KR100967334B1 - 말단 카르복실산을 가진 수용성 중합체 유도체의 제조 방법 - Google Patents

말단 카르복실산을 가진 수용성 중합체 유도체의 제조 방법 Download PDF

Info

Publication number
KR100967334B1
KR100967334B1 KR1020057003986A KR20057003986A KR100967334B1 KR 100967334 B1 KR100967334 B1 KR 100967334B1 KR 1020057003986 A KR1020057003986 A KR 1020057003986A KR 20057003986 A KR20057003986 A KR 20057003986A KR 100967334 B1 KR100967334 B1 KR 100967334B1
Authority
KR
South Korea
Prior art keywords
delete delete
substituted
water soluble
group
soluble polymer
Prior art date
Application number
KR1020057003986A
Other languages
English (en)
Other versions
KR20050057276A (ko
Inventor
안토니 코즈로브스키
Original Assignee
넥타르 테라퓨틱스
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by 넥타르 테라퓨틱스 filed Critical 넥타르 테라퓨틱스
Publication of KR20050057276A publication Critical patent/KR20050057276A/ko
Application granted granted Critical
Publication of KR100967334B1 publication Critical patent/KR100967334B1/ko

Links

Images

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D493/00—Heterocyclic compounds containing oxygen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system
    • C07D493/02—Heterocyclic compounds containing oxygen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system in which the condensed system contains two hetero rings
    • C07D493/08—Bridged systems
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C08—ORGANIC MACROMOLECULAR COMPOUNDS; THEIR PREPARATION OR CHEMICAL WORKING-UP; COMPOSITIONS BASED THEREON
    • C08G—MACROMOLECULAR COMPOUNDS OBTAINED OTHERWISE THAN BY REACTIONS ONLY INVOLVING UNSATURATED CARBON-TO-CARBON BONDS
    • C08G65/00—Macromolecular compounds obtained by reactions forming an ether link in the main chain of the macromolecule
    • C08G65/02—Macromolecular compounds obtained by reactions forming an ether link in the main chain of the macromolecule from cyclic ethers by opening of the heterocyclic ring
    • C08G65/32—Polymers modified by chemical after-treatment
    • C08G65/329—Polymers modified by chemical after-treatment with organic compounds
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/74—Synthetic polymeric materials
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
    • A61K9/14—Particulate form, e.g. powders, Processes for size reducing of pure drugs or the resulting products, Pure drug nanoparticles
    • A61K9/16—Agglomerates; Granulates; Microbeadlets ; Microspheres; Pellets; Solid products obtained by spray drying, spray freeze drying, spray congealing,(multiple) emulsion solvent evaporation or extraction
    • A61K9/1605—Excipients; Inactive ingredients
    • A61K9/1611—Inorganic compounds
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
    • A61K9/14—Particulate form, e.g. powders, Processes for size reducing of pure drugs or the resulting products, Pure drug nanoparticles
    • A61K9/16—Agglomerates; Granulates; Microbeadlets ; Microspheres; Pellets; Solid products obtained by spray drying, spray freeze drying, spray congealing,(multiple) emulsion solvent evaporation or extraction
    • A61K9/1605—Excipients; Inactive ingredients
    • A61K9/1617—Organic compounds, e.g. phospholipids, fats
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
    • A61K9/14—Particulate form, e.g. powders, Processes for size reducing of pure drugs or the resulting products, Pure drug nanoparticles
    • A61K9/16—Agglomerates; Granulates; Microbeadlets ; Microspheres; Pellets; Solid products obtained by spray drying, spray freeze drying, spray congealing,(multiple) emulsion solvent evaporation or extraction
    • A61K9/1605—Excipients; Inactive ingredients
    • A61K9/1617—Organic compounds, e.g. phospholipids, fats
    • A61K9/1623—Sugars or sugar alcohols, e.g. lactose; Derivatives thereof; Homeopathic globules
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
    • A61K9/14—Particulate form, e.g. powders, Processes for size reducing of pure drugs or the resulting products, Pure drug nanoparticles
    • A61K9/16—Agglomerates; Granulates; Microbeadlets ; Microspheres; Pellets; Solid products obtained by spray drying, spray freeze drying, spray congealing,(multiple) emulsion solvent evaporation or extraction
    • A61K9/1605—Excipients; Inactive ingredients
    • A61K9/1629—Organic macromolecular compounds
    • A61K9/1635—Organic macromolecular compounds obtained by reactions only involving carbon-to-carbon unsaturated bonds, e.g. polyvinyl pyrrolidone, poly(meth)acrylates
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
    • A61K9/14—Particulate form, e.g. powders, Processes for size reducing of pure drugs or the resulting products, Pure drug nanoparticles
    • A61K9/16—Agglomerates; Granulates; Microbeadlets ; Microspheres; Pellets; Solid products obtained by spray drying, spray freeze drying, spray congealing,(multiple) emulsion solvent evaporation or extraction
    • A61K9/1605—Excipients; Inactive ingredients
    • A61K9/1629—Organic macromolecular compounds
    • A61K9/1652—Polysaccharides, e.g. alginate, cellulose derivatives; Cyclodextrin
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
    • A61K9/20—Pills, tablets, discs, rods
    • A61K9/2072—Pills, tablets, discs, rods characterised by shape, structure or size; Tablets with holes, special break lines or identification marks; Partially coated tablets; Disintegrating flat shaped forms
    • A61K9/2086—Layered tablets, e.g. bilayer tablets; Tablets of the type inert core-active coat
    • A61K9/209—Layered tablets, e.g. bilayer tablets; Tablets of the type inert core-active coat containing drug in at least two layers or in the core and in at least one outer layer
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C08—ORGANIC MACROMOLECULAR COMPOUNDS; THEIR PREPARATION OR CHEMICAL WORKING-UP; COMPOSITIONS BASED THEREON
    • C08G—MACROMOLECULAR COMPOUNDS OBTAINED OTHERWISE THAN BY REACTIONS ONLY INVOLVING UNSATURATED CARBON-TO-CARBON BONDS
    • C08G65/00—Macromolecular compounds obtained by reactions forming an ether link in the main chain of the macromolecule
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C08—ORGANIC MACROMOLECULAR COMPOUNDS; THEIR PREPARATION OR CHEMICAL WORKING-UP; COMPOSITIONS BASED THEREON
    • C08G—MACROMOLECULAR COMPOUNDS OBTAINED OTHERWISE THAN BY REACTIONS ONLY INVOLVING UNSATURATED CARBON-TO-CARBON BONDS
    • C08G65/00—Macromolecular compounds obtained by reactions forming an ether link in the main chain of the macromolecule
    • C08G65/002—Macromolecular compounds obtained by reactions forming an ether link in the main chain of the macromolecule from unsaturated compounds
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C08—ORGANIC MACROMOLECULAR COMPOUNDS; THEIR PREPARATION OR CHEMICAL WORKING-UP; COMPOSITIONS BASED THEREON
    • C08G—MACROMOLECULAR COMPOUNDS OBTAINED OTHERWISE THAN BY REACTIONS ONLY INVOLVING UNSATURATED CARBON-TO-CARBON BONDS
    • C08G65/00—Macromolecular compounds obtained by reactions forming an ether link in the main chain of the macromolecule
    • C08G65/02—Macromolecular compounds obtained by reactions forming an ether link in the main chain of the macromolecule from cyclic ethers by opening of the heterocyclic ring
    • C08G65/32—Polymers modified by chemical after-treatment
    • C08G65/329—Polymers modified by chemical after-treatment with organic compounds
    • C08G65/331—Polymers modified by chemical after-treatment with organic compounds containing oxygen
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C08—ORGANIC MACROMOLECULAR COMPOUNDS; THEIR PREPARATION OR CHEMICAL WORKING-UP; COMPOSITIONS BASED THEREON
    • C08G—MACROMOLECULAR COMPOUNDS OBTAINED OTHERWISE THAN BY REACTIONS ONLY INVOLVING UNSATURATED CARBON-TO-CARBON BONDS
    • C08G65/00—Macromolecular compounds obtained by reactions forming an ether link in the main chain of the macromolecule
    • C08G65/02—Macromolecular compounds obtained by reactions forming an ether link in the main chain of the macromolecule from cyclic ethers by opening of the heterocyclic ring
    • C08G65/32—Polymers modified by chemical after-treatment
    • C08G65/329—Polymers modified by chemical after-treatment with organic compounds
    • C08G65/331—Polymers modified by chemical after-treatment with organic compounds containing oxygen
    • C08G65/332—Polymers modified by chemical after-treatment with organic compounds containing oxygen containing carboxyl groups, or halides, or esters thereof
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C08—ORGANIC MACROMOLECULAR COMPOUNDS; THEIR PREPARATION OR CHEMICAL WORKING-UP; COMPOSITIONS BASED THEREON
    • C08G—MACROMOLECULAR COMPOUNDS OBTAINED OTHERWISE THAN BY REACTIONS ONLY INVOLVING UNSATURATED CARBON-TO-CARBON BONDS
    • C08G65/00—Macromolecular compounds obtained by reactions forming an ether link in the main chain of the macromolecule
    • C08G65/02—Macromolecular compounds obtained by reactions forming an ether link in the main chain of the macromolecule from cyclic ethers by opening of the heterocyclic ring
    • C08G65/32—Polymers modified by chemical after-treatment
    • C08G65/329—Polymers modified by chemical after-treatment with organic compounds
    • C08G65/333—Polymers modified by chemical after-treatment with organic compounds containing nitrogen
    • C08G65/33303—Polymers modified by chemical after-treatment with organic compounds containing nitrogen containing amino group
    • C08G65/33317—Polymers modified by chemical after-treatment with organic compounds containing nitrogen containing amino group heterocyclic
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C08—ORGANIC MACROMOLECULAR COMPOUNDS; THEIR PREPARATION OR CHEMICAL WORKING-UP; COMPOSITIONS BASED THEREON
    • C08G—MACROMOLECULAR COMPOUNDS OBTAINED OTHERWISE THAN BY REACTIONS ONLY INVOLVING UNSATURATED CARBON-TO-CARBON BONDS
    • C08G2650/00—Macromolecular compounds obtained by reactions forming an ether link in the main chain of the macromolecule
    • C08G2650/28—Macromolecular compounds obtained by reactions forming an ether link in the main chain of the macromolecule characterised by the polymer type
    • C08G2650/38—Macromolecular compounds obtained by reactions forming an ether link in the main chain of the macromolecule characterised by the polymer type containing oxygen in addition to the ether group
    • C08G2650/42—Macromolecular compounds obtained by reactions forming an ether link in the main chain of the macromolecule characterised by the polymer type containing oxygen in addition to the ether group containing orthoester groups
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C08—ORGANIC MACROMOLECULAR COMPOUNDS; THEIR PREPARATION OR CHEMICAL WORKING-UP; COMPOSITIONS BASED THEREON
    • C08L—COMPOSITIONS OF MACROMOLECULAR COMPOUNDS
    • C08L2203/00—Applications
    • C08L2203/02—Applications for biomedical use

Abstract

말단 카르복실기 또는 그의 에스테르를 가진 수용성 중합체의 제조 방법이 제공된다. 상기 방법은 수용성 중합체의 오르토 에스테르를 가수분해하여 상응하는 산을 제공하는 것을 수반한다. 또한, 본 발명은 말단 카르복실기 또는 그의 에스테르를 가진 수용성 중합체, 상기 방법 수행에 유용한 중간체 및 시약 및 상기 기재된 수용상 중합체 유도체와 관련된 겔, 약제학적 제형물, 컨쥬게이트를 제공한다.
Figure R1020057003986
수용성 중합체

Description

말단 카르복실산을 가진 수용성 중합체 유도체의 제조 방법{METHOD FOR PREPARING WATER-SOLUBLE POLYMER DERIVATIVES BEARING A TERMINAL CARBOXYLIC ACID}
본 발명은 일반적으로는 말단 카르복실산 또는 그의 에스테르를 함유하는 중합체 유도체의 신규한 제조 방법에 관한 것이다. 추가로, 본 발명은 중합체, 중합체의 컨쥬게이트, 컨쥬게이션 방법, 및 중간체 뿐만 아니라 상기 중간체의 제조 방법에 관한 것이다. 추가로, 본 발명은 약제학적 제제, 합성법 등에 관한 것이다.
수용성 중합체, 예컨대 폴리(에틸렌 글리콜) (또는 "PEG") 를 생물학적으로 활성인 시약과 컨쥬게이션하는 것은, 활성제의 대응하는 "컨쥬게이션되지 않은" 버젼을 초월하는 유리한 특성을 종종 갖는 중합체-활성제 컨쥬게이트를 제공한다. 다른 장점들 중에서 특히, 활성제의 컨쥬게이션된 형태는 증가된 반감기를 가지며 덜 면역원성이다. PEG 를 중합체-활성제 컨쥬게이트 제조를 위해 사용하는 경우, 상기 컨쥬게이션된 활성제는 통상적으로 "PEG화" 되었다고 일컫는다. 시판되어 입수가능한 PEG 화 제제에는, PEGASYS
Figure 112005012286413-pct00001
PEG 화 인터페론 알파-2a (Hoffmann-La Roche, Nutley, NJ), PEG-INTRON
Figure 112005012286413-pct00002
PEG 화 인터페론 알파-2b (Schering Corp., Kennilworth, NJ), NEULASTATM PEG-filgrastim (Amgen Inc., Thousand Oaks, CA) 및 SOMAVERT
Figure 112005012286413-pct00003
pegvisomant (Pfizer, New York, NY) 이 포함된다. 상기 제제의 상업적인 성공은 PEG 화 기술의 가치를 입증한다.
말단 카르복실기를 가진 중합체는, 직접적으로 또는 간접적으로, 활성제 및 기타 물질과의 컨쥬게이션 반응에서 유용하다. 예를 들어, 카르복실산은 활성제의 아미노기 또는 히드록실기와 직접 반응함으로써 컨쥬게이트를 형성할 수 있다. 간접적으로는, 말단 카르복실산을 가진 중합체 (활성 친전자성기로서 작용) 은 카르복실기 이외의 관능기를 가진 기타 중합체 유도체 제조를 위한 편리한 개시 물질로서 제공될 수 있다. 카르복실기 이외의 관능기를 가진 중합체는 이어서 적합한 반응기를 가진 활성제와 컨쥬게이트를 형성할 수 있다.
말단 카르복실산을 가진 특정 수용성 중합체의 제조 방법이 기재되어 있다. 예를 들어, U.S. 특허 제 5,681,567 호에서는, 폴리(알킬렌 옥시드) 와 3 차-알킬 할로아세테이트를 반응시켜 폴리(알킬렌 옥시드)카르복실산의 3 차-알킬 에스테르를 제조하는 것을 기재하고 있다. 도식적으로, 3 차-알킬 클로로아세테이트를 사용한 반응은 하기와 같이 나타낼 수 있다:
Figure 112005012286413-pct00004
[식 중, 각각의 R 은 알킬을 나타낸다]. 에스테르와 산의 후속적인 반응은 3 차 알킬 부분을 제거하며, 이는 상응하는 아세트산을 제공한다. 그러나, 상기 방법은, 말단 아세트산 부분을 가진 중합체만을 제공한다. 아세트산 부분에서 종결되도록 합성된 중합체 유도체는 종종 "카르복시메틸화" 중합체로 일컬어진다.
말단 아세트산을 가진 중합체 유도체는 추가로 반응하여 기타 반응성 부분을 가진 중합체 유도체를 형성할 수 있다. 예를 들어, 카르복시메틸 PEG 의 숙신이미딜 에스테르가 형성될 수 있다. 그러나, 상기 숙신이미딜 에스테르는 거의 수용액 중에 가수분해되도록 반응성이다. 이에 따라, 말단 아세트산 부분을 가진 PEG 유도체의 실제적인 유용성은 상기 유도체의 전반적인 반응적 특성에 부여되는 것보다 더 낮을 수 있다.
말단 카르복실산 유도체를 가진 특정 수용성 중합체의 또다른 제조 방법은 U.S. 특허 제 5,523,479 호에 기재되어 있다. 상기 접근법에서, 32 내지 6000 의 분자량 및 1 내지 6 개의 히드록실기를 가진 부분은 베타-불포화 카르복실산의 3 차 알킬 에스테르와 반응하여 말단 에스테르를 가진 산물을 제공한다.
도식적으로, 상기 반응은 하기와 같이 나타낼 수 있다 (상기 부분은 단일 히드록실기를 가진 것으로서 제시되며, 베타-불포화 카르복실산의 3 차 알킬 에스테르는 아크릴산의 3 차 알킬로 나타낸다):
Figure 112005012286413-pct00005
[식 중, R 은 알킬을 나타낸다]. 후속적인 가수분해 단계는 상기 에스테르를 상응하는 프로판산으로 변환시킨다.
반응성 아세트산 부분이 없는 중합체 유도체를 제공하면서, 상기 방법은 다 른 단점을 갖게 된다. 첫번째로, 상기 방법은 오직 프로판산 유도체만을 제공한다. 추가로, 히드록실기의 에스테르로의 최선의 보고된 변환율은 85% 미만이다. 마지막으로, 상기 방법의 수행과 관련하여서는 오직 분자량이 32 내지 6000 인 부분만이 기재되어 있다. 그러나, 프로판산 유도체 이외의 산을 제조할 수 있고, 85% 를 초과하는 에스테르/산 변환율을 제공할 수 있고, 32 내지 6000 의 범위를 벗어나는 분자량을 가진 부분으로 사용될 수 있는 것에 대한 수요가 남아있다.
U.S. 특허 제 5,672,662 호는, 단백질 또는 아미노산이 있는 기타 분자로 컨쥬게이션하기에 적합한 활성 에스테르 제조에 사용될 수 있는 말단 프로판산 또는 부탄산을 가진 PEG 유도체를 개시한다. U.S. 특허 제 5,672,662 호에 기재된 활성 에스테르는 카르복시메틸화 PEG 의 활성 에스테르보다 더 큰 용액에서의 안정성을 나타내며, 이에 따라 생물학적 활성 분자로의 컨쥬게이션에 더욱더 적합하다. 그러나, 말단 프로판산 또는 부탄산 부분을 가진 상기 PEG 유도체 제조를 위해 기재된 상기 방법은 다수의 단계를 수반하며, 카르복실산 부분으로 약 80% 의 치환을 제공할 뿐이다. 그 결과, U.S. 특허 제 5,672,662 호에 기재된 방법은 약제학적 등급의 제품을 제공하기 위해서는 고비용의 시간 소모적 정제 단계를 필요로 한다.
이에 따라, 당업계에는 말단 카르복실기를 가진 중합체 유도체를 제조하기 위한 개선된 방법에 대한 수요가 남아있다. 추가로, 컨쥬게이션 반응 및 추가적인 관능화에 유용한 카르복실산 부분이 있는 신규한 중합체 제공에 대한 수요가 지속된다. 본 발명은, 특히 말단 카르복실산을 가진 중합체 유도체의 효율적인 제조를 위한 신규한 방법을 제공함으로써 당업계의 상기 및 기타 수요를 충족시킨다.
발명의 개요
따라서, 본 발명의 제 1 목적은, 하기 단계를 포함하는 수용성 중합체의 카르복실산 제조 방법을 제공하는 것이다: (a) 하나 이상의 알콕시드 이온 또는 티올레이트 이온을 가진 수용성 중합체 단편을 적합한 이탈기를 포함하여 이루어진 오르토 에스테르와 반응시켜 수용성 중합체의 오르토 에스테르를 제공하는 단계; 및 (b) 단계 (a) 에서 형성된 수용성 중합체의 오르토 에스테르를 하나 이상의 가수분해 단계에 적용하여 수용성 중합체의 상응하는 카르복실산을 제공하는 단계.
본 발명의 또다른 목적은, 수용성 중합체의 카르복실산 말단을 만들기 위한 방법에 유용한 오르토 에스테르를 제공하는 것이다. 이에 따라, 본 발명의 목적은 바로 앞의 문단에서 언급한 단계 (a) 를 수행하는 것을 포함한다.
본 발명의 또다른 목적은 본원에 기재된 방법으로 제조된 수용성 중합체의 카르복실산을 제공하는 것이다.
본 발명의 추가적인 목적은 수용성 중합체의 카르복실산 또는 그의 에스테르를 제공하는 것이다.
본 발명의 추가적인 또다른 목적은 수용성 중합체의 오르토 에스테르를 제공하는 것이다.
본 발명의 또다른 목적은 본원에 기재된 중합체를 함유하는 겔, 컨쥬게이트 및 약제학적 조성물을 제공하는 것이다.
본 발명의 또다른 목적은 본원에 기재된 각각의 겔, 컨쥬게이트 및 약제학적 조성물의 제조 방법을 제공하는 것이다.
본 발명의 추가적인 또다른 목적은, 제제를 환자에게 전달하는 단계를 포함하는, 본원에 기재된 각각의 겔, 컨쥬게이트 및 약제학적 조성물의 투여 방법을 제공하는 것이다.
본 발명의 추가적인 목적, 장점 및 신규한 특성은 하기의 명세서에 부분적으로 제시될 것이며, 하기에 의해 당업자에게는 자명해지거나, 또는 본 발명의 실시로 알 수 있게 될 것이다.
본 발명의 한 구현예에서, 수용성 중합체의 오르토 에스테르가 제공된다. 다른 용도들 중 특히, 오르토 에스테르는 말단 카르복실산 기를 가진 수용성 중합체의 합성에서 중간체로서의 유용성을 갖는다. 수용성 중합체의 오르토 에스테르는 바람직하게는 하기의 구조를 포함한다:
Figure 112005012286413-pct00006
[식 중,
POLY 는 수용성 중합체 단편이며;
(a) 는 0 또는 1 이며;
X 는, 존재한다면, 스페이서 부분이며;
(z) 는 1 내지 24 의 정수이며;
R1 는, 각각의 경우, 독립적으로 H 또는 알킬, 치환 알킬, 알케닐, 치환 알 케닐, 알키닐, 치환 알키닐, 아릴 및 치환 아릴로 이루어진 군으로부터 선택되는 유기 라디칼이며;
R2 는, 각각의 경우, 독립적으로 H 또는 알킬, 치환 알킬, 알케닐, 치환 알케닐, 알키닐, 치환 알키닐, 아릴 및 치환 아릴로 이루어진 군으로부터 선택되는 유기 라디칼이며;
Figure 112005012286413-pct00007
는 오르토 에스테르 부분의 잔기를 나타낸다].
또다른 구현예에서, 본 발명은 수용성 중합체의 오르토 에스테르의 제조 방법을 제공한다. 상기 방법은, 염기의 존재 하에 하나 이상의 히드록실기 또는 티올기를 가진 수용성 중합체 단편을 적합한 이탈기를 포함하여 이루어지는 오르토 에스테르와 반응시키는 단계를 포함한다. 수용성 중합체 단편은 하나 이상의 히드록실기를 가지며 임의의 티올기는 없는 것이 바람직하다.
전형적으로, 반드시 필요한 것은 아니나, 적합한 이탈기를 포함하는 오르토 에스테르는 하기의 구조를 포함하여 이루어진다:
Figure 112005012286413-pct00008
[식 중,
Figure 112005012286413-pct00009
는 적합한 이탈기를 나타내며;
(z) 는 1 내지 24 의 정수이며;
R1 은, 각각의 경우, 독립적으로 H 또는 알킬, 치환 알킬, 알케닐, 치환 알케닐, 알키닐, 치환 알키닐, 아릴 및 치환 아릴로 이루어진 군으로부터 선택되는 유기 라디칼이며;
R2 는, 각각의 경우, 독립적으로 H 또는 알킬, 치환 알킬, 알케닐, 치환 알케닐, 알키닐, 치환 알키닐, 아릴 및 치환 아릴로 이루어진 군으로부터 선택되는 유기 라디칼이며;
Figure 112005012286413-pct00010
는 오르토 에스테르 부분의 잔기를 나타낸다].
본 발명의 추가적인 구현예에서, 수용성 중합체의 카르복실산 제조 방법이 제공된다. 상기 방법은, 수용성 중합체의 오르토 에스테르를 하나 이상의 가수분해 단계에 적용하여 수용성 중합체의 상응하는 카르복실산을 제공하는 단계를 포함한다. 단일 가수분해 단계가 수행될 수 있더라도, 2 회의 연속적인 가수분해 단계가 수행되는 것이 바람직하다. 예시적인 2 중 가수분해 단계에는, 초기 염기 가수분해 단계에 이은 제 2 염기 가수분해 단계 및 초기 산 가수분해 단계에 이은 염기 가수분해 단계가 포함된다.
또다른 구현예에서, 본 발명은 상기 방법으로 제조된 수용성 중합체의 카르복실산을 제공한다. 이와 관련하여, 하기 구조를 가진 것과 같은 중합체가 제조될 수 있다:
Figure 112005012286413-pct00011
[식 중,
POLY 는 수용성 중합체 단편이며;
(a) 는 0 또는 1 이며;
X 는, 존재하는 경우, 스페이서 부분이며;
(z) 는 1 내지 24 의 정수이며;
R1 는, 각각의 경우, 독립적으로 H 또는 알킬, 치환 알킬, 알케닐, 치환 알케닐, 알키닐, 치환 알키닐, 아릴 및 치환 아릴로 이루어진 군으로부터 선택되는 유기 라디칼이며;
R2 는, 각각의 경우, 독립적으로 H 또는 알킬, 치환 알킬, 알케닐, 치환 알케닐, 알키닐, 치환 알키닐, 아릴 및 치환 아릴로 이루어진 군으로부터 선택되는 유기 라디칼이다].
상기 산의 상응하는 에스테르 버젼은 또한 중합체의 말단 카르복실산 부분 "-C(O)OH" 가 "C(O)OR3" (식 중, R3 은 알킬, 치환 알킬, 알케닐, 치환 알케닐, 알키닐, 치환 알키닐, 아릴 및 치환 아릴로 이루어진 군으로부터 선택되는 유기 라디칼로서 정의된다) 로 치환된 것이 포함된다.
말단 카르복실산 또는 그의 에스테르를 가진 예시적인 중합체에는 하기 구조를 가진 것이 포함된다:
Figure 112005012286413-pct00012
[식 중,
POLY 는 수용성 중합체 단편이며;
X' 는 스페이서 부분이며, 단 상기 스페이서 부분이 오직 1 개의 원자인 경우, 상기 1 개의 원자는 0 또는 S 가 아니며;
(z') 는 3 내지 24 의 정수이며;
R1 는, 각각의 경우, 독립적으로 H 또는 알킬, 치환 알킬, 알케닐, 치환 알케닐, 알키닐, 치환 알키닐, 아릴 및 치환 아릴로 이루어진 군으로부터 선택되는 유기 라디칼이며;
R2 는, 각각의 경우, 독립적으로 H 또는 알킬, 치환 알킬, 알케닐, 치환 알케닐, 알키닐, 치환 알키닐, 아릴 및 치환 아릴로 이루어진 군으로부터 선택되는 유기 라디칼이며;
R3 은 H 또는 알킬, 치환 알킬, 알케닐, 치환 알케닐, 알키닐 및 치환 알키닐로 이루어진 군으로부터 선택되는 유기 라디칼이다].
이에 따라, R3 가 비방향족인 것이 바람직하다.
수용성 중합체 단편을 포함하는 임의의 구조에 대해서, 수용성인 임의의 중합체가 사용될 수 있으며, 본 발명은 이에 제한되지 않는다. 그러나, 바람직한 수용성 중합체 단편은, 한 말단 상에서 종결되어 말단-캡핑된 것이다. 또한, 약 100,000 달톤 미만의 질량 평균 분자량을 가진 수용성 중합체 단편이 바람직하다.
도 1 은 본 발명에 따른 말단 카르복실기를 포함하는 수용성 중합체의 제조를 위한 한가지 접근법에 대한 개략도이다.
개요 및 정의
본 발명을 상세히 기재하기 전에, 본 발명은 특정 중합체, 합성 기술, 활성제 등에 제한되지 않으며 매우 다양할 수 있다는 것을 이해해야 한다. 또한 본원에 사용되는 용어법은 단지 특정 구현예를 기재하기 위한 것이며 제한하기 위한 것이 아님을 이해해야 한다.
본 명세서 및 특허청구범위에서 사용되는 바와 같이, 단수 형태 "a," "an," 및 "the" 는, 그 내용이 명백히 다르게 기술되지 않는 한 복수의 관련 대상체를 포함한다. 따라서, 예를 들어, "중합체" 에 대한 언급은 단일 중합체 뿐만 아니라 둘 이상의 동일하거나 상이한 중합체를 포함하며, "컨쥬게이트" 에 대한 언급은 단일 컨쥬게이트 뿐만 아니라 둘 이상의 동일하거나 상이한 컨쥬게이트를 말하며, "부형제" 에 대한 언급은 단일 부형제 뿐만 아니라 둘 이상의 동일하거나 상이한 부형제 등을 포함한다.
본 발명의 상세한 설명 및 특허청구범위에 있어서, 하기의 용어법은 하기에 기재된 정의에 따라 사용될 것이다.
본원에서 사용되는 바와 같은 "PEG", "폴리에틸렌 글리콜" 및 "폴리(에틸렌 글리콜)" 은 임의의 수용성 폴리(에틸렌 옥시드) 를 포함하는 것을 의미한다. 일반적으로, 본 발명에 따라 사용되는 PEG 는 하기의 구조 "-0(CH2CH20)m-" (식 중, (m) 은 2 내지 4000 임) 을 포함한다. 본원에 사용되는 바와 같이, PEG 는 또한 -- 말단 산소(들) 의 치환 여부에 따라 -- 하기의 유사한 구조식 "-CH2CH2-0(CH2CH20)m-CH2CH2-" 및 "-(CH2CH20)m-" (식 중, (m) 은 2 내지 4000 임) 을 포함한다. PEG 가 추가로 링커 (linker) 잔기 (하기에 보다 상세히 기재됨) 를 포함하는 경우, 링커를 포함하는 원자는 수용성 중합체 단편에 공유결합되는 경우 산소-산소 결합 (즉, "-O-O-" 또는 퍼옥시드 연결기) 의 형성을 야기하지 않는다. 명세서 및 특허청구범위 전체에서, 용어 "PEG" 는 다양한 말단 또는 "말단 캡핑 (capping)" 기 등을 갖는 구조를 포함한다는 것을 기억해야 한다. 용어 "PEG" 는 또한 과반수, 다시 말해, 50% 초과의 -CH2CH20- 단량체 서브유닛 (subunit) 을 함유하는 중합체를 의미한다. 특정 형태에 대해, PEG 는 임의의 수의 다양한 분자량, 및 "분지쇄", "직쇄", "갈래의 (forked)", "다관능성 (multifunctional)" 등과 같은 구조 또는 기하학을 취할 수 있으며, 이는 하기에 보다 상세히 기재된다.
용어 "말단-캡핑된" 또는 "말단적으로 캡핑된" 은 본원에서 말단-캡핑 잔기로 종결되는 중합체의 말단 또는 종점을 칭하기 위해 호환되어 사용된다. 일반적으로, 말단-캡핑 잔기는 히드록시 또는 C1-20 알콕시기를 포함하지만, 반드시 그렇지는 않다. 따라서, 말단-캡핑 잔기의 예로는 알콕시 (예컨대, 메톡시, 에톡시 및 벤질옥시), 또한 아릴, 헤테로아릴, 시클로, 헤테로시클로 등이 포함된다. 또한, 상기한 것들의 각각의 포화, 불포화, 치환 및 비치환 형태가 포함되는 것으로 생각된다. 또한, 말단-캡핑기는 실란일 수도 있다. 말단-캡핑기는 또한 유리하게는 검출가능 표지 (label) 를 포함할 수도 있다. 중합체가 검출가능 표지를 포함하는 말단-캡핑기를 가질 경우, 중합체 및/또는 상기 중합체가 커플링되는 관심의 대상이 되는 잔기 (예컨대, 활성제) 의 양 또는 위치는 적합한 검출기를 사용하여 결정될 수 있다. 적합한 표지로는, 형광물질, 화학발광제 (chemiluminescer), 효소 표지화에 사용되는 잔기, 비색제 (예컨대, 염료), 금속 이온, 방사성 잔기 등이 포함되나, 이에 제한되지는 않는다. 적합한 검출기로는, 광도계, 필름, 분광계 등이 포함된다.
중합체 또는 수용성 중합체 단편에 대해 "비자연적으로 발생하는" 이란, 그 전체가 자연에서 발견되지 않는 중합체를 의미한다. 그러나, 비자연적으로 발생하는 중합체 또는 수용성 중합체 단편은, 전체 중합체 구조가 자연에서 발견되지 않는 한, 자연적으로 발생하는 하나 이상의 서브유닛 또는 서브유닛의 부분을 포함할 수 있다.
"수용성 중합체 단편" 및 "수용성 중합체" 에서와 같은 용어 "수용성" 은 실온에서 수용성인 임의의 단편 또는 중합체이다. 일반적으로, 수용성 중합체 또는 단편은, 여과 후 동일한 용액에 의해 전달되는 약 75% 이상, 보다 바람직하게는 약 95% 이상의 빛을 전달할 것이다. 중량을 기준으로, 수용성 중합체 또는 이의 단편은 바람직하게는 물에 약 35 중량% 이상 용해될 것이며, 보다 바람직하게는 물에 약 50 중량% 용해될 것이며, 더욱 더 바람직하게는 물에 약 70 중량% 이상 용해될 것이며, 훨씬 더 바람직하게는 물에 약 85 중량% 용해될 것이다. 그러나, 수용성 중합체 또는 단편이 물에 약 95 중량% 이상 용해되거나 물에 완전히 용해되는 것이 가장 바람직하다.
PEG 와 같은, 본 발명의 수용성, 비자연적으로 발생한 중합체의 맥락에서, "몰 질량" 은 중합체의 공칭 평균 몰 질량을 말하며, 일반적으로는 크기 배제 크로마토그래피 (size exclusion chromatography), 광 산란 기술, 또는 1,2,4-트리클로로벤젠에서의 고유 속도 결정에 의해 결정된다. 본 발명의 중합체는 일반적으로 다분산성 (polydisperse) 이고, 바람직하게는 약 1.2 미만, 보다 바람직하게는 약 1.15 미만, 더욱 더 바람직하게는 약 1.10 미만, 훨씬 더 바람직하게는 약 1.05 미만, 및 가장 바람직하게는 약 1.03 미만의 낮은 다분산도 값을 갖는다.
수용성 중합체의 맥락에서 "티올 유도체" 는 티올기 (-SH), 티올레이트 (-S-) 또는 보호된 티올, 즉 그의 보호된 형태의 티올기인 하나 이상의 말단을 갖는 중합체를 의미한다. 전형적인 티올 보호기로는, 티오에테르, 티오에스테르, 또는 디술파이드가 포함된다. 티올에 대한 예시적인 보호기는 문헌 [Greene et al., "PROTECTIVE GROUPS IN ORGANIC SYNTHESIS," 3rd Edition, John Wiley and Sons, Inc., New York, 1999] 에서 확인될 수 있다.
본원에서 사용되는 바와 같이, 용어 "카르복실산" 유도체에서의 "카르복실산" 은
Figure 112005012286413-pct00013
관능기를 갖는 잔기 ["-COOH" 또는 -C(O)OH 로도 나타냄] 이다. 그 내용이 명백히 다르게 기술되지 않는 한, 카르복실산이라는 용어에는 산 형태 뿐만 아니라 대응하는 에스테르 및 보호된 형태가 또한 포함된다. 카르복실산에 적합한 보호기에 대해서는 상기 문헌 [Greene et al.] 을 재참조한다.
특정 관능기와 함께 사용되는 경우, 용어 "반응성" 또는 "활성화된" 은 다른 분자 상의 친전자체 (electrophile) 또는 친핵체 (neutrophile) 와 용이하게 반응하는 반응성 관능기를 말한다. 이는, 반응하기 위해서 강한 촉매 또는 매우 비실용적인 반응 조건이 요구되는 기 (즉, "비반응성" 또는 "불활성" 기) 와는 대조적이다.
용어 "보호된" 또는 "보호기" 또는 "보호성 기" 는 특정 반응 조건 하에서 분자 내에서 화학 반응성 관능기의 반응을 예방하거나 차단하는 잔기 (즉, 보호기) 의 존재를 말한다. 보호기는 보호되는 화학 반응기의 유형 뿐만 아니라 사용되는 반응 조건 및 임의로 분자 내의 추가 반응기 또는 보호기의 존재에 따라 달라질 것이다. 당 분야에 공지된 보호기는 상기 문헌 [Greene et al.] 에서 확인될 수 있다.
본원에서 사용되는 바와 같이, 용어 "관능기" 또는 그의 임의의 유사용어는 이의 보호된 형태를 포함하는 것을 의미한다.
용어 "스페이서" 또는 "스페이서 잔기" 는 본원에서, 임의로 수용성 중합체 단편의 말단과 같은 잔기 및 친전자체를 서로 연결시키는 데 사용되는 원자 또는 원자 집단을 칭하기 위해 사용된다. 본 발명의 스페이서 잔기는 가수분해적으로 안정할 수 있거나 생리학적으로 가수분해가능하거나 효소적으로 분해가능한 연결기를 포함할 수 있다.
"알킬" 은 탄화수소쇄, 일반적으로는 그 길이가 1 내지 20 개의 원자 범위인 탄화수소쇄를 말한다. 상기 탄화수소쇄는 반드시 그렇지는 않지만 바람직하게는 포화되고, 분지쇄 또는 직쇄일 수 있지만, 일반적으로는 직쇄가 바람직하다. 예시적 알킬기로는 에틸, 프로필, 부틸, 펜틸, 1-메틸부틸, 1-에틸프로필, 3-메틸펜틸 등이 포함된다. 본원에서 사용되는 바와 같이, "알킬" 은 세개 이상의 탄소 원자가 관련되는 경우 시클로알킬을 포함한다.
"저급 알킬" 은 탄소수 1 내지 6 을 포함하는 알킬기를 말하며, 이는 직쇄 또는 분지쇄일 수 있고, 메틸, 에틸, n-부틸, iso-부틸, 및 tert-부틸로 예시될 수 있다.
"시클로알킬" 은 바람직하게는 탄소수 3 내지 약 12, 보다 바람직하게는 3 내지 약 8 로 이루어진, 브릿지된 (bridged), 융합된 또는 스피로 시클릭 화합물을 포함하는, 포화 또는 불포화 시클릭 탄화수소쇄를 말한다.
"비간섭 치환기 (non-interfering substituents)" 는, 분자 내에 존재하는 경우, 일반적으로 분자 내에 함유된 다른 관능기와 비반응성인 기이다.
예를 들어, "치환 알킬" 에서와 같은 용어 "치환" 은 하나 이상의 비간섭 치환기, 예컨대, 이에 제한되지는 않으나 C3-C8 시클로알킬, 예컨대, 시클로프로필, 시클로부틸 등; 할로, 예컨대, 플루오로, 클로로, 브로모, 및 요오도; 시아노; 알콕시, 저급 페닐 (예컨대, 0-2 치환 페닐); 치환 페닐 등으로 치환된 잔기 (예컨대, 알킬기) 를 말한다. "치환 아릴" 은 치환기로서 하나 이상의 비간섭기를 갖는 아릴이다. 페닐 고리 상의 치환에 대해, 치환기는 임의의 배향 (즉, 오르토, 메타, 또는 파라) 으로 존재할 수 있다.
"알콕시" 는 R 이 알킬 또는 치환 알킬, 바람직하게는 C1-C20 알킬 (예컨대, 메톡시, 에톡시, 프로필옥시, 벤질 등), 바람직하게는 C1-C7 알킬인 R 를 말한다.
본원에서 사용되는 바와 같이, "알케닐" 은 하나 이상의 이중 결합, 예컨대 에테닐, n-프로페닐, 이소프로페닐, n-부테닐, 이소부테닐, 옥테닐, 데세닐, 테트라데세닐 등을 함유하는, 길이가 1 내지 15 원자 범위인 분지쇄 또는 비분지쇄 탄화수소기에 관한 것이다.
본원에서 사용되는 바와 같은 용어 "알키닐" 은 하나 이상의 삼중 결합을 포함하는, 길이가 2 내지 15 개의 원자인 분지쇄 또는 비분지쇄 탄화수소기, 예컨대 에티닐, n-프로피닐, 이소프로피닐, n-부티닐, 이소부티닐, 옥티닐, 데시닐 등에 관한 것이다.
"아릴" 은 각각 5 또는 6 개의 코어 (core) 탄소 원자를 갖는 하나 이상의 방향족 고리를 의미한다. 아릴은 나프틸에서와 같이 융합될 수 있는 다중 아릴 고리 또는 비페닐에서와 같이 비융합될 수 있는 다중 고리를 포함한다. 아릴 고리는 또한 하나 이상의 시클릭 탄화수소, 헤테로아릴, 또는 헤테로시클릭 고리와 함께 융합 또는 비융합될 수 있다. 본원에서 사용되는 바와 같이, "아릴" 에는 헤테로아릴이 포함된다.
"헤테로아릴" 은 1 내지 4 개의 헤테로원자, 바람직하게는 N, 0, S, 또는 이들의 조합을 포함하는 아릴기이다. 헤테로아릴 고리는 하나 이상의 시클릭 탄화수소, 헤테로시클릭, 아릴, 또는 헤테로아릴 고리와 함께 융합될 수 있다.
"헤테로사이클" 또는 "헤테로시클릭" 은 불포화 또는 방향족 특성이 있거나 없고 탄소가 아닌 하나 이상의 고리 원자를 갖는 하나 이상의 5-12 개의 원자, 바람직하게는 5-7 개의 원자의 고리를 의미한다. 바람직한 헤테로원자에는 황, 산소, 및 질소가 포함된다.
"치환 헤테로아릴" 은 치환기로서 하나 이상의 비간섭기를 갖는 헤테로아릴이다.
"치환 헤테로사이클" 은 비간섭 치환기로부터 형성된 하나 이상의 측쇄를 갖는 헤테로사이클이다.
"친전자체" 는, 이온성일 수 있고, 친전자 중심, 즉 전자 추적 (electron seeking) 성이고 친핵체와 반응할 수 있는 중심을 갖는 이온 또는 원자 또는 원자 집단에 관한 것이다.
"친핵체" 는, 이온성일 수 있고, 친핵 중심, 즉 친전자 중심을 추적하거나 친전자체와 반응할 수 있는 중심을 갖는 이온 또는 원자 또는 원자 집단에 관한 것이다.
"생리학적으로 분해가능한" 또는 "가수분해가능한" 또는 "분해가능한" 결합은 생리학적 조건 하에서 물과 반응하는 (즉, 가수분해되는) 비교적 약한 결합이다. 결합이 물 속에서 가수분해되는 경향은 두개의 중심 원자를 연결시키는 연결기의 일반적인 유형 뿐만 아니라 이러한 중심 원자에 부착되는 치환기에 따라 달라질 것이다. 적절한 가수분해적으로 불안정하거나 약한 연결기로는, 카르복실레이트 에스테르, 포스페이트 에스테르, 무수물, 아세탈, 케탈, 아실옥시알킬 에테르, 이민, 오르토 에스테르, 펩티드 및 올리고뉴클레오티드가 포함되지만, 이에 제한되지는 않는다.
"효소적으로 분해가능한 연결기" 는 하나 이상의 효소에 의해 분해되는 연결기를 의미한다.
"가수분해적으로 안정한" 연결기 또는 결합은, 물 속에서 실질적으로 안정한, 다시 말해 생리학적 조건 하에서 연장된 시간에 걸쳐 임의의 뚜렷한 정도로 가수분해를 겪지 않는 화학 결합, 일반적으로는 공유 결합을 말한다. 가수분해적으로 안정한 연결기의 예로는, 탄소-탄소 결합 (예컨대, 지방족 쇄), 에테르, 아미드, 우레탄 등이 포함되지만, 이에 제한되는 것은 아니다. 일반적으로, 가수분해적으로 안정한 연결기는 생리학적 조건 하에서 하루에 약 1-2% 미만의 가수분해율을 나타내는 결합이다. 대표적인 화학 결합의 가수분해율은 대부분의 표준 화학 교과서에서 확인될 수 있다.
용어 "활성제" 및 "생물학적 활성제" 는 본원에서 교환가능하게 사용되고 임의의 제제, 약물, 화합물, 생체내 또는 생체외에서 입증될 수 있는 어떠한 약리학적 (종종, 이로운) 효과를 제공하는 물질의 조성물 또는 혼합물을 포함하는 것으로 정의된다. 이는 식품, 식품보조제, 영양제, 영양기능식품, 약물, 백신, 항체, 비타민, 및 다른 이로운 제제 등을 포함한다. 본원에서 사용되는 바와 같이, 이러한 용어는 또한 환자에서 국소적 또는 전신적 효과를 생성하는 임의의 생리학적 또는 약리학적 활성 물질을 추가로 포함한다.
"약제학적으로 허용가능한 부형제" 또는 "약제학적으로 허용가능한 담체" 는 본 발명의 조성물에 포함될 수 있고 환자에 실질적인 독성학적 부작용을 야기하지 않는 부형제를 말한다.
"약리학적 유효량", "생리학적 유효량", 및 "치료적 유효량" 은 본원에서 교환가능하게 혈류 또는 표적 조직 내에서 목적한 수준의 활성제 및/또는 컨쥬게이트를 제공하는 데 필요한 약학 제제에 존재하는 중합체-활성제 컨쥬게이트의 양을 의미하는 데 사용된다. 정확한 양은 다수의 인자, 예컨대 특정 활성제, 약학 제제의 성분 및 물리적 특성, 의도된 환자 집단, 환자 고려사항 등에 따라 달라질 것이며, 본원에 제공되고 관련 문헌에서 입수가능한 정보에 기초하여 당업자에 의해 용이하게 결정될 수 있다.
본 발명의 중합체의 맥락에서 "다관능성" 은 그 안에 함유된 3 개 이상의 관응기를 갖는 중합체를 의미하며, 상기 관능기는 동일하거나 상이할 수 있다. 본 발명의 다관능성 중합체는 일반적으로 약 3-100 개의 관능기, 3-50 개의 관능기, 또는 3-25 개의 관능기, 또는 3-15 개의 관능기, 또는 3 내지 10 개의 관능기를 함유할 것이며, 중합체 내에 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9 또는 10 개의 관능기를 포함할 것이다. "이관능성" 중합체는 그 안에 함유된, 동일하거나 (즉, 상동이관능성 (homodifunctional)) 상이한 (즉, 이종이관능성 (heterodifunctional)) 두개의 관능기를 갖는 중합체를 의미한다.
중합체의 기하학 또는 전체 구조와 관련한 "분지쇄" 는 2 개 이상의 중합체 "아암 (arm)" 을 갖는 중합체를 말한다. 분지쇄 중합체는 2 개의 중합체 아암, 3 개의 중합체 아암, 4 개의 중합체 아암, 6 개의 중합체 아암, 8 개의 중합체 아암 또는 그 이상을 가질 수 있다. 고도로 분지쇄인 중합체의 한 특정 유형은, 본 발명의 목적을 위해 분지쇄 중합체의 구조와 구별되는 구조를 갖는 것으로 생각되는 덴드리머성 중합체 또는 덴드리머 (dendrimer) 이다.
"덴드리머" 또는 덴드리머성 중합체는 모든 결합이 중심 초점 또는 규칙적인 분지 패턴 및 각각 분지점을 제공하는 반복 단위를 갖는 코어로부터 방사상으로 방출되는 구형의, 크기 일분산성 (size monodisperse) 중합체이다. 덴드리머는 이를 다른 유형의 중합체와 구별되게 하는 코어 캡슐화와 같은 덴드리머성 상태 특성을 나타낸다.
본원에 기재된 염기성 또는 산성 반응물에는 중성의, 하전된, 및 이들의 임의 대응 염 형태가 포함된다.
용어 "환자" 는 반드시는 아니지만 전형적으로 중합체-활성제 콘쥬게이트 형태인, 본 발명의 중합체 투여로 예방 또는 치료될 수 있는 상태를 겪거나 겪기 쉬운 생명체를 나타내며, 인간 및 동물이 모두 포함된다.
"임의" 또는 "임의로" 는 이후 기재되는 상황이 일어날 수도 일어나지 않을 수도 있음을 의미하여, 상기 기재에는 그 상황이 일어나는 상황 및 일어나지 않는 상황이 포함된다.
본원에 사용되는 바와 같이, "할로" 표시 (예컨대, 플루오로, 클로로, 요오도, 브로모 등) 는 일반적으로는 할로겐이 분자에 결합되는 경우에 사용되고, 접미사 "아이드" (예컨대, 플루오라이드, 클로라이드, 요오다이드, 브로마이드 등) 는, 할로겐이 그의 독립적인 이온 형태로 존재할 경우 (예컨대 이탈기가 분자를 이탈하는 때와 같이) 이온 형태가 사용되는 경우에 사용된다.
본 논의의 맥락에서, 한 구조 또는 화학식에 대해 제공된 변수의 정의는 그 내용이 달리 기술되지 않는 한, 상이한 구조에서 반복되는 동일한 변수에 적용가능한 것으로 이해되어야 한다. 따라서, 예를 들어, 수용성 중합체의 오르토 에스테르에 대한 "POLY", "스페이서 잔기", "(z)" 등의 정의는 카르복실산을 포함하는 수용성 중합체에 동일하게 적용가능하다.
방법
수용성 중합체의 카르복실산을 제조하는 본 방법은 여러 장점을 가진다. 본원에 보여진 바와 같이, 예를 들어, 말단 카르복실산 부분을 가진 수용성 중합체는 고순도로 제공될 수 있다. 선행기술의 접근법이 상대적으로 낮은 순도를 제공함에도 불구하고, 약 85% 이상의 전환율, 보다 바람직하게는 약 90% 이상, 보다 더 바람직하게는 약 95% 이상, 및 가장 바람직하게는 약 98% 이상의 전구체 분자의 대응하는 카르복실산 유도체로의 전환이 본원에서 나타난다. 말단 카르복실산 부분을 가진 수용성 중합체는 이제 상대적으로 고순도로 제공될 수 있기 때문에, 고가이며 시간이 소비되는 정제 단계가 감소되거나 완전히 제거된다.
수용성 중합체의 카르복실산을 제조하는 본 방법의 또다른 장점은 광범위한 구조적으로 다양한 유도체를 제조할 수 있는 능력이다. 이전에 기술된 방법들은 예를 들어, 특정 아세트산 또는 카르복시메틸화 유도체(미국 특허 No. 5,681,567 참조), 특정 프로판산 유도체 (미국 특허 Nos. 5,523,479 및 5,672,662 참조), 및 특정 부탄산 유도체 (미국 특허 No. 5,672,662 참조)를 불가피하게 초래한다. 이러한 이전의 기술된 유도체들은 이들을 제조하는 방법들이 상기 방법을 사용함에 있어서 적합한 비교적 좁은 범위의 이용가능한 시약들에 의존하기 때문에 불가피하게 일부 구조들에 제한된다. 유리하게는, 본 방법은 상대적으로 다양한 갯수의 시약들과 사용될 수 있어, 가능한 구조들의 범위를 크게 확장할 수 있다.
따라서 첫번째 방법은 말단 카르복실산을 가진 수용성 중합체의 후속 형성을 위한 단계의 추가적 수행에서 유용한 중간체로서 작용하는, 수용성 중합체의 오르토 에스테르를 형성하기 위해 제공된다. 도 1 에 나타난 과정 A 는, 이 첫번째 방법을 수행하기 위한 하나의 접근법을 기술한다. 카르복실산 말단(화학식 V)을 함유하는 수용성 중합체의 후속 형성을 위한 한 접근법은 도 1의 과정 B 로서 나타나 있다. 본원에 기술된 합성 방법의 양호한 이해를 위해 단지 보조적 차원으로 제공된 도 1 은 본 발명을 제한하는 것으로 이해되어서는 안된다. 도 1 에 나타난 다양한 방법은 하기에 보다 상세히 기술된다.
먼저, 수용성 중합체의 오르토 에스테르를 형성하는 방법은 하나 이상의 알콕시드 이온 또는 티올레이트 이온을 갖는 수용성 중합체 단편을 적합한 이탈기(즉, 적합한 이탈기를 포함하는 오르토 에스테르-함유 분자)를 포함하여 이루어지는 오르토 에스테르와 반응시키는 단계를 포함한다. 편리하게는, 도 1을 참조하여, 하나 이상의 알콕시드 이온 또는 티올레이트 이온을 갖는 수용성 중합체 단편은 적합한 염기의 존재하에서 하나 이상의 히드록실 또는 티올기를 갖는 수용성 중합체(화학식 II)를 혼합함으로써 제조된다. 적합한 이탈기(화학식 I)를 포함하는 오르토 에스테르를 하나 이상의 히드록실 또는 티올기를 갖는 수용성 중합체(화학식 II)와 반응하도록 하여 적합한 이탈기를 포함하는 오르토 에스테르(화학식 III)를 형성한다.
그러나, 이러한 접근법에서 사용되는 염기는 각각 하나 이상의 히드록실 또는 티올기를 갖는 수용성 중합체의 알콕시드 (즉, R-O-) 또는 티올레이트 (즉, R-S-)를 형성하는 것이어야 한다. 따라서, 예를 들어, 염기는 폴리-(X)a-OH 를 폴리-(X)a-O- 으로 및 폴리-(X)a-SH 를 폴리-(X)a-S-으로 변환시킨다. 또한 이제 알콕시드 또는 티올레이트 부분을 가진, 수용성 중합체는 SN2 반응을 통해 적합한 이탈기를 갖는 오르토 에스테르 (화학식 I) 와 반응한다고 여겨진다. 당업계의 숙련자에게 인식될 것과 같이, 이 접근법은 윌리암슨(Williamson) 에테르 합성에 대응되며, 윌리암슨 에테르 합성에서 일반적으로 사용되는 원리와 기술은 본원에서도 역시 적용가능하다.
티올-함유 화합물의 알콜 또는 티올레이트의 알콕시드를 형성하기 위해 적합한 염기의 비제한적 예로서는 나트륨, 수산화 나트륨, 칼륨, 수산화칼륨, 수소화나트륨, 수소화칼륨, 나트륨 메톡시드, 칼륨 메톡시드, 나트륨 tert-부톡시드, 칼륨 tert-부톡시드, 나트륨 카르보네이트, 및 칼륨 카르보네이트를 포함한다. 그러나, 이 단계에 따른 사용에 바람직한 염기는, 나트륨, 칼륨, 수소화나트륨, 수소화칼륨, 나트륨 메톡시드, 칼륨 메톡시드, 나트륨 tert-부톡시드, 및 칼륨 tert-부톡시드로 이루어진 군으로부터 선택된 것들을 포함한다.
또한, 하나 이상의 알콕시드 이온 또는 티올레이트 이온을 갖는 수용성 중합체 단편은 편리하게는 하기 상세히 기술될 바와 같이, 중합 반응을 통해 제공될 수 있다. 수용성 중합체 단편을 제공하기 위한 이러한 접근법에서, 수용성 중합체 단편이 하나 이상의 알콕시드 이온을 갖는 것이 바람직하다.
일반적으로, 필수적이지는 않더라도, 적절한 이탈기를 포함하는 과량의 오르토 에스테르 (화학식 I) 를 하나 이상의 알콕시드 이온 또는 티올레이트 이온을 함유하는 수용성 중합체 (화학식 II) 와 반응시키는 것이 허용된다. 보통, 적절한 이탈기를 포함하는 오르토 에스테르 (화학식 I) 의 함량은 하나 이상의 히드록실 또는 티올기를 갖는 수용성 중합체 (화학식 II) 내에서 이용가능한 히드록실 또는 티올기의 수에 대한 몰 당량 이상을 나타낸다. 이종관능 중합체 종 (즉, 2 가지 이상의 상이한 말단 관능기들을 함유하는 종)은 적절한 이탈기를 포함하는 오르토 에스테르 (화학식 1) 의 비화학량론적 함량을 이용하여 제조될 수 있다. 즉, 이종관능 종은 하나 이상의 히드록실 또는 티올기를 갖는 수용성 중합체 (화학식 II) 상에 이용가능한 히드록실 또는 티올기의 총 몰수가 반응에 첨가된 적절한 이탈기를 포함하는 오르토 에스테르 (화학식 I) 의 총 몰수를 초과하는 경우 형성된다.
수용성 중합체의 오르토 에스테르 (화학식 III)는 다른 방법에 의해 제조될 수 있으며 본 발명은 도 1 에 기술된 방법 A 에만 제한되는 것은 아니다. 예를 들어, 중합에 적절한 하나 이상의 개시 부위를 포함하는 오르토 에스테르는 하나 이상의 수용성 중합체 단편을 성장시키는데 사용될 수 있다. 이 접근법을 이용하여, 하나 이상의 개시 부위 (예를 들어, 알콕시드 부분) 및 반응성 단량체 (예를 들어, 에틸렌 옥시드)를 포함하는 오르토 에스테르를 혼합하고, 상기 반응을 모든 반응성 단량체가 소비되거나 또는 반응이 예를 들어, 반응 매질을 중화시킴으로써 종결될 때까지 진행시키는 것이 허용된다. 마지막 반응성 단량체, 예를 들어, 성장 사슬에 첨가된 에틸렌 옥시드는, 편리하게 예를 들어 적절한 이탈기를 포함하는 오르토 에스테르와의 후속 반응을 위한 알콕시드 이온 또는 티올레이트 이온을 제공할 수 있다.
특히, 하나 이상의 개시 부위를 포함하는 오르토 에스테르 상에 직접 수용성 중합체 단편을 제조하기 위해 하기의 단계가 뒤따를 수 있다: (i) 중합 개시를 위해 적절한 하나 이상의 활성 음이온 부위를 포함하는 오르토 에스테르를 제공하는 단계; (ii) 오르토 에스테르의 음이온 부위를 중합할 수 있는 반응성 단량체와 접촉시켜, 오르토 에스테르 전구체 상의 반응성 단량체의 중합을 개시하는 단계; (iii) 오르토산 전구체에 추가의 반응성 단량체를 첨가하여 하나 이상의 중합체 사슬을 형성하는 단계; (iv) 상기 접촉을 목적하는 중합체 사슬 길이가 수득될 때까지 지속시키는 단계; 및 (v) 반응을 종결시켜 수용성 중합체의 오르토 에스테르를 수득하는 단계.
임의의 반응성 단량체가 생성 중합체 사슬이 수용성인 한 중합체 사슬을 "성장" 시키는데 사용될 수 있다. 하지만, 반응성 단량체가 에틸렌 옥시드이어서, 폴리(에틸렌 옥시드) 사슬을 제공하는 것이 특히 바람직하다. 개시 부위에의 반응성 단량체의 초기 결합을 포함하는, 중합체 사슬의 성장은 예를 들어, 알콕시드 이온 (즉, R-O-)을 통해 유효화될 수 있다. 이러한 기술 및 다른 기술들은 당업계의 숙련자들에게 공지되어 있고 예를 들어, [Odian, Chap. 7, Principles of Polymerization, Yd Ed., McGraw-Hill, 1991] 을 참조한다.
중합체 사슬의 성장은 목적하는 분자량이 달성될 때까지 지속된다. 따라서, 예를 들어, 반응 매질을 중화시키는 것은 중합체 사슬의 성장을 중단시킨다. 또한, 특정 중량 또는 함량의 반응성 단량체를 첨가하고 중합을 모든 반응성 단량체가 소비될 때까지 진행시키는 것은 대응하는 분자량을 갖는 중합체 사슬을 초래하게 된다. 일단 중합체 사슬이 형성되면, 엔드캡핑(end-capping)기가 통상의 기술을 이용하여 첨가될 수 있다. 예를 들어, 알킬 할라이드 (예를 들어, 메틸 할라이드 또는 메틸 p-톨루엔술포네이트)가 중합체 사슬의 노출된 말단 (오르토 에스테르 관능기에의 말단 말초부)과 반응할 수 있다.
다르긴 하지만, 관련 중합 접근법이 또한 수용성 중합체의 오르토 에스테르를 제공하기 위해 사용될 수 있다. 이 관련 접근법에서, 중합은 먼저 오르토 에스테르 유도체로 후속 변환될 수 있는 중합체 사슬을 형성하기 위해 수행된다. 따라서, 예를 들어, 나트륨 2-메톡시 에탄올레이트 (Na+ : -0CH2CH2OCH3)와 같은 알콕시 알콜레이트염이 상기 개괄된 하기의 동일한 절차를 필수적으로 수반하여 에틸렌 옥시드의 중합을 개시할 수 있다. 중합체 사슬에 첨가된 최종 단량체가 알콕시드 (에틸렌 옥시드의 경우와 같이)와 같은 반응성기를 이탈시킨다고 가정한다면, 상기 중합체는 적절한 이탈기를 포함하는 오르토 에스테르와 반응할 수 있다. 중합체가 오르토 에스테르-함유 시약에의 직접적 결합을 위해 적절한 기 (예를 들어, 알콕시드)를 이탈시키지 않는 정도까지는, 오르토 에스테르가 결합되도록 중합체 사슬이 추가적으로 변형될 수 있다.
중합체의 개시제로서 알콕시 알콜레이트염의 사용은 단일 오르토 에스테르 관능기를 포함하는 수용성 중합체의 오르토 에스테르를 초래한다. 두 오르토 에스테르 관능기를 포함하는 중합체 (이관능성 중합체)가 디알콜레이트염 (예를 들어 2Na+ : -0CH2CH2O_)이 알콕시 알콜레이트염 대신에 사용되는 경우 생성될 수 있다. 상기 기술된 바와 같이, 선택적인 캡핑 단계가 또한 이 중합 접근법과 같이 수행될 수 있다.
도 1 로 돌아가서, 수용성 중합체의 오르토 에스테르 (화학식 III) 는 카르복실산 말단을 함유하는 수용성 중합체 (화학식 V) 로 전환될 수 있다. 대응하는 카르복실산 유도체로의 전환은 하나 이상의 가수분해 단계를 수행함으로써 유리하게 효율적으며 고순도로 달성될 수 있다. 산-촉매 가수분해 또는 염기-촉진 가수분해를 수반하는 산-촉매 가수분해는 말단 카르복실산을 가진 수용성 중합체 (화학식 V) 를 제공할 수 있다.
카르복실산으로의 전환이 산-촉매 가수분해를 통한 단일 가수분해 단계로 수행될 수 있음에도 불구하고, 이러한 단일 가수분해적 접근은 시간의 관점에서 비율적인 것으로 여겨진다. 하지만, 두가지 가수분해 단계가 대응하는 오르토 에스테르로부터 카르복실산을 전환하는 속도를 증가시킴이 발견되었다.
두 가수분해 단계의 접근에서, 첫번째 가수분해 단계는 에스테르(화학식 IV)로 변환되는 오르토 에스테르 관능기를 초래한다. 두번째 가수분해 단계는, 이어서, 에스테르(화학식 IV)를 카르복실산 말단을 함유하는 대응하는 중합체 (화학식 IV)로 전환시킨다.
첫번째 가수분해 단계는 산-촉매 가수분해여야 한다. 오르토 에스테르 관능기는 수중 p-톨루엔술폰산 (p-TsOH) 및 피리딘, 및 0℃ 에서 20분 동안 수중NaHSO4 및 1,2-디메톡시에탄 (DME)와 같은 경수 산성(mild aqueous acidic)조건에 쪼개질 수 있다. 각각 [Just et al. (1983) Can. J. Chem. 61:712 및 Corey et al. (1986) Tetrahedron Lett. 27:2199] 를 참조. 산-촉매 가수분해에서의 사용에 적합한 다른 산의 예로서는, 제한되지는 않지만, 불산 (HF), 염산(HCl), 브롬산 (HBr), 요오드산 (HI), 질산 (HNO3), 과염소산 (HCl04), 황산 (H2SO4), 아세트산 (CH3CO2H), 탄산 (H2CO3), 인산 (H3PO4), 옥살산 (H2C204), 및 포름산 (HCOOH)을 포함한다.
두번째 가수분해 단계는 보통 염기-촉진 가수분해 단계이다. 첫번째 가수분해 단계의 에스테르 (화학식 IV)를 염기로 처리한다. 염기-촉진 가수분해에 있어서, 오르토 에스테르 관능기는 임의의 수성 염기, 예컨대 리튬 히드록시드 (LiOH), 나트륨 히드록시드 (NaOH), 칼륨 히드록시드 (KOH), 루비듐 히드록시드 (RuOH), 세슘 히드록시드 [Cs(OH)2], 스트론튬 히드록시드 [Sr(OH)2], 바륨 히드록시드 [Ba(OH)2], 암모늄 히드록시드 (NH40H), 마그네슘 히드록시드 [Mg(OH)2], 칼슘 히드록시드 [Ca(OH)2], 나트륨 아세테이트 (NaCH3CO2), 칼륨 아세테이트 (KCH3CO2), 나트륨 카르보네이트 (Na2CO3), 칼륨 카르보네이트 (K2CO3), 리튬 카르보네이트 (Li2CO3), 나트륨 포스페이트 (Na3PO4), 칼륨 포스페이트 (K3PO4), 나트륨 보레이트 (Na3B04), 칼륨 보레이트 (Li3PO4) 등으로 처리할 수 있다.
첫번째, 및 선택적인 두번째 가수분해 단계는 반응 속도를 증가시키기 위해 가열하에 수행될 수 있다.
상기 방법의 단계는 적절한 용매 내에서 수행된다. 당업자의 숙련자는 임의의 주어진 반응에 대해 적절한 임의의 용매를 결정할 수 있을 것이다. 하지만, 도 1 에 나타난 바와 같은 방법 A 및 B 와 관련하여 보통 그리고 특히, 용매는 바람직하게는 비극성 용매 또는 극성 비양성자성 용매이다. 비극성 용매의 비제한적인 예로서는 벤젠, 자일렌, 디옥산, 테트라히드로푸란 (THF), t-부틸 알콜 및 톨루엔을 포함한다. 특히 바람직한 비극성 용매로서는 톨루엔, 자일렌, 디옥산, 테트라히드로푸란, 및 t-부틸 알콜을 포함한다. 대표적인 극성 비양성자성 용매는, 여기에 제한하지는 않지만, DMSO (디메틸 술폭시드), HMTA (헥사메틸포스포아미드), DMF (디메틸포름아미드), DMA (디메틸아세트아미드), NMP (N-메틸리롤리딘)을 포함한다.
가수분해와 관련하여, 다른 수성-함유 용매뿐만 아니라, 물과 다른 용매들과의 수성 혼합물 예컨대 물과 테트라히드로푸란, 물과 1,2-디메틸에탄, 물과 디글라임이 용매로서 사용될 수 있지만, 물이 바람직한 용매이다.
선택적으로, 상기 방법은 추가로 수용성 중합체의 카르복실산을 회수하는 단계를 포함한다. 당업계에 공지된 기술이 중합체를 회수하는데 사용될 수 있으며 예를 들어, 용액으로부터 중합체를 침전시키는 것을 포함한다. 이후 상기 침전물은 수집될 수 있으며 선택적으로 여과 및/또는 건조될 수 있다. 이러한 기술 및 다른 기술들이 수용성 중합체의 카르복실산을 분리 및 회수하는데에 사용될 수 있다.
또한 상기 방법은 선택적으로 수용성 중합체의 카르복실산을 추가로 정제하는 단계를 포함한다. 하지만, 이러한 정제 과정은 일반적으로 전구체 (예를 들어, 수용성 중합체의 오르토 에스테르)를 대응하는 카르복실산으로의 상대적으로 높은 전환이 반드시 필요한 것은 아니다. 여하튼 크로마토그래피와 같은 당업계에 공지된 기술이 중합체 정제에 사용될 수 있다.
본 방법에 따라 생성된 산은 실제로 순수하며 한번의 과정으로 제조될 수 있다. 순수하다는 것은, 히드록실 또는 티올기를 함유하는 수용성 중합체의 총 함량(중량 또는 몰 기준)의 바람직하게는 약 85% 이상, 보다 바람직하게는 약 90% 이상, 보다 더 바람직하게는 약 95% 이상, 및 가장 바람직하게는 약 98% 이상이 말단 카르복실산을 가진 수용성 중합체로 전환된 것을 의미한다.
수용성 중합체의 오르토 에스테르
상기에 나타낸 바와 같이, 본 발명의 방법은 적합한 이탈기를 포함하는 오르토 에스테르의 사용을 필요로 한다. 구조적으로, 오르토 에스테르는 "분지화 탄소 원자" 를 포함한다. 상기 분지화 탄소 원자는 3 개의 산소 원자에 공유 부착된 탄소 원자이며, 이는 다시 전형적으로 각각, 예를 들어 알킬 부분에 공유 부착된다. 탄소의 4 가 성질을 고려하면, 분지화 탄소 원자는 또한 제 4 의 공유 부착을 포함한다. 알칸산을 제조하는데 사용되는 본 발명의 오르토 에스테르에 있어서, 분지화 탄소 원자의 제 4 의 공유 부착은 치환 또는 비치환 탄소쇄, 예컨대 알킬렌쇄이다. 최종적으로, 적합한 이탈기는 직접 또는 스페이서 부분을 통해, 분지화 탄소 원자에 부착되지 않은 탄소쇄 말단에서 부착된다.
적합한 이탈기를 포함하는 오르토 에스테르의 구조예를 하기에 제공한다.
[화학식 I]
Figure 112005012286413-pct00014
(식 중,
Figure 112005012286413-pct00015
는 적합한 이탈기이며;
(z) 는 1 내지 24 의 정수이고;
R1 은, 각각의 경우, 독립적으로 H 또는 알킬, 치환 알킬, 알케닐, 치환 알케닐, 알키닐, 치환 알키닐, 아릴, 및 치환 아릴로 이루어진 군으로부터 선택되는 유기 라디칼이고;
R2 는, 각각의 경우, 독립적으로 H 또는 알킬, 치환 알킬, 알케닐, 치환 알케닐, 알키닐, 치환 알키닐, 아릴, 및 치환 아릴로 이루어진 군으로부터 선택되는 유기 라디칼이고;
Figure 112005012286413-pct00016
는 오르토 에스테르 부분의 잔기를 나타낸다).
화학식 I 에 있어서, 적합한 이탈기는 부착된 탄소 원자를 떠날 수 있는 임의 원자 또는 원자군이다. 구체적으로, 적합한 이탈기는 친핵제의 접근에 의해 대체될 수 있는 것이다. 당업자는 어느 원자 또는 원자군이 적합한 이탈기로 작용할 수 있는지를 결정할 수 있다. 또한, 일상적 실험으로 어느 특정 원자 또는 원자군이 적합한 이탈기로 작용할 수 있는지 여부를 확인할 수 있다. 예를 들어, 오르토 에스테르를 포함하는 분자 상의 제안된 이탈기는 히드록실기를 갖는 수용성 중합체 단편과 오르토 에스테르를 반응시켜 시험할 수 있으며; 검출가능한 양의 수용성 중합체의 대응 오르토 에스테르가 형성된다면 제안된 이탈기는 적합한 이탈기이다.
바람직한 적합한 이탈기에는 일차인 것들 (예컨대 일차 할로) 이 포함되지만, 이차인 이탈기도 사용될 수 있다. 적합한 이탈기의 예에는 할로겐 및 술포네이트 에스테르가 포함된다. 할로겐 중에서, 브로모, 클로로, 요오도, 및 플루오로가 바람직하며, 브로모 및 클로로가 특히 바람직한 할로겐형 이탈기이다. 술포네이트 에스테르에 있어서는, 메탄술포네이트, 트리플루오로메탄술포네이트, 트리클로로메탄술포네이트, 2,2,2-트리플루오로에탄술포네이트, 2,2,2-트리클로로에탄술포네이트, 및 파라톨루엔술포네이트가 특히 바람직하지만, 당분야에 공지된 다른 술포네이트 에스테르 및 유사 구조 이탈기도 또한 사용할 수 있다.
화학식 I 와 연관된 특정 오르토 에스테르 관능부에 있어서, 임의의 오르토 에스테르 관능부가 사용될 수 있고, 본 발명은 이에 제한되지 않는다. 그러나, 오르토 에스테르 관능부의 예는 하기 구조를 포함한다:
Figure 112005012286413-pct00017
(식 중, 각각의 R4 는 알킬, 치환 알킬, 알케닐, 치환 알케닐, 알키닐, 치환 알키닐, 아릴, 치환 아릴로 이루어진 군으로부터 독립적으로 선택되는 유기 라디칼이며, 또다른 R4 또는 나머지 R4 부분들과 조합한 하나 이상의 원자는 고리 구조를 형성한다).
오르토 에스테르 관능부는 비환식, 즉 고리 구조가 없을 수 있다. 비환식인 경우, 상기 정의된 구조에서 각각의 R4 가 독립적으로 C1-6 알킬 (예컨대, 메틸, 에틸 또는 프로필) 또는 치환 C1-6 알킬인 것이 바람직하다. 또한, 오르토 에스테르 관능부는 "시클릭" 또는 "고리화" 구조의 형태일 수 있다. 본 명세서에서, 용어 "시클릭" 모노시클릭, 비시클릭, 및 폴리시클릭 구조를 포함하는 것으로 이해될 것이다. 시클릭 형에 있어서, 오르토 에스테르 관능부는 바람직하게는 약 6 내지 약 14 원자수의 치환 또는 비치환 헤테로시클릭 고리의 형태이다. 헤테로시클릭 고리에 대한 바람직한 치환기에는 C1-6 알킬, 예컨대 메틸 또는 에틸, 또는 치환 C1-6 알킬이 포함된다. 상기 바람직한 시클릭 구조의 예에는 하기 가교 헤테로시클릭 고리가 포함된다:
Figure 112005012286413-pct00018
4-메틸-2,6,7-트리옥사비시클로[2.2.2]옥타닐, ("OBO 에스테르");
Figure 112005012286413-pct00019
4-메틸-2,7,8-트리옥사비시클로[3.2.1]옥타닐, ("ABO 에스테르"); 및
Figure 112005012286413-pct00020
2,8,9-트리옥사트리시클로[3.3.1.13,7]데카닐.
당업자는 다른 오르토 에스테르 구조 (시클릭 및 비환식 둘 다) 를 포함하는 다른 시클릭 구조를 쉽게 상상할 수 있다.
화학식 I 에서 알 수 있듯이, 적합한 이탈기를 포함하는 오르토 에스테르는 하기 구조로 정의되는 (z) 탄소의 탄소쇄를 포함한다:
Figure 112005012286413-pct00021
(식 중, (z), 각각의 R1 및 각각의 R2 는 앞서 정의된 바와 같다. 그러나 바람직하게는, (z) 는 0, 2, 3, 4 또는 5 이다).
탄소쇄는 탄소 원자의 단순한, 직쇄일 수 있다. 간단한 선형 탄소쇄는 각각의 R1 및 R2 가 수소로 정의되는 것들이다. 또한, 탄소쇄는 하나 이상의 탄소-탄소 이중 및/또는 삼중 결합을 포함할 수 있다. 또한, R1 및 R2 중 하나가 수소 이외의 원자 또는 기, 예컨대 알킬로 정의되고, 모든 다른 R1 및 R2 변수가 수소인 경우, 탄소쇄는 단일 분지화될 수 있다. R1 및/또는 R2 의 여러 경우가 수소 이외의 원자 또는 원자군 (예컨대 알킬) 으로 정의되는 경우, 다중 분지화가 또한 포함된다. 그러나, 분지종에 단일 분지점만이 포함되는 것이 바람직하다. 또한, 단일 분지점이 오르토 에스테르 관능부에서 "분지화 탄소 원자" 에 대한 α (또는 이에 바로 인접한) 탄소 원자에서 일어나는 것이 바람직하다.
임의로, 스페이서 부분은 탄소쇄 및 적합한 이탈기 사이에 위치할 수 있다. 상기 스페이서 부분을 포함하는 예시적 오르토 에스테르는 하기 구조를 포함한다:
Figure 112005012286413-pct00022
(식 중,
X2 는 스페이서 부분이며,
Figure 112005012286413-pct00023
, (z), 각각의 R1, 각각의 R2, 및
Figure 112005012286413-pct00024
은 앞서 정의된 바와 같다).
적합한 이탈기를 포함하는 오르토 에스테르 내의 임의 스페이서 부분 (즉, X2) 은 이탈기로부터 (z) 원자의 탄소쇄를 분리하는 임의 원자 또는 일련의 원자이다. 상기 스페이서 부분을 구성하는 실제 원자 또는 원자들에 근거하여, 스페이서 부분은 가수분해적으로 안정하거나 또는 가수분해적으로 불안정할 수 있다. 임의의 특정 부분이 가수분해적으로 안정하거나 불안정한가의 여부는 당업자가 결정할 수 있거나 일상적 실험을 이용하여 실험적으로 결정될 수 있다. 상기 임의의 스페이서 부분 X2 는 X 와 관련하에 하기에 나타내는 스페이서 부분으로부터 선택될 수 있다. X2 가 X 또는 X' 을 포함하는 것으로 정의된 동일 구조 내에 나타나는 경우, X2 은 동일 또는 상이할 수 있다.
적합한 이탈기를 포함하는 오르토 에스테르가 (z) 원자의 탄소쇄를 포함하지만, 탄소쇄의 존재가 카르복실산을 제공하는데 필요한 것은 아님이 강조되어야 한다. 결과적으로, 알칸산 (예컨대 프로판산, 부탄산 등) 이외의 말단 카르복실산을 갖는 수용성 중합체를 원하는 경우, 탄소쇄가 생략되고, 예를 들어, 스페이서 부분 또는 다른 원자기로 대체된다.
적합한 이탈기를 갖는 오르토 에스테르는 합성적으로 제조될 수 있다. 예를 들어, 비환식 오르토 에스테르는, 예를 들어 Pinner 반응을 통해 이미노 에스테르 (또한, "알킬 이미데이트" 로 불림) 를 수득하여 제조될 수 있다. 본 접근법에 있어서, 이미노 에스테르는 니트릴 및 알콜의 혼합물에 무수 염화수소 기체를 첨가하여 형성된다. 알콜로의 이미노 에스테르의 후속 처리로 대응 오르토 에스테르가 얻어진다. 예를 들어 [Voss 등, (1983) Helv. Chim. Acta. 66: 2294] 를 참고한다.
시클릭 오르토 에스테르는 히드록시알킬옥세탄의 대응 카르복실산 에스테르로의 전환, 이어서 재배열을 통해 가교 오르토 에스테르를 산출하여 제조될 수 있다. 시클릭 오르토 에스테르를 제조하기 위한 상기 및 기타 접근법은 문헌에 기재되어 있다. 예를 들어 하기를 참고한다: [Corey 등, (1983) Tetrahedron Lett. 24 (50): 5571-5574; Wipf 등, (1999) Pure Appl. Chem. 71 (3): 415-421; 및 Greene 등, PROTECTIVE GROUPS IN ORGANIC SYNTHESIS, 3 판, pp. 437-441, John Wiley & Sons, New York, NY (1999)]. 적합한 이탈기는 오르토 에스테르의 형성 이전에 반응물 중에 이탈기를 포함시키거나, 오르토 에스테르의 형성 이후 이를 첨 가하여 오르토 에스테르 내에 도입된다.
일부 경우에 있어서, 적합한 이탈기를 포함하는 오르토 에스테르는 시판된다. 예를 들어, 시판되는 하나의 오르토 에스테르는 St. Louis, MO. 소재 Sigma-Aldrich Corporation 의 트리메틸 4-브로모오르토부티레이트이다.
하나 이상의 히드록실 또는 티올기를 갖는 수용성 중합체
하나 이상의 히드록실 또는 티올기를 갖는 임의의 수용성 중합체 (예를 들어, 각각 하나 이상의 알콕시드 이온 또는 티올레이트 이온을 갖는 수용성 중합체를 제공하기 위해) 는 본 발명에 따라 사용될 수 있으며, 본 발명은 이에 제한되지 않는다. 단 하나의 히드록실 또는 티올을 갖는 수용성 중합체를 사용할 수 있지만, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12 또는 그 초과의 히드록실 및/또는 티올 부분을 갖는 중합체를 사용할 수 있다. 유리하게는, 수-중합체 단편 상의 히드록실 또는 티올 부분의 수가 증가할 수록, 카르복실산 부분을 제공하기 위해 이용가능한 부위의 수가 증가한다. 수용성 중합체 단편과 연관된 히드록실 및/또는 티올 부분의 수의 상한치의 비제한적 예에는 500, 100, 80 및 40 이 포함된다.
수용성 중합체 단편은 반드시는 아니지만 바람직하게는, 폴리(에틸렌 글리콜) 또는 "PEG" 또는 이들의 유도체이다. 그러나, 관련 중합체가 또한 본 발명의 실시에 사용하기 적합하며, 용어 "PEG" 또는 "폴리(에틸렌 글리콜)" 의 사용은 포함을 위한 것이지 이를 배제하기 위한 것이 아님이 이해되어야 한다. 결과적으로, 용어 "PEG" 에는 알콕시 PEG, 이관능성 PEG, 포크형 PEG, 분지형 PEG, 돌출형 PEG, 또는 하기에 보다 상세히 기재될, 내부에 분해가능한 연결을 갖는 PEG 를 포 함하는, 선형, 분지형 또는 다중팔 형태 중 어느 하나인 폴리(에틸렌 글리콜) 이 포함된다.
본 발명에서 유용한 하나의 형태에 있어서, 유리 또는 비결합 PEG 는 히드록실기로 각 말단이 종결된 선형 중합체이다:
HO-CH2CH2O-(CH2CH2O)m'-CH2CH2-OH
((m') 은 전형적으로 0 내지 약 4,000, 바람직하게는 약 20 내지 약 1,000 범위이다).
상기 중합체, 알파-,오메가-디히드록실폴리(에틸렌 글리콜) 은 간단한 형태 HO-PEG-OH 로 나타낼 수 있으며, 여기서 -PEG- 기호는 하기 구조 단위를 나타낼 수 있는 것으로 이해된다:
-CH2CH2O-(CH2CH2O)m'-CH2CH2-
(여기서, (m') 은 상기 정의된 바와 같다).
본 발명에 유용한 또다른 유형의 PEG 는 메톡시-PEG-OH, 또는 간단히 mPEG 이며, 여기서 하나의 말단은 상대적으로 불활성인 메톡시기인 반면, 다른 말단은 히드록실기이다. mPEG 의 구조를 하기에 나타낸다.
CH3O-CH2CH2O-(CH2CH2O)m'-CH2CH2-OH
(여기서, (m') 은 상기에 정의된 바와 같다).
예컨대 U.S. 특허 No. 5,932,462 에 기재된 것들과 같은 다지형 또는 분지형 PEG 분자가 또한 PEG 중합체로 사용될 수 있다. 예를 들어, PEG 는 하기 구조를 가질 수 있다:
Figure 112005012286413-pct00025
(식 중,
polya 및 polyb 는 PEG 골격 (동일 또는 상이함), 예컨대 메톡시 폴리(에틸렌 글리콜) 이며;
R" 은 비반응성 부분, 예컨대 H, 메틸 또는 PEG 골격이고;
P 및 Q 는 비반응성 연결이다). 바람직한 구현예에 있어서, 분지형 PEG 중합체는 메톡시 폴리(에틸렌 글리콜) 이치환 라이신이다.
또한, PEG 는 포크형 PEG 를 포함할 수 있다. 포크형 PEG 의 예는 하기 구조로 나타낼 수 있다:
Figure 112005012286413-pct00026
(식 중, X 는 스페이서 부분이며, 각각의 Z 는 한정된 길이의 원자쇄로 CH 에 연결된 활성화 말단기이다). 국제 출원 No. PCT/US99/05333 에는 본 발명에서 사용할 수 있는 다양한 포크형 PEG 구조가 개시되어 있다 Z 관능기를 분지화 탄소 원자에 연결하는 원자쇄는 구속기로 작용하며, 예를 들어, 알킬쇄, 에테르쇄, 에스테르쇄, 아미드쇄 및 이들의 조합을 포함할 수 있다.
PEG 중합체는 PEG 쇄의 말단이 아닌 PEG 의 길이에 따라 공유 결합된 반응 기, 예컨대 카르복실을 갖는 돌출형 PEG 분자를 포함할 수 있다. 돌출형 반응기는 직접 또는 스페이서 부분, 예컨대 알킬렌기를 통해, PEG 에 부착될 수 있다.
상술된 PEG 형태에 부가하여, 중합체는 또한 임의의 상술된 중합체를 포함하는, 중합체 내에 하나 이상의 약하거나 분해가능한 연결을 가지며 제조될 수 있다. 예를 들어, PEG 는 가수분해되기 쉬운 중합체 내 에스테르 연결을 갖고 제조될 수 있다. 하기에 나타낸 바와 같이, 상기 가수분해는 더 낮은 분자량의 단편으로 중합체를 절단시킨다:
Figure 112005012286413-pct00027
중합체 골격 내에서 분해가능한 연결로 유용한 다른 가수분해적으로 분해가능한 연결에는 카르보네이트 연결; 예를 들어 아민 및 알데히드의 반응 (예컨대 [Ouchi 등, (1997) Polymer Preprints 38 (1): 582-3] 참고) 으로 생성되는 이민 연결; 예를 들어, 알콜과 포스페이트기를 반응시켜 형성되는 포스페이트 에스테르 연결; 보통 히드라지드 및 알데히드의 반응으로 형성되는 히드라존 연결; 보통 알데히드 및 알콜의 반응으로 형성되는 아세탈 연결; 예를 들어, 포르메이트 및 알콜의 반응으로 형성되는 오르토 에스테르 연결; 예컨대 중합체, 예컨대 PEG 의 말단에서 아민기 및 또다른 PEG 사슬의 카르복실기로 형성되는 아미드 연결; 예컨대 PEG 와 말단 이소시아네이트기 및 PEG 알콜의 반응으로 형성되는 우레탄 연결; 예컨대 중합체, 예컨대 PEG 의 말단에서 아민기 및 펩티드의 카르복실기에 의해 형성되는 펩티드 연결; 및 예를 들어 중합체 말단에서 포스포르아미디트기 및 올리고뉴클레오티드의 5' 히드록실기에 의해 형성되는 올리고뉴클레오티드 연결이 포함된 다.
당업자는 용어 폴리(에틸렌 글리콜) 또는 PEG 가 상기 모든 형태의 PEG 를 나타내거나 포함하는 것을 이해한다.
다수의 기타 중합체가 또한 본 발명을 위해 적합하다. 비펩티드성이고, 2 내지 약 300 개 말단을 갖는 수용성 중합체가 본 발명에서 특히 유용하다. 적합한 중합체의 예에는 하기가 포함되지만, 이에 제한되는 것은 아니다: 기타 폴리(알킬렌 글리콜), 예컨대 폴리(프로필렌 글리콜) ("PPG"), 에틸렌 글리콜 및 프로필렌 글리콜의 공중합체 등, 폴리(올레핀계 알콜), 폴리(비닐피롤리돈), 폴리(히드록시알킬메타크릴아미드), 폴리(히드록시알킬메타크릴레이트), 폴리(사카라이드), 폴리(α-히드록시산), 폴리(비닐 알콜), 폴리포스파젠, 폴리옥사졸린, 폴리(N-아크릴로일모르폴린), 예컨대 U.S. 특허 No. 5,629,384 에 기재된 것들 및 이들의 공중합체, 3원중합체 및 혼합물. 상기 중합체는 선형일 수 있거나, 또는 상기 기재된 임의 형태 (예컨대, 분지형, 포크형 등) 일 수 있다.
수용성 중합체의 겉보기 평균 분자량은 변할 수 있지만, 겉보기 평균 분자량은 전형적으로 하기 범위 중 하나 이상일 것이다: 약 100 달톤 내지 약 100,000 달톤; 약 500 달톤 내지 약 80,000 달톤; 약 1,000 달톤 내지 약 50,000 달톤; 약 2,000 달톤 내지 약 25,000 달톤; 약 5,000 달톤 내지 약 20,000 달톤. 수용성 중합체 단편의 겉보기 평균 분자량의 예에는 약 1,000 달톤, 약 5,000 달톤, 약 10,000 달톤, 약 15,000 달톤, 약 20,000 달톤, 약 25,000 달톤, 및 약 30,000 달톤이 포함된다.
본원에 기재된 PEG 및 기타 수용성 중합체는 보통 생체적합성이고 비면역원성인 것으로 간주된다. 생체적합성에 대하여는, 생체 조직과 연관되는 (예컨대 환자로의 투여) 단독 또는 또다른 물질 (예컨대 활성제) 와의 물질의 사용에 연관된 유익한 효과가 의사, 예컨대 내과 의사가 평가하여 임의의 해로운 효과를 능가하는 경우, 물질은 생체적합성으로 간주된다. 비면역원성에 대하여는, 생체 조직과 연관되는 단독 또는 또다른 물질과의 물질의 사용이 면역 반응 (예컨대 항체 형성) 을 일으키지 않거나, 면역 반응이 일어나는 경우, 상기 반응이 의사가 평가하여 임상적으로 유의미하거나 중요한 것으로 고려되지 않는 경우, 물질은 비면역원성으로 간주된다. 본원에 기재된 중합체 뿐만 아니라 본원에 기재된 수용성 중합체 및 단편과 활성제의 콘쥬게이트가 생체적합성이며 비면역원성인 것이 특히 바람직하다.
당업자는 실질적으로 수용성 중합체에 대한 상기 논의가 제한을 위한 것이 아니고 단순히 예시적이며, 상기 기재된 특성을 갖는 모든 중합체성 물질이 포함됨을 인지할 것이다. 본원에서 사용되는 용어 "수용성 중합체" 는 일반적으로 관능기, 예컨대 히드록실기, 티올기, 오르토 에스테르 관능부 등을 포함할 수 있는 전체 분자를 나타낸다. 용어 수용성 중합체 단편은 일반적으로 중합체 또는 이들의 일부가 전체 분자 구조의 한 부분인 특정 분자 구조의 논의에 사용하기 위함이다.
히드록실 또는 티올 부분을 갖는 바람직한 수용성 중합체의 예는 하기 구조를 포함한다:
POLY-(X)a--YH
(식 중, POLY 는 수용성 중합체 단편이며;
(a) 는 0 또는 1 이고;
X 는 존재하는 경우 스페이서 부분이고;
Y 는 0 또는 S 이다).
수용성 중합체 단편 (즉, "POLY") 가 히드록실 또는 티올 부분 (예컨대, 각각 CH3O-(CH2CH2O)m-H 또는 CH3O-(CH2CH2O)m-(CH2CH2S)-H) 을 포함하는 것으로 정의되는 특정 상황을 고려하면, 화학식 II 의 "YH" 부분은 예를 들어, "CH3O-(CH2CH2O)m- H-YH" 의 불합리한 해석이 아닌 "POLY" 의 히드록실 또는 티올 부분을 나타내는 것으로 이해된다. 대안적으로, POLY 가 "CH3O-(CH2CH2O)m-" 으로 정의되고, (a) 가 1 이고, X 가 "-CH2CH2-" 이고 Y 가 "-O-" 인 경우, 화학식 II 에는 CH3O-(CH2CH2O)m-H 가 포함된다. 즉, 주어진 화학식에 포함될 임의의 개별 분자에 대해 하나 이상의 방식이 존재할 수 있는 가능성이 있으므로, 해당 분자가 주어진 화학식에 포함되는지 여부를 결정하기 위해 주의를 기울여야 한다.
단일 히드록실기를 갖는 특히 바람직한 수용성 단편은 하기 구조를 포함한다:
R5-O-(CH2CH2O)m-H
[식 중, (m) 은 2 내지 4000 이고;
R5 는 말단-캡핑기, 예컨대 H 또는 알킬, 치환 알킬, 알케닐, 치환 알케닐, 알키닐, 치환 알키닐, 아릴 및 치환 아릴로 이루어진 군에서 선택되는 유기 라디칼이다]. R5 은 메틸과 같은 하급 알킬인 것이 특히 바람직하나, 당업자에게 공지된 다른 말단-캡핑기 또한 사용할 수 있다.
그러나, 본 발명의 개시를 위해, 일련의 원자가 중합체에 바로 인접하는 경우 상기 일련의 원자는 스페이서 잔기가 아니고, 단지 또다른 단량체로서, 상기한 스페이서 잔기는 중합체 사슬의 단순한 연장을 나타낸다. 예를 들어, 부분 구조 "POLY-X-" 및 POLY 가 "CH3O(CH2CH2O)m-" 으로 정의되고 (식 중, (m) 은 2 내지 4000 임), X 가 스페이서 잔기로 정의되는 경우, 상기 스페이서 잔기는 "-CH2CH2O-" 일 수 없는 바, 이는 이러한 정의가 단지 중합체의 연장만을 나타내기 때문이다. 그러나, 그러한 경우, 용인할 수 있는 스페이서 잔기는 "-CH2CH2-" 로서 정의될 수 있다.
스페이서 잔기의 예로는, 하기의 것들이 포함되나 이에 제한되지는 않는다:
Figure 112005012286413-pct00028
2 가 시클로알킬기, -O-, -S-, 아미노산, -N(R6)-, 및 임의의 상기의 것 중 2 이상의 조합물 [식 중, R6 은 H 또는 알킬, 치환 알킬, 알케닐, 치환 알케닐, 알키닐, 치환 알키닐, 아릴 및 치환 아릴로 이루어진 군에서 선택된 유기 라디칼이고, (h)는 0 내지 6, 및 (j)는 0 내지 20 이다].
기타 특정한 스페이서 잔기는 하기의 구조를 지닌다:
-C(O)-NH-(CH2)1-6-NH-C(O)-, -NH-C(O)-NH-(CH2)1-6-NH-C(O)-, 및 -O-C(O)-NH-(CH2)1-6-NH-C(O)- (식 중, 각 메틸렌에 뒤따르는 아래첨자 값은 상기 구조 내에 함유된 메틸렌의 수를 나타내는 바, 예컨대 (CH2)1-6 는 1 내지 6 개의 메틸렌을 함유한 구조를 의미한다.
본 명세서에서 제시하는 구조 내에 포함된 아미노산에 있어서, 상기 아미노산이 한 개, 두 개, 세 개 또는 그보다 많은 부위를 통해 상기 구조의 나머지와 연결되어 있다는 것을 기억해야 한다. 예를 들어, 아미노산이 상기 분자의 나머지 부분과 두 개의 공유결합에 의해 결합된 경우 스페이서 잔기가 형성될 수 있다. 또한, 아미노산이 상기 분자의 나머지와 세 개 부위를 통해 결합한 경우 분지 구조가 형성될 수 있다. 따라서, 아미노산 구조는 하나 이상의 공유 결합이 존재함으로 인하여 필연적으로 다소간 변화한다 (예를 들어, 공유 결합을 도모하기 위해 아미노산으로부터 수소 원자를 제거하는 것). 결과적으로, "아미노산" 이라 함은 다른 원자와 하나 이상의 결합을 지닌 아미노산을 포함한다. 알라닌, 아르기닌, 아스파라긴, 아스파르트산, 시스테인, 글루탐산, 글루타민, 글라이신, 히스티딘, 이소루신, 루신, 라이신, 메티오닌, 페닐알라닌, 프롤린, 세린, 트레오닌, 트립토판, 타이로신 및 발린으로 이루어진 군으로부터 아미노산을 선택할 수 있다. D 및 L 형태의 아미노산 모두를 고려한다.
수용성 중합체의 오르소 에스테르
본 발명은 오르소 에스테르 관능성을 포함하는 수용성 중합체를 제공한다. 상기하였듯이, 오르소 에스테르 관능성의 비고리(acylcic) 및 고리 형태가 모두 포함된다. 본 발명의 수용성 중합체의 고리형 오르소 에스테르의 예는 하기와 같다:
Figure 112005012286413-pct00029
Figure 112005012286413-pct00030
Figure 112005012286413-pct00031
Figure 112005012286413-pct00032
Figure 112005012286413-pct00033
[식 중, (m) 은 2 내지 4000 이고, (a) 는 0 또는 1 이고, X1 은 존재하는 경우, 스페이서 잔기이다].
물론, 오르소 에스테르 잔기를 포함하는 다른 수용성 중합체 또한 가능하며 본 발명과 일치한다.
말단 카르복실산 또는 이의 에스테르를 지닌 수용성 중합체
본 방법에 따라, 말단 카르복실산 또는 이의 에스테르를 지닌, 임의의 수의 중합체를 제조할 수 있으며, 본 발명은 이와 관련하여 제한되지 않는다. 따라서, 본 발명은 알칸산과 같은 카르복실산 및 본 명세서에서 제공한 방법에 의해 형성된 중합체의 대응하는 에스테르를 포함한다.
알칸산에 관하여, 본 발명은 하기 구조를 포함하는 알칸산을 제공한다:
[화학식 Ⅴ]
Figure 112005012286413-pct00034
[식 중,
POLY 는 수용성 중합체 단편 (segment) 이고;
(a) 는 0 또는 1 이고;
X 는 존재하는 경우, 스페이서 잔기이고;
(z) 는 1 내지 24 의 정수이고;
R1 은 각 경우에 있어서, 서로 독립적으로 H 또는 알킬, 치환 알킬, 알케닐, 치환 알케닐, 알키닐, 치환 알키닐, 아릴 및 치환 아릴로 이루어진 군에서 선택된 유기 라디칼이며;
R2 는 각 경우에 있어서, 서로 독립적으로 H 또는 알킬, 치환 알킬, 알케닐, 치환 알케닐, 알키닐, 치환 알키닐, 아릴 및 치환 아릴로 이루어진 군에서 선택된 유기 라디칼이다].
또한, 말단 카르복실산을 지닌 수용성 중합체의 에스테르를 제공한다. 예를 들어, 화학식 Ⅴ 의 카르복실산에 대응하는 에스테르는 바람직하게 하기의 구조를 갖는다:
[화학식 Ⅵ]
Figure 112005012286413-pct00035
[식 중, POLY, (a), X (존재하는 경우), (z), 및 각 R1 및 각 R2 는 상기 정의한 바와 같고,
R3 은 알킬, 치환 알킬, 알케닐, 치환 알케닐, 알키닐, 치환 알키닐, 아릴 및 치환 아릴로 이루어진 군에서 선택된 유기 라디칼이다].
말단 카르복실산 또는 이의 에스테르를 지닌 중합체를 언급하기 위하여, R3 을 H (이로써 산을 지칭함) 또는 알킬, 치환 알킬, 알케닐, 치환 알케닐, 알키닐, 치환 알키닐, 아릴 및 치환 아릴로 이루어진 군에서 선택된 유기 라디칼 (이로써 대응하는 에스테르를 지칭함) 로 편리하게 정의할 수 있다. 본 명세서에서 제공한 카르복실산 및 에스테르에는 황-치환 형태, 예컨대 -C(O)-S-R3 또한 포함된다.
임의의 주어진 카르복실산에 대하여, 대응하는 에스테르를 종래의 기술을 이용하여 형성시킬 수 있다. 예를 들어, 말단 카르복실산을 지닌 수용성 중합체를 알코올과 함께 산-촉매 축합반응시킴으로써 대응하는 에스테르를 제공할 수 있다. 이를 수행하기 위한 한 가지 접근법은 흔히 피셔(Fischer) 에스테르화 반응으로 부르는 방법을 이용하는 것이다. 목적하는 에스테르를 형성시키는 다른 기술은 당 업자에게 공지되어 있다.
또한, 말단 카르복실산을 지닌 수용성 중합체를, 당업계에 공지된 방법을 이용하여 개질시켜서 유용한 반응성 알칼산 유도체를 형성할 수 있다. 예를 들어, 카르복실산을 더 유도하여(derivatized) 할로겐화 아실, 슈도(pseudo)할로겐화물, 예컨대 아실 시아나이드, 아실 이소시아네이트, 및 아실 아지드, 중성염, 예컨대 알칼리 금속 또는 알칼리 토금속 염(예를 들어, 칼슘, 나트륨 및 바륨 염), 에스테르, 무수물, 아미드, 이미드, 히드라지드 등을 형성할 수 있다. 바람직한 구현예에서, 카르복실산을 에스테르화하여 N-숙신이미딜 에스테르, o-, m-, 또는 p-니트로페닐 에스테르, 1-벤조트리아졸릴 에스테르, 이미다졸릴 에스테르, 또는 N-설포숙신이미딜 에스테르를 형성한다. 예를 들어, 염기의 존재하에서 카르복실산을 디시클로헥실 카르보디이미드 (DCC) 또는 디이소프로필 카르보디이미드 (DIC) 와 반응시킴으로써, 카르복실산을 대응하는 N-숙신이미딜 에스테르로 전환시킬 수 있다.
그러나, 특히 바람직한 말단 카르복실산 잔기를 지닌 중합체는, 카르복실산 잔기가 알칼산의 일부를 형성하는 것이다. 이와 관련하여, 카르복실산 또는 비방향족 에스테르에서 끝나는 네 개 이상의 탄소 원자로 된 탄소 사슬(카르보닐 탄소 포함)이 바람직하다. 수용성 중합체 단편이 하나 이상의 원자를 통하여 네 개 이상의 탄소로 된 탄소 사슬 내의 원거리의 탄소(카르보닐 탄소에 대하여)와 공유 결합하는 것이 바람직하다. 또한, 상기 수용성 중합체 단편이 오로지 원자 한 개를 통해 공유 결합한 경우, 상기 원자는 O 또는 S 가 아니다. 그러한 중합체를 하기 와 같은 구조로 정의할 수 있다:
Figure 112005012286413-pct00036
[식 중,
POLY 는 수용성 중합체 단편이고;
X' 는 스페이서 잔기이고 (단, 스페이서 잔기가 오로지 한 개의 원자인 경우, 그 원자는 O 또는 S 가 아니다);
(z') 는 3 내지 21 의 정수이고;
R1 은 각 경우에 있어서, 서로 독립적으로 H 또는 알킬, 치환 알킬, 알케닐, 치환 알케닐, 알키닐, 치환 알키닐, 아릴, 및 치환 아릴로 이루어진 군에서 선택된 유기 라디칼이고;
R2 은 각 경우에 있어서, 서로 독립적으로 H 또는 알킬, 치환 알킬, 알케닐, 치환 알케닐, 알키닐, 치환 알키닐, 아릴, 및 치환 아릴로 이루어진 군에서 선택된 유기 라디칼이며;
R7 은 H 또는 알킬, 치환 알킬, 알케닐, 치환 알케닐, 알키닐 및 치환 알키닐로 이루어진 군에서 선택된 유기 라디칼이다].
바람직하게, (z') 는 3, 4 또는 5 이다. (z') 가 3 인 경우, 화학식 Ⅵa 의 중합체는 하기 구조로 이루어진다:
Figure 112005012286413-pct00037
[식 중, POLY, X', 각 R1, 각 R2 및 R7 은 상기 정의한 바와 같다].
(z') 이 4 인 경우, 화학식 Ⅵa 의 중합체는 하기 구조로 이루어진다:
Figure 112005012286413-pct00038
[식 중, POLY, X', 각 R1, 각 R2 및 R7 은 상기 정의한 바와 같다].
(z') 이 5 인 경우, 화학식 Ⅵa 의 중합체는 하기 구조로 이루어진다:
Figure 112005012286413-pct00039
[식 중, POLY, X', 각 R1, 각 R2 및 R7 은 상기 정의한 바와 같다].
각 경우에 있어서, 카르복실산이 바람직한 경우 R7 은 수소이다. 일부의 경우, R1 및 R2 에 있어서, 각 R1 및 R2 은 수소이다. 그러나, 다른 경우, 카르보닐 탄소의 α탄소에 결합한 R1 은 알킬 (예컨대, 메틸, 에틸, n-프로필, 이소프로필, n-부틸, sec-부틸, 이소부틸 및 tert-부틸) 이고, 다른 모든 R1 변수는 H 이고 모든 R2 변수는 수소이다. 당업자에 공지되어 있듯이, "카르보닐의 α탄소" 는 카르보닐 탄소와 직접 결합한 탄소 원자를 나타낸다. 예시를 위해, "카르보닐 탄소의 α탄소" 와 "카르보닐 탄소" 를 하기의 구조에 표시한다:
Figure 112005012286413-pct00040
카르보닐 탄소의 β, γ 또는 δ 탄소에 결합한 R1 이 유기 라디칼인 다른 배열도 고려한다. 또한, 두 개 이상의 R1 치환기가 유기 라디칼로 정의되어 있는 조합도 가능하다. 이와 동일한 치환을 대응하는 오르소 에스테르 중합체 및 반응물에 적용한다.
카르보닐 탄소의 α탄소가 유기 라디칼(예컨대, 메틸)을 지니는 경우, 생성되는 중합체는 키랄 중심을 포함할 수 있다. 그러나, 하나 이상의 키랄 중심을 포함한 임의의 화합물 또는 구조에 대하여 특정한 키랄성을 본 명세서에 명확하게 예시하지 않으며, 본 발명은 화합물 또는 구조의 이성질체적으로 순수한 형태 뿐만 아니라, 라세미 혼합물을 포함하는, 이의 부분입체 이성질체성 혼합물도 포함하고자 한다.
X'는 상기하였듯이 X 와 동일하나, X' 은 O 또는 S 가 아니다.
본 명세서에 개시한 카르복실산은 또한 하기 식으로 명확히 할 수 있다:
Figure 112005012286413-pct00041
[식 중,
R10 은 H 또는 알킬, 치환 알킬, 알케닐, 치환 알케닐, 알키닐, 치환 알키닐, 아릴 및 치환 아릴로 이루어진 군에서 선택된 유기 라디칼이고;
Q 는 x+y 개의 히드록실기를 함유한 다가알코올의 잔기이고;
R8 은 각 경우에 있어서, 서로 독립적으로 H 또는 알킬, 치환 알킬, 알케닐, 치환 알케닐, 알키닐, 치환 알키닐, 아릴 및 치환 아릴로 이루어진 군에서 선택된 유기 라디칼이고;
R9 는 각 경우에 있어서, 서로 독립적으로 H 또는 알킬, 치환 알킬, 알케닐, 치환 알케닐, 알키닐, 치환 알키닐, 아릴 및 치환 아릴로 이루어진 군에서 선택된 유기 라디칼이고;
(x) 는 1 내지 20, 바람직하게는 2, 3, 4, 5 또는 6 이고;
(y) 는 1 내지 20 이며;
(z) 는 1 내지 24 , 바람직하게는 4 내지 20 이다].
Q 로 대표되는 잔기에는 하기의 물질이 포함된다: 프로필렌 글리콜, 글리세린, 소르비톨, 펜타에리트리톨, 디펜타에리트리톨, 디히드록시시클로헥산, 글루코오스, 갈락토오스, 만노오스, 프럭토오스, 락토오스, 수크로오스, 아밀로오스, 및 기타 당.
두 개의 말단 카르복실산 잔기를 지닌 바람직한 중합체 ("갈라진" 구조) 의 예는 하기의 식을 포함한다:
Figure 112005012286413-pct00042
[식 중, (m) 은 2 내지 4000 이다].
그러나, 수용성 중합체 단편의 중량 평균 분자량은 바람직하게 약 5000 달톤 내지 약 40000 달톤, 더욱 바람직하게는 약 20000 달톤 내지 약 30000 달톤이고, 약 20000 달톤의 분자량이 가장 바람직하다.
일반적인 저장 조건
말단 카르복실산 또는 이의 에스테르를 지닌 중합체 및 이들 형태의 임의의 중간체 (예컨대, 수용성 중합체의 오르소 에스테르) 를 아르곤 또는 질소와 같은 불활성 대기 하에서 저장할 수 있다. 이와 같은 방식으로, 예컨대 대기 중 산소와 연관된 잠재적인 분해 과정을 완전히 막거나 감소시킬 수 있다. 일부의 경우, 산화 분해를 방지하기 위해, 부틸화 히드록실 톨루엔(BHT)과 같은 항산화제를 저장 전에 최종 생성물에 첨가할 수 있다. 또한, 물과 연관된 잠재적인 파괴 반응을 감소시키기 위해 저장 조건과 관련된 수분 양을 최소화하는 것이 바람직하다. 또한, 빛과 연관된 일정한 분해 과정을 방지하기 위하여 저장 장소를 어둡게 하는 것이 바람직하다. 따라서, 바람직한 저장 조건은 하나 이상의 하기 조건을 포함한다: 건조 아르곤 또는 기타 건조 불활성 기체 하에서의 저장; 약 -15 ℃ 미만의 온도에서의 저장; 빛을 피하여 저장; 및 적절한 양 (예컨대, 약 50 - 500 ppm) 의 BHT 와 같은 항산화제와 함께 저장.
컨쥬게이션 방법
임의로 활성화 형태인, 말단 카르복실산을 지닌 상기 중합체는 카르복실산 또는 임의의 활성화 형태와 반응하기 적합한 하나 이상의 기를 함유하는 생물학적 활성 물질 또는 표면과의 컨쥬게이션에 유용하다. 카르복실산과의 반응에 적합한 기의 예로는, 아미노기(예컨대, 1차 아민), 히드라진, 히드라지드 및 알코올이 포함된다. 종종, 말단 카르복실산 잔기를 지닌 중합체를 활성 물질 또는 표면에 직접 컨쥬게이션시킬 수 있다. 그러나, 일부의 경우, 생물학적 활성 물질 또는 표면에 대한 반응성을 강화하기 위해 카르복실산의 "활성화" 형태를 형성하는 것이 필요하다. 카르복실산을 활성화하는 방법은 당업계에 공지되어 있으며, 그 방법은, 예컨대 말단 카르복실산을 지닌 수용성 중합체를 메틸렌 클로라이드에 용해시킨 후, N-히드록시숙신이미드 및 N,N-디시클로헥실카르보이미드(DCC)를 첨가함으로써 카르복실산의 활성화된 N-숙신이미딜 에스테르 형태를 형성하는 방법을 포함한 다. 카르복실산을 활성화시키는 다른 접근법은 당업자에게 공지되어 있다.
통상적으로, 카르복실산 또는 이의 에스테르를 지닌 수용성 중합체를 활성 물질 또는 표면에 동량 (카르복실산 또는 이의 에스테르와의 반응에 적합한 기의 목적하는 개수에 대하여) 또는 과량의 몰로 첨가한다. 예를 들어, 상기 중합체를 목표 활성 물질에 약 1:1 (중합체 : 활성 물질), 1.5:1, 2:1, 3:1, 4:1, 5:1, 6:1, 8:1, 또는 10:1 의 몰비율로 첨가할 수 있다. 실질적으로 더 이상 컨쥬게이션 반응이 일어나지 않을 때까지 (이는 일반적으로 시간에 따라 반응의 진행 상황을 모니터링함으로써 결정함) 상기 반응이 진행되도록 둔다. 다양한 시점에 반응 혼합물로부터 분취량을 회수하여 반응 혼합물을 SDS-PAGE 또는 MALDI-TOF 질량 분광측정법 또는 기타 임의의 적당한 분석법으로 분석함으로써 반응의 진행 상황을 모니터링할 수 있다. 형성된 컨쥬게이트의 양 또는 잔여 비컨쥬게이트 중합체의 양과 관련하여 일단 안정기에 도달하면, 반응이 완료된 것으로 추정한다. 통상적으로, 컨쥬게이션 반응은 수 분에서 몇 시간이 걸린다 (예를 들어, 5 분 내지 24 시간 가량). 생성된 혼합 생성물로부터 과량의 반응물, 비컨쥬게이션 반응물(예컨대, 활성 물질), 원치 않는 다중-컨쥬게이션 종, 및 유리 또는 비반응 중합체를 바람직하게는(그러나 반드시 정제해야하는 것은 아님) 분리 제거한다. 그 후, 생성된 컨쥬게이트를 MALDI, 모세관 전기영동법, 겔 전기영동법, 및/또는 크로마토그래피와 같은 분석 방법을 이용하여 추가적으로로 파악할 수 있다.
특성 파악/분리
중합체-활성 물질 컨쥬게이션물에 있어서, 컨쥬게이트를 정제하여 상이한 컨 쥬게이션종(conjugated species)을 수득/단리할 수 있다. 다르게는, 또한 더 낮은 분자량(예를 들어, 20 kDalton 미만, 더욱 바람직하게는 10 kDalton 미만)에 대하여는 더욱 바람직하게, 생성된 혼합물을 정제하여 활성 물질 당 수용성 중합체 단편의 분포를 얻을 수 있다. 예를 들어, 생성 혼합물을 정제하여 활성 물질(예컨대, 단백질) 당 평균 약 5 PEG, 통상적으로는 활성 물질(예컨대, 단백질) 당 평균 약 3 PEG 를 수득할 수 있다. 최종 컨쥬게이션 반응 혼합물의 정제 기법은 몇 가지 요소, 예컨대 사용한 중합체의 분자량, 특정한 활성 물질, 목적하는 투여 계획, 및 각 컨쥬게이션물(들)의 잔여 활성 및 생체 내에서의 특성을 포함하는 요소에 따라 다를 것이다.
필요에 따라, 상이한 분자량을 지닌 컨쥬게이션물을 겔 여과 크로마토그래피를 이용하여 단리할 수 있다. 즉, 겔 여과 크로마토그래피를 이용하여 상이한 분자량 (그 차이는 본질적으로 수용성 중합체 단편의 평균 분자량에 대응한다) 을 기초로 상이한 수의 중합체-대-활성 물질의 비 (예컨대, 1-머, 2-머, 3-머 등으로서. 여기서 "1-머"는 활성 물질 당 중합체 1 개, "2-머"는 활성 물질 당 중합체 2 개 등을 가리킨다) 를 분별한다. 예를 들어, 100 kDa 단백질을 분자량이 약 20 kDa 인 PEG 알칸산과 랜덤하게 컨쥬게이션시키는 예시 반응에서, 생성된 반응 혼합물은 아마도 비개질된 단백질 (MW 100 kDa), 모노-페길화 단백질 (MW 120 kDa), 디-페길화 단백질 (MW 140 kDa) 등을 함유할 것이다. 이 접근법이 PEG 와 상이한 분자량을 지닌 다른 중합체 컨쥬게이션물 분리에 사용될 수 있지만, 이는 단백질 내에 상이한 중합체 결합 부위를 지니는 위치 이성질체(positional isomer)를 분리하는 데 는 일반적으로 효과적이지 않다. 예를 들어, 겔 여과 크로마토그래피를 사용하여 PEG 1-머, 2-머, 3-머 등의 혼합물을 서로 분리할 수 있으나, 회수한 각 PEG-머 조성물은 활성 물질 내에 상이한 반응성 아미노기 (예컨대, 라이신 잔기) 에 결합된 PEG 를 함유할 수 있다.
상기 유형의 분리 작업을 수행하기에 적합한 겔 여과 칼럼에는 Amersham Biosciences (Piscataway, NJ) 에서 시판하는 Superdex™ 및 Sephadex™ 칼럼이 포함된다. 특정한 칼럼의 선택 여부는 목적하는 분별 범위에 따라 다를 것이다. 용리는 일반적으로 적절한 완충액, 예컨대 인산염, 아세트산염 등을 이용하여 수행한다. 수합한 분획물을 몇 가지 상이한 방법, 예를 들어 (i) 단백질 함량에 대한 280 nm 에서의 광학 밀도(OD), (ii) 소 혈청 알부민(BSA) 단백질 분석, (iii) PEG 함량에 대한 요오드 시험 [Sims 등 (1980) Anal. Biochem, 107:60-63], 및 (iv) 소디움 도데실 설페이트 폴리아크릴아미드 겔 전기영동법(SDS PAGE)과 그 이후의 요오드화 바륨을 이용한 염색법으로 분석할 수 있다.
위치 이성질체의 분리는, 역상-고성능 액체 크로마토그래피(RP-HPLC) C 18 칼럼 (Amersham Biosciences 또는 Vydac) 을 이용한 역상 크로마토그래피 또는 이온 교환 칼럼, 예컨대 Amersham Biosciences 에서 시판하는 Sepharose™ 이온 교환 컬럼을 이용한 이온 교환 크로마토그래피에 의해 수행한다. 어느 접근법이든 동일한 분자량을 지닌 중합체-활성 물질 이성질체 (위치 이성질체) 분리에 사용할 수 있다.
중합체-활성제 컨쥬게이트의 저장 조건
컨쥬게이트 및 임의로 추가의 분리 단계에 이어, 컨쥬게이트 혼합물을 농축시키고, 멸균 여과하고, 일반적으로 약 -20℃ 내지 약 -80℃ 의 저온에서 저장할 수 있다. 대안적으로, 컨쥬게이트을 잔류 완충용액의 존재 또는 부재 하에 동결건조시켜, 동결건조된 파우더로서 저장할 수 있다. 일부 경우에, 예를 들어 소듐 아세테이트와 같은 컨쥬게이트에 이용되는 완충용액을 동결건조 동안에 손쉽게 제거될 수 있는 암모늄 카르보네이트 또는 암모늄 아세테이트와 같은 휘발성 완충용액으로 교환하여, 동결건조된 파우더에 잔류 완충용액이 없는 것이 바람직하다. 대안적으로, 완충용액 교환 단계는 제형물 완충용액을 사용하여 이용되며, 동결건조된 컨쥬게이트은 제형물 완충용액으로 재구성되고 궁극적으로는 포유류에 투여되기 적합한 형태일 수 있다.
활성제 및 표면
본원에 나타낸 카르복실산 또는 그것의 에스테르를 가진 수-용성 중합체는 필름, 화학 분리 및 정제 표면, 고체 지지체, 금, 티탄, 탄탈륨, 니오븀, 알루미늄, 스틸 및 이들의 산화물과 같은 금속 표면, 규소 산화물, 거대분자 (예를 들어, 단백질, 폴리펩티드 등) 및 소분자를 포함하는 다수의 실체에 공유 또는 비-공유 결합될 수 있다. 추가로, 상기 중합체는 또한 생화학 센서, 생체전기 스위치 및 게이트에 이용될 수 있다. 중합체는 또한 펩티드 합성, 중합체-코팅 표면 및 중합체 그래프트에 대한 담체로서 채용되어 친화성 분할에 대한 중합체-리간드 컨쥬게이트을 제조하고, 가교 또는 비가교 히드로겔을 제조하고, 생반응기에 대한 중합체-조인자 첨가제를 제조할 수 있다.
본원에 나타낸 바와 같이 중합체 커플링에 이용하기 위한 생물학적 활성제는 임의로 하기 중 하나 이상일 수 있다. 적합한 제는 예를 들어, 수면제 및 진정제, 심적 에너자이저, 신경안정제, 호흡약, 항경련약, 근육이완제, 항파킨슨제 (도파민 안타고니스트), 진통제, 항-염증약, 항불안약 (항불안제), 식욕억제제, 편두통 치료제, 근육수축제, 항-감염제 (항생제, 항바이러스제, 항진균제, 백신), 관절염 치료제, 항말라리아제, 진토제, 아네필렙틱스 (anepileptics), 기관지확장제, 사이토카인, 성장 인자, 항암제, 항트롬보플라스틴제, 항고혈압제, 심혈관약, 항부정맥제, 항산화제, 항천식제, 및 피임제, 교감신경흥분제, 이뇨제, 지질 조절제, 항안드로겐제, 항기생충제, 항응고제, 신생물, 항신생물, 저혈당제, 영양제 및 보충제를 포함한 호르몬제, 성장 보충제, 안티엔터리티스제 (antienteritis agent), 백신, 항체, 진단제 및 조영제로부터 선택될 수 있다.
더 바람직하게는, 활성화제는 소분자 (바람직하게는 불용성 소분자), 펩티드, 폴리펩티드, 단백질, 폴리사카라이드, 스테로이드, 뉴클레오티드, 올리고뉴클레오티드, 폴리뉴클레오티드, 지방, 전해질 등을 포함하나 여기에 제한되지 않는 다수의 구조적 분류 중 하나로 나뉠 수 있다. 바람직하게는, 여기에 기술된 바와 같은 중합체에 커플링하기 위한 활성화제는 고유의 아미노기를 가지고 있거나, 대안적으로 여기에 기술된 중합체에 컨쥬게이트하기 적합한 하나 이상의 반응성 아미노기를 포함하도록 수정된다.
공유 결합에 적합한 활성화제의 구체적인 예는 아스파라기나제, 암독소비 (DAPD), 안티드, 베카플레민, 칼시토닌 (calcitonins), 시아노비린, 데닐루킨 디프 티톡스, 적혈구조혈인자 (EPO), EPO 아고니스트 (예를 들어, 약 10 - 40 아미노산 길이 및 WO 96/40749 에 개시된 바와 같은 특이한 중심 서열을 포함하는 펩티드), 도르나제 알파, 적혈구조혈 자극 단백질 (NESP), 응고 인자, 예를 들어 인자 Ⅴ, 인자 Ⅶ, 인자 Ⅶa, 인자 Ⅷ, 인자 Ⅸ, 인자 Ⅹ, 인자 ⅩⅡ, 인자 ⅩⅢ, 폰 빌레브란트 인자 (von Willebrand Factor); 세레다제, 세레자임, 알파-글루코시다제, 콜라겐, 시클로포린, 알파 데펜신, 베타 데펜신, 엑세딘-4, 과립구 집락 자극인자 (GCSF), 혈소판형성인자 (TPO), 알파-1 프로테이나제 저해제, 엘카토닌, 과립구 대식세포 집락 자극인자 (GMCSF), 피브리노겐, 필그라스팀, 성장호르몬 인간 성장호르몬 (hGH), 성장호르몬 유리 호르몬 (GHRH), GRO-베타, GRO-베타 항체, 골형성유도단백질, 예를 들어 골형성유도단백질-2, 골형성유도단백질-6, OP-1; 산성 섬유아세포 성장인자, 염기성 섬유아세포 성장인자, CD-40 리간드, 헤파린, 인간 혈청 알부민, 저분자량 헤파린 (LMWH), 예를 들어 인터페론 알파, 인터페론 베타, 인터페론 감마, 인터페론 오메가, 인터페론 타우, 교감 인터페론과 같은 인터페론 ; 예를 들어, 인터루킨-1 수용체, 인터루킨-2, 인터루킨-2 융합 단백질, 인터루킨-1 수용체 안타고니스트, 인터루킨-3, 인터루킨-4, 인터루킨-4 수용체, 인터루킨-6, 인터루킨-8, 인터루킨-12, 인터루킨-13 수용체, 인터루킨-17 수용체와 같은 인터루킨 및 인터루킨 수용체 ; 락토페린 및 락토페린 단편, 황체호르몬 방출호르몬 (LHRH), 인슐린, 프로-인슐린, 인슐린 유사체 (예를 들어, U.S. 특허 No. 5,922,675 에서 기재된 바와 같은 모노-아실화된 인슐린), 아밀린, C-펩티드, 소마토스타틴, 옥트레오티드를 포함한 소마토스타틴 유사체, 바소프레신, 여포자극호르몬 (FSH), 독감 백신, 인슐린-형 성장인자 (IGF), 인슐린트로핀, 대식세포 집락 자극인자 (M-CSF), 플라스미노겐 활성화제, 예를 들어 알테플라제, 유로키나제, 레테플라제, 스트렙토키나제, 파미테플라제, 라노테플라제 및 테네테플라제; 신경성장인자 (NGF), 오스테오프로테게린, 혈소판-유래 성장인자, 조직성장인자, 전환성장인자-1, 혈관내피세포성장인자, 백혈병저해인자, 피부세포성장인자 (KGF), 신경아세포성장인자 (GGF), T 세포 수용체, CD 분자/항원, 종양괴사인자 (TNF), 단구화학주성단백질-1, 내피세포성장인자, 부갑상선 호르몬 (PTH), 글루카곤-형 펩티드, 소마토트로핀, 티모신 알파 1, 라스부리카제, 티모신 알파 1 Ⅱb/Ⅲa 저해체, 티모신 베타 10, 티모신 베타 9, 티모신 베타 4, 알파-1 안티트립신, 포스포디에스터라제 (PDE) 화합물, VLA-4 (very late antigen-4), VLA-4 저해제, 비스포스포네이트, 호흡기 합보체 바이러스 항체, 낭성 섬유증 막조절자 (CFTR) 유전자, 데옥시레이보뉴클레아제 (Dnase), 박테리아살해/침투성 증가단백질 (BPI), 및 항-CMV 항체를 포함하나, 이에 제한되지 않는다. 실례의 단클론 항체는 에타네르셉트 (IgG1 의 Fc 부위에 연결되어 있는 인간 75 kD TNF 수용체의 세포외 리간드-결합 부위로 이루어진 이합체 융합 단백질), 아브식시맵, 아펠리오모맵, 바실릭시맵, 다클리주맵, 인플릭시맵, 이브리투모맵 티우엑세탄, 미투모맵, 무로모맵-CD3, 요오드 131 토시투모맵 컨쥬게이트, 올리주맵, 리툭시맵, 트라스투주맵 (헤르셉틴) 및 아달리무맵을 포함한다.
공유 결합에 적합한 추가의 제제는 아데포비르, 알로세트론, 아미포스틴, 아미오다론, 아미노카프로산, 아미노히푸레이트 소듐, 아미노글루테티미드, 아미노레부린산, 아미노살리시클릭산, 암사크린, 아나그렐리드, 아나스트로졸, 아리피프라 졸, 아스파라기나제, 안트라시클린, 벡사로텐, 비칼루타미드, 블레오마이신, 부세렐린, 부술판, 카베르골린, 카페시타빈, 카르보플라틴, 카무스틴, 클로람부신, 실라스타틴 소듐, 시스플라틴, 클라드리빈, 클로드로네이트, 시클로포스파미드, 시프로테론, 시타라빈, 캄프토테신, 13-시스 레틴산, 모든 트란스 레틴산 ; 다카바진, 다크티노마이신, 다우노루비신, 데페록사민, 덱사메타손, 디클로페낙, 디에틸스틸베스트롤, 도세탁셀, 독소루비신, 두타스테리드, 에피루비신, 에스트라무스틴, 엑토포시드, 엑세메스탄, 에제티미베, 펙소페나딘, 플루다라빈, 플루드로코티손, 플루오로우라실, 플루옥시메스테론, 플루타미드, 폰다파리눅스, 풀베스트란트, 감마-히드록시부레이트, 겜시타빈, 에피네프린, L-도파, 히드록시우레아, 이다루비신, 이포스파미드, 이마티닙, 이리노테칸, 이트라코나졸, 고세렐린, 레트로졸, 루코보린, 레바미솔, 리시노프릴, 로보티록신 소듐, 로무스틴, 메클로레타민, 메드록시프로게스테론, 메게스트롤, 멜파란, 메캅토푸린, 메타라미놀 비타트레이트, 메토트렉세이트, 메토클로프라미드, 멕실레틴, 미토마이신, 미토탄, 미톡산트론, 날록손, 니코틴, 닐루타미드, 니티시논, 옥트레오티드, 옥살리플라틴, 파미드로네이트, 펜토스타틴, 필카마이신, 포피머, 프레드니손, 프로카바진, 프로클로페라진, 온단세트론, 옥살리플라틴, 랄티트렉세드, 시롤리무스, 스트렙토조신, 타크로리무스, 피메크로리무스, 타목시펜, 테가세로드, 테모졸로미드, 테니포시드, 테스토스테론, 테트라히드로카나비놀, 탈리도미드, 티오구아닌, 티오테파, 토포테칸, 트레프로스티닐, 트레티노인, 발데콕시브, 셀레콕시브, 로페콕시브, 발루비신, 빈블라스틴, 빈크리스틴, 빈데신, 비노렐빈, 보리코나졸, 돌라세트론, 그라니세트론; 포르모테 롤, 플루티카손, 루프롤리드, 미다졸람, 알프라졸람, 암포테리신 B, 포도필로톡신, 뉴클레오시드 안티바이랄, 아로일 히드라존, 수마트립탄; 예를 들어 에리스로마이신, 올레안도마이신, 트롤레안도마이신, 록시스로마이신, 클라리스로마이신, 다베르신, 아지스로마이신, 플루리스로마이신, 디리스로마이신, 조사마이신, 스피로마이신, 미데카마이신, 로라타딘, 데슬로라타딘, 루코마이신, 미오카마이신, 로키타마이신, 안다지스로마이신 및 스비놀리드 A 와 같은 마크롤리드; 예를 들어 시프로플록사신, 오플록사신, 레보플록사신, 트로바플록사신, 알라트로플록사신, 목시플록시신, 노르플록사신, 에노삭신, 그레파플록사신, 가티플록사신, 로메플록사신, 스파플록사신, 테마플록사신, 페플록사신, 아미플록사신, 플레록사신, 토수플록사신, 프루리플록사신, 이롤삭신, 파주플록사신, 클리나플록삭신 및 시타플록사신과 같은 플루오로퀴놀론; 예를 들어 겐타마이신, 네틸마이신, 파라메신, 토브라마이신, 아미카신, 카나마이신, 네오마이신 및 스트렙토마이신과 같은 아미노글루코시드, 반코마이신, 테이코플라민, 람폴라닌, 미데플라닌, 콜리스틴, 답토마이신, 그라미시딘, 콜리스티메테이트; 예를 들어 폴릭믹신 B 와 같은 폴리믹신, 카프레오마이신, 바시트라신, 페넴; 페니실린 G, 페니실린 V 와 같은 페니실리나제-센서티브 제를 포함하는 페니실린; 메치실린, 옥사실린, 클록사실린, 디클록사실린, 플록사실린, 나프실린과 같은 페니실리나제-레지스탄트 제; 암피실린, 아목시실린 및 헤타실린과 같은 그램 네거티브 미생물 활성화제, 실린 및 갈람피실린; 카르베니실린, 티카실린, 아즐로실린, 메즐로실린 및 피페라실린과 같은 안티슈도모날 페니실린; 세프포독심, 세프프로질, 세프트부텐, 세프티족심, 세프트리악손, 세팔로신, 세파피린, 세파렉신, 세프라드린, 세폭시틴, 세파만돌, 세파졸린, 세파로리딘, 세파클로, 세파드록실, 세파로글리신, 세푸록심, 세포라니드, 세포탁심, 세파트리진, 세파세트릴, 세페핌, 세픽심, 세포니시드, 세포페라존, 세포테탄, 세프메타졸, 세프타지딤, 로라카베프 및 목사락탐과 같은 세팔로스포린, 아즈트레오남과 같은 모노박탐; 및 이미페넴, 메로페넴 및 에트라페넴과 같은 카르바페넴, 펜타미딘 이세티오네이트, 알부테롤 술페이트, 리도카인, 메타프로테레놀 술페이트, 베클로메타손 디프레피오네이트, 트리암시놀론 아세트아미드, 부데소니드 아세토니드, 플루티카손, 이프라트로퓸 브로미드, 플루니솔리드, 크로몰린 소듐 및 에르고타민 타르트레이트와 같은 카르바페넴; 파클리탁셀과 같은 탁산; SN-38 및 티르포스틴을 포함하나 이에 한정되지 않는다.
여기에 기술된 바와 같이 중합체에 커플링하기 바람직한 소분자는 하나 이상의 자연적으로 발생하는 아미노기를 가진 것들이다. 상기와 같은 바람직한 분자는 아미노히푸레이트 소듐, 암포테리신 B, 독소루비신, 이미노카프론산, 아미노레불린산, 아미노살리시클릭산, 메타라미놀 비타르트레이트, 파미드로네이트 디소듐, 다우노루비신, 레보티록신 소듐, 리시노프릴, 실라스타틴 소듐, 멕실레틴, 세파렉신, 데페록사민 및 아미포스틴을 포함한다.
본원에 기술된 바와 같이 중합체에 커플링하기 바람직한 펩티드 또는 단백질은 EPO, IFN-α, IFN-β, 교감 IFN, 인자 Ⅷ, 인자 Ⅸ, GCSF, GMCSF, hGH, 인슐린, FSH 및 PTH 를 포함한다.
상기 실례의 생물학적 활성제는 적용가능한, 유사체, 아고니스트, 안타고니 스트, 저해제, 이성질체 및 그것의 약제학적으로 수용가능한 염 형태를 포함하는 것으로 여겨진다. 펩티드 및 단백질을 고려할 때, 본 발명은 합성된 것이거나, 재조합된 것이거나, 고유의 것이거나, 글리코실화 및 비-글리코실화 형태뿐만 아니라, 그것의 생물학적으로 활성인 절편을 포함하는 것으로 여겨진다.
약제학적 조성물
본 발명은 또한 약제학적 부형제와 조합된 본 명세서에서 제시된 바와 같은 컨쥬게이트를 포함하는 약제학적 제제를 포함한다. 일반적으로, 컨쥬게이트 자체는 고체 또는 액체 형태 중 어느 하나일 수 있는 적당한 약제학적 부형제와 조합될 수 있는 고체 형태(예를 들면, 충전물)의 형태일 수 있다.
예시적인 부형제로는 탄화수소류, 무기 염류, 미생물 억제제류, 산화방지제류, 계면활성제류, 완충제류, 산류, 염기류 및 그의 조합물로 이루어진 군으로부터 선택된 것을 들 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다.
당과 같은 탄화수소류, 알디톨, 알돈산, 에스테르화 당, 및/또는 당 중합체와 같은 당 유도체가 부형제로서 존재할 수 있다. 특정한 탄화수소 부형제로는 예를 들면, 프룩토스, 말토스, 갈락토스, 글루코스, D-만노스, 소르보스 등과 같은 단당류; 락토스, 수크로스, 트레할로스, 셀로비오스 등과 같은 이당류; 라피노스, 멜레지토스, 말토덱스트린, 덱스트란, 전분 등과 같은 다당류; 및 만니톨, 자일리톨, 말티톨, 락티톨, 자일리톨, 소르비톨(글루시톨), 피라노실 솔비톨, 미오이노시톨 등과 같은 알디톨류를 들 수 있다.
부형제로서 또한 시트르산, 염화나트륨, 염화 칼륨, 황산나트륨, 질산칼륨, 일염기성 인산나트륨, 이염기성 인산나트륨 및 그들의 조합물을 들 수 있다.
제제는 미생물 성장을 방지하거나, 지연시키는 미생물 억제제를 포함할 수 있다. 본 발명에 적당한 미생물 억제제의 비제한적 예로는 벤즈알코늄 클로라이드, 벤즈에토늄 클로라이드, 벤질 알콜, 세틸피리디늄 클로라이드, 클로로부탄올, 페놀, 페닐에틸 알콜, 페닐수은 니트레이트, 티머솔, 및 그의 조합물을 들 수 있다.
산화방지제 또한 제제 내에 존재할 수 있다. 산화방지제는 산화를 방지하는 데 사용됨으로써, 컨쥬게이트 또는 제제의 다른 성분의 열화를 방지할 수 있다. 본 발명에서 사용되는 적당한 산화방지제로는 예를 들면, 아스코르빌 팔미테이트, 부틸화 히드록시아니솔, 부틸화 히드록시톨루엔, 차아인산, 모노티오글리세롤, 프로필 갈레이트, 소듐 비술페이트, 소듐 포름알데히드 술폭실레이트, 소듐 메타비술피트 및 그의 조합물을 들 수 있다.
계면활성제도 부형제로서 존재할 수 있다. 예시적인 계면활성제는, "Tween 20" 및 "Tween 80" 과 같은 폴리소르베이트류, 및 F68 및 F88과 같은 플루로닉류(모두 BASF로부터 입수가능, Mount Olive, New Jersey); 소르비탄 에스테르류; 레시틴과 같은 인지질, 및 기타 포스파티딜콜린류와 같은 지질류, 포스파티딜에탄올아민(바람직하게는 리포솜 형태가 아님), 지방산 및 지방 에스테르류; 콜레스테롤과 같은 스테로이드류; 및 EDTA, 아연 및 기타 적당한 양이온과 같은 킬레이트제를 들 수 있다.
산류 또는 염기류는 제제 중에 부형제로서 존재할 수 있다. 사용할 수 있 는 산류의 비제한적인 예로는, 염산, 아세트산, 인산, 시트르산, 말산, 락트산, 포름산, 트리클로로아세트산, 질산, 과염산, 인산, 황산, 푸마르산, 및 그의 조합물로 이루어진 군에서 선택된 산류를 들 수 있다. 적당한 염기류의 예는 수산화나트륨, 아세트산나트륨, 수산화암모늄, 수산화칼륨, 아세트산 암모늄, 아세트산 칼륨, 인산나트륨, 인산칼륨, 시트르산나트륨, 포름산나트륨, 황산나트륨, 황산칼륨, 푸마르산칼륨 및 그의 조합물을 들 수 있다.
약제학적 제제는 모든 유형의 제형, 및 특히, 현탁액 및 용액 뿐 아니라, 재구성될 수 있는 분말과 같이 주사에 적합한 형태를 포함한다. 본 조성물 중의 컨쥬게이트(즉, 활성제 및 본 명세서에 기재된 중합체 사이에 형성된 컨쥬게이트)의 양은 다수의 요인에 따라 변할 수 있으나, 최적으로는 조성물이 단위 투여 용기(예를 들면, 바이알) 내에 보존된 경우 치료적으로 유효한 투여량일 수 있다. 또한, 약제학적 제제는 시린지 내에 포장될 수 있다. 치료적으로 유효한 투여량은 임상적으로 요구되는 종료점을 나타내는 양을 결정하기 위하여 컨쥬게이트의 양을 증가시키는 반복 투여에 의해 실험적으로 결정될 수 있다.
조성물 중의 개별적인 부형제의 양은 부형제의 활성 및 조성물의 구체적인 요구에 따라 변화할 수 있다. 전형적으로, 개별적인 부형제의 최적량은, 예를 들면, 다양한 양(낮은 양부터 높은 양까지)의 부형제를 함유하는 조성물을 제조하고, 안정성 및 기타 파라미터를 시험한 후, 유의한 부작용을 수반하지 않으면서 최적의 성능을 얻는 범위를 결정하는 것과 같은, 통상적인 실험을 통하여 결정한다.
그러나, 일반적으로, 부형제는 조성물 중 약 1 중량% 내지 약 99 중량%, 바 람직하게는 약 5 중량% 내지 98 중량%, 보다 바람직하게는 약 15 내지 95 중량%로 존재하고, 30 중량% 미만이 가장 바람직하다.
상기한 약제학적 부형제와 기타 부형제는 문헌 ["Remington: The Science & Practice of Pharmacy", 19th ed., Williams & Williams, (1995), the "Physician's Desk Reference", 52nd ed., Medical Economics, Montvale, NJ (1998), 및 Kibbe, A.H., Handbook of Pharmaceutical Excipients, 3rd Edition, American Pharmaceutical Association, Washington, D.C., 2000] 에 기재되어 있다.
본 발명의 약제학적 제제는, 필수적으로는, 일반적으로 주사를 통하여 투여되고, 따라서 일반적으로 투여 직전에는 액체 용액 또는 현탁액이다. 약제학적 제제는 또한 시럽, 크림, 연고, 정제, 분말 등과 같은 다른 형태를 취할 수 있다. 투여의 다른 태양으로는 또한, 폐내, 직장내, 경피내, 점막내, 구강내, 수막강내, 정맥내, 동맥내 투여 등의 형태를 들 수 있다.
상술한 바와 같이, 컨쥬게이트는 정맥내 주사에 의해, 덜 바람직하게는 점막내 또는 정맥내 주사에 의해 비경구적으로 투여될 수 있다. 비경구적 투여용으로 적당한 제형은 다른 것들 중에서 주사형 용액, 사용전에 용매와 조합하는 건조 분말, 사용하기 전에 부형제와 조합하는 건조한 불용성 조성물, 및 투여 전에 희석시키는 액체 농축물 등을 들 수 있다.
투여 방법
본 발명은 또한 컨쥬게이트에 의한 치료에 반응성인 질환 중인 환자에게 본 명세서에서 제공되는 컨쥬게이트를 투여하는 방법을 제공한다. 상기 방법은 일반적으로 주사를 통하여, 컨쥬게이트의 치료학적 유효량 (바람직하게는 약제학적 제제의 일부로서 제공되는) 을 투여하는 것을 포함한다. 투여 방법은 특정한 컨쥬게이트의 투여에 의해 치료되거나 또는 억제될 수 있는 임의의 질환을 치료하는데 사용할 수 있다. 당분야의 숙련자는 특정한 컨쥬게이트가 효과적으로 치료할 수 있는 질환을 인식하고 있다. 실제 투여량은 치료되는 질환의 심각성, 전문적인 건강 관리의 판단 및 투여되는 컨쥬게이트 뿐만 아니라 환자의 연령, 체중, 및 일반적인 조건에 따라 다양해질 수 있다. 치료학적으로 유효한 양은 당분야에 공지되어있고/거나 당분야의 참고 문헌에 기재되어 있다. 일반적으로, 치료학적 유효량은 약 0.001 mg 내지 100 mg, 바람직하게는 0.01 mg/일 내지 75 mg/일, 및 보다 바람직하게는 0.10 mg/일 내지 50 mg/일 범위이다.
주어진 컨쥬게이트(또한, 바람직하게는 약제학적 제제의 일부로서 제공되는) 의 단위 투여량은 임상의의 판단, 환자의 요구 등에 따른 다양한 투여 스케쥴로 투여될 수 있다. 구체적인 투여 스케쥴은 당분야의 숙련자에게 공지되어 있거나, 통상적인 방법을 사용하여 실험적으로 결정될 수 있다. 예시적인 투여 스케쥴은 일 5회, 일 4회, 일 3회, 일 2회, 일 1회, 주 3회, 주 2회, 주 1회, 월 2회, 월 1회, 및 그의 조합의 형태를 들 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다. 일단 임상적 종료점이 얻어지면, 조성물의 투여를 중단한다.
본 발명의 컨쥬게이트를 투여하는 하나의 장점은 개별적인 수용성 중합체 분획을 분할할 수 있다는 것이다. 이와 같은 결과는 중합체 크기 때문에 신체로부터 의 간격이 잠재적인 문제가 되는 경우에 유리하다. 최적으로는, 각 수용성 중합체 분획의 분할은 우레탄, 아미드, 카르보네이트 또는 에스테르 함유 결합과 같은 생리학적으로 분할할 수 있고/거나 효소적으로 분해가능한 결합의 사용을 통하여 이용된다. 이와 같은 방법으로 컨쥬게이트의 간격 (개별적인 수용성 중합체 분획의 분할을 통한)은 중합체 분자 크기 및 작용기 유형을 선택함으로써 조절하여 소망의 간극 특성을 제공할 수 있다. 당분야의 숙련자는 분할가능한 작용기 뿐만 아니라 중합체의 적절한 분자 크기를 결정할 수 있다. 예를 들면, 통상적인 실험을 사용하여 당분야의 숙련자는 상이한 분자량 및 분할가능한 작용기를 갖는 다양한 중합체 유도체를 먼저 제조한 후, 환자에게 중합체 유도체를 투여하고, 주기적 혈액 및/또는 소변 샘플을 취함으로써 적절한 분자 크기 및 분할가능한 작용기를 결정할 수 있다. 각 시험 컨쥬게이트에 대하여 일련의 간극 프로파일을 일단 얻으면 적당한 컨쥬게이트를 확인할 수 있다.
본 발명은 그의 바람직한 특정한 구현예와 함께 기술되었으나, 상술 내용 및 후술하는 실험은 발명을 예시하고자 하는 것이고, 발명의 범위를 제한하고자 하는 것은 아님이 이해되어져야 한다. 본 발명의 범위의 다른 면, 장점 및 변형은 본 발명의 당분야의 숙련자에게 명백할 것이다.
실험
본 발명의 실시는 달리 언급되지 않는 한, 당분야의 숙련자에게 이해되어지고, 문헌에 설명되어진 통상적인 유기 합성 등의 기술을 사용한다. 하기 실시예 에서는, 사용된 숫자(예를 들면, 양, 온도 등)에 대한 정확성을 확보하기 위하여 노력이 이루어져 있으나, 일부 실험적인 에러 및 오차가 고려되어져야 한다. 다른 언급이 없는 한, 온도는 섭씨 기준이고, 압력은 해수면 수준의 대기압 정도이다. 모든 시약은 다른 언급이 없는 한 상업적으로 입수하였다. 모든 생성된 NMR 데이터는 브루커(Billerica, MA)에 의해 제조된 300 또는 400 MHz NMR 분광계로부터 얻어졌다. "OBO 오르토 에스테르"라는 호칭은 4-메틸-2,6,7-트리옥사비시클로[2.2.2]옥타닐을 포함하는 에스테르에 해당한다.
실시예 1
3-메틸-3-히드록시메틸옥세탄의 4-브로모부티레이트 에스테르의 형성
(MW = 251.12)
3-메틸-3-히드록시메틸옥세탄 (10.2g, 0.1 mole) (Sigma-Aldrich Corporation, St. Louis, MO) 을 무수 디클로로메탄 (200 ml) 중에 용해시켰다. 이어서, 피리딘 (9.8 ml, 0. 12 moles) 을 용액에 가하였다. 그후, 용액을 0 ℃로 빙냉하고, 무수 디클로로메탄 (50 ml) 중에 용해된 4-브로모부티릴 클로라이드 (18.5g, 0.1 mole) (Sigma Aldrich Corporation, St. Louis, MO) 를 20분에 걸쳐 적하하였다. 혼합물을 아르곤 분위기 하에서 밤새 교반하였다. 다음으로, 반응 혼합물을 수세하고, 무수 황산마그네슘 상에서 건조하였다. 이어서, 용매를 감압 하에 증류시켰다.
Figure 112005012286413-pct00043
실시예 2
1-(3-브로모프로필)-4-메틸-2,6,7-트리옥사비시클로[2,2,2]옥탄의 형성
(MW = 251.12)
실시예 1의 생성물 (조 3-메틸-3-히드록시메틸옥세탄의 4-브로모부티레이트 에스테르, 20.1g, 0.08 moles) 을 무수 디클로로메탄 (100ml) 중에 용해시키고, 용액을 0℃로 냉각시키고, 삼불화붕소 디에틸 에테레이트 (2.5 ml, 0.022 moles) 를 가하였다. 이어서, 혼합물을 0℃에서 4 시간 동안 교반하였다. 트리에틸아민 (12 ml) 을 가하고, 혼합물을 15분 동안 교반하고, 용매를 감압하에 증류 제거시켰다. 조 생성물을 에틸 에테르 (180 ml) 중에 용해시킨 후, 용액을 여과하여 고체 불순물을 제거하였다. 다음으로, 에테르를 증류 제거시키고, 생성물을 감압하에 증류하였다.(kugelrohr, 110-115 ℃, 0.05 mm Hg).
Figure 112005012286413-pct00044
실시예 3
중합 반응에 유용한 PEG-부탄산 전구체의 합성
무수 에틸렌 글리콜 (120 g, 1.93 moles), t-부탄올 중의 칼륨 t-부톡시드의 1.0M 용액 (70 ml, 0.070 moles), 및 실시예 2 의 산물 [1-(3-브로모프로필)-4-메틸-2,6,7-트리옥사비시클로[2,2,2]옥탄 (15 g, 0.060 moles)] 을 아르곤 분위기 하 에 70 ℃에서 밤새 교반하였다. 실온으로 냉각한 후, 반응 혼합물을 600 ml 증류수에 가하였다. 생성물을 디클로로메탄 (150 ml, 125 ml 및 125 ml)으로 3회 추출하였다. 수집된 추출물을 무수 황산마그네슘으로 건조시키고, 용매를 감압하에 증발 제거시켰다. 이어서, 생성물 (화합물 1)을 진공 증류시켰다 (kugelrohr, t = 120-130 ℃, 0.05 mm Hg).
Figure 112005012286413-pct00045
도식적으로는, 반응은 하기와 같이 나타내어질 수 있다:
Figure 112005012286413-pct00046
실시예 4
중합 반응에 유용한 PEG-프로판온산 전구체의 합성
t-부틸 아크릴레이트 (130 g, 1.01 mole) 을 무수 에틸렌 글리콜 (62 g, 1.0 mole), 테트라부틸암모늄 브로마이드 (9.6 g) 및 KOH (분말, 2.2 g)의 혼합물에 3시간에 걸쳐 적가하고, 아르곤 분위기 하에 실온에서 밤새 교반하였다. 휘발성 생성물을 감압 하에 증발 제거시키고 (회전 증발기, 60 ℃), 혼합물을 250 ml 디클로로메탄 중에 용해시켰다. 용액을 250 ml 증류수로 세척시키고, 무수 황산마그네슘으로 건조시키고, 용매를 감압 하에 증발 제거시켰다. 이어서, 생성물 (화합물 2)을 진공 증류시켰다 (kugelrohr, t = 95-100 ℃, 0.05 mm Hg).
Figure 112005012286413-pct00047
도식적으로, 반응은 하기와 같이 나타내어질 수 있다:
Figure 112005012286413-pct00048
화합물 2 (36.6 g, 0.19 moles), 피리딘 (52 ml, 0.64 moles), 아세트산 무수물 (52 ml, 0.55 moles) 및 디메틸아미노피리딘 (DMAP, 1.0 g) 의 혼합물을 실온에서 밤새 교반하였다. 이어서, 휘발성 생성물을 감압 하에 증발 제거시키고(회전 증발기, t = 65 ℃), 생성물 (화합물 3)을 진공 증류시켰다 (kugelrohr, 100-110 ℃, 0.05 mm Hg).
Figure 112005012286413-pct00049
도식적으로, 반응은 하기와 같이 나타내어질 수 있다:
Figure 112005012286413-pct00050
화합물 3 (30.0 g, 0. 19 moles)에, 트리플루오로아세트산 (40 ml) 을 가하고, 용액을 실온에서 1시간 동안 교반하였다. 이어서, 휘발성 생성물을 감압 하에 증발 제거시키고 (회전증발기, t = 60 ℃), 생성물을 400 ml 디클로로메탄 중에 용해시켰다. 용액을 5% NaCl 용액으로 2회 세척하고, 무수 황산마그네슘으로 건 조시키고, 용매를 감압 하에 증발 제거시켜 화합물 4를 얻었다. 수율 19.1 g.
Figure 112005012286413-pct00051
도식적으로, 반응은 하기와 같이 나타내어질 수 있다:
Figure 112005012286413-pct00052
무수 디클로로메탄 (500ml) 중의 화합물 4 (19.1 g, 0.108 moles), 3-메틸 -3-히드록시옥세탄 (17.6 g, 0.172 moles), 1-히드록시벤조트리아졸 (HOBt, 1.6 g), 및 DMAP (3.6 g)를, 1,3 디시클로헥실카르보디이미드 (DCC, 디클로로메탄 중 1.0M 용액, 114 ml, 0.114 moles) 을 0℃에서 가하고, 혼합물을 실온에서 밤새 교반하였다. 이어서, 혼합물을 여과하여 침전된 1,3 디시클로헥실우레아를 제거하고, 용액을 250 ml 5% H3PO4로 세척하였다. 다음으로, 디클로로메탄을 감압 하에 증발 제거시키고(회전 증발기), 생성물(화합물 5)을 진공 증발시켰다 (kugelrohr, 125-135 ℃, 0.05 mm Hg).
Figure 112005012286413-pct00053
도식적으로, 반응은 하기와 같이 나타내어질 수 있다:
Figure 112005012286413-pct00054
이어서, 화합물 5 (15.0 g, 0.08 moles) 를 무수 디클로로메탄 (75 ml) 중에 용해시키고, 용액을 0 ℃으로 냉각시키고, 삼불화 디에틸 에테레이트 (1.65 ml)를 가하였다. 이어서, 혼합물을 0 ℃에서 3시간 동안 교반하였다. 트리에틸아민 (7.5 ml) 을 가하고, 혼합물을 10분 동안 교반하고, 용매를 감압 하에 증발 제거시켰다. 조 생성물 (화합물 6)을 에틸 에테르 (150 ml) 중에 용해시키고, 용액을 여과하여 고체 불순물을 제거시켰다. 이어서, 에테르를 증발 제거시켰다.
Figure 112005012286413-pct00055
도식적으로, 반응은 하기와 같이 나타내어질 수 있다:
Figure 112005012286413-pct00056
화합물 6 (12 g), 에틸 알콜 (80 ml), 및 50% 수산화칼륨 수용액 (8 g) 의 혼합물을 실온에서 40 분 동안 교반하였다. 이어서, 용매를 감압하에 증발 제거시켰다(회전 증발기). 조 생성물을 400 ml 디클로로메탄 중에 용해시키고, 용액을 5% 염화나트륨 수용액으로 세척하였다. 다음으로, 용액을 무수 MgSO4로 건조하 고, 용매를 감압 하에 증발 제거시켜 (회전 증발기), 8.0 g 무색의 액체 생성물을 수득하였다 (화합물 7).
Figure 112005012286413-pct00057
도식적으로, 상기 반응은 하기와 같이 나타낼 수 있다.
Figure 112005012286413-pct00058
실시예 5
중합 개시제로서 화합물 1을 사용하여
PEG (3,500 Da) -α-하이드록시-ω-부탄산, OBO 오르토 에스테르의 형성
화합물 1 (0.564 g, 0.00243 몰), 테트라하이드로푸란 (THF, 200 ml), 및 포타슘 나프탈렌 0.3 몰/L-테트라하이드로푸란 용액 (10 ml, 0.00300 몰)을 유리 반응기에 첨가하고 3 분 동안 아르곤 분위기에서 교반하였다. 산화에틸렌 (8.8 g, 0.20 몰)을 상기 용액에 첨가하고 상기 반응 혼합물을 44 시간 동안 실온에서 교반하였다. 다음, 상기 혼합물을 아르곤으로 퍼지하고 0.1 M 인산 완충액 (pH = 8, 100 ml)을 첨가하였다. 상기 THF 층을 분리하여 제거하였다. 나프탈렌을 에틸 에테르 추출에 의해 상기 용액으로부터 제거하였다. 이어서 상기 생성물을 디클로로메탄 (3 x 50 ml)으로 추출하였다. 상기 추출물을 무수 황산나트륨으로 건조시키고 그 용매를 감압 하에서 증류하였다.
Figure 112005012286413-pct00059
실시예 6
PEG (3,500 Da) -α-하이드록시-ω-부탄산의 형성
상기 실시예 5의 생성물(즉, PEG(3,500 Da)-α-하이드록시-ω-부탄산, OBO 오르토 에스테르, 7.0 g)을 증류수(100 ml)에 용해하였다. 5% 인산을 사용하여 상기 용액의 pH를 2로 조정하고 실온에서 15 분 동안 교반하였다. 다음, 1 M 수산화나트륨을 첨가함으로써 상기 pH를 12로 재조정하고, 1 M 수산화나트륨의 주기적 첨가에 의해 pH를 12로 유지하면서 상기 용액을 2 시간 동안 교반하였다. 이어서, 상기용액의 pH를 5% 인산을 사용하여 3으로 조정한 후, 상기 생성물을 디클로로메탄으로 추출하였다. 상기 추출물을 무수 황산마그네슘으로 건조시키고 에틸 에테르에 첨가하였다. 상기 침전된 생성물을 여과하고 감압 하에서 건조시켰다.
Figure 112005012286413-pct00060
실시예 7
mPEG (3,500 Da) -부탄산, OBO 오르토 에스테르의 형성
상기 실시예 5의 생성물 (즉, PEG(3,500 Da)-α-하이드록시-ω-부탄산, OBO 오르토 에스테르, 7.0 g, 0.002 몰), 톨루엔 (100 ml), tert-부탄올 중 포타슘 tert-부톡사이드 1.0 M 용액 (10 ml, 0.01 몰), 및 메틸 p-톨루엔설포네이트 (1.49 g, 0.008 몰)의 혼합물을 45℃에서 하룻밤 동안 교반하였다. 그 용매를 감압 하 (회전증발기) 에서 증류 제거하였다. 상기 미정제 생성물을 디클로로메탄에 용해하고 차가운 에틸 에테르에 첨가하였다. 상기 침전된 생성물을 여과하고 감압 하에서 건조시켰다.
수율 6.2 g.
Figure 112005012286413-pct00061
실시예 8
mPEG (3,500 Da) -부탄산의 형성
상기 실시예 7의 생성물 (mPEG(3,500 Da)-부탄산, OBO 오르토 에스테르, 6.0 g)을 증류수에 (60 ml)에 용해하였다. 상기 용액의 pH를 5% 인산을 사용하여 2로 조정하고, 상기 용액을 실온에서 15 분 동안 교반하였다. 다음, 1 M 수산화나트륨을 첨가함으로써 상기 pH 를 12로 재조정하였고, 상기 용액을 2 시간 동안 교반하였다. 1 M 수산화나트륨의 주기적 첨가에 의해 pH를 12로 유지하였다. pH를 12로 유지하면서 2 시간 동안 교반한 후, 상기 pH를 5% 인산을 사용하여 3으로 조정하고, 그 생성물을 디클로로메탄으로 추출하였다. 이어서, 상기 추출물을 무수 황산마그네슘으로 건조시키고 에틸 에테르에 첨가하였다. 상기 침전된 생성물을 여과하고 감압 하에서 건조시켰다.
Figure 112005012286413-pct00062
실시예 9
중합 개시제로서 화합물 7을 사용한
PEG (5,000 Da) -α-하이드록시-ω-프로판산, OBO 오르토 에스테르의 형성
화합물 7 (0.53 g, 0.00243 몰), 테트라하이드로푸란 (THF, 200 ml), 및 포타슘 나프탈렌 0.3 몰/L-테트라하이드로푸란 용액 (10 ml, 0.00300 몰)을 유리 반응기에 첨가하고 3 분 동안 아르곤 분위기에서 교반하였다. 산화에틸렌 (12.2 g, 0.277 몰)을 상기 용액에 첨가하고 그 반응 혼합물을 44 시간 동안 실온에서 교반하였다. 다음, 상기 혼합물을 아르곤으로 퍼지하고 0.1 M 인산 완충액 (pH = 8, 100 ml)을 첨가하였다. 상기 THF 층을 분리한 후 제거하였다. 나프탈렌을 에틸 에테르 추출에 의해 상기 용액으로부터 제거하였다. 이어서 상기 생성물을 디클로로메탄 (3 x 50 ml)으로 추출하였다. 상기 추출물을 무수 황산나트륨으로 건조시키고 그 용매를 감압 하에서 증류 제거하였다.
Figure 112005012286413-pct00063
실시예 10
mPEG (5,000 Da) -α-하이드록시-ω-프로판산의 형성
상기 실시예 9의 생성물 (PEG(5,000 Da)-α-하이드록시-ω-프로판산, OBO 오르 토 에스테르, 5.0 g)을 증류수에 (75 ml) 에 용해하였다. 상기 용액의 pH를 5% 인산을 사용하여 2로 조정하고, 상기 용액을 실온에서 15 분 동안 교반하였다. 다음, 1 M 수산화나트륨을 첨가함으로써 상기 pH를 12로 재조정하고 그 용액을 2 시간 동안 교반하였다. 상기 용액의 pH는 1 M 수산화나트륨의 주기적 첨가에 의해 pH 12로 유지되었다. pH를 12로 유지하면서 2 시간 동안 교반한 후, 상기 용액의 pH를 5% 인산을 사용하여 3으로 조정한 후, 상기 생성물을 디클로로메탄으로 추출하였다. 이어서, 상기 추출물을 무수 황산마그네슘으로 건조시키고 에틸 에테르에 첨가하였다. 상기 침전된 생성물을 여과하고 감압 하에서 건조시켰다.
Figure 112005012286413-pct00064
실시예 11
mPEG (5,000 Da) -프로판산, OBO 오르토 에스테르의 형성
상기 실시예 9의 생성물 (PEG(5,000 Da)-α-하이드록시-ω-프로판산, OBO 오르토 에스테르, 4.0 g, 0.0008 몰), 톨루엔 (50 ml), tert-부탄올 중 포타슘 tert-부톡사이드 1.0 M 용액 (8 ml, 0.008 몰), 및 메틸 p-톨루엔설포네이트 (1.49 g, 0.008 몰)의 혼합물을 50℃에서 하룻밤 동안 교반하였다. 다음, 그 용매를 감압 하 (회전증발기)에서 증류하였다. 이어서, 상기 미정제 생성물을 디클로로메탄에 용해하고 차가운 에틸 에테르에 첨가하였다. 상기 침전된 생성물을 여과하고 감압 하에서 건조시켰다.
수율 3.6 g.
Figure 112005012286413-pct00065
실시예 12
mPEG (5,000 Da) -프로판산의 형성
실시예 11의 생성물 (mPEG(5,000 Da)-프로판산, OBO 오르토 에스테르, 6.0 g)을 증류수에 (60 ml)에 용해하였다. 상기 용액의 pH를 5% 인산을 사용하여 2로 조정하고, 상기 용액을 실온에서 15 분 동안 교반하였다. 다음, 1 M 수산화나트륨을 첨가함으로써 상기 pH를 12로 재조정하고, 상기 용액을 2 시간 동안 교반하였다. 1 M 수산화나트륨의 주기적 첨가에 의해 pH를 12로 유지하였다. pH를 12로 유지하면서 2 시간 동안 교반한 후, 상기 pH를 5% 인산을 사용하여 3으로 조정한 후, 상기 생성물을 디클로로메탄으로 추출하였다. 상기 추출물을 무수 황산마그네슘으로 건조시키고 에틸 에테르에 첨가하였다. 상기 침전된 생성물을 여과하고 감압 하에서 건조시켰다. 수율 5.6 g. NMR (d6-DMSO): 2.43 ppm (t, -CH2 -COO-, 2H), 3.24 ppm (s, CH30-, 3H), 3.51 ppm (s, PEG 골격).
실시예 13
mPEG (20,000 Da) -부탄산의 형성
톨루엔 (30 ml) 중 mPEG(20,000 Da) (2.0g, 0.0001 몰) (NOF Corporation) 용액을, 톨루엔 15 ml를 증류 제거함으로써 공비 건조시켰다. tert-부탄올 중 포타슘 tert-부톡사이드 1.0 M 용액 (0.80 ml, 0.0008000 몰) 및 상기 실시예 2의 생성물 [1-(3-브로모프로필)-4-메틸-2,6,7-트리옥사비시클로[2,2,2]옥탄, 0.15g, 0.0005973 몰]을 첨가하고 상기 혼합물을 아르곤 분위기 하 70℃에서 하룻밤 동안 교반하였다. 그 용매를 감압 하에서 증류 제거하고 그 잔류물을 증류수에 (40 ml)에 용해하였다. 상기 용액의 pH를 5% 인산을 사용하여 2로 조정하고, 상기 용액을 실온에서 15 분 동안 교반하였다. 다음, 1 M 수산화나트륨을 사용하여 상기 pH를 12로 재조정하고, 1 M 수산화나트륨의 주기적 첨가에 의해 pH를 12로 유지하면서 상기 용액을 2 시간 동안 교반하였다. 그 후, 상기 용액의 pH를 5% 인산을 사용하여 3으로 조정하고, 상기 생성물을 디클로로메탄으로 추출하였다. 상기 추출물을 무수 황산마그네슘으로 건조시키고 에틸 에테르에 첨가하였다. 상기 침전된 생성물을 여과하고 감압 하에서 건조시켰다.
Figure 112005012286413-pct00066
실시예 14
3-메틸-3-하이드록시메틸옥세탄의 4-브로모헥사노에이트 에스테르의 형성
(MW = 251.12)
3-메틸-3-하이드록시메틸옥세탄 (20.5g, 0.201 몰)을 무수 디클로로메탄 (250 ml)에 용해하고 피리딘 (20.0 ml, 0.12 몰)을 첨가하였다. 상기 용액을 0 ℃로 냉각하고 무수 디클로로메탄 (50 ml) 에 용해된 4-브로모헥사노일 클로라이드 (42.7g, 0.200 몰)를 20 분 동안 적가하였다. 그 후, 상기 혼합물을 아르곤분위기에서 하룻반 동안 교반하였다. 다음, 상기 반응 혼합물을 물로 세척하고 무수 황산마그네슘으로 건조시켰다. 그 후, 상기 용매를 감압 하에서 증류 제거하였다.
Figure 112005012286413-pct00067
실시예 15
1-(3-브로모펜틸)-4-메틸-2,6,7-트리옥사비시클로[2,2,2]옥탄의 형성
상기 실시예 14의 생성물 (미정제 3-메틸-3-하이드록시메틸옥세탄의 4-브로모헥사노에이트 에스테르, 20.1g, 0.08 몰)을 무수 디클로로메탄 (100 ml)에 용해하고, 상기 용액을 0℃로 냉각하고, 붕소 트리플루오라이드 디에틸 에테레이트(2.5 ml, 0.022 몰)를 첨가하였다. 이어서, 상기 혼합물을 0℃에서 4 시간 동안 교반 하였다. 트리에틸아민 (12 ml)을 첨가하고, 상기 혼합을 15 분 동안 교반한 후, 상기 용매를 감압 하에서 증류 제거하였다. 이어서, 상기 미정제 생성물을 에틸 에테르 (180 ml)에 용해시키고 상기 용액을 여과하여 고체 불순물을 제거하였다. 다음, 에테르를 증류 제거하고 상기 생성물을 감압 하에서 증류하였다 (kugelrohr, 110-115℃, 0.05 mmHg).
수율 15.0g.
Figure 112005012286413-pct00068
실시예 16
mPEQ (2,000 Da) -헥산산의 형성
톨루엔 (30 ml) 중 mPEG(2,00O Da) (2.0g, 0.0010 몰) (NOF Corporation) 용액을, 15 ml 톨루엔을 증류 제거함으로써 공비 건조시켰다. tert-부탄올 중 포타슘 tert-부톡사이드 1.0 M 용액 (0.60 ml, 0.0006000 몰) 및 상기 실시예 15의 생성물 [1-(3-브로모펜틸)-4-메틸-2,6,7-트리옥사비시클로[2,2,2]옥탄, 0.15g, 0.0005973 몰]을 첨가하고 상기 혼합물을 아르곤 분위기 하 70℃에서 하룻밤 동안 교반하였다. 이어서, 상기 용매를 감압 하에서 증류 제거하고 그 잔류물을 증류수 (40 ml)에 용해하였다. 상기 용액의 pH를 5% 인산을 사용하여 2로 조정하고, 상기 용액을 실온에서 15 분 동안 교반하였다. 다음, 1 M 수산화나트륨을 사용하여 상기 pH를 12로 재조정하고 상기 용액의 pH를 1 M 수산화나트륨의 주기적 첨가에 의해 pH를 12로 유지하면서 상기 용액을 2 시간 동안 교반하였다. 상기 용액의 pH를 5% 인산을 사용하여 3으로 조정하고, 상기 생성물을 디클로로메탄으로 추출하였다. 이어서, 상기 추출물을 무수 황산마그네슘으로 건조시키고 에틸 에테르에 첨가하였다. 상기 침전된 생성물을 여과하고 감압 하에서 건조시켰다.
Figure 112005012286413-pct00069
실시예 17
mPEQ (5,000 Da) -O-CH[CH 2 O(CH 2 ) 3 COOH] 2 의 형성
톨루엔 (30 ml) 중 mPEQ(5,000 Da)-O-CH[CH2O(CH2)3COOH]2 (2.0g, 0.0004 몰) (미국 특허출원 US 2001/0011115에 기술된 방법에 따라 mPEG(5,000 Da)-메실레이트 및 1,3-디벤질옥시-2-프로판올로부터 제조됨) 용액을, 15 ml 톨루엔을 증류 제거함으로써 공비 건조시켰다. tert-부탄올 중 포타슘 tert-부톡사이드 1.0 M 용액 (2.4 ml, 0.0024 몰) 및 1-(3-브로모프로필)-4-메틸-2,6,7-트리옥사비시클로[2,2,2]옥탄 (0.60 g, 0.0024 몰) (실시예 2에 기술된 바와 같이 제조됨)을 첨가하고 상기 혼합물을 아르곤 분위기 하 70℃에서 하룻밤 동안 교반하였다. 상기 용매를 감압 하에서 증류 제거하고 그 잔류물을 증류수 (30 ml)에 용해하였다. 상기 용액의 pH를 5% 인산을 사용하여 2로 조정하고, 상기 용액을 실온에서 15 분 동안 교반하였다. 다음, 1 M 수산화나트륨을 첨가함으로써 상기 pH를 12로 재조정하고 1 M 수산화나트륨의 주기적 첨가에 의해 pH를 12로 유지하면서 상기 용액을 1.5 시간 동안 교반하였다. 그 후, 5% 인산을 사용하여 상기 용액의 pH를 3으로 조정하고, 상기 생성물을 디클로로메탄으로 추출하였다. 이어서, 상기 추출물을 무수 황산마그네슘으로 건조시키고 에틸 에테르에 첨가하였다. 상기 침전물을 여과하고 감압 하에서 건조시켰다.
Figure 112005012286413-pct00070
실시예 18
mPEQ (5,000 Da) -부탄산의 형성
톨루엔 (20 ml) 중 mPEG(5,000 Da) (2.0g, 0.0004 몰) (NOF Corporation) 용액을, 감압 하에서 용매를 증류 제거함으로써 공비 건조시켰다. 그 건조된 물질을 15 ml 무수 톨루엔에 용해하였다. tert-부탄올 중 포타슘 tert-부톡사이드 1.0 M 용액 (1.2 ml, 0.0012 몰) 및 트리메틸 4-브로모오르토부티레이트 (Sigma-Aldrich, 0.25g, 0.0011 몰)를 첨가하고 상기 혼합물을 아르곤 분위기 하 70℃에서 하룻밤 동안 교반하였다. 상기 용매를 감압 하에서 증류 제거하고 그 잔류물을 증류수 (40 ml)에 용해하였다. 상기 용액의 pH를 5% 인산을 사용하여 2로 조정하고, 상기 용액을 실온에서 15 분 동안 교반하였다. 다음, 1 M 수산화나트륨을 사용하여 상기 pH를 12로 재조정하고 1 M 수산화나트륨의 주기적 첨가에 의해 pH를 12로 유지하면서 상기 용액을 2 시간 동안 교반하였다. 5% 인산을 사용하여 상기 용액의 pH를 3으로 조정하고, 상기 생성물을 디클로로메탄으로 추출하였다. 상기 추출물을 무수 황산마그네슘으로 건조시키고 에틸 에테르에 첨가하였다. 상기 침전된 생성물을 여과하고 감압 하에서 건조시켰다.
Figure 112005012286413-pct00071
실시예 19
mPEG-숙신이미딜 부탄노에이트의 형성
상기 실시예 18의 생성물 (mPEG(5,000 Da)-부탄산)을 염화메틸렌에 용해하여 용액을 형성하였다. 이어서, N-하이드록시숙신이미드 및 N,N-디시클로헥실카르보이미드를 2 ml 염화메틸렌에 용해하여 상기 용액에 첨가한 후, 이를 하룻밤 동안, 교반하였다. 다음, 상기 혼합물을 여과하고 그 여액을 진공 하에서 농축하였다. 상기 산물을 이소프로판올에 첨가함으로써 상기 생성을 침전시킨 후 여과에 의해 수합하여 진공 하에서 건조시켰다. 상기 생성물은 하기와 같이 표시된다:
Figure 112005012286413-pct00072
실시예 20
PEG화 라이소자임의 형성
라이소자임은 공액 반응에 유용한 단백질 모델로서 역할을 한다.
결과적으로, 다른 활성제 단백질들이 상기 실시예에서 라이소자임에 대하여 치환될 수 있다. 50 ml의 pH 6.5 완충액 (50 mM 인산나트륨/50 mM NaCl) 중 라이소자임 용액 (4 ml, 3 mg/ml)을 mPEG(5,000 Da)-부탄산의 N-숙신이미딜 에스테르 (상기 실시예 19의 생성물, m PEG-숙신이미딜 부탄노에이트) 20 mg 에 첨가하였다. 상기 반응의 진행을 모세관 전기영동법 (capillary electrophoresis)에 의해 6 시간의 과정 동안 관찰하여 상기 반응을 관찰하였다. 6 시간 후, 모세관 전기영동은 PEG화 라이소자임의 증거를 나타낸다.
실시예 21
PEG화 라이소자임의 형성
라이소자임은 공액 반응에 유용한 단백질 모델로서 역할을 한다.
결과적으로, 다른 활성제 단백질들이 상기 실시예에서 라이소자임에 대하여 대체될 수 있다.
상기 실시예 18의 생성물 (mPEG(5,000 Da)-부탄산)을 실온에서 20 ml의 염화메틸렌에 용해하여 용액을 형성하였다. 그 후, 상기 용액을 0℃에서 1,3-디이소프로필카보디이미드, 4-디메틸아미노피리딘 및 라이소자임으로 처리하였다. 그 후, 상기 용액을 수 시간 후 실온으로 가온하고 실온에서 약 16 시간 동안 유지하였다. 그 후, 상기 반응 혼합물을 염산으로 세척하고, 건조 및 증발시켜 공액 생성물을 수득하였다.

Claims (85)

  1. 하나 이상의 알콕시드 이온 또는 티올레이트 이온을 가진 수용성 중합체 단편 및 적합한 이탈기를 포함하여 이루어지는 오르토 에스테르를 반응시키는 단계를 포함하는, 수용성 중합체의 오르토 에스테르의 제조 방법.
  2. 제 1 항에 있어서, 상기 수용성 중합체 단편이 하나 이상의 알콕시드 이온을 가지며, 중합 반응을 통해 제조되는 방법.
  3. 제 1 항에 있어서, 상기 하나 이상의 알콕시드 이온 또는 티올레이트 이온을 가진 수용성 중합체 단편이 하나 이상의 히드록실 부분 또는 티올 부분을 가진 수용성 중합체 단편을 적합한 염기와 조합함으로써 제조되는 방법.
  4. 제 3 항에 있어서, 상기 적합한 염기가 나트륨, 칼륨, 나트륨 수소화물, 칼륨 수소화물, 나트륨 메톡시드, 칼륨 메톡시드, 나트륨 tert-부톡시드 및 칼륨 tert-부톡시드로 이루어진 군으로부터 선택되는 방법.
  5. 제 1 항에 있어서, 적합한 이탈기를 포함하여 이루어지는 오르토 에스테르가 하기의 구조를 포함하는 방법:
    Figure 112005012286413-pct00073
    [식 중,
    Figure 112005012286413-pct00074
    는 적합한 이탈기이며;
    (z) 는 1 내지 24 의 정수이며;
    R1 은, 각각의 경우, 독립적으로 H 또는 알킬, 치환 알킬, 알케닐, 치환 알케닐, 알키닐, 치환 알키닐, 아릴 및 치환 아릴로 이루어지는 군으로부터 선택되는 유기 라디칼이며;
    R2 는, 각각의 경우, 독립적으로 H 또는 알킬, 치환 알킬, 알케닐, 치환 알케닐, 알키닐, 치환 알키닐, 아릴 및 치환 아릴로 이루어지는 군으로부터 선택되는 유기 라디칼이며;
    Figure 112005012286413-pct00075
    는 오르토 에스테르 부분의 잔기를 나타낸다].
  6. 제 5 항에 있어서, 상기 적합한 이탈기는 할로겐 및 술포네이트 에스테르로 이루어진 군으로부터 선택되는 방법.
  7. 제 5 항에 있어서, 상기 적합한 이탈기는 브로모, 클로로 및 요오도로 이루 어지는 군으로부터 선택되는 방법.
  8. 제 5 항에 있어서, 상기 적합한 이탈기는 메탄술포네이트, 트리플루오로메탄술포네이트, 트리클로로메탄술포네이트, 2,2,2-트리플루오로에탄술포네이트, 2,2,2-트리클로로에탄술포네이트 및 파라-톨루엔술포네이트로 이루어진 군으로부터 선택되는 방법.
  9. 제 5 항에 있어서, 상기
    Figure 112005012286413-pct00076
    부분이 하기 구조를 포함하여 이루어지는 방법:
    Figure 112005012286413-pct00077
    [식 중, 각각의 R4 는 알킬, 치환 알킬, 알케닐, 치환 알케닐, 알키닐, 치환 알키닐, 아릴 및 치환 아릴로 이루어지는 군으로부터 독립적으로 선택되는 유기 라디칼이다].
  10. 제 5 항에 있어서, 상기
    Figure 112005012286413-pct00078
    부분이 환형 구조의 형태인 방법.
  11. 제 10 항에 있어서, 상기
    Figure 112005012286413-pct00079
    부분이
    Figure 112005012286413-pct00080
    로 이루어진 군으로부터 선택되는 방법.
  12. 제 5 항에 있어서, 적합한 이탈기를 포함하여 이루어지는 상기 오르토 에스테르가 하기의 구조를 포함하여 이루어지는 방법:
    Figure 112005012286413-pct00081
    [식 중,
    Figure 112005012286413-pct00082
    는 적합한 이탈기이며;
    X1 는 스페이서 부분이며;
    (z) 는 1 내지 24 의 정수이며;
    R1 은, 각각의 경우, 독립적으로 H 또는 알킬, 치환 알킬, 알케닐, 치환 알케닐, 알키닐, 치환 알키닐, 아릴 및 치환 아릴로 이루어지는 군으로부터 선택되는 유기 라디칼이며;
    R2 는, 각각의 경우, 독립적으로 H 또는 알킬, 치환 알킬, 알케닐, 치환 알케닐, 알키닐, 치환 알키닐, 아릴 및 치환 아릴로 이루어지는 군으로부터 선택되는 유기 라디칼이며;
    Figure 112005012286413-pct00083
    는 오르토 에스테르 부분의 잔기를 나타낸다].
  13. 제 5 항에 있어서, 적합한 이탈기를 포함하여 이루어지는 상기 오르토 에스테르 부분이, 오르토 에스테르 부분을 가진 개시제 분자 상에서 수행되는 중합 반응을 통해 제조되는 방법.
  14. 제 1 항에 있어서, 하나 이상의 알콕시드 이온 또는 티올레이트 이온을 가진 상기 수용성 중합체 단편이 하기의 구조를 포함하여 이루어지는 방법:
    Figure 112005012286413-pct00084
    [식 중, POLY 는 수용성 중합체 단편이며;
    (a) 는 0 또는 1 이며;
    X 는, 존재하는 경우, 스페이서 부분이며;
    Y 는 0 또는 S 이다].
  15. 제 14 항에 있어서, 하나 이상의 알콕시드 이온 또는 티올레이트를 가진 상 기 수용성 중합체 단편이 하기 구조를 포함하여 이루어지는 방법:
    Figure 112005012286413-pct00085
    [식 중, (m) 은 2 내지 4000 이며;
    Y 는 0 또는 S 이며;
    R5 는 H 또는 알킬, 치환 알킬, 알케닐, 치환 알케닐, 알키닐, 치환 알키닐, 아릴 및 치환 아릴로 이루어진 군으로부터 선택되는 유기 라디칼이다].
  16. 제 3 항에 있어서, 하나 이상의 히드록실기 또는 티올기를 가진 상기 수용성 중합체 단편이 하기 구조를 포함하여 이루어지는 방법:
    POLY-(X) a -YH
    [식 중, POLY 는 수용성 중합체 단편이며;
    (a) 는 0 또는 1 이며;
    X 는, 존재하는 경우, 스페이서 부분이며;
    Y 는 0 또는 S 이다].
  17. 제 16 항에 있어서, 상기 수용성 중합체 단편이 1 개의 히드록실기를 가지며, 하기의 구조를 포함하여 이루어지는 방법:
    R 5 -O-(CH 2 CH 2 O) m -H
    [식 중:
    (m) 은 2 내지 4000 이며;
    R5 은 H 또는 알킬, 치환 알킬, 알케닐, 치환 알케닐, 알키닐, 치환 알키닐, 아릴 및 치환 아릴로 이루어지는 군으로부터 선택되는 유기 라디칼이다].
  18. 제 17 항에 있어서, 1 개의 히드록실기를 가진 상기 수용성 중합체 단편이 하기의 구조를 포함하여 이루어지는 방법:
    H 3 C-O-(CH 2 CH 2 O) m -H
    [식 중, (m) 은 2 내지 4000 이다].
  19. 하기 단계를 포함하는 수용성 중합체의 카르복실산 제조 방법:
    (a) 하나 이상의 알콕시드 이온 또는 티올레이트 이온을 가진 수용성 중합체 단편과 적합한 이탈기를 포함하여 이루어지는 오르토 에스테르를 반응시켜 수용성 중합체의 오르토 에스테르를 제조하는 단계; 및
    (b) 단계 (a) 에서 제조한 수용성 중합체의 오르토 에스테르를 하나 이상의 가수분해 단계에 적용하여 수용성 중합체의 상응하는 카르복실산을 제공하는 단계.
  20. 제 19 항에 있어서, 상기 하나 이상의 알콕시드 이온 또는 티올레이트 이온을 가진 수용성 중합체를, 하나 이상의 히드록실 또는 티올 부분을 가진 수용성 중 합체 단편 및 적합한 염기를 조합하여 제조하는 방법.
  21. 제 19 항에 있어서, 상기 수용성 중합체의 카르복실산을 회수하는 단계를 추가로 포함하는 방법.
  22. 제 19 항에 있어서, 상기 수용성 중합체의 카르복실산을 정제하는 단계를 추가로 포함하는 방법.
  23. 제 19 항에 있어서, 상기 수용성 중합체의 오르토 에스테르의 수용성 중합체의 카르복실산으로의 전환율이 약 85% 이상인 방법.
  24. 제 19 항에 있어서, 상기 하나 이상의 가수분해 단계가 2 개의 가수분해 단계를 포함하는 방법.
  25. 제 24 항에 있어서, 상기 2 개의 가수분해 단계가 초기 산 가수분해 단계에 이은 염기 가수분해 단계를 포함하는 방법.
  26. 삭제
  27. 삭제
  28. 하기 구조를 포함하여 이루어지는 중합체:
    Figure 112005012286413-pct00086
    [식 중:
    POLY 는 수용성 중합체 단편이며;
    (a) 는 0 또는 1 이며;
    X 는, 존재한다면, 스페이서 부분이며;
    (z) 는 1 내지 24 의 정수이며;
    R1 는, 각각의 경우, 독립적으로 H 또는 알킬, 치환 알킬, 알케닐, 치환 알케닐, 알키닐, 치환 알키닐, 아릴 및 치환 아릴로 이루어진 군으로부터 선택되는 유기 라디칼이며;
    R2 는, 각각의 경우, 독립적으로 H 또는 알킬, 치환 알킬, 알케닐, 치환 알케닐, 알키닐, 치환 알키닐, 아릴 및 치환 아릴로 이루어지는 군으로부터 선택되는 유기 라디칼이며;
    Figure 112005012286413-pct00087
    은 오르토 에스테르 부분의 잔기이다].
  29. 제 28 항에 있어서, (z) 는 3 이고, 상기 중합체가 하기 구조를 포함하여 이 루어지는 중합체:
    Figure 112005012286413-pct00088
    [식 중, POLY, X, (a), 각각의 R1, 각각의 R2 및
    Figure 112005012286413-pct00089
    는 상기 정의된 바와 같다].
  30. 삭제
  31. 삭제
  32. 제 28 항에 있어서, (z) 이 4 이며, 상기 중합체가 하기 구조를 포함하여 이루어지는 방법:
    Figure 112005012286413-pct00090
    [식 중, POLY, X, (a), 각각의 R1, 각각의 R2 및
    Figure 112005012286413-pct00091
    는 상기 정의된 바와 같다].
  33. 삭제
  34. 삭제
  35. 제 28 항에 있어서, (z) 가 5 이며, 상기 중합체가 하기 구조를 포함하여 이루어지는 중합체:
    Figure 112005012286413-pct00092
    [식 중, POLY, X, (a), 각각의 R1, 각각의 R2 및
    Figure 112005012286413-pct00093
    은 상기 정의된 바와 같다].
  36. 삭제
  37. 제 29 항, 제 32 항 또는 제 35 항 중 어느 한 항에 있어서, 오르토 에스테르 부분에서의 탄소에 대한 탄소 알파에 결합된 R1 이 알킬이며, 모든 기타 R1 변수는 H 이며, 모든 R2 변수는 H 인 중합체.
  38. 삭제
  39. 삭제
  40. 삭제
  41. 삭제
  42. 삭제
  43. 삭제
  44. 삭제
  45. 삭제
  46. 삭제
  47. 삭제
  48. 삭제
  49. 제 28 항에 있어서, (a) 가 0 인 중합체.
  50. 제 28 항에 있어서, (a) 가 1 인 중합체.
  51. 제 50 항에 있어서, X 가:
    Figure 112005012286413-pct00094
    2 가 시클로알킬기, 아미노기, -N(R6)- 로 이루어지는 군, 및 상기 언급된 임의의 2 가지 이상의 조합으로부터 독립적으로 선택되는 중합체로서, R6 은 H 또는 알킬, 치환 알킬, 알케닐, 치환 알케닐, 알키닐, 치환 알키닐, 아릴 및 치환 아릴로 이루어 지는 군으로부터 선택되는 유기 라디칼이며, (h) 는 0 내지 6 이며, (j) 는 0 내지 20 인 중합체.
  52. 제 28 항에 있어서, 상기
    Figure 112010014320937-pct00095
    부분이 제 9 항 내지 제 11 항 중 어느 한 항에서 정의된 것인 중합체.
  53. 삭제
  54. 삭제
  55. 제 28 항에 있어서, 하기의 구조를 포함하여 이루어지는 중합체:
    Figure 112005012286413-pct00100
    [식 중, POLY, 각각의 X, 각각의 (a), 각각의 R1, 각각의 R2 및 각각의
    Figure 112005012286413-pct00101
    가 상기 기재된 바와 같다].
  56. 제 28 항에 있어서, 하기로 이루어진 군으로부터 선택되는 중합체:
    Figure 112005012286413-pct00102
    Figure 112005012286413-pct00103
    Figure 112005012286413-pct00104
    Figure 112005012286413-pct00105
    Figure 112005012286413-pct00106
    [식 중, (m) 은 2 내지 4000 이며, (a) 는 0 또는 1 이며, X1 은, 존재하는 경우, 스페이서 부분이다].
  57. 삭제
  58. 삭제
  59. 삭제
  60. 삭제
  61. 삭제
  62. 삭제
  63. 삭제
  64. 삭제
  65. 삭제
  66. 삭제
  67. 삭제
  68. 삭제
  69. 삭제
  70. 삭제
  71. 삭제
  72. 삭제
  73. 삭제
  74. 삭제
  75. 삭제
  76. 삭제
  77. 삭제
  78. 삭제
  79. 삭제
  80. 삭제
  81. 삭제
  82. 삭제
  83. 삭제
  84. 삭제
  85. 삭제
KR1020057003986A 2002-09-09 2003-09-09 말단 카르복실산을 가진 수용성 중합체 유도체의 제조 방법 KR100967334B1 (ko)

Applications Claiming Priority (2)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US40934802P 2002-09-09 2002-09-09
US60/409,348 2002-09-09

Publications (2)

Publication Number Publication Date
KR20050057276A KR20050057276A (ko) 2005-06-16
KR100967334B1 true KR100967334B1 (ko) 2010-07-05

Family

ID=31978747

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
KR1020057003986A KR100967334B1 (ko) 2002-09-09 2003-09-09 말단 카르복실산을 가진 수용성 중합체 유도체의 제조 방법

Country Status (11)

Country Link
US (5) US7569214B2 (ko)
EP (1) EP1537163B1 (ko)
JP (1) JP4959133B2 (ko)
KR (1) KR100967334B1 (ko)
AT (1) ATE412684T1 (ko)
AU (1) AU2003270555B2 (ko)
CA (1) CA2497980C (ko)
DE (1) DE60324435D1 (ko)
ES (1) ES2315526T3 (ko)
MX (1) MXPA05002632A (ko)
WO (1) WO2004022629A2 (ko)

Families Citing this family (33)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
EP2319518A1 (en) * 2002-02-04 2011-05-11 ALFAMA-Investigacao e Desenvolvimento de Produtos Farmaceuticos Lda. Use of CO-releasing compounds for the manufacture of a medicament for the treatment of inflammatory diseases
ES2315526T3 (es) * 2002-09-09 2009-04-01 Nektar Therapeutics Al, Corporation Metodo para preparar derivados polimericos solubles en agua que llevan un acido carboxilico terminal.
HUE058897T2 (hu) 2003-02-26 2022-09-28 Nektar Therapeutics Polimer VIII-as faktor egység konjugátumok
PT1656410E (pt) * 2003-07-22 2010-06-11 Nektar Therapeutics Processo para preparação de polímeros funcionalizados a partir de álcoois poliméricos
JP4920593B2 (ja) * 2004-10-25 2012-04-18 インテザイン テクノロジーズ， インコーポレイテッド ヘテロ二官能性ポリ（エチレングリコール）およびそれらの使用
EP2412744B1 (en) 2005-07-18 2014-01-22 Nektar Therapeutics Method for preparing branched functionalised polymers using branched polyol cores
JP5096363B2 (ja) 2005-12-16 2012-12-12 ネクター セラピューティックス Ｇｌｐ−１のポリマ複合体
CA2650035C (en) 2006-04-27 2015-02-03 Intezyne Technologies, Inc. Poly (ethylene glycol) containing chemically disparate endgroups
US20100196516A1 (en) * 2007-04-24 2010-08-05 ALFAMA-Investigacao e Desenvolvimento de produtos Farmaceuticos, Lda Treatment of infections by carbon monoxide
CA2691443C (en) * 2007-06-21 2015-10-27 Arthur Schwartz Phenyl ester side chains to increase polymer resorptivity
CA2732508C (en) 2008-08-11 2016-03-15 Nektar Therapeutics Multi-arm polymeric alkanoate conjugates
EP2600901B1 (en) 2010-08-06 2019-03-27 ModernaTX, Inc. A pharmaceutical formulation comprising engineered nucleic acids and medical use thereof
ES2737960T3 (es) 2010-10-01 2020-01-17 Modernatx Inc Nucleósidos, nucleótidos y ácidos nucleicos modificados y sus usos
US10894087B2 (en) 2010-12-22 2021-01-19 Nektar Therapeutics Multi-arm polymeric prodrug conjugates of cabazitaxel-based compounds
US20130331443A1 (en) 2010-12-22 2013-12-12 Nektar Therapeutics Multi-arm polymeric prodrug conjugates of taxane-based compounds
AU2012236099A1 (en) 2011-03-31 2013-10-03 Moderna Therapeutics, Inc. Delivery and formulation of engineered nucleic acids
ES2656237T3 (es) 2011-04-19 2018-02-26 Alfama, Inc. Moléculas liberadoras de monóxido de carbono y usos de las mismas
JP6134710B2 (ja) 2011-07-21 2017-05-24 アルファーマ インコーポレイテッドＡｌｆａｍａ，Ｉｎｃ． 一酸化ルテニウム放出分子およびその使用
US9464124B2 (en) 2011-09-12 2016-10-11 Moderna Therapeutics, Inc. Engineered nucleic acids and methods of use thereof
EP3682905B1 (en) 2011-10-03 2021-12-01 ModernaTX, Inc. Modified nucleosides, nucleotides, and nucleic acids, and uses thereof
EP2791160B1 (en) 2011-12-16 2022-03-02 ModernaTX, Inc. Modified mrna compositions
US9572897B2 (en) 2012-04-02 2017-02-21 Modernatx, Inc. Modified polynucleotides for the production of cytoplasmic and cytoskeletal proteins
US9283287B2 (en) 2012-04-02 2016-03-15 Moderna Therapeutics, Inc. Modified polynucleotides for the production of nuclear proteins
AU2013243948A1 (en) 2012-04-02 2014-10-30 Moderna Therapeutics, Inc. Modified polynucleotides for the production of proteins associated with human disease
US9303079B2 (en) 2012-04-02 2016-04-05 Moderna Therapeutics, Inc. Modified polynucleotides for the production of cytoplasmic and cytoskeletal proteins
EP4074834A1 (en) 2012-11-26 2022-10-19 ModernaTX, Inc. Terminally modified rna
US8980864B2 (en) 2013-03-15 2015-03-17 Moderna Therapeutics, Inc. Compositions and methods of altering cholesterol levels
CA2926218A1 (en) 2013-10-03 2015-04-09 Moderna Therapeutics, Inc. Polynucleotides encoding low density lipoprotein receptor
PL3207130T3 (pl) 2014-10-14 2020-02-28 Halozyme, Inc. Kompozycje deaminazy adenozyny 2 (ada2), jej warianty i sposoby ich zastosowania
JP6693096B2 (ja) 2015-11-20 2020-05-13 日油株式会社 末端カルボキシ基を有するポリエチレングリコールの製造方法
US10342797B2 (en) * 2016-03-13 2019-07-09 LivePet, LLC Solubility of therapeutic agents
JP6935059B2 (ja) 2017-03-30 2021-09-15 日油株式会社 カルボキシル基を一つ有するポリエチレングリコールの精製方法
US20220185957A1 (en) * 2019-03-29 2022-06-16 Nof Corporation Method for producing terminal carboxyl group-containing polyethylene glycol and method for producing activated polyethylene glycol

Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO1997003106A1 (en) 1995-07-07 1997-01-30 Shearwater Polymers, Inc. Poly(ethylene glycol) and related polymers monosubstituted with propionic or butanoic acids and functional derivatives thereof for biotechnical applications
US20010021763A1 (en) 1996-09-26 2001-09-13 Shearwater Corporation Soluble, degradable poly (ethylene glycol) derivatives for controllable release of bound molecules into solution
US20020064546A1 (en) 1996-09-13 2002-05-30 J. Milton Harris Degradable poly(ethylene glycol) hydrogels with controlled half-life and precursors therefor

Family Cites Families (28)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US4093709A (en) * 1975-01-28 1978-06-06 Alza Corporation Drug delivery devices manufactured from poly(orthoesters) and poly(orthocarbonates)
US4079038A (en) * 1976-03-05 1978-03-14 Alza Corporation Poly(carbonates)
DE2631656C2 (de) * 1976-07-14 1983-02-10 Boehringer Mannheim Gmbh, 6800 Mannheim Verwendung eines Hydroxysuccinimidoester-Derivats zur Bindung von biologisch aktiven Proteinen aneinander und/oder an flüssige oder feste Trägerstoffe
EP0206448B1 (en) * 1985-06-19 1990-11-14 Ajinomoto Co., Inc. Hemoglobin combined with a poly(alkylene oxide)
US4943626A (en) * 1988-07-29 1990-07-24 The Dow Chemical Company Primary polyether active hydrogen compounds which are prepared from linked, protectively initiated polyalkyleneoxides
US4957998A (en) * 1988-08-22 1990-09-18 Pharmaceutical Delivery Systems, Inc. Polymers containing acetal, carboxy-acetal, ortho ester and carboxyortho ester linkages
US5162430A (en) * 1988-11-21 1992-11-10 Collagen Corporation Collagen-polymer conjugates
US5157075A (en) * 1990-05-02 1992-10-20 Taenaka Mining Co., Ltd. Modified melanin
US5483008A (en) * 1992-02-07 1996-01-09 Research Development Corporation Of Japan Polyether having heterofunctional groups at both ends, process for the preparation thereof and polymerization initiator therefor
JP3236087B2 (ja) * 1992-10-26 2001-12-04 株式会社トクヤマ 重合性磁性流体製造用界面活性剤
US5256819A (en) * 1992-12-24 1993-10-26 Shell Oil Company Preparation of polyoxyalkylene-alpha,omega-dicarboxylic acids
DE4314627A1 (de) * 1993-05-04 1994-11-10 Bayer Ag Verfahren zur Herstellung von Ethercarbonsäuren
US5824701A (en) * 1993-10-20 1998-10-20 Enzon, Inc. Taxane-based prodrugs
US5965566A (en) * 1993-10-20 1999-10-12 Enzon, Inc. High molecular weight polymer-based prodrugs
US5840900A (en) * 1993-10-20 1998-11-24 Enzon, Inc. High molecular weight polymer-based prodrugs
US5605976A (en) * 1995-05-15 1997-02-25 Enzon, Inc. Method of preparing polyalkylene oxide carboxylic acids
US5446090A (en) * 1993-11-12 1995-08-29 Shearwater Polymers, Inc. Isolatable, water soluble, and hydrolytically stable active sulfones of poly(ethylene glycol) and related polymers for modification of surfaces and molecules
US5634971A (en) * 1995-10-25 1997-06-03 Petrolite Corporation Process for dispersing pigments with polyoxyalkylated ethers
ATE226450T1 (de) 1996-03-05 2002-11-15 Robert Gurny Gepufferte orthoesterpolymere enthaltende arzneimittel
US5763538A (en) * 1996-10-28 1998-06-09 E. I. Du Pont De Nemours And Company Process for making an oriented polyester article having improved hydrolytic stability
US6011042A (en) * 1997-10-10 2000-01-04 Enzon, Inc. Acyl polymeric derivatives of aromatic hydroxyl-containing compounds
SE513181C2 (sv) 1997-12-19 2000-07-24 Akzo Nobel Nv En ortoesterbaserad tensid, dess tillverkning och användning
US5939453A (en) 1998-06-04 1999-08-17 Advanced Polymer Systems, Inc. PEG-POE, PEG-POE-PEG, and POE-PEG-POE block copolymers
AU781839B2 (en) 1999-12-22 2005-06-16 Nektar Therapeutics Sterically hindered derivatives of water soluble polymers
KR100948532B1 (ko) 2001-11-07 2010-03-23 넥타르 테라퓨틱스 분지형 중합체 및 그의 공액체
DE10228103A1 (de) 2002-06-24 2004-01-15 Bayer Cropscience Ag Fungizide Wirkstoffkombinationen
BR0312863B1 (pt) 2002-07-24 2013-02-05 derivados de aldeÍdo de polietileno glicol e processo de produÇço dos mesmos.
ES2315526T3 (es) 2002-09-09 2009-04-01 Nektar Therapeutics Al, Corporation Metodo para preparar derivados polimericos solubles en agua que llevan un acido carboxilico terminal.

Patent Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO1997003106A1 (en) 1995-07-07 1997-01-30 Shearwater Polymers, Inc. Poly(ethylene glycol) and related polymers monosubstituted with propionic or butanoic acids and functional derivatives thereof for biotechnical applications
US20020064546A1 (en) 1996-09-13 2002-05-30 J. Milton Harris Degradable poly(ethylene glycol) hydrogels with controlled half-life and precursors therefor
US20010021763A1 (en) 1996-09-26 2001-09-13 Shearwater Corporation Soluble, degradable poly (ethylene glycol) derivatives for controllable release of bound molecules into solution

Also Published As

Publication number Publication date
WO2004022629A3 (en) 2004-04-08
AU2003270555A1 (en) 2004-03-29
EP1537163A2 (en) 2005-06-08
US8435504B2 (en) 2013-05-07
JP4959133B2 (ja) 2012-06-20
US20130231490A1 (en) 2013-09-05
JP2005538226A (ja) 2005-12-15
US20120209027A1 (en) 2012-08-16
US8182801B2 (en) 2012-05-22
CA2497980A1 (en) 2004-03-18
WO2004022629A2 (en) 2004-03-18
KR20050057276A (ko) 2005-06-16
DE60324435D1 (de) 2008-12-11
US9045494B2 (en) 2015-06-02
US7569214B2 (en) 2009-08-04
CA2497980C (en) 2011-06-21
US20090264600A1 (en) 2009-10-22
US8784791B2 (en) 2014-07-22
MXPA05002632A (es) 2005-09-20
ATE412684T1 (de) 2008-11-15
US20050036978A1 (en) 2005-02-17
ES2315526T3 (es) 2009-04-01
US20140296541A1 (en) 2014-10-02
EP1537163B1 (en) 2008-10-29
AU2003270555B2 (en) 2009-01-29

Similar Documents

Publication Publication Date Title
KR100967334B1 (ko) 말단 카르복실산을 가진 수용성 중합체 유도체의 제조 방법
KR100974843B1 (ko) 수용성 중합체 알카날
KR101031206B1 (ko) 말레암산 중합체 유도체 및 이의 바이오컨쥬게이트
JP4490290B2 (ja) 加水分解安定性マレイミド末端ポリマー
KR101128320B1 (ko) 아미도카르보네이트 연결기를 갖는 ｐｅｇ 유도체
JP4490413B2 (ja) チオール選択的水溶性ポリマー誘導体
KR101090784B1 (ko) 케톤 또는 관련 관능기를 함유하는 중합체성 시약
KR101157007B1 (ko) 카르복시산 작용기화 중합체 제조 방법
KR101320936B1 (ko) 안정화된 중합체성 티올 시약
US9308273B2 (en) Polymer derivatives comprising an acetal or ketal branching point

Legal Events

Date Code Title Description
A201 Request for examination
E902 Notification of reason for refusal
N231 Notification of change of applicant
E701 Decision to grant or registration of patent right
GRNT Written decision to grant
FPAY Annual fee payment

Payment date: 20130531

Year of fee payment: 4

FPAY Annual fee payment

Payment date: 20140529

Year of fee payment: 5

FPAY Annual fee payment

Payment date: 20160330

Year of fee payment: 7

FPAY Annual fee payment

Payment date: 20180329

Year of fee payment: 9

FPAY Annual fee payment

Payment date: 20190327

Year of fee payment: 10