본 발명은 상지 추출물 및 헥사노일트리펩타이드를 유효 성분으로 함유하는 피부 미백용 화장료 조성물을 제공한다.
상지 (Ramulus mori)는 뽕나무속 식물의 여린 가지를 말린 것으로, 모양은 긴 원주형으로 드물게 분지가 있고, 크기가 일정하지 않으며, 직경은 0.5-1.5 cm이다. 표면은 회황색 혹은 황갈색으로 다수의 황갈색 점상 피공과 미세한 종문이 있으며, 회백색을 띤 반원형 잎 흔적과 황갈색의 액아가 있다. 절편의 두께는 0.2-0.5 cm로 외피 부위는 비교적 얇고, 목질 부위는 황백색이며, 사선은 방사상이고, 수부는 백색 또는 황백색이다. 상지의 채취 시기는 늦은 봄과 초여름 사이이며, 잎을 제거한 후, 신선할 때 30-60 cm 크기로 잘라 햇볕에 말린다. 상지는 약간 쓴맛이 나며, 소염, 이뇨, 강장, 발한 및 풍을 제거하는 등의 효능을 가지고 있어, 오래 전부터 한약재로 쓰이고 있다.
본 발명의 조성물에서 유효 성분으로 이용되는 “상지 추출물”은 뽕나무의 어린 가지인 상지로부터 추출한 물질을 통칭하여 나타낸다.
상기 상지 추출물은 다양한 추출 용매, 예를 들어, 물, 탄소수 1-4의 무수 또는 함수 저급 알코올 (메탄올, 에탄올, 프로판올, 부탄올 등), 상기 저급 알코올 과 물과의 혼합용매, 아세톤, 에틸 아세테이트, 클로로포름, 1,3-부틸렌글리콜 및 부틸 아세테이트를 추출 용매로 하여 얻을 수 있다. 보다 바람직하게는, 본 발명의 상지 추출물은 함수 저급 알코올, 가장 바람직하게는 에탄올을 이용하여 얻어진 것이다.
한편, 본 발명의 추출물은 상기한 추출 용매뿐만 아니라, 다른 추출 용매를 이용하여도 실질적으로 동일한 효과를 나타내는 상지 추출물이 얻어질 수 있다는 것은 당업자에게 자명한 것이다.
또한, 본 발명의 추출물은 상술한 추출 용매에 의한 추출물뿐만 아니라, 통상적인 정제 과정을 거친 추출물도 포함한다. 예컨대, 일정한 분자량 컷-오프 값을 갖는 한외여과막을 이용한 분리, 다양한 크로마토그래피 (크기, 전하, 소수성 또는 친화성에 따른 분리를 위해 제작된 것)에 의한 분리 등, 추가적으로 실시된 다양한 정제 방법을 통해 얻어진 활성 분획도 본 발명의 상지 추출물에 포함되는 것이다. 또한, “상지 추출물”의 범위에는 상지로부터 추출되어 가공된 “멜버린” 및 기타 상지의 가공물이 포함된다.
본 발명의 상지 추출물은 감압 증류 및 동결 건조 또는 분무 건조 등과 같은 추가적인 과정에 의해 분말 상태로 제조될 수 있다.
본 발명의 조성물에서 상지 추출물과 함께 유효 성분으로 이용되는 “헥사노일트리펩타이드”는 헥사노일기 말단에 서열번호 1로 표시되는 3개의 펩타이드(아르기닌-알라닌-노르루이신)가 연결되고, 이 펩타이드에 아미드 아세테이트 염이 연 결된 구조, 즉 Hexanoyl-Arg-Ala-Nle-NH2 Acetate Salt를 일컫는다. 본 발명의 헥사노일트리펩타이드는 각질세포를 연결하고 있는 데스모좀이라는 단백질의 연결을 약하게 하여 노화된 각질이 자연스럽게 떨어져 나가도록 도와준다. 데스모좀은 데스모글레인 (Desmoglein)과 데스모콜린(Desmocollin)이라는 두 개의 단백질의 세포접착 인식(Cell Adhesion Recognition: 줄여서 CAR)부위가 서로 이형질 결합으로 이루어져 있다. "헥사노일트리펩타이드"의 Arg-Ala-Nle 트리펩타이드 부분이 데스모글레인의 세포접착 인식 부위와 경쟁적으로 데스모콜린의 세포접착 인식 부위와 결합을 하여 결과적으로 데스모좀의 결합력을 약화시켜 피부 자극없이 안전하게 피부 갱신 속도를 높여준다.
본 발명의 화장료 조성물은 유효 성분으로서 상기 상지 추출물 및 헥사노일트리펩타이드 이외에 다른 미백 유효 성분을 포함할 수 있다. 그러나, 본 발명의 화장료 조성물은 상지 추출물 및 헥사노일트리펩타이드 만으로 구성된 유효 성분으로도 매우 우수한 미백 효과를 나타낸다.
본 발명의 바람직한 구현예에 따르면, 상지 추출물 및 헥사노일트리펩타이드의 함량은 화장료 조성물 총 중량에 대하여 각각 0.002-10.0 중량% 및 0.01-10.0 ppm 이며, 더욱 바람직하게는 각각 0.1-5.0 중량% 및 0.1-5.0 ppm 이다.
이때, 상지 추출물과 헥사노일트리펩타이드의 함량이 각각 0.002 중량% 및 0.01 ppm 미만일 때에는 미백 효과가 나타나기 어렵고, 상기 성분의 함량이 각각 10.0 중량% 및 10.0 ppm 이상일 때에는 피부에 자극을 유발할 가능성이 높으며, 제형의 안정화에도 큰 영향을 미칠 수 있다.
본 발명의 화장료 조성물에 포함되는 성분은 유효 성분으로서 상기 유효 성분 이외에 화장료 조성물에 통상적으로 이용되는 성분들을 포함하며, 예컨대 항산화제, 안정화제, 용해화제, 비타민, 안료 및 향료와 같은 통상적인 보조제, 그리고 담체를 포함한다.
본 발명의 화장료 조성물은 당업계에서 통상적으로 제조되는 어떠한 제형으로도 제조될 수 있으며, 예를 들어, 용액, 현탁액, 유탁액, 페이스트, 겔, 크림, 로션, 파우더, 비누, 계면활성제-함유 클렌징, 오일, 분말 파운데이션, 유탁액 파운데이션, 왁스 파운데이션 및 스프레이 등으로 제형화될 수 있으나, 이에 한정되는 것은 아니다. 보다 상세하게는, 유연 화장수, 영양 화장수, 영양 크림, 마사지 크림, 에센스, 아이 크림, 클렌징크림, 클렌징 포옴, 클렌징 워터, 팩, 스프레이 또는 파우더의 제형으로 제조될 수 있다.
본 발명의 제형이 페이스트, 크림 또는 겔인 경우에는 담체 성분으로서 동물성유, 식물성유, 왁스, 파라핀, 전분, 트라칸트, 셀룰로오스 유도체, 폴리에틸렌글리콜, 실리콘, 벤토나이트, 실리카, 탈크 또는 산화아연 등이 이용될 수 있다.
본 발명의 제형이 파우더 또는 스프레이인 경우에는 담체 성분으로서 락토스, 탈크, 실리카, 알루미늄 히드록시드, 칼슘 실리케이트 또는 폴리아미드 파우더 가 이용될 수 있고, 특히 스프레이인 경우에는 추가적으로 클로로플루오로히드로카본, 프로판/부탄 또는 디메틸에테르와 같은 추진제를 포함할 수 있다.
본 발명의 제형이 용액 또는 유탁액인 경우에는 담체 성분으로서 용매, 용해화제 또는 유탁화제가 이용되고, 예컨대 물, 에탄올, 이소프로판올, 에틸 카보네이트, 에틸 아세테이트, 벤질 알코올, 벤질 벤조에이트, 프로필렌글리콜, 1,3-부틸글리콜 오일, 글리세롤 지방족 에스테르, 폴리에틸렌글리콜 또는 소르비탄의 지방산 에스테르가 있다.
본 발명의 제형이 현탁액인 경우에는 담체 성분으로서 물, 에탄올 또는 프로필렌글리콜과 같은 액상의 희석제, 에톡실화 이소스테아릴 알코올, 폴리옥시에틸렌 소르비톨 에스테르 및 폴리옥시에틸렌 소르비탄 에스테르와 같은 현탁제, 미소결정성 셀룰로오스, 알루미늄 메타히드록시드, 벤토나이트, 아가 또는 트라칸트 등이 이용될 수 있다.
본 발명의 제형이 계면-활성제 함유 클렌징인 경우에는 담체 성분으로서 지방족 알코올 설페이트, 지방족 알코올 에테르 설페이트, 설포숙신산 모노에스테르, 이세티오네이트, 이미다졸리늄 유도체, 메틸타우레이트, 사르코시네이트, 지방산 아미드 에테르 설페이트, 알킬아미도베타인, 지방족 알코올, 지방산 글리세리드, 지방산 디에탄올아미드, 식물성 유, 라놀린 유도체 또는 에톡실화 글리세롤 지방산 에스테르 등이 이용될 수 있다.
본 발명의 화장료 조성물은 상지 추출물과 헥사노일트리펩타이드를 유효성분 으로 함께 사용함으로써 상지 추출물의 티로시나아제 억제 효과와 헥사노일트리펩타이드의 각질 박리효과가 복합적으로 나타나 상기 성분 각각을 단독으로 사용하는 경우에 비해 보다 상승적 (synergic)인 미백효과를 달성할 수 있다. 또한, 각질 박리제로 헥사노일트리펩타이드를 사용함으로써 종전의 히드록시산의 사용으로 인해 피부 자극이 발생되었던 문제점을 개선하였으며, 헥사노일트리펩타이드의 첨가로 인해 발생하는 제형의 불안정 문제를 상지 추출물의 첨가로 해결할 수 있다. 이와 같은 사실은 하기의 실시예에 명시되어 있다.
이하, 실시예를 통하여 본 발명을 더욱 상세히 설명하고자 한다. 이들 실시예는 오로지 본 발명을 보다 구체적으로 설명하기 위한 것으로서, 본 발명의 요지에 따라 본 발명의 범위가 이들 실시예에 의해 제한되지 않는다는 것은 당업계에서 통상의 지식을 가진 자에게 있어서 자명할 것이다.
제조예 1 : 상지 추출물의 제조
본 발명의 화장료 조성물에 함유되는 상지 추출물을 다음과 같이 제조하였다: 먼저 정제수로 세척하고 건조한 후 작은 조각으로 파쇄한 상지 파우더를 10배의 70% 에탄올에 넣고, 15-35℃에서 5일간 추출한 후 300 메쉬 여과포로 여과한 다음, 5-10℃에서 7-10일간 방치하여 숙성시키고, 와트만 여과지로 여과하였다. 이어 이 추출물을 65℃에서 회전 감압 증발기로 건조시켜 상지 추출 분말을 수득하였다. 상기 상지 추출 분말을 물과 1,3-부틸렌글리콜이 동량으로 혼합된 용액에 용 해시켜서 본 발명의 상지 추출물을 수득하였다.
제조예 2 : 상지 추출물 및 헥사노일트리펩타이드를 함유하는 크림 제형의 화장료 제조
상지 추출물과 헥사노일트리펩타이드를 함유하는 조성물의 미백 효과, 자극 시험, 및 안정성 시험을 위하여 여러 성분들을 하기 표 1과 같은 조성비로 사용하여 크림 제형의 화장료를 제조하였다. 조성물의 제조에 사용한 상지 추출물은 상기 제조예 1에서 제조한 추출물이며, 헥사노일트리펩타이드는 스위스의 Mibelle사 제품이다.
구분 |
함량 (중량%) |
성분 |
실시예 |
비교예1 |
비교예2 |
비교예3 |
비교예4 |
비교예5 |
상지 추출물 |
3.0 |
- |
3.0 |
- |
- |
- |
헥사노일트리펩타이드 |
1.0(ppm) |
- |
- |
1.0(ppm) |
- |
- |
락트산 |
- |
- |
- |
- |
1.0 |
- |
글리콜산 |
- |
- |
- |
- |
- |
1.0 |
부틸렌글리콜 |
2.0 |
2.0 |
2.0 |
2.0 |
2.0 |
2.0 |
프로필렌글리콜 |
6.0 |
6.0 |
6.0 |
6.0 |
6.0 |
6.0 |
카르복시비닐폴리머 |
0.5 |
0.5 |
0.5 |
0.5 |
0.5 |
0.5 |
밀납 |
2.0 |
2.0 |
2.0 |
2.0 |
2.0 |
2.0 |
바셀린 |
7.0 |
7.0 |
7.0 |
7.0 |
7.0 |
7.0 |
폴리솔베이트 60 |
2.0 |
2.0 |
2.0 |
2.0 |
2.0 |
2.0 |
솔비탄세스퀴올레이트 |
2.5 |
2.5 |
2.5 |
2.5 |
2.5 |
2.5 |
스쿠알란 |
3.0 |
3.0 |
3.0 |
3.0 |
3.0 |
3.0 |
유동파라핀 |
10.0 |
10.0 |
10.0 |
10.0 |
10.0 |
10.0 |
트리에탄올아민 |
0.5 |
0.5 |
0.5 |
0.5 |
0.5 |
0.5 |
토코페릴아세테이트 |
0.1 |
0.1 |
0.1 |
0.1 |
0.1 |
0.1 |
향료, 방부제 |
미량 |
미량 |
미량 |
미량 |
미량 |
미량 |
정제수 |
잔량 |
잔량 |
잔량 |
잔량 |
잔량 |
잔량 |
합계 |
100 |
100 |
100 |
100 |
100 |
100 |
실험예 1 : 미백효과 측정
30-42세의 여성 20명을 대상으로, 제조예 2에서 제조한 각 화장료의 미백 효과를 측정하였다. 피검자의 팔의 6군데를 가로 × 세로 1cm씩 표시하고, 자외선 UV-A를 15J/㎠의 광량으로 조사하여 흑화를 일으킨 후, 제조예 2에서 제조한 화장료 각각을 1 달 동안 하루에 2회 적용하였다. 피부색 측정 장비인 Minolta CR 300을 사용하여 1 개월 경과 후 피부색 (L value)을 측정하여 하기 수학식을 이용하여 피부색의 변화도를 계산했으며, 그 결과를 하기 표 2에 나타내었다.
ΔL 값 = 화장료 적용 전의 L 값 - 1 개월 경과 후 L 값
미백 임상시험 결과
구분 |
실시예 |
비교예 1 |
비교예 2 |
비교예 3 |
비교예 4 |
비교예 5 |
ΔL 값 |
4.67 |
0.39 |
1.61 |
1.90 |
1.26 |
1.33 |
상기 표 2의 결과에 따르면, 상지 추출물과 헥사노일트리펩타이드를 함께 함유하는 실시예의 크림은 상지 추출물만을 함유한 크림 (비교예 2)에 비해 약 2.9배, 헥사노일트리펩타이드만을 함유한 크림 (비교예 3)에 비해 약 2.5배 높은 미백효과가 나타났다. 아울러, 상지 추출물만을 함유한 크림 (비교예 2) 및 헥사노일트리펩타이드만을 함유한 크림 (비교예 3)은 기존의 각질박리제를 함유한 크림(비교예 4 및 비교예 5)에 비해서도 미백효과가 뛰어났다. 따라서, 본 발명의 조성물과 같이 상지 추출물과 헥사노일트리펩타이드를 동시에 함유하는 경우 미백효과를 상승적으로 크게 증가시킬 수 있음을 알 수 있었다.
실험예 2 : 피부 자극 시험
상기 제조예 2에서 제조된 각 화장료의 피부 자극성을 시험하기 위해, 건강한 성인 남녀 20명을 대상으로 첩포 시험 (patch test)을 헤이즈 테스트 쳄버 (Haye's Test Chamber)를 이용하여 실시하였다. 시험부위를 70% 에탄올로 닦아내고 건조시킨 다음, 준비된 시험물질 (제조예 2의 화장료 각각) 15 ㎍ 또는 15 ㎕를 적하한 쳄버 (Finn chamber, 100x10, EPITEST, 핀란드국)를 시험 대상자의 전박 (forearm) 안쪽 부위에 밀폐 첩포하였다. 24시간 동안 첩포하고 첩포를 제거한 후 표시펜으로 시험 부위를 표시하였다. 각각 1시간 그리고 24시간 후(첩포 제거 후 1시간, 24시간 후 = 첩포 부착 포함 24시간, 48시간)에 확대경 (8MC-150, DAZOR, 미합중국)을 이용하여 시험 부위를 관찰하여 홍반 및 부종 유무를 관찰하였다. 피부 반응은 국제접촉피부염연구회 (ICDRG: International Contact Dermatitis Research Group)의 규정(표 3)에 따라 판정하였으며, 하기 수학식에 의하여 평균 피부 반응도를 계산하고 그 결과를 표 4에 나타내었다.
피부 반응의 평가 기준 및 점수
기호 |
점수 |
평가기준 |
- |
0 |
무반응, 정상 피부 |
± |
0.5 |
희미한 또는 가벼운 홍반 |
+ |
1.0 |
경계가 뚜렷하나 약한 홍반, 부종 및 구진 |
++ |
2.0 |
뚜렷한 홍반, 구진 및 소수포 |
+++ |
3.0 |
심한 홍반 및 소포형성 |
++++ |
6.0 |
대수포 형성 |
시험 물질 |
24 시간 |
48 시간 |
평균 피부 반응도 (n=20) |
± + ++ |
± + ++ |
실시예 |
2 1 - |
- - - |
0.83 |
비교예 1 |
2 - - |
- - - |
0.42 |
비교예 2 |
1 1 - |
- - - |
0.63 |
비교예 3 |
1 1 - |
- - - |
0.63 |
비교예 4 |
6 5 - |
3 2 - |
4.79 |
비교예 5 |
5 4 - |
4 2 - |
4.38 |
상기 표 4에 나타난 바와 같이, 락트산이나 글리콜산을 함유한 제형 (비교예 4 및 5)에서 높은 피부자극이 나타난 결과와는 대조적으로 상지 추출물을 함유한 제형(비교예 2) 및 헥사노일트리펩타이드를 함유한 제형 (비교예 3)에서는 피부 반응도가 매우 낮았고, 본 발명에서 사용한 상지 추출물과 헥사노일트리펩타이드를 모두 함유한 크림 제형(실시예)에서도 또한 피부 자극이 거의 없어, 상지 추출물과 헥사노일트리펩타이드는 피부자극을 거의 유발하지 않는 성분임을 알 수 있었다.
이하 상기한 시험예들의 결과를 근거로 하여 상지 추출물과 헥사노일트리펩타이드를 유효성분으로 함유하는 화장료 조성물을 제시한다. 그러나 본 발명의 조성물이 하기의 제형예들에만 국한되는 것은 아니다.
제형예
1: 유연화장수 (스킨로션)
성분 |
함량 (중량%) |
상지 추출물 |
3.0 |
헥사노일트리펩타이드 |
1.0 (ppm) |
1,3-부틸렌글리콜 |
6.0 |
글리세린 |
4.0 |
올레일알콜 |
0.1 |
폴리솔베이트 20 |
0.5 |
에탄올 |
15.0 |
벤조페논-9 |
0.05 |
향, 방부제 |
미량 |
정제수 |
잔량 |
제형예 2: 영양화장수(밀크로션)
성분 |
함량 (중량%) |
상지 추출물 |
3.0 |
헥사노일트리펩타이드 |
1.0 (ppm) |
프로필렌글리콜 |
6.0 |
글리세린 |
4.0 |
트리에탄올아민 |
1.2 |
토코페릴아세테이트 |
3.0 |
유동 파라핀 |
5.0 |
스쿠알란 |
3.0 |
마카다미아너트오일 |
2.0 |
폴리솔베이트 60 |
1.5 |
솔비탄세스퀴올레이트 |
1.0 |
카르복시비닐 폴리머 |
1.0 |
향, 방부제 |
미량 |
정제수 |
잔량 |
제형예 3: 영양크림
성분 |
함량 (중량%) |
상지 추출물 |
3.0 |
헥사노일트리펩타이드 |
1.0 (ppm) |
바셀린 |
7.0 |
유동파라핀 |
10.0 |
밀납 |
2.0 |
폴리솔베이트 60 |
2.0 |
솔비탄세스퀴올레이트 |
2.5 |
스쿠알란 |
3.0 |
프로필렌글리콜 |
6.0 |
글리세린 |
4.0 |
트리에탄올아민 |
0.5 |
카르복시비닐폴리머 |
0.5 |
토코페릴아세테이트 |
0.1 |
향, 방부제 |
미량 |
정제수 |
잔량 |
제형예 4: 마사지크림
성분 |
함량 (중량%) |
상지 추출물 |
3.0 |
헥사노일트리펩타이드 |
1.0 (ppm) |
프로필렌글리콜 |
6.0 |
글리세린 |
4.0 |
트리에탄올아민 |
0.5 |
밀납 |
2.0 |
토코페릴아세테이트 |
0.1 |
폴리솔베이트 60 |
3.0 |
솔비탄세스퀴올레이트 |
2.5 |
세테아릴알콜 |
2.0 |
유동파라핀 |
30.0 |
카르복시비닐폴리머 |
0.5 |
향, 방부제 |
미량 |
정제수 |
잔량 |
제형예 5: 팩
성분 |
함량 (중량%) |
상지 추출물 |
3.0 |
헥사노일트리펩타이드 |
1.0 (ppm) |
프로필렌글리콜 |
2.0 |
글리세린 |
4.0 |
카르복시비닐폴리머 |
0.3 |
에탄올 |
7.0 |
피이지-40 히드로게비이티드 캐스터 오일 |
0.8 |
트리에탄올아민 |
0.3 |
향, 방부제 |
미량 |
정제수 |
잔량 |