KR101791217B1 - A composition for enhancing concentration and memory containing Thuja orientalis oil extract as an active ingredient - Google Patents
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Abstract
본 발명은 측백엽으로부터 추출된 지용성 분획 추출물을 유효성분으로 함유하는 집중력 및 기억력 강화용 한약 조성물에 관한 것으로서, 신경을 안정시키고 집중력 및 기억력을 증진시킬 수 있다. The present invention relates to a herbal medicine composition for enhancing concentration and memory power containing an extract of a fat soluble fraction extracted from a mulberry leaf as an active ingredient, which can stabilize nerves and enhance concentration and memory.
Description
본 발명은 신경을 안정시키고 집중력 및 기억력을 증진시킬 수 있는 집중력 및 기억력 강화용 한약 조성물에 관한 것으로서, 측백엽으로부터 추출된 지용성 분획 추출물을 유효성분으로 함유한다. The present invention relates to a herbal medicine composition for enhancing concentration and memory which can stabilize nerves and improve concentration and memory, and contains an oil-soluble fraction extract extracted from a lateral leaf as an active ingredient.
과거부터 몸과 마음의 관계성을 중심으로 발달해온 동양의학에서는 소화기 질환, 신경정신과 질환 등에 대한 의학적 치료법으로 향기 흡입에 의해 치료효과를 나타내는 향기요법이 있다.In oriental medicine, which has developed from the past to the relationship between body and mind, there is aroma therapy which shows therapeutic effect by scent inhalation as medical treatment for digestive diseases and neuropsychiatric diseases.
향기를 이용한 치료법으로 서양에서는 식물의 정유를 이용한 향기요법으로 발전하였고, 동양의 한의학에서는 방향성(芳香性) 본초(本草)를 이용한 방향요법(芳香療法)으로 발전하여 훈법(熏法), 임법(淋法), 증법(蒸法), 좌욕법(坐浴法) 등의 방법으로 임상에서 다양한 질환에 응용되었다. In oriental oriental medicine, Oriental medicine has developed into aroma therapy using oriental aromatic herb, and it has been developed as a method of aroma therapy, It has been applied to a variety of diseases in clinical practice by methods such as gonorrhea method, vapor method, and bathing method.
향기요법은 인체의 신체적, 감정적 변화를 일으키며, 자율신경계와 내분비계를 조절하여 면역력을 증가시킴으로써 질병의 치료에 도움을 주는 것으로 알려져 있다. 또한 정서적으로는 감정을 안정 혹은 흥분시키는 기능이 있어 불안, 공포, 우울, 분노, 불면 등의 증상을 완화시키는 효능이 있다.Fragrances are known to help the physical and emotional changes of the body and to treat diseases by controlling the autonomic and endocrine systems to increase immunity. In addition, emotionally, it has the ability to stabilize or excite emotions, thus relieving symptoms such as anxiety, fear, depression, anger, and insomnia.
향(香)은 향기 입자가 코의 후각세포를 통해 인식되어 대뇌의 변연계로 영향을 미쳐서 인체의 정신과 몸에 즉각적인 반응을 유발한다.The fragrance is perceived through the olfactory cells of the nose and affects the limbic system of the cerebrum, causing an immediate reaction to the mind and body of the human body.
또한 향을 통한 치료는 신경계에 직접 영향을 미치는 비침습적인 방법으로 효과가 신속하고 비교적 안전하며 부작용이 거의 없다.In addition, aroma therapy is a noninvasive method that directly affects the nervous system, and its effect is rapid, relatively safe, and has few side effects.
향을 내는 물질인 방향제는 주로 실내 분위기에 청량함을 주어 기분을 상쾌하게 하기 위해 사용되고 있다.Perfume, which is a fragrance, is mainly used to refresh the mood by giving the room an atmosphere of softness.
대부분의 방향제 조성물은 향료, 알코올, 가용화제, 정제수 및 방향제품의 여러 기제를 이용하여 조성된 합성향료만을 사용하거나, 합성향료 및 일부 시트러스 계통의 천연 오일이 혼합된 것으로서, 향취의 강약 정도에 따라 때로는 정신을 혼미하게 하고 두통을 유발하여 사용자가 기피하는 경우가 있다. Most perfume compositions consist of synthetic fragrances made using fragrances, alcohols, solubilisers, purified water and various bases of oriental products, or mixtures of synthetic fragrances and some natural oils of the citrus family, depending on the intensity of the fragrance Occasionally, the mind is disoriented and the headache is induced to avoid the user.
그러므로 합성향료를 사용하지 않음으로써 합성향료가 주는 부작용을 막을 뿐만 아니라, 천연의 한약재를 사용하여 우수한 신경의 안정성, 집중력 및 기억력을 증진시키는 조성물이 요구되고 있다. Therefore, there is a need for a composition that not only prevents the side effects of the synthetic fragrance by not using the synthetic perfume but also enhances the stability, concentration, and memory of the excellent nerve using a natural medicinal herb.
본 발명의 목적은 신경을 안정시키고 집중력 및 기억력을 증진시킬 수 있는 집중력 및 기억력 강화용 한약 조성물을 제공하는데 있다.It is an object of the present invention to provide a herbal medicine composition for enhancing concentration and memory which can stabilize nerves and enhance concentration and memory.
본 발명의 다른 목적은 신경을 안정시키고 집중력 및 기억력을 증진시킬 수 있는 집중력 및 기억력 강화용 향 조성물을 제공하는데 있다.It is another object of the present invention to provide a concentration and memory enhancing composition capable of stabilizing nerves and enhancing concentration and memory.
상기한 목적을 달성하기 위한 본 발명의 집중력 및 기억력 강화용 한약 조성물은 측백엽으로부터 추출된 지용성 분획 추출물을 유효성분으로 함유할 수 있다.To achieve the above object, the herbal composition for enhancing concentration and memory of the present invention may contain, as an active ingredient, an oil-soluble fraction extract extracted from a lateral leaflet.
상기 지용성 분획 추출물은 초임계 추출법으로 추출된 지용성 분획 추출물일 수 있으며, 상기 초임계 추출 시 용매는 이산화탄소일 수 있다. The lipid soluble fraction extract may be a lipid soluble fraction extract obtained by supercritical extraction, and the solvent may be carbon dioxide in the supercritical extraction.
또한, 상기 초임계 추출 시 압력은 300 내지 400 bar이며, 온도는 50 내지 70 ℃일 수 있다.In addition, the supercritical extraction pressure may be 300-400 bar and the temperature may be 50-70 < 0 > C.
상기 지용성 분획 추출물의 유기화합물은 보리닐 아세테이트(Bornyl acetate), α-테르피닐 아세테이트(α-Terpinyl acetate), α-에레몰(α-Elemol), (8-β,13-β)-13-메틸-17-노르카우르-15-엔((8-β,13-β)-13-methyl-17-norkaur-15-ene), 세드롤(Cedrol) 및 파이톨(Phytol)을 포함할 수 있다.The organic compounds of the fat-soluble fraction extract are selected from the group consisting of boryl acetate,? -Terpinyl acetate,? -Elemol, (8- ?, 13-?) -13- Methyl-17-norkaur-15-ene, Cedrol and Phytol, which may include (8- ?, 13-?) -13-methyl- have.
상기 측백엽은 수분함량이 3 내지 10%로 건조된 분말일 수 있다.The mesophyll may be a powder dried to a moisture content of 3 to 10%.
또한, 상기한 다른 목적을 달성하기 위한 본 발명의 집중력 및 기억력 강화용 향 조성물은 측백엽으로부터 추출된 지용성 분획 추출물을 유효성분으로 함유할 수 있다.In order to achieve the above-mentioned other objects, the concentration-concentrating composition for enhancing concentration and memory power of the present invention may contain, as an active ingredient, an oil-soluble fraction extract extracted from a lateral leaflet.
본 발명의 집중력 및 기억력 강화용 한약 조성물은 독성이 없는 지용성 분획 추출물을 유효성분으로 함유함으로써 신경 및 심리적 안정을 가져오며, 이로 인하여 소화기 질환, 두통 등을 완화시킬 수 있다. 또한 집중력 및 기억력을 증진시킬 수 있으므로 수험생 및 치매 질환 등에 유용하게 사용될 수 있다.The herbal medicine composition for enhancing concentration and memory power of the present invention contains nerve and psychological stability by containing an oil-soluble fraction extract having no toxicity as an active ingredient, thereby alleviating gastrointestinal diseases, headache, and the like. It can also be used for examinees and dementia because it can improve concentration and memory.
또한, 본 발명의 한약 조성물은 화학 첨가제를 사용한 합성향료를 사용하지 않음으로써 합성향료가 주는 부작용이 없으며, 나쁜 냄새를 제거하는 소취효과도 나타낸다. Further, since the herbal composition of the present invention does not use the synthetic perfume using the chemical additive, there is no side effect given by the synthetic fragrance and also shows a deodorizing effect for eliminating bad smell.
또한, 상기 측백엽 지용성 분획 추출물은 염증 또는 부종의 예방 또는 치료용 약학 조성물에 유효성분으로 함유될 수 있으며, 이에 따라 근육통을 완화시키며 근육염 및 피부염 등의 염증 또는 부종을 예방 및 치료할 수 있다. 그러므로 상기 지용성 분획 추출물을 이용하여 근육통 완화로션, 근육염 예방 및 치료용 화장품, 피부염 예방 및 치료용 화장품, 부종 예방, 치료용 로션, 건강기능식품 등을 제조할 수 있다. In addition, the leaf extracts of the leaves can be contained as an active ingredient in a pharmaceutical composition for preventing or treating inflammation or edema, thereby relieving muscular pain and preventing or treating inflammation or edema such as muscle inflammation and dermatitis. Therefore, the fat-soluble fraction extract may be used to prepare a cosmetic for preventing and treating muscular pain, a cosmetic for preventing and treating muscular pain, a cosmetic for preventing and treating dermatitis, an anti-edema, a therapeutic lotion and a health functional food.
도 1은 10-20 국제 표준전극부착법을 나타낸 도면이다.
도 2는 지용성 분획 추출물 등의 향을 흡입하기 전 및 흡입한 후의 피험자 뇌를 3차원 뇌 맵핑을 사용하여 촬영한 사진이다(참고용 사진).
도 3은 3차원 뇌 맵핑을 사용하여 본 발명의 일 실시예에 따라 제조된 측백엽 지용성 분획 추출물을 흡입하기 전 및 흡입한 후의 SEF50의 변화를 나타낸 사진이다.
도 4는 3차원 뇌 맵핑을 사용하여 본 발명의 일 실시예에 따라 제조된 측백엽 지용성 분획 추출물을 흡입하기 전 및 흡입한 후의 ASEF의 변화를 나타낸 사진이다.
도 5는 본 발명의 일 실시예에 따라 제조된 지용성 분획 추출물로 처리된 사람의 정상피부 세포주 각질형성세포(HaCaT 세포)의 세포 생존능을 측정한 그래프이다(LPS 무처리).
도 6은 사람의 정상피부 세포주 각질형성세포(HaCaT 세포)에서 본 발명의 일 실시예에 따라 제조된 지용성 분획 추출물의 NO 생성을 나타낸 그래프이다.
도 7은 본 발명의 일 실시예에 따라 제조된 지용성 분획 추출물로 처리된 HaCaT 세포의 PGE2 농도를 측정한 그래프이다.
도 8은 본 발명의 일 실시예에 따라 제조된 지용성 분획 추출물로 처리된 HaCaT 세포의 IL-6 농도를 측정한 그래프이다.
도 9는 본 발명의 일 실시예에 따라 제조된 지용성 분획 추출물로 처리된 마우스의 귀 부종 두께를 측정한 그래프이다(희석액: 아세톤).
도 10은 본 발명의 일 실시예에 따라 제조된 지용성 분획 추출물로 처리된 마우스의 귀 부종 두께를 측정한 그래프이다(희석액: 호호바 오일).1 is a view showing a 10-20 international standard electrode attaching method.
FIG. 2 is a photograph of a brain of a subject before and after inhalation of fragrance such as oil-soluble fraction extract using three-dimensional brain mapping (reference photograph).
FIG. 3 is a photograph showing changes in the
FIG. 4 is a photograph showing changes in ASEF before and after inhalation of a Leukocyese lipid-soluble fraction extract prepared according to an embodiment of the present invention using 3D brain mapping; FIG.
FIG. 5 is a graph showing cell viability of normal skin cell keratinocytes (HaCaT cells) treated with lipid soluble fraction extract prepared according to an embodiment of the present invention (no LPS treatment).
6 is a graph showing NO production of lipid soluble fraction extracts prepared according to one embodiment of the present invention in human normal skin cell keratinocytes (HaCaT cells).
FIG. 7 is a graph showing the effect of PGE 2 on HaCaT cells treated with lipid soluble fraction extract prepared according to an embodiment of the present invention FIG.
FIG. 8 is a graph showing the measurement of IL-6 concentration of HaCaT cells treated with lipid soluble fraction extract prepared according to an embodiment of the present invention.
FIG. 9 is a graph showing the thickness of ear edema of a mouse treated with the oil-soluble fraction extract prepared according to an embodiment of the present invention (diluent: acetone).
10 is a graph showing the thickness of ear edema of a mouse treated with the oil-soluble fraction extract prepared according to an embodiment of the present invention (diluent: jojoba oil).
본 발명은 신경을 안정시키고 집중력 및 기억력을 증진시킬 수 있는 집중력 및 기억력 강화용 한약 조성물에 관한 것으로서, 측백엽으로부터 추출된 지용성 분획 추출물을 유효성분으로 함유한다.
The present invention relates to a herbal medicine composition for enhancing concentration and memory which can stabilize nerves and improve concentration and memory, and contains an oil-soluble fraction extract extracted from a lateral leaf as an active ingredient.
이하, 본 발명을 상세하게 설명한다. Hereinafter, the present invention will be described in detail.
본 발명의 집중력 및 기억력 강화용 한약 조성물은 측백엽으로부터 추출된 지용성 분획 추출물을 유효성분으로 함유할 수 있다.The herbal composition for enhancing concentration and memory of the present invention may contain, as an active ingredient, an oil-soluble fraction extract extracted from a lateral leaflet.
상기 측백엽(側柏葉)은 측백나무과의 측백나무(Thuja orientalis L.)의 어린 가지와 잎(Thuja orientalis)을 의미하는 것으로서, 열을 내려주고 폐장과 경락에 작용하며 마른기침과 기관지염에 좋으며 지혈효과가 있어 토혈이나, 코피, 빈혈 및 자궁출혈 등에도 좋은 효과가 있다.The lateral leaflet is a leaf of Thuja orientalis L., which is a leaf of Thuja orientalis L. Thuja orientalis, which acts on lungs and meridians to lower fever and is good for dry cough and bronchitis. There is also good effect on blood clots, nosebleeds, anemia and uterine bleeding.
상기 측백엽은 물로 세척한 후 40 내지 60 ℃의 건조기에서 10 내지 60분 동안 건조되어 수분함량이 3 내지 10%, 바람직하게는 3 내지 8%가 되도록 한다. 일반적으로 한약재의 수분함량은 11 내지 15%인데, 수분함량이 11 내지 15%인 측백엽을 이용하면 향취가 좋지 못하며 집중력 및 각성에 대한 효능이 저하되므로 수분함량을 3 내지 10%, 바람직하게는 3 내지 8%가 되도록 건조한다. The mesophyll is washed with water and then dried in a drier at 40 to 60 DEG C for 10 to 60 minutes so that the moisture content is 3 to 10%, preferably 3 to 8%. Generally, the moisture content of the medicinal herb is 11 to 15%. When the mushroom having a moisture content of 11 to 15% is used, the aroma is poor and the effect on concentration and arousal deteriorates. Therefore, the moisture content is 3 to 10%, preferably 3 To 8%.
상기 초임계 추출법은 300 내지 400 bar, 바람직하게는 350 내지 400 bar의 압력 및 50 내지 70 ℃, 바람직하게는 60 내지 70 ℃ 온도의 초임계 상태에서 상기 측백엽으로부터 지용성 분획을 추출하여 지용성 분획 추출물을 얻는다. 이때 용매로는 측백엽에서 지용성 분획 추출물을 얻을 수 있다면 특별히 한정되지 않지만, 높은 추출 효율, 강화된 집중력 및 각성 효과를 위해서는 이산화탄소를 사용하여 이산화탄소로 임계상태(이산화탄소의 임계온도: 31 , 임계압력: 74 bar)에서 추출하는 것이 바람직하다. The supercritical extraction method extracts a lipid soluble fraction from the mesophyll with a pressure of 300 to 400 bar, preferably 350 to 400 bar and a supercritical state at a temperature of 50 to 70 ° C, preferably 60 to 70 ° C, . In this case, the solvent is not particularly limited as long as the oil-soluble fraction extract can be obtained from the leaves. However, in order to obtain high extraction efficiency, enhanced concentration and arousal effect, carbon dioxide is used in a critical state (critical temperature of carbon dioxide: 31, critical pressure: bar).
상기 초임계 추출법은 수증기 증류 추출법 등의 다른 추출법으로 추출하는 경우에 비하여 향취가 우수하며 추출 효율이 높고 더욱 강화된 집중력 및 각성 효과를 가질 수 있다. 특히, 수증기 증류 추출법을 사용하는 경우에는 측백엽의 고유한 향취가 사라지고 열에 의해 변성된 좋지 못한 향취가 발생된다.The supercritical extraction method has superior aroma, extraction efficiency, and enhanced concentration and arousal effect as compared with extraction by other extraction methods such as steam distillation extraction method. Especially, when steam distillation extraction method is used, the inherent odor of the leaves is lost and an unpleasant odor denatured by heat is generated.
초임계 추출 시 압력이 상기 하한치 미만인 경우에는 측백엽으로부터 지용성 분획이 거의 추출되지 않을 수 있으며, 상기 상한치 초과인 경우에는 집중력 및 기억력이 강화되는 효과가 사라질 수 있다. 또한, 상기 초임계 추출 시 온도가 상기 하한치 미만인 경우에는 추출효율이 낮을 수 있으며, 상기 상한치 초과인 경우에는 오히려 집중력 및 기억력이 강화되는 효과가 저하될 수 있다. When the pressure is lower than the lower limit value in the supercritical extraction, the fat-soluble fraction may be hardly extracted from the lateral leaflet. If the pressure is above the upper limit, the effect of enhancing concentration and memory may disappear. In addition, the extracting efficiency may be low when the temperature is lower than the lower limit of the supercritical extraction. If the temperature is higher than the upper limit, the effect of enhancing concentration and memory may deteriorate.
상기 '추출효율'은 측백엽으로부터 얻어진 지용성 분획 추출물의 양을 의미한다.The 'extraction efficiency' refers to the amount of the fat soluble fraction extract obtained from the lateral leaves.
상기 측백엽으로부터 추출된 지용성 분획 추출물에는 총 27가지의 휘발성 유기화합물이 함유되어 있는데, 그 중에서 주된 유기화합물로는 보리닐 아세테이트(Bornyl acetate), α-테르피닐 아세테이트(α-Terpinyl acetate), α-에레몰(α-Elemol), (8-β,13-β)-13-메틸-17-노르카우르-15-엔((8-β,13-β)-13-methyl-17-norkaur-15-ene), 세드롤(Cedrol) 및 파이톨(Phytol)을 들 수 있다.
A total of 27 volatile organic compounds are contained in the lipid-soluble fraction extract extracted from the leaves. Among the organic compounds, boric acid, (8-beta, 13-beta) -13-methyl-17-noraur-15-ene, 15-ene, Cedrol and Phytol.
이하, 본 발명의 이해를 돕기 위하여 바람직한 실시예를 제시하나, 하기 실시예는 본 발명을 예시하는 것일 뿐 본 발명의 범주 및 기술사상 범위 내에서 다양한 변경 및 수정이 가능함은 당업자에게 있어서 명백한 것이며, 이러한 변형 및 수정이 첨부된 특허청구범위에 속하는 것도 당연한 것이다.It will be apparent to those skilled in the art that various modifications and variations can be made in the present invention without departing from the spirit or scope of the present invention. Such variations and modifications are intended to be within the scope of the appended claims.
실시예 1. 측백엽 지용성 분획 추출물EXAMPLES Example 1. Leaf-leaf lipid soluble fraction extract
측백엽 300 g을 초임계 이산화탄소의 재순환 방식을 이용한 초임계 추출기(ILSHIN Auto, Korea)에 넣은 후 이산화탄소를 주입하여 60 ℃ 및 400 bar의 초임계 상태 하에서 지용성 분획 추출물을 추출하였다.
(300 g) was placed in a supercritical extractor (ILSHIN Auto, Korea) using a recirculation method of supercritical carbon dioxide, and carbon dioxide was injected thereinto to extract a lipid soluble fraction under supercritical conditions of 60 ° C. and 400 bar.
<시험예><Test Example>
시험예 1. 향취 분석Test Example 1. Flavor analysis
후각훈련이 되어 있는 향수전문가 5명에게 의뢰하여 향취평가를 수행 하였다. The fragrance experts who had been training in the sense of smell were commissioned to five persons to perform the fragrance evaluation.
실시예 1에서 제조된 100 % 원액을 시향지(0.5cm x 5cm)에 적신 후, 코로부터 5 cm되는 위치에서 향의 특징을 향료 평가용어를 사용하여 기술 하였다. 사용된 향취 타입은 알데하이드(aldehyde), 애니마릭(animalic), 발사믹(balsamic), 시트러스(citrus), 코니퍼로스(coniferous), 얼띠(earthy), 플로랄(floral), 푸루이티(fruity), 그린(green), 허벌(herbal), 메디시날(medicinal), 민티(minty), 마린(marine), 모씨(mossy), 머스키(musky), 오일리(oily), 오리엔탈(oriental), 파우더리(powdery), 스모키(smoky), 스파이시(spicy), 스위트(sweet), 우디(woody), 리프레싱 (Refreshing)이다.The fragrance characteristics were described using fragrance evaluation terms at a
상기 향취를 분석한 결과, 실시예 1에서 제조된 지용성 분획 추출물의 향취는 코니퍼러스(Coniferous), 우디(woody), 시트러스(Citrus) 및 리프레쉬(Refreshing) 타입으로서, 솔잎 향취와 리프레쉬한 향취가 뛰어난 것을 확인하였다.
As a result of analyzing the fragrance, the fragrance of the fat-soluble fraction extract prepared in Example 1 was Coniferous, Woody, Citrus and Refreshing type, and the pine needle fragrance and the refreshing fragrance I confirmed it was excellent.
시험예Test Example 2. 휘발성 유기 화합물 분석 2. Analysis of volatile organic compounds
실시예 1에 따라 제조된 지용성 분획 추출물에 함유된 휘발성 화학성분은 (polydimethyl siloxane, PDMS) 섬유가 장착된 solid phase microextraction(SPME) 장치에 흡착시킨 다음, 가스 크로마토그래피-질량 분석기(gas chromatography-mass spectrometry, GC-MS)로 분석하였다. 분석의 정확도를 위하여 일본 향료 분석 전문 기관에 의뢰하여 향료 Library의 질량 스펙트럼 데이터(Mass Spectrum Data)를 이용하였다.The volatile chemical components contained in the liposoluble fraction extract prepared according to Example 1 were adsorbed on a solid phase microextraction (SPME) apparatus equipped with polydimethyl siloxane (PDMS) fibers, and then analyzed by gas chromatography-mass spectrometry spectrometry, GC-MS). For the accuracy of analysis, mass spectrometry data of fragrance library was used by a Japanese perfume analysis agency.
위 표 1에 나타낸 바와 같이, 실시예 1에 따라 제조된 지용성 분획 추출물에 함유된 총 27가지의 휘발성 유기화합물의 양은 총 17.73 중량%이며, 이 중에서 주된 유기화합물은 보리닐 아세테이트(Bornyl acetate), α-테르피닐 아세테이트(α-Terpinyl acetate), α-에레몰(α-Elemol), (8-β,13-β)-13-메틸-17-노르카우르-15-엔((8-β,13-β)-13-methyl-17-norkaur-15-ene), 세드롤(Cedrol) 및 파이톨(Phytol)이다.
As shown in Table 1, the total amount of 27 volatile organic compounds contained in the fat soluble fraction extract prepared according to Example 1 was 17.73% by weight in total, and the main organic compound was boronyl acetate, ? -terpinyl acetate,? -Elemol, (8- ?, 13-?) -13-methyl-17-norcaur-15-ene ((8- 13-beta -13-methyl-17-noraur-15-ene, Cedrol and Phytol.
시험예Test Example 3. 뇌파를 이용한 집중력 및 기억력 검사 3. Concentration and memory test using EEG
-피험자 선정- Subject selection
피험자는 냄새 구분이 가능한 만 20세 이상 30세 미만의 건강한 성인 남녀 10명을 선정하였다. 코 수술 이력이 있거나 코 질환이 있는 사람, 정신 질환이 있거나 약을 복용중인 사람은 피험자 선정에서 제외하였다. 뇌파 측정시 최대한 잡파(artifacts)의 혼입을 막기 위하여 눈을 감았을 때 안면의 떨림이 있는 사람도 제외하였다. 피험자에게는 충분한 수면을 취하여 몸에 피로가 없도록 주의를 주었으며, 금주, 금연을 하도록 하였다. Subjects were selected from 10 healthy adults and 20 males and females under 30 years of age. People with a history of nose surgery or with a nosebleed disease, people with mental illness, or taking medication were excluded from the study. To prevent as much blurring of artifacts as possible during EEG measurement, people with facial tremors were excluded when the eyes were closed. Subjects were given enough sleep to take care of their body so that they were not fatigued.
실험 시작 4시간 전에는 중추신경계에 영향을 줄 수 있기 때문에 카페인이 들어간 음료의 섭취도 금하였다. 뇌파 측정 장소는 일정한 온도(23 ℃)와 습도(50 %)를 유지한 32.5 m2(9.8평) 크기의 실험실에서 최대한 잡음이 혼입이 되지 않은 안정적인 상태에서 성인 남녀 총 10명의 피험자를 대상으로 뇌파 측정하였다. Four hours before the start of the experiment, the caffeinated beverages were also discontinued because they could affect the central nervous system. The EEG was measured in a total of 10 subjects in an adult male and female in a state of 32.5 m 2 (9.8 pye) in which the noise was not mixed at a constant temperature (23 ° C) and humidity (50% Respectively.
-뇌피 측정 장치- a brain-measuring device
뇌파측정 시 사용한 기기는 QEEG-8 system(LXE3208, LAXTHA Inc. Korea)이며, 피험자의 뇌파신호 측정은 데이터 수집 장비 및 분석프로그램(Telescan)을 이용하였다.The instrument used for EEG was a QEEG-8 system (LXE3208, LAXTHA Inc. Korea). EEG data were collected using a data collection device and an analysis program (Telescan).
-전극 부착 및 지용성 분획 추출물의 흡입 방법- electrode attachment and inhalation method of fat-soluble fraction extract
도 1에 나타낸 10-20 국제 표준전극부착법을 이용하여 8개의 접지전극에 뇌파전용 무해 접착풀을 묻혀 피험자의 전전두엽(Fp1, Fp2), 전두엽(F3, F4), 측두엽(T3, T4), 두정엽(P3, P4) 부분에 부착하고 오른쪽과 왼쪽 귓불 뒷부분에도 각각 하나씩의 전극을 부착하였다. 그리고 바이알에 담겨진 실시예 1의 지용성 분획 추출물을 피험자의 코로부터 약 3 cm 거리를 유지하고 피험자가 눈을 감은 상태에서 향 흡입 전(무자극)과 흡입상태(향자극)를 각각 1분씩 측정하였다. (Fp1, Fp2), frontal lobe (F3, F4), temporal lobe (T3, T4), parietal lobe (P3, P4), and one electrode was attached to each of the right and left ear lobes. The liposoluble fraction extract of Example 1 contained in the vial was kept at a distance of about 3 cm from the nose of the subject, and before the incense suction (unstimulated) and the inhalation state (incense stimulus) were measured for 1 minute each while the subject closed her eyes .
-데이터 분석 지표- Data analysis index
1분 측정 중 25초 측정된 뇌파신호만을 추출하여 일괄처리 프로그램(Batch processing)으로 데이터 처리를 하였고, SPSS 18.0 version의 통계 분석 프로그램을 사용하여 대응표본 T검정하였다. 이때 지용성 분획 추출물의 향을 흡입 시 측정된 뇌파 신호 중 잡파가 발견된 피험자의 데이터는 제외시켰다. 상기 데이터 분석에 사용된 뇌파지표는 하기 [표 2] 및 [표 3]에 나타내었다.We measured only the EEG signal for 25 seconds during the 1 minute measurement, processed the data by batch processing, and then applied the corresponding sample T test using statistical analysis program of SPSS version 18.0. The data of subjects who were found to have some of the EEG signals measured when the fragrance of the fat-soluble fraction extract was inhaled were excluded. EEG indices used in the above data analysis are shown in the following [Table 2] and [Table 3].
하기 [표 2]는 데이터 분석에 사용된 뇌파지표의 종류 및 그 의미를 나타낸 것이다.Table 2 below shows the types and meanings of the EEG indices used in the data analysis.
전체에서 나오는 비율, 상대적인 것이기 때문에 편차가 적음Percentage of theta waves in total
Ratio out of all, less deviation because it is relative
하기 [표 3]은 뇌파의 종류 및 그 특징으로 나타내었다.Table 3 shows the types and characteristics of EEG.
(4~8Hz)Theta
(4-8 Hz)
(8~13Hz)Alpha
(8-13 Hz)
(13~30Hz)Beta
(13-30 Hz)
(30~50Hz)Gamma
(30 to 50 Hz)
-3차원 뇌 맵핑 프로그램 - 3D brain mapping program
도 2는 향을 흡입하기 전 및 흡입한 후의 피험자 뇌를 3차원 뇌 맵핑을 사용하여 촬영한 사진이며, 상기 사진은 뇌파변화를 보는 방법을 설명하기 위한 것이다.FIG. 2 is a photograph of a subject's brain before and after inhalation using a three-dimensional brain mapping, and the photograph is intended to illustrate a method of viewing brain wave changes.
도 2에 도시된 바와 같이, 좌측에 보이는 Value 막대는 지용성 분획 추출물의 향을 흡입하기 전과 흡입 상태에서 측정된 뇌파신호의 평균 데이터를 색깔로 나타낸 것으로 뇌파지표마다 각각 다른 평균값을 나타낸다. Fp1, Fp2, F3, F4, T3, T4, P3, P4 위치에서 측정된 뇌파신호 중 평균값이 높을수록 위쪽에 있는 색깔을 나타내고 평균값이 낮을수록 아래쪽에 있는 색깔을 나타낸다. 예를 들어, T3 위치에서 alpha파가 출현하였는데 향을 흡입 전에는 파랑색을 나타내고 향을 흡입 중에 보라색으로 나타났다면 alpha파가 감소한 것으로 해석할 수 있다.
As shown in FIG. 2, the Value bar on the left side shows the mean data of the EEG signals measured before and after the inhalation of the fractions of the fat-soluble fraction extract, and shows a different average value for each EEG index. The higher the mean value of the EEG signals measured at Fp1, Fp2, F3, F4, T3, T4, P3 and P4, the higher the color is, and the lower the average value, the lower the color. For example, alpha wave appeared at T3 position, and it can be interpreted that the alpha wave is decreased when the incense is blue before the inhalation and when the incense is purple during inhalation.
측백엽 지용성 분획 추출물로는 총 2가지의 지표(SEF50, ASEF)에서 유의미한 변화를 볼 수 있었다.There were significant differences in the two indexes (SEF50, ASEF) as the extracts of liposoluble fractions of P.
3-1. 지표 3-1. Indicators SEF50SEF50 의 변화 측정Change measurement of
Spectral edge frequency(SEF) 지표는 인지활동에 대한 대뇌피질의 활성을 알아보기 위한 기준척도로 작업 부하도나 각성상태를 알아볼 수 있다. 뇌파 파워 스펙트럼 분포가 저주파에 비해서 고주파 쪽으로 얼마나 편향되었는지를 주파수로 정량화하는 방법으로 전체 주파수 영역에 대한 면적비로 표시되는데, SEF 값이 높을수록 파워 스펙트럼 분포에서 상대적으로 높은 주파수 성분이 많이 나왔음을 의미한다.The spectral edge frequency (SEF) index can be used as a reference measure of cortical activity for cognitive activity. This is a method of quantifying how much the EEG power spectrum is deflected toward the high frequency as compared with the low frequency. This is expressed as the area ratio of the entire frequency region. The higher the SEF value, the more frequency components are relatively high in the power spectrum distribution .
Spectral edge frequency 50%(SEF50) 지표는 뇌의 각성을 나타내며, 영역 구분에 의한 기존의 분석법보다 예리하고 심도 있는 지표로서 파워 스펙트럼에서 낮은 주파수 축에서부터 면적을 계산하고 그 면적이 전체 주파수 면적의 반이 되는 지점의 주파수 값을 의미한다. 즉, SEF 값이 높을수록 파워 스펙트럼 분포에서 상대적으로 높은 주파수 성분이 많이 나왔음을 의미하며, 뇌의 각성이 높아졌음을 의미한다.
하기 [표 4]는 실시예 1의 지용성 분획 추출물을 흡입하기 전 및 흡입한 후에 뇌에서 유발된 SEF50의 변화를 나타낸 것이다.Table 4 below shows changes in brain-induced SEF50 before and after inhalation of the oil-soluble fraction extract of Example 1.
위 표 4 및 도 3에 나타낸 바와 같이, 본 발명의 실시예 1에 따라 제조된 측백엽 지용성 분획 추출물의 향을 흡입하기 전과 흡입하고 난 후의 뇌파를 확인한 결과, SEF50 뇌파분석 지표 값이 좌측 전전두엽(Fp1)과 우측 전전두엽(Fp2)에서 통계적으로 유의성있게 증가하였다(p < 0.05). 이는 측백엽 지용성 분획 추출물의 향을 흡입하고 난 후, 뇌가 활성화되어 뇌의 각성 상태가 증가한 것을 의미한다.
As shown in Table 4 and FIG. 3, SEF50 EEG index values were measured before and after the inhalation of the fragrance of the Leptospore oil-soluble fraction extract prepared according to Example 1 of the present invention as the left frontal lobe (Fp1 ) And the right prefrontal cortex (Fp2) (p <0.05). This means that after the fragrance of the extracts of the extracts of the liposoluble fraction of the leaves of the leaves, the brain is activated and the arousal state of the brain is increased.
3-2. 지표 3-2. Indicators ASEFASEF 의 변화Change of
알파 스펙트럼 밴드의 SEF50(ASEF, Spectral edge frequency 50% of alpha spectrum band) 지표는 알파파의 SEF50으로 쾌적성을 나타내는 뇌파지표로 알파파의 뇌파 활성도를 확인이 가능하다고 알려져 있으며(Jang 2013), 몸과 마음의 이완을 의미한다(Ryu 2009).It is known that SEF50 (ASEF, 50% of alpha spectrum band) of alpha spectrum band is an EEG index showing comfort with SEF50 of ALPHA, and it is known that ALPA EEG activity can be confirmed (Jang 2013) And relaxation of mind (Ryu 2009).
하기 [표 5]는 실시예 1의 지용성 분획 추출물을 흡입하기 전 및 흡입한 후에 뇌에서 유발된 ASEF의 변화를 나타낸 것이다.Table 5 below shows changes in brain-induced ASEF before and after inhalation of the oil-soluble fraction extract of Example 1.
위 표 5 및 도 4에 나타낸 바와 같이, 본 발명의 실시예 1에 따라 제조된 측백엽 지용성 분획 추출물의 향을 흡입하기 전과 흡입하고 난 후의 뇌파를 확인한 결과, ASEF 뇌파분석 지표 값이 우측 전전두엽(Fp2)과 우측 전두엽(F4)에서 통계적으로 유의성 있게 증가하였다(p < 0.05). 이는 측백엽 지용성 분획 추출물의 향을 흡입하고 난 후, 뇌가 정신적 안정상태가 되었음을 의미한다.As shown in the above Table 5 and FIG. 4, when the fragrance of Leekleaf lipid soluble fraction prepared according to Example 1 of the present invention was examined before and after the inhalation of the fragrance, the ASEP EEG index value was found to be higher than that of the right prefrontal ) And the right frontal lobe (F4) (p <0.05). This means that the brain is in a state of mental stability after inhaling the fragrance of the fragrant oil fraction extract.
이와 같이, 측백엽 지용성 분획 추출물의 향을 흡입하기 전과 후의 뇌파 측정 결과, 전전두엽과 전두엽에서 25개의 뇌파지표 중 2가지 지표(SEF50, ASEF)가 유의한 결과를 나타내었다. 이와 같은 결과로 측백엽 지용성 분획 추출물의 향을 흡입 시 심신의 스트레스나 긴장 상태가 이완되어 정신적인 안정을 얻음과 동시에 뇌가 각성상태가 되어 뇌 활성도가 증가됨으로써 집중력 및 기억력을 강화시킬 수 있다는 것을 확인하였다.
In this way, EEG data before and after inhalation of the fragrance of the fragrant oil extracts of the leaves showed significant results in 25 EEG indicators (SEF50, ASEF) in prefrontal and frontal lobes. As a result, when the fragrance of Leaf Leaf Fractional Leaves of Leaves of Leaves Leaves is relaxed, the mental and emotional stability of the mind and body is relaxed and the brain is awakened and the brain activity is increased, thereby enhancing the concentration and memory Respectively.
[[ 실시예Example 2 및 항염증과 부종 2 and anti-inflammatory and edema 시험예Test Example ]]
실시예 2.Example 2. 측백엽 지용성 분획 추출물Leaves
측백엽 300 g을 110 ℃의 온도에서 수증기로 표면 또는 조직에 있는 오일 성분을 휘발시키고(6시간), 이를 급냉시켜 농축시킴으로써 오일 추출물을 추출하였다.
The oil extract was extracted by volatilizing the oil components on the surface or tissue (6 hours) with water vapor at a temperature of 110 캜 and quenching and concentrating 300 g of the lateral leaf.
시험예 4. 휘발성 유기 화합물 분석Test Example 4. Analysis of volatile organic compounds
상기 시험예 2와 동일한 방법으로 시험예 4를 수행하였다.Test Example 4 was carried out in the same manner as in Test Example 2 above.
위 표 6에 나타낸 바와 같이, 실시예 2에 따라 제조된 지용성 분획 추출물에 함유된 총 54가지의 휘발성 유기화합물을 가지며, 이 중에서 주된 유기화합물은 α-Elemol, 3-cyclohexene-1-methanol,alpha,alpha, 4-trimethyl-acetate, Terpinen-4-ol, bornl acetate, widdrene, limonene, α-Terpinene, α-Pinene, Camphene이다.
As shown in Table 6 above, the total of 54 volatile organic compounds contained in the fat soluble fraction extract prepared according to Example 2, of which the main organic compounds are α-Elemol, 3-cyclohexene-1-methanol, , alpha, 4-trimethyl-acetate, Terpinen-4-ol, bornl acetate, widdrene, limonene, α-Terpinene, α-Pinene and Camphene.
시험예Test Example 5. 항염증 시험_In vitro 5. Anti-inflammatory test _ In vitro
-세포배양 - Cell culture
사용할 세포는 사람의 정상피부 세포주 각질형성세포인 HaCaT 세포이다. 세포배양을 위해 10% FBS와 1% penicillin/streptomycin을 포함하는 DMEM(Dulbeccos Modified Eagle Medium) 배지를 사용한다. 세포는 CO2 배양기 (37 ℃, 5% CO2)에서 배양하였다. 세포 개수는 96-well plate 인 경우 1*105, 6-well plate : 1.5*106 을 사용하였다.The cells to be used are HaCaT cells which are normal human skin cell keratinocytes. For cell culture, use DMEM (Dulbeccos Modified Eagle Medium) medium containing 10% FBS and 1% penicillin / streptomycin. Cells were cultured in a CO 2 incubator (37 ° C, 5% CO 2 ). The number of cells was 1 × 10 5 for a 96-well plate and 1.5 × 10 6 for a 6-well plate.
-자료의 통계 처리 - Statistical processing of data
모든 실험 결과는 평균±표준편차(mean±S.D.)로 나타내었고, students t-test를 이용하여 분석하였다. p 값이 5% 미만일 때를 "유의적인 차이가 있음"으로 판정하였다.All experimental results were expressed as mean ± SD (mean ± SD) and analyzed using students t- test. When the p value was less than 5%, it was judged as "significant difference".
-시료-sample
실시예 2에 따라 제조된 지용성 분획 추출물은 5 mg/ul 배지에 녹인 후 25, 50, 100 ug/ml의 농도로 사용하였다.The lipid soluble fraction extract prepared according to Example 2 was dissolved in 5 mg / ul medium and used at a concentration of 25, 50, 100 ug / ml.
-염증반응- inflammatory reaction
염증반응은 감염과 같은 외부 자극이나 생체 내 대사산물과 같은 내부자극에 대한 생체조직의 방어기전으로 인해 일어나며, 다양한 염증조절인자들인 IL-6, TNF-a 등과 같은 cytokine에 관여한다. 특히 LPS와 같은 자극에 의해 염증반응을 활성화시키며 그 결과 iNOS, COX-2를 발현시켜 NO를 필요이상으로 생성시키고 또한 PGE2를 생성하여 염증을 일으킨다.
Inflammation reactions are caused by defibrillation of biological tissues against external stimuli such as infection or internal stimuli such as metabolites in vivo and are involved in cytokines such as IL-6 and TNF-a, which are various inflammatory regulators. In particular, activation of the inflammatory response by stimulation such as LPS results in the expression of iNOS and COX-2, resulting in the unnecessary production of NO and PGE2 to produce inflammation.
5-1. 5-1. MTTMTT Assay 법에 세포 생존율 및 독성 측정 Assay method for cell viability and toxicity
세포 생존률은 살아 있는 세포의 미토콘드리아 탈수소 효소에 의해 보라색으로 환원되는 MTT의 원리를 이용하여 분석하였다. HaCaT 세포는 96-well plate에 2 X 104 cells/well의 농도가 되도록 100 ul/well씩 접종하여 24시간 동안 CO2 배양기에서 안정화시킨 후 실험에 사용한다. 세포는 LPS로 자극시키거나 혹은 자극시키지 않은 상태에서 각 농도별(지용성 분획 추출물 25, 50, 100 ug/ml)로 처리한 다음 다시 24시간 배양 후 10 ul의 MTT solution을 첨가하여 CO2 배양기에서 1시간 30분 반응시켰다. Microplate reader를 이용하여 540 nm에서 흡광도의 변화를 측정하여 대조군에 대한 세포 생존율을 측정하였다. Cell viability was assayed using the principle of MTT reduced to purple by mitochondrial dehydrogenase of living cells. HaCaT cells were inoculated at 100 μl / well in a 96-well plate at a concentration of 2 × 10 4 cells / well and stabilized in a CO 2 incubator for 24 hours. Cells were treated with LPS (25, 50, 100 ug / ml) at various concentrations without stimulation or stimulation with LPS, and then cultured for another 24 hours. 10 μl of MTT solution was added to the cells and incubated in a CO 2 incubator And reacted for 1 hour and 30 minutes. The cell viability of the control group was measured by measuring the absorbance change at 540 nm using a microplate reader.
도 5에 도시된 바와 같이, 실시예 2에 따라 제조된 지용성 분획 추출물은 세포 독성을 보이지 않는 것을 확인하였다.
As shown in FIG. 5, the lipid soluble fraction extract prepared according to Example 2 showed no cytotoxicity.
5-2. Nitric Oxide(NO) 측정5-2. Measurement of nitric oxide (NO)
NO는 특이적 또는 비 특이적 면역 반응에 중요한 역할을 하는 것으로 알려져 있으며 세포 배양액에서 NO2와 NO3의 형태로 축적되어있다. NO의 농도는 배양액 내의 nitrite 농도를 Griess reagent system을 이용하여 측정한다. HaCaT 세포를 96well plate에 2 X 104 cells/well이 되도록 분주하고, 24시간 후 지용성 분획 추출물을 농도별(25, 50, 100 ug/ml)로 전처리하고 1시간 후에 LPS 10 g/ml을 처리하여 24시간 동안 배양한다. 배양액과 동량의 griess reagent를 가하고 10분간 상온에서 반응시킨 다음 540 nm에서 흡광도를 측정한다. Sodium Nitrite의 농도별 표준곡선을 이용하여 배양액의 NO 농도를 결정하였다. 상기 HaCaT 세포는 37 ℃, 5 % CO2 배양기에서 안정화시킨 뒤 사용하였다.NO is known to play an important role in specific or nonspecific immune responses and accumulates in the form of NO2 and NO3 in cell culture fluids. The concentration of NO is measured by using the Griess reagent system for nitrite concentration in the culture medium. HaCaT cells were plated at a density of 2 × 10 4 cells / well on a 96-well plate. After 24 hours, lipid soluble fraction extracts were pretreated by concentration (25, 50, 100 ug / ml) And cultured for 24 hours. Add the same amount of griess reagent to the culture medium, incubate for 10 minutes at room temperature, and measure the absorbance at 540 nm. The concentration of NO in the culture medium was determined using a standard curve of concentration of sodium nitrite. The HaCaT cells were used after being stabilized in a 37 ° C, 5% CO2 incubator.
체내 염증과정에서는 과량의 nitric oxide(NO) 및 prostaglandin E2(PGE2)등의 염증인자가 유도형 NO synthase(iNOS) 및 cycloxygenase(COX)-2에 의해 형성된다. 이 중 NO는 체내 방어기능, 신호전달기능, 신경독성, 혈관확장 등의 다양한 생리기능을 가지고 있다. NO 자체는 반감기가 6 내지 10초 정도로 매우 짧으며, 이러한 NO를 형성하는 nitric oxide syntase(NOS)는 물리 화학적 성상에 따라 type Ⅰ, Ⅱ 및 Ⅲ 등 3종류의 동종 효소로 나누어진다. Type Ⅰ(neuronal NOS, nNOS)과 type Ⅲ(endothelial, eNOS)는 세포속에 계속적으로 존재하기 때문에 구성 NOS(constitutive NOS)로 분류하였으며, 상대적으로 일부 세포에서 LPS, cytokine 및 박테리아 독소같은 특수한 자극제들에 노출되는 경우에만 발현되는 type Ⅲ인 유도형 NOS(iNOS)로 나누어진다. 이러한 NOS들은 l-argine을 l-citrulline으로 전환시키면서 NO를 형성하였다. 이들 NOS는 iNOS에 의한 발현성이 절대적으로 많으며, 이는 병리적으로 중요한 작용을 하였다. 일반적으로 NO의 형성은 박테리아를 죽이거나 종양을 제거시키는 중요한 역할을 하지만 병리학적인 원인에 의한 과도한 NO의 형성은 염증을 유발시키게 되며, 조직의 손상, 유전자 변이 및 신경 손상 등을 유발하였다. In the body, inflammatory factors such as nitric oxide (NO) and prostaglandin E 2 (PGE 2 ) are formed by induction of NO synthase (iNOS) and cyclooxygenase (COX) -2. Among these, NO has various physiological functions such as body defense function, signal transduction function, neurotoxicity, and vasodilation. Nitric oxide synthase (NOS), which forms NO, is divided into three kinds of isoenzymes such as type Ⅰ, Ⅱ and Ⅲ according to physicochemical properties. Type Ⅰ (neuronal NOS, nNOS) and type Ⅲ (endothelial, eNOS) are classified into constitutive NOS because they are continuously present in the cells. In some cells, specific stimulants such as LPS, cytokine and bacterial toxin And inductive NOS (iNOS) type III, which is expressed only when exposed. These NOSs formed NO by converting l-argine to l-citrulline. These NOS expressions by iNOS are absolutely high, and they have a pathologically important effect. In general, the formation of NO plays an important role in killing bacteria or eliminating tumors, but the formation of excessive NO by pathologic causes causes inflammation, causing tissue damage, gene mutation and nerve damage.
도 6에 도시된 바와 같이, LPS를 처리한 군과, LPS와 실시예 2의 지용성 분획 추출물을 동시에 처리한 군으로 나누어 실험을 진행하였다. HaCat 세포를 LPS로 자극 시 염증 매개 물질인 NO의 생성이 증가되었으며, LPS 처리에 의해 현저히 증가된 NO가 실시예 2의 지용성 분획 추출물로 처리 시 억제되는 경향을 보이는 것을 확인하였다.
As shown in FIG. 6, the experiment was divided into the group treated with LPS and the group treated with LPS and the oil-soluble fraction extract of Example 2 at the same time. The stimulation of HaCat cells with LPS increased the production of NO, an inflammatory mediator, and showed that the significantly increased NO by LPS treatment tended to be inhibited by the lipid soluble fraction extract of Example 2.
5-3. 5-3. CytokineCytokine 생성량 측정( Production Quantity Measurement PGE2PGE2 , IL-6), IL-6)
HaCaT 세포를 96 well plate에 1 X 105 cells/well이 되도록 분주하고 24시간 동안 배양한 후 시료를 처리하고 1시간 후 LPS처리하여 24시간 동안 배양한다. 24시간 동안 배양된 배양액에 함유된 PGE2, IL-6를 ELISA kit을 이용하여 측정하였다. HaCaT cells were plated in 96-well plates at a density of 1 × 10 5 cells / well, cultured for 24 hours, treated with LPS for 1 hour, and cultured for 24 hours. PGE 2 and IL-6 contained in the cultures cultured for 24 hours were measured using an ELISA kit.
도 7 및 도 8에 도시된 바와 같이, 염증성 사이토카인인 IL-6와 PGE2분비에 미치는 영향을 살펴보기 위해 HaCaT 세포에 LPS 단독처리, 또는 LPS와 실시예 2의 지용성 분획 추출물을 함께 처리한 결과, LPS에 의해 자극된 세포는 IL-1β, IL-6, TNF-α와 같은 pro-inflammatory cytokine의 분비를 증가시키지만, 실시예 2의 지용성 분획 추출물이 IL-6와 PGE2의 분비를 100 ug/ml 농도에서 유의적으로 억제시키는 것을 확인하였다.As shown in FIGS. 7 and 8, in order to examine the effects on the inflammatory cytokines IL-6 and PGE 2 secretion, HaCaT cells were treated with LPS alone or with LPS and the liposoluble fraction extract of Example 2 As a result, LPS-stimulated cells increased pro-inflammatory cytokine secretion such as IL-1β, IL-6 and TNF-α, but the lipid soluble fraction extract of Example 2 secreted IL-6 and PGE 2 ug / ml.
따라서, 실시예 2의 지용성 분획 추출물은 HaCaT세포에서 LPS에 의해 유도되는 NO의 생성을 억제시켰으며, 염증성 사이토카인 IL-6, PGE2의 분비량도 억제하는 효과를 가지고 있는 것을 확인하였다.
Thus, it was confirmed that the liposoluble fraction extract of Example 2 inhibited the production of NO induced by LPS in HaCaT cells and also had the effect of suppressing the secretion amount of inflammatory cytokines IL-6 and PGE 2 .
시험예Test Example 6. 항염증 시험_In 6. Anti-inflammatory test _In vivovivo (Ear Edema Test) (Ear Edema Test)
-피부에 적용 시 자극과 함께 염증반응을 유발하여 부종을 발생시키는 Croton oil(파두유)를 이용한 동물실험 모델을 사용해 피부 표면에 대한 항염증 효능을 평가한다. - Evaluate the anti-inflammatory effect on the skin surface using an animal model using Croton oil (persimmon oil), which induces inflammation and edema by stimulation when applied to skin.
-시료 - Sample
동물 실험 모델에 사용한 시료는 일정 퍼센트(v/v) 비율로 아세톤을 이용해 희석하여 사용하였다. 양성 대조군으로는 Hydrocortisone(2 mg/ear)을 사용하였다.The samples used in the animal model were diluted with acetone at a certain percentage (v / v) ratio. Hydrocortisone (2 mg / ear) was used as a positive control.
-실험 방법_마우스 귀 부종 시험법 (Ear Edema Test) - Experimental method _ Ear Edema Test (Ear Edema Test)
약물 처리를 하지 않은 정상 마우스(수컷, 8주령)의 좌측 귀 뒷면에 시험약물 20 ul를 피펫을 이용하여 균질하게 도포한 후 1 시간 동안 방치한다. 이때, 정상군은 용매로 사용된 아세톤을 동일한 양으로 도포한다. 이후, 5% Croton oil 용액을 동일한 귀 뒷면에 30 ul씩 피펫을 이용하여 균질하게 도포한다. 이때, 정상군은 용매로 사용된 아세톤을 동일한 양으로 도포한다.20 μl of the test drug is uniformly applied to the back of the left ear of a normal mouse (male, 8 weeks old) without drug treatment using a pipette, and left for 1 hour. At this time, the normal group is coated with the same amount of acetone used as a solvent. Thereafter, a 5% croton oil solution is homogeneously applied to the back of the ear using a pipette by 30 μl each. At this time, the normal group is coated with the same amount of acetone used as a solvent.
5% Croton oil 도포로부터 0, 3 및 5시간이 경과한 시점에서 실험동물 좌측 귀 상단 일정한 부위의 두께를 버니어 캘리퍼를 이용해 측정한다. 각 실험군 별 실험동물은 7마리를 사용하며, 각 실험동물의 귀 부종 여부는 0 시간대 측정값을 기준값(100%)으로 하여 각 시간대 별 측정된 귀의 두께를 증가된 % 수치로 환산하여 나타낸다. At 0, 3 and 5 hours after the application of 5% Croton oil, the thickness of the constant area of the left ear of the experimental animal is measured using a vernier caliper. Seven animals were used in each experimental group. Ear swelling of each animal was expressed as an increased percentage value of the ear thickness measured at each time zone with the reference value (100%) at 0 time zone measurement value.
3번에 걸친 반복 실험을 수행하였으며 시료 용매가 미치는 영향을 확인하기 위하여 최종제품을 아세톤 대신 호호바 오일을 처리하여 실험에 사용하였다.In order to confirm the effect of the sample solvent, the final product was treated with jojoba oil instead of acetone.
-자료의 통계 처리 - Statistical processing of data
모든 실험 결과는 평균±표준편차(mean±S.D.)로 나타내었고, students t-test를 이용하여 분석하였다. p 값이 5% 미만일 때를 "유의적인 차이가 있음"으로 판정하였다.All experimental results were expressed as mean ± SD (mean ± SD) and analyzed using students t- test. When the p value was less than 5%, it was judged as "significant difference".
도 9에 도시된 바와 같이, 5% Croton oil은 정상 상태의 귀에 부종을 유발시켜 3시간째에 약 230% 수준까지 귀 두께를 증가(부종)시켰으며, 5시간째에는 약 260% 수준까지 추가로 증가시켰다. 양성 대조군인 Hydrocortisone은 2 mg씩을 각 귀에 도포한 결과, 이러한 귀 두께가 감소하였다.As shown in FIG. 9, the 5% Croton oil induced edema in the normal ear and increased the ear thickness to about 230% at 3 hours (edema). At 5 hours, about 260% Respectively. Hydrocortisone, a positive control, applied 2 mg to each ear, resulting in a decrease in ear thickness.
실시예 2의 지용성 분획 추출물은 전반적으로 귀 두께가 감소하는 경향성을 보였으며, 특히 30 % 및 70% 농도 처리군들이 5시간째에서부터 유의성 있게 귀 두께가 감소하였다. The fat-soluble fraction extract of Example 2 showed a tendency of decreasing the thickness of the ear as a whole. Especially, the ear thickness decreased significantly at 5 hours after 30% and 70% treatment groups.
또한, 희석액으로 아세톤 대신 호호바 오일을 사용한 결과(도 9)는 5% Croton oil은 정상 상태의 귀에 부종을 유발시켜 3시간째에 약 190% 수준까지 귀 두께를 증가시켰으며, 5시간째에는 약 230% 수준까지 추가로 증가시켰다. 이는 기존 아세톤으로 진행한 시험에 대비하여 소폭 감소한 수치로 호호바 오일 도포에 따른 5% Croton oil의 흡수 저해가 작용한 것으로 보인다. 양성 대조군인 Hydrocortisone을 2 mg씩을 각 귀에 도포한 결과, 이러한 귀 두께가 현저하게 감소되었다.In addition, as a result of using jojoba oil instead of acetone as a diluent (FIG. 9), 5% Croton oil induced edema in a normal ear and increased ear thickness to about 190% at 3 hours, To 230%. This is a slight decrease compared to the previous test with acetone, which seems to be due to the absorption inhibition of 5% Croton oil by applying jojoba oil. 2 mg of Hydrocortisone, a positive control, was applied to each ear, resulting in a significant reduction in ear thickness.
실시예 2의 지용성 분획 추출물은 전반적으로 귀 두께가 감소하는 경향성을 보였으며, 특히 70% 처리군은 3시간째부터 양성 대조군인 Hydrocortisone 도포군과 유사한 정도로 유의성 있게 귀 두께가 감소되는 효능을 나타냈으며 이는 5시간째까지 지속되었다.
The liposoluble fraction extract of Example 2 showed a tendency to decrease ear thickness in general, and the 70% treated group showed a significant decrease in ear thickness from the third hour to a degree similar to that of the positive control group Hydrocortisone This continued until 5 hours.
시험예Test Example 7. 7. 전자공여능Electron donating ability (electron donating ability) 측정(electron donating ability) measurement
전자공여능(EDA: electron donating ability)은 Blois의 방법을 변형하여 측정하였다. 실시예 2의 지용성 분획 추출물 2 ml에 0.2 mM의 1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl(DPPH) 1 ml 넣고 교반한 후 30분간 방치한 다음 517 nm에서 흡광도를 측정하였다. 전자공여능은 시료용액의 첨가구와 무 첨가구의 흡광도 감소율로 나타내었다. The electron donating ability (EDA) was measured by modifying the Blois method. To 2 ml of the liposoluble fraction extract of Example 2, 1 ml of 0.2
[수학식 1][Equation 1]
DPPH는 화학적으로 안정화된 프리 라디칼을 가지고 있는 수용성 물질로 아스크르브산(ascorbic acid), 토코페롤(tocopherol), 폴리하이드록시(polyhydroxy) 방향족 화합물 등에 의해 환원되어 짙은 자색이 탈색되는데, 이것은 다양한 천연 소재로부터 항산화 물질을 검색하는데 많이 이용된다. ROS(reactive oxygen species)는 체내 방어기전에 의해 대부분 제거되지만 제거되지 못할 경우 생체분자들과 신속하게 반응하여 단백질의 변성이나 생체막의 지질 과산화, DNA 손상 등을 일으키며, 세포 내로 확산되거나 혈류를 통해 이동된 지질 과산화물은 새로운 라디칼반응을 촉진시켜 각종 질환의 원인으로 작용한다.DPPH is a chemically stabilized water-soluble substance with free radicals, which is reduced by ascorbic acid, tocopherol, and polyhydroxy aromatic compounds, resulting in discoloration of deep purple color, Which is widely used to search for antioxidants. Reactive oxygen species (ROS) are largely eliminated by the body's defense system, but if not eliminated, they react with biomolecules rapidly to cause protein denaturation, lipid peroxidation and DNA damage of the biological membrane, Lipid peroxides accelerate new radical reactions and cause various diseases.
본 발명의 실시예 2에 따라 제조된 지용성 분획 추출물의 DPPH free radical 소거활성은 1,000 ug/ml 농도에서 매우 우수한 97.72±0.8%를 나타내는 것을 확인하였다.
The DPPH free radical scavenging activity of the fat soluble fraction extract prepared according to Example 2 of the present invention was found to be very excellent 97.72 ± 0.8% at a concentration of 1,000 ug / ml.
이와 같이, 상기 지용성 분획 추출물은 염증 또는 부종의 예방 및 치료용 약학 조성물에 유효성분으로 함유될 수 있다.Thus, the fat-soluble fraction extract may be contained as an active ingredient in a pharmaceutical composition for preventing or treating inflammation or edema.
상기 염증 또는 부종의 예방 및 치료용 약학 조성물은 다양한 경구 또는 비경구 투여 형태로 제형화할 수 있다.The pharmaceutical composition for the prevention and treatment of inflammation or edema can be formulated into various oral or parenteral administration forms.
경구 투여용 제형으로는 예를 들면 정제, 환제, 경질, 연질 캅셀제, 액제, 현탁제, 유화제, 시럽제, 과립제 등이 있는데, 이들 제형은 유효성분 이외에 희석제(예: 락토즈, 덱스트로즈, 수크로즈, 만니톨, 솔비톨, 셀룰로즈 및/또는 글리신), 활택제(예: 실리카, 탈크, 스테아르산 및 그의 마그네슘 또는 칼슘염 및/또는 폴리에틸렌 글리콜)를 추가로 포함할 수 있다. 또한, 상기 정제는 마그네슘 알루미늄 실리케이트, 전분 페이스트, 젤라틴, 트라가칸스, 메틸셀룰로즈, 나트륨 카복시메틸셀룰로즈 및/또는 폴리비닐피롤리딘과 같은 결합제를 함유할 수 있으며, 경우에 따라 전분, 한천, 알긴산 또는 그의 나트륨 염과 같은 붕해제 또는 비등 혼합물 및/또는 흡수제, 착색제, 향미제 및 감미제를 함유할 수 있다. 상기 제형은 통상적인 혼합, 과립화 또는 코팅 방법에 의해 제조될 수 있다.Examples of formulations for oral administration include tablets, pills, hard, soft capsules, liquids, suspensions, emulsions, syrups, granules and the like. These formulations may contain, in addition to the active ingredient, a diluent such as lactose, dextrose, (For example, silica, talc, stearic acid and magnesium or calcium salts thereof and / or polyethylene glycol), in addition to the active ingredient (s). The tablets may also contain binders such as magnesium aluminum silicate, starch paste, gelatin, tragacanth, methylcellulose, sodium carboxymethylcellulose and / or polyvinylpyrrolidine, optionally mixed with starch, agar, alginic acid Or a disintegrating or boiling mixture such as its sodium salt and / or an absorbent, a colorant, a flavoring agent and a sweetening agent. The formulations may be prepared by conventional mixing, granulating or coating methods.
또한, 비경구 투여용 제형의 대표적인 것은 주사용 제제이며, 주사용 제제의 용매로서 물, 링거액, 등장성 생리식염수 또는 현탁액을 들 수 있다. 상기 주사용 제제의 멸균 고정 오일은 용매 또는 현탁 매질로서 사용할 수 있으며 모노-, 디- 글리세라이드를 포함하여 어떠한 무자극성 고정오일도 이러한 목적으로 사용될 수 있다. 또한, 상기 주사용 제제는 올레산과 같은 지방산을 사용할 수 있다.Representative examples of formulations for parenteral administration include injectable preparations, and water, Ringer's solution, isotonic saline or suspensions may be mentioned as a solvent for the injectable preparation. The sterile, fixed oils of the injectable preparations may be used as a solvent or suspending medium, and any non-irritating fixed oils, including mono-, di-glycerides, may be used for this purpose. The injectable preparation may be a fatty acid such as oleic acid.
본 발명의 측백엽 지용성 분획 추출물을 유효성분으로 함유한 염증 또는 부종의 예방 또는 치료용 약학 조성물의 투여량은 환자의 연령, 성별, 체중, 질환의 중증도에 따라 달라지나, 본 발명의 조성물은 환자의 무게 1 kg 당 300 mg 이하, 바람직하게는 100 내지 200 mg을 1일 1-4회 투여하나 이에 한정되는 것은 아니다.The dosage of the pharmaceutical composition for prevention or treatment of inflammation or edema containing the extract of Leptocainfolius extract of the present invention as an active ingredient varies depending on the age, sex, weight and severity of the disease of the patient, The dosage is not more than 300 mg per kg body weight, preferably 100 to 200 mg per day, but not limited thereto.
또한, 상기 본 발명의 측백엽 지용성 분획 추출물을 유효성분으로 함유하는 염증 또는 부종의 예방 및 개선용 건강기능식품은 건강기능식품 총 중량을 기준으로 지용성 분획 추출물을 0.01 내지 80 중량%로 함유한다. In addition, the health functional food for preventing or ameliorating inflammation or edema containing the leaves of the present invention as an active ingredient contains 0.01 to 80% by weight of the fat-soluble fraction extract based on the total weight of the health functional food.
상기 건강기능식품은 일상식사에서 부족할 수 있는 영양소를 보충하거나 인체에 유용한 기능성 원료를 보충할 목적으로 캡슐, 정제, 분말, 과립, 액상, 환, 편상, 페이스트상, 시럽, 겔, 젤리 및 바로 이루어진 군에서 선택되어 1회 섭취가 용이하게 제조 및 가동된 것이다.The health functional food may be in the form of a capsule, tablet, powder, granule, liquid, ring, flaky, paste, syrup, gel, jelly and jute for the purpose of supplementing nutrients that may be lacking in daily eating or supplementing functional raw materials useful in the human body And is easily manufactured and operated once.
또한, 상기 건강기능식품은 제형에 따라 포도당, 구연산, 액상 올리고당, 옥수수 시럽(corn syrup), 대두 레시틴, 버터, 식물성 경화류, 탈지우유, 설탕, 마가린, 식염, 전분, 밀가루, 물엿, 맥아당, 중조 및 당 에스테르 등의 통상적으로 사용되는 성분들을 이용하여 제조될 수 있다.In addition, the health functional food may contain at least one selected from the group consisting of glucose, citric acid, liquid oligosaccharide, corn syrup, soybean lecithin, butter, vegetable hardening oil, skim milk, sugar, margarine, salt, starch, And can be prepared by using commonly used components such as sodium bicarbonate and sugar ester.
또한, 상기 본 발명의 측백엽 지용성 분획 추출물을 유효성분으로 함유하는 염증 또는 부종의 예방 및 개선용 화장용 조성물은 일반적인 유화 제형 및 가용화 제형의 형태로 제조할 수 있다. 유화 제형의 화장품으로는 영양화장수, 크림, 에센스 등이 있으며, 가용화 제형의 화장품으로는 유연화장수가 있다.In addition, the cosmetic composition for preventing or ameliorating inflammation or edema containing the fragrant extract of the present invention as an active ingredient can be prepared in the form of a general emulsified formulation and a solubilized formulation. Cosmetics of emulsified form include nutrition lotion, cream, essence, etc., and cosmetics of solubilized form have softening longevity.
적합한 화장품의 제형으로는 예를 들면 용액, 겔, 고체 또는 반죽 무수 생성물, 수상에 유상을 분산시켜 얻은 에멀젼, 현탁액, 마이크로에멀젼, 마이크로캡슐, 미세과립구 또는 이온형(리포좀), 비이온형의 소낭 분산제의 형태, 크림, 스킨, 로션, 파우더, 연고, 스프레이 또는 콘실 스틱의 형태로 제공될 수 있다. 또한, 포말(foam)의 형태 또는 압축된 추진제를 더 함유한 에어로졸 조성물의 형태로도 제조될 수 있다.Suitable cosmetic formulations include, for example, solutions, gels, solid or kneaded anhydrous products, emulsions obtained by dispersing the oil phase in water, suspensions, microemulsions, microcapsules, microgranules or ionic (liposomes) In the form of a dispersing agent, in the form of a cream, a skin, a lotion, a powder, an ointment, a spray or a conical stick. It can also be prepared in the form of a foam or an aerosol composition further containing a compressed propellant.
또한, 상기 화장품은 본 발명의 추출물 또는 이의 분획물에 추가로 지방 물질, 유기 용매, 용해제, 농축제 및 겔화제, 연화제, 항산화제, 현탁화제, 안정화제, 발포제(foaming agent), 방향제, 계면활성제, 물, 이온형 또는 비이온형 유화제, 충전제, 금속이온봉쇄제 및 킬레이트화제, 보존제, 비타민, 차단제, 습윤화제, 필수 오일, 염료, 안료, 친수성 또는 친유성 활성제, 지질 소낭 또는 화장품에 통상적으로 사용되는 임의의 다른 성분과 같은 화장품 분야에서 통상적으로 사용되는 보조제를 함유할 수 있다.
In addition, the cosmetic composition may further contain, in addition to the extract of the present invention or its fractions, a lipid, an organic solvent, a solubilizing agent, a thickening agent and a gelling agent, a softening agent, an antioxidant, a suspending agent, a stabilizer, a foaming agent, , Water, ionic or nonionic emulsifiers, fillers, sequestering agents and chelating agents, preservatives, vitamins, barrier agents, wetting agents, essential oils, dyes, pigments, hydrophilic or lipophilic active agents, lipid vesicles or cosmetics And may contain adjuvants conventionally used in the cosmetics field, such as any other ingredients used.
하기에 본 발명의 추출물을 함유하는 조성물의 제제예를 설명하나, 본 발명은 이를 한정하고자 함이 아닌 단지 구체적으로 설명하고자 함이다.Hereinafter, formulation examples of the composition containing the extract of the present invention will be described, but the present invention is not intended to be limited thereto but is specifically described.
제제예 1. 산제의 제조Preparation Example 1. Preparation of powder
실시예 2에서 지용성 분획 추출물 500 mgIn Example 2, 500 mg of the liposoluble fraction extract
유당 100 mg
탈크 10 mg
상기의 성분들을 혼합하고 기밀포에 충진하여 산제를 제조한다.
The above components are mixed and filled in airtight bags to prepare powders.
제제예 2. 정제의 제조Formulation Example 2. Preparation of tablets
실시예 2에서 지용성 분획 추출물 300 mgIn Example 2, 300 mg of the liposoluble fraction extract
옥수수전분 100 mg
유당 100 mg
스테아린산 마그네슘 2 mg
상기의 성분들을 혼합한 후 통상의 정제의 제조방법에 따라서 타정하여 정제를 제조한다.
After mixing the above components, tablets are prepared by tableting according to the usual preparation method of tablets.
제제예 3. 캅셀제의 제조Formulation Example 3. Preparation of capsules
실시예 2에서 지용성 분획 추출물 200 mgIn Example 2, 200 mg of the liposoluble fraction extract
결정성 셀룰로오스 3 mgCrystalline cellulose 3 mg
락토오스 14.8 mgLactose 14.8 mg
마그네슘 스테아레이트 0.2 mgMagnesium stearate 0.2 mg
통상의 캡슐제 제조방법에 따라 상기의 성분을 혼합하고 젤라틴 캡슐에 충전하여 캡슐제를 제조한다.
The above components are mixed according to a conventional capsule preparation method and filled in gelatin capsules to prepare capsules.
제제예 4. 주사제의 제조Formulation Example 4. Preparation of injection
실시예 2에서 지용성 분획 추출물 600 mgIn Example 2, 600 mg of the lipid soluble fraction extract
만니톨 180 mg180 mg mannitol
주사용 멸균 증류수 2974 mgSterile sterilized water for injection 2974 mg
Na2HPO4·12H2O 26 mgNa 2 HPO 4 .12H 2 O 26 mg
통상의 주사제의 제조방법에 따라 1 앰플 당 상기의 성분 함량으로 제조한다.
It is prepared by the above-mentioned component content per ampoule according to the usual injection preparation method.
제제예 5. 액제의 제조Formulation Example 5. Preparation of a liquid preparation
실시예 2에서 지용성 분획 추출물 4 gIn Example 2, 4 g of the fat soluble fraction extract
이성화당 10 g10 g per isomer
만니톨 5 g5 g mannitol
정제수 적량Purified water quantity
통상의 액제의 제조방법에 따라 정제수에 각각의 성분을 가하여 용해시키고 레몬향을 적량 가한 다음 상기의 성분을 혼합한 다음 정제수를 가하여 전체를 정제수를 가하여 전체 100g으로 조절한 후 갈색병에 충진하여 멸균시켜 액제를 제조한다.
Each component was added and dissolved in purified water according to the usual liquid preparation method, and the lemon flavor was added in an appropriate amount. Then, the above components were mixed, and purified water was added thereto. The whole was adjusted to 100 g with purified water, To prepare a liquid agent.
제제예 6. 과립제의 제조Preparation Example 6 Preparation of Granules
실시예 2에서 지용성 분획 추출물 1,000 mgIn Example 2, 1,000 mg of the liposoluble fraction extract
비타민 혼합물 적량Vitamin mixture quantity
비타민 A 아세테이트 70 mgVitamin A acetate 70 mg
비타민 E 1.0 mgVitamin E 1.0 mg
비타민 B1 0.13 mgVitamin B1 0.13 mg
비타민 B2 0.15 mg0.15 mg of vitamin B2
비타민 B6 0.5 mgVitamin B6 0.5 mg
비타민 B12 0.2 mgVitamin B12 0.2 mg
비타민 C 10 mg
비오틴 10 mgBiotin 10 mg
니코틴산아미드 1.7 mgNicotinic acid amide 1.7 mg
엽산 50 mg
판토텐산 칼슘 0.5 mgCalcium pantothenate 0.5 mg
무기질 혼합물 적량Mineral mixture quantity
황산제1철 1.75 mg1.75 mg of ferrous sulfate
산화아연 0.82 mg0.82 mg of zinc oxide
탄산마그네슘 25.3 mgMagnesium carbonate 25.3 mg
제1인산칼륨 15 mgPotassium monophosphate 15 mg
제2인산칼슘 55 mgSecondary calcium phosphate 55 mg
구연산칼륨 90 mgPotassium citrate 90 mg
탄산칼슘 100 mg
염화마그네슘 24.8 mgMagnesium chloride 24.8 mg
상기의 비타민 및 미네랄 혼합물의 조성비는 비교적 과립제에 적합한 성분을 바람직한 실시예로 혼합 조성하였지만, 그 배합비를 임의로 변형 실시하여도 무방하며, 통상의 과립제 제조방법에 따라 상기의 성분을 혼합한 다음, 과립을 제조하고, 통상의 방법에 따라 건강기능식품 조성물 제조에 사용할 수 있다.
The composition ratio of the above-mentioned vitamins and minerals is comparatively comparatively mixed with the granules according to the preferred embodiment. However, the blending ratio may be arbitrarily changed, and the above components are mixed according to the ordinary granule preparation method, Can be prepared and used in the manufacture of a health functional food composition according to a conventional method.
제제예 7. 기능성 음료의 제조Preparation Example 7. Preparation of functional beverage
실시예 2에서 지용성 분획 추출물 1,000 mgIn Example 2, 1,000 mg of the liposoluble fraction extract
구연산 1,000 mgCitric acid 1,000 mg
올리고당 100 g100 g of oligosaccharide
매실농축액 2 gPlum concentrate 2 g
타우린 1 gTaurine 1 g
정제수를 가하여 전체 900 mLPurified water was added to the flask to obtain a total of 900 mL
통상의 건강음료 제조방법에 따라 상기의 성분을 혼합한 다음, 약 1 시간 동안 85 ℃에서 교반 가열한 후, 만들어진 용액을 여과하여 멸균된 2 L 용기에 취득하여 밀봉 멸균한 뒤 냉장 보관한 다음 본 발명의 기능성 음료 조성물 제조에 사용한다. The above components were mixed according to a conventional health drink manufacturing method, and the mixture was stirred and heated at 85 DEG C for about 1 hour. The solution thus prepared was filtered and sterilized in a sterilized 2 L container, It is used in the production of the functional beverage composition of the invention.
상기 조성비는 비교적 기호음료에 적합한 성분을 바람직한 실시예로 혼합 조성하였지만, 수요계층, 수요국가, 사용용도 등 지역적, 민족적 기호도에 따라서 그 배합비를 임의로 변형 실시하여도 무방하다.
Although the composition ratio is a mixture of the components suitable for the preferred beverage as a preferred embodiment, the blending ratio may be arbitrarily varied according to the regional and national preferences such as the demand level, the demanding country, and the intended use.
제제예 8. 유화 제형의 화장품의 제조Formulation Example 8. Preparation of cosmetic product of emulsified formulation
영양화장수, 크림, 에센스 등의 유화 제형의 화장품 및 유연화장수 등의 가용화 제형의 화장품을 제조하였다.Cosmetics of emulsified form such as nutrient lotion, cream, essence, and cosmetics of solubilized form such as softened longevity were prepared.
하기 표 7에 기재된 조성으로 유화제형의 화장품을 제조하였다. 제조방법은 하기와 같다.Emulsifier type cosmetics were prepared with the compositions shown in Table 7 below. The production method is as follows.
1) 1 내지 9의 원료를 혼합한 혼합물을 65 내지 70 ℃로 가열하였다.1) A mixture of
2) 10의 원료를 상기 단계 1)의 혼합물에 투입하였다.2) The starting material of 10 was added to the mixture of step 1).
3) 11 내지 13의 원료의 혼합물을 65 내지 70 ℃로 가열하여 완전히 용해시켰다.3) The mixture of raw materials 11 to 13 was completely dissolved by heating to 65 to 70 占 폚.
4) 상기 단계 3)을 거치면서, 상기 2)의 혼합물을 서서히 첨가하여 8,000 rpm에서 2 내지 3분간 유화시켰다.4) While the above step 3) was carried out, the mixture of step 2) was gradually added and emulsified at 8,000 rpm for 2 to 3 minutes.
5) 14의 원료를 소량의 물에 용해시킨 후 상기 단계 4)의 혼합물에 첨가하고 2분간 더 유화시켰다.5) The raw material of 14 was dissolved in a small amount of water and then added to the mixture of step 4) and further emulsified for 2 minutes.
6) 15 내지 17의 원료를 각각 평량한 후 상기 단계 5)의 혼합물에 넣고 30초간 더 유화시켰다.6) The raw materials of 15 to 17 were each weighed, and then put into the mixture of step 5) and further emulsified for 30 seconds.
7) 상기 단계 6)의 혼합물을 유화 후 탈기과정을 거쳐 25 내지 35 ℃로 냉각시킴으로써 유화제형의 화장품을 제조하였다.7) The mixture of step 6) was degassed after emulsification and cooled to 25-35 占 폚 to prepare an emulsifier-type cosmetic.
모노라우린산 에스테르Polyoxyethylene sorbitan
Monolauric acid ester
제제예Formulation example 9. 9. 가용화Solubilization 제형의 화장품의 제조 Manufacture of Cosmetics for Formulation
하기 표 8에 기재된 조성으로 가용화제형의 화장품을 제조하였다. 제조방법은 하기와 같다.Cosmetics of solubilized formulations were prepared with the compositions shown in Table 8 below. The production method is as follows.
1) 2 내지 6의 원료를 1의 원료(정제수)에 넣고 아직믹서를 이용하여 용해시켰다.1) 2 to 6 raw materials were put into 1 raw material (purified water) and dissolved using a mixer.
2) 8 내지 11의 원료를 7의 원료(알코올)에 넣고 완전용해시켰다.2) Raw materials 8 to 11 were completely dissolved in 7 raw materials (alcohol).
3) 상기 단계 2)의 혼합물을 상기 단계 1)의 혼합물에 서서히 첨가하면서 가용화시켰다.3) The mixture of step 2) was slowly solubilized by adding it to the mixture of step 1).
하이드로제네이디트에스테르Polyoxyethylene
Hydro genide ester
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