBS (60.3 mg, 0.339 mmol)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 빙조에서 15분 동안 및 실온에서 30분 동안 교반하였다. LC-MS는 SM 및 생성물의 혼합물을 나타낸다. 0.1 당량 초과의 NBS를 첨가하고, 실온에서 추가로 1시간 교반하였다. 반응 혼합물을 EtOAc로 희석하고, 포화 중탄산나트륨 2mL를 첨가하였다. 10분 교반하였다. 유기 층을 분리하고, 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 증발시켰다. 후속 단계를 위해 진행하였다 (73%). LCMS (m/z): 270.2/272.2(MH+), 0.302분.
단계 7. 4-(2-아미노-5-(1-메틸-5-옥소피롤리딘-3-일)피리딘-3-일)-2-플루오로-N-((S)-2-히드록시-1-페닐에틸)벤즈아미드
DME (1.6 mL) 중 4-(6-아미노-5-브로모피리딘-3-일)-1-메틸피롤리딘-2-온 (18 mg, 0.067 mmol) 및 탄산나트륨 (0.167 mL, 0.333 mmol)에 (S)-2-플루오로-N-(2-히드록시-1-페닐에틸)-4-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-디옥사보롤란-2-일)벤즈아미드 (30.8 mg, 0.080 mmol) 및 PdCl2(dppf).CH2Cl2 부가물 (5.44 mg, 6.66 μmol)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 마이크로웨이브에서 120℃에서 15분 동안 가열하였다. 반응 혼합물을 에틸아세테이트로 희석하였다. 유기 층을 분리하고, 증발시켰다. 조 물질을 정제용 HPLC에 의해 정제하여 목적 생성물 (29.3%)을 TFA 염으로서 수득하였다. LCMS (m/z): 449.3 (MH+), 0.52분;
1H NMR (400 MHz, CD3OD) δ ppm 8.65 (dd, J=7.24, 4.11 Hz, 1 H) 7.97 (d, J=2.35 Hz, 1 H) 7.94-7.83 (m, 2 H) 7.49-7.39 (m, 4 H) 7.36 (t, J=7.63 Hz, 2 H) 7.32-7.24 (m, 1 H) 5.30-5.13 (m, 1 H) 3.94-3.76 (m, 3 H) 3.69 (quin, J=8.31 Hz, 1 H) 3.50 (dd, J=9.59, 7.24 Hz, 1 H) 2.89 (s, 3 H) 2.79 (dd, J=16.82, 9.00 Hz, 1 H) 2.56 (dd, J=16.82, 8.22 Hz, 1 H).
실시예 42, 43, 및 44
4-(2-아미노-5-(1-메틸-5-옥소피롤리딘-3-일)피리딘-3-일)-N-((S)-1-(3-클로로페닐)-2-히드록시에틸)-2-플루오로벤즈아미드, 4-(2-아미노-5-((R)-1-메틸-5-옥소피롤리딘-3-일)피리딘-3-일)-N-((S)-1-(3-클로로페닐)-2-히드록시에틸)-2-플루오로벤즈아미드, 및 4-(2-아미노-5-((S)-1-메틸-5-옥소피롤리딘-3-일)피리딘-3-일)-N-((S)-1-(3-클로로페닐)-2-히드록시에틸)-2-플루오로벤즈아미드
Figure 112016034409922-pct00081
반응식 50에서의 단계 6에 따라, 4-(6-아미노-5-브로모피리딘-3-일)-1-메틸피롤리딘-2-온 및 (S)-N-(1-(3-클로로페닐)-2-히드록시에틸)-2-플루오로-4-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-디옥사보롤란-2-일)벤즈아미드를 사용하여, 4-(2-아미노-5-(1-메틸-5-옥소피롤리딘-3-일)피리딘-3-일)-N-((S)-1-(3-클로로페닐)-2-히드록시에틸)-2-플루오로벤즈아미드를 부분입체이성질체 혼합물 (33.3%)로서 수득하였다. LCMS (m/z): 483.3 (MH+), 0.59분;
1H NMR (400 MHz, CD3OD) δ ppm 8.79-8.61 (m, 1 H) 7.97 (d, J=1.96 Hz, 1 H) 7.93-7.82 (m, 2 H) 7.48-7.39 (m, 3 H) 7.39-7.25 (m, 3 H) 5.25-5.14 (m, 1 H) 3.95-3.76 (m, 3 H) 3.69 (quin, J=8.22 Hz, 1 H) 3.50 (dd, J=9.78, 7.43 Hz, 1 H) 2.89 (s, 3 H) 2.80 (dd, J=16.82, 9.00 Hz, 1 H) 2.56 (dd, J=16.82, 8.22 Hz, 1 H).
부분입체이성질체 혼합물을 키랄 SFC (키랄팩 5mic AD 칼럼, 4.6x100 (mm), IPA+0.1% DEA=40%, 5mL/분)로 분리하였다. 극성 부분입체이성질체, 4-(2-아미노-5-((R)-1-메틸-5-옥소피롤리딘-3-일)피리딘-3-일)-N-((S)-1-(3-클로로페닐)-2-히드록시에틸)-2-플루오로벤즈아미드를 RT = 1.41분에서 수득하였다. LCMS (m/z): 483.3 (MH+), 0.586분;
1H NMR (400 MHz, CD3OD) δ ppm 7.82 (d, J=1.56 Hz, 1 H) 7.74 (t, J=7.83 Hz, 1 H) 7.35 (d, J=2.35 Hz, 2 H) 7.33-7.15 (m, 5 H) 5.09 (t, J=5.87 Hz, 1 H) 4.48 (s, 1 H) 3.83-3.63 (m, 3 H) 3.50 (quint, J=8.22 Hz, 1 H) 3.36 (dd, J=9.39, 7.43 Hz, 1H) 2.78 (s, 3 H) 2.67 (dd, J=16.82, 9.00 Hz, 1 H) 2.42 (dd, J=16.63, 8.41 Hz, 1 H).
덜 극성의 부분입체이성질체, 4-(2-아미노-5-((S)-1-메틸-5-옥소피롤리딘-3-일)피리딘-3-일)-N-((S)-1-(3-클로로페닐)-2-히드록시에틸)-2-플루오로벤즈아미드를 RT = 2.16분에서 수득하였다. LCMS (m/z): 483.3 (MH+), 0.585분;
1H NMR (400 MHz, CD3OD) δ ppm 7.92 (d, J=2.35 Hz, 1 H) 7.84 (t, J=8.02 Hz, 1 H) 7.51-7.21 (m, 7 H) 5.18 (t, J=5.87 Hz, 1 H) 3.94-3.72 (m, 3 H) 3.59 (quin, J=8.22 Hz, 1 H) 3.50-3.42 (m, 1 H) 2.88 (s, 3 H) 2.82-2.70 (m, 1 H) 2.51 (dd, J=16.82, 8.61 Hz, 1 H).
실시예 45
(S)-4-(2-아미노-5-(4-메틸테트라히드로-2H-피란-4-일)피리딘-3-일)-2-플루오로-N-(2-히드록시-1-페닐에틸)벤즈아미드의 합성
반응식 51
Figure 112016034409922-pct00082
단계 1. 4-(6-플루오로피리딘-3-일)테트라히드로-2H-피란-4-카르브알데히드
디옥산 (35 mL) 중 5-브로모-2-플루오로피리딘 (2.0 g, 11.36 mmol)의 용액에 테트라히드로-2H-피란-4-카르브알데히드 (2.59 g, 22.73 mmol), Pd(OAc)2 (0.25 g, 1.14 mmol), 탄산세슘 (7.41 g, 22.73 mmol), 및 물 (10.24 μL, 0.57 mmol), xantphos (0.98 g, 1.70 mmol)를 첨가하였다. 혼합물을 질소로 5분 동안 퍼징하고, 생성된 혼합물을 오일 조에서 110℃로 15시간 동안 가열하였다. 혼합물을 에틸 아세테이트로 희석하고, 물, 염수로 세척하고, 황산나트륨 상에서 건조시키고, 농축시켰다. 잔류물을 실리카겔 상에서 플래쉬 칼럼 크로마토그래피겔 (이스코)에 의해 헵탄 중 0-80% 에틸 아세테이트로 용리시키면서 정제하여 4-(6-플루오로피리딘-3-일)테트라히드로-2H-피란-4-카르브알데히드 (560 mg, 2.68 mmol, 23.5% 수율)를 적색 오일로서 수득하였다. LCMS (m/z): 210 (MH+), 0.45분.
단계 2. (4-(6-플루오로피리딘-3-일)테트라히드로-2H-피란-4-일)메탄올
메탄올 (18 mL) 중 4-(6-플루오로피리딘-3-일)테트라히드로-2H-피란-4-카르브알데히드 (560 mg, 2.68 mmol)의 빙냉 용액에 수소화붕소나트륨 (91 mg, 2.41 mmol)을 첨가하였다. 반응 용액을 주위 온도에서 30분 동안 교반하였다. 용매를 진공 하에 제거하였다. 잔류물을 에틸 아세테이트로 희석하고, 물, 염수로 세척하고, 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 농축시켜 (4-(6-플루오로피리딘-3-일)테트라히드로-2H-피란-4-일)메탄올 (550 mg, 2.60 mmol, 97%)을 갈색 오일로서 수득하였다. LCMS (m/z): 212 (MH+), 0.42분.
단계 3. 2-플루오로-5-(4-(아이오도메틸)테트라히드로-2H-피란-4-일)피리딘
디클로로메탄 (20 mL) 중 트리페닐포스핀 (983 mg, 3.75 mmol), 아이오딘 (952 mg, 3.75 mmol)의 빙냉 용액에 이미다졸 (278 mg, 4.09 mmol)을 첨가하였다. 용액을 주위 온도에서 1시간 동안 교반하고, 이어서 10 mL 디클로로메탄 중 (4-(6-플루오로피리딘-3-일)테트라히드로-2H-피란-4-일)메탄올 (360 mg, 1.70 mmol)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 오일 조에서 60℃로 48시간 동안 가열하였다. 고체를 여과하고, 여과물을 실리카겔 상에서 플래쉬 칼럼 크로마토그래피겔 (이스코)에 의해 헵탄 중 0-80% 에틸 아세테이트로 용리시키면서 정제하여 2-플루오로-5-(4-(아이오도메틸)테트라히드로-2H-피란-4-일)피리딘 (330 mg, 1.03 mmol, 60.3% 수율)을 담황색 오일로서 수득하였다. LCMS (m/z): 322 (MH+), 0.77분.
단계 4. 2-플루오로-5-(4-메틸테트라히드로-2H-피란-4-일)피리딘
-15℃에서 THF (5mL) 중 (2-플루오로-5-(4-(아이오도메틸)테트라히드로-2H-피란-4-일)피리딘 (330 mg, 1.03 mmol)의 용액에 N-셀렉트리드 (2.26 mL, 2.26 mmol)를 적가하였다. 용액을 주위 온도에서 16시간 동안 교반하였다. 용액을 빙조에서 재냉각시키고, 물 0.3 mL를 첨가하였다. 생성된 용액을 10분 동안 교반하였다. 용매를 진공 하에 제거하고, 잔류물을 DCM 중에 용해시켰다. 불용성 고체를 여과하고, 여과물을 실리카 겔 상에서 플래쉬 칼럼 크로마토그래피 (이스코)에 의해 헵탄 중 0-80% 에틸 아세테이트로 용리시키면서 정제하여 2-플루오로-5-(4-메틸테트라히드로-2H-피란-4-일)피리딘 (110 mg, 0.56 mmol, 54.8% 수율)을 무색 오일로서 >90% 순도로 수득하였다. LCMS (m/z): 196 (MH+), 0.64분.
단계 5. N-(2,4-디메톡시벤질)-5-(4-메틸테트라히드로-2H-피란-4-일)피리딘-2-아민
(2,4-디메톡시페닐)메탄아민 (1016 μL, 6.76 mmol) 및 DIEA (246 μL, 1.41 mmol) 중 2-플루오로-5-(4-메틸테트라히드로-2H-피란-4-일)피리딘 (110 mg, 0.56 mmol)의 용액에 탄산칼륨 (156 mg, 1.12 mmol)을 첨가하였다. 생성된 혼합물을 160℃로 오일 조에서 16시간 가열하였다. 반응 혼합물을 에틸 아세테이트로 희석하고, 물, 염수로 세척하고, 황산나트륨 상에서 건조시키고, 농축시켰다. 잔류물을 실리카겔 상에서 플래쉬 칼럼 크로마토그래피겔 (이스코)에 의해 헵탄 중 0-100% 에틸 아세테이트로 용리시키면서 정제하여 N-(2,4-디메톡시벤질)-5-(4-메틸테트라히드로-2H-피란-4-일)피리딘-2-아민 (100 mg, 0.29 mmol, 51.8% 수율)을 담황색 고체로서 수득하였다. LCMS (m/z): 343 (MH+), 0.63분.
단계 6. 5-(4-메틸테트라히드로-2H-피란-4-일)피리딘-2-아민
DCM (6 mL) 중 N-(2,4-디메톡시벤질)-5-(4-메틸테트라히드로-2H-피란-4-일)피리딘-2-아민 (100 mg, 0.29 mmol)의 빙냉 용액에 DCM 용액 중 10mL 30% TFA를 첨가하였다. 생성된 용액을 0℃에서 15분 동안 교반하였다. 용매를 진공을 통해 제거하였다. 생성된 잔류물을 에틸 아세테이트 중에 재용해시키고, 유기 용액을 1M NaOH, 염수로 세척하고, 황산나트륨 상에서 건조시키고, 농축시켰다. 잔류물을 실리카겔 상에서 플래쉬 칼럼 크로마토그래피겔 (이스코)에 의해 헵탄 중 0-100% 에틸 아세테이트로 용리시키면서 정제하여 5-(4-메틸테트라히드로-2H-피란-4-일)피리딘-2-아민 (50 mg, 0.26 mmol, 89% 수율)을 백색 고체로서 수득하였다. LCMS (m/z): 193 (MH+), 0.35분.
단계 7. 3-브로모-5-(4-메틸테트라히드로-2H-피란-4-일)피리딘-2-아민
DCM (5 mL) 중 5-(4-메틸테트라히드로-2H-피란-4-일)피리딘-2-아민 (50 mg, 0.26 mmol)의 빙냉 용액에 NBS (50.9 mg, 0.28 mmol)를 2 부분으로 첨가하였다. 반응 혼합물을 주위 온도에서 40분 동안 교반하였다. 반응 용액을 에틸 아세테이트로 희석하고, 물, 수성 중탄산나트륨, 염수로 세척하고, 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 농축시켜 3-브로모-5-(4-메틸테트라히드로-2H-피란-4-일)피리딘-2-아민 (70 mg, 0.26 mmol, 99% 수율)을 황색 잔류물로서 수득하였다. LCMS (m/z): 271/273 (MH+), 0.41분.
단계 8. (S)-4-(2-아미노-5-(4-메틸테트라히드로-2H-피란-4-일)피리딘-3-일)-2-플루오로-N-(2-히드록시-1-페닐에틸)벤즈아미드
DME (4 mL) 중 3-브로모-5-(4-메틸테트라히드로-2H-피란-4-일)피리딘-2-아민 (70 mg, 0.26 mmol)의 용액에 (S)-2-플루오로-N-(2-히드록시-1-페닐에틸)-4-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-디옥사보롤란-2-일)벤즈아미드 (298 mg, 0.77 mmol) 및 탄산나트륨 (0.64 mL, 1.29 mmol)을 첨가하였다. 혼합물을 질소로 10분 동안 퍼징한 다음, PdCl2(dppf)-CH2Cl2 (31.6 mg, 0.039 mmol)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 오일 조에서 120℃로 2시간 동안 가열하였다. 반응 혼합물을 에틸 아세테이트로 희석하고, 물, 염수로 세척하고, 황산나트륨 상에서 건조시키고, 농축시켰다. 생성된 잔류물을 실리카겔 상에서 플래쉬 칼럼 크로마토그래피겔 (이스코)에 의해 헵탄 중 0-100% 에틸 아세테이트로 용리시키면서 정제하여 70mg 조 생성물을 수득하였으며, 이를 HPLC에 의해 정제하여 (S)-4-(2-아미노-5-(4-메틸테트라히드로-2H-피란-4-일)피리딘-3-일)-2-플루오로-N-(2-히드록시-1-페닐에틸)벤즈아미드 (40.8 mg, 0.089 mmol, 34.5% 수율)를 TFA 염으로서 수득하였다. LCMS (m/z): 450 (MH+), 0.61분;
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ ppm 8.22 (t, J=7.83 Hz, 1 H) 7.77 - 7.65 (m, 2 H) 7.50 (dd, J=11.74, 7.43 Hz, 1 H) 7.42 - 7.36 (m, 4 H) 7.33 (d, J=7.43 Hz, 2 H) 7.21 (d, J=11.74 Hz, 1 H) 5.33 (d, J=4.70 Hz, 1 H) 4.08 - 3.94 (m, 2 H) 3.83 - 3.65 (m, 4 H) 1.97 (ddd, J=13.40, 8.12, 5.09 Hz, 2 H) 1.72 (d, J=13.69 Hz, 2 H) 1.35 (s, 3 H)
실시예 46
4-(3-아미노피라진-2-일)-N-벤질벤즈아미드의 합성
반응식 52
Figure 112016034409922-pct00083
DME (3.3 mL) 중 N-벤질-4-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-디옥사보롤란-2-일)벤즈아미드 (150 mg, 0.445 mmol), 3-클로로피라진-2-아민 (74.9 mg, 0.578 mmol), 및 PdCl2(dppf)-CH2Cl2 부가물 (36.3 mg, 0.044 mmol)의 용액에 2 M Na2CO3 (1.11 mL)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 마이크로웨이브 합성기 (120℃, 10분)에서 가열하였다. EtOAc로 희석하고, 물로 2회 세척하였다. 이어서, 1N HCl (3 X15 mL)로 추출하였다. 산성 용액을 에테르 (2 X15 mL)로 2회 세척한 다음, Na2CO3으로 염기성화시켰다. 이어서, EtOAc (20 mL, 3회)로 추출한 다음, 포화 NaHCO3, 물 및 염수로 세척하고, Na2SO4 상에서 건조시키고, 여과하고, 농축시켰다. 조 생성물을 플래쉬 크로마토그래피에 의해 헵탄 중 0-100%의 EtOAc (10% MeOH 함유)로 용리시키면서 정제한 다음, 회전증발기 상에서 농축시켰다. 잔류물을 에테르로 연화처리하여 목적 생성물 80.2 mg을 수득하였다. LCMS (m/z): 305.2 (MH+), 0.59분.
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 8.74 (d, J=8.22 Hz, 1 H) 8.41 (s, 1 H) 8.06 (dd, J=9.39, 2.74 Hz, 1 H) 8.01 (d, J=8.61 Hz, 2 H) 7.94 (br. s., 1 H) 7.83 (d, J=8.22 Hz, 2 H) 7.40 - 7.34 (m, 2 H) 7.30 (t, J=7.63 Hz, 2 H) 7.22 (d, J=7.43 Hz, 1 H) 6.40 (d, J=9.39 Hz, 1 H) 5.12 - 5.03 (m, 1 H) 3.75 - 3.60 (m, 2 H).
<표 2> 상기 기재된 방법 1로부터 제조된 화합물
Figure 112016034409922-pct00084
Figure 112016034409922-pct00085
Figure 112016034409922-pct00086
Figure 112016034409922-pct00087
Figure 112016034409922-pct00088
Figure 112016034409922-pct00089
Figure 112016034409922-pct00090
Figure 112016034409922-pct00091
Figure 112016034409922-pct00092
Figure 112016034409922-pct00093
Figure 112016034409922-pct00094
Figure 112016034409922-pct00095
Figure 112016034409922-pct00096
Figure 112016034409922-pct00097
Figure 112016034409922-pct00098
Figure 112016034409922-pct00099
Figure 112016034409922-pct00100
Figure 112016034409922-pct00101
Figure 112016034409922-pct00102
Figure 112016034409922-pct00103
Figure 112016034409922-pct00104
방법 2
실시예 127
(S)-4-(3-아미노-6-(1,3-디메틸-1H-피라졸-4-일)피라진-2-일)-N-(1-(3-클로로페닐)-2-히드록시에틸)-2-플루오로벤즈아미드의 합성
반응식 53
Figure 112016034409922-pct00105
단계 1. (S)-4-(3-아미노피라진-2-일)-N-(1-(3-클로로페닐)-2-히드록시에틸)-2-플루오로벤즈아미드
3-클로로피라진-2-아민 (288 mg, 2.22 mmol), (S)-4-(1-(3-클로로페닐)-2-히드록시에틸카르바모일)-3-플루오로페닐보론산 (500 mg, 1.48 mmol)의 반응 혼합물에, PdCl2(dppf)-DCM (108 mg, 0.148 mmol), DME (1.1 mL), 2M Na2CO3 (3.703 mL)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 마이크로웨이브 합성기 (120℃, 12분)에서 가열하였다. 반응 혼합물에, 무수 황산나트륨을 첨가하고, 여과하고, 농축시켰다. 조 생성물을 플래쉬 크로마토그래피에 의해 헵탄 중 EtOAc (10% MeOH 함유)로 용리시키면서 예비정제하였다. 순수한 분획을 합하고, 농축시켜 목적 생성물 389 mg을 68% 수율로 수득하였다. LCMS (m/z): 387 (MH+), 0.69분.
단계 2. (S)-4-(3-아미노-6-브로모피라진-2-일)-N-(1-(3-클로로페닐)-2-히드록시에틸)-2-플루오로벤즈아미드
아세토니트릴 (21 mL) 중 (S)-4-(3-아미노피라진-2-일)-N-(1-(3-클로로페닐)-2-히드록시에틸)-2-플루오로벤즈아미드 (389 mg, 1.006 mmol)의 용액에 0℃에서 NBS (171 mg, 0.961 mmol)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 0℃에서 20분 동안 교반하였다. 포화 NaHCO3으로 캔칭한 후, 30분 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 EtOAc로 3회 추출하고, 유기부를 포화 NaHCO3, 물 및 염수로 세척하고, 건조시키고, 여과하고, 농축시켰다. 조 물질을 후속 단계에 추가 정제 없이 사용하였다. LCMS (m/z): 367 (MH+), 0.88분.
단계 3. (S)-4-(3-아미노-6-(1,3-디메틸-1H-피라졸-4-일)피라진-2-일)-N-(1-(3-클로로페닐)-2-히드록시에틸)-2-플루오로벤즈아미드
(S)-4-(3-아미노-6-브로모피라진-2-일)-N-(1-(3-클로로페닐)-2-히드록시에틸)-2-플루오로벤즈아미드 (40 mg, 0.086 mmol), 1,3-디메틸-4-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-디옥사보롤란-2-일)-1H-피라졸 (38.2 mg, 0.172 mmol)의 반응 혼합물에, PdCl2(dppf)-DCM (6.28 mg, 8.59 μmol), 및 DME (644 μL), 2 M Na2CO3 (215 μL)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 마이크로웨이브 합성기 (120℃, 12분)에서 가열하였다. 반응 혼합물에, 무수 황산나트륨을 첨가하고, 여과하고, 농축시켰다. 조 생성물을 자동-정제용에 의해 정제하여 목적 생성물 25 mg을 TFA 염으로서 수득하였다. LCMS (m/z): 481.3 (MH+), 0.73분;
1H NMR (500 MHz, CD3OD) δ ppm 8.66 (d, J=6.26 Hz, 1 H) 8.17 (s, 1 H) 8.02 (s, 1 H) 7.76 - 7.51 (m, 3 H) 7.45 - 7.16 (m, 3 H) 5.07 - 4.09 (m, 1 H) 3.72 (s, 3 H) 3.62 (m, 2 H) 2.33 (s, 3 H).
실시예 128
(S)-4-(2-아미노-5-(1-메틸-1H-1,2,3-트리아졸-4-일)피리딘-3-일)-N-(1-(3-클로로페닐)-2-히드록시에틸)-2-플루오로벤즈아미드의 합성
반응식 54
Figure 112016034409922-pct00106
단계 1. 메틸 4-(2-아미노피리딘-3-일)-2-플루오로벤조에이트
500 mL 둥근 바닥 플라스크에 들은 3-브로모피리딘-2-아민 (5 g, 28.9 mmol)에 (3-플루오로-4-(메톡시카르보닐)페닐)보론산 (7.44 g, 37.6 mmol), PdCl2(dppf)-DCM (2.115 g, 2.89 mmol), DME (108 mL) 및 2M Na2CO3 용액 (36.1 mL)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 오일 조에서 110℃에서 4시간 동안 가열하였다. 반응 혼합물을 EtOAc로 희석하고, 물로 3회 세척하고, Na2SO4 상에서 건조시키고, 여과하고, 농축시켰다. 조 생성물을 플래쉬 크로마토그래피에 의해 0-100%의 EtOAc (10%의 MeOH 함유)/헵탄으로 용리시키면서 정제하여 메틸 4-(2-아미노피리딘-3-일)-2-플루오로벤조에이트 5.6 g을 79% 수율로 정제하였다. LCMS (m/z): 247.1 (MH+), 0.50분.
단계 2. 메틸 4-(2-아미노-5-브로모피리딘-3-일)-2-플루오로벤조에이트
아세토니트릴 (229 mL) 중 메틸 4-(2-아미노피리딘-3-일)-2-플루오로벤조에이트 (5.64 g, 22.90 mmol)의 용액에 0℃에서 NBS (4.16 g, 23.36 mmol)를 2 부분으로 첨가하였다. 반응 혼합물을 0℃에서 20분 동안 교반하였다. 포화 Na2S2O3 및 NaHCO3으로 켄칭한 후, 30분 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 EtOAc로 3회 추출하고, 유기부를 포화 NaHCO3, 물 및 염수로 세척하였다. 건조시키고, 농축시켰다. 조 물질을 에테르로 연화처리하여 메틸 4-(2-아미노-5-브로모피리딘-3-일)-2-플루오로벤조에이트 7.05 g을 95% 수율로 수득하였다. LCMS (m/z): 327.1 (MH+), 0.66분.
단계 3. 4-(2-아미노-5-브로모피리딘-3-일)-2-플루오로벤조산
THF (19.48 mL) 및 MeOH (9.74 mL, 비: 1.000) 중 메틸 4-(2-아미노-5-브로모피리딘-3-일)-2-플루오로벤조에이트 (1.9 g, 5.84 mmol)의 용액에 LiOH (1 M 수성 용액성 용액) (10.52 mL, 10.52 mmol)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 5시간 동안 교반하였다. 1N HCl (1.9 mL)을 pH 5까지 첨가한 후, 반응 혼합물을 EtOAc로 후처리하고, 유기 층을 Na2SO4 상에서 건조시키고, 여과하고, 진공 하에 농축시켰다. 조 4-(2-아미노-5-브로모피리딘-3-일)-2-플루오로벤조산을 후속 단계에 추가 정제 없이 사용하였다. LCMS (m/z): 311.1/313.1 (MH+), 0.5분.
단계 4. (S)-4-(2-아미노-5-브로모피리딘-3-일)-N-(1-(3-클로로페닐)-2-히드록시에틸)-2-플루오로벤즈아미드
THF (8.036 mL) 중 4-(2-아미노-5-브로모피리딘-3-일)-2-플루오로벤조산 (300 mg, 0.964 mmol)의 용액에 (S)-2-아미노-2-(3-클로로페닐)에탄올 (331 mg, 1.157 mmol)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 15시간 동안 교반하였다. 물을 첨가한 후, 반응 혼합물을 EtOAc로 후처리하고, 유기 층을 무수 Na2SO4 상에서 건조시키고, 여과하고, 진공 하에 농축시켰다. 조 (S)-4-(2-아미노-5-브로모피리딘-3-일)-N-(1-(3-클로로페닐)-2-히드록시에틸)-2-플루오로벤즈아미드를 후속 단계에 추가 정제 없이 사용하였다. LCMS (m/z): 464.1/466.1 (MH+), 0.69분.
단계 5. (S)-4-(2-아미노-5-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-디옥사보롤란-2-일)피리딘-3-일)-N-(1-(3-클로로페닐)-2-히드록시에틸)-2-플루오로벤즈아미드
디옥산 (610 μL) 중 (S)-4-(2-아미노-5-브로모피리딘-3-일)-N-(1-(3-클로로페닐)-2-히드록시에틸)-2-플루오로벤즈아미드 (85 mg, 0.183 mmol), 비스(피나콜레이토)디보론 (93 mg, 0.366 mmol), 및 PdCl2(dppf) (26.8 mg, 0.037 mmol)의 용액에 아세트산칼륨 (54 mg, 0.549 mmol)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 마이크로웨이브 합성기 (20분 동안 120℃)에서 가열하였다. 반응 혼합물을 셀라이트 패드를 통해 여과하였다. 여과물을 대부분 농축시킨 후, 조 (S)-4-(2-아미노-5-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-디옥사보롤란-2-일)피리딘-3-일)-N-(1-(3-클로로페닐)-2-히드록시에틸)-2-플루오로벤즈아미드를 후속 단계에 추가 정제 없이 사용하였다. LCMS (m/z): 430.2 (보론산에 대한 MH+), 0.57분.
단계 6. (S)-4-(2-아미노-5-(1-메틸-1H-1,2,3-트리아졸-4-일)피리딘-3-일)-N-(1-(3-클로로페닐)-2-히드록시에틸)-2-플루오로벤즈아미드
잔류 디옥산 중 조 (S)-4-(2-아미노-5-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-디옥사보롤란-2-일)피리딘-3-일)-N-(1-(3-클로로페닐)-2-히드록시에틸)-2-플루오로벤즈아미드 (30 mg, 0.059 mmol)의 용액에 실온에서 4-브로모-1-메틸-1H-1,2,3-트리아졸 (14.24 mg, 0.088 mmol), PdCl2(dppf) (42.9 mg, 0.059 mmol), DME (195 μl) 및 2 M Na2CO3 (130 μl)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 5시간 동안 교반하였다. 물 및 EtOAc를 첨가한 후, 유기 층을 EtOAc로 추출하였다. 유기 층을 물 및 염수로 세척하고, 무수 Na2SO4 상에서 건조시키고, 여과하고, 진공 하에 농축시켰다. 조 생성물을 정제용 HPLC에 의해 정제하였다. 순수한 분획을 동결건조시켜 (S)-4-(2-아미노-5-(1-메틸-1H-1,2,3-트리아졸-4-일)피리딘-3-일)-N-(1-(3-클로로페닐)-2-히드록시에틸)-2-플루오로벤즈아미드 (2 단계에 걸쳐 25%)를 TFA 염으로서 수득하였다. LCMS (m/z): 467.3 (MH+), 0.61분;
1H NMR (400MHz, CD3OD) δ ppm 8.64 (m, 1 H), 8.31 (m, 1 H), 8.25 (m, 2 H), 8.2 (m, 1 H), 7.82 (m, 1 H), 7.4 (m, 3 H), 7.28 (m, 2 H), 7.22 (m, 1 H), 5.11 (m, 1 H), 4.07 (s, 3 H), 3.78 (m, 2 H).
실시예 129
(S)-4-(3-아미노-6-(6-옥소-1,6-디히드로피리딘-3-일)피라진-2-일)-N-(2-히드록시-1-페닐에틸)벤즈아미드의 합성
반응식 55
Figure 112016034409922-pct00107
단계 1. (S)-4-(3-아미노-6-브로모피라진-2-일)-N-(2-히드록시-1-페닐에틸)벤즈아미드
DME (12.3 mL) 중 3,5-디브로모피라진-2-아민 (826 mg, 3.27 mmol), (S)-N-(2-히드록시-1-페닐에틸)-4-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-디옥사보롤란-2-일)벤즈아미드 (600 mg, 1.634 mmol), 및 PdCl2(dppf).CH2Cl2 부가물 (133 mg, 0.163 mmol)의 용액에, 2 M Na2CO3 (4.08 mL)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 마이크로웨이브 합성기 (120℃, 10분)에서 가열하였다. 반응 혼합물을 EtOAc로 후처리하였다. 유기 층을 포화 NaHCO3, 물 및 염수로 세척하고, Na2SO4 상에서 건조시키고, 여과하고, 진공 하에 농축시켰다. 조 생성물을 실리카 플래쉬 크로마토그래피에 의해 헵탄 중 0-100%의 EtOAc (10%의 MeOH 함유)로 용리시키면서 정제하고, 에테르로 연화처리하여 (S)-4-(3-아미노-6-브로모피라진-2-일)-N-(2-히드록시-1-페닐에틸)벤즈아미드 800 mg을 수득하였다. LCMS (m/z): 415 (MH+), 0.73분.
단계 2. (S)-4-(3-아미노-6-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-디옥사보롤란-2-일)피라진-2-일)-N-(2-히드록시-1-페닐에틸)벤즈아미드
디옥산 (302 μL) 중 (S)-4-(3-아미노-6-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-디옥사보롤란-2-일)피라진-2-일)-N-(2-히드록시-1-페닐에틸)벤즈아미드 (50 mg, 0.121 mmol), 비스(피나콜레이토)디보론 (61.4 mg, 0.242 mmol), 및 PdCl2(dppf)-CH2Cl2 부가물 (9.88 mg, 0.012 mmol)의 용액에 아세트산칼륨 (35.6 mg, 0.363 mmol)을 탈기시킨 직후에 첨가하였다. 반응 혼합물을 마이크로웨이브 합성기 (20분 동안 120℃)에서 가열하였다. EtOAc로 희석한 후, 반응 혼합물을 셀라이트 패드를 통해 여과하였다. 농축시킨 후, 조 (S)-4-(3-아미노-6-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-디옥사보롤란-2-일)피라진-2-일)-N-(2-히드록시-1-페닐에틸)벤즈아미드를 후속 단계에 추가 정제 없이 사용하였다. LCMS (m/z): 379 (보론산에 대한 MH+), 0.47분.
단계 3. (S)-4-(3-아미노-6-(6-옥소-1,6-디히드로피리딘-3-일)피라진-2-일)-N-(2-히드록시-1-페닐에틸)벤즈아미드
DME (1091 μL) 중 (S)-5-아미노-6-(4-(2-히드록시-1-페닐에틸카르바모일)페닐)피라진-2-일보론산 (55 mg, 0.145 mmol), 5-브로모피리딘-2(1H)-온 (38.0 mg, 0.218 mmol), 및 PdCl2(dppf)-CH2Cl2 (11.88 mg, 0.015 mmol)의 용액에 2M Na2CO3 (364 μL)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 마이크로웨이브 합성기 (120℃, 10분)에서 가열하였다. 반응 혼합물을 EtOAc로 후처리하였다. 유기 층을 포화 NaHCO3, 물 및 염수로 세척하고, Na2SO4 상에서 건조시키고, 여과하고, 진공 하에 농축시켰다. 조 생성물을 정제용 HPLC에 의해 정제하여 (S)-4-(3-아미노-6-(6-옥소-1,6-디히드로피리딘-3-일)피라진-2-일)-N-(2-히드록시-1-페닐에틸)벤즈아미드 4.3 mg을 TFA 염으로서 수득하였다. LCMS (m/z): 428.2 (MH+), 0.55분;
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) 3.60 - 3.75 (m, 2 H) 5.03 - 5.12 (m, 1 H) 6.40 (d, J=9.39 Hz, 1 H) 7.22 (d, J=7.43 Hz, 1 H) 7.30 (t, J=7.63 Hz, 2 H) 7.34 - 7.40 (m, 2 H) 7.83 (d, J=8.22 Hz, 2 H) 7.94 (br. s., 1 H) 8.01 (d, J=8.61 Hz, 2 H) 8.06 (dd, J=9.39, 2.74 Hz, 1 H) 8.41 (s, 1 H) 8.74 (d, J=8.22 Hz, 1 H).
(S)-4-(3-아미노-6-브로모피라진-2-일)-N-(1-(3-클로로페닐)-2-히드록시에틸)-2,6-디플루오로벤즈아미드의 합성
반응식 56
Figure 112016034409922-pct00108
단계 1. 메틸 4-브로모-2,6-디플루오로벤조에이트
실온에서 MeOH (11 mL) 중 4-브로모-2,6-디플루오로벤조산 (800 mg, 3.38 mmol)의 용액에, 황색 용액으로 변할 때까지 트리메틸실릴디아조메탄 (5.63 mL, 3.38 mmol)을 천천히 첨가하였다. 소량의 AcOH를 황색이 사라질 때까지 첨가하였다. 모든 휘발성 물질을 진공 하에 제거하여 메틸 4-브로모-2,6-디플루오로벤조에이트 (47%)를 수득하였다. LCMS (m/z): 251.1 (MH+), 0.86분.
단계 2. 메틸 4-(2-아미노피리딘-3-일)-2,6-디플루오로벤조에이트
반응식 54에서의 단계 1에 따라, 메틸 4-(2-아미노피리딘-3-일)-2,6-디플루오로벤조에이트를 수득하였다 (9%). LCMS (m/z): 485.2 (MH+), 0.64분;
1H NMR (400 MHz, CD3OD) δ ppm 8.11 (m, 1 H), 7.76 (m, 2 H), 7.37 (m, 1 H), 7.27 (m, 2 H), 7.20 (m, 3 H), 5.09 (m, 1 H), 4.03 (s, 3 H), 3.73 (m, 2 H).
단계 3, 4, 및 5. (S)-4-(3-아미노-6-브로모피라진-2-일)-N-(1-(3-클로로페닐)-2-히드록시에틸)-2,6-디플루오로벤즈아미드
반응식 54에서의 단계 2, 3, 및 4에 따라, (S)-4-(3-아미노-6-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-디옥사보롤란-2-일)피라진-2-일)-N-(1-(3-클로로페닐)-2-히드록시에틸)-2,6-디플루오로벤즈아미드를 수득하였다. LCMS (m/z): 482/484 (MH+), 0.68분.
<표 3> 스즈키 커플링을 위한 브로마이드 또는 상응하는 보론산 에스테르 중간체
Figure 112016034409922-pct00109
Figure 112016034409922-pct00110
Figure 112016034409922-pct00111
(+/-)-4-(2-아미노-5-브로모피리딘-3-일)-2-플루오로-N-((1S,2R)-2-페닐시클로프로필)벤즈아미드의 키랄 분해
반응식 57
Figure 112016034409922-pct00112
(+/-)-4-(2-아미노-5-브로모피리딘-3-일)-2-플루오로-N-((1S,2R)-2-페닐시클로프로필)벤즈아미드 (121 mg)를 키랄 크로마토그래피 (AD-H 칼럼 EtOH=60/40, 1mL/분)에 의해 분해하였다. 극성 화합물 (피크1), 4-(2-아미노-5-브로모피리딘-3-일)-2-플루오로-N-((1R,2S)-2-페닐시클로프로필)벤즈아미드를 7.41분 (50 mg, 41%)에서 수득하고, 덜 극성의 화합물 (피크2), 4-(2-아미노-5-브로모피리딘-3-일)-2-플루오로-N-((1S,2R)-2-페닐시클로프로필)벤즈아미드를 10.26분 (54 mg, 44%)에서 수득하였다. 절대 입체화학을 상응하는 유사체의 생화학적 데이터 및 도킹 모델을 기준으로 하여 지정하였다.
실시예 130
(+/-)-4-(2-아미노-5-(1-메틸-1H-피라졸-4-일)피리딘-3-일)-2-플루오로-N-((1R,2S)-2-페닐시클로프로필)벤즈아미드의 합성
Figure 112016034409922-pct00113
반응식 59에 따라, (+/-)-4-(2-아미노-5-브로모피리딘-3-일)-2-플루오로-N-((1S,2R)-2-페닐시클로프로필)벤즈아미드를 사용하여, (+/-)-4-(2-아미노-5-(1-메틸-1H-피라졸-4-일)피리딘-3-일)-2-플루오로-N-((1R,2S)-2-페닐시클로프로필)벤즈아미드를 수득하였다 (11%). LCMS (m/z): 428.2 (MH+), 0.72분;
1H NMR (400MHz, CD3OD) δ ppm 8.19 (m, 1 H), 7.91 (s, 1 H), 7.82 (m, 1 H), 7.77 (m, 1 H), 7.64 (m, 1 H), 7.48 - 7.33 (m, 2 H), 7.31 - 7.12 (m, 5 H), 3.91 (s, 3 H), 3.10 (m, 1 H), 2.20 (m, 1 H), 1.33 (m, 2 H).
실시예 131
4-(2-아미노-5-(1-메틸-1H-피라졸-4-일)피리딘-3-일)-2-플루오로-N-((1R,2S)-2-페닐시클로프로필)벤즈아미드의 합성
Figure 112016034409922-pct00114
반응식 59에 따라, 4-(2-아미노-5-브로모피리딘-3-일)-2-플루오로-N-((1R,2S)-2-페닐시클로프로필)벤즈아미드를 사용하여, 4-(2-아미노-5-(1-메틸-1H-피라졸-4-일)피리딘-3-일)-2-플루오로-N-((1R,2S)-2-페닐시클로프로필)벤즈아미드를 수득하였다 (53%). LCMS (m/z): 428.3 (MH+), 0.69분;
1H NMR (400MHz, CD3OD) δ ppm 8.11 - 8.02 (m, 1 H), 7.94 (m, 1 H), 7.97 - 7.88 (m, 2 H), 7.85 - 7.71 (m, 2 H), 7.43 - 7.30 (m, 2 H), 7.26 - 7.14 (m, 2H), 7.14 - 7.02 (m, 2 H), 3.83 (s, 3 H), 3.06 - 2.92 (m, 1 H), 2.19 - 2.02 (m, 1 H), 1.35 - 1.17 (m, 2 H).
절대 입체화학을 생화학적 데이터 및 도킹 모델을 기준으로 하여 지정하였다.
실시예 132
4-(2-아미노-5-(1-메틸-1H-피라졸-4-일)피리딘-3-일)-2-플루오로-N-((1S,2R)-2-페닐시클로프로필)벤즈아미드
Figure 112016034409922-pct00115
반응식 59에 따라, 4-(2-아미노-5-브로모피리딘-3-일)-2-플루오로-N-((1S,2R)-2-페닐시클로프로필)벤즈아미드를 사용하여, 4-(2-아미노-5-(1-메틸-1H-피라졸-4-일)피리딘-3-일)-2-플루오로-N-((1S,2R)-2-페닐시클로프로필)벤즈아미드를 수득하였다 (42%). LCMS (m/z): 428.3 (MH+),
1H NMR (400MHz, CD3OD) δ ppm 8.09 - 8.02 (m, 1 H), 8.01 - 7.95 (m, 1 H), 7.96 - 7.88 (m, 2 H), 7.84 - 7.70 (m, 2 H), 7.42 - 7.29 (m, 2 H), 7.25 - 7.02 (m, 4 H), 3.83 (s, 3 H), 3.10 - 2.87 (m, 1 H), 2.24 - 2.00 (m, 1 H), 1.33 - 1.15 (m, 2 H).
절대 입체화학을 생화학적 데이터 및 도킹 모델을 기준으로 하여 지정하였다.
실시예 133
(S)-4-(2-아미노-5-(1-듀테리도-메틸,5-메틸-1H-피라졸-4-일)피리딘-3-일)-N-(1-(3-클로로페닐)-2-히드록시에틸)-2-플루오로벤즈아미드의 합성
반응식 58
Figure 112016034409922-pct00116
단계 1. 1-듀테리도-메틸-1H-피라졸
2-메틸 THF (80 mL) 중 NaH (1.851 g, 46.3 mmol)의 용액에 0℃에서 2-메틸 THF (30 mL) 중 1H-피라졸 (3 g, 44.1 mmol)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온으로 가온하고, 1시간 동안 교반하였다. 여기에, CD3I (3.02 mL, 48.5 mmol)를 천천히 첨가하였다. 반응 혼합물을 밤새 교반하였다. NH4Cl 용액으로 켄칭한 후, 반응 혼합물을 EtOAc로 추출하였다. 유기 층을 물 및 염수로 세척하고, 여과하고, 진공 하에 농축시켰다. 조 생성물을 증류하여 1-듀테리도-메틸-1H-피라졸 (47%) (b.p. ~130℃, 조 온도는 ~200℃였음)을 수득하였다. LCMS (m/z): 86 (MH+), 0.24분;
1H NMR (500MHz, CDCl3) δ ppm 7.55 - 7.42 (m, 1H), 7.39 - 7.28 (m, 1H), 6.28 - 6.15 (m, 1H).
단계 2. 1-듀테리도-메틸,5-메틸-1H-피라졸
-30℃에서 에테르 (20 mL) 중 n-BuLi의 용액 (헥산 중 2.5 M) (4.14 mL, 10.34 mmol)에 에테르 (2 mL) 중 1-듀테리도-메틸-1H-피라졸 (880 mg, 10.34 mmol)의 용액을 천천히 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온으로 가온되도록 하고, 2시간 동안 교반하였다. 0℃로 냉각시킨 후, 에테르 (3 mL) 중 디메틸 술페이트 (0.931 mL, 9.82 mmol)의 용액을 반응 혼합물에 천천히 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 3시간 동안 교반하였다. 포화 NH4Cl 용액으로 켄칭한 후, 반응 혼합물을 에테르 (x2)로 추출하였지만, 수성 상은 여전히 생성물을 함유하였다. 이어서, 수성 상을 DCM (x2)으로 추출하였다. 합한 유기 상을 무수 Na2SO4 상에서 건조시키고, 여과하고, 진공 하에 농축시켰다. 조 생성물을 증류에 의해 정제하여 1-듀테리도-메틸,5-메틸-1H-피라졸 (59%)을 수득하였다. LCMS (m/z): 100.0 (MH+), 0.24분;
1H NMR (400MHz, 클로로포름-d) δ ppm 7.36 (m, 1H), 6.00 (m, 1H), 2.27 (s, 3H).
단계 3. 4-브로모-1-듀테리도-메틸,5-메틸-1H-피라졸
MeCN (3.362 mL) 중 1-듀테리도-메틸,5-메틸-1H-피라졸 (100 mg, 1.009 mmol)의 용액에 NBS (171 mg, 0.958 mmol)를 0℃에서 천천히 첨가하였다. 빙조를 제거한 후, 반응 혼합물을 30분 동안 교반하였다. 아황산나트륨 용액으로 켄칭한 후, 반응 혼합물을 EtOAc로 추출하였다. 유기 층을 탄산나트륨 용액 및 염수로 세척하고, 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 진공 하에 농축시켰다. 조 4-브로모-1-듀테리도-메틸,5-메틸-1H-피라졸을 수득하고, 후속 단계에 추가 정제 없이 사용하였다 (92%). LCMS (m/z): 178, 180 (MH+), 0.61분.
단계 4. (S)-4-(2-아미노-5-(1-듀테리도-메틸,5-메틸-1H-피라졸-4-일)피리딘-3-일)-N-(1-(3-클로로페닐)-2-히드록시에틸)-2-플루오로벤즈아미드
반응식 54에서의 단계 6에 따라, 4-브로모-1-듀테리도-메틸,5-메틸-1H-피라졸을 사용하여, (S)-4-(2-아미노-5-(1-듀테리도-메틸,5-메틸-1H-피라졸-4-일)피리딘-3-일)-N-(1-(3-클로로페닐)-2-히드록시에틸)-2-플루오로벤즈아미드를 유리 염기 (9%)로서 수득하였다. LCMS (m/z): 483.2 (MH+), 0.67분; 1H NMR (500MHz, CD3OD) δ ppm 8.00 (d, J=1.9 Hz, 1H), 7.86 (t, J=7.9 Hz, 1H), 7.58 - 7.23 (m, 8H), 5.19 (t, J=5.8 Hz, 1H), 3.93 - 3.77 (m, 2H), 2.37 (s, 1H).
실시예 134
(S)-4-(2-아미노-5-(시아노메틸)피리딘-3-일)-2-플루오로-N-(2-히드록시-1-페닐에틸)벤즈아미드의 합성
반응식 59
Figure 112016034409922-pct00117
DME (697 μl) 중 (S)-4-(2-아미노-5-브로모피리딘-3-일)-2-플루오로-N-(2-히드록시-1-페닐에틸)벤즈아미드 (40 mg, 0.093 mmol) 및 이속사졸-4-일보론산 (20.99 mg, 0.186 mmol)의 용액에 PdCl2(dppf)-CH2Cl2 (7.59 mg, 9.30 μmol) 및 2 M Na2CO3 용액 (232 μl)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 마이크로웨이브에서 120℃에서 30분 동안 가열하였다. 반응 혼합물을 EtOAc와 물 사이에 분배하고, 유기 층을 무수 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 진공 하에 농축시켰다. 조 생성물을 정제용 HPLC에 의해 정제하였다. 순수한 분획을 수집하고, 동결건조시켜 (S)-4-(2-아미노-5-(시아노메틸)피리딘-3-일)-2-플루오로-N-(2-히드록시-1-페닐에틸)벤즈아미드를 TFA 염으로서 7% 수율로 수득하였다. LCMS (m/z): 391.2 (MH+), 0.51분; 1H NMR (400MHz,CD3OD) δ ppm 8.66 (br. s., 1 H), 7.99 - 7.95 (m, 1 H), 7.92 - 7.82 (m, 2 H), 7.44 - 7.39 (m, 4 H), 7.38 - 7.32 (m, 2 H), 7.31 - 7.25 (m, 1 H), 5.25 - 5.18 (m, 1 H), 3.92 - 3.90 (m, 2 H), 3.90 - 3.80 (m, 2 H).
실시예 135
(S)-4-(3-아미노-6-(2,2,6,6-테트라듀테리도-테트라히드로-2H-피란-4-일)피라진-2-일)-N-(2-히드록시-1-페닐에틸)벤즈아미드의 합성
반응식 60
Figure 112016034409922-pct00118
Figure 112016034409922-pct00119
단계 1. 디에틸 2,2'-(1,3-디옥솔란-2,2-디일)디아세테이트
벤젠 (80 mL) 중 디에틸 1,3-아세톤디카르복실레이트 (12 g, 59.3 mmol), 에틸렌글리콜 (9.93 mL, 178 mmol), 및 p-톨루엔술폰산 1수화물 (564 mg, 2.97 mmol)의 용액을 가열 하에 환류하여 물을 10시간 동안 딘-스타크 트랩에 의해 제거하였다. 벤젠 층을 포화 수성 중탄산나트륨 용액 및 염수로 세척하였다. 용매를 증류하고, 수득된 잔류물을 플래쉬 크로마토그래피 (헵탄 중 10에서 40% EtOAc)에 의해 정제하여 디에틸 2,2'-(1,3-디옥솔란-2,2-디일)디아세테이트 (42%)를 수득하였다. LCMS (m/z): 247.2 (MH+), 0.65분;
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ ppm 4.17 (q, J=7.04 Hz, 4 H) 4.03 (s, 4 H) 2.95 (s, 4 H) 1.27 (t, J=7.24 Hz, 6 H).
단계 2. 2,2'-(1,3-디옥솔란-2,2-디일)디에탄올-d4
-10 내지 0℃ 사이의 THF 중 LiAlD4 (2.46 g, 40 mL 중 58.7 mmol)의 현탁액에, THF (20 mL) 중 디에틸 2,2'-(1,3-디옥솔란-2,2-디일)디아세테이트 (6.06 g)의 용액을 10분에 걸쳐 첨가하였다. 반응 혼합물을 0℃에서 1시간 동안 교반하고, 물 (2.5 mL), 15 wt% NaOH (2.5 mL), 및 물 (7.5 mL)의 순차적 첨가로 켄칭하였다. 켄칭한 혼합물의 침전물을 여과에 의해 제거하고, 필터 케이크를 THF로 조심스럽게 헹구었다. 여과물을 농축시키고, 조 2,2'-(1,3-디옥솔란-2,2-디일)디에탄올-d4를 수득하였다 (92%).
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ ppm 4.06 (s, 4 H) 2.49 (s, 2 H) 1.98 (s, 4 H).
단계 3. 1,4,8-트리옥사스피로[4.5]데칸-d4
2,2'-(1,3-디옥솔란-2,2-디일)디에탄올-d4 (3.57 g, 21.5 mmol) 및 4-메틸벤젠술폰산 수화물 (0.204 g, 1.07 mmol) 및 벤젠 (150 mL)의 혼합물을 딘-스타크 장치를 사용하여 환류 온도에서 3시간 동안 가열하여 물을 제거하였다. 반응 혼합물을 냉각시키고, 포화 NaHCO3 (20 mL x 2)으로 세척하고, 수성 층을 합하고, Et2O (2 x 20 mL)로 추출하고, 유기 층을 합하고, 염수 (30 mL)로 세척하고, 건조 (Na2SO4)시키고, 여과하고, 20 mbar 하에 회전증발기를 통해 농축시키고, 담황색 오일을 조 1,4,8-트리옥사스피로[4.5]데칸-d4 (2.34 g, 73.5% 수율)로서 수득하였다.
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ ppm 3.98 (s, 4 H) 1.73 (s, 4 H).
단계 4. 디히드로-2H-피란-4(3H)-온-d4
1,4,8-트리옥사스피로[4.5]데칸-d4 (2.34 g, 15.8mmol), 포름알데히드 (37%, 4.6 mL, 63.2 mmol) 및 피리딘 4-메틸벤젠술포네이트 (0.198 g, 0.79mmol)를 2개의 마이크로웨이브 바이알로 동등하게 분할하였다. 각각의 바이알을 80℃에서 30분 및 추가로 15분 동안 가열하였다. 반응 혼합물을 포화 NaCl과 합하고, 1H-NMR에 의해 수성 층 중에 어떠한 목적 생성물도 발견되지 않을 때까지 Et2O로 추출하였다. 에테르 추출물을 합하고, 농축시키고, 잔류물을 실리카 겔 상에서 플래쉬 칼럼 크로마토그래피 (구배 Et2O/n-펜탄)에 의해 2회 정제하여 디히드로-2H-피란-4(3H)-온-d4를 수득하였다.
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ ppm 2.50 (s, 4 H).
단계 5. 3,6-디히드로-2H-피란-4-일 트리플루오로메탄술포네이트-d4
-75에서 -65℃ 사이의 THF (10 mL) 중 새로이 제조한 LDA (10.6 mmol)에 THF (3.5 mL) 중 디히드로-2H-피란-4(3H)-온-d4 (1.05 g)의 용액을 10분에 걸쳐 적가하였다. 생성된 반응 혼합물을 -75℃에서 3시간 동안 교반하고, 이어서 THF 중 N-(5-클로로피리딘-2-일)-1,1,1-트리플루오로-N-((트리플루오로메틸)술포닐)메탄술폰아미드 (4.16 g/5 mL)를 10분에 걸쳐 첨가하였다. 반응 혼합물을 -75℃에서 1시간 동안 교반한 다음, 온도를 실온으로 밤새 서서히 가온하였다. 반응 혼합물을 0℃로 냉각시키고, D2O (10mL)로 켄칭하고, 2개의 층을 분리하고, 유기 층을 D2O (10 mL), 시트르산 (3 x 10 mL, 30 mL 물 중 3 g 시트르산), 1M NaOH (2 x 10 mL), 염수 (30 mL)로 순차적으로 세척하고, 건조 (Na2SO4)시키고, 농축시키고, 조 유성 생성물을 실리카 겔 상에서 플래쉬 크로마토그래피에 의해 구배 Et2O/n-펜탄 (0-60%)으로 용리시키면서 정제하였다. 정제된 생성물을 쿠겔로에 의해 105℃/3 mbar에서 증류 정제에 의해 추가로 정제하여, 3,6-디히드로-2H-피란-4-일 트리플루오로메탄술포네이트-d4 (500 mg, 21% 수율)를 수득하였다.
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ ppm 5.82 (s, 1 H) 2.45 (s, 2 H).
단계 6. 2-(3,6-디히드로-2H-피란-4-일)-4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-디옥사보롤란-d4
3,6-디히드로-2H-피란-4-일 트리플루오로메탄술포네이트-d4 (500 mg, 2.12 mmol), 4,4,4',4',5,5,5',5'-옥타메틸-2,2'-비(1,3,2-디옥사보롤란) (806 mg, 3.18 mmol), 아세트산칼륨(644 mg, 6.56 mmol), PdCl2(dppf)-CH2Cl2 (86 mg, 0.106 mmol) 및 p-디옥산 (5 mL)의 혼합물을 마이크로웨이브 반응기 바이알에 채우고, 아르곤으로 5분 동안 퍼징하고, 밀봉하고, 오일 조에서 밤새 80℃에서 가열하였다. 반응 혼합물을 실온으로 냉각시키고, EtOAc (10mL)로 희석하고, 중성 알루미나 플러그 (1.25' H x 0.75' D)를 통해 여과하고, 필터 케이크를 EtOAc로 완전히 세척하였다. 여과물을 농축시켜 담갈색 고체의 조 2-(3,6-디히드로-2H-피란-4-일)-4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-디옥사보롤란-d4 (>99%)를 수득하였다. LCMS (m/z): 215.2 (MH+), 0.78분.
단계 7. (S)-4-(3-아미노-6-(3,6-디히드로-2H-피란-4-일)피라진-2-일)-N-(2-히드록시-1-페닐에틸)벤즈아미드-d4
2-(3,6-디히드로-2H-피란-4-일)-4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-디옥사보롤란-d4 (300 mg, 1.4 mmol), (S)-4-(3-아미노-6-브로모피라진-2-일)-N-(2-히드록시-1-페닐에틸)벤즈아미드 (694mg, 1.68 mmol), 수성 Na2CO3 (2 M, 2.8 mL), 및 PdCl2(dppf)-CH2Cl2 (57.2 mg, 0,07mmol) 및 p-디옥산 (6 mL)의 혼합물에 마이크로웨이브 반응기 바이알에 채우고, 아르곤으로 5분 동안 퍼징하고, 밀봉하고, 115℃에서 30분 동안 가열하였다. 반응 혼합물을 EtOAc (15 mL)로 희석하고, 여과하고, 여과물을 1M HCl (4 x 30 mL)로 세척하고, 수성 층을 합하고, 고체 NaOH에 의해 pH 12로 염기성화시키고, EtOAc (60 mL)로 추출하고, 건조 (Na2SO4)시키고, 농축시키고, 생성물의 제1 수확물을 일부 불순물과 함께 수득하였다. 수성 HCl 세척 후 EtOAc 층을 농축시키고, 잔류물을 DMSO로 희석하고, C18 역상 정제용 HPLC로 정제하고, 생성물 분획을 합하고, Na2CO3으로 포화시키고, EtOAc (60 mL)로 추출하고, 제2 수확 순수한 생성물을 담황색 고체로 수득하였다. 제1 수확 생성물을 실리카 겔 상에서 플래쉬 크로마토그래피에 의해 구배 아세톤/CH2Cl2 (0-60%)로 용리시키면서 정제하였다. 생성물의 2종의 수확물을 합하고, (S)-4-(3-아미노-6-(3,6-디히드로-2H-피란-4-일)피라진-2-일)-N-(2-히드록시-1-페닐에틸)벤즈아미드-d4 (179 mg, 27.9% 수율)를 수득하였다. LCMS (m/z): 421.2 (MH+), 0.65분.
단계 8. (S)-4-(3-아미노-6-(2,2,6,6-테트라듀테리도-테트라히드로-2H-피란-4-일)피라진-2-일)-N-(2-히드록시-1-페닐에틸)벤즈아미드
메탄올 중 (S)-4-(3-아미노-6-(3,6-디히드로-2H-피란-4-일)피라진-2-일)-N-(2-히드록시-1-페닐에틸)벤즈아미드-d4 (175 mg) 및 Pd/C (10%, 22mg)의 혼합물을 실온에서 수소 풍선 하에 2시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 셀라이트 패드의 박층을 통해 여과하고, 여과물을 농축시켜 조 백색 고체를 수득하였다. 조 생성물을 플래쉬 크로마토그래피 (0-60% 아세톤/CH2Cl2)에 의해 정제하고, 순수한 생성물을 아세토니트릴/물 (1:1, 10 mL) 중에 용해시키고, 동결시키고, 동결건조시켜 백색 분말의 (S)-4-(3-아미노-6-(2,2,6,6-테트라듀테리도-테트라히드로-2H-피란-4-일)피라진-2-일)-N-(2-히드록시-1-페닐에틸)벤즈아미드 (64%)를 수득하였다. LCMS (m/z): 423.2 (MH+), 0.60분;
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ ppm 7.93 - 8.01 (m, 2 H), 7.92 (s, 1 H), 7.82 - 7.89 (m, 2 H), 7.38 - 7.47 (m, 4 H), 7.31 - 7.37 (m, 1 H), 6.90 (d, J=7.04 Hz, 1 H), 5.32 (dt, J=6.95, 4.55 Hz, 1 H), 4.68 (br. s., 2 H), 4.06 (d, J=4.30 Hz, 2 H), 2.93 (tt, J=11.44, 4.40 Hz, 1 H), 1.79 - 1.99 (m, 4 H).
실시예 136 및 137
4-(3-아미노-6-((S)-테트라히드로푸란-3-일)피라진-2-일)-N-((S)-2-히드록시-1-페닐에틸)벤즈아미드 및 4-(3-아미노-6-((R)-테트라히드로푸란-3-일)피라진-2-일)-N-((S)-2-히드록시-1-페닐에틸)벤즈아미드의 합성
반응식 61
Figure 112016034409922-pct00120
MeOH (1.873 mL) 중 (S)-4-(3-아미노-6-(푸란-3-일)피라진-2-일)-N-(2-히드록시-1-페닐에틸)벤즈아미드 (75 mg, 0.187 mmol)의 용액에 산화백금 (IV) (12.76 mg, 0.056 mmol)을 첨가하였다. 용액을 N2 스트림에 의해 15분 동안 탈기시켰다. 수소 기체로 플러싱하고, 수소 풍선을 장착한 후, 반응 혼합물을 24시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 셀라이트를 통해 여과하였다. 휘발성 물질을 제거한 후, 조 생성물을 반응에 대해 다시 설정하였다. 반응 혼합물을 추가로 24시간 동안 교반하였다. LCMS (m/z): 추가의 부산물이 형성되었다. 반응 혼합물을 셀라이트를 통해 여과하였다. 휘발성 물질을 제거한 후, MeOH 중 조 생성물의 용액 (1.873 mL)에 Pd-C (100 mg, 0.094 mmol)를 첨가하였다. 용액을 N2 스트림에 의해 15분 동안 탈기시켰다. 수소 기체로 플러싱하고, 수소 풍선을 장착한 후, 반응 혼합물을 24시간 동안 교반하였다. LCMS (m/z): 모든 s.m.은 사라졌다. 반응 혼합물을 셀라이트를 통해 여과하였다. 휘발성 물질을 제거한 후, 조 생성물을 플래쉬 크로마토그래피 (DCM 중 EtOAc)에 의해 정제하여 4-(3-아미노-6-(테트라히드로푸란-3-일)피라진-2-일)-N-((S)-2-히드록시-1-페닐에틸)벤즈아미드 (9 mg, 12%)를 수득하였다. LCMS (m/z): 405.2 (MH+), 0.58분;
1H NMR (400MHz, CD3OD) δ ppm 7.96 - 7.86 (m, 2 H), 7.80 (s, 1 H), 7.77 - 7.70 (m, 2 H), 7.38 - 7.32 (m, 2 H), 7.30 - 7.21 (m, 2 H), 7.21 - 7.12 (m, 1 H), 5.14 (m, 1 H), 4.08 - 3.97 (m, 1 H), 3.99 - 3.89 (m, 1 H), 3.89 - 3.67 (m, 4 H), 3.56 - 3.38 (m, 1 H), 2.33 - 2.04 (m, 2 H), 1.24 - 1.13 (m, 2 H).
라세미 생성물을 키랄 HPLC (AD 칼럼, 5mL/분, MeOH= 30%, SFC)에서 분해하여 4-(3-아미노-6-((S)-테트라히드로푸란-3-일)피라진-2-일)-N-((S)-2-히드록시-1-페닐에틸)벤즈아미드 및 4-(3-아미노-6-((R)-테트라히드로푸란-3-일)피라진-2-일)-N-((S)-2-히드록시-1-페닐에틸)벤즈아미드 - 극성 거울상이성질체 3.4 mg (Rt = 2.12분) 및 덜-극성 거울상이성질체 3.5 mg (Rt = 2.66분)을 수득하였다. 절대 입체화학을 임의적으로 지정하였다.
<표 4> 상기 기재된 방법 2를 사용하여 제조된 화합물.
Figure 112016034409922-pct00121
Figure 112016034409922-pct00122
Figure 112016034409922-pct00123
Figure 112016034409922-pct00124
Figure 112016034409922-pct00125
Figure 112016034409922-pct00126
Figure 112016034409922-pct00127
Figure 112016034409922-pct00128
Figure 112016034409922-pct00129
방법 3
실시예 173
4-(3-아미노-6-(테트라히드로-2H-피란-4-일)피라진-2-일)-N-(3-클로로벤질)-2-플루오로벤즈아미드의 합성
반응식 62
Figure 112016034409922-pct00130
단계 1. 메틸 4-(3-아미노-6-(테트라히드로-2H-피란-4-일)피라진-2-일)-2-플루오로벤조에이트
메틸 2-플루오로-4-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-디옥사보롤란-2-일)벤조에이트 (259 mg, 1.308 mmol), 3-브로모-5-(테트라히드로-2H-피란-4-일)피라진-2-아민 (225 mg, 0.872 mmol), 및 PdCl2(dppf) (64 mg, 0.087 mmol)의 용액에 DME (6.5 mL) 및 2 M Na2CO3 용액 (3.2 mL)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 마이크로웨이브 합성기 (120℃, 10분)에서 가열하였다. 반응 혼합물을 EtOAc로 후처리하였다. 유기 층을 물 및 염수로 세척하고, 무수 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 진공 하에 농축시켰다. 조 생성물을 플래쉬 크로마토그래피 (구배: 헵탄 중 EtOAc)에 의해 정제하여 목적 생성물 (192 mg, 67%)을 수득하였다. LCMS (m/z): 332.2 (MH+), 0.63분.
단계 2. 4-(3-아미노-6-(테트라히드로-2H-피란-4-일)피라진-2-일)-2-플루오로벤조산
THF (698 μL) 및 MeOH (349 μL) 중 메틸 4-(3-아미노-6-(테트라히드로-2H-피란-4-일)피라진-2-일)-2-플루오로벤조에이트 (104 mg, 0.314 mmol)의 용액에 LiOH (1 M 용액) (565 μL, 0.565 mmol)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 1시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 1N HCl 용액을 사용하여 pH 5까지 켄칭하고, EtOAc로 후처리하였다. 유기 층을 물 및 염수로 세척하고, 무수 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 진공 하에 농축시켰다. 조 생성물을 후속 단계에 사용하였다. LCMS (m/z): 318.3 (MH+), 0.5분.
단계 3. 4-(3-아미노-6-(테트라히드로-2H-피란-4-일)피라진-2-일)-N-(3-클로로벤질)-2-플루오로벤즈아미드
THF (268 μL) 중 4-(3-아미노-6-(테트라히드로-2H-피란-4-일)피라진-2-일)-2-플루오로벤조산 (17 mg, 0.054 mmol) 및 (3-클로로페닐)메탄아민 (8.34 mg, 0.059 mmol)의 용액에 PyBroP (27.5 mg, 0.059 mmol), DIEA (28.1 μL, 0.161 mmol) 및 HOBT (9.02 mg, 0.059 mmol)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 밤새 교반하였다. 모든 휘발성 물질을 진공 하에 제거하고, DCM 중에 용해시켰다. DCM 중에 용해시킨 조 생성물을 플래쉬 크로마토그래피 칼럼 (구배: 헵탄 중 EtOAc)에 로딩하여 4-(3-아미노-6-(테트라히드로-2H-피란-4-일)피라진-2-일)-N-(3-클로로벤질)-2-플루오로벤즈아미드를 87% 수율로 수득하였다. LCMS (m/z): 441.1 (MH+), 0.79분.
1H NMR (400MHz, DMSO-d6) δ ppm 7.92 (s, 1 H), 7.74 (m, 1 H), 7.63 (m, 2 H), 7.35 (m, 4 H), 6.14 (s, 1 H), 4.48 (m, 2 H), 3.92 (m, 2 H), 3.43 (m, 2 H), 1.73 (m, 4 H).
실시예 174
(S)-N-(2-아미노-1-(3-클로로페닐)에틸)-4-(3-아미노-6-(테트라히드로-2H-피란-4-일)피라진-2-일)-2-플루오로벤즈아미드의 합성
반응식 63
Figure 112016034409922-pct00131
단계 1. (S)-tert-부틸 (2-(4-(3-아미노-6-(테트라히드로-2H-피란-4-일)피라진-2-일)-2-플루오로벤즈아미도)-2-(3-클로로페닐)에틸)카르바메이트
DMF (368 μL) 중 4-(3-아미노-6-(테트라히드로-2H-피란-4-일)피라진-2-일)-2-플루오로벤조산 (35 mg, 0.110 mmol)의 용액에 (S)-tert-부틸 (2-아미노-2-(3-클로로페닐)에틸)카르바메이트 (33.9 mg, 0.110 mmol), 아자-HOBt (22.52 mg, 0.165 mmol), EDC (31.7 mg, 0.165 mmol), 및 DIEA (57.8 μL, 0.331 mmol)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 3시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 EtOAc와 물 사이에 분배하였다. 유기 층을 NaHCO3, 물 및 염수로 세척하고, 무수 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 진공 하에 농축시켜 조 (S)-tert-부틸 (2-(4-(3-아미노-6-(테트라히드로-2H-피란-4-일)피라진-2-일)-2-플루오로벤즈아미도)-2-(3-클로로페닐)에틸)카르바메이트 (>99%)를 수득하였다.
단계 2. (S)-N-(2-아미노-1-(3-클로로페닐)에틸)-4-(3-아미노-6-(테트라히드로-2H-피란-4-일)피라진-2-일)-2-플루오로벤즈아미드
조 (S)-tert-부틸 (2-(4-(3-아미노-6-(테트라히드로-2H-피란-4-일)피라진-2-일)-2-플루오로벤즈아미도)-2-(3-클로로페닐)에틸)카르바메이트를 DCM (1.0 mL) 중에 용해시켰다. TFA (0.3 mL)를 첨가한 후, 반응 혼합물을 실온에서 10분 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 톨루엔으로 희석하고, 농축 건조시켰다. 조 생성물을 역상 정제용 HPLC에 의해 정제하였다. 순수한 분획을 합하고, 동결건조시켜 (S)-N-(2-아미노-1-(3-클로로페닐)에틸)-4-(3-아미노-6-(테트라히드로-2H-피란-4-일)피라진-2-일)-2-플루오로벤즈아미드 (2 단계에 걸쳐 50% 수율)를 TFA 염으로서 수득하였다. LCMS (m/z): 470.1 (MH+), 0.67분;
1H NMR (400MHz, CD3OD) δ ppm 7.95 - 7.85 (m, 2H), 7.72 (d, J=8.2 Hz, 1H), 7.64 (d, J=12.1 Hz, 1H), 7.55 (s, 1H), 7.49 - 7.38 (m, 3H), 5.49 (dd, J=5.7, 8.8 Hz, 1H), 4.04 (dd, J=3.1, 11.3 Hz, 2H), 3.57 (dt, J=2.0, 11.5 Hz, 2H), 3.51 - 3.41 (m, 2H), 2.98 - 2.88 (m, 1H), 1.97 - 1.76 (m, 4H).
실시예 175
4-(3-아미노-6-((1r,4S)-4-히드록시시클로헥실)피라진-2-일)-N-((S)-1-(3-브로모-5-플루오로페닐)-2-히드록시에틸)-2-플루오로벤즈아미드의 합성
반응식 64
Figure 112016034409922-pct00132
Figure 112016034409922-pct00133
단계 1. tert-부틸 4-브로모-2-플루오로벤조에이트
0℃에서 무수 THF (700 mL) 중 4-브로모-2-플루오로벤조산 (60 g, 274 mmol)의 교반 용액에 DMF (2 mL)에 이어서 옥살릴 클로라이드 (48 mL, 548 mmol)를 1시간에 걸쳐 조금씩 첨가하였다. 혼합물을 0℃에서 30분 동안 교반한 다음, 실온에서 1시간 동안 교반하였다. 용매를 감압 하에 제거하고, 잔류물을 DCM (700 mL) 중에 용해시켰다. tert-부틸 알콜 (97 g, 1315 mmol) 및 피리딘 (150 mL)을 첨가하고, 반응 혼합물을 실온에서 64시간 동안 교반하였다. 혼합물을 분리 깔때기에 옮기고, 물 (400 mL), 2 N NaOH 수용액 (400 mL) 및 염수 (2 x 200 mL)로 세척하고, 황산마그네슘 상에서 건조시키고, 여과하고, 진공 하에 농축시켰다. 잔류물을 실리카 겔 상에서 플래쉬 크로마토그래피 (30분에 걸쳐 헵탄 중 0에서 5% 에틸 아세테이트)에 의해 정제하여 tert-부틸 4-브로모-2-플루오로벤조에이트 (60 g, 80%)를 오일로서 수득하였다. LCMS (m/z): 218 / 220 (MH+ (-tBu)), 1.11분;
1H NMR (500 MHz, CDCl3) δ ppm 7.81 - 7.71 (m, 1 H) 7.39 - 7.30 (m, 2 H) 7.29 (s, 1 H) 1.68 - 1.55 (m, 9 H).
단계 2. tert-부틸 2-플루오로-4-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-디옥사보롤란-2-일)벤조에이트
2 L 둥근 바닥 플라스크에 tert-부틸 4-브로모-2-플루오로벤조에이트 (30 g, 114 mmol), 비스(피노콜레이토)디보론 (41.5 g, 164 mmol), 아세트산칼륨 (32.1 g, 327 mmol), PdCl2(dppf)-CH2Cl2 (2.67 g, 3.27 mmol) 및 1,4-디옥산 (500 mL)을 채웠다. 반응 혼합물을 아르곤으로 15분 동안 탈기시킨 다음, 95℃로 가열하고, 이 온도에서 16시간 동안 유지하였다. 냉각시킨 후, 반응 혼합물을 증발 건조시키고, DCM (300 mL) 중에 용해시키고, 셀라이트 상에서 여과하고, DCM (3 x 100 mL)으로 세척하였다. 여과물을 물 (200 mL) 및 염수 (2 x 200 mL)로 세척하고, 황산마그네슘 상에서 건조시키고, 여과하고, 농축시켰다. 잔류물을 실리카 겔 상에서 플래쉬 크로마토그래피 (30분에 걸쳐 헵탄 중 0에서 10% EtOAc)를 사용하여 정제하여 tert-부틸 2-플루오로-4-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-디옥사보롤란-2-일)벤조에이트 (27 g, 90%)를 고체로서 수득하였다. LCMS (m/z): 267 (MH+ (-tBu)), 1.23분;
1H NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ ppm 7.83 (t, 1 H) 7.57 (d, 1 H) 7.43 (d, 1 H) 1.62 -1.46 (m, 9 H) 1.34 - 1.25 (m, 12 H).
단계 3. tert-부틸 4-(3-아미노피라진-2-일)-2-플루오로벤조에이트
2 L 둥근 바닥 플라스크에 tert-부틸 2-플루오로-4-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-디옥사보롤란-2-일)벤조에이트 (54 g, 151 mmol), 2-아미노-3-클로로피라진 (19.54 g, 151 mmol), 2 N 탄산나트륨 (158 mL, 317 mmol) 및 DME (600 mL)를 채웠다. 반응 혼합물을 10분 동안 아르곤을 사용하여 탈기시킨 다음, PdCl2(dppf)-CH2Cl2 (6.16 g, 7.54 mmol)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 100℃로 가열하고, 이 온도에서 4시간 동안 유지하였다. 냉각시킨 후, 반응 혼합물을 물 (400 mL)에 붓고, EtOAc (3 x 200 mL)로 추출하였다. 합한 유기부를 염수 (3 x 200 mL)로 세척하고, 황산마그네슘 상에서 건조시키고, 여과하고, 농축시켰다. 조 물질을 실리카 겔 상에서 플래쉬 크로마토그래피 (50분에 걸쳐 헵탄 중 0에서 70% EtOAc)를 사용하여 정제하여 tert-부틸 4-(3-아미노피라진-2-일)-2-플루오로벤조에이트 (37.7 g, 86%)를 고체로서 수득하였다. LCMS (m/z): 290 (MH+), 0.80분;
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 7.98 (d, 1 H) 7.91 -7.81 (m, 2 H) 7.65 -7.46 (m, 2 H) 6.35 (br. s., 2 H) 1.54 (s, 9 H).
단계 4. tert-부틸 4-(3-아미노-6-브로모피라진-2-일)-2-플루오로벤조에이트
0℃에서 아세토니트릴 (800 mL) 중 tert-부틸 4-(3-아미노피라진-2-일)-2-플루오로벤조에이트 (37.7 g, 130 mmol)의 교반 용액에 N-브로모숙신이미드 (23.19 g, 130 mmol)를 한번에 첨가하였다. 반응물을 0℃에서 2시간 동안 교반한 다음, 포화 NaHCO3 용액 (200 mL)으로 켄칭하고, 0℃에서 30분 동안 교반하였다. 혼합물을 물 (300 mL)로 희석하고, EtOAc (3 x 250 mL)로 추출하였다. 합한 유기부를 물 (200 mL) 및 염수 (2 x 200 mL)로 세척하고, 황산마그네슘 상에서 건조시키고, 여과하고, 농축시켰다. 조 물질을 실리카 겔 상에서 플래쉬 크로마토그래피 (40분에 걸쳐 헵탄 중 0에서 40% EtOAc)를 사용하여 정제하여 tert-부틸 4-(3-아미노-6-브로모피라진-2-일)-2-플루오로벤조에이트 (30.9 g, 64%)를 고체로서 수득하였다. LCMS (m/z): 368 / 370 (MH+), 1.03분;
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 8.14 (s, 1 H) 7.97 -7.74 (m, 1 H) 7.62 - 7.39 (m, 2 H) 6.64 (s, 2 H) 1.54 (s, 9 H).
단계 5. tert-부틸 4-(3-아미노-6-(1,4-디옥사스피로[4.5]데스-7-엔-8-일)피라진-2-일)-2-플루오로벤조에이트
DME (115 mL) 중 tert-부틸 4-(3-아미노-6-브로모피라진-2-일)-2-플루오로벤조에이트 (5.17 g, 46.2 mmol)에 4,4,5,5-테트라메틸-2-(1,4-디옥사스피로[4.5]데스-7-엔-8-일)-1,3,2-디옥사보롤란 (15.36 g, 57.7 mmol), PdCl2(dppf).CH2Cl2 부가물 (1.885 g, 2.309 mmol)에 이어서 2 M 수용액 탄산나트륨 (19.57 g, 185 mmol)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 100℃에서 밤새 가열하였다. LCMS는 반응이 완결되었음을 나타내었다. 반응물을 냉각시켰다. 혼합물에 EtOAc 1000 mL 및 물 300 mL를 첨가하였다. 생성된 혼합물을 30분 동안 교반하고, 유기 층을 분리하였다. 수성 층을 EtOAc (3 X 200 mL)로 추출하였다. 유기 층을 합하고, 물로 3회 및 염수로 세척하고, 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 진공 하에 농축시켰다. 조 생성물을 에테르에 의해 연화처리하여 tert-부틸 4-(3-아미노-6-(1,4-디옥사스피로[4.5]데스-7-엔-8-일)피라진-2-일)-2-플루오로벤조에이트 (19.5 g, 45.6 mmol, 99%)를 담황색 고체로서 수득하였다. LCMS (m/z): 428.1 (MH+), 1.02분.
단계 6. tert-부틸 4-(3-아미노-6-(1,4-디옥사스피로[4.5]데칸-8-일)피라진-2-일)-2-플루오로벤조에이트
실온에서 DCM (100 mL) 및 MeOH (100 mL) 중 tert-부틸 4-(3-아미노-6-(1,4-디옥사스피로[4.5]데스-7-엔-8-일)피라진-2-일)-2-플루오로벤조에이트 (11 g, 25.7 mmol)의 용액에 Pd/C (5 g, 25.7 mmol) (탄소, 습윤 중 10%)를 첨가하였다. 생성된 혼합물을 진공처리한 다음, 수소로 재충전하였다. 과정을 3회 반복하였다. 이어서, 반응물을 H2 분위기 하에 실온에서 6시간 동안 교반하였다. 촉매를 셀라이트®를 통해 여과하고, DCM으로 세척하였다. 여과물을 농축시키고, 잔류물을 DCM (60 mL) 중에 용해시키고, 여과하고, 농축시켰다. 조 생성물을 플래쉬 크로마토그래피에 의해 0-100%의 EtOAc/헵탄으로 용리시키면서 정제하여 tert-부틸 4-(3-아미노-6-(1,4-디옥사스피로[4.5]데칸-8-일)피라진-2-일)-2-플루오로벤조에이트 (8.18 g, 19.04 mmol, 74%)를 담황색 고체로서 수득하였다. LCMS (m/z): 430.2 (MH+), 0.99분;
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 7.98 - 7.82 (m, 2 H), 7.71 - 7.49 (m, 2 H), 6.13 (s, 2 H), 3.85 (s, 4 H), 3.30 (s, 1 H), 2.77 - 2.55 (m, 1 H), 2.48 (dt, J = 3.62, 1.91 Hz, 2 H), 1.88 - 1.65 (m, 6 H), 1.63 - 1.46 (m, 10 H).
단계 7. tert-부틸 4-(3-아미노-6-(4-옥소시클로헥실)피라진-2-일)-2-플루오로벤조에이트
tert-부틸 4-(3-아미노-6-(1,4-디옥사스피로[4.5]데칸-8-일)피라진-2-일)-2-플루오로벤조에이트 (14.34 g, 33.4 mmol)에 아세토니트릴 (250 mL), 물 (160 mL)에 이어서 3 M 수성 용액성 HCl (55.6 mL, 167 mmol)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 25℃에서 30분 동안 교반하고, 이를 LCMS에 의해 모니터링하였다. 혼합물을 2 M NaOH 수용액을 사용하여 교반 하에 pH 9로 염기성화시켰다. 담황색 고체가 침전되었다. 아세토니트릴을 실온에서 감압 하에 제거하였다. 고체를 여과하고, 물 (2 X 30 mL)로 세척하고, 고진공 하에 밤새 건조시켜 tert-부틸 4-(3-아미노-6-(4-옥소시클로헥실)피라진-2-일)-2-플루오로벤조에이트 (12 g, 31.1 mmol, 93%)를 담황색 고체로서 수득하였다. LCMS (m/z): 386.1 (MH+), 0.89분;
1H NMR (400 MHz, 아세토니트릴-d3) δ ppm 8.05 - 7.89 (m, 2 H) 7.73 - 7.51 (m, 2 H), 5.14 (br. s., 2 H), 3.30 - 3.08 (m, 1 H), 2.64 - 2.48 (m, 2 H), 2.40 (br. s., 2 H), 2.30 - 2.17 (m, 2 H), 2.12 - 1.99 (m, 2 H), 1.96 (dt, J = 4.99, 2.40 Hz, 4 H), 1.61 (s, 9 H).
단계 8. tert-부틸 4-(3-아미노-6-(4-히드록시시클로헥실)피라진-2-일)-2-플루오로벤조에이트
메탄올 (125 mL) 및 THF (125 mL) 중 tert-부틸 4-(3-아미노-6-(4-옥소시클로헥실)피라진-2-일)-2-플루오로벤조에이트 (9 g, 23.35 mmol)의 용액을 -78℃로 냉각시킨 다음, NaBH4 (2.297 g, 60.7 mmol)를 조금씩 첨가하였다. 이어서, 반응 혼합물을 -78℃에서 40분 동안 교반하고, LCMS는 반응이 완결되었음을 나타내었다. 일부 과다-환원 생성물이 관찰되었다. 트랜스 대 시스의 비는 약 8:1이었다. 포화 NH4Cl 100 mL를 -78℃에서 천천히 첨가한 다음, 혼합물을 실온으로 서서히 가온하였다. 반응 혼합물을 포화 NaHCO3에 의해 켄칭하고, EtOAc (2 X 200 mL)로 추출하였다. 유기 층을 합하고, Na2SO4 상에서 건조시키고, 여과하고, 농축시키고, 고진공 하에 건조시켜 tert-부틸 4-(3-아미노-6-(4-히드록시시클로헥실)피라진-2-일)-2-플루오로벤조에이트 (8.9 g, 22.97 mmol, 98%)를 수득하였으며, 이를 후속 단계에 추가 정제 없이 사용하였다. LCMS (m/z): 388.2 (MH+), 0.86분.
단계 9 &10. 4-(3-아미노-6-((1r,4r)-4-히드록시시클로헥실)피라진-2-일)-2-플루오로벤조산
tert-부틸 4-(3-아미노-6-(4-히드록시시클로헥실)피라진-2-일)-2-플루오로벤조에이트 (8.8 g, 22.71 mmol)를 THF (100 mL) 중에 용해시킨 다음, TBDMSCl (8.22 g, 54.5 mmol) 및 이미다졸 (5.57 g, 82 mmol)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 3시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 EtOAc (150 mL)에 의해 희석하고, 물 및 염수로 세척하고, Na2SO4 상에서 건조시키고, 여과하고, 농축시켰다. 조 물질을 플래쉬 크로마토그래피에 의해 0-100%의 아세톤/DCM (DCM 중 10% 아세톤/DCM, 10에서 50%, 40분 지속기간, 320 g 실리카 겔 칼럼)으로 용리시키면서 정제하여 tert-부틸 4-(3-아미노-6-((1s,4s)-4-((tert-부틸디메틸실릴)옥시)시클로헥실)피라진-2-일)-2-플루오로벤조에이트 (7.7 g, 15.35 mmol, 67.6%)를 수득하였다. LCMS (m/z): 502.3 (MH+), 0.96분. 디옥산 중 4 N HCl 중 tert-부틸 4-(3-아미노-6-((1s,4s)-4-((tert-부틸디메틸실릴)옥시)시클로헥실)피라진-2-일)-2-플루오로벤조에이트 (7.789 g, 15.52 mmol)의 용액을 실온에서 48시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 농축시켰다. 담황색 잔류물에 Et2O 50 mL를 첨가하고, 15분 동안 초음파처리하고, 여과하고, Et2O 15 mL로 2회 세척하고, 진공 흡인 하에 2시간 동안 건조시켜 4-(3-아미노-6-((1r,4r)-4-히드록시시클로헥실)피라진-2-일)-2-플루오로벤조산 (11, 6.0 g, 15.99 mmol, 100% 수율)을 담황색 고체로서 수득하였다. LCMS (m/z): 332.0 (MH+, 산), 0.48분;
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 8.06 - 7.79 (m, 2 H), 7.69 - 7.50 (m, 2 H), 3.63 -3.30 (m, 3 H) 2.62 - 2.50 (m, 1 H), 1.97 -1.71 (m, 4 H), 1.34 - 1.11 (m, 2 H), 1.63 - 1.42 (m, 2 H).
단계 11. 4-(3-아미노-6-((1r,4S)-4-히드록시시클로헥실)피라진-2-일)-N-((S)-1-(3-브로모-5-플루오로페닐)-2-히드록시에틸)-2-플루오로벤즈아미드
DMF (16.80 mL) 중 4-(3-아미노-6-((1r,4r)-4-히드록시시클로헥실)피라진-2-일)-2-플루오로벤조산 (670 mg, 2.022 mmol)에 아자-HOBt (413 mg, 3.03 mmol), EDC (581 mg, 3.03 mmol), DIEA (1.059 mL, 6.07 mmol) 및 (S)-2-아미노-2-(3-브로모-5-플루오로페닐)에탄올 히드로클로라이드 (547 mg, 2.022 mmol)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 3시간 동안 교반하였다. LCMS는 생성물을 나타내었다. 반응 혼합물을 EtOAc로 희석하고, 포화 NaHCO3, 물 및 염수로 세척하고, Na2SO4 상에서 건조시키고, 여과하고, 농축시켰다. 잔류물을 플래쉬 크로마토그래피에 의해 0-100%의 EtOAc (10% MeOH 함유)/헵탄으로 용리시키면서 정제하여 4-(3-아미노-6-((1r,4S)-4-히드록시시클로헥실)피라진-2-일)-N-((S)-1-(3-브로모-5-플루오로페닐)-2-히드록시에틸)-2-플루오로벤즈아미드 (920 mg, 1.66 mmol, 82%)를 수득하였다. LCMS (m/z): 547/549 (MH+), 0.72분;
1H NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ ppm 8.74 (dd, J = 1.9, 7.9 Hz, 1H), 7.92 (s, 1H), 7.81 - 7.70 (m, 1H), 7.68 - 7.55 (m, 2H), 7.52 - 7.39 (m, 2H), 7.30 (d, J = 9.5 Hz, 1H), 6.11 (s, 2H), 5.09 (t, J = 5.7 Hz, 2H), 4.58 (d, J = 4.4 Hz, 1H), 3.69 (dt, J = 2.4, 5.8 Hz, 2H), 3.49 - 3.40 (m, 1H), 2.55 (t, J = 3.5 Hz, 1H), 1.98 - 1.76 (m, 4H), 1.55 (dd, J = 2.8, 12.6 Hz, 2H), 1.29 (d, J = 13.6 Hz, 2H).
(S)-N-(2-아미노-2-(3-클로로페닐)에틸)-N-메틸-2-니트로벤젠술폰아미드의 합성
반응식 65
Figure 112016034409922-pct00134
단계 1. (S)-tert-부틸 (1-(3-클로로페닐)-2-히드록시에틸)카르바메이트
THF (64.1 mL) 중 (s)-2-아미노-2-(3-클로로페닐)에탄올 (4 g, 19.22 mmol)의 혼합물에 NaHCO3 (1.776 g, 21.15 mmol)에 이어서 Boc2O (4.91 mL, 21.15 mmol) 및 DMAP (0.235 g, 1.922 mmol)를 첨가하였다. 이어서, 반응 혼합물을 실온에서 밤새 교반하였다. LCMS는 반응이 완결되었음을 나타내었다. TEA (5.36 mL, 38.4 mmol)를 첨가하고, 반응 혼합물을 실온에서 5시간 동안 교반하였다. 물을 첨가하고, 반응 혼합물을 EtOAc로 추출하였다. 유기 층을 염수로 세척하고, 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 농축시켰다. 조 물질을 플래쉬 크로마토그래피에 의해 0-100%의 EtOAc/헵탄으로 용리시키면서 정제하여 (S)-tert-부틸 (1-(3-클로로페닐)-2-히드록시에틸)카르바메이트 (4.0 g, 14.72 mmol, 77%)를 수득하였다. LCMS (m/z): 216.1 (MH+-56), 0.75분.
단계 2. N-메틸-2-니트로벤젠술폰아미드
DCM (60.2 mL) 중 2-니트로벤젠-1-술포닐 클로라이드 (4 g, 18.05 mmol)의 용액을 빙수조를 사용하여 0℃로 냉각시켰다. TEA (7.55 mL, 54.1 mmol) 및 테트라히드로푸란 중 2 M 메틸아민 (13.54 mL, 27.1 mmol)을 첨가하였다. 생성된 용액을 실온에서 6시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 DCM으로 희석하고, 포화 NaHCO3 (2 x 100 mL), 염수 (100 mL)로 세척한 다음, 황산마그네슘 상에서 건조시켰다. 용액을 여과한 후, 감압 하에 농축시키고, 에테르 중에 연화처리하여 N-메틸-2-니트로벤젠술폰아미드 (3.12 g, 14.44 mmol, 80% 수율)를 수득하였다. LCMS (m/z): 217.1 (MH+), 0.53분.
단계 3. (S)-tert-부틸 (1-(3-클로로페닐)-2-(N-메틸-2-니트로페닐술폰아미도)에틸)-카르바메이트
THF (56.6 mL) 중 N-메틸-2-니트로벤젠술폰아미드 (3.50 g, 16.19 mmol)에 (S)-tert-부틸 (1-(3-클로로페닐)-2-히드록시에틸)카르바메이트 (4 g, 14.72 mmol) 및 트리부틸포스핀 (3.87 g, 19.14 mmol)을 첨가하였다. 이어서, THF (56.6 mL) 중 (E)-디-tert-부틸 디아젠-1,2-디카르복실레이트 (3.29 g, 19.14 mmol)를 0℃에서 천천히 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 밤새 교반하였다. LCMS는 남아있는 약간의 출발 물질이 존재하였음을 나타내었다. 반응물을 EtOAc로 희석하고, 포화 NaHCO3, 물 및 염수로 세척하고, Na2SO4 상에서 건조시키고, 여과하고, 농축시켰다. 조 생성물을 플래쉬 크로마토그래피에 의해 0-100%의 EtOAc/헵탄으로 용리시키면서 정제하여 (S)-tert-부틸 (1-(3-클로로페닐)-2-(N-메틸-2-니트로페닐술폰아미도)에틸)카르바메이트 (7 g, 14.9 mmol, 100%)를 수득하였다. LCMS (m/z): 370.1 (MH+-100), 1.05분.
단계 4. (S)-N-(2-아미노-2-(3-클로로페닐)에틸)-N-메틸-2-니트로벤젠술폰아미드
DCM (149 mL) 중 (S)-tert-부틸 (1-(3-클로로페닐)-2-(N-메틸-2-니트로페닐술폰아미도)에틸)카르바메이트 (7 g, 14.9 mmol)에 HCl (디옥산 중 4 M) (14.90 mL, 59.6 mmol)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 4시간 동안 교반하였다. LCMS는 반응이 완결되었음을 나타내었다. 백색 침전물을 여과하고, DCM으로 잘 세척하여 (S)-N-(2-아미노-2-(3-클로로페닐)에틸)-N-메틸-2-니트로벤젠술폰아미드 2.8 g을 HCl 염으로서 수득하였다. 잔류물을 증발 건조시키고, DCM (20 mL) 중에서 30분 동안 교반하였다. 고체를 여과하고, DCM으로 잘 세척하여 52.9%의 총 수율과 95% 순도를 갖는 추가의 (S)-N-(2-아미노-2-(3-클로로페닐)에틸)-N-메틸-2-니트로벤젠술폰아미드 400 mg을 수득하였다. LCMS (m/z): 370.1 (MH+-100), 0.67분;
1H NMR (500 MHz, 메탄올-d4) δ ppm 8.09 - 7.99 (m, 1H), 7.92 - 7.77 (m, 3H), 7.60 (s, 1H), 7.53 - 7.35 (m, 3H), 4.74 - 4.62 (m, 1H), 3.93 (dd, J=9.0, 14.7 Hz, 1H), 3.53 (dd, J = 5.4, 14.8 Hz, 1H), 2.98 (s, 3H).
실시예 176
(S)-4-(3-아미노-6-(테트라히드로-2H-피란-4-일)피라진-2-일)-N-(1-(3-클로로페닐)-2-(메틸아미노)에틸)-2-플루오로벤즈아미드의 합성
반응식 66
Figure 112016034409922-pct00135
단계 1. tert-부틸 4-(3-아미노-6-(3,6-디히드로-2H-피란-4-일)피라진-2-일)-2-플루오로벤조에이트
DME (127 mL) 중 tert-부틸 4-(3-아미노-6-브로모피라진-2-일)-2-플루오로벤조에이트 (21 g, 57.0 mmol)의 용액에 PdCl2(dppf).CH2Cl2 부가물 (2.329 g, 2.85 mmol), 2-(시클로헥스-1-엔-1-일)-4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-디옥사보롤란 (13.18 g, 62.7 mmol), 및 2 M Na2CO3수용액 (63.4 mL)을 첨가하였다. 반응물을 110℃에서 16시간 동안 가열하였다. 반응 혼합물에 에틸 아세테이트 200 mL를 첨가하고, 물 (2 x 100 mL), 염수로 세척하고, 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 농축시켰다. 잔류물을 플래쉬 크로마토그래피에 의해 0-100%의 EtOAc/DCM으로 용리시키면서 정제하여 tert-부틸 4-(3-아미노-6-(3,6-디히드로-2H-피란-4-일)피라진-2-일)-2-플루오로벤조에이트 (18 g, 48.5 mmol, 85%)를 수득하였다. LCMS (m/z): 372.3 (MH+), 0.95분.
단계 2. tert-부틸 4-(3-아미노-6-(테트라히드로-2H-피란-4-일)피라진-2-일)-2-플루오로벤조에이트
MeOH (800 mL) 중 tert-부틸 4-(3-아미노-6-(3,6-디히드로-2H-피란-4-일)피라진-2-일)-2-플루오로벤조에이트 (15 g, 40.4 mmol)의 현탁액에 현탁액이 균질 용액으로 변할 때까지 DCM (100 mL)을 첨가하였다. N2 스트림에 의해 15분 동안 탈기시킨 후, Pd/C (10 g, 9.40 mmol)를 반응 혼합물에 첨가하였다. 이 혼합물에, 수소 기체로 3회 플러싱한 후 수소 풍선을 장착하였다. 반응 혼합물을 6시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 셀라이트® 패드를 통해 여과하고, 휘발성 물질을 진공 하에 제거하였다. 잔류물을 가열에 의해 MeOH (200 mL) 중에 용해시키고, 실온으로 냉각시키고, 밤새 정치시켰다. 갈색 침전물을 여과하여 tert-부틸 4-(3-아미노-6-(테트라히드로-2H-피란-4-일)피라진-2-일)-2-플루오로벤조에이트 4.5 g을 수득하였다. 여과물을 농축시키고, EtOH (200 mL) 중에 가열에 의해 용해시켰다. 제2 갈색 침전물을 여과하여 tert-부틸 4-(3-아미노-6-(테트라히드로-2H-피란-4-일)피라진-2-일)-2-플루오로벤조에이트 (55.7% 합한 수율) 3.9 g을 수득하였다. LCMS (m/z): 374.7 (MH+), 0.90분.
단계 3. 4-(3-아미노-6-(테트라히드로-2H-피란-4-일)피라진-2-일)-2-플루오로벤조산
DCM (60.3 mL) 중 tert-부틸 4-(3-아미노-6-(테트라히드로-2H-피란-4-일)피라진-2-일)-2-플루오로벤조에이트 (4.5 g, 12.05 mmol)의 용액에 TFA (60.3 mL)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 2시간 동안 교반하였다. 톨루엔 (30 mL)으로 희석한 후, 휘발성 물질을 진공 하에 2회 제거하여 4-(3-아미노-6-(테트라히드로-2H-피란-4-일)피라진-2-일)-2-플루오로벤조산 (5.2 g, 12.06 mmol, 100%)을 TFA 염으로서 수득하였다. 조 생성물을 후속 단계에 추가 정제 없이 사용하였다. LCMS (m/z): 318.5 (MH+), 0.55분.
단계 4. (S)-4-(3-아미노-6-(테트라히드로-2H-피란-4-일)피라진-2-일)-N-(1-(3-클로로페닐)-2-(N-메틸-2-니트로페닐술폰아미도)에틸)-2-플루오로벤즈아미드
DMF (16.28 mL) 중 4-(3-아미노-6-(테트라히드로-2H-피란-4-일)피라진-2-일)-2-플루오로벤조산 (1.55 g, 4.88 mmol)의 용액에 HOAt (0.997g, 7.33 mmol), EDC (1.498 g, 7.82 mmol), DIEA (2.61 m l, 14.65 mmol) 및 (S)-N-(2-아미노-2-(3-클로로페닐)에틸)-N-메틸-2-니트로벤젠술폰아미드 (2.084 g, 5.13 mmol)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 3시간 동안 교반하고, LCMS는 반응이 완결되었음을 나타내었다. 반응 혼합물을 EtOAc로 희석하고, 유기부를 포화 Na2CO3, 물 및 염수로 세척하고, Na2SO4 상에서 건조시키고, 여과하고, 농축시켰다. 조 물질을 플래쉬 크로마토그래피에 의해 50% DCM/EtOAc (10% 메탄올)로 용리시키면서 정제하여 (S)-4-(3-아미노-6-(테트라히드로-2H-피란-4-일)피라진-2-일)-N-(1-(3-클로로페닐)-2-(N-메틸-2-니트로페닐술폰아미도)에틸)-2-플루오로벤즈아미드 (2.68 g, 4.01 mmol, 82%)를 수득하였다. LCMS: 669.1 (MH+), 0.95분.
단계 5. (S)-4-(3-아미노-6-(테트라히드로-2H-피란-4-일)피라진-2-일)-N-(1-(3-클로로페닐)-2-(메틸아미노)에틸)-2-플루오로벤즈아미드
DMF (20 mL) 중 (S)-4-(3-아미노-6-(테트라히드로-2H-피란-4-일)피라진-2-일)-N-(1-(3-클로로페닐)-2-(N-메틸-2-니트로페닐술폰아미도)에틸)-2-플루오로벤즈아미드 (2.68 g, 4.01 mmol)의 용액에 4-메르캅토벤조산 (1.235 g, 8.01 mmol) 및 K2CO3 (2.214 g, 16.02 mmol)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 40℃에서 질소 하에 밤새 가열하였다. 물 (50 mL)을 첨가하고, 혼합물은 균질하게 변하였다. 반응물을 실온에서 30분 동안 교반한 다음, 물 (150 mL)을 천천히 첨가하였다. 담황색 고체가 침전되었다. 혼합물을 추가로 30분 동안 교반하고, 현탁액을 여과하였다. 고체를 물에 이어서 헵탄으로 잘 세척하고, 1시간 동안 공기 건조시켰다. 고체를 물 중에 현탁시키고, 실온에서 1시간 동안 교반한 다음, 여과하였다. 고체에 EtOAc를 첨가하고, 회전증발기 상에서 천천히 회전하여 EtOAc 약 20 mL가 남을 때까지 과량의 에틸 아세테이트를 제거하고, 백색 고체를 여과하고, 아세토니트릴 및 물 중에 재용해시키고, 동결건조시켰다. 용액을 동결건조기 상에서 건조시켜 (S)-4-(3-아미노-6-(테트라히드로-2H-피란-4-일)피라진-2-일)-N-(1-(3-클로로페닐)-2-(메틸아미노)에틸)-2-플루오로벤즈아미드 (1.31 g, 2.69 mmol, 67.2%)를 수득하였다. LCMS (m/z): 484.3 (MH+), 0.66분;
1H NMR (500 MHz, 메탄올-d4) δ ppm 7.90 (s, 1H), 7.83 (t, J = 7.7 Hz, 1H), 7.70 (dd, J = 1.1, 8.0 Hz, 1H), 7.63 (d, J = 10.7 Hz, 1H), 7.48 (s, 1H), 7.38 (d, J = 5.4 Hz, 2H), 7.32 (dt, J = 1.9, 4.6 Hz, 1H), 5.33 (dd, J = 5.2, 9.0 Hz, 1H), 4.05 (dd, J = 3.5, 11.0 Hz, 2H), 3.57 (dt, J = 1.9, 11.8 Hz, 2H), 3.12 - 3.04 (m, 1H), 3.04 - 2.88 (m, 2H), 2.48 (s, 3H), 1.89 - 1.88 (m, 1H), 1.96 - 1.76 (m, 4H).
(S)-tert-부틸 2-아미노-2-페닐에틸카르바메이트의 합성
Figure 112016034409922-pct00136
반응식 9에 따라, (R)-2-아미노-1-페닐에탄올을 사용하여, (S)-tert-부틸 2-아미노-2-페닐에틸카르바메이트를 47% 수율로 수득하였다. LCMS (m/z): 237.5 (MH+), 0.54분.
1H NMR (400MHz,CDCl3) δ ppm 7.42 - 7.32 (m, 5 H), 4.81 (br. s., 1 H), 4.11 - 4.00 (m, 1 H), 3.44 - 3.28 (m, 1 H), 3.28 - 3.13 (m, 1 H), 1.49 - 1.35 (m, 9 H).
(S)-2-플루오로-1-페닐에탄아민의 합성
반응식 67
Figure 112016034409922-pct00137
단계 1. (S)-2-(2-히드록시-1-페닐에틸)이소인돌린-1,3-디온
물 (26.5 mL) 중 (S)-2-아미노-2-페닐에탄올 (3 g, 21.87 mmol) 및 아세토니트릴 (46.4 mL)의 용액에 실온에서 2,5-디옥소피롤리딘-1-일 메틸 프탈레이트 (5.76 g, 20.78 mmol)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 밤새 교반하였다. 아세토니트릴을 진공 하에 제거한 후, 이어서 반응 혼합물을 EtOAc로 추출하였다. 유기부를 물 및 염수로 세척하고, 무수 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 진공 하에 농축시켜 (S)-2-(2-히드록시-1-페닐에틸)이소인돌린-1,3-디온 (2.2 g, 40%)을 수득하였다. LCMS (m/z): 268 (MH+), 0.79분.
단계 2. (S)-2-(2-플루오로-1-페닐에틸)이소인돌린-1,3-디온
PhCF3 (18.71 mL) 중 (S)-2-(2-히드록시-1-페닐에틸)이소인돌린-1,3-디온 (1.5 g, 5.61 mmol)의 용액에 실온에서 트리에틸아민 트리히드로플루오라이드 (5.48 mL, 33.7 mmol), 퍼플루오로부탄술포닐 플루오라이드 (1.019 mL, 5.67 mmol), DIEA (14.70 mL, 84 mmol)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 1시간 동안 교반한 다음, 추가의 퍼플루오로부탄술포닐 플루오라이드 (1.019 mL, 5.67 mmol)를 첨가하였다. 5시간 후, 반응 혼합물을 NaHCO3으로 켄칭하고, EtOAc로 추출하였다. 합한 유기 층을 물 및 염수로 세척하고, 무수 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 진공 하에 농축시켰다. 조 생성물을 플래쉬 크로마토그래피 (헵탄 중 0-10% EtOAC)에 의해 정제하여 (S)-2-(2-플루오로-1-페닐에틸)이소인돌린-1,3-디온 (30% 수율)을 수득하였다. LCMS (m/z): 270.1 (MH+), 0.96분.
단계 3. (S)-2-플루오로-1-페닐에탄아민
MeOH (3.59 mL) 중 (S)-2-(2-플루오로-1-페닐에틸)이소인돌린-1,3-디온 (290 mg, 1.077 mmol)의 용액에 히드라진 (0.507 mL, 16.15 mmol)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 80℃에서 3시간 동안 교반하였다. 백색 침전물을 여과하였다. 여과물을 농축시켜 조 (S)-2-플루오로-1-페닐에탄아민을 수득하였으며, 이를 후속 단계에 추가 정제 없이 사용하였다. LCMS (m/z): 140.1 (MH+), 0.28분;
1H NMR (400MHz, CDCl3) δ ppm 7.43 - 7.34 (m, 4 H), 7.34 - 7.27 (m, 1 H), 4.57 (dd, J = 3.7, 8.8 Hz, 1 H), 4.49 - 4.38 (m, 1 H), 4.38 - 4.32 (m, 1H), 4.32 - 4.25 (m, 1 H).
(S)-2-아지도-1-(3-브로모-5-플루오로페닐)에탄아민의 합성
반응식 68
Figure 112016034409922-pct00138
단계 1. (S)-tert-부틸 (1-(3-브로모-5-플루오로페닐)-2-히드록시에틸)카르바메이트
DCM (80 mL) 중 (S)-2-아미노-2-(3-브로모-5-플루오로페닐)에탄올 (4.4 g, 16.26 mmol)의 용액에 실온에서 TEA (6.80 mL, 48.8 mmol)에 이어서 Boc 무수물 (5.32 g, 24.4 mmol)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 16시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 EtOAc로 추출하였다. 유기 층을 포화 NaHCO3, 물 및 염수로 세척하고, 무수 Na2SO4 상에서 건조시키고, 여과하고, 농축시켰다. 조 생성물을 플래쉬 크로마토그래피 (구배: 헵탄 중 EtOAc)에 의해 정제하여 (S)-tert-부틸 (1-(3-브로모-5-플루오로페닐)-2-히드록시에틸)카르바메이트 (4.8 g, 88%)를 수득하였다. LCMS (m/z): 280 (MH+-tBu), 0.79분.
단계 2. (S)-2-((tert-부톡시카르보닐)아미노)-2-(3- 브로모-5-플루오로페닐)에틸 메탄술포네이트
0℃에서 무수 DCM (100 mL) 중 (S)-tert-부틸 (1-(3-브로모-5-플루오로페닐)-2-히드록시에틸)카르바메이트 (4.8 g, 14.36 mmol)의 교반 용액에 트리에틸아민 (4.00 mL, 28.7 mmol)에 이어서 메탄술포닐 클로라이드 (1.343 mL, 17.24 mmol)를 첨가하였다. 반응물을 0℃에서 1시간 동안 교반하고, 이때 LCMS는 반응이 완결되었음을 나타내었다. 반응 혼합물을 포화 NaHCO3 용액 (100 mL)에 부었다. 혼합물을 진탕시키고, 층을 분리하고, 수성 층을 DCM (2 x 50 mL)으로 추출하였다. 합한 유기부를 NaHCO3 용액 (50 mL) 및 염수 (50 mL)로 세척하고, 건조 (MgSO4)시키고, 여과하고, 농축시켜 (S)-2-((tert-부톡시카르보닐)아미노)-2-(3- 브로모-5-플루오로페닐)에틸 메탄술포네이트 (5.92 g, 14.36 mmol, 100% 수율)를 연오렌지색 고체로서 수득하였다.
1H NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ ppm 7.75 (d, J=8.83 Hz, 1 H), 7.43 - 7.55 (m, 2 H), 7.31 (d, J=9.46 Hz, 1 H), 4.86 - 5.00 (m, 1 H), 4.30 (dd, J=10.09, 5.04 Hz, 1 H), 4.24 (t, J=9.30 Hz, 1 H), 3.16 - 3.23 (m, 3 H), 1.36 - 1.44 (m, 9 H).
단계 3. (S)-tert-부틸 (2-아지도-1-(3- 브로모-5-플루오로페닐)에틸)카르바메이트
(S)-2-((tert-부톡시카르보닐)아미노)-2-(3- 브로모-5-플루오로페닐)에틸 메탄술포네이트 (5.92 g, 14.36 mmol)를 무수 DMF (60 mL) 중에 용해시켰다. 아지드화나트륨 (2.80 g, 43.1 mmol)을 첨가하고, 반응물을 70℃로 가열하고, 이 온도에서 2시간 동안 유지하였다. 냉각시킨 후, 반응 혼합물을 물 (100 mL)에 붓고, EtOAc (3 x 80 mL)로 추출하였다. 합한 유기부를 물 (50 mL) 및 염수 (3 x 50 mL)로 세척하고, 건조 (MgSO4)시키고, 여과하고, 농축시켰다. 플래쉬 크로마토그래피 (아날로직스, 80 g 칼럼, DCM 중에 로딩함, 30분에 걸쳐 헵탄 중 0에서 40% EtOAc)하여 (S)-tert-부틸 (2-아지도-1-(3- 브로모-5-플루오로페닐)에틸)카르바메이트 (4.29 g, 11.94 mmol, 83% 수율)를 백색 고체로서 수득하였다.
1H NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ ppm 7.73 (d, J=8.83 Hz, 1 H), 7.48 (t, J=4.26 Hz, 2 H), 7.29 (d, J=9.77 Hz, 1 H), 4.80 (d, J=8.20 Hz, 1 H), 3.47 (d, J=7.88 Hz, 2 H), 1.44 - 1.38 (m, 9 H), 1.36 (br. s., 1 H).
단계 4. (S)-2-아지도-1-(3- 브로모-5-플루오로페닐)에탄아민
디옥산 (40 mL) 중 (S)-tert-부틸 (2-아지도-1-(3- 브로모-5-플루오로페닐)에틸)카르바메이트 (3.15 g, 8.77 mmol)의 교반 용액에 염산 (10.96 mL, 43.8 mmol) (디옥산 중 4N 용액)을 첨가하였다. 반응물을 40℃로 가열하고, 이 온도에서 2시간 동안 유지하였다. 냉각시킨 후, 반응 혼합물을 증발 건조시켜 (S)-2-아지도-1-(3- 브로모-5-플루오로페닐)에탄아민 히드로클로라이드 (2.59 g, 8.76 mmol, 100% 수율)를 백색 고체로서 수득하였다.
(S)-2-아지도-1-(3-클로로-5-플루오로페닐)에탄아민의 합성
Figure 112016034409922-pct00139
반응식 68에 따라, (S)-2-아미노-2-(3-클로로-5-플루오로페닐)에탄올을 사용하여, (S)-2-아지도-1-(3-클로로-5-플루오로페닐)에탄아민을 수득하였다. LCMS (m/z): 215.1 (MH+), 0.48분.
(S)-2-아지도-1-(3-클로로페닐)에탄아민의 합성
Figure 112016034409922-pct00140
반응식 68에 따라, (S)-2-아미노-2-(3-클로로페닐)에탄올을 사용하여, (S)-2-아지도-1-(3-클로로-5-플루오로페닐)에탄아민을 수득하였다. LCMS (m/z): 197 (MH+), 0.5분.
(S)-3-페닐모르폴린의 합성
반응식 69
Figure 112016034409922-pct00141
단계 1. (S)-2-클로로-N-(2-히드록시-1-페닐에틸)아세트아미드
0℃에서 CH2Cl2 (10 mL) 중 (S)-2-아미노-2-페닐에탄올 (0.852 g, 6.21 mmol), Et3N (0.952 mL, 6.83 mmol), DMAP (76 mg, 0.621 mmol)의 용액에 2-클로로아세틸 클로라이드 (0519 mL, 6.52 mmol)를 첨가하고, 생성된 혼합물을 0℃에서 15분 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 수성 HCl (1 M, 20 mL)에 이어서 포화 NaHCO3 (20 mL)으로 세척하고, 건조 (Na2SO4)시키고, 농축시키고, 고진공 하에 추가로 건조시키고, (S)-2-클로로-N-(2-히드록시-1-페닐에틸)아세트아미드 (0.60 g, 45.2% 수율)를 백색 고체로서 수득하였다. LCMS (m/z): 214 (MH+), 0.44분.
단계 2. (S)-5-페닐모르폴린-3-온
0℃에서 무수 THF 용액 중 (S)-2-클로로-N-(2-히드록시-1-페닐에틸)아세트아미드 (600 mg, 2.8 mmol)의 용액에 NaH 미네랄 오일 현탁액 (247 mg, 6.18 mmol)을 첨가하였다. 생성된 혼합물을 실온에서 밤새 교반하였다. 반응 혼합물을 농축 건조시키고, 잔류물을 CH2Cl2/염수/H2O (20mL/18mL/2mL) 사이에 분배하였다. CH2Cl2 층을 무수 Na2SO4 상에서 건조시키고, 여과하고, 진공 하에 농축시켰다. 조 생성물, (S)-5-페닐모르폴린-3-온을 백색 고체 (498 mg, 97%)로서 수득하였다. 조 생성물을 직접 후속 단계에 추가 정제 없이 사용하였다. LCMS (m/z): 178.2 (MH+), 0.47분.
단계 3. (S)-3-페닐모르폴린
LiAlH4/THF 슬러리 (0.47g/2 mL)에 THF 용액 중 (S)-5-페닐모르폴린-3-온 (6mL 중 481 mg)을 실온에서 5분에 걸쳐 적가하였다. 그후로 1시간 동안 생성된 혼합물을 실온에서 교반한 다음, 72℃ 오일 조를 사용하여 밤새 가열한 다음, 0℃로 냉각시키고, H2O (0.47 mL), 3M 수성 용액성 NaOH (0.47 mL) 및 H2O (1.4 mL)의 순차적 첨가에 의해 켄칭하고, 켄칭된 잔류물을 Et2O (30 mL)로 희석하고, 10분 동안 교반하고, 에테르성 용액을 여과로 분리하였다. 여과물을 농축시키고, 진공 하에 추가로 건조시키고, (S)-3-페닐모르폴린 (424 mg, 96% 수율)을 무색 고체로서 수득하였다. LCMS (m/z): 164.2 (MH+), 0.33분.
(S)-tert-부틸 (2-아미노-2-(3-클로로페닐)에틸)(메틸)카르바메이트의 합성
반응식 70
Figure 112016034409922-pct00142
단계 1. (R)-1-(3-클로로페닐)-2-(메틸아미노)에탄올
반응식 9에서 제조된 (R)-tert-부틸 (2-(3-클로로페닐)-2-히드록시에틸)카르바메이트 (2.48g, 9.13 mmol)를 THF (30.4 mL) 중에 용해시키고, LiAlH4 (1.039 g, 27.4 mmol)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 환류 하에 6시간 동안 가열한 다음, 냉각시켰다. 물 (1.06 mL)을 첨가하고, 이어서 수성 NaOH (15%, 3 mL), 및 물 (1.06 mL)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 1시간 동안 교반하였다. 고체 침전물을 셀라이트®를 통해 여과하고, EtOAc로 잘 헹구었다. 여과물을 농축시켰다. 조 생성물 (R)-1-(3-클로로페닐)-2-(메틸아미노)에탄올 (1.75 g, 9.43 mmol, 100%)을 후속 단계 반응에 추가 정제 없이 사용하였다. LCMS (m/z): 186.1 (MH+), 0.43분.
단계 2. (R)-tert-부틸 (2-(3-클로로페닐)-2-히드록시에틸)(메틸)카르바메이트
(R)-1-(3-클로로페닐)-2-(메틸아미노)에탄올 (1.75 g, 9.43 mmol)을 THF (31.4 mL) 중에 용해시킨 다음, Boc 무수물 (2.298 mL, 9.90 mmol)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 2시간 동안 교반하였다. LCMS는 반응이 완결되었음을 나타내었다. 반응 혼합물을 농축시키고, 플래쉬 크로마토그래피에 의해 정제하여 (R)-tert-부틸 (2-(3-클로로페닐)-2-히드록시에틸)(메틸)카르바메이트 (2.0 g, 7.00 mmol, 74.3%)를 수득하였다. LCMS (m/z): 212.1 (MH+-56), 0.94분.
단계 3. (S)-tert-부틸 (2-(3-클로로페닐)-2-(1,3-디옥소이소인돌린-2-일)에틸)(메틸)카르바메이트
THF (23.33 mL) 중 (R)-tert-부틸 (2-(3-클로로페닐)-2-히드록시에틸)(메틸)카르바메이트 (2.0 g, 7.00 mmol)의 혼합물에 프탈이미드 (1.339 g, 9.10 mmol) 및 PPh3 (PPh3 3 mmol/수지 1 g, 2.34 g, 7.02 mmol)을 첨가하였다. 이어서, THF 중 DTBAD (1.660 g, 7.21 mmol)를 실온에서 천천히 첨가하고, 반응 혼합물을 실온에서 밤새 교반하였다. 반응 혼합물을 셀라이트®를 통해 여과하고, EtOAc로 세척하였다. 여과물을 농축시키고, EtOAc 중에 재용해시키고, 포화 Na2CO3, 물 및 염수로 세척하고, 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 농축시켰다. 조 생성물을 플래쉬 크로마토그래피에 의해 정제하여 (S)-tert-부틸 (2-(3-클로로페닐)-2-(1,3-디옥소이소인돌린-2-일)에틸)(메틸)카르바메이트 (1.96 g, 4.72 mmol, 67.5%)를 수득하였다. LCMS (m/z): 315.1 (MH+-100), 1.19분.
단계 4. (S)-tert-부틸 (2-아미노-2-(3-클로로페닐)에틸)(메틸)카르바메이트
에탄올 (15.75 mL) 중 (S)-tert-부틸 (2-(3-클로로페닐)-2-(1,3-디옥소이소인돌린-2-일)에틸)(메틸)카르바메이트 (1.96 g, 4.72 mmol)의 용액에 히드라진 수화물 (2.296 mL, 47.2 mmol)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 60℃에서 2시간 동안 가열하였다. 이어서, 반응 혼합물을 셀라이트 패드를 통해 여과하고, 여과물을 농축시켰다. 잔류물을 에탄올 중에 재용해시키고, 셀라이트® 패드를 통해 여과하여 추가의 백색 고체를 제거하였다. NMR은 조 물질 중에 불순물이 존재함을 나타내었다. 조 생성물을 실리카의 플러그를 통해 여과하고, DCM/EtOAc (2:1 비)로 세척하고, DCM/EtOAc (20% 메탄올, 메탄올 중 0.5% NH3) (1:1 비)로 플래쉬하여 (s)-tert-부틸 (2-아미노-2-(3-클로로페닐)에틸)(메틸)카르바메이트 (1.2 g, 89% 수율)를 수득하였다. LCMS (m/z): 285.1 (MH+), 0.65분;
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ ppm 7.37 (s, 1H) 7.26 (3H), 4.20 (br. s., 1H), 2.85- 2.77 (m, 3H), 1.51 - 1.38 (m, 9H).
(S)-2-아미노-4-시클로프로필부트-3-인-1-올의 합성
반응식 71
Figure 112016034409922-pct00143
단계 1. (S)-N-((S)-1-((tert-부틸디메틸실릴)옥시)-4-시클로프로필부트-3-인-2-일)-2-메틸프로판-2-술핀아미드
Et2O 중 3.0 M 에틸 브로민화마그네슘 (0.360 mL, 1.081 mmol)을 THF (4 mL) 중 에티닐시클로프로판 (71.5 mg, 1.081 mmol)의 용액에 첨가하였다. 용액을 50℃로 1시간 동안 가열한 다음, 생성된 그리냐르를 DCM (4.00 mL) 중 (S,E)-N-(2-((tert-부틸디메틸실릴)옥시)에틸리덴)-2-메틸프로판-2-술핀아미드 (100 mg, 0.360 mmol)의 -78℃ 용액에 첨가하고, 반응물을 실온으로 가온되도록 하였다. 3시간 후, 반응물을 포화 수성 NH4Cl로 켄칭하였다. 층을 분리하고, 유기부를 황산마그네슘 상에서 건조시키고, 농축시켜 (S)-N-((S)-1-((tert-부틸디메틸실릴)옥시)-4-시클로프로필부트-3-인-2-일)-2-메틸프로판-2-술핀아미드를 수득하였으며, 이를 직접 사용하였다. LCMS (m/z): 344.1 (MH+), 1.23분.
단계 2. (S)-2-아미노-4-시클로프로필부트-3-인-1-올
디옥산 중 4.0 N HCl (0.873 mL, 3.49 mmol)을 MeOH (4 mL) 중 (S)-N-((S)-1-((tert-부틸디메틸실릴)옥시)-4-시클로프로필부트-3-인-2-일)-2-메틸프로판-2-술핀아미드 (120 mg, 0.349 mmol)의 실온 용액에 첨가하였다. 30분 후, 반응물을 농축시킨 다음, 벤젠과 공비혼합하여 (S)-2-아미노-4-시클로프로필부트-3-인-1-올을 HCl 염으로서 수득하였다. LCMS (m/z): 126.2 (MH+), 0.50분.
(S)-2-아미노-2-(3-플루오로-5-(메틸티오)페닐)에탄올의 합성
반응식 72
Figure 112016034409922-pct00144
단계 1: (S)-tert-부틸 4-(3-플루오로-5-(메틸티오)페닐)-2,2-디메틸옥사졸리딘-3-카르복실레이트
톨루엔 (2.6 mL) 중 Xantphos (13.91 mg, 0.024 mmol), Pd2(dba)3 (22.02 mg, 0.024 mmol), (S)-tert-부틸 4-(3-브로모-5-플루오로페닐)-2,2-디메틸옥사졸리딘-3-카르복실레이트 (300 mg, 0.802 mmol), DIEA (700 μl, 4.01 mmol) 및 소듐 메탄티올레이트 (112 mg, 1.603 mmol)의 혼합물을 110℃에서 18분 동안 마이크로웨이브 가열하였다. EtOAc를 첨가하고, 포화 NaHCO3, 물, 및 염수로 세척하였다. 혼합물을 여과하고, 농축시키고, 플래쉬 크로마토그래피에 의해 0-60%의 EtOAc/헵탄으로 용리시키면서 정제하여 (S)-tert-부틸 4-(3-플루오로-5-(메틸티오)페닐)-2,2-디메틸옥사졸리딘-3-카르복실레이트 (278 mg, 102%)를 오일로서 수득하였다. LCMS (m/z): 286.1 (MH+-56), 1.14분.
단계 2: (S)-2-아미노-2-(3-플루오로-5-(메틸티오)페닐)에탄올
디옥산 중 4 M HCl (2.4 mL) 중 (S)-tert-부틸 4-(3-플루오로-5-(메틸티오)페닐)-2,2-디메틸옥사졸리딘-3-카르복실레이트 (278 mg, 0.814 mmol)의 용액을 80℃로 밤새 가열하였다. 남은 일부 출발 물질이 여전히 존재하였다. 추가의 디옥산 중 4 M HCl (2.035 mL, 8.14 mmol)을 첨가하고, 80℃에서 추가로 10시간 동안 가열하였다. 용매를 감압 하에 제거하여 (S)-2-아미노-2-(3-플루오로-5-(메틸티오)페닐)에탄올 (194 mg, 0.814 mmol, 100%)을 수득하였다. LCMS (m/z): 170.1 (MH+-56), 0.26분.
(S)-2-아미노-2-(3-(메틸티오)페닐)에탄올의 합성
Figure 112016034409922-pct00145
반응식 72에 따라, (S)-tert-부틸 4-(3-브로모페닐)-2,2-디메틸옥사졸리딘-3-카르복실레이트를 사용하여, (S)-2-아미노-2-(3-(메틸티오)페닐)에탄올을 수득하였다. LCMS (m/z): 184 (MH+), 0.41분.
(S)-2-아미노-2-(3-(클로로메틸)-5-플루오로페닐)에탄올의 합성
반응식 73
Figure 112016034409922-pct00146
단계 1. (S)-tert-부틸 4-(3-(클로로메틸)-5-플루오로페닐)-2,2-디메틸옥사졸리딘-3-카르복실레이트
무수 DMSO (2.028 mL) 중 (S)-tert-부틸 4-(3-플루오로-5-(히드록시메틸)페닐)-2,2-디메틸옥사졸리딘-3-카르복실레이트 (330 mg, 1.014 mmol)의 용액에 2,4,6-트리클로로-1,3,5-트리아진 (112 mg, 0.609 mmol)을 조금씩 첨가하였다. 혼합물을 실온에서 30분 동안 교반하였다. 혼합물을 EtOAc로 희석하고, 분리하였다. 유기 상을 H2O (5 x 30 mL)로 세척하고, 무수 Na2SO4 상에서 건조시키고, 여과하고, 감압 하에 농축시켰다. 잔류물을 플래쉬 크로마토그래피에 의해 0-100% EtOAc/헵탄으로 용리시키면서 정제하여 (S)-tert-부틸 4-(3-(클로로메틸)-5-플루오로페닐)-2,2-디메틸옥사졸리딘-3-카르복실레이트 (329 mg, 94%)를 수득하였다. LCMS (m/z): 288.1 (MH+-56), 1.12분.
단계 2: (S)-2-아미노-2-(3-(클로로메틸)-5-플루오로페닐)에탄올
무수 DCM (1.357 mL) 중 (S)-tert-부틸 4-(3-(클로로메틸)-5-플루오로페닐)-2,2-디메틸옥사졸리딘-3-카르복실레이트 (140 mg, 0.407 mmol)의 용액에 디옥산 중 4 N HCl (1.018 mL, 4.07 mmol)을 조금씩 첨가하였다. 혼합물을 80℃에서 밤새 환류하였다. 반응은 완결되지 않았다. 추가의 디옥산 중 4N HCl (1.018 mL, 4.07 mmol)을 첨가하고, 추가로 24시간 동안 환류하였다. 용매를 진공 하에 제거하여 (S)-2-아미노-2-(3-(클로로메틸)-5-플루오로페닐)에탄올 (70 mg, 84%)을 수득하였다. LCMS (m/z): 204 (MH+), 0.41분.
(S)-2-아미노-2-(3-플루오로-5-(플루오로메틸)페닐)에탄올의 합성
반응식 74
Figure 112016034409922-pct00147
단계 1. (3-브로모-5-플루오로페닐)메탄올
0℃에서 THF (41.2 mL) 중 3-브로모-5-플루오로벤조산 (4.51 g, 20.59 mmol)의 현탁액에 BH3.THF (41.2 mL, 41.2 mmol)를 30분에 걸쳐 적가한 다음, 반응 혼합물을 실온으로 돌아가도록 하고, 실온에서 밤새 교반하였다. 메탄올 (40mL)을 천천히 첨가하고, 실온에서 1시간 동안 교반하였다. THF 및 메탄올을 진공 하에 제거하였다. 이어서, 잔류물을 EtOAc로 추출하고, 포화 NaHCO3으로 세척하였다. 유기부를 건조시키고, 농축시켰다. 조 생성물을 후속 단계 반응에 정제 없이 사용하였다. LCMS (m/z): 187.2 (MH+-18), 0.66분.
1H NMR (400MHz, CDCl3) δ ppm 7.32 (s, 1H), 7.19 - 7.14 (m, 1H), 7.05 (tdd, J=0.7, 1.5, 9.1 Hz, 1H), 4.70 (br. s., 2H), 1.78 (br. s., 1H).
단계 2. 1-브로모-3-플루오로-5-(플루오로메틸)벤젠
0℃에서 DCM (39.0 mL) 중 (3-브로모-5-플루오로페닐)메탄올 (4 g, 19.51 mmol)의 용액에, DAST (3.35 mL, 25.4 mmol)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온으로 돌아가도록 하고, 실온에서 밤새 교반하였다. 포화 NaHCO3을 첨가한 다음, 반응 혼합물을 DCM으로 추출하였다. 유기부를 건조시키고, 농축시켰다. 조 물질을 플래쉬 크로마토그래피 (0-10% EtOAc/헵탄)에 의해 정제하여 최종 생성물을 무색 오일로서 수득하였다. LCMS (m/z): 질량 없음 (MH+), 0.86분.
1H NMR (400MHz, CDCl3) δ ppm 7.30 (s, 1H), 7.23 (d, J=8.2 Hz, 1H), 7.03 (d, J=8.6 Hz, 1H), 5.41 (s, 1H), 5.29 (s, 1H).
단계 3. 3-플루오로-5-(플루오로메틸)벤즈알데히드
1-브로모-3-플루오로-5-(플루오로메틸)벤젠 (1.30 g, 6.28 mmol)을 THF (31.4 mL) 중에 용해시킨 다음, -78℃로 냉각시키고, 부틸리튬 (헥산 중 2.5M) (2.76mL, 6.91 mmol)을 -78℃에서 첨가한 다음, 반응 혼합물을 -78℃에서 30분 동안 교반하였다. -78℃에서 1시간 동안 교반한 후, DMF (0.972 mL, 12.56 mmol)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 HCl에 의해 켄칭한 다음, 반응 혼합물을 EtOAc에 의해 추출하고, 유기부를 건조시키고, 농축시켜 조 생성물을 수득하였다. 조 물질을 후속 단계 반응에 정제 없이 사용하였다. LCMS (m/z): 질량 없음 (MH+), 0.60분.
1H NMR (400MHz, CDCl3) δ ppm 10.08 - 9.93 (m, 1H), 7.68 (s, 1H), 7.56 (d, J=8.2 Hz, 1H), 7.37 (d, J=7.8 Hz, 1H), 5.53 (s, 1H), 5.42 (s, 1H)
단계 4. (R,E)-N-(3-플루오로-5-(플루오로메틸)벤질리덴)-2-메틸프로판-2-술핀아미드
DCE (19.0 mL) 중 3-플루오로-5-(플루오로메틸)벤즈알데히드 (890 mg, 5.70 mmol) 및 (R)-2-메틸프로판-2-술핀아미드 (760 mg, 6.27 mmol)의 용액에 황산구리 (II) (무수) (1.820 g, 11.40 mmol)를 첨가하고, 현탁액을 오일 조 중에 질소 하에 60℃에서 밤새 교반하였다. 현탁액은 담청색으로 변하였다. 냉각시키고, 반응 혼합물을 셀라이트의 플러그를 통해 여과하고, DCM으로 헹구고, 여과물을 농축시켜 조 생성물을 수득하였다. 조 생성물을 플래쉬 크로마토그래프 (헵탄 중 0-30% EtOAc)에 의해 정제하여 (R,E)-N-(3-플루오로-5-(플루오로메틸)벤질리덴)-2-메틸프로판-2-술핀아미드 (900 mg, 60.9% 수율)를 담황색 오일로서 수득하였다. LCMS (m/z): 260.1 (MH+), 0.88분.
1H NMR (400MHz, CDCl3) δ ppm 8.57 (s, 1H), 7.60 (s, 1H), 7.56 (d, J=8.8 Hz, 1H), 7.26 - 7.22 (m, 1H), 5.50 (s, 1H), 5.38 (s, 1H), 1.29 - 1.23 (m, 9H)
단계 5. (R)-N-((R)-1-(3-플루오로-5-(플루오로메틸)페닐)알릴)-2-메틸프로판-2-술핀아미드
디메틸 아연 (톨루엔 중 2M) (0.434 mL, 0.868 mmol) 및 비닐마그네슘 브로마이드 (THF 중 1M) (4.51 mL, 4.51 mmol)를 실온에서 20분 동안 아르곤 하에 혼합한 다음, -78℃로 냉각시킨 다음, 건조 THF (11.57 mL) 중 (R,E)-N-(3-플루오로-5-(플루오로메틸)벤질리덴)-2-메틸프로판-2-술핀아미드 (0.900 g, 3.47 mmol)를 적가함에 따라 혼합하고, 내부 온도를 -74℃ 내지 -72℃로 유지하고, 첨가 후 반응 혼합물을 -78℃에서 1시간 동안 교반하고, 반응물을 포화 NH4Cl에 의해 켄칭하고, THF를 진공 하에 제거한 다음, EtOAc로 추출하였다. 유기부를 물 및 염수로 세척하고, 무수 Na2SO4 상에서 건조시키고, 여과하고, 농축시켰다. 조 생성물을 플래쉬 크로마토그래피 (0-30% EtOAc/헵탄)에 의해 정제하여 생성물 660 mg을 수득하였다, LCMS (m/z): 288.0 (MH+), 0.83분.
1H NMR (400MHz, CDCl3) δ ppm 7.14 (s, 1H), 7.03 (d, J=9.0 Hz, 1H), 7.07 (d, J=9.4 Hz, 1H), 5.90 (ddd, J=7.4, 10.1, 17.3 Hz, 1H), 5.45 - 5.35 (m, 2H), 5.35 - 5.25 (m, 2H), 5.01 - 4.94 (m, 1H), 3.45 (br. s., 1H), 1.30 - 1.22 (m, 9H)
단계 6. (R)-1-(3-플루오로-5-(플루오로메틸)페닐)프로프-2-엔-1-아민
MeOH (7.66 mL) 중 (R)-N-((R)-1-(3-플루오로-5-(플루오로메틸)페닐)알릴)-2-메틸프로판-2-술핀아미드 (660 mg, 2.297 mmol)에 HCl (디옥산 중 4 M) (5.742 mL, 22.97 mmol)을 0℃에서 첨가하고, 반응 혼합물을 실온에서 2시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 농축 건조시켰다. 포화 Na2CO3을 첨가한 다음, 반응 혼합물을 EtOAc로 추출하였다. 유기부를 건조시키고, 농축시켜 조 생성물을 수득하였다. 조 생성물을 후속 단계 반응에 정제 없이 사용하였다. LCMS (m/z): 184.1 (MH+), 0.40분.
단계 7. (R)-tert-부틸 (1-(3-플루오로-5-(플루오로메틸)페닐)알릴)카르바메이트
DCM (7.6 mL) 중 (R)-1-(3-플루오로-5-(플루오로메틸)페닐)프로프-2-엔-1-아민 (421 mg, 2.30 mmol)의 용액에 Boc2O (640 μl, 2.76 mmol)를 첨가하고, 반응 혼합물을 실온에서 밤새 교반하고, 농축시켰다. 조 생성물을 플래쉬 크로마토그래피 (0-20% EtOAc/헵탄)에 의해 정제하여 (R)-tert-부틸 (1-(3-플루오로-5-(플루오로메틸)페닐)알릴)카르바메이트를 수득하였다. LCMS (m/z): 228.1 (MH+-56)), 0.91분.
1H NMR (400MHz, CDCl3) δ ppm 7.08 (s, 1H), 6.99 (d, J=9.0 Hz, 2H), 5.95 (ddd, J=5.5, 10.6, 16.8 Hz, 1H), 5.42 (s, 1H), 5.30 (s, 1H), 5.30 - 5.13 (m, 3H), 4.86 (br. s., 1H), 1.44 (s, 9H).
단계 8. (S)-tert-부틸 (1-(3-플루오로-5-(플루오로메틸)페닐)-2-히드록시에틸)카르바메이트
DCM (14.5 mL) 중 (R)-tert-부틸 (1-(3-플루오로-5-(플루오로메틸)페닐)알릴)카르바메이트 (410 mg, 1.447 mmol)를 -78℃로 냉각시키고, 반응 혼합물을 5분 동안 O3 (오존 발생기로부터)에 의해 버블링하였다. 반응 혼합물은 담청색이며, N2를 버블링하여 O3을 제거한 다음, 에탄올 (10 mL) 중 NaBH4 (547 mg, 14.47 mmol)를 첨가하고, 반응 혼합물을 -78℃에서 10분 동안 교반한 다음, 실온으로 돌아가도록 하였다. 30분 후, 포화 NH4Cl에 이어서 메탄올을 첨가하고, 반응 혼합물을 농축시킨 다음, EtOAc로 추출하였다. 유기부를 포화 NaHCO3, 물 및 염수로 세척하고, 건조시키고, 농축시켜 조 생성물을 수득하였다. 조 생성물을 플래쉬 크로마토그래피에 의해 정제하여 (S)-tert-부틸 (1-(3-플루오로-5-(플루오로메틸)페닐)-2-히드록시에틸)카르바메이트 (223 mg, 54% 수율)를 수득하였다. LCMS (m/z): 232.2 (MH+-56), 0.73분.
1H NMR (400MHz, CDCl3) δ ppm 7.10 (s, 1H), 7.02 (d, J=9.4 Hz, 2H), 5.43 (s, 1H), 5.35 - 5.28 (m, 1H), 4.78 (br. s., 1H), 3.95 - 3.78 (m, 2H), 1.44 (br. s., 9H).
단계 9. (S)-2-아미노-2-(3-플루오로-5-(플루오로메틸)페닐)에탄올
DCM (2.5 mL) 중 (S)-tert-부틸 (1-(3-플루오로-5-(플루오로메틸)페닐)-2-히드록시에틸)카르바메이트 (220 mg, 0.766 mmol)의 용액에, HCl (디옥산 중 4M) (1.9 mL 7.66 mmol)을 실온에서 첨가하고, 반응 혼합물을 실온에서 1시간 동안 교반하였다. 이어서, 반응 혼합물을 농축 건조시켰다. 잔류물을 DCM 및 헵탄으로부터 재결정화하였다. 고체를 여과하고, 공기 건조시켜 (S)-2-아미노-2-(3-플루오로-5-(플루오로메틸)페닐)에탄올 (145 mg, 0.908 mmol, 100% 수율) HCl 염을 백색 고체로서 수득하였다. LCMS (m/z): 188.2 (MH+), 0.32분.
실시예 177 및 178
4-(3-아미노-6-((1r,4S)-4-히드록시시클로헥실)피라진-2-일)-2-플루오로-N-((S)-1-(3-플루오로-5-(플루오로메틸)페닐)-2-히드록시에틸)벤즈아미드 및 4-(3-아미노-6-((1s,4R)-4-히드록시시클로헥실)피라진-2-일)-2-플루오로-N-((S)-1-(3-플루오로-5-(플루오로메틸)페닐)-2-히드록시에틸)벤즈아미드의 합성
반응식 75
Figure 112016034409922-pct00148
단계 1. 메틸 4-(3-아미노피라진-2-일)-2-플루오로벤조에이트
DME (391 mL) 중 3-클로로피라진-2-아민 (27 g, 208 mmol), 및 탄산나트륨 (66.3 g, 625 mmol)에 메틸 2-플루오로-4-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-디옥사보롤란-2-일)벤조에이트 (64.2 g, 229 mmol) 및 PdCl2(dppf).CH2Cl2 부가물 (8.51 g, 10.42 mmol)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 N2로 퍼징하고, 오일 조에서 100℃에서 3시간 동안 가열하였다. 반응 혼합물을 EtOAc와 물 사이에 분배하였다. 유기 층을 분리하고, 염수로 세척하고, 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 증발시켰다. 조 생성물을 EtOAc 및 헵탄 (2:3)에 의해 재결정화하여 메틸 4-(3-아미노피라진-2-일)-2-플루오로벤조에이트를 84% 수율로 수득하였다. LCMS (m/z): 248.1 (MH+), 0.58분.
단계 2. 메틸 4-(3-아미노-6-브로모피라진-2-일)-2-플루오로벤조에이트
0℃에서 아세토니트릴 (430 mL) 중 메틸 4-(3-아미노피라진-2-일)-2-플루오로벤조에이트 (31.5 g, 127 mmol)의 현탁액에 NBS (23.9 g, 134 mmol)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 빙조에서 1시간 동안 교반하고, 포화 중탄산나트륨을 첨가하고, 30분 교반하고, 생성물을 에틸아세테이트로 추출하였다. 유기 추출물을 합하고, 염수로 세척하고, 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 증발시켰다. 조 생성물을 EtOAc 및 헵탄으로 재결정화하여 메틸 4-(3-아미노-6-브로모피라진-2-일)-2-플루오로벤조에이트를 갈색 고체로서 96% 수율로 수득하였다. LCMS (m/z): 326.0/328.0 (MH+), 0.87분.
단계 3. 메틸 4-(3-아미노-6-(1,4-디옥사스피로[4.5]데스-7-엔-8-일)피라진-2-일)-2-플루오로벤조에이트
DME (77 mL) 중 메틸 4-(3-아미노-6-브로모피라진-2-일)-2-플루오로벤조에이트 (10 g, 30.7 mmol)의 용액에 4,4,5,5-테트라메틸-2-(1,4-디옥사스피로[4.5]데스-7-엔-8-일)-1,3,2-디옥사보롤란 (9.79 g, 36.8 mmol), PdCl2(dppf).CH2Cl2 부가물 (1.252 g, 1.533 mmol), H2O (25.6 mL)에 이어서 마지막 탄산나트륨 (9.75 g, 92 mmol)을 첨가하였다. 반응물을 오일 조에서 2시간 동안 100℃에서 가열하였다. 냉각시켰다. 반응 혼합물을 EtOAc에 의해 3회 추출하고, 유기부를 물 및 염수로 세척하고, 건조시키고, 농축시켰다. 조 물질을 DCM 및 헵탄 (1:1)으로 재결정화하여 생성물 메틸 4-(3-아미노-6-(1,4-디옥사스피로[4.5]데스-7-엔-8-일)피라진-2-일)-2-플루오로벤조에이트를 75% 수율로 수득하였다. LCMS (m/z): 382.2 (MH+), 0.82분.
단계 4. 메틸 4-(3-아미노-6-(1,4-디옥사스피로[4.5]데칸-8-일)피라진-2-일)-2-플루오로벤조에이트
메틸 4-(3-아미노-6-(1,4-디옥사스피로[4.5]데스-7-엔-8-일)피라진-2-일)-2-플루오로벤조에이트 (6.1 g, 15.83 mmol)를 MeOH (150 mL) 및 EtOAc (80 mL) 중에 용해시키고, 반응 혼합물을 N2로 15분 동안 플러싱하였다. 이어서, Pd-C (데구사) (6 g, 5.64 mmol)를 첨가한 다음, 반응 혼합물에 수소 풍선을 채우고, 실온에서 밤새 교반하였다. 반응 혼합물을 셀라이트를 통해 여과하고, 이를 EtOAc 및 메탄올로 세척하였다. 여과물을 농축시켜 조 생성물을 수득하였으며, 이를 후속 단계 반응에 정제 없이 사용하였다. LCMS (m/z): 388.0 (MH+), 0.79분.
단계 5. 메틸 4-(3-아미노-6-(4-옥소시클로헥실)피라진-2-일)-2-플루오로벤조에이트
아세토니트릴 (100 mL), 물 (40 mL) 중 메틸 4-(3-아미노-6-(1,4-디옥사스피로[4.5]데칸-8-일)피라진-2-일)-2-플루오로벤조에이트 (6.2 g, 16.00 mmol)의 용액에 3M 수용액 HCl (13.34 mL, 80 mmol)을 첨가하였다. 반응물을 실온에서 30분 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 6M NaOH (10 mL)를 사용하여 염기성화시킨 다음, 포화 NaHCO3을 사용하여 pH 8로 조정하였다. 아세토니트릴을 진공 하에 제거한 후, 고체 현탁액 잔류물을 여과하고, 물 및 헵탄으로 세척하고, 공기-건조시켜 메틸 4-(3-아미노-6-(4-옥소시클로헥실)피라진-2-일)-2-플루오로벤조에이트를 담황색 고체로서 67% 수율로 수득하였다. LCMS (m/z): 344.0 (MH+), 0.70분.
단계 6. 메틸 4-(3-아미노-6-((1r,4r)-4-히드록시시클로헥실)피라진-2-일)-2-플루오로벤조에이트
0℃에서 메탄올 (100 mL) 및 THF (20 mL) 중 메틸 4-(3-아미노-6-(4-옥소시클로헥실)피라진-2-일)-2-플루오로벤조에이트 (3.25 g, 9.47 mmol)의 용액에, NaBH4를 첨가하였다 (0.358 g, 9.47 mmol). 30분 후, 포화 NH4Cl을 천천히 첨가한 다음, 실온에서 1시간 동안 교반하였다. 메탄올 및 THF를 진공 하에 제거하였다. 잔류물을 EtOAc에 의해 3회 추출하고, 합한 유기부를 NaHCO3 및 물로 세척하고, 건조시키고, 농축시켰다. 조 생성물을 후속 단계 반응에 정제 없이 사용하였다. LCMS (m/z): 346.4 (MH+), 0.63분 (트랜스) 및 0.66분 (시스); 트랜스/시스 (~4 :1).
단계 7. 4-(3-아미노-6-((1r,4r)-4-히드록시시클로헥실)피라진-2-일)-2-플루오로벤조산 및 4-(3-아미노-6-((1s,4s)-4-히드록시시클로헥실)피라진-2-일)-2-플루오로벤조산
MeOH (15.68 mL) 및 THF (15.68 mL) 중 메틸 4-(3-아미노-6-((1r,4r)-4-히드록시시클로헥실)피라진-2-일)-2-플루오로벤조에이트 (3.25 g, 9.41 mmol)의 용액에 LiOH 1M 수용액 (23.53 mL, 23.53 mmol)을 첨가하였다. 반응물을 실온에서 2시간 동안 교반하고, 6 M HCl (3.9 mL)을 천천히 첨가하였다. 메탄올 및 THF를 진공 하에 제거하고, 잔류물 (황색 고체 현탁액)을 여과하였다. 고체를 물 및 헵탄으로 세척하고, 공기 건조시켜 조 생성물을 수득하였다. 조 생성물을 후속 단계 반응에 정제 없이 사용하였다. LCMS (m/z): 332.1 (MH+), 0.49분 (트랜스) 및 0.53분 (시스).
단계 8. 4-(3-아미노-6-((1r,4S)-4-히드록시시클로헥실)피라진-2-일)-2-플루오로-N-((S)-1-(3-플루오로-5-(플루오로메틸)페닐)-2-히드록시에틸)벤즈아미드 및 4-(3-아미노-6-((1s,4R)-4-히드록시시클로헥실)피라진-2-일)-2-플루오로-N-((S)-1-(3-플루오로-5-(플루오로메틸)페닐)-2-히드록시에틸)벤즈아미드
4-(3-아미노-6-((1r,4r)-4-히드록시시클로헥실)피라진-2-일)-2-플루오로벤조산 및 4-(3-아미노-6-((1s,4s)-4-히드록시시클로헥실)피라진-2-일)-2-플루오로벤조산 (19.45 mg, 0.053 mmol)의 혼합물에 NMP (0.5 mL), 휘니그 염기 (0.042 mL, 0.240 mmol) 및 (S)-2-아미노-2-(3-플루오로-5-(플루오로메틸)페닐)에탄올-HCl (9 mg, 0.048 mmol)을 첨가하였다. 이어서, HATU (36.6 mg, 0.096 mmol)를 첨가하였다. 반응물을 1시간 동안 실온에서 교반하고, 이어서 LCMS를 수행하였다. 조 반응물에 NMP 0.5 mL를 첨가하고, 여과하고, 정제용 HPLC에 의해 정제하여 2종의 이성질체를 트랜스로서의 4-(3-아미노-6-((1r,4S)-4-히드록시시클로헥실)피라진-2-일)-2-플루오로-N-((S)-1-(3-플루오로-5-(플루오로메틸)페닐)-2-히드록시에틸)벤즈아미드 및 시스로서의 소량의 4-(3-아미노-6-((1s,4R)-4-히드록시시클로헥실)피라진-2-일)-2-플루오로-N-((S)-1-(3-플루오로-5-(플루오로메틸)페닐)-2-히드록시에틸)벤즈아미드로 단리시켰다. 2종의 생성물을 TFA 염으로 동결건조시켰다. 트랜스 부분입체이성질체에 대해,
1H NMR (400 MHz, CD3OD) δ ppm 7.84 - 7.70 (m, 2 H), 7.64 - 7.47 (m, 2 H), 7.19 (s, 1 H), 7.09 (d, J=9.78 Hz, 1 H), 6.98(d, J=9.00 Hz, 1 H), 5.36 (s, 1 H), 5.24 (s, 1 H), 5.13 (t, J=5.87 Hz, 1 H), 3.87 - 3.70 (m, 2 H), 3.59 -3.45 (m, 1 H), 2.62 - 2.49 (m, 1 H), 2.05 - 1.92 (m, 2 H), 1.91- 1.79 (m, 2 H), 1.57 (qd, J=12.98 Hz, 2.93 Hz, 2 H), 1.39-1.24.
시스 부분입체이성질체에 대해,
1H NMR (400 MHz, CD3OD) δ ppm 7.93-7.81 (m, 2H) 7.75-7.58 (m, 2H) 7.29 (d, J=9.78 Hz, 1 H), 7.19 (d, J=9.78 Hz, 1H), 7.07 (d, J=9.00 Hz, 1H), 5.45 (s, 1 H), 5.33 (s, 1 H), 5.22(t, J=5.67 Hz, 1H), 4.01 (br. s., 1 H), 3.94 -3.77 (m, 2 H), 2.80 - 2.68 (m, 1 H), 2.12 - 1.96 (m, 2 H) 1.91- 1.80 (m, 2 H), 1.77-1.60 (m, 4 H).
(S)-N-(2-아미노-2-(3-플루오로-5-아이오도페닐)에틸)-N-메틸-2-니트로벤젠술폰아미드의 합성
반응식 76
Figure 112016034409922-pct00149
단계 1. 메틸 3-아미노-5-플루오로벤조에이트
3-브로모-5-플루오로벤조산 (6.12 g, 33.1 mmol)을 MeOH (10 mL) 중에 용해시키고, 빙수조에서 냉각시키고, 톨루엔 (50 mL)에 이어서 TMS-디아조메탄 (19.84 mL, 39.7 mmol)을 적가하였다. 반응 혼합물을 1시간 동안 실온으로 돌아가도록 하고, 진공 하에 농축시키고, 잔류물을 DCM/에테르 중에 용해시키고, 실리카의 짧은 플러그를 통해 여과하고, 여과물을 진공 하에 증발시켜 목적 생성물을 수득한 다음, 이를 MeOH (60 mL) 중에 용해시키고, Pd/C 10wt% 3.3 g을 첨가하고, 혼합물을 배기시키고, 수소 1 atm 하에 밤새 교반하고, LCMS는 다음 날 아침 목적 생성물을 나타내었다. 반응 혼합물을 셀라이트를 통해 여과하고, 여과물을 진공 하에 농축시키고, 잔류물을 톨루엔과 2회 공비혼합하고, 그대로 후속 단계에 사용하였다 (99%). LCMS (m/z): 211.1 (MH+), 0.55분.
단계 2. 메틸 3-플루오로-5-아이오도벤조에이트
메틸 3-아미노-5-플루오로벤조에이트를 5.0 N HCl (68.5 mL, 343 mmol) 중에 용해시키고, 0℃로 냉각시켰다. 3.0 mL 물 중에 용해시킨 NaNO2 (2.51 g, 36.4 mmol)를 적가하였다. 이어서, 45 mL 물 중에 용해시킨 KI (6.59 g, 39.7 mmol)를 30분에 걸쳐 첨가하고, 혼합물을 실온에서 1시간 동안 교반하고, 반응 혼합물을 Et2O (200 mL)로 2회 추출한 다음, 건조 (황산마그네슘)시키고, 여과하고, 진공 하에 농축시켜 조 생성물을 수득하였으며, 이를 플래쉬 크로마토그래피 (0-20% EtOAc/헵탄)에 의해 정제하여 목적 생성물 5.49 g을 황색 시럽 (59%)으로서 수득하였다.
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ ppm 8.18 (s, 1H), 7.69 (d, J=9.0 Hz, 1H), 7.63 (dd, J=7.6, 1.4 Hz, 1H), 3.93 (s, 3H).
단계 3. (3-플루오로-5-아이오도페닐)메탄올
메틸 3-플루오로-5-아이오도벤조에이트 (5.49 g, 19.60 mmol)를 DCM (100 mL) 중에 용해시키고, -78℃로 냉각시켰다. DIBAL-H (49.0 mL, 49.0 mmol)를 30분에 걸쳐 적가한 다음, 1시간 후에 추가 부분의 DIBAL-H (49.0 mL, 49.0 mmol)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 -78℃에서 4시간 동안 교반하고, 빙냉 1N HCl에 조심스럽게 부었다. 혼합물을 10분 동안 교반하고, 층을 분리하고, 수성 층을 DCM으로 추출하고, 합한 유기 추출물을 건조 (황산마그네슘)시키고, 여과하고, 진공 하에 농축시켜 정량적 수율의 목적 생성물을 수득하였다. LCMS는 결정적이지 않다.
단계 4. 3-플루오로-5-아이오도벤즈알데히드
(3-플루오로-5-아이오도페닐)메탄올 (9.79 g, 35.0 mmol mmol)을 DCM (94 mL) 중에 용해시킨 다음, 실리카 겔 (18.0 g)을 첨가하였다. 실온에서 혼합물에 PCC (18.3 g, 45.0 mmol)를 조금씩 첨가하고, 혼합물을 실온에서 1시간 동안 교반하고, 이어서 TLC하였다. 1시간 후, TLC는 비-극성 (짐작건대 알데히드)으로의 SM의 완전한 전환을 나타내었다. 반응 혼합물을 실리카 패드의 1-인치 플러그 상에서 여과하고, DCM 중 30% 에테르 (200 mL)로 용리시켰다. 여과물을 진공 하에 농축시켜 조 생성물을 수득하였으며, 이를 후속 단계에 추가 정제 없이 사용하였다.
단계 5. (R,E)-N-(3-플루오로-5-아이오도벤질리덴)-2-메틸프로판-2-술핀아미드
DCE (117 mL) 중 3-플루오로-5-아이오도벤즈알데히드 (8.75 g, 35 mmol) 및 (R)-(+)-t-부틸술핀아미드 (4.67 g, 38.5 mmol)의 용액에 황산구리 (II) (무수) (16.76 g, 105 mmol)를 첨가하고, 생성된 현탁액을 60℃에서 밤새 가열하였다. LCMS는 목적 생성물 형성을 나타내었다. 반응 혼합물을 셀라이트를 통해 여과하고, 여과물을 진공 하에 농축시킨 다음, 그대로 후속 단계에 사용하였다. LCMS (m/z): 354.1 (MH+), 1.08분.
단계 6. (R)-N-((R)-1-(3-플루오로-5-아이오도페닐)알릴)-2-메틸프로판-2-술핀아미드
디메틸 아연 (톨루엔 중 1.2M) (7.29 mL, 8.75 mmol) 및 비닐마그네슘 브로마이드 (45.5 mL, 45.5 mmol)를 실온에서 20분 동안 아르곤 하에 혼합한 후, -78℃로 냉각시킨 다음, 건조 THF (117 mL) 중 (R,E)-N-(3-플루오로-5-아이오도벤질리덴)-2-메틸프로판-2-술핀아미드를 약 30분 적가함에 따라 혼합하였다. 내부 온도는 74℃ 내지 -72℃이고, 첨가 후 반응 혼합물을 -78℃에서 1시간 동안 교반하고, 샘플을 물에 의해 켄칭하고, LCMS는 목적 생성물과 함께 미반응 출발 물질을 나타내었다. 추가의 비닐마그네슘 브로마이드 (12 mL, 12.0 mmol)를 첨가하고, 반응을 LCMS에 의해 모니터링하고, 30분 후, 반응은 완결된 것으로 간주되었다. 반응 혼합물을 포화 NH4Cl 및 물에 의해 빙냉수에 붓고, THF를 진공 하에 제거하고, 생성물을 EtOAc로 추출하였다. 유기 층을 물 및 염수로 세척하고, 무수 Na2SO4 상에서 건조시키고, 여과하고, 농축시키고, 조 생성물을 플래쉬 크로마토그래피 (0-70% EtOAc/헵탄)에 의해 정제하여 목적 생성물로서의 (R)-N-((R)-1-(3-플루오로-5-아이오도페닐)알릴)-2-메틸프로판-2-술핀아미드 8.99 g을 무색 황색 시럽으로서 수득하였다. 수율 (67.4%). 수율은 4 단계 순서에 대한 것이다. 주: 주요 부산물은 탈아이오딘화 목적 생성물에 상응한다. LCMS (m/z): 382.5 (MH+), 0.96분;
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ ppm 7.48 (s, 1H), 7.37 (dt, J=7.6, 1.9 Hz, 1H), 7.06 (d, J=9.0 Hz, 1H), 5.85 (ddd, J=17.0, 10.0, 7.4 Hz, 1H), 5.25-5.47 (m, 3H), 4.90 (d, J=7.0 Hz, 1H), 3.23-3.66 (m, 1H), 1.26 (s, 9H).
단계 7. (R)-tert-부틸 (1-(3-플루오로-5-아이오도페닐)알릴)카르바메이트
(R)-N-((R)-1-(3-플루오로-5-아이오도페닐)알릴)-2-메틸프로판-2-술핀아미드 (8.99 g, 23.58 mmol)를 MeOH (40 mL) 중에 용해시키고, 4 N HCl (11.79 mL, 47.2 mmol)로 처리하고, 혼합물을 실온에서 1시간 동안 교반하고, 진공 하에 농축시켰다. 잔류물을 물 중에 용해시키고, 포화 Na2CO3을 첨가하였다. 생성물을 3:1 CHCl3:IPA로 추출하고, 유기 층을 건조 (황산마그네슘)시키고, 여과하고, 진공 하에 농축시켰다. 잔류물을 DCM (60 mL) 중에 용해시키고, Boc-무수물 (6.79 mL, 29.2 mmol)을 첨가하였다. 혼합물을 실온에서 밤새 교반하고, 다음 날 아침, 반응 혼합물을 진공 하에 농축시키고, 조 생성물 (R)-tert-부틸 (1-(3-플루오로-5-아이오도페닐)알릴)카르바메이트를 후속 단계에 어떠한 추가 정제도 없이 사용하였다. LCMS (m/z): 322.1 (MH+-56), 1.11분.
단계 8. (S)-tert-부틸 (1-(3-플루오로-5-아이오도페닐)-2-히드록시에틸)카르바메이트
(R)-tert-부틸 (1-(3-플루오로-5-아이오도페닐)알릴)카르바메이트 (8.89 g, 23.58 mmol)를 DCM (236 mL) 중에 용해시키고, -78℃로 냉각시켰다. 청색이 지속될 때까지 오존을 혼합물을 통해 퍼징하였다. 이어서, 반응 혼합물을 질소로 퍼징하고, NaBH4 (8.92 g, 236 mmol)를 한번에 첨가하고, 이어서 MeOH (120 mL)를 첨가하고, 혼합물을 동일한 온도에서 2시간 동안 교반한 다음, 아세톤 20 mL를 첨가하였다. 반응 혼합물을 추가로 1시간 동안 교반한 다음, 포화 NH4Cl 상에 부은 다음, DCM (500 mL)으로 추출한 다음, 3:1 CHCl3/IPA (200 mL)로 추출하고, 유기 추출물을 합하고, 건조 (황산마그네슘)시키고, 용매를 진공 하에 농축시키고, 잔류물을 플래쉬 크로마토그래피에 의해 정제하여 (S)-tert-부틸 (1-(3-플루오로-5-아이오도페닐)-2-히드록시에틸)카르바메이트 6.74 g (17.7 mmol) (75%)을 수득하였다. LCMS (m/z): 326.1 (MH+-56), 0.90분.
단계 9. (S)-tert-부틸 (2-아지도-1-(3-플루오로-5-아이오도페닐)에틸)카르바메이트
(S)-tert-부틸 (1-(3-플루오로-5-아이오도페닐)-2-히드록시에틸)카르바메이트 (4.8112 g, 12.62 mmol)를 DCM (100 mL) 중에 용해시키고, 0℃로 냉각시켰다. Et3N (2.62 mL, 18.93 mmol)을 다음에 첨가한 다음, MsCl (1.180 mL, 15.15 mmol)을 적가하였다. 반응 혼합물을 동일한 온도에서 30분 동안 교반한 후, RM을 포화 NaHCO3 및 물로 켄칭하였다. 생성물을 DCM으로 추출하고, 합한 유기 층을 건조 (황산마그네슘)시키고, 여과하고, 진공 하에 농축시켜 조 생성물을 수득하였으며, 이를 DMF (25 mL, 약 0.5 M) 중에 용해시켰다. NaN3 (2.462 g, 37.9 mmol)을 다음에 첨가하고, 혼합물을 70℃에서 가열하였다. 6시간 후, 반응 혼합물을 실온으로 냉각시키고, EtOAc 및 물로 희석하고, 생성물을 EtOAc로 추출하였다. 합한 유기 추출물을 물로 3회 세척하고, 건조 (황산마그네슘)시키고, 여과하고, 진공 하에 농축시키고, 잔류물을 플래쉬 크로마토그래피 (0-50%) EtOAc/헵탄에 의해 정제하여 (S)-tert-부틸 (2-아지도-1-(3-플루오로-5-아이오도페닐)에틸)카르바메이트 4.03 g을 목적 생성물로서 수득하였다. LCMS (m/z): 351.0 (MH+-56), 1.05분.
단계 10. (S)-tert-부틸 (1-(3-플루오로-5-아이오도페닐)-2-(2-니트로페닐술폰아미도)에틸)카르바메이트
(S)-tert-부틸 (2-아지도-1-(3-플루오로-5-아이오도페닐)에틸)카르바메이트 (288 mg, 0.709 mmol)를 MeOH (7.09 mL) 중에 용해시킨 다음, 중합체-결합된 PPh3 (7.09 mmol)을 첨가하였다. RM을 70℃에서 밤새 교반하였다. 다음 날 아침, LCMS는 목적 생성물의 형성을 나타내었다. RM을 셀라이트를 통해 여과하고, 필터-케이크를 DCM 및 MeOH로 세척하고, 여과물을 진공 하에 농축시켜 조 아민을 수득하였으며, 이를 후속 단계에 어떠한 추가 정제도 없이 사용하였다. 조 아민을 DCM (7 mL) 중에 용해시키고, 0℃로 냉각시킨 다음, 트리에틸아민 (0.198 mL, 1.418 mmol)을 첨가하였다. 이어서, 2-니트로벤젠-1-술포닐 클로라이드 (189 mg, 0.851 mmol)를 한번에 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 1시간 동안 교반하고, 물로 켄칭하고, 생성물을 DCM으로 추출하였다. 유기 층을 염수로 세척하고, 건조 (황산마그네슘)시키고, 여과하고, 진공 하에 농축시키고, 잔류물을 플래쉬 크로마토그래피 (0-40% EtOAc/헵탄)에 의해 정제하여 (S)-tert-부틸 (1-(3-플루오로-5-아이오도페닐)-2-(2-니트로페닐술폰아미도)에틸)카르바메이트 290 mg을 목적 생성물로서 수득하였다. LCMS (m/z): 524.0 (MH+-56), 1.10분.
단계 11. (S)-N-(2-아미노-2-(3-플루오로-5-아이오도페닐)에틸)-N-메틸-2-니트로벤젠술폰아미드 (S)-tert-부틸 (1-(3-플루오로-5-아이오도페닐)-2-(2-니트로페닐술폰아미도)에틸)카르바메이트 (290 mg, 0.513 mmol)를 DMF (5.1 mL) 중에 용해시키고, K2CO3 (142 mg, 1.026 mmol)에 이어서 아이오도메탄 (48.1 μl, 0.769 mmol)을 첨가하였다. 혼합물을 실온에서 1시간 동안 교반하였으며 이때 완전한 반응이 관찰되었다. RM을 물 및 EtOAc로 희석하였다. 유기 층을 물로 2회 세척하고, 건조 (황산마그네슘)시키고, 여과하고, 진공 하에 농축시켜 비교적 순수한 생성물을 수득하였으며, 이를 DCM (5 mL) 중에 용해시키고, 디옥산 중 4N HCl (2 mL)로 처리하고, 혼합물을 실온에서 밤새 교반하고, 혼합물을 진공 하에 농축시켜 목적 생성물 (S)-N-(2-아미노-2-(3-플루오로-5-아이오도페닐)에틸)-N-메틸-2-니트로벤젠술폰아미드를 히드로클로라이드 염으로서 수득하였다. LCMS (m/z): 480.4 (MH+), 0.72분.
실시예 179
(S)-N-(2-아미노-1-(3-플루오로-5-아이오도페닐)에틸)-4-(3-아미노-6-(테트라히드로-2H-피란-4-일)피라진-2-일)-2-플루오로벤즈아미드의 합성
반응식 77
Figure 112016034409922-pct00150
단계 1. (S)-4-(3-아미노-6-(테트라히드로-2H-피란-4-일)피라진-2-일)-N-(2-아지도-1-(3-플루오로-5-아이오도페닐)에틸)-2-플루오로벤즈아미드
4-(3-아미노-6-(테트라히드로-2H-피란-4-일)피라진-2-일)-2-플루오로벤조산 TFA 부가물 (126 mg, 0.292 mmol) 및 HOAt (0.060 g, 0.438 mmol)를 DMF (1 mL) 및 DIEA (0.156 mL, 0.876 mmol) 중에 용해시켰다. (S)-tert-부틸 (2-아지도-1-(3-플루오로-5-아이오도페닐)에틸)카르바메이트와 디옥산 중 4M HCl의 반응 (반응식 76에서의 단계 9)으로부터 수득된 (S)-2-아지도-1-(3-플루오로-5-아이오도페닐)에탄아민 히드로클로라이드 염 (100 mg, 292 mmol)을 첨가하고, 이어서 EDC (0.090 g, 0.467 mmol)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 밤새 교반하였다. 반응 혼합물을 EtOAc 및 물로 희석하고, 유기 층을 물로 2회 세척한 다음, 포화 Na2CO3으로 세척하였다. 유기 층을 황산마그네슘 상에서 건조시키고, 여과하고, 진공 하에 농축시켜 조 (S)-4-(3-아미노-6-(테트라히드로-2H-피란-4-일)피라진-2-일)-N-(2-아지도-1-(3-플루오로-5-아이오도페닐)에틸)-2-플루오로벤즈아미드를 추가 정제 없이 수득하였다.
단계 2. (S)-N-(2-아미노-1-(3-플루오로-5-아이오도페닐)에틸)-4-(3-아미노-6-(테트라히드로-2H-피란-4-일)피라진-2-일)-2-플루오로벤즈아미드
조 (S)-4-(3-아미노-6-(테트라히드로-2H-피란-4-일)피라진-2-일)-N-(2-아지도-1-(3-플루오로-5-아이오도페닐)에틸)-2-플루오로벤즈아미드를 THF (5 mL) 중에 용해시키고, 트리페닐포스핀 (중합체 결합, 3 mmol/g) (0.97 g, 3.70 mmol)을 적가하였다. 혼합물을 70℃에서 3시간 동안 가열하였다. LCMS는 출발 물질의 부재 (이 스테이지에서, 포스포릴이민 중간체는 고체 상에 존재할 수 있음)를 나타내었다. 물 (4.5 mL) 및 THF (5 mL)를 첨가하고, 혼합물을 80℃에서 3시간 동안 가열한 다음, 여과하였다. 필터 케이크를 DCM으로 세척한 다음, 여과물을 진공 하에 농축시켰다. 잔류물을 DCM 중에 용해시키고, 물로 세척하고, 유기 층을 황산마그네슘 상에서 건조시키고, 여과하고, 진공 하에 농축시켜 잔류물을 수득하였으며, 이를 플래쉬 크로마토그래피 (0.5% NH4OH를 함유하는 EtOAc 중 0-60% DCM/10% MeOH)에 의해 정제하고, 생성물 분획을 수집하고, 농축시켰다. 잔류물을 아세토니트릴 및 물 중에 용해시키고, 동결건조시켜 (S)-N-(2-아미노-1-(3-플루오로-5-아이오도페닐)에틸)-4-(3-아미노-6-(테트라히드로-2H-피란-4-일)피라진-2-일)-2-플루오로벤즈아미드 101.2 mg을 목적 생성물로서 수득하였다. LCMS (m/z): 580.1 (MH+), 0.70분.
1H NMR (CD3OD) δ (ppm): 7.92 (s, 1H), 7.85 - 7.79 (m, 1H), 7.73 (dd, J=8.0, 1.4 Hz, 1H), 7.68 - 7.61 (m, 2H), 7.50 - 7.43 (m, 1H), 7.23 (d, J=9.5 Hz, 1H), 5.12 (t, J=6.9 Hz, 1H), 4.07 (dd, J=11.2, 3.3 Hz, 2H), 3.60 (td, J=11.7, 2.0 Hz, 2H), 3.09 - 2.83 (m, 3H), 2.02 - 1.76 (m, 4H).
(S)-tert-부틸 (2-아미노-2-(3-브로모-5-플루오로페닐)에틸)카르바메이트의 합성
반응식 78
Figure 112016034409922-pct00151
단계 1. (S,E)-N-(3-브로모-5-플루오로벤질리덴)-2-메틸프로판-2-술핀아미드
DCE (82 mL) 중 3-브로모-5-플루오로벤즈알데히드 (5 g, 24.63 mmol) 및 (S)-2-메틸프로판-2-술핀아미드 (3.28 g, 27.1 mmol)의 용액에 황산구리 (II) (무수) (7.86 g, 49.3 mmol)를 첨가하였다. 현탁액을 60℃에서 질소 하에 밤새 교반하였다. 반응 혼합물을 냉각시키고, 셀라이트의 플러그를 통해 여과하고, DCM으로 헹구었다. 여과물을 농축시켜 조 생성물을 수득하였다. 조 생성물을 플래쉬 크로마토그래프에 의해 헵탄 중 0-30% EtOAc로 용리시키면서 정제하여 생성물 (S,E)-N-(3-브로모-5-플루오로벤질리덴)-2-메틸프로판-2-술핀아미드 (7.5 g, 24.49 mmol, 99% 수율)를 담황색 오일로서 수득하였다. LCMS (m/z): 306.1/308.1 (MH+), 1.04분.
단계 2. (S)-N-((S)-1-(3-브로모-5-플루오로페닐)-2-니트로에틸)-2-메틸프로판-2-술핀아미드
니트로메탄 (1.0 mL, 17.20 mmol)을 THF (34.4 mL) 중에 용해시킨 다음, BuLi (헥산 중 2.5 M) (7.22 mL, 18.06 mmol)를 -78℃에서 첨가하였다. 반응 혼합물을 -78℃에서 10분 동안 교반한 다음, 실온으로 20분 동안 가온하였다. -78℃로 냉각시킨 후, THF (6 mL) 중 (S,E)-N-(3-브로모-5-플루오로벤질리덴)-2-메틸프로판-2-술핀아미드 (4.74 g, 15.48 mmol)를 적가하였다. 반응 혼합물을 -78℃에서 20분 동안 교반하고, 실온으로 가온하고, 실온에서 5시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 포화 NH4Cl에 의해 켄칭하고, EtOAc로 추출하였다. 유기부를 Na2SO4 상에서 건조시키고, 여과하고, 농축시켰다. 조 생성물을 플래쉬 크로마토그래피 (0-40%-100% EtOAC/ 헵탄)에 의해 정제하였다. 순수한 분획을 합하여 (S)-N-((S)-1-(3-브로모-5-플루오로페닐)-2-니트로에틸)-2-메틸프로판-2-술핀아미드 (2.2 g, 5.99 mmol, 38.7% 수율)를 수득하였다. LCMS (m/z): 367.1/369.1 (MH+), 0.89분;
1H NMR (400MHz, CDCl3) δ ppm 7.31 (s, 1H), 7.03 (d, J=9.0 Hz, 1H), 5.03 (q, J=5.7 Hz, 1H), 4.87 - 4.78 (m, 2H), 4.48 (d, J=5.1 Hz, 1H), 1.33 - 1.25 (m, 9H).
단계 3. (S)-N-((S)-2-아미노-1-(3-브로모-5-플루오로페닐)에틸)-2-메틸프로판-2-술핀아미드
(S)-N-((S)-1-(3-브로모-5-플루오로페닐)-2-니트로에틸)-2-메틸프로판-2-술핀아미드 (2.2 g, 5.99 mmol)를 MeOH (19.97 mL) 중에 용해시키고, 10분 동안 N2로 플러싱한 다음, PtO2 (0.408 g, 1.797 mmol)를 첨가하였다. 반응 혼합물에 수소 풍선을 채우고, 실온에서 밤새 교반하였다. 반응 혼합물을 셀라이트를 통해 여과하고, 메탄올 및 EtOAc로 세척하였다. 여과물을 Na2SO4 상에서 건조시키고, 여과하고, 농축시켰다. 조 물질을 후속 단계 반응에 추가 정제 없이 사용하였다. LCMS (m/z): 337.1/339.1 (MH+), 0.64분.
단계 4. tert-부틸 ((S)-2-(3-브로모-5-플루오로페닐)-2-((S)-1,1-디메틸에틸술핀아미도) 에틸)카르바메이트
(S)-N-((S)-2-아미노-1-(3-브로모-5-플루오로페닐)에틸)-2-메틸프로판-2-술핀아미드 (1.75 g, 5.19 mmol)를 DCM (17.30 mL) 중에 용해시킨 다음, Boc2O (1.325 mL, 5.71 mmol)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 3시간 동안 교반한 다음, 농축시켰다. 조 생성물을 정제하여 생성물 tert-부틸 ((S)-2-(3-브로모-5-플루오로페닐)-2-((S)-1,1-디메틸에틸술핀아미도)에틸)카르바메이트 (1.78 g, 78%)를 수득하였다. LCMS (m/z): 437.1/439.1 (MH+), 0.99분.
단계 5. (S)-tert-부틸 (2-아미노-2-(3-브로모-5-플루오로페닐)에틸)카르바메이트
DCM (13.57 mL) 중 tert-부틸 ((S)-2-(3-브로모-5-플루오로페닐)-2-((R)-1,1-디메틸에틸술핀아미도)에틸)카르바메이트 (1.78 g, 4.07 mmol)의 용액에 실온에서 HCl (디옥산 중 4M) (4.07 mL, 16.28 mmol)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 1시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 pH = 7로 중화시킨 다음, EtOAc에 의해 추출하여 목적 (S)-tert-부틸 (2-아미노-2-(3-브로모-5-플루오로페닐)에틸)카르바메이트 (300 mg)를 유리 염기로서 추출하였다. LCMS (m/z): 317.1/319.1 (MH+), 0.66분.
(S)-tert-부틸 (2-아미노-2-(3-브로모페닐)에틸)카르바메이트의 합성
Figure 112016034409922-pct00152
반응식 78에 따라, 3-브로모벤즈알데히드를 사용하여, (S)-tert-부틸 (2-아미노-2-(3-브로모페닐)에틸)카르바메이트를 HCl 염으로서 수득하였다. LCMS (m/z): 315.1/317.1 (MH+), 0.66분.
(S)-메틸 (2-아미노-2-(3-브로모-5-플루오로페닐)에틸)카르바메이트의 합성
반응식 79
Figure 112016034409922-pct00153
DCM (988 μl) 중 (S)-N-((S)-2-아미노-1-(3-브로모-5-플루오로페닐)에틸)-2-메틸프로판-2-술핀아미드 (100 mg, 0.297 mmol)의 용액에 TEA (124 μl, 0.890 mmol) 및 메틸 클로로포르메이트 (24.12 μl, 0.311 mmol)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 1시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 EtOAc로 추출하고, 유기부를 물 및 염수로 세척하고, 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 진공 하에 농축시켰다. 잔류물을 Et2O (1 mL) 중에 용해시키고, 이어서 HCl (디옥산 중 4M) (148 μl, 0.593 mmol)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 30분 동안 교반하였다. 용매를 경사분리한 후, 잔류물 고체를 후속 단계에 추가 정제 없이 사용하였다. LCMS (m/z): 291.2/293 (MH+), 0.49분.
(S)-메틸 (2-아미노-2-(3-브로모페닐)에틸)카르바메이트
Figure 112016034409922-pct00154
반응식 79에 따라, (S)-N-((S)-2-아미노-1-(3-브로모페닐)에틸)-2-메틸프로판-2-술핀아미드를 사용하여, (S)-메틸 (2-아미노-2-(3-브로모페닐)에틸)카르바메이트를 수득하였다. LCMS (m/z): 273.0/275.0 (MH+), 0.46분.
(S)-메틸 (2-아미노-2-(3-클로로페닐)에틸)카르바메이트
Figure 112016034409922-pct00155
반응식 79에 따라, (S)-N-((S)-2-아미노-1-(3-클로로페닐)에틸)-2-메틸프로판-2-술핀아미드를 사용하여, (S)-메틸 (2-아미노-2-(3-클로로페닐)에틸)카르바메이트를 수득하였다. LCMS (m/z): 229.2 (MH+), 0.42분.
(S)-N-(2-아미노-2-(3-브로모-5-플루오로페닐)에틸)아세트아미드의 합성
반응식 80
Figure 112016034409922-pct00156
(S)-N-((S)-2-아미노-1-(3-브로모-5-플루오로페닐)에틸)-2-메틸프로판-2-술핀아미드 (100 mg, 0.297 mmol)를 DCM (988 μl) 중에 용해시키고, 이어서 피리딘 (71.9 μl, 0.890 mmol) 및 아세트산 무수물 (28.0 μl, 0.297 mmol)을 용해시켰다. 반응 혼합물을 실온에서 1시간 동안 교반하고, EtOAc로 추출하고, 물 및 염수로 세척하고, Na2SO4 상에서 건조시키고, 농축시켰다. 잔류물을 Et2O (1 mL) 중에 용해시킨 다음, HCl (디옥산 중 4 M) (148 μl, 0.593 mmol)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 30분 동안 교반하였다. 용매를 경사분리한 후, 잔류물 고체를 후속 단계 반응에 정제 없이 사용하였다. LCMS (m/z): 275.1/277.1 (MH+), 0.41분.
(S)-N-(2-아미노-2-(3-브로모페닐)에틸)아세트아미드의 합성
Figure 112016034409922-pct00157
반응식 80에 따라, (S)-N-((S)-2-아미노-1-(3-브로모페닐)에틸)-2-메틸프로판-2-술핀아미드를 사용하여, (S)-N-(2-아미노-2-(3-브로모페닐)에틸)아세트아미드를 수득하였다. LCMS (m/z): 257.1/259.1 (MH+), 0.40분.
실시예 180
(S)-N-(2-아미노-1-(3-브로모-5-플루오로페닐)에틸)-4-(3-아미노-6-(테트라히드로-2H-피란-4-일)피라진-2-일)-2-플루오로벤즈아미드의 합성
반응식 81
Figure 112016034409922-pct00158
단계 1. (S)-tert-부틸 (2-(4-(3-아미노-6-(테트라히드로-2H-피란-4-일)피라진-2-일)-2-플루오로벤즈아미도)-2-(3-브로모-5-플루오로페닐)에틸)카르바메이트
DMF (368 μl) 중 4-(3-아미노-6-(테트라히드로-2H-피란-4-일)피라진-2-일)-2-플루오로벤조산 (35 mg, 0.110 mmol)의 용액에 (S)-tert-부틸 (2-아미노-2-(3-브로모-5-플루오로페닐)에틸)카르바메이트 (40.8 mg, 0.110 mmol), 아자-HOBt (22.52 mg, 0.165 mmol), EDC (31.7 mg, 0.165 mmol), 및 DIEA (57.8 μl, 0.331 mmol)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 3시간 동안 교반한 다음, EtOAc와 물 사이에 분배하였다. 유기부를 NaHCO3, 물 및 염수로 세척하고, Na2SO4 상에서 건조시키고, 농축시켰다. 조 (S)-tert-부틸 (2-(4-(3-아미노-6-(테트라히드로-2H-피란-4-일)피라진-2-일)-2-플루오로벤즈아미도)-2-(3-브로모-5-플루오로페닐)에틸)카르바메이트를 후속 단계 반응에 추가 정제 없이 사용하였다. LCMS (m/z): 632.1/634.1 (MH+), 0.97분.
단계 2. (S)-N-(2-아미노-1-(3-브로모-5-플루오로페닐)에틸)-4-(3-아미노-6-(테트라히드로-2H-피란-4-일)피라진-2-일)-2-플루오로벤즈아미드
DCM (1.0 mL) 중 (S)-tert-부틸 (2-(4-(3-아미노-6-(테트라히드로-2H-피란-4-일)피라진-2-일)-2-플루오로벤즈아미도)-2-(3-브로모-5-플루오로페닐)에틸)카르바메이트 (69 mg, 0.110 mmol)의 용액에 TFA (0.5 mL)를 첨가하고, 실온에서 1시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 농축 건조시킨 다음, DMSO 중에 용해시키고, 정제용 HPLC로 처리하였다. 순수한 분획을 합하고, 동결건조시켜 최종 생성물을 TFA 염으로서 수득하였다. LCMS (m/z): 532.1/534.1 (MH+), 0.69분;
1H NMR (400 MHz, 메탄올-d4) δ ppm 7.94 - 7.84 (m, 2H), 7.73 (dd, J=1.4, 8.0 Hz, 1H), 7.66 (dd, J=1.4, 11.9 Hz, 1H), 7.55 (s, 1H), 7.49 - 7.39 (m, 1H), 7.29 (d, J=9.4 Hz, 1H), 5.48 (t, J=7.2 Hz, 1H), 4.04 (dd, J=2.9, 11.5 Hz, 2H), 3.57 (dt, J=2.2, 11.6 Hz, 2H), 3.51 - 3.41 (m, 2H), 3.01 - 2.85 (m, 1H), 1.97 - 1.76 (m, 4H).
실시예 181
(S)-N-(2-아미노-1-(3-클로로-5-플루오로페닐)에틸)-4-(3-아미노-6-(테트라히드로-2H-피란-4-일)피라진-2-일)-2-플루오로벤즈아미드의 합성
반응식 82
Figure 112016034409922-pct00159
단계 1. (S)-4-(3-아미노-6-(테트라히드로-2H-피란-4-일)피라진-2-일)-N-(2-아지도-1-(3-클로로-5-플루오로페닐)에틸)-2-플루오로벤즈아미드
DMF (1328 μl) 중 4-(3-아미노-6-(테트라히드로-2H-피란-4-일)피라진-2-일)-2-플루오로벤조산 (126 mg, 0.398 mmol)의 용액에 (S)-2-아지도-1-(3-클로로-5-플루오로페닐)에탄아민 (100.0 mg, 0.398 mmol), DIEA (348 μl, 1.991 mmol), EDC (153 mg, 0.797 mmol), 및 아자-HOBt (81 mg, 0.597 mmol)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 15시간 동안 교반하였다. 물을 첨가한 후, 반응 혼합물을 EtOAc로 후처리하였다. 유기 층을 Na2SO4 상에서 건조시키고, 여과하고, 진공 하에 농축시켰다. 조 생성물을 플래쉬 크로마토그래피 (구배: 헵탄 중 EtOAc)에 의해 정제하여 (S)-4-(3-아미노-6-(테트라히드로-2H-피란-4-일)피라진-2-일)-N-(2-아지도-1-(3-클로로-5-플루오로페닐)에틸)-2-플루오로벤즈아미드 (118 mg, 58%)를 수득하였다. LCMS (m/z): 514.2 (MH+), 0.91분.
단계 2. (S)-N-(2-아미노-1-(3-클로로-5-플루오로페닐)에틸)-4-(3-아미노-6-(테트라히드로-2H-피란-4-일)피라진-2-일)-2-플루오로벤즈아미드
피리딘 (2 mL) 중 (S)-4-(3-아미노-6-(테트라히드로-2H-피란-4-일)피라진-2-일)-N-(2-아지도-1-(3-클로로-5-플루오로페닐)에틸)-2-플루오로벤즈아미드 (118 mg, 0.230 mmol)의 용액에 실온에서 NH4OH (200 μl) 및 트리메틸포스핀 (344 μl, 0.344 mmol)을 순차적으로 첨가하였다. 반응 혼합물을 2시간 동안 교반하였다. EtOH (1 mL)를 첨가한 후, 반응 혼합물을 진공 하에 농축시켰다. 조 생성물을 플래쉬 크로마토그래피 (0.5% NH3 / DCM을 함유하는 DCM 중 20% MeOH)에 의해 정제하여 (S)-N-(2-아미노-1-(3-클로로-5-플루오로페닐)에틸)-4-(3-아미노-6-(테트라히드로-2H-피란-4-일)피라진-2-일)-2-플루오로벤즈아미드 89.6 mg (79%)을 수득하였다. LCMS (m/z): 488.2 (MH+), 0.66분.
1H NMR (500MHz, 메탄올-d4) δ ppm 7.98 - 7.89 (m, 1H), 7.89 - 7.79 (m, 1H), 7.74 (td, J=1.4, 8.0 Hz, 1H), 7.69 - 7.61 (m, 1H), 7.41 - 7.28 (m, 1H), 7.27 - 7.08 (m, 2H), 5.27 - 5.12 (m, 1H), 4.07 (dd, J=3.8, 11.0 Hz, 2H), 3.69 - 3.52 (m, 2H), 3.14 - 3.03 (m, 2H), 2.96 (tt, J=3.9, 11.7 Hz, 1H), 2.02 - 1.77 (m, 4H).
(S)-N-(2-아미노-2-(3-브로모-5-플루오로페닐)에틸)-N-메틸-2-니트로벤젠술폰아미드의 합성
반응식 83
Figure 112016034409922-pct00160
단계 1. N-((S)-2-(3-브로모-5-플루오로페닐)-2-((S)-1,1-디메틸에틸술핀아미도)에틸)-2-니트로벤젠술폰아미드
(S)-N-((S)-2-아미노-1-(3-브로모-5-플루오로페닐)에틸)-2-메틸프로판-2-술핀아미드 (3.3 g, 9.78 mmol)를 0℃에서 DCM (32.6 mL) 중에 용해시킨 다음, TEA (1.405 mL, 10.08 mmol), 및 2-니트로벤젠-1-술포닐 클로라이드 (2.169 g, 9.78 mmol)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 3시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 진공 하에 농축시키고, 조 생성물을 정제하여 N-((S)-2-(3-브로모-5-플루오로페닐)-2-((S)-1,1-디메틸에틸술핀아미도)에틸)-2-니트로벤젠술폰아미드를 수득하였다. LCMS (m/z): 522.1/524.1 (MH+), 0.94분.
단계 2. (S)-N-(2-아미노-2-(3-브로모-5-플루오로페닐)에틸)-2-니트로벤젠술폰아미드
Et2O (22.65 mL) 중 N-((S)-2-(3-브로모-5-플루오로페닐)-2-((R)-1,1-디메틸에틸술핀아미도)에틸)-2-니트로벤젠술폰아미드 (3.55 g, 6.80 mmol), 및 HCl (디옥산 중 4 M) (3.40 mL, 13.59 mmol)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 1시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 Na2CO3 용액에 의해 중화시키고, EtOAc에 의해 추출하였다. 유기 층을 물로 세척하고, 건조시키고, 여과하고, 진공 하에 농축시켜 조 (S)-N-(2-아미노-2-(3-브로모-5-플루오로페닐)에틸)-2-니트로벤젠술폰아미드를 수득하였으며, 이를 후속 단계 반응에 추가 정제 없이 사용하였다. LCMS (m/z): 418.2/420.2 (MH+), 0.62분.
단계 3. (S)-tert-부틸 (1-(3-브로모-5-플루오로페닐)-2-(2-니트로페닐술폰아미도)에틸)카르바메이트
(S)-N-(2-아미노-2-(3-브로모-5-플루오로페닐)에틸)-2-니트로벤젠술폰아미드 (1.55 g, 3.71 mmol)를 CH2Cl2 (12.35 mL) 중에 용해시킨 다음, TEA (0.517 mL, 3.71 mmol) 및 Boc-무수물 (1.119 mL, 4.82 mmol)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 1시간 동안 교반하고, 농축시켰다. 조 생성물을 플래쉬 크로마토그래피에 의해 정제하여 (S)-tert-부틸 (1-(3-브로모-5-플루오로페닐)-2-(2-니트로페닐술폰아미도)에틸)카르바메이트를 수득하였다. LCMS (m/z): 462.0/464.0 (MH+-56), 0.99분.
단계 4. (S)-tert-부틸 (1-(3-브로모-5-플루오로페닐)-2-(N-메틸-2-니트로페닐술폰아미도) 에틸)카르바메이트
(S)-tert-부틸 (1-(3-브로모-5-플루오로페닐)-2-(2-니트로페닐술폰아미도)에틸)카르바메이트 (2.3 g, 4.44 mmol)를 DMF (14.79 mL) 중에 용해시켰다. K2CO3 (1.226 g, 8.87 mmol) 및 MeI (0.416 mL, 6.66 mmol)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 2시간 동안 교반한 다음, 물을 첨가하였다. 반응 혼합물을 EtOAc로 추출하였다. 유기부를 물 및 염수로 세척하고, 건조시키고, 농축시켰다. 조 생성물을 플래쉬 크로마토그래피에 의해 정제하여 (S)-tert-부틸 (1-(3-브로모-5-플루오로페닐)-2-(N-메틸-2-니트로페닐술폰아미도)에틸) 카르바메이트 (2.3 g, 4.32 mmol, 97% 수율)를 수득하였다.
단계 5. (S)-N-(2-아미노-2-(3-브로모-5-플루오로페닐)에틸)-N-메틸-2-니트로벤젠술폰아미드
(S)-tert-부틸 (1-(3-브로모-5-플루오로페닐)-2-(N-메틸-2-니트로페닐술폰아미도)에틸) 카르바메이트 (2.3 g, 4.32 mmol, 97% 수율)를 CH2Cl2 중에 용해시키고, HCl (디옥산 중 4 M, 4.44 mL, 17.75 mmol)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 밤새 교반하였다. 헵탄을 첨가하였다. 고체를 여과하고, 공기에 의해 건조시켜 (S)-N-(2-아미노-2-(3-브로모-5-플루오로페닐)에틸)-N-메틸-2-니트로벤젠술폰아미드 (1.8 g, 3.84 mmol, 87% 수율)를 수득하였다. LCMS (m/z): 432.2/434.1 (MH+), 0.69분.
(S)-N-(2-아미노-2-(3-브로모-5-플루오로페닐)에틸)-N-메틸-2-니트로벤젠술폰아미드 히드로클로라이드 염을 하기와 같이 제조하였다:
Figure 112016034409922-pct00161
단계 1: (S)-tert-부틸 (1-(3-브로모-5-플루오로페닐)-2-히드록시에틸)카르바메이트.
DCM (390 mL) 중 (S)-2-아미노-2-(3-브로모-5-플루오로페닐)에탄올 (30 g, 111 mmol) (HCl 염)의 빙수 냉각된 용액에 TEA (46.5 mL, 333 mmol)에 이어서 Boc-무수물 (26.4 mL, DCM 50 ml 중 114 mmol)을 첨가하였다. 첨가를 15분 안에 완결하였다. 빙수조를 제거하고, 반응 혼합물을 실온에서 16시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 농축시키고 (수조 온도를 30℃ 미만으로 유지하였음), 잔류물을 EtOAc 500 ml로 희석하고, 1N NaOH 100 ml, 물 100 ml 및 염수 100 ml로 세척하고, Na2SO4 상에서 건조시키고, 여과하고, 농축시켜 조 생성물을 점성 액체 (보다 더 작은 스케일, 이는 반고체였음)로서 수득하였다. 이 점성 (또는 반고체) 생성물에 Et2O 120 ml를 첨가한 다음, 생성된 혼합물을 5분 동안 초음파처리하였다. 혼합물을 약 60 ml의 총 부피로 농축시켰다. 실온에서 1시간 후, 백색 결정질 고체가 침전되었다. (어떠한 결정도 형성되지 않은 경우에, 종자 ~ 2 mg을 첨가하였음). 4시간 후, 백색 고체를 여과하고, 최소량의 에테르로 세척하고, 건조 (적어도 1시간 동안 하우스 진공 상에서)시켜 백색 고체 총 30.5 g을 목적 생성물로서 수득하였다. 여과물을 농축시키고, 상기 절차를 반복하는 경우에 회수가 개선되었다. (S)-tert-부틸 (1-(3-브로모-5-플루오로페닐)-2-히드록시에틸)카르바메이트: 30.5 g, 82% 수율. LC-MS: (MW-56): 0.84분에서 279.8 m/z.
1H NMR (400 MHz, DMSO) ppm 1.29 - 1.43 (m, 8 H) 3.38 - 3.55 (m, 2 H) 4.39 - 4.61 (m, 1 H) 4.84 (t, J=5.67 Hz, 1 H) 7.15 (d, J=9.39 Hz, 1 H) 7.24 - 7.44 (m, 3 H).
단계 2: (4S)-tert-부틸 4-(3-브로모-5-플루오로페닐)-1,2,3-옥사티아졸리딘-3-카르복실레이트 2-옥시드. 질소 하에 -40℃ ~ -45℃ (내부 온도, 약 -55℃의 드라이 아이스-아세톤 조 온도)에서 아세토니트릴 (280 ml) 중 SOCl2 (19.98 mL, 274 mmol)의 용액에 CH3CN (175 ml) 중 (S)-tert-부틸 (1-(3-브로모-5-플루오로페닐)-2-히드록시에틸)카르바메이트 (30.5 g, 91 mmol)를 첨가하였다. 첨가를 약 30분 내에 완결하였다. -40℃ ~ -45℃에서 약 20분 교반 후, 피리딘 (40.6 mL, 502 mmol)을 첨가하였다 (약 10분 내). -40℃에서 10분 동안 교반한 후, 냉각 조를 제거하고, 혼합물을 실온으로 가온하고, 2시간 동안 교반하였다. LC-MS는 2종의 부분입체이성질체 생성물 및 일부 양의 이량체 부산물을 나타내었다. 혼합물을 EtOAc 400 ml로 희석하고, 염수 (200 ml)로 3회 세척하고, Na2SO4 상에서 건조시키고, 여과하고, 농축 (수조 약 40℃, 약 2시간)시켜 조 생성물 35.7 그램을 담황색 점성 액체로서 수득하였으며, 이를 즉시 후속 단계에 사용하거나 또는 4℃에서 저장하였다. (4S)-tert-부틸 4-(3-브로모-5-플루오로페닐)-1,2,3-옥사티아졸리딘-3-카르복실레이트 2-옥시드: LC-MS: (MW-100): 1.02분에서 281.8.
단계 3: (S)-tert-부틸 4-(3-브로모-5-플루오로페닐)-1,2,3-옥사티아졸리딘-3-카르복실레이트 2,2-디옥시드. 교반 하에 아세토니트릴 (420 mL) 중 (4S)-tert-부틸 4-(3-브로모-5-플루오로페닐)-1,2,3-옥사티아졸리딘-3-카르복실레이트 2-옥시드 (34.6 g, 91 mmol)의 빙수 냉각된 용액에 NaIO4 (29.2 g, 137 mmol)를 첨가하고, 삼염화루테늄 수화물 (0.359 g, 1.729 mmol)에 이어서 물 (320 ml)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 0℃에서 2시간 동안 교반하였다. 혼합물을 EtOAc (500 ml)로 희석하고, 염수 (200 ml)로 2회 세척하고, Na2SO4 상에서 건조시키고, 여과하고, 농축시켜 조 생성물을 수득하였고, 이를 직접 후속 단계에 사용하였다. 조 생성물 40.3 그램을 수득하였다. LC-MS: (MW + Na): 1.01분에서 419.9 m/z.
단계 4: (S)-tert-부틸 (1-(3-브로모-5-플루오로페닐)-2-(N-메틸-2-니트로페닐술폰아미도)에틸)카르바메이트. 실온에서 아세토니트릴 (400 ml) 중 N-메틸-2-니트로벤젠술폰아미드 (18.69 g, 86 mmol)의 용액에 KOH (10.21 g, 182 mmol, 상업용, 분말 형태)를 첨가하였다. 생성된 혼합물을 실온에서 약 15분 동안 교반한 후, CH3CN 180 ml 중 (S)-tert-부틸 4-(3-브로모-5-플루오로페닐)-1,2,3-옥사티아졸리딘-3-카르복실레이트 2,2-디옥시드 (36.1 g, 91 mmol)를 첨가하였다 (첨가는 15- 20분 내에 완료됨). 생성된 혼합물을 실온에서 1-2시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 약 200 ml의 총 부피로 농축시켰다. 잔류물에 EtOAc 600 ml를 첨가하고, 이어서 3N HCl 180 ml, 1N NaOH 200 ml, 및 염수 (200 ml)로 2회 세척하였다. 용액을 Na2SO4에 의해 건조시키고, 셀라이트 (~30 g) 및 실리카 겔 (20 g)을 사용한 필터 깔때기를 통해 여과하였다. 여과된 용액을 농축시켜 생성물 40.3 그램을 점성 액체로서 수득하였으며, 이를 후속 단계에 직접 사용하였다. (S)-tert-부틸 (1-(3-브로모-5-플루오로페닐)-2-(N-메틸-2-니트로페닐술폰아미도)에틸)카르바메이트: LC-MS: (MW + Na): 1.07분에서 555.8 m/z. (40.3 g, 76 mmol, 83% 수율).
단계 5: (S)-N-(2-아미노-2-(3-브로모-5-플루오로페닐)에틸)-N-메틸-2-니트로벤젠술폰아미드 히드로클로라이드 염. 실온에서 DCM (420 ml) 중 (S)-tert-부틸 (1-(3-브로모-5-플루오로페닐)-2-(N-메틸-2-니트로페닐술폰아미도)에틸)카르바메이트 (40 g, 75 mmol)의 용액에 HCl (디옥산 중 4M, 150 ml, 601 mmol)을 첨가하였다. 생성된 용액을 실온에서 4시간 동안 교반하고, 이 시간 동안 백색 고체가 침전되었다. 반응 혼합물을 여과하고, 백색 고체를 DCM (50ml x2)으로 세척하고, 진공 건조시켜 목적 생성물 23.8 그램을 백색 고체로서 수득하였다 (HCl 염). (S)-N-(2-아미노-2-(3-브로모-5-플루오로페닐)에틸)-N-메틸-2-니트로벤젠술폰아미드 (23.8 g, 4 단계에 걸쳐 68% 수율). LC-MS: (M+1): 0.66분에서 433.9 m/z.
1H NMR (400 MHz, <dmso>) ppm 2.86 (s, 3 H) 3.56 - 3.82 (m, 2 H) 4.61 (t, J=7.24 Hz, 1 H) 7.42 - 7.61 (m, 2 H) 7.68 (d, J=1.57 Hz, 1 H) 7.75 -8.05 (m, 4 H).
(S)-N-(2-아미노-2-(3-브로모-5-플루오로페닐)에틸)-N-(2-플루오로에틸)-2-니트로벤젠술폰아미드의 합성
Figure 112016034409922-pct00162
반응식 83에서의 단계 4 및 5에 따라, 1-브로모-2-플루오로에탄을 사용하여, (S)-N-(2-아미노-2-(3-브로모-5-플루오로페닐)에틸)-N-(2-플루오로에틸)-2-니트로벤젠술폰아미드를 수득하였다. LCMS (m/z): 464.1/466.1 (MH+), 0.71분.
실시예 182
4-(3-아미노-6-((1S,3S,4S)-3-플루오로-4-히드록시시클로헥실)피라진-2-일)-N-((S)-1-(3-브로모-5-플루오로페닐)-2-히드록시에틸)-2-플루오로벤즈아미드의 합성
반응식 84
Figure 112016034409922-pct00163
단계 1. 이미도디탄산, 4-(3-((tert-부톡시카르보닐)아미노)-6-(4-옥소시클로헥실)피라진-2-일)-2-플루오로벤조에이트, 1,3-비스(1,1-디메틸에틸) 에스테르
아세토니트릴 (130 mL) 중 tert-부틸 4-(3-아미노-6-(4-옥소시클로헥실)피라진-2-일)-2-플루오로벤조에이트 (3 g, 7.78 mmol)의 용액에 Boc2O (6.33 mL, 27.2 mmol) 및 DMAP (0.048 g, 0.389 mmol)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 밤새 교반하였다. 휘발성 물질을 회전증발기 상에서 감압 하에 제거한 후, 조 생성물을 플래쉬 크로마토그래피에 의해 0-50%의 EtOAc/헵탄으로 용리시키면서 정제하여 이미도디탄산, 4-(3-((tert-부톡시카르보닐)아미노)-6-(4-옥소시클로헥실)피라진-2-일)-2-플루오로벤조에이트, 1,3-비스(1,1-디메틸에틸) 에스테르 (4.34 g, 7.41 mmol, 95%)를 수득하였다. LCMS (m/z): 586.5 (MH+), 1.24분;
1H NMR (500 MHz, 클로로포름-d) δ ppm 8.52 - 8.41 (m, 1H), 7.97 (t, J=7.7 Hz, 1H), 7.61 - 7.44 (m, 2H), 3.46 - 3.30 (m, 1H), 2.68 - 2.52 (m, 4H), 2.38 (dd, J=3.0, 13.7 Hz, 2H), 2.28 - 2.10 (m, 2H), 1.69 - 1.61 (m, 9H), 1.42 - 1.29 (m, 18H).
단계 2. 이미도디탄산, 4-(3-((tert-부톡시카르보닐)아미노)-6-(4-((트리에틸실릴)옥시)시클로헥스-3-엔-1-일)피라진-2-일)-2-플루오로벤조에이트, 1,3-비스(1,1-디메틸에틸) 에스테르
THF (68.9 mL) 중 이미도디탄산, 4-(3-((tert-부톡시카르보닐)아미노)-6-(4-옥소시클로헥실)피라진-2-일)-2-플루오로벤조에이트, 1,3-비스(1,1-디메틸에틸) 에스테르 (12.1 g, 20.66 mmol)의 용액에 -78℃에서 LiHMDS (THF 중 1 M) (22.73 mL, 22.73 mmol)를 천천히 첨가하였다. 30분 동안 교반한 후, 트리에틸클로로실란 (3.67 mL, 21.69 mmol)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온으로 가온하고, 1시간 동안 교반하였다. 포화 중탄산나트륨 용액을 첨가하고, 혼합물을 EtOAc로 추출하였다. 유기 층을 물 및 염수로 잘 세척하고, 무수 NaHCO3 상에서 건조시키고, 여과하고, 진공 하에 농축시켰다. 조 생성물을 플래쉬 크로마토그래피에 의해 5%의 EtOAc/헵탄으로 용리시키면서 정제하여 이미도디탄산, 4-(3-((tert-부톡시카르보닐)아미노)-6-(4-((트리에틸실릴)옥시)시클로헥스-3-엔-1-일)피라진-2-일)-2-플루오로벤조에이트, 1,3-비스(1,1-디메틸에틸) 에스테르 (12.1 g, 17.29 mmol)를 수득하였다. LCMS (m/z, 중성-비극성 방법): 701.8 (MH+), 1.14분;
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ ppm 8.41 (s, 1H), 8.00 - 7.88 (m, 1H), 7.57 - 7.46 (m, 2H), 4.97 (br. s., 1H), 3.16 - 3.00 (m, 1H), 2.49 - 2.38 (m, 2H), 2.38 - 2.23 (m, 1H), 2.19 - 1.94 (m, 3H), 1.61 (s, 9H), 1.33 (s, 18H), 1.06 - 0.94 (m, 8H), 0.77 - 0.64 (m, 6H).
단계 3. 이미도디탄산, 4-(3-((tert-부톡시카르보닐)아미노)-6-(3-플루오로-4-옥소시클로헥실)피라진-2-일)-2-플루오로벤조에이트, 1,3-비스(1,1-디메틸에틸) 에스테르
아세토니트릴 (57.6 mL) 중 이미도디탄산, 4-(3-((tert-부톡시카르보닐)아미노)-6-(4-((트리에틸실릴)옥시)시클로헥스-3-엔-1-일)피라진-2-일)-2-플루오로벤조에이트, 1,3-비스(1,1-디메틸에틸) 에스테르 (12.1 g, 17.29 mmol)의 용액에 0℃에서 셀렉트플루오르® (7.96 g, 22.47 mmol)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온으로 가온하고, 밤새 교반하였다. 포화 NaHCO3 용액으로 켄칭한 후, 반응 혼합물을 EtOAc로 추출하였다. 유기 층을 물 및 염수로 세척하고, Na2SO4 상에서 건조시키고, 여과하고, 진공 하에 농축시켜 이미도디탄산, 4-(3-((tert-부톡시카르보닐)아미노)-6-(3-플루오로-4-옥소시클로헥실)피라진-2-일)-2-플루오로벤조에이트, 1,3-비스(1,1-디메틸에틸) 에스테르 (10.44 g, 17.29, 100%)를 수득하였으며, 이를 후속 단계에 추가 정제 없이 사용하였다. LCMS (m/z, 중성-비극성 방법): 604.3 (MH+), 1.12분.
단계 4. (+/-)-tert-부틸 4-(3-아미노-6-((1R,3R)-3-플루오로-4-옥소시클로헥실)피라진-2-일)-2-플루오로벤조에이트
THF (57.6 mL) 중 이미도디탄산, 4-(3-((tert-부톡시카르보닐)아미노)-6-(3-플루오로-4-옥소시클로헥실)피라진-2-일)-2-플루오로벤조에이트, 1,3-비스(1,1-디메틸에틸) 에스테르 (10.44 g, 17.29 mmol)의 용액에 실온에서 디옥산 중 4 M HCl (130 mL, 519 mmol)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 3-4시간 동안 교반하고, 이를 LCMS에 의해 모니터링하여 추가의 t-부틸 에스테르가 카르복실산으로 가수분해하는 것을 방지하였다. 반응물을 수조에서 냉각시키고, 포화 탄산나트륨으로 중화시켰다. 생성된 혼합물을 EtOAc로 3회 추출하였다. 합한 유기 층을 염수로 세척하고, Na2SO4 상에서 건조시키고, 여과하고, 농축시켰다. 잔류물을 플래쉬 크로마토그래피에 의해 0-100%의 EtOAc/헵탄으로 용리시키면서 정제하여 (+/-)-tert-부틸 4-(3-아미노-6-((1R,3R)-3-플루오로-4-옥소시클로헥실)피라진-2-일)-2-플루오로벤조에이트 (1.9 g, 4.71 mmol, 27.2%) 및 (+/-)-tert-부틸 4-(3-아미노-6-((1S,3S)-3-플루오로-4-옥소시클로헥실)피라진-2-일)-2-플루오로벤조에이트 (926 mg, 2.295 mmol, 13.3%)를 수득하였다. LCMS (m/z): 404.3 (MH+), 0.84분 및 404.3 (MH+), 0.84분 각각.
단계 5. (+/-)-tert-부틸 4-(3-아미노-6-((1S,3S,4S)-3-플루오로-4-히드록시시클로헥실)피라진-2-일)-2-플루오로벤조에이트
MeOH (47.1 mL) 중 (+/-)-tert-부틸 4-(3-아미노-6-((1R,3R)-3-플루오로-4-옥소시클로헥실)피라진-2-일)-2-플루오로벤조에이트 (1.9 g, 4.71 mmol)의 용액에 0℃에서 NaBH4 (0.267 g, 7.06 mmol)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 2시간 동안 교반하였다. 포화 NaHCO3 용액으로 켄칭한 후, 반응 혼합물을 EtOAc로 추출하였다. 유기 층을 물 및 염수로 세척하고, 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 진공 하에 농축시켰다. 조 생성물을 플래쉬 크로마토그래피에 의해 헵탄 중 플랫 35%의 EtOAc로 용리시키면서 정제하여 (+/-)-tert-부틸 4-(3-아미노-6-((1S,3S,4S)-3-플루오로-4-히드록시시클로헥실)피라진-2-일)-2-플루오로벤조에이트 (839 mg, 2.07mmol, 43.9%) 및 (+/-)-tert-부틸 4-(3-아미노-6-((1R,3R,4R)-3-플루오로-4-히드록시시클로헥실)피라진-2-일)-2-플루오로벤조에이트 (900 mg, 2.22 mmol, 47%)를 수득하였다. LCMS (m/z): 406.3 (MH+), 0.85분 및 406.3 (MH+), 0.85분 각각.
단계 6. tert-부틸 4-(3-아미노-6-((1S,3S,4S)-3-플루오로-4-히드록시시클로헥실)피라진-2-일)-2-플루오로벤조에이트
tert-부틸 4-(3-아미노-6-((1S,3S,4S)-3-플루오로-4-히드록시시클로헥실)피라진-2-일)-2-플루오로벤조에이트 (839 mg, 2.07mmol)를 키랄 분리 (키랄팩 5mic AD 칼럼, 4.6x100 (mm), CO2/EtOH+0.1% DEA=70/30, SFC=5ml/분)로 처리하여 단일 거울상이성질체 tert-부틸 4-(3-아미노-6-((1S,3S,4S)-3-플루오로-4-히드록시시클로헥실)피라진-2-일)-2-플루오로벤조에이트 (Rt = 1.61분, 336 mg, 0.829 mmol, 40%) 및 덜 극성의 거울상이성질체 (Rt = 2.45분, 43%)를 수득하였다.
단계 7. 4-(3-아미노-6-((1S,3S,4S)-3-플루오로-4-히드록시시클로헥실)피라진-2-일)-2-플루오로벤조산
DCM (0.444 mL) 중 tert-부틸 4-(3-아미노-6-((1S,3S,4S)-3-플루오로-4-히드록시시클로헥실)피라진-2-일)-2-플루오로벤조에이트 (90 mg, 0.22 mmol)의 용액에 디옥산 중 4 M HCl(3.7 mL, 14.80 mmol)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 밤새 교반하였다. 휘발성 물질을 진공 하에 증발시킨 후, 반응 혼합물을 Et2O로 연화처리하고, 여과하여 4-(3-아미노-6-((1S,3S,4S)-3-플루오로-4-히드록시시클로헥실)피라진-2-일)-2-플루오로벤조산 (86 mg, 0.22 mmol, 100%)을 HCl 염으로서 수득하였으며, 이를 후속 단계에 어떠한 추가 정제도 없이 사용하였다. LCMS (m/z): 350.2 (MH+), 0.51분.
단계 8. 4-(3-아미노-6-((1S,3S,4S)-3-플루오로-4-히드록시시클로헥실)피라진-2-일)-N-((S)-1-(3-브로모-5-플루오로페닐)-2-히드록시에틸)-2-플루오로벤즈아미드
DMF (573 μL) 중 4-(3-아미노-6-((1S,3S,4S)-3-플루오로-4-히드록시시클로헥실)피라진-2-일)-2-플루오로벤조산 (20 mg, 0.057 mmol)의 용액에 (S)-2-아미노-2-(3-브로모-5-플루오로페닐)에탄올 HCl 염 (18.59 mg, 0.069 mmol), 아자-HOBt (11.69 mg, 0.086 mmol), EDC (21.95 mg, 0.115 mmol), 및 DIEA (30.0 μl, 0.172 mmol)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 15시간 동안 교반하였다. 물을 첨가하고, 반응 혼합물을 EtOAc로 3회 추출하였다. 유기 층을 Na2SO4 상에서 건조시키고, 여과하고, 진공 하에 농축시켰다. 조 생성물을 HPLC에 의해 정제하였다. 순수한 분획을 동결건조시켜 4-(3-아미노-6-((1S,3S,4S)-3-플루오로-4-히드록시시클로헥실)피라진-2-일)-N-((S)-1-(3-브로모-5-플루오로페닐)-2-히드록시에틸)-2-플루오로벤즈아미드 (12.9 mg, 0.019 mmol, 32.8%)를 TFA 염으로서 수득하였다. LCMS (m/z): 565.1/567.1 (MH+), 0.72분;
1H NMR (400 MHz, CD3OD) δ ppm 7.78 (s, 2H), 7.63 - 7.47 (m, 2H), 7.37 (s, 1H), 7.22 - 7.02 (m, 2H), 5.15 - 5.03 (m, 1H), 4.43 - 4.15 (m, 1H), 3.77 (t, J = 5.7 Hz, 2H), 3.62 - 3.47 (m, 1H), 2.76 (br. s., 1H), 2.19 (dd, J = 3.1, 6.3 Hz, 1H), 2.02 - 1.92 (m, 1H), 1.89 - 1.66 (m, 2H), 1.56 (dd, J = 3.3, 12.3 Hz, 1H), 1.42 (br. s., 1H).
절대 입체화학을 4-(3-아미노-6-((1S,3S,4S)-3-플루오로-4-히드록시시클로헥실)피라진-2-일)-N-((S)-1-(3-브로모-5-플루오로페닐)-2-히드록시에틸)-2-플루오로벤즈아미드의 X선 공-구조의 정보를 기준으로 하여 결정하였다.
실시예 183
4-(3-아미노-6-((1R,3R,4R)-3-플루오로-4-히드록시시클로헥실)피라진-2-일)-N-((S)-1-(3-브로모-5-플루오로페닐)-2-히드록시에틸)-2-플루오로벤즈아미드의 합성
반응식 85
Figure 112016034409922-pct00164
단계 1. 4-(3-아미노-6-((1R,3R,4R)-3-플루오로-4-히드록시시클로헥실)피라진-2-일)-2-플루오로벤조산
DCM (2 mL) 중 tert-부틸 4-(3-아미노-6-((1R,3R,4R)-3-플루오로-4-히드록시시클로헥실)피라진-2-일)-2-플루오로벤조에이트 (반응식 84: 365 mg, 0.9 mmol)의 용액에 디옥산 중 4 M HCl (8 mL, 32.0 mmol)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 3일 동안 교반하였다. 휘발성 물질을 진공 하에 증발시킨 후, 4-(3-아미노-6-((1R,3R,4R)-3-플루오로-4-히드록시시클로헥실)피라진-2-일)-2-플루오로벤조산을 수득하였으며, 이를 후속 단계에 추가 정제 없이 사용하였다. LCMS (m/z): 350.3 (MH+), 0.48분.
단계 2. 4-(3-아미노-6-((1R,3R,4R)-3-플루오로-4-히드록시시클로헥실)피라진-2-일)-N-((S)-1-(3-브로모-5-플루오로페닐)-2-히드록시에틸)-2-플루오로벤즈아미드
DMF (573 μL) 중 4-(3-아미노-6-((1R,3R,4R)-3-플루오로-4-히드록시시클로헥실)피라진-2-일)-2-플루오로벤조산 (20 mg, 0.057 mmol)의 용액에 (S)-2-아미노-2-(3-브로모-5-플루오로페닐)에탄올 HCl 염 (18.59 mg, 0.069 mmol), 아자-HOBt (11.69 mg, 0.086 mmol), EDC (21.95 mg, 0.115 mmol), 및 DIEA (30.0 μl, 0.172 mmol)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 15시간 동안 교반하였다. 물을 첨가하고, 반응 혼합물을 EtOAc로 3회 추출하였다. 유기 층을 Na2SO4 상에서 건조시키고, 여과하고, 진공 하에 농축시켰다. 조 생성물을 HPLC에 의해 정제하였다. 순수한 분획을 동결건조시켜 4-(3-아미노-6-((1R,3R,4R)-3-플루오로-4-히드록시시클로헥실)피라진-2-일)-N-((S)-1-(3-브로모-5-플루오로페닐)-2-히드록시에틸)-2-플루오로벤즈아미드 (16.1 mg, 0.023 mmol, 41%)를 TFA 염으로서 수득하였다. LCMS (m/z): 565.1/567.1 (MH+), 0.72분;
1H NMR (400 MHz, CD3OD) δ ppm 7.86 - 7.69 (m, 2H), 7.65 - 7.47 (m, 2H), 7.40 - 7.30 (m, 1H), 7.22 - 7.06 (m, 2H), 5.08 (t, J=5.7 Hz, 1H), 4.41 - 4.14 (m, 1H), 3.85 - 3.67 (m, 2H), 3.63 - 3.48 (m, 1H), 2.74 (t, J=11.5 Hz, 1H), 2.17 (td, J=3.1, 6.3 Hz, 1H), 2.04 - 1.89 (m, 1H), 1.84 - 1.66 (m, 2H), 1.65 - 1.30 (m, 2H).
절대 입체화학을 4-(3-아미노-6-((1R,3R,4R)-3-플루오로-4-히드록시시클로헥실)피라진-2-일)-N-((S)-1-(3-브로모-5-플루오로페닐)-2-히드록시에틸)-2-플루오로벤즈아미드의 ERK2에서의 X선 공-구조의 정보를 기준으로 하여 결정하였다.
실시예 184
4-(3-아미노-6-((1S,3S,4S)-3-플루오로-4-히드록시시클로헥실)피라진-2-일)-N-((S)-1-(3-브로모-5-플루오로페닐)-2-(메틸아미노)에틸)-2-플루오로벤즈아미드의 합성
반응식 86
Figure 112016034409922-pct00165
단계 1. 4-(3-아미노-6-((1S,3S,4S)-3-플루오로-4-히드록시시클로헥실)피라진-2-일)-N-((S)-1-(3-브로모-5-플루오로페닐)-2-(N-메틸-2-니트로페닐술폰아미도)에틸)-2-플루오로벤즈아미드
DMF (1.28 mL) 중 4-(3-아미노-6-((1S,3S,4S)-3-플루오로-4-히드록시시클로헥실)피라진-2-일)-2-플루오로벤조산 (156 mg, 0.403 mmol)의 용액에 (S)-N-(2-아미노-2-(3-브로모-5-플루오로페닐)에틸)-N-메틸-2-니트로벤젠술폰아미드 (180 mg, 0.384 mmol), HOAt (105 mg, 0.768 mmol), DIEA (402 μl, 2.8 mmol), 및 EDC.HCl (147 mg, 0.768 mmol)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 15시간 동안 실온에서 교반하였으며, LCMS는 생성물을 나타내었다. 혼합물을 EtOAc로 희석하고, 물 및 포화 Na2CO3으로 1회 세척하고, 유기 층을 건조 (황산마그네슘)시키고, 여과하고, 진공 하에 농축시켜 4-(3-아미노-6-((1S,3S,4S)-3-플루오로-4-히드록시시클로헥실)피라진-2-일)-N-((S)-1-(3-브로모-5-플루오로페닐)-2-(메틸아미노)에틸)-2-플루오로벤즈아미드를 수득하였다. 조 생성물을 이스코 칼럼 크로마토그래피 (헵탄 중 0-100% EtOAc)에 의해 정제하여 4-(3-아미노-6-((1S,3S,4S)-3-플루오로-4-히드록시시클로헥실)피라진-2-일)-N-((S)-1-(3-브로모-5-플루오로페닐)-2-(N-메틸-2-니트로페닐술폰아미도)에틸)-2-플루오로벤즈아미드 (99%)를 수득하였다.
단계 2. 4-(3-아미노-6-((1S,3S,4S)-3-플루오로-4-히드록시시클로헥실)피라진-2-일)-N-((S)-1-(3-브로모-5-플루오로페닐)-2-(메틸아미노)에틸)-2-플루오로벤즈아미드
DMF (3.8 mL) 중 4-(3-아미노-6-((1S,3S,4S)-3-플루오로-4-히드록시시클로헥실)피라진-2-일)-N-((S)-1-(3-브로모-5-플루오로페닐)-2-(N-메틸-2-니트로페닐술폰아미도)에틸)-2-플루오로벤즈아미드 (293 mg, 0.38 mmol)의 용액에 K2CO3 (371 mg, 2.69 mmol) 및 4-메르캅토벤조산 (207 mg, 1.34 mmol)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 마이크로웨이브 합성기에서 45℃에서 55분 동안 가열하였다. 반응 후, 물을 첨가하고, 혼합물을 EtOAc로 3회 추출하였다. 유기 층을 합하고, 물로 3회 세척하였다. 합한 유기 층을 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 진공 하에 농축시켰다. 잔류물을 플래쉬 크로마토그래피에 의해 EtOAc (물 중 20% MeOH 및 0.5% 암모니아 함유)/DCM으로 용리시키면서 정제하여 4-(3-아미노-6-((1S,3S,4S)-3-플루오로-4-히드록시시클로헥실)피라진-2-일)-N-((S)-1-(3-브로모-5-플루오로페닐)-2-(메틸아미노)에틸)-2-플루오로벤즈아미드 150 mg을 수득하였다. LCMS (m/z): 578, 580 (MH+), 0.64분.
1H NMR (400 MHz, CD3OD) δ ppm 7.80 (s, 1H), 7.76 - 7.68 (m, 1H), 7.59 (dd, J=1.6, 7.8 Hz, 1H), 7.53 (dd, J=1.2, 11.7 Hz, 1H), 7.37 (s, 1H), 7.18 (d, J=8.2 Hz, 1H), 7.11 (d, J=9.4 Hz, 1H), 5.27 - 5.10 (m, 1H), 4.42 - 4.13 (m, 1H), 3.65 - 3.49 (m, 1H), 2.97 - 2.88 (m, 1H), 2.87 - 2.79 (m, 1H), 2.74 (t, J=11.7 Hz, 1H), 2.35 (s, 3H), 2.22 - 2.11 (m, 1H), 2.04 - 1.92 (m, 1H), 1.85 - 1.68 (m, 2H), 1.55 (dq, J=3.1, 12.9 Hz, 1H), 1.46 - 1.33 (m, 1H).
대안적으로, 4-(3-아미노-6-((1S,3S,4S)-3-플루오로-4-히드록시시클로헥실)피라진-2-일)-N-((S)-1-(3-브로모-5-플루오로페닐)-2-(메틸아미노)에틸)-2-플루오로벤즈아미드는 하기와 같이 합성할 수 있다:
(1R,3S,4S)-에틸 4-((tert-부틸디메틸실릴)옥시)-3-플루오로시클로헥산카르복실레이트
Figure 112016034409922-pct00166
500 mL 플라스크에 (1R,3S,4S)-에틸 3-플루오로-4-히드록시시클로헥산-카르복실레이트 (17 g, 89.3 mmol, 97.9% ee), TBSCl (17.5 g, 116.1 mmol) 및 DCM (200 mL)을 첨가하였다. 이미다졸 (12.1 g, 178 mmol)을 생성된 투명한 용액에 첨가하고, 반응 혼합물을 16시간 동안 교반하였다. 물 (100 mL)을 첨가하고, 혼합물을 추가로 10분 동안 교반하였다. 상을 분리하고, 유기 층을 물 (100 mL)로 세척하고, 감압 (40±5℃, 50 ~ 250 mbar) 하에 농축시켰다. 실리카 상에서 플래쉬 크로마토그래피에 의해 헵탄 및 에틸 아세테이트의 혼합물 (100:1)로 용리시키면서 정제하여 (1R,3S,4S)-에틸 4-((tert-부틸디메틸실릴)옥시)-3-플루오로시클로헥산카르복실레이트를 무색 오일 (20.6 g, 수율 75.7%)로서 수득하였다.
1H NMR (400MHz, DMSO-d6): 4.38 ~ 4.52 (m, 1 H), 4.03 ~ 4.08 (dd, J = 1 2 Hz, J = 8 Hz, 2 H), 3.77 ~ 3.81(m, 1 H), 2.54 ~ 2.60 (m, 1 H), 1.93 ~ 2.06 (m, 1 H), 1.58 ~ 1.86 (m, 4 H), 1.46~1.50 (m, 1 H), 1.17 ~ 1.20 (t, J = 12 Hz, J = 6 Hz, 3 H), 0.85(s, 9 H), 0.03 ~ 0.04 (d, J = 4 Hz, 8 H), GC-MS를 통한 [M+H]+ = 305.1 (기기: 애질런트 테크놀로지스(Agilent Technologies), GC 6890N, MS 5975C. GC 조건: 칼럼: HP - 5 MS, 모세관: 30.0 m x 250 μm x 0.25 μm, 검출기 파라미터: 온도: 350℃, 유량 H2: 40 mL / 분, 공기 유량: 400 mL / 분, 보충 (He): 40 mL / 분. 주사기 파라미터: 온도: 200℃. 분할 비: 100:1. 운반 기체: He, 유량: 2.0 mL / 분, 모드: 일정한 유량. 오븐 파라미터: 0분, 50℃; 2.0분, 50℃; 5.33분, 100℃; 15.83분, 270℃. 주입 부피: 1 μL, 시린지 세척액 용매: 아세토니트릴. MS 조건: 볼트: 70 EV, 스캔 범위: m / z = 50 ~ 550)
2-((1S,3S,4S)-4-((tert-부틸디메틸실릴)옥시)-3-플루오로시클로헥실)-5-(2,5-디메틸-1H-피롤-1-일)피라진
Figure 112016034409922-pct00167
1 L 플라스크에 2-브로모-5-(2,5-디메틸-1H-피롤-1-일)피라진 (23 g, 67 mmol), (1R,3S,4S)-에틸 4-((tert-부틸디메틸실릴)옥시)-3-플루오로시클로헥산카르복실레이트 (28 g, 83 mmol), {[P(t-Bu)3]PdBr}2 (800 mg, 1 mmol)에 이어서 톨루엔 (250 mL)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 질소로 퍼징함으로써 3회 탈기시킨 다음, -35±5℃로 냉각시켰다. 반응 혼합물에 NaHMDS (47 mL, THF 중 2 M, 94 mmol)를 적가하였다. 온도를 1시간의 기간에 걸쳐 실온으로 상승시키고, 추가로 30분 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 8% 수성 염화암모늄 (200 mL)으로 켄칭하고, 상을 분리하고, 수성 층을 헵탄 (300 mL)으로 추출하였다. 합한 유기 층을 10% 염수 (400 mL)로 세척하고, 감압 (45±5℃, 50 ~ 100 mbar) 하에 농축시켜 (1RS,3S,4S)-에틸 4-((tert-부틸디메틸실릴)옥시)-1-(5-(2,5-디메틸-1H-피롤-1-일)피라진-2-일)-3-플루오로시클로헥산카르복실레이트 48 g을 1R 및 1S 부분입체이성질체의 혼합물로서 수득하였다. 이 물질을 후속 단계에 추가 정제 없이 사용하였다. HPLC 체류 시간 = 8.274분 HPLC 방법 d: 기기: 애질런트 테크놀로지스 1200 시리즈. 칼럼: 워터스 엑스브리지 C18, 150*3.0 mm, 3 um. 칼럼 온도: 35℃. 유량: 0.70 mL / 분. 검출: 210 nm/ DAD. 이동상 조성물: A: 물 중 0.1% H3PO4; B: 아세토니트릴. 구배: 0분: 90% A, 10% B; 5분: 100% B; 11분 100% B. LC-MS 방법: [M+H]+ = 476.2706,
1H NMR(400MHz, DMSO-d6): 8.47 (s, 1 H), 8.43 (s, 1 H), 5.85(s, 2 H), 4.39 ~ 4.52 (m, 1 H), 4.14 (dd, J = 1 2 Hz, J = 8 Hz, 2 H), 3.59 ~ 3.66 (m, 1 H), 2.28 ~ 2.94 (m, 1H), 2.06 (s, 6 H), 1.84 ~ 1.97 (m, 3 H), 1.46 ~ 1.52 (m, 3 H), 1.14 ~ 1.17 (t, J = 1 2 Hz, J = 8 Hz, 2H), 0.81 (s, 9 H), 0.01(d, J = 4 Hz, 6 H).
1 L 플라스크에 (1R,3S,4S)-에틸 4-((tert-부틸디메틸실릴)옥시)-1-(5-(2,5-디메틸-1H-피롤-1-일)피라진-2-일)-3-플루오로시클로헥산카르복실레이트 (48g, 67 mmol), 에탄올 (250 mL)에 이어서 11% 수성 NaOH 용액 (112 g, 300 mmol)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 30±5℃에서 16시간 동안 교반한 다음, 10% 수성 HCl (70 mL)을 사용하여 pH = 6~7로 켄칭하였다. 감압 하에 에탄올의 증류 (50±5℃, 50 ~ 100 mbar) 후, 생성된 혼합물의 pH를 10% HCl을 사용하여 4 내지 5로 조정하였다. 수용액을 IPAc (200 mL x2)로 2회 추출하였다. 합한 유기 층을 10% 염수 (200 mL)로 세척하고, 감압 (50±5℃, 50 ~ 100 mbar) 하에 농축시켜 (1RS,3S,4S)-4-((tert-부틸디메틸실릴)옥시)-1-(5-(2,5-디메틸-1H-피롤-1-일)피라진-2-일)-3-플루오로시클로헥산카르복실산 46 g을 수득하였으며, 이를 후속 단계에 추가 정제 없이 사용하였다. HPLC 체류 시간 = 7.390분 (기기: 애질런트 테크놀로지스 1200 시리즈. 칼럼: 워터스 엑스브리지 C18, 150*3.0 mm, 3 um. 칼럼 온도: 35℃. 유량: 0.70 mL / 분. 검출: 210 nm/ DAD. 이동상 조성물: A: 물 중 0.1% H3PO4; B: 아세토니트릴. 구배: 0분: 90% A, 10% B; 5분: 100% B; 11분 100% B), LC-MS: [M+H]+ = 448.2415.
500 mL 플라스크에 질소 하에 (1RS,3S,4S)-4-((tert-부틸디메틸실릴)옥시)-1-(5-(2,5-디메틸-1H-피롤-1-일)피라진-2-일)-3-플루오로시클로헥산카르복실산 (46 g), 톨루엔 (250 mL) 및 HOAc (0.8 g, 13.3mmol)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 1시간 동안 환류한 다음, 실온으로 냉각시킨 후, 6% 수성 NaHCO3 (200 mL)을 첨가하였다. 상을 분리하고, 수성 층을 헵탄 (250 mL)으로 추출하였다. 합한 유기 층을 10% 염수 (200 mL)로 세척하고, 감압 (50±5℃, 50 ~ 100 mbar) 하에 농축시켜 오일을 수득하였다. 잔류물에의 80 mL 메탄올의 첨가 후, 혼합물을 55±5℃로 가열하고, 1시간 동안 교반하였다. 온도를 25±5℃로 2시간 기간에 걸쳐 농축시키고, 추가로 2-3시간 동안 교반하였다. 생성된 현탁액을 여과하고, 습윤 케이크를 감압 (50±5℃, 50 ~ 100 mbar) 하에 3시간 동안 건조시켜 2-((1S,3S,4S)-4-((tert-부틸디메틸실릴)옥시)-3-플루오로시클로헥실)-5-(2,5-디메틸-1H-피롤-1-일)피라진 8.6 g을 결정질 고체 (dr > 99:1)로서 수득하였다. 모액을 감압 (50±5℃, 50 ~ 100 mbar) 하에 농축시켜 34.5 g (71 mmol) 암색 오일을 수득하였다. 이 잔류물에 tBuOH (200 mL)에 이어서 tBuOK (8.0 g, 71 mmol)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 90±5℃로 가열하고, 3시간 동안 교반하였다. 온도를 실온으로 냉각시킨 후, 10% 수성 NaHCO3 (150 mL)을 첨가하고, 이어서 헵탄 (200 mL)을 첨가하고, 혼합물을 추가로 10분 동안 교반하였다. 상을 분리하고, 수성 층을 헵탄 (200 mL)으로 세척하였다. 합한 유기 층을 10% 염수 (150 mL)로 세척하고, 감압 (50±5℃, 50 ~ 100 mbar) 하에 농축시켜 오일 잔류물을 수득하였다. 이 잔류물에 메탄올 (60 mL)을 첨가하고, 혼합물을 55±5℃로 가열하였다. 1시간 동안 교반한 후, 온도를 25±5℃로 2시간 기간에 걸쳐 냉각시키고, 이어서 추가로 2시간 동안 교반하였다. 현탁액을 여과하고, 생성된 습윤 케이크를 감압 (50±5℃, 50 ~ 100 mbar) 하에 3시간 동안 건조시켜 2-((1S,3S,4S)-4-((tert-부틸디메틸실릴)옥시)-3-플루오로시클로헥실)-5-(2,5-디메틸-1H-피롤-1-일)피라진의 제2 배치를 결정질 고체 (5.6 g, dr = 98:2)로서 수득하였다. 2-브로모-5-(2,5-디메틸-1H-피롤-1-일)피라진으로부터 출발하는 4 단계의 전체 수율은 51.8%이다. mp = 100.6℃ ~ 102.9℃. LC/MS: [M+H]+ = 404.2459,
1H NMR(400MHz, DMSO-d6): 8.53 (s, 1 H), 8.50 (s, 1 H), 5.75 (s, 2 H), 4.25 ~ 4.43 (m, 1 H), 3.60 ~ 3.69 (m, 1 H), 3.25 (s, 6 H), 2.93 ~ 3.00 (m, 1 H), 2.19 ~ 2.27 (m, 1 H), 1.98 (s, 6 H), 1.72 ~ 1.90 (m, 3 H), 1.39 ~ 1.61 (m, 2 H), 0.80 (s, 9H), 0.01 (d, J = 4 Hz, 6 H). HPLC (기기: 애질런트 테크놀로지스 1200 시리즈. 칼럼: 워터스 엑스브리지 C18, 150*3.0 mm, 3 um. 칼럼 온도: 35℃. 유량: 0.70 mL / 분. 검출: 210 nm/ DAD. 이동상 조성물: A: 물 중 0.1% H3PO4; B: 아세토니트릴. 구배: 0분: 90% A, 10% B; 5분: 100% B; 11분 100% B) 체류 시간: 2-((1S,3S,4S)-4-((tert-부틸디메틸실릴)옥시)-3-플루오로시클로헥실)-5-(2,5-디메틸-1H-피롤-1-일)피라진에 대해 8.084분, 2-((1R,3S,4S)-4-((tert-부틸디메틸실릴)옥시)-3-플루오로시클로헥실)-5-(2,5-디메틸-1H-피롤-1-일)피라진에 대해 8.324분.
2-브로모-5-(2,5-디메틸-1H-피롤-1-일)피라진
Figure 112016034409922-pct00168
250 mL 플라스크에 톨루엔 (60 mL) 중 5-브로모피라진-2-아민 (18 g, 10.35 mmol), 헥산-2,5-디온 (14.5g, 12.41 mmol) 및 PPTS (0.9 g, 0.36 mmol)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 딘-스타크 트랩 중 환류 하에 16시간 동안 가열하였다. 반응 혼합물을 실온으로 냉각시킨 다음, 감압 (55±5℃, 50 ~ 100 mbar) 하에 농축시켜 2-브로모-5-(2,5-디메틸-1H-피롤-1-일)피라진을 오일 (28 g, ~10% 톨루엔 함유, 검정 수율: 95%)로서 수득하였다. 이 물질을 추가 정제 없이 사용하였다. LC/MS: [M+H]+ = 252.0139,
1H NMR(400MHz, DMSO-d6): 8.87 (s, 1H), 8.63 (s, 1 H), 5.86 (s, 2 H), 2.10 (s, 6 H).
HPLC 체류 시간 = 6.21분, 기기: 애질런트 테크놀로지스 1200 시리즈. 칼럼: 워터스 엑스브리지 C18, 150*3.0 mm, 3 um. 칼럼 온도: 35℃. 유량: 0.70 mL / 분. 검출: 210 nm/ DAD. 이동상 조성물: A: 물 중 0.1% H3PO4; B: 아세토니트릴. 구배: 0분: 90% A, 10% B; 5분: 100% B; 11분 100% B.
5-((1S,3S,4S)-4-((tert-부틸디메틸실릴)옥시)-3-플루오로시클로헥실)피라진-2-아민
Figure 112016034409922-pct00169
에탄올 (7.5 kg) 중 2-((1S,3S,4S)-4-((tert-부틸디메틸실릴)옥시)-3-플루오로시클로헥실)-5-(2,5-디메틸-1H-피롤-1-일)피라진 (1250 g, 3097 mmol)의 교반 현탁액에 히드록실아민 히드로클로라이드 (860.9 g, 12388.2 mmol)에 이어서 트리에틸아민 (642.5 g, 6349.0 mmol)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 환류 (77-78℃) 하에 42시간 동안 가열한 다음, 약 40℃로 냉각시켰다. 에탄올 6 kg을 진공 (<100 mbar) 하에 40℃에서 증류한 후, 혼합물을 실온으로 냉각시키고, MTBE (7.0 kg) 및 물 (8.0 kg)로 희석하였다. 10분 동안 교반한 후, 유기 층을 분리하고, 수성 층을 MTBE (6.0 Kg)로 추출하였다. 합한 유기 층을 물 2x12 kg 및 10% 염수 8 kg으로 연속적으로 세척하였다. MTBE 층을 진공 (<100 mbar) 하에 농축시켜 1.2 kg 황색 고체를 조 생성물로서 수득하였다. 조 생성물을 2 kg DCM 중에 용해시키고, 실리카 칼럼 크로마토그래피에 의해 EtOAc 및 헵탄 (1/6, v/v)으로 용리시키면서 추가로 정제하여 2-((1S,3S,4S)-4-((tert-부틸디메틸실릴)옥시)-3-플루오로시클로헥실)-5-(2,5-디메틸-1H-피롤-1-일)피라진 (310 g)을 회수한 다음, EtOAc 및 헵탄 (1/3, v/v)으로 용리시키면서 정제하여 5-((1S,3S,4S)-4-((tert-부틸디메틸실릴)옥시)-3-플루오로시클로헥실)피라진-2-아민 (650 g, 64.5% 수율)을 담황색 고체, mp 113-116℃로서 회수하였다. ESI-MS (m/z): 326.1940 ([M+H]+, 100). HPLC (방법 A), 체류 시간 12.26분.
1H NMR (400 MHz, CDCl3): 7.93 (s, 1H), 7.86 (s, 1H), 4.50 (br. s, 2H), 4.41-4.46, 4.27-4.31 (m, 1H), 3.65-3.74 (m, 1H), 2.68-2.74 (m, 1H), 2.24-2.30 (m, 1H), 1.97-2.02 (m, 1H), 1.74-1.87 (m, 2H), 1.44-1.63 (m, 2H), 0.91 (s, 9H), 0.10 (d, J = 8Hz, 6H).
tert-부틸 4-(3-아미노-6-((1S, 3S, 4S)-4-((tert-부틸디메틸실릴)옥시)-3-플루오로시클로헥실)피라진-2-일)-2-플루오로벤조에이트
Figure 112016034409922-pct00170
DMSO (5 L) 및 물 (400 mL) 중 5-((1S,3S,4S)-4-((tert-부틸디메틸실릴)옥시)-3-플루오로시클로헥실)피라진-2-아민 (620.0 g, 1904.8 mmol)의 용액을 ~4℃로 냉각시켰다. NBS (389.8 g, 2190.5 mmol)를 1시간 내에 10 부분으로 첨가하고, 반응 온도를 5℃ 하에 30분 동안 연속 교반하여 제어하였다. 0.3 M 수성 Na2CO3 (8.5 kg)의 첨가 후, 반응 혼합물을 35℃로 증가시켰다. MTBE (4.5 kg)를 첨가하고, 혼합물을 추가로 10분 동안 교반하였다. 상 분리 후, 수성 층을 MTBE (4 kg)로 추출하였다. 합한 유기 층을 0.3 M 수성 Na2CO3 (8.5 kg) 및 물 (8 kg)로 연속적으로 세척하고, 진공 하에 30-40℃에서 농축시켜 조 생성물 3-브로모-5-((1S,3S,4S)-4-((tert-부틸디메틸실릴)옥시)-3-플루오로시클로헥실)피라진-2-아민을 발포체 (770 g)로서 수득하였다. 이 조 생성물을 후속 단계에 추가 정제 없이 사용하였다. ESI-MS (m/z): 404.1105, 406.1093 ([M+H]+, 100). HPLC (방법 A), 체류 시간 = 14.38분.
1H NMR (400 MHz, CDCl3): 7.81 (s, 1H), 4.99 (br. s, 2H), 4.37-4.42, 4.25-4.30 (m, 1H), 3.66-3.72 (m, 1H), 2.67-2.73 (m, 1H), 2.26-2.29 (m, 1H), 1.97-2.02 (m, 1H), 1.74-1.87 (m, 2H), 1.44-1.63 (m, 2H), 0.91 (s, 9H), 0.10 (d, J = 8 Hz, 6H).
DME (3.0 kg) 중 3-브로모-5-((1S, 3S, 4S)-4-((tert-부틸디메틸실릴)옥시)-3-플루오로시클로헥실)피라진-2-아민 (760.0 g, 1879.4 mmol) 및 tert-부틸 2-플루오로-4-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-디옥사보롤란-2-일)벤조에이트 (605.5 g, 1879.4 mmol)의 용액에 2.0 M 수성 Na2CO3 (1880 mL, 3760 mmol) 및 Pd(dppf)Cl2·DCM (38.4 g, 47.0 mmol)을 첨가하였다. N2로 3회 탈기시킨 후, 반응 혼합물을 환류 하에 가열 (79-80℃)하고, 이 온도에서 3시간 동안 교반하였다. 반응 온도를 실온으로 냉각시키고, MTBE (2.5 kg)를 첨가하고, 이어서 물 (4.0 kg)을 첨가하였다. 혼합물을 10분 동안 교반한 후, 상 분리하고, 수성 층을 MTBE (1.8 kg)로 추출하였다. 합한 유기 층을 물 (2x4 kg)로 세척하고, 진공 하에 30-40℃에서 농축시켜 조 생성물 tert-부틸 4-(3-아미노-6-((1S, 3S, 4S)-4-((tert-부틸디메틸실릴)옥시)-3-플루오로시클로헥실)피라진-2-일)-2-플루오로벤조에이트 (약 1 kg)를 수득하였다. 이 조 생성물 및 EtOH의 혼합물 (95%, 3.2 kg)을 환류 (78-80℃) 하에 30분 동안 가열하여 용액을 수득하였다. 온도를 40℃로 100분 내에 냉각시키고, 이어서 물 (800 g)을 30분 내에 첨가하였다. 온도를 ~5℃로 100분 내에 냉각시키고, 이 온도에서의 교반을 추가로 60분 동안 계속하였다. 고체 침전을 여과하고, 습윤 케이크를 EtOH/물 (1.2 L, 5/1, vol/vol)로 세척하였다. 진공 하에 50℃에서 5시간 동안 건조시킨 후, tert-부틸 4-(3-아미노-6-((1S, 3S, 4S)-4-((tert-부틸디메틸실릴)옥시)-3-플루오로시클로헥실)피라진-2-일)-2-플루오로벤조에이트를 갈색 분말 (755g, 2 단계에 걸쳐 76.4% 수율, 검정 순도는 98.8%임)로서 수득하였다. mp 169-172℃. ESI-MS (m/z): 520.2739 ([M+H]+, 100). HPLC (방법 A) 체류 시간 15.76분.
1H NMR (400 MHz, CDCl3): 7.98 (t, J = 8 Hz, 1H), 7.91 (s, 1H), 7.61 (d, J = 8 Hz, 1H), 7.55 (d, J = 8 Hz, 1H), 4.68 (br. s, 2H), 4.42-4.48, 4.30-4.36 (m, 1H), 3.67-3.76 (m, 1H), 2.75-2.83 (m, 1H), 2.28-2.36 (m, 1H), 1.98-2.05 (m, 1H), 1.83-1.92 (m, 2H), 1.46-1.68 (m, 2H), 1.62 (s, 9H), 0.92 (s, 9H), 0.11 (d, J = 8 Hz, 6H).
4-(3-아미노-6-((1S,3S,4S)-3-플루오로-4-히드록시시클로헥실)피라진-2-일)-2-플루오로벤조산
Figure 112016034409922-pct00171
EtOH (3.6 kg) 중 tert-부틸 4-(3-아미노-6-((1S, 3S, 4S)-4-((tert-부틸디메틸실릴)옥시)-3-플루오로시클로헥실)피라진-2-일)-2-플루오로벤조에이트 (685.0 g, 1318.0 mmol)의 현탁액에 수성 HCl (36%, 400.5 g, 3954.2 mmol)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 30℃로 가열하고, 4시간 동안 교반하였다. 반응 온도를 5℃로 낮추고, 물 (1.6 kg) 중 NaOH (342.7g, 8567.5 mmol)의 용액을 첨가하였다. 반응 혼합물을 30℃로 가열하고, 이 온도에서 18시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물의 pH를 4 N 수성 HCl을 사용하여 5로 조정하여 고체 침전을 형성하였다. 진공 하에 40-50℃에서 EtOH의 증류 후, 물 (2.5 kg)을 잔류물에 첨가하고, 온도를 5℃로 1시간 내에 냉각시켰다. 현탁액을 여과하고, 고체를 수집하고, 진공 (<100 mbar) 하에 50-60℃에서 24시간 동안 건조시켜 4-(3-아미노-6-((1S,3S,4S)-3-플루오로-4-히드록시시클로헥실)피라진-2-일)-2-플루오로벤조산을 갈색 분말 (460 g, 230 nm에서의 HPLC 순도는 98.2%, 정량적 수율이었음). Mp 226-228℃. ESI-MS (m/z): 350.1282 ([M+H]+, 100). HPLC (방법 A), 체류 시간 5.93분.
1H NMR (400 MHz, DMSO-D6): 13.32 (br. s, 1H), 8.00 (t, J = 8 Hz, 1H), 7.99 (s, 1H), 7.70 (d, J = 8 Hz, 1H), 7.65 (d, J = 8 Hz, 1H), 6.24 (br. s, 2H), 5.16 (br. s, 1H), 4.44-4.49, 4.30-4.35 (m, 1H), 3.50-3.60 (m, 1H), 2.79-2.84 (m, 1H), 2.20-2.25 (m, 1H), 1.92-1.99 (m, 1H), 1.72-1.83 (m, 2H), 1.50-1.60 (m, 1H), 1.36-1.46 (m, 1H).
4-(3-아미노-6-((1S,3S,4S)-3-플루오로-4-히드록시시클로헥실)피라진-2-일)-N-((S)-1-(3-브로모-5-플루오로페닐)-2-(메틸아미노)에틸)-2-플루오로벤즈아미드
Figure 112016034409922-pct00172
DMF (2.5 kg) 중 4-(3-아미노-6-((1S,3S,4S)-3-플루오로-4-히드록시시클로헥실)피라진-2-일)-2-플루오로벤조산 (300 g, 95% 검정, 815.8 mmol) 및 (S)-N-(2-아미노-2-(3-브로모-5-플루오로페닐)에틸)-N-메틸-2-니트로벤젠술폰아미드 히드로클로라이드 (397.7 g, 848.5 mmol)의 용액에 DIPEA (421.8 g, 3263.4 mmol)에 이어서 EDCI (312.8 g, 1631.7 mmol) 및 HOAt (222.1g, 1631.7 mmol)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 25℃에서 18시간 동안 교반한 후, 반응 온도를 10℃로 낮춘 후, IPAC (3.5 kg) 및 물 (4.0 kg)을 첨가하였다. 혼합물을 10분 동안 교반한 다음, 층을 분리하였다. 수성 층을 IPAC (2.5 kg)로 추출하였다. 합한 유기 층을 10% 수성 Na2CO3 (4.5 kg) 및 물 (2x4 kg)로 연속적으로 세척한 다음, 진공 (<100 mbar) 하에 40-45℃에서 농축시켜 4-(3-아미노-6-((1S,3S,4S)-3-플루오로-4-히드록시시클로헥실)피라진-2-일)-N-((S)-1-(3-브로모-5-플루오로페닐)-2-(N-메틸-2-니트로페닐술폰아미도)에틸)-2-플루오로벤즈아미드를 발포체 (670 g, 검정 순도는 93%임)로서 수득하였으며, 이를 후속 단계에 추가 정제 없이 사용하였다. ESI-MS (m/z): 763.1216, 765.1161 ([M+H]+, 100). Mp=115-117℃. HPLC (방법 A), 체류 시간 = 10.57분.
1H NMR (400 MHz, CDCl3): 8.11 (t, J = 8 Hz, 1H), 7.99 (m, 1H), 7.91 (s, 1H), 7.59-7.72 (m, 5H), 7.35 (s, 1H), 7.19 (d, J = 8 Hz, 1H), 7.09 (d, J = 8 Hz, 1H), 5.46 (br. s,1H), 4.77 (br. s, 2H), 4.48-4.55, 4.35-4.42 (m, 1H), 3.93 (q, J1 = 12 Hz, J1 = 16 Hz, 1H), 3.73-3.82 (m, 1H), 3.33 (q, J1 = 4 Hz, J1 = 12 Hz, 1H), 3.00 (s, 3H), 2.78-2.85 (m, 1H), 2.31-2.37 (m, 1H), 2.12-2.20 (m, 1H), 1.84-1.96 (m, 2H), 1.60-1.71 (m, 1H), 1.47-1.56 (m, 1H).
DMF (2.0 kg) 중 4-(3-아미노-6-((1S,3S,4S)-3-플루오로-4-히드록시시클로헥실)-피라진-2-일)-N-((S)-1-(3-브로모-5-플루오로페닐)-2-(N-메틸-2-니트로페닐-술폰아미도)에틸)-2-플루오로벤즈아미드 (이전 단계로부터 500 g 조 생성물)의 현탁액에 4-메르캅토벤조산 (161.5 g, 1047.7 mmol)을 첨가하였다. 반응 혼합물은 5분 후 용액이 되었으며, 이어서 10℃로 냉각시켰다. LiOH·H2O (137.3 g, 3274.0 mmol)를 한번에 첨가한 후, 혼합물을 25℃에서 3시간 동안 교반한 후, 온도를 10℃로 냉각시켰다. 반응 혼합물을 물 (3.0 kg)로 희석하고, IPAC (3*2.5 kg)로 추출하였다. IPAC 층을 먼저 15% 수성 Na2CO3 (2*3.0 kg)에 이어서 물 (2*3.0 kg)로 세척한 다음, 진공 (<100 mbar) 하에 40-45℃에서 농축시켰다. 생성된 잔류물에 MeCN (1.8 kg)을 첨가하여 투명한 용액을 수득하였으며, 이를 50℃로 가열하고, 30분 동안 교반하였다. 혼합물을 2시간 내에 10℃로 추가로 냉각시키고, 이 온도에서 추가로 1시간 동안 교반하였다. 생성된 현탁액을 여과한 후, 고체 케이크를 사전에 냉각된 MeCN (400 g, 5℃)으로 세척하였다. 습윤 케이크를 진공 (<100 mbar) 하에 80℃에서 18시간 동안 건조시켜 4-(3-아미노-6-((1S,3S,4S)-3-플루오로-4-히드록시시클로헥실)피라진-2-일)-N-((S)-1-(3-브로모-5-플루오로페닐)-2-(메틸아미노)에틸)-2-플루오로벤즈아미드를 결정질 고체 (245 g, 2 단계에 대한 전체 수율은 66%임, HPLC 순도 = 98.3%, 키랄 순도 = 99.0%)를 수득하였다. Mp 115-117℃. ESI-MS (m/z): 578.1381, 580.1381 ([M+H]+, 100). HPLC (방법 A), 체류 시간 = 7.24분.
1H NMR (400 MHz, DMSO-D6): 8.82 (d, J = 8 Hz, 1H), 8.0 (s, 1H), 8.82 (t, J = 8 Hz, 1H), 7.70 (d, J = 8 Hz, 1H), 7.67 (d, J = 8 Hz, 1H), 7.53 (s, 1H), 7.48 (d, J = 8 Hz, 1H), 7.34 (d, J = 8 Hz, 1H), 6.21 (br. s, 2H), 5.18 (m, 2H), 4.46-4.52, 4.32-4.37 (m, 1H), 3.52-3.60 (m, 1H), 2.80-2.94 (m, 3H), 2.36 (s, 3H), 2.23-2.25 (m, 1H), 1.95-1.98 (m, 1H), 1.76-1.86 (m, 3H), 1.51-1.62 (m, 1H), 1.39-1.48 (m, 1H).
4-(3-아미노-6-((1S,3S,4S)-3-플루오로-4-히드록시시클로헥실)피라진-2-일)-N-((S)-1-(3-브로모-5-플루오로페닐)-2-(메틸아미노)에틸)-2-플루오로벤즈아미드의 유리 염기 형태는 4-(3-아미노-6-((1S,3S,4S)-3-플루오로-4-히드록시시클로헥실)피라진-2-일)-N-((S)-1-(3-브로모-5-플루오로페닐)-2-(메틸아미노)에틸)-2-플루오로벤즈아미드 (200mg)를 니트로메탄 4ml 중에 실온에서 현탁시킴으로써 제조하였다. 현탁액을 용액이 투명해질 때까지 55℃로 가열하였다. 8회의 가열-냉각 사이클을 55℃ 내지 5℃의 온도 범위에서 수행하였다. 고체를 여과에 의해 생성하고, 진공 하에 40℃에서 밤새 건조시켰다. 유리 염기 형태의 X선 분말 회절 패턴을 도 1에서 결정하였다. 4-(3-아미노-6-((1S,3S,4S)-3-플루오로-4-히드록시시클로헥실)피라진-2-일)-N-((S)-1-(3-브로모-5-플루오로페닐)-2-(메틸아미노)에틸)-2-플루오로벤즈아미드의 유리 염기의 DSC/TGA 온도그래프는 도 2에 제공되어 있다.
4-(3-아미노-6-((1S,3S,4S)-3-플루오로-4-히드록시시클로헥실)피라진-2-일)-N-((S)-1-(3-브로모-5-플루오로페닐)-2-(메틸아미노)에틸)-2-플루오로벤즈아미드의 HCl 염 형태는 무정형 4-(3-아미노-6-((1S,3S,4S)-3-플루오로-4-히드록시시클로헥실)피라진-2-일)-N-((S)-1-(3-브로모-5-플루오로페닐)-2-(메틸아미노)에틸)-2-플루오로벤즈아미드 (120mg)를 0.5N HCl 에탄올 용액 (414μL) 중에 실온에서 교반하면서 용해시킴으로써 제조하였다. 침전은 5분의 교반 후 관찰된다. 4-(3-아미노-6-((1S,3S,4S)-3-플루오로-4-히드록시시클로헥실)피라진-2-일)-N-((S)-1-(3-브로모-5-플루오로페닐)-2-(메틸아미노)에틸)-2-플루오로벤즈아미드의 고도의 결정질 HCl 염 형태의 DSC/TGA 온도그래프는 도 4에 제공되어 있다. 유리 염기 형태의 X선 분말 회전 패턴을 도 3에서 결정하였다. 도 3의 XRPD에서의 가장 중요한 피크가 표에 제시되어 있다:
Figure 112016034409922-pct00173
Figure 112016034409922-pct00174
실시예 185 및 186
4-(3-아미노-6-((1R,3R,4S)-3-플루오로-4-히드록시시클로헥실)피라진-2-일)-N-((S)-1-(3-브로모-5-플루오로페닐)-2-히드록시에틸)-2-플루오로벤즈아미드 및 4-(3-아미노-6-((1S,3S,4R)-3-플루오로-4-히드록시시클로헥실)피라진-2-일)-N-((S)-1-(3-브로모-5-플루오로페닐)-2-히드록시에틸)-2-플루오로벤즈아미드의 합성
반응식 87
Figure 112016034409922-pct00175
단계 1. tert-부틸 4-(3-아미노-6-((1S,3S,4S)-3-플루오로-4-히드록시시클로헥실)피라진-2-일)-2-플루오로벤조에이트
tert-부틸 4-(3-아미노-6-((1R,3R,4S)-3-플루오로-4-히드록시시클로헥실)피라진-2-일)-2-플루오로벤조에이트 (154 mg, 0.38 mmol)를 키랄 분리 (키랄팩 5mic AD 칼럼, 4.6x100 (mm), CO2/IPA+0.1% DEA=75/25, SFC=5ml/분)로 처리하여 극성 거울상이성질체, tert-부틸 4-(3-아미노-6-((1R,3R,4S)-3-플루오로-4-히드록시시클로헥실)피라진-2-일)-2-플루오로벤조에이트 (Rt = 1.86분, 63 mg, 0.155 mmol, 41%) 및 덜 극성의 거울상이성질체, tert-부틸 4-(3-아미노-6-((1S,3S,4R)-3-플루오로-4-히드록시시클로헥실)피라진-2-일)-2-플루오로벤조에이트 (Rt = 2.91, 70 mg, 0.173 mmol, 46%)를 수득하였다. 절대 입체화학을 임의적으로 지정하였다.
단계 2 및 3. 4-(3-아미노-6-((1R,3R,4S)-3-플루오로-4-히드록시시클로헥실)피라진-2-일)-2-플루오로벤조산 및 4-(3-아미노-6-((1S,3S,4S)-3-플루오로-4-히드록시시클로헥실)피라진-2-일)-2-플루오로벤조산
DCM (2 mL) 중 각각의 에스테르 (1 mmol)의 용액에 디옥산 (30 mL) 중 4 M HCl을 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 2일 동안 교반하였다. 휘발성 물질을 진공 하에 증발시킨 후, 반응 혼합물을 Et2O로 연화처리하고, 여과하여 4-(3-아미노-6-((1R,3R,4S)-3-플루오로-4-히드록시시클로헥실)피라진-2-일)-2-플루오로벤조산 (에스테르 63 mg으로부터 60 mg) 및 4-(3-아미노-6-((1S,3S,4R)-3-플루오로-4-히드록시시클로헥실)피라진-2-일,)-2-플루오로벤조산 (에스테르 70 mg으로부터 59 mg)을 HCl 염으로서 각각 수득하였으며, 이를 후속 단계에 어떠한 추가 정제도 없이 사용하였다. LCMS (m/z): 350.2 (MH+), 0.5분 (각각의 산에 대해).
단계 4 및 5. 4-(3-아미노-6-((1R,3R,4S)-3-플루오로-4-히드록시시클로헥실)피라진-2-일)-N-((S)-1-(3-브로모-5-플루오로페닐)-2-히드록시에틸)-2-플루오로벤즈아미드 및 4-(3-아미노-6-((1S,3S,4R)-3-플루오로-4-히드록시시클로헥실)피라진-2-일)-N-((S)-1-(3-브로모-5-플루오로페닐)-2-히드록시에틸)-2-플루오로벤즈아미드
DMF (573 μL) 중 각각의 산 (20 mg, 0.057 mmol)의 용액에 (S)-2-아미노-2-(3-브로모-5-플루오로페닐)에탄올 HCl 염 (18.59 mg, 0.069 mmol), 아자-HOBt (11.69 mg, 0.086 mmol), EDC (21.95 mg, 0.115 mmol), 및 DIEA (30.0 μl, 0.172 mmol)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 15시간 동안 교반하였다. 물을 첨가하고, 반응 혼합물을 EtOAc로 3회 추출하였다. 유기 층을 Na2SO4 상에서 건조시키고, 여과하고, 진공 하에 농축시켰다. 조 생성물을 HPLC에 의해 정제하였다. 순수한 분획을 동결건조시켜 목적 생성물 (11 mg, 0.016 mmol, 28%)을 TFA 염으로서 각각 수득하였다. 4-(3-아미노-6-((1R,3R,4S)-3-플루오로-4-히드록시시클로헥실)피라진-2-일)-N-((S)-1-(3-브로모-5-플루오로페닐)-2-히드록시에틸)-2-플루오로벤즈아미드에 대해, LCMS (m/z): 565.1/567 (MH+), 0.74분;
1H NMR (400 MHz, CD3OD) δ ppm 7.95 - 7.79 (m, 1H), 7.76 - 7.59 (m, 1H), 7.46 (s, 1H), 7.33 - 7.14 (m, 2H), 5.24 - 5.10 (m, 1H), 4.75 - 4.49 (m, 1H), 4.16 (br. s., 2H), 3.96 - 3.77 (m, 4H), 2.80 (t, J=12.5 Hz, 2H), 2.25 (dq, J=7.6, 11.9 Hz, 2H), 2.08 - 1.78 (m, 7H), 1.76 - 1.55 (m, 4H).
4-(3-아미노-6-((1S,3S,4R)-3-플루오로-4-히드록시시클로헥실)피라진-2-일)-N-((S)-1-(3-브로모-5-플루오로페닐)-2-히드록시에틸)-2-플루오로벤즈아미드에 대해, LCMS (m/z): 565.1/567.1 (MH+), 0.74분;
1H NMR (400 MHz, CD3OD) δ ppm 7.84 - 7.70 (m, 2H), 7.66 - 7.49 (m, 2H), 7.37 (s, 1H), 7.24 - 7.05 (m, 2H), 5.09 (d, J=5.5 Hz, 1H), 4.66 - 4.41 (m, 1H), 4.07 (br. s., 1H), 3.88 - 3.65 (m, 2H), 2.71 (t, J=12.9 Hz, 1H), 2.16 (dq, J=7.4, 12.0 Hz, 1H), 1.99 - 1.70 (m, 3H), 1.66 - 1.47 (m, 2H).
절대 입체화학을 아직 결정하지 않았다.
실시예 187 및 188
4-(3-아미노-6-((1R,3S,4R)-3-플루오로-4-히드록시시클로헥실)피라진-2-일)-N-((S)-1-(3-브로모-5-플루오로페닐)-2-히드록시에틸)-2-플루오로벤즈아미드 및 4-(3-아미노-6-((1S,3R,4S)-3-플루오로-4-히드록시시클로헥실)피라진-2-일)-N-((S)-1-(3-브로모-5-플루오로페닐)-2-히드록시에틸)-2-플루오로벤즈아미드의 합성
반응식 88
Figure 112016034409922-pct00176
단계 1. (+/-)-tert-부틸 4-(3-아미노-6-((1R,3S,4R)-3-플루오로-4-히드록시시클로헥실)피라진-2-일)-2-플루오로벤조에이트
MeOH (3.017 mL) 중 (+/-)-tert-부틸 4-(3-아미노-6-((1R,3S)-3-플루오로-4-옥소시클로헥실)피라진-2-일)-2-플루오로벤조에이트 (208 mg, 0.516 mmol)의 용액에 0℃에서 NaBH4 (29.3 mg, 0.773 mmol)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 2시간 동안 교반하였다. LCMS는 2종의 부분입체이성질체의 ~4:1 비를 나타내었다. NaHCO3 용액으로 켄칭한 후, 반응 혼합물을 EtOAc로 추출하였다. 유기 층을 물 및 염수로 세척하고, 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 진공 하에 농축시켰다. 주요 부분입체이성질체를 중성 정제용 HPLC로 분리하였다. 동결건조 후, (+/-)-tert-부틸 4-(3-아미노-6-((1R,3S,4R)-3-플루오로-4-히드록시시클로헥실)피라진-2-일)-2-플루오로벤조에이트를 35.8% 수율로 수득하였다. (74.9 mg). LCMS (m/z): 406.3 (MH+), 0.80분. (+/-)-tert-부틸 4-(3-아미노-6-((1R,3S,4R)-3-플루오로-4-히드록시시클로헥실)피라진-2-일)-2-플루오로벤조에이트의 상대 입체화학을 NMR에 의해 확인하였다.
단계 2. tert-부틸 4-(3-아미노-6-((1R,3S,4R)-3-플루오로-4-히드록시시클로헥실)피라진-2-일)-2-플루오로벤조에이트 및 tert-부틸 4-(3-아미노-6-((1S,3R,4S)-3-플루오로-4-히드록시시클로헥실)피라진-2-일)-2-플루오로벤조에이트
(+/-)-tert-부틸 4-(3-아미노-6-((1R,3S,4R)-3-플루오로-4-히드록시시클로헥실)피라진-2-일)-2-플루오로벤조에이트 (74.9 mg, 0.185 mmol)를 키랄 SFC (키랄팩 5mic AD 칼럼, 4.6x100 (mm), CO2/EtOH+0.1%, DEA=80/20, SFC=5mL/분)로 처리하여 극성 거울상이성질체, tert-부틸 4-(3-아미노-6-((1R,3S,4R)-3-플루오로-4-히드록시시클로헥실)피라진-2-일)-2-플루오로벤조에이트 (Rt = 1.95분, 33 mg, 44%) 및 덜 극성의 거울상이성질체, tert-부틸 4-(3-아미노-6-((1S,3R,4S)-3-플루오로-4-히드록시시클로헥실)피라진-2-일)-2-플루오로벤조에이트 (Rt = 3.17, 35 mg, 46%)를 수득하였다. 절대 입체화학을 임의적으로 지정하였다.
단계 3 및 4. 4-(3-아미노-6-((1R,3S,4R)-3-플루오로-4-히드록시시클로헥실)피라진-2-일)-2-플루오로벤조산 및 4-(3-아미노-6-((1S,3R,4S)-3-플루오로-4-히드록시시클로헥실)피라진-2-일)-2-플루오로벤조산
각각의 에스테르 (1 mmol)의 용액에 디옥산 중 4 M HCl (111 mL)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 2일 동안 교반하였다. 휘발성 물질을 진공 하에 증발시킨 후, 반응 혼합물을 Et2O로 연화처리하고, 여과하여 4-(3-아미노-6-((1R,3S,4R)-3-플루오로-4-히드록시시클로헥실)피라진-2-일)-2-플루오로벤조산 (에스테르 33 mg으로부터 31 mg), LCMS (m/z): 350.2 (MH+), 0.47분, 및 4-(3-아미노-6-((1S,3R,4S)-3-플루오로-4-히드록시시클로헥실)피라진-2-일)-2-플루오로벤조산 (에스테르 35 mg으로부터 33 mg), LCMS (m/z): 350.2 (MH+), 0.48분을 각각 HCl 염으로서 수득하였으며, 이를 후속 단계에 어떠한 추가 정제도 없이 사용하였다.
단계 5 및 6. 4-(3-아미노-6-((1R,3S,4R)-3-플루오로-4-히드록시시클로헥실)피라진-2-일)-N-((S)-1-(3-브로모-5-플루오로페닐)-2-히드록시에틸)-2-플루오로벤즈아미드 및 4-(3-아미노-6-((1S,3R,4S)-3-플루오로-4-히드록시시클로헥실)피라진-2-일)-N-((S)-1-(3-브로모-5-플루오로페닐)-2-히드록시에틸)-2-플루오로벤즈아미드
반응식 85에서의 단계 8에 따라, 4-(3-아미노-6-((1R,3S,4R)-3-플루오로-4-히드록시시클로헥실)피라진-2-일)-2-플루오로벤조산을 사용하여, 4-(3-아미노-6-((1R,3S,4R)-3-플루오로-4-히드록시시클로헥실)피라진-2-일)-N-((S)-1-(3-브로모-5-플루오로페닐)-2-히드록시에틸)-2-플루오로벤즈아미드를 수득하였다. LCMS (m/z): 565.0/567.1 (MH+), 0.71분;
1H NMR (400MHz, CD3OD) δ ppm 7.93 - 7.78 (m, 2H), 7.73 - 7.55 (m, 2H), 7.46 (s, 1H), 7.33 - 7.13 (m, 2H), 5.17 (t, J=5.9 Hz, 1H), 3.95 - 3.78 (m, 2H), 3.75 - 3.42 (m, 1H), 3.09 - 2.93 (m, 1H), 2.32 - 2.14 (m, 1H), 2.05 - 1.79 (m, 5H), 1.80 - 1.59 (m, 1H).
4-(3-아미노-6-((1S,3R,4S)-3-플루오로-4-히드록시시클로헥실)피라진-2-일)-2-플루오로벤조산을 사용하여, 4-(3-아미노-6-((1S,3R을 사용하여,4S)-3-플루오로-4-히드록시시클로헥실)피라진-2-일)-N-((S)-1-(3-브로모-5-플루오로페닐)-2-히드록시에틸)-2-플루오로벤즈아미드를 수득하였다. LCMS (m/z): 565.0/567.1 (MH+), 0.71분;
1H NMR (400MHz, CD3OD) δ ppm 7.95 - 7.80 (m, 2H), 7.75 - 7.56 (m, 2H), 7.46 (s, 1H), 7.33 - 7.12 (m, 2H), 5.17 (t, J=5.9 Hz, 1H), 3.96 - 3.78 (m, 2H), 3.76 - 3.55 (m, 1H), 3.10 - 2.95 (m, 1H), 2.31 - 2.12 (m, 1H), 2.08 - 1.82 (m, 5H), 1.79 - 1.62 (m, 1H).
실시예 189
4-(3-아미노-6-((1S,3S,4S)-3-플루오로-4-히드록시시클로헥실)피라진-2-일)-2-플루오로-N-((S)-1-(3-플루오로-5-아이오도페닐)-2-히드록시에틸)벤즈아미드의 합성
반응식 89
Figure 112016034409922-pct00177
단계 1. (S)-2-아미노-2-(3-플루오로-5-아이오도페닐)에탄올 히드로클로라이드
(S)-tert-부틸 (1-(3-플루오로-5-아이오도페닐)-2-히드록시에틸)카르바메이트 (2.507 g, 6.58 mmol)를 DCM (60 mL) 중에 용해시키고, 디옥산 중 4 N HCl (4.93 mL, 19.73 mmol)로 처리하였다. 혼합물을 실온에서 밤새 교반하였다. 대부분의 용매를 진공 하에 조심스럽게 증발시킨 후, 슬러리를 Et2O로 연화처리하여 (S)-2-아미노-2-(3-플루오로-5-아이오도페닐)에탄올의 미세 백색 HCl 염 1.525 g (72%)을 수득하였으며, 이를 흡인 여과에 의해 단리시켰다. LCMS (m/z): 282.4 (MH+), 0.46분.
단계 2. 4-(3-아미노-6-((1S,3S,4S)-3-플루오로-4-히드록시시클로헥실)피라진-2-일)-2-플루오로-N-((S)-1-(3-플루오로-5-아이오도페닐)-2-히드록시에틸)벤즈아미드
DMF (0.46 mL) 중 4-(3-아미노-6-((1S,3S,4S)-3-플루오로-4-히드록시시클로헥실)피라진-2-일)-2-플루오로벤조산 (16 mg, 0.046 mmol)의 용액에 (S)-2-아미노-2-(3-플루오로-5-아이오도페닐)에탄올 히드로클로라이드 (17.5 mg, 0.055 mmol), HOAt (9.35 mg, 0.069 mmol), EDC (17.6 mg, 0.092 mmol), 및 DIEA (24 μl, 0.137 mmol)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 15시간 동안 교반하였다. 물을 첨가한 후, 반응 혼합물을 EtOAc로 추출하고, 유기 층을 물로 2회 세척하였다. 유기 층을 분리하고, Na2SO4 상에서 건조시키고, 여과하고, 진공 하에 농축시켰다. 조 생성물을 플래쉬 크로마토그래피에 의해 0-100% EtOAc/헵탄으로 용리시키면서 정제하여 조 생성물을 수득하였으며, 이를 70%의 DCM/에테르로 연화처리하여 4-(3-아미노-6-((1S,3S,4S)-3-플루오로-4-히드록시시클로헥실)피라진-2-일)-2-플루오로-N-((S)-1-(3-플루오로-5-아이오도페닐)-2-히드록시에틸)벤즈아미드 9.3 mg (28%)을 TFA 염으로서 수득하였다. LCMS (m/z): 613.1 (MH+), 0.74분;
1H NMR (400MHz, CD3OD) δ ppm 7.93 - 7.78 (m, 2H), 7.76 - 7.57 (m, 3H), 7.73 - 7.56 (m, 3H), 7.43 (d, J=7.8 Hz, 1H), 7.21 (d, J=9.4 Hz, 1H), 5.15 (t, J=5.9 Hz, 1H), 4.37 (m, 1H), 3.83 (m, 2H), 3.63 (m, 1H), 2.84 (t, J=11.7 Hz, 1H), 2.27 (dd, J=2.9, 9.2 Hz, 1H), 2.14 - 1.98 (m, 1H), 1.96 - 1.75 (m, 2H), 1.65 (dq, J=3.3, 13.0 Hz, 1H), 1.56 - 1.34 (m, 1H).
(S)-2-(4-(3-아미노-6-((1S,3S,4S)-3-플루오로-4-히드록시시클로헥실)피라진-2-일)-2-플루오로벤즈아미도)-2-(3-플루오로-5-아이오도페닐)에틸 디히드로겐 포스페이트의 합성
Figure 112016034409922-pct00178
단계 1. (S)-(9H-플루오렌-9-일)메틸 (1-(3-플루오로-5-아이오도페닐)-2-히드록시에틸)카르바메이트: (S)-2-아미노-2-(3-플루오로-5-아이오도페닐)에탄올 (4500 mg, 14.17 mmol)에 THF (부피: 40 mL, 비: 2.67) 및 물 (부피: 15 mL, 비: 1.000)에 이어서 NaHCO3 (4762 mg, 56.7 mmol)을 첨가하였다. 혼합물을 2분 동안 교반한 다음, 빙조에서 0℃로 냉각시켰다. 반응물에 (9H-플루오렌-9-일)메틸 카르보노클로리데이트 (5499 mg, 21.26 mmol)를 첨가하고, 반응물을 0℃에서 30분 동안 교반하고, 실온으로 가온되도록 하고, 추가로 60분 동안 교반한 후, LCMS를 수행하였다. 에틸 아세테이트를 조 반응 혼합물에 첨가하였다. 혼합물을 물 (2x), 포화 염 용액으로 세척하고, 황산나트륨으로 건조시키고, 여과하고, 잔류물로 농축시켰다. 조 생성물을 실리카 겔 크로마토그래피에 의해 헵탄 중 0-60% 에틸 아세테이트로부터 용리시키는 300 g 칼럼 (고체 로드)을 사용하여 정제하였다. 목적 분획을 일정한 질량으로 농축시켜 백색 고체로서의 목적 생성물 5375 mg을 유리 염기로서 수득하였으며, 이를 그대로 사용하였다 (73% 수율). LCMS (m/z): 504.1 (MH+), 1.05분.
1H NMR (<cd3od>) d: 7.78 (d, J=7.4 Hz, 2H), 7.64 (d, J=7.2 Hz, 2H), 7.53 (s, 1H), 7.33-7.43 (m, 3H), 7.25-7.33 (m, 2H), 7.07 (d, J=9.2 Hz, 1H), 4.64 (t, J=5.9 Hz, 1H), 4.31-4.46 (m, 2H), 4.21 (t, J=6.3 Hz, 1H), 3.66 (d, J=3.1 Hz, 2H).
단계 2. (S)-(9H-플루오렌-9-일)메틸 (2-((디-tert-부톡시포르포릴)옥시)-1-(3-플루오로-5-아이오도페닐)에틸)카르바메이트: (S)-(9H-플루오렌-9-일)메틸 (1-(3-플루오로-5-아이오도페닐)-2-히드록시에틸)카르바메이트 (5260 mg, 10.45 mmol)에 이미다졸 (818 mg, 12.02 mmol), 이미다졸 HCl (1857 mg, 17.77 mmol), 및 DMF (부피: 50 mL)를 첨가하였다. 반응물을 교반하여 아르곤 하에 2-3분 동안 용해시켰다. 이어서, 디-tert-부틸 디이소프로필포스포르아미다이트 (4928 mg, 17.77 mmol)를 2-3분에 걸쳐 적가하고, 실온에서 2시간 동안 교반하였다. 이어서, 반응물을 중성 LCMS를 수행하고, 1:1 에틸 아세테이트/헵탄으로 용리시키면서 TLC하였다. 조 반응물을 수조에 넣고, 과산화수소 30% (5.34 mL, 52.3 mmol)를 천천히 첨가하고, 혼합물을 실온에서 30분 동안 교반하고, 이어서 LCMS를 수행하였다. 조 반응물을 빙조에 넣고, 과량의 포화 티오황산나트륨을 5-10분에 걸쳐 (조심스럽게) 적가하였다. 조 반응 혼합물에 에틸 아세테이트 800 ml를 첨가하고, 물 (3x), 포화 염 용액으로 세척하고, 황산나트륨으로 건조시키고, 여과하고, 잔류물로 농축시켰다. 조 물질을 실리카 겔 크로마토그래피에 의해 헵탄 중 0-55% 에틸 아세테이트로부터 용리시키는 300 g 칼럼을 사용하여 정제하였다. 목적 피크를 일정한 질량으로 농축시켜 목적 생성물 6560 mg을 유리 염기로서 수득하였으며, 이를 그대로 사용하였다 (86% 수율). LCMS (m/z): 696.3 (MH+) 약함, 1.25분. 주: 2개의 t-부틸 보호기의 손실로부터 예상한 바와 같이 584.2에서의 -112 단편이 LCMS에서의 주요 이온이다.
1H NMR (<cd3od>) d: 7.79 (d, J=7.3 Hz, 2H), 7.64 (d, J=7.3 Hz, 2H), 7.58 (s, 1H), 7.45 (d, J=7.6 Hz, 1H), 7.34-7.42 (m, 2H), 7.22-7.32 (m, 2H), 7.12 (d, J=9.1 Hz, 1H), 4.90 (t, J=6.0 Hz, 1H), 4.41-4.48 (m, 1H), 4.31-4.40 (m, 1H), 4.21 (t, J=6.6 Hz, 1H), 4.08 (t, J=6.3 Hz, 2H), 1.42 (s, 9H), 1.40 (s, 9H).
단계 3. (S)-2-아미노-2-(3-플루오로-5-아이오도페닐)에틸 디-tert-부틸 포스페이트: (S)-(9H-플루오렌-9-일)메틸 (2-((디-tert-부톡시포르포릴)옥시)-1-(3-플루오로-5-아이오도페닐)에틸)카르바메이트 (6450 mg, 9.27 mmol)에 DMF (부피: 90 mL)에 이어서 피페리딘 (25 mL, 253 mmol)을 첨가하고, 실온에서 30분 동안 교반하고, 이어서 LCMS를 수행하였다. 조 반응 혼합물에 에틸 아세테이트 750 ml를 첨가하고, 포화 중탄산나트륨 (2x), 물 (5x), 포화 염 용액으로 세척하고, 황산나트륨으로 건조시키고, 여과하였다. 용매를 고진공 하에 일정한 질량으로 농축시켜 FMOC 피페리딘 불순물을 포함하는 목적 조 생성물을 수득하였으며, 이를 그대로 사용하였다. LCMS (m/z): 474.2 (MH+), 0.80분.
단계 4. (S)-2-(4-(3-아미노-6-((1S,3S,4S)-3-플루오로-4-히드록시시클로헥실)피라진-2-일)-2-플루오로벤즈아미도)-2-(3-플루오로-5-아이오도페닐)에틸 디-tert-부틸 포스페이트: NMP (부피: 60 mL) 중 4-(3-아미노-6-((1S,3S,4S)-3-플루오로-4-히드록시시클로헥실)피라진-2-일)-2-플루오로벤조산 (3927 mg, 9.3 mmol)의 용액에 (S)-2-아미노-2-(3-플루오로-5-아이오도페닐)에틸 디-tert-부틸 포스페이트 (4740 mg, 9.30 mmol), DIEA (9.75 mL, 55.8 mmol)에 이어서 HATU (5304 mg, 13.95 mmol)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 2시간 동안 교반하고, 이어서 LCMS를 수행하였다. 조 반응물에 에틸 아세테이트 850 ml를 첨가하고, 포화 비카르보네이트 (2x), 물 (3x), 포화 염 용액으로 세척하고, 황산나트륨으로 건조시키고, 여과하고, 잔류물로 건조시켰다. 조 생성물을 실리카 겔 크로마토그래프 330g 칼럼에 의해 0-70% (10% MeOH 함유 EtOAc) / 헵탄으로 용리시키면서 정제하였다. 목적 피크를 일정한 질량으로 농축시켜 조 생성물 5.75 그램을 수득하였다. 물질을 실리카 겔 크로마토그래프 330g 칼럼에 의해 0-60% (10% MeOH 함유 EtOAc) / 헵탄으로 용리시키면서 재정제하여 조 생성물 5.03 그램을 수득하였다. 물질을 에틸 아세테이트 1200 ml를 첨가하여 용해키시키고, 헵탄 200 ml를 첨가하여 추가로 정제하고, 0.5 N HCl (5x) 200 ml, 물, 포화 중탄산나트륨, 물 (3x), 포화 염 용액으로 세척하고, 황산나트륨으로 건조시키고, 여과하고, 일정한 질량으로 농축시켜 목적 생성물 4.70 그램을 수득하였으며, 이를 그대로 사용하였다. (2 단계에 걸쳐 61% 수율). LCMS (m/z): 805.4 (MH+), 0.99분.
1H NMR (<cd3od>) d: 7.90 (s, 1H), 7.77-7.86 (m, 1H), 7.68-7.73 (m, 2H), 7.63 (dd, J=11.8, 1.2 Hz, 1H), 7.42-7.52 (m, 1H), 7.26 (d, J=9.5 Hz, 1H), 5.43 (t, J=5.7 Hz, 1H), 4.30-4.49 (m, 1H), 4.28 (t, J=6.3 Hz, 2H), 3.58-3.72 (m, 1H), 2.83 (t, J=11.6 Hz, 1H), 2.27 (dt, J=6.2, 3.1 Hz, 1H), 2.02-2.13 (m, 1H), 1.77-1.94 (m, 2H), 1.58-1.74 (m, 1H), 1.48-1.55 (m, 1H), 1.45 (d, J=5.8 Hz, 18H).
단계 5. (S)-2-(4-(3-아미노-6-((1S,3S,4S)-3-플루오로-4-히드록시시클로헥실)피라진-2-일)-2-플루오로벤즈아미도)-2-(3-플루오로-5-아이오도페닐)에틸 디히드로겐 포스페이트: (S)-2-(4-(3-아미노-6-((1S,3S,4S)-3-플루오로-4-히드록시시클로헥실)피라진-2-일)-2-플루오로벤즈아미도)-2-(3-플루오로-5-아이오도페닐)에틸 디-tert-부틸 포스페이트 (4600 mg, 5.72 mmol)를 MeOH (부피: 70 mL) 중에 완전히 용해시켰다. 이어서, 디옥산 중 HCl 4M (14.29 mL, 57.2 mmol)을 첨가하고, 실온에서 3시간 동안 교반하고, 이어서 LCMS를 수행하였다. 용매를 대부분 농축시켰다. 이어서, MeOH (부피: 70 mL)를 첨가하고, 용매를 잔류물로 농축시키고, 추가의 MeOH (부피: 70 mL)를 첨가하고, 잔류물을 일정한 질량으로 농축시켰다. 생성물을 1:1 ACN/물 90 ml 중에 용해시키고, 동결건조시켜 목적 생성물 3.99 그램을 HCl 염으로서 수득하였다. (94% 수율). LCMS (m/z): 692.9 (MH+), 0.63분.
1H NMR (<cd3od>) d: 7.84-7.93 (m, 1H), 7.75 (s, 1H), 7.60-7.71 (m, 3H), 7.45-7.51 (m, 1H), 7.26 (dt, J=9.7, 1.6 Hz, 1H), 5.40 (t, J=5.9 Hz, 1H), 4.31-4.50 (m, 1H), 4.22-4.30 (m, 2H), 3.64 (tdd, J=11.7, 8.6, 5.1 Hz, 1H), 2.82-2.98 (m, 1H), 2.32 (ddt, J=11.7, 5.8, 2.8 Hz, 1H), 2.01-2.15 (m, 1H), 1.89-1.97 (m, 1H), 1.75-1.89 (m, 1H), 1.58-1.72 (m, 1H), 1.42-1.55 (m, 1H). 31P NMR (<cd3od>) d: 0.00 (s, 1P).
이나트륨 염으로의 HCl 염의 전환: HCl 염으로서의 상기 목적 생성물 (24 mg, 0.035 mmol)에 물 (부피: 17 mL)을 첨가한 다음, 2M 탄산나트륨을 사용하여 pH10-11로 연화처리한 다음, DCM 15 ml (4x)로 추출하였다. 염기성 물을 12 그램 그레이스 레벨레리스(Grace Reveleris) C18 역상 칼럼 상에 완충제 없이 15 ml/분의 유량에서 18분에 걸쳐 0-20% ACN/물로 용리시키면서 직접 로딩하였다. 목적 분획을 동결건조시켜, 반대이온 분석에 의해 결정된 목적 생성물 (S)-2-(4-(3-아미노-6-((1S,3S,4S)-3-플루오로-4-히드록시시클로헥실)피라진-2-일)-2-플루오로벤즈아미도)-2-(3-플루오로-5-아이오도페닐)에틸 디히드로겐 포스페이트 18 mg을 이나트륨 염으로서 수득하였다 (70% 수율). LCMS (m/z): 692.9 (MH+), 0.64분.
1H NMR (<cd3od>) d: 7.82-7.92 (m, 2H), 7.64-7.72 (m, 2H), 7.58 (dd, J=11.4, 1.2 Hz, 1H), 7.39 (d, J=7.6 Hz, 1H), 7.28 (d, J=9.5 Hz, 1H), 5.17 (dd, J=6.9, 4.1 Hz, 1H), 4.25-4.49 (m, 1H), 4.02-4.20 (m, 2H), 3.57-3.73 (m, 1H), 2.83 (t, J=11.6 Hz, 1H), 2.27 (dd, J=6.1, 3.6 Hz, 1H), 1.98-2.14 (m, 1H), 1.78-1.94 (m, 2H), 1.59-1.73 (m, 1H), 1.40-1.55 (m, 1H).
실시예 190
4-(3-아미노-6-((1R,3R,4R)-3-플루오로-4-히드록시시클로헥실)피라진-2-일)-2-플루오로-N-((S)-1-(3-플루오로-5-아이오도페닐)-2-히드록시에틸)벤즈아미드의 합성
Figure 112016034409922-pct00179
DMF (0.52 mL) 중 4-(3-아미노-6-((1R,3R,4R)-3-플루오로-4-히드록시시클로헥실)피라진-2-일)-2-플루오로벤조산 (18 mg, 0.052 mmol)의 용액에 (S)-2-아미노-2-(3-플루오로-5-아이오도페닐)에탄올 히드로클로라이드 (19.6 mg, 0.062 mmol), HOAt (10.52 mg, 0.077 mmol), EDC (19.76 mg, 0.103 mmol), 및 DIEA (27 μl, 0.155 mmol)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 15시간 동안 교반하였다. 물을 첨가한 후, 반응 혼합물을 EtOAc로 추출하고, 유기 층을 물로 2회 세척하였다. 유기 층을 분리하고, Na2SO4 상에서 건조시키고, 여과하고, 진공 하에 농축시켰다. 조 생성물을 플래쉬 크로마토그래피에 의해 0-100% EtOAc/헵탄으로 용리시키면서 정제하여 4-(3-아미노-6-((1R,3R,4R)-3-플루오로-4-히드록시시클로헥실)피라진-2-일)-2-플루오로-N-((S)-1-(3-플루오로-5-아이오도페닐)-2-히드록시에틸)벤즈아미드 15.8 mg을 유리 염기로서 수득하였다 (50%). LCMS (m/z): 613.1 (MH+), 0.74분;
1H NMR (400MHz, CD3OD) δ ppm 7.89 - 7.69 (m, 2H), 7.66 - 7.47 (m, 3H), 7.39 - 7.26 (m, 1H), 7.12 (d, J=9.4 Hz, 1H), 5.05 (t, J=5.9 Hz, 1H), 4.43 - 4.14 (m, 1H), 3.84 - 3.66 (m, 2H), 3.64 - 3.45 (m, 1H), 2.74 (t, J=11.7 Hz, 1H), 2.17 (td, J=3.1, 6.0 Hz, 1H), 2.05 - 1.87 (m, 1H), 1.84 - 1.66 (m, 2H), 1.65 - 1.47 (m, 1H), 1.47 - 1.27 (m, 1H).
(S)-2-(4-(3-아미노-6-((1R,3R,4R)-3-플루오로-4-히드록시시클로헥실)피라진-2-일)-2-플루오로벤즈아미도)-2-(3-플루오로-5-아이오도페닐)에틸 디히드로겐 포스페이트의 합성
Figure 112016034409922-pct00180
단계 1. (S)-2-(4-(3-아미노-6-((1R,3R,4R)-3-플루오로-4-히드록시시클로헥실)피라진-2-일)-2-플루오로벤즈아미도)-2-(3-플루오로-5-아이오도페닐)에틸 디-tert-부틸 포스페이트: NMP (부피: 4 mL) 중 4-(3-아미노-6-((1R,3R,4R)-3-플루오로-4-히드록시시클로헥실)피라진-2-일)-2-플루오로벤조산 (215 mg, 0.509 mmol)의 용액에 (S)-2-아미노-2-(3-플루오로-5-아이오도페닐)에틸 디-tert-부틸 포스페이트 (260 mg, 0.509 mmol), DIEA (0.534 mL, 3.06 mmol)에 이어서 HATU (290 mg, 0.764 mmol)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 1시간 동안 교반하고 이어서, LCMS를 수행하였다. 조 반응물에 에틸 아세테이트 150 ml를 첨가하고, 포화 비카르보네이트 (2x), 물 (3x), 포화 염 용액으로 세척하고, 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 잔류물로 건조시켰다. 조 생성물을 실리카 겔 크로마토그래프 24g 칼럼 (DCM 로딩)에 의해 0-80% (10% MeOH 함유 EtOAc) / 헵탄으로 용리시키면서 정제하였다. 목적 분획을 일정한 질량으로 농축시켜 목적 생성물 315 mg을 유리 염기로서 수득하였다. (77% 수율). LCMS (m/z): 805.3 (MH+), 1.01분.
단계 2. (S)-2-(4-(3-아미노-6-((1R,3R,4R)-3-플루오로-4-히드록시시클로헥실)피라진-2-일)-2-플루오로벤즈아미도)-2-(3-플루오로-5-아이오도페닐)에틸 디히드로겐 포스페이트: (S)-2-(4-(3-아미노-6-((1R,3R,4R)-3-플루오로-4-히드록시시클로헥실)피라진-2-일)-2-플루오로벤즈아미도)-2-(3-플루오로-5-아이오도페닐)에틸 디-tert-부틸 포스페이트 (315 mg, 0.392 mmol)의 용액에 디옥산 중 HCl 4M (5 mL, 20.00 mmol) 및 메탄올 (부피: 0.5 mL)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 1시간 동안 교반하고, 이어서 LCMS를 수행하였다. 용매를 농축시켰다. 조 물질을 첨가된 최소량의 MeOH를 사용하여 3M NaOH로 염기성화시키고, 용해시켰다. 물질을 12 그램 그레이스 레벨레리스 C18 역상 칼럼에 의해 완충제 없이 15 ml/분의 유량에서 18분에 걸쳐 0-15% ACN/물로 용리시키면서 정제하였다. 목적 분획을 수집하고, 1 M HCl을 사용하여 pH 1로 산성화시키고, 에틸 아세테이트 (5x)로 추출하여 염을 제거하였다. 합한 유기 층 (800 ml)을 최소량의 물 (3x 25 ml)로 세척하여 염을 제거하였다. 용매를 농축시키고, 1:1 ACN/물 중에 용해시키고, 동결건조시켜 목적 생성물 207 mg을 HCL 염으로서 수득하였다. (72% 수율). LCMS (m/z): 693.2 (MH+), 0.64분.
1H NMR (<cd3od>) d: 7.87 (s, 1H), 7.81-7.86 (m, 1H), 7.65-7.72 (m, 2H), 7.61 (dd, J=11.7, 1.6 Hz, 1H), 7.46 (ddd, J=8.0, 2.3, 1.4 Hz, 1H), 7.26 (dt, J=9.5, 1.9 Hz, 1H), 5.38 (t, J=5.7 Hz, 1H), 4.29-4.49 (m, 1H), 4.18-4.29 (m, 2H), 3.64 (tdd, J=11.6, 8.6, 4.9 Hz, 1H), 2.76-2.92 (m, 1H), 2.27 (ddd, J=8.8, 5.9, 2.5 Hz, 1H), 2.01-2.13 (m, 1H), 1.76-1.94 (m, 2H), 1.58-1.71 (m, 1H), 1.39-1.55 (m, 1H). 31P NMR (<cd3od>) d: 0.16 (br. s., 1P).
실시예 191 및 192
4-(3-아미노-6-((1r,4S)-4-아미노시클로헥실)피라진-2-일)-N-((S)-1-(3-클로로페닐)-2-히드록시에틸)-2-플루오로벤즈아미드 및 4-(3-아미노-6-((1s,4R)-4-아미노시클로헥실)피라진-2-일)-N-((S)-1-(3-클로로페닐)-2-히드록시에틸)-2-플루오로벤즈아미드의 합성
반응식 90
Figure 112016034409922-pct00181
단계 1. 메틸 4-(3-아미노-6-(4-(벤질아미노)시클로헥실)피라진-2-일)-2-플루오로벤조에이트
메틸 4-(3-아미노-6-(4-옥소시클로헥실)피라진-2-일)-2-플루오로벤조에이트 (300 mg, 0.874 mmol)에 MeOH (4 mL), 페닐메탄아민 (112 mg, 1.048 mmol) 및 마지막 건조 4 Å 분자체를 첨가하였다. 반응물을 실온에서 16시간 동안 교반하였다. 이어서, NaBH4 (165 mg, 4.37 mmol)를 첨가하고, 실온에서 2시간 동안 교반하고, 이어서 LCMS를 수행하였다. 반응물에 에틸 아세테이트 150 mL를 첨가하고, 포화 중탄산나트륨, 물 (2x), 포화 염 용액으로 세척하고, 황산나트륨으로 건조시키고, 여과하고, 잔류물로 농축시켜 2:1 트랜스 대 시스 비의 목적 생성물 352 mg을 수득하였으며, 이를 그대로 사용하였다 (93%). LCMS (m/z): 435.3 (MH+), 0.68분 및 0.72분.
단계 2. 메틸 4-(3-아미노-6-(4-아미노시클로헥실)피라진-2-일)-2-플루오로벤조에이트
아르곤으로 플러싱된 둥근 바닥 플라스크 중 메틸 4-(3-아미노-6-(4-(벤질아미노)시클로헥실)피라진-2-일)-2-플루오로벤조에이트 (350 mg, 0.806 mmol)에 Pd-C 10% 데구사, 습윤 (171 mg, 0.161 mmol)을 첨가하였다. 이어서, 시린지를 사용하여 아르곤 하에, MeOH (5 mL) 및 마지막 수소 풍선을 첨가하였다. 플라스크를 6회 배기시키고, 수소로 재충전하였다. 반응물을 실온에서 14시간 동안 교반하였다. 반응물을 아르곤으로 퍼징한 다음, Pd-C 10% 데구사, 습윤 (171 mg, 0.161 mmol)을 조심스럽게 첨가하였다. 이어서, 수소 풍선을 첨가하고, 플라스크를 배기시키고, 수소로 6회 재충전하였다. 반응물을 추가로 10시간 동안 교반하여 총 24시간 동안 교반하고, 이어서 LCMS를 수행하였다. 반응물을 아르곤으로 플러싱하고, DCM 35 mL를 첨가하였다. 조 혼합물을 셀라이트 플러그를 통해 여과하고, 일정한 질량으로 농축시켜 목적 생성물 230 mg (이는 2:1 트랜스 내지 시스 비임)을 수득하였으며, 이를 그대로 사용하였다 (83%). LCMS (m/z): 345.2 (MH+), 0.48분 및 0.51분.
단계 3. 메틸 4-(3-아미노-6-(4-((tert-부톡시카르보닐)아미노)시클로헥실)피라진-2-일)-2-플루오로벤조에이트
메틸 4-(3-아미노-6-(4-아미노시클로헥실)피라진-2-일)-2-플루오로벤조에이트 (230 mg, 0.668 mmol)에 DCM (5 mL), TEA (0.233 mL, 1.670 mmol), 및 Boc-무수물 (0.186 mL, 0.801 mmol)을 첨가하였다. 반응물을 실온에서 1시간 동안 교반하고, 이어서 LCMS를 수행하였다. 반응물에 에틸 아세테이트 150 mL를 첨가하고, 포화 중탄산나트륨으로 세척하고, 물로 2회 세척하고, 포화 염 용액으로 세척하고, 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 일정한 질량으로 농축시켜 목적 생성물 233 mg (이는 2:1 트랜스 대 시스 비임)을 수득하였으며, 이를 그대로 사용하였다 (78%). 상기 2종에 대해 LCMS (m/z): 445.2 (MH+), 0.92분.
단계 4. 4-(3-아미노-6-(4-((tert-부톡시카르보닐)아미노)시클로헥실)피라진-2-일)-2-플루오로벤조산
메틸 4-(3-아미노-6-(4-((tert-부톡시카르보닐)아미노)시클로헥실)피라진-2-일)-2-플루오로벤조에이트 (230 mg, 0.517 mmol)에 MeOH (2 mL), THF (2 mL)에 이어서 수산화리튬 1M 수용액 (1.552 mL, 1.552 mmol)을 첨가하였다. 반응물을 실온에서 1시간 동안 교반하였다. 용매를 잔류물로 농축시킨 다음, THF (20 mL)를 첨가하고, 잔류물로 농축시켰다. 이어서, THF (20 mL)를 다시 첨가하고, 잔류물을 일정한 질량으로 재농축시켜 목적 생성물 (이는 2:1 트랜스 내지 시스 비임)을 수득하였으며, 이를 그대로 사용하였다. 정량적 수율을 가정하였다 (0.517 mmol). 상기 2종에 대해 LCMS (m/z): 431.2 (MH+), 0.78분.
단계 5. (S)-tert-부틸 (4-(5-아미노-6-(4-((1-(3-클로로페닐)-2-히드록시에틸)카르바모일)-3-플루오로페닐)피라진-2-일)시클로헥실)카르바메이트
4-(3-아미노-6-(4-((tert-부톡시카르보닐)아미노)시클로헥실)피라진-2-일)-2-플루오로벤조산 (222 mg, 0.516 mmol)에 DMSO (4 mL), 휘니그 염기 (0.450 mL, 2.58 mmol), (S)-2-아미노-2-(3-클로로페닐)에탄올 (133 mg, 0.774 mmol)에 이어서 HATU (392 mg, 1.031 mmol)를 첨가하였다. 반응물을 실온에서 1시간 동안 교반하였다. 반응물에 에틸 아세테이트 50 mL를 첨가하고, 물로 2회, 포화 염 용액으로 세척하고, 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 잔류물로 농축시켰다. 조 물질을 플래쉬 크로마토그래피에 의해 12 그램 칼럼 (고체 로드)을 사용하여 헵탄 중 10-95% 에틸 아세테이트로 용리시키면서 정제하였다. 목적 분획을 일정한 질량으로 농축시켜 생성물 252 mg (이는 2:1 트랜스 내지 시스 비임)을 수득하였으며, 이를 그대로 사용하였다 (2 단계에 걸쳐 83%). 상기 2종에 대해 LCMS (m/z): 584.3 (MH+), 0.91분.
단계 6. 4-(3-아미노-6-((1r,4S)-4-아미노시클로헥실)피라진-2-일)-N-((S)-1-(3-클로로페닐)-2-히드록시에틸)-2-플루오로벤즈아미드 및 4-(3-아미노-6-((1s,4R)-4-아미노시클로헥실)피라진-2-일)-N-((S)-1-(3-클로로페닐)-2-히드록시에틸)-2-플루오로벤즈아미드
(S)-tert-부틸 (4-(5-아미노-6-(4-((1-(3-클로로페닐)-2-히드록시에틸)카르바모일)-3-플루오로페닐)피라진-2-일)시클로헥실)카르바메이트 (252 mg, 0.431 mmol)에 DCM (8 mL)에 이어서 TFA (2 mL, 26.0 mmol)를 첨가하였다. 반응물을 실온에서 1시간 동안 교반하였다. 용매를 농축시키고, DMSO 중에 재용해시키고, 여과하고, 정제용 HPLC에 의해 정제하여 2종의 이성질체를 수집하였다. 주요 이성질체를 사용하여, 트랜스가 첫번째로 용리되고, 시스 이성질체가 두번째로 용리되었다. 동결건조 후, 트랜스 생성물 4-(3-아미노-6-((1r,4S)-4-아미노시클로헥실)피라진-2-일)-N-((S)-1-(3-클로로페닐)-2-히드록시에틸)-2-플루오로벤즈아미드 87 mg을 TFA 염으로서 34% 수율로 수득하였다. LCMS (m/z): 484.2 (MH+), 0.58분;
1H NMR (CD3OD) δ ppm 7.79 (s, 1H), 7.76 (t, J=7.8 Hz, 1H), 7.58 (dd, J=7.8, 1.6 Hz, 1H), 7.52 (dd, J=11.9, 1.4 Hz, 1H), 7.36 (s, 1H), 7.30 - 7.23 (m, 2H), 7.22 - 7.16 (m, 1H), 5.10 (t, J=5.9 Hz, 1H), 3.83 - 3.70 (m, 2H), 3.08 (tt, J=11.7, 3.9 Hz, 1H), 2.69 - 2.49 (m, 1H), 2.06 (d, J=10.6 Hz, 2H), 1.97 (d, J=12.9 Hz, 2H), 1.75 - 1.57 (m, 2H), 1.55 - 1.31 (m, 2H).
또한, 시스 생성물 4-(3-아미노-6-((1s,4R)-4-아미노시클로헥실)피라진-2-일)-N-((S)-1-(3-클로로페닐)-2-히드록시에틸)-2-플루오로벤즈아미드 43 mg의 동결건조 후 TFA 염으로서 17% 수율로 수득하였다. LCMS (m/z): 484.2 (MH+), 0.61분;
1H NMR (CD3OD) δ ppm 7.87 (s, 1H), 7.81 - 7.72 (m, 1H), 7.60 (dd, J=8.0, 1.4 Hz, 1H), 7.55 (d, J=11.7 Hz, 1H), 7.36 (s, 1H), 7.26 (d, J=5.9 Hz, 2H), 7.22 - 7.16 (m, 1H), 5.10 (t, J=5.7 Hz, 1H), 3.87 - 3.67 (m, 2H), 2.91 - 2.80 (m, 1H), 1.98 (q, J=8.9 Hz, 2H), 1.90 - 1.71 (m, 6H).
실시예 193
4-(6-((1r,4S)-4-아세트아미도시클로헥실)-3-아미노피라진-2-일)-N-((S)-1-(3-클로로페닐)-2-히드록시에틸)-2-플루오로벤즈아미드의 합성
Figure 112016034409922-pct00182
4-(3-아미노-6-((1r,4S)-4-아미노시클로헥실)피라진-2-일)-N-((S)-1-(3-클로로페닐)-2-히드록시에틸)-2-플루오로벤즈아미드 (15 mg, 0.025 mmol)에 0℃에서 DCM (0.25 mL), THF (0.75 mL) 및 TEA (10.49 μl, 0.075 mmol)를 첨가하였다. 이어서, 아세트산 무수물 (2.367 μl, 0.025 mmol)을 첨가하였다. 반응물을 0℃에서 30분 동안 교반하였다. 반응물을 농축시키고, DMSO 1 mL 중에 용해시키고, 여과하고, 정제용 HPLC에 의해 정제하고, 동결건조시켜 목적 생성물 4-(6-((1r,4S)-4-아세트아미도시클로헥실)-3-아미노피라진-2-일)-N-((S)-1-(3-클로로페닐)-2-히드록시에틸)-2-플루오로벤즈아미드 5.4 mg (33% 수율)을 TFA 염으로서 수득하였다. LCMS (m/z): 526.3 (MH+), 0.67분;
1H NMR (CD3OD) δ ppm 7.71-7.82 (m, 2H), 7.58 (dd, J=8.0, 1.4 Hz, 1H), 7.53 (d, J=11.7 Hz, 1H), 7.37 (s, 1H), 7.22-7.29 (m, 2H), 7.15-7.22 (m, 1H), 5.10 (t, J=5.9 Hz, 1H), 3.71-3.84 (m, 2H), 3.52-3.66 (m, 1H), 2.51-2.65 (m, 1H), 1.86-2.02 (m, 4H), 1.83 (s, 3H), 1.53-1.69 (m, 2H), 1.22-1.39 (m, 2H).
실시예 194
4-(3-아미노-6-((1r,4S)-4-(메틸술폰아미도)시클로헥실)피라진-2-일)-N-((S)-1-(3-클로로페닐)-2-히드록시에틸)-2-플루오로벤즈아미드의 합성
Figure 112016034409922-pct00183
4-(3-아미노-6-((1r,4S)-4-아미노시클로헥실)피라진-2-일)-N-((S)-1-(3-클로로페닐)-2-히드록시에틸)-2-플루오로벤즈아미드 (15 mg, 0.025 mmol)에 DCM (0.25 mL, 비: 1.000), THF (0.250 mL), TEA (10.49 μl, 0.075 mmol)를 첨가하고, 교반하여 용해시키고, 0℃로 냉각시킨 다음, 메탄술포닐 클로라이드 (1.955 μl, 0.025 mmol)를 첨가하였다. 반응물을 30분 동안 0℃에서 교반하고, 이어서 LCMS를 수행하였다. 반응물을 농축시키고, DMSO 1 mL 중에 용해시키고, 여과하고, 정제용 HPLC에 의해 정제하고, 동결건조시켜 목적 생성물 4-(3-아미노-6-((1r,4S)-4-(메틸술폰아미도)시클로헥실)피라진-2-일)-N-((S)-1-(3-클로로페닐)-2-히드록시에틸)-2-플루오로벤즈아미드 1.6 mg (9% 수율)을 TFA 염으로서 수득하였다. LCMS (m/z): 562.2 (MH+), 0.69분.
1H NMR (CD3OD) δ ppm 7.70-7.82 (m, 2H), 7.59 (d, J=7.8 Hz, 1H), 7.53 (d, J=11.7 Hz, 1H), 7.37 (s, 1H), 7.22-7.30 (m, 2H), 7.13-7.21 (m, 1H), 5.09 (t, J=5.9 Hz, 1H), 3.68-3.89 (m, 2H), 2.87 (s, 3H), 2.48-2.60 (m, 1H), 2.05 (d, J=14.9 Hz, 2H), 1.84-1.95 (m, 2H), 1.54-1.74 (m, 2H), 1.38 (q, J=12.9 Hz, 2H).
실시예 195
메틸 ((1S,4r)-4-(5-아미노-6-(4-(((S)-1-(3-클로로페닐)-2-히드록시에틸)카르바모일)-3-플루오로페닐)피라진-2-일)시클로헥실)카르바메이트의 합성
Figure 112016034409922-pct00184
4-(3-아미노-6-((1r,4S)-4-아미노시클로헥실)피라진-2-일)-N-((S)-1-(3-클로로페닐)-2-히드록시에틸)-2-플루오로벤즈아미드 (15 mg, 0.025 mmol)에 DCM (0.25 mL), THF (0.250 mL), TEA (10.49 μl, 0.075 mmol)를 첨가하고, 교반하여 용해시키고, 0℃로 농축시킨 다음, 메틸 클로로포르메이트 (1.943 μl, 0.025 mmol)를 첨가하였다. 반응물을 0℃에서 30분 동안 교반하고, 이어서 LCMS를 수행하였다. 반응물을 농축시키고, DMSO 1 mL 중에 용해시키고, 여과하고, 정제용 HPLC에 의해 정제하고, 동결건조시켜 목적 생성물 메틸 ((1S,4r)-4-(5-아미노-6-(4-(((S)-1-(3-클로로페닐)-2-히드록시에틸)카르바모일)-3-플루오로페닐)피라진-2-일)시클로헥실)카르바메이트 4.5 mg (27% 수율)을 TFA 염으로서 수득하였다. LCMS (m/z): 542.3 (MH+), 0.75분.
1H NMR (CD3OD) δ: 7.73-7.81 (m, 2H), 7.58 (dd, J=8.0, 1.4 Hz, 1H), 7.48-7.55 (m, 1H), 7.37 (s, 1H), 7.23-7.30 (m, 2H), 7.15-7.22 (m, 1H), 5.10 (t, J=5.9 Hz, 1H), 3.69-3.84 (m, 2H), 3.53 (s, 3H), 3.31-3.36 (m, 1H), 2.48-2.62 (m, 1H), 1.84-2.00 (m, 4H), 1.51-1.68 (m, 2H), 1.21-1.44 (m, 2H)
실시예 196
4-(3-아미노-6-((1r,4S)-4-(2-히드록시아세트아미도)시클로헥실)피라진-2-일)-N-((S)-1-(3-클로로페닐)-2-히드록시에틸)-2-플루오로벤즈아미드의 합성
Figure 112016034409922-pct00185
4-(3-아미노-6-((1r,4S)-4-아미노시클로헥실)피라진-2-일)-N-((S)-1-(3-클로로페닐)-2-히드록시에틸)-2-플루오로벤즈아미드 (11 mg, 0.018 mmol)에 NMP (0.4 mL), 2-히드록시아세트산 (2.80 mg, 0.037 mmol), 휘니그 염기 (0.013 mL, 0.074 mmol)에 이어서 HATU (17.49 mg, 0.046 mmol)를 첨가하였다. 반응물을 실온에서 30분 동안 교반하였다. 반응물을 농축시키고, DMSO 0.75 mL 중에 용해시키고, 여과하고, 정제용 HPLC에 의해 정제하고, 동결건조시켜 목적 생성물 4-(3-아미노-6-((1r,4S)-4-(2-히드록시아세트아미도)시클로헥실)피라진-2-일)-N-((S)-1-(3-클로로페닐)-2-히드록시에틸)-2-플루오로벤즈아미드 3.6 mg (29%)을 TFA 염으로서 수득하였다. LCMS (m/z): 542.2 (MH+), 0.63분.
1H NMR (CD3OD) δ ppm 7.83 - 7.72 (m, 2H), 7.59 (dd, J=8.0, 1.4 Hz, 1H), 7.53 (d, J=11.7 Hz, 1H), 7.37 (s, 1H), 7.32 - 7.23 (m, 2H), 7.22 - 7.16 (m, 1H), 5.10 (t, J=5.9 Hz, 1H), 3.86 (s, 2H), 3.82 - 3.63 (m, 3H), 2.65 - 2.50 (m, 1H), 2.02 - 1.86 (m, 4H), 1.72 - 1.56 (m, 2H), 1.48 - 1.33 (m, 2H).
실시예 197
(S)-N-(2-아미노-1-(3-클로로페닐)에틸)-4-(3-아미노-6-(4,4-디플루오로시클로헥실)피라진-2-일)-2-플루오로벤즈아미드의 합성
반응식 91
Figure 112016034409922-pct00186
단계 1. 메틸 4-(3-아미노-6-(4,4-디플루오로시클로헥실)피라진-2-일)-2-플루오로벤조에이트
메틸 4-(3-아미노-6-(4-옥소시클로헥실)피라진-2-일)-2-플루오로벤조에이트 (250 mg, 0.728 mmol)에 DCM (10 mL)을 첨가하고, 용액을 빙조에서 0℃로 냉각시켰다. 이어서, 톨루엔 50% 중 데옥소-플루오로 용액 (805 mg, 1.820 mmol)을 0℃에서 첨가하였다. 반응물을 실온으로 가온되도록 하고, 2시간 동안 교반하였다. 반응물을 켄칭하기 위해, TEA (1.522 mL, 10.92 mmol)를 첨가하고, 1시간 동안 실온에서 교반하였다. 용매를 잔류물로 농축시키고, 조 물질을 플래쉬 크로마토그래피 (건조 로드)에 의해 12 그램 칼럼을 사용하여 헵탄 중 5-75% 에틸 아세테이트로 용리시키면서 정제하였다. 목적 분획을 일정한 질량으로 농축시켜 목적 생성물 83 mg을 유리 염기로서 수득하였으며, 이를 그대로 사용하였다 (31% 수율). LCMS (m/z): 366.2 (MH+), 0.87분.
단계 2. 4-(3-아미노-6-(4,4-디플루오로시클로헥실)피라진-2-일)-2-플루오로벤조산
메틸 4-(3-아미노-6-(4,4-디플루오로시클로헥실)피라진-2-일)-2-플루오로벤조에이트 (83 mg, 0.227 mmol)에 MeOH (1.5 mL), THF (1.5 mL)에 이어서 1 M 수용액 NaOH (0.909 mL, 0.909 mmol)를 첨가하였다. 반응물을 실온에서 6시간 동안 교반하였다. 반응물을 잔류물로 농축시켰다. THF를 첨가하고, 잔류물로 다시 농축시켰다. 이어서, 혼합물을 1:1 ACN/물 중에 용해시키고, 6 M HCl을 사용하여 산성화시키고, 동결건조시켜 목적 생성물을 HCl 염으로서 수득하였으며, 이를 그대로 사용하였다. 정량적 수율을 가정하였다 (0.227 mmol). LCMS (m/z): 352.1 (MH+), 0.71분.
단계 3. (S)-tert-부틸 (2-(4-(3-아미노-6-(4,4-디플루오로시클로헥실)피라진-2-일)-2-플루오로벤즈아미도)-2-(3-클로로페닐)에틸)카르바메이트
4-(3-아미노-6-(4,4-디플루오로시클로헥실)피라진-2-일)-2-플루오로벤조산 (48 mg, 0.124 mmol)에 DMSO (1 mL), 휘니그 염기 (0.108 mL, 0.619 mmol), (S)-tert-부틸 (2-아미노-2-(3-클로로페닐)에틸)카르바메이트 (50.3 mg, 0.186 mmol)에 이어서 HATU (94 mg, 0.248 mmol)를 첨가하였다. 반응물을 실온에서 1시간 동안 교반하였다. 반응물에 DMSO 0.5 mL를 첨가하고, 여과하고, 정제용 HPLC에 의해 정제하고, 동결건조시켜 목적 생성물 11 mg을 수득하였으며, 이를 그대로 사용하였다 (12% 수율). LCMS (m/z): 604.2 (MH+), 1.05분.
단계 4. (S)-N-(2-아미노-1-(3-클로로페닐)에틸)-4-(3-아미노-6-(4,4-디플루오로시클로헥실)피라진-2-일)-2-플루오로벤즈아미드
(S)-tert-부틸 (2-(4-(3-아미노-6-(4,4-디플루오로시클로헥실)피라진-2-일)-2-플루오로벤즈아미도)-2-(3-클로로페닐)에틸)카르바메이트 (11 mg, 0.018 mmol)에 디옥산 중 HCl 4M (1 mL, 4.00 mmol)을 첨가하였다. 반응물을 실온에서 1시간 동안 교반하였다. 용매를 제거하고, 잔류물로 농축시키고, 이를 1:1 아세토니트릴/ 물 중에 용해시키고, 여과하고, HCl 염으로 동결건조시켰다. 조 염 잔류물을 DMSO 1 mL 중에 용해시키고, 정제용 HPLC에 의해 정제하고, 동결건조시켜 목적 생성물 (S)-N-(2-아미노-1-(3-클로로페닐)에틸)-4-(3-아미노-6-(4,4-디플루오로시클로헥실)피라진-2-일)-2-플루오로벤즈아미드 3.8 mg을 TFA 염으로서 수득하였다 (33%). LCMS (m/z): 504.2 (MH+), 0.74분;
1H NMR (CD3OD) δ ppm 7.85 - 7.73 (m, 2H), 7.62 (dd, J=8.0, 1.4 Hz, 1H), 7.54 (dd, J=12.1, 1.2 Hz, 1H), 7.46 (s, 1H), 7.38 - 7.28 (m, 3H), 5.39 (dd, J=9.0, 5.9 Hz, 1H), 3.40 - 3.33 (m, 2H), 2.72 (br. s., 1H), 2.12 - 1.98 (m, 2H), 1.96 - 1.73 (m, 6H).
실시예 198 및 199
시스-4-(3-아미노-6-(3-히드록시시클로헥실)피라진-2-일)-N-((S)-1-(3-클로로페닐)-2-히드록시에틸)-2-플루오로벤즈아미드의 거울상이성질체적으로 풍부한 부분입체이성질체의 합성
반응식 92
Figure 112016034409922-pct00187
단계 1. 극성 및 덜 극성의 거울상이성질체적으로 풍부한 시스-5-(3-((tert-부틸디메틸실릴)옥시)시클로헥실)피라진-2-아민
반응식 29로부터 제조된 5-(3-((tert-부틸디메틸실릴)옥시)시클로헥실)피라진-2-아민 (500 mg, 1.626 mmol)을 키랄 SFC (키랄팩 5mic OD 칼럼, 4.6x100 (mm), CO2/IPA+0.1% DEA=90/10, SFC=5mL/분)에 의해 분해하였다. 극성 거울상이성질체 (피크 1) (230 mg, 0.748 mmol, 46.0% 수율)에 대해, Rt = 1.58분. 덜 극성의 거울상이성질체 (피크 2) (230 mg, 0.748 mmol, 46.0% 수율)에 대해, Rt = 2.36분.
단계 2, 3, 4, 5 및 6. 시스-4-(3-아미노-6-(3-히드록시시클로헥실)피라진-2-일)-N-((S)-1-(3-클로로페닐)-2-히드록시에틸)-2-플루오로벤즈아미드 부분입체이성질체
반응식 75에서의 단계 2, 3, 및 7에 따라, 각각의 거울상이성질체 풍부 시스-5-(3-((tert-부틸디메틸실릴)옥시)시클로헥실)피라진-2-아민을 브로민화시키고, 이어서 3-플루오로-4-(메톡시카르보닐)페닐)보론산과 스즈키 커플링하였다. 가수분해 후, 반응식 75에서의 단계 8에 따라, (S)-2-아미노-2-(3-클로로페닐)에탄올 및 각각의 거울상이성질체를 사용하여, 시스-4-(3-아미노-6-(3-히드록시시클로헥실)피라진-2-일)-N-((S)-1-(3-클로로페닐)-2-히드록시에틸)-2-플루오로벤즈아미드의 각각의 거울상이성질체를 각각 수득하였다. 극성 전구체로부터의 시스 부분입체이성질체에 대해, LCMS (m/z): 485.0 (MH+), 0.70분;
1H NMR (400 MHz, 메탄올-d4) δ ppm 7.90 - 7.69 (m, 2 H) 7.64 - 7.48 (m, 2 H) 7.37 (s, 1 H) 7.30 - 7.09 (m, 3 H) 5.10 (t, J=6.06 Hz, 1 H) 3.89 - 3.69 (m, 2 H) 3.66 - 3.47 (m, 1 H) 2.79 - 2.60 (m, 1 H) 2.06 (d, J=11.74 Hz, 1 H) 1.97 - 1.68 (m, 3 H) 1.52 - 1.26 (m, 3 H) 1.24 -0.99 (m, 1 H).
덜 극성의 전구체로부터의 시스 부분입체이성질체에 대해, LCMS (m/z): 485.0 (MH+), 0.70분.
1H NMR (400 MHz, 메탄올-d4) δ ppm 7.88 - 7.70 (m, 2 H) 7.65 - 7.49 (m, 2 H) 7.37 (s, 1 H) 7.32 - 6.98 (m, 3 H) 5.10 (s, 1 H) 3.76 (t, J=6.06 Hz, 2 H) 3.58 (s, 1 H) 2.79- 2.59 (m, 1 H) 2.06 (d, J=12.13 Hz, 1 H) 1.97 - 1.61 (m, 3 H) 1.54 - 1.30 (m, 3 H) 1.25 -0.96 (m, 1 H).
2종의 부분입체이성질체에 대한 시클로헥산 고리 상의 절대 입체화학이 결정된 바 있다.
실시예 200 및 201
4-(3-아미노-6-(테트라히드로-2H-피란-4-일)피라진-2-일)-2-플루오로-N-((1S,2R)-2-페닐시클로프로필)벤즈아미드 및 4-(3-아미노-6-(테트라히드로-2H-피란-4-일)피라진-2-일)-2-플루오로-N-((1R,2S)-2-페닐시클로프로필)벤즈아미드의 합성
반응식 93
Figure 112016034409922-pct00188
반응식 89에서의 단계 2에 따라, (+/-)-트랜스-2-페닐시클로프로판아민, EDC (30.2 mg, 0.158 mmol), HOAt (17.2 mg, 0.126 mmol), 및 DIEA (0.033 mL, 0.189 mmol)를 사용하여, (+/-)-트랜스-4-(3-아미노-6-(테트라히드로-2H-피란-4-일)피라진-2-일)-2-플루오로-N-(2-페닐시클로프로필)벤즈아미드를 수득하였다 (19 mg, 70%). LCMS (m/z): 433.2 (MH+), 0.82분;
1H NMR (400MHz, CDCl3) δ ppm 8.29-8.22 (m, 1 H), 7.94 (s, 1 H), 7.76-7.71 (m, 1 H), 7.63-7.56 (m, 1 H), 7.35-7.18 (m, 4 H), 7.04-6.94 (m, 1 H), 4.67 (s, 2 H), 4.09 (m, 2 H), 3.35 (m, 2 H), 3.15 (m, 1 H), 2.93 (m, 1 H), 2.22 (m, 1 H), 2.90-1.8 (m, 4 H), 1.43-1.23 (m, 3 H).
라세미 생성물을 키랄 SFC (키랄팩 5mic AD-H 칼럼, 4.6x100 (mm), 헵탄:EtOH= 50/50, 1mL/분)에 의해 분해하였다. RT = 11.0분에서의 극성 4-(3-아미노-6-(테트라히드로-2H-피란-4-일)피라진-2-일)-2-플루오로-N-((1S,2R)-2-페닐시클로프로필)벤즈아미드 (27%)에 대해, LCMS (m/z): 433.2 (MH+), 0.81분. RT = 15.8분에서의 덜 극성의 부분입체이성질체 4-(3-아미노-6-(테트라히드로-2H-피란-4-일)피라진-2-일)-2-플루오로-N-((1R,2S)-2-페닐시클로프로필)벤즈아미드 (+/-)-트랜스-4-(3-아미노-6-(테트라히드로-2H-피란-4-일)피라진-2-일)-2-플루오로-N-(2-페닐시클로프로필)벤즈아미드 (27%)에 대해, LCMS (m/z): 433.2 (MH+), 0.81분. 절대 입체화학을 생화학적 데이터 및 도킹 모델을 기준으로 하여 지정하였다.
실시예 202 및 203
4-(3-아미노-6-((1r,4S)-4-히드록시시클로헥실)피라진-2-일)-2-플루오로-N-((1S,2R)-2-페닐시클로프로필)벤즈아미드 및 4-(3-아미노-6-((1r,4R)-4-히드록시시클로헥실)피라진-2-일)-2-플루오로-N-((1R,2S)-2-페닐시클로프로필)벤즈아미드의 합성
반응식 94
Figure 112016034409922-pct00189
반응식 89에서의 단계 2에 따라, (+/-)-트랜스-2-페닐시클로프로판아민 (48.6 mg, 0.37 mmol), EDC (127 mg, 0.66 mmol), HOAt (67.8 mg, 0.498 mmol), 및 DIEA (0.174 mL, 0.996 mmol)를 사용하여, (+/-)-트랜스-4-(3-아미노-6-(테트라히드로-2H-피란-4-일)피라진-2-일)-2-플루오로-N-(2-페닐시클로프로필)벤즈아미드를 수득하였으며 (40 mg, 97%), 이를 키랄 SFC (키랄팩 5mic OJ 칼럼, 4.6x100 (mm), CO2/IPA+0.1% DEA=60/40, SFC=5ml/분)로 분리하였다. 극성 부분입체이성질체는 4-(3-아미노-6-((1r,4S)-4-히드록시시클로헥실)피라진-2-일)-2-플루오로-N-((1S,2R)-2-페닐시클로프로필)벤즈아미드 (Rt = 1.38분)였다. LCMS (m/z): 447.3 (MH+), 0.76분;
1H NMR (500MHz, CD3OD) δ ppm 7.89 - 7.78 (m, 2H), 7.72 - 7.53 (m, 2H), 7.33 - 7.23 (m, 2H), 7.24 - 7.10 (m, 3H), 3.68 -3.53 (m, 1H), 3.14 - 3.03 (m, 1H), 2.74 - 2.56 (m, 1H), 2.27 - 2.13 (m, 1H), 2.12 - 1.88 (m, 4H), 1.77 - 1.57 (m, 2H), 1.52 - 1.29 (m, 4H).
덜 극성의 부분입체이성질체는 4-(3-아미노-6-((1r,4R)-4-히드록시시클로헥실)피라진-2-일)-2-플루오로-N-((1R,2S)-2-페닐시클로프로필)벤즈아미드 (Rt = 1.82분)였다. LCMS (m/z): 447.3 (MH+), 0.75분;
1H NMR (500MHz, CD3OD) δ ppm 7.89 - 7.78 (m, 2H), 7.72 - 7.53 (m, 2H), 7.33 - 7.23 (m, 2H), 7.24 - 7.10 (m, 3H), 3.68 - 3.53 (m, 1H), 3.14 - 3.03 (m, 1H), 2.74 - 2.56 (m, 1H), 2.27 - 2.13 (m, 1H), 2.12 - 1.88 (m, 4H), 1.77 - 1.57 (m, 2H), 1.52 - 1.29 (m, 4H).
절대 입체화학을 생화학적 데이터 및 도킹 모델을 기준으로 하여 지정하였다.
실시예 204
4-(2-아미노-5-(테트라히드로-2H-피란-4-일)피리딘-3-일)-N-벤질-2-시아노-6-플루오로벤즈아미드의 합성
반응식 95
Figure 112016034409922-pct00190
단계 1. 4-클로로-2-플루오로-6-아이오도벤조산
250 mL 플라스크에 4-클로로-2-플루오로벤조산 (4 g, 22.92 mmol), Pd(OAc)2 (0.257 g, 1.146 mmol), 아이오도벤젠 디아세테이트 (8.12 g, 25.2 mmol), 아이오딘 (6.40 g, 25.2 mmol) 및 DMF (60 mL)를 첨가하였다. 용액을 질소 분위기 하에 100℃에서 20시간 동안 가열하였다. LCMS는 4-클로로-2-플루오로벤조산의 약 절반이 생성물로 전환되었음을 나타내었다 (LCMS 체류 시간 0.98분, MH+ 피크 없음). 실온으로 냉각시킨 후, 용액을 EtOAc로 희석하고, 1 N HCl로 3회 세척하였다. 수성 층을 합하고, EtOAc로 1회 추출하였다. 유기 층을 합하고, Na2SO4 상에서 건조시키고, 농축시켜 암갈색 오일 (16.4 g, 42% 순도)을 수득하였으며, 이를 후속 단계에 정제 없이 사용하였다.
단계 2. 메틸 4-클로로-2-플루오로-6-아이오도벤조에이트
4-클로로-2-플루오로-6-아이오도벤조산 (16.4 g, 22.93 mmol, 4-클로로-2-플루오로벤조산과 함께)을 DMF (30 mL) 중에 용해시켰다. Cs2CO3 (8.96 g, 27.5 mmol)을 첨가하고, 이어서 MeI (1.577 mL, 25.2 mmol)를 첨가하였다. 실온에서 90분 후. LCMS는 반응이 완결되었음 (체류 시간 1.06분, MH+ 피크 없음)을 나타내었다. 이를 EtOAc로 희석하고, 여과지의 조각을 통해 여과하였다. 여과물을 물로 3회 세척하였다. 수성 층을 합하고, EtOAc로 1회 추출하였다. 유기 층을 합하고, Na2SO4 상에서 건조시키고, 농축시켰다. 잔류물을 실리카 겔 칼럼 (헵탄:EtOAc 1:0에서 9:1) 상에서 정제하여 대략 1:1 비의 메틸 4-클로로-2-플루오로-6-아이오도벤조에이트 및 메틸 4-클로로-2-플루오로벤조에이트의 혼합물 (1.99 g)을 수득하였다.
단계 3. 메틸 4-클로로-2-시아노-6-플루오로벤조에이트
메틸 4-클로로-2-플루오로-6-아이오도벤조에이트 (1.99 g, 10.6 mmol)를 DMF (12 mL) 중에 용해시켰다. CuCN (2.84 g, 31.7 mmol)을 첨가하고, 현탁액을 마이크로웨이브 하에 110℃에서 18분 동안 가열하였다. EtOAc를 첨가하고, 현탁액을 여과지의 조각을 통해 여과하였다. 여과물을 물로 3회 세척하였다. 수성 층을 합하고, EtOAc로 1회 추출하였다. 유기 층을 합하고, Na2SO4 상에서 건조시키고, 농축시켰다. 잔류물을 실리카 겔 칼럼 (헵탄:EtOAc 1:0에서 9:1) 상에서 정제하여 생성물을 무색 고체 (505 mg)로서 수득하였다.
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ ppm 7.56 (s, 1H), 7.40 (d, 1H, J=8 Hz), 4.00 (s, 3H); 13C NMR (100 MHz, CDCl3) δ ppm 161.78 (d, J=58 Hz), 159.44, 139.16 (d, J=11 Hz), 129.96, 121.99, 121.74, 115.48, 114.72, 53.04.
단계 4. 메틸 4-(2-아미노-5-(테트라히드로-2H-피란-4-일)피리딘-3-일)-2-시아노-6-플루오로벤조에이트
2 mL 마이크로웨이브 바이알에 5-(테트라히드로-2H-피란-4-일)-3-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-디옥사보롤란-2-일)피리딘-2-아민 (638 mg, 1.049 mmol), 메틸 4-클로로-2-시아노-6-플루오로벤조에이트 (140 mg, 0.655 mmol), Pd2(dba)3 (30.0 mg, 0.033 mmol), XPhos (31.2 mg, 0.066 mmol), NaHCO3 (275 mg, 3.28 mmol), DME (3 mL) 및 H2O (1.5 mL)를 첨가하였다. 용액을 마이크로웨이브 하에 100℃에서 15분 동안 가열하였다. 물 및 EtOAc를 첨가하고, 수성 층을 EtOAc로 3회 추출하였다. 유기 층을 합하고, Na2SO4 상에서 건조시키고, 농축시켰다. 잔류물을 실리카 겔 칼럼 (헵탄:EtOAc 1:0에서 1:4) 상에서 정제하여 생성물을 황색 발포체 (85 mg)로서 수득하였다. LCMS (m/z) 356.1 (MH+), 0.58분.
단계 5. 4-(2-아미노-5-(테트라히드로-2H-피란-4-일)피리딘-3-일)-2-시아노-6-플루오로벤조산
메틸 4-(2-아미노-5-(테트라히드로-2H-피란-4-일)피리딘-3-일)-2-시아노-6-플루오로벤조에이트 (85 mg, 0.239 mmol) 및 수산화리튬 1수화물 (11.04 mg, 0.263 mmol)에 THF (1 mL) 및 H2O (1.000 mL)를 첨가하였다. 용액을 실온에서 3시간 동안 교반하였다. 모든 용매를 증발시켜 조 생성물의 리튬 염을 황색 고체 (92 mg)로서 수득하였으며, 이를 후속 단계에 정제 없이 사용하였다. LCMS (m/z) 342.0 (MH+), 0.42분,
단계 6. 4-(2-아미노-5-(테트라히드로-2H-피란-4-일)피리딘-3-일)-N-벤질-2-시아노-6-플루오로벤즈아미드
4-(2-아미노-5-(테트라히드로-2H-피란-4-일)피리딘-3-일)-2-시아노-6-플루오로벤조산에 DCM (1 mL)에 이어서 벤질아민 (0.017 mL, 0.153 mmol), 트리에틸아민 (0.053 mL, 0.383 mmol) 및 T3P (EtOAc 중 50%, 0.084 mL, 0.141 mmol)를 첨가하였다. 1시간 후, 추가의 벤질아민 (0.017 mL, 0.153 mmol) 및 T3P (EtOAc 중 50%, 0.084 mL, 0.141 mmol)를 첨가하고, 2시간에서 반응이 완결되었다. 포화 NaHCO3 용액을 첨가하고, EtOAc로 2회 추출하였다. 유기 층을 합하고, Na2SO4 상에서 건조시키고, 농축시켰다. 잔류물을 실리카 겔 칼럼 (헵탄:EtOAc 1:0에서 0:1) 상에서 정제하여 생성물을 무색 고체 (17 mg)로서 수득하였다. LCMS (m/z) 431.1 (MH+), 0.65분.
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ ppm 8.03 (s, 1 H), 7.74 (s, 1 H), 7.54 (d, 1 H, J 12 Hz), 7.43-7.30 (m, 4 H) 7.26 (s, 1 H), 7.23 (s, 1 H) 6.57 (br s, 1 H), 4.74 (d, J 5.53 Hz, 2 H), 4.10 -4.06 (m, 2 H), 3.55 -3.46 (m, 2 H), 2.77 -2.67 (m, 1H), 1.80 -1.70 (m, 4 H).
실시예 205
4-(2-아미노-5-(테트라히드로-2H-피란-4-일)피리딘-3-일)-2-플루오로-N-((6-메틸피리딘-2-일)메틸)벤즈아미드의 합성
반응식 96
Figure 112016034409922-pct00191
단계 1. (E)-에틸 3-(6-아미노피리딘-3-일)아크릴레이트
유리 용기에 DMF (40 mL) 중 5-브로모피리딘-2-아민 (10.0 g, 57.8 mmol), 에틸 아크릴레이트 (8.14 mL, 75 mmol) 및 DIEA (25.2 mL, 144mmol)를 채웠다. 혼합물을 아르곤으로 퍼징하고, 이어서 Pd(OAc)2 (0.649 g, 2,89 mmol) 및 (o-Tol)3P (3.87 g, 12.72 mmol)를 첨가하고, 최종적으로 아르곤으로 완전히 퍼징하였다. 혼합물을 밀봉하고, 100℃ 오일 조를 사용하여 밤새 가열하였다. 반응 혼합물을 실온으로 냉각시키고, 여과물을 셀라이트의 박층을 통해 여과함으로써 제거하였다. 여과물을 회전증발기를 통해 가능한 한 많이 농축시키고, 잔류물을 EtOAc/물 (150 mL/100 mL) 사이에 분배하였다. EtOAc 층을 물 (2 x 100 mL)로 세척하고, Na2SO4 상에서 건조시키고, 농축시켰다. 갈색 고체를 조 생성물로서 수득하였다. 조 생성물을 EtOAc (40 mL)로 연화처리하고, 황색 고체를 여과에 의해 수집하였다. 필터 케이크를 소량의 EtOAc로 헹구고, 생성물의 제1 수확물 (5.0 g)로서 진공 하에 건조시켰다. 연화처리로부터의 모액을 묽은 수성 1 N HCl (30 mL) 및 물 (70 mL)에 의해 스트리핑하였다. 수성 층을 깨끗한 분리 깔때기에 옮기고, 20 mL 포화 Na2CO3으로 염기성화시키고, EtOAc (60 mL)로 추출하였다. EtOAc 층을 Na2SO4 상에서 건조시키고, 농축시키고, 생성물의 제2 부분 (4.0 g)을 수득하였다. 생성물의 2종의 수확물을 합하여 81% 수율을 수득하였다. LCMS (m/z) 193.2 (MH+), 0.39분.
단계 2. (E)-에틸 3-(6-(비스(tert-부톡시카르보닐)아미노)피리딘-3-일)아크릴레이트
THF (150 mL) 중 (E)-에틸 3-(6-아미노피리딘-3-일)아크릴레이트 (6.6 g, 34.3 mmol) 및 DMAP (0.21 g, 1.7 mmol)의 용액에 디-tert-부틸 디카르보네이트 (15.7 g, 71.9 mmol)를 첨가하였다. 혼합물을 실온에서 밤새 교반하였다. 반응물을 농축시키고, 갈색 고체를 조 (E)-에틸 3-(6-(비스(tert-부톡시카르보닐)아미노)피리딘-3-일)아크릴레이트 (12.5 g, 93%)로서 수득하였다. LCMS (m/z) 237.4 (MH+) 0.98분.
단계 3. 트리메틸 2-(6-(tert-부톡시카르보닐아미노)피리딘-3-일)프로판-1,1,3-트리카르복실레이트 및 테트라메틸 2-(6-아미노피리딘-3-일)프로판-1,1,1,3-테트라카르복실레이트
무수 MeOH (50mL)로 채워진 불꽃 플라스크에, 함량물을 0℃로 냉각시켰다. 플라스크에 수소화나트륨 (3.18 g, 분산액 미네랄오일 중 60%, 80 mmol)을 제어 하의 기체 발생과 함께 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 기체 발생이 중단될 때까지 교반하였다. 여기에 새로이 제조한 NaOMe/MeOH 용액에 디메틸 말로네이트 (10.52 g, 80 mmol)를 첨가하고, 혼합물을 실온에서 20분 동안 교반하였다. 혼합물은 우윳빛 슬러리로 변하였다. 우윳빛 슬러리를 25 mL 무수 MeOH로 희석하고, 플라스크에 수소화나트륨 (12.5 g, 31.9 mmol)을 사용하여 경사분리하였다. 반응 혼합물 슬러리를 실온에서 15분 동안 교반한 다음, 환류 하에 밤새 가열하였다. 반응 혼합물을 실온으로 냉각시키고, 농축시켰다. 잔류물을 EtOAc/H2O (100 mL/100 mL) 사이에 분배하였다. EtOAc 층을 1 N NaOH (3 x 30 mL), 염수 (30 mL)로 세척하고, Na2SO4 상에서 건조시키고, 농축시켰다. 담갈색 오일을 조 생성물로서 수득하였다. 조 생성물을 플래쉬 크로마토그래피에 의해 구배 EtOAc/CH2Cl2로 용리시키면서 정제하였다. 2개의 주요 피크를 단리시키고, 트리메틸 2-(6-(tert-부톡시카르보닐아미노)피리딘-3-일)프로판-1,1,3-트리카르복실레이트 (2.65 g, 20.3% 수율) 및 테트라메틸 2-(6-아미노피리딘-3-일)프로판-1,1,1,3-테트라카르복실레이트 (1.89 g, 16% 수율)로서 수집하였다. 2종의 생성물을 LCMS 및 1H NMR에 의해 특징화하고, 확인하였다. 트리메틸 2-(6-(tert-부톡시카르보닐아미노)피리딘-3-일)프로판-1,1,3-트리카르복실레이트에 대해. LCMS (m/z) 411.5 (MH+), 0.64분;
1H NMR (CDCl3) δ ppm 8.15 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 7.88 (d, J = 8.6 Hz, 1H), 7.60 - 7.52 (m, 2H), 3.90 (td, J = 9.8, 4.7 Hz, 1H), 3.76 (s, 3H), 3.56 (s, 3H), 3.55 (s, 3H), 2.92 - 2.81 (m, 1H), 2.80 - 2.69 (m, 1H), 1.53 (s, 9H).
테트라메틸 2-(6-아미노피리딘-3-일)프로판-1,1,1,3-테트라카르복실레이트에 대해: LCMS (m/z) 369.5 (MH+) 0.47분;
1H NMR (CDCl3) δ ppm 8.31 (s, 1H), 8.19 (d, J = 2.3 Hz, 1H), 7.93 (d, J = 8.6 Hz, 1H), 7.60 (dd, J = 8.6, 2.3 Hz, 1H), 3.92 (td, J = 9.7, 4.9 Hz, 1H), 3.82 (s, 3H), 3.76 (s, 3H), 3.57 (s, 3H), 3.55 (s, 3H), 2.93 - 2.82 (m, 1H), 2.81- 2.70 (m, 1H).
단계 4. 디메틸 3-(6-아미노피리딘-3-일)펜탄디오에이트
MeOH (30 mL) 중 트리메틸 2-(6-(tert-부톡시카르보닐아미노)피리딘-3-일)프로판-1,1,3-트리카르복실레이트 (2.5 g, 6.1 mmol) 및 테트라메틸 2-(6-아미노피리딘-3-일)프로판-1,1,1,3-테트라카르복실레이트 (1.8 g, 4.9 mmol)의 혼합물에 수성 NaOH 용액 (5 mL 물 중 2.44 g NaOH, 60.9 mmol)을 첨가하였다. 생성된 혼합물을 환류 하에 오일 조에 의해 1시간 동안 가열하였다. 반응 혼합물을 실온으로 냉각시키고, 회전증발기를 통해 감압 하에 농축시켰다. 농축된 잔류물에 물 (15 mL) 및 진한 HCl (3 mL)을 첨가하였다. 생성된 혼합물을 환류 하에 밤새 가열하였다. 반응 혼합물을 냉각시키고, 회전증발기를 통해 감압 하에 농축시키고, 고체를 수득하였다. 수득된 고체 잔류물을 메탄올 (100 mL)로 연화처리하고, 침전물을 여과에 의해 제거하고, 담색 여과물을 수득하였다. 여과물에 진한 HCl (200 μL)을 첨가하고, 생성된 혼합물을 환류 하에 외부 오일 조를 통해 1시간 동안 가열하였다. 반응 혼합물을 냉각시키고, 농축시켰다. 잔류물을 EtOAc/포화 NaHCO3 (50 mL/50 mL) 사이에 분배하였다. 수성 층을 EtOAc (50 mL)로 추출하였다. EtOAc 추출물을 합하고, 염수 (50 mL)로 세척하고, Na2SO4 상에서 건조시키고, 농축시켰다. 백색 고체를 목적 디메틸 3-(6-아미노피리딘-3-일)펜탄디오에이트 (2.6 g, 10.31 mmol, 93.9% 수율)로서 수득하였다. LCMS (m/z) 253.2 (MH+) 0.38분;
1H NMR (CDCl3) δ ppm 7.95 (d, J = 2.3 Hz, 1H), 7.32 (dd, J = 8.2, 2.3 Hz, 1H), 6.46 (d, J = 8.6 Hz, 1H), 4.37 (br. s., 2H), 3.61 (s, 6H), 3.55 (quin, J = 7.5 Hz, 1H), 2.80 -2.66 (m, 2H), 2.65- 2.51 (m, 2H).
단계 5. 3-(6-아미노피리딘-3-일)펜탄-1,5-디올
0℃에서 알루미늄 (III) 수소화리튬/THF 슬러리 (60 mL THF 중 0.94g, 25 mmol)에 디메틸 3-(6-아미노피리딘-3-일)펜탄디오에이트/THF 용액 (2.5 g, 30 mL THF 중 9.9 mmol)을 ~10분에 걸쳐 첨가하였다. 슬러리를 0℃에서 40분 동안 교반한 다음, 실온에서 45분 동안 교반하였다. 혼합물을 0℃로 냉각시키고, 물 (0.96 mL) (제어 하에 기체 발생과 함께)에 이어서, 15% 수성 NaOH (0.96 mL), 및 물 (2.9 mL)의 순차적 첨가로 켄칭하였다. 켄칭한 혼합물을 실온에서 30분 동안 교반하였다. 침전물을 여과에 의해 제거하였다. 여과물을 농축시키고, 담황색 고체 (1.97 g, 정량적 수율)를 3-(6-아미노피리딘-3-일)펜탄-1,5-디올로서 수득하였다. LCMS (m/z) 197.2 (MH+) 0.22분.
단계 6. 5-(테트라히드로-2H-피란-4-일)피리딘-2-아민
3-(6-아미노피리딘-3-일)펜탄-1,5-디올/톨루엔 혼합물 (1.96 g, 40 mL 중 10 mmol)에 1 mL 물을 첨가하여 용해를 도운 다음, 진한 H2SO4 (98%, 1.6 mL, 30 mmol)를 첨가하였다. 생성된 혼합물을 딘-스타크를 사용하여 환류 하에 가열하여 반응 혼합물로부터 1시간 20분 동안 물을 제거하였다. 반응 혼합물을 실온으로 냉각시키고, 농축시켰다. 잔류물을 빙냉수 (15 mL)로 희석하고, 고체 Na2CO3 (4 g)으로 중화시키고, EtOAc (3 x 30 mL)로 추출하였다. EtOAc 추출물을 합하고, 염수 (30mL)로 세척하고, Na2SO4 상에서 건조시키고, 농축시켰다. 담황색 고체를 조 5-(테트라히드로-2H-피란-4-일)피리딘-2-아민으로서 수득하였다. LCMS (m/z) 179.2 (MH+) 0.33분;
1H NMR (CDCl3) δ ppm 7.95 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 7.32 (dd, J = 8.2, 2.3 Hz, 1H), 6.49 (d, J = 8.2 Hz, 1H), 4.34 (br. s., 2H), 4.11 - 3.99 (m, 2H), 3.51 (td, J = 11.2, 3.3 Hz, 2H), 2.73 -2.56 (m, 1H), 1.75 -1.69 (m, 4H).
단계 7. 3-브로모-5-(테트라히드로-2H-피란-4-일)피리딘-2-아민
0-5℃에서 5-(테트라히드로-2H-피란-4-일)피리딘-2-아민 /아세토니트릴 용액 (1.4 g, 7.85 mmol/30 mL)에 내부 온도를 5℃ 미만으로 제어하면서 NBS (1.4 g, 7.85 mmol)를 조금씩 첨가하였다. 생성된 혼합물을 0℃에서 1시간 40분 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 감압 하에 농축시키고, 잔류물을 묽은 수성 NaOH/H2O (1 g/30 mL)로 연화처리하였다. 고체 현탁액을 여과에 의해 수집하였다. 필터케이크를 빙냉수 (~10 mL)로 세척하고, 여과물을 합하고, EtOAc (20 mL)로 추출하였다. EtOAc 추출물을 염수 (20 mL)로 세척하고, Na2SO4 상에서 건조시키고, 농축시켰다. 담황색 고체를 필터 케이크와 합하고, 조 3-브로모-5-(테트라히드로-2H-피란-4-일)피리딘-2-아민으로서 고진공 하에 건조시켰다. LCMS (m/z) 257.1/259.1 (MH+) 0.39분.
1H NMR (CDCl3) δ ppm 7.90 (d, J = 1.6 Hz, 1H), 7.54 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 4.80 (br. s., 1H), 4.12 -4.02 (m, 2H), 3.54 -3.44 (m, 2H), 2.71 - 2.61 (m, 1H), 1.78 -1.68 (m, 4H).
단계 8. 4-(2-아미노-5-(테트라히드로-2H-피란-4-일)피리딘-3-일)-2-플루오로벤조산
마이크로웨이브 바이알에 3-브로모-5-(테트라히드로-2H-피란-4-일)피리딘-2-아민 (500 mg, 1.95 mmol), 4-보로노-2-플루오로벤조산 (1.07 g, 5.83 mmol), 수성 Na2CO3 (2 M, 4.86 mL) 및 DME (10 mL)를 채웠다. 혼합물을 아르곤으로 퍼징한 다음, 이어서 Pd(PPh3)4 (225 mg, 0.194 mmol)를 첨가하였다. 혼합물을 아르곤으로 퍼징하고, 밀봉하고, 마이크로웨이브 반응기를 통해 125℃에서 20분 동안에 이어서 130℃에서 추가로 40분 동안 가열하였다. 반응 혼합물의 DME 층을 수집하고, 고체 침전물을 메탄올 (2 x 10 mL)로 연화처리하였다. 메탄올 상청액을 DME 층과 합하고, 농축시켰다. 수득된 잔류물을 Et2O (2 x 60 mL)와 함께 교반하고, Et2O 상청액을 버렸다. 고체 잔류물을 EtOAc (20 mL)와 수성 HCl (1N, 20 mL) 사이에 분배하였다. EtOAc 층을 1N HCl (2 x 5 mL)을 사용하여 스트리핑하고, 수성 층을 합하였다. 수성 층을 감압 하에 농축시키고, 수득된 담황색 고체를 메탄올 (8 mL)로 연화처리하였다. 상청액을 여과에 의해 단리시키고, 농축시켰다. 4-(2-아미노-5-(테트라히드로-2H-피란-4-일)피리딘-3-일)-2-플루오로벤조산 (0.844 g, 2.67 mmol, 137% 수율)을 담황색 발포체로서 수득하였다. LCMS (m/z) 317.2 (MH+) 0.46분.
단계 9. (E)-6-메틸피콜린알데히드 옥심
6-메틸피콜린알데히드 에탄올 용액 (642 mg, 5.3 mmol/2.1 mL)에 히드록시아민 히드로클로라이드 (368 mg, 5.3 mmol) 및 K2CO3 수용액 (0.88 g/4.2 mL)을 첨가하였다. 이어서, 생성된 용액을 환류 하에 외부 오일 조를 통해 30분 동안 가열하였다. 반응 혼합물을 0℃로 냉각시키고, 30분 동안 교반하였다. 백색 고체 현탁액을 여과에 의해 수집하고, 필터 케이크를 일부 빙냉수로 세척하였다. 필터 케이크를 공기 건조시키고, 고진공 하에 제1 수확 생성물 (0.565 g)로서 추가로 건조시켰다. 여과물을 합하고, 농축 건조시켰다. 잔류물을 물 (2 mL) 중에 재용해시키고, 0℃로 냉각시키고, 20분 동안 교반하였다. 고체 생성물을 여과를 통해 생성물의 제2 수확물 (70 mg)로서 담황색 고체로서 수집하였다. 생성물의 제2 수확물을 합하여 (E)-6-메틸피콜린알데히드 옥심 (88%)을 수득하였다. LCMS (m/z) 136.9 (MH+) 0.21분.
단계 10. (6-메틸피리딘-2-일)메탄아민
(E)-6-메틸피콜린알데히드 옥심 (0.635 g, 4.66 mmol)/아세트산 (267 μL, 4.66 mmol)/에탄올 (10 mL) 용액에 아연 분진 (5.19 g, 79 mmol)을 30분에 걸쳐 조금씩 첨가하였다. 생성된 혼합물을 추가로 30분 동안 교반하였다. 반응 분취물의 LCMS는 반응물이 완결되었음을 나타내었다. 반응 혼합물 중 아연 침전물을 여과에 의해 제거하고, 여과물을 농축시켰다. 잔류물을 과량의 포화 KOH (~ 7 mL)를 사용하여 pH > 12로 염기성화시키고, Et2O (30 mL)로 교반하였다. Et2O 층을 수집하고, Na2SO4 상에서 건조시키고, 농축시켰다. 잔류물을 EtOAc (15 mL) 중에 재용해시키고, Na2SO4 상에서 건조시키고, 농축시켰다. (6-메틸피리딘-2-일)메탄아민을 무색 오일 (385 mg, 3.15 mmol, 67.6%)로서 수득하였다. LCMS (m/z) 123.2 (MH+) 0.15분.
단계 11. 4-(2-아미노-5-(테트라히드로-2H-피란-4-일)피리딘-3-일)-2-플루오로-N-((6-메틸피리딘-2-일)메틸)벤즈아미드
바이알에 4-(2-아미노-5-(테트라히드로-2H-피란-4-일)피리딘-3-일)-2-플루오로벤조산 (20 mg, 0.063 mmol), (6-메틸피리딘-2-일)메탄아민 (11.6 mg, 0.095 mmol), DIEA (28 μL, 0.158 mmol), PyBOP (65.8, 0.126 mmol) 및 DMF (0.5 mL)를 채웠다. 혼합물을 실온에서 10분 동안 교반하였다. 이어서, 반응 혼합물을 정제용 HPLC에 의해 정제하고, 생성물 분획을 합하고, 동결시키고, 동결건조시켜 4-(2-아미노-5-(테트라히드로-2H-피란-4-일)피리딘-3-일)-2-플루오로-N-((6-메틸피리딘-2-일)메틸)벤즈아미드를 백색 분말로서 수득하였다. LCMS (m/z) 421.3 (MH+) 0.41분.
1H NMR (DMSO-d6) δ ppm 8.99 (d, J = 3.1 Hz, 1H), 7.95 -7.83 (m, 3H), 7.79 (t, J = 7.6 Hz, 1H), 7.53 (d, J = 11.7 Hz, 2H), 7.44 (dd, J = 8.0, 1.4 Hz, 1H), 7.24 (d, J = 7.4 Hz, 2H), 4.60 (d, J = 5.5 Hz, 2H), 4.02 - 3.88 (m, 2H), 3.40 (td, J = 11.2, 2.7 Hz, 3H), 2.88 - 2.71 (m, 1H), 2.51 (br. s., 3H), 1.82 - 1.58 (m, 4H).
실시예 206
(S)-4-(2-아미노-5-(1-(디플루오로메틸)-3-메틸-1H-피라졸-4-일)피리딘-3-일)-2-플루오로-N-(1-(3-플루오로-5-(플루오로메틸)페닐)-2-히드록시에틸)벤즈아미드의 합성
반응식 97
Figure 112016034409922-pct00192
단계 1. 메틸 4-(2-아미노-5-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-디옥사보롤란-2-일)피리딘-3-일)-2-플루오로벤조에이트:
메틸 4-(2-아미노-5-브로모피리딘-3-일)-2-플루오로벤조에이트 (2 g, 6.15 mmol), B2(PIN)2 (3.12 g, 12.30 mmol), PdCl2(dppf) (0.225 g, 0.308 mmol), KOAc (1.811 g, 18.45 mmol) 및 디옥산 (30.8 mL)의 혼합물을 오일 조에서 100℃에서 밤새 가열하였다. 반응 혼합물을 EtOAc로 추출하였다. 유기 층을 물 및 염수로 세척하고, Na2SO4 상에서 건조시키고, 여과하고, 진공 하에 농축시켰다. 조 생성물에, 에테르를 첨가하였다. 불용성 물질을 여과하여 메틸 4-(2-아미노-5-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-디옥사보롤란-2-일)피리딘-3-일)-2-플루오로벤조에이트를 갈색 고체 (79%)로서 수득하였다. LCMS (m/z): 291.2 (MH+), 0.44분 (보론산에 대해).
단계 2. 메틸 4-(2-아미노-5-(1-메틸-1H-피라졸-4-일)피리딘-3-일)-2-플루오로벤조에이트
조 메틸 4-(2-아미노-5-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-디옥사보롤란-2-일)피리딘-3-일)-2-플루오로벤조에이트 (712 mg, 1.912 mmol), 1-(디플루오로메틸)-4-아이오도-3-메틸-1H-피라졸 (740 mg, 2.87 mmol), PdCl2(dppf) (70.0 mg, 0.096 mmol), DME (7.899 mL), 및 2M Na2CO3 (3.95 mL)의 혼합물을 100℃에서 밤새 가열하였다. Na2SO4를 첨가하고, 이어서 EtOAc로 희석한 후, 반응 혼합물을 여과하고, 생성된 휘발성 물질을 진공 하에 농축시켰다. 조 생성물을 플래쉬 크로마토그래피에 의해 0-100%의 DCM 중 EtOAc로 용리시키면서 정제하였다. LCMS (m/z): 491.1 (MH+), 0.64분
단계 3. 4-(2-아미노-5-(1-메틸-1H-피라졸-4-일)피리딘-3-일)-2-플루오로벤조산
THF (6236 μL) 및 MeOH (3118 μL) 중 메틸 4-(2-아미노-5-(1-(디플루오로메틸)-3-메틸-1H-피라졸-4-일)피리딘-3-일)-2-플루오로벤조에이트 (352 mg, 0.935 mmol)의 용액에 LiOH (1 M 용액) (1684 μL, 1.684 mmol)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 교반하였다. 반응 혼합물에, 1 N HCl을 pH 5까지 첨가하였다. 반응 혼합물을 EtOAc로 추출하였다. 유기 층을 무수 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 진공 하에 농축시켜 조 4-(2-아미노-5-(1-(디플루오로메틸)-3-메틸-1H-피라졸-4-일)피리딘-3-일)-2-플루오로벤조산 (88%)을 수득하였다. LCMS (m/z): 363.3 (MH+), 0.51분.
단계 4. (S)-4-(2-아미노-5-(1-메틸-1H-피라졸-4-일)피리딘-3-일)-N-(1-(3-클로로페닐)-2-히드록시에틸)-2-플루오로벤즈아미드
DMF 중 4-(2-아미노-5-(1-(디플루오로메틸)-3-메틸-1H-피라졸-4-일)피리딘-3-일)-2-플루오로벤조산 (25 mg, 0.069 mmol)의 용액에 (S)-2-아미노-2-(3-플루오로-5-(플루오로메틸)페닐)에탄올 (15.50 mg, 0.083 mmol), EDC, HOAt, 및 DIEA를 첨가하였다. 반응 혼합물을 15시간 동안 교반하였다. 물을 첨가한 후, 반응 혼합물을 EtOAc로 후처리하였다. 유기 층을 Na2SO4 상에서 건조시키고, 여과하고, 진공 하에 농축시켰다. 조 생성물을 역상 정제용 HPLC에 의해 정제하였다. 순수한 분획을 동결건조시켜 (S)-4-(2-아미노-5-(1-(디플루오로메틸)-3-메틸-1H-피라졸-4-일)피리딘-3-일)-2-플루오로-N-(1-(3-플루오로-5-(플루오로메틸)페닐)-2-히드록시에틸)벤즈아미드 (50%)를 TFA 염으로서 수득하였다. LCMS (m/z): 532.2 (MH+), 0.65분;
1H NMR (400 MHz, CD3OD) δ ppm 8.23 (m, 1H), 7.97 (m, 1H), 7.93 (m, 1H), 7.82 (m, 1H), 7.51 - 7.30 (m, 3H), 7.2 (m, 1H), 7.09 (d, J = 8 Hz, 1H), 6.98 (d, J = 12 Hz, 1H), 5.30 (d, J = 44 Hz, 2H), 5.14 (m, 1H), 3.8 (m, 2H), 2.32 (s, 3H).
4-(2-아미노-5-(1-(디플루오로메틸)-5-메틸-1H-피라졸-4-일)피리딘-3-일)-2-플루오로벤조산의 합성
Figure 112016034409922-pct00193
반응식 97에서의 단계 2 및 3에 따라, 1,5-디메틸-4-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-디옥사보롤란-2-일)-1H-피라졸을 사용하여, 4-(2-아미노-5-(1-(디플루오로메틸)-5-메틸-1H-피라졸-4-일)피리딘-3-일)-2-플루오로벤조산을 수득하였다. LCMS (m/z): 363.1 (MH+), 0.53분.
4-(2-아미노-5-(1-메틸-1H-1,2,3-트리아졸-5-일)피리딘-3-일)-2-플루오로벤조산의 합성
Figure 112016034409922-pct00194
반응식 97에서의 단계 2 및 3에 따라, 5-아이오도-1-메틸-1H-1,2,3-트리아졸을 사용하여, 4-(2-아미노-5-(1-메틸-1H-1,2,3-트리아졸-5-일)피리딘-3-일)-2-플루오로벤조산을 수득하였다. LCMS (m/z): 314.3 (MH+), 0.38분.
4-(2-아미노-5-(1,5-디메틸-1H-피라졸-4-일)피리딘-3-일)-2-플루오로벤조산의 합성
Figure 112016034409922-pct00195
반응식 97에서의 단계 1 및 2에 따라, 메틸 4-(2-아미노-5-브로모피리딘-3-일)-2-플루오로벤조에이트 및 1,5-디메틸-4-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-디옥사보롤란-2-일)-1H-피라졸을 사용하여, 4-(2-아미노-5-(1,5-디메틸-1H-피라졸-4-일)피리딘-3-일)-2-플루오로벤조산을 수득하였다. LCMS (m/z): 327.1 (MH+), 0.45분.
4-(2-아미노-5-(1,5-디메틸-1H-피라졸-4-일)피리딘-3-일)-2-플루오로벤조산의 합성
Figure 112016034409922-pct00196
반응식 97에서의 단계 2 및 3에 따라, 메틸 4-(2-아미노-5-브로모피리딘-3-일)-2-플루오로벤조에이트 및 1,3-디메틸-4-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-디옥사보롤란-2-일)-1H-피라졸을 사용하여, 4-(2-아미노-5-(1,3-디메틸-1H-피라졸-4-일)피리딘-3-일)-2-플루오로벤조산을 수득하였다. LCMS (m/z): 327.2 (MH+), 0.47분.
4-(2-아미노-5-(1,5-디메틸-1H-피라졸-4-일)피리딘-3-일)-2-플루오로벤조산의 합성
Figure 112016034409922-pct00197
반응식 97에서의 단계 2 및 3에 따라, 메틸 4-(2-아미노-5-브로모피리딘-3-일)-2-플루오로벤조에이트 및 4-브로모-1-(디플루오로메틸)-5-메틸-1H-피라졸을 사용하여, 4-(2-아미노-5-(1,3-디메틸-1H-피라졸-4-일)피리딘-3-일)-2-플루오로벤조산을 수득하였다. LCMS (m/z): 341.2 (MH+), 0.47분.
(3S,4R)-4-(4-클로로-3-플루오로페닐)-1-메틸피롤리딘-3-아민의 합성
반응식 97b
Figure 112016034409922-pct00198
단계 1. (E)-1-클로로-2-플루오로-4-(2-니트로비닐)벤젠
아세트산 (168 mL) 중 4-클로로-3-플루오로벤즈알데히드 (8 g, 50.5 mmol) 및 아세트산암모늄 (9.72 g, 126 mmol)의 용액에 니트로메탄 (8.16 mL, 151 mmol)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 환류 하에 5시간 동안 가열하고, 냉각시켰다. 물 (100 mL)을 첨가하고, 혼합물을 실온에서 1시간 동안 교반하였다. 고체를 여과하고, 물로 세척하고, 진공 하에 건조시켰다. 고체를 플래쉬 크로마토그래피 (0-20% EtOAc/헵탄)에 의해 정제하여 깨끗한 생성물 4.2 g을 41% 수율로 수득하였다.
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ ppm 7.92 (d, J=13.7 Hz, 1H), 7.54 (d, J=13.8 Hz, 1H), 7.49 (d, J=7.5 Hz, 1H), 7.33 (dd, J=2.0, 9.3 Hz, 1H), 7.31 - 7.28 (m, 1H).
단계 2. (+/-)-(3R,4S)-3-(4-클로로-3-플루오로페닐)-1-메틸-4-니트로피롤리딘
(E)-1-클로로-2-플루오로-4-(2-니트로비닐)벤젠 (4.2 g, 20.84 mmol), 2-(메틸아미노)아세트산 (4.64 g, 52.1 mmol), 파라포름알데히드 (3.75 g, 125 mmol)를 건조 톨루엔 (104 mL) 중에 혼합하였다. 반응 혼합물을 환류 하에 딘-스타크를 사용하여 밤새 가열하였다. 반응 혼합물을 EtOAc와 물 사이에 분배하였다. 유기부를 포화 NaCl로 세척하고, Na2SO4 상에서 건조시키고, 농축시켰다. 조 물질을 플래쉬 크로마토그래피에 의해 정제하여 (+/-)-(3R,4S)-3-(4-클로로-3-플루오로페닐)-1-메틸-4-니트로피롤리딘을 45% 수율로 수득하였다. LCMS (m/z): 259.2 (MH+), 0.52분;
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ ppm 7.37 (t, J=8.0 Hz, 1H), 7.15 (dd, J=2.0, 10.2 Hz, 1H), 7.09 - 7.01 (m, 1H), 4.91 - 4.82 (m, 1H), 3.98 (d, J=5.1 Hz, 1H), 3.34 (dd, J=4.1, 10.8 Hz, 1H), 3.23 (t, J=8.6 Hz, 1H), 3.10 (dd, J=7.8, 10.6 Hz, 1H), 2.63 (dd, J=7.0, 9.4 Hz, 1H), 2.44 (s, 3H).
단계 3. (+/-)-(3S,4R)-4-(4-클로로-3-플루오로페닐)-1-메틸피롤리딘-3-아민
아연 분진 (5.76 g, 88 mmol)을 MeOH (29.4 mL) 및 아세트산 (30 mL, 524 mmol) 중 (+/-)-(3R,4S)-3-(4-클로로-3-플루오로페닐)-1-메틸-4-니트로피롤리딘 (2.28 g, 8.81 mmol)의 혼합물에 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 5시간 동안 교반하고, 여과하였다. 용매를 진공 하에 제거하였다. 잔류물을 pH 9로 중화시킨 다음, IPA:CHCl3 (3:7)로 추출하였다. 유기부를 Na2SO4 상에서 건조시키고, 여과하고, 농축시켰다. 조 생성물을 플래쉬 크로마토그래피 (DCM/메탄올/ NH3 90:9:1)에 의해 정제하여 (+/-)-(3S,4R)-4-(4-클로로-3-플루오로페닐)-1-메틸피롤리딘-3-아민을 40% 수율로 수득하였다. LCMS (m/z): 229.2 (MH+), 0.25분.
(+/-)-(3S,4R)-4-(3-클로로-4-플루오로페닐)-1-메틸피롤리딘-3-아민의 합성
Figure 112016034409922-pct00199
반응식 97b에 따라, 3-클로로-4-플루오로벤즈알데히드 (3.92 g, 24.72 mmol)를 사용하여, (+/-)-(3S,4R)-4-(3-클로로-4-플루오로페닐)-1-메틸피롤리딘-3-아민을 수득하였다. LCMS (m/z): 229.0 (MH+), 0.32분.
실시예 207 및 208
트랜스-4-(2-아미노-5-(1-메틸-1H-피라졸-4-일)피리딘-3-일)-N-((3S,4R)-4-(3-클로로-4-플루오로페닐)-1-메틸피롤리딘-3-일)-2-플루오로벤즈아미드 및 트랜스-4-(2-아미노-5-(1-메틸-1H-피라졸-4-일)피리딘-3-일)-N-((3R,4S)-4-(3-클로로-4-플루오로페닐)-1-메틸피롤리딘-3-일)-2-플루오로벤즈아미드의 합성
반응식 98
Figure 112016034409922-pct00200
반응식 89에서의 단계 2에 따라, (+/-)-(3S,4R)-4-(3-클로로-4-플루오로페닐)-1-메틸피롤리딘-3-아민을 사용하여, 4-(2-아미노-5-(1-메틸-1H-피라졸-4-일)피리딘-3-일)-N-((3S,4R)-4-(3-클로로-4-플루오로페닐)-1-메틸피롤리딘-3-일)-2-플루오로벤즈아미드를 70% 수율로 수득하였다. LCMS (m/z): 523.3 (MH+), 0.56분. 조 라세미 혼합물을 키랄 SFC (키랄팩 5mic OD 칼럼, 4.6x100 (mm), IPA+0.1% DEA=30%, 5mL/분)에 의해 분해하였다. 극성 부분입체이성질체 (Rt = 2.37분)에 대해, LCMS (m/z): 523.2 (MH+), 0.57분;
1H NMR (400 MHz, CD3OD) δ ppm 8.19 (d, J=2.0 Hz, 1H), 7.91 (s, 1H), 7.79 - 7.73 (m, 2H), 7.63 (d, J=2.3 Hz, 1H), 7.52 (dd, J=2.3, 7.0 Hz, 1H), 7.46 - 7.29 (m, 3H), 7.26 - 7.13 (m, 1H), 4.66 (d, J=6.3 Hz, 1H), 3.45 - 3.37 (m, 1H), 3.21 (t, J=9.0 Hz, 1H), 3.16 - 3.08 (m, 1H), 2.82 (dd, J=5.7, 10.0 Hz, 1H), 2.70 (t, J=9.2 Hz, 1H), 2.54 - 2.41 (m, 3H), 1.27 (d, J=17.6 Hz, 1H).
덜 극성의 부분입체이성질체 (Rt = 3.96분)에 대해, LCMS (m/z): 523.2 (MH+), 0.58분;
1H NMR (400 MHz, CD3OD) δ ppm 8.19 (d, J=2.0 Hz, 1H), 7.91 (s, 1H), 7.79 - 7.73 (m, 2H), 7.63 (d, J=2.3 Hz, 1H), 7.52 (dd, J=2.3, 7.0 Hz, 1H), 7.46 - 7.29 (m, 3H), 7.26 - 7.13 (m, 1H), 4.66 (d, J=6.3 Hz, 1H), 3.45 - 3.37 (m, 1H), 3.21 (t, J=9.0 Hz, 1H), 3.16 - 3.08 (m, 1H), 2.82 (dd, J=5.7, 10.0 Hz, 1H), 2.70 (t, J=9.2 Hz, 1H), 2.54 - 2.41 (m, 3H), 1.27 (d, J=17.6 Hz, 1H).
실시예 209 및 210
트랜스-4-(2-아미노-5-(1-메틸-1H-피라졸-4-일)피리딘-3-일)-N-((3S,4R)-4-(4-클로로-3-플루오로페닐)-1-메틸피롤리딘-3-일)-2-플루오로벤즈아미드 및 트랜스-4-(2-아미노-5-(1-메틸-1H-피라졸-4-일)피리딘-3-일)-N-((3R,4S)-4-(4-클로로-3-플루오로페닐)-1-메틸피롤리딘-3-일)-2-플루오로벤즈아미드의 합성
반응식 99
Figure 112016034409922-pct00201
반응식 86에서의 단계 2에 따라, (3S,4R)-4-(4-클로로-3-플루오로페닐)-1-메틸피롤리딘-3-아민을 사용하여, (+/-)-4-(2-아미노-5-(1-메틸-1H-피라졸-4-일)피리딘-3-일)-N-((3S,4R)-4-(4-클로로-3-플루오로페닐)-1-메틸피롤리딘-3-일)-2-플루오로벤즈아미드를 79% 수율로 수득하였다. LCMS (m/z): 523.2 (MH+), 0.57분. 조 라세미 혼합물을 키랄 SFC (키랄팩 5mic OD 칼럼, 4.6x100 (mm), IPA+0.1% DEA=30%, 5mL/분)에 의해 분해하였다. 극성 부분입체이성질체 (Rt = 2.45분)에 대해, LCMS (m/z): 523.2 (MH+), 0.58분;
1H NMR (400 MHz, CD3OD) δ ppm 8.18 (d, J=2.2 Hz, 1H), 7.90 (s, 1H), 7.80 - 7.72 (m, 2H), 7.66 - 7.61 (m, 1H), 7.44 - 7.36 (m, 3H), 7.33 - 7.29 (m, 1H), 7.19 (dd, J=1.8, 8.3 Hz, 1H), 4.71 - 4.62 (m, 1H), 3.90 (s, 3H), 3.44 - 3.37 (m, 1H), 3.22 (d, J=9.6 Hz, 1H), 3.12 (dd, J=7.9, 10.0 Hz, 1H), 2.86 - 2.80 (m, 1H), 2.74 - 2.67 (m, 1H), 2.51 - 2.44 (m, 3H).
덜 극성의 부분입체이성질체 (Rt = 3.92분)에 대해, LCMS (m/z): 523.2 (MH+), 0.58분;
1H NMR (400 MHz, CD3OD) δ ppm 8.19 (d, J=2.2 Hz, 1H), 7.90 (s, 1H), 7.80 - 7.70 (m, 2H), 7.63 (d, J=2.2 Hz, 1H), 7.46 - 7.36 (m, 3H), 7.30 (dd, J=2.0, 10.6 Hz, 1H), 7.19 (dd, J=1.8, 8.4 Hz, 1H), 4.66 (d, J=5.9 Hz, 1H), 3.91 (s, 3H), 3.44 - 3.36 (m, 1H), 3.19 (t, J=9.0 Hz, 1H), 3.11 (dd, J=7.8, 10.0 Hz, 1H), 2.83 - 2.78 (m, 1H), 2.69 (dd, J=8.4, 9.5 Hz, 1H), 2.45 (s, 3H).
4-(3-아미노-6-시클로프로필피라진-2-일)-2-플루오로벤조산의 합성
반응식 100
Figure 112016034409922-pct00202
단계 1. 메틸 4-(3-아미노-6-시클로프로필피라진-2-일)-2-플루오로벤조에이트
톨루엔 (10 mL) 및 물 (1 mL) 중 메틸 4-(3-아미노-6-브로모피라진-2-일)-2-플루오로벤조에이트 (합성을 위해 실시예 34, 단계 2 참조) (300 mg, 0.920 mmol)에 칼륨 시클로프로필 트리플루오로보레이트 (408 mg, 2.76 mmol), 디(1-아다만틸)-n-부틸포스핀 (66.0 mg, 0.184 mmol), 탄산세슘 (1499 mg, 4.60 mmol), 및 아세트산팔라듐 (II) (20.65 mg, 0.092 mmol)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 가열 블록에서 100℃에서 밤새 가열하였다. 반응 혼합물을 포화 NH4Cl로 켄칭하고, 에틸 아세테이트로 추출하였다. 유기 추출물을 합하고, 염수로 세척하고, 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 증발시켰다. 조 물질을 플래쉬 크로마토그래피 (헵탄 중 0에서 80% EtOAc)에 의해 정제하여 메틸 4-(3-아미노-6-시클로프로필피라진-2-일)-2-플루오로벤조에이트 (250 mg, 90%)를 수득하였다. LCMS (m/z): 288.2 (MH+), 0.756분.
단계 2. 4-(3-아미노-6-시클로프로필피라진-2-일)-2-플루오로벤조산
THF (6 mL) 및 MeOH (3 mL) 중 메틸 4-(3-아미노-6-시클로프로필피라진-2-일)-2-플루오로벤조에이트 (250 mg, 0.870 mmol)에 1M LiOH (1.740 mL, 1.740 mmol)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 2시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물의 pH를 수성 2N HCl에 의해 ~4로 조정하였다. 반응 혼합물을 EtOAc와 물 사이에 분배하였다. 유기 층을 분리하고, 염수로 세척하고, 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 증발시켜 4-(3-아미노-6-시클로프로필피라진-2-일)-2-플루오로벤조산 (230 mg, 97%)을 담황색 고체로서 수득하였다. LCMS (m/z): 274.2 (MH+), 0.621분.
4-(2-아미노-5-시클로프로필피리딘-3-일)-2-플루오로벤조산의 합성
Figure 112016034409922-pct00203
반응식 100에 따라, 메틸 4-(2-아미노-5-브로모피리딘-3-일)-2-플루오로벤조에이트를 사용하여, 4-(2-아미노-5-시클로프로필피리딘-3-일)-2-플루오로벤조산을 수득하였다 (80%). LCMS (m/z): 273.0 (MH+), 0.515분.
4-(3-아미노-6-시클로헥실피라진-2-일)-2-플루오로벤조산의 합성
Figure 112016034409922-pct00204
반응식 66에서의 단계 1, 2 및 3에 따라, 2-(시클로헥스-1-엔-1-일)-4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-디옥사보롤란을 사용하여, 4-(3-아미노-6-시클로헥실피라진-2-일)-2-플루오로벤조산을 수득하였다. LCMS (m/z): 316.3 (MH+), 0.79분.
실시예 211
4-(2-아미노-5-((1S,4r)-1-옥시도테트라히드로-2H-티오피란-4-일)피리딘-3-일)-N-((S)-1-(3-클로로페닐)-2-히드록시에틸)-2-플루오로벤즈아미드의 합성
반응식 101
Figure 112016034409922-pct00205
단계 1. tert-부틸 4-(2-아미노피리딘-3-일)-2-플루오로벤조에이트
n-부탄올 (26 mL) 중 3-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-디옥사보롤란-2-일)피리딘-2-아민 (2.4 g, 10.91 mmol), tert-부틸 4-브로모-2-플루오로벤조에이트 (3.30 g, 12.00 mmol), Pd(PPh3)4 (0.63 mg, 0.0.545 mmol), 2.0 M Na2CO3 수용액 (10.91 mL)의 탈기된 혼합물을 130℃로 10분 동안 마이크로웨이브 가열하였다. 반응물을 에틸 아세테이트 (30 mL)로 희석한 다음, 물 (10 mL) 및 염수 (10 mL)로 세척하였다. 유기부를 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 농축시킨 다음, 플래쉬 크로마토그래피 (10-60% 에틸 아세테이트/헵탄 용리액)에 의해 정제하여 tert-부틸 4-(2-아미노피리딘-3-일)-2-플루오로벤조에이트 (1.35 g, 43% 수율)를 수득하였다. LCMS (m/z): 289.4 (MH+), 0.67분.
단계 2. tert-부틸 4-(2-아미노-5-브로모피리딘-3-일)-2-플루오로벤조에이트
아세토니트릴 (10 mL) 중 tert-부틸 4-(2-아미노피리딘-3-일)-2-플루오로벤조에이트 (700 mg, 2.43 mmol)의 용액을 NBS (453 mg, 2.55 mmol)로 처리하였다. 10분 후, 반응이 완결되었다. 반응물을 1:1 포화 수성 NaHCO3: 포화 수성 Na2S2O3 (10 mL)으로 처리하였다. 혼합물을 10분 동안 격렬히 교반하였다. 혼합물을 에틸 아세테이트 (30 mL)로 희석하고, 층을 분리하였다. 유기부를 염수로 세척하고, 황산마그네슘 상에서 건조시키고, 여과하고, 농축시켜 tert-부틸 4-(2-아미노-5-브로모피리딘-3-일)-2-플루오로벤조에이트 (803 mg, 90% 수율)를 수득하였다. LCMS (m/z): 367.2, 369.2 (MH+), 0.75분.
단계 3. tert-부틸 4-(2-아미노-5-(3,6-디히드로-2H-티오피란-4-일)피리딘-3-일)-2-플루오로벤조에이트
2.0 M Na2CO3 수용액 (1.63 mL) 및 n-부탄올 (5 mL) 중 tert-부틸 4-(2-아미노-5-브로모피리딘-3-일)-2-플루오로벤조에이트 (400 mg, 1.09 mmol), 2-(3,6-디히드로-2H-티오피란-4-일)-4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-디옥사보롤란 (296 mg, 1.31 mmol), Pd(PPh3)4 (126 mg, 0.109 mmol)의 탈기된 혼합물을 130℃로 15분 동안 마이크로웨이브 가열하였다. 반응물을 에틸 아세테이트 (20 mL)로 희석한 다음, 물 (10 mL) 및 염수 (10 mL)로 세척하였다. 유기부를 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 농축시킨 다음, 플래쉬 크로마토그래피 (10-60% 에틸 아세테이트/헵탄 용리액)에 의해 정제하여 tert-부틸 4-(2-아미노-5-(3,6-디히드로-2H-티오피란-4-일)피리딘-3-일)-2-플루오로벤조에이트 (400 mg, 95% 수율)를 수득하였다. LCMS (m/z): 387.1 (MH+), 0.87분;
1H NMR (400 MHz, CD3OD) δ ppm 7.83 - 7.76 (m, 2H), 7.68 (d, J = 1.96 Hz, 1H), 7.37 - 7.34 (m, 1H), 7.33 - 7.29 (m, 2H), 7.28 - 7.24 (m, 2H), 7.24 - 7.18 (m, 1H), 5.10 (t, J = 5.87 Hz, 1H), 3.83 - 3.69 (m, 2H), 2.81 - 2.70 (m, 2H), 2.63 - 2.49 (m, 3H), 2.08 (dd, J = 2.74, 13.30 Hz, 2H), 1.72 (dq, J = 2.93, 12.59 Hz, 2H).
단계 4. tert-부틸 4-(2-아미노-5-(1-옥시도-3,6-디히드로-2H-티오피란-4-일)피리딘-3-일)-2-플루오로벤조에이트
아세톤 (20 mL) 중 4-(2-아미노-5-(3,6-디히드로-2H-티오피란-4-일)피리딘-3-일)-2-플루오로벤조에이트의 0℃ 용액을 물 (5 mL) 중 옥손 (227 mg, 0.369 mmol)의 용액으로 처리하였다. 20분 후, 반응물을 에틸 아세테이트 (50 mL) 및 물 (50 mL)로 희석하였다. 층을 분리하고, 수성 층을 에틸 아세테이트 (50 mL)로 세척하였다. 합한 유기부를 물 (30 mL) 및 염수 (30 mL)로 세척하고, 황산마그네슘 상에서 건조시키고, 여과하고, 농축시켜 tert-부틸 4-(2-아미노-5-(1-옥시도-3,6-디히드로-2H-티오피란-4-일)피리딘-3-일)-2-플루오로벤조에이트 (220 mg, 74% 수율)를 수득하였다. LCMS (m/z): 403.5 (MH+), 0.66분.
단계 5. tert-부틸 4-(2-아미노-5-((1r,4r)-1-옥시도테트라히드로-2H-티오피란-4-일)피리딘-3-일)-2-플루오로벤조에이트
메탄올 (15 mL) 중 tert-부틸 4-(2-아미노-5-(1-옥시도-3,6-디히드로-2H-티오피란-4-일)피리딘-3-일)-2-플루오로벤조에이트 (220 mg, 0.547 mmol)의 탈기된 슬러리를 1.0 N HCl 수용액 (0.82 mL) 및 10% Pd(OH)2로 처리하였다. 용기에 수소를 250 PSI까지 채웠다. 2시간 후, 반응이 완결되었다. 슬러리를 탈기시키고, 셀라이트 상에서 여과하고, 농축시켜 tert-부틸 4-(2-아미노-5-((1r,4r)-1-옥시도테트라히드로-2H-티오피란-4-일)피리딘-3-일)-2-플루오로벤조에이트 (150 mg, 68% 수율)를 수득하였다. LCMS (m/z): 405.6 (MH+), 0.63분.
단계 6. 4-(2-아미노-5-((1r,4r)-1-옥시도테트라히드로-2H-티오피란-4-일)피리딘-3-일)-2-플루오로벤조산-TFA
DCM (2 mL) 중 tert-부틸 4-(2-아미노-5-((1r,4r)-1-옥시도테트라히드로-2H-티오피란-4-일)피리딘-3-일)-2-플루오로벤조에이트 (50 mg, 0.124 mmol)의 실온 용액을 TFA (1 mL)로 처리하였다. 1시간 후, 반응물을 농축시켰다. 생성된 물질을 벤젠 중에 초음파처리로 슬러리화한 다음, 다시 농축시켜 4-(2-아미노-5-((1r,4r)-1-옥시도테트라히드로-2H-티오피란-4-일)피리딘-3-일)-2-플루오로벤조산-TFA (57 mg, 100% 수율)를 수득하였다. LCMS (m/z): 349.2 (MH+), 0.37분.
단계 7. 4-(2-아미노-5-((1S,4r)-1-옥시도테트라히드로-2H-티오피란-4-일)피리딘-3-일)-N-((S)-1-(3-클로로페닐)-2-히드록시에틸)-2-플루오로벤즈아미드
DMF (1 mL) 중 4-(2-아미노-5-((1r,4r)-1-옥시도테트라히드로-2H-티오피란-4-일)피리딘-3-일)-2-플루오로벤조산-TFA (57 mg, 0.123 mmol) 및 (S)-2-아미노-2-(3-클로로페닐)에탄올 (25 mg, 0.148 mmol)의 용액을 HATU (61 mg, 0.160 mmol) 및 DIEA (129 μL, 0.738 mmol)로 처리하였다. 1시간 후, 반응물을 물 (5 mL)로 희석하고, 에틸 아세테이트 (2 x 10 mL)로 추출하였다. 생성물은 층 둘 다에 존재하였다. 따라서 수성 및 유기 층 둘 다를 농축시키고, 역상 정제용 HPLC에 의해 정제하여 4-(2-아미노-5-((1S,4r)-1-옥시도테트라히드로-2H-티오피란-4-일)피리딘-3-일)-N-((S)-1-(3-클로로페닐)-2-히드록시에틸)-2-플루오로벤즈아미드 (20 mg, 26% 수율)를 TFA 염으로서 수득하였다. LCMS (m/z): 502.1, 504.1 (MH+), 0.57분.
1H NMR (400 MHz, CD3OD) δ ppm 8.63 (dd, J = 4.11, 7.24 Hz, 1H), 7.90 (d, J = 1.96 Hz, 1H), 7.80 (t, J = 7.83 Hz, 1H), 7.76 (d, J = 1.57 Hz, 1H), 7.38 - 7.31 (m, 3H), 7.29 -7.25 (m, 2H), 7.24 - 7.17 (m, 1H), 5.14 - 5.06 (m, 1H), 3.83 -3.70 (m, 2H), 3.06 (d, J = 12.91 Hz, 2H), 2.85 - 2.70 (m, 3H), 2.38 - 2.24 (m, 2H), 1.83 (d, J = 12.13 Hz, 2H).
실시예 212
(S)-4-(2-아미노-5-(테트라히드로-2H-티오피란-4-일)피리딘-3-일)-N-(1-(3-클로로페닐)-2-히드록시에틸)-2-플루오로벤즈아미드의 합성
Figure 112016034409922-pct00206
반응식 101에 도시된 반응 순서, 단계 5, 6, 및 7을 tert-부틸 4-(2-아미노-5-(3,6-디히드로-2H-티오피란-4-일)피리딘-3-일)-2-플루오로벤조에이트에 적용하여 (S)-4-(2-아미노-5-(테트라히드로-2H-티오피란-4-일)피리딘-3-일)-N-(1-(3-클로로페닐)-2-히드록시에틸)-2-플루오로벤즈아미드를 수득하였다. LCMS (m/z): 486.0, 488.0 (MH+), 0.73분;
1H NMR (400 MHz, CD3OD) δ ppm 7.83 -7.76 (m, 2H), 7.68 (d, J = 1.96 Hz, 1H), 7.37 -7.34 (m, 1H), 7.33 -7.29 (m, 2H), 7.28 - 7.24 (m, 2H), 7.24 - 7.18 (m, 1H), 5.10 (t, J = 5.87 Hz, 1H), 3.83 - 3.69 (m, 2H), 2.81 -2.70 (m, 2H), 2.63 - 2.49 (m, 3H), 2.08 (dd, J = 2.74, 13.30 Hz, 2H), 1.72 (dq, J = 2.93, 12.59 Hz, 2H).
4-(2-아미노-5-(1-메틸-1H-피라졸-4-일)피리딘-3-일)-2-메틸벤조산의 합성
반응식 102
Figure 112016034409922-pct00207
단계 1. 메틸 4-브로모-2-메틸벤조에이트
DMF (60 mL) 중 4-브로모-2-메틸벤조산 (6 g, 27.9 mmol), 아이오도메탄 (5.21 mL, 84 mmol) 및 탄산칼륨 (11.57 g, 84 mmol)의 교반 혼합물을 실온에서 밤새 교반하였다. 반응 혼합물을 물 (250 mL)과 4:1 헥산:에틸 아세테이트 (650 mL) 사이에 분배하였다. 유기 층을 물로 세척하고, Na2SO4 상에서 건조시켰다. 용매를 진공 하에 제거하여 목적 생성물 6.39 g을 오일로서 100% 수율로 수득하였다.
1H NMR (400 MHz, CD3OD) δ ppm 7.86 - 7.65 (m, 7 H) 7.50 (br. s., 2 H) 3.88 (s, 3 H) 2.56 (s, 3 H).
단계 2. 3-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-디옥사보롤란-2-일)피리딘-2-아민
1,4-디옥산 (87 mL) 중 3-브로모피리딘-2-아민 (6 g, 34.7 mmol)의 현탁액에 비스핀 (13.21 g, 52.0 mmol) 및 아세트산칼륨 (10.21 g, 104 mmol)을 첨가하였다. 혼합물을 질소로 10분 동안 퍼징한 다음, PdCl2(dppf)-CH2Cl2 부가물 (2.83 g, 3.47 mmol)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 오일 조에서 108℃로 2 - 3시간 동안 가열하였다. 반응 혼합물을 에틸 아세테이트로 희석하고, 셀라이트를 통해 여과하고, 농축시켰다. 잔류물을 후속 단계 스즈키 커플링에 추가 정제 없이 사용하였다. LCMS (m/z): 139 (MH+) 0.22분 (보론산에 대해).
단계 3. 메틸 4-(2-아미노피리딘-3-일)-2-메틸벤조에이트
500 mL 둥근 바닥 플라스크에 들은 3-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-디옥사보롤란-2-일)피리딘-2-아민 (7.37 g, 33.5 mmol)에 메틸 4-브로모-2-메틸벤조에이트 (6.390 g, 27.9 mmol), PdCl2(dppf)-DCM (2.041 g, 2.79 mmol), DME (209 mL) 및 2 M Na2CO3 용액 (69.7 mL)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 20분 동안 N2를 통해 버블링하고, 오일 조 중에 108℃에서 1.5시간 동안 가열하였다. 반응 혼합물을 EtOAc로 희석하고, 물로 3회 세척하고, Na2SO4 상에서 건조시키고, 여과하고, 농축시켰다. 조 생성물을 플래쉬 크로마토그래피에 의해 0-100%의 EtOAc (10%의 MeOH 함유)/헵탄으로 용리시키면서 정제하여, 이전 실험으로부터의 상당한 양의 B2(PIN)2를 함유하는 조 생성물 약 8 g을 수득하였다. 에테르를 첨가하여 조 혼합물을 용해시킨 다음, 헵탄을 첨가하여 목적 생성물을 석출시켰다. 고체를 여과하여 62.1% 수율의 고순도를 갖는 목적 생성물 4.2 g을 수득하였다. LCMS (m/z): 243.5 (MH+), 0.56분.
단계 4. 메틸 4-(2-아미노-5-브로모피리딘-3-일)-2-메틸벤조에이트
아세토니트릴 (173 mL) 중 메틸 4-(2-아미노피리딘-3-일)-2-메틸벤조에이트 (4.2 g, 17.34 mmol)의 용액에 0℃에서 NBS (3.15 g, 17.68 mmol)를 2 부분으로 첨가하였다. 반응 혼합물을 0℃에서 20분 동안 교반하였다. LCMS는 반응이 완결되었음을 나타내었다. 포화 Na2SO3 및 NaHCO3으로 켄칭한 후, 반응 혼합물을 30분 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 EtOAc로 3회 추출하고, 포화 NaHCO3, 물 및 염수로 세척하였다. 유기부를 Na2SO4 상에서 건조시키고, 여과하고, 농축시켰다. 조 물질을 에테르로 연화처리하고, 후속 단계에 추가 정제 없이 사용하였다. LCMS (m/z): 323.1 (MH+), 0.68분.
단계 5. 메틸 4-(2-아미노-5-(1-메틸-1H-피라졸-4-일)피리딘-3-일)-2-메틸벤조에이트
20 mL MW 바이알에 들은 메틸 4-(2-아미노-5-브로모피리딘-3-일)-2-메틸벤조에이트 (500 mg, 1.557 mmol)에 1-메틸-4-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-디옥사보롤란-2-일)-1H-피라졸 (421 mg, 2.024 mmol), PdCl2(dppf)DCM (114 mg, 0.156 mmol), DME (11.7 mL) 및 2 M Na2CO3 용액 (3.892 mL)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 마이크로웨이브 합성기 (12분, 120℃)에서 가열하였다. 반응 혼합물을 EtOAc로 희석하고, 물로 3회 세척하고, Na2SO4 상에서 건조시키고, 여과하고, 농축시켰다. 조 생성물을 플래쉬 크로마토그래피에 의해 0-100%의 EtOAc (10%의 MeOH 함유)/헵탄으로 용리시키면서 정제하여 조 생성물을 수득하였으며, 이를 에테르로 연화처리하여 순수한 생성물 400 mg을 80% 수율로 수득하였다. LCMS (m/z): 323.4 (MH+), 0.60분.
단계 6. 4-(2-아미노-5-(1-메틸-1H-피라졸-4-일)피리딘-3-일)-2-메틸벤조산
THF/MeOH/H2O (1:1:1, 36 mL) 중 메틸 4-(2-아미노-5-(1-메틸-1H-피라졸-4-일)피리딘-3-일)-2-메틸벤조에이트 (1.20 g, 3.72 mmol)의 용액에 LiOH-H2O (0.234 g, 5.58 mmol)를 첨가하였다. 용액을 실온에서 밤새 교반하였다. pH를 3-5, 최적으로 4로 조정하였다. 모든 유기 용매를 감압에 의해 제거하였다. EtOAc를 첨가하여 모든 불순물을 연화처리하였다. 물을 첨가하고, 혼합물을 30분 동안 교반하였다. 고체를 여과하고, 50%의 에테르 및 물로 잘 세척하였다. 이어서, 고체를 회전증발기 상에서 톨루엔과 공비혼합하여 목적 산 약 800 mg을 69.7% 수율로 수득하였다. LCMS (m/z): 309.2 (MH+), 0.50분.
4-(2-아미노-5-(1-에틸-1H-피라졸-4-일)피리딘-3-일)-2-플루오로벤조산의 합성
반응식 103
Figure 112016034409922-pct00208
단계 1. tert-부틸 4-브로모-2-플루오로벤조에이트
디옥산 (90 mL) 및 진한 H2SO4 (5 mL) 중 4-브로모-2-플루오로벤조산 (20.16 g, 92 mmol)의 슬러리를 0℃로 냉각시킨 다음, 이소부텐으로 2시간 동안 버블링하였다. 반응이 실온으로 밤새 서서히 가온되도록 하였다. 고체 NaHCO3 (40 g)을 반응물에 조심스럽게 첨가하고, 혼합물을 1시간 동안 교반하였다. 혼합물을 농축시킨 다음, 물 및 에틸 아세테이트 중에 재용해시켰다. 층을 분리하였다. 수성 상을 에틸 아세테이트로 세척하였다. 합한 유기부를 포화 수성 NaHCO3 및 염수로 세척한 다음, Na2SO4 상에서 건조시키고, 여과하고, 농축시켰다. 생성된 유성 tert-부틸 4-브로모-2-플루오로벤조에이트를 추가 정제 없이 사용하였다.
1H NMR (400 MHz, MeOH-d4) δ ppm 7.79 - 7.70 (m, 1H), 7.42 - 7.23 (m, 3H), 1.59 (s, 11H).
단계 2. tert-부틸 2-플루오로-4-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-디옥사보롤란-2-일)벤조에이트
DMF (75 mL) 중 tert-부틸 4-브로모-2-플루오로벤조에이트 (5.55 g, 20.17 mmol), 비스핀 (7.68 g, 30.3 mmol), PdCl2(dppf)-CH2Cl2 부가물 (1.153 g, 1.412 mmol) 및 아세트산칼륨 (5.94 g, 60.5 mmol)의 슬러리를 탈기시킨 다음, 100℃로 밤새 가열하였다. 반응물을 농축시킨 다음, DCM 중에 용해시키고, 셀라이트 상에 여과한 다음, 물 및 염수로 세척하였다. 유기부를 셀라이트 상에서 여과하고, 농축시킨 다음, 플래쉬 크로마토그래피에 의해 0 - 20% 에틸 아세테이트/헵탄으로 용리시키면서 정제하여 tert-부틸 2-플루오로-4-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-디옥사보롤란-2-일)벤조에이트 5.2 g을 80% 수율로 수득하였다.
단계 3. tert-부틸 4-(2-아미노피리딘-3-일)-2-플루오로벤조에이트
n-부탄올 (50 mL) 및 2.0 M Na2CO3 수용액 (19.79 mL, 39.6 mmol) 중 tert-부틸 2-플루오로-4-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-디옥사보롤란-2-일)벤조에이트 (5.1 g, 15.83 mmol), 3-브로모아미노피리딘 (3.01 g, 17.41 mmol) 및 Pd(PPh3)4 (0.732 g, 0.633 mmol)의 슬러리를 탈기시킨 다음, 100℃로 밤새 가열하였다. 반응물을 냉각시키고, 에틸 아세테이트로 희석하였다. 층을 분리하고, 유기부를 염수로 세척하고, 셀라이트 상에서 여과하고, 농축시켰다. 조 물질을 플래쉬 크로마토그래피에 의해 10 - 50% 에틸 아세테이트/헵탄으로 용리시키면서 정제하여 tert-부틸 4-(2-아미노피리딘-3-일)-2-플루오로벤조에이트 3.41 g을 75% 수율로 수득하였다.
단계 4. tert-부틸 4-(2-아미노-5-브로모피리딘-3-일)-2-플루오로벤조에이트
NBS (2.145 g, 12.05 mmol)를 MeCN (60 mL) 중 tert-부틸 4-(2-아미노피리딘-3-일)-2-플루오로벤조에이트 (3.31 g, 11.48 mmol)의 실온 용액에 첨가하였다. 생성된 혼합물을 10분 동안 교반하였다. 반응물을 1:1의 포화 수성 Na2S2O3:포화 수성 NaHCO3 용액으로 켄칭한 다음, 에틸 아세테이트로 추출하였다. 합한 유기부를 염수로 세척하고, 황산나트륨 상에서 건조시키고, 진공 하에 농축시켜 tert-부틸 4-(2-아미노-5-브로모피리딘-3-일)-2-플루오로벤조에이트를 수득하였다. 물질을 추가 정제 없이 사용하였다. LCMS (m/z): 369.0 (MH+), 0.85분.
단계 5. tert-부틸 4-(2-아미노-5-(1-에틸-1H-피라졸-4-일)피리딘-3-일)-2-플루오로벤조에이트
DME (3 mL) 중 tert-부틸 4-(2-아미노-5-브로모피리딘-3-일)-2-플루오로벤조에이트 (200 mg, 0.544 mmol) (합성을 위해 반응식 101, 단계 2 참조) 및 2 M 탄산나트륨 (1.5 mL, 3.0 mmol)에 1-에틸-4-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-디옥사보롤란-2-일)-1H-피라졸 (182 mg, 0.816 mmol)에 이어서 PdCl2(dppf)-CH2Cl2 부가물 (44.5 mg, 0.054 mmol)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 120℃에서 20분 동안 마이크로웨이브 가열하였다. 반응 혼합물을 에틸아세테이트와 물 사이에 분배하였다. 유기 층을 분리하고, 염수로 세척하고, 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 증발시켰다. 조 물질을 플래쉬 크로마토그래피에 의해 0 -50%의 EtOAc (10%MeOH 함유) / 헵탄으로 용리시키면서 정제하여 tert-부틸 4-(2-아미노-5-(1-에틸-1H-피라졸-4-일)피리딘-3-일)-2-플루오로벤조에이트 (160 mg, 77%)를 수득하였다. LCMS (m/z): 383.2 (MH+), 0.782분.
단계 6. 4-(2-아미노-5-(1-에틸-1H-피라졸-4-일)피리딘-3-일)-2-플루오로벤조산
DCM (0.5 mL) 중 tert-부틸 4-(2-아미노-5-(1-에틸-1H-피라졸-4-일)피리딘-3-일)-2-플루오로벤조에이트 (160 mg, 0.418 mmol)에 TFA (2 mL, 26 mmol)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 1시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 톨루엔과 진공 하에 공증발시켰다. 조 4-(2-아미노-5-(1-에틸-1H-피라졸-4-일)피리딘-3-일)-2-플루오로벤조산을 후속 단계에 사용하였다. LCMS (m/z): 327.2 (MH+), 0.509분.
실시예 213
4-(2-아미노-5-(1-(메틸술포닐)피롤리딘-3-일)피리딘-3-일)-2-플루오로-N-((S)-2-히드록시-1-페닐에틸)벤즈아미드
반응식 104
Figure 112016034409922-pct00209
단계 1. 메틸 4-(3-아미노피라진-2-일)-2-플루오로벤조에이트
DME (160 mL) 중 3-클로로피라진-2-아민 (5 g, 38.6 mmol) 및 수성 2 M 탄산나트륨 (40 mL, 80 mmol)의 혼합물에 메틸 2-플루오로-4-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-디옥사보롤란-2-일)벤조에이트 (12.97 g, 46.3 mmol)에 이어서 PdCl2(dppf)-CH2Cl2 부가물 (3.15 g, 3.86 mmol)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 N2로 퍼징하고, 오일 조에서 100℃에서 3 -4시간 동안 가열하였다. 반응 혼합물을 에틸아세테이트와 물 사이에 분배하였다. 유기 층을 분리하고, 염수로 세척하고, 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 증발시켰다. 조 물질을 DCM으로 연화처리하였다. 관찰된 고체를 여과하고, 에테르로 세척하고, 감압 하에 건조시켜 생성물을 회백색 고체로서 수득하였다. 여과물을 플래쉬 크로마토그래피에 의해 0-50-80% EtOAc / 헵탄으로 용리시키면서 정제하여 생성물 10.6 g을 93% 수율로 수득하였다. LCMS (m/z): 248.1 (MH+), 0.563분.
단계 2. 메틸 4-(3-아미노피라진-2-일)-2-플루오로벤조에이트
빙조에 들은 아세토니트릴 (300 mL) 중 메틸 4-(3-아미노피라진-2-일)-2-플루오로벤조에이트 (8.9 g, 36.0 mmol)의 혼합물에 NBS (5.77 g, 32.4 mmol)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 0℃에서 1시간 동안 교반하였다. NBS (0.05 당량)를 첨가하고, 생성된 혼합물을 추가로 30분 동안 교반하였다. 반응 혼합물에 포화 중탄산나트륨 용액을 첨가하였다. 혼합물을 30분 동안 교반하고, 생성물을 EtOAc로 추출하였다. 유기 추출물을 합하고, 염수로 세척하고, 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 증발시켰다. 잔류물을 고진공 하에 건조시켜 갈색 고체 (12.2g, 94%)를 수득하였다. LCMS (m/z): 326.0/328.0 (MH+), 0.846분.
단계 3. tert-부틸 5-(((트리플루오로메틸)술포닐)옥시)-3,4-디히드로피리딘-1(2H)-카르복실레이트
tert-부틸 3-옥소피페리딘-1-카르복실레이트 (1.1 g, 5.52 mmol)를 THF (10 mL)에 녹이고, -78℃로 냉각시켰다. 여기에 리튬 비스(트리메틸실릴)아미드 (6.07 mL, 6.07 mmol) (THF 중 1 M 용액)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 -78℃에서 20분 동안 교반한 다음, THF (10 mL) 중 1,1,1-트리플루오로-N-페닐-N-((트리플루오로메틸)술포닐) 메탄술폰아미드 (2.071 g, 5.80 mmol)의 용액을 적가하였다. 반응 혼합물을 -78℃에서 15분 동안 교반한 다음, 가온하고, 0℃에서 3시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 포화 중탄산나트륨 용액으로 켄칭한 다음, 에틸 아세테이트로 추출하였다. 합한 추출물을 염수로 세척하고, 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 증발시켰다. 조 물질을 중성 알루미나의 플러그를 통해 헵탄 중 10% EtOAc로 정제하였다. 용매를 증가시키고, 잔류물을 건조시켜 목적 생성물을 황색 액체 (2 g, 98%)로서 수득하였다.
단계 4. tert-부틸 5-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-디옥사보롤란-2-일)-3,4-디히드로피리딘-1(2H)-카르복실레이트
플라스크 중 4,4,4',4',5,5,5',5'-옥타메틸-2,2'-비(1,3,2-디옥사보롤란) (1.223 g, 4.81 mmol), 아세트산칼륨 (1.289 g, 13.13 mmol) 및 PdCl2(dppf)-CH2Cl2 부가물 (0.107 g, 0.131 mmol)의 혼합물을 N2로 플러싱한 다음, 디옥산 (12 mL)을 첨가하고, 이어서 디옥산 (12 mL) 중 tert-부틸 5-(((트리플루오로메틸)술포닐)옥시)-3,4-디히드로피리딘-1(2H)-카르복실레이트 (1.45 g, 4.38 mmol)의 용액을 첨가하였다. 반응 혼합물을 N2로 5분 동안 퍼징한 다음, 오일 조에서 80℃에서 밤새 가열하였다. 반응 혼합물을 에틸 아세테이트와 물 사이에 분배하였다. 유기 층을 분리하고, 염수로 세척하고, 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 증발시켰다. 잔류물을 플래쉬 크로마토그래피에 의해 0 - 30%의 EtOAc / 헵탄으로 용리시키면서 정제하여 목적 생성물을 고점성 액체 (1.2 g, 89%)로서 수득하였다. LCMS (m/z): 254.1 (MH+-tBu), 1.21분.
단계 5. tert-부틸 5-(5-아미노-6-(3-플루오로-4-(메톡시카르보닐)페닐)피라진-2-일)-3,4-디히드로피리딘-1(2H)-카르복실레이트
DME (6 mL) 중 메틸 4-(3-아미노-6-브로모피라진-2-일)-2-플루오로벤조에이트 (240 mg, 0.70 mmol) 및 2 M 탄산나트륨 (1.0 mL, 2.0 mmol)의 혼합물에 tert-부틸 5-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-디옥사보롤란-2-일)-3,4-디히드로피리딘-1(2H)-카르복실레이트 (180 mg, 0.582 mmol)에 이어서 PdCl2(dppf).CH2Cl2 부가물 (14.4 mg, 17.5 μmol)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 마이크로웨이브에서 110℃에서 20분 동안 가열하였다. 반응 혼합물을 에틸아세테이트와 물 사이에 분배하였다. 유기 층을 분리하고, 물 및 염수로 세척하였다. 유기부를 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 증발시켰다. 잔류물을 플래쉬 크로마토그래피에 의해 헵탄 중 0-50- 80% EtOAc로 용리시키면서 정제하여 목적 생성물을 황색 고체 (150 mg, 60%)로서 수득하였다. LCMS (m/z): 429.2 (MH+), 1.03분.
단계 6. 메틸 4-(3-아미노-6-(1,4,5,6-테트라히드로피리딘-3-일)피라진-2-일)-2-플루오로벤조에이트
DCM (4 mL) 중 tert-부틸 5-(5-아미노-6-(3-플루오로-4-(메톡시카르보닐)페닐)피라진-2-일)-3,4-디히드로피리딘-1(2H)-카르복실레이트 (150 mg, 0.350 mmol) (분리할 수 없는 혼합물)에 TFA (1 mL, 12.98 mmol)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 30 - 45분 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 회전증발기 상에서 증발시키고, 톨루엔과 공비혼합하였다. 조 생성물을 후속 단계에 정제 없이 진행하였다. LCMS (m/z): 329.2 (MH+), 0.502분.
단계 7. 메틸 4-(3-아미노-6-(피페리딘-3-일)피라진-2-일)-2-플루오로벤조에이트
MeOH (10 mL) 중 메틸 4-(3-아미노-6-(1,4,5,6-테트라히드로피리딘-3-일)피라진-2-일)-2-플루오로벤조에이트 (115 mg, 0.350 mmol)에 Pd/C (93 mg, 0.088 mmol)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 H2 풍선 하에 실온에서 24시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 셀라이트를 통해 여과하고, DCM으로 세척하였다. 여과물을 증발시키고, 건조시켜 목적 생성물을 수득하였다. 조 생성물 (115 mg, 95%)을 후속 단계에 대해 진행하였다. LCMS (m/z): 331.2 (MH+), 0.492분.
단계 8. 메틸 4-(3-아미노-6-(1-(메틸술포닐)피페리딘-3-일)피라진-2-일)-2-플루오로벤조에이트
빙조에 들은 DCM (2 mL) 중 조 메틸 4-(3-아미노-6-(피페리딘-3-일)피라진-2-일)-2-플루오로벤조에이트 (38 mg, 0.114 mmol)의 혼합물에 DIEA (79 μL, 0.454 mmol)에 이어서 메탄술포닐 클로라이드 (9.73 μL, 0.125 mmol)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 0℃에서 30분 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 DCM과 물 사이에 분배하였다. DCM 층을 분리하고, 염수로 세척하였다. 유기 층을 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 증발시켰다. 조 생성물 (50% 순도)을 후속 단계에 진행하였다. LCMS (m/z): 409.1 (MH+), 0.721분.
단계 9. 4-(3-아미노-6-(1-(메틸술포닐)피페리딘-3-일)피라진-2-일)-2-플루오로벤조산
THF (4 mL) 및 MeOH (2 mL) 중 메틸 4-(3-아미노-6-(1-(메틸술포닐)피페리딘-3-일)피라진-2-일)-2-플루오로벤조에이트 (60 mg, 0.147 mmol)에 1 M LiOH (400 μL, 0.400 mmol)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 밤새 교반하였다. 반응 혼합물의 pH를 2 N HCl을 사용하여 ~3 내지 4로 조정하고, 생성물을 에틸 아세테이트로 추출하였다. 유기 층을 물로부터 분리하고, 염수로 세척하고, 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 증발시켜 조 생성물을 수득하였으며, 이를 후속 단계에 추가 정제 없이 사용하였다. LCMS (m/z): 395.1 (MH+), 0.573분.
단계 10. 4-(3-아미노-6-(1-(메틸술포닐)피페리딘-3-일)피라진-2-일)-2-플루오로-N-((S)-2-히드록시-1-페닐에틸)벤즈아미드
DMF (1 mL) 중 4-(3-아미노-6-(1-(메틸술포닐)피페리딘-3-일)피라진-2-일)-2-플루오로벤조산 (40 mg, 0.101 mmol)의 혼합물에 (S)-2-아미노-2-페닐에탄올 (13.91 mg, 0.101 mmol)에 이어서 HATU (57.8 mg, 0.152 mmol) 및 DIEA (0.089 mL, 0.507 mmol)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 밤새 교반하였다. 반응 혼합물을 DMF로 희석하고, 시린지 필터를 통해 여과하였으며, 이를 정제용 HPLC에 의해 정제하여 목적 생성물 (33.4%)을 TFA 염으로서 수득하였다. LCMS (m/z): 514.2 (MH+), 0.687분;
1H NMR (400 MHz, CD3OD) δ ppm7.95 (s, 1 H) 7.85 (t, J=7.83 Hz, 1 H) 7.73-7.57 (m, 2 H) 7.49-7.21 (m, 5 H) 5.22 (d, J=6.65 Hz, 1 H) 3.94-3.78 (m, 3 H) 3.71 (d, J=11.74 Hz, 1 H) 3.03-2.93 (m, 2 H) 2.87-2.74 (m, 4 H) 2.07-1.97 (m, 1 H) 1.92 (d, J=12.13 Hz, 1 H) 1.85-1.68 (m, 1 H)1.37-1.25 (m, 1 H).
실시예 214
메틸 3-(5-아미노-6-(3-플루오로-4-(((S)-2-히드록시-1-페닐에틸)카르바모일)페닐)피라진-2-일)피페리딘-1-카르복실레이트
반응식 105
Figure 112016034409922-pct00210
단계 1. 메틸 3-(5-아미노-6-(3-플루오로-4-(메톡시카르보닐)페닐)피라진-2-일)피페리딘-1-카르복실레이트
빙조에 들은 DCM (3 mL) 중 메틸 4-(3-아미노-6-(피페리딘-3-일)피라진-2-일)-2-플루오로벤조에이트 (55 mg, 0.166 mmol) (합성을 위해, 실시예 34, 단계 7 참조)에 DIEA (0.116 mL, 0.666 mmol) 및 메틸 클로로포르메이트 (0.013 mL, 0.166 mmol)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 빙조에서 30분 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 DCM과 물 사이에 분배하였다. DCM 층을 분리하고, 염수로 세척하고, 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 증발시켰다. 잔류물 (50 mg, 77%)을 후속 단계에 추가 정제 없이 사용하였다. LCMS (m/z): 389.2 (MH+), 0.785분.
단계 2. 4-(3-아미노-6-(1-(메톡시카르보닐)피페리딘-3-일)피라진-2-일)-2-플루오로벤조산
THF (4 mL) 및 MeOH (2 mL) 중 메틸 3-(5-아미노-6-(3-플루오로-4-(메톡시카르보닐)페닐)피라진-2-일)피페리딘-1-카르복실레이트 (50 mg, 0.129 mmol)에 1 M LiOH (0.500 mL, 0.500 mmol)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 4시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물 pH를 2 N HCl을 사용하여 ~ 3으로 조정하고, 생성물을 에틸 아세테이트로 추출하였다. EtOAc 층을 분리하고, 염수로 세척하고, 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 증발시켰다. 잔류물을 후속 단계에 정제 없이 진행하였다 (40 mg, 83%). LCMS (m/z): 375.2 (MH+), 0.637분.
단계 3. 메틸 3-(5-아미노-6-(3-플루오로-4-(((S)-2-히드록시-1-페닐에틸)카르바모일)페닐)피라진-2-일)피페리딘-1-카르복실레이트
DMF (1 mL) 중 4-(3-아미노-6-(1-(메톡시카르보닐)피페리딘-3-일)피라진-2-일)-2-플루오로벤조산 (28 mg, 0.06 mmol)의 혼합물에 (S)-2-아미노-2-페닐에탄올 (12.31 mg, 0.090 mmol)에 이어서 HATU (34.1 mg, 0.090 mmol) 및 DIEA (0.052 mL, 0.299 mmol)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 밤새 교반하였다. 반응 혼합물을 DMF로 희석하고, 시린지 필터를 통해 여과하고, 정제용 HPLC에 의해 정제하여 목적 생성물 (10.9 mg, 29.4%)을 TFA 염으로서 수득하였다. LCMS (m/z): 494.2 (MH+), 0.733분.
1H NMR (400 MHz, CD3OD) δ ppm7.82-7.72 (m, 2 H) 7.63-7.48 (m, 2 H) 7.38-7.11 (m, 5 H) 5.12 (t, J=6.06 Hz, 1 H) 4.09 (d, J=12.91 Hz, 1 H) 3.97 (d, J=12.13 Hz, 1 H) 3.87-3.68(m, 2 H) 3.59 (s, 3 H) 3.11-2.66 (m, 3 H) 2.00-1.88 (m, 1 H) 1.85-1.65 (m, 2 H) 1.58-1.40 (m, 1 H)
실시예 215
4-(6-(1-아세틸피페리딘-3-일)-3-아미노피라진-2-일)-2-플루오로-N-((S)-2-히드록시-1-페닐에틸)벤즈아미드
반응식 106
Figure 112016034409922-pct00211
단계 1. 메틸 4-(6-(1-아세틸피페리딘-3-일)-3-아미노피라진-2-일)-2-플루오로벤조에이트
빙조에 들은 DCM (3 mL) 중 메틸 4-(3-아미노-6-(피페리딘-3-일)피라진-2-일)-2-플루오로벤조에이트 (55 mg, 0.166 mmol) (합성을 위해, 실시예 34, 단계 7 참조)의 혼합물에 DIEA (0.116 mL, 0.666 mmol)에 이어서 아세틸 클로라이드 (0.012 mL, 0.166 mmol)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 0℃에서 30분 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 DCM과 물 사이에 분배하였다. DCM 층을 분리하고, 염수로 세척하고, 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 증발시켰다. 잔류물을 후속 단계에 정제 없이 진행하였다 (50 mg, 81%). LCMS (m/z): 373.3 (MH+), 0.666분.
단계 2. 4-(6-(1-아세틸피페리딘-3-일)-3-아미노피라진-2-일)-2-플루오로벤조산
THF (4 mL) 및 MeOH (2 mL) 중 메틸 4-(6-(1-아세틸피페리딘-3-일)-3-아미노피라진-2-일)-2-플루오로벤조에이트 (50 mg, 0.134 mmol)의 혼합물에 1 M LiOH (0.500 mL, 0.500 mmol)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 4시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물의 pH를 2 N HCl을 사용하여 ~3으로 조정하고, 생성물을 에틸 아세테이트로 추출하였다. 유기 층을 분리하고, 염수로 세척하고, 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 증발시켰다. 잔류물을 후속 단계에 정제 없이 진행하였다 (34 mg, 70.7%). LCMS (m/z): 359.1 (MH+), 0.534분.
단계 3. 4-(6-(1-아세틸피페리딘-3-일)-3-아미노피라진-2-일)-2-플루오로-N-((S)-2-히드록시-1-페닐에틸)벤즈아미드
DMF (1.5 mL) 중 4-(6-(1-아세틸피페리딘-3-일)-3-아미노피라진-2-일)-2-플루오로벤조산 (34 mg, 0.076 mmol)의 혼합물에 (S)-2-아미노-2-페닐에탄올 (15.62 mg, 0.114 mmol)에 이어서 HATU (43.3 mg, 0.114 mmol) 및 DIEA (0.066 mL, 0.379 mmol)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 밤새 교반하였다. 반응 혼합물을 DMF로 희석하고, 시린지 필터를 통해 여과하고, 정제용 HPLC에 의해 정제하여 목적 생성물 (13.9 mg, 30%)을 TFA 염으로서 수득하였다. LCMS (m/z): 478.2 (MH+), 0.641분.
1H NMR (400 MHz, CD3OD) δ ppm 7.98-7.97 (m, 2 H) 7.73-7.58 (m, 2 H) 7.47-7.23 (m, 5 H) 5.22 (t, J=6.06 Hz, 1 H) 4.62-4.37 (m, 1 H) 4.08-3.75 (m, 3 H) 3.27-3.08 (m, 1 H) 3.03-2.71 (m, 2 H) 2.11 (d, J=11.35 Hz, 3 H) 2.04 (d, J=8.22 Hz, 1 H) 2.00-1.75 (m, 2 H) 1.73-1.46 (m, 1 H)
실시예 216
메틸 3-(5-아미노-6-(4-(((S)-1-(3-클로로페닐)-2-히드록시에틸)카르바모일)-3-플루오로페닐)피라진-2-일)피페리딘-1-카르복실레이트
반응식 107
Figure 112016034409922-pct00212
DMF (1 mL) 중 4-(3-아미노-6-(1-(메톡시카르보닐)피페리딘-3-일)피라진-2-일)-2-플루오로벤조산 (12 mg, 0.026 mmol) (합성을 위해, 실시예 35, 단계 2 참조)에 (S)-2-아미노-2-(3-클로로페닐)에탄올 (6.60 mg, 0.038 mmol)에 이어서 HATU (14.63 mg, 0.038 mmol) 및 DIEA (0.022 mL, 0.128 mmol)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 밤새 교반하였다. 반응 혼합물을 DMF로 희석하고, 시린지 필터를 통해 여과하고, 정제용 HPLC에 의해 정제하여 목적 생성물 (6.5 mg, 38%)을 TFA 염으로서 수득하였다. LCMS (m/z): 528.1/530.1 (MH+), 0.798분.
1H NMR (400 MHz, CD3OD) δ ppm7.96-7.80 (m, 2 H) 7.75-7.58 (m, 2 H) 7.50-7.23 (m, 4 H) 5.19 (t, J=5.87 Hz, 1 H) 4.25-4.01 (m, 2 H) 3.92-3.79 (m, 2 H) 3.68 (s, 3 H) 3.20-2.74 (m, 3 H) 2.08-1.97 (m, 1 H) 1.91-1.73 (m, 2 H) 1.67-1.51 (m, 1 H)
실시예 217
(S)-4-(3-아미노-6-(1-에틸-1H-피라졸-4-일)피라진-2-일)-2-플루오로-N-(2-히드록시-1-페닐에틸) 벤즈아미드
반응식 108
Figure 112016034409922-pct00213
단계 1. 메틸 4-(3-아미노-6-(1H-피라졸-4-일)피라진-2-일)-2-플루오로벤조에이트)
DME (3 mL) 중 메틸 4-(3-아미노-6-브로모피라진-2-일)-2-플루오로벤조에이트 (합성을 위해 실시예 34, 단계 2 참조) (100 mg, 0.307 mmol) 및 2 M 탄산나트륨 (0.75 mL, 1.5 mmol)에 tert-부틸 4-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-디옥사보롤란-2-일)-1H-피라졸-1-카르복실레이트 (90 mg, 0.307 mmol)에 이어서 PdCl2(dppf)-CH2Cl2 부가물 (25.04 mg, 0.031 mmol)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 마이크로웨이브에서 120℃에서 15분 동안 가열하였다. 반응 혼합물을 에틸 아세테이트와 물 사이에 분배하였다. 유기 층을 분리하고, 물 및 염수로 세척하고, 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 증발시켰다. 잔류물을 후속 단계에 정제 없이 진행하였다 (90 mg, 74%, 80% 순도). LCMS (m/z): 314.1 (MH+), 0.595분.
단계 2. 메틸 4-(3-아미노-6-(1-에틸-1H-피라졸-4-일)피라진-2-일)-2-플루오로벤조에이트
DMF (2 mL) 중 메틸 4-(3-아미노-6-(1H-피라졸-4-일) 피라진-2-일)-2-플루오로벤조에이트 (45 mg, 0.115 mmol)에 탄산칼륨 (47.6 mg, 0.345 mmol)에 이어서 브로모에탄 (0.017 mL, 0.230 mmol)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 48시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 에틸아세테이트와 물 사이에 분배하였다. 유기 층을 분리하고, 염수로 세척하고, 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 증발시키고, 플래쉬 크로마토그래피에 의해 0 - 60%의 EtOAc (10%의 MeOH 함유) / 헵탄으로 용리시키면서 정제하여 목적 생성물 (25mg, 64%, 80% 순도)을 수득하였다. LCMS (m/z): 342.0 (MH+), 0.73분.
단계 3. 4-(3-아미노-6-(1-에틸-1H-피라졸-4-일)피라진-2-일)-2-플루오로벤조산
MeOH (1 mL) 및 THF (2 mL) 중 메틸 4-(3-아미노-6-(1-에틸-1H-피라졸-4-일)피라진-2-일)-2-플루오로벤조에이트 (25 mg, 0.073 mmol)에 1 M LiOH (0.220 mL, 0.2 20 mmol)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 4시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물의 pH를 2 N HCl에 의해 ~ 4로 조정하였다. 생성물을 에틸 아세테이트로 2회 추출하였다. 합한 유기부 추출물을 염수로 세척하고, 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 증발시켰다. 잔류물을 후속 단계에 추가 정제 없이 진행하였다. LCMS (m/z): 328.1 (MH+), 0.607분.
단계 4. (S)-4-(3-아미노-6-(1-에틸-1H-피라졸-4-일)피라진-2-일)-2-플루오로-N-(2-히드록시-1-페닐에틸) 벤즈아미드
DMF (1 mL) 중 4-(3-아미노-6-(1-에틸-1H-피라졸-4-일)피라진-2-일)-2-플루오로벤조산 (25 mg, 0.076 mmol)에 EDC.HCl (21.96 mg, 0.115 mmol)에 이어서 HOAt (15.60 mg, 0.115 mmol), (S)-2-아미노-2-페닐에탄올 (15.92 mg, 0.092 mmol) 및 DIEA (0.040 mL, 0.229 mmol)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 6시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 DMF로 희석하고, 시린지 필터를 통해 여과하였다. 조 물질을 정제용 HPLC에 의해 정제하여 목적 생성물 (9.1mg, 17%)을 TFA 염으로서 수득하였다. LCMS (m/z): 447.2 (MH+), 0.699분.
1H NMR (400 MHz, CD3OD) δ ppm 8.67-8.41 (m, 1 H), 8.17 (s, 1 H), 8.03 (s, 1 H), 7.86 (s, 1 H), 7.78 (t, J=7.63 Hz, 1 H), 7.67-7.53 (m, 2 H), 7.40-7.09 (m, 5 H), 5.21-5.03 (m, 1 H), 4.13 (q, J=7.30 Hz, 2 H), 3.86-3.65 (m, 2 H), 1.39 (t, J=7.24 Hz, 3 H).
실시예 218
4-(2-아미노-5-(5-옥소피롤리딘-3-일)피리딘-3-일)-2-플루오로-N-((S)-2-히드록시-1-페닐에틸)벤즈아미드의 합성
반응식 109
Figure 112016034409922-pct00214
단계 1. tert-부틸 4-히드록시-2-옥소-2,5-디히드로-1H-피롤-1-카르복실레이트
0℃에서 N2 분위기 하에 DCM (12 mL) 중 Boc-Gly-OH (1 g, 5.71 mmol)에 DMAP (1.743 g, 14.27 mmol) 및 멜드럼의 산 (0.987 g, 6.85 mmol)을 첨가하였다. 톨루엔 중 이소프로필 클로로포르메이트 (8.56 mL, 8.56 mmol)의 용액을 적가하였다. 반응 혼합물을 0℃에서 3시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 15% KHSO4로 2회 세척하고, 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 증발시켰다. 조 생성물을 EtOAc 50 mL에 녹이고, 1시간 동안 환류하였다. 휘발성 물질을 증발시킨 후, 조 생성물을 EtOAC로 연화처리하고, 생성된 고체를 여과하고, 건조시켜 황색 고체 (75%)를 수득하였다. LCMS (m/z): 200.1 (MH+), 0.504분.
단계 2. tert-부틸 2-옥소-4-(토실옥시)-2,5-디히드로-1H-피롤-1-카르복실레이트
DCM (12 mL) 중 tert-부틸 4-히드록시-2-옥소-2,5-디히드로-1H-피롤-1-카르복실레이트 (680 mg, 3.41 mmol)에 DIEA (1.192 mL, 6.83 mmol) 및 토실 클로라이드 (651 mg, 3.41 mmol)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 6시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 DCM으로 희석하고, 포화 중탄산나트륨으로 세척하였다. 유기 층을 분리하고, 염수로 세척하고, 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 증발시켰다. 조 생성물을 플래쉬 크로마토그래피 (0에서 50% EtOAc / 헵탄)에 의해 정제하였다. 순수한 분획을 합하고, 증발시키고, 건조시켜 목적 생성물을 백색 고체 (0.98 g, 81%)로서 수득하였다. LCMS (m/z): 354.1 (MH+), 0.97분;
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 7.99 (d, J=8.22 Hz, 2 H) 7.54 (d, J=7.83 Hz, 2 H) 5.77 (s, 1 H) 4.33 (s, 2 H) 2.43 (s, 3 H) 1.41 (s, 9 H).
단계 3. tert-부틸 4-(2-아미노-5-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-디옥사보롤란-2-일)피리딘-3-일)-2-플루오로벤조에이트
DME (12 mL) 중 tert-부틸 4-(2-아미노-5-브로모피리딘-3-일)-2-플루오로벤조에이트 (400 mg, 1.089 mmol)에 4,4,4',4',5,5,5'-헵타메틸-2,2'-비(1,3,2-디옥사보롤란) (523 mg, 2.179 mmol), 아세트산칼륨 (321 mg, 3.27 mmol) 및 PdCl2(dppf)-CH2Cl2 (89 mg, 0.109 mmol)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 N2로 퍼징하고, 가열 블록 중 마이크로웨이브 바이알에서 110℃에서 밤새 가열하였다. 반응 혼합물을 에틸 아세테이트와 물 사이에 분배하였다. 유기 층을 분리하고, 염수로 세척하고, 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 증발시켰다. 조 물질을 에테르에 녹이고 10분 동안 초음파처리하고, 흑색 고체를 여과하였다. 여과물을 증발시켜 생성물을 담황색 고체 (300 mg, 66.5%)로서 수득하였다. LCMS (m/z): 333.2 (MH+), 0.672분 (보론산에 대해).
단계 4. tert-부틸 4-(6-아미노-5-(4-(tert-부톡시카르보닐)-3-플루오로페닐)피리딘-3-일)-2-옥소-2,5-디히드로-1H-피롤-1-카르복실레이트
DME (3 mL) 중 tert-부틸 4-(2-아미노-5-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-디옥사보롤란-2-일)피리딘-3-일)-2-플루오로벤조에이트 (158 mg, 0.382 mmol) 및 탄산나트륨 (0.509 mL, 1.019 mmol)에 tert-부틸 2-옥소-4-(토실옥시)-2,5-디히드로-1H-피롤-1-카르복실레이트 (90 mg, 0.255 mmol) 및 PdCl2(dppf)-CH2Cl2 (41.6 mg, 0.051 mmol)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 마이크로웨이브 중에 90℃에서 30분 동안 가열하였다. LCMS는 출발 물질이 남아있음을 나타내었다. 추가의 촉매를 첨가하고, 90℃에서 20분 동안 다시 가열하였다. 반응 혼합물을 에틸아세테이트와 물 사이에 분배하였다. 유기 층을 분리하고, 염수로 세척하고, 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 증발시켰다. 조 생성물을 플래쉬 크로마토그래피에 의해 0-50% EtOAc (10%MeOH 함유) / 헵탄을 사용하여 정제하여 생성물을 황색 고체 (66%)로서 수득하였다. LCMS (m/z): 470.2 (MH+), 0.846분.
단계 5. 4-(2-아미노-5-(5-옥소-2,5-디히드로-1H-피롤-3-일)피리딘-3-일)-2-플루오로벤조산
tert-부틸 4-(6-아미노-5-(4-(tert-부톡시카르보닐)-3-플루오로페닐)피리딘-3-일)-2-옥소-2,5-디히드로-1H-피롤-1-카르복실레이트 (158 mg, 0.337 mmol)에 TFA (2 mL, 26.0 mmol)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 1시간 동안 교반하였다. 톨루엔을 첨가한 후, 휘발성 용매를 증발시켰다. 조 생성물을 후속 단계에 사용하였다. LCMS(m/z): 314.2 (MH+), 0.382분.
단계 6. 4-(2-아미노-5-(5-옥소피롤리딘-3-일)피리딘-3-일)-2-플루오로벤조산
N2 분위기 하에 MeOH (15 mL) 중 4-(2-아미노-5-(5-옥소-2,5-디히드로-1H-피롤-3-일)피리딘-3-일)-2-플루오로벤조산 (100 mg, 0.319 mmol)에 Pd-C (67.9 mg, 0.064 mmol)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 H2 풍선 하에 실온에서 24시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 셀라이트를 통해 여과하고, 메탄올로 세척하였다. 여과물을 증발시켰다. 조 물질을 후속 단계에 진행하였다. LCMS(m/z): 316.2 (MH+), 0.338분.
단계 7. (+/-)-4-(2-아미노-5-(5-옥소피롤리딘-3-일)피리딘-3-일)-2-플루오로-N-((S)-2-히드록시-1-페닐에틸)벤즈아미드
DMF (1 mL) 중 4-(2-아미노-5-(5-옥소피롤리딘-3-일)피리딘-3-일)-2-플루오로벤조산 (30 mg, 0.076 mmol)에 (S)-2-아미노-2-페닐에탄올 (12.53 mg, 0.091 mmol), EDC-HCl (21.89 mg, 0.114 mmol), HOAt (15.54 mg, 0.114 mmol) 및 DIEA (0.040 mL, 0.228 mmol)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 5시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 DMF로 희석하고, 직접 정제용 HPLC에 의해 정제하여 (+/-)-4-(2-아미노-5-(5-옥소피롤리딘-3-일)피리딘-3-일)-2-플루오로-N-((S)-2-히드록시-1-페닐에틸)벤즈아미드 (20.2%)를 TFA 염으로서 수득하였다. LCMS (m/z): 435.2 (MH+), 0.476분;
1H NMR (400 MHz, CD3OD) δ ppm 7.88 (s, 1 H), 7.84-7.74 (m, 2 H), 7.38-7.30 (m, 4 H), 7.27 (t, J=7.43 Hz, 2 H), 7.22-7.13 (m, 1 H), 5.18-5.05 (m,1 H), 3.85-3.56 (m, 4 H), 3.39 -3.26(m, 1 H), 2.62 (dd, J=16.82, 8.61 Hz, 1 H), 2.48-2.33 (m, 1 H).
실시예 219 및 220
4-(2-아미노-5-((R)-5-옥소피롤리딘-3-일)피리딘-3-일)-2-플루오로-N-((S)-2-히드록시-1-페닐에틸)벤즈아미드 및 4-(2-아미노-5-((S)-5-옥소피롤리딘-3-일)피리딘-3-일)-2-플루오로-N-((S)-2-히드록시-1-페닐에틸)벤즈아미드의 합성
반응식 110
Figure 112016034409922-pct00215
(+/-)-4-(2-아미노-5-(5-옥소피롤리딘-3-일)피리딘-3-일)-2-플루오로-N-((S)-2-히드록시-1-페닐에틸)벤즈아미드를 키랄 SFC (키랄팩 5mic C10=AD-H 칼럼, 4.6x100 (mm), 5mL/분, MeOH = 50%)에 의해 분해하였다. 극성 화합물 (피크 1)을 RT = 1.36분 (24.5%)에서 수득하였다. LCMS (m/z): 435.2 (MH+), 0.485분. 덜 극성의 화합물 (피크 2)을 RT = 2.20분 (22%)에서 수득하였다. LCMS (m/z): 435.2 (MH+), 0.482분. 시클릭 락탐 상의 절대 입체화학을 임의적으로 지정하였다.
실시예 221
(2S,4R)-메틸 4-(6-아미노-5-(4-(((S)-1-(3-클로로페닐)-2-히드록시에틸)카르바모일)-3-플루오로페닐)피리딘-3-일)피롤리딘-2-카르복실레이트의 합성
반응식 111
Figure 112016034409922-pct00216
단계 1. (S)-1-tert-부틸 2-메틸 4-(6-아미노-5-(4-(tert-부톡시카르보닐)-3-플루오로페닐)피리딘-3-일)-1H-피롤-1,2(2H,5H)-디카르복실레이트
THF (10 mL) 및 물 (2 mL) 중 tert-부틸 4-(2-아미노-5-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-디옥사보롤란-2-일)피리딘-3-일)-2-플루오로벤조에이트 (400 mg, 0.966 mmol), (S)-1-tert-부틸 2-메틸 4-(((트리플루오로메틸)술포닐)옥시)-1H-피롤-1,2(2H,5H)-디카르복실레이트 (1.087 g, 2.90 mmol), Pd(PPh3)4 (112 mg, 0.097 mmol) 및 탄산세슘 (1.258 g, 3.86 mmol)의 혼합물을 탈기시킨 다음, 90℃로 10분 동안 마이크로웨이브 가열하였다. 완결 시, 반응물을 에틸 아세테이트로 희석하였다. 유기부를 염수로 세척하고, 황산마그네슘 상에서 건조시키고, 농축시켰다. 조 혼합물을 실리카 겔 상에서 플래쉬 크로마토그래피 (20-90% 에틸 아세테이트/헵탄)에 의해 정제하여 (S)-1-tert-부틸 2-메틸 4-(6-아미노-5-(4-(tert-부톡시카르보닐)-3-플루오로페닐)피리딘-3-일)-1H-피롤-1,2(2H,5H)-디카르복실레이트 (470 mg, 95%)를 수득하였다. LCMS (m/z): 514.3 (MH+), 0.92분.
단계 2. (2S,4R)-1-tert-부틸 2-메틸 4-(6-아미노-5-(4-(tert-부톡시카르보닐)-3-플루오로페닐)피리딘-3-일)피롤리딘-1,2-디카르복실레이트
메탄올 (40 mL) 중 (S)-1-tert-부틸 2-메틸 4-(6-아미노-5-(4-(tert-부톡시카르보닐)-3-플루오로페닐)피리딘-3-일)-1H-피롤-1,2(2H,5H)-디카르복실레이트 (470 mg, 0.915 mmol)의 탈기된 용액을 10 wt% Pd/C (3.214 g, 3.02 mmol)로 처리하였다. 시스템을 다시 탈기시킨 다음, 1 atm 수소로 밤새 채웠다. 완결 시, 반응물을 탈기시킨 다음, 암모니아 기체로 처리한 다음, 셀라이트 상에서 여과하였다. 케이크를 메탄올 중에 슬러리화하고, 암모니아 기체로 처리하고, 여과하여 추가의 생성물을 회수하였다. 어떠한 추가의 생성물도 필터 케이크로부터 용리되지 않을 때까지 과정을 반복하였다. 합한 유기부를 농축시켜 (2S,4R)-1-tert-부틸 2-메틸 4-(6-아미노-5-(4-(tert-부톡시카르보닐)-3-플루오로페닐)피리딘-3-일)피롤리딘-1,2-디카르복실레이트 (300 mg, 64%)를 수득하였다. LCMS (m/z): 516.1 (MH+), 0.89분.
단계 3. 4-(2-아미노-5-((3R,5S)-5-(메톡시카르보닐)피롤리딘-3-일)피리딘-3-일)-2-플루오로벤조산-2TFA
DCM (6 mL) 중 (2S,4R)-1-tert-부틸 2-메틸 4-(6-아미노-5-(4-(tert-부톡시카르보닐)-3-플루오로페닐)피리딘-3-일)피롤리딘-1,2-디카르복실레이트 (300 mg, 0.58 mmol)의 용액을 TFA (3 mL)로 처리하였다. 1시간 후, 반응물을 농축시킨 다음, 잔류물을 벤젠 중에 슬러리화하고, 초음파처리한 다음, 농축시켜 4-(2-아미노-5-((3R,5S)-5-(메톡시카르보닐)피롤리딘-3-일)피리딘-3-일)-2-플루오로벤조산-2TFA (345 mg, 100% 수율)를 수득하였다. LCMS (m/z): 360.2 (MH+), 0.34분.
단계 4. (2S,4R)-메틸 4-(6-아미노-5-(4-(((S)-1-(3-클로로페닐)-2-히드록시에틸)카르바모일)-3-플루오로페닐)피리딘-3-일)피롤리딘-2-카르복실레이트
DMF (2 mL) 중 4-(2-아미노-5-((3R,5S)-5-(메톡시카르보닐)피롤리딘-3-일)피리딘-3-일)-2-플루오로벤조산-2TFA (35 mg, 0.060 mmol), HATU (34 mg, 0.089 mmol), 및 DIEA (0.104 mL, 0.596 mmol)의 혼합물을 (S)-2-아미노-2-(3-클로로페닐)에탄올 (51 mg, 0.348 mmol)로 처리하였다. 완결 시, 반응물을 물 및 염수로 세척한 다음, MgSO4 상에서 건조시키고, 농축시켰다. 조 물질을 역상 정제용 HPLC에 의해 정제하여 (2S,4R)-메틸 4-(6-아미노-5-(4-(((S)-1-(3-클로로페닐)-2-히드록시에틸)카르바모일)-3-플루오로페닐)피리딘-3-일)피롤리딘-2-카르복실레이트 (4.2 mg, 9%)를 수득하였다. LCMS (m/z): 513.2, 515.2 (MH+), 0.58분;
1H NMR (400 MHz, CD3OD) δ ppm 7.97 - 7.86 (m, 3H), 7.49 - 7.40 (m, 3H), 7.39 - 7.34 (m, 2H), 7.33 - 7.26 (m, 1H), 5.19 (t, J = 5.87 Hz, 1H), 4.62 (dd, J = 7.63, 10.76 Hz, 1H), 3.93 - 3.77 (m, 6H), 3.74 - 3.61 (m, 1H), 2.87 (td, J = 6.90, 13.21 Hz, 1H), 2.33 - 2.21 (m, 1H).
실시예222 및 223
(2S,4R)-4-(6-아미노-5-(4-(((S)-1-(3-클로로페닐)-2-히드록시에틸)카르바모일)-3-플루오로페닐)피리딘-3-일)피롤리딘-2-카르복실산 및 (2S,4R)-메틸 4-(6-아미노-5-(4-(((S)-1-(3-클로로페닐)-2-히드록시에틸)카르바모일)-3-플루오로페닐)피리딘-3-일)피롤리딘-2-카르복실레이트의 합성
반응식 112
Figure 112016034409922-pct00217
단계 1. (2S,4R)-4-(6-아미노-5-(4-(((S)-1-(3-클로로페닐)-2-히드록시에틸)카르바모일)-3-플루오로페닐)피리딘-3-일)피롤리딘-2-카르복실산
MeOH (4 mL) 중 (2S,4R)-메틸 4-(6-아미노-5-(4-(((S)-1-(3-클로로페닐)-2-히드록시에틸)카르바모일)-3-플루오로페닐)피리딘-3-일)피롤리딘-2-카르복실레이트 (120 mg, 0.234 mmol)의 용액을 1.0 M LiOH 수용액 (0.468 mL)으로 처리한 다음, 70℃로 가열하였다. 1시간 후, 반응물을 농축시킨 다음, 물 (2 mL) 중에 용해시키고, 1.0 N 수성 HCl (0.468 mL)로 처리하였다. 반응 혼합물을 에틸 아세테이트 (20 mL)로 추출하였다. 유기 층을 물 및 염수로 세척한 다음, MgSO4 상에서 건조시키고, 농축시켜 조 생성물 (97 mg, 57%)을 수득하였다. 이 물질의 일부를 역상 정제용 HPLC에 의해 정제하여 (2S,4R)-4-(6-아미노-5-(4-(((S)-1-(3-클로로페닐)-2-히드록시에틸)카르바모일)-3-플루오로페닐)피리딘-3-일)피롤리딘-2-카르복실산을 수득하였다. LCMS (m/z): 499.1/501.1 (MH+), 0.49분;
1H NMR (400 MHz, CD3OD) δ ppm 8.56 - 8.64 (m, 1H), 7.75 - 7.87 (m, 4H), 7.31 - 7.38 (m, 4H), 7.24 - 7.29 (m, 3H), 7.17 - 7.24 (m, 1H), 5.07 - 5.14 (m, 1H), 4.36 (dd, J = 7.63, 9.98 Hz, 1H), 3.64 - 3.83 (m, 4H), 3.52 - 3.62 (m, 1H), 3.27 - 3.34 (m, 1H), 2.72 - 2.81 (m, 1H), 2.56 (s, 1H), 2.15 (td, J = 10.42, 13.21 Hz, 1H).
단계 2. (2S,4R)-메틸 4-(6-아미노-5-(4-(((S)-1-(3-클로로페닐)-2-히드록시에틸)카르바모일)-3-플루오로페닐)피리딘-3-일)피롤리딘-2-카르복실레이트
THF (2 mL) 및 DMF (2 mL) 중 (2S,4R)-4-(6-아미노-5-(4-(((S)-1-(3-클로로페닐)-2-히드록시에틸)카르바모일)-3-플루오로페닐)피리딘-3-일)피롤리딘-2-카르복실산 (25 mg, 0.050 mmol)의 용액을 2.0 M 용액의 THF 중 메틸아민 (1.25 mL, 2.5 mmol), 및 HATU (95 mg, 0.25 mmol)로 순차적으로 처리하였다. 2시간 후, 반응물을 에틸 아세테이트로 희석하고, 물 및 염수로 세척하였다. 유기부를 황산마그네슘 상에서 건조시키고, 농축시켜 (2S,4R)-메틸 4-(6-아미노-5-(4-(((S)-1-(3-클로로페닐)-2-히드록시에틸)카르바모일)-3-플루오로페닐)피리딘-3-일)피롤리딘-2-카르복실레이트를 역상 정제용 HPLC에 의해 정제한 후 수득하였다 (1.8 mg, 5%). LCMS (m/z): 512.2, 514.2 (MH+), 0.54분;
1H NMR (400 MHz, CD3OD) δ ppm 8.64 - 8.73 (m, 1H), 7.84 - 7.96 (m, 2H), 7.45 (s, 1H), 7.40 - 7.44 (m, 1H), 7.35 - 7.38 (m, 1H), 7.27 - 7.34 (m, 1H), 5.16 - 5.24 (m, 1H), 4.38 (dd, J = 7.83, 10.17 Hz, 1H), 3.75 - 3.92 (m, 2H), 3.60 - 3.72 (m, 1H), 2.78 - 2.89 (m, 3H).
4-(2-아미노-5-(1-메틸-1H-이미다졸-5-일)피리딘-3-일)-2-플루오로벤조산의 합성
Figure 112016034409922-pct00218
반응식 109에서의 단계 4 및 5에 따라, 5-브로모-1-메틸-1H-이미다졸을 사용하여, 4-(2-아미노-5-(1-메틸-1H-이미다졸-5-일)피리딘-3-일)-2-플루오로벤조산을 수득하였다. LCMS (m/z): 313.1 (MH+), 0.3분.
4-(2-아미노-5-(1-메틸-1H-피라졸-5-일)피리딘-3-일)-2-플루오로벤조산의 합성
Figure 112016034409922-pct00219
반응식 109에서의 단계 4 및 5에 따라, 1-메틸-5-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-디옥사보롤란-2-일)-1H-피라졸을 사용하여, 4-(2-아미노-5-(1-메틸-1H-피라졸-5-일)피리딘-3-일)-2-플루오로벤조산을 수득하였다. LCMS (m/z): 313.4 (MH+), 0.44분.
4-(2-아미노-5-(1-이소프로필-1H-피라졸-4-일)피리딘-3-일)-2-플루오로벤조산의 합성
Figure 112016034409922-pct00220
반응식 109에서의 단계 4 및 5에 따라, 1-이소프로필-4-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-디옥사보롤란-2-일)-1H-피라졸을 사용하여, 4-(2-아미노-5-(1-이소프로필-1H-피라졸-4-일)피리딘-3-일)-2-플루오로벤조산을 수득하였다. LCMS (m/z): 341 (MH+), 0.56분.
실시예 224
(S)-4-(3-아미노-6-(옥세탄-3-일)피라진-2-일)-2-플루오로-N-(2-히드록시-1-페닐에틸)벤즈아미드의 합성
반응식 113
Figure 112016034409922-pct00221
단계 1. 메틸 4-(3-아미노-6-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-디옥사보롤란-2-일)피라진-2-일)-2-플루오로벤조에이트
DME (12 mL) 중 메틸 4-(3-아미노-6-브로모피라진-2-일)-2-플루오로벤조에이트 (400 mg, 1.227 mmol)에 4,4,4',4',5,5,5'-헵타메틸-2,2'-비(1,3,2-디옥사보롤란 (589 mg, 2.453 mmol), 아세트산칼륨 (361 mg, 3.68 mmol) 및 PdCl2(dppf)-CH2Cl2 (100 mg, 0.123 mmol)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 N2로 퍼징하고, 마이크로웨이브 중에 120℃에서 15분 동안 가열하였다. 반응 혼합물을 에틸아세테이트와 물 사이에 분배하였다. 유기 층을 분리하고, 염수로 세척하고, 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 증발시켰다. 조 생성물을 에테르 중에 녹이고, 20분 동안 초음파처리하였다. 흑색 고체를 여과하였다. 여과물에 헵탄을 첨가하였다. 침전물을 여과하고, 건조시켜 담황색 고체 (250mg, 54.6%)를 수득하였다. LCMS (m/z): 292.2 (MH+), 0.47분 (보론산에 대해).
단계 2. 메틸 4-(3-아미노-6-(옥세탄-3-일)피라진-2-일)-2-플루오로벤조에이트
DME (6 mL) 중 메틸 4-(3-아미노-6-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-디옥사보롤란-2-일)피라진-2-일)-2-플루오로벤조에이트 (150 mg, 0.402 mmol) 및 탄산나트륨 (1.5 mL, 3.0 mmol)에 3-아이오도옥세탄 (370 mg, 2.01 mmol) 및 PdCl2(dppf)-CH2Cl2 (32.8 mg, 0.042 mmol)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 마이크로웨이브 중에 100℃에서 15분 동안 가열하였다. 반응 혼합물을 에틸아세테이트와 물 사이에 분배하였다. 유기 층을 분리하고, 염수로 세척하고, 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 증발시켰다. 조 생성물을 정제용 HPLC에 의해 정제하여 생성물 (13.5 mg, 11.0%)을 단리시켰다. LCMS (m/z): 304.2 (MH+), 0.61분.
단계 3. 4-(3-아미노-6-(옥세탄-3-일)피라진-2-일)-2-플루오로벤조산
MeOH (1 mL) 및 THF (2 mL) 중 메틸 4-(3-아미노-6-(옥세탄-3-일)피라진-2-일)-2-플루오로벤조에이트 (13 mg, 0.043 mmol)에 LiOH (0.128 mL, 0.128 mmol)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 2시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 산성 (pH ~3)으로 조정하고, 용매를 회전증발기 상에서 증발시켰다. 조 물질을 톨루엔과 공비혼합하여 후속 단계에 진행하였다. LCMS (m/z): 290.1 (MH+), 0.46분.
단계 4. (S)-4-(3-아미노-6-(옥세탄-3-일)피라진-2-일)-2-플루오로-N-(2-히드록시-1-페닐에틸)벤즈아미드
DMF (1 mL) 중 4-(3-아미노-6-(옥세탄-3-일)피라진-2-일)-2-플루오로벤조산 -조 물질 (10 mg, 0.035 mmol)에 (S)-2-아미노-2-페닐에탄올 (14.22 mg, 0.104 mmol), DIEA (0.030 mL, 0.173 mmol), EDC (13.25 mg, 0.069 mmol) 및 아자-HOBt (7.06 mg, 0.052 mmol)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 밤새 교반하였다. 조 물질을 정제용 HPLC에 의해 정제하여 목적 생성물 (11.5%)을 TFA 염으로서 수득하였다. LCMS (m/z): 409.2 (MH+), 0.597분;
1H NMR (400 MHz, CD3OD) δ ppm 7.92-7.82 (m, 2H) 7.78-7.64 (m, 2 H) 7.48-7.32 (m, 5 H) 7.23 - 7.31-7.23 (m, 1 H) 5.28-5.17 (m, 1 H) 5.03-4.90 (m, 5 H) 4.47-4.34 (m, 1 H)3.96-3.76 (m, 3 H).
실시예 225, 226, 및 227
(+/-)-N-(2-아미노-1-(3-클로로페닐)에틸)-4-(2-아미노-5-(1,3-디메틸-1H-피라졸-4-일)피리딘-3-일)-2-플루오로벤즈아미드의 합성
반응식 114
Figure 112016034409922-pct00222
반응식 82에서의 단계 1 및 2, 반응식 102에서의 단계 5 및 6에 따라, (+/-)-tert-부틸 (2-아미노-2-(3-클로로페닐)에틸)카르바메이트를 사용하여, (+/-)-N-(2-아미노-1-(3-클로로페닐)에틸)-4-(2-아미노-5-(1,3-디메틸-1H-피라졸-4-일)피리딘-3-일)-2-플루오로벤즈아미드를 수득하였다. LCMS (m/z): 479.3 (MH+), 0.54분.
1H NMR (400MHz, CDCl3) δ ppm 8.16 (m, 2H), 7.87 (m, 1H), 7.47 - 7.18 (m, 7H), 5.23 (m, 1H), 4.58 (bs, 2H), 3.88 (s, 3H), 3.19 (m, 2H), 2.36 (s, 3H).
라세미 혼합물을 키랄 SFC (키랄팩 5mic AD 칼럼, 4.6x100 (mm), 5 mL/분, EtOH+0.1%, DEA = 30%)에 의해 분해하였다. 극성 거울상이성질체, (S)-N-(2-아미노-1-(3-클로로페닐)에틸)-4-(2-아미노-5-(1,3-디메틸-1H-피라졸-4-일)피리딘-3-일)-2-플루오로벤즈아미드를 Rt = 2.6분에서 수득하였다. LCMS (m/z): 479.1 (MH+), 0.57분. 덜 극성의 거울상이성질체, (R)-N-(2-아미노-1-(3-클로로페닐)에틸)-4-(2-아미노-5-(1,3-디메틸-1H-피라졸-4-일)피리딘-3-일)-2-플루오로벤즈아미드를 Rt = 3.22분에서 수득하였다. LCMS (m/z): 479.1 (MH+), 0.57분. 절대 입체화학을 생화학적 데이터 및 도킹 모델을 기준으로 하여 지정하였다.
4-(3-아미노-6-((1r,4r)-4-듀테리도-4-히드록시시클로헥실)피라진-2-일)-2-플루오로벤조산의 합성
반응식 115
Figure 112016034409922-pct00223
단계 1. 메틸 4-(3-아미노-6-((1r,4r)-4-듀테리도-4-히드록시시클로헥실)피라진-2-일)-2-플루오로벤조에이트
메탄올 (1.903 mL), THF (0.952 mL) 중 에틸 4-(3-아미노-6-(4-옥소시클로헥실)피라진-2-일)-2-플루오로벤조에이트 (98 mg, 0.285 mmol)의 용액을 -78℃로 냉각시켰다. 여기에, NaBD4 (32.4 mg, 0.856 mmol)를 조금씩 천천히 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온으로 1시간 동안 가온되도록 하였다. 반응 혼합물을 NH4Cl 용액으로 켄칭한 다음, Na2CO3 용액으로 켄칭하고, 1시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 EtOAc로 추출하였다. 합한 유기 층을 물 및 염수로 세척하고, 무수 Na2SO4 상에서 건조시키고, 여과하고, 진공 하에 농축시켜 조 메틸 4-(3-아미노-6-((1r,4r)-4-듀테리도-4-히드록시시클로헥실)피라진-2-일)-2-플루오로벤조에이트 (81.4 mg, 트랜스:시스 = ~4:1, 82%)를 수득하였으며, 이를 후속 단계에 사용하였다. LCMS (m/z): 347.1 (MH+), 0.61분 (주요, 트랜스) 및 0.64분 (시스).
단계 2. 4-(3-아미노-6-((1r,4r)-4-듀테리도-4-히드록시시클로헥실)피라진-2-일)-2-플루오로벤조산
THF (1559 μl,) 및 MeOH (780 μl) 중 메틸 4-(3-아미노-6-((1r,4r)-4-듀테리도-4-히드록시시클로헥실)피라진-2-일)-2-플루오로벤조에이트 (81 mg, 0.234 mmol)의 용액에 LiOH (1M 용액) (421 μl, 0.421 mmol)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 1시간 동안 교반하였다. pH를 5로 조정한 후, 반응 혼합물을 EtOAc로 추출하였다. 합한 유기 층을 물 및 염수로 세척하고, 여과하고, 진공 하에 농축시켰다. 조 4-(3-아미노-6-((1r,4r)-4-듀테리도-4-히드록시시클로헥실)피라진-2-일)-2-플루오로벤조산 (99%)을 후속 단계에 추가 정제 없이 사용하였다. LCMS (m/z): 333.1 (MH+), 0.47분 (주요, 트랜스) 및 0.51분 (시스).
(S)-2-아미노-2-듀테리도-2-(3-브로모-5-플루오로페닐)에탄올의 합성
반응식 116
Figure 112016034409922-pct00224
단계 1. (3-브로모-5-플루오로페닐)-1,1-디-듀테리도-메탄올
3-브로모-5-플루오로벤조산 (5.3 g, 24.20 mmol)을 THF (81 mL) 중에 용해시켰다. 여기에, LiAlD4 (1.102 g, 29.0 mmol)를 0℃에서 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 밤새 교반하였다. 반응 혼합물을 0℃로 냉각시킨 후, 물 1.1 mL를 첨가하고, 이어서 15% NaOH 1.1 mL 및 물 3.2 mL를 첨가하였다. 현탁액을 실온에서 2시간 동안 교반한 다음, 셀라이트를 통해 여과하고, Et2O로 헹구고, 여과물을 농축시켜 조 생성물을 수득하였으며, 이를 플래쉬 크로마토그래피 (0-30% EtOAc/헵탄)에 의해 정제하여 (3-브로모-5-플루오로페닐)-1,1-디-듀테리도-메탄올을 64% 수율로 수득하였다. LCMS (m/z): 232.0 (MNa+), 0.69분.
단계 2. 3-브로모-5-플루오로벤즈알데히드-d1
(3-브로모-5-플루오로페닐)-1,1-디-듀테리도-메탄올 (3.2 g, 15.4 mmol)을 DCM (51.5 mL) 중에 용해시키고, 0℃로 냉각시켰다. 데스-마르틴 퍼아이오디난 (9.83 g, 23.18 mmol)을 반응 혼합물에 첨가하였으며, 이를 0 ℃에서 3시간 동안 교반하였다. 포화 Na2S2O3 / NaHCO3 (8:1) 용액을 혼합물에 첨가하였으며, 이를 실온에서 1시간 동안 교반하였다. 이어서, 반응 혼합물을 DCM으로 추출하였다. 합한 유기 층을 물 및 염수로 세척하고, 여과하고, 진공 하에 농축시켰다. 조 물질을 플래쉬 크로마토그래피에 의해 정제하여 3-브로모-5-플루오로벤즈알데히드-d1을 백색 고체 (2.6 g, 82%)로서 수득하였다.
1H NMR (400MHz, CDCl3) δ ppm 7.83 (s, 1H), 7.57 - 7.50 (m, 2H).
단계 3. (S)-2-아미노-2-듀테리도-2-(3-브로모-5-플루오로페닐)에탄올
반응식 74에서의 단계 4 내지 9에 따라, 3-브로모-5-플루오로벤즈알데히드-d1을 사용하여, (S)-2-아미노-2-듀테리도-2-(3-브로모-5-플루오로페닐)에탄올을 HCl 염으로서 수득하였다. LCMS (m/z): 235.0/237.0 (MH+), 0.40분.
(R)-2-아미노-2-(3-브로모-5-플루오로페닐)-2,2-디-듀테리도-에탄올 히드로클로라이드의 합성
반응식 117
Figure 112016034409922-pct00225
단계 1. (R)-2-(3-브로모-5-플루오로페닐)-2-((tert-부톡시카르보닐)아미노)아세트산
CCl4 (4 mL), 아세토니트릴 (4 mL) 및 물 (6 mL) 중 (S)-tert-부틸 (1-(3-브로모-5-플루오로페닐)알릴)카르바메이트 (1.235 g, 3.74 mmol)의 용액을 과아이오딘산나트륨 (1.680 g, 7.85 mmol) 및 RuCl3 (16 mg, 0.075 mmol)으로 처리하였다. 1시간 후, 반응이 완결되었다. 반응물을 에틸 아세테이트와 물 사이에 분배하였다. 유기부를 염수로 세척한 다음, 셀라이트 상에서 여과하고, 농축시켰다. 조 물질을 벤젠 중에 재용해시킨 다음, 여과하고, 다시 농축시켜 조 (R)-2-(3-브로모-5-플루오로페닐)-2-((tert-부톡시카르보닐)아미노)아세트산 (1.30 g, 99% 수율)을 수득하였으며, 이를 직접 사용하였다. LCMS (m/z): 348.2 (MH+), 0.52분.
단계 2. (R)-tert-부틸 (1-(3-브로모-5-플루오로페닐)-2-히드록시-2,2-듀테리도-에틸)카르바메이트
DME (6 mL) 중 (R)-2-(3-브로모-5-플루오로페닐)-2-((tert-부톡시카르보닐)아미노)아세트산 (1.30 g, 3.73 mmol)의 -10℃ 용액을 N-메틸 모르폴린 (0.431 mL, 3.92 mmol)으로 처리하였다. 5분 후, 반응물을 이소부틸 클로로포르메이트 (0.515 mL, 3.92 mmol)로 처리하였다. 추가로 5분 후, 반응물을 여과하고, 케이크를 DME (4 mL)로 세척하였다. 합한 유기부를 물 (1 mL) 중 NaBD4 (0.251 g, 5.97 mmol)의 용액으로 처리하였다. 완결 시, 반응물을 에틸 아세테이트와 물 사이에 분배하였다. 유기부를 염수로 세척한 다음, 황산나트륨 상에서 건조시키고, 농축시켰다. 조 물질을 정제용 HPLC에 의해 정제하여 표제 화합물, (R)-tert-부틸 (1-(3-브로모-5-플루오로페닐)-2-히드록시-2,2-듀테리도-에틸)카르바메이트 (55 mg, 4.4% 수율)를 수득하였다. LCMS (m/z): 337.3 (MH+), 1.03분.
단계 3. (R)-2-아미노-2-(3-브로모-5-플루오로페닐)-2,2-디-듀테리도-에탄올 히드로클로라이드
디옥산 중 4 M HCl (1368 μl) 중 (R)-tert-부틸 (1-(3-브로모-5-플루오로페닐)-2-히드록시-2,2-듀테리도-에틸)카르바메이트 (46 mg, 0.137 mmol)의 용액을 밤새 교반하였다. 휘발성 물질을 진공 하에 제거하였다. 조 생성물을 후속 단계에 추가 정제 없이 사용하였다. LCMS (m/z): 236/238 (MH+), 0.4분.
4-(3-아미노-6-(4-(히드록시메틸)시클로헥실)피라진-2-일)-2-플루오로벤조산의 합성
반응식 118
Figure 112016034409922-pct00226
단계 1. 에틸 1,4-디옥사스피로[4.5]데칸-8-카르복실레이트
에틸 4-옥소시클로헥산카르복실레이트 (15.01 g, 88.16 mmol)를 무수 톨루엔 (50 mL) 중 에틸렌 글리콜 (21 mL, 4.27 당량) 및 p-톨루엔술폰산 1수화물 (0.2 g, 0.012 당량)과 합하고, 혼합물을 실온에서 14시간 동안 교반하였다. 반응물을 에테르 (200 mL)로 희석하고, H2O (2x200 mL), 포화 중탄산나트륨 (100 mL) 및 염수 (80 mL)로 세척하였다. 유기 층을 건조 (Na2SO4)시키고, 여과하고, 감압 하에 농축시켜 에틸 4-옥소시클로헥산카르복실레이트 에틸렌 케탈 18.15 g (96% 수율)을 수득하였다. LCMS (m/z): 214.8 (MH+), 0.74분.
단계 2. 1,4-디옥사스피로[4.5]데칸-8-일메탄올
LiAlH4 (2.51 g, 66.3 mmol)를 THF (60 mL) 중에 현탁시킨 다음, 빙조에서 냉각시켰다. 현탁액에 THF (40 mL) 중에 용해시킨 에틸 1,4-디옥사스피로[4.5]데칸-8-카르복실레이트 (11.357 g, 53.0 mmol)를 적가하고, 반응 혼합물을 실온으로 1시간에 걸쳐 서서히 가온하였으며, 이때 LCMS는 SM의 완전한 환원을 나타내었다. 반응 혼합물을 에테르 (200 mL)로 희석하고, 2.5 mL 물에 이어서 5 mL (10% NaOH)에 이어서 7.5 mL 물로 켄칭하였다. 여기에, 무수 MgSO4를 첨가한 다음, 이를 30분 동안 교반하고, 셀라이트 상에서 여과하였다. 여과물을 진공 하에 농축시켜 목적 생성물을 정량적 수율로 수득하였다. LCMS (m/z): 173.1 (MH+), 0.41분.
단계 3. 4-((벤질옥시)메틸)시클로헥사논
1,4-디옥사스피로[4.5]데칸-8-일메탄올 (1.33 g, 7.72 mmol)을 DMF (14 mL) 중에 용해시킨 다음, 0℃로 냉각시켰다. 용액에 NaH (0.402 g, 10.04 mmol)를 조금씩 첨가하고, 혼합물을 10℃에서 1시간 동안 교반한 다음, 벤질 브로마이드 (1.194 mL, 10.04 mmol)를 첨가하고, 혼합물을 72시간에 걸쳐 교반하였다. 반응 혼합물을 물로 켄칭하고, 에테르로 추출하고, 합한 유기 추출물을 건조 (MgSO4)시키고, 여과하고, 진공 하에 농축시키고, 조 생성물 8-((벤질옥시)메틸)-1,4-디옥사스피로[4.5]데칸을 아세토니트릴 (35 mL) 및 물 (25 mL) 중에 용해시키고, 3N HCl (13 mL)로 처리하고, 실온에서 20분 동안 교반하였으며, 이때 LCMS는 목적 생성물을 나타내었다. 반응 혼합물을 40 mmol 수성 NaOH로 켄칭한 다음, EtOAc (200 mL)로 추출하고, 유기 층을 물로 세척하고, 건조 (MgSO4)시키고, 여과하고, 진공 하에 농축시키고, 잔류물을 플래쉬 크로마토그래피 (0-50% EtOAc/헵탄)에 의해 정제하여 목적 생성물 1.23 g을 무색 시럽 (73%)으로서 수득하였다. LCMS (m/z): 329.2 (MH+), 1.33분.
단계 4. 2-(4-((벤질옥시)메틸)시클로헥스-1-엔-1-일)-4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-디옥사보롤란
1,4-디옥사스피로[4.5]데칸-8-일메탄올 (1.23 g, 5.63 mmol)을 THF (22.5 mL) 중에 용해시키고, -78℃로 냉각시켰다. 이어서, LiHMDS (6.20 mL, 6.20 mmol)를 적가하고, 혼합물을 이 온도에서 1시간 동안 교반하였으며, 이때 1,1,1-트리플루오로-N-페닐-N-((트리플루오로메틸)술포닐)메탄술폰아미드 (2.214 g, 6.20 mmol)를 한번에 첨가하고, 반응 혼합물을 실온으로 가온되도록 하고, 밤새 교반하였다. 다음 날 아침, 반응 혼합물을 1.0 M NaHSO4로 켄칭하고, 용매를 진공 하에 증발시켰다. 잔류물을 NaOH/에테르 사이에 분배하고, 유기 층을 분리하고, 1.0 M NaOH로 2회 세척하고, 염수에 이어서 MgSO4로 건조시키고, 여과하고, 진공 하에 농축시켜 목적 생성물 4-((벤질옥시)메틸)시클로헥스-1-엔-1-일 트리플루오로메탄술포네이트를 정량적 수율로 수득하였으며, 이를 후속 단계에 어떠한 추가 정제도 없이 사용하였다. 중간체 4-((벤질옥시)메틸)시클로헥스-1-엔-1-일 (1000 mg, 2.85 mmol), B2(PIN)2 (1087 mg, 4.28 mmol), PdCl2(dppf)-CH2Cl2 (233 mg, 0.285 mmol) 및 KOAc (560 mg, 5.71 mmol)를 마이크로웨이브 바이알에 채운 다음, 디옥산 (9.5 mL)을 첨가하였다. 혼합물을 배기시키고, N2로 퍼징한 다음, 100℃로 22분 동안 마이크로웨이브에서 가열하였다. 조 혼합물을 에테르 및 물로 희석하고, 유기 층을 분리하고, 건조 (MgSO4)시키고, 여과하고, 진공 하에 농축시키고, 잔류물을 플래쉬 크로마토그래피 (0-10% EtOAc/헵탄)에 의해 정제하여 목적 생성물 (51%)을 수득하였다. LCMS (m/z): 219.2 (MH+), 0.88분.
단계 5. 메틸 4-(3-아미노-6-(4-((벤질옥시)메틸)시클로헥스-1-엔-1-일)피라진-2-일)-2-플루오로벤조에이트
메틸 4-(3-아미노-6-브로모피라진-2-일)-2-플루오로벤조에이트 (343 mg, 1.051 mmol), 2-(4-((벤질옥시)메틸)시클로헥스-1-엔-1-일)-4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-디옥사보롤란 (414 mg, 1.261 mmol), PdCl2(dppf)-CH2Cl2 부가물 (86 mg, 0.105 mmol)을 마이크로웨이브 바이알에 넣은 다음, DME (3.5 mL)를 첨가하였다. 이어서, 2.0 M Na2CO3 (1261 μL, 2.52 mmol)을 첨가하고, 혼합물을 탈기시키고, 질소로 퍼징한 다음, 115℃에서 30분 동안 가열하였으며, 이때 반응이 완결되었다. 반응 혼합물을 EtOAc로 희석하고, 물로 세척하고, 유기 층을 분리하고, 건조 (MgSO4)시키고, 여과하고, 농축시키고, 잔류물을 플래쉬 크로마토그래피 (0-100% EtOAc/헵탄)에 의해 정제하여 목적 생성물 381 mg을 황색 고체 (81%)로서 수득하였다. LCMS (m/z): 448.2 (MH+), 1.16분.
단계 6. 메틸 4-(3-아미노-6-(4-(히드록시메틸)시클로헥실)피라진-2-일)-2-플루오로벤조에이트
메틸 4-(3-아미노-6-(4-((벤질옥시)메틸)시클로헥스-1-엔-1-일)피라진-2-일)-2-플루오로벤조에이트 (381 mg, 0.851 mmol)를 THF (5 mL) 중에 용해시킨 다음, MeOH (15 mL)를 첨가한 다음, Pd-C (10% 습윤) (550 mg, 0.517 mmol)를 첨가하였다. 혼합물을 진공 하에 두고, 수소로 퍼징하고, 이 사이클을 3회 반복한 다음, 최종적으로 수소 하에 밤새 반복하였다. 14시간 후, LCMS는 알켄 포화 그러나 오직 부분적인 벤질 탈보호를 나타내었으며, 따라서 추가의 Pd-C (10% 습윤) (700 mg)를 첨가하고, 혼합물을 실온에서 추가로 5시간 동안 교반하였으며, 그 이후로 완전한 벤질 탈보호가 관찰되었다. 반응 혼합물을 여과하고, 진공 하에 농축시켜 목적 생성물 215.6 mg (70%)을 부분입체이성질체의 혼합물 (명시되지 않은 시스/트랜스)로서 수득하였다. LCMS (m/z): 360.2 (MH+), 0.71, 0.72분.
단계 7. (S)-4-(3-아미노-6-(4-(히드록시메틸)시클로헥실)피라진-2-일)-N-(1-(3-클로로페닐)-2-히드록시에틸)-2-플루오로벤즈아미드
메틸 4-(3-아미노-6-(4-(히드록시메틸)시클로헥실)피라진-2-일)-2-플루오로벤조에이트 (215.6 mg, 0.600 mmol)를 THF (3 mL) 중에 용해시킨 다음, MeOH (3 mL)를 첨가한 다음, 1.0 M LiOH (2400 μL, 2.400 mmol)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 밤새 및 다음 날 아침에 교반하였고, LCMS는 목적 생성물의 형성을 나타내었다. 반응 혼합물을 진공 하에 농축시킨 다음, THF와 2회 (각각 10 mL) 공비혼합한 다음, 디옥산 중 4.0 N HCl 1.5 mL로 산성화시키고, 진공 하에 농축시켰다. 잔류물을 DMSO (5 mL) 중에 용해시키고, 후속 단계에 그대로 사용하였다. LCMS (m/z): 346.2 (MH+), 0.57, 0.58분.
4-(3-아미노-6-((1s,4s)-4-플루오로시클로헥실)피라진-2-일)-2-플루오로벤조산의 합성
반응식 119
Figure 112016034409922-pct00227
단계 1. 메틸 4-(3-아미노-6-((1r,4r)-4-히드록시시클로헥실)피라진-2-일)-2-플루오로벤조에이트
메틸 4-(3-아미노-6-(4-옥소시클로헥실)피라진-2-일)-2-플루오로벤조에이트 (401.4 mg, 1.169 mmol)를 MeOH 중에 현탁시키고, 0℃로 냉각시켰다. 혼합물에 MeOH (5 mL) 중에 용해시킨 NaBH4 (133 mg, 3.51 mmol)를 첨가하고, 혼합물을 실온으로 서서히 가온하고, 30분 동안 교반하였으며, 이때 반응이 완결되었다. 반응 혼합물을 EtOAc 및 포화 NaHCO3으로 희석하고, 유기 층을 물로 2회 세척하고, 건조 (MgSO4)시키고, 여과하고, 진공 하에 농축시켜 목적 생성물 339.4 mg (84%)을 수득하였다. LCMS (m/z): 346.2 (MH+), 0.63분.
단계 2. 메틸 4-(3-아미노-6-((1s,4s)-4-플루오로시클로헥실)피라진-2-일)-2-플루오로벤조에이트
아세토니트릴 (3.2 mL) 중 메틸 4-(3-아미노-6-((1r,4r)-4-히드록시시클로헥실)피라진-2-일)-2-플루오로벤조에이트 (339.4 mg, 0.983 mmol)의 용액을 함유하는 플라스크를 얼음/염수 조에서 0℃로 냉각시키고, 퍼플루오로부탄술포닐 플루오라이드 (530 μl, 2.95 mmol)에 이어서 트리에틸아민 트리히드로플루오라이드 (480 μl, 2.95 mmol) 및 트리에틸아민 (1233 μl, 8.84 mmol)을 첨가하고, 생성된 반응 혼합물을 0℃에서 90분 동안 교반되도록 하였다. 경과 시간 후, LCMS는 2.5:1 비의 제거 vs. 목적 생성물을 나타내었다. 반응 혼합물을 물로 켄칭하고, EtOAc로 추출하고, 유기 추출물을 물로 2회 세척하고, 건조 (MgSO4)시키고, 여과하고, 진공 하에 농축시켜 조 생성물 혼합물을 수득하였으며, 이를 조심스럽게 크로마토그래피 (0-60% EtOAc/헵탄)하여 목적 생성물 67.5 mg (19.8%)을 수득하였다. LCMS (m/z): 348.2 (MH+), 0.86분.
단계 3. 4-(3-아미노-6-((1s,4s)-4-플루오로시클로헥실)피라진-2-일)-2-플루오로벤조산
메틸 4-(3-아미노-6-((1s,4s)-4-플루오로시클로헥실)피라진-2-일)-2-플루오로벤조에이트 (67.5 mg, 0.194 mmol)를 THF (1 mL) 및 MeOH (1 mL) 중에 용해시킨 다음, 1.0 M LiOH (0.777 mL, 0.777 mmol)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 교반하였다. 1시간 후, LCMS는 목적 산의 형성을 나타내었다. LCMS (m/z): 334.2 (MH+), 0.70분.
3-브로모-5-((1r,4r)-4-플루오로시클로헥실)피라진-2-아민의 합성
반응식 120
Figure 112016034409922-pct00228
단계 1. (1s,4s)-4-(5-아미노피라진-2-일)시클로헥산올
4-(5-아미노피라진-2-일)시클로헥사논 (1.049 g, 5.48 mmol)을 THF (10 mL) 중에 용해시키고, 0℃로 냉각시켰다. L-셀렉트리드 (12.06 mL, 12.06 mmol)를 적가하고, 혼합물을 20분 동안 교반하였으며, 이때 반응이 완결되었다. 반응 혼합물을 5 N NaOH (40 mmol)에 이어서 MeOH (5mL)로 켄칭하였다. 반응 혼합물을 2-메틸 THF로 희석하고, 수성 층을 분리하고, 유기 층을 염수로 세척하고, 건조 (MgSO4)시키고, 여과하고, 진공 하에 농축시켜 목적 생성물을 95:5 시스/트랜스 비로 수득하였으며, 이어서 이를 에테르로 연화처리하여 희미한 황색 침전물 586.3 mg을 목적 생성물 (55%)로서 수득하였다. LCMS (m/z): 194.1 (MH+), 0.32분.
단계 2 및 3. 3-브로모-5-((1r,4r)-4-플루오로시클로헥실)피라진-2-아민
반응식 119에서의 단계 2 및 3에 따라, 3-브로모-5-((1r,4r)-4-플루오로시클로헥실)피라진-2-아민을 수득하였다. LCMS (m/z): 276.0 (MH+), 0.81분.
4-(3-아미노-6-(4-시아노시클로헥실)피라진-2-일)-2-플루오로벤조산의 합성
Figure 112016034409922-pct00229
반응식 118에서의 단계 4 내지 7에 따라, 4-(3-아미노-6-(4-시아노시클로헥실)피라진-2-일)-2-플루오로벤조산을 수득하였다. LCMS (m/z): 341.2 (MH+), 0.64, 0.66분 (트랜스, 시스).
<표 5> 상기 기재된 방법 3을 사용하여 제조된 화합물.
Figure 112016034409922-pct00230
Figure 112016034409922-pct00231
Figure 112016034409922-pct00232
Figure 112016034409922-pct00233
Figure 112016034409922-pct00234
Figure 112016034409922-pct00235
Figure 112016034409922-pct00236
Figure 112016034409922-pct00237
Figure 112016034409922-pct00238
Figure 112016034409922-pct00239
Figure 112016034409922-pct00240
Figure 112016034409922-pct00241
Figure 112016034409922-pct00242
Figure 112016034409922-pct00243
Figure 112016034409922-pct00244
Figure 112016034409922-pct00245
Figure 112016034409922-pct00246
Figure 112016034409922-pct00247
Figure 112016034409922-pct00248
Figure 112016034409922-pct00249
Figure 112016034409922-pct00250
Figure 112016034409922-pct00251
Figure 112016034409922-pct00252
Figure 112016034409922-pct00253
Figure 112016034409922-pct00254
Figure 112016034409922-pct00255
Figure 112016034409922-pct00256
Figure 112016034409922-pct00257
Figure 112016034409922-pct00258
Figure 112016034409922-pct00259
Figure 112016034409922-pct00260
Figure 112016034409922-pct00261
Figure 112016034409922-pct00262
Figure 112016034409922-pct00263
Figure 112016034409922-pct00264
Figure 112016034409922-pct00265
Figure 112016034409922-pct00266
Figure 112016034409922-pct00267
Figure 112016034409922-pct00268
Figure 112016034409922-pct00269
Figure 112016034409922-pct00270
Figure 112016034409922-pct00271
Figure 112016034409922-pct00272
Figure 112016034409922-pct00273
Figure 112016034409922-pct00274
Figure 112016034409922-pct00275
Figure 112016034409922-pct00276
Figure 112016034409922-pct00277
Figure 112016034409922-pct00278
Figure 112016034409922-pct00279
Figure 112016034409922-pct00280
Figure 112016034409922-pct00281
Figure 112016034409922-pct00282
Figure 112016034409922-pct00283
Figure 112016034409922-pct00284
Figure 112016034409922-pct00285
Figure 112016034409922-pct00286
Figure 112016034409922-pct00287
Figure 112016034409922-pct00288
Figure 112016034409922-pct00289
Figure 112016034409922-pct00290
Figure 112016034409922-pct00291
Figure 112016034409922-pct00292
Figure 112016034409922-pct00293
Figure 112016034409922-pct00294
Figure 112016034409922-pct00295
Figure 112016034409922-pct00296
Figure 112016034409922-pct00297
실시예 453
4-(3-아미노-6-((1R,3R)-3-히드록시시클로펜틸)피라진-2-일)-2-플루오로-N-((S)-1-(3-플루오로-5-아이오도페닐)-2-히드록시에틸)벤즈아미드의 합성
Figure 112016034409922-pct00298
단계 1. tert-부틸 4-(3-아미노-6-(3-옥소시클로펜트-1-엔-1-일)피라진-2-일)-2-플루오로벤조에이트: 디옥산 (7 mL) 중 tert-부틸 4-(3-아미노-6-브로모피라진-2-일)-2-플루오로벤조에이트 (1 g, 2.72 mmol), 시클로펜트-2-에논 (0.892 g, 10.86 mmol), N-시클로헥실-N-메틸시클로헥산아민 (1.061 g, 5.43 mmol), 비스(트리-t-부틸포스핀)팔라듐(0) (0.069 g, 0.136 mmol), TBAC (0.075 g, 0.272 mmol)의 혼합물을 135℃에서 25분 동안 마이크로웨이브처리하였다. 냉각시킨 후, 혼합물을 농축시키고, 잔류물을 DCM 10 ml로 희석하고, 5분 동안 초음파처리하고, 여과하고, 고체를 DCM 3ml로 세척하였다. 합한 DCM 용액을 ISCO 이스코 실리카 칼럼 분리 (40 그램 칼럼, 헵탄 중 10에서 90% EtOAc)에 직접 적용하였다. 목적 생성물 400 mg을 담황색 고체로서 수득하였다. LCMS (m/z): (MH+) 370.0, 0.903분.
1H NMR (400 MHz, DMSO) δ ppm 1.12 - 1.26 (m, 5 H) 1.55 (s, 10 H) 1.59 - 1.72 (m, 5 H) 2.41 (dt, J=5.09, 2.15 Hz, 3 H) 2.48 (dt, J=3.62, 1.91Hz, 3 H) 3.00 (dd, J=5.09, 2.35 Hz, 2 H) 3.30 (s, 3 H) 6.66 (t, J=1.76 Hz, 1 H) 7.09 (s, H) 7.55 - 7.69 (m, H) 7.83 - 7.95 (m, 1 H) 8.57 (s, 1 H).
단계 2: tert-부틸 4-(3-아미노-6-(3-옥소시클로펜틸)피라진-2-일)-2-플루오로벤조에이트: MeOH (15 ml) 중 tert-부틸 4-(3-아미노-6-(3-옥소시클로펜트-1-엔-1-일)피라진-2-일)-2-플루오로벤조에이트 (650 mg, 1.760 mmol)에 DCM 15 ml를 투명한 용액이 수득될 때까지 교반 하에 첨가하였다. 용액을 질소로 5분 동안 퍼징한 다음, Pd/C (300 mg, 10%, 데구사 유형)를 첨가하고, 생성된 혼합물을 N2 스트림으로 15분 동안 탈기시켰다. 수소 기체 풍선을 장착한 후, 반응 혼합물을 실온에서 16시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 여과하고, 여과된 용액을 농축시키고, 조 물질을 이스코 (24 g 실리카 겔, 헵탄 중 20에서 80% EtOAc)에 의해 정제하여 목적 생성물 380 mg을 담황색 고체로서 수득하였다. 58.1% 수율. LC-MS (m/z): (MH+) 372.1, 0.829분.
단계 3: (+/-) tert-부틸 4-(3-아미노-6-((1R,3R)-3-히드록시시클로펜틸)피라진-2-일)-2-플루오로벤조에이트 및 (+/-)tert-부틸 4-(3-아미노-6-((1R,3S)-3-히드록시시클로펜틸)피라진-2-일)-2-플루오로벤조에이트: -78℃에서 MeOH (4 mL) 중 tert-부틸 4-(3-아미노-6-(3-옥소시클로펜틸)피라진-2-일)-2-플루오로벤조에이트 (200 mg, 0.538 mmol)의 용액에 NaBH4 (61.1 mg, 1.615 mmol)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 -78℃에서 1시간 동안 교반하였다. -78℃에서, 반응 혼합물을 포화 NH4Cl (4 ml)로 켄칭하고, 냉각 조를 제거하고, 혼합물을 실온으로 서서히 가온한 다음, 포화 NaHCO3 용액 (4 ml)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 EtOAc (30 ml x2)로 추출하였다. 유기 층을 물 및 염수로 세척하고, 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 진공 하에 농축시켰다. 조 생성물 약 210 mg을 수득하였다. 조 생성물을 DMSO 4 ml 중에 용해시키고, 여과하고, 정제용 HPLC에 의해 정제하였다. 보다 극성의 화합물은 트랜스 (바람직함, 더 일찍 나옴)이고, 덜 극성의 화합물은 시스이며, 이후에 나온다. 1N NaOH로 중화시킨 후, 트랜스 및 시스 화합물을 유리 염기 화합물로서 수득하였다.
(+/-) tert-부틸 4-(3-아미노-6-((1R,3R)-3-히드록시시클로펜틸)피라진-2-일)-2-플루오로벤조에이트: (40 mg, 19.9% 수율), 트랜스. LC-MS (m/z): (MH+) 374.1, 0.81분,
NMR (400 MHz, CD3CN) δ ppm 1.61 (s, 9 H) 1.69 - 1.82 (m, 1 H) 1.88 - 2.25 (m, 6 H) 2.59 - 2.77 (m, 1 H) 3.32 - 3.56 (m, 1 H) 4.31 - 4.48(m, 1 H) 5.07 (br. s., 2 H) 7.59 (dd, J=12.13, 1.56 Hz, 1 H) 7.66 (dd, J=8.02, 1.76 Hz, 1 H) 7.88 - 8.03 (m, 2 H).
(+/-) tert-부틸 4-(3-아미노-6-((1R,3R)-3-히드록시시클로펜틸)피라진-2-일)-2-플루오로벤조에이트: 150 mg, 74.6% 수율, 시스. LC-MS (m/z): (MH+) 374.1, 0.81분.
1H NMR (400 MHz, CD3CN) δ ppm: 1.55 - 1.67 (m, 9 H) 1.69 - 1.89 (m, 2 H) 1.91 - 2.03 (m, 4 H) 2.05 - 2.13 (m, 1 H) 2.21 - 2.33 (m, 1 H) 3.21 -3.41 (m, 1 H) 3.99 (s, 1 H) 4.20 - 4.34 (m, 1 H) 5.04 - 5.23 (m, 2 H) 7.50 - 7.58 (m, 1 H) 7.58 - 7.67 (m, 1 H) 7.90 - 8.05 (m, 2 H).
단계 4: tert-부틸 4-(3-아미노-6-((1R,3R)-3-히드록시시클로펜틸)피라진-2-일)-2-플루오로벤조에이트 및 tert-부틸 4-(3-아미노-6-((1S,3S)-3-히드록시시클로펜틸)피라진-2-일)-2-플루오로벤조에이트: 2종의 트랜스 이성질체 (160 mg 총)를 키랄 칼럼으로 분리하였다: OJ 칼럼 (21 X250 mm), SFC = 100 ml/분, CO2/EtOH = 85/15, 로딩: 70 mg/7ml EtOH, 274 bar. 각각의 거울상이성질체 80 mg을 수득하였다.
tert-부틸 4-(3-아미노-6-((1R,3R)-3-히드록시시클로펜틸)피라진-2-일)-2-플루오로벤조에이트:
NMR (400 MHz, DMSO) δ ppm: 1.04 (t, J=6.85 Hz, 1 H) 1.47 - 1.73 (m, 11 H) 1.75 - 1.86 (m, 2 H) 1.89 - 2.18 (m, 2 H) 3.15 (s, 1 H) 3.30 (s, 4H) 3.97 - 4.16 (m, 1 H) 4.19 - 4.39 (m, 1 H) 4.44 - 4.59 (m, 1 H) 6.10 (s, 2 H) 7.57 (d, J=12.13 Hz, 1 H) 7.63 (dd, J=8.02, 1.76 Hz, 1 H) 7.77 - 8.01 (m, 2 H).
tert-부틸 4-(3-아미노-6-((1S,3S)-3-히드록시시클로펜틸)피라진-2-일)-2-플루오로벤조에이트:
NMR (400 MHz, DMSO) δ ppm: 1.04 (t, J=6.85 Hz, 1 H) 1.14 - 1.28 (m, 1 H) 1.50 - 1.57 (m, 10 H) 1.59 - 1.71 (m, 1 H) 1.75 - 1.87 (m, 2 H)1.89 - 2.14 (m, 2 H) 3.15 (s, 1 H) 3.30 (s, 4 H) 4.18 - 4.37 (m, 1 H) 4.42 - 4.55 (m, 1 H) 6.10 (s, 2 H) 7.51 - 7.60 (m, 1 H) 7.63 (dd, J=8.02, 1.76 Hz,1 H) 7.81 - 7.95 (m, 2 H).
단계 5. 4-(3-아미노-6-((1R,3R)-3-히드록시시클로펜틸)피라진-2-일)-2-플루오로벤조산
절차: 실온에서 DCM (2 mL) 중 tert-부틸 4-(3-아미노-6-((1R,3R)-3-히드록시시클로펜틸)-피라진-2-일)-2-플루오로벤조에이트 (7 mg, 0.019 mmol)의 용액에 TFA (0.361 mL, 4.69 mmol)를 첨가하였다. 생성된 용액을 실온에서 2시간 동안 교반하였다. 용액을 농축시키고, 고진공에 의해 추가로 건조시켜 목적 생성물을 TFA 슬랫으로서 수득하였으며, 이를 후속 단계에 직접 사용하였다. (6 mg, 100% 수율) LC-MS (m/z): 318.1 (MH+), 0.46분.
단계 6: 4-(3-아미노-6-((1R,3R)-3-히드록시시클로펜틸)피라진-2-일)-2-플루오로-N-((S)-1-(3-플루오로-5-아이오도페닐)-2-히드록시에틸)벤즈아미드: DMF (1ml) 중 (4-(3-아미노-6-((1R,3R)-3-히드록시시클로펜틸)피라진-2-일)-2-플루오로벤조산) (6 mg, 0.019 mmol), (S)-2-아미노-2-(3-플루오로-5-아이오도페닐)에탄올 (8.96 mg, 0.028 mmol), HOAt (5.15 mg, 0.038 mmol) 및 EDC (7.25 mg, 0.038 mmol)의 혼합물에 DIEA (0.036 ml, 0.208 mmol)를 첨가하였다. 생성된 혼합물을 실온에서 밤새 교반하였다. 혼합물을 EtOAc로 희석하고, 물로 3회 및 염수로 세척하고, Na2SO4로 건조시키고, 여과하고, 농축시켜 조 생성물을 담황색 점성 액체로서 수득하였다. 이 조 물질을 정제용 HPLC에 의해 정제하여 목적 생성물 (6 mg, 45.2% 수율)을 담황색 고체, TFA 염으로서 수득하였다. LC-MS: (MH+) 0.726분에서 581.0.
1H NMR (400 MHz, CD3CN) δ ppm 1.56 - 1.82 (m, 2 H) 2.01 - 2.30 (m, 3 H) 3.47 (t, J=8.61 Hz, 1 H) 3.73 - 3.92 (m, 3 H) 4.32 - 4.45 (m, 2 H) 5.05 - 5.19 (m, 1 H) 7.16 - 7.27 (m, 1 H) 7.48 (dt, J=8.12, 1.81 Hz, 1 H) 7.56 - 7.71 (m, 4 H) 7.74 - 7.81 (m, 1 H) 7.97 (t, J=7.83 Hz, 1 H).
실시예 456
4-(3-아미노-6-((1S,4S)-3,3-디플루오로-4-히드록시시클로헥실)피라진-2-일)-2-플루오로-N-((S)-1-(3-플루오로-5-아이오도페닐)-2-히드록시에틸)벤즈아미드의 합성
Figure 112016034409922-pct00299
단계 1: 3-옥소시클로헥스-1-엔-1-일 트리플루오로메탄술포네이트: 질소 하에 0℃에서 CH2Cl2 (120 ml) 중 시클로헥산-1,3-디온 (8 g, 71.3 mmol)의 용액에, (빙수조) 탄산나트륨 (8.32 g, 78 mmol)을 첨가하였다. 생성된 혼합물을 0℃에서 10분 동안 교반하였다. DCM 35 ml 중 트리플루오로메탄술폰산 무수물 (12.05 ml, 71.3 mmol)의 용액을 1시간에 걸쳐 적가하였다. 혼합물을 0℃에서 1.5시간 동안 교반하였다. 혼합물을 소결 유리 깔때기를 통해 여과하고, 포화 NaHCO3 60 ml를 천천히 첨가하였다. 이어서, 유기 층을 분리하고, 염수 40ml로 세척하고, Na2SO4 상에서 건조시키고, 여과하고, 농축시켜 목적 생성물 9 g (52% 수율)을 담황색 액체로서 수득하였다. LC-MS (m/z): (MH+) 244.9, 0.72분.
단계 2: 3-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-디옥사보롤란-2-일)시클로헥스-2-에논, (3-옥소시클로헥스-1-엔-1-일)보론산: 디옥산 (80 mL) 중 3-옥소시클로헥스-1-엔-1-일 트리플루오로메탄술포네이트 (9 g, 36.9 mmol), 4,4,4',4',5,5,5',5'-옥타메틸-2,2'-비(1,3,2-디옥사보롤란) (14.04 g, 55.3 mmol), 아세트산칼륨 (10.85 g, 111 mmol) 및 Pd(dppf)Cl2.DCM (0.808 g, 1.106 mmol)의 혼합물을 질소로 5분 동안 플러싱한 다음, 90℃에서 밤새 가열하였다. 냉각시킨 후, 혼합물을 여과하고, 고체를 3x20mL 따뜻한 디옥산으로 세척하였다. 합한 용액을 디옥산 약 70 ml가 남을 때까지 농축시켰다. 이 생성물 (디옥산 중)을 후속 단계에 직접 사용하였다. LCMS (m/z): MH+=140.8 (보론산), 0.284분.
단계 3: tert-부틸 4-(3-아미노-6-(3-옥소시클로헥스-1-엔-1-일)피라진-2-일)-2-플루오로벤조에이트: 250 ml RB에 3-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-디옥사보롤란-2-일)시클로헥스-2-에논 (7.00 g, 31.5 mmol) (약 70 ml 디옥산 중), tert-부틸 4-(3-아미노-6-브로모피라진-2-일)-2-플루오로벤조에이트 (5.8 g, 15.75 mmol), Pd(dppf)Cl2.DCM (0.576 g, 0.788 mmol), 및 이어서 포화 Na2CO3 (25 mL)을 채웠다. 생성된 혼합물을 질소로 15분 동안 플러싱하였다. 이어서, DME (10 mL)를 첨가하였다. 혼합물을 100℃에서 밤새 교반하였다. 에틸 아세테이트 (150 ml) 및 물 (50 ml)을 첨가하고, 생성된 혼합물을 30분 동안 교반하였다. 유기부를 분리하고, 수성 층을 에틸 아세테이트 (30 ml x3)로 추출하였다. 유기 층을 합하고, Na2SO4 상에서 건조시키고, 여과하고, 증발시켜 조 목적 물질을 점착성 암색 반고체로서 수득하였다. 이 고체를 에테르 약 30 ml에 녹이고, 10분 동안 초음파처리하고, 침전된 황색 고체를 여과하고, 차가운 에테르 (5ml x3)로 세척하고, 고진공 하에 건조시켜 목적 생성물 (3.1 g, 51.3%)을 황색 고체로서 수득하였다. LC-MS (m/z): (MH+) 384.2, 0.92분.
단계 4: tert-부틸 4-(3-(비스(tert-부톡시카르보닐)아미노)-6-(3-옥소시클로헥스-1-엔-1-일)피라진-2-일)-2-플루오로벤조에이트: 실온에서 아세토니트릴 (25 mL) 중 tert-부틸 4-(3-아미노-6-(3-옥소시클로헥스-1-엔-1-일)피라진-2-일)-2-플루오로벤조에이트 (3 g, 7.82 mmol)의 현탁액에 DMAP (0.048 g, 0.391 mmol)에 이어서 Boc-무수물 (6.36 mL, 27.4 mmol)을 첨가하였다. 생성된 혼합물을 실온에서 25분 동안 교반하였다. 용액을 EtOAc로 희석하고, 포화 NaHCO3 및 물로 세척하고, 건조시키고, 농축시켰다. 조 생성물을 이스코 분리 (80 g 실리카, 30분, 헵탄 중 5에서 60% EtOAc)에 의해 정제하였다. 목적 생성물을 담황색 점착성 액체로서 수득하였으며, 이를 정치 시 밤새 응고시켰다. (3.5 g, 6.00 mmol, 77% 수율). LC-MS (m/z): (MH+) 584.2, 1.286분.
1H NMR (400 MHz, 아세토니트릴-d3) δ ppm 0.91 (s, 1 H) 1.31 (s, 16 H) 1.61 (s, 7 H) 1.88 - 2.03 (m, 1 H) 2.16 (s, 2 H) 2.50 (d, J=7.04 Hz, 2H) 2.85 - 3.09 (m, 2 H) 6.90 (s, 1 H) 7.51 - 7.71 (m, 2 H) 7.91 - 8.11 (m, 1 H) 8.92 (s, 1 H).
단계 5: tert-부틸 4-(3-(비스-(tert-부톡시카르보닐)아미노)-6-(3-옥소시클로헥실)피라진-2-일)-2-플루오로벤조에이트: 실온에서 MeOH (15 mL) 및 DCM (10 mL) 중 tert-부틸 4-(3-(비스(tert-부톡시카르보닐)아미노)-6-(3-옥소시클로헥스-1-엔-1-일)피라진-2-일)-2-플루오로벤조에이트 (3g, 5.14 mmol)의 용액에 Pd-C (10%, 데구사, 1.094 g, 1.028 mmol)를 첨가하였다. 생성된 혼합물을 수소로 10분 동안 플러싱한 다음, 수소 분위기 하에 실온에서 5시간 동안 교반하였다. 현탁액을 여과하고, 용액을 농축시켰다. 이스코 실리카 칼럼 분리 (80 g 실리카, 30분, 헵탄 중 5에서 60% EtOAc)로 목적 생성물을 담황색 점착성 액체로서 수득하였으며, 이를 정치 시 밤새 응고시켰다. (1.485 g, 2.54 mmol, 49.3% 수율). LC-MS (m/z): (MH+) 586.3, 1.17분.
단계 6: tert-부틸 4-(6-((1S,4S)-4-(벤조일옥시)-3-옥소시클로헥실)-3-(비스(tert-부톡시카르보닐)아미노)피라진-2-일)-2-플루오로벤조에이트 및 tert-부틸 4-(6-((1R,4R)-4-(벤조일옥시)-3-옥소시클로헥실)-3-(비스(tert-부톡시카르보닐)아미노)피라진-2-일)-2-플루오로벤조에이트:
A: 유리 염기 촉매의 제조: (S)-(6-메톡시퀴놀린-4-일)((1S,2R,4S,5R)-5-비닐퀴누클리딘-2-일)메탄아민 (트리.HCl 염) 300 mg을 DCM 20 ml 중에 용해시킨 다음, 1N NaOH (5 ml)로 중화시키고, 유기 층을 분리하고, 염수 (5ml x2) 및 물 (5ml x2)로 세척하고, 건조시키고, 여과하고, 농축시켜 생성물을 유리 염기로서 수득하였다. (디옥산 4 ml 중 200 mg 유리 염기 아민).
B: 자기 교반 막대가 장착된 10 mL 마이크로웨이브 바이알에, tert-부틸 4-(3-(비스-(tert-부톡시카르보닐)아미노)-6-(3-옥소시클로헥실)피라진-2-일)-2-플루오로벤조에이트 (1.485 g, 2.54 mmol), BHT (부틸화 히드록실톨루엔, 0.067 g, 0.304 mmol), (S)-(6-메톡시퀴놀린-4-일)((1S,2R,4S,5R)-5-비닐퀴누클리딘-2-일)메탄아민 (0.098 g, 0.304 mmol) (디옥산 2 ml 중) 및 트리클로로아세트산 (0.050 g, 0.304 mmol)을 채웠다. 이어서, 디옥산 (1ml)을 첨가하고, 생성된 혼합물을 5분 동안 교반한 후, 벤조산 퍼옥시무수물 (0.983 g, 4.06 mmol)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 30℃에서 16시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 디클로로메탄으로 희석하고, NaHCO3의 포화 수용액으로 희석하고, 염수로 세척하고, Na2SO4 상에서 건조시키고, 여과하고, 대략 3 ml의 DCM으로 농축시켰다. 조 물질 (DCM 3 ml 중)을 이스코 플래쉬 칼럼 크로마토그래피에 의해 헵탄 중 EtOAc (헵탄 중 10에서 45% EtOAc, 120 g 실리카 겔 칼럼, 35분)로 용리시키면서 정제하였다. 거울상선택성은 이 스테이지에서 키랄-상 HPLC 분석에 의해 결정될 수 없었다. 이용가능한 모든 칼럼/방법에 의한 어떠한 분리도 관찰되지 않았다. 이 생성물을 직접 후속 단계 반응에 사용하였다. (730 mg, 40.8% 수율) LC-MS (m/z): (MH+) 1.38분에서 706.3.
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ ppm 1.26 - 1.41 (m, 19 H) 1.46 - 1.67 (m, 11 H) 2.08 - 2.22 (m, 1 H) 2.26 - 2.42 (m, 2 H) 2.50 - 2.67 (m, 1 H) 2.70- 2.91 (m, 1 H) 3.08 (s, 1 H) 3.26 - 3.49 (m, 1 H) 4.03 - 4.19 (m, 1 H) 5.49 - 5.67 (m, 1 H) 7.26 (d, J=0.78 Hz, 2 H) 7.40 - 7.66 (m, 5 H) 7.97 (t,J=7.83 Hz, 1 H) 8.07 - 8.19 (m, 2 H) 8.41 (s, 1 H).
단계 7: tert-부틸 4-(6-(4-(벤조일옥시)-3,3-디플루오로시클로헥실)-3-(비스(tert-부톡시카르보닐)아미노)피라진-2-일)-2-플루오로벤조에이트: 실온에서 DCM (7 mL) 중 tert-부틸 4-(6-((1S,4S)-4-(벤조일옥시)-3-옥소시클로헥실)-3-(비스(tert-부톡시카르보닐)아미노)피라진-2-일)-2-플루오로벤조에이트 (730 mg, 1.034 mmol)의 용액에 엑스탈플루오르-E (939 mg, 4.14 mmol)에 이어서 트리에틸아민 트리히드로플루오라이드 (0.674 mL, 4.14 mmol)를 첨가하였다. 생성된 혼합물을 실온에서 5시간 동안 교반하였다. 혼합물을 여과하고, 여과된 용액을 이스코 분리에 대해 직접 적용하였다: 24 g 실리카 겔, 헵탄 중 0에서 70% EtOAc, 30분. 담황색 고체 (670 mg, 0.902 mmol, 87% 수율)를 수득하였다. LC-MS (m/z): (MH+) 0.95분에서 728.0 (비-극성 MS 방법).
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ ppm 0.88 (s, 2 H) 1.19 - 1.39 (m, 21 H) 1.48 - 1.68 (m, 11 H) 1.86 - 2.08 (m, 2 H) 2.08 - 2.21 (m, 1 H) 2.26 - 2.47(m, 2 H) 2.47 - 2.63 (m, 1 H) 3.21 - 3.44 (m, 1 H) 5.22 - 5.51 (m, 1 H) 7.41 - 7.55 (m, 4 H) 7.60 (s, 1 H) 7.96 (d, J=7.82 Hz, 1 H) 8.06 - 8.19 (m, 2H) 8.42 (s, 1 H).
단계 8: 4-(3-아미노-6-(4-(벤조일옥시)-3,3-디플루오로시클로헥실)피라진-2-일)-2-플루오로벤조산: 실온에서 DCM (12 mL) 중 tert-부틸 4-(6-(4-(벤조일옥시)-3,3-디플루오로시클로헥실)-3-(비스(tert-부톡시카르보닐)아미노)피라진-2-일)-2-플루오로벤조에이트 (670 mg, 0.921 mmol)의 용액에 TFA (4.96 mL, 64.4 mmol)를 첨가하였다. 생성된 혼합물을 실온에서 2시간 동안 교반하였다. 혼합물을 농축시키고, EtOAc로 희석하고, NaHCO3으로 2회 이어서 염수로 중화시킨 다음, 유기 층을 분리하고, 건조시키고, 농축시켜 조 생성물을 수득하였고, 이를 후속 단계에 직접 사용하였다. (434 mg, 0.921 mmol, 100% 수율). LC-MS (m/z): (MH+) 0.942분에서 472.1.
1H NMR (400 MHz, DMSO) δ ppm: 1.07 (t, J=7.04 Hz, 2 H) 1.83 (t, J=10.17 Hz, 2 H) 2.16 (d, J=5.09 Hz, 1 H) 2.29 - 2.45 (m, 2 H) 3.02 (br. s., 1H) 3.16 - 3.44 (m, 9 H) 5.22 - 5.52 (m, 1 H) 5.73 (s, 1 H) 6.24 (s, 2 H) 7.44 - 7.75 (m, 5 H) 7.89 (t, J=7.83 Hz, 1 H) 7.94 - 8.07 (m, 3 H).
단계 9: 4-(5-아미노-6-(3-플루오로-4-(((S)-1-(3-플루오로-5-아이오도페닐)-2-히드록시에틸)카르바모일)페닐)피라진-2-일)-2,2-디플루오로시클로헥실 벤조에이트, 4-(5-아미노-6-(3-플루오로-4-(((S)-1-(3-플루오로-5-아이오도페닐)-2-히드록시에틸)카르바모일)페닐)피라진-2-일)-2,2-디플루오로시클로헥실 벤조에이트: DMF (5 mL) 중 4-(3-아미노-6-(4-(벤조일옥시)-3,3-디플루오로시클로헥실)피라진-2-일)-2-플루오로벤조산 (434 mg, 0.92 mmol), (4-(3-아미노-6-((4R)-4-(벤조일옥시)-3,3-디플루오로시클로헥실)피라진-2-일)-2-플루오로벤조산), (S)-2-아미노-2-(3-플루오로-5-아이오도페닐)에탄올 (320 mg, 1.012 mmol), HOAt (250 mg, 1.840 mmol) 및 EDC (353 mg, 1.840 mmol)의 혼합물에 DIEA (1.607 mL, 9.20 mmol)를 첨가하였다. 생성된 혼합물을 실온에서 밤새 교반하였다. 혼합물을 EtOAc로 희석하고, 물로 3회 및 염수로 세척하고, 건조시키고, 농축시켜 조 생성물을 담황색 점성 액체로서 수득하였다.
이스코 정제 (24 g 실리카, 헵탄 중 10에서 80% EtOAc, 35분) 후, 목적 생성물을 담황색 액체로서 수득하였으며, 이는 2종의 가능한 이성질체를 함유하였다. (601 mg, 0.818 mmol, 89% 수율) LC-MS (m/z): (MH+) 1.09분에서 735.0.
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ ppm 1.71 (br. s., 1 H) 1.80 - 2.00 (m, 2 H) 2.18 - 2.39 (m, 2 H) 2.39 - 2.52 (m, 1 H) 2.53 - 2.70 (m, 1 H) 3.13 (br. s.,1 H) 3.82 - 4.07 (m, 2 H) 4.78 (s, 2 H) 5.23 (d, J=5.09 Hz, 2 H) 7.02 - 7.16 (m, 1 H) 7.31 - 7.39 (m, 1 H) 7.41 - 7.50 (m, 2 H) 7.50 - 7.76 (m, 5 H) 7.87 - 8.03 (m, 2 H) 8.07 - 8.23 (m, 3 H).
단계 10: 4-(3-아미노-6-(3,3-디플루오로-4-히드록시시클로헥실)피라진-2-일)-2-플루오로-N-((S)-1-(3-플루오로-5-아이오도페닐)-2-히드록시에틸)벤즈아미드: 실온에서 MeOH (8 ml), THF (8 ml) 및 물 (8 ml) 중 4-(5-아미노-6-(3-플루오로-4-(((S)-1-(3-플루오로-5-아이오도페닐)-2-히드록시에틸)카르바모일)페닐)피라진-2-일)-2,2-디플루오로시클로헥실 벤조에이트 (600 mg, 0.817 mmol)에 LiOH.H2O (206 mg, 4.90 mmol)를 첨가하였다. 생성된 혼합물을 25℃에서 2시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 농축시키고, 잔류물에 EtOAc 30 ml를 첨가하고, 물 (10 ml x3)로 세척하고, 건조시키고, 여과하고, 농축시켜 조 생성물을 담황색 점착성 액체로서 수득하였으며, 이는 밤새 정치 후 회백색 고체가 되었다. (515 mg, 100% 수율). LC-MS (m/z): (MH+) 0.771분에서 631.1.
단계 11: 4-(3-아미노-6-((1S,4S)-3,3-디플루오로-4-히드록시시클로헥실)피라진-2-일)-2-플루오로-N-((S)-1-(3-플루오로-5-아이오도페닐)-2-히드록시에틸)벤즈아미드: 단계 10으로부터 수득된 화합물을 키랄 분리 칼럼 (OJ 칼럼 (21 X250 mm), SFC = 100 ml/분, CO2/EtOH = 85/15, 로딩: 70 mg/7ml EtOH, 274 bar)에 의해 정제하여 2종의 키랄 순수한 화합물: 4-(3-아미노-6-((1S,4S)-3,3-디플루오로-4-히드록시시클로헥실)피라진-2-일)-2-플루오로-N-((S)-1-(3-플루오로-5-아이오도페닐)-2-히드록시에틸)벤즈아미드 (255 mg, 27.8% 수율)을 수득하였다.
1H NMR (400 MHz, DMSO) δ ppm 1.46 - 1.69 (m, 2 H) 1.71 - 2.26 (m, 4 H) 2.79 - 3.02 (m, 1 H) 3.58 - 3.83 (m, 2 H) 4.94 - 5.15 (m, 2 H) 5.25 -5.45 (m, 1 H) 6.11 - 6.26 (m, 1 H) 7.19 - 7.34 (m, 1 H) 7.46 - 7.56 (m, 1 H) 7.56 - 7.66 (m, 2 H) 7.66 - 7.77 (m, 1 H) 7.95 (s, 1 H) 8.66 - 8.79 (m, 1H).
4-(3-아미노-6-((1R,4R)-3,3-디플루오로-4-히드록시시클로헥실)피라진-2-일)-2-플루오로-N-((S)-1-(3-플루오로-5-아이오도페닐)-2-히드록시에틸)벤즈아미드 (53 mg, 5.77% 수율).
1H NMR (400 MHz, DMSO) δ ppm 1.15 - 1.30 (m, 1 H) 1.48 - 1.69 (m, 2 H) 1.72 - 2.25 (m, 5 H) 2.77 - 2.97 (m, 2 H) 3.57 - 3.84 (m, 3 H) 4.92 -5.14 (m, 2 H) 5.27 - 5.42 (m, 1 H) 6.10 - 6.24 (m, 2 H) 7.16 - 7.34 (m, 1 H) 7.46 - 7.57 (m, 1 H) 7.57 - 7.67 (m, 2 H) 7.67 - 7.77 (m, 1 H) 7.95 (s, 1H) 8.63 - 8.80 (m, 1 H).
실시예 473
(S)-4-(3-아미노-6-(모르폴린-4-카르보닐)피라진-2-일)-N-(1-(3-브로모-5-플루오로페닐)-2-히드록시에틸)-2-플루오로벤즈아미드의 합성
Figure 112016034409922-pct00300
단계 1: 에틸 5-아미노-6-브로모피라진-2-카르복실레이트: 실온에서 아세토니트릴 (20 mL) 중 에틸 5-아미노피라진-2-카르복실레이트 (880 mg, 5.26 mmol)의 용액에 NBS (984 mg, 5.53 mmol)를 첨가하고, 생성된 용액을 실온에서 1시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 EtOAc로 희석하고, 포화 NaHCO3, 염수 및 물로 세척하고, 건조시키고, 여과하고, 농축시켜 조 생성물을 수득하였으며, 이를 이스코 (24 g 실리카 겔 칼럼, 헵탄 중 0에서 50% EtOAc, 30분)에 의해 정제하였다. 1.01 g, 78% 수율. LC-MS (m/z): 247.9 (MH+), 0.51분.
단계 2: 에틸 5-아미노-6-(4-(tert-부톡시카르보닐)-3-플루오로페닐)피라진-2-카르복실레이트: DME (5 mL) 중 에틸 5-아미노-6-브로모피라진-2-카르복실레이트 (210 mg, 0.853 mmol), tert-부틸 2-플루오로-4-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-디옥사보롤란-2-일)벤조에이트 (357 mg, 1.109 mmol), PdCl2(dppf).CH2Cl2 부가물 (69.7 mg, 0.085 mmol) 및 Na2CO3 (362 mg, 3.41 mmol) (2M 용액을 사용하였음)의 혼합물을 20 ml 바이알에 넣고, 밀봉하였다. 혼합물을 15분 동안 110℃에서 마이크로웨이브처리하였다. 혼합물을 EtOAc로 희석하고, 물로 2회 및 염수로 세척하고, 건조시키고, 여과하고, 농축시켜 조 물질을 담황색 고체로서 수득하였다. 조 생성물을 이스코 (12 g, 헵탄 중 10 -55% EtOAc, 30분)에 의해 정제하여 담황색 고체 228 mg (74% 수율)을 수득하였다. LC-MS (m/z): 362.1 (MH+), 0.89분.
단계 3: 4-(3-아미노-6-(에톡시카르보닐)피라진-2-일)-2-플루오로벤조산: 실온에서 DCM (4 mL) 중 에틸 5-아미노-6-(4-(tert-부톡시카르보닐)-3-플루오로페닐)피라진-2-카르복실레이트 (0.253 g, 0.7 mmol)의 용액에 TFA (2.157 mL, 28.0 mmol)를 첨가하였다. 생성된 용액을 실온에서 2시간 동안 교반하였다. 반응 용액을 농축시키고, 추가로 건조시켜 조 목적 생성물을 TFA 염으로서 수득하였다. 이 생성물을 직접 후속 단계에 사용하였다. 담색 점착성 액체 0.214 g (100% 수율)을 수득하였다. LC-MS (m/z): 306.1 (MH+), 0.563분.
단계 4: (S)-에틸 5-아미노-6-(4-((1-(3-브로모-5-플루오로페닐)-2-히드록시에틸)카르바모일)-3-플루오로페닐)피라진-2-카르복실레이트: DMF (2.5 mL) 중 4-(3-아미노-6-(에톡시카르보닐)피라진-2-일)-2-플루오로벤조산 (0.214 g, 0.7 mmol), (S)-2-아미노-2-(3-브로모-5-플루오로페닐)에탄올 (272 mg, 1.009 mmol), HOAt (187 mg, 1.376 mmol) 및 EDC (264 mg, 1.376 mmol)의 혼합물에 DIEA (0.961 mL, 5.50 mmol)를 첨가하였다. 생성된 혼합물을 실온에서 밤새 교반하였다. 혼합물을 EtOAc로 희석하고, 물로 3회 및 염수로 세척하고, 건조시키고, 농축시켜 조 생성물을 담황색 점성 액체로서 수득하였다. 이스코 정제 (12 g 실리카, 헵탄 중 10에서 90% EtOAc, 30분)로 목적 생성물 (200 mg, 84% 수율)을 담황색 액체로서 수득하였다. LC-MS (m/z): 522.9 (MH+), 0.787분.
단계 5: (S)-5-아미노-6-(4-((1-(3-브로모-5-플루오로페닐)-2-히드록시에틸)카르바모일)-3-플루오로페닐)피라진-2-카르복실산: MeOH (2ml), THF (2mL) 및 물 (2mL) 중 (S)-에틸 5-아미노-6-(4-((1-(3-브로모-5-플루오로페닐)-2-히드록시에틸)카르바모일)-3-플루오로페닐)피라진-2-카르복실레이트 (220 mg, 0.422 mmol) 및 LiOH.H2O (142 mg, 3.38 mmol)의 혼합물을 실온에서 3시간 동안 교반하였다. 혼합물을 농축시키고, 잔류물에 물 2mL를 첨가한 다음, 3N HCl을 교반 하에 최종 pH가 약 4가 되었을 때까지 첨가하였다. 이어서, 생성된 혼합물을 농축시키고, 추가로 건조시켜 조 생성물을 담황색 고체 (208 mg, 0.422 mmol, 100% 수율)로서 수득하였다. LC-MS (m/z): 494.9 (MH+), 0.653분.
단계 6: (S)-4-(3-아미노-6-(모르폴린-4-카르보닐)피라진-2-일)-N-(1-(3-브로모-5-플루오로페닐)-2-히드록시에틸)-2-플루오로벤즈아미드: DMF (0.5 mL) 중 (S)-5-아미노-6-(4-((1-(3-브로모-5-플루오로페닐)-2-히드록시에틸)카르바모일)-3-플루오로페닐)피라진-2-카르복실산 (40 mg, 0.081 mmol), 모르폴린 (28.3 mg, 0.324 mmol), HOAt (33.1 mg, 0.243 mmol) 및 EDC (46.6 mg, 0.243 mmol)의 혼합물에 DIEA (0.170 mL, 0.973 mmol)를 첨가하였다. 생성된 혼합물을 실온에서 밤새 교반하였다. 혼합물을 EtOAc로 희석하고, 물로 3회 및 염수로 세척하고, 건조시키고, 농축시켜 조 생성물을 담황색 점성 액체로서 수득하였다. 조 생성물을 DMSO 1.5 ml 중에 용해시키고, 여과하고, 정제용 HPLC에 의해 정제하였다 (14 mg, 25.3% 수율). LC-MS (m/z): 563.9 (MH+), 0.707분.
1H NMR (500 MHz, 아세토니트릴-d3) δ ppm 3.56 - 3.99 (m, 13 H) 5.06 - 5.23 (m, 1 H) 5.78 - 6.13 (m, 2 H) 7.22 (d, J=8.20 Hz, 1 H) 7.27 -7.36 (m, 1 H) 7.41 - 7.79 (m, 5 H) 7.89 - 8.05 (m, 1 H) 8.25 - 8.43 (m, 1 H).
실시예 478a 및 478b
4-(3-아미노-6-((R)-6-옥소피페리딘-3-일)피라진-2-일)-2-플루오로-N-((S)-1-(3-플루오로-5-아이오도페닐)-2-히드록시에틸)벤즈아미드 (실시예 478a) 및 4-(3-아미노-6-((S)-6-옥소피페리딘-3-일)피라진-2-일)-2-플루오로-N-((S)-1-(3-플루오로-5-아이오도페닐)-2-히드록시에틸)벤즈아미드 (실시예 478b).
Figure 112016034409922-pct00301
1-(4-메톡시벤질)피페리딘-2,6-디온: 글루타르이미드 (5 g, 44.2 mmol)를 아세톤 (부피: 100 mL)에 이어서 K2CO3 (12.22 g, 88 mmol), Bu4NI (3.27 g, 8.84 mmol) 중에 현탁시키고, 4-메톡시벤질 클로라이드 (6.02 mL, 44.2 mmol)를 첨가하였다. 혼합물을 실온에서 밤새 교반하고, 셀라이트를 통해 여과한 다음, 진공 하에 농축시키고, 잔류물을 플래쉬 크로마토그래피 (0-50% EtOAc/헵탄)에 의해 정제하여 목적 생성물 8.99 g을 무색 고체로서 수득하였다. LCMS (m/z): (MH+), 234.2, 0.66분.
1-(4-메톡시벤질)-3,4-디히드로피리딘-2(1H)-온: 1-(4-메톡시벤질)피페리딘-2,6-디온 (8.99 g, 38.5 mmol)을 톨루엔 (부피: 128 ml) 중에 용해시키고, -78℃로 냉각시켰다. L-셀렉트리드 (42.4 ml, 42.4 mmol)를 적가하고, 혼합물을 1시간 동안 교반하였다. 1시간 후, 농후한 슬러리와 함께 침전물이 관찰되었다. 반응 혼합물을 냉각 조 외부로 잠시 꺼내어 혼합물을 균질화하였다. 이어서, DMAP (0.047 g, 0.385 mmol)를 한번에 첨가한 다음, DIEA (38.4 ml, 220 mmol)를 첨가한 다음, TFAA (6.53 ml, 46.2 mmol)를 첨가하였다. 이어서, 냉각 플라스크를 제거하고, 혼합물을 실온에서 2시간 동안 교반한 다음, 물로 켄칭하고, 생성물을 EtOAc로 추출하였다. 합한 유기 층을 건조 (MgSO4)시키고, 여과하고, 진공 하에 농축시켜 조 잔류물을 수득하였으며, 이를 플래쉬 크로마토그래피에 의해 정제하여 목적 생성물 7.66g을 황색 시럽으로서 수득하였다. LCMS (m/z): (MH+), 234.2, 0.73분.
5-아이오도-1-(4-메톡시벤질)-3,4-디히드로피리딘-2(1H)-온: 1-(4-메톡시벤질)-3,4-디히드로피리딘-2(1H)-온 (2 g, 9.21 mmol)을 MeOH (90 mL) 중에 용해시키고, -78℃로 냉각시켰다. ICl (13.81 ml, 13.81 mmol)을 천천히 첨가하고, 혼합물을 1시간 동안 교반한 다음, 포화 Na2S2O3을 첨가하고, 혼합물을 실온이 관찰될 때까지 교반하였다. 용매를 진공 하에 증발시켰다. 잔류물을 DCM 중에 용해시키고, 포화 Na2S2O3에 이어서 물로 세척하고, 건조 (MgSO4)시키고, 여과하고, 진공 하에 농축시켰다. 잔류물을 톨루엔 (40 mL) 중에 용해시키고, 트리플루오로아세트산 (100 uL)으로 처리하고, 145℃로 15분 동안 즉시 가열한 다음, 0℃로 냉각시키고, ET3N (5 mL)을 첨가하였다. 혼합물을 1시간 동안 교반하고, 진공 하에 농축시킨 다음, 잔류물을 플래쉬 크로마토그래피 (0-20% EtOAc/헵탄)에 의해 정제하여 목적 생성물을 점착성 시럽로서 수득하였다. LCMS (m/z): (MH+), 344.1, 0.88분.
메틸 4-(3-아미노-6-(1-(4-메톡시벤질)-6-옥소-1,4,5,6-테트라히드로피리딘-3-일)피라진-2-일)-2-플루오로벤조에이트: 5-아이오도-1-(4-메톡시벤질)-3,4-디히드로피리딘-2(1H)-온 (630 mg, 1.836 mmol), PdCl2(dppf).CH2Cl2 부가물 (150 mg, 0.184 mmol), 메틸 4-(3-아미노-6-브로모피라진-2-일)-2-플루오로벤조에이트 (1028 mg, 2.75 mmol) 및 Na2CO3 (2754 μl, 5.51 mmol)을 플라스크 중에서 합한 다음, DME (부피: 6120 μl)를 첨가하였다. 혼합물을 탈기시키고, 질소로 퍼징한 다음, 90℃에서 2시간 동안 최종적으로 가열하였으며, 이때 출발 물질의 완전한 소모가 관찰되었다. 반응 혼합물을 EtOAc 및 물로 희석하고, 유기 층을 분리하고, 건조 (MgSO4)시키고, 여과하고, 진공 하에 농축시키고, 잔류물을 플래쉬 크로마토그래피 (0-60% EtOAc/DCM)에 의해 정제하여 목적 생성물 361 mg을 황색 고체로서 수득하였다. LCMS (m/z): (MH+), 463.1, 0.88분.
메틸 4-(3-아미노-6-(6-옥소피페리딘-3-일)피라진-2-일)-2-플루오로벤조에이트: 메틸 4-(3-아미노-6-(1-(4-메톡시벤질)-6-옥소-1,4,5,6-테트라히드로피리딘-3-일)피라진-2-일)-2-플루오로벤조에이트 (361 mg, 0.781 mmol)를 MeOH (부피: 7 mL) 중에 용해시킨 다음, Pd-C (400 mg, 3.76 mmol)를 첨가하였다. 혼합물을 배기시키고, 수소로 3회 퍼징하고, 최종적으로, 혼합물을 1 atm의 수소 하에 밤새 교반하였다. 다음 날 아침, 과산화된 아미노-피라진과 함께 목적 생성물을 수득하였다. 혼합물을 셀라이트 상에서 여과하고, 여과물을 진공 하에 농축시키고, 잔류물을 DCM 중에 용해시키고, 공기 하에 1일 동안 교반한 다음, 농축시키고, 플래쉬 크로마토그래피 (0-50% DCM/EtOAc)에 의해 정제하여 목적 생성물 144 mg을 황색 고체로서 수득하였다. LCMS (m/z): (MH+), 465.1, 0.81분.
4-(3-아미노-6-(6-옥소피페리딘-3-일)피라진-2-일)-2-플루오로벤조산: 메틸 4-(3-아미노-6-(6-옥소피페리딘-3-일)피라진-2-일)-2-플루오로벤조에이트 (144 mg, 0.310 mmol)를 TFA (부피: 3 mL) 중에 용해시키고, 마이크로웨이브 중에 150℃에서 30분 동안 가열하였다. 용매를 진공 하에 증발시키고, 잔류물을 톨루엔과 3회 공비혼합하여 조 탈벤질화된 락탐을 수득하였다. 이 조 생성물을 THF (부피: 3 mL, 비: 3) 및 MeOH (부피: 1.500 mL, 비: 1.5) 중에 용해시키고, 혼합물에 물 중 LiOH (0.037 g, 1.550 mmol) (부피: 1.500 mL, 비: 1.5)를 첨가하였다. 혼합물을 실온에서 30분 동안 교반하고, 진공 하에 농축시키고, 잔류물을 2 mL (4.0 N HCl)로 중화시키고, 용매를 증발시켰다. 잔류물을 THF와 1회 및 톨루엔과 1회 공비혼합하여 조 산을 수득하였으며, 이를 후속 단계에 어떠한 추가 정제도 없이 사용하였다 (정량적 수율을 추정함). LCMS (m/z): (MH+), 331.2, 0.44분.
4-(3-아미노-6-(6-옥소피페리딘-3-일)피라진-2-일)-2-플루오로-N-((S)-1-(3-플루오로-5-아이오도페닐)-2-히드록시에틸)벤즈아미드: 4-(3-아미노-6-(6-옥소피페리딘-3-일)피라진-2-일)-2-플루오로벤조산 (41.0 mg, 0.124 mmol), DIEA (0.108 mL, 0.620 mmol) 및 HATU (94 mg, 0.248 mmol)를 DMF (1.0 mL) 중에서 합한 다음, (S)-2-아미노-2-(3-플루오로-5-아이오도페닐)에탄올 (39.4 mg, 0.124 mmol)을 첨가하였다. 혼합물을 실온에서 1시간 동안 교반한 다음, 역상 HPLC에 의한 직접 정제로 처리하여 정제하여 표제 화합물을 TFA 부가물로서 수득하였다. 동결건조 시 수득된 고체를 MeOH 중에 용해시키고, 실리카 카트리지를 함유하는 염기성 카르보네이트를 통해 통과시키고, 여과물을 진공 하에 농축시켜 부분입체이성질체의 혼합물 28.5 mg을 수득하였다. 잔류물을 키랄 SFC에 의해 정제하여 2종의 부분입체이성질체를 수득하였다:
부분입체이성질체 1 (실시예 478a): 4-(3-아미노-6-((R)-6-옥소피페리딘-3-일)피라진-2-일)-2-플루오로-N-((S)-1-(3-플루오로-5-아이오도페닐)-2-히드록시에틸)벤즈아미드 (8.8 mg).
1H NMR (CD3OD): 7.88 (s, 1H), 7.75 (t, J=7.8 Hz, 1H), 7.48-7.64 (m, 3H), 7.34 (d, J=7.4 Hz, 1H), 7.11 (d, J=9.8 Hz, 1H), 5.05 (t, J=5.7 Hz,1H), 3.67-3.83 (m, 2H), 3.43 (d, J=7.8 Hz, 2H), 3.00-3.15 (m, 1H), 2.28-2.46 (m, 2H), 1.88-2.16 (m, 2H); LCMS (m/z): (MH+), 594.1, 0.71분.
부분입체이성질체 2 (실시예 478b): 4-(3-아미노-6-((R)-6-옥소피페리딘-3-일)피라진-2-일)-2-플루오로-N-((S)-1-(3-플루오로-5-아이오도페닐)-2-히드록시에틸)벤즈아미드 (8.2 mg)
1H NMR (CD3OD): 7.89 (s, 1H), 7.75 (t, J=7.6 Hz, 1H), 7.50-7.65 (m, 3H), 7.35 (d, J=7.8 Hz, 1H), 7.12 (d, J=9.8 Hz, 1H), 5.06 (t, J=5.7 Hz,1H), 3.65-3.89 (m, 2H), 3.37-3.53 (m, 2H), 2.96-3.16 (m, 1H), 2.31-2.59 (m, 2H), 1.88-2.20 (m, 2H); LCMS (m/z): (MH+), 594.1, 0.71분.
생물학적 활성
ERK1 및 ERK2의 억제를 하기 방법을 사용하여 측정하였다.
활성화된 ERK2 (20 pM) 키나제 검정:
활성화된 ERK2에 대한 화합물 효력을 비오티닐화 ERKtide 펩티드 기질 ([비오틴] -AHA-K-R-E-L-V-E-P-L-T-P-S-G-E-A-P-N-Q-A-L-L-R- [NH2], EGF 수용체로부터 유래된 펩티드 서열: 서열 1)의 ERK2-촉매된 인산화를 측정하는 키나제 검정을 사용하여 결정하였다. 검정을 20 mM HEPES [pH 7.5], 5 mM MgCl2, 1 mM DTT, 0.01% 트윈(Tween)-20, 0.05% BSA 중에 0.02 nM ERK2, 400 nM ERKtide 펩티드 및 35 μM ATP (모든 농도는 반응물 중 최종 농도임)를 총 부피 10.25 μL로 사용하여 수행하였다. 16-포인트, 하프-로그 희석 시리즈의 화합물을 41x 최종 농도에서 IC50 곡선을 생성하는데 사용하였다. 화합물 희석 시리즈를 100% DMSO 중에 제조하였다. ERK2를 화합물과 30분 동안 주위 온도에서 예비인큐베이션하였다. 반응을 ERKtide 펩티드 및 ATP의 기질 칵테일의 첨가에 의해 개시하고, 4시간 동안 주위 온도에서 진행되도록 하였다. 반응을 100 mM 트리스(Tris)-Cl [pH 7.5], 25 mM EDTA, 0.01% 트윈 20, 알파스크린(AlphaScreen) 단백질 A 수용자 비드 20 μg/mL, 스트렙타비딘(Streptavidin) 공여자 비드 (퍼킨엘머(PerkinElmer), 매사추세츠주 월섬) 20 μg/mL, 및 1:1000 희석 포스포-EGF 수용자 (Thr669) 항체 (Cat # 8808, 셀 시그널링 테크놀로지(Cell Signaling Technology), 매사추세츠주 댄버)로 이루어진 2x 정지 완충제 10 μL의 첨가에 의해 종결시켰다. 암실에서 밤새 인큐베이션한 후, 엔비전 멀티라벨 플레이트 리더(EnVision Multilabel Plate Reader) (퍼킨엘머, 매사추세츠주 월섬) 상에서, 680 nm 및 570 nm로 각각 세팅된 여기 및 방출 파장을 사용하여 종결된 반응을 판독하였다. IC50 값을 4-파라미터 피트를 사용하여 결정하였다.
하기 표에서 일부 화합물에 대해 하기 검정 조건 (ERK2 신규)을 사용하였고, 상기 기재된 검정에 대해 실질적으로 유사한 IC50을, IC50에 대해 약 0.1 μM 또는 그 초과로 제공하였다. 이러한 검정의 제한이 도달되는 경우에, 상기 기재된 검정을 사용하였다.
활성화된 ERK2에 대한 화합물 효력을 비오티닐화 ERKtide 펩티드 기질 ([비오틴] -AHA-K-R-E-L-V-E-P-L-T-P-S-G-E-A-P-N-Q-A-L-L-R- [NH2], EGF 수용체로부터 유래된 펩티드 서열: 서열 1)의 ERK2-촉매된 인산화를 측정하는 키나제 검정을 사용하여 결정하였다. 검정을 50 mM HEPES [pH 7.5], 5 mM MgCl2, 1 mM DTT, 0.01% 트윈-20, 0.05% BSA 중에서 0.25 nM ERK2, 200 nM ERKtide 펩티드 및 35 μM ATP (모든 농도는 반응물 중 최종 농도임)를 총 부피 10.25 μL로 사용하여 수행하였다. 16-포인트, 하프-로그 희석 시리즈의 화합물을 41x 최종 농도에서 IC50 곡선을 생성하는데 사용하였다. 화합물 희석 시리즈를 100% DMSO 중에 제조하였다. ERK2를 화합물과 30분 동안 주위 온도에서 예비인큐베이션하였다. 반응을 ERKtide 펩티드 및 ATP의 기질 칵테일의 첨가에 의해 개시하고, 2-3시간 동안 주위 온도에서 진행되도록 하였다. 반응을 100 mM 트리스-Cl [pH 7.5], 25 mM EDTA, 0.01% 트윈 20, 알파스크린 단백질 A 수용자 비드 10 μg/mL, 스트렙타비딘 공여자 비드 (퍼킨엘머, 매사추세츠주 월섬) 10 μg/mL, 및 1.4 μg/mL 포스포-EGF 수용자 (Thr669) 항체 (Cat # 3056, 셀 시그널링 테크놀로지, 매사추세츠주 댄버)로 이루어진 2x 정지 완충제 10 μL의 첨가에 의해 종결시켰다. 암실에서 밤새 인큐베이션한 후, 엔비전 멀티라벨 플레이트 리더 (퍼킨엘머, 매사추세츠주 월섬) 상에서, 680 nm 및 570 nm로 각각 세팅된 여기 및 방출 파장을 사용하여 종결된 반응을 판독하였다. IC50 값을 4-파라미터 피트를 사용하여 결정하였다.
활성화된 ERK1 키나제 검정:
활성화된 ERK1에 대한 화합물 효력을 비오티닐화 ERKtide 펩티드 기질 ([비오틴] -AHA-K-R-E-L-V-E-P-L-T-P-S-G-E-A-P-N-Q-A-L-L-R- [NH2], EGF 수용체로부터 유래된 펩티드 서열: 서열 1)의 ERK1-촉매된 인산화를 측정하는 키나제 검정을 사용하여 결정하였다. 검정을 20 mM HEPES [pH 7.5], 5 mM MgCl2, 1 mM DTT, 0.01% 트윈-20, 0.05% BSA 중에서 0.2 nM ERK1, 200 nM ERKtide 펩티드 및 45 μM ATP (모든 농도는 반응물 중 최종 농도임)를 총 부피 10.25 μL로 사용하여 수행하였다. 16-포인트, 하프-로그 희석 시리즈의 화합물을 41x 최종 농도에서 IC50 곡선을 생성하는데 사용하였다. 화합물 희석 시리즈를 100% DMSO 중에 제조하였다. ERK1을 화합물과 30분 동안 주위 온도에서 예비인큐베이션하였다. 반응을 ERKtide 펩티드 및 ATP의 기질 칵테일의 첨가에 의해 개시하고, 4시간 동안 주위 온도에서 진행되도록 하였다. 반응을 100 mM 트리스-Cl [pH 7.5], 25 mM EDTA, 0.01% 트윈 20, 알파스크린 단백질 A 수용자 비드 10 μg/mL, 스트렙타비딘 공여자 비드 (퍼킨엘머, 매사추세츠주 월섬) 10 μg/mL, 및 1.4 μg/mL 포스포-EGF 수용자 (Thr669) 항체 (Cat # 3056, 셀 시그널링 테크놀로지, 매사추세츠주 댄버)로 이루어진 2x 정지 완충제 10 μL의 첨가에 의해 종결시켰다. 암실에서 밤새 인큐베이션한 후, 엔비전 멀티라벨 플레이트 리더 (퍼킨엘머, 매사추세츠주 월섬) 상에서, 680 nm 및 570 nm로 각각 세팅된 여기 및 방출 파장을 사용하여 종결된 반응을 판독하였다. IC50 값을 4-파라미터 피트를 사용하여 결정하였다.
모든 IC50은, 'E'가 10의 거듭제곱을 나타내는 것인 과학적 표기법으로 나타내어지며; 예를 들어, 1.63E-03은 1.63 x 10-3, 또는 0.00163을 나타낸다.
Figure 112016034409922-pct00302
Figure 112016034409922-pct00303
Figure 112016034409922-pct00304
Figure 112016034409922-pct00305
Figure 112016034409922-pct00306
Figure 112016034409922-pct00307
Figure 112016034409922-pct00308
Figure 112016034409922-pct00309
Figure 112016034409922-pct00310
Figure 112016034409922-pct00311
Figure 112016034409922-pct00312
Figure 112016034409922-pct00313
Figure 112016034409922-pct00314

Claims (30)

  1. 하기 화학식 I의 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염.
    <화학식 I>
    Figure 112018085470164-pct00315

    상기 식에서,
    R1은 C3-8 시클로알킬 및 페닐로부터 선택된 임의로 치환된 기이고,
    여기서 R1에 대한 임의적인 치환기는 D, 할로, 히드록시, 아미노, -N(R8)2, CN, C1-4 알킬, C1-4 알콕시, -S(C1-4 알킬), C1-4 할로알킬, C1-4 할로알콕시, C3-6 시클로알킬, N, O 및 S로부터 선택된 1-2개의 헤테로원자를 함유하는 3-6원 헤테로시클릴, 옥소 (방향족 고리 상에서는 제외), COOR8, CON(R8)2, -NR8-C(O)R8, -NR8-C(O)OR8, -SO2R8, -NR8SO2R8, 및 SO2N(R8)2로부터 독립적으로 선택된 1-3개의 기이고, 여기서 각각의 R8은 독립적으로 H 또는 C1-4 알킬이고;
    L은
    Figure 112018085470164-pct00324
    이고;
    여기서 R"는 메틸 또는 에틸이고, 플루오로, 아미노, 히드록시, 메틸아미노, 에틸아미노, 디메틸아미노, -OP(O)(OH)2, 메톡시 또는 에톡시로 임의로 치환되고;
    X 및 Y는 독립적으로 H, D, 할로, CN, 아미노, 히드록시, C1-4 알킬, C1-4 할로알킬, C1-4 알콕시 및 C1-4 할로알콕시로부터 선택되고;
    R2는 H 또는 C1-4 알킬이고, 여기서 C1-4 알킬은 할로, CN, C1-4 알킬, C1-4 할로알킬, C3-6 시클로알킬, C1-4 알콕시, C1-4 할로알콕시 또는 C1-4 알킬술포닐로 임의로 치환되거나; 또는
    R2 및 L은 함께 연결되어, R1에 부착되어 있고 C1-4 알킬, C1-4 알콕시, 옥소, CN, COOR7, CON(R7)2 및 -SO2R7로부터 독립적으로 선택된 1 또는 2개의 기로 또한 임의로 치환된, 모르폴린, 피페리딘, 티오모르폴린, 피페라진 및 피롤리딘으로부터 선택된 헤테로시클릭 기를 형성하고, 여기서 각각의 R7은 독립적으로 H 또는 C1-4 알킬이고;
    Z는 N 또는 CR4이고;
    R4는 H, D, 할로, C1-4 알킬, C1-4 할로알킬 또는 C1-4 알콕시이고;
    R5는 -C(O)-R5a 및 R5a로부터 선택되고; 여기서 R5a는 임의로 치환된 C3-8 시클로알킬, N, O 및 S로부터 선택된 1-2개의 헤테로원자를 함유하는 불포화 3-8원 헤테로시클릭 고리, 페닐, 또는 N, O 및 S로부터 선택된 1-3개의 헤테로원자를 함유하는 5-6원 헤테로아릴 고리이고, 여기서 R5에 대한 임의적인 치환기는 D, 할로, 히드록시, 아미노, CN, C1-4 알킬, C1-4 알콕시, C1-4 할로알킬, C1-4 히드록시알킬, C1-4 할로알콕시, 옥소 (방향족 고리 상에서는 제외), -COOR9, -C(O)R9, -NR9C(O)R9, -NR9CO2R9, -SO2R9, -NR9SO2R9, 및 -SO2N(R9)2로부터 독립적으로 선택된 1-4개의 기이고, 여기서 각각의 R9는 독립적으로 H 또는 OH로 임의로 치환된 C1-4 알킬이고;
    R6은 H, D, 할로, C1-4 알킬 또는 C1-4 할로알킬이다.
  2. 제1항에 있어서, Z가 N인 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염.
  3. 제1항 또는 제2항에 있어서, R2가 H 또는 Me인 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염.
  4. 제1항 또는 제2항에 있어서, R6이 H인 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염.
  5. 제1항 또는 제2항에 있어서, R5가 -C(O)-R5a 및 R5a로부터 선택되고; 여기서 R5a가 C3-8 시클로알킬, N, O 및 S로부터 선택된 1-2개의 헤테로원자를 함유하는 5-8원 헤테로시클릴, 페닐, 및 5-6원 헤테로아릴로부터 선택되며, D, 할로, CN, 히드록시, C1-4 알콕시, C1-4 알킬, C1-4 할로알킬, C1-4 히드록시알킬, C1-4 할로알콕시, -SO2R', -NR'-C(O)-R' 및 -SO2NR'2로부터 독립적으로 선택된 1-3개의 기로 임의로 치환되고, 여기서 각각의 R'가 독립적으로 H 또는 C1-4 알킬인 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염.
  6. 제1항 또는 제2항에 있어서, R5가 -C(O)-R5a 및 R5a로부터 선택되고; 여기서 R5a가 시클로부틸, 시클로펜틸, 시클로헥실, 시클로헥세닐, 테트라히드로피란, 디히드로피란, 테트라히드로푸란, 옥세탄, 아제티딘, 피롤리딘, 피페리딘, 피페라진, 모르폴린, 테트라히드로티오피란 (티아시클로헥산) 및 테트라히드로티오푸란 (티아시클로펜탄)으로부터 선택되고, 이들 각각이 할로, D, CN, 히드록시, C1-4 알킬, C1-4 알콕시, C1-4 할로알킬, C1-4 히드록시알킬, C1-4 할로알콕시, 옥소, COOR9, CON(R9)2, -NHC(O)R9, -NHCOOR9, -NHSO2R9 및 -SO2R9로부터 독립적으로 선택된 1-3개의 기로 임의로 치환되고, 여기서 각각의 R9가 독립적으로 H 또는 C1-4 알킬인 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염.
  7. 제1항 또는 제2항에 있어서, R1이 페닐이고, 할로, D, CN, C1-4 알콕시, C1-4 알킬, C1-4 할로알킬, C1-4 할로알콕시, -SO2R', -N(R')2, -NR'-C(O)-R' 및 -SO2NR'2로부터 독립적으로 선택된 1 내지 3개의 기로 임의로 치환되고, 여기서 각각의 R'가 독립적으로 H 또는 C1-4 알킬인 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염.
  8. 제1항 또는 제2항에 있어서, Y가 H, 메틸 또는 할로인 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염.
  9. 제1항에 있어서, 하기 화학식 IB의 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염.
    <화학식 IB>
    Figure 112018058086538-pct00325

    상기 식에서,
    R5는 4-7원 시클릭 에테르 또는 C5-6 시클로알킬이고, R5는 D, F, Cl, CN, 아미노, -CH2OH, -NHC(O)Me, -NHCOOMe, -NHSO2Me, Me, OMe, OH, 옥소, Et, iPr, OEt 및 CF3으로부터 독립적으로 선택된 4개 이하의 기로 치환될 수 있고;
    Y는 H, F, Cl 또는 Me이고;
    R10은 -CH2-R*이고, 여기서 R*는 H, -OH, F, -NH2, -NHMe, -OP(O)(OH)2, -NMe2 또는 -OMe이고;
    R1은 할로, CN, C1-4 알킬, C1-4 알콕시, C1-4 할로알킬, C1-4 할로알콕시, COOR8, CON(R8)2 및 -SO2R8로부터 독립적으로 선택된 1-2개의 기로 임의로 치환된 페닐이고, 여기서 각각의 R8은 독립적으로 H 또는 C1-4 알킬이다.
  10. 제1항, 제2항 및 제9항 중 어느 한 항에 있어서, R5가 D, F, Cl, CN, 아미노, Me, NHSO2Me, NHCOMe, OMe, OH, Et, CN, -CH2OH 및 CF3으로부터 독립적으로 선택된 1-3개의 기로 치환된 시클로헥실인 화합물.
  11. 제1항에 있어서, R1이 F, Cl, Br, I, SMe, SO2Me 및 CH3으로부터 독립적으로 선택된 0, 1 또는 2개의 기로 치환된 페닐인 화합물.
  12. 하기로 이루어진 군으로부터 선택된 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염.
    Figure 112018085470164-pct00326

    Figure 112018085470164-pct00327

    Figure 112018085470164-pct00328

    Figure 112018085470164-pct00329

    Figure 112018085470164-pct00330

    Figure 112018085470164-pct00331

    Figure 112018085470164-pct00332

    Figure 112018085470164-pct00333

    Figure 112018085470164-pct00334

    Figure 112018085470164-pct00335

    Figure 112018085470164-pct00336


    Figure 112018085470164-pct00338

    Figure 112018085470164-pct00339

    Figure 112018085470164-pct00340

    Figure 112018085470164-pct00341

    Figure 112018085470164-pct00342

    Figure 112018085470164-pct00343

    Figure 112018085470164-pct00344

    Figure 112018085470164-pct00345

    Figure 112018085470164-pct00346

    Figure 112018085470164-pct00347

    Figure 112018085470164-pct00348

    Figure 112018085470164-pct00349

    Figure 112018085470164-pct00350

    Figure 112018085470164-pct00351

    Figure 112018085470164-pct00352

    Figure 112018085470164-pct00353

    Figure 112018085470164-pct00354

    Figure 112018085470164-pct00355

    Figure 112018085470164-pct00356

    Figure 112018085470164-pct00357

    Figure 112018085470164-pct00358

    Figure 112018085470164-pct00359

    Figure 112018085470164-pct00360

    Figure 112018085470164-pct00361

    Figure 112018085470164-pct00362

    Figure 112018085470164-pct00363

    Figure 112018085470164-pct00364

    Figure 112018085470164-pct00365

    Figure 112018085470164-pct00366

    Figure 112018085470164-pct00367

    Figure 112018085470164-pct00368

    Figure 112018085470164-pct00369

    Figure 112018085470164-pct00370

    Figure 112018085470164-pct00371

    Figure 112018085470164-pct00372

    Figure 112018085470164-pct00373

    Figure 112018085470164-pct00374
  13. 하기 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염.
    Figure 112018058086538-pct00375
  14. 하기 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염.
    Figure 112018058086538-pct00376
  15. 하기 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염.
    Figure 112018058086538-pct00377
  16. 하기 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염.
    Figure 112018058086538-pct00378
  17. 히드로클로라이드 염 형태의 4-(3-아미노-6-((1S,3S,4S)-3-플루오로-4-히드록시시클로헥실)피라진-2-일)-N-((S)-1-(3-브로모-5-플루오로페닐)-2-(메틸아미노)에틸)-2-플루오로벤즈아미드인 화합물.
  18. 적어도 1종의 제약상 허용되는 부형제와 혼합된, 제1항, 제2항, 제9항 및 제12항 내지 제17항 중 어느 한 항에 따른 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염을 포함하는, 암의 치료에 사용하기 위한 제약 조성물.
  19. 제18항에 있어서, 치료 공동-작용제를 추가로 포함하는, 암의 치료에 사용하기 위한 제약 조성물.
  20. 제18항에 있어서, 암이 선종, 방광암, 뇌암, 유방암, 자궁경부암, 결장직장암, 결장암, 표피 암종, 여포성 암종, 비뇨생식기암, 교모세포종, 두경부암, 호지킨병, 비-호지킨 림프종, 간세포암, 신장암, 폐암, 소세포 또는 비소세포 폐암, 백혈병, AML, CML, 다발성 골수종, 림프성 장애, 흑색종을 포함한 피부암, 신경모세포종, 난소암, 췌장암, 전립선암, 직장암, 육종, 고환암, 및 갑상선암으로부터 선택된 것인 제약 조성물.
  21. 제1항, 제2항, 제9항 및 제12항 내지 제17항 중 어느 한 항에 있어서, 베무라페닙, 다브라페닙, LGX818, 트라메티닙, MEK162, LEE011, PD-0332991, 파노비노스타트, 보리노스타트, 로미뎁신, 세툭시맙, 게피티닙, 에를로티닙, 라파티닙, 파니투무맙, 반데타닙, INC280, 에베롤리무스, 시롤리무스, BMK120, BYL719 및 CLR457로부터 선택된 화합물과 조합된 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염.
  22. 삭제
  23. 삭제
  24. 삭제
  25. 삭제
  26. 삭제
  27. 삭제
  28. 삭제
  29. 삭제
  30. 삭제
KR1020167009455A 2013-11-01 2014-10-29 키나제 억제제로서의 아미노헤테로아릴 벤즈아미드 KR101910720B1 (ko)

Applications Claiming Priority (5)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US201361898761P 2013-11-01 2013-11-01
US61/898,761 2013-11-01
CNPCT/CN2014/088409 2014-10-11
CN2014088409 2014-10-11
PCT/US2014/062913 WO2015066188A1 (en) 2013-11-01 2014-10-29 Aminoheteroaryl benzamides as kinase inhibitors

Publications (2)

Publication Number Publication Date
KR20160078957A KR20160078957A (ko) 2016-07-05
KR101910720B1 true KR101910720B1 (ko) 2018-10-22

Family

ID=51932581

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
KR1020167009455A KR101910720B1 (ko) 2013-11-01 2014-10-29 키나제 억제제로서의 아미노헤테로아릴 벤즈아미드

Country Status (36)

Country Link
US (4) US9242996B2 (ko)
EP (1) EP3063143B1 (ko)
JP (2) JP6219507B2 (ko)
KR (1) KR101910720B1 (ko)
CN (1) CN105658646B (ko)
AP (1) AP2016009099A0 (ko)
AU (1) AU2014342338B2 (ko)
BR (1) BR112016008133B1 (ko)
CA (1) CA2922532C (ko)
CL (1) CL2016000807A1 (ko)
CU (1) CU24425B1 (ko)
CY (1) CY1120635T1 (ko)
DK (1) DK3063143T3 (ko)
DO (1) DOP2016000085A (ko)
EA (1) EA032754B1 (ko)
ES (1) ES2684360T3 (ko)
HR (1) HRP20181287T1 (ko)
HU (1) HUE039306T2 (ko)
IL (1) IL244240B (ko)
JO (1) JO3452B1 (ko)
LT (1) LT3063143T (ko)
MX (1) MX355480B (ko)
PE (1) PE20161073A1 (ko)
PH (1) PH12016500467B1 (ko)
PL (1) PL3063143T3 (ko)
PT (1) PT3063143T (ko)
RS (1) RS57641B1 (ko)
SG (1) SG11201601467SA (ko)
SI (1) SI3063143T1 (ko)
SV (1) SV2016005180A (ko)
TN (1) TN2016000081A1 (ko)
TR (1) TR201811764T4 (ko)
TW (1) TWI663153B (ko)
UY (1) UY35813A (ko)
WO (1) WO2015066188A1 (ko)
ZA (1) ZA201601102B (ko)

Families Citing this family (43)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CU24425B1 (es) * 2013-11-01 2019-06-04 Novartis Ag Amino-heteroaril-benzamidas como inhibidores de cinasa
US10642873B2 (en) * 2014-09-19 2020-05-05 Microsoft Technology Licensing, Llc Dynamic natural language conversation
MA41044A (fr) 2014-10-08 2017-08-15 Novartis Ag Compositions et procédés d'utilisation pour une réponse immunitaire accrue et traitement contre le cancer
SG11201702401RA (en) 2014-10-14 2017-04-27 Novartis Ag Antibody molecules to pd-l1 and uses thereof
JO3746B1 (ar) 2015-03-10 2021-01-31 Aduro Biotech Inc تركيبات وطرق لتنشيط الإشارات المعتمدة على "منبه أو تحفيز جين انترفيرون"
EP3964528A1 (en) 2015-07-29 2022-03-09 Novartis AG Combination therapies comprising antibody molecules to lag-3
CN108495651A (zh) 2015-12-17 2018-09-04 诺华股份有限公司 抗pd-1的抗体分子及其用途
US10759806B2 (en) 2016-03-17 2020-09-01 Infinity Pharmaceuticals, Inc. Isotopologues of isoquinolinone and quinazolinone compounds and uses thereof as PI3K kinase inhibitors
CN106198778B (zh) * 2016-06-24 2018-11-20 南京优科制药有限公司 一种同时测定吉非替尼及其有关物质的方法
WO2018009466A1 (en) 2016-07-05 2018-01-11 Aduro Biotech, Inc. Locked nucleic acid cyclic dinucleotide compounds and uses thereof
CN109715163B (zh) * 2016-09-19 2022-11-22 诺华股份有限公司 包含raf抑制剂和erk抑制剂的治疗组合
CN108456213B (zh) * 2017-02-22 2021-01-15 浙江九洲药业股份有限公司 一种3-氟-4-羟基环己烷羧酸酯的制备方法
UY37695A (es) 2017-04-28 2018-11-30 Novartis Ag Compuesto dinucleótido cíclico bis 2’-5’-rr-(3’f-a)(3’f-a) y usos del mismo
KR20200024252A (ko) * 2017-06-30 2020-03-06 브리스톨-마이어스 스큅 컴퍼니 치환된 퀴놀리닐시클로헥실프로판아미드 화합물 및 그의 개선된 제조 방법
CN109467538A (zh) * 2017-09-07 2019-03-15 和记黄埔医药（上海）有限公司 环烯烃取代的杂芳环类化合物及其用途
WO2019073435A1 (en) 2017-10-12 2019-04-18 Novartis Ag COMBINATIONS OF MDM2 INHIBITORS WITH ERK INHIBITORS TO TREAT CANCERS
EP3728230A1 (en) * 2017-12-22 2020-10-28 Ravenna Pharmaceuticals, Inc. Aryl-bipyridine amine derivatives as phosphatidylinositol phosphate kinase inhibitors
MX2020007956A (es) 2018-01-29 2021-01-08 Capulus Therapeutics Llc Inhibidores de la proteína de unión al elemento regulador de esterol (srebp) que comprenden un anillo central de 6 miembros.
MX2020009228A (es) 2018-03-08 2021-01-08 Incyte Corp Compuestos diolicos de aminopirazina como inhibidores de fosfoinositida 3-cinasas-gamma.
JP2021519285A (ja) * 2018-03-30 2021-08-10 ノバルティス アーゲー ダブラフェニブ、トラメチニブ及びｅｒｋ阻害剤を含む医薬品の三重の組合せ
CN108440514A (zh) * 2018-05-16 2018-08-24 张玉叶 一种甲酰胺类衍生物、制备方法及其在抗肿瘤药物中的应用
CN108558844A (zh) * 2018-05-16 2018-09-21 张玉叶 一种甲酰胺类衍生物及其在抗肿瘤药物中的应用
CN108727355A (zh) * 2018-05-16 2018-11-02 张玉叶 一种甲酰胺类衍生物、制备方法及其在抗肿瘤药物中的应用
CN108440513A (zh) * 2018-05-16 2018-08-24 张玉叶 一种甲酰胺类衍生物及其在抗肿瘤药物中的应用
CN108727354A (zh) * 2018-05-16 2018-11-02 张玉叶 一种甲酰胺类衍生物及其在抗肿瘤药物中的应用
WO2020010003A1 (en) 2018-07-02 2020-01-09 Incyte Corporation AMINOPYRAZINE DERIVATIVES AS PI3K-γ INHIBITORS
JP7422732B2 (ja) * 2018-07-18 2024-01-26 アストラゼネカ・アクチエボラーグ Ｊａｋ阻害化合物のキシナホ酸塩
CN110275010B (zh) * 2019-06-21 2022-07-01 中山大学孙逸仙纪念医院 一种用于治疗***癌药物的P38a MAPK信号通路抑制剂的筛选方法
WO2021003084A1 (en) * 2019-07-01 2021-01-07 Ligang Qian P2x7r antagonists
WO2021026672A1 (en) 2019-08-09 2021-02-18 Novartis Ag Heterocyclic wdr5 inhibitors as anti-cancer compounds
TW202140029A (zh) 2020-02-18 2021-11-01 瑞士商諾華公司 用於治療ｂｒａｆ突變型ｎｓｃｌｃ的包含ｒａｆ抑制劑之治療組合
EP4110341A2 (en) 2020-02-28 2023-01-04 Novartis AG A triple pharmaceutical combination comprising dabrafenib, an erk inhibitor and a raf inhibitor
CN115297862A (zh) 2020-02-28 2022-11-04 诺华股份有限公司 包含达拉菲尼、erk抑制剂和shp2抑制剂的三重药物组合
JP2023525100A (ja) 2020-05-12 2023-06-14 ノバルティス アーゲー Ｃｒａｆ阻害剤を含む治療的組み合わせ
TW202227076A (zh) 2020-10-08 2022-07-16 瑞士商諾華公司 Ｅｒｋ抑制劑用於治療骨髓纖維化之用途
TW202227077A (zh) 2020-10-08 2022-07-16 瑞士商諾華公司 Ｅｒｋ抑制劑用於治療骨髓纖維化之用途
CA3206906A1 (en) 2021-02-02 2022-08-11 Andras Herner Selective bcl-xl protac compounds and methods of use
AU2022272184A1 (en) 2021-05-11 2023-11-30 Oric Pharmaceuticals, Inc. Polo like kinase 4 inhibitors
TW202313041A (zh) 2021-06-09 2023-04-01 瑞士商諾華公司 包含達拉菲尼、曲美替尼和shp2抑制劑之三重藥物組合
TW202404645A (zh) 2022-05-20 2024-02-01 瑞士商諾華公司 Met bcl-xl抑制劑抗體-藥物結合物及其使用方法
WO2023225320A1 (en) 2022-05-20 2023-11-23 Novartis Ag Epha2 bcl-xl inhibitor antibody-drug conjugates and methods of use thereof
WO2023245015A2 (en) * 2022-06-14 2023-12-21 Schrödinger, Inc. Phenyl amide compounds and methods of use
CN116444496B (zh) * 2023-06-16 2023-11-24 药康众拓(北京)医药科技有限公司 一种嘧啶联氘代吡唑类化合物及其应用

Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2004016597A2 (en) 2002-08-14 2004-02-26 Vertex Pharmaceuticals Incorporated Protein kinase inhibitors and uses thereof

Family Cites Families (12)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
ZA200501536B (en) * 2002-08-14 2006-10-25 Vertex Pharma Protein kinase inhibitors and uses thereof
JP2007524596A (ja) 2003-02-28 2007-08-30 トランスフォーム・ファーマシューティカルズ・インコーポレイテッド 共結晶医薬組成物
US8202999B2 (en) * 2005-01-07 2012-06-19 Synta Pharmaceuticals Corp. Compounds for inflammation and immune-related uses
RS51981B (en) 2005-12-13 2012-02-29 Schering Corporation POLYCYCLIC INDASOL DERIVATIVES WHICH ARE ERK INHIBITORS
GB0625659D0 (en) * 2006-12-21 2007-01-31 Cancer Rec Tech Ltd Therapeutic compounds and their use
BRPI0812450A2 (pt) 2007-06-05 2019-09-24 Schering Corp derivados de indazol policíclicos e seu uso como inibidores de erk para o tratamento de câncer
UY33469A (es) * 2010-06-29 2012-01-31 Irm Llc Y Novartis Ag Composiciones y metodos para modular la via de señalizacion de wnt
US8946216B2 (en) 2010-09-01 2015-02-03 Merck Sharp & Dohme Corp. Indazole derivatives useful as ERK inhibitors
CA2828578A1 (en) * 2011-03-04 2012-09-13 Lexicon Pharmaceuticals, Inc. Mst1 kinase inhibitors and methods of their use
ES2857649T3 (es) 2012-03-01 2021-09-29 Array Biopharma Inc Inhibidores de serina/treonina cinasa
WO2015051043A1 (en) 2013-10-01 2015-04-09 Amgen Inc. Biaryl acyl-sulfonamide compounds as sodium channel inhibitors
CU24425B1 (es) 2013-11-01 2019-06-04 Novartis Ag Amino-heteroaril-benzamidas como inhibidores de cinasa

Patent Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2004016597A2 (en) 2002-08-14 2004-02-26 Vertex Pharmaceuticals Incorporated Protein kinase inhibitors and uses thereof

Also Published As

Publication number Publication date
LT3063143T (lt) 2018-08-10
MX355480B (es) 2018-04-19
US20170182038A1 (en) 2017-06-29
US20190247392A1 (en) 2019-08-15
TR201811764T4 (tr) 2018-09-21
JP2016540728A (ja) 2016-12-28
JP6219507B2 (ja) 2017-10-25
KR20160078957A (ko) 2016-07-05
EA201690598A1 (ru) 2016-10-31
PL3063143T3 (pl) 2018-10-31
PE20161073A1 (es) 2016-10-30
US10660888B2 (en) 2020-05-26
WO2015066188A1 (en) 2015-05-07
SV2016005180A (es) 2016-11-21
ES2684360T3 (es) 2018-10-02
HRP20181287T1 (hr) 2018-10-05
AU2014342338B2 (en) 2016-12-01
US10188649B2 (en) 2019-01-29
JP6388991B2 (ja) 2018-09-12
RS57641B1 (sr) 2018-11-30
CU24425B1 (es) 2019-06-04
PH12016500467A1 (en) 2016-05-16
CN105658646B (zh) 2018-11-27
DK3063143T3 (en) 2018-08-20
CY1120635T1 (el) 2019-12-11
PH12016500467B1 (en) 2016-05-16
JO3452B1 (ar) 2020-07-05
CL2016000807A1 (es) 2016-07-08
CN105658646A (zh) 2016-06-08
AU2014342338A1 (en) 2016-03-10
EP3063143A1 (en) 2016-09-07
US20150126490A1 (en) 2015-05-07
IL244240A0 (en) 2016-04-21
TWI663153B (zh) 2019-06-21
UY35813A (es) 2015-05-29
IL244240B (en) 2018-01-31
HUE039306T2 (hu) 2018-12-28
US20180028532A1 (en) 2018-02-01
TN2016000081A1 (en) 2017-07-05
ZA201601102B (en) 2017-09-27
EA032754B1 (ru) 2019-07-31
JP2018076287A (ja) 2018-05-17
BR112016008133B1 (pt) 2020-11-24
NZ717223A (en) 2021-05-28
CU20160052A7 (es) 2017-02-02
PT3063143T (pt) 2018-10-19
US9242996B2 (en) 2016-01-26
CA2922532A1 (en) 2015-05-07
DOP2016000085A (es) 2016-06-15
US9763937B2 (en) 2017-09-19
MX2016004938A (es) 2016-07-11
SG11201601467SA (en) 2016-05-30
CA2922532C (en) 2023-09-19
TW201607926A (zh) 2016-03-01
SI3063143T1 (sl) 2018-09-28
EP3063143B1 (en) 2018-05-16
AP2016009099A0 (en) 2016-03-31

Similar Documents

Publication Publication Date Title
KR101910720B1 (ko) 키나제 억제제로서의 아미노헤테로아릴 벤즈아미드
AU2021237841B2 (en) Biaryl derivatives as YAP/TAZ-TEAD protein-protein interaction inhibitors
JP6387360B2 (ja) 変異ｉｄｈの阻害薬としての３−ピリミジン−４−イル−オキサゾリジン−２−オン
US10899746B2 (en) Bisamide sarcomere activating compounds and uses thereof
JP6964576B2 (ja) 置換４−アザインドール及びｇｌｕｎ２ｂ受容体調節因子としてのそれらの使用
AU2017304761B2 (en) Pharmaceutical compounds
TW201249823A (en) Tetrasubstituted cyclohexyl compounds as kinase inhibitors
TW201408641A (zh) 可作爲激酶抑制劑之新穎環取代ｎ－吡啶基醯胺
EA031310B1 (ru) Производные пиперидина и азепина как модуляторы рецептора прокинетицина
NZ717223B2 (en) Aminoheteroaryl benzamides as kinase inhibitors

Legal Events

Date Code Title Description
E902 Notification of reason for refusal
E701 Decision to grant or registration of patent right
GRNT Written decision to grant