JPS63127162A - 抗原抗体複合物及びその使用方法 - Google Patents
抗原抗体複合物及びその使用方法Info
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- JPS63127162A JPS63127162A JP62145950A JP14595087A JPS63127162A JP S63127162 A JPS63127162 A JP S63127162A JP 62145950 A JP62145950 A JP 62145950A JP 14595087 A JP14595087 A JP 14595087A JP S63127162 A JPS63127162 A JP S63127162A
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Abstract
(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。
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Description
【発明の詳細な説明】
〔産業上の利用分野〕
この発明は、抗原抗体複合物、及びこの抗原抗体複合物
の凝集反応試薬としての使用方法に関する。
の凝集反応試薬としての使用方法に関する。
従来において、Ｒｈ式血液型の検査に使用する試薬の１
つに、単クローン性ヒト抗り抗体がある。
つに、単クローン性ヒト抗り抗体がある。
この単クローン性ヒト抗り抗体の製造法及びその使用方
法については、第１３回日本免疫学会（１９８３年）の
研究論文集第４１６〜４１７頁に記載されているほか、
昭和５８年特許出願公表第５００３６６号公報。
法については、第１３回日本免疫学会（１９８３年）の
研究論文集第４１６〜４１７頁に記載されているほか、
昭和５８年特許出願公表第５００３６６号公報。
昭和５９年特許出願公開第１３８９５９号公報、昭和６
０年特許出願公開第７０３６１号公報などに記載されて
いる。又、他の試薬としては、ヒト血清から得られる多
クローン性ヒト抗り抗体があり、これは現在において公
的に認可された試薬として常用されているものである。
０年特許出願公開第７０３６１号公報などに記載されて
いる。又、他の試薬としては、ヒト血清から得られる多
クローン性ヒト抗り抗体があり、これは現在において公
的に認可された試薬として常用されているものである。
又、ウィルス抗原を検出するための方法として逆受身赤
血球凝集反応があり、単クローン性マウス抗ＨＢｓ抗体
をヒツジ赤血球に感作して製造した試薬が常用されてい
る。
血球凝集反応があり、単クローン性マウス抗ＨＢｓ抗体
をヒツジ赤血球に感作して製造した試薬が常用されてい
る。
（発明が解決しようとする問題点〕
前記した試薬のうち、単クローン性抗体は、対応する抗
原と反応するが、反応が弱いため種々の検査方法のうち
の一部にのみしか使用出来ない問題点がある。例えば、
前記したＲｈ式血液型の検査方法として、抗ヒトグロブ
リン法、ブロンリン法。
原と反応するが、反応が弱いため種々の検査方法のうち
の一部にのみしか使用出来ない問題点がある。例えば、
前記したＲｈ式血液型の検査方法として、抗ヒトグロブ
リン法、ブロンリン法。
アルブミン法及び生理食塩演法があるが、前記第１３回
日本免疫学会で発表された単クローン性ヒト抗り抗体は
、抗ヒトグロブリン法及びプロメリン法による凝集でＲ
ｈ（Ｄ）抗原の血液型の判定はできるが、他の検査方法
、すなわち、アルブミン法、生理食塩液性では凝集反応
を起さないことから、この単クローン性ヒト抗り抗体の
使用方法が限定されていた。また、前記多クローン性ヒ
ト抗り抗体はヒト血清をそのまま使用するか、又はこの
ヒト血清を適当な希釈液で希釈したヒト由来の検査試薬
であるために、大量の検体を試験するためには血清量が
多量に必要である。しかしながら、ヒト血清はＲｈ陰性
の人にＲｈ陽性の血液を何らかの方法で投与して得られ
るのが通常であるので、入手が困難であるという問題点
がある。又、ウィルス抗原を検出する試薬として、単ク
ローン性抗ｔｌＢｓ抗体感作ヒツジ赤血球を用いた場合
には、ウィルス抗原の検出感度が低いという問題点があ
る。
日本免疫学会で発表された単クローン性ヒト抗り抗体は
、抗ヒトグロブリン法及びプロメリン法による凝集でＲ
ｈ（Ｄ）抗原の血液型の判定はできるが、他の検査方法
、すなわち、アルブミン法、生理食塩液性では凝集反応
を起さないことから、この単クローン性ヒト抗り抗体の
使用方法が限定されていた。また、前記多クローン性ヒ
ト抗り抗体はヒト血清をそのまま使用するか、又はこの
ヒト血清を適当な希釈液で希釈したヒト由来の検査試薬
であるために、大量の検体を試験するためには血清量が
多量に必要である。しかしながら、ヒト血清はＲｈ陰性
の人にＲｈ陽性の血液を何らかの方法で投与して得られ
るのが通常であるので、入手が困難であるという問題点
がある。又、ウィルス抗原を検出する試薬として、単ク
ローン性抗ｔｌＢｓ抗体感作ヒツジ赤血球を用いた場合
には、ウィルス抗原の検出感度が低いという問題点があ
る。
そこでこの出願の発明者らは、前記した試薬としての単
クローン性抗体、多クローン性抗体あるいは単クローン
性ヒト抗１１Ｂｓ抗体感作ヒツジ赤血球等の有する問題
点の解決を図るため、ＩｇＧタイプの化クローン性抗体
２分子に、この抗体に対する単クローン性抗ＩｇＧ抗体
又は多クローン性抗ＩｇＧ抗体２分子又は１分子を結合
した抗原抗体複合物が、凝集反応試薬としであるいはそ
の他に有効に利用できることを見い出した。
クローン性抗体、多クローン性抗体あるいは単クローン
性ヒト抗１１Ｂｓ抗体感作ヒツジ赤血球等の有する問題
点の解決を図るため、ＩｇＧタイプの化クローン性抗体
２分子に、この抗体に対する単クローン性抗ＩｇＧ抗体
又は多クローン性抗ＩｇＧ抗体２分子又は１分子を結合
した抗原抗体複合物が、凝集反応試薬としであるいはそ
の他に有効に利用できることを見い出した。
前記したＩｇＧタイプの単クローン性抗体は、赤血球表
面抗原（血液型物質）、ウィルス抗原の判定の際に使用
されるもので、具体的には、血液型に対する抗体、ウィ
ルスに対する抗体である。このようなＩｇＧタイプの単
クローン性抗体に対し、この抗体に対する単クローン性
抗ＩｇＧ抗体又は多クローン性抗ＩｇＧ抗体を反応させ
たときの反応系は、第１図（ａ）に示されるように、Ｉ
ｇＧタイプの単クローン性抗体（例えば、単クローン性
ヒト抗り抗体）に単クローン性抗ＩｇＧ抗体（例えば、
単クローン性抗ヒトＩｇＧ抗体）又は多クローン性抗Ｉ
ｇＧ抗体（例えば、多クローン性抗ヒ）ＩｇＧ抗体）を
抗原抗体反応させることによって、ＩｇＧタイプの単ク
ローン性抗体の２分子が単クローン性抗ＩｇＧ抗体の２
分子又は１分子と結合し抗原抗体複合物を形成する。こ
の抗原抗体複合物を、検出目的とする抗原（例えば、Ｒ
ｈ（Ｄ）陽性血球）に添加して２次反応させると、第１
図（ｂ）に示すように、この抗原に抗原抗体複合物の活
性部位が結合して、凝集反応として人の目で瞬時に感知
できる状態となって、目的とする抗原を検出することが
できるのである。
面抗原（血液型物質）、ウィルス抗原の判定の際に使用
されるもので、具体的には、血液型に対する抗体、ウィ
ルスに対する抗体である。このようなＩｇＧタイプの単
クローン性抗体に対し、この抗体に対する単クローン性
抗ＩｇＧ抗体又は多クローン性抗ＩｇＧ抗体を反応させ
たときの反応系は、第１図（ａ）に示されるように、Ｉ
ｇＧタイプの単クローン性抗体（例えば、単クローン性
ヒト抗り抗体）に単クローン性抗ＩｇＧ抗体（例えば、
単クローン性抗ヒトＩｇＧ抗体）又は多クローン性抗Ｉ
ｇＧ抗体（例えば、多クローン性抗ヒ）ＩｇＧ抗体）を
抗原抗体反応させることによって、ＩｇＧタイプの単ク
ローン性抗体の２分子が単クローン性抗ＩｇＧ抗体の２
分子又は１分子と結合し抗原抗体複合物を形成する。こ
の抗原抗体複合物を、検出目的とする抗原（例えば、Ｒ
ｈ（Ｄ）陽性血球）に添加して２次反応させると、第１
図（ｂ）に示すように、この抗原に抗原抗体複合物の活
性部位が結合して、凝集反応として人の目で瞬時に感知
できる状態となって、目的とする抗原を検出することが
できるのである。
第３図（ａ）及び（ｂ）は、従来の単クローン性ヒト抗
り抗体を用いてＲｈ式血液型り抗原を検出する場合の抗
ヒトグロブリン試験の凝集反応系を示した模式図である
。この反応は、まず、第３図（ａ）に示すようにＲｈ（
Ｄ）陽性血球に単クローン性ヒト抗り抗体を加え３７℃
で数十分間の加温によって単クローン性ヒト抗り抗体の
活性部位がＲｈ（’Ｄ）抗原（Ｒｈ（Ｄ）陽性血球）に
結合し、抗り抗体感作血球を形成する。この状態では、
凝集として確認できないことから、第３図（ｂ）に示す
ように、次に抗ヒトグロブリン血清（多クローン性抗ヒ
トＩｇＧ抗体）を添加することによって多クローン性抗
ヒトＩｇＧ抗体の活性部位が単クローン性ヒト抗り抗体
に結合し、凝集反応として人の目で確認できるようにな
るのである。
り抗体を用いてＲｈ式血液型り抗原を検出する場合の抗
ヒトグロブリン試験の凝集反応系を示した模式図である
。この反応は、まず、第３図（ａ）に示すようにＲｈ（
Ｄ）陽性血球に単クローン性ヒト抗り抗体を加え３７℃
で数十分間の加温によって単クローン性ヒト抗り抗体の
活性部位がＲｈ（’Ｄ）抗原（Ｒｈ（Ｄ）陽性血球）に
結合し、抗り抗体感作血球を形成する。この状態では、
凝集として確認できないことから、第３図（ｂ）に示す
ように、次に抗ヒトグロブリン血清（多クローン性抗ヒ
トＩｇＧ抗体）を添加することによって多クローン性抗
ヒトＩｇＧ抗体の活性部位が単クローン性ヒト抗り抗体
に結合し、凝集反応として人の目で確認できるようにな
るのである。
これに対して、この発明の抗原抗体複合物を使用した時
は、前記したように一度の反応で凝集が生成されて瞬時
に血液型の判定が可能となった。
は、前記したように一度の反応で凝集が生成されて瞬時
に血液型の判定が可能となった。
第２図（ａ）、第２図（ｂ）及び第２図（ｃ）は、ウィ
ルス抗原の判定の際に用いられる逆受身赤血球凝集反応
にこの発明の抗原抗体複合物を使用した反応系を示す模
式図である。この反応は、まず、第２図（ａ）に示すよ
うに、ＴｇＧタイプの単クローン性抗体（例えば、単ク
ローン性マウス抗１１Ｂｓ抗体）に単クローン性抗Ｉｇ
Ｇ抗体（例えば、単クローン性抗マウスＩｇＧ抗体）又
は、多クローン性抗ＴｇＧ抗体（例えば、多クローン性
抗マウスＩｇＧ抗体）を抗原抗体反応させることによっ
て、ＩｇＧタイプの単クローン性抗体の２分子が単クロ
ーン性抗ＩｇＧ抗体、又は、多クローン性抗ＩｇＧ抗体
の２分子または１分子と結合し、抗原抗体複合物を形成
する。次に、第２図（ｂ）に示すように、長期保存する
ためにグルタルアルデヒド処理を行ったヒツジ赤血球に
前記した抗原抗体複合物を感作させると、ウィルス抗原
の検出試薬となる抗原抗体後合物感作ヒツジ赤血球が製
造できる。第２図（Ｃ）に示すように、この試薬を検出
目的とする抗原（例えば、Ｂ型肝炎ウィルス関連抗原で
あるＨＢｓ抗原）に添加すると、感作ヒツジ赤血球に吸
着している特異抗体（単クローン性マウス抗ＨＢＳ抗体
）と反応し、凝集反応が起こり、人の目で凝集が感知で
きる状態となって、目的とする抗原を検出することがで
きるのである。
ルス抗原の判定の際に用いられる逆受身赤血球凝集反応
にこの発明の抗原抗体複合物を使用した反応系を示す模
式図である。この反応は、まず、第２図（ａ）に示すよ
うに、ＴｇＧタイプの単クローン性抗体（例えば、単ク
ローン性マウス抗１１Ｂｓ抗体）に単クローン性抗Ｉｇ
Ｇ抗体（例えば、単クローン性抗マウスＩｇＧ抗体）又
は、多クローン性抗ＴｇＧ抗体（例えば、多クローン性
抗マウスＩｇＧ抗体）を抗原抗体反応させることによっ
て、ＩｇＧタイプの単クローン性抗体の２分子が単クロ
ーン性抗ＩｇＧ抗体、又は、多クローン性抗ＩｇＧ抗体
の２分子または１分子と結合し、抗原抗体複合物を形成
する。次に、第２図（ｂ）に示すように、長期保存する
ためにグルタルアルデヒド処理を行ったヒツジ赤血球に
前記した抗原抗体複合物を感作させると、ウィルス抗原
の検出試薬となる抗原抗体後合物感作ヒツジ赤血球が製
造できる。第２図（Ｃ）に示すように、この試薬を検出
目的とする抗原（例えば、Ｂ型肝炎ウィルス関連抗原で
あるＨＢｓ抗原）に添加すると、感作ヒツジ赤血球に吸
着している特異抗体（単クローン性マウス抗ＨＢＳ抗体
）と反応し、凝集反応が起こり、人の目で凝集が感知で
きる状態となって、目的とする抗原を検出することがで
きるのである。
第４図（ａ）及び第４図（ｂ）は、単クローン性マウス
抗ＨＢｓ抗体を用いてｌｌＢｓ抗原を検出する従来の逆
受身赤血球凝集反応系を示した模式図である。この反応
は、まず、第４図（ａ）に示すように、単クローン性マ
ウス抗ＨＢｓ抗体をグルタルアルデヒド処理済みのヒツ
ジ赤血球に感作して、単クローン性マウス抗ＨＢｓ抗体
感作ヒフジ赤血球を作り、これをＨａｓ抗原検出試薬と
していた。この試薬を用いると、第４図（ｂ）に示すよ
うに、ＨＢｓ抗原と凝集反応が起こり人の目で確認でき
るが、前記した第２図（ｃ）の凝集反応に比してウィル
ス抗原の検出感度が低い。
抗ＨＢｓ抗体を用いてｌｌＢｓ抗原を検出する従来の逆
受身赤血球凝集反応系を示した模式図である。この反応
は、まず、第４図（ａ）に示すように、単クローン性マ
ウス抗ＨＢｓ抗体をグルタルアルデヒド処理済みのヒツ
ジ赤血球に感作して、単クローン性マウス抗ＨＢｓ抗体
感作ヒフジ赤血球を作り、これをＨａｓ抗原検出試薬と
していた。この試薬を用いると、第４図（ｂ）に示すよ
うに、ＨＢｓ抗原と凝集反応が起こり人の目で確認でき
るが、前記した第２図（ｃ）の凝集反応に比してウィル
ス抗原の検出感度が低い。
以上に述べた種々の凝集反応は、抗体の結合によって血
球の間の距離が大きくなるため、血球間の反発力が弱め
られる結果、凝集が起こりやすくなると考えられている
。
球の間の距離が大きくなるため、血球間の反発力が弱め
られる結果、凝集が起こりやすくなると考えられている
。
この発明の実施例について以下説明する。
実施例１
この実施例は、ＩｇＧタイプの単クローン性抗体として
単クローン性ヒト抗り抗体、単クローン性抗ＩｇＧ抗体
として単クローン性抗ヒ）ＩｇＧ抗体を使用した場合の
実施例である。
単クローン性ヒト抗り抗体、単クローン性抗ＩｇＧ抗体
として単クローン性抗ヒ）ＩｇＧ抗体を使用した場合の
実施例である。
（，１） 単クローン性ヒト抗り抗体の製法Ｒｈ（Ｄ
）陰性者のうち抗り抗体保有者の末梢リンパ球にＥ Ｂ
Ｖ （Ｅｐｓｔｅｉｎ−Ｂａｒｒウィルス）を感染さ
せトランスフオームした細胞を軟寒天法によりクローニ
ングをして単クローン性ヒト抗り抗体産生株（Ｂ２−１
株）をクローン化した。（以上は、宇野正恒他、第１３
回日本免疫学会・１９８３研究論文集第４１６〜４１７
頁記載の方法による。）このようにしてクローン化した
Ｂ２−１株とＪＭＳ −３株（ヒト由来細胞）をＰＥＧ
−１５００で融合し、融合細胞を限界希釈法によりクロ
ーニングを行い単クローン性ヒト抗り抗体産生株（Ｂ−
７−Ｄ−１０株）を確立した。この抗り抗体の精製は、
５０％硫酸アンモニウム法でＩｇＧ分画を粗精製した後
、更にＤＥＡＥセファセル（ファルマシアＭ）を用いて
０．０１７５ｍｏｌリン酸緩衝液（Ｐｌ＋６．８ ）で
ＩｇＧ分画、すなわち！ｇＧタイプの単クローン性ヒト
抗り抗体を得た。
）陰性者のうち抗り抗体保有者の末梢リンパ球にＥ Ｂ
Ｖ （Ｅｐｓｔｅｉｎ−Ｂａｒｒウィルス）を感染さ
せトランスフオームした細胞を軟寒天法によりクローニ
ングをして単クローン性ヒト抗り抗体産生株（Ｂ２−１
株）をクローン化した。（以上は、宇野正恒他、第１３
回日本免疫学会・１９８３研究論文集第４１６〜４１７
頁記載の方法による。）このようにしてクローン化した
Ｂ２−１株とＪＭＳ −３株（ヒト由来細胞）をＰＥＧ
−１５００で融合し、融合細胞を限界希釈法によりクロ
ーニングを行い単クローン性ヒト抗り抗体産生株（Ｂ−
７−Ｄ−１０株）を確立した。この抗り抗体の精製は、
５０％硫酸アンモニウム法でＩｇＧ分画を粗精製した後
、更にＤＥＡＥセファセル（ファルマシアＭ）を用いて
０．０１７５ｍｏｌリン酸緩衝液（Ｐｌ＋６．８ ）で
ＩｇＧ分画、すなわち！ｇＧタイプの単クローン性ヒト
抗り抗体を得た。
（２）単クローン性抗ヒＩＩｇＧ抗体の製法ＢＡＬＢ／
ＣマウスにヒトＩｇＧ （ヒト血清をＤＥＡＥセファ
セルを用いて精製したもの）を免疫後、肺臓を摘出して
得られた細胞とＰ３−Ｘ６３−Ａｇ ８−０１株（ＢＡ
ＬＢ／Ｃマウス由来）をＰＥＧ−４０００で融合し、融
合細胞を限界希釈法でクローニングを行い、単クローン
性抗ヒ目ｇＧ抗体産生株を確立した（渡辺武、１９７８
、免疫実験操作法ＴＸ ７２９６３頁に記載の方法。）
。抗ＩｇＧ抗体の精製は、前記（１）と同様に行いＩｇ
Ｇタイプの単クローン性抗ヒトＩｇＧ抗体を得た。
ＣマウスにヒトＩｇＧ （ヒト血清をＤＥＡＥセファ
セルを用いて精製したもの）を免疫後、肺臓を摘出して
得られた細胞とＰ３−Ｘ６３−Ａｇ ８−０１株（ＢＡ
ＬＢ／Ｃマウス由来）をＰＥＧ−４０００で融合し、融
合細胞を限界希釈法でクローニングを行い、単クローン
性抗ヒ目ｇＧ抗体産生株を確立した（渡辺武、１９７８
、免疫実験操作法ＴＸ ７２９６３頁に記載の方法。）
。抗ＩｇＧ抗体の精製は、前記（１）と同様に行いＩｇ
Ｇタイプの単クローン性抗ヒトＩｇＧ抗体を得た。
（３）単クローン性ヒト抗り抗体の力価の決定前記（１
）で得た被検抗り抗体を生理食塩液を用いて０．１ ｍ
ｌの系列で、２倍連続希釈を行い、２％Ｒｈ（Ｄ）陽性
血球（生理食塩液浮遊）を１滴ずつ加え、３７℃で６０
分間反応させた後、生理食塩液で３回洗浄してから、抗
ヒトグロブリン血清を２滴ずつ加えて、３４００ｒｐｍ
で１５秒間遠心分離した後、凝集を示した最高の希釈倍
率を力価とした。
）で得た被検抗り抗体を生理食塩液を用いて０．１ ｍ
ｌの系列で、２倍連続希釈を行い、２％Ｒｈ（Ｄ）陽性
血球（生理食塩液浮遊）を１滴ずつ加え、３７℃で６０
分間反応させた後、生理食塩液で３回洗浄してから、抗
ヒトグロブリン血清を２滴ずつ加えて、３４００ｒｐｍ
で１５秒間遠心分離した後、凝集を示した最高の希釈倍
率を力価とした。
（４）単クローン性抗ヒｌ−ｒｇＧ抗体の力価の決定前
記（２）で得た被検抗ＩｇＧ抗体を希釈液（３％ウシ胎
児血清、０．１％ＮａＮ ３を含む生理食塩液）を用い
て、Ｏ，１ｍｌの系列で２倍連続希釈を行い、２％抗り
感作血球生理食塩液ＣＲｈ式血液型Ｒ１Ｒ２血球の２％
生理食塩浮遊液ｌ容に抗り血清（国家検定済みアルブミ
ン液抗体）を生理食塩液で１００倍したものを１容加え
３７℃で１時間感作したもの〕を１滴ずつ加えて、３４
００ｒｐｍで１５秒間遠心分離し、凝集を示した最高の
希釈倍数を力価とした。
記（２）で得た被検抗ＩｇＧ抗体を希釈液（３％ウシ胎
児血清、０．１％ＮａＮ ３を含む生理食塩液）を用い
て、Ｏ，１ｍｌの系列で２倍連続希釈を行い、２％抗り
感作血球生理食塩液ＣＲｈ式血液型Ｒ１Ｒ２血球の２％
生理食塩浮遊液ｌ容に抗り血清（国家検定済みアルブミ
ン液抗体）を生理食塩液で１００倍したものを１容加え
３７℃で１時間感作したもの〕を１滴ずつ加えて、３４
００ｒｐｍで１５秒間遠心分離し、凝集を示した最高の
希釈倍数を力価とした。
（５）抗原抗体複合物の製法
前記（１１で得た単クローン性ヒト抗り抗体を希釈液（
１０％ウシ胎児血清、２％ウジアルブミン、０゜１％Ｎ
ａＮ ３を含む０．０１３ ｍｏ＋ リンＭ 緩ｆｉ
ｉ食塩液ＰＨ７，０）で希釈し、Ｒｈ（Ｄ）陽性血球と
の間接抗グロブリン試験、で力価が４０９６倍になるよ
うに調整した液１容に対し、前記（２）で得、そして前
記（４）で求めた力価を２５６倍に調整した単クローン
性抗ヒトＩｇＧ抗体を１容加え、３７℃で１時間加温し
て製造した。これによって、ＴｇＧタイプの単クローン
性ヒト抗り抗体（単クローン性抗体）２分子に、この抗
体に対する単クローン性抗ヒｌ−ＩｇＧ抗体く単クロー
ン性抗ＩｇＧ抗体）を２分子又は１分子が結合した抗原
抗体複合物を得た（第１図（ａ）参照）。
１０％ウシ胎児血清、２％ウジアルブミン、０゜１％Ｎ
ａＮ ３を含む０．０１３ ｍｏ＋ リンＭ 緩ｆｉ
ｉ食塩液ＰＨ７，０）で希釈し、Ｒｈ（Ｄ）陽性血球と
の間接抗グロブリン試験、で力価が４０９６倍になるよ
うに調整した液１容に対し、前記（２）で得、そして前
記（４）で求めた力価を２５６倍に調整した単クローン
性抗ヒトＩｇＧ抗体を１容加え、３７℃で１時間加温し
て製造した。これによって、ＴｇＧタイプの単クローン
性ヒト抗り抗体（単クローン性抗体）２分子に、この抗
体に対する単クローン性抗ヒｌ−ＩｇＧ抗体く単クロー
ン性抗ＩｇＧ抗体）を２分子又は１分子が結合した抗原
抗体複合物を得た（第１図（ａ）参照）。
（６）抗原抗体複合物のＲｈ式血液型の検査試薬として
凝集反応への使用 前記（５）でｉＭた抗原抗体複合物を、Ｉ？ｈ（Ｄ）陽
性血球と反応させると強い凝集反応を認めた（第１図（
ｂ）参照）。Ｒｈ（Ｄ）陰性血球とは凝集反応を認めな
かった。
凝集反応への使用 前記（５）でｉＭた抗原抗体複合物を、Ｉ？ｈ（Ｄ）陽
性血球と反応させると強い凝集反応を認めた（第１図（
ｂ）参照）。Ｒｈ（Ｄ）陰性血球とは凝集反応を認めな
かった。
次に、この検査例を表１及び表２で示す。表１は、生理
食塩液法で従来試薬の１つである単クローン性ヒト抗り
抗体とこの発明の抗原抗体複合物を使用して、それぞれ
検査を実施した場合の例である。この抗原抗体複合物を
使用した場合には強い凝集反応が認められたが、単クロ
ーン性ヒト抗り抗体を使用した場合には何ら反応が認め
られなかった。
食塩液法で従来試薬の１つである単クローン性ヒト抗り
抗体とこの発明の抗原抗体複合物を使用して、それぞれ
検査を実施した場合の例である。この抗原抗体複合物を
使用した場合には強い凝集反応が認められたが、単クロ
ーン性ヒト抗り抗体を使用した場合には何ら反応が認め
られなかった。
表１
的に認められた試薬である多クローン性抗り抗体をアル
ブミン法で使用し、この発明の抗原抗体複合物を生理食
塩液法で使用した検査例である。共にＲｈ（Ｄ）陽性血
球とは強い凝集反応が認められ、この抗原抗体複合物が
、Ｒｈ式血液型判定の試薬として有用であることが判明
した。
ブミン法で使用し、この発明の抗原抗体複合物を生理食
塩液法で使用した検査例である。共にＲｈ（Ｄ）陽性血
球とは強い凝集反応が認められ、この抗原抗体複合物が
、Ｒｈ式血液型判定の試薬として有用であることが判明
した。
表２
この実施例は、ＩｇＧタイプの単クローン性抗体として
単クローン性ヒト抗り抗体、多クローン性抗ＩｇＧ抗体
として多クローン性抗ヒ）ＩｇＧ抗体を使用した場合の
実施例である。
単クローン性ヒト抗り抗体、多クローン性抗ＩｇＧ抗体
として多クローン性抗ヒ）ＩｇＧ抗体を使用した場合の
実施例である。
（１）単クローン性ヒト抗り抗体の製法及び力価の決定
は、それぞれ実施例１の（１１，（３）と同様に行う。
は、それぞれ実施例１の（１１，（３）と同様に行う。
（２）多クローン性抗ヒトＩｇＧ抗体の製法正常ヒト血
清を５０％硫酸アンモニウム法でＴｇＧ分画とし、更に
ＤＥＡＥセファセル（ファルマシア製）を用いてＩｇＧ
分画を得た。この精製ＩｇＧを家兎に免疫し、得られた
血清をノイラミニダーゼ処理ヒト血球で異種凝集素を吸
収後、その血清を５０％硫酸アンモニウム法でＩｇＣｙ
分画とし、更にＤＥＡＥセファセルで精製し、多クロー
ン性抗ヒトＩｇＧ抗体を得た。
清を５０％硫酸アンモニウム法でＴｇＧ分画とし、更に
ＤＥＡＥセファセル（ファルマシア製）を用いてＩｇＧ
分画を得た。この精製ＩｇＧを家兎に免疫し、得られた
血清をノイラミニダーゼ処理ヒト血球で異種凝集素を吸
収後、その血清を５０％硫酸アンモニウム法でＩｇＣｙ
分画とし、更にＤＥＡＥセファセルで精製し、多クロー
ン性抗ヒトＩｇＧ抗体を得た。
（３）多クローン性抗ヒ）ＩｇＧ抗体の力価の決定は、
実施例１の（４）、抗原抗体複合物の製法は実施例１の
（５）と同様に行う。
実施例１の（４）、抗原抗体複合物の製法は実施例１の
（５）と同様に行う。
このようにして、■ｇＧタイプの単クローン性抗体２分
子に、この抗体に対する多クローン性抗ＩｇＧ抗体を２
分子、又は１分子結合した抗原抗体複合物ができる（第
１図（ａ）参照）。
子に、この抗体に対する多クローン性抗ＩｇＧ抗体を２
分子、又は１分子結合した抗原抗体複合物ができる（第
１図（ａ）参照）。
（４）抗原抗体複合物のＲｈ式血液型の検査試薬として
凝集反応への使用 前記（３）で得た抗原抗体複合物は、Ｒｈ（Ｄ）陽性血
球と反応させると強い凝集反応を認め、Ｒｈ（Ｄ）陰性
血球とは凝集反応を認めなかった。
凝集反応への使用 前記（３）で得た抗原抗体複合物は、Ｒｈ（Ｄ）陽性血
球と反応させると強い凝集反応を認め、Ｒｈ（Ｄ）陰性
血球とは凝集反応を認めなかった。
次に、実施例１の表１に対応する検査結果を表３に、実
施例１の表２に対応する検査結果を表４に示す。表３．
４から、単クローン性ヒト抗り抗体と多クローン性抗ヒ
目ｇＧ抗体の複合物の凝集反応性は、実施例１と差を認
めず、単クローン性ヒト抗り抗体単独の場合とは異なり
、実施例１と同様に強い凝集反応を示した（第１図（ｂ
）参照）。
施例１の表２に対応する検査結果を表４に示す。表３．
４から、単クローン性ヒト抗り抗体と多クローン性抗ヒ
目ｇＧ抗体の複合物の凝集反応性は、実施例１と差を認
めず、単クローン性ヒト抗り抗体単独の場合とは異なり
、実施例１と同様に強い凝集反応を示した（第１図（ｂ
）参照）。
この抗原抗体複合物は、生理食塩演法のほかに前記した
Ｒｈ式血液型の検査方法、すなわち、抗ヒトグロブリン
法、ブロメリン法及びアルブミン法のすべての検査方法
において凝集反応を起こす試薬として応用できた。
Ｒｈ式血液型の検査方法、すなわち、抗ヒトグロブリン
法、ブロメリン法及びアルブミン法のすべての検査方法
において凝集反応を起こす試薬として応用できた。
この抗原抗体複合物は、次に実施例３及び実施例４にお
いて述べ−る逆受身赤血球凝集反応にも使用することが
できる。
いて述べ−る逆受身赤血球凝集反応にも使用することが
できる。
表３
表４
実施例３
この実施例は、ＩｇＧタイプの単クローン性抗体として
単クローン性マウス抗ＨＢｓ抗体、単クローン性抗Ｉｇ
Ｇ抗体として単クローン性抗マウスＩｇＧ抗体を使用し
た場合の実施例である。
単クローン性マウス抗ＨＢｓ抗体、単クローン性抗Ｉｇ
Ｇ抗体として単クローン性抗マウスＩｇＧ抗体を使用し
た場合の実施例である。
＋１） 単クローン性マウス抗ＨＢｓ抗体の製法ＢＡ
ＬＢ／Ｃマウスに）ＩＢｓ抗原（ＨＢｓ抗原陽性血漿を
密度勾配超遠心分離法にて精製したＢ型肝炎ウィルス関
連抗原）を免疫原として、実施例１の（２）と同様の方
法で単クローン性マウス抗ＨＢｓ抗体産生株を確立した
。抗ＨＢｓ抗体の精製は、セファローズ４Ｂ （ファル
マシア！％Ｊ）に精１４ＨＢｓ抗原を結合させたアファ
ニティークロマトグラフィーを用いて、４ ｍｏｌ塩化
マグネシウムで解離した分画、すなわちＨＢｇ抗原に特
異な単クローン性マウス抗１１Ｂｓ抗体を得た。
ＬＢ／Ｃマウスに）ＩＢｓ抗原（ＨＢｓ抗原陽性血漿を
密度勾配超遠心分離法にて精製したＢ型肝炎ウィルス関
連抗原）を免疫原として、実施例１の（２）と同様の方
法で単クローン性マウス抗ＨＢｓ抗体産生株を確立した
。抗ＨＢｓ抗体の精製は、セファローズ４Ｂ （ファル
マシア！％Ｊ）に精１４ＨＢｓ抗原を結合させたアファ
ニティークロマトグラフィーを用いて、４ ｍｏｌ塩化
マグネシウムで解離した分画、すなわちＨＢｇ抗原に特
異な単クローン性マウス抗１１Ｂｓ抗体を得た。
（２） 単クローン性抗マウスＩｇＧ抗体の製法ウシ
アルブミンを安定剤として含有する単クローン性抗マウ
スＩｇＧラット抗体（イムノチック製）を、ブルーセル
ロファイン（生化学工業型）を用いて０．１ｍｏｌ ）
リス塩酸緩衝液ＰＨ８，０でウシアルブミンをカラムに
結合させた素通り分画、すなわちＩｇＧタイプの単クロ
ーン性抗マウスＴｇＧ抗体を得た。
アルブミンを安定剤として含有する単クローン性抗マウ
スＩｇＧラット抗体（イムノチック製）を、ブルーセル
ロファイン（生化学工業型）を用いて０．１ｍｏｌ ）
リス塩酸緩衝液ＰＨ８，０でウシアルブミンをカラムに
結合させた素通り分画、すなわちＩｇＧタイプの単クロ
ーン性抗マウスＴｇＧ抗体を得た。
（３）抗原抗体複合物の製法
前記（１）で得た単クローン性マウス抗ＨＢｓ抗体を２
８０ｎｍにおける紫外部吸収法で、０．１５ｍｏｌ リ
ン酸１７７ｉｔＥ食塩液ＰＨ７，４（以下ＰＢＳという
）を希釈液として１０ｍｇ／ｍｌの濃度に調整したもの
に、前記（２）で得た単クローン性抗マウスＩｇＧ抗体
を同様にして１ｍｇ ／ｍｌの濃度に調整したものを等
容加え４℃で１６時間反応させて抗原抗体複合物を製造
した（第２図（ａ）参照）。
８０ｎｍにおける紫外部吸収法で、０．１５ｍｏｌ リ
ン酸１７７ｉｔＥ食塩液ＰＨ７，４（以下ＰＢＳという
）を希釈液として１０ｍｇ／ｍｌの濃度に調整したもの
に、前記（２）で得た単クローン性抗マウスＩｇＧ抗体
を同様にして１ｍｇ ／ｍｌの濃度に調整したものを等
容加え４℃で１６時間反応させて抗原抗体複合物を製造
した（第２図（ａ）参照）。
（４）抗原抗体複合物のＨＢｓ抗原検査試薬として逆受
身赤血球凝集反応への使用 （イ）感作血球の製法 グルタルアルデヒド処理したヒツジ赤血球にタンニン酸
を用いて、前記（３）で得た抗原抗体複合物又は前記（
１１で得た単クローン性マウス抗ＨＢｓ抗体を等容加え
３７℃で１時間混合し反応させた。それぞれＰＢＳで５
回遠心洗浄し、２％正常ウつ血ｌＲ加ＰＢＳで１％浮遊
液とし感作ヒツジ赤血球（感作血球）を製造した（第２
図（ｂ）参照）。
身赤血球凝集反応への使用 （イ）感作血球の製法 グルタルアルデヒド処理したヒツジ赤血球にタンニン酸
を用いて、前記（３）で得た抗原抗体複合物又は前記（
１１で得た単クローン性マウス抗ＨＢｓ抗体を等容加え
３７℃で１時間混合し反応させた。それぞれＰＢＳで５
回遠心洗浄し、２％正常ウつ血ｌＲ加ＰＢＳで１％浮遊
液とし感作ヒツジ赤血球（感作血球）を製造した（第２
図（ｂ）参照）。
（ロ）検査用試薬としての使用
前記（４１−（イ）で得た抗原抗体複合物を感作した試
薬は、従来試薬の１つである単クローン性マウス抗ｌｌ
Ｂｓ抗体のみを感作した場合よりも検出感度が約５倍高
いことを認めた。
薬は、従来試薬の１つである単クローン性マウス抗ｌｌ
Ｂｓ抗体のみを感作した場合よりも検出感度が約５倍高
いことを認めた。
次に、この検査例を表５で示す。表５は、■型パーマネ
ントマイクロプレートを用いて、約５ｎｇ／ ｍ Ｉの
ｌｌＢｓ抗原を含むヒト血清を１．５倍連続希釈したも
のを検体として、従来試薬の１つである単クローン性抗
ＨＢｓ抗体のみと、この発明の抗原抗体複合物をそれぞ
れ感作した血球を使用して検査を実施した例である（第
２図（Ｃ）参照）。この抗原抗体複合物を使用した場合
には７．５９倍希釈（約０．６６ｎｇ／ｍｌ）のＨＢｓ
抗原まで凝集反応が認められたが、単クローン性マウス
抗１１８ｓ抗体のみを使用した場合には１．５０倍希釈
（約３．３Ｂｇ ／ｍ＋）のＨＢｓ抗原までしか凝集反
応が認められず、この抗原抗体複合物を使用することに
より、逆受身赤血球凝集反応においてＨＢｓ抗原の検出
感度が単クローン性マウス抗ＨＢｓ抗体のみを使用した
場合に比べて約５倍上昇することが判明した。
ントマイクロプレートを用いて、約５ｎｇ／ ｍ Ｉの
ｌｌＢｓ抗原を含むヒト血清を１．５倍連続希釈したも
のを検体として、従来試薬の１つである単クローン性抗
ＨＢｓ抗体のみと、この発明の抗原抗体複合物をそれぞ
れ感作した血球を使用して検査を実施した例である（第
２図（Ｃ）参照）。この抗原抗体複合物を使用した場合
には７．５９倍希釈（約０．６６ｎｇ／ｍｌ）のＨＢｓ
抗原まで凝集反応が認められたが、単クローン性マウス
抗１１８ｓ抗体のみを使用した場合には１．５０倍希釈
（約３．３Ｂｇ ／ｍ＋）のＨＢｓ抗原までしか凝集反
応が認められず、この抗原抗体複合物を使用することに
より、逆受身赤血球凝集反応においてＨＢｓ抗原の検出
感度が単クローン性マウス抗ＨＢｓ抗体のみを使用した
場合に比べて約５倍上昇することが判明した。
表５
実施例４
この実施例は、ＩｇＧタイプの単クローン性抗体として
単クローン性マウス抗ＨＢｓ抗体、多クローン性抗Ｉｇ
Ｇ抗体として多クローン性抗マウスＩｇＧ抗体を使用し
た場合の実施例である。
単クローン性マウス抗ＨＢｓ抗体、多クローン性抗Ｉｇ
Ｇ抗体として多クローン性抗マウスＩｇＧ抗体を使用し
た場合の実施例である。
（１）単クローン性マウス抗１１Ｂｓ抗体の製法実施例
３の（１１と同様の方法でｌｌＢｓ抗原に特異な単クロ
ーン性マウス抗１１８ｓ抗体を得ることができる。
３の（１１と同様の方法でｌｌＢｓ抗原に特異な単クロ
ーン性マウス抗１１８ｓ抗体を得ることができる。
（２） 多クローン性抗マウスｒｇＧ抗体の製法１３
ＡＬＢ／Ｃマウス血清を硫酸アンモニウムを用いてＩｇ
Ｇとし、Ｐｏ ｔｅｒの方法（Ｒ、Ｒ，Ｐｏｔｅｒ、Ｂ
ｉｏｃｈｅｍ、 、 Ｊ、 、 ７３． ｐ、１１９．
１９５９）でマウスＩｇＧ −Ｆｃを精製した。このネ
ｍｌマウスｒｇＧ −Ｆｃをフロイントコンプリートア
ジュバントと共に家兎に免疫し、採血して得られた抗血
清をマウスＩｇＧ −Ｆｃ結合セファローズ４Ｂによっ
て分画して多クローン性抗マウス■ｇＧ抗体を得た。
ＡＬＢ／Ｃマウス血清を硫酸アンモニウムを用いてＩｇ
Ｇとし、Ｐｏ ｔｅｒの方法（Ｒ、Ｒ，Ｐｏｔｅｒ、Ｂ
ｉｏｃｈｅｍ、 、 Ｊ、 、 ７３． ｐ、１１９．
１９５９）でマウスＩｇＧ −Ｆｃを精製した。このネ
ｍｌマウスｒｇＧ −Ｆｃをフロイントコンプリートア
ジュバントと共に家兎に免疫し、採血して得られた抗血
清をマウスＩｇＧ −Ｆｃ結合セファローズ４Ｂによっ
て分画して多クローン性抗マウス■ｇＧ抗体を得た。
（３）抗原抗体複合物の製法
前記（１）で得た単クローン性マウス抗Ｈａｓ抗体を２
８０ｎｍにおける紫外部吸収法で、０．１５ｍｏｌ
リン酸緩衝食塩液ＰＩ＋７．４ （以下ＰＢＳという
）を希釈液としてＬｏｎｇ／ｍｌの濃度に調整したもの
に、前記（２）で得た多クローン性抗マウスＩｇＧ抗体
を同様にして１０ｍｇ／ｍｌの濃度に調整したものを等
容加え４℃で１６時間反応させて抗原抗体複合物を製造
した（第２図（ａ）参照）。
８０ｎｍにおける紫外部吸収法で、０．１５ｍｏｌ
リン酸緩衝食塩液ＰＩ＋７．４ （以下ＰＢＳという
）を希釈液としてＬｏｎｇ／ｍｌの濃度に調整したもの
に、前記（２）で得た多クローン性抗マウスＩｇＧ抗体
を同様にして１０ｍｇ／ｍｌの濃度に調整したものを等
容加え４℃で１６時間反応させて抗原抗体複合物を製造
した（第２図（ａ）参照）。
（４）抗原抗体複合物のＨＢｓ抗原検査試薬として逆受
身赤血球凝集反応への使用 （イ）感作血球の製法 グルタルアルデヒド処理したヒツジ赤血球にタンニン酸
を用いて、前記（３）で得た抗原抗体複合物、又は前記
（１）で得た単クローン性マウス抗ＨＢｓ抗体を等容加
え３７℃で１時間混合し反応させた。それぞれＰＢＳで
５回遠心洗浄し、２％正常ウつ血清加ＰＢＳで１％ｌ＄
遊液とし感作ヒツジ赤血球（感作血球）を製造したく第
２図（ｂ）参照）。
身赤血球凝集反応への使用 （イ）感作血球の製法 グルタルアルデヒド処理したヒツジ赤血球にタンニン酸
を用いて、前記（３）で得た抗原抗体複合物、又は前記
（１）で得た単クローン性マウス抗ＨＢｓ抗体を等容加
え３７℃で１時間混合し反応させた。それぞれＰＢＳで
５回遠心洗浄し、２％正常ウつ血清加ＰＢＳで１％ｌ＄
遊液とし感作ヒツジ赤血球（感作血球）を製造したく第
２図（ｂ）参照）。
（ロ）検査用試薬としての使用
前記（４）の（イ）で得た抗原抗体複合物を感作した試
薬は、従来試薬の１つである単クローン性マウス抗ｔ（
Ｂｓ抗体のみを感作した場合よりも検出感度が約３倍高
いことを認めた。
薬は、従来試薬の１つである単クローン性マウス抗ｔ（
Ｂｓ抗体のみを感作した場合よりも検出感度が約３倍高
いことを認めた。
次に、この検査例を表６で示す。表６は、Ｖ型パーマネ
ントマイクロプレートを用いて、約５ｎｇ／ｍｌのＨＢ
ｓ抗原を含むヒト血清を１．５倍連続希釈したものを検
体として、従来試薬の１つである単クローン性マウス抗
＋ＩＢｓ抗体のみと、この発明の抗原抗体複合物をそれ
ぞれ感作した血球を使用して検査を実施した例である（
第２図（ｃ）参照）。
ントマイクロプレートを用いて、約５ｎｇ／ｍｌのＨＢ
ｓ抗原を含むヒト血清を１．５倍連続希釈したものを検
体として、従来試薬の１つである単クローン性マウス抗
＋ＩＢｓ抗体のみと、この発明の抗原抗体複合物をそれ
ぞれ感作した血球を使用して検査を実施した例である（
第２図（ｃ）参照）。
この抗原抗体複合物を使用した場合には５．０６倍希釈
（約０．９９ｎｇ／ｍりのＨＢｓ抗原まで＆Ｅ集反応が
認められたが、単クローン性マウス抗ＨＢｓ抗体のみを
使用した場合には１．５０倍希釈（約３．３ｎｇ ／ｍ
ｌ）の）ＩＢｓ抗原までしか凝集反応が認められず、こ
の抗原抗体複合物を使用することにより、逆受身赤血球
凝集反応においてＨＢｓ抗原の検出感度が単クローン性
マウス抗＋（Ｂｓ抗体のみを使用した場合に表６ 比べて約３倍上昇することが判明した。
（約０．９９ｎｇ／ｍりのＨＢｓ抗原まで＆Ｅ集反応が
認められたが、単クローン性マウス抗ＨＢｓ抗体のみを
使用した場合には１．５０倍希釈（約３．３ｎｇ ／ｍ
ｌ）の）ＩＢｓ抗原までしか凝集反応が認められず、こ
の抗原抗体複合物を使用することにより、逆受身赤血球
凝集反応においてＨＢｓ抗原の検出感度が単クローン性
マウス抗＋（Ｂｓ抗体のみを使用した場合に表６ 比べて約３倍上昇することが判明した。
この抗原抗体複合物は、上記の血液凝集反応、 −逆
受身赤血球凝集反応の他に、ラテックス凝集反応などに
も応用することができる。
受身赤血球凝集反応の他に、ラテックス凝集反応などに
も応用することができる。
以上の説明からも明らかなように、血液型判定の際に使
用する抗体は、従来の単クローン性抗体のみの試薬では
、一部の検査方法に対してのみしか凝集反応を起こさず
実用的に使用することが困難であったが、この発明の抗
原抗体複合物は、Ｒｈ式血液型の検査試薬として使用し
た場合において、＃ｉ集反応を利用する全ての検査方法
において有効に利用することができると共に多クローン
性抗り抗体のようにヒト血清を必要としないので、原材
料の入手も容易である利点がある。更に、この発明の抗
原抗体複合物を感作したヒツジ赤血球においては、ウィ
ルス例えばＨＢｓ抗原に対して顕著な凝集反応を示し、
従来の単クローン性マウス抗ＨＢＳ抗体のみを感作した
ヒツジ赤血球による試薬に比べて約３倍〜５倍の感度で
反応するため、検査試薬として非常に有効である。
用する抗体は、従来の単クローン性抗体のみの試薬では
、一部の検査方法に対してのみしか凝集反応を起こさず
実用的に使用することが困難であったが、この発明の抗
原抗体複合物は、Ｒｈ式血液型の検査試薬として使用し
た場合において、＃ｉ集反応を利用する全ての検査方法
において有効に利用することができると共に多クローン
性抗り抗体のようにヒト血清を必要としないので、原材
料の入手も容易である利点がある。更に、この発明の抗
原抗体複合物を感作したヒツジ赤血球においては、ウィ
ルス例えばＨＢｓ抗原に対して顕著な凝集反応を示し、
従来の単クローン性マウス抗ＨＢＳ抗体のみを感作した
ヒツジ赤血球による試薬に比べて約３倍〜５倍の感度で
反応するため、検査試薬として非常に有効である。
第１図（ａ）はこの発明の抗原抗体複合物の製造方法の
模式図及び抗原抗体複合物の模式図を示し、第１図（ｂ
）は抗原抗体複合物とＲｈ （Ｄ ）陽性血球の凝集反
応の模式図を示し、第２図（ａ）はこの発明の抗原抗体
複合物の製造方法の模式図及び抗原抗体複合物の模式図
を示し、第２図（ｂ）は抗原抗体複合物とヒツジ赤血球
の感作方法及び抗原抗体複合物感作ヒツジ赤血球の模式
図を示し、第２図（Ｃ）は抗原抗体複合物感作ヒツジ赤
血球とＨＢｓ抗原の逆受身赤血球凝集反応の模式図を示
し、第３図（ａ）及び第３図（ｂ）は従来の試薬である
単クローン性抗体を使用した抗ヒトグロブリン検査法で
の凝集反応模式図を示し、第４図（ａ）は従来の試薬で
ある単クローン性マウス抗８８Ｓ抗体感作ヒツジ赤血球
の製法の模式図を示し、第４図（ｂ）は、従来の試薬で
ある単クローン性マウス抗ＨＢｓ抗体感作ヒツジ赤血球
を使用したＨＢＳ抗原の逆受身赤血球凝集反応の模式図
である。
模式図及び抗原抗体複合物の模式図を示し、第１図（ｂ
）は抗原抗体複合物とＲｈ （Ｄ ）陽性血球の凝集反
応の模式図を示し、第２図（ａ）はこの発明の抗原抗体
複合物の製造方法の模式図及び抗原抗体複合物の模式図
を示し、第２図（ｂ）は抗原抗体複合物とヒツジ赤血球
の感作方法及び抗原抗体複合物感作ヒツジ赤血球の模式
図を示し、第２図（Ｃ）は抗原抗体複合物感作ヒツジ赤
血球とＨＢｓ抗原の逆受身赤血球凝集反応の模式図を示
し、第３図（ａ）及び第３図（ｂ）は従来の試薬である
単クローン性抗体を使用した抗ヒトグロブリン検査法で
の凝集反応模式図を示し、第４図（ａ）は従来の試薬で
ある単クローン性マウス抗８８Ｓ抗体感作ヒツジ赤血球
の製法の模式図を示し、第４図（ｂ）は、従来の試薬で
ある単クローン性マウス抗ＨＢｓ抗体感作ヒツジ赤血球
を使用したＨＢＳ抗原の逆受身赤血球凝集反応の模式図
である。
Claims (2)
- （１）ＩｇＧタイプの単クローン性抗体２分子に、この
抗体に対する単クローン性抗ＩｇＧ抗体又は多クローン
性抗ＩｇＧ抗体を２分子又は１分子結合した抗原抗体複
合物。 - （２）特許請求の範囲第１項の抗原抗体複合物を凝集反
応に使用する抗原抗体複合物の使用方法。
Applications Claiming Priority (2)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP13988786 | 1986-06-16 | ||
| JP61-139887 | 1986-06-16 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPS63127162A true JPS63127162A (ja) | 1988-05-31 |
| JPH0690206B2 JPH0690206B2 (ja) | 1994-11-14 |
Family
ID=15255904
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP62145950A Expired - Lifetime JPH0690206B2 (ja) | 1986-06-16 | 1987-06-10 | 抗原抗体複合物及びその使用方法 |
Country Status (3)
| Country | Link |
|---|---|
| EP (1) | EP0321604B1 (ja) |
| JP (1) | JPH0690206B2 (ja) |
| DE (1) | DE3780315D1 (ja) |
Cited By (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JPH01223349A (ja) * | 1988-03-03 | 1989-09-06 | Kokusai Shiyaku Kk | 抗ｄ血液型判定用試薬 |
| JPH09318629A (ja) * | 1996-05-27 | 1997-12-12 | Sekisui Chem Co Ltd | イムノアッセイ法 |
Families Citing this family (7)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| FR2676123B1 (fr) * | 1991-05-02 | 1994-06-17 | Pasteur Diagnostics | Complexe agglutinant et reactif d'identification d'antigenes sur les parois cellulaires. |
| US20070269840A1 (en) * | 2006-05-19 | 2007-11-22 | Idexx Laboratories, Inc. | In-situ equilibrium dialysis |
| CN106483303A (zh) * | 2015-08-24 | 2017-03-08 | 北京中检安泰诊断科技有限公司 | 人类血型检测试剂盒及其制备方法 |
| CN108693359B (zh) * | 2017-09-25 | 2021-02-09 | 广东睿碁生物科技有限公司 | 氧化锆微珠Rh血型分型试剂卡及其制备方法 |
| CN108693346B (zh) * | 2017-09-25 | 2021-03-09 | 广东睿碁生物科技有限公司 | 外源凝集素a1血型检测试剂卡及其制备方法 |
| CN108693361B (zh) * | 2017-09-25 | 2021-03-09 | 广东睿碁生物科技有限公司 | 氧化锆微珠abo血型正反定型试剂卡及其制备方法 |
| CN108693360B (zh) * | 2017-09-25 | 2021-03-09 | 广东睿碁生物科技有限公司 | 氧化锆微珠稀有血型检测试剂卡及其制备方法 |
Family Cites Families (7)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JPS5470384A (en) * | 1977-08-22 | 1979-06-06 | Inst Obu Kiyansaa Risaachi Roi | High molecular complex |
| US4401764A (en) * | 1980-02-07 | 1983-08-30 | Technicon Instruments Corporation | Immunoassays employing labeled reagent and a conjugate having two binding sites |
| US4433059A (en) * | 1981-09-08 | 1984-02-21 | Ortho Diagnostic Systems Inc. | Double antibody conjugate |
| US4529712A (en) * | 1981-09-18 | 1985-07-16 | Research Corporation | Coated cells and their use |
| EP0089367A1 (en) * | 1981-09-18 | 1983-09-28 | Georgetown University | Monoclonal antibody detection system |
| US4594327A (en) * | 1983-11-02 | 1986-06-10 | Syntex (U.S.A.) Inc. | Assay method for whole blood samples |
| GB8408193D0 (en) * | 1984-03-30 | 1984-05-10 | Cambridge Patent Dev | Antibodies |
-
1987
- 1987-06-10 JP JP62145950A patent/JPH0690206B2/ja not_active Expired - Lifetime
- 1987-12-23 EP EP87119130A patent/EP0321604B1/en not_active Expired - Lifetime
- 1987-12-23 DE DE8787119130T patent/DE3780315D1/de not_active Expired - Fee Related
Cited By (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JPH01223349A (ja) * | 1988-03-03 | 1989-09-06 | Kokusai Shiyaku Kk | 抗ｄ血液型判定用試薬 |
| JPH09318629A (ja) * | 1996-05-27 | 1997-12-12 | Sekisui Chem Co Ltd | イムノアッセイ法 |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| DE3780315D1 (de) | 1992-08-13 |
| EP0321604B1 (en) | 1992-07-08 |
| JPH0690206B2 (ja) | 1994-11-14 |
| EP0321604A1 (en) | 1989-06-28 |
| DE3780315T2 (ja) | 1993-02-25 |
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