JPWO2013051520A1 - 生体細胞凍結保存具 - Google Patents
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Abstract
Description
しかし、凍結ストロー、凍結バイアルまたは凍結チューブ等の凍結保存用容器の内面に、胚または卵子などの卵を包被するに充分な最少量のガラス化液で貼り付ける作業が必ずしも容易ではなかった。
また、本願発明者は、特許文献3(特開2004−329202、US公開2004−0259072)も提案している。特許文献3の卵凍結保存具1は、耐液体窒素材料で形成された卵凍結保存用チューブ2と、チューブ2を保護するための金属製筒状保護部材3とを備える。チューブ2は、本体部21と、内径が0.1mm〜0.5mmの卵保存用細径部22とを備えるとともに、細径部の先端側にてヒートシール可能であり、本体部21にてヒートシール可能である。筒状保護部材3は、チューブ2の細径部22の先端部を収納する筒状部31と、細径部22の筒状部31に収納されない部分および本体部21の先端部21aを収納する半筒状部32とを備えている。
特許文献2および3の卵凍結保存具は、有効である。
しかし、より容易に卵凍結操作が行え、かつ、凍結された卵の離脱抑制を確実に防止できる卵凍結保存具が望まれている。
本発明の目的は、生体細胞凍結保存具への生体細胞載置操作が容易であり、かつ、生体細胞の凍結作業時における生体細胞の離脱がなく、かつ生体細胞の凍結を迅速に行うことができる生体細胞凍結保存具を提供するものである。
耐寒性材料により形成された本体部と、耐寒性材料により形成された生体細胞保持部とを備える生体細胞凍結保存具であって、前記生体細胞保持部は、細長い生体細胞付着保持部を備え、前記生体細胞付着保持部は、前記生体細胞付着保持部の長手方向に複数設けられた生体細胞収納用凹部と、前記生体細胞収納用凹部と連通する余剰凍結保存液排出路を有する生体細胞凍結保存具。
本発明の生体細胞凍結保存具1は、耐寒性材料により形成された本体部3と、耐寒性材料により形成された生体細胞保持部(卵保持部)2とを備える。卵保持部2は、細長い卵付着保持部22を備え、卵付着保持部22は、卵付着保持部22の長手方向に複数設けられた生体細胞収納用凹部(卵収納用凹部)28a,28b,28c,28d,28eと、卵収納用凹部28a,28b,28c,28d,28eと連通する余剰凍結保存液排出路29a,29b,29c,29d,29e,29fを有している。
しかし、上述のようなものに限定されるものではなく、図10および図11に示す生体細胞凍結保存具10のように、溝部29a,29b,29c,29d,29eは、生体細胞収納用凹部28a,28b,28c,28d,28eの底部に到達するものであってもよい。このようにすることにより、生体細胞収納用凹部28a,28b,28c,28d,28eに貯留する凍結保存液をより少ないものとすることができる。
例えば、図12ないし図14に示すような生体細胞凍結保存具20のようなタイプのものであってもよい。図12は、本発明の他の実施例の生体細胞凍結保存具の先端部の拡大正面図である。図13は、図12のE−E線断面図である。図14は、図12のF−F線断面図である。
生体細胞凍結保存具20では、生体細胞付着保持部22は、上面に形成された複数の短円筒状突出部を備えており、それら突出部の内部に生体細胞収納用凹部51,52,53,54,55が形成されている。そして、突出部の側壁には、凹部51と連通する2つのスリット61a,61b、凹部52と連通する2つのスリット62a,62b、凹部53と連通する2つのスリット63a,63b、凹部54と連通する2つのスリット64a,64b、凹部55と連通する2つのスリット65a,65bを有している。また、各スリットは、それぞれの凹部の底部に連通している。なお、凹部と連通するスリットは、1つでもよいが、2つ以上設けることが好ましい。また、凹部の深さは、0.05〜0.5mmが好ましい。さらに、この生体細胞凍結保存具20では、その裏面側(短円筒状突出部の非形成面側)には、軸方向に延びかつ凹部51の底面の下方を通過するように延びる凹部56が形成されている。このため、凹部51の底面を形成する部分は、肉薄部となっており、凹部への熱伝導を良好なものとしている。
この説明では、生体細胞(具体的には、卵子)を凍結保存する場合を例に取り説明する。
まず、複数の生体細胞である卵子を採取し、卵子の細胞内液を平衡液に置換する作業を行い、さらに、細胞外液をガラス化液に置換する作業を行う。そして、顕微鏡下において、生体細胞凍結保存具1の生体細胞付着保持部22に設けられたそれぞれの生体細胞収納用凹部28a,28b,28c,28d,28eに卵子を少量のガラス化液とともに配置させ、付着させる。卵子が付着した生体細胞凍結保存具1を先端側(生体細胞保持部22側)より、あらかじめ準備しておいた液体窒素に浸漬し凍結(ガラス化)させる。液体窒素との接触により、生体細胞は、急激冷却される。凍結生体細胞が付着した生体細胞凍結保存具1は、別途準備した筒状容器内に収納した後、さらに、収納容器(ケーン)に収納し、収納容器を液体窒素タンク内に入れ保存する。
(1) 耐寒性材料により形成された本体部と、耐寒性材料により形成された生体細胞保持部とを備える生体細胞凍結保存具であって、前記生体細胞保持部は、細長い生体細胞付着保持部を備え、前記生体細胞付着保持部は、前記生体細胞付着保持部の長手方向に複数設けられた生体細胞収納用凹部と、前記生体細胞収納用凹部と連通する余剰凍結保存液排出路を有する生体細胞凍結保存具。
(2) 前記余剰凍結保存液排出路は、前記生体細胞収納用凹部と連通し、かつ、前記生体細胞付着保持部の長手方向に延びる溝部である上記(1)に記載の生体細胞凍結保存具。
(3) 前記生体細胞保持部は、前記生体細胞収納用凹部が形成された部分の前記生体細胞付着保持部の両側部に設けられかつ前記生体細胞付着保持部の長手方向に延びる2つの側部膨出部を有している上記(1)または(2)に記載の生体細胞凍結保存具。
(4) 前記生体細胞付着保持部は、最も先端側の前記生体細胞収納用凹部より先端側に設けられた突出部を有する上記(1)ないし(3)のいずれかに記載の生体細胞凍結保存具。
(5) 前記溝部は、隣り合う前記生体細胞収納用凹部を接続している上記(2)ないし(4)のいずれかに記載の生体細胞凍結保存具。
(7) 前記生体細胞付着保持部は、最も基端側に位置する前記生体細胞収納用凹部より、基端側に延びる溝部を備えている上記(2)ないし(6)のいずれかに記載の生体細胞凍結保存具。
(8) 前記耐寒性材料は、液体窒素耐性材料である上記(1)ないし(7)のいずれかに記載の生体細胞凍結保存具。
(9) 前記生体細胞付着保持部は、薄板状のものである上記(1)ないし(8)のいずれかに記載の生体細胞凍結保存具。
また、本願発明者は、特許文献3(特開2004−329202、US公開2004−0259072)も提案している。特許文献3の卵凍結保存具1は、耐液体窒素材料で形成された卵凍結保存用チューブ2と、チューブ2を保護するための金属製筒状保護部材3とを備える。チューブ2は、本体部21と、内径が0.1mm〜0.5mmの卵保存用細径部22とを備えるとともに、細径部の先端側にてヒートシール可能であり、本体部21にてヒートシール可能である。筒状保護部材3は、チューブ2の細径部22の先端部を収納する筒状部31と、細径部22の筒状部31に収納されない部分および本体部21の先端部21aを収納する半筒状部32とを備えている。
特許文献2および3の卵凍結保存具は、有効である。
しかし、より容易に卵凍結操作が行え、かつ、凍結された卵の離脱を確実に防止できる卵凍結保存具が望まれている。
本発明の目的は、生体細胞凍結保存具への生体細胞載置操作が容易であり、かつ、生体細胞の凍結作業時における生体細胞の離脱がなく、かつ生体細胞の凍結を迅速に行うことができる生体細胞凍結保存具を提供するものである。
Claims (9)
- 耐寒性材料により形成された本体部と、耐寒性材料により形成された生体細胞保持部とを備える生体細胞凍結保存具であって、
前記生体細胞保持部は、細長い生体細胞付着保持部を備え、前記生体細胞付着保持部は、前記生体細胞付着保持部の長手方向に複数設けられた生体細胞収納用凹部と、前記生体細胞収納用凹部と連通する余剰凍結保存液排出路を有することを特徴とする生体細胞凍結保存具。 - 前記余剰凍結保存液排出路は、前記生体細胞収納用凹部と連通し、かつ、前記生体細胞付着保持部の長手方向に延びる溝部である請求項1に記載の生体細胞凍結保存具。
- 前記生体細胞保持部は、前記生体細胞収納用凹部が形成された部分の前記生体細胞付着保持部の両側部に設けられかつ前記生体細胞付着保持部の長手方向に延びる2つの側部膨出部を有している請求項1または2に記載の生体細胞凍結保存具。
- 前記生体細胞付着保持部は、最も先端側の前記生体細胞収納用凹部より先端側に設けられた突出部を有する請求項1ないし3のいずれかに記載の生体細胞凍結保存具。
- 前記溝部は、隣り合う前記生体細胞収納用凹部を接続している請求項2ないし4のいずれかに記載の生体細胞凍結保存具。
- 前記生体細胞付着保持部は、最も先端側に位置する前記生体細胞収納用凹部より、先端側に延びる溝部を備えている請求項2ないし5のいずれかに記載の生体細胞凍結保存具。
- 前記生体細胞付着保持部は、最も基端側に位置する前記生体細胞収納用凹部より、基端側に延びる溝部を備えている請求項2ないし6のいずれかに記載の生体細胞凍結保存具。
- 前記耐寒性材料は、液体窒素耐性材料である請求項1ないし7のいずれかに記載の生体細胞凍結保存具。
- 前記生体細胞付着保持部は、薄板状のものである請求項1ないし8のいずれかに記載の生体細胞凍結保存具。
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