JPS6341885B2

JPS6341885B2 -

Info

Publication number: JPS6341885B2
Application number: JP54017869A
Authority: JP
Inventors: Kazuya Sasaki; Yukio Inoe
Original assignee: Kaken Pharmaceutical Co Ltd
Current assignee: Kaken Pharmaceutical Co Ltd
Priority date: 1979-02-20
Filing date: 1979-02-20
Publication date: 1988-08-19
Also published as: JPS55111419A

Description

【発明の詳細な説明】

本発明は新規な抗腫瘍剤に関する。本発明の抗腫瘍剤は、一般式（式中Ｒはアミノ基、メチルアミノ基又はジメチ
ルアミノ基を意味する）で表わされるゲルダナマ
イシン誘導体を有効成分として含有する。ゲルダナマイシンはストレプトミセス・ヒグロ
スコピクス・バル・ゲルダヌス・バル・ノバ株の
生産する抗原虫性抗生物質であることが知られて
おり（ジヤーナル・オブ・アンチビオテイクス第
23巻442頁1970年参照）、次式の化学構造を有する
（ジヤーナル・オブ・ザ・アメリカン・ケミカ
ル・ソサイエテイ第92巻7591頁1970年参照）。フオルトシユリツテ・デル・ヘーミツシエン・
オルガニツシエン・ナツールシユトツフエ第33巻
231〜307頁（1976年）には、ゲルダナマイシン
（）をアンモニア、メチルアミン又はジメチル
アミンで処理すると式の化合物が得られること
が記載されている。しかし式の化合物の物性及
び生成学的作用については、これまで全く報報告
されていない。本発明者らは先に17位のメトキシ基がモノアル
キルアミノ基で置換されたゲルダナマイシン誘導
体が、抗腫瘍剤として有用であることを見出した
（特開昭55−111469号公報参照）。この化合物のア
ルキルアミノ基に結合するアルキル基（R¹又は
R²）は２個以上の炭素原子を有するものに限定
されている。本発明者らはさらに研究を進めた結
果、このアルキル基の代わりにメチル基を有する
式の化合物が優れた抗腫瘍作用を有することを
見出した。本発明はこの新知見に基づくものであ
る。式の化合物は、前記刊行物に記載の方法によ
り製造できるが、ゲルダナマイシンに直接にアン
モニア、メチルアミン又はジメチルアミンを水溶
液の形で作用させることによつても製造できる。
後者の反応の場合には、例えば次のように操作す
ることが好ましい。有機溶媒、例えばクロロホル
ム−メタノール混合溶媒にゲルダナマイシン
（）を溶解し、これにアンモニア水、メチルア
ミン水溶液又はジメチルアミン水溶液を加え、室
温で１〜25時間撹拌する。反応終了後、目的物質
は常法により単離、精製することができる。例え
ば反応混合物を希鉱酸で洗浄し、次いで減圧下に
浴温35〜45℃で蒸発乾固し、残査をクロマトグラ
フイーにより分離精製し、再結晶すると、式の
化合物がそれぞれ結晶状で得られる。式の化合物は、癌細胞のモデルとして広く認
められている実験腫瘍細胞Ｗ−2K−11細胞に対
し著しい生育阻止作用を有する。１種又は２種以上の式の化合物を単独で本発
明の抗腫瘍剤として用いてもよいが、通常は普通
の賦形剤又は補助剤を配合して、経口投与ならび
に非径口投与に適する製剤の形で用いることが好
ましい。賦形剤又は補助剤としては、例えば下記
の有機もしくは無機の固体ないし液状物質が用い
られる。好適な賦形剤は、例えば水、ゼラチン、
乳糖、デンプン、繊維素グリコール酸カルシウ
ム、微結晶セルロース、ステアリルアルコール、
ステアリン酸マグネシウム、タルク、植物油、ベ
ンジルアルコール、プロピレングリコール、ゴ
ム、ポリアルキレングリコール、白色石油、ゼリ
ー、コレステロールなどである。補助剤として
は、例えば保存剤、湿潤剤、乳化剤、溶解促進
剤、浸透圧調整用塩、緩衝剤、結合剤、懸濁分散
剤などが用いられる。製剤としては、例えば粉剤、顆粒剤、カプセル
剤、丸剤、錠剤、糖衣錠、注射剤、坐剤、軟膏な
どがあげられ、これらの製剤は常法により製造す
ることができる。本発明の抗腫瘍剤は人間の治療のためばかりで
なく、前記の形態で獣医用医薬として用いること
もできる。本発明の抗腫瘍剤を治療に用いる際には、有効
成分の投与量は成人につき１日当たり、非経口投
与の場合は一般に0.5〜80mg／Kg好ましくは１〜
40mg／Kg、経口的投与の場合は一般に１〜100
mg／Kg好ましくは２〜50mg／Kgである。式の化合物の製造：ゲルダナマイシン560mgをクロロホルム−メタ
ノール（混合比３：２）100mlに溶解し、50％ジ
メチルアミン水溶液30mlを加えたのち室温で２時
間撹拌する。次いで反応混合物を冷水100ml中に
投入し、6N−塩酸でPH３〜４となし、クロロホ
ルムで２回抽出する。抽出液を水洗したのち無水
硫酸ナトリウム上で乾燥し、減圧下に蒸発乾固す
ると油状物が得られる。これをシリカゲルクロマ
トグラフイーにより２％メタノール−クロロホル
ムで展開し、第１〜10番の分画を集め、溶媒を留
去したのちエーテルから再結晶すると、17−デメ
トキシ−17−ジメチルアミノ−ゲルダナマイシン
186mgが青色結晶として得られる。融点：245〜247℃ 元素分析値：C₃₀H₄₅N₃O₉としてＣＨＮ計算値(%) 62.81 7.56 7.32 実測値(%) 62.75 7.44 7.16 NMRスペクトル（100MHz、CDCl₃中）：（ppm）2.93（ジメチルアミノ）、3.25（メトキ
シ）、3.31（メトキシ）紫外部吸収スペクトル： λCH₃OH max（ｎｍ）242、333、542 質量分析法による分子量（ｍ／ｅ）：573 ジメチルアミン水溶液の代わりにアンモニア又
はメチルアミンを用い、前記と同様にして反応さ
せると、下記の化合物が得られる。 17−デメトキシ−17−アミノ−ゲルダナマイシン融点：278〜280℃（分解）紫外部吸収スペクトル： λCH₃OH max（ｎｍ）238、260、330、510 質量分析法による分子量（ｍ／ｅ）：545 17−デメトキシ−17−メチルアミノ−ゲルダナマ
イシン融点：149〜151℃ 質量分析法による分子量（ｍ／ｅ）：559 実施例 17−デメトキシ−17−ジメチルアミノ−ゲルダ
ナマイシン2500ｇ、乳糖1375ｇ、微結晶セルロー
ス775ｇ及び繊維素グリコール酸カルシウム375ｇ
を16メツシユの篩を用いて篩過し、均一に混合し
たのち練合機に入れ、これに３％ヒドロキシプロ
ピルセルロース溶液（イソプロピルアルコール：
水＝３：７の混液中）３を添加して練混する。
混合物を押出造粒機を用いて造粒し、50℃で６時
間送風乾燥する。次いで16〜60メツシユの範囲に
整粒したのち、この粒状物に対し0.3％のステア
リン酸マグネシウムを混合して打錠し、錠剤とす
る。試験例マウスの腎由来の線維芽細胞のC3H−2Kクロ
ーンをSV40発癌ウイルスによつて癌化させた癌
細胞Ｗ−2K−11を供試細胞とし、これを下記の
方法により培養した。 (1) 増殖培養液の調製：イーグルMEM培地（日水製薬製）9.4ｇを蒸
留水900mlに溶解し、120℃で15分間加圧滅菌
し、冷却したのち仔牛血清100ml及び滅菌した
10％炭酸水素ナトリウム溶液３〜５mlを加えて
PH7.1〜7.2に調整する。培地使用直前にミリポ
アフイルターで過したＬ−グルタミン（2.92
ｇ／100ml）溶液10mlを加える。 (2) 移植細胞液の調製：シープ・フリーザー（−80℃）で保存された
供試細胞を室温で溶解させ、670×ｇで５分間
遠心分離し、沈澱した細胞を(1)の増殖培養液50
mlに懸濁したのちルー・フラスコに移し、37℃
で培養すると細胞が増殖を始め、３〜４日で充
分に増殖する。培養液を傾瀉し、次いで0.2％
トリプシン溶液10mlを加え、室温で２〜３分間
放置したのちトリプシン溶液を傾瀉する。更に
(1)の増殖培養液50mlを加えて細胞浮遊液とす
る。 (3) 細胞培養と被験化合物の投与： (2)で得られた細胞浮遊液を1.8mlずつシヤー
レに分注し、炭酸ガスインキユベーター（５％
CO₂、95％空気）中で37℃において24時間培養
する。培養24時間後に被験化合物のエタノール
溶液0.2mlを投与して培養を継続する。培養48時間後に、細胞増殖について顕微鏡下
で細胞の生存数を計測し、供試細胞増殖の抑制
率を次式により求めた。抑制率（％）＝（無投与シヤーレ中の細胞数）−
（投与シヤーレ中の細胞数）／（無投与シヤーレ中の細
胞数）×100 得られた結果を次表に示す。

【表】急性毒性：マウスに対する50％致死量（LD₅₀）は、腹腔
内投与で17−デメトキシ−17−ジメチルアミノ−
ゲルダナマイシンは約120mg／Kgであつた。ゲル
ダナマイシンのLD₅₀は15mg／Kgであり、これと
比較して毒性が著しく低下している。

Claims

【特許請求の範囲】１一般式（式中Ｒはアミノ基、メチルアミノ基又はジメチ
ルアミノ基を意味する）で表わされる化合物を有
効成分とする抗腫瘍剤。