JPWO2020081415A5 - - Google Patents
Download PDFInfo
- Publication number
- JPWO2020081415A5 JPWO2020081415A5 JP2021545269A JP2021545269A JPWO2020081415A5 JP WO2020081415 A5 JPWO2020081415 A5 JP WO2020081415A5 JP 2021545269 A JP2021545269 A JP 2021545269A JP 2021545269 A JP2021545269 A JP 2021545269A JP WO2020081415 A5 JPWO2020081415 A5 JP WO2020081415A5
- Authority
- JP
- Japan
- Prior art keywords
- aav
- composition
- target cells
- hours
- test
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Pending
Links
- 239000000203 mixture Substances 0.000 claims description 86
- 239000000523 sample Substances 0.000 claims description 28
- 239000002245 particle Substances 0.000 claims description 22
- 108020004707 nucleic acids Proteins 0.000 claims description 19
- 150000007523 nucleic acids Chemical class 0.000 claims description 19
- 229920000023 polynucleotide Polymers 0.000 claims description 16
- 239000002157 polynucleotide Substances 0.000 claims description 16
- 230000003612 virological Effects 0.000 claims description 16
- 238000003752 polymerase chain reaction Methods 0.000 claims description 12
- 241001068295 Replication defective viruses Species 0.000 claims description 11
- 238000010790 dilution Methods 0.000 claims description 11
- 241000700605 Viruses Species 0.000 claims description 9
- 229920001850 Nucleic acid sequence Polymers 0.000 claims description 7
- 102000004040 Capsid Proteins Human genes 0.000 claims description 6
- 108090000565 Capsid Proteins Proteins 0.000 claims description 6
- 238000005406 washing Methods 0.000 claims description 5
- 230000005017 genetic modification Effects 0.000 claims description 4
- 235000013617 genetically modified food Nutrition 0.000 claims description 4
- 241000702423 Adeno-associated virus - 2 Species 0.000 claims description 3
- 102100017074 DNAJB7 Human genes 0.000 claims description 3
- 101710007744 DNAJB7 Proteins 0.000 claims description 3
- 241000713666 Lentivirus Species 0.000 claims description 3
- 241000700618 Vaccinia virus Species 0.000 claims description 3
- 239000012472 biological sample Substances 0.000 claims description 3
- 229920003013 deoxyribonucleic acid Polymers 0.000 claims description 3
- 241000701161 unidentified adenovirus Species 0.000 claims description 3
- 238000010353 genetic engineering Methods 0.000 claims description 2
- 230000001809 detectable Effects 0.000 description 3
- 239000002773 nucleotide Substances 0.000 description 2
- 125000003729 nucleotide group Chemical group 0.000 description 2
- 238000003753 real-time PCR Methods 0.000 description 2
- 241001430294 unidentified retrovirus Species 0.000 description 2
- 239000007850 fluorescent dye Substances 0.000 description 1
- 238000006467 substitution reaction Methods 0.000 description 1
- ABZLKHKQJHEPAX-UHFFFAOYSA-N tetramethylrhodamine Chemical compound C=12C=CC(N(C)C)=CC2=[O+]C2=CC(N(C)C)=CC=C2C=1C1=CC=CC=C1C([O-])=O ABZLKHKQJHEPAX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
Description
[本発明1001]
ウイルス粒子を含む参照組成物の感染性に対するウイルス粒子を含む試験組成物の感染性を決定するための方法であって、
a.標的細胞に前記試験組成物及び参照組成物を別々に接種する工程と、
b.前記接種された細胞を洗浄して細胞外のウイルス粒子を除去する工程と、
c.前記試験組成物及び参照組成物を接種された前記標的細胞から、それぞれ試験核酸試料及び参照核酸試料を単離する工程と、
d.前記試験核酸試料及び前記参照核酸試料におけるウイルスゲノムコピー（ＶＧＣ）：標的細胞ゲノムコピー（ＴＣＧＣ）の比を決定する工程と
を含む、前記方法。
[本発明1002]
ウイルス粒子を含む参照組成物の感染性に対するウイルス粒子を含む試験組成物の感染性を決定するための方法であって、
a.前記試験組成物及び参照組成物の系列希釈物を調製する工程と、
b.標的細胞に前記試験組成物及び参照組成物の前記系列希釈物を別々に接種する工程と、
c.前記接種された細胞を洗浄して細胞外のウイルス粒子を除去する工程と、
d.前記試験組成物及び参照組成物を接種された前記標的細胞から、それぞれ試験核酸試料及び参照核酸試料を単離する工程と、
e.前記試験核酸試料及び前記参照核酸試料におけるウイルスゲノムコピー（ＶＧＣ）：標的細胞ゲノムコピー（ＴＣＧＣ）の比を決定する工程と
を含む、前記方法。
[本発明1003]
前記系列希釈物が、10倍未満の希釈物である、本発明1002の方法。
[本発明1004]
前記系列希釈物が、1．5倍、2倍、3倍、4倍、5倍、または8倍の希釈物である、本発明1002の方法。
[本発明1005]
前記系列希釈物が、2倍の希釈物である、本発明1002の方法。
[本発明1006]
前記系列希釈物が、少なくとも2種類の希釈物、少なくとも3種類の希釈物、少なくとも5種類の希釈物、または少なくとも10種類の希釈物を含む、本発明1002～1005のいずれかの方法。
[本発明1007]
前記系列希釈物が、2～20種類の希釈物を含む、本発明1002～1005のいずれかの方法。
[本発明1008]
平行線モデルを用いて、前記参照組成物に対する前記試験組成物の感染性を計算する工程をさらに含む、本発明1002～1007のいずれかの方法。
[本発明1009]
前記参照組成物に対する前記試験組成物の感染性を計算する前記工程が、
a.試験組成物及び参照組成物の各希釈度についてのＶＧＣ：ＴＣＧＣ比を計算することと、
b.前記試験組成物及び参照組成物についての対数希釈度に対し対数ＶＧＣ：ＴＣＧＣ比をプロットすることと、
c.共通の傾きを用いて、前記試験組成物及び参照組成物のデータポイントを試験組成物及び参照組成物の線にフィットさせることと、
d.前記参照組成物に対する前記試験組成物の感染性を
として計算することと
を含む、本発明1008の方法。
[本発明1010]
変動係数（ｃｖ）が、約100％未満、約50％未満、または約25％未満である、本発明1001～1009のいずれかの方法。
[本発明1011]
標的細胞に接種する前記工程が、ウイルス粒子の存在下で前記標的細胞を
a.約5分から約3日の間、
b.約12時間から約36時間の間、
c.約18時間から約30時間の間、
d.約1時間、約2時間、約6時間、約12時間、約18時間、約24時間、約30時間、もしくは約36時間、
e.約1日、もしくは約1．5日、もしくは約2日、または
f.約24時間
にわたってインキュベートすることを含む、本発明1001～1010のいずれかの方法。
[本発明1012]
核酸組成物中の前記ＶＧＣ及びＴＣＧＣがポリメラーゼ連鎖反応によって決定される、本発明1001～1011のいずれかの方法。
[本発明1013]
前記ポリメラーゼ連鎖反応が定量的ポリメラーゼ連鎖反応である、本発明1012の方法。
[本発明1014]
前記ポリメラーゼ連鎖反応がデジタルポリメラーゼ連鎖反応である、本発明1012の方法。
[本発明1015]
前記ウイルス粒子が複製欠損型ウイルスである、本発明1001～1014のいずれかの方法。
[本発明1016]
前記複製欠損型ウイルスが、ＡＡＶ、アデノウイルス、ワクシニア、またはレンチウイルスである、本発明1015の方法。
[本発明1017]
前記複製欠損型ウイルスがレトロウイルスである、本発明1015の方法。
[本発明1018]
前記複製欠損型ウイルスがＡＡＶである、本発明1015の方法。
[本発明1019]
前記ＡＡＶが組換えＡＡＶ（ｒＡＡＶ）である、本発明1018の方法。
[本発明1020]
前記ｒＡＡＶが、ＡＡＶ1、ＡＡＶ2、ＡＡＶ3、ＡＡＶ4、ＡＡＶ5、ＡＡＶ6、ＡＡＶ7、ＡＡＶ8、ＡＡＶ9、ＡＡＶ10、ＡＡＶ11、ＡＡＶ12、ＡＡＶ13、ＡＡＶ14、ＡＡＶ15、及びＡＡＶ16、ＡＡＶ．ｒｈ8、ＡＡＶ．ｒｈ10、ＡＡＶ．ｒｈ20、ＡＡＶ．ｒｈ39、ＡＡＶ．Ｒｈ74、ＡＡＶ．ＲＨＭ4－1、ＡＡＶ．ｈｕ37、ＡＡＶ．Ａｎｃ80、ＡＡＶ．Ａｎｃ80Ｌ65、ＡＡＶ．7ｍ8、ＡＡＶ．ＰＨＰ．Ｂ、ＡＡＶ．ＰＨＰ．ｅＢ、ＡＡＶ2．5、ＡＡＶ2ｔＹＦ、ＡＡＶ3Ｂ、ＡＡＶ．ＬＫ03、ＡＡＶ．ＨＳＣ1、ＡＡＶ．ＨＳＣ2、ＡＡＶ．ＨＳＣ3、ＡＡＶ．ＨＳＣ4、ＡＡＶ．ＨＳＣ5、ＡＡＶ．ＨＳＣ6、ＡＡＶ．ＨＳＣ7、ＡＡＶ．ＨＳＣ8、ＡＡＶ．ＨＳＣ9、ＡＡＶ．ＨＳＣ10、ＡＡＶ．ＨＳＣ11、ＡＡＶ．ＨＳＣ12、ＡＡＶ．ＨＳＣ13、ＡＡＶ．ＨＳＣ14、ＡＡＶ．ＨＳＣ15、またはＡＡＶ．ＨＳＣ16血清型のカプシドタンパク質を含む、本発明1019の方法。
[本発明1021]
前記ｒＡＡＶが、ＡＡＶ8血清型またはＡＡＶ9血清型のカプシドタンパク質を含む、本発明1020の方法。
[本発明1022]
前記標的細胞が、ＢＨＫ21、ＨＥＫ293、ＢＥＡＳ－2ＢＳ、ＨｅＬａＳ3、Ｈｕｈ－7、Ｈｅｐａ1－6、またはＡ549細胞である、本発明1001～1021のいずれかの方法。
[本発明1023]
前記標的細胞がＨｕｈ－7細胞である、本発明1022の方法。
[本発明1024]
前記試験組成物及び前記参照組成物が同じ力価を有し、前記力価がミリリットル当たりのゲノムコピー（ＧＣ）として測定される、本発明1001～1023のいずれかの方法。
[本発明1025]
前記試験組成物及び前記参照組成物が異なる力価を有し、前記力価がミリリットル当たりのゲノムコピー（ＧＣ）として測定される、本発明1001～1023のいずれかの方法。
[本発明1026]
前記試験組成物の前記力価が、約1×10ｅ＋10ＧＣ／ｍｌ～約1×10ｅ＋13ＧＣ／ｍｌのｒＡＡＶ粒子である、本発明1024または本発明1025の方法。
[本発明1027]
前記参照組成物の前記力価が、約1×10ｅ＋10ＧＣ／ｍｌ～約1×10ｅ＋13ＧＣ／ｍｌのｒＡＡＶ粒子である、本発明1024～1026のいずれかの方法。
[本発明1028]
0、1、2、3、4、または5つの置換を含む、以下のヌクレオチド配列：
を含む約15～約40個のヌクレオチドを有する、単離されたポリヌクレオチド。
[本発明1029]
約15～約40個のヌクレオチドを有し、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：1～6のうちの1つのヌクレオチド配列を含む、単離されたポリヌクレオチド。
[本発明1030]
ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：1～6のうちの1つのヌクレオチド配列からなる、単離されたポリヌクレオチド。
[本発明1031]
（ｉ）本発明1028～1030のいずれかのポリヌクレオチドと、（ｉｉ）前記ポリヌクレオチドに共有結合している検出可能な標識とを含む、組成物。
[本発明1032]
前記検出可能な標識が蛍光標識である、本発明1031の組成物。
[本発明1033]
前記検出可能な標識が、ＦＡＭ、ＪＯＥ、ＴＡＭＲＡ、及びＲＯＸのうちの1つ以上を含む、本発明1032の組成物。
[本発明1034]
順方向プライマー及び逆方向プライマーの対であって、前記順方向プライマー及び逆方向プライマーがそれぞれＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：1及び2のポリヌクレオチド配列を含む、前記対。
[本発明1035]
順方向プライマー及び逆方向プライマーの対であって、前記順方向プライマー及び逆方向プライマーがそれぞれＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：4及び5のポリヌクレオチド配列を含む、前記対。
[本発明1036]
プローブ、順方向プライマー、及び逆方向プライマーの組合せであって、前記順方向プライマー、逆方向プライマー、及びプローブが、それぞれＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：1、2、及び3のヌクレオチド配列からなるポリヌクレオチドを含む、前記組合せ。
[本発明1037]
プローブ、順方向プライマー、及び逆方向プライマーの組合せであって、前記順方向プライマー、逆方向プライマー、及びプローブが、それぞれＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：4、5、及び6のヌクレオチド配列からなるポリヌクレオチドを含む、前記組合せ。
[本発明1038]
目的ポリヌクレオチドを生成する方法であって、本発明1034または1035の順方向プライマー及び逆方向プライマーの対を用いて、生物学的試料からのＤＮＡをポリメラーゼ連鎖反応に供する工程を含む、前記方法。
[本発明1039]
目的ポリヌクレオチドを生成する方法であって、本発明1036または1037のプローブ、順方向プライマー、及び逆方向プライマーの組合せを用いて、生物学的試料からのＤＮＡをポリメラーゼ連鎖反応に供する工程を含む、前記方法。
[本発明1040]
試料中のｒＡＡＶを検出するためのキットであって、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：1～3からなる群より選択される1つ以上のポリヌクレオチドを含む、前記キット。
[本発明1041]
試料中のｒＡＡＶを検出するためのキットであって、本発明1034の順方向プライマー及び逆方向プライマーの対を含む、前記キット。
[本発明1042]
試料中のｒＡＡＶを検出するためのキットであって、本発明1036のプローブ、順方向プライマー、及び逆方向プライマーの組合せを含む、前記キット。
[本発明1043]
参照試料の感染性に対するｒＡＡＶ試験試料の感染性を決定するためのキットであって、本発明1034の順方向プライマー及び逆方向プライマーの対を含む、前記キット。
[本発明1044]
本発明1035の順方向プライマー及び逆方向プライマーの対をさらに含む、本発明1043のキット。
[本発明1045]
参照組成物の感染性に対するｒＡＡＶ試験組成物の感染性を決定するためのキットであって、本発明1036のプローブ、順方向プライマー、及び逆方向プライマーの組合せを含む、前記キット。
[本発明1046]
本発明1037のプローブ、順方向プライマー、及び逆方向プライマーの組合せをさらに含む、本発明1045のキット。
[本発明1047]
ｒＡＡＶ参照組成物をさらに含む、本発明1040～1046のいずれかのキット。
[本発明1048]
以下の工程を含む、異なる条件下でのウイルス粒子の組成物の相対的感染性を決定するための方法：
a.第1及び第2の条件セットの下で、標的細胞にウイルス粒子を含む前記組成物を接種する工程と、
b.前記接種された細胞を洗浄して細胞外のウイルス粒子を除去する工程と、
c.前記第1及び第2の条件セットの下で接種された標的細胞から、それぞれ第1及び第2の核酸試料を単離する工程と、
d.前記第1及び第2の核酸試料におけるウイルスゲノムコピー（ＶＧＣ）：標的細胞ゲノムコピー（ＴＣＧＣ）の比を決定する工程。
[本発明1049]
前記第1及び第2の条件セットが、同じ標的細胞を使用する、本発明1048の方法。
[本発明1050]
前記第1及び第2の条件セットが、異なる標的細胞を使用する、本発明1048の方法。
[本発明1051]
前記異なる標的細胞が、異なる遺伝子修飾を含む、本発明1050の方法。
[本発明1052]
前記異なる標的細胞が、前記標的細胞のうちの1つに遺伝子修飾が存在することを除いて同一である、本発明1050の方法。
[本発明1053]
標的細胞に接種する前記工程が、標的細胞に前記組成物の系列希釈物を接種することを含む、本発明1049～1052のいずれかの方法。
[本発明1054]
前記系列希釈物が、2倍の希釈物である、本発明1053の方法。
[本発明1055]
標的細胞に接種する前記工程が、標的細胞に前記組成物の系列希釈物を接種することを含む、本発明1053または本発明1054の方法。
[本発明1056]
平行線モデルを用いて、前記第1及び第2の条件セットの下で、前記組成物の相対的感染性を計算する工程をさらに含む、本発明1053～1055のいずれかの方法。
[本発明1057]
前記第1及び第2の条件セットの下で、前記組成物の相対感染性を計算する前記工程が、
a.前記第1及び第2の条件セットの各希釈度についてのＶＧＣ：ＴＣＧＣ比を計算することと、
b.前記第1及び第2の条件セットについての対数希釈度に対し対数ＶＧＣ：ＴＣＧＣ比をプロットすることと、
c.共通の傾きを用いて、前記第1及び第2の条件セットのデータポイントを第1及び第2の条件の線にフィットさせることと、
d.前記第2の条件に対する前記第1の条件の下での感染性を
として計算することと
を含む、本発明1056の方法。
[本発明1058]
変動係数（ｃｖ）が、約100％未満、約50％未満、または約25％未満である、本発明1053～1057のいずれかの方法。
[本発明1059]
核酸組成物中の前記ＶＧＣ及びＴＣＧＣがポリメラーゼ連鎖反応によって決定される、本発明1053～1058のいずれかの方法。
[本発明1060]
前記ポリメラーゼ連鎖反応が定量的ポリメラーゼ連鎖反応である、本発明1059の方法。
[本発明1061]
前記ポリメラーゼ連鎖反応がデジタルポリメラーゼ連鎖反応である、本発明1059の方法。
[本発明1062]
前記ウイルス粒子が複製欠損型ウイルスである、本発明1048～1061のいずれかの方法。
[本発明1063]
前記複製欠損型ウイルスが、ＡＡＶ、アデノウイルス、ワクシニア、またはレンチウイルスである、本発明1062の方法。
[本発明1064]
前記複製欠損型ウイルスがレトロウイルスである、本発明1062の方法。
[本発明1065]
前記複製欠損型ウイルスがＡＡＶである、本発明1062の方法。
[本発明1066]
前記ＡＡＶが組換えＡＡＶ（ｒＡＡＶ）である、本発明1065の方法。
[本発明1067]
前記ｒＡＡＶが、ＡＡＶ1、ＡＡＶ2、ＡＡＶ3、ＡＡＶ4、ＡＡＶ5、ＡＡＶ6、ＡＡＶ7、ＡＡＶ8、ＡＡＶ9、ＡＡＶ10、ＡＡＶ11、ＡＡＶ12、ＡＡＶ13、ＡＡＶ14、ＡＡＶ15、及びＡＡＶ16、ＡＡＶ．ｒｈ8、ＡＡＶ．ｒｈ10、ＡＡＶ．ｒｈ20、ＡＡＶ．ｒｈ39、ＡＡＶ．Ｒｈ74、ＡＡＶ．ＲＨＭ4－1、ＡＡＶ．ｈｕ37、ＡＡＶ．Ａｎｃ80、ＡＡＶ．Ａｎｃ80Ｌ65、ＡＡＶ．7ｍ8、ＡＡＶ．ＰＨＰ．Ｂ、ＡＡＶ．ＰＨＰ．ｅＢ、ＡＡＶ2．5、ＡＡＶ2ｔＹＦ、ＡＡＶ3Ｂ、ＡＡＶ．ＬＫ03、ＡＡＶ．ＨＳＣ1、ＡＡＶ．ＨＳＣ2、ＡＡＶ．ＨＳＣ3、ＡＡＶ．ＨＳＣ4、ＡＡＶ．ＨＳＣ5、ＡＡＶ．ＨＳＣ6、ＡＡＶ．ＨＳＣ7、ＡＡＶ．ＨＳＣ8、ＡＡＶ．ＨＳＣ9、ＡＡＶ．ＨＳＣ10、ＡＡＶ．ＨＳＣ11、ＡＡＶ．ＨＳＣ12、ＡＡＶ．ＨＳＣ13、ＡＡＶ．ＨＳＣ14、ＡＡＶ．ＨＳＣ15、またはＡＡＶ．ＨＳＣ16血清型のカプシドタンパク質を含む、本発明1066の方法。
[本発明1068]
前記ｒＡＡＶが、ＡＡＶ8血清型またはＡＡＶ9血清型のカプシドタンパク質を含む、本発明1067の方法。
[本発明1069]
少なくとも1つの条件セットの下での前記標的細胞が、ＢＨＫ21、ＨＥＫ293、ＢＥＡＳ－2ＢＳ、ＨｅＬａＳ3、Ｈｕｈ－7、Ｈｅｐａ1－6、またはＡ549細胞を含む、本発明1048～1068のいずれかの方法。
[本発明1070]
少なくとも1つの条件セットの下での前記標的細胞がＨｕｈ－7細胞を含む、本発明1022または1069の方法。
本明細書で説明される組成物及び方法のさらなる他の特徴及び利点は、添付の図面と共に読めば、以下の詳細な説明からさらに明らかになるであろう。
ウイルス粒子を含む参照組成物の感染性に対するウイルス粒子を含む試験組成物の感染性を決定するための方法であって、
a.標的細胞に前記試験組成物及び参照組成物を別々に接種する工程と、
b.前記接種された細胞を洗浄して細胞外のウイルス粒子を除去する工程と、
c.前記試験組成物及び参照組成物を接種された前記標的細胞から、それぞれ試験核酸試料及び参照核酸試料を単離する工程と、
d.前記試験核酸試料及び前記参照核酸試料におけるウイルスゲノムコピー（ＶＧＣ）：標的細胞ゲノムコピー（ＴＣＧＣ）の比を決定する工程と
を含む、前記方法。
[本発明1002]
ウイルス粒子を含む参照組成物の感染性に対するウイルス粒子を含む試験組成物の感染性を決定するための方法であって、
a.前記試験組成物及び参照組成物の系列希釈物を調製する工程と、
b.標的細胞に前記試験組成物及び参照組成物の前記系列希釈物を別々に接種する工程と、
c.前記接種された細胞を洗浄して細胞外のウイルス粒子を除去する工程と、
d.前記試験組成物及び参照組成物を接種された前記標的細胞から、それぞれ試験核酸試料及び参照核酸試料を単離する工程と、
e.前記試験核酸試料及び前記参照核酸試料におけるウイルスゲノムコピー（ＶＧＣ）：標的細胞ゲノムコピー（ＴＣＧＣ）の比を決定する工程と
を含む、前記方法。
[本発明1003]
前記系列希釈物が、10倍未満の希釈物である、本発明1002の方法。
[本発明1004]
前記系列希釈物が、1．5倍、2倍、3倍、4倍、5倍、または8倍の希釈物である、本発明1002の方法。
[本発明1005]
前記系列希釈物が、2倍の希釈物である、本発明1002の方法。
[本発明1006]
前記系列希釈物が、少なくとも2種類の希釈物、少なくとも3種類の希釈物、少なくとも5種類の希釈物、または少なくとも10種類の希釈物を含む、本発明1002～1005のいずれかの方法。
[本発明1007]
前記系列希釈物が、2～20種類の希釈物を含む、本発明1002～1005のいずれかの方法。
[本発明1008]
平行線モデルを用いて、前記参照組成物に対する前記試験組成物の感染性を計算する工程をさらに含む、本発明1002～1007のいずれかの方法。
[本発明1009]
前記参照組成物に対する前記試験組成物の感染性を計算する前記工程が、
a.試験組成物及び参照組成物の各希釈度についてのＶＧＣ：ＴＣＧＣ比を計算することと、
b.前記試験組成物及び参照組成物についての対数希釈度に対し対数ＶＧＣ：ＴＣＧＣ比をプロットすることと、
c.共通の傾きを用いて、前記試験組成物及び参照組成物のデータポイントを試験組成物及び参照組成物の線にフィットさせることと、
d.前記参照組成物に対する前記試験組成物の感染性を
を含む、本発明1008の方法。
[本発明1010]
変動係数（ｃｖ）が、約100％未満、約50％未満、または約25％未満である、本発明1001～1009のいずれかの方法。
[本発明1011]
標的細胞に接種する前記工程が、ウイルス粒子の存在下で前記標的細胞を
a.約5分から約3日の間、
b.約12時間から約36時間の間、
c.約18時間から約30時間の間、
d.約1時間、約2時間、約6時間、約12時間、約18時間、約24時間、約30時間、もしくは約36時間、
e.約1日、もしくは約1．5日、もしくは約2日、または
f.約24時間
にわたってインキュベートすることを含む、本発明1001～1010のいずれかの方法。
[本発明1012]
核酸組成物中の前記ＶＧＣ及びＴＣＧＣがポリメラーゼ連鎖反応によって決定される、本発明1001～1011のいずれかの方法。
[本発明1013]
前記ポリメラーゼ連鎖反応が定量的ポリメラーゼ連鎖反応である、本発明1012の方法。
[本発明1014]
前記ポリメラーゼ連鎖反応がデジタルポリメラーゼ連鎖反応である、本発明1012の方法。
[本発明1015]
前記ウイルス粒子が複製欠損型ウイルスである、本発明1001～1014のいずれかの方法。
[本発明1016]
前記複製欠損型ウイルスが、ＡＡＶ、アデノウイルス、ワクシニア、またはレンチウイルスである、本発明1015の方法。
[本発明1017]
前記複製欠損型ウイルスがレトロウイルスである、本発明1015の方法。
[本発明1018]
前記複製欠損型ウイルスがＡＡＶである、本発明1015の方法。
[本発明1019]
前記ＡＡＶが組換えＡＡＶ（ｒＡＡＶ）である、本発明1018の方法。
[本発明1020]
前記ｒＡＡＶが、ＡＡＶ1、ＡＡＶ2、ＡＡＶ3、ＡＡＶ4、ＡＡＶ5、ＡＡＶ6、ＡＡＶ7、ＡＡＶ8、ＡＡＶ9、ＡＡＶ10、ＡＡＶ11、ＡＡＶ12、ＡＡＶ13、ＡＡＶ14、ＡＡＶ15、及びＡＡＶ16、ＡＡＶ．ｒｈ8、ＡＡＶ．ｒｈ10、ＡＡＶ．ｒｈ20、ＡＡＶ．ｒｈ39、ＡＡＶ．Ｒｈ74、ＡＡＶ．ＲＨＭ4－1、ＡＡＶ．ｈｕ37、ＡＡＶ．Ａｎｃ80、ＡＡＶ．Ａｎｃ80Ｌ65、ＡＡＶ．7ｍ8、ＡＡＶ．ＰＨＰ．Ｂ、ＡＡＶ．ＰＨＰ．ｅＢ、ＡＡＶ2．5、ＡＡＶ2ｔＹＦ、ＡＡＶ3Ｂ、ＡＡＶ．ＬＫ03、ＡＡＶ．ＨＳＣ1、ＡＡＶ．ＨＳＣ2、ＡＡＶ．ＨＳＣ3、ＡＡＶ．ＨＳＣ4、ＡＡＶ．ＨＳＣ5、ＡＡＶ．ＨＳＣ6、ＡＡＶ．ＨＳＣ7、ＡＡＶ．ＨＳＣ8、ＡＡＶ．ＨＳＣ9、ＡＡＶ．ＨＳＣ10、ＡＡＶ．ＨＳＣ11、ＡＡＶ．ＨＳＣ12、ＡＡＶ．ＨＳＣ13、ＡＡＶ．ＨＳＣ14、ＡＡＶ．ＨＳＣ15、またはＡＡＶ．ＨＳＣ16血清型のカプシドタンパク質を含む、本発明1019の方法。
[本発明1021]
前記ｒＡＡＶが、ＡＡＶ8血清型またはＡＡＶ9血清型のカプシドタンパク質を含む、本発明1020の方法。
[本発明1022]
前記標的細胞が、ＢＨＫ21、ＨＥＫ293、ＢＥＡＳ－2ＢＳ、ＨｅＬａＳ3、Ｈｕｈ－7、Ｈｅｐａ1－6、またはＡ549細胞である、本発明1001～1021のいずれかの方法。
[本発明1023]
前記標的細胞がＨｕｈ－7細胞である、本発明1022の方法。
[本発明1024]
前記試験組成物及び前記参照組成物が同じ力価を有し、前記力価がミリリットル当たりのゲノムコピー（ＧＣ）として測定される、本発明1001～1023のいずれかの方法。
[本発明1025]
前記試験組成物及び前記参照組成物が異なる力価を有し、前記力価がミリリットル当たりのゲノムコピー（ＧＣ）として測定される、本発明1001～1023のいずれかの方法。
[本発明1026]
前記試験組成物の前記力価が、約1×10ｅ＋10ＧＣ／ｍｌ～約1×10ｅ＋13ＧＣ／ｍｌのｒＡＡＶ粒子である、本発明1024または本発明1025の方法。
[本発明1027]
前記参照組成物の前記力価が、約1×10ｅ＋10ＧＣ／ｍｌ～約1×10ｅ＋13ＧＣ／ｍｌのｒＡＡＶ粒子である、本発明1024～1026のいずれかの方法。
[本発明1028]
0、1、2、3、4、または5つの置換を含む、以下のヌクレオチド配列：
[本発明1029]
約15～約40個のヌクレオチドを有し、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：1～6のうちの1つのヌクレオチド配列を含む、単離されたポリヌクレオチド。
[本発明1030]
ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：1～6のうちの1つのヌクレオチド配列からなる、単離されたポリヌクレオチド。
[本発明1031]
（ｉ）本発明1028～1030のいずれかのポリヌクレオチドと、（ｉｉ）前記ポリヌクレオチドに共有結合している検出可能な標識とを含む、組成物。
[本発明1032]
前記検出可能な標識が蛍光標識である、本発明1031の組成物。
[本発明1033]
前記検出可能な標識が、ＦＡＭ、ＪＯＥ、ＴＡＭＲＡ、及びＲＯＸのうちの1つ以上を含む、本発明1032の組成物。
[本発明1034]
順方向プライマー及び逆方向プライマーの対であって、前記順方向プライマー及び逆方向プライマーがそれぞれＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：1及び2のポリヌクレオチド配列を含む、前記対。
[本発明1035]
順方向プライマー及び逆方向プライマーの対であって、前記順方向プライマー及び逆方向プライマーがそれぞれＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：4及び5のポリヌクレオチド配列を含む、前記対。
[本発明1036]
プローブ、順方向プライマー、及び逆方向プライマーの組合せであって、前記順方向プライマー、逆方向プライマー、及びプローブが、それぞれＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：1、2、及び3のヌクレオチド配列からなるポリヌクレオチドを含む、前記組合せ。
[本発明1037]
プローブ、順方向プライマー、及び逆方向プライマーの組合せであって、前記順方向プライマー、逆方向プライマー、及びプローブが、それぞれＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：4、5、及び6のヌクレオチド配列からなるポリヌクレオチドを含む、前記組合せ。
[本発明1038]
目的ポリヌクレオチドを生成する方法であって、本発明1034または1035の順方向プライマー及び逆方向プライマーの対を用いて、生物学的試料からのＤＮＡをポリメラーゼ連鎖反応に供する工程を含む、前記方法。
[本発明1039]
目的ポリヌクレオチドを生成する方法であって、本発明1036または1037のプローブ、順方向プライマー、及び逆方向プライマーの組合せを用いて、生物学的試料からのＤＮＡをポリメラーゼ連鎖反応に供する工程を含む、前記方法。
[本発明1040]
試料中のｒＡＡＶを検出するためのキットであって、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：1～3からなる群より選択される1つ以上のポリヌクレオチドを含む、前記キット。
[本発明1041]
試料中のｒＡＡＶを検出するためのキットであって、本発明1034の順方向プライマー及び逆方向プライマーの対を含む、前記キット。
[本発明1042]
試料中のｒＡＡＶを検出するためのキットであって、本発明1036のプローブ、順方向プライマー、及び逆方向プライマーの組合せを含む、前記キット。
[本発明1043]
参照試料の感染性に対するｒＡＡＶ試験試料の感染性を決定するためのキットであって、本発明1034の順方向プライマー及び逆方向プライマーの対を含む、前記キット。
[本発明1044]
本発明1035の順方向プライマー及び逆方向プライマーの対をさらに含む、本発明1043のキット。
[本発明1045]
参照組成物の感染性に対するｒＡＡＶ試験組成物の感染性を決定するためのキットであって、本発明1036のプローブ、順方向プライマー、及び逆方向プライマーの組合せを含む、前記キット。
[本発明1046]
本発明1037のプローブ、順方向プライマー、及び逆方向プライマーの組合せをさらに含む、本発明1045のキット。
[本発明1047]
ｒＡＡＶ参照組成物をさらに含む、本発明1040～1046のいずれかのキット。
[本発明1048]
以下の工程を含む、異なる条件下でのウイルス粒子の組成物の相対的感染性を決定するための方法：
a.第1及び第2の条件セットの下で、標的細胞にウイルス粒子を含む前記組成物を接種する工程と、
b.前記接種された細胞を洗浄して細胞外のウイルス粒子を除去する工程と、
c.前記第1及び第2の条件セットの下で接種された標的細胞から、それぞれ第1及び第2の核酸試料を単離する工程と、
d.前記第1及び第2の核酸試料におけるウイルスゲノムコピー（ＶＧＣ）：標的細胞ゲノムコピー（ＴＣＧＣ）の比を決定する工程。
[本発明1049]
前記第1及び第2の条件セットが、同じ標的細胞を使用する、本発明1048の方法。
[本発明1050]
前記第1及び第2の条件セットが、異なる標的細胞を使用する、本発明1048の方法。
[本発明1051]
前記異なる標的細胞が、異なる遺伝子修飾を含む、本発明1050の方法。
[本発明1052]
前記異なる標的細胞が、前記標的細胞のうちの1つに遺伝子修飾が存在することを除いて同一である、本発明1050の方法。
[本発明1053]
標的細胞に接種する前記工程が、標的細胞に前記組成物の系列希釈物を接種することを含む、本発明1049～1052のいずれかの方法。
[本発明1054]
前記系列希釈物が、2倍の希釈物である、本発明1053の方法。
[本発明1055]
標的細胞に接種する前記工程が、標的細胞に前記組成物の系列希釈物を接種することを含む、本発明1053または本発明1054の方法。
[本発明1056]
平行線モデルを用いて、前記第1及び第2の条件セットの下で、前記組成物の相対的感染性を計算する工程をさらに含む、本発明1053～1055のいずれかの方法。
[本発明1057]
前記第1及び第2の条件セットの下で、前記組成物の相対感染性を計算する前記工程が、
a.前記第1及び第2の条件セットの各希釈度についてのＶＧＣ：ＴＣＧＣ比を計算することと、
b.前記第1及び第2の条件セットについての対数希釈度に対し対数ＶＧＣ：ＴＣＧＣ比をプロットすることと、
c.共通の傾きを用いて、前記第1及び第2の条件セットのデータポイントを第1及び第2の条件の線にフィットさせることと、
d.前記第2の条件に対する前記第1の条件の下での感染性を
を含む、本発明1056の方法。
[本発明1058]
変動係数（ｃｖ）が、約100％未満、約50％未満、または約25％未満である、本発明1053～1057のいずれかの方法。
[本発明1059]
核酸組成物中の前記ＶＧＣ及びＴＣＧＣがポリメラーゼ連鎖反応によって決定される、本発明1053～1058のいずれかの方法。
[本発明1060]
前記ポリメラーゼ連鎖反応が定量的ポリメラーゼ連鎖反応である、本発明1059の方法。
[本発明1061]
前記ポリメラーゼ連鎖反応がデジタルポリメラーゼ連鎖反応である、本発明1059の方法。
[本発明1062]
前記ウイルス粒子が複製欠損型ウイルスである、本発明1048～1061のいずれかの方法。
[本発明1063]
前記複製欠損型ウイルスが、ＡＡＶ、アデノウイルス、ワクシニア、またはレンチウイルスである、本発明1062の方法。
[本発明1064]
前記複製欠損型ウイルスがレトロウイルスである、本発明1062の方法。
[本発明1065]
前記複製欠損型ウイルスがＡＡＶである、本発明1062の方法。
[本発明1066]
前記ＡＡＶが組換えＡＡＶ（ｒＡＡＶ）である、本発明1065の方法。
[本発明1067]
前記ｒＡＡＶが、ＡＡＶ1、ＡＡＶ2、ＡＡＶ3、ＡＡＶ4、ＡＡＶ5、ＡＡＶ6、ＡＡＶ7、ＡＡＶ8、ＡＡＶ9、ＡＡＶ10、ＡＡＶ11、ＡＡＶ12、ＡＡＶ13、ＡＡＶ14、ＡＡＶ15、及びＡＡＶ16、ＡＡＶ．ｒｈ8、ＡＡＶ．ｒｈ10、ＡＡＶ．ｒｈ20、ＡＡＶ．ｒｈ39、ＡＡＶ．Ｒｈ74、ＡＡＶ．ＲＨＭ4－1、ＡＡＶ．ｈｕ37、ＡＡＶ．Ａｎｃ80、ＡＡＶ．Ａｎｃ80Ｌ65、ＡＡＶ．7ｍ8、ＡＡＶ．ＰＨＰ．Ｂ、ＡＡＶ．ＰＨＰ．ｅＢ、ＡＡＶ2．5、ＡＡＶ2ｔＹＦ、ＡＡＶ3Ｂ、ＡＡＶ．ＬＫ03、ＡＡＶ．ＨＳＣ1、ＡＡＶ．ＨＳＣ2、ＡＡＶ．ＨＳＣ3、ＡＡＶ．ＨＳＣ4、ＡＡＶ．ＨＳＣ5、ＡＡＶ．ＨＳＣ6、ＡＡＶ．ＨＳＣ7、ＡＡＶ．ＨＳＣ8、ＡＡＶ．ＨＳＣ9、ＡＡＶ．ＨＳＣ10、ＡＡＶ．ＨＳＣ11、ＡＡＶ．ＨＳＣ12、ＡＡＶ．ＨＳＣ13、ＡＡＶ．ＨＳＣ14、ＡＡＶ．ＨＳＣ15、またはＡＡＶ．ＨＳＣ16血清型のカプシドタンパク質を含む、本発明1066の方法。
[本発明1068]
前記ｒＡＡＶが、ＡＡＶ8血清型またはＡＡＶ9血清型のカプシドタンパク質を含む、本発明1067の方法。
[本発明1069]
少なくとも1つの条件セットの下での前記標的細胞が、ＢＨＫ21、ＨＥＫ293、ＢＥＡＳ－2ＢＳ、ＨｅＬａＳ3、Ｈｕｈ－7、Ｈｅｐａ1－6、またはＡ549細胞を含む、本発明1048～1068のいずれかの方法。
[本発明1070]
少なくとも1つの条件セットの下での前記標的細胞がＨｕｈ－7細胞を含む、本発明1022または1069の方法。
本明細書で説明される組成物及び方法のさらなる他の特徴及び利点は、添付の図面と共に読めば、以下の詳細な説明からさらに明らかになるであろう。
Claims (15)
- ウイルス粒子を含む参照組成物の感染性に対するウイルス粒子を含む試験組成物の感染性を決定するための方法であって、
a.標的細胞に前記試験組成物及び参照組成物を別々に接種する工程と、
b.前記接種された細胞を洗浄して細胞外のウイルス粒子を除去する工程と、
c.前記試験組成物及び参照組成物を接種された前記標的細胞から、それぞれ試験核酸試料及び参照核酸試料を単離する工程と、
d.前記試験核酸試料及び前記参照核酸試料におけるウイルスゲノムコピー（ＶＧＣ）：標的細胞ゲノムコピー（ＴＣＧＣ）の比を決定する工程と
を含み前記ウイルス粒子が複製欠損型ウイルスである、前記方法。 - 前記試験組成物及び参照組成物の系列希釈物を調製する工程をさらに含み、かつ、任意で、平行線モデルを用いて、前記参照組成物に対する前記試験組成物の感染性を計算する工程をさらに含む、請求項１に記載の方法。
- 前記参照組成物に対する前記試験組成物の感染性を計算する前記工程が、
a.試験組成物及び参照組成物の各希釈度についてのＶＧＣ：ＴＣＧＣ比を計算することと、
b.前記試験組成物及び参照組成物についての対数希釈度に対し対数ＶＧＣ：ＴＣＧＣ比をプロットすることと、
c.共通の傾きを用いて、前記試験組成物及び参照組成物のデータポイントを試験組成物及び参照組成物の線にフィットさせることと、
d.前記参照組成物に対する前記試験組成物の感染性を
として計算することと
を含む、請求項２に記載の方法。 - 標的細胞に接種する前記工程が、ウイルス粒子の存在下で前記標的細胞を
a.約５分から約３日の間、
b.約１２時間から約３６時間の間、
c.約１８時間から約３０時間の間、
d.約１時間、約２時間、約６時間、約１２時間、約１８時間、約２４時間、約３０時間、もしくは約３６時間、
e.約１日、もしくは約１．５日、もしくは約２日、または
f.約２４時間
にわたってインキュベートすることを含む、請求項１～３のいずれか１項に記載の方法。 - 核酸組成物中の前記ＶＧＣ及びＴＣＧＣがポリメラーゼ連鎖反応によって決定される、請求項１～４のいずれか１項に記載の方法。
- 前記試験組成物及び前記参照組成物が同じ力価を有し、前記力価がミリリットル当たりのゲノムコピー（ＧＣ）として測定される、請求項１～５のいずれか１項に記載の方法。
- (a) それぞれＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１及び２のポリヌクレオチド配列を含む順方向プライマー及び逆方向プライマーの対、
(b) それぞれＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４及び５のポリヌクレオチド配列を含む順方向プライマー及び逆方向プライマーの対、
(c) プローブ、順方向プライマー、及び逆方向プライマーの組合せであって、前記順方向プライマー、逆方向プライマー、及びプローブが、それぞれＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１、２、及び３のヌクレオチド配列からなるポリヌクレオチドを含む、前記組合せ、または
(d) プローブ、順方向プライマー、及び逆方向プライマーの組合せであって、前記順方向プライマー、逆方向プライマー、及びプローブが、それぞれＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４、５、及び６のヌクレオチド配列からなるポリヌクレオチドを含む、前記組合せ
を用いて、生物学的試料からのＤＮＡをポリメラーゼ連鎖反応に供する工程を含む、請求項５に記載の方法。 - 以下の工程を含む、異なる条件下でのウイルス粒子の組成物の相対的感染性を決定するための方法であって、前記ウイルス粒子が複製欠損型ウイルスを含む、前記方法：
a.第１及び第２の条件セットの下で、標的細胞にウイルス粒子を含む前記組成物を接種する工程と、
b.前記接種された細胞を洗浄して細胞外のウイルス粒子を除去する工程と、
c.前記第１及び第２の条件セットの下で接種された標的細胞から、それぞれ第１及び第２の核酸試料を単離する工程と、
d.前記第１及び第２の核酸試料におけるウイルスゲノムコピー（ＶＧＣ）：標的細胞ゲノムコピー（ＴＣＧＣ）の比を決定する工程。 - (a)前記第１及び第２の条件セットが、同じ標的細胞を使用する、または(b) 前記第１及び第２の条件セットが、異なる標的細胞を使用する、任意で、前記異なる標的細胞が、異なる遺伝子修飾を含む、または前記異なる標的細胞が、前記標的細胞のうちの１つに遺伝子修飾が存在することを除いて同一である、請求項８に記載の方法。
- 標的細胞に接種する前記工程が、標的細胞に前記組成物の系列希釈物を接種することを含む、請求項８または９に記載の方法。
- 前記第１及び第２の条件セットの下で、前記組成物の相対感染性を計算する前記工程が、
a.前記第１及び第２の条件セットの各希釈度についてのＶＧＣ：ＴＣＧＣ比を計算することと、
b.前記第１及び第２の条件セットについての対数希釈度に対し対数ＶＧＣ：ＴＣＧＣ比をプロットすることと、
c.共通の傾きを用いて、前記第１及び第２の条件セットのデータポイントを第１及び第２の条件の線にフィットさせることと、
d.前記第２の条件に対する前記第１の条件の下での感染性を
として計算することと
を含む、請求項１０に記載の方法。 - 前記複製欠損型ウイルスが、ＡＡＶ、アデノウイルス、ワクシニア、またはレンチウイルスである、請求項１～１１のいずれか１項に記載の方法。
- 前記複製欠損型ウイルスがＡＡＶである、好ましくは前記ＡＡＶが組換えＡＡＶ（ｒＡＡＶ）である、請求項１２に記載の方法。
- 前記ｒＡＡＶが、ＡＡＶ１、ＡＡＶ２、ＡＡＶ３、ＡＡＶ４、ＡＡＶ５、ＡＡＶ６、ＡＡＶ７、ＡＡＶ８、ＡＡＶ９、ＡＡＶ１０、ＡＡＶ１１、ＡＡＶ１２、ＡＡＶ１３、ＡＡＶ１４、ＡＡＶ１５、及びＡＡＶ１６、ＡＡＶ．ｒｈ８、ＡＡＶ．ｒｈ１０、ＡＡＶ．ｒｈ２０、ＡＡＶ．ｒｈ３９、ＡＡＶ．Ｒｈ７４、ＡＡＶ．ＲＨＭ４－１、ＡＡＶ．ｈｕ３７、ＡＡＶ．Ａｎｃ８０、ＡＡＶ．Ａｎｃ８０Ｌ６５、ＡＡＶ．７ｍ８、ＡＡＶ．ＰＨＰ．Ｂ、ＡＡＶ．ＰＨＰ．ｅＢ、ＡＡＶ２．５、ＡＡＶ２ｔＹＦ、ＡＡＶ３Ｂ、ＡＡＶ．ＬＫ０３、ＡＡＶ．ＨＳＣ１、ＡＡＶ．ＨＳＣ２、ＡＡＶ．ＨＳＣ３、ＡＡＶ．ＨＳＣ４、ＡＡＶ．ＨＳＣ５、ＡＡＶ．ＨＳＣ６、ＡＡＶ．ＨＳＣ７、ＡＡＶ．ＨＳＣ８、ＡＡＶ．ＨＳＣ９、ＡＡＶ．ＨＳＣ１０、ＡＡＶ．ＨＳＣ１１、ＡＡＶ．ＨＳＣ１２、ＡＡＶ．ＨＳＣ１３、ＡＡＶ．ＨＳＣ１４、ＡＡＶ．ＨＳＣ１５、またはＡＡＶ．ＨＳＣ１６血清型のカプシドタンパク質を含む、好ましくは前記ｒＡＡＶが、ＡＡＶ８血清型またはＡＡＶ９血清型のカプシドタンパク質を含む、請求項１３に記載の方法。
- 少なくとも１つの条件セットの下での前記標的細胞が、ＢＨＫ２１、ＨＥＫ２９３、ＢＥＡＳ－２ＢＳ、ＨｅＬａＳ３、Ｈｕｈ－７、Ｈｅｐａ１－６、またはＡ５４９細胞を含む、好ましくは少なくとも１つの条件セットの下での前記標的細胞がＨｕｈ－７細胞を含む、請求項１～１４のいずれか１項に記載の方法。
Applications Claiming Priority (3)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| US201862745859P | 2018-10-15 | 2018-10-15 | |
| US62/745,859 | 2018-10-15 | ||
| PCT/US2019/056042 WO2020081415A1 (en) | 2018-10-15 | 2019-10-14 | Method for measuring the infectivity of replication defective viral vectors and viruses |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JP2022514112A JP2022514112A (ja) | 2022-02-09 |
| JPWO2020081415A5 true JPWO2020081415A5 (ja) | 2022-10-21 |
Family
ID=68393096
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP2021545269A Pending JP2022514112A (ja) | 2018-10-15 | 2019-10-14 | 複製欠損型ウイルスベクター及びウイルスの感染性を測定するための方法 |
Country Status (9)
| Country | Link |
|---|---|
| US (1) | US20210324483A1 (ja) |
| EP (1) | EP3867412A1 (ja) |
| JP (1) | JP2022514112A (ja) |
| KR (1) | KR20210075994A (ja) |
| CN (1) | CN112912518A (ja) |
| AU (1) | AU2019362833A1 (ja) |
| CA (1) | CA3115524A1 (ja) |
| IL (1) | IL282195A (ja) |
| WO (1) | WO2020081415A1 (ja) |
Families Citing this family (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN115197967B (zh) * | 2021-04-08 | 2023-09-15 | 广州派真生物技术有限公司 | 制备重组腺相关病毒的辅助质粒及其应用 |
Family Cites Families (48)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US5658785A (en) * | 1994-06-06 | 1997-08-19 | Children's Hospital, Inc. | Adeno-associated virus materials and methods |
| US7198784B2 (en) | 1996-10-17 | 2007-04-03 | Oxford Biomedica (Uk) Limited | Retroviral vectors |
| US6989264B2 (en) | 1997-09-05 | 2006-01-24 | Targeted Genetics Corporation | Methods for generating high titer helper-free preparations of released recombinant AAV vectors |
| US8715940B2 (en) | 1999-04-06 | 2014-05-06 | Wisconsin Alumni Research Foundation | Method of making recombinant influenza virus |
| JP4827353B2 (ja) | 1999-08-09 | 2011-11-30 | ターゲティッド ジェネティクス コーポレイション | 鎖内塩基対を形成するような配列の設計による、組換えウイルスベクターからの一本鎖の異種ヌクレオチド配列の発現の増大 |
| EP1402023A4 (en) | 2001-05-31 | 2005-06-15 | Univ Rockefeller | METHOD FOR GENERATING DEFECTIVE VIRAL VECTORS FOR REPLICATION EXEMPT FROM ASSISTANT VIRUSES |
| US6723551B2 (en) | 2001-11-09 | 2004-04-20 | The United States Of America As Represented By The Department Of Health And Human Services | Production of adeno-associated virus in insect cells |
| SG157224A1 (en) | 2001-11-13 | 2009-12-29 | Univ Pennsylvania | A method of detecting and/or identifying adeno-associated virus (aav) sequences and isolating novel sequences identified thereby |
| EP1453547B1 (en) | 2001-12-17 | 2016-09-21 | The Trustees Of The University Of Pennsylvania | Adeno-associated virus (aav) serotype 8 sequences, vectors containing same, and uses therefor |
| US20060286545A1 (en) | 2003-05-23 | 2006-12-21 | Mount Sinai School Of Medicine Of New York University | Viral vectors with improved properties |
| DK3211085T3 (da) | 2003-09-30 | 2021-06-21 | Univ Pennsylvania | Klader af adeno-associeret virus (aav), sekvenser, vektorer indeholdende disse og anvendelser deraf |
| EP2179744B1 (en) * | 2004-09-09 | 2010-12-01 | Novartis Vaccines and Diagnostics GmbH | Decreasing potential latrogenic risks associated with influenza vaccines |
| US7183969B2 (en) | 2004-12-22 | 2007-02-27 | Raytheon Company | System and technique for calibrating radar arrays |
| DK2359867T3 (en) | 2005-04-07 | 2015-01-05 | Univ Pennsylvania | A method for increasing an AAV vector function |
| EP1777906A1 (en) | 2005-06-09 | 2007-04-25 | Matsushita Electric Industrial Co., Ltd. | Amplitude error compensating apparatus and orthogonality error compensating apparatus |
| CA2630353A1 (en) * | 2005-11-21 | 2007-05-24 | Institut Pasteur | Tool for quantitative real-time analysis of viral gene expression dynamics in single living cells |
| EP2242840B1 (en) | 2008-01-29 | 2019-07-24 | Applied Genetic Technologies Corporation | Recombinant adeno-associated virus production using bhk cells in suspension |
| EA020969B1 (ru) | 2008-02-19 | 2015-03-31 | ЮНИКЬЮРЕ АйПи Б.В. | ОПТИМИЗАЦИЯ ЭКСПРЕССИИ ПАРВОВИРУСНЫХ БЕЛКОВ Rep И Cap В КЛЕТКАХ НАСЕКОМЫХ |
| US10087493B2 (en) * | 2008-03-07 | 2018-10-02 | Aptalis Pharma Canada Ulc | Method for detecting infectious parvovirus in pharmaceutical preparations |
| US10920244B2 (en) | 2009-04-30 | 2021-02-16 | The Trustees Of The University Of Pennsylvania | Compositions for targeting conducting airway cells comprising adeno-associated virus constructs |
| CN102740881A (zh) | 2009-05-12 | 2012-10-17 | 特兰斯吉恩股份有限公司 | 正痘病毒产生和纯化方法 |
| US8734809B2 (en) | 2009-05-28 | 2014-05-27 | University Of Massachusetts | AAV's and uses thereof |
| US20120198578A1 (en) * | 2009-06-19 | 2012-08-02 | Commonwealth Scientific And Industrial Research Organisation | Viral assay |
| AU2010333749B2 (en) | 2009-12-21 | 2015-07-30 | The Brigham And Women's Hospital, Inc. | Herpes simplex virus vaccines |
| WO2012150478A1 (en) | 2010-04-28 | 2012-11-08 | Institut Gustave Roussy | Adenovirus vaccine vectors |
| US8927514B2 (en) | 2010-04-30 | 2015-01-06 | City Of Hope | Recombinant adeno-associated vectors for targeted treatment |
| US8628966B2 (en) | 2010-04-30 | 2014-01-14 | City Of Hope | CD34-derived recombinant adeno-associated vectors for stem cell transduction and systemic therapeutic gene transfer |
| WO2012057363A1 (ja) | 2010-10-27 | 2012-05-03 | 学校法人自治医科大学 | 神経系細胞への遺伝子導入のためのアデノ随伴ウイルスビリオン |
| JP6042825B2 (ja) | 2011-02-10 | 2016-12-14 | ザ・ユニヴァーシティ・オヴ・ノース・キャロライナ・アト・チャペル・ヒル | 改変された形質導入プロファイルを有するウイルスベクターならびにその製造および使用の方法 |
| EP3693025B1 (en) | 2011-04-22 | 2021-10-13 | The Regents of The University of California | Adeno-associated virus virions with variant capsid and methods of use thereof |
| WO2012147370A1 (ja) * | 2011-04-28 | 2012-11-01 | 国立大学法人山口大学 | ターミネータ配列を含む高発現用リバースプライマー及びリニアｄｎａ |
| EP2748185A1 (en) | 2011-08-24 | 2014-07-02 | The Board of Trustees of The Leland Stanford Junior University | New aav capsid proteins for nucleic acid transfer |
| US9677088B2 (en) | 2012-05-09 | 2017-06-13 | Oregon Health & Science University | Adeno associated virus plasmids and vectors |
| CN105051198A (zh) | 2012-11-16 | 2015-11-11 | 貝丝以色列女执事医疗中心 | 重组腺病毒及其用途 |
| JP2016514152A (ja) | 2013-03-13 | 2016-05-19 | ザ・チルドレンズ・ホスピタル・オブ・フィラデルフィア | アデノ随伴ウイルスベクターおよびその使用の方法 |
| JP6461917B2 (ja) | 2013-04-20 | 2019-01-30 | リサーチ インスティチュート アット ネイションワイド チルドレンズ ホスピタル | エクソン２標的Ｕ７ｓｎＲＮＡポリヌクレオチド構築物の組換えアデノ随伴ウイルスによる送達 |
| CA3209883A1 (en) | 2013-07-22 | 2015-01-29 | The Children's Hospital Of Philadelphia | Variant aav and compositions, methods and uses for gene transfer to cells, organs and tissues |
| EP3044318B1 (en) | 2013-09-13 | 2019-05-01 | California Institute of Technology | Selective recovery |
| CN115141260A (zh) | 2013-10-11 | 2022-10-04 | 马萨诸塞眼科耳科诊所 | 预测祖先病毒序列的方法及其用途 |
| JP6567974B2 (ja) * | 2013-11-29 | 2019-08-28 | タカラバイオ株式会社 | アデノ随伴ウイルスの定量方法 |
| US11230719B2 (en) | 2014-03-26 | 2022-01-25 | Denovo Biopharma Llc | Retroviral vector having immune-stimulating activity |
| US10746742B2 (en) | 2014-04-25 | 2020-08-18 | Oregon Health & Science University | Methods of viral neutralizing antibody epitope mapping |
| WO2015191508A1 (en) | 2014-06-09 | 2015-12-17 | Voyager Therapeutics, Inc. | Chimeric capsids |
| WO2016049230A1 (en) | 2014-09-24 | 2016-03-31 | City Of Hope | Adeno-associated virus vector variants for high efficiency genome editing and methods thereof |
| JP6665466B2 (ja) | 2015-09-26 | 2020-03-13 | 日亜化学工業株式会社 | 半導体発光素子及びその製造方法 |
| WO2017070491A1 (en) | 2015-10-23 | 2017-04-27 | Applied Genetic Technologies Corporation | Ophthalmic formulations |
| CA3019425A1 (en) * | 2016-04-15 | 2017-10-19 | The Trustees Of The University Of Pennsylvania | Gene therapy for treating hemophilia a |
| EP4365311A2 (en) * | 2016-09-07 | 2024-05-08 | St Vincent's Hospital Sydney Limited | Methods of detecting lentivirus |
-
2019
- 2019-10-14 CA CA3115524A patent/CA3115524A1/en active Pending
- 2019-10-14 CN CN201980067652.8A patent/CN112912518A/zh active Pending
- 2019-10-14 AU AU2019362833A patent/AU2019362833A1/en active Pending
- 2019-10-14 JP JP2021545269A patent/JP2022514112A/ja active Pending
- 2019-10-14 KR KR1020217010729A patent/KR20210075994A/ko unknown
- 2019-10-14 US US17/285,362 patent/US20210324483A1/en active Pending
- 2019-10-14 WO PCT/US2019/056042 patent/WO2020081415A1/en unknown
- 2019-10-14 EP EP19795740.0A patent/EP3867412A1/en active Pending
-
2021
- 2021-04-08 IL IL282195A patent/IL282195A/en unknown
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| JP3943048B2 (ja) | 組織の細胞ｄｎａからの組込みウイルスの直接レスキュー及び増幅の方法 | |
| JP6741345B2 (ja) | パルボウイルスビリオンを含む組成物におけるｄｎａ不純物 | |
| US20030138772A1 (en) | Method of detecting and/or identifying adeno-associated virus (AAV) sequences and isolating novel sequences identified thereby | |
| CN116411024A (zh) | 用于生产重组腺相关病毒的质粒*** | |
| JPWO2020081415A5 (ja) | ||
| CN114075610A (zh) | 检测野生型腺相关病毒的通用引物及其应用 | |
| Purohit et al. | Molecular characterization of novel Adeno-associated virus variants infecting human tissues | |
| CN116622908B (zh) | 快速检测野生型腺相关病毒的引物探针、试剂盒及方法和应用 | |
| JP2023511108A (ja) | ウイルス力価を決定する方法 | |
| JP2022514112A (ja) | 複製欠損型ウイルスベクター及びウイルスの感染性を測定するための方法 | |
| US20230295608A1 (en) | Methods for Characterization of Viral Genome Using Base Modifications | |
| JP2023545835A (ja) | 遺伝子療法製剤の効力を測定するためのアッセイ | |
| US20240209415A1 (en) | Droplet digital pcr assay for determining viral vector genomic titer | |
| Schmitt et al. | Genotyping of AAV plasmid stocks: quality control in adeno-associated virus vector production | |
| KR20190012378A (ko) | 아데노 연관 바이러스의 정량방법 | |
| US20220242917A1 (en) | Compositions and methods for producing adeno-associated viral vectors | |
| CN115807064A (zh) | 重组腺相关病毒载体制品中游离和错误包装dna的检测方法 | |
| CN117025843A (zh) | 重组型腺相关病毒制品中复制型腺相关病毒rcAAV8的检测组合物、方法及试剂盒 | |
| JP2004305092A (ja) | ヒトアデノウイルスの定量方法並びにそのためのプライマー及びプローブ | |
| Jasani et al. | Molecular Detection of Siman Virus 40 in Human Mesothelioma |