JPS6259295A - ペプチドの新規製造法 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 （産業上の利用分野） 本発明は一般式（１） 式中Ｒ１は水素原子、炭素数１〜１０のアルキル基、炭
素数２〜６のアルケニル基、フェニル基、炭素数７〜９
のアルアルキル基、保護または無保護の水酸基で置換さ
れた炭素数１〜６のアルキル基、保護または無保りの水
酸基で置換された炭素数７〜９のアルアルキル基、低級
アルキルチオ基で置換された炭素数２〜６のアルキル基
、保護または無保護のチオール基で置換された炭素数１
〜４のアルキル基またはインドリルメチル基を表わし。

Ｒ２は水素原子、アミノ基の保護基または基（ここでＲ
１は前記と同一意義を表わし、Ｒ４は水素原子またはア
ミノ基の保護基を表わす）を表わし、 Ｒ３は水素原子または低級アルキル基を表わす〕を有す
るはプチドの新規製造法に関する。

さらに詳しく述べれば、本発明は有機溶媒中で活性エス
テルの分解、あるいは塩基によるラセミ化なしで啄プチ
ドを合成する極めて有用な方法であり、さらにα−アミ
ノ酸を保護基なしで使用できるという画期的な手法であ
る。

本発明の方法によって得られる化合物は各種ホルモン、
農薬、食品（たとえば甘味量）などとして、あるいは該
化合物からさらに上記の如き諸用途を有する最終目的化
合物を合成する中間体として有用である。

（従来技術） イプチト９類の合成は同相合成法と液相合成法に大別さ
れる。同相法は精製工程−ｂ’−少なく、そのため迅速
な合成が可能であシ、且つ合成機械による省力化が計れ
る利点がある。一方液相法は一般的に各段階における収
率、ラセミ化の割合において優っていて゛、両方法とも
に利点を有している。

液相法において、その基本的瀝合成法は３つに分類され
る。（１）Ｃ端活性化法　（２１縮合法　（３）Ｎ端活
性化法（インシアナート法） （１）の方法は一方のアミノ酸のカルボキシル基ヲ活性
エステルとし、もう一方のアミノ酸と塩基の存在下また
は不存在下縮合をする方法であり、（２）の方法は縮合
剤を用いることによりフラスコ内で一方のアミノ酸のカ
ルボキシル基が活性エステルとなり、もう一方のアミノ
酸のアミノ基と縮合する方法である。

これら２つの方法が、液相法で各釉ハプチド合成に最も
よく使用されている。

しかしながら、通常両者共、活性エステルに縮合するア
ミン成分のカルボキシル基をエステル化により保護する
ことが必須である。

アミノ酸は解離した分子内塩を形成しており電気的に中
和されている。このため水及び有機溶媒に難溶である。

かかる理由から液相法ではアミン基の窒素の塩基性（求
核性）を引き出すべくカルボキシル基を保護し中和しな
ければならない。

アミノ酸のアミンの塩基性を引き出す方法として、強塩
基を加えカルボン酸塩を生成させる事がある。この方法
としてショツテン・ノＺウマン・（Ｓｃｈｏｔｔｅｎ−
Ｂａｕｍａｎｎ）法が知られている（ボダンスキ−（Ｂ
ｏｄａｎｓｋｙ）　ラヘフチトゞ・シンセシス・セカン
ド・エディジョン（Ｐｅｐｔｉｄｅ　５ｙｎｔｈｅｓｉ
ｓ２ｎｄ　Ｅａ、）　８５頁） しかしながら、この方法では活性エステル基がアミノ基
と水による加水分解との競争反応をうけるため不安定（
よシ活性の強い）な活性エステルを用いることができな
い。

（発明が解決しようとする問題点） 本発明の目的は水による活性エステルの分解を防ぐだめ
％有機溶媒中で反応を行ない、塩基によるラセミ化を防
ぐために、中性に近い反応条件下で、アミンの塩基性を
引き出すことである。

本発明のもう１つの目的は、さらに応用範囲を広げるた
め、α−アミノ酸について無保護で上記の条件を満たす
方法を提供することである。

（問題点を解決するだめの手段） 遊離アミノ酸のカルボキシル基を中和し、アミン基の塩
基性を引き出し、且つ有機溶媒に可溶化する方法として
、本発明者はシリル化による方法を検討した。

シリル化はトリメチルシリルイミダゾールを用いること
により解決した。

α−アミノ酸とトリメチルシリルイミダゾールを０℃〜
３０℃で有機溶媒中反応させると速やかに反応が進みＮ
−）リメチルシリルアミノートリメチルシリルエステル
が得られる。

このことを利用して一般式（２） （式中Ｒ５は水素原子、炭素数１〜１０のアルキル基、
炭素数２〜６のアルケニル基、フェニル基、炭素数７〜
９のアルアルキル基、保護または無保りの水酸基で置換
された炭素数１〜６のアルキル基、保麹または無保饅の
水酸基で置換された炭素数７〜９のアルアルギル基、低
級アルキルチオ基で置換された炭素数２〜６のアルキル
基、保護されたチオール基で置換された炭素数１〜４の
アルキル基またはインドリルメチル基を表わす）を有す
るα−アミノ酸を有機溶媒中トリメチルシリルイミダゾ
ールと処理すると一般式（４）（式中Ａは水素原子、炭
素数１〜１０のアルキル！Ｕ、　炭−１１２〜６のアル
ケニル基、フェニル基。

炭素数７〜９のアルアルキル基、保護された水酸基で置
換された炭素数１〜６のアルキル基、保護された水酸基
で置換された炭素数７〜９のアルアルキル基、低級アル
キルチオ基で置換された炭素数２〜６のアルキル基、保
護されたチオール基で置換された炭素数１〜４のアルキ
ル基またはインドリルメチル基を表わす） を有するＮ−）リメチルシリルアミノートリメチルシリ
ルエステルが得られる。

本工程において反応温度は０６〜３０℃がよく。

反応溶媒はアミド系、エーテル系、エステル系および塩
素系がよい。α−アミノ酸に対して用いられるトリメチ
ルシリルイミダゾールの量は一般式　　　　　　。

（４）が得られる量でよい。

トリメチルシリルイミダゾールを用いＮ−）リメチルシ
リルアミノートリメチルシリルエステルとする利点は、
反応系中に出てくるイミダゾールが中性化合物であり何
ら反応に関与せず、かつラセミ化の心配がないととであ
る。

このことはＮ−）リメチルシリルアミノ・トリメチルシ
リルエステルを単離することなく次いで活性エステルを
加えペプチドを合成できることである。

一般式（２）で表わされるα−アミノ酸基について。

アミン基およびカルボキシル基に対し当量、すなわち２
当景が最もよいが、１当量でも以後の反応条件を用いる
ことによジペプチド形成反応は進行する。ただし収量は
１当量の場合低下することはさけられない。

次に一般式（４）を有するＮ−）リメテルシリルアミノ
・トリメチルシリルエステルとアミノ酸の活性エステル
化合物との縮合反応を検討した。

一般式（２）のα−アミノ酸をトリメチルシリルイミダ
ゾールと作用させ、前記一般式（４）を有する化合物と
し、単離することなく一般式（３）〔式中Ｒ６は水素原
子、炭素数１〜１０のアルキル基、炭素数２〜６のアル
ケニル基、フェニル基。

炭素数７〜９のアルアルキル基、保護された水酸基で置
換された炭素数１〜６のアルキル基、保護された水酸基
で置換された炭素数７〜９のアルアルキル基、低級アル
午ルチオ基で置換された炭素数２〜６のアル午ル基、保
膿されたチオール基で置換された炭素数１〜４のアルキ
ル基またはインドリルメチル基を表わし。

Ｒ７はアミン基の保睦基または基 （ここでＲ６は前記と同一意義を表わし　Ｒ８はアミノ
基の保論基を表わす）を表わす〕を有するアミノ酸活性
エステル化合物を加えることによシ収率よく一般式（１
ａ） （式中Ａ、　　Ｒ’　およびＲ７は前記と同一意義を表
わす） を有する本発明化合物が得られる。

この反応に用いられる活性エステルはｐ−ニトロフェニ
ルエステル、ジニトロフェニルエステル。

インタクロルフェニルエステル、トリクロルフェニルエ
ステルなどのフェノール類、Ｎ−オキシコハク酸イミド
のエステル、Ｎ−オヤシフタルイミビのエステル等でも
よいが、ピリジルチオエステルが好ましい。

以上のペプチド新規合成法において、ます前記一般式（
２）のアミノ酸を有機溶媒に懸濁させ１次いでトリメチ
ルシリルイミダゾールを加える。反応が進行すれば、不
溶物がとけて半透明の溶液になる。例えば溶媒としてジ
メチルホルムアミ１を用いると、半透明の溶液が得られ
、容易にＮ−）リメチルシリルアミノートリメチルシリ
ルエステルの生成が確認できる。

過剰のトリメチルシリルイミダゾールを用いた場合には
、反応が進まない。このことは一般式（５）（式中Ａは
前記と同一意義を表わす） を有するＮ、Ｎ−ジトリメチルシリルアミノ化合物にな
ったからと考えられる。このことよシトリメチルシリル
イミダゾールの童を常に正確に使用する必要がある。

前述の本発明化合物（１ａ）のカルボキシル基を一般的
なアルキル化剤と作用さすと一般式（１ｂ）（式中Ａ、
　　Ｒ６およびＲ７は前記と四−意義を表わし　Ｒ９は
低級アルキル基を表わす）を有する他の本発明化合物が
得られる。

ここで用いられるアルキル化剤は一般的なアルキル化剤
でよく１例えばジアゾメタン等があげられる。

又前述の化合物（１ａ）の保護基をイプテド化学におい
て一般に用いられている方法を用い除去することによシ
他の本発明化合物（１ｃ）〔式中ＲＩＯは水素原子、炭
素数１〜１ｏのアルキル＆、炭素数２〜６のアルケニル
試、フェニル基、炭素数７〜９のアルアルキル基、 水酸基で置換された炭素数１〜６のアルキル基、水酸基
で置換された炭素数７〜９のアルアルキル基、低級アル
午ルチオ基で置換された炭素数２〜６のアルキル基、チ
オール基で置換された炭素数１〜４のアルキル基または
インド９リルメチル基を表わし。

Ｒ１１は水素原子または 基 （ここでＲＩＯは前記と同一意義を表わす）を表わす〕 を有する本発明のきプチドは得られる。

本発明の製造方法を要約すると、まずアミノ酸にトリメ
チルシリルイミダゾールを加えることによりアミノ酸の
Ｎ−）リメチルシリルアミノ・トリメチルシリルエステ
ルとする。

ここで分離されてくるのはイミダゾールであシ反応には
伺ら関与しない。次いで活性エステル（ピリジルチオエ
ステル）を加える。

ことで分離してくるのは２−ピリジンチオールである。

このような反応条件下では、弱塩基などの触媒を加える
必要はない。又、中間体としてのシリル化されたアミノ
酸を単離する必要もない。

反応系中に存在する化合物は、はぼ中性でありラセミ化
の心配は全く麦い。反応条件としては室温以下が好まし
く、室温ないし一２０℃で反応は進むことより、温度制
御はいらない。

反応終了後、水洗することによジイミダゾール。

２−ピリジンチオールは除去出来る。

これにより漉網後、再結晶、カラムクロマトグラフィー
、分取薄層クロマトグラフィー等によシ容易に精製でき
る。

アミノ酸の種類、溶媒、反応時間などを検討することに
よ多収率は定量的になると考えられる。

本発明の方法を用いると、溶媒が適応できるものであれ
ば、理論上はいくらでも啄プテド鎖をのばすことができ
る。

（実施例） 以下に実施例および参考例でもって本発明をさらに具体
的に説明するが、これら実施例に本発明が限定されるも
のでないのはいうまでもない。

実施例Ｉ Ｎ−（ベンジルオキシカルボニル）−Ｌ−バリル−２−
アミノ−４−はンテン酸 Ｌ−アリルグリクン（２３０η）のジメチルホルムアミ
ド（５ｍｌ）＃濁液にトリメチルシリルイミダゾール（
５６０ｗ９）を窒素気流下、室温で加え１時間攪拌した
。

次に、Ｎ−ペンジルオキシカルボニルノミリンピリジル
チオエステル（５５０■）のジメチルホルムアミド溶液
（３＋ｔ／）を室温で加え、２時間攪拌した。

反応液を水にあけ、ＩＮ塩酸でｐＨ２とし。

３０分攪拌したのち酢酸エチル（２００肩ｌ）で３回抽
出を行い、有機層を飽和食塩水で洗浄、乾燥後濃縮し粗
結晶５００ｗ１（収率８８％）を得た。

クロロホルム・ヘキサンで再結晶し４６７■（収率８１
％）の標記化合物を得た。

実施例１においてトリメチルシリルイぐダゾールは以下
の実験例によシ２肖曾が最適であることが判った。

又溶媒の影響をみるため以下の溶媒で実施例１と同じ方
法を用いて実験した。

標記化合物をエーテルにとかし過剰のジアゾメタンを加
えることによｊ）Ｎ−（インジルオキ７カルボニル）−
Ｌ−ノζリルー２−アミノー４−ペンテン酸メチルエス
テルとした。

メチルエステルの物性を以下に示す。

融虚：１１６．５−１１７．０℃ 〔α）Ｄ：＋１２．９°　（Ｃ−１，０１，クロロホル
ム）ＩＨス−＜クトル（クロロホルム’ム、　Ｃｍ−’
）：３４５０゜１７４０．１７２（１，１６８０ マススペクトル（ｍ／ｚ）：３６３（Ｍ＋１）”、２５
４゜ＮＭＲスペクトル（ＣＤ（Ｊ３．　　δ）：０．８
７（３Ｈ，ｄ。

Ｊ−７，０Ｈ２）、０．９３　（３Ｈ，ｄ、Ｊ＝７．０
Ｈｚ）。

２．０６（ＩＨ，ｍ）、２．４８（２Ｈ，ｔ、’　　Ｊ
−７，０Ｈｚ）。

３．６８（３Ｈ，ｓ）、４．００（ＩＨ，ｄｒｌ、Ｊ＝
６゜８．５　ＨＺ　）　＋　　４６０　（Ｉ　Ｈ、ｌ　
ｔ　ｙ　　Ｊ−６，８，５Ｈｚ）　＃５．０４（２Ｈ，
ｅ）、　６．４６（１馬ｄ、　Ｊ＝８．５）。

７．２８（５Ｈ，ｓ） 実施例２ Ｎ−（ベンジルオキシカルボニル）−バリル−Ｌ−メチ
オニン Ｌ−メチオニン（９０１ｎｇ）のジメチルホルムアミド
懸濁液（２ｍＪ）に室温、窒素気流下トリメチルシリル
イミダゾール（１７６μｌ）を加え、２時間攪拌した。

次いでＮ−ベンジルオキシカルボニル−Ｌ−バリンピリ
ジルチオエステル（１７０１１１ｖ）のジメチルホルム
アミド溶液（２ｍ／）を加え１４時間攪拌した。

ＩＮ塩酸３ｍｌを加え反応を止め、酢酸エチル抽出稜、
有＠層を実施例１と同様に処理し白色結晶として標記化
合物１６８■（収率８９チ）を得た。

融点：１８０−１８２゜ 〔α〕Ｄニー２２．６°（Ｃｍ１．０５．クロロホルム
）ＩＲスペクトル（ヌジョール、ｃｍ　　）：３３５０
゜３３００．１７４０．１６４０ マススペクトル（ｍ／ｚ）：２７６．２０３，１８３Ｎ
ＭＲスはクトル（ＣＤ３０Ｄ、δ）：０．９６（３Ｈ，
ｄ。

Ｊ＝７．０Ｈｚ）、０．９９（３Ｂ、（１，Ｊ−７，０
Ｈｚ）。

２．０５　（３Ｈ，ｅ　）、　　３．９６　（ＩＨ，ｄ
、　　Ｊ＝８．０Ｈ２）。

４、’５８　（ＩＨ，ａａ、Ｊ＝４．８Ｈ２）、５．０
８　（２Ｈ。

８）、７．３２（５Ｈ，Ｂ）。

実施例３ Ｎ−（−＜ンジルオキシカルボニル）−バリル−Ｌ−フ
ェニルアラニンメチルエステル Ｌ−フェニルアラニン（９９■）のジメチルホルムアミ
ド懸濁液（１ｍ／）、）リメテルシリルイミダゾール（
１７６μりおよびＮ−ベンジルオキシカルボニル−Ｌ−
バリンの２−ピリジルチオエステル（１６７１１１１＞
）のジメチルホルムアミド溶液（ｌｊＩｅ）を用い実施
例２と同様に反応し、処理するととによシ得られた粗結
晶を５＋＋／の酢酸エチルにとかし過剰のジアゾメタン
のエーテル溶液を加えメチルエステルとした。

濃縮後、シリカゲルカラムクロマトグラフィーに付しエ
ーテル・ヘキサン（２５ニア５）で溶出し白色結晶とし
て標記化合物１７１η（収率８６チ）を得た。

融点：１４２−１４３℃ 〔α）Ｄ：＋３６．６°（Ｃ−１，１，クロロホルム〕
マススペクトル（ｍ／ｚ）：４１２（Ｍ”）、３０４゜
エＲス投りト化（クロロホルム、　ｃｍ−”）　：　３
４５０゜３３５０．１７５０，１７４０゜ １７３０、　１６８Ｏ ＮＭＲス投クトり（ＣＤＯＡ！３．　　δ）：ｏ、５７
（３Ｈ。

ｄ、　　Ｊ−６，０Ｈ２）、　０．９３（３Ｈ，（１，
Ｊ＝６．０Ｈ２）＊２．０８　（Ｉ　Ｈ，ｑ、　　Ｊ−
６Ｈｇ）、　　３．１０　（２Ｈ，ｄ。

Ｊ−６Ｈｚ）、　　３．７２　（３Ｈ，ｓ　）＊　　４
．００　（Ｉ　Ｈ’、　ｄ　ｄ。

Ｊ−６＊　９　Ｈｚ　）　＋　４８８　（Ｉ　Ｈ＊　ｄ
ｔ　、　Ｊ−６ｒ　８　Ｈｚλ５．１０　（２Ｈ，ｓ　
）、　５．３４　（Ｉ　Ｈ，ｄ、　Ｊ−９Ｈｚ）。

６．３６（ＩＨ，（１，、Ｊ−８Ｈ２）、７．３６（５
Ｈ，ａ）。

７．０−７．４　（５Ｈ，ｍ　） 実施例４ Ｎ、−（ベンジルオキシカルボニル）バリルグリシグリ
シン（１００ｍｇ）のジメチルホルムアミド懸濁液（１
ｍｅ）、）リメチルシリルイミダゾール（３９０μｌ）
およびＮ−ベンジルオキシカルボニル−Ｌ−バリンのピ
リジルチオエステル（３８１ｙｚｑ　）のジメチルホル
ムアミド４溶液（１，（１ｍＪ）を用い実施例１と同様
に処理し、室温で１６時間反応させた。実施例１と同様
に処理し得られた油状物を酢酸エチルにとかし、ジアゾ
メタンのエーテル溶液を加えメチルエステルとした。こ
のメチルエステルをシリカゲルのカラムクロマトグラフ
ィー（溶出溶媒：エーテル）に付し３７７１１１９の標
記化合物を白色結晶として得た（収率９７チ）。

融点：１５９．５−１６１．５℃ 〔α）ｐニー１３．１°（Ｃ−１，１６，メタノール）
工Ｒスはクトル（クロロホルム、ｃｍ　　）：３４５０
゜１７５０．１７４０，１７２０゜ マススハクトル（ｍ／　ｚ　）　＊　３２２　（Ｍ”　
）　＊　　２５５　＋ＮＭＲスはクトル（ＣＤＣ１３，
δ）　：０．９４　（３Ｈ，（１゜Ｊ＝７Ｈｚ）、　０
．９８　（３Ｈ，ｄ、　　Ｊ−７Ｈ２）、　２．０５（
Ｉ　Ｈ，ｑ、　　Ｊ−７Ｈ２）、　　３．７２　（３Ｈ
，８）＊３．９０−４．２２　（３Ｈ，ｍ）、　　５．
０８　（２Ｈ，８）＊５．５８　（Ｉ　Ｈ，ｃｌ、　　
Ｊ−９Ｈ２）　＋　　６．８０　（Ｉ　Ｈ。

ａａ、　　Ｊ−５，６Ｈｚ）、　　７．３２（５Ｈ，ｓ
）実施例５ Ｎ−（ベンジルオキシカルボニル）−Ｌ−パリルーＬ−
スレオニンメチルエステル Ｈ Ｌ−スレオニン（２３，８１ｎｇ）のジメチルホルムア
ミド懸濁液（０，５罰）に室温、全素気流下トリメチル
シリルイミダゾール（８８μｌ）を滴下し攪拌し半透明
の溶液を得た。次にＮ−ベンジルオキシカルボニル−Ｌ
−バリンピリジルチオエステル（６８１１９）のジメチ
ルホルムアミド溶液を滴下し実施例４と同様に処理して
得られた油状物を過剰のジアゾメタン・エーテル溶液と
処理した。粗生成物をシリカゲルのカラムクロマトグラ
フィーに付し標記化合物を白色結晶として得た。収４１
２９．５■、収率４１％。

融点：１４１−１４２℃ 〔α］Ｄニー８．３°（Ｃ−ｔ、Ｏ，クロロホルム）マ
ススハクトル（ｍ／ｚ）：３６６（Ｍ”）、３２２ＩＲ
スペクトル（りａｃｔホルム、　ｃｍ−”）　：３４５
０゜１７５０．１７３０，１７１０゜ ６８Ｏ ＮＭＲスペクトル（ＣＤＣ１３，δ）：０．９３（３Ｈ
，ｄ。

Ｊ−７Ｈ２）、　０．９６（３Ｈ，ｄ、　　Ｊ−７Ｈｚ
）、　　１．１６（３Ｈ，ｄ、Ｊ−７Ｈｚ）、３．７０
（３Ｈ，ｓ）。

４．０５　（ＩＨ，ｄｄ、　Ｊ−７，９Ｈ２）、　　４
．５８　（Ｉ　Ｈ。

ａｄ、　Ｊ−２，５，８Ｈｚ）、　５．０５（２Ｈ，ｓ
）、　　５．７０（ＩＨ，ｅＬ、　Ｊ＝８Ｈｚ）、　７
．１１　（ＩＨ，ｄ、　Ｊ＝９Ｈｚ）、　　７．３０（
５Ｈ，ｅ） 実施例６ Ｎ−（ベンジルオキシカルボニル）−Ｌ−バリル−０−
（１−ブチルジメチルシリル）−Ｌ−スレオニンメチル
エステル ０−ｔ−ブチルジメチルシリル−Ｌ−スレオニン３８■
のジメチルホルムアミド（０，５ｍｌ　）懸濁液ととト
リメチルシリルイミダゾール４９μノを用い、３０分攪
拌することにより得られた透明な溶液にＮ−インジルオ
キシカルボニル−Ｌ−バリンピリジルチオエステル５６
１ｖのジメチルホルムアミド（０，５ｍ／）ｉ液を滴下
し、室温で３時間反応させた。

０．５Ｎ塩酸２ｒｘｌを加え、酢酸エチルで抽出し常法
通夛処理し得られた粗生成物に過剰のジアゾメタン・エ
ーテル溶液を加えエステル化した。このエステル化物を
シリカゲルのカラムクロマトグラフィーに付し、インイ
ン・酢酸エチル（３：１）で溶出し標記化合物５５■（
収率７ｏ％）を油状物として得た。

〔α）　Ｄ：　＋　４．３１°（Ｃ−１，１６，クロロ
ホルム）−ｒ　ｘ　、Ｘ−！：クトル（ｍ／ｚ）：４８
１（Ｍ＋１）”。

４２３．３１５ ＩＲスＲクトル（フィルム＃　ｃｌＩＬ−”）　：３４
５０゜３３００．１７２５，１６７Ｏ ＮＭＲス−！！り）　ル（ＣＤＣ１ａ　ｅ　　ａ　）　
：　ｏ、　ＯＯ（３Ｈ２ｓ）、０．０６（３Ｈ，ｓ）、
０．８５（９Ｈ，ａ）。

１．００（３Ｈ，ｄ、　　Ｊ−７Ｈ２）、　　１．０３
（３Ｈ，ｄ。

Ｊ−７Ｈ２）、１．１７（３Ｈ，ｄ、Ｊ−７Ｈ２）、２
．１６（ｘｎｔ　ｑＩ　　ＬＴ−７Ｈｚ）、　　３．７
０（３Ｈ，８）。

４．１３　（Ｉ　Ｈ，ａｄ、　　Ｊ＝６．　８Ｈｓ）、
　　４．３５−４．６０（２Ｈｌｍ）　−５，１２（２
Ｈｔ　　ａ　）　＊　　５．５０　（Ｉ　Ｈ−ｄ、Ｊ−
８Ｈｚ）、６．３６（ＩＨ，ｄ、Ｊ−８Ｈｚ）。

７．３５（５Ｈ，ｓ） 実施例７ Ｎ−（ｔ−ノドキシカルボニル）−２−アミノ−４−Ｒ
ンテノイルー０−（ｔ−ブチルジメチルシリル）−Ｌ−
スレオニンメチルエステル数Ｃ００Ｃ（ＣＨ３）３ ０ｆｔ−ブチルジメチルシリルスレオニン（９５３■　
４．０　ｍｍｏｌ）のジメチルホルムアミド溶液（８，
０ｍ！りにトリメチルシリルイミダゾール（１，１７ｍ
１８．０ミリモル）を加え、窒素雰囲気下室温で１時間
攪拌すると、透明な溶液となった。

この溶液に、Ｎ−ｔ−フトキシカルボニルアリルグリシ
ンチオビリジルエステル（１，０５Ｎ、３．４ミリモル
）の塩化メチレン溶液（１（１ｍ／）を、室温攪拌下ゆ
っくり滴下した。その後室温で一晩攪拌したものを、水
にそそぎ込み、１０％クエン酸水溶液でｐＨ３にした後
、酢酸エチルで数度抽出した。有機層を無水硫酸マグネ
シウムで乾燥後、沖過、溶媒を減圧留去し、黄色油状物
の反応混合物を得た。（２，２５Ｊｉ’） この反応混合物の一部（４１４■）のエーテル溶液に、
ジアゾメタンエーテル溶液を加えたのち。

溶液を留去し、得られた無色油状物をカラムクロマトグ
ラフィーに付しくエーテルｌヘキサン−１／１）Ｎ−ｔ
−ブトキシカルボニルアリルグリシン−〇　−ｔ　−−
７チルジメチルシリルスレオニンメチルエステルを得た
。（２５２ｗ９　　収率９５チ）性状：無色油状物質 ＩＲｘベクトル（フィルム＃　””−”　）　：　３４
５０　＊３３３５．３０８０．１？６０゜ １７２０．１６８５ マスス／％！’クトル（ｍ／ｇ）：４４ｓ（Ｍ＋１）”
、４００゜ＮＭＲスにクトル（ＣＤＣＪ３．　　δ）ニ
ー０．０４（３Ｈ。

８Ｌ　　０．０２（３Ｈ，ｓ）、０．８３（９Ｈ，ｓ）
。

１−１４　（３Ｈ２６ｐ　　Ｊ−７０Ｈｔａ　）　、１
−４２　（９Ｈｓ　　ｓ　）　ｓ２．５２　（２Ｈ＝　
　ｍ　）ｓ　　３，６８　（３Ｈ，ｓ　）ｓ　　４．１
〜４６　（３Ｈ９ｍ　）　＋　　５−０〜５−３　（３
Ｈ２ｍ　）＊　５１８０　’（Ｉ　Ｈ−ｄｄｔ、　Ｊ＝
１８．０　、１０．０　、７．０Ｈ２）　、６．６７　
（ＩＨ，ｄ、、　１０．０＆）実施例８ Ｎ−（ｔ−ノドキンカルボニル）−２−アミノ−４−ペ
ンテノイル−０−（ｔ−ブチルジメチルシリル）−Ｌ−
スレオニル−２−アミノ−ペンテン酸メチルエステル アリルグリンン（２５５ｗ９２．２ミリモル）のジメチ
ルホルムアミド溶液（５ＭＩりにトリメチルシリルイミ
ダゾール（０，６５ｍＪ　　４．４ミリモル）を加え、
室温下１時間攪拌し透明な溶液を得た。この溶液に、Ｎ
−ｔ−プトキ７カルボニルアリルグリシン−０−ｔ−、
／チルジメチルシリルスレオニンチオピリジルエステル
（９６６１ｖ　１．８５ミリモル）の塩化メチレン溶液
（８ｄ）を窒素気流下。

室温で滴下し、その後−晩攪拌を行なった。この反応溶
液を水にそそぎ込み、１０チクエン酸水溶液でｐＨ３に
したのち、酢酸エチルで数度抽出した。有機層を無水硫
酸マグネシウムで乾燥後、濾過、溶媒を減圧留去し、黄
色油状物を得た。

このもののエーテル溶液（１０ｍｌ）にジアゾメ□　タ
ンエーテル溶液を、θ℃水水冷下見たのち、溶媒を留去
し、得られた無色油状物をカラムクロマトグラフィーに
付し、（エーテル／ヘキサン−１／１）で溶出し、標記
化合物８７５■（ｉｆ’、’率８８チ）を得た。

性状：無色結晶 融点：１３５−１３６．５℃（再結晶溶媒：へキサン）
ＩＨスにクトル（クロロホルム、備−”）：３４２０゜
３３８０．３０８０，１７４０゜ １７１５、　１６７０ −ｒ　スｘｄクトル（ｍ／ｚ）：　５４２　（Ｍ＋１　
）＋、４９７゜ＮＭＲス４クトル（ＣＩ）Ｃ１３，δ）
：０．１４（θ５３ＨＬＯ，１７（θｙ　　３　Ｈ）　
ｓ　　Ｏ，９３（９Ｈ＋　　θ）、１．１２（ＦＨ，ａ
、　Ｊ−６，０Ｈ２）、　　１．４５（９Ｈ，ｓ）。

２．５３（４Ｈ，ｍ）、３．７４（３Ｈ，ｓ）、４．１
９（ＩＨ，ｄ、　　Ｊ−６，０Ｈｚ）、　　４．３６（
ＩＨ，ａｄ、　　、Ｔ−７，０，３，０Ｈ２）、　　４
．４１　（Ｉ　Ｈ，ｂｒｓ）、　　４．６５（Ｉ　Ｈｐ
　ｑ　＊　　Ｊ＋＝７．０　Ｈ２）ｓ　　５．００　（
Ｉ　Ｈ，ｂｒｓ　）　Ｃ５，１〜５．２　（４Ｈ，ｍ）
、　　５．６〜５．８　（２Ｈ，ｍ）。

７．０２　（］　Ｈ，ｄ、　　Ｊ−６，０Ｈ２）、　　
７．２９　（Ｉ　Ｈ，ｄ。

Ｊ−７，ａＨ２）。

この化合物（実施例８）を０．５　Ｎ水酸化ナトリウム
水溶液で加水分解することによｐＮ−（ｔ−ブトキンカ
ルボニル）−２−アミノ−４−−！ンテノイルー０−（
ｔ−メチルジメチルシリル）−Ｌ−スレオニル−２−ア
ミンはンテン酸を得た。

性状：無定形結晶 ＮＭＲｘベクトル（１００ＭＨ２−ＣＤ　ａ　ＯＤ　ｅ
　　δ）＝０．０８（３Ｈ，ｓ）、０．１０（θ、３Ｈ
）、０．９２（９Ｈ，ｅ）、１．１６（３Ｈ，ｄ、、Ｔ
−６，０Ｈｙｓ）。

１．４５　（９Ｈ−８）　＃　　２．５２　（４Ｈｅ　
　ｍ　）−４，０〜６．０　（１２Ｈ，ｍ）、　　７．
６８　（］　Ｈ，ｄ、　Ｊ＝８．０Ｈ２）。

７．８１　（Ｉ　Ｈ，ｄ、　　Ｊ−８，０Ｈｚ）。

実施例９ （２８，３Ｒ）−１’Ｊ−（ｔ−ブトキシカルボニル）
−２−アミノ−３−（テトラヒト９０ピラニル）オキシ
−４−（ｔ−プチルジメチルシリルオキンフェニル）−
プテロイル−０−（ｔ−ブチルジメチルシリル）−スレ
オニンピリジンチオエステル０−（ｔ−ブチルジメチル
シリル）−スレオニン３５＃ｖを無水Ｎ、Ｎ−ジメチル
ホルムアミドゞ０．３　ｘｉに懸濁し、トリメチルシリ
ルイミダゾール４４μノを加え窒素下、室温で１時間攪
拌した。

参考例３の化合物４５．５■の無水ジメチルホルムアミ
ド（０，７ｍ１）溶液を次いで上記のシリル化物に室温
で加えさらに１５時間攪拌した０反応液に水を加え、Ｉ
ＮｔｉＡ酸でｐＨ４としたのち酢酸エチルで抽出した。

有機層を無水硫酸マグネシウムで乾燥、＃縮して油状物
を得た。

この油状物を無水ジクロロメタン０．５１１／にとかし
、トリフェニルホスフィン２３．８■およびジピリジル
ジスルフィド１６．７■を加え窒素気流下室温で１．５
時間攪拌した。

反応液を減圧濃縮し、得られた油状物質をシリカゲルの
カラムクロマトグラフィーに付しエーテル・ヘキサン（
１：１）で溶出し標記化合物３８９１１Ｉｇ（収率６３
％）を得た。

性状二油状物質 ＮＭＲス４クトル（ＣＤＣ１３Ｉ　δ）：０．０１．　
０．０５（各３Ｈ，ｓ）、０．１６（６Ｈ，ａ）、０．
８８と０．９０（各８．あわせて９Ｈ）、α９５（９Ｈ
，ｓ）、１．１４と１．２０（各ａ、　ａＨ，Ｊ−５Ｈ
ｚ）、　１．４８（９Ｈ。

ｂｒｓ）、　　６．７２と６７３（各ｄ、　２Ｈ，Ｊ−
８Ｈ２）。

７．０９　（２Ｈ，ｄ、　　Ｊ＝８Ｈ２）、　　７．１
６〜７．８０（３Ｈ，ｍ）、８．５９（ＩＨ，ａ、Ｊ−
５Ｈ２）。

参考例Ｉ Ｎ−（ｔ−ノドキシカルボニル）−２−アミノ−４−ペ
ンテノイックアシッドチオピリジルエステル Ｎ−ｔ−ブトキシカルボニルアリルグリシン（５００■
　２．３　ｍｍｏｌ）の塩化メチレン溶液（８厘ｊ）に
、：）ピリジルジスルフィド”（５１２１９゜２．３ミ
リモル）１次いでトリフェニルホスフィン（７３１ｍｇ
、２．８ミリモル）を加えた。室温で一晩攪拌した抜、
溶媒を減圧留去し、得られた反応混合物をカラムクロマ
トグラフィーに付しくエーテルｌヘキサン−２／３）Ｎ
−ｔ−ノドキシカルボニルアリルグリシンチオピリジル
エステルを淡黄色油状物として得た。（６５０ｗｉ、収
率９１％）性状：淡黄色油状物質 ＮＭＲス−ｅクトル（１００ＭＨ２，ＣＤＣｌ３．　δ
）：１．４４　（９Ｈ，ｓ）、　　２．５４　（２Ｈ，
ｍ）、　　４．４８（Ｉ　Ｈ，ｄｔ、　　Ｊ−７，０，
７，５Ｈ２）、　　５．０〜５．３（３Ｈ，ｍ）、　　
５．７０　（ＩＨ，ａａｔ、　Ｊ−１８，０゜９．０．
　７．０Ｈ２）、　　７．２３（ＩＨ，ｄｄｄ、　　ｔ
Ｔｘ７．ｏ。

５．０．　２．０Ｈ２）、　　７．５４　（ＩＨ，ａａ
ａ、　　Ｊ−８，０゜２．０．ｔ、ｏＨｚ）＋　　７．
７０（ＩＨ，ｄｄｄ、、ｒ−Ｂ、０゜７．０．　２．０
Ｈ２）、　　８．５６　（Ｉ　Ｈ，ａａａ、　　Ｊ−５
，０゜２．０．　１．０Ｈ２）。

参考例２ Ｎ−（ｔ−ノドキシカルボニル）−２−アミノ−４−イ
ンテノイル−０−（ｔ−ブチルジメチルシリル）−Ｌ−
スレオニンチオピリジルエステル実施例７で得られたＮ
−ｔ−ブトキシカルボニルアリルグリシン−〇−ｔ−ブ
チルジメチルシリルーＬ−スレオニン（１，３＃　）の
塩化メチレン溶液（Ｂａｔ）に、ジピリジルスルフィド
（４４０り　。

次いでトリフェニルホスフィン（６２９■）ヲ加え、室
温下４時間攪拌した。溶媒を減圧留去したのちカラムク
ロマトグラフィーに付しくエーテル／ヘキサン−２／３
）Ｎ−ｔ−ノドキシカルボニルアリルグリシン−〇−ｔ
−ノチルジメチルシリルスレオニンチオピリジルエステ
ル８４２■（収率８２チ）を淡黄色油状物として得た。

性状：淡黄色油状物質 ＮＭＲス−ｅクト＃（６０ＭＨｚ、ＣＤＣｌ３．　　δ
）ニー−０，０４（３Ｈ，θ）ｔ　　Ｏ，０２（３Ｈ，
ｓ）　、　　０．８５（９Ｈ，ｓ　）、　　１．１１　
（３Ｈ，ａ、　Ｊ−７，０Ｈ２）。

１．４０（９Ｈ，ｅ）、２．５８（２Ｈ，ｍ）、４．０
−６．０　（７Ｈ，ｍ）、　　６．６〜８．６　（５Ｈ
，ｍＬ参考例３ （２８，３Ｒ）−４−（４−ｔ−ブチルジメチルシリロ
キシフェニル）−３−（２−テ）、＞ヒト９０ピラニル
）オキシ−２−Ｎ−ｔ−ノドキシカルボニルアミノ酪酸
−２−ピリジルチオールエステル（２Ｓｓ　　３Ｒ）−
４−（４−ｔ−ブチルジメチル７リロキシフエニル）−
３−（２−テトラヒドロピラニル）オキシ−２−Ｎ−を
−ブトキシカルボニルアミノ酪酸１．０３＃を無水ジク
ロロメタン１０ｆｆｉ／にとかし、トリフェニルホスフ
ィン９５４■、ジピリジルスルフィド 気流下４０℃で８．５時間、室温で１４時間攪拌した。

反応液を濃縮し、シリカゲルカラムクロマトグラフィー
に付しヘキサン：エーテル（１：１）で溶出し標記化合
物８４６■（収率６９％）を得た。

性状：油状物質 ＩＲスペクトル（フィルム、ｃＷＬ　）：３４５０゜マ
ススペクトル（ｍ／ｚ）　：　４６４ＨＭＲスはクトル
（ＣＤＣ１３，δ）：０．１６（６Ｈ，θ）。

ｏ、　９６　（９Ｈｔ　ｓ　）　ｔ　１．５４　（９Ｈ
−８）、６．７４および７０６（各２Ｈ，ａ、　Ｊ−ｇ
Ｈｚ）、　　７．２４（ＩＨ。

ｍ）、　　７．４４〜７．８０　（２Ｈ，ｍ）、　　８
．５２　（ＩＨ。

ｍ）・ （発明の効果） 本発明の方法を用いることによりペプチドを合成するこ
とができる。この方法の特命は有機溶媒を用いることで
あり、可溶化できる溶媒があれば理論上はどんな高分子
のペプチドも合成できると考えられる。本発明の方法に
よシ得られるペプチドはホルモン、農薬、食品等巾広い
分野で応用できる基本的物質なので、該はプチドを効率
よく生成できる本発明の方法は当分野に神益するところ
大であろう。

（外５名） ＱＱち−

Claims (1)

1. 【特許請求の範囲】 １、一般式（１） ▲数式、化学式、表等があります▼（１） 〔式中Ｒ＾１は水素原子、炭素数１〜１０のアルキル基
   、炭素数２〜６のアルケニル基、フェニル基、炭素数７
   〜９のアルアルキル基、保護または無保護の水酸基で置
   換された炭素数１〜６のアルキル基、保護または無保護
   の水酸基で置換された炭素数７〜９のアルアルキル基、
   低級アルキルチオ基で置換された炭素数２〜６のアルキ
   ル基、保護または無保護のチオール基で置換された炭素
   数１〜４のアルキル基またはインドリルメチル基を表わ
   し、 Ｒ＾２は水素原子、アミノ基の保護基または基▲数式、
   化学式、表等があります▼ （ここでＲ＾１は前記と同一意義を表わし、Ｒ＾４は水
   素原子またはアミノ基の保護基を表わす）を表わし、 Ｒ＾３は水素原子または低級アルキル基を表わす〕を有
   するペプチドを製造する方法であつて、一般式（２） ▲数式、化学式、表等があります▼（２） （式中Ｒ＾５は水素原子、炭素数１〜１０のアルキル基
   、炭素数２〜６のアルケニル基、フェニル基、炭素数７
   〜９のアルアルキル基、保護または無保護の水酸基で置
   換された炭素数１〜６のアルキル基、保護または無保護
   の水酸基で置換された炭素数７〜９のアルアルキル基、
   低級アルキルチオ基で置換された炭素数２〜６のアルキ
   ル基、保護されたチオール基で置換された炭素数１〜４
   のアルキル基またはインドリルメチル基を表わす）を有
   するα−アミノ酸をトリアルキルシリルイミダゾールと
   反応させ、次いで一般式（３） ▲数式、化学式、表等があります▼（３） 〔式中Ｒ＾６は水素原子、炭素数１〜１０のアルキル基
   、炭素数２〜６のアルケニル基、フェニル基、炭素数７
   〜９のアルアルキル基、保護された水酸基で置換された
   炭素数１〜６のアルキル基、保護された水酸基で置換さ
   れた炭素数７〜９のアルアルキル基、低級アルキルチオ
   基で置換された炭素数２〜６のアルキル基、保護された
   チオール基で置換された炭素数１〜４のアルキル基また
   はインドリルメチル基を表わし、 Ｒ＾７はアミノ基の保護基または基 ▲数式、化学式、表等があります▼ （ここでＲ＾６は前記と同一意義を表わし、Ｒ＾８はア
   ミノ基の保護基を表わす〕 を有する活性エステル化合物を有機溶媒中反応させるか
   、反応させたのち脱保護するか、又は反応させたのちア
   ルキル化することを特徴とする方法。 （２）トリアルキルシリルイミダゾールがｔ−ブチルジ
   メチルシリルイミダゾール、トリメチルシリルイミダゾ
   ール、トリエチルシリルイミダゾール、ジメチルフェニ
   ルシリルイミダゾールまたはｔ−ブチルジフェニルシリ
   ルイミダゾールである特許請求の範囲第１項記載の方法
   。 （３）ペプチド形成反応に用いられる溶媒がアミド系溶
   媒、エーテル系溶媒または塩素系溶媒である特許請求の
   範囲第１項記載の方法。 （４）ペプチド形成方法における反応温度が３０〜０℃
   である特許請求の範囲第１項記載の方法。 （５）反応に用いられるトリアルキルシリルイミダゾー
   ルの量が前記式（２）のα−アミノ酸基に対し１〜２当
   量である特許請求の範囲第１項記載の方法。 （６）前記式（２）および（３）が光学活性体である特
   許請求の範囲第１項記載の方法。 （７）前記式（１）が光学活性体である特許請求の範囲
   第１項記載の方法。