KR100940133B1 - 지각 추출물을 함유하는 당뇨병 치료 조성물 및 이를유효성분으로 하는 건강보조식품 - Google Patents
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Abstract
본 발명은 지각 추출물을 함유하는 당뇨병 치료 조성물과 이를 유효성분으로 하는 건강보조식품 및 그 제조방법에 관한 것으로서, 지각을 포함한 당뇨병 치료를 위한 약학적 조성물, 식품 조성물 및 지각을 열수 추출 또는 유기용매 추출하는 것을 특징으로 하는 당뇨병 치료제 제조방법에 관한 것이다.
지각, 당뇨병
Description
도 1 은 제대정맥내피세포를 배양하여 각 그룹의 세포생존율을 MTT방법을 이용하여 측정한 결과를 보인다. X축의 그룹 Ⅰ은 정상 세포 대조군, Ⅱ는 정상 세포에 지각 처리를 한 것, Ⅲ은 정상 세포에 상엽 처리를 한 것, IV는 정상 세포에 상엽과 지각을 처리한 것, V는 스트렙토조토신 처리를 한 대조군, VI은 스트렙토조토신에 지각을 처리한 것, VII은 스트렙토조토신에 상엽을 처리한 것, VIII은 스트렙토조토신과 상엽과 지각의 혼합물처리를 한 것이다.
도 2 는 당뇨병 유발 쥐의 체중변화에 대한 지각의 영향을 보인다. X축의 그룹 Ⅰ은 정상 쥐 대조군, Ⅱ는 정상 쥐에 지각 처리를 한 것, Ⅲ는 정상 쥐에 상엽 처리를 한 것, IV는 정상 쥐에 상엽과 지각을 처리한 것, V는 스트렙토조토신에 의해 당뇨가 유발된 대조군, VI은 당뇨유발 쥐에 지각을 처리한 것, VII는 당뇨유발 쥐에 상엽을 처리한 것, VIII은 당뇨유발 쥐에 상엽과 지각의 혼합물처리를 한 것을 나타낸 것이다.
도 3 은 당뇨병 유발 쥐의 혈당량 변화에 대한 지각의 영향을 보인다.
도 4 는 당뇨병의 증상인 다식, 다음현상 개선에 지각이 미치는 영향을 보인다. X축의 그룹화는 도 2와 같다.
도 5는 당뇨병의 증상인 다뇨 현상의 개선에 지각이 미치는 영향을 보인다.
본 발명은 당뇨병치료용 조성물과 건강보조식품에 관한 것으로, 보다 상세하게는 지각을 포함한 당뇨병 치료용 한방약 복합제제, 건강보조식품 및 그 조제방법에 관한 것이다.
한국인의 당뇨병 유병율은 최근 10년 사이에 급증하여 사망요인 제4위를 차지하고 있다. 당뇨 환자는 호르몬 불균형으로 인해 탄수화물, 단백질, 지질대사가 비정상적으로 진행되어 고혈당과 고지혈증을 나타내게 되고, 결국 심순환계 질환과 신경장애를 비롯한 합병증을 초래하게 된다. 당뇨환자는 중성지방 및 콜레스테롤 농도가 증가하고 HDL-콜레스테롤이 감소하는 등 지질대사에 이상이 일어나 심순환계 합병증 발생의 위험요인이 되며 당뇨환자의 주요 사망요인이 된다. 당뇨병의 치료법으로는 일반적으로 약물요법과 식이요법 및 운동요법을 병행하는데, 치료목표는 지 속적으로 이상적인 혈당을 유지하여 당뇨병성 합병증을 예방하고 지연하는 것이다. 그러나 현재 당뇨병은 완치법이 확립되어 있지 않으므로, 고혈당과 고지혈증을 개선할 수 있는 약물과 식품에 대하여 지속적인 연구가 요망되고 있다.
당뇨병은 Ⅰ형과 Ⅱ형 두 가지로 나뉘는데 Ⅰ형은 인슐린 의존형, Ⅱ형은 비인슐린 의존형이다. 그 중 Ⅱ형 환자, 즉 비인슐린의존형 당뇨병 환자가 총 환자수의 90%정도를 차지한다.
당뇨병에 대한 기존의 인슐린이나 경구용 혈당 강하제의 투여로는 근원적 치료에 한계가 있기 때문에 최근에는 약물적 요법과 함께 다양한 생리활성을 갖고 있는 기능성 건강식품을 소재로한 당뇨병 예방 및 치료제로서의 가능성에 관한 연구가 시도되고 있으며 상당수의 환자들이 약물요법과 함께 운동요법과 민간요법을 시도하고 있는 것으로 나타났다(Lim, S.J., & Park, H.J.(2000). The Effect of BuOH Fraction of Polygonatum odoratum with Selenium on Blood Glucose Level and Lipid Peroxidation in Streptozotocin Induced Diabetic Rats. Korean J. Nutrition, 33(7):703-711.;Koh, J.B., & Choi, M.A.(1999). Effect of Tea Fungus/Kombucha Beverage on Lipid Metabolism in Streptozotocin-induced Diabetic Male Rats. J. Korean Soc. Food Sci. Nutr. 28(3), 613-618. )
상엽 복합추출물과 운동의 병용이 스트렙토조토신(streptozotoin, STZ)에 의해 유 발된 당뇨의 혈액 내의 과산화지질의 양을 감소시킬 뿐만 아니라 간의 총 콜레스테롤의 저하에도 효과를 나타낸다고 보고 된 바 있으며(고영철, streptozotoin 당뇨 유발 흰쥐에서 상엽복합추출물과 운동이 지질대사에 미치는 영향, Korea Sport Research, 2003, Vol.14, No.5, p.2251~2168), 다시마 추출물의 섭취로 당뇨쥐의 고혈당이 강하되고, 당뇨시 산화적 반응에 대한 방어기전을 제공하며, 중성지방이 감소하고 HDL-콜레스테롤의 증가로 심혈관계와 관련되는 당뇨합병증의 억제가능성이 제시된 바 있다(조영자, 방미애,streptozotoin-유발 당뇨쥐에서 다시마 추출물 첨가식이의 항당뇨 침 항산화 효과, 한국 영양학회지, 2004, Vol. 37, No.1, p.5~14) .
또한, 백삼, 홍삼, 화기삼이 혈당강하 효과와 고혈당에 의한 체중 감소현상을 개선하며, 당뇨의 대표적인 증상인 다식과 다음 현상을 개선하였다는 보고가 있었고(박경수, 고성권, 정성현, Multiple Low Dose Streptozotoin 으로 유도된 당뇨 흰쥐에서 백삼, 홍상, 화기삼의 항당뇨 활성 비교, J. Ginseng Res.,2003, Vol. 27, No. 2, p. 56~61), 오디를 이용하여 인슐린 비의존성 당뇨병에 대하여 항당뇨효과를 가진 기능성 식품을 개발할 수 있다는 가능성이 시사된바 있으며(김태완, 권영배 등, 오디의 항당뇨 효능에 관한 연구,한잠학지 1996, Vol. 38, No. 2, p. 100~107), 생약성분 중 백강잠, 미삼, 연자육, 우절, 사과락, 귤핵, 곤포, 길경 및 금은화를 조합하여 섭취하는 경우 항산화 비만억제, 다이어트, 당뇨병예방 작용에 효과가 있다는 보고가 있었다(김진표, 전인주 등, 기능성 식품 복합처방의 항산화 및 항당뇨 효과, 생약학회지, 2004, Vol.35, No. 1,p.98~103.)
생약제를 이용한 당뇨병 치료용 조성물에 관한 특허로는 17 종의 주생약성분, 즉 동충하초, 우황, 서홍화, 황기, 수질, 호장근, 황정, 귀전우, 산수유, 목단피, 지골피, 구기자, 백출, 창출, 황련, 갈근 및 생지황을 함유하는 당뇨병 치료용 조성물에 관한 것(한국 특허등록번호 10-0195886-0000 호), 조개나물(Ajuga multiflora Bunge)로부터 혈당 강하작용이 강하고 안전성이 매우 높은 추출물을 저렴한 유기용매를 사용하여 간단하면서도 효과적으로 추출 정제하는 방법과 이 정제된 추출물을 약학적으로 사용가능한 부형제 또는 보조제 등과 함께 단독 또는 기타의 유효 약물들과 함께 병용해서 사용하는 당뇨병 치료제 조성물에 관한 것(한국 특허등록번호10-0242283-0000 호), 순기산 생약 복합제 즉, 후박, 대황 및 지실의 추출물을 유효성분으로 함유하고 항당뇨 활성이 우수한 당뇨병 예방 및 치료용 조성물에 관한 것(한국 특허등록번호 10-0478150-0000호) 및 황련, 인삼, 지모, 단삼에서 추출한 물질을 활성성분으로 하는 당뇨병 치료제인 한방약 복합제제에 관한 것(한국 특허등록번호 10-0378745-0000 호)등이 있으나, 한약재 중에 지각을 첨가하였을 경우 이 당뇨병 치료에 상승 효과가 있다는 보고는 없었다.
본 발명자는 지각이 스트렙토조토신(streptozotoin, STZ)으로 유발한 당뇨 흰쥐의 혈당과 동맥혈관벽에 미치는 영향을 조사하여 지각이 당뇨병을 치료하는 효과가 있음을 최초로 밝히고 본 발명을 완성하였다.
본 발명의 목적은, 지각이 혈관의 내피세포 보호기능을 나타내는 효과가 있고, 당뇨의 대표적인 증상인 체중감소와 다식현상을 개선시켜주며, 혈당을 낮추어 주고, 혈관의 탄성도를 증가시켜 당뇨로 인해서 나타나는 혈관부전현상을 개선시킬 수 있는 당뇨병 치료제, 건강보조식품 및 그 조제방법을 제공하고자 함에 있다.
상기와 같은 목적을 위하여 본 발명은 지각을 포함하는 당뇨병 치료를 위한 약학적 조성물을 제공한다.
일반적으로 본 발명에 따른 당뇨병 치료용 조성물은 임상투여시에 경구 투여가 가능하며 일반적인 의약품 제제의 형태로 사용될 수 있다. 본 발명에 따른 당뇨병 치료용 조성물은 실제 임상투여시에 경구의 여러 가지 제형으로 투여될 수 있는데, 제제화 할 경우에는 보통 사용하는 충진제, 증량제, 결합제, 습윤제, 붕해제, 계면활성제 등의 희석제 또는 부형제를 사용하여 조제된다. 경구투여를 위한 고형제제에는 정제, 환제, 산제, 과립제, 캡슐제 등이 포함되며, 이러한 고형제제는 본 발명에 따른 항염증 조성물에 적어도 하나 이상의 부형제 예를 들면, 전분, 칼슘카보네이트(Calcium carbonate), 수크로스(Sucrose) 또는 락토오스(Lactose), 젤라틴 등을 섞어 조제된다. 또한 단순한 부형제 이외에 마그네슘 스티레이트 탈크 같은 윤활제들도 사용된다. 경구를 위한 액상제제로는 현탁제, 내용액제, 유제, 시럽제 등이 해당되는데 흔히 사용되는 단순희석제인 물, 리퀴드 파라핀 이외에 여러 가지 부형제, 예를 들면 습윤제, 감미제, 방향제,보존제 등이 포함될 수 있다.
보다 상세하게는 전체중량에 대하여 지각 추출물 4.5-7.5중량%, 상엽 추출물 4.5- 7.5중량%, 콩기름 15 내지 30 중량%, 황납 4 내지 6 중량%, 야자경화유 10 내지 20 중량%, 대두인지질 1 내지 3 중량%, 젤라틴 20-30 중량%, 글리세린(비중 1.24) 4-7중량%, 디-소르비톨 7-12중량%, 파라옥시안식향산메틸 흔적량에서 1중량% 이하, 파라옥시안식향산프로필 흔적량에서 1중량% 이하, 메틸바닐린 흔적량에서 1중량%이하를 포함하는 것을 특징으로 하는 연질캅셀제를 제공한다.
정제형태로는, 지각추출물 5 내지 15 중량%, 상엽 추출물 5 내지 15 중량%, 옥수수전분 20 내지 25 중량%, 유당 40 내지 45 중량%, 엘-하이드록시프로필셀룰로오스 1 내지 5 중량%, 폴리비닐피롤리돈90 0.5 내지 2 중량% 및 에탄올 흔적량에서 1중량%를 포함하는 원료를 균질하게 혼합하여 습식과립법으로 과립화하고 스테아린산 마그네슘 흔적량 내지 1중량%을 가하여 혼합한 후 타정한 정제임을 특징으로 하는 약학적 조성물을 제공한다.
캅셀제형태로는, 지각추출물 5 내지 20 중량%, 상엽 추출물 5 내지 20 중량%, 옥수수전분 20 내지 30 중량%, 유당 40 내지 55중량% 및 스테아린산 마그네슘 흔적량 내지 1 중량%의 원료를 균질하게 혼합하여 함유되도록 충전한 캅셀제임을 특징으로 하는 약학적 조성물을 제공한다.
본 발명의 제 2의 태양은 지각을 포함한 당뇨병 치료를 위한 식품 조성물에 관한 것이다. 본 발명에 따른 당뇨병 치료용 조성물을 식품으로 사용할 경우, 본 발명에 따른 당뇨병 치료용 조성물을 그대로 첨가하거나 다른 식품 또는 식품 성분과 함께 사용되고, 통상적인 방법에 따라 적절하게 사용될 수 있다. 상기 식품의 종류에는 특별한 제한은 없다. 상기 당뇨병 치료용 조성물을 첨가할 수 있는 식품의 예로는 각종 스프, 음료수, 차, 드링크제, 비타민 복합제, 츄잉껌, 아이스크림 및 소세지 등이 있고, 유효 성분의 혼합양은 그의 사용 목적(예방, 건강 또는 치료적 처치)에 따라 적합하게 결정될 수 있다.
보다 상세하게는 지각 추출물 0.1 내지 1 중량 %, 상엽 추출물 0.1 내지 1 중량 %, 껌베이스 10 내지 30 중량 %, 후르츠향 0.5 내지 1.5 중량 %, 물 1 내지3 중량 % 및 설탕 잔량 60 내지 80 중량 %을 포함하여 통상적인 방법을 사용하여 제조한 츄잉껌을 임을 특징으로 하는 식품 조성물을 제공한다.
아이스크림의 형태로는, 지각 추출물 0.1 내지 1 중량 %, 상엽 추출물 0.1 내지 1 중량 %, 유지방 5 내지 15 중량 %, 무지유고형분 5 내지 15 중량 %, 설탕 5 내지 20 중량 %, 물엿 1 내지 5 중량 %, 유화안정제 흔적량 내지 1 중량 %, 향료 흔적량 내지 1 중량 % 및 물 잔량 41 내지 83.8 중량 %를 포함하여 통상적인 방법을 사용하여 제조한 식품 조성물을 제공한다.
음료의 형태로는, 지각 추출물 0.1 내지 1 중량 %, 상엽 추출물 0.1 내지 1 중량 %, 꿀 50 내지 75 중량 %, 치옥토산아미드 흔적량 내지 1 중량 %, 니코틴산아미드 흔적량 내지 1 중량 %, 염산리보플라빈나트륨 흔적량 내지 1 중량 % , 염산피리독신 흔적량 내지 1 중량 %, 이노시톨 흔적량 내지 1 중량 %, 오르트산 흔적량 내지 1 중량 % 및 물 20 내지 30 중량 % 의 조성을 포함하여 통상적인 방법을 사용하여 제조한 식품 조성물을 제공한다.
소세지의 형태로는,지각 추출물 0.1 내지 1 중량 %, 상엽 추출물 0.1 내지 1 중량 %, 계육 15 내지 35 중량 %, 전분 2 내지 5 중량 %, 대두단백 1 내지 3 중량 %, 식염 1 내지 2.5 중량 %, 포도당 흔적량 내지 1.5 중량 %, 기타첨가물 0.5 내지 2.5 중량 % 및 돈육 잔량 40 내지 85 중량 %의 조성을 포함하여 통상적인 방법을 사용하여 제조된 식품 조성물을 제공한다.
본 발명의 제 3의 태양은 지각으로부터 당뇨병 치료용 조성물을 제조하는 방법을 제공한다. 보다 상세하게는 지각을 열수 추출 또는 유기용매 추출하는 것을 특징으로 하는 당뇨병 치료제 제조방법을 제공한다. 보다 더 상세하게는 증류수에 500 내지 1200 ml에 지각 건조물 분말 200-700g을 투입한 후, 80 내지 100℃에서 0.5 내지 3시간 동안 열수추출하는 단계;
여과기를 통해 여과하는 단계: 및
상기 여액을 감압농축한 후, 동결 건조하는 단계를 포함하는 것을 특징으로 하는 당뇨병 치료제 제조방법을 제공한다.
또한, 지각 건조물 분말 0.5 내지 2㎏에 에탄올 수용액 1 내지 3ℓ를 가하는 단계;
초음파기로 5 내지 10분간 초음파처리하는 단계;
여과기를 통해 여과하는 단계: 및
상기 여액을 감압농축한 후, 동결 건조하는 단계를 포함하는 것을 특징으로 하는 당뇨병 치료제 제조방법을 제공한다.
이하 본 발명을 실시예를 통하여 자세히 설명한다. 그러나 본 발명의 실시예는 본 발명의 권리범위를 한정하는 것이 아니며, 본 발명의 권리범위는 청구범위에 의하여 정하여진다.
<
실시예
1> 세포보호기능의 확인
제대정맥내피세포(Human umbilical vein endothelial cells ,HUVECs)를 배양하여 대조구로 각각 증류수, 지각 (1μg/ml ·1,000,000 cell), 상엽(1μg/ml·1,000,000 cell), 지각 (1μg/ml ·1,000,000 cell)+ 상엽 (1μg/ml·1,000,000 cell) 처리한 세포를 이용하였고, 당뇨유발군으로 스트렙토조토신 (0.5mM), 스트렙토조토신(0.5mM)+ 지각 (1μg/ml·1,000,000 cell), 스트렙토조토신(0.5mM)+ 상엽 (1μg/ml·1,000,000 cell), 스트렙토조토신+ 지각 (1μg/ml ·1,000,000 cell)+ 상엽 (1μg/ml·1,000,000 cell)을 첨가하여 24시간 배양한 후 세포의 생존율을 MTT방법을 이용하여 측정하고 그 결과를 표 1 및 도 1에 나타내었다.
혈관내피세포의 생존율에 있어서 정상군(Ⅰ)과 지각투여한 군(Ⅱ) 및 상엽투여한 군(Ⅲ)간의 유의성은 없었고, 정상세포에 상엽과 지각의 혼합물을 투여한 군(IV)의 세포 생존율은 102.78%로 세포량이 증가하였다. 그러나 세포는 스트렙토조토신에 의해서 생존율이 감소하였고, 지각과 스트렙토조토신을 함께 투여한 군 및 상엽과 스트렙토조토신을 함께 투여한 군에서의 혈관내피세포 생존율은 스트렙토조토신만을 투여한 군에 비하여 그 생존율이 증가하였다. 스트렙토조토신과 상엽 및 지각을 동시에 투여한 군에서 스트렙토조토신과 상엽만을 투여한 군보다 높은 세포 생존율을 보여서 지각이 혈관의 내피세포 보호기능 효과를 보였다.
[표 1] 지각의 처리에 따른 스트렙토조토신 처리 제대정맥내피세포의 세포 생존율 (compared to V,*p<0.05, **p<0.01)
| 그룹 | 평 균 | 표준오차 |
| 대조구(Ⅰ) | 100 | 3.15 |
| 지각 (Ⅱ) | 97.9 | 7.8 |
| 상엽 (Ⅲ) | 98.78 | 6.3 |
| 상엽+지각(Ⅳ) | 102.78 | 5.1 |
| 스트렙토조토신(Ⅴ) | 65.87 | 8.3 |
| 스트렙토조토신+지각(Ⅵ) | 81.1 | 6.9 |
| 스트렙토조토신+상엽(Ⅶ) | *81.28 | 5.65 |
| 스트렙토조토신+상엽+지각(Ⅷ) | **85.77 | 7.3 |
<
실시예
2> 당뇨병에 따른 체중감소 현상 개선확인
(1) 재료 및 방법
1) 당뇨유발 (in vivo)
스트렙토조토신을 0.1 M 시트르산 완충용액(pH 4.3)에 녹여 체중 60 mg/kg 농도로 대퇴부 복강내 주사하였으며, 스트렙토조토신 투여 후 1~2일에 공복시 꼬리 정맥으로부터 취한 혈액의 혈당농도가 300 mg/dL 이상일 경우에 당뇨로 간주했다.체중, 음용수 섭취량은 전 실험 기간을 통해서 매일 일정한 시간에 측정하였다.
2) 실험 동물
수컷 스프레기-돌레이 쥐(Spraguee-Dawley rats, 140~170g)를 사용하였다. 실험동물들은 조절된 온도와 습도의 방의 우리당 4 마리씩 사육되었고, 오전 7시에서 빛을 주기 시작해서 12시간 주기로 명/암을 반복하여 실시하였다. 사료와 물은 실험동안에 마음대로 섭취할 수 있도록 하였다. 동물의 보호와 취급은 기관의 지침의 최고 수준의 기준에 따라 하였다.
120 마리를 비슷한 몸무게끼리 15마리가 한 그룹이 되도록 8그룹으로 나누었다. 그룹 Ⅰ은 정상 쥐 대조군, Ⅱ는 정상 쥐에 지각 처리를 한 것, Ⅲ는 정상 쥐에 상엽 처리를 한 것, IV는 정상 쥐에 상엽과 지각을 처리한 것, V는 스트렙토조토신에 의해 당뇨가 유발된 대조군, VI은 당뇨유발 쥐에 지각을 처리한 것, VII는 당뇨유발 쥐에 상엽을 처리한 것, VIII은 당뇨유발 쥐에 상엽과 지각의 혼합물처리를 한 것이다.
3) 처리군
그룹 V에서 VIII은 하룻밤 동안 신선한 0.1M 시트르산 완충용액 1ml를 한 마리당 스트렙토조토신 60 mg/kg를 주사하여 당뇨유발을 시켰다. 대조군 쥐(그룹 I Ⅱ,Ⅲ,IV)는 수돗물 처리를 하였다. 스트렙토조토신을 주입한 동물에는 스트렙토조토신 주입 후 초기에 약물에 의해 유발될 수 있는 저혈당 치사를 방지하게 위해 48시간 동안 3% 포도당 용액을 주었다. 스트렙토조토신 주입 3일 후에, 헤파린으로 응고가 방지된 모세혈관을 사용하여 의식이 있는 쥐의 눈 뒤 신경얼기로부터(retro-orbital plexus) 혈액을 채취하였고, 포도당을 분석키트로 측정하였다.
4) 급이과정
그룹 Ⅱ와 VI에는 지각만을, 그룹 III과 VII에는 상엽만을, 그룹 IV와 VIII에는 상엽과 지각의 혼합물을 경구 투여하였다. 상기 상엽 및 상엽과 지각의 혼합물은 1차정제수에 녹여 8주 동안 경구 투여하였다(1g/kg/day). 혼합물 처리는 스트렙토조토신 처리 12시간 전에 시작되었다. 쥐의 모든 그룹은 8주 동안의 기간동안 표준사육조건 하에 유지 되었고, 체중의 변화는 각각의 그룹에서 1주마다 기록하여, 평균을 계산하였다.
(2) 결과
지각이 당뇨병에 따른 체중감소 현상을 완화하는 효과를 가지고 있음을 확인하는 결과는 표 2 및 도 2 에 나타내었다.
체중의 변화에 있어서 정상군(Ⅰ)보다 정상군에 지각을 투여한 군(Ⅱ) 및 상엽을 투여한 군(III)의 체중이 다소 증가 하였고, 이보다 정상군에 상엽과 지각을 투여한 군(IV)의 체중이 조금 더 증가 하였으나, 뚜렷한 증가를 보이지 않아 이들 간의 유의성은 없었다. 스트렙토조토신을 투여하여 당뇨를 유발한 쥐(V)의 경우 다른 군에 비하여 체중이 현저히 감소하였고, 당뇨 유발 쥐에 지각을 투여한 쥐(VI) 및 상엽을 투여한 쥐(VII)의 경우 체중감소 현상이 다소 완화되었으며, 당뇨 유발 쥐에 상엽과 지각의 혼합물을 투여한 쥐(Ⅵ)의 경우 체중감소 현상이 현저히 완화되어 지각이 당뇨병에 의한 체중감소 현상을 완화하는 효과가 있음을 확인하였다.
[표 2] 당뇨병 유발 쥐의 체중에 대한 지각의 영향(처리 후 8주 경과시)
(## p< 0.01, compared to normal control, * p < 0.05, compared to 스트렙토조토신,** p< 0.01, compared to 스트렙토조토신)
| 그룹 | 평 균(단위 g) | 표준오차 |
| 대조구(Ⅰ) | 481.8 | 16.5 |
| 지각(Ⅱ) | 491.5 | 19.7 |
| 상엽(Ⅲ) | 489.5 | 23.4 |
| 상엽+지각(Ⅳ) | 497.3 | 15.1 |
| 스트렙토조토신(Ⅴ) | 338.3 | 19.3 ## |
| 스트렙토조토신+지각(Ⅵ) | 415.7 | 27.1 |
| 스트렙토조토신+상엽(Ⅶ) | 414.7 | 25.2 * |
| 스트렙토조토신+상엽+지각(Ⅷ) | 437.8 | 22.5 ** |
<
실시예
3> 당뇨병에 있어서 혈당강하 효과의 확인
(1) 재료 및 방법
실시예 2 에서와 같은 방법으로 정상쥐와 당뇨를 유발한 쥐를 그룹화하였다. 실험동물을 에테르 마취하에서 22 게이지 주사기를 사용해 복부 대동맥으로부터 채혈하여 4℃, 3000 rpm으로 10분간 원심분리하여 혈청을 얻었으며, -70℃에 두면서 분석용 시료로 사용하였다.
혈당은 글루코-테스터(Life Scan Inc., U.S.A)로 매일 오전 10-12시에 측정하였으며, 꼬리부위 혈관에서 란셋으로 채혈하였다.
지각, 상엽 및 상엽과 지각의 혼합물의 투여방식과 사육조건은 실시예2 와 동일하 게 실시하였다. 혈액 내 혈당량은 1주 마다 모니터링하였다. 8주 후에 하룻밤 절식 한 쥐들은 가벼운 에테르 마취 하에서 심장출혈로 희생시켰고, 분석절차를 위하여 헤파린으로 혈액응고를 방지한 유리병에 심장천자(cardiac puncture)법으로 채혈하였다.
(2) 결과
지각이 혈당강하 효과를 가지고 있음을 확인하는 결과는 표 3 및 도 3 에 나타내었다.
혈당량에 있어서 정상군(Ⅰ), 정상군에 지각투여한 군(Ⅱ), 정상군에 상엽투여한 군(Ⅲ), 정상군에 상엽과 지각을 투여한 군(Ⅳ)간에 차이에 유의성은 없었다. 스트렙토조토신을 투여하여 당뇨를 유발한 쥐(Ⅴ)의 경우 다른 군에 비하여 혈당량이 현저히 증가하였고, 당뇨 유발 쥐에 지각을 투여한 쥐(Ⅵ) 및 상엽을 투여한 쥐(VII)의 경우 혈당량이 다소 감소되었으며, 당뇨 유발 쥐에 상엽과 지각의 혼합물을 투여한 쥐(VIII)의 경우 혈당강하 현상이 현저하게 나타나, 지각이 당뇨병에 있어서 혈당량을 감소시키는 효과가 있음을 확인하였다.
[표 3] 당뇨병 유발 쥐에서 지각에 의한 혈당저하 효과(처리 후 8주 경과시)
(## p< 0.01, compared to normal control, * p < 0.05, compared to 스트렙토조토신,** p< 0.01, compared to 스트렙토조토신)
| 그룹 | 평 균(mg/dL) | 표준오차 |
| 대조구(Ⅰ) | 138.5 | 19.5 |
| 지각(Ⅱ) | 145.8 | 24.8 |
| 상엽(Ⅲ) | 135.6 | 25.1 |
| 상엽+지각(Ⅳ) | 137.3 | 16.5 |
| 스트렙토조토신(Ⅴ) | 432.8 | 24.8 ## |
| 스트렙토조토신+지각(Ⅵ) | 312.5 | 25.5 |
| 스트렙토조토신+상엽(Ⅶ) | 298.5 | 32.3 * |
| 스트렙토조토신+상엽+지각(Ⅷ) | 273.7 | 27.8 ** |
<
실시예
4> 당뇨병에 따른 다식, 다뇨 현상 감소의 확인
실시예 2 에서와 같은 방법으로 정상쥐와 당뇨를 유발한 쥐를 그룹화하고 사육하였다. 8주의 실험기간동안 음식과 물은 마음대로 섭취하도록 하였고, 소변은 멸균된 유리병에 받았다.
당뇨병의 증상 중 하나인 다식, 다음 현상이 지각의 섭취로 완화되는지 여부에 대한 실험결과는 표 4 와 도 4 에 나타내었다.
다식, 다음 현상에 따른 수분섭취에 있어서 정상군(Ⅰ), 정상군에 상엽투여한 군(Ⅱ), 정상군에 상엽과 지각을 투여한 군(Ⅲ)간에 차이에 유의성은 없었다. 스트렙토조토신을 투여하여 당뇨를 유발한 쥐(Ⅳ)의 경우 다른 군에 비하여 수분섭취량이 현저히 증가하였고, 당뇨 유발 쥐에 상엽을 투여한 쥐(Ⅴ)의 경우 수분셥취량이 감소되었으며, 당뇨 유발 쥐에 상엽과 지각의 혼합물을 투여한 쥐(Ⅵ)의 경우 수분섭취량이 Ⅴ의 경우보다 더 감소하였다.
[표 4] 지각의 투여에 따른 당뇨병 유발 쥐의 수분섭취량 (8 주동안 하루 섭취량 의 평균치, ## p< 0.01, compared to control)
| 그룹 | 평 균(mL) | 표준오차 |
| 대조구(Ⅰ) | 38.5 | 5.3 |
| 상엽 (Ⅱ) | 41.5 | 4.6 |
| 상엽+지각(Ⅲ) | 35.2 | 3.8 |
| 스트렙토조토신(Ⅳ) | 191.4 | 13.6## |
| 스트렙토조토신+상엽(Ⅴ) | 172.1 | 18.8 |
| 스트렙토조토신+상엽+지각(Ⅵ) | 168.2 | 13.1 |
당뇨병의 증상 중 하나인 다뇨현상이 지각의 섭취로 완화되는지 여부에 대한 실험결과는 표 5 와 도 5 에 나타내었다.
소변량에 있어서 정상군(Ⅰ), 정상군에 상엽투여한 군(Ⅱ), 정상군에 상엽과 지각을 투여한 군(Ⅲ)간에 차이에 유의성은 없었다. 스트렙토조토신을 투여하여 당뇨를 유발한 쥐(Ⅳ)의 경우 다른 군에 비하여 소변량이 현저히 증가하였고, 당뇨 유발 쥐에 상엽을 투여한 쥐(Ⅴ)의 경우 소변량이 IV군보다 현저히 감소하였고, 당뇨 유발 쥐에 상엽과 지각의 혼합물을 투여한 쥐(Ⅵ)의 경우도 마찬가지로 현저히 감소하는 것으로 보아 지각이 당뇨병에 있어서 증가된 소변량을 감소시키는 효과가 있음을 확인하였다.
[표 5] 지각의 투여가 당뇨병 유발 쥐의 소변량에 미치는 영향
(8 주동안 하루 소변량의 평균치, ## p < 0.01, compared to conrtol, *p < 0.05, compared to 스트렙토조토신, **p < 0.01 compared to 스트렙토조토신)
| 그룹 | 평 균(mL) | 표준오차 |
| 대조구(Ⅰ) | 9.6 | 2.3 |
| 상엽 (Ⅱ) | 10.2 | 2.5 |
| 상엽+지각(Ⅲ) | 8.3 | 1.8 |
| 스트렙토조토신(Ⅳ) | 41.5 | 5.3 ## |
| 스트렙토조토신+상엽(Ⅴ) | 30.3 | 3.6 ** |
| 스트렙토조토신+상엽+지각(Ⅵ) | 32.1 | 3.5 * |
< 실시예 5> 혈관부전현상 개선 효과의 확인
(1) 재료 및 방법
실시예 2 에서와 같은 방법으로 정상쥐와 당뇨를 유발한 쥐를 그룹화하고 사육하였다. 실험 후 60일에, 쥐를 각각의 그룹을 나트륨 펜토바르비탈(50 mg/kg)로 마취하였다. 각 그룹의 내부 대정맥으로부터 채혈하였고, 내림 가슴 대동맥(decending thoracic aorta)은 즉시 노출시켜 주변의 세포로부터 분리하였다. 상기 대동맥은 해부되어 적출되었고, 실리콘 선이 그어진 차가운 생리적 식염수(0 에서4℃,mM 에서 NaCl 112.0, KCl 5.0, CaCl2 2.5, MgSO4 1.2, KH2PO4 1, NaHCO3 29.7, 포도당 11.5, EDTA 0.016 및 95% O2 와 5% CO2 로 충전되었다)를 함유한 페트리 접시에 놓았다. 혈관에 부착된 지방과 연결조직은 제거하였다. 대동맥은 2~3 mm 넓이의 고리로 잘랐고, 대동맥 고리는 7.8℃, pH 7.4 인 95% O2 및 5% CO2 로 충전된 , PSS 조직보관통(organ chamber)에 안에서 두개의 스테인레스 스틸 스터럽(stainless steel stirrup)사이에 수평으로 걸었다. 스터럽 중의 하나는 조직보관통에 연결하였고, 다른 하나는 크기가 같은 장력을 기록하기 위해여 힘 에너지 변환기(force transducer, Narco bio-system)에 연결하였다.
대동맥 고리는 8그룹으로 나누었는데, 그룹 Ⅰ은 정상 쥐 대조군, Ⅱ는 정상 쥐에 지각 처리를 한 것, Ⅲ는 정상 쥐에 상엽 처리를 한 것, IV는 정상 쥐에 상엽과 지각을 처리한 것, V는 스트렙토조토신에 의해 당뇨가 유발된 대조군, VI은 당뇨유발 쥐에 지각을 처리한 것, VII는 당뇨유발 쥐에 상엽을 처리한 것, VIII은 당뇨유발 쥐에 상엽과 지각의 혼합물처리를 한 것이다.
각 그룹에서 내피세포층은 혈관에 공기로 1분간 20 mmHg의 살포압력을 줌으로 해서 제거 되었다.내피세포 노출의 효과는 공기 덩어리 처리 전 후에 아세틸콜린(acetylcholine; 0.1M; 내피세포 의존 인자)와 SNP(0.1 M; 내피세포 비의존적인자)에 대한 소동맥 반응으로 확인하였다. 공기의 주입은 내피세포의 기능의 손실을 유발한다. 내피세포의 기능 손상 여부는 아세틸콜린에 반응하여 혈관이 팽창의 소실되고, SNP에 반응한 팽창은 완전하게 남아있는 것으로부터 알 수 있다.
내피세포가 부존재 하는 대동맥 고리는 2.0 g의 휴지기 장력에서 90분 동안 평형을 유지하도록 적용되었고, 그 후, 고농도의 칼륨(70 mM)에 노출시켰다. 고농도의 칼륨이 혈관의 수축의 안정기 도달을 유발하였을 때, 대동맥 고리를 생리적식염수로 헹구었고, 30분 동안 재평형에 적용되었다. 혈관수축이 70 mM KCl에 의해 견고한 안정기에 도달한 후에 대동맥 고리는 30분 동안 생리적 식염수에 의해 안정화되었다. 이러한 반응은 세 번 반복되었고, 생리적 식염수로 안정화시킨 후에 노르에피네프린(norepinephrine, NE; 0.1 nM 에서 10 M)에 대한 소동맥의 수축반응이 측정되었다. 혈관의 긴장은 30분 후에 안정상태에 도달하였다. 노르에피네프린은 0.1 nM 부터 10M까지 누적적으로 첨가되었다.
각 농도에서의 반응은 노르에피네피린의 다음 농도의 첨가 전에 평형에 도달하도록 하였다. 노르에피네프린에 의한 혈관 수축의 폭은 각 농도마다 측정하였다. 노르에피네프린에 의한 수축의 효과는 초기에 각각의 대동맥에 처리된 70 mM KCl에 의해 수축된 최대치에 대한 반응의 백분율(%)로 표현하였다.
모든 실험은 각각 4번에서 5번 반복되었다.
카르바콜(carbachol,CCh)처리 하에서 지연효과는 내피세포를 가진 대동맥 고리에서 조사되었다. 70 mM KCl에 의해 유발된 혈관수축의 견고한 안정기 도달 후에, 대동맥 고리는 생리적 식염수에 의해 30분동안 안정화되었다. 이러한 반응은 카르바콜로 세 번 반복되었고, 대동맥 고리는 내피세포의 존재 하에서 대동맥의 확장효과를 측정하기 위해서 70 mM KCl로 다시 수축시켰고, 0.1 nM 에서 10 M 까지 투여농도 의존적 방법으로 카르바콜로 지연시켰다. 각각의 농도에 대한 반응은 카르바콜의 다음농도의 첨가 전에 안정기에 도달하도록 하였다. 카르바콜에 의해 유발된 지연 폭은 각각의 농도에서 측정되었다. 카르바콜에 의한 수축의 지연효과는 내피세포가 존재하는 각각의 대동맥에 초기에 처리된 70 mM KCl에 의해 수축된 최대치에 대한 반응의 백분율(%)로서 표현되었다. 모든 실험은 각각 4~5번 반복되었다.
(2) 결과
혈관수축능력 및 이완능력에서도 당뇨군에서 정상군에 비해 혈관의 수축력이 월등 히 높았으며, 이완능력은 감소하여 혈관의 탄성도가 감소하였다. 그러나 상엽과 지각의 복합제 처리에 의해 혈관의 탄성도가 증가하여 당뇨로 인해서 나타나는 혈관부전 현상을 개선시키는 효과가 있음을 보였다.
노르에피네프린 처리에 따른 혈관수축효과를 표 6 에 보인다.
[표 6] 노르에피네프린 처리에 따른 혈관수축효과(노르에피네프린 처리농도; log M , ## p < 0.01, compared to conrtol, **p < 0.01 compared to 스트렙토조토신)
| 노르에피네프린 처리농도; log M | ||||||
| 그룹 | 1E-10 | 1E-9 | 1E-8 | 1E-7 | 1E-6 | 1E-5 |
| 대조구(Ⅰ) | 0 | 3.2 | 50.2 | 82.3 | 83.2 | 82.7 |
| 지각(Ⅱ) | 0 | 3.8 | 32.8 | 72.4 | 88.1 | 91.3 |
| 상엽 (Ⅲ) | 0 | 3.1 | 52.5 | 75.9 | 82.5 | 81.1 |
| 상엽+지각(Ⅳ) | 0 | 2.3 | 43.3 | 76.4 | 83.5 | 85.2 |
| 스트렙토조토신 (Ⅴ) | 0.4 | 27.1## | 85.2## | 103.3## | 114.7## | 119.3## |
| 스트렙토조토신 +지각(Ⅵ) | 0 | 1.3 | 43.7 | 81.4 | 101.7 | 103.7 |
| 스트렙토조토신 +상엽(Ⅶ) | 0 | 10.3** | 73.4** | 89.4** | 101.3** | 105.2** |
| 스트렙토조토신 +상엽+지각(Ⅷ) | 0 | 9.1** | 63.8** | 91.4** | 103.2** | 104.5** |
카르바콜 처리에 따른 혈관수축의 지연효과를 표 7 에 보인다.
[표 7] 카르바콜 처리에 따른 혈관수축의 지연 효과 (카르바콜 처리농도 ;log M, ## p < 0.01, compared to conrtol, *p < 0.05 compared to 스트렙토조토신, **p < 0.01 compared to 스트렙토조토신)
| 카르바콜 처리농도(log M) | ||||
| 그룹 | 1E-8 | 1E-7 | 1E-6 | 1E-5 |
| 대조구(Ⅰ) | 0 | 63.2 | 87.1 | 92.8 |
| 지각(Ⅱ) | 0 | 51.5 | 95.8 | 101.3 |
| 상엽 (Ⅲ) | 0 | 55.6 | 84.8 | 89.4 |
| 상엽+지각(Ⅳ) | 3.1 | 59.1 | 89.4 | 91.7 |
| 스트렙토조토신 (Ⅴ) | 0 | 35.8## | 65.5## | 71.6## |
| 스트렙토조토신 +지각(Ⅵ) | 0 | 25.7 | 81.6 | 85.7 |
| 스트렙토조토신 +상엽(Ⅶ) | 0 | 41.8* | 77.5* | 81.5* |
| 스트렙토조토신 +상엽+지각(Ⅷ) | 0 | 55.3** | 80.5** | 84.7** |
<
실시예
6> 지각을 포함하는 조성물의 제조방법
본 발명에 따른 지각 또는 상엽 추출물은 물, 저급 알코올, 헥산, 에틸아세테이트 또는 이들의 혼합 용매로 추출할 수 있다. 더욱 바람직하게는, 유기용매를 이용하여 휘발성 혹은 비휘발성 물질을 분리하는 유기용매 추출법에 의해 제조될 수 있다. 이는 저급 알코올, 헥산, 에틸 아세테이트 또는 이들의 혼합 용매로 추출하는 단계 및 추출여액을 여과하여 농축하는 단계 및 동결 건조하는 단계로 구성된다. 상기 저급 알코올은 메탄올, 에탄올 및 부탄올로 이루어진 군으로부터 선택된다. 추출 과정으로는 냉침 추출법, 초음파 추출법, 여과법, 환류 추출법, 감압 농축법 등의 방법이 사용될 수 있으며, 이밖에도 통상적으로 사용되는 추출법이 사용될 수 있다. 또한, 지각 또는 상엽 추출물은 고온의 열수를 이용하여 가용성 물질들을 분리하는 열수추출법에 의해서도 제조될 수 있다. 열수추출은 80 내지 100℃의 온도에서 1 내지 3시간 동안 이루어지는 것이 바람직하며, 지각 또는 상엽에 물을 가 한 후 여과하여 농축하는 단계 및 동결 건조하는 단계로 구성된다. 농축 및 동결과정 또한 통상적으로 알려진 방법이 다양하게 사용될 수 있다.
1) 열수추출에 의한 지각 또는 상엽 추출물의 준비
3차 증류수 1ℓ가 담긴 플라스크에 지각 또는 상엽 건조물 분말 500g을 투입한 후, 100℃에서 1시간 동안 열수추출하고 거즈로 여과한 여액을 감압여과기(Eyela. Japan)로 농축한 후, 동결 건조하여 본 발명의 원지 추출물을 제조하였다. 그 결과, 각각 지각 102g 및 상엽 120g의 건조추출물을 얻었다.
2) 유기용매추출에 의한 지각 또는 상엽 추출물의 준비
지각 또는 상엽 건조물 분말 1㎏에 에탄올 수용액 2ℓ를 가한 후, 한약재의 추출시 통상적으로 사용되는 초음파처리기를 사용하여 초음파로 15분간 2회 추출하여 3ℓ의 추출액을 얻었다. 수집된 추출액을 여과지로 여과한 여액을 45℃, 1기압에서 감압여과기(Eyela. Japan)로 농축한 후, 동결 건조하여 본 발명의 지각 또는 상엽 추출물을 제조하였다. 그 결과 지각 92g 및 상엽 98g의 건조추출물을 얻었다.
3) 급성독성실험
지각 또는 상엽 추출물의 인체 안정성을 검사하기 위하여 급성 독성실험을 하였다. 6주령의 특정병원체부재(specific pathogen-free, SPF) SD계 쥐를 사용하여 급 성독성실험을 실시하였다. 군당 5 마리씩의 동물에 본 발명의 지각 또는 상엽 추출물을 각각 0.5% 메틸셀룰로오즈 용액에 현탁하여 각각 5g/㎏, 10g/㎏ 및 20g/㎏의 용량으로 1회 단회 경구투여 하였다. 시험물질 투여 후 통상의 방법에 따라 동물의 폐사여부, 임상증상, 체중변화를 관찰하고 혈액학적 검사와 혈액 생화학적 검사를 실시하였으며, 부검하여 육안으로 복강장기와 흉강장기의 이상여부를 관찰하였다.
그 결과, 시험물질을 투여한 모든 동물에서 특기할 만한 임상증상이나 폐사된 동물은 없었으며, 체중변화, 혈액검사, 혈액생화학 검사, 부검소견 등에서도 독성변화는 관찰되지 않았다. 이상의 결과, 본 발명의 지각 또는 상엽 추출물은 모두 쥐에서 20g/㎏까지 독성변화를 나타내지 않으며 따라서, 경구 투여 중간치사량(LD50)은 지각 또는 상엽 추출물 20g/kg 이상인 안전한 물질로 판단되었다.
본 발명의 지각 또는 상엽 추출물을 통상의 방법에 따라 흰 쥐에 경구 투여, 복강 내 투여 및 피하 주사시의 독성 실험을 수행한 결과, 복강 내 투여 독성시험에 의한 50% 치사량(LD50)은 적어도 지각 또는 상엽 추출물 20g/kg 이상인 안전한 물질로 판명되었다.
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실시예
7> 지각을 함유하는 당뇨병 치료효과가 있는 약학적 조성물 및 식품조성물의 제조예
인체에 안전하며 당뇨 예방 또는 치료 효능을 갖는 상기 지각 +상엽 추출물을 유효 성분으로 하여 당뇨 치료용 약학 조성물을 제조할 수 있다. 지각 +상엽 추출물은 임상 투여 시에 경구 또는 비경구로 투여가 가능하며 일반적인 의약품 제제의 형태로 사용될 수 있다. 즉, 본 발명의 지각 +상엽 추출물은 실제 임상 투여 시에 경구 및 비경구의 여러 가지 제형으로 투여될 수 있는데, 제제화할 경우에는 보통 사용하는 충진제, 증량제, 결합제, 습윤제, 붕해제 및 계면활성제 등의 희석제 또는 부형제를 사용하여 조제된다.
경구 투여를 위한 고형 제제에는 정제, 환제, 산제, 과립제 및 캡슐제 등이 포함되며, 이러한 고형 제제는 원지 추출물에 적어도 하나 이상의 부형제 예를 들면, 전분, 탄산칼슘, 수크로오스(sucrose), 락토오스 및 젤라틴 등을 섞어 조제된다. 또한 단순한 부형제 이외에 스테아린산 마그네슘(Magnesium stearate), 탈크(talc) 등과 같은 활택제들도 사용된다.
경구 투여를 위한 액상 제제로는 현탁제, 내용액제, 유제 및 시럽제 등이 해당되는데 흔히 사용되는 단순 희석제인 물, 리퀴드 파라핀(liquid paraffin) 이외에 여러 가지 부형제, 예를 들면 습윤제, 감미제, 방향제 및 보존제 등이 포함될 수 있다.
비경구 투여를 위한 제제에는 멸균된 수용액, 비수성용제, 현탁제, 유제, 동결건조제제 및 좌제가 포함된다. 비수성용제와 현탁용제로는 프로필렌글리콜(propylene glycol), 폴리에틸렌글리콜(polyethylene glycol), 올리브 오일(olive oil)과 같은 식물성 기름, 에틸올레이트(ethyl oleate)와 같은 주사 가능한 에스테르 등이 사용 될 수 있다. 좌제의 기제로는 위텝솔(witepsol), 마크로골(macrogol), 트윈(tween) 61, 카카오지, 라우린지, 글리세롤 및 젤라틴 등이 사용될 수 있다.
투약 단위는, 예를 들면 개별 투약량의 1, 2, 3 또는 4배를 함유하거나 또는 1/2, 1/3 또는 1/4배를 함유할 수 있다. 개별 투약량은 바람직하기로는 유효 약물이 1회에 투여되는 양을 함유하며, 이는 통상 1일 투여량의 전부, 1/2, 1/3 또는 1/4배에 해당한다.
당뇨병 치료용 약학조성물에서, 지각+상엽 추출물의 유효용량은 30 내지 700㎎/㎏이고, 바람직하기로는 100 내지 500mg/kg이며, 하루 1-6 회 투여될 수 있다. 단, 특정 환자에 대한 투여용량 수준은 환자의 체중, 연령, 성별, 건강상태, 식이, 투여시간, 투여방법, 배설율, 질환의 중증도 등에 따라 변화될 수 있다.
또한, 상기 지각 +상엽 추출물을 유효 성분으로 하여 당뇨병 치료용 건강 식품도 제조할 수 있다. 본 발명의 추출물을 식품으로 사용할 경우, 상기 추출물을 그대로 첨가하거나 다른 식품 또는 식품 성분과 함께 사용되고, 통상적인 방법에 따라 적절하게 사용될 수 있다. 유효 성분의 혼합양은 그의 사용 목적(예방, 건강 또는 치료적 처치)에 따라 적합하게 결정될 수 있다. 일반적으로, 본 발명의 추출물을 식품 또는 음료의 제조시에 원료에 대하여 0.01 내지 1 중량%, 바람직하게는 0.1 내지 1중량%의 양으로 첨가될 수 있다. 본 발명의 추출물의 유효용량은 상기 약학적 조성물의 유효용량에 준해서 사용할 수 있으나, 건강 및 위생을 목적으로 하거나 또는 건강 조절을 목적으로 하는 장기간의 섭취의 경우에는 상기 범위 이하일 수 있으며, 유효성분은 안전성 면에서 아무런 문제가 없기 때문에 상기 범위 이상의 양으로도 사용될 수 있음은 확실하다. 상기 식품의 종류에는 특별한 제한은 없다. 상기 물질을 첨가할 수 있는 식품의 예로는 육류, 소세지, 빵, 쵸코렛, 캔디류, 스넥류, 과자류, 피자, 라면, 기타 면류, 껌류, 아이스크림류를 포함한 낙농제품, 각종 스프, 음료수, 차, 드링크제, 알콜 음료 및 비타민 복합제 등이 있으며, 보혈제, 보양제, 피부미백제 등을 목적으로 하는 민간 요법제 등을 들 수 있다. 또한, 삼소음패독산, 패독산, 오약순기삼 등과 같은 여러 한의학 처방들에도 사용할 수 있다.
이하, 제제예 1 내지 7에서 지각 +상엽 추출물을 함유하는 약학 제제 및 건강 식품을 제조하였지만, 본 발명이 이들 예에 한정되는 것은 아니다.
<제제예 1> 연질캅셀제의 제조
실시예 6의 열수추출법에 따라 제조된 지각 +상엽 추출물 100.0㎎, 콩기름 175.0㎎, 황납 45.0㎎, 야자경화유 127.5㎎, 대두인지질 21.0㎎, 젤라틴 212.0㎎, 글리세린(비중 1.24) 50.0㎎, 디-소르비톨 76.0㎎, 파라옥시안식향산메틸 0.54㎎, 파라옥시안식향산프로필 0.90㎎, 메틸바닐린 0.56㎎, 황색 203호 적량의 성분이 1캅셀 중에 함유되도록 약전 제제총칙중 연질캅셀의 제법에 따라 제조하였다.
<제제예 2> 정제의 제조
실시예 6의 열수추출법에 따라 제조된 지각 +상엽 추출물 100.0㎎, 옥수수전분 90.0㎎, 유당 175.0㎎, 엘-하이드록시프로필셀룰로오스 15.0㎎, 폴리비닐피롤리돈90 5.0㎎ 및 에탄올 적량의 원료를 균질하게 혼합하여 습식과립법으로 과립화하고 스테아린산 마그네슘 1.8㎎을 가하여 혼합한 후 1정이 400㎎이 되도록 타정하였다.
<제제예 3> 캅셀제의 제조
실시예 6의 열수추출법에 따라 제조된 지각 +상엽 추출물 100.0㎎, 옥수수전분 83.2㎎, 유당 175.0㎎ 및 스테아린산 마그네슘 1.8㎎의 원료를 균질하게 혼합하여 1캅셀에 360㎎이 함유되도록 충전하였다.
<제제예 4> 츄잉껌의 제조
실시예 6의 열수추출법에 따라 제조된 원지 추출물 0.24∼0.64%, 껌베이스 20%, 후르츠향 1%, 물 2% 및 설탕 잔량의 조성으로 하여 통상적인 방법을 사용하여 츄잉껌을 제조하였다.
<제제예 5> 아이스크림의 제조
실시예 6의 열수추출법에 따라 제조된 지각 +상엽 추출물 0.24∼0.64%, 유지방 10.0%, 무지유고형분 10.8%, 설탕 12.0%, 물엿 3.0%, 유화안정제(스팬,span) 0.5%, 향료(스트로베리) 0.15% 및 물 잔량의 조성으로 하여 통상적인 방법을 사용하여 아이스크림을 제조하였다.
<제제예 6> 음료의 제조
실시예 6의 열수추출법에 따라 제조된 지각 +상엽 추출물 0.48∼1.28㎎, 꿀 522㎎, 치옥토산아미드 5㎎, 니코틴산아미드 10㎎, 염산리보플라빈나트륨 3㎎, 염산피리독신 2㎎, 이노시톨 30㎎, 오르트산 50㎎ 및 물 200㎖의 조성 및 함량으로 하여 통상적인 방법을 사용하여 음료를 제조하였다.
<제제예 7> 소세지의 제조
실시예 6의 열수추출법에 따라 제조된 지각 +상엽 추출물 0.24∼0.64 %, 계육 27.5%, 전분 3.5%, 대두단백 1.7%, 식염 1.62%, 포도당 0.5%, 기타첨가물(글리세린) 0.94∼1.34% 및 돈육 잔량의 조성으로 하여 통상적인 방법을 사용하여 소세지를 제조하였다.
본 발명에서는 스트렙토조토신으로 당뇨병을 유발한 쥐에게 한약재인 지각을 투여한 결과, 당뇨병의 대표적 증상인 체중감소를 완화시켜주고, 혈당치를 현저히 낮추어 주는 효과를 처음으로 확인하고, 지각을 포함한 당뇨병 치료를 위한 약학적 조성물, 지각을 포함한 당뇨병 치료를 위한 식품 조성물 및 지각을 열수 추출하는 것을 특징으로 하는 당뇨병 치료제 제조방법을 제공한다.
Claims (13)
- 유효량의 지각 추출물로 구성되는 것을 특징으로 하는 당뇨병 치료를 위한 약학적 조성물.
- 전체중량에 대하여 지각 추출물 4.5-7.5중량%, 상엽 추출물 4.5-7.5중량%, 콩기름 15 내지 30 중량%, 황납 4 내지 6 중량%, 야자경화유 10 내지 20 중량%, 대두인지질 1 내지 3 중량%, 젤라틴 20-30 중량%, 글리세린(비중 1.24) 4-7중량%, 디-소르비톨 7-12중량%, 파라옥시안식향산메틸 흔적량에서 1중량% 이하, 파라옥시안식향산프로필 흔적량에서 1중량% 이하, 메틸바닐린 흔적량에서 1중량% 이하를 포함하는 것을 특징으로 하는 당뇨병 치료를 위한 약학적조성물.
- 지각추출물 5 내지 15 중량%, 상엽 추출물 5 내지 15 중량%, 옥수수전분 20 내지 25 중량%, 유당 40 내지 45 중량%, 엘-하이드록시프로필셀룰로오스 1 내지 5 중량%, 폴리비닐피롤리돈90 0.5 내지 2 중량% 및 에탄올 흔적량에서 1중량%를 포함하는 원료를 균질하게 혼합하여 습식과립법으로 과립화하고 스테아린산 마그네슘 흔적량 내지 1 중량%의 혼합물을 포함하여 타정한 정제임을 특징으로 하는 당뇨병 치료를 위한 약학적 조성물.
- 지각추출물 5 내지 20 중량%, 상엽 추출물 5 내지 20 중량%, 옥수수전분 20 내지 30 중량%, 유당 40 내지 55중량% 및 스테아린산 마그네슘 흔적량 내지 1 중량%의 원료를 균질하게 혼합한 혼합물을 포함하여 충전한 캅셀제임을 특징으로 하는 당뇨병 치료를 위한 약학적 조성물.
- 유효량의 지각 추출물로 구성되는 것을 특징으로 하는 당뇨병 예방 및 개선용 식품조성물.
- 지각 추출물 0.1 내지 1 중량 %, 상엽 추출물 0.1 내지 1 중량 %, 껌베이스 10 내지 30 중량 %, 후르츠향 0.5 내지 1.5 중량 %, 물 1 내지3 중량 % 및 설탕 잔량 60 내지 80 중량 %을 포함하여 통상적인 방법을 사용하여 제조한 츄잉껌임을 특징으로 하는 당뇨병 예방 및 개선용 식품 조성물.
- 지각 추출물 0.1 내지 1 중량 %, 상엽 추출물 0.1 내지 1 중량 %, 유지방 5 내지 15 중량 %, 무지유고형분 5 내지 15 중량 %, 설탕 5 내지 20 중량 %, 물엿 1 내지 5 중량 %, 유화안정제 흔적량 내지 1 중량 %, 향료 흔적량 내지 1 중량 % 및 물 잔량 41 내지 80 중량 %를 포함하여 통상적인 방법을 사용하여 제조된 아이스크림을 특징으로 하는 당뇨병 예방 및 개선용 식품 조성물.
- 지각 추출물 0.1 내지 1 중량 %, 상엽 추출물 0.1 내지 1 중량 %, 꿀 50 내지 75 중량 %, 치옥토산아미드 흔적량 내지 1 중량 %, 니코틴산아미드 흔적량 내지 1 중량 %, 염산리보플라빈나트륨 흔적량 내지 1 중량 % , 염산피리독신 흔적량 내지 1 중량 %, 이노시톨 흔적량 내지 1 중량 %, 오르트산 흔적량 내지 1 중량 % 및 물 20 내지 30 중량 % 의 조성을 포함하여 통상적인 방법을 사용하여 제조된 음료임을 특징으로 하는 당뇨병 예방 및 개선용 식품 조성물.
- 지각 추출물 0.1 내지 1 중량 %, 상엽 추출물 0.1 내지 1 중량 %, 계육 15 내지 35 중량 %, 전분 2 내지 5 중량 %, 대두단백 1 내지 3 중량 %, 식염 1 내지 2.5 중량 %, 포도당 흔적량 내지 1.5 중량 %, 기타첨가물 0.5 내지 2.5 중량 % 및 돈육 잔량 40 내지 80 중량 %의 조성을 포함하여 통상적인 방법을 사용하여 제조된 소세지임을 특징으로 하는 당뇨병 예방 및 개선용 식품 조성물.
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