JPWO2018083772A1 - 顕微鏡システム - Google Patents
顕微鏡システム Download PDFInfo
- Publication number
- JPWO2018083772A1 JPWO2018083772A1 JP2018548515A JP2018548515A JPWO2018083772A1 JP WO2018083772 A1 JPWO2018083772 A1 JP WO2018083772A1 JP 2018548515 A JP2018548515 A JP 2018548515A JP 2018548515 A JP2018548515 A JP 2018548515A JP WO2018083772 A1 JPWO2018083772 A1 JP WO2018083772A1
- Authority
- JP
- Japan
- Prior art keywords
- light
- frequency
- fluorescence
- microscope system
- unit
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Granted
Links
- 238000001514 detection method Methods 0.000 claims abstract description 99
- 239000000126 substance Substances 0.000 claims abstract description 57
- 239000000463 material Substances 0.000 claims description 49
- 238000000034 method Methods 0.000 claims description 12
- 238000000926 separation method Methods 0.000 claims description 6
- 230000001678 irradiating effect Effects 0.000 claims description 2
- 239000000523 sample Substances 0.000 description 125
- 230000002238 attenuated effect Effects 0.000 description 47
- 230000003287 optical effect Effects 0.000 description 43
- 238000002189 fluorescence spectrum Methods 0.000 description 18
- 238000010586 diagram Methods 0.000 description 16
- 230000005284 excitation Effects 0.000 description 12
- 238000000862 absorption spectrum Methods 0.000 description 10
- 230000010287 polarization Effects 0.000 description 9
- 230000010355 oscillation Effects 0.000 description 5
- -1 pump light Substances 0.000 description 5
- 238000010521 absorption reaction Methods 0.000 description 4
- 230000008901 benefit Effects 0.000 description 4
- 230000008859 change Effects 0.000 description 4
- 238000003384 imaging method Methods 0.000 description 4
- 238000000695 excitation spectrum Methods 0.000 description 3
- 238000005286 illumination Methods 0.000 description 3
- 210000001747 pupil Anatomy 0.000 description 3
- OAICVXFJPJFONN-UHFFFAOYSA-N Phosphorus Chemical compound [P] OAICVXFJPJFONN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000007423 decrease Effects 0.000 description 2
- 238000002073 fluorescence micrograph Methods 0.000 description 2
- 239000011521 glass Substances 0.000 description 2
- 230000001939 inductive effect Effects 0.000 description 2
- 230000001360 synchronised effect Effects 0.000 description 2
- 230000002123 temporal effect Effects 0.000 description 2
- 230000004075 alteration Effects 0.000 description 1
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 1
- 238000011109 contamination Methods 0.000 description 1
- 230000001419 dependent effect Effects 0.000 description 1
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 1
- 239000000284 extract Substances 0.000 description 1
- 230000007274 generation of a signal involved in cell-cell signaling Effects 0.000 description 1
- 230000006872 improvement Effects 0.000 description 1
- 230000010354 integration Effects 0.000 description 1
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 1
- 230000001131 transforming effect Effects 0.000 description 1
Classifications
-
- G—PHYSICS
- G02—OPTICS
- G02B—OPTICAL ELEMENTS, SYSTEMS OR APPARATUS
- G02B21/00—Microscopes
Landscapes
- Physics & Mathematics (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Analytical Chemistry (AREA)
- General Physics & Mathematics (AREA)
- Optics & Photonics (AREA)
- Microscoopes, Condenser (AREA)
- Investigating, Analyzing Materials By Fluorescence Or Luminescence (AREA)
Abstract
Description
Lu Wei et. al., Biomedical Optics Express 1465-1475, vol. 3, No.6, 1 June 2012
観察光学系160は、対物レンズ164と、ダイクロイックミラー162と、光学フィルタ166と、レンズペア172とを有する。
100、101 光源
102、104、500、504 レーザ光源
106、141、144、162、402、412、450、454、456、506 ダイクロイックミラー
110 第1強度変調部
112 ドライバ
114 音響光学チューナブルフィルタ
120 第2強度変調部
122 ドライバ
124 音響光学素子
130 制御部
132 発振器
134、135 ロックインアンプ
136、137 検出部
140 照明光学系
142、143、154、155、157、452、458、460 ミラー
150、151、156 走査部
152 レゾナントスキャナ
153 ガルバノスキャナ
160 観察光学系
164 対物レンズ
166、404、414 光学フィルタ
406、416 レンズ
172、173 レンズペア
174、410、420 受光部
180 ステージ
182 スライドガラス
184 観察対象物
186 標本
220 入力部
222 画像生成部
224 表示部
226 記憶部
228 スキャナ制御部
229 周波数制御部
230 波長制御部
300、350、360 GUI画面
302、304、312、316、324、352、362、364 チェックボックス
354、356、358、366、374 表示欄
308、310、314、318、320、322、326 入力欄
330、332 観察画像
334、335 タイムラプス画像
408、418 ピンホール
550、560、570、580 強度変調部
552、562、572、582 ドライバ
554 AOTF
564、574、584 AOM
Claims (22)
- 標本に含まれる第1の蛍光物質を励起する第1の光を周波数f1で強度変調する第1の強度変調部と、
前記第1の蛍光物質において誘導放出を生じさせる第2の光を前記周波数f1とは異なる周波数f2で強度変調する第2の強度変調部と、
前記第1の光および前記第2の光を前記標本において走査する走査部と、
前記標本からの蛍光を検出する検出部と
を備え、
前記走査部は、共振ミラーを有するレゾナントスキャナを有し、
前記検出部は、
前記標本からの蛍光を受光し、周波数f1+f2の成分を検出する
顕微鏡システム。 - 前記検出部は、
前記標本からの蛍光を受光する受光部と、
前記受光部で受光した蛍光を周波数f1+f2でロックイン検出するロックインアンプ
を備える
請求項1に記載の顕微鏡システム。 - 前記走査部は、主走査方向を走査する共振ミラーと副走査方向を走査するガルバノミラーとを有する
請求項1又は2に記載の顕微鏡システム。 - 前記走査部と、前記標本との間に対物レンズが設けられ、
前記対物レンズと、前記走査部との間に第1の波長分離部材が設けられ、
前記検出部は、前記第1の波長分離部材を透過又は反射した蛍光を検出する
請求項1〜3のいずれか1項に記載の顕微鏡システム。 - 光源と、前記走査部との間に第2の波長分離部材が配置され、
前記検出部は、前記第2の波長分離部材を透過又は反射した蛍光を検出する
請求項1〜4のいずれか1項に記載の顕微鏡システム。 - 前記第2の波長分離部材と前記検出部との間に、開口部を有する開口部材が設けられ、
前記開口部材の開口部の大きさは可変である
請求項5に記載の顕微鏡システム。 - 前記走査部は、前記レゾナントスキャナとガルバノスキャナとが選択可能に構成されている
請求項1〜6のいずれか1項に記載の顕微鏡システム。 - 前記第1の光のビーム径は、第2の光のビーム径よりも小さい
請求項1〜7のいずれか1項に記載の顕微鏡システム。 - 前記第1の蛍光物質と第1の光の波長とを対応付けた情報と、前記第1の蛍光物質と第2の光の波長とを対応付けた情報とを記憶する記憶部と、
前記第1の蛍光物質の選択を受け付ける受付部と
制御部と
をさらに備え、
前記制御部は、
前記記憶部を参照して、前記受付部により受け付けられた前記第1の蛍光物質に対応する前記第1の光および第2の光の波長を決定する
請求項1〜8のいずれか1項に記載の顕微鏡システム。 - 前記記憶部は、
前記第1の蛍光物質と第1の光の波長と前記第1の光の変調周波数とを対応付けた情報と、前記第1の蛍光物質と前記第2の光の波長と前記第2の光の変調周波数とを対応付けた情報とを記憶し、
前記制御部は、
前記記憶部を参照して、前記受付部により受け付けられた前記第1の蛍光物質に対応する前記第1の光および前記第1の光の変調周波数と、第2の光の波長および前記第2の光の変調周波数を決定する
請求項9に記載の顕微鏡システム。 - 前記第1の強度変調部および前記第2の強度変調部の一方は音響チューナブルフィルタを有し、他方は音響光学素子を有する
請求項1〜10のいずれか1項に記載の顕微鏡システム。 - 前記標本には、前記第1の蛍光物質と種類が異なる第2の蛍光物質が含まれ、
前記第1の光は、前記第2の蛍光物質を励起し、
前記第2の強度変調部は、前記第2の蛍光物質において誘導放出を生じさせる第3の光を前記周波数f1および前記周波数f2と異なる周波数f3で強度変調し、
前記検出部は、
前記標本からの蛍光を受光し、周波数f1+f2の成分および周波数f1+f3の成分を検出する
請求項1〜11のいずれか1項に記載の顕微鏡システム。 - 前記周波数f1+f2の成分および周波数f1+f3の成分の少なくとも一方の成分について、所定の位相で検出する
請求項12に記載の顕微鏡システム。 - 前記標本には、前記第1の蛍光物質と種類が異なる第2の蛍光物質が含まれ、
前記第1の強度変調部は、前記第2の蛍光物質を励起する第4の光を前記周波数f1および前記周波数f2と異なる周波数f4で強度変調し、
前記第2の光は、前記第2の蛍光物質において誘導放出を生じさせ、
前記検出部は、
前記標本からの蛍光を受光し、前記周波数f1+f2の成分および周波数f4+f2の成分を検出する
請求項1〜11のいずれか1項に記載の顕微鏡システム。 - 前記周波数f1+f2の成分および前記周波数f4+f2の成分の少なくとも一方の成分について、所定の位相で検出する
請求項14に記載の顕微鏡システム。 - 標本に含まれる蛍光物質を励起する第1の光を前記標本に照射し、前記標本からの蛍光を検出部において受光させる
第1の観察方法と、
前記第1の光を周波数f1で強度変調して前記標本に照射し、
前記蛍光物質において誘導放出を生じさせる第2の光を前記周波数f1とは異なる周波数f2で強度変調して前記標本に照射し、
前記検出部において前記標本からの蛍光を受光させ、周波数f1+f2の成分または周波数f1−f2の成分を検出させる
第2の観察方法と
が選択可能に構成された顕微鏡システム。 - 前記検出部と前記標本との間には、開口部を有する開口部材が設けられ、
前記開口部材の開口部の大きさは可変である
請求項16に記載の顕微鏡システム。 - 対物レンズを有し、
前記開口部材は、前記検出部と前記対物レンズとの間に設けられている
請求項17に記載の顕微鏡システム。 - 前記対物レンズと前記検出部との間に走査部を有し、
前記開口部材は、前記検出部と前記走査部との間に設けられている
請求項18に記載の顕微鏡システム。 - 前記走査部と前記検出部との間に波長分離部材を有し、
前記開口部材は、前記検出部と前記波長分離部材との間に設けられている
請求項19に記載の顕微鏡システム。 - 前記第1の観察方法における前記開口部の前記開口部の大きさは、前記第2の観察方法における前記開口部の大きさよりも小さい
請求項17〜20のいずれか1項に記載の顕微鏡システム。 - 前記蛍光物質の種類に基づいて、前記第1の観察方法または第2の観察方法が選択されるように構成されている
請求項17〜21のいずれか1項に記載の顕微鏡システム。
Applications Claiming Priority (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
PCT/JP2016/082717 WO2018083772A1 (ja) | 2016-11-02 | 2016-11-02 | 顕微鏡システム |
Publications (2)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
JPWO2018083772A1 true JPWO2018083772A1 (ja) | 2019-07-25 |
JP6806161B2 JP6806161B2 (ja) | 2021-01-06 |
Family
ID=62075897
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
JP2018548515A Active JP6806161B2 (ja) | 2016-11-02 | 2016-11-02 | 顕微鏡システム |
Country Status (2)
Country | Link |
---|---|
JP (1) | JP6806161B2 (ja) |
WO (1) | WO2018083772A1 (ja) |
Families Citing this family (1)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN111122568B (zh) * | 2018-11-01 | 2022-04-22 | 华中科技大学苏州脑空间信息研究院 | 一种高通量光学层析成像方法及成像*** |
Citations (4)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
WO2007077710A1 (ja) * | 2005-12-28 | 2007-07-12 | Nikon Corporation | 光走査装置、光走査型顕微鏡、観察方法、制御装置、及び制御プログラム |
JP2010505094A (ja) * | 2006-09-29 | 2010-02-18 | カール ツァイス マイクロイメージング ゲーエムベーハー | 解像度を高めたルミネセンス顕微鏡検査 |
WO2015151461A1 (ja) * | 2014-04-01 | 2015-10-08 | 株式会社ニコン | 超解像観察装置及び超解像観察方法 |
JP2015200693A (ja) * | 2014-04-04 | 2015-11-12 | 浜松ホトニクス株式会社 | 誘導放射抑制顕微鏡装置 |
-
2016
- 2016-11-02 JP JP2018548515A patent/JP6806161B2/ja active Active
- 2016-11-02 WO PCT/JP2016/082717 patent/WO2018083772A1/ja active Application Filing
Patent Citations (4)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
WO2007077710A1 (ja) * | 2005-12-28 | 2007-07-12 | Nikon Corporation | 光走査装置、光走査型顕微鏡、観察方法、制御装置、及び制御プログラム |
JP2010505094A (ja) * | 2006-09-29 | 2010-02-18 | カール ツァイス マイクロイメージング ゲーエムベーハー | 解像度を高めたルミネセンス顕微鏡検査 |
WO2015151461A1 (ja) * | 2014-04-01 | 2015-10-08 | 株式会社ニコン | 超解像観察装置及び超解像観察方法 |
JP2015200693A (ja) * | 2014-04-04 | 2015-11-12 | 浜松ホトニクス株式会社 | 誘導放射抑制顕微鏡装置 |
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
WO2018083772A1 (ja) | 2018-05-11 |
JP6806161B2 (ja) | 2021-01-06 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
US7436501B2 (en) | Microscope | |
EP1835323B1 (en) | Fluorescence microscope and observation method | |
US7133130B2 (en) | Method for scanning microscopy, scanning microscope, and apparatus for coding an illuminating light beam | |
CN105973853B (zh) | 一种基于双模式竞争激发的超分辨显微方法和装置 | |
US7999935B2 (en) | Laser microscope with a physically separating beam splitter | |
US9001321B2 (en) | Microscope and observation method | |
US9404867B2 (en) | Luminescence microscopy | |
US20130302905A1 (en) | Increased depth-resolution microscopy | |
US10310243B2 (en) | Device and method for multispot scanning microscopy | |
US8488118B2 (en) | Apparatus and method for multi-modal imaging in nonlinear raman microscopy | |
US9348128B2 (en) | Microscope for high spatial resolution imaging a structure of interest in a sample | |
US10983323B2 (en) | Fluorescence observation device | |
WO2015151461A1 (ja) | 超解像観察装置及び超解像観察方法 | |
JP2011257691A (ja) | レーザ顕微鏡装置 | |
US10690897B2 (en) | Laser scanning microscope apparatus | |
JP6806161B2 (ja) | 顕微鏡システム | |
JP2003177329A (ja) | 走査型レーザ顕微鏡 | |
JP6673497B2 (ja) | 蛍光観察装置 | |
JP4633386B2 (ja) | 走査型レーザ顕微鏡及びそれを用いたデータ取得方法 | |
JP2016206648A (ja) | レーザー走査顕微鏡装置 | |
JP2006195076A (ja) | 走査型光学装置 | |
Young | Applications of Confocal Microscopy |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
A621 | Written request for application examination |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A621 Effective date: 20190408 |
|
A131 | Notification of reasons for refusal |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A131 Effective date: 20200414 |
|
A601 | Written request for extension of time |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A601 Effective date: 20200604 |
|
A521 | Request for written amendment filed |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523 Effective date: 20200725 |
|
A131 | Notification of reasons for refusal |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A131 Effective date: 20200901 |
|
A521 | Request for written amendment filed |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523 Effective date: 20201009 |
|
TRDD | Decision of grant or rejection written | ||
A01 | Written decision to grant a patent or to grant a registration (utility model) |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A01 Effective date: 20201104 |
|
A61 | First payment of annual fees (during grant procedure) |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A61 Effective date: 20201117 |
|
R150 | Certificate of patent or registration of utility model |
Ref document number: 6806161 Country of ref document: JP Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R150 |
|
R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |