JPS6366200B2 - - Google Patents
Info
- Publication number
- JPS6366200B2 JPS6366200B2 JP17806181A JP17806181A JPS6366200B2 JP S6366200 B2 JPS6366200 B2 JP S6366200B2 JP 17806181 A JP17806181 A JP 17806181A JP 17806181 A JP17806181 A JP 17806181A JP S6366200 B2 JPS6366200 B2 JP S6366200B2
- Authority
- JP
- Japan
- Prior art keywords
- acid
- culture
- valine
- medium
- esters
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Expired
Links
- KZSNJWFQEVHDMF-UHFFFAOYSA-N Valine Natural products CC(C)C(N)C(O)=O KZSNJWFQEVHDMF-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 13
- KQNPFQTWMSNSAP-UHFFFAOYSA-N isobutyric acid Chemical compound CC(C)C(O)=O KQNPFQTWMSNSAP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 12
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 claims description 12
- 241000894006 Bacteria Species 0.000 claims description 8
- 150000002148 esters Chemical class 0.000 claims description 8
- ZXEKIIBDNHEJCQ-UHFFFAOYSA-N isobutanol Chemical compound CC(C)CO ZXEKIIBDNHEJCQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 8
- FGKJLKRYENPLQH-UHFFFAOYSA-N isocaproic acid Chemical compound CC(C)CCC(O)=O FGKJLKRYENPLQH-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 8
- QHKABHOOEWYVLI-UHFFFAOYSA-N 3-methyl-2-oxobutanoic acid Chemical compound CC(C)C(=O)C(O)=O QHKABHOOEWYVLI-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 6
- KZSNJWFQEVHDMF-BYPYZUCNSA-N L-valine Chemical compound CC(C)[C@H](N)C(O)=O KZSNJWFQEVHDMF-BYPYZUCNSA-N 0.000 claims description 6
- 238000012258 culturing Methods 0.000 claims description 6
- 241000187747 Streptomyces Species 0.000 claims description 5
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 claims description 5
- 239000002253 acid Substances 0.000 claims description 4
- 150000007513 acids Chemical class 0.000 claims description 4
- 239000004474 valine Substances 0.000 claims description 4
- XYHKNCXZYYTLRG-UHFFFAOYSA-N 1h-imidazole-2-carbaldehyde Chemical compound O=CC1=NC=CN1 XYHKNCXZYYTLRG-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 3
- GWYFCOCPABKNJV-UHFFFAOYSA-M 3-Methylbutanoic acid Natural products CC(C)CC([O-])=O GWYFCOCPABKNJV-UHFFFAOYSA-M 0.000 claims description 3
- GWYFCOCPABKNJV-UHFFFAOYSA-N beta-methyl-butyric acid Natural products CC(C)CC(O)=O GWYFCOCPABKNJV-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 3
- 230000003115 biocidal effect Effects 0.000 claims 1
- VLKZOEOYAKHREP-UHFFFAOYSA-N n-Hexane Chemical compound CCCCCC VLKZOEOYAKHREP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 23
- OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N Methanol Chemical compound OC OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 15
- CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N Acetone Chemical compound CC(C)=O CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 9
- VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N Silicium dioxide Chemical compound O=[Si]=O VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 7
- 238000000034 method Methods 0.000 description 7
- XEKOWRVHYACXOJ-UHFFFAOYSA-N Ethyl acetate Chemical compound CCOC(C)=O XEKOWRVHYACXOJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 235000002639 sodium chloride Nutrition 0.000 description 6
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 6
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 5
- 239000003242 anti bacterial agent Substances 0.000 description 5
- 229940088710 antibiotic agent Drugs 0.000 description 5
- WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N Glucose Natural products OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N 0.000 description 4
- 239000000654 additive Substances 0.000 description 4
- 239000008103 glucose Substances 0.000 description 4
- 239000000741 silica gel Substances 0.000 description 4
- 229910002027 silica gel Inorganic materials 0.000 description 4
- 229960004295 valine Drugs 0.000 description 4
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N Acetic acid Chemical compound CC(O)=O QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N Carbon Chemical compound [C] OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 235000010469 Glycine max Nutrition 0.000 description 3
- 240000008042 Zea mays Species 0.000 description 3
- 235000005824 Zea mays ssp. parviglumis Nutrition 0.000 description 3
- 235000002017 Zea mays subsp mays Nutrition 0.000 description 3
- 235000005822 corn Nutrition 0.000 description 3
- 239000013078 crystal Substances 0.000 description 3
- 238000012136 culture method Methods 0.000 description 3
- KZSNJWFQEVHDMF-AZXPZELESA-N dl-valine-2-13c Chemical compound CC(C)[13CH](N)C(O)=O KZSNJWFQEVHDMF-AZXPZELESA-N 0.000 description 3
- 235000013312 flour Nutrition 0.000 description 3
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 3
- 239000000047 product Substances 0.000 description 3
- 235000020183 skimmed milk Nutrition 0.000 description 3
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 3
- IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N Atomic nitrogen Chemical compound N#N IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- VTYYLEPIZMXCLO-UHFFFAOYSA-L Calcium carbonate Chemical compound [Ca+2].[O-]C([O-])=O VTYYLEPIZMXCLO-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 2
- PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N Glycerine Chemical compound OCC(O)CO PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 244000068988 Glycine max Species 0.000 description 2
- CSNNHWWHGAXBCP-UHFFFAOYSA-L Magnesium sulfate Chemical compound [Mg+2].[O-][S+2]([O-])([O-])[O-] CSNNHWWHGAXBCP-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 2
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 2
- WCUXLLCKKVVCTQ-UHFFFAOYSA-M Potassium chloride Chemical compound [Cl-].[K+] WCUXLLCKKVVCTQ-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- 229920002472 Starch Polymers 0.000 description 2
- 229930006000 Sucrose Natural products 0.000 description 2
- CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N Sucrose Chemical compound O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@]1(CO)O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N 0.000 description 2
- QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-N Sulfuric acid Chemical compound OS(O)(=O)=O QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000003463 adsorbent Substances 0.000 description 2
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 2
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 description 2
- XBDQKXXYIPTUBI-UHFFFAOYSA-N dimethylselenoniopropionate Natural products CCC(O)=O XBDQKXXYIPTUBI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 125000001495 ethyl group Chemical group [H]C([H])([H])C([H])([H])* 0.000 description 2
- 239000000499 gel Substances 0.000 description 2
- 125000001449 isopropyl group Chemical group [H]C([H])([H])C([H])(*)C([H])([H])[H] 0.000 description 2
- 125000002496 methyl group Chemical group [H]C([H])([H])* 0.000 description 2
- 244000005700 microbiome Species 0.000 description 2
- 239000010446 mirabilite Substances 0.000 description 2
- LWIHDJKSTIGBAC-UHFFFAOYSA-K potassium phosphate Substances [K+].[K+].[K+].[O-]P([O-])([O-])=O LWIHDJKSTIGBAC-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 2
- 238000011218 seed culture Methods 0.000 description 2
- RSIJVJUOQBWMIM-UHFFFAOYSA-L sodium sulfate decahydrate Chemical compound O.O.O.O.O.O.O.O.O.O.[Na+].[Na+].[O-]S([O-])(=O)=O RSIJVJUOQBWMIM-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 2
- 239000008107 starch Substances 0.000 description 2
- 235000019698 starch Nutrition 0.000 description 2
- 239000005720 sucrose Substances 0.000 description 2
- 239000006228 supernatant Substances 0.000 description 2
- VZGDMQKNWNREIO-UHFFFAOYSA-N tetrachloromethane Chemical compound ClC(Cl)(Cl)Cl VZGDMQKNWNREIO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- NWUYHJFMYQTDRP-UHFFFAOYSA-N 1,2-bis(ethenyl)benzene;1-ethenyl-2-ethylbenzene;styrene Chemical compound C=CC1=CC=CC=C1.CCC1=CC=CC=C1C=C.C=CC1=CC=CC=C1C=C NWUYHJFMYQTDRP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- RYHBNJHYFVUHQT-UHFFFAOYSA-N 1,4-Dioxane Chemical compound C1COCCO1 RYHBNJHYFVUHQT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- PAWQVTBBRAZDMG-UHFFFAOYSA-N 2-(3-bromo-2-fluorophenyl)acetic acid Chemical compound OC(=O)CC1=CC=CC(Br)=C1F PAWQVTBBRAZDMG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000238876 Acari Species 0.000 description 1
- DCXYFEDJOCDNAF-UHFFFAOYSA-N Asparagine Natural products OC(=O)C(N)CC(N)=O DCXYFEDJOCDNAF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- UXVMQQNJUSDDNG-UHFFFAOYSA-L Calcium chloride Chemical compound [Cl-].[Cl-].[Ca+2] UXVMQQNJUSDDNG-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 229920002261 Corn starch Polymers 0.000 description 1
- 241000196324 Embryophyta Species 0.000 description 1
- 239000005909 Kieselgur Substances 0.000 description 1
- DCXYFEDJOCDNAF-REOHCLBHSA-N L-asparagine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC(N)=O DCXYFEDJOCDNAF-REOHCLBHSA-N 0.000 description 1
- ROHFNLRQFUQHCH-YFKPBYRVSA-N L-leucine Chemical compound CC(C)C[C@H](N)C(O)=O ROHFNLRQFUQHCH-YFKPBYRVSA-N 0.000 description 1
- ROHFNLRQFUQHCH-UHFFFAOYSA-N Leucine Natural products CC(C)CC(N)C(O)=O ROHFNLRQFUQHCH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000244206 Nematoda Species 0.000 description 1
- 229910019142 PO4 Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000001888 Peptone Substances 0.000 description 1
- 108010080698 Peptones Proteins 0.000 description 1
- 241000209140 Triticum Species 0.000 description 1
- 235000021307 Triticum Nutrition 0.000 description 1
- 238000010521 absorption reaction Methods 0.000 description 1
- 230000000895 acaricidal effect Effects 0.000 description 1
- 239000000642 acaricide Substances 0.000 description 1
- 230000000996 additive effect Effects 0.000 description 1
- 125000005907 alkyl ester group Chemical group 0.000 description 1
- PNEYBMLMFCGWSK-UHFFFAOYSA-N aluminium oxide Inorganic materials [O-2].[O-2].[O-2].[Al+3].[Al+3] PNEYBMLMFCGWSK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- BFNBIHQBYMNNAN-UHFFFAOYSA-N ammonium sulfate Chemical compound N.N.OS(O)(=O)=O BFNBIHQBYMNNAN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229910052921 ammonium sulfate Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000011130 ammonium sulphate Nutrition 0.000 description 1
- 230000000507 anthelmentic effect Effects 0.000 description 1
- 229940124339 anthelmintic agent Drugs 0.000 description 1
- 239000000921 anthelmintic agent Substances 0.000 description 1
- 229960001230 asparagine Drugs 0.000 description 1
- 235000009582 asparagine Nutrition 0.000 description 1
- 230000001580 bacterial effect Effects 0.000 description 1
- 125000001797 benzyl group Chemical group [H]C1=C([H])C([H])=C(C([H])=C1[H])C([H])([H])* 0.000 description 1
- WQZGKKKJIJFFOK-VFUOTHLCSA-N beta-D-glucose Chemical compound OC[C@H]1O[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-VFUOTHLCSA-N 0.000 description 1
- 229910000019 calcium carbonate Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000010216 calcium carbonate Nutrition 0.000 description 1
- 239000001110 calcium chloride Substances 0.000 description 1
- 229910001628 calcium chloride Inorganic materials 0.000 description 1
- 229910052799 carbon Inorganic materials 0.000 description 1
- 238000004587 chromatography analysis Methods 0.000 description 1
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 1
- 239000008120 corn starch Substances 0.000 description 1
- ZPWVASYFFYYZEW-UHFFFAOYSA-L dipotassium hydrogen phosphate Chemical compound [K+].[K+].OP([O-])([O-])=O ZPWVASYFFYYZEW-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 235000019797 dipotassium phosphate Nutrition 0.000 description 1
- 229910000396 dipotassium phosphate Inorganic materials 0.000 description 1
- 230000009977 dual effect Effects 0.000 description 1
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 1
- 238000000605 extraction Methods 0.000 description 1
- 239000011790 ferrous sulphate Substances 0.000 description 1
- 235000003891 ferrous sulphate Nutrition 0.000 description 1
- 235000011187 glycerol Nutrition 0.000 description 1
- 244000000013 helminth Species 0.000 description 1
- 238000009776 industrial production Methods 0.000 description 1
- 238000005342 ion exchange Methods 0.000 description 1
- 239000003456 ion exchange resin Substances 0.000 description 1
- 229920003303 ion-exchange polymer Polymers 0.000 description 1
- BAUYGSIQEAFULO-UHFFFAOYSA-L iron(2+) sulfate (anhydrous) Chemical compound [Fe+2].[O-]S([O-])(=O)=O BAUYGSIQEAFULO-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 229910000359 iron(II) sulfate Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 1
- 238000009630 liquid culture Methods 0.000 description 1
- 229910052943 magnesium sulfate Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000019341 magnesium sulphate Nutrition 0.000 description 1
- 229940099596 manganese sulfate Drugs 0.000 description 1
- 239000011702 manganese sulphate Substances 0.000 description 1
- 235000007079 manganese sulphate Nutrition 0.000 description 1
- SQQMAOCOWKFBNP-UHFFFAOYSA-L manganese(II) sulfate Chemical compound [Mn+2].[O-]S([O-])(=O)=O SQQMAOCOWKFBNP-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 238000004949 mass spectrometry Methods 0.000 description 1
- 239000000463 material Substances 0.000 description 1
- 235000013372 meat Nutrition 0.000 description 1
- GBMDVOWEEQVZKZ-UHFFFAOYSA-N methanol;hydrate Chemical compound O.OC GBMDVOWEEQVZKZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000000813 microbial effect Effects 0.000 description 1
- 235000013379 molasses Nutrition 0.000 description 1
- 125000004108 n-butyl group Chemical group [H]C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])* 0.000 description 1
- 230000007935 neutral effect Effects 0.000 description 1
- 229910052757 nitrogen Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000016709 nutrition Nutrition 0.000 description 1
- 239000003921 oil Substances 0.000 description 1
- 235000019198 oils Nutrition 0.000 description 1
- 230000003287 optical effect Effects 0.000 description 1
- 235000019319 peptone Nutrition 0.000 description 1
- 150000003013 phosphoric acid derivatives Chemical class 0.000 description 1
- 235000011164 potassium chloride Nutrition 0.000 description 1
- 239000001103 potassium chloride Substances 0.000 description 1
- 235000011009 potassium phosphates Nutrition 0.000 description 1
- 159000000001 potassium salts Chemical class 0.000 description 1
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 1
- 235000019260 propionic acid Nutrition 0.000 description 1
- 235000018102 proteins Nutrition 0.000 description 1
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 1
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 1
- 238000000746 purification Methods 0.000 description 1
- IUVKMZGDUIUOCP-BTNSXGMBSA-N quinbolone Chemical compound O([C@H]1CC[C@H]2[C@H]3[C@@H]([C@]4(C=CC(=O)C=C4CC3)C)CC[C@@]21C)C1=CCCC1 IUVKMZGDUIUOCP-BTNSXGMBSA-N 0.000 description 1
- 230000005855 radiation Effects 0.000 description 1
- 235000003441 saturated fatty acids Nutrition 0.000 description 1
- 150000004671 saturated fatty acids Chemical class 0.000 description 1
- 238000000926 separation method Methods 0.000 description 1
- UQDJGEHQDNVPGU-UHFFFAOYSA-N serine phosphoethanolamine Chemical compound [NH3+]CCOP([O-])(=O)OCC([NH3+])C([O-])=O UQDJGEHQDNVPGU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 159000000000 sodium salts Chemical class 0.000 description 1
- 235000012424 soybean oil Nutrition 0.000 description 1
- 239000003549 soybean oil Substances 0.000 description 1
- 230000001954 sterilising effect Effects 0.000 description 1
- 238000004659 sterilization and disinfection Methods 0.000 description 1
- 239000006188 syrup Substances 0.000 description 1
- 235000020357 syrup Nutrition 0.000 description 1
- 239000013076 target substance Substances 0.000 description 1
- 239000011782 vitamin Substances 0.000 description 1
- 229940088594 vitamin Drugs 0.000 description 1
- 229930003231 vitamin Natural products 0.000 description 1
- 235000013343 vitamin Nutrition 0.000 description 1
- 238000005303 weighing Methods 0.000 description 1
- 210000005253 yeast cell Anatomy 0.000 description 1
- NWONKYPBYAMBJT-UHFFFAOYSA-L zinc sulfate Chemical compound [Zn+2].[O-]S([O-])(=O)=O NWONKYPBYAMBJT-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 229960001763 zinc sulfate Drugs 0.000 description 1
- 229910000368 zinc sulfate Inorganic materials 0.000 description 1
Landscapes
- Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
Description
本発明は駆虫剤及び殺ダニ剤として有用な抗生
物質B−41D、E及びGを工業的に有利に製造す
る方法に関する。 B−41D、E及びGは、ストレプトマイセス属
に属するB−41生産菌、例えばB−41−146株の
培養によつて得られる抗生物質であつて、次の構
造式を有し、 動物に寄生する蠕虫とくに線虫及び動植物に寄
生するダニの駆除等に有効であることは、特開昭
56−32481号公報、特願昭55−153141号(特開昭
57−77686号)明細書及び特願昭56−7091号(特
開昭57−120589号)明細書に知られている。 ところで、通常の方法でB−41生産菌を培養し
た場合、上記構造式に対応して25位がメチル基で
あるB−41A1、A3、B2及び25位がエチル基であ
るB−41A4、B3、B2などを同時に生産するため、
25位がイソプロピル基である最も活性なB−
41D、E及びGをより収率よく生産する方法が望
まれる。 本発明者等は、B−41生産菌を培養するに際
し、培地に特定の物質を添加することにより、B
−41D、E及びGが高収量で生産されることを見
い出した。 本発明は、ストレプトミセス属に属するB−41
生産菌を培養してB−41D、E及びGを製造する
に際し、バリン、イソ酪酸、イソ吉草酸、2−ケ
トイソ吉草酸、イソカプロン酸、これらの酸の塩
またはエステル、イソブタノール及びそのエステ
ルから選ばれた1種または2種以上を培地に添加
することを特徴とするB−41D、E及びGの製造
法である。 B−41生産菌、例えばストレプトミセス属B−
41−146株は通産省工業技術院微生物工業技術研
究所に微工研条寄第1072号として寄託されてお
り、その菌学的性状は特開昭50−29472号公報に
詳しく記載されている。本発明において使用する
菌には、上記B−41−146株を例えばX線照射、
紫外線照射、放射線照射、人工変異剤を用いて人
工変更したものであつて、B−41D、E及びGの
生産能を有するものは包含される。 本発明の方法において培地中に添加するバリン
はL体又はDLの光学異性体が用いられる。バリ
ン、イソ酪酸、イソ吉草酸、2−ケトイソ吉草
酸、イソカプロン酸のうちではL−またはDLバ
リン、イソ酪酸、2−ケトイソ吉草酸は好適に用
いられる。これらの酸の塩としてはナトリウム
塩、カリウム塩などがあげられ、エステルとして
はメチル、エチル、n−ブチルのような低級アル
キルエステルまたはベンジルエステルがあげられ
る。イソブタノール及びそのエステルも用いるこ
とができ、エステルとしては酢酸、プロピオン酸
のような低級飽和脂肪酸とのエステルがあげられ
る。上記添加物の 13C−ラベル化合物を用いた実
験では生成物の25位にイソプロピル基が特異的に
取り込まれていることが確認された。 培地に対するこれら添加物の添加量は一般的に
は0.001〜1W/V%、好ましくは0.005〜0.01W/
V%が添加される。添加時期は培地の調製時また
は培養中の適宜の段階で添加してもよい。 B−41生産菌の培養に用いられる培地は該微生
物が利用しうる栄養源を含むものならよく、上記
添加物を添加するほか、炭素源としてはグルコー
ス、しよ糖、殿粉、グリセリン、水あめ、糖蜜、
大豆油などが使用され、窒素源としてはスキムミ
ルク、大豆粉、小麦胚芽、肉エキス、ペプトン、
酵母菌体、コーンスチープ・リカー、硫酸アンモ
ニウム、硝酸アンモニウム等が使用される。この
ほか必要に応じて炭酸カルシウム、食塩、塩化カ
リ、リン酸塩類を添加することができる。 培養法としては、一般の抗生物質を生産する方
法と同じく液体培養法、とくに深部培養法が最も
適している。培養は好気的条件下で行なわれ、培
養に適当な温度は22〜30℃であるが多くの場合28
℃付近で培養する。培地の液性は概ねPH5.5〜8.0
の間でよく、望ましくはPH約6.5〜7.5の中性近傍
でよりよい結果をうることができる。培養はB−
41D、EおよびGの蓄積濃度が最大となる迄行な
うが、これに要する時間は、培養の方法、温度、
培地の組成など条件によつて差はあるものの、通
常約5〜15日程度である。 B−41各成分の検定にあたつては次の方法が用
いられる。すなわち、培養物3mlを小試験管にと
り、アセトン7mlを添加振とうして抽出し遠心分
離する。ここで得られた上澄の10〜20μをTLC
用板(メルク社製、Kieselgel 60 F254)上の所
定の位置に吸着せしめ、これをジオキサン:四塩
化炭素(18:82)で4時間展開後、二波長クロマ
トスキヤナを用いて245nmの波長(ブランクは
380nm)で測定し、その吸収量を標準物質のそ
れと比較し、算出する。 B−41D、EおよびGを培養物から採取するに
あたつては、活性炭、アルミナ、シリカゲルなど
の吸着剤、ダイヤイオンHP−10、HP−20(三菱
化成社製)などの合成吸着剤、アビセル(旭化成
社製)、紙などの固定剤、イオン交換樹脂、イ
オン交換ゲル過剤などが使用されうるが、以下
に示す採取方法が最も効果的である。 培養物を、けいそう土などの過助剤を用いて
別し、ここで得られたケーキをメタノール抽出
することにより、目的物はメタノール水に溶解し
てくる。これに水を加えた後、n−ヘキサンで抽
出し、これを減圧下で濃縮することにより、目的
物を含有するオイル状物質が得られる。これをシ
リカゲル(ワコーゲルC−200)のカラムに吸着
せしめ、n−ヘキサン:アセトン(95:5)で溶
出し、B−41Dを含有するフラクシヨン、B−
41Eを含有するフラクシヨンおよびB−41Gを含
有するフラクシヨンを集める。各フラクシヨンは
減圧下で濃縮し、ここで得られた残渣を少量のn
−ヘキサン:酢酸エチル(20:1)に溶解し、室
温に放置するとB−41D、B−41E、B−41Gが
それぞれ結晶状に得られる。 本発明の方法によれば特にB−41D、Eおよび
G成分の生成比率が非常に高く、また生成量も増
大するので、分離精製が容易になり工業生産上き
わめて有利な方法である。 以下実施例を挙げて、本発明を具体的に説明す
る。 実施例 1 種培地(シユクロース1%、ポリペプトン0.35
%、K2HPO40.05%)100mlを500mlエルレンマイ
ヤーフラスコに分注し、滅菌後、B−41−146株
を1白金耳接種し、48時間28℃で培養し、種培養
とした。 この1mlを主培地(グルコース4%、大豆粉1
%、スキムミルク1%、NaCl0.3%、コーンスチ
ープ・リカー0.2%及びCaCO30.05%)20ml含む
100mlエルレンマイヤーフラスコに接種し、28℃
で3日振とう培養したのち、DL−バリン−2−
13Cを0.01W/V%になるように添加し、さらに
2日間培養した。培養終了時、培養物中に生成し
たB−41群抗生物質のうちB−41Dの占める割合
は約65%、Eの割合は18%及びGの割合は5%で
あつた。なお添加物なしに培養したときD、Eお
よびGの占める割合は、それぞれ37%、9%およ
び2%であつた。 DL−バリン−2− 13Cを添加して培養した培
養物を過し、菌体をメタノール抽出した。これ
に水を加えて50%メタノール溶液にし、n−ヘキ
サンで抽出した。得られたn−ヘキサン層は芒硝
で脱水後、減圧下で濃縮し、オイル状物質を得
た。このオイル状物質をシリカゲルカラムさらに
ローバーカラム(メルク社製)で精製し、B−41
物質の各成分を単離した。得られた各成分中の
13Cの取り込みを、400メガヘルツの 13C−NMR
及びマス・スペクトルで測定したところ、DL−
バリン−2− 13Cの 13CがB−41D、EおよびG
のC−25位に特異的に取り込まれている事がわか
つた。 実施例 2 実施例1の種培養物をグルコース6%、アスパ
ラギン0.3%、ロイシン0.5%、リン酸第2カリウ
ム0.05%、硫酸マグネシウム0.05%、食塩0.05%、
塩化カルシウム0.02%、硫酸亜鉛0.005%、硫酸
マンガン0.001%、硫酸第1鉄0.002%及び微量の
ビタミン類からなる培地20mlに1mlづつ接種し、
L−バリン、イソ酪酸、2−ケトイソ吉草酸、イ
ソカプロン酸及びイソブタノールを第1表に示す
条件で添加して、28℃で8日間振とう培養した結
果、第1表に示す結果が得られた。
物質B−41D、E及びGを工業的に有利に製造す
る方法に関する。 B−41D、E及びGは、ストレプトマイセス属
に属するB−41生産菌、例えばB−41−146株の
培養によつて得られる抗生物質であつて、次の構
造式を有し、 動物に寄生する蠕虫とくに線虫及び動植物に寄
生するダニの駆除等に有効であることは、特開昭
56−32481号公報、特願昭55−153141号(特開昭
57−77686号)明細書及び特願昭56−7091号(特
開昭57−120589号)明細書に知られている。 ところで、通常の方法でB−41生産菌を培養し
た場合、上記構造式に対応して25位がメチル基で
あるB−41A1、A3、B2及び25位がエチル基であ
るB−41A4、B3、B2などを同時に生産するため、
25位がイソプロピル基である最も活性なB−
41D、E及びGをより収率よく生産する方法が望
まれる。 本発明者等は、B−41生産菌を培養するに際
し、培地に特定の物質を添加することにより、B
−41D、E及びGが高収量で生産されることを見
い出した。 本発明は、ストレプトミセス属に属するB−41
生産菌を培養してB−41D、E及びGを製造する
に際し、バリン、イソ酪酸、イソ吉草酸、2−ケ
トイソ吉草酸、イソカプロン酸、これらの酸の塩
またはエステル、イソブタノール及びそのエステ
ルから選ばれた1種または2種以上を培地に添加
することを特徴とするB−41D、E及びGの製造
法である。 B−41生産菌、例えばストレプトミセス属B−
41−146株は通産省工業技術院微生物工業技術研
究所に微工研条寄第1072号として寄託されてお
り、その菌学的性状は特開昭50−29472号公報に
詳しく記載されている。本発明において使用する
菌には、上記B−41−146株を例えばX線照射、
紫外線照射、放射線照射、人工変異剤を用いて人
工変更したものであつて、B−41D、E及びGの
生産能を有するものは包含される。 本発明の方法において培地中に添加するバリン
はL体又はDLの光学異性体が用いられる。バリ
ン、イソ酪酸、イソ吉草酸、2−ケトイソ吉草
酸、イソカプロン酸のうちではL−またはDLバ
リン、イソ酪酸、2−ケトイソ吉草酸は好適に用
いられる。これらの酸の塩としてはナトリウム
塩、カリウム塩などがあげられ、エステルとして
はメチル、エチル、n−ブチルのような低級アル
キルエステルまたはベンジルエステルがあげられ
る。イソブタノール及びそのエステルも用いるこ
とができ、エステルとしては酢酸、プロピオン酸
のような低級飽和脂肪酸とのエステルがあげられ
る。上記添加物の 13C−ラベル化合物を用いた実
験では生成物の25位にイソプロピル基が特異的に
取り込まれていることが確認された。 培地に対するこれら添加物の添加量は一般的に
は0.001〜1W/V%、好ましくは0.005〜0.01W/
V%が添加される。添加時期は培地の調製時また
は培養中の適宜の段階で添加してもよい。 B−41生産菌の培養に用いられる培地は該微生
物が利用しうる栄養源を含むものならよく、上記
添加物を添加するほか、炭素源としてはグルコー
ス、しよ糖、殿粉、グリセリン、水あめ、糖蜜、
大豆油などが使用され、窒素源としてはスキムミ
ルク、大豆粉、小麦胚芽、肉エキス、ペプトン、
酵母菌体、コーンスチープ・リカー、硫酸アンモ
ニウム、硝酸アンモニウム等が使用される。この
ほか必要に応じて炭酸カルシウム、食塩、塩化カ
リ、リン酸塩類を添加することができる。 培養法としては、一般の抗生物質を生産する方
法と同じく液体培養法、とくに深部培養法が最も
適している。培養は好気的条件下で行なわれ、培
養に適当な温度は22〜30℃であるが多くの場合28
℃付近で培養する。培地の液性は概ねPH5.5〜8.0
の間でよく、望ましくはPH約6.5〜7.5の中性近傍
でよりよい結果をうることができる。培養はB−
41D、EおよびGの蓄積濃度が最大となる迄行な
うが、これに要する時間は、培養の方法、温度、
培地の組成など条件によつて差はあるものの、通
常約5〜15日程度である。 B−41各成分の検定にあたつては次の方法が用
いられる。すなわち、培養物3mlを小試験管にと
り、アセトン7mlを添加振とうして抽出し遠心分
離する。ここで得られた上澄の10〜20μをTLC
用板(メルク社製、Kieselgel 60 F254)上の所
定の位置に吸着せしめ、これをジオキサン:四塩
化炭素(18:82)で4時間展開後、二波長クロマ
トスキヤナを用いて245nmの波長(ブランクは
380nm)で測定し、その吸収量を標準物質のそ
れと比較し、算出する。 B−41D、EおよびGを培養物から採取するに
あたつては、活性炭、アルミナ、シリカゲルなど
の吸着剤、ダイヤイオンHP−10、HP−20(三菱
化成社製)などの合成吸着剤、アビセル(旭化成
社製)、紙などの固定剤、イオン交換樹脂、イ
オン交換ゲル過剤などが使用されうるが、以下
に示す採取方法が最も効果的である。 培養物を、けいそう土などの過助剤を用いて
別し、ここで得られたケーキをメタノール抽出
することにより、目的物はメタノール水に溶解し
てくる。これに水を加えた後、n−ヘキサンで抽
出し、これを減圧下で濃縮することにより、目的
物を含有するオイル状物質が得られる。これをシ
リカゲル(ワコーゲルC−200)のカラムに吸着
せしめ、n−ヘキサン:アセトン(95:5)で溶
出し、B−41Dを含有するフラクシヨン、B−
41Eを含有するフラクシヨンおよびB−41Gを含
有するフラクシヨンを集める。各フラクシヨンは
減圧下で濃縮し、ここで得られた残渣を少量のn
−ヘキサン:酢酸エチル(20:1)に溶解し、室
温に放置するとB−41D、B−41E、B−41Gが
それぞれ結晶状に得られる。 本発明の方法によれば特にB−41D、Eおよび
G成分の生成比率が非常に高く、また生成量も増
大するので、分離精製が容易になり工業生産上き
わめて有利な方法である。 以下実施例を挙げて、本発明を具体的に説明す
る。 実施例 1 種培地(シユクロース1%、ポリペプトン0.35
%、K2HPO40.05%)100mlを500mlエルレンマイ
ヤーフラスコに分注し、滅菌後、B−41−146株
を1白金耳接種し、48時間28℃で培養し、種培養
とした。 この1mlを主培地(グルコース4%、大豆粉1
%、スキムミルク1%、NaCl0.3%、コーンスチ
ープ・リカー0.2%及びCaCO30.05%)20ml含む
100mlエルレンマイヤーフラスコに接種し、28℃
で3日振とう培養したのち、DL−バリン−2−
13Cを0.01W/V%になるように添加し、さらに
2日間培養した。培養終了時、培養物中に生成し
たB−41群抗生物質のうちB−41Dの占める割合
は約65%、Eの割合は18%及びGの割合は5%で
あつた。なお添加物なしに培養したときD、Eお
よびGの占める割合は、それぞれ37%、9%およ
び2%であつた。 DL−バリン−2− 13Cを添加して培養した培
養物を過し、菌体をメタノール抽出した。これ
に水を加えて50%メタノール溶液にし、n−ヘキ
サンで抽出した。得られたn−ヘキサン層は芒硝
で脱水後、減圧下で濃縮し、オイル状物質を得
た。このオイル状物質をシリカゲルカラムさらに
ローバーカラム(メルク社製)で精製し、B−41
物質の各成分を単離した。得られた各成分中の
13Cの取り込みを、400メガヘルツの 13C−NMR
及びマス・スペクトルで測定したところ、DL−
バリン−2− 13Cの 13CがB−41D、EおよびG
のC−25位に特異的に取り込まれている事がわか
つた。 実施例 2 実施例1の種培養物をグルコース6%、アスパ
ラギン0.3%、ロイシン0.5%、リン酸第2カリウ
ム0.05%、硫酸マグネシウム0.05%、食塩0.05%、
塩化カルシウム0.02%、硫酸亜鉛0.005%、硫酸
マンガン0.001%、硫酸第1鉄0.002%及び微量の
ビタミン類からなる培地20mlに1mlづつ接種し、
L−バリン、イソ酪酸、2−ケトイソ吉草酸、イ
ソカプロン酸及びイソブタノールを第1表に示す
条件で添加して、28℃で8日間振とう培養した結
果、第1表に示す結果が得られた。
【表】
実施例 3
実施例1に示した種培地を調製し、その600ml
を2000mlエルレンマイヤーフラスコに分注し、滅
菌した。これにB−41−146株を1白金耳接種し、
48時間28℃で培養を行ない、この2000mlエルレン
マイヤーフラスコ2本を30ジヤー・フアメンタ
に移植した。ジヤー・フアメンタには、グルコー
ス4%、大豆粉1%、コーンスターチ0.5%、ス
キムミルク1%、コーンスチープ・リカー0.2%、
食塩0.3%及びCaCO30.05%を含有する培地20
を仕込み、PHを7.2〜7.5に調節し、十分に滅菌し
ておいた。培養期間中は、28℃、内圧0.5Kg/cm2
に保持した。3日培養後DL−バリンを0.01%添
加しさらに5日間培養した。B−41群抗生物質総
生産量のうちDは68%(重量比)の割合を占め
た。同条件でDL−バリンを添加せず培養した場
合には、B−41Dの割合は35%にとどまつた。
DL−バリンを添加して得られた培養物20のPH
を硫酸で3とし、セライト1Kgを加えて加圧過
すると約3Kgのケーキが得られた。これを15の
メタノールで抽出し、別し、得られたメタノー
ル溶液15に水10を加え、20のn−ヘキサン
で抽出した。得られたn−ヘキサン層は芒硝で脱
水後、40〜45℃水浴中で減圧下濃縮すると23gの
オイルが得られた。これを約30mlのn−ヘキサン
にとかし、あらかじめ2Kgのシリカゲルをn−ヘ
キサンでつめてあるカラムに吸着せしめ、n−ヘ
キサン:アセトン(95:5)で展開した。その結
果目的物質B−41Dを含有するフラクシヨンを
2.5得た。これらを前述と同様の条件で濃縮す
るとB−41Dの粗結晶が得られた。これをn−ヘ
キサン:酢酸エチル(20:1)に溶解後、室温に
放置し、析出する結晶を取し、B−41Dの精結
晶210mgを得た。
を2000mlエルレンマイヤーフラスコに分注し、滅
菌した。これにB−41−146株を1白金耳接種し、
48時間28℃で培養を行ない、この2000mlエルレン
マイヤーフラスコ2本を30ジヤー・フアメンタ
に移植した。ジヤー・フアメンタには、グルコー
ス4%、大豆粉1%、コーンスターチ0.5%、ス
キムミルク1%、コーンスチープ・リカー0.2%、
食塩0.3%及びCaCO30.05%を含有する培地20
を仕込み、PHを7.2〜7.5に調節し、十分に滅菌し
ておいた。培養期間中は、28℃、内圧0.5Kg/cm2
に保持した。3日培養後DL−バリンを0.01%添
加しさらに5日間培養した。B−41群抗生物質総
生産量のうちDは68%(重量比)の割合を占め
た。同条件でDL−バリンを添加せず培養した場
合には、B−41Dの割合は35%にとどまつた。
DL−バリンを添加して得られた培養物20のPH
を硫酸で3とし、セライト1Kgを加えて加圧過
すると約3Kgのケーキが得られた。これを15の
メタノールで抽出し、別し、得られたメタノー
ル溶液15に水10を加え、20のn−ヘキサン
で抽出した。得られたn−ヘキサン層は芒硝で脱
水後、40〜45℃水浴中で減圧下濃縮すると23gの
オイルが得られた。これを約30mlのn−ヘキサン
にとかし、あらかじめ2Kgのシリカゲルをn−ヘ
キサンでつめてあるカラムに吸着せしめ、n−ヘ
キサン:アセトン(95:5)で展開した。その結
果目的物質B−41Dを含有するフラクシヨンを
2.5得た。これらを前述と同様の条件で濃縮す
るとB−41Dの粗結晶が得られた。これをn−ヘ
キサン:酢酸エチル(20:1)に溶解後、室温に
放置し、析出する結晶を取し、B−41Dの精結
晶210mgを得た。
Claims (1)
- 【特許請求の範囲】 1 ストレプトマイセス属に属する抗生物質B−
41生産菌を培養してB−41D、E及びGを製造す
るに際し、バリン、イソ酪酸、イソ吉草酸、2−
ケトイソ吉草酸、イソカプロン酸、これら酸の塩
またはエステル、イソブタノール及びそのエステ
ルから選ばれた1種または2種以上を培地に添加
することを特徴とするB−41D、E及びGの製造
法。 2 B−41生産菌がストレプミセス属B−41−
146株である特許請求の範囲第1項記載の製造法。 3 B−41Dを製造するための特許請求の範囲第
2項記載の製造法。 4 ストレプトミセス属B−41−146株を、L−
またはDL−バリン、イソ酪酸、2−ケトイソ吉
草酸およびこれらの酸の塩またはエステルから選
ばれた1種または2種以上を添加した培地に培養
してB−41Dを製造する特許請求の範囲第1項記
載の製造法。
Priority Applications (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
JP17806181A JPS5878594A (ja) | 1981-11-06 | 1981-11-06 | 抗生物質b−41d、e及びgの製造法 |
Applications Claiming Priority (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
JP17806181A JPS5878594A (ja) | 1981-11-06 | 1981-11-06 | 抗生物質b−41d、e及びgの製造法 |
Publications (2)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
JPS5878594A JPS5878594A (ja) | 1983-05-12 |
JPS6366200B2 true JPS6366200B2 (ja) | 1988-12-20 |
Family
ID=16041918
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
JP17806181A Granted JPS5878594A (ja) | 1981-11-06 | 1981-11-06 | 抗生物質b−41d、e及びgの製造法 |
Country Status (1)
Country | Link |
---|---|
JP (1) | JPS5878594A (ja) |
Cited By (4)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
KR20230047163A (ko) | 2020-08-06 | 2023-04-06 | 닛토덴코 가부시키가이샤 | 보강용 필름, 광학 부재 및 전자 부재 |
KR20230047164A (ko) | 2020-08-06 | 2023-04-06 | 닛토덴코 가부시키가이샤 | 보강용 필름, 광학 부재 및 전자 부재 |
KR20230047165A (ko) | 2020-08-06 | 2023-04-06 | 닛토덴코 가부시키가이샤 | 보강용 필름, 광학 부재 및 전자 부재 |
KR20230047162A (ko) | 2020-08-06 | 2023-04-06 | 닛토덴코 가부시키가이샤 | 보강용 필름, 광학 부재 및 전자 부재 |
Families Citing this family (6)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
ES8800986A1 (es) * | 1985-07-27 | 1987-12-01 | Pfizer | Un procedimiento para la produccion de un nuevo derivado de avermectina |
US5840704A (en) * | 1986-07-16 | 1998-11-24 | Pfizer Inc. | Antiparasitic agents and process for their preparation |
US5525506A (en) * | 1987-01-23 | 1996-06-11 | Pfizer Inc. | Process for production of avermectins and cultures therefor |
US5234831A (en) * | 1987-01-23 | 1993-08-10 | Pfizer Inc | Cultures for production of B avermectins |
US5238848A (en) * | 1987-01-23 | 1993-08-24 | Pfizer Inc | Cultures for production of avermectins |
US5240850A (en) * | 1987-10-23 | 1993-08-31 | Pfizer Inc. | Cultures for production of avermectin aglycones |
-
1981
- 1981-11-06 JP JP17806181A patent/JPS5878594A/ja active Granted
Cited By (4)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
KR20230047163A (ko) | 2020-08-06 | 2023-04-06 | 닛토덴코 가부시키가이샤 | 보강용 필름, 광학 부재 및 전자 부재 |
KR20230047164A (ko) | 2020-08-06 | 2023-04-06 | 닛토덴코 가부시키가이샤 | 보강용 필름, 광학 부재 및 전자 부재 |
KR20230047165A (ko) | 2020-08-06 | 2023-04-06 | 닛토덴코 가부시키가이샤 | 보강용 필름, 광학 부재 및 전자 부재 |
KR20230047162A (ko) | 2020-08-06 | 2023-04-06 | 닛토덴코 가부시키가이샤 | 보강용 필름, 광학 부재 및 전자 부재 |
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
JPS5878594A (ja) | 1983-05-12 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
US4576961A (en) | Antibiotic heterocyclic oxygen compounds and use | |
CA1335367C (en) | Ks-506 compounds and process for the production thereof | |
JP2728406B2 (ja) | 抗性物質a/16686複合体の製造方法 | |
JPS6366200B2 (ja) | ||
JPS6316120B2 (ja) | ||
CH624956A5 (de) | Verfahren zur entfernung von verunreinigungen aus clavulansaeure. | |
US2885433A (en) | O-carbamyl-d-serine | |
EP0395106B1 (en) | Demethylallosamidin and a process for production thereof | |
DE2652677C2 (de) | Antibiotica 890A↓1↓ und 890A↓3↓, Verfahren zu ihrer Herstellung und diese Antibiotika enthaltende antibakterielle Mittel | |
EP0652205A2 (de) | Moenomycin-Abbauprodukte mit hydroxylierter oder oxidierter Lipidseitenkette und Moenomycin-Analoga, ein Verfahren zur Herstellung und die Verwendung dieser Verbindungen | |
US4229534A (en) | Acetylthienamycin production | |
DE3003359C2 (ja) | ||
DK144658B (da) | Fremgangsmaade til fremstilling af antibiotikum c-15003 p-4 | |
US4165379A (en) | N-acetyl thienamycin | |
JPS6024717B2 (ja) | 抗生物質マイコプラネシン | |
US4370266A (en) | Mycoplanecin derivatives and their preparation | |
DE3782199T2 (de) | Biologisch aktive peptide tan-866. | |
CA1108078A (en) | Fermentation process | |
EP0055929B1 (en) | Antibiotic c-19393 e5 and production thereof | |
JP2897834B2 (ja) | 醗酵法によるエバーメクチンA1a、A2a、B1aおよびB2aの製造法およびストレプトミセス・アベルミチルスに属する新菌株 | |
CH643298A5 (fr) | Procede de fabrication de nouveaux antibiotiques. | |
JP3100785B2 (ja) | 新規エバーメクチン誘導体、その製造方法ならびにその生産微生物 | |
JP2971204B2 (ja) | 新規物質wk−2955およびその製造法 | |
EP0009363A1 (en) | Method of separating cephalosporins | |
JP2858939B2 (ja) | 抗生物質ab3217a、ab3217b及びab3217cとそれらの製造法 |