JPWO2003072123A1 - 安定化されたアルブミン製剤 - Google Patents
安定化されたアルブミン製剤 Download PDFInfo
- Publication number
- JPWO2003072123A1 JPWO2003072123A1 JP2003570867A JP2003570867A JPWO2003072123A1 JP WO2003072123 A1 JPWO2003072123 A1 JP WO2003072123A1 JP 2003570867 A JP2003570867 A JP 2003570867A JP 2003570867 A JP2003570867 A JP 2003570867A JP WO2003072123 A1 JPWO2003072123 A1 JP WO2003072123A1
- Authority
- JP
- Japan
- Prior art keywords
- albumin
- amino acid
- sulfur
- containing amino
- derivative
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Granted
Links
- 102000009027 Albumins Human genes 0.000 title claims abstract description 56
- 108010088751 Albumins Proteins 0.000 title claims abstract description 56
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 title claims abstract description 45
- 150000001413 amino acids Chemical class 0.000 claims abstract description 27
- NINIDFKCEFEMDL-UHFFFAOYSA-N Sulfur Chemical compound [S] NINIDFKCEFEMDL-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 23
- 239000011593 sulfur Substances 0.000 claims abstract description 23
- 229910052717 sulfur Inorganic materials 0.000 claims abstract description 23
- 150000004667 medium chain fatty acids Chemical class 0.000 claims abstract description 21
- 238000000034 method Methods 0.000 claims abstract description 19
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 claims abstract description 17
- 125000003396 thiol group Chemical group [H]S* 0.000 claims description 13
- 108091006905 Human Serum Albumin Proteins 0.000 claims description 12
- 102000008100 Human Serum Albumin Human genes 0.000 claims description 12
- 150000001412 amines Chemical class 0.000 claims description 11
- 239000003381 stabilizer Substances 0.000 claims description 11
- 230000000087 stabilizing effect Effects 0.000 claims description 5
- 150000003862 amino acid derivatives Chemical class 0.000 claims description 4
- 125000004432 carbon atom Chemical group C* 0.000 claims description 4
- 150000004671 saturated fatty acids Chemical class 0.000 claims description 3
- 125000002228 disulfide group Chemical group 0.000 claims description 2
- 150000003463 sulfur Chemical class 0.000 claims description 2
- 239000000243 solution Substances 0.000 abstract description 14
- 239000002504 physiological saline solution Substances 0.000 abstract description 11
- 230000000694 effects Effects 0.000 abstract description 10
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 abstract description 7
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 abstract description 6
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 abstract description 4
- 241000700605 Viruses Species 0.000 abstract description 3
- 239000000203 mixture Substances 0.000 abstract description 3
- 239000008363 phosphate buffer Substances 0.000 abstract description 3
- 238000009472 formulation Methods 0.000 abstract description 2
- 238000002347 injection Methods 0.000 abstract description 2
- 239000007924 injection Substances 0.000 abstract description 2
- 238000007911 parenteral administration Methods 0.000 abstract description 2
- 239000000825 pharmaceutical preparation Substances 0.000 abstract description 2
- 230000006641 stabilisation Effects 0.000 abstract description 2
- 238000011105 stabilization Methods 0.000 abstract description 2
- 239000000872 buffer Substances 0.000 abstract 1
- 239000003978 infusion fluid Substances 0.000 abstract 1
- 229940102223 injectable solution Drugs 0.000 abstract 1
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 description 24
- BYKRNSHANADUFY-UHFFFAOYSA-M sodium octanoate Chemical compound [Na+].CCCCCCCC([O-])=O BYKRNSHANADUFY-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 22
- XUYPXLNMDZIRQH-LURJTMIESA-N N-acetyl-L-methionine Chemical compound CSCC[C@@H](C(O)=O)NC(C)=O XUYPXLNMDZIRQH-LURJTMIESA-N 0.000 description 20
- 235000001014 amino acid Nutrition 0.000 description 20
- 229960005480 sodium caprylate Drugs 0.000 description 20
- 229940099459 n-acetylmethionine Drugs 0.000 description 17
- 235000002639 sodium chloride Nutrition 0.000 description 15
- 230000008859 change Effects 0.000 description 9
- 239000003814 drug Substances 0.000 description 9
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 description 8
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 8
- -1 medium chain fatty acid salt Chemical class 0.000 description 7
- 230000002401 inhibitory effect Effects 0.000 description 6
- 238000005259 measurement Methods 0.000 description 6
- 125000002915 carbonyl group Chemical group [*:2]C([*:1])=O 0.000 description 5
- 238000004128 high performance liquid chromatography Methods 0.000 description 5
- 235000018102 proteins Nutrition 0.000 description 5
- 230000010512 thermal transition Effects 0.000 description 5
- 230000007704 transition Effects 0.000 description 5
- 230000003078 antioxidant effect Effects 0.000 description 4
- 238000000113 differential scanning calorimetry Methods 0.000 description 4
- 238000010438 heat treatment Methods 0.000 description 4
- 230000003647 oxidation Effects 0.000 description 4
- 238000007254 oxidation reaction Methods 0.000 description 4
- 238000002264 polyacrylamide gel electrophoresis Methods 0.000 description 4
- 230000001954 sterilising effect Effects 0.000 description 4
- 238000004659 sterilization and disinfection Methods 0.000 description 4
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 4
- QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N Acetic acid Chemical compound CC(O)=O QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M Sodium hydroxide Chemical compound [OH-].[Na+] HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 3
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 description 3
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 3
- KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-N citric acid Chemical compound OC(=O)CC(O)(C(O)=O)CC(O)=O KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 235000014113 dietary fatty acids Nutrition 0.000 description 3
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 3
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 3
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 3
- 239000000194 fatty acid Substances 0.000 description 3
- 229930195729 fatty acid Natural products 0.000 description 3
- 150000004665 fatty acids Chemical class 0.000 description 3
- 238000005194 fractionation Methods 0.000 description 3
- FUZZWVXGSFPDMH-UHFFFAOYSA-N hexanoic acid Chemical compound CCCCCC(O)=O FUZZWVXGSFPDMH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 230000006872 improvement Effects 0.000 description 3
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 3
- 239000008055 phosphate buffer solution Substances 0.000 description 3
- LXEKPEMOWBOYRF-QDBORUFSSA-N AAPH Chemical compound Cl.Cl.NC(=N)C(C)(C)\N=N\C(C)(C)C(N)=N LXEKPEMOWBOYRF-QDBORUFSSA-N 0.000 description 2
- OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N Carbon Chemical group [C] OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 206010016654 Fibrosis Diseases 0.000 description 2
- 208000032456 Hemorrhagic Shock Diseases 0.000 description 2
- 241000282412 Homo Species 0.000 description 2
- VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N Hydrochloric acid Chemical compound Cl VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 208000003623 Hypoalbuminemia Diseases 0.000 description 2
- CSNNHWWHGAXBCP-UHFFFAOYSA-L Magnesium sulfate Chemical compound [Mg+2].[O-][S+2]([O-])([O-])[O-] CSNNHWWHGAXBCP-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 2
- DZTHIGRZJZPRDV-LBPRGKRZSA-N N-acetyl-L-tryptophan Chemical compound C1=CC=C2C(C[C@H](NC(=O)C)C(O)=O)=CNC2=C1 DZTHIGRZJZPRDV-LBPRGKRZSA-N 0.000 description 2
- DZTHIGRZJZPRDV-UHFFFAOYSA-N Nalpha-Acetyltryptophan Natural products C1=CC=C2C(CC(NC(=O)C)C(O)=O)=CNC2=C1 DZTHIGRZJZPRDV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 206010029164 Nephrotic syndrome Diseases 0.000 description 2
- 206010030113 Oedema Diseases 0.000 description 2
- 229910019142 PO4 Inorganic materials 0.000 description 2
- WCUXLLCKKVVCTQ-UHFFFAOYSA-M Potassium chloride Chemical compound [Cl-].[K+] WCUXLLCKKVVCTQ-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- 206010049771 Shock haemorrhagic Diseases 0.000 description 2
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- 206010044541 Traumatic shock Diseases 0.000 description 2
- LXEKPEMOWBOYRF-UHFFFAOYSA-N [2-[(1-azaniumyl-1-imino-2-methylpropan-2-yl)diazenyl]-2-methylpropanimidoyl]azanium;dichloride Chemical compound Cl.Cl.NC(=N)C(C)(C)N=NC(C)(C)C(N)=N LXEKPEMOWBOYRF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000008351 acetate buffer Substances 0.000 description 2
- 230000002776 aggregation Effects 0.000 description 2
- 238000004220 aggregation Methods 0.000 description 2
- 150000001450 anions Chemical class 0.000 description 2
- 239000007864 aqueous solution Substances 0.000 description 2
- 239000007853 buffer solution Substances 0.000 description 2
- 230000007882 cirrhosis Effects 0.000 description 2
- 208000019425 cirrhosis of liver Diseases 0.000 description 2
- 238000012937 correction Methods 0.000 description 2
- GHVNFZFCNZKVNT-UHFFFAOYSA-N decanoic acid Chemical compound CCCCCCCCCC(O)=O GHVNFZFCNZKVNT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- POULHZVOKOAJMA-UHFFFAOYSA-N dodecanoic acid Chemical compound CCCCCCCCCCCC(O)=O POULHZVOKOAJMA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000002008 hemorrhagic effect Effects 0.000 description 2
- MNWFXJYAOYHMED-UHFFFAOYSA-N heptanoic acid Chemical compound CCCCCCC(O)=O MNWFXJYAOYHMED-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229940116191 n-acetyltryptophan Drugs 0.000 description 2
- 238000001426 native polyacrylamide gel electrophoresis Methods 0.000 description 2
- FBUKVWPVBMHYJY-UHFFFAOYSA-N nonanoic acid Chemical compound CCCCCCCCC(O)=O FBUKVWPVBMHYJY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- WWZKQHOCKIZLMA-UHFFFAOYSA-N octanoic acid Chemical compound CCCCCCCC(O)=O WWZKQHOCKIZLMA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000003002 pH adjusting agent Substances 0.000 description 2
- 238000009928 pasteurization Methods 0.000 description 2
- NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-K phosphate Chemical compound [O-]P([O-])([O-])=O NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 2
- 239000010452 phosphate Substances 0.000 description 2
- 238000000746 purification Methods 0.000 description 2
- 239000002904 solvent Substances 0.000 description 2
- 239000004094 surface-active agent Substances 0.000 description 2
- PIEPQKCYPFFYMG-UHFFFAOYSA-N tris acetate Chemical compound CC(O)=O.OCC(N)(CO)CO PIEPQKCYPFFYMG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- ZDPHROOEEOARMN-UHFFFAOYSA-N undecanoic acid Chemical compound CCCCCCCCCCC(O)=O ZDPHROOEEOARMN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000008215 water for injection Substances 0.000 description 2
- BJEPYKJPYRNKOW-REOHCLBHSA-N (S)-malic acid Chemical compound OC(=O)[C@@H](O)CC(O)=O BJEPYKJPYRNKOW-REOHCLBHSA-N 0.000 description 1
- OWEGMIWEEQEYGQ-UHFFFAOYSA-N 100676-05-9 Natural products OC1C(O)C(O)C(CO)OC1OCC1C(O)C(O)C(O)C(OC2C(OC(O)C(O)C2O)CO)O1 OWEGMIWEEQEYGQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- GZAJOEGTZDUSKS-UHFFFAOYSA-N 5-aminofluorescein Chemical compound C12=CC=C(O)C=C2OC2=CC(O)=CC=C2C21OC(=O)C1=CC(N)=CC=C21 GZAJOEGTZDUSKS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 102000004506 Blood Proteins Human genes 0.000 description 1
- 108010017384 Blood Proteins Proteins 0.000 description 1
- 241000283690 Bos taurus Species 0.000 description 1
- 108091003079 Bovine Serum Albumin Proteins 0.000 description 1
- 208000014644 Brain disease Diseases 0.000 description 1
- UXVMQQNJUSDDNG-UHFFFAOYSA-L Calcium chloride Chemical compound [Cl-].[Cl-].[Ca+2] UXVMQQNJUSDDNG-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 239000005632 Capric acid (CAS 334-48-5) Substances 0.000 description 1
- 239000005635 Caprylic acid (CAS 124-07-2) Substances 0.000 description 1
- FBPFZTCFMRRESA-FSIIMWSLSA-N D-Glucitol Natural products OC[C@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)CO FBPFZTCFMRRESA-FSIIMWSLSA-N 0.000 description 1
- FBPFZTCFMRRESA-JGWLITMVSA-N D-glucitol Chemical compound OC[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O)CO FBPFZTCFMRRESA-JGWLITMVSA-N 0.000 description 1
- 241000283086 Equidae Species 0.000 description 1
- 102000008857 Ferritin Human genes 0.000 description 1
- 108050000784 Ferritin Proteins 0.000 description 1
- 238000008416 Ferritin Methods 0.000 description 1
- 229930091371 Fructose Natural products 0.000 description 1
- 239000005715 Fructose Substances 0.000 description 1
- RFSUNEUAIZKAJO-ARQDHWQXSA-N Fructose Chemical compound OC[C@H]1O[C@](O)(CO)[C@@H](O)[C@@H]1O RFSUNEUAIZKAJO-ARQDHWQXSA-N 0.000 description 1
- WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N Glucose Natural products OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N 0.000 description 1
- XUJNEKJLAYXESH-REOHCLBHSA-N L-Cysteine Chemical compound SC[C@H](N)C(O)=O XUJNEKJLAYXESH-REOHCLBHSA-N 0.000 description 1
- LEVWYRKDKASIDU-IMJSIDKUSA-N L-cystine Chemical compound [O-]C(=O)[C@@H]([NH3+])CSSC[C@H]([NH3+])C([O-])=O LEVWYRKDKASIDU-IMJSIDKUSA-N 0.000 description 1
- 102000003855 L-lactate dehydrogenase Human genes 0.000 description 1
- 108700023483 L-lactate dehydrogenases Proteins 0.000 description 1
- FFEARJCKVFRZRR-BYPYZUCNSA-N L-methionine Chemical compound CSCC[C@H](N)C(O)=O FFEARJCKVFRZRR-BYPYZUCNSA-N 0.000 description 1
- 239000005639 Lauric acid Substances 0.000 description 1
- GUBGYTABKSRVRQ-PICCSMPSSA-N Maltose Natural products O[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@H]1O[C@@H]1[C@@H](CO)OC(O)[C@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-PICCSMPSSA-N 0.000 description 1
- 241000124008 Mammalia Species 0.000 description 1
- 125000003047 N-acetyl group Chemical group 0.000 description 1
- 241001494479 Pecora Species 0.000 description 1
- 239000005643 Pelargonic acid Substances 0.000 description 1
- 239000004698 Polyethylene Substances 0.000 description 1
- 239000004743 Polypropylene Substances 0.000 description 1
- HLCFGWHYROZGBI-JJKGCWMISA-M Potassium gluconate Chemical compound [K+].OC[C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)C([O-])=O HLCFGWHYROZGBI-JJKGCWMISA-M 0.000 description 1
- VMHLLURERBWHNL-UHFFFAOYSA-M Sodium acetate Chemical compound [Na+].CC([O-])=O VMHLLURERBWHNL-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- UIIMBOGNXHQVGW-DEQYMQKBSA-M Sodium bicarbonate-14C Chemical compound [Na+].O[14C]([O-])=O UIIMBOGNXHQVGW-DEQYMQKBSA-M 0.000 description 1
- 101710162629 Trypsin inhibitor Proteins 0.000 description 1
- 229940122618 Trypsin inhibitor Drugs 0.000 description 1
- TVXBFESIOXBWNM-UHFFFAOYSA-N Xylitol Natural products OCCC(O)C(O)C(O)CCO TVXBFESIOXBWNM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 235000011054 acetic acid Nutrition 0.000 description 1
- 125000002777 acetyl group Chemical group [H]C([H])([H])C(*)=O 0.000 description 1
- 230000002378 acidificating effect Effects 0.000 description 1
- 239000004480 active ingredient Substances 0.000 description 1
- 239000013543 active substance Substances 0.000 description 1
- 230000001154 acute effect Effects 0.000 description 1
- 239000000654 additive Substances 0.000 description 1
- 230000000996 additive effect Effects 0.000 description 1
- 229910052783 alkali metal Inorganic materials 0.000 description 1
- BJEPYKJPYRNKOW-UHFFFAOYSA-N alpha-hydroxysuccinic acid Natural products OC(=O)C(O)CC(O)=O BJEPYKJPYRNKOW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- BFNBIHQBYMNNAN-UHFFFAOYSA-N ammonium sulfate Chemical compound N.N.OS(O)(=O)=O BFNBIHQBYMNNAN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229910052921 ammonium sulfate Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000011130 ammonium sulphate Nutrition 0.000 description 1
- 239000002585 base Substances 0.000 description 1
- WQZGKKKJIJFFOK-VFUOTHLCSA-N beta-D-glucose Chemical compound OC[C@H]1O[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-VFUOTHLCSA-N 0.000 description 1
- GUBGYTABKSRVRQ-QUYVBRFLSA-N beta-maltose Chemical compound OC[C@H]1O[C@H](O[C@H]2[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)O[C@@H]2CO)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-QUYVBRFLSA-N 0.000 description 1
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 1
- 229940098773 bovine serum albumin Drugs 0.000 description 1
- 239000001110 calcium chloride Substances 0.000 description 1
- 229910001628 calcium chloride Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000011148 calcium chloride Nutrition 0.000 description 1
- 239000004227 calcium gluconate Substances 0.000 description 1
- 235000013927 calcium gluconate Nutrition 0.000 description 1
- 229960004494 calcium gluconate Drugs 0.000 description 1
- NEEHYRZPVYRGPP-UHFFFAOYSA-L calcium;2,3,4,5,6-pentahydroxyhexanoate Chemical compound [Ca+2].OCC(O)C(O)C(O)C(O)C([O-])=O.OCC(O)C(O)C(O)C(O)C([O-])=O NEEHYRZPVYRGPP-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 125000001589 carboacyl group Chemical group 0.000 description 1
- 150000001720 carbohydrates Chemical class 0.000 description 1
- 150000001768 cations Chemical class 0.000 description 1
- 230000001684 chronic effect Effects 0.000 description 1
- 235000015165 citric acid Nutrition 0.000 description 1
- 239000003086 colorant Substances 0.000 description 1
- 238000011109 contamination Methods 0.000 description 1
- 238000001816 cooling Methods 0.000 description 1
- NKLPQNGYXWVELD-UHFFFAOYSA-M coomassie brilliant blue Chemical compound [Na+].C1=CC(OCC)=CC=C1NC1=CC=C(C(=C2C=CC(C=C2)=[N+](CC)CC=2C=C(C=CC=2)S([O-])(=O)=O)C=2C=CC(=CC=2)N(CC)CC=2C=C(C=CC=2)S([O-])(=O)=O)C=C1 NKLPQNGYXWVELD-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 235000018417 cysteine Nutrition 0.000 description 1
- XUJNEKJLAYXESH-UHFFFAOYSA-N cysteine Natural products SCC(N)C(O)=O XUJNEKJLAYXESH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960003067 cystine Drugs 0.000 description 1
- 238000004925 denaturation Methods 0.000 description 1
- 230000036425 denaturation Effects 0.000 description 1
- 238000001514 detection method Methods 0.000 description 1
- 238000011161 development Methods 0.000 description 1
- 238000000502 dialysis Methods 0.000 description 1
- 238000001938 differential scanning calorimetry curve Methods 0.000 description 1
- 239000003085 diluting agent Substances 0.000 description 1
- 150000002016 disaccharides Chemical class 0.000 description 1
- 239000002552 dosage form Substances 0.000 description 1
- 238000001962 electrophoresis Methods 0.000 description 1
- 238000010828 elution Methods 0.000 description 1
- 238000004108 freeze drying Methods 0.000 description 1
- 239000011521 glass Substances 0.000 description 1
- 239000008103 glucose Substances 0.000 description 1
- 238000003505 heat denaturation Methods 0.000 description 1
- 235000011167 hydrochloric acid Nutrition 0.000 description 1
- 238000001802 infusion Methods 0.000 description 1
- 230000002427 irreversible effect Effects 0.000 description 1
- 229910052943 magnesium sulfate Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000019341 magnesium sulphate Nutrition 0.000 description 1
- 239000001630 malic acid Substances 0.000 description 1
- 235000011090 malic acid Nutrition 0.000 description 1
- 238000000691 measurement method Methods 0.000 description 1
- HEBKCHPVOIAQTA-UHFFFAOYSA-N meso ribitol Natural products OCC(O)C(O)C(O)CO HEBKCHPVOIAQTA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229930182817 methionine Natural products 0.000 description 1
- 238000013508 migration Methods 0.000 description 1
- 230000005012 migration Effects 0.000 description 1
- 239000011259 mixed solution Substances 0.000 description 1
- 238000012986 modification Methods 0.000 description 1
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 1
- 150000002772 monosaccharides Chemical class 0.000 description 1
- 231100000957 no side effect Toxicity 0.000 description 1
- 229960002446 octanoic acid Drugs 0.000 description 1
- 230000003204 osmotic effect Effects 0.000 description 1
- 239000007800 oxidant agent Substances 0.000 description 1
- 230000001590 oxidative effect Effects 0.000 description 1
- 230000007170 pathology Effects 0.000 description 1
- 229940127557 pharmaceutical product Drugs 0.000 description 1
- 239000004033 plastic Substances 0.000 description 1
- 229920003023 plastic Polymers 0.000 description 1
- 229920002401 polyacrylamide Polymers 0.000 description 1
- 229920000573 polyethylene Polymers 0.000 description 1
- 229920001155 polypropylene Polymers 0.000 description 1
- XAEFZNCEHLXOMS-UHFFFAOYSA-M potassium benzoate Chemical compound [K+].[O-]C(=O)C1=CC=CC=C1 XAEFZNCEHLXOMS-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 239000001103 potassium chloride Substances 0.000 description 1
- 235000011164 potassium chloride Nutrition 0.000 description 1
- 239000004224 potassium gluconate Substances 0.000 description 1
- 235000013926 potassium gluconate Nutrition 0.000 description 1
- 229960003189 potassium gluconate Drugs 0.000 description 1
- 239000003755 preservative agent Substances 0.000 description 1
- 230000002335 preservative effect Effects 0.000 description 1
- 239000002994 raw material Substances 0.000 description 1
- 238000005215 recombination Methods 0.000 description 1
- 230000006798 recombination Effects 0.000 description 1
- 230000002441 reversible effect Effects 0.000 description 1
- 235000003441 saturated fatty acids Nutrition 0.000 description 1
- 239000001632 sodium acetate Substances 0.000 description 1
- 235000017281 sodium acetate Nutrition 0.000 description 1
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 1
- 235000011121 sodium hydroxide Nutrition 0.000 description 1
- 159000000000 sodium salts Chemical class 0.000 description 1
- 239000000600 sorbitol Substances 0.000 description 1
- 238000010186 staining Methods 0.000 description 1
- 238000003860 storage Methods 0.000 description 1
- 150000005846 sugar alcohols Chemical class 0.000 description 1
- 125000004434 sulfur atom Chemical group 0.000 description 1
- 230000009469 supplementation Effects 0.000 description 1
- 238000001757 thermogravimetry curve Methods 0.000 description 1
- 229960002175 thyroglobulin Drugs 0.000 description 1
- 230000001988 toxicity Effects 0.000 description 1
- 231100000419 toxicity Toxicity 0.000 description 1
- 239000002753 trypsin inhibitor Substances 0.000 description 1
- 239000000811 xylitol Substances 0.000 description 1
- HEBKCHPVOIAQTA-SCDXWVJYSA-N xylitol Chemical compound OC[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)CO HEBKCHPVOIAQTA-SCDXWVJYSA-N 0.000 description 1
- 229960002675 xylitol Drugs 0.000 description 1
- 235000010447 xylitol Nutrition 0.000 description 1
Images
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
- A61K38/16—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
- A61K38/17—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
- A61K38/38—Albumins
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
- A61K47/06—Organic compounds, e.g. natural or synthetic hydrocarbons, polyolefins, mineral oil, petrolatum or ozokerite
- A61K47/08—Organic compounds, e.g. natural or synthetic hydrocarbons, polyolefins, mineral oil, petrolatum or ozokerite containing oxygen, e.g. ethers, acetals, ketones, quinones, aldehydes, peroxides
- A61K47/12—Carboxylic acids; Salts or anhydrides thereof
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
- A61K47/06—Organic compounds, e.g. natural or synthetic hydrocarbons, polyolefins, mineral oil, petrolatum or ozokerite
- A61K47/20—Organic compounds, e.g. natural or synthetic hydrocarbons, polyolefins, mineral oil, petrolatum or ozokerite containing sulfur, e.g. dimethyl sulfoxide [DMSO], docusate, sodium lauryl sulfate or aminosulfonic acids
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
- A61K9/0012—Galenical forms characterised by the site of application
- A61K9/0019—Injectable compositions; Intramuscular, intravenous, arterial, subcutaneous administration; Compositions to be administered through the skin in an invasive manner
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P1/00—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system
- A61P1/16—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system for liver or gallbladder disorders, e.g. hepatoprotective agents, cholagogues, litholytics
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P13/00—Drugs for disorders of the urinary system
- A61P13/12—Drugs for disorders of the urinary system of the kidneys
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P43/00—Drugs for specific purposes, not provided for in groups A61P1/00-A61P41/00
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P7/00—Drugs for disorders of the blood or the extracellular fluid
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P7/00—Drugs for disorders of the blood or the extracellular fluid
- A61P7/10—Antioedematous agents; Diuretics
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Public Health (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Oil, Petroleum & Natural Gas (AREA)
- Gastroenterology & Hepatology (AREA)
- Diabetes (AREA)
- Dermatology (AREA)
- Hematology (AREA)
- Zoology (AREA)
- Immunology (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Urology & Nephrology (AREA)
- Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
- Medicinal Preparation (AREA)
- Peptides Or Proteins (AREA)
- Medicines Containing Material From Animals Or Micro-Organisms (AREA)
Abstract
Description
本発明は、極めて安定性に優れたアルブミン製剤に関する。さらに詳しくは、安定化され,安全性に優れた、分画ヒト血清アルブミン、遺伝子組み換えヒト血清アルブミンなどのアルブミン製剤に関する。
背景技術
アルブミン製剤は、急性の低アルブミン血症や管理困難な慢性低アルブミン血症に基づく疾病に対し、その補充によって病態の改善を図るものである。具体的には、出血性及び外傷性ショック時の循環血漿量の是正や浮腫の改善、肝硬変、ネフローゼ症候群等、種々の疾患に対して汎用されており、近代医療にとって欠かせない医薬品である(Peter T.Jr., The Plasma Proteins,Academic Press,New York,133−81(1975).,Rosenorer VM.,Rothschild MA.,Albumin Structure,Function and Uses,(1977))。
従来ヒト血清アルブミン製剤の製造は、ヒトから採取した血液を分画し、得られたアルブミン含有水溶液を種々の精製手段により精製することにより行われている。精製手段としては、例えばエタノール分画法、PEG分画法、硫安分画法、陰イオン交換体と69℃、10時間の加熱処理を組み合わせた方法(特開平2−191226号公報)、陰イオン交換体処理、陽イオン交換体処理及び60℃、10時間の加熱処理を組み合わせた方法(特開平3−17123号公報、特開平7−330626号公報)などが知られている。一方、アルブミンは近年リコンビナント(遺伝子組替え)による大量生産技術が確立され、ヒトアルブミンが献血によらず、工場で大量生産できるようになった。(臨床分子医学、1、939(1993))
アルブミン製剤の製造(とりわけ分画ヒト血清アルブミンの製造)においては、有害で熱に不安定なウイルスを除去し、蛋白質等の混入を防ぐために、例えば低温殺菌法(60℃、10時間)などの殺菌方法が用いられている。低温殺菌法では、ヒト血清アルブミンにN−アセチルトリプトファン、カプリル酸ナトリウムが加えられている(Ballou GA.,Boyer PD.,Luck JM.,Lum FG.,J.Biol.Chem.,153,589−605(1944),Scatchard G,Strong LE.,Hughes WL.Jr.,AshWorth JN.,Sparrow AH.,J Clin.Invest.,24,571−679(1945),Boyer PD.,Lum FG.,Ballou GA.,Luch JM.,Rice RG.,J.Biol.Chem.,162,181−198(1946))が、N−アセチルトリプトファンは脳内疾患等の副作用の問題がある。
ウイルスや夾雑蛋白質が混在せず、副作用の危険性がなく安全で、しかも長期間外観変化や含量低下もなく、安定に保存できるアルブミン製剤の開発が求められている。
発明の開示
このような背景の下、本発明者らは、N−アセチルメチオニンがアルブミンを安定化する優れた効果を発揮することを見出し、さらに中鎖脂肪酸を共存させることにより、さらに優れた凝集抑制効果を有することを発見した。このような知見に基づき、種々検討した結果、本発明を完成した。
すなわち、本発明は、
(1)中鎖脂肪酸またはその塩と含硫黄アミノ酸またはその誘導体とを含有することを特徴とする、安定化されたアルブミン製剤、
(2)中鎖脂肪酸が、炭素数6〜12の直鎖状飽和脂肪酸である上記1記載のアルブミン製剤、
(3)含硫黄アミノ酸が、アルキル化されていてもよくジスルフィド結合化していてもよいメルカプト基を有するアミノ酸である上記1記載のアルブミン製剤、
(4)含硫黄アミノ酸誘導体が、N−アシル化された含硫黄アミノ酸誘導体である上記1記載のアルブミン製剤、
(5)中鎖脂肪酸またはその塩と含硫黄アミノ酸またはその誘導体の総添加量が、アルブミンに対して、約1倍から20倍モル量である上記1記載のアルブミン製剤、
(6)アルブミンが遺伝子組み換えヒト血清アルブミンである請求項1記載のアルブミン製剤、
(7)中鎖脂肪酸またはその塩と含硫黄アミノ酸またはその誘導体とからなるアルブミン製剤用安定化剤、及び
(8)中鎖脂肪酸またはその塩と含硫黄アミノ酸またはその誘導体とを配合することを特徴とする、アルブミン製剤の安定化方法に関する。
本発明製剤では、有効成分のアルブミンとして分画ヒト血清アルブミン、遺伝子組み換えヒト血清アルブミンなどが用いられる。アルブミン製剤は、通常アルブミン含量が約5重量/容量%〜約25重量/容量%の溶液として用いられる。アルブミンを溶解する溶媒としては、水(注射用水)、生理的食塩水、医薬品として投与可能なリン酸塩等の緩衝液などが挙げられる。
本発明製剤に添加する中鎖脂肪酸は、例えば炭素数6から12の脂肪酸、好ましくは炭素数6から12の直鎖状飽和脂肪酸が挙げられる。好ましい具体例を挙げれば、カプリル酸、ペラルゴン酸、カプリン酸、ウンデカン酸、ラウリン酸等である。中鎖脂肪酸の塩としては塩基塩、例えば、ナトリウム塩、カリウム塩などのアルカリ金属塩が挙げられる。このうちカプリル酸ナトリウムが最も好ましい。
含硫黄アミノ酸またはその誘導体としては、アルキル化されていてもよく、二量化(ジスルフィド結合)していてもよいメルカプト基(SH基)を有するアミノ酸が挙げられる。含硫黄アミノ酸は、硫黄原子を1から3個分子中に有するアミノ酸が挙げられる。その好ましい具体例を挙げれば、例えばシステイン、シスチン、メチオニンなどである。含硫黄アミノ酸の誘導体としては、N−アシル体、好ましくは、例えばN−ホルミル、N−アセチル、N−プロピオニル、N−ブチリル等のN−(1から6のアルカノイル)体、より好ましくはN−アセチル体が挙げられる。このうち、N−アセチルメチオニンが最も好ましい。
本発明製剤において、中鎖脂肪酸またはその塩と含硫黄アミノ酸またはその誘導体との合計添加量は、アルブミンに対して、好ましくは等モル量程度から20倍モル量程度である。含硫黄アミノ酸またはその誘導体:中鎖脂肪酸またはその塩の添加モル比は、0.1〜10:1、好ましくは、0.5〜2:1である。中鎖脂肪酸またはその塩及び含硫黄アミノ酸またはその誘導体はそれぞれ1種類または2種類以上適宜混合して用いてもよい。
本発明製剤は、必要により薬理学的に許容できる、着色剤、安定化剤、防腐剤、希釈剤、pH調整剤(例、塩基性アミノ酸、酸性アミノ酸、塩酸、酢酸、リンゴ酸、水酸化ナトリウム等)、浸透圧調整剤(例、塩化ナトリウム,塩化カリウム,グルコン酸カリウム,硫酸マグネシウム,炭酸水素ナトリウム,塩化カルシウム,グルコン酸カルシウム,クエン酸等の電解質等)、表面活性剤(例、非イオン性表面活性剤等)等を適量添加してもよい。
本発明製剤の溶液のpH値は必要によりpH調整剤を加えて、約5から7.5、好ましくはpH約6.5〜7.4に調整する。本発明製剤は、必要に応じて、アルブミン以外の生理活性物質を含んでいてもよい。例えば糖類(例、グルコース,フラクトースなどの単糖類、マルトースなどの二糖類、ソルビトール,キシリトールなどの糖アルコール類)を加えてもよい。
本発明製剤は出血性及び外傷性ショック時の循環血漿量の是正や浮腫の改善、肝硬変、ネフローゼ症候群等の治療用に用いられる。 投与量は、通常成人一回あたりアルブミンとして、約5g〜約12.5gである。本発明製剤は、病態により異なるが、1日1回または2から4回程度に分けて投与してもよい。
本発明製剤は副作用もほとんどなく、低毒性で安全であり、自体公知の方法に従ってヒトやほ乳動物(例、ヒツジ、ウマ、ウシ等)に皮下または静脈内投与することができる。
本発明製剤は、中鎖脂肪酸またはその塩と含硫黄アミノ酸またはその誘導体とアルブミン水溶液(医薬品として投与可能なリン酸塩等の緩衝液、注射用水または生理的食塩水等)とを均一に混合して溶解し、ついで混合溶液を例えば、点滴製剤、注射剤などの非経口投与に適した製剤形に製剤化することにより製造できる。
原料として用いられる中鎖脂肪酸またはその塩、含硫黄アミノ酸またはその誘導体及びアルブミンは、公知方法または自体公知の方法にしたがって製造することができる。
製造された製剤を保存する容器としては、例えば、ガラスバイアルやポリプロピレン、ポリエチレン等のプラスチック容器を用いることができる。本発明のアルブミン製剤は、上記した容器等に充填し、密閉し、滅菌(60℃/10時間)を施すことができる。
本発明製剤は、加熱滅菌処理を行っても、また長期間保存しても外観変化は少なく含量の変化もほとんどない優れた安定性を示す。
発明を実施するための最良の形態
以下、本発明を実施例、実験例により具体的に説明するが、これらに限定されるものではない。
[実施例1]
遺伝子組み換えヒト血清アルブミン(以下、ヒト血清アルブミンをHSAまたはアルブミンと略称)を生理食塩水に溶解し25w/v%HSA生理食塩水溶液500mLを調製した。これに安定化剤としてカプリル酸ナトリウム1662mgとN−アセチルメチオニン1912.5mgとを添加して溶解させた後、50mLバイアルにHSA生理食塩水溶液50mLずつ分注し密封した
[実施例2]
血液から分画されたHSAを生理食塩水に溶解し25w/v%HSA生理食塩水溶液500mLを調製した。これに安定化剤としてカプリル酸ナトリウム1662mgとN−アセチルメチオニン1912.5mgとを添加して溶解させた後、50mLバイアルにHSA生理食塩水溶液50mLずつ分注し密封した
[実験例1]
(1)供試薬剤の調製
遺伝子組み換えHSAをChenの方法(Chen RF,J.Biol.Chem.,242,173−181(1967))に従って脱脂した。さらに透析した後、凍結乾燥を行い、以下の全ての実験に用いた。
HSA100μM(1/15mMリン酸緩衝液、pH7.4)に各種薬剤を添加し、以下の供試薬剤を調製した。
▲1▼ HSA 100μM溶液
▲2▼ HSA 100μM+カプリル酸ナトリウム500μMの溶液
▲3▼ HSA 100μM+N−アセチルメチオニン500μMの溶液
▲4▼ HSA 100μM+N−アセチルメチオニン500μM+カプリル酸ナトリウム500μMの溶液
【0001】
(2)測定方法
これらの供試薬剤▲1▼〜▲4▼の示差走査熱量分析(DSC)測定から熱転移温度(Tm)及び転移エンタルピー変化ΔHcalを算出し、安定化効果を熱力学的観点から評価した。熱力学上、熱転移温度(Tm)が上昇する場合、その供試薬剤の安定性は増加することを意味する。また転移エンタルピー変化ΔHcalが増加すれば、その供試薬剤の安定性は増加することを示す。
表1に、供試薬剤▲1▼〜▲4▼の熱転移温度Tm値及び転移エンタルピー変化ΔHcal値を示した。これらの値はHSA溶液のDSCサーモグラムから解析された。
示差走査熱量測定法(DSC法)
DSCは、MicroCal社製MC−2示差走査熱量計を使用して測定した。測定条件を以下に示す。
走査速度:1K/min
アルブミン濃度:100μM
溶媒:1/15Mリン酸緩衝液(pH7.4)
熱変性の可逆性は、初回の測定後のアルブミン溶液を冷却後、再び加熱して確認した。その結果、85℃以下までの加熱であれば、アルブミンは不可逆的な変性を惹起することなく、可逆的な熱転移を起こすことが明らかになった。得られたサーモグラムは非線形フィッティングアルゴリズム(Using Origin TM scientific plotting software)を用い、フィッティングを行い、その結果得られた過剰熱容量曲線下面積を用いて、以下のように解析した。
転移エンタルピー ΔHcal=∫Cex dT
Cexは過剰熱容量を表す。
(3)結果
表1から明らかなように各種薬剤が添加された溶液は、添加されていないHSA溶液に比べ、熱転移温度(Tm)がいずれも増加した。カプリル酸ナトリウムの添加によって、アルブミンのTmは約7℃上昇しており、熱に対する安定性の向上が示されている。
また、N−アセチルメチオニン単独の添加によってもわずかにTmの上昇と転移エンタルピー変化ΔHcalが増加した。
カプリル酸ナトリウムとN−アセチルメチオニンとを添加した溶液は、アルブミンがより秩序だった立体構造状態となり、native状態よりもさらに安定な状態であることが明らかである。
[実験例2]
(1)供試薬剤の調製
HSAの24μMリン酸緩衝溶液(67mM pH7.4)を調製し、これに各種薬剤を24、72、120μMの濃度になるように添加した供試薬剤▲1▼〜▲4▼を調製し、添加薬剤の濃度の安定化効果への影響を検討した。
▲1▼ HSA 24μM
▲2▼ HSA 24μM+カプリル酸ナトリウム
▲3▼ HSA 24μM+N−アセチルメチオニン
▲4▼ HSA 24μM+N−アセチルメチオニン+カプリル酸ナトリウム
(2)測定方法
60℃/30分の加熱滅菌による熱安定性をNATIVE−PAGEにより評価した。
NATIVE−PAGE
NATIVE−PAGEは、7.5%(w/v)ポリアクリルアミドゲルを用い、Davis法に従って行った。蛋白質の染色にはクマジーブリリアントブルーR−250を使用した。分子量マーカーとしては下記の蛋白質を用いた。
α−サイログロブリン(M.W.669000)、フェリチン(M.W.443000)、乳酸脱水素酵素(M.W.139850)、ウシ血清アルブミン(M.W.66267)、トリプシンインヒビター(M.W.20110)を用いた。
(3)結果
NATIVE−PAGEの結果を図1に示した。60℃で30分間の加熱処理後、供試薬剤▲1▼(添加薬剤なし)は多量の凝集体が確認された。一方、供試薬剤▲2▼(カプリル酸ナトリウム含有)供試薬剤▲3▼(N−アセチルメチオニンを含有)あるいは供試薬剤▲4▼(カプリル酸ナトリウムとN−アセチルメチオニンを含有)では、凝集体抑制効果が認められた。またこれらの濃度依存性については、泳動パターンから明らかなように、アルブミンと等モルの薬剤を加えた場合には、ほとんど凝集体抑制効果が認められなかったが、3倍量(72μM)を添加した場合には明らかな凝集体抑制効果が認められ、さらに5倍量(120μM)の添加では著しい凝集体抑制効果が得られた。
[実験例3]
カプリル酸ナトリウム以外の中鎖脂肪酸を用いて、熱に対する凝集体抑制効果について検討を行った(図2電気泳動)。測定試料は、HSA24μMリン酸緩衝溶液(67mM pH7.4)に対して、5倍量(120μM)の各種脂肪酸を添加したものを用いた。
その結果、カプリル酸ナトリウムよりも炭素鎖の短いカプロン酸(C6)、エナント酸(C7)では、わずかに凝集体抑制効果は観察され、カプリル酸ナトリウム以上の炭素鎖を持つ脂肪酸では顕著な抑制効果が観察された。
[実験例4]
(1)供試薬剤の調製
HSAの24μMリン酸緩衝溶液(67mM pH7.4)を調製し、各種薬剤を120μMの濃度で添加した供試薬剤を以下のように調製し、供試薬剤5mLに対して、最終濃度10μMとなるように2,2’−アゾビス(2−アミジノプロパン)二塩酸塩(以下、AAPH)(1級、和光純薬製)を添加した。
▲1▼ HSA
▲2▼ HSA+カプリル酸ナトリウム
▲3▼ HSA+カプリル酸ナトリウム+N−アセチルメチオニン
(2)HSAのメルカプト型とノンメルカプト型の存在比率の測定
高速液体クロマトグラフィー(以下、HPLC)でHSAのメルカプト型とノンメルカプト型の存在比率(メルカプト分率)を測定した。
メルカプト分率の測定に用いたHPLCはグラジエント装置を装備した島津LC−4Aに島津SPD−2ASUV検出器及び島津C−R2AXデータ処理装置を接続したものを用いた。試料の溶離は、(A)0.05Mトリス−酢酸緩衝液(pH7.0)から、(B)0.5M酢酸ナトリウムを含む0.05Mトリス−酢酸緩衝液(pH7.0)への30分間の直線グラジエント法を用いて流速0.5mL/minで行った。試料の検出はUV280nmにて室温で実施した。
(3)結果
供試薬剤▲1▼のHSAのHPLCクロマトグラムを図3に示す。供試薬剤▲1▼では、メルカプト型の減少とノンメルカプト型の増大が認められた。
HSAのメルカプト型とノンメルカプト型の存在率の変化は、カプリル酸ナトリウムを添加しても変化は認められなかった。しかし、供試薬剤▲3▼(カプリル酸ナトリウムとN−アセチルメチオニンとを併用)では、これらの存在率の変化は有意に抑制され、抗酸化効果が確認された。したがって、副作用のないN−アセチルメチオニンが安定化剤として適していることがわかる。
[実験例5]
HSAに対し過剰量の酸化剤2,2’−アゾビス(2−アミジノプロパン)二塩酸塩(AAPH)を加え、HSAを酸化させた。一定時間酸化を行った後に、HSAのカルボニル含量を測定した。酸化時間と安定化剤の種類との関係から、各種安定化剤の抗酸化作用について評価を行った(図4)。
酸化の程度を示すカルボニル含量はClimentらの方法(Climent I.,Thai L.,Levine RL.,Anal.Biochem.,182,226(1989).に記載)に従って測定した。カルボニル呈色試薬Fluoresceinamineの蛋白質あたりの修飾量として表示した。
N−アセチルメチオニンにおいては、添加されていない供試薬剤と比較してカルボニル含量の有意な減少が観察され、抗酸化作用が得られることは明らかである。
[実験例6]
遺伝子組み換えHSAを生理食塩水を用いて25w/v%の500mL溶液を調製し、安定化剤としてカプリル酸ナトリウム1662mgとN−アセチルメチオニン1912.5mgとを添加した供試薬剤を調製し、50mLをバイアルに密封した。また、別に安定化剤を含まない遺伝子組み換えHSAを生理食塩水を用いて25w/v%の濃度に調製し50mLをバイアルに密封した。
これらの試料を60℃で30分間の減菌条件で加熱処理した後、異物の発生について目視確認を行った。その結果、添加剤未添加の試料は明らかに熱によるアルブミンの凝集体生成が認められたが、安定化剤添加試料は全く異物が認められなかった。
産業上の利用可能性
本発明の安定化されたアルブミン製剤は、副作用の危険性がなく、安全でしかも長期間安定に保存できる。中鎖脂肪酸またはその塩単独では、熱安定性に対する効果は認められるが、アルブミンの抗酸化作用が小さく、また、含硫黄アミノ酸またはその誘導体のみの添加では、アルブミンの熱安定性に対する効果が認められない。従って、中鎖脂肪酸またはその塩及び含硫黄アミノ酸またはその誘導体の両方を添加することにより相乗的に優れたアルブミン安定化効果が得られる。
【図面の簡単な説明】
第1図は、実験例2の未変性ポリアクリルアミドゲル電気泳動を示す図面に替わる代用写真である。第2図は、実験例3の未変性ポリアクリルアミドゲル電気泳動を示す図面に替わる代用写真である。第3図は、実験例4のHPLCクロマトグラムを示す図面である。第4図は、実験例5の酸化によるHSA中のカルボニル含量を示す図面である。
Claims (8)
- 中鎖脂肪酸またはその塩と含硫黄アミノ酸またはその誘導体とを含有することを特徴とする、安定化されたアルブミン製剤。
- 中鎖脂肪酸が、炭素数6〜12の直鎖状飽和脂肪酸である請求項1記載のアルブミン製剤。
- 含硫黄アミノ酸が、アルキル化されていてもよくジスルフィド結合化していてもよいメルカプト基を有するアミノ酸である請求項1記載のアルブミン製剤。
- 含硫黄アミノ酸誘導体が、N−アシル化された含硫黄アミノ酸誘導体である請求項1記載のアルブミン製剤。
- 中鎖脂肪酸またはその塩と含硫黄アミノ酸またはその誘導体の総添加量が、アルブミンに対して、約1倍から20倍モル量である請求項1記載のアルブミン製剤。
- アルブミンが遺伝子組み換えヒト血清アルブミンである請求項1記載のアルブミン製剤。
- 中鎖脂肪酸またはその塩と含硫黄アミノ酸またはその誘導体とからなるアルブミン製剤用安定化剤。
- 中鎖脂肪酸またはその塩と含硫黄アミノ酸またはその誘導体とを配合することを特徴とする、アルブミン製剤の安定化方法。
Applications Claiming Priority (3)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
JP2002053337 | 2002-02-28 | ||
JP2002053337 | 2002-02-28 | ||
PCT/JP2003/002320 WO2003072123A1 (fr) | 2002-02-28 | 2003-02-28 | Preparations d'albumine stabilisees |
Publications (2)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
JPWO2003072123A1 true JPWO2003072123A1 (ja) | 2005-06-16 |
JP4259324B2 JP4259324B2 (ja) | 2009-04-30 |
Family
ID=27764357
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
JP2003570867A Expired - Fee Related JP4259324B2 (ja) | 2002-02-28 | 2003-02-28 | 安定化されたアルブミン製剤 |
Country Status (9)
Country | Link |
---|---|
US (1) | US7351800B2 (ja) |
EP (1) | EP1479393B1 (ja) |
JP (1) | JP4259324B2 (ja) |
CN (1) | CN1330370C (ja) |
AT (1) | ATE477810T1 (ja) |
AU (1) | AU2003211474A1 (ja) |
CA (1) | CA2477557C (ja) |
DE (1) | DE60333821D1 (ja) |
WO (1) | WO2003072123A1 (ja) |
Families Citing this family (14)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US7658938B2 (en) | 1999-02-22 | 2010-02-09 | Merrion Reasearch III Limited | Solid oral dosage form containing an enhancer |
AU2007235251B2 (en) | 2006-04-07 | 2013-02-07 | Merrion Research Iii Limited | Solid oral dosage form containing an enhancer |
KR101430772B1 (ko) * | 2006-06-28 | 2014-08-18 | 후지모리 고교 가부시키가이샤 | 액체 수납용기 |
JP4935242B2 (ja) * | 2006-08-24 | 2012-05-23 | ニプロ株式会社 | 脂肪酸を含有するs−ニトロソタンパク質とその製法 |
WO2009137078A1 (en) * | 2008-05-07 | 2009-11-12 | Merrion Research Iii Limited | Compositions of peptides and processes of preparation thereof |
US9089484B2 (en) | 2010-03-26 | 2015-07-28 | Merrion Research Iii Limited | Pharmaceutical compositions of selective factor Xa inhibitors for oral administration |
US8802114B2 (en) | 2011-01-07 | 2014-08-12 | Merrion Research Iii Limited | Pharmaceutical compositions of iron for oral administration |
CN103476786B (zh) * | 2011-04-08 | 2018-06-05 | 哥斯达黎加大学 | 一种生产血液来源蛋白质注射制剂的方法,以及使用上述方法获得的蛋白质物料 |
AU2013205138B2 (en) * | 2012-08-09 | 2015-06-25 | Grifols, S.A. | Caprylate Viral Deactivation |
US10124107B2 (en) | 2012-12-14 | 2018-11-13 | Gambro Lundia Ab | Cleaning of biological fluid |
US10265384B2 (en) | 2015-01-29 | 2019-04-23 | Novo Nordisk A/S | Tablets comprising GLP-1 agonist and enteric coating |
CN106106739A (zh) * | 2016-06-15 | 2016-11-16 | 广州嘉德乐生化科技有限公司 | 含有双乙酰酒石酸单双甘油酯的稳定剂组合物及其用途 |
MX2019007255A (es) * | 2016-12-21 | 2019-11-05 | Prometic Pharma Smt Ltd | Metodos y composiciones para prevenir o minimizar la transicion epitelio mesenquima. |
US11739166B2 (en) | 2020-07-02 | 2023-08-29 | Davol Inc. | Reactive polysaccharide-based hemostatic agent |
Citations (15)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
JPS5892619A (ja) * | 1981-11-28 | 1983-06-02 | Sunstar Inc | インタ−フエロンを安定に配合した組成物 |
JPS60215631A (ja) * | 1984-04-09 | 1985-10-29 | Takeda Chem Ind Ltd | インタ−ロイキン−2組成物 |
JPH01246226A (ja) * | 1988-03-28 | 1989-10-02 | Sumitomo Pharmaceut Co Ltd | 安定な修飾アスパラギナーゼ含有組成物 |
JPH0327320A (ja) * | 1989-06-26 | 1991-02-05 | Ajinomoto Co Inc | ヒトb細胞分化因子医薬組成物 |
JPH03103188A (ja) * | 1989-09-18 | 1991-04-30 | Green Cross Corp:The | ヒト血清アルブミンの製造方法 |
JPH04210646A (ja) * | 1990-11-30 | 1992-07-31 | Green Cross Corp:The | アルブミン製剤の保存方法 |
JPH05317079A (ja) * | 1992-05-20 | 1993-12-03 | Green Cross Corp:The | 遺伝子操作により得られるヒト血清アルブミンの製造方法、およびそれにより得られるヒト血清アルブミン含有組成物 |
JPH0672891A (ja) * | 1992-08-31 | 1994-03-15 | Green Cross Corp:The | ヒト血清アルブミン含有製剤 |
JPH06247870A (ja) * | 1993-02-23 | 1994-09-06 | Ajinomoto Co Inc | インターロイキン−6を含有する医薬製剤 |
JPH0776525A (ja) * | 1988-03-09 | 1995-03-20 | Otsuka Pharmaceut Co Ltd | インターロイキン−1β組成物の安定化方法 |
JPH07170993A (ja) * | 1993-12-17 | 1995-07-11 | Green Cross Corp:The | ヒト血清アルブミンの脱色方法 |
JPH08116985A (ja) * | 1994-08-31 | 1996-05-14 | Green Cross Corp:The | 遺伝子操作に由来するヒト血清アルブミンの精製方法 |
JPH09176195A (ja) * | 1997-01-06 | 1997-07-08 | Green Cross Corp:The | 遺伝子操作由来のヒト血清アルブミンより得られる高純度ヒト血清アルブミン含有組成物 |
WO2000043035A1 (fr) * | 1999-01-19 | 2000-07-27 | Nissho Corporation | Preparations d'albumine a base d'acides amines |
JP2000247903A (ja) * | 1999-03-01 | 2000-09-12 | Chugai Pharmaceut Co Ltd | 長期安定化製剤 |
Family Cites Families (8)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US5277818A (en) * | 1988-10-31 | 1994-01-11 | The Green Cross Corporation | Albumin preparation and process for preparing the same |
DE68916237T2 (de) * | 1988-12-06 | 1994-11-10 | Otsuka Pharma Co Ltd | Stabilisierte interleukin-1-beta enthaltende zusammensetzung. |
US4939176A (en) | 1988-12-20 | 1990-07-03 | Miles Inc. | Viral inactivation process |
US5440018A (en) * | 1992-05-20 | 1995-08-08 | The Green Cross Corporation | Recombinant human serum albumin, process for producing the same and pharmaceutical preparation containing the same |
CA2138349A1 (en) * | 1993-12-17 | 1995-06-18 | Welfide Corporation | Method for decoloring human serum albumin |
JP3702474B2 (ja) * | 1994-06-01 | 2005-10-05 | 三菱ウェルファーマ株式会社 | 血清アルブミン製剤の製造方法 |
DE69532492T2 (de) * | 1994-08-31 | 2004-12-02 | Mitsubishi Pharma Corp. | Verfahren zur Reinigung von rekombinantem menschlichem Serumalbumin |
BR0109764A (pt) * | 2000-03-23 | 2003-07-01 | Clearant Inc | Método para esterilização de um material biológico que é sensìvel à radiação de ionização |
-
2003
- 2003-02-28 EP EP03743064A patent/EP1479393B1/en not_active Expired - Lifetime
- 2003-02-28 WO PCT/JP2003/002320 patent/WO2003072123A1/ja active Application Filing
- 2003-02-28 DE DE60333821T patent/DE60333821D1/de not_active Expired - Lifetime
- 2003-02-28 US US10/505,783 patent/US7351800B2/en not_active Expired - Fee Related
- 2003-02-28 AT AT03743064T patent/ATE477810T1/de not_active IP Right Cessation
- 2003-02-28 CA CA2477557A patent/CA2477557C/en not_active Expired - Fee Related
- 2003-02-28 JP JP2003570867A patent/JP4259324B2/ja not_active Expired - Fee Related
- 2003-02-28 AU AU2003211474A patent/AU2003211474A1/en not_active Abandoned
- 2003-02-28 CN CNB038047799A patent/CN1330370C/zh not_active Expired - Fee Related
Patent Citations (16)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
JPS5892619A (ja) * | 1981-11-28 | 1983-06-02 | Sunstar Inc | インタ−フエロンを安定に配合した組成物 |
JPS60215631A (ja) * | 1984-04-09 | 1985-10-29 | Takeda Chem Ind Ltd | インタ−ロイキン−2組成物 |
JPH0776525A (ja) * | 1988-03-09 | 1995-03-20 | Otsuka Pharmaceut Co Ltd | インターロイキン−1β組成物の安定化方法 |
JPH01246226A (ja) * | 1988-03-28 | 1989-10-02 | Sumitomo Pharmaceut Co Ltd | 安定な修飾アスパラギナーゼ含有組成物 |
JPH0327320A (ja) * | 1989-06-26 | 1991-02-05 | Ajinomoto Co Inc | ヒトb細胞分化因子医薬組成物 |
JPH03103188A (ja) * | 1989-09-18 | 1991-04-30 | Green Cross Corp:The | ヒト血清アルブミンの製造方法 |
JPH04210646A (ja) * | 1990-11-30 | 1992-07-31 | Green Cross Corp:The | アルブミン製剤の保存方法 |
JPH05317079A (ja) * | 1992-05-20 | 1993-12-03 | Green Cross Corp:The | 遺伝子操作により得られるヒト血清アルブミンの製造方法、およびそれにより得られるヒト血清アルブミン含有組成物 |
JPH0672891A (ja) * | 1992-08-31 | 1994-03-15 | Green Cross Corp:The | ヒト血清アルブミン含有製剤 |
JPH06247870A (ja) * | 1993-02-23 | 1994-09-06 | Ajinomoto Co Inc | インターロイキン−6を含有する医薬製剤 |
JPH07170993A (ja) * | 1993-12-17 | 1995-07-11 | Green Cross Corp:The | ヒト血清アルブミンの脱色方法 |
JPH08116985A (ja) * | 1994-08-31 | 1996-05-14 | Green Cross Corp:The | 遺伝子操作に由来するヒト血清アルブミンの精製方法 |
JPH09176195A (ja) * | 1997-01-06 | 1997-07-08 | Green Cross Corp:The | 遺伝子操作由来のヒト血清アルブミンより得られる高純度ヒト血清アルブミン含有組成物 |
WO2000043035A1 (fr) * | 1999-01-19 | 2000-07-27 | Nissho Corporation | Preparations d'albumine a base d'acides amines |
JP3937423B2 (ja) * | 1999-01-19 | 2007-06-27 | ニプロ株式会社 | アミノ酸含有アルブミン製剤 |
JP2000247903A (ja) * | 1999-03-01 | 2000-09-12 | Chugai Pharmaceut Co Ltd | 長期安定化製剤 |
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
DE60333821D1 (de) | 2010-09-30 |
JP4259324B2 (ja) | 2009-04-30 |
CA2477557A1 (en) | 2003-09-04 |
CA2477557C (en) | 2011-01-25 |
AU2003211474A1 (en) | 2003-09-09 |
ATE477810T1 (de) | 2010-09-15 |
EP1479393A1 (en) | 2004-11-24 |
CN1638788A (zh) | 2005-07-13 |
EP1479393A4 (en) | 2009-07-01 |
US20050222024A1 (en) | 2005-10-06 |
EP1479393B1 (en) | 2010-08-18 |
WO2003072123A1 (fr) | 2003-09-04 |
CN1330370C (zh) | 2007-08-08 |
US7351800B2 (en) | 2008-04-01 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
US11135267B2 (en) | Etanercept formulations stabilized with metal ions | |
JP4259324B2 (ja) | 安定化されたアルブミン製剤 | |
TWI240627B (en) | Erythropoietin solution preparation | |
HU223668B1 (hu) | Cseppfolyós immunoglobulinkészítmények és eljárás előállításukra | |
EP2869817A1 (en) | Stable aqueous formulations of etanercept | |
JP6884858B2 (ja) | 医薬製剤及びその製造方法 | |
JPH05331071A (ja) | カルシトニン遺伝子関連ペプチド類の凍結乾燥組成物および安定化法 | |
JP2021521232A (ja) | メグルミン塩を使用して製剤を含むタンパク質を安定化するための方法 |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
A621 | Written request for application examination |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A621 Effective date: 20050928 |
|
A131 | Notification of reasons for refusal |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A131 Effective date: 20080729 |
|
A521 | Request for written amendment filed |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523 Effective date: 20080926 |
|
TRDD | Decision of grant or rejection written | ||
A01 | Written decision to grant a patent or to grant a registration (utility model) |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A01 Effective date: 20090120 |
|
A01 | Written decision to grant a patent or to grant a registration (utility model) |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A01 |
|
A61 | First payment of annual fees (during grant procedure) |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A61 Effective date: 20090202 |
|
FPAY | Renewal fee payment (event date is renewal date of database) |
Free format text: PAYMENT UNTIL: 20120220 Year of fee payment: 3 |
|
R150 | Certificate of patent or registration of utility model |
Ref document number: 4259324 Country of ref document: JP Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R150 Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R150 |
|
FPAY | Renewal fee payment (event date is renewal date of database) |
Free format text: PAYMENT UNTIL: 20120220 Year of fee payment: 3 |
|
FPAY | Renewal fee payment (event date is renewal date of database) |
Free format text: PAYMENT UNTIL: 20150220 Year of fee payment: 6 |
|
R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
LAPS | Cancellation because of no payment of annual fees |