KR101778436B1 - 우수한 초산 생성능을 가지는 신규한 아세토박터속 slv-7 균주 및 이의 용도 - Google Patents

우수한 초산 생성능을 가지는 신규한 아세토박터속 slv-7 균주 및 이의 용도 Download PDF

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Abstract

본 발명은 아세토박터 속(Acetobacter sp .) SLV-7 균주(기탁번호 KACC 92002P)에 관한 것으로, 상기 균주는 에탄올 저항성을 가지며, 넓은 온도 범위에서 생장할 수 있고, 우수한 초산 생산능을 가지고 있으므로 식초 제조에 유용하게 사용될 수 있다.

Description

우수한 초산 생성능을 가지는 신규한 아세토박터속 SLV-7 균주 및 이의 용도{Acetobacter sp. SLV-7 as a novel strain with high acetic acid producing ability and use thereof}
본 발명은 전통 발효 식초인 막걸리 식초로부터 분리한 아세토박터 속 균주에 관한 것으로, 상세하게는 초산 생성능(acetic acid production activity)이 우수한 아세토박터 속(Acetobacter sp .) SLV-7 균주(기탁번호 KACC 92002P)에 관한 것이다.
식초는 가장 오랜 역사를 가진 발효 식품 중 하나이다. 현재 양조식초는 건강용 식품으로 이용되며 의약품으로도 치료 효과가 있다고 보고되고 있다. 항생제 효과, 항산화 기능, 혈당을 낮춰주는 효과, 비만 방지, 콜레스테롤 저하, 동맥경화 및 고혈압의 예방 등의 다양한 생리 활성이 보고되고 있다.
기존의 연구는 초산 생성 수율을 높이는 방향으로 수행되었으나 현재는 독일의 Frings 사에서 심부발효법(submerged culture)을 개발하여 17% 이상의 고산도 식초를 만들어낼 수 있게 되면서 근래에는 연구 테마로 다루어지고 있지 않다. 전통발효 식초는 2단계 발효를 하는데, 먼저 당을 포함하고 있는 원재료에서 효모에 의해 알코올을 생성하고, 이어서 초산균에 의해 초산을 생성하게 된다. 전통발효 식초는 일반적으로 한 달 정도 긴 발효기간을 거친다. 자연적인 식초를 이용하여 종균 배양(start culture)을 한다.
식초 제조에 사용되는 균은 초산균과(Acetobacteraceae)에 속하며, 절대 호기성으로, 최적 성장 온도는 25 내지 30℃이고, 최적 pH는 5.0 내지 6.5이다. 초산균은 pH 5.0 이하의 산성 조건에서도 저항성을 가진다고 알려져 있으며, 보통 식초 생산에 이용하는 주요 초산균은 아세토박터(Acetobacter) 및 글루코노박터(Gluconobacter) 2가지 속이다.
국내의 식초 산업은 대기업, 저가 제품 위주로 형성이 되어있으며, 전통 식초 개발에 대한 노력이 부족한 현황이다. 또한 국내 발효산업은 기술력의 내용이 현장을 바탕으로 한 경험위주의 노하우 축적이 대부분으로, 전문성을 갖춘 기술개발과정이 체계화되어 있지 않은 실정이므로, 생물 산업 소재의 신속한 산업화, 수출증대 등 경제가치 창출에 어려움을 겪는 경우가 많다.
이러한 문제점을 극복하고 생물 산업을 한 단계 도약시키기 위해서는 다양한 미생물 배양특성에 관한 데이터베이스 구축, 발효배양 공정 및 균주 개발 기술, 실용화 관련 스케일 업 기술 등 핵심 기술 분야를 집중 공략하여 기술수준을 더욱 전문화하고, 대상 미생물의 기능/특성을 기준으로 요소 기술들을 효율적으로 통합 체계화함으로써 고효율의 기술개발 체계를 확립해야 할 필요가 있다. 우리나라의 전통 발효식품 제조공정은 종균(스타터)을 첨가하지 않고 주원료에 부재료를 첨가, 혼합하여 원료나 공기 중에서 유입된 천연 미생물에 의한 자연발효 과정을 이용하고 있다. 따라서 발효에 참여하는 미생물이 균일하지 못하여 제조 공정의 표준화가 어려우며 이로 인하여 생산되는 발효식품의 품질 및 맛이 다양하게 형성된다.
본 발명의 일 양상은 에탄올 저항성을 가지며, 초산 생산능을 가지는 아세토박터 속(Acetobacter sp .) SLV-7 균주(기탁번호 KACC 92002P)를 제공하는 것이다.
본 발명의 다른 양상은 본 발명의 아세토박터 속 SLV-7 균주(기탁번호 KACC 92002P), 상기 균주의 배양물, 상기 균주 또는 배양액의 농축물 및 이들의 건조물로 이루어진 군에서 선택된 하나 이상을 포함하는 초산 발효용 조성물을 제공하는 것이다.
본 발명의 또 다른 양상은 본 발명의 아세토박터 속 SLV-7 균주(기탁번호 KACC 92002P)를 배양하여 종초를 제조하는 단계; 제조된 종초를 에탄올을 포함하는 배지에 접종하여 발효하는 단계; 및 발효된 배지를 여과하는 단계를 포함하는 식초의 제조방법 및 상기 제조방법에 의하여 제조된 식초를 제공하는 것이다.
본 발명의 일 양상은 에탄올 저항성을 가지며, 초산 생산능을 가지는 아세토박터 속(Acetobacter sp .) SLV-7 균주(기탁번호 KACC 92002P)를 제공한다.
본 발명의 용어 "아세토박터(Acetobacter)"는 그람 음성의 알파-프로테오박테리아(α-Proteobacteria) 강의 초산균과(Acetobacteraceae)에 속하는 절대호기성 세균으로, 에탄올을 발효하여 초산(acetic acid)을 생성한다. 단간 또는 타원형의 단독 또는 연쇄상으로 존재하며, 포자는 형성하지 않고, 운동성은 있는 것과 없는 것이 있으며, 생육 최적 pH는 3.5 내지 6.5이다.
일 구체예에 따르면 상기 아세토박터 속 SLV-7 균주는 본 발명자가 전통 발효식초인 막걸리 식초에서 분리하여 동정하였으며, 상기 균주의 16S rRNA 유전자 염기서열(서열번호 4)을 분석한 결과 아세토박터 파스테리아누스 아종 파스테리아누스(Acetobacter pasteurianus subsp . pasteurianus) LMG 1262T 균주와 99.9% 상동성이 있는 것을 확인하였으나, 전체 유전체로 평균 서열 동일성(Average nucleotide identity, ANI)을 분석한 결과 90.52%로 낮게 나타나 신규한 초산 균주인 것을 확인하였다. 따라서, 상기 균주를 국립농업과학원 농업유전자원센터에 기탁하여 KACC 92002P의 수탁번호를 부여받았다.
일 구체예에 따르면 상기 아세토박터 속 SLV-7 균주는 10 내지 45℃의 온도 범위에서 생장하며, 바람직하게는 15 내지 40℃, 더욱 바람직하게는 20 내지 37℃의 온도에서 생장할 수 있다.
일 구체예에 따르면 상기 아세토박터 속 SLV-7 균주는 에탄올 농도가 0 내지 15%인 배지에서 생장하며, 바람직하게는 0 내지 10%, 더욱 바람직하게는 0 내지 8%의 에탄올 농도에서 생장할 수 있다.
일 구체예에 따르면 상기 아세토박터 속 SLV-7 균주는 초산 농도가 0 내지 8%인 배지에서 생장하며, 바람직하게는 0 내지 6%, 더욱 바람직하게는 0 내지 4%의 초산 농도에서 생장할 수 있다.
또한 본 발명의 다른 양상은 본 발명의 아세토박터 속 SLV-7 균주(기탁번호 KACC 92002P), 상기 균주의 배양물, 상기 균주 또는 배양액의 농축물 및 이들의 건조물로 이루어진 군에서 선택된 하나 이상을 포함하는 초산 발효용 조성물을 제공한다.
본 발명의 용어 "배양물"은 배지에서 일정 기간 동안 배양하여 수득한 균주, 그의 대사물, 여분의 영양분 등을 포함하는 배지 또는 균주를 배양한 후 균주를 제거한 배양액을 포함하는 개념으로 해석된다.
일 구체예에 따르면 본 발명의 아세토박터 속 SLV-7 균주의 배양물은 미생물 배양에 사용되는 배지 중에서 당업자가 목적에 따라 용이하게 선택한 배지를 사용할 수 있으며, 바람직하게는 초산균 배양에 사용되는 배지, 보다 바람직하게는 하기 실시예 1에 기재된 YPGDE 배지를 선택하여 사용할 수 있다.
일 구체예에 따르면 본 발명의 아세토박터 속 SLV-7 균주의 배양물은, 상기 미생물 배양 배지에 본 발명의 균주를 접종하고, 당업계에 공지된 미생물 배양 방법(예를 들어, 정치배양, 교반배양)에 따라, 바람직하게는 초산균 배양 방법에 따라, 보다 바람직하게는 10 중량%(배지 전체 중량 대비)로 접종하고 25 내지 37에서 2 내지 10일 동안 배양하여 제조할 수 있다. 보다 더 바람직하게는 본 발명의 균주를 10 중량%(배지 전체 중량 대비)로 배지에 접종하고 30℃에서 배양하여 제조할 수 있다.
상기 아세토박터 속 SLV-7 균주 또는 배양액의 농축물 및 이들의 건조물은 당업계에 공지된 미생물 또는 배양액의 농축 또는 건조 방법에 따라 용이하게 제조될 수 있으며, 아세토박터 속 SLV-7 균주, 균주의 배양물, 균주 또는 배양액의 농축물 및 이들의 건조물은 이에 한정되지 않지만 바람직하게는 본 발명의 초산 생산용 조성물에 1 내지 15 중량%로 함유될 수 있다.
본 발명의 또 다른 양상은 아세토박터 속 SLV-7 균주(기탁번호 KACC 92002P)를 배양하여 종초를 제조하는 단계; 제조된 종초를 에탄올을 포함하는 배지에 접종하여 발효하는 단계; 및 상기 결과물을 여과하는 단계를 포함하는 식초의 제조방법 및 이에 의하여 제조된 식초를 제공한다.
본 발명의 용어 "배양"은 미생물을 적당히 인공적으로 조절한 환경조건에서 생육시키는 것을 의미한다. 구체적으로, 상기 배양방법의 예에는, 회분식 배양(batch culture), 연속식 배양(continuous culture) 및 유가식 배양(fed-batchculture)이 포함되나, 이에 제한되는 것은 아니다. 이러한 다양한 방법은, 예를 들면, "Biochemical Engineering" (James M. Lee, Prentice-Hall International Editions, pp138-176, 1991) 등에 개시되어 있다.
본 발명의 용어 "종초(vinegar starter)"란 새롭게 식초를 담글 때 쓰이는 종(種)이 되는 초를 말하며, 초산균이 활발하게 초산을 생성하는 능력이 있는 상태의 초를 의미한다. 일반적으로 발효 종료액의 일부를 남겨 종초로 하거나 또는 정상적인 발효를 하고 있는 발효액의 일부를 사용한다. 종초에 함유되어 있는 초산균은 균막을 빠르게 늘려 균막의 노화가 늦고 발효가 종료될 때까지 막을 보존함으로써 산 생성의 속도가 빠르며, 산 생성이 끝까지 진행되어 원하는 농도까지 산을 생산하고 생성된 초산을 산화하기 않고 발효액을 혼탁시키지 않는 것이 좋다.
일 구체예에 따르면 상기 종초를 제조하는 단계는 초산을 함유하는 배지에서 배양하여 이루어질 수 있으며, 초산은 0.5 내지 5%, 더욱 바람직하게는 1 내지 4% 농도로 포함될 수 있다.
일 구체예에 따르면 상기 에탄올은 배지에 2 내지 10%의 농도로 포함될 수 있으며, 4 내지 8%인 것이 바람직하고, 5 내지 6%인 것이 더욱 바람직하다.
일 구체예에 따르면 상기 종초는 에탄올을 포함하는 배지에 1 내지 15%로 포함될 수 있으며, 10%로 포함되는 것이 바람직하다 또한, 상기 발효하는 단계는 10 내지 40℃의 온도에서 이루어질 수 있으며, 20 내지 40℃인 것이 바람직하고, 30 내지 37℃인 것이 더욱 바람직하다.
본 발명의 아세토박터 속(Acetobacter sp .) SLV-7 균주(기탁번호 KACC 92002P)는 에탄올 저항성을 가지며, 넓은 온도 범위에서 생장할 수 있고, 우수한 초산 생산능을 가지고 있으므로 식초 제조에 유용하게 사용될 수 있다.
도 1은 아세토박터 속 SLV-7 균주의 rep-PCR 결과를 나타낸 도이다.
도 2는 다른 농도의 에탄올을 함유한 배지에서 아세토박터 속 SLV-7 균주를 배양한 결과를 나타낸 도이다.
도 3은 다른 농도의 초산을 함유한 배지에서 아세토박터 속 SLV-7 균주를 배양한 결과를 나타낸 도이다.
도 4는 다양한 온도 범위에서 아세토박터 속 SLV-7 균주를 배양한 결과를 나타낸 도이다.
이하 하나 이상의 구체예를 실시예를 통하여 보다 상세하게 설명한다. 그러나, 이들 실시예는 하나 이상의 구체예를 예시적으로 설명하기 위한 것으로 본 발명의 범위가 이들 실시예에 한정되는 것은 아니다.
실시예 1: 초산균주의 분리
막걸리 38종을 30에서 4 내지 6주 정도 발효시켜 만든 막걸리 식초 및 10종의 종초에서 초산균을 분리하였다.
구체적으로 막걸리식초 및 종초를 10진 희석법(serial dilution)으로 희석하여 탄산칼슘(CaCO3)이 2% 함유되어 있는 YPGDE 아가배지(0.5% yeast extract, 0.5% peptone, 0.5% glycerol, 0.5% D-glucose, 1.5% agar 및 4% ethanol)에 도말하였다. 도말한 아가 배지(agar plate)를 30℃에서 5일 동안 배양한 후 투명환이 생성되는 균주 38개를 선발하였다.
이후 탄산칼슘 용해능이 확인되는 균주들만 GTG5 프라이머를 이용하여 rep-PCR(repetitive extragenic palindromic PCR)을 수행하였다. 구체적으로 주형 DNA를 얻기 위하여 선택한 콜로니만 취하여 Chelex-100 solution(Bio-rad, USA)에 넣고 100에서 10분 동안 끓여 세포벽을 분해시켰다. 주형 DNA 1.5 ㎕, GTG5(5'-GTGGTGGTGGTGGTG-3′') 프라이머(서열번호 1), 1.25 U Taq polymerase(solgent, Korea), dNTP mixute(solgent, Korea), 1X Taq buffer(solgent, Korea) 및 정제수(pure water)를 사용하여 총 부피를 50 ㎕로 맞춘 후, C1000 thermal cycler (Bio-Rad, USA)를 이용하여 증폭하였다. PCR 조건으로는 94℃ 5분(1 cycle); 94℃ 30초, 85℃ 1분 및 65℃ 8분(30 cycle); 65℃ 16분(1 cycle)을 설정하였다.
PCR이 끝난 후 산물을 1.5%의 아가로스 겔(0.5% TBE buffer)을 사용하여 100 V에서 45분 동안 전기영동(electrophoresis)한 후 브롬화 에티듐(ethidium bromide, EtBr)으로 15분간 염색하여 PCR 산물의 염색 패턴을 확인하였다. 특정 패턴을 나타내는 시료만을 다시 선택하여 19개의 균주를 선별하였다.
상기 선별된 19개의 균주를 다시 탄산칼슘이 2% 함유되어 있는 YPGDE 아가배지에 접종한 후 단일 콜로니에서 형성되는 투명환의 크기를 바탕으로 우수한 초산 생성능을 보이면서 성장속도가 빠른 균주 SLV-7를 선별하였다.
실시예 2: 선별한 초산균주의 동정
16S rRNA 유전자를 통해 기존의 보고된 미생물과 상기 실시예 1에서 분리한 SLV-7 균주의 상동성을 비교하였다.
먼저 16S rRNA 유전자의 염기서열을 확인하기 위해 콜로니 PCR(colony polymerase chain reaction)을 수행하였다. 주형 DNA를 추출하기 위하여 선택한 콜로니를 취하여 Chelex-100 solution(Bio-rad, USA)에 넣고 100℃에서 10분 동안 끓여 세포벽을 분해시켰다. 주형 DNA 1 ㎕, F1(5'-AGA GTT TGA TCM TGG CTC AG-3') 프라이머(서열번호 2), R13(5'-TAC GGY TAC CTT GTT ACG ACT T-3') 프라이머(서열번호 3), 1.25 U Taq polymerase, dNTP mixute, 1X Taq buffer 및 정제수를 사용하여 총 부피 50 ㎕를 맞춘 후, C1000 thermal cycler를 이용하여 증폭하였다. PCR 조건으로는 94 5분(1 cycle); 94℃ 45초, 60℃ 45초 및 72℃ 1분(30 cycle); 72℃ 10분(1 cycle)을 설정하였다. 증폭된 PCR 산물을 PCR product purification kit(Solgent, Korea)를 이용하여 정제하였고, Macrogen(Korea)을 통해 16S rRNA 유전자의 염기서열을 분석하였다.
이후 SLV-7 균주의 16S rRNA 염기서열(서열번호 4)을 국가생명연구자원정보센터(Korea bioinformation center, KOBIC)의 EzTaxon(Chun et al., 2007)을 이용하여 기존에 보고된 미생물의 16S rRNA 염기서열과 상동성(similarity)을 비교하였다.
그 결과 본 발명의 아세토박터 속(Acetobacter sp.) SLV-7 균주는 아세토박터 파스테리아누스 아종 파스테리아누스(Acetobacter pasteurianus subsp . pasteurianus) LMG 1262T 균주와 99.9%, 아세토박터 파스테리아누스 아종 아센덴스(Acetobacter pasteurianus subsp . ascendens) LMG 1590T 균주와 99.8%, 아세토박터 파스테리아누스 아종 파라독수스(Acetobacter pasteurianus subsp . paradoxus) LMG 1591T 균주와 99.7%의 상동성이 있는 것을 확인하였다.
그러나 도 1에 나타난 바와 같이 GTG5-PCR 패턴을 비교한 결과, 아세토박터 SLV-7 균주의 패턴은 Acetobacter pasteurianus subsp . ascendens LMG 1590T 균주 및 A. pasteurianus subsp . paradoxus LMG 1591T 균주와는 확연히 다르고, A. pasteurianus subsp . pasteurianus LMG 1262T(A. pasteurianus subsp . Pasteurianus KACC 13994T) 균주와는 패턴은 비슷하였지만, 전체 유전체로 평균 서열 동일성(Average nucleotide identity, ANI)을 분석한 결과 90.52%로 낮게 나타나 신규한 초산 균주임을 확인하였다(도 1).
실시예 3: 아세토박터 SLV -7 균주의 특성 분석
기존에 알려진 2종의 공시균주인 아세토박터 포모룸(Acetobacter pomorum) KCTC 22319T(와인, 사과식초에서의 분리균) 및 아세토박터 아세티(Acetobacter aceti) KCTC 12290T(=Acetobacter ATCC 15978T, 식초 생산을 위해 사용된 균주)를 선정하여 후보 균주인 와 함께 균주의 특성을 분석하였다.
3-1: 에탄올 저항성 확인
YPGD 배지에 에탄올을 각 농도별(0, 2, 4, 6, 8, 10, 12 및 14%)로 첨가하여 플레이트를 제조하였다. YPGDE 배지에서 OD600 값이 1이 될 때까지 Acetobacter sp. SLV-7 균주를 배양하고, 배양액을 10-3까지 희석하여 5 ㎕를 플레이트에 접종하여 30℃에서 48시간 동안 배양하였다.
그 결과 Acetobacter sp. SLV-7 균주가 높은 에탄올 저항성을 나타내는 것을 확인하였다(도 2).
3-2: 초산 저항성 확인
YPGDE 배지에 초산을 각 농도별(0, 0.5, 1, 1.5, 2, 2.5, 3, 3.5, 4 및 4.5%)로 첨가하여 플레이트를 제조하였다. YPGDE 배지에서 OD600 값이 1이 될 때까지 Acetobacter sp. SLV-7 균주를 배양하고, 배양액을 10-3까지 희석하여 5 ㎕를 플레이트에 접종하여 30℃에서 48시간 동안 배양하였다.
그 결과 Acetobacter sp. SLV-7 균주가 높은 초산 농도에서도 다른 균주에 비해 비교적 빠르게 성장하는 것을 확인하였다(도 3).
3-3: 생장 온도 범위 확인
YPGDE 배지에서 OD600 값이 1이 될 때까지 Acetobacter sp. SLV-7 균주를 배양하고, 배양액을 10-3까지 희석하여 5 ㎕를 YPGDE 배지 플레이트에 접종하였다. 접종 후 10, 15, 20, 25, 30, 37, 40 및 45℃에서 48시간 동안 배양하였다.
그 결과 모든 초산균의 최적 배양 온도는 30℃인 것을 확인하였으며, 특히 Acetobacter sp. SLV-7 균주는 20 내지 40℃까지 넓은 온도 범위에서 성장하는 것을 확인하였다(도 4).
3-4: 초산 생성능 평가
초산균을 발효기를 사용하여 배양하고, 성장곡선 및 초산 생산 수율을 확인하였다. 발효기 운전 조건은 하기 표 1과 같다.
발효기 운전 조건
배지 YPDE(Yeast extract 0.5%, Peptone 0.5%, D-glucose 0.5%, Ethanol 5%)
초산 농도 1%
배지 용량 700 ㎖
배양 온도 30℃
회전 속도 250 rpm
균주 접종량 10%
공기주입량 2 vvm
잔여 에탄올 농도가 1% 이하로 감소하였을 때 에탄올 5%를 추가로 주입하였다. 발효 최고치일 때 초산 농도(%), 최저 pH, 초산 생산 수율을 확인하였고, 초산 생산 수율은 하기 수학식 1을 이용하여 계산하였다.
Figure 112016035116311-pat00001
초산균 발효기간 중 생성되는 초산의 양과 소모되는 에탄올의 양은 HPLC 정량분석 방법으로 RI(Refractive Index) detector를 사용하여 검출하였다(이동상: 1 mM sulfuric acid, 유속: 0.5 ㎖/min, 검출기: RI detector, 컬럼: Repromer H, 컬럼 온도: 50℃).
그 결과 초기 산도 및 pH는 3개의 균주 모두 비슷하였으나, 최저 pH는 A. aceti KCTC 12290T 균주가 가장 낮았고, Acetobacter sp. SLV-7, A. pomorum KCTC 22319T 균주 순서로 낮은 것으로 나타났다. 발효 최고치일 때 초산 농도는 Acetobacter sp. SLV-7 균주가 가장 높았으며, 따라서 초산 수율도 Acetobacter sp. SLV-7 균주가 가장 우수한 것을 확인할 수 있었다(표 2).
Acetobacter
sp. SLV-7		 A. aceti
KCTC 12290T		 A. pomorum
KCTC 22319T
초기 산도(%) 0.97 1.03 1.02
초기 pH 3.69 3.70 3.72
발효 최고치
초산 농도(%)		 3.39 2.87 3.29
최저 pH 3.20 3.21 3.27
초산 수율(%) 31.00 24.00 29.60
실시예 4: 아세토박터 SLV -7 균주를 이용한 막걸리 식초의 제조
시중에서 유통되고 있는 막걸리(당 0.5% 및 알코올 6%)를 반응기에 주입한 후, 초산 1%가 함유된 YPGDE 배지에서 48시간 배양한 Acetobacter sp . SLV-7 균주 배양액을 10% 접종하였다. 반응기 온도는 30℃로 유지하고 250 rpm으로 10일 동안 초산 발효를 진행하였다. A. aceti KCTC 12290T 균주를 이용하여 같은 조건으로 식초를 제조하여 비교하였다.
그 결과 A. aceti 12290T 균주는 총산 함량 3%이고, Acetobacter sp. SLV-7 균주는 총산 함량이 5.4%로 우수한 것을 확인하였다.
실시예 5: 아세토박터 SLV -7 균주를 이용한 감식초의 제조
시중에서 판매되는 감을 세척한 후 물기를 제거하여 10일 정도 방치한 후, 꼭지와 씨를 제거하여 30℃에서 10일 동안 알코올 발효를 시켰다. 알코올 발효가 끝난 후, 초산이 1% 함유된 YPGDE 배지에서 48시간 배양한 Acetobacter sp. SLV-7 균주 배양액을 접종하여 초산 발효를 진행하였다. A. aceti KCTC 12290T 균주를 이용하여 같은 조건으로 식초를 제조하여 비교하였다.
그 결과 A. aceti 12290T 균주는 총산 함량 2%, Acetobacter sp. SLV-7 균주는 총산 함량 3.8%로 우수한 것을 확인하였다.
이제까지 본 발명에 대하여 그 바람직한 실시예들을 중심으로 살펴보았다. 본 발명이 속하는 기술 분야에서 통상의 지식을 가진 자는 본 발명이 본 발명의 본질적인 특성에서 벗어나지 않는 범위에서 변형된 형태로 구현될 수 있음을 이해할 수 있을 것이다. 그러므로 개시된 실시예들은 한정적인 관점이 아니라 설명적인 관점에서 고려되어야 한다. 본 발명의 범위는 전술한 설명이 아니라 특허청구범위에 나타나 있으며, 그와 동등한 범위 내에 있는 모든 차이점은 본 발명에 포함된 것으로 해석되어야 할 것이다.
농업생명공학연구원 KACC92002P 20141110
<110> CHUNG ANG University industry Academic Cooperation Foundation <120> Acetobacter sp. SLV-7 as a novel strain with high acetic acid producing ability and use thereof <130> PN160068 <160> 4 <170> KoPatentIn 3.0 <210> 1 <211> 15 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> synthesized nucleotide <400> 1 gtggtggtgg tggtg 15 <210> 2 <211> 20 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> synthesized nucleotide <400> 2 agagtttgat cmtggctcag 20 <210> 3 <211> 22 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> synthesized nucleotide <400> 3 tacggytacc ttgttacgac tt 22 <210> 4 <211> 1476 <212> RNA <213> Acetobacter sp. <400> 4 agagtttgat cctggctcag agcgaacgct ggcggcatgc ttaacacatg caagtcgcac 60 gaaggtttcg gccttagtgg cggacgggtg agtaacgcgt aggtatctat ccatgggtgg 120 gggataacac tgggaaactg gtgctaatac cgcatgacac ctgagggtca aaggcgtaag 180 tcgcctgtgg aggagcctgc gtttgattag ctagttggtg gggtaaaggc ctaccaaggc 240 gatgatcaat agctggtttg agaggatgat cagccacact gggactgaga cacggcccag 300 actcctacgg gaggcagcag tggggaatat tggacaatgg gggcaaccct gatccagcaa 360 tgccgcgtgt gtgaagaagg tcttcggatt gtaaagcact ttcgacgggg acgatgatga 420 cggtacccgt agaagaagcc ccggctaact tcgtgccagc agccgcggta atacgaaggg 480 ggctagcgtt gctcggaatg actgggcgta aagggcgtgt aggcggtttg tacagtcaga 540 tgtgaaatcc ccgggcttaa cctgggagct gcatttgata cgtgcagact agagtgtgag 600 agagggttgt ggaattccca gtgtagaggt gaaattcgta gatattggga agaacaccgg 660 tggcgaaggc ggcaacctgg ctcattactg acgctgaggc gcgaaagcgt ggggagcaaa 720 caggattaga taccctggta gtccacgctg taaacgatgt gtgctagatg ttgggtgact 780 tagtcattca gtgtcgcagt taacgcgtta agcacaccgc ctggggagta cggccgcaag 840 gttgaaactc aaaggaattg acgggggccc gcacaagcgg tggagcatgt ggtttaattc 900 gaagcaacgc gcagaacctt accagggctt gaatgtagag gctgcaagca gagatgtttg 960 tttcccgcaa gggacctcta acacaggtgc tgcatggctg tcgtcagctc gtgtcgtgag 1020 atgttgggtt aagtcccgca acgagcgcaa cccctatctt tagttgccat caggttgggc 1080 tgggcactct agagagactg ccggtgacaa gccggaggaa ggtggggatg acgtcaagtc 1140 ctcatggccc ttatgtcctg ggctacacac gtgctacaat ggcggtgaca gtgggaagct 1200 aggtggtgac accatgctga tctctaaaag ccgtctcagt tcggattgca ctctgcaact 1260 cgagtgcatg aaggtggaat cgctagtaat cgcggatcag catgccgcgg tgaatacgtt 1320 cccgggcctt gtacacaccg cccgtcacac catgggagtt ggtttgacct taagccggtg 1380 agcgaaccgc aaggacgcag ccgaccacgg tcgggtcagc gactggggtg aagtcgtaac 1440 aaggtagccg taggggaacc tgcggctgga tcacct 1476

Claims (10)

  1. 에탄올 저항성을 가지며, 초산 생산능을 가지고, 20 내지 37℃에서 생장 가능한 아세토박터 속(Acetobacter sp.) SLV-7 균주(기탁번호 KACC 92002P).
  2. 삭제
  3. 제1항에 있어서, 상기 균주는 에탄올 농도 0 내지 8%에서 생장하는 것을 특징으로 하는 균주.
  4. 제1항에 있어서, 상기 균주는 초산 농도 0 내지 4.5%에서 생장하는 것을 특징으로 하는 균주.
  5. 제1항의 아세토박터 속 SLV-7 균주(기탁번호 KACC 92002P), 상기 균주의 배양물, 상기 균주 또는 배양액의 농축물 및 이들의 건조물로 이루어진 군에서 선택된 하나 이상을 포함하는 초산 발효용 조성물.
  6. (a) 제1항의 아세토박터 속 SLV-7 균주(기탁번호 KACC 92002P)를 초산을 포함하는 배지에서 배양하여 종초를 제조하는 단계;
    (b) 상기 제조된 종초를 막걸리를 포함하는 배지에 접종하여 발효시키는 단계; 및
    (c) 상기 단계 (b)의 결과물을 여과하는 단계를 포함하는 막걸리 식초의 제조방법.
  7. 삭제
  8. 삭제
  9. 제6항에 있어서, 상기 발효하는 단계는 20 내지 37℃에서 이루어지는 것을 특징으로 하는 막걸리 식초의 제조방법.
  10. 제6항 또는 제9항 중 어느 한 항의 제조방법에 의하여 제조된 막걸리 식초.
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