JPS62234071A - 新規なアミノ酸誘導体 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 〔産業上の利用分野〕 本発明は医薬品として有用なアミノ酸誘導体およびそれ
らの薬理学的に許容される酸付加塩に関するものである
。

さらに詳しく述べれば、本発明はヒトレニン（ｈｕｍａ
ｎ　ｒｅｎｉｎ）阻害作用を有し、経口投与可能な高血
圧症治療剤として有用な、新規なアミノ酸誘導体および
それらの薬理学的に許容される酸付加塩を提供するもの
である。

〔従来の技術〕

レニンは肝臓の傍系球体細胞から遊離する蛋白分解酵素
であり、血漿のα２グロブリン分画中にあるレニン基質
に反応してアンジオテンシン■（ａｎｇｉｏｔｅｎｓｉ
ｎ　　Ｉ　）を生成させる。生成したアンジオテンシン
■はアンジオテンシン変換酵素によりアンジオテンシン
ｆｌ　（ａｎｇｉｏｔｅｎｓｉｎ　　ＩＩ　）に変換さ
れるが、このアンジオテンシン■は、血管収縮作用を有
するとともに、副腎皮質に働き、ナ）　ＩＪウムや水の
代謝に影響するアルドステロン（ａｌｄｏ−ｓｔｅｒｏ
ｎｅ）を分泌させる、高血圧症の一つの因子である。

このような、レニンとレニン基質との反応を阻害し、ア
ンジオテンシンＨの生成を抑制する化合物は、新しい作
用機作による高血圧治療剤として注目され、その開発が
強く要望されている。

今までにレニンとレニン基質との反応を阻害、すなわち
レニン活性阻害作用を有する化合物として、多くのペプ
チド誘導体が知られている。（日本特許公告公報昭５８
−３９１４９号、日本特許公開公報昭５９−１１０６６
１号、ヨーロッパ特許公開公報７０７０２９号、同７７
０２８号、同８１７８３号）しかしながら、これらの特
許出願等に開示されている化合物群はほとんどポリペプ
チド類で、その合成が厄介であり、かつ体内の蛋白分解
酵素、例えばキモ）ＩＪプシン（ｃｈｙｍｏｔｒｙｐｓ
ｉｎ）などで分解され、経口投与においてはその薬理効
果を発揮することが期待できないものである。

また、構造が簡単で製造が比較的容易なペプチド類でレ
ニン活性阻害作用を有するものも見出されている。（日
本特許公開公報昭５９−１５５３４５号、同昭５９−２
２７８５１号）　これらの特許出願に開示されている化
合物はジ、トリまたはテトラペプチド誘導体であり、上
記のポリペプチド類に比べ製造は容易であるが、なお蛋
白分解酵素に対しては不安定であり、経口投与において
その薬理効果を発揮することが期待し難いものである。

〔発明が解決しようとする問題〕

従来より知られているレニン活性阻害作用を有するペプ
チド誘導体はいずれも蛋白分解酵素に対し、不安定で、
経口投与においてその薬理効果を発揮することが期待し
難いものである。

本発明の目的は、このような問題を解決しうるような強
いレニン活性阻害作用を有し、しかも経口投与可能なア
ミノ酸誘導体およびそれらの薬理学的に許容される酸付
加塩を提供することである。

〔問題点を解決するための手段〕

本発明者らは強いレニン活性阻害作用を有し、かつ経口
投与においてもその薬理効果を発揮できる化合物を見出
すべく種々研究を重ねた結果、−（式中のＨｉｓはＬ−
ヒスチジル基であり、Ｘは一〇−または−ＮＨ−であり
、Ｒは炭素数１〜７の直鎮状または枝分かれ状のアルキ
ル基である）で表されるアミノ酸誘導体およびそれらの
薬理学的に許容される酸付加塩が良好な作用を有してお
り、問題点が解決できることを見出し、本発明を成すに
至った。

本発明の一般式（Ｉ）で表されるアミノ酸誘導体および
それらの薬理学的に許容される酸付加塩は、ヒトレニン
−羊レニン基質系およびヒト高レニン血漿で強いレニン
活性阻害作用を示す。またキモトリプシン、ペプシンの
ような蛋白分解酵素に対し安定であり、高レニン状態の
サルに経口投与した場合、顕著なしかも持続性の、血漿
中レニン活性低下作用を発揮する。

従って、本発明の一般式（Ｉ）で表されるアミノ酸誘導
体およびそれらの薬理学的に許容される酸付加塩は、経
口投与可能な高血圧症治療剤として有用である。

本発明者らは先に、一般式 （式中のＨｉｓＳＸおよびＲは前記と同じ意味をもつ）
で表される化合物を含む一連のアミノ酸誘導体およびそ
れらの薬理学的に許容される酸付加塩が強いレニン活性
阻害作用を存し、しかも蛋白分解酵素に対し安定で、経
口投与可能な高血圧症治療剤として有用であることを見
出し、既に特許出願している。（日本特許出願昭６０−
７９７２６号）本発明者らは、この−般式（ｎ）の化合
物よりさらに優れた化合物を見出すべく研究を重ねた結
果、側鎖のイソブチル基をシクロヘキシルメチル基に変
換することによって、レニン活性阻害作用が増大し、し
かも持続性が高まることを見出し、本発明を完成させた
。

本発明の一般式（Ｉ）の化合物は対応する一般式（ｎ）
の化合物に比べ、ヒトレニン−羊レニン基質系でのレニ
ン活性阻害作用が強い。また、高レニン状態のサルに経
口投与した場合の血漿中レニン活性阻害作用および作用
時間においても優れた効果を示す。

本発明の前記一般式（Ｉ）で表されるアミノ酸誘導体は
、式 一般式 （式中のＸおよびＲは前記と同じ意味をもつ）で表され
る化合物とを反応させるか、あるいはまた、式 化合物と前記一般式（ｒＶ）で表される化合物とを縮合
剤を用いて縮合させることなどにより製造することがで
きる。

これらの反応で出発原料として用いられる式（Ｉ［Ｉ）
および式（Ｖ）で表される化合物は前記日本特許出願昭
６０−７９７２６号に記載した方法あるいはそれに準じ
た方法に従って製造することができる。

すなわち、コハク酸エチルと１−ナフトアルデヒドを塩
基、例えば水素化す）ＩＪウムの存在下に反応させ、次
いで水酸化ナトリウムで加水分解して２−（１−ナフチ
ルメチレン）コハク酸を得る。これを無水酢酸で処理し
て、２−（１−ナフチルメチレン）無水コハク酸を得、
次いでモルホリンと反応させて２−（１−ナフチルメチ
レン）−３−（モルホリノカルボニル）プロピオン酸を
得、さらにパラジウム炭素を用いて水添を行い、２−（
１−ナフチルメチル）−３−（モルホリノカルボニル）
プロピオン酸を得る。

得られたカルボン酸とし一ヒスチジンメチルエステル２
塩酸塩とをジフェニルリン酸アジドとトリエチルアミン
の存在下に反応させて、Ｎ−（２−（１−ナフチルメチ
ル）−３−（モルホリフカルボニル）プロピオニル］−
Ｌ−ヒスチジンメチルエステルを得る。

これを常法に従い、ヒドラジンと反応させるかあるいは
加水分解することにより目的物を得る。

また、もう一方の出発原料として用いられる−般式（Ｉ
Ｖ）で表される化合物は、以下のようにして製造するこ
とができる。例えばＮ−（ｔｅｒｔ−ブチルオキシカル
ボニル）−し−フェニルアラニンヲ適当な触媒、例えば
５％ロジウムアルミナ等の存在下に水添して、Ｎ−（ｔ
ｅｒｔ−ブチルオキシカルボニル）−Ｌ−シクロへキシ
ルアラニンを得、これを適当な還元剤、例えばボラン等
を用いて還元して、Ｎ−（ｔｅｒｔ−ブチルオキシカル
ボニル）−Ｌ−シクロへキシルアラニナールを得る。次
いで、これを塩基、例えばトリエチルアミン中、ジメチ
ルスルホキシドおよび三酸化イオウピリジン錯塩と処理
することによって、Ｎ−（ｔｅｒｔ−ブチルオキシカル
ボニル）−Ｌ−シクロへキシルアラニナールを得る。こ
れをシアン化カリウムと反応させた後塩酸等を用いて加
水分解して、式 で表されるアミノカルボン酸を得る。このカルボン酸（
１’Ｖ）を常法によりエステル化あるいはアミド化する
ことにより目的物を得る。

本発明の前記式（ＩＩ［）で表される化合物と一般式（
ｒＶ）で表される化合物との反応は常法に従って行うこ
とができる。本反応を好適に実施するには式（Ｉ［Ｉ）
で表される化合物をＮ、Ｎ−ジメチルホルムアミドに懸
濁し、これに３〜５倍モルの塩化水素を加え、この溶液
に一般式（ＩＩＩ＞で表される化合物に対して、１〜３
モル量の亜硝酸イソアミルを加え５〜３０分Ｍ−２０〜
−５℃で反応させる。この反応液にトリエチルアミンを
加え、ｐＨ８〜９゛にし、この溶液を式（ＩＩＩ）で表
される化合物に対して等モル量の前記一般式（ＩＶ）の
化合物およびトリエチルアミンのＮ、Ｎ−ジメチルホル
ムアミド溶液に冷却下、好ましくは一２０〜０℃で加え
、次いで５〜２０時間０℃ないし室温で反応させ、反応
物を常法に従い処理し、目的物を得ることができる。

また、本発明の前記式（Ｖ）で表される化合物と一般式
（ＩＶ）で表される化合物との反応を好適に実施するに
は、式（Ｖ）で表される化合物と、これと等モル量の一
般式（ＩＶ）で表される化合物とをＮ、Ｎ−ジメチルホ
ルムアミドに溶解し、この溶液に必要量の１−ヒドロキ
シペンゾトリアゾールオよびジシクロへキシルカルボジ
イミドを加え、室温でｌＯ〜２０時間反応させる。反応
終了後、常法に従い処理して目的物を得ることができる
。

本発明の一般式（Ｉ）で表されるアミノ酸誘導体にはし
一ヒスチジン部分の不斉炭素を含め４個の不斉炭素があ
り、個々の不斉炭素における置換基の立体配置により種
々の異性体が存在する。これらの不斉炭素における置換
基の立体配置は一般式（１）で表される化合物のもつレ
ニン阻害活性に対し影響を与えるが、本発明にふいては
これらの異性体についてし一ヒスチジン部分以外の不斉
炭素の立体配置を特に限定するものではない。

本発明の一般式（Ｉ）で表されるアミノ酸誘導体中、一
般式（ＩＶ）で表される化合物部分においてはアミノ基
が置換されている炭素原子の立体配置はＳ配置であるこ
とが好ましい。水酸基が置換されている炭素原子の立体
配置も活性に影響を与え、Ｒ配置が好ましいが、Ｓ配置
とＲ配置の混合物でもよい。

このような光学活性化合物の製造に用いられる光学活性
出発原料は常法により光学分割するか、または光学活性
な化合物を用いることにより製造される。

本発明の前記一般式Ｎ）で表される化合物は常法に従い
、薬理学的に許容される酸付加塩とすることができ、こ
れらの塩としては塩酸塩、スルホン酸塩、ｐ−）ルエン
スルホン酸塩、酢酸塩、クエン酸塩、コハク酸塩、酒石
酸塩、フマール酸塩等をあげることができる。これらの
酸付加塩も強いレニン活性阻害作用を有し、蛋白分解酵
素に安定であり、経口投与によって高レニン状態のサル
の血漿中のレニン活性を低下させる。

本発明の一般式（Ｉ）で表されるアミノ酸誘導体および
その薬理学的に許容される酸付加塩は常法に従い医薬品
組成物とすることができる。そのような医薬品組成物と
して例えば、錠剤、カブセル剤、顆粒剤、注射剤、貼付
剤、半開等をあげることができる。

本発明の前記一般式（１）で表されるアミノ酸誘導体ま
たはその薬理学的に許容できる酸付加塩を含有する医薬
品組成物を治療に用いる場合、その投与量は疾病の程度
、患者の性９、年齢、体重等により調整されるが、経口
投与で、は概ね成人１日当たり５　ｍｇ〜５０００■、
非経口投与では１日当たり１　ｍｇ〜１０００ｍｇの範
囲内で投与することができる。

〔発明の効果〕

本発明の一般式（Ｉ）で表されるアミノ酸誘導体および
その薬理学的に許容される酸付加塩は強いレニン活性阻
害作用を有し、しかも蛋白分解酵素に対し安定であり、
経口可能な高血圧症治療剤として有用である。

例えば、（２ＲＳ、　３Ｓ）−３−（Ｎ−Ｃ２−（１−
ナフチルメチル）−３−（モルホリノカルボニル）ブロ
ビオニルコーし一ヒスチジル）アミノ−４−シクロへキ
シル−２−ヒドロキシ酪酸イソプロピルはヒトレニン−
羊レニン基質系およびヒト高レニン血漿での５０％阻害
活性値＜［Ｃ３Ｏ）はそれぞれ６．５　　Ｘ　１０−’
モル濃度および１．ＯＸ　１０−’モル濃度であった。

さらに、本化合物をコモンマーモセットに（［１ｋｇ当
たり３０ｍｇ経口投与した後の血漿中のレニン活性の阻
害効果は、１時間後で約８７％、５時間後でも約５０％
であった。

〔実施例〕

本発明をさらに詳述するために以下に参考例および実施
例をあげる。なお、各参考例および実施例中の化合物の
融点は未補正である。また、各化合物のＮＭＲスペクト
ルは日本電子ＪＮＭ−ＧＸ２７０型高分解能核磁気共鳴
装置を用いて測定した。１ｔａｓｓスペクトルは日本電
子ＪＭＳ−ＤＸ３００型マススペクトロメーターを用い
てＦＡＢ法により測定した。薄層クロマトグラフィーは
メルク社のプレコートプレートシリカゲル（ｐｒｅｃｏ
ａｔｅｄ　ｐｌａｔｅｓ　５ｉｌｉｃａ　ｇｅｔ）６０
Ｆ２Ｓ４を、カラムクロマトグラフィーはメルク社のキ
ーゼル・ゲル（Ｋｉｅｓｅｌｇｅｌ）　６０　（２３０
−４００メツシユ）を用いて行った。また薄層クロマト
グラフィーの展開溶媒はクロロホルム／メタノール／水
＝８／３／１の混合液の下層およびクロロホルム／メタ
ノール＝５／１の混合液の２種類を用い、Ｒｆ値（Ｒｆ
、およびＲｆ、）を算出した。

参考例　１ コハク酸エチル３２．３ｇと１−ナツトアルデヒド２９
．０ｇを無水エタノール３２０−に溶解し、水冷下に５
０％水素化ナト’Ｊウム（油性）１０．７ｇを加えたの
ち、３０分加熱還流する。この溶液に１規定水酸化ナト
リウム水溶液２３０　ａｇを加え、１時間加熱還流する
。減圧下に溶媒を留去し、残留物に水を加え中性部をエ
ーテルで抽出除去したのち、水層に濃塩酸を加え酸性と
し、エーテルで抽出する。エーテル層を飽和食塩水で洗
ったのち、無水硫酸マグネシウムで乾燥する。減圧下に
溶媒を留去し、残留物にベンゼンを加え、析出結晶をろ
取し、黄色結晶の２−（１−ナフチルメチレン）コハク
１２２６．５ｇを得る。

２−（１−ナフチルメチレン）コハク酸２４．５ｇに無
水酢酸２６０　ｍｌを加え、６０℃で１時間加熱する。

減圧下に溶媒を留去し、残留物にベンゼン／ヘキサン＝
１７１の混液を加え、析出結晶をろ取し、橙黄色結晶の
２−（１−ナフチルメチレン）無水コハク酸１６．０ｇ
を得る。

２−（１−ナフチルメチレン）無水コハク酸１．ＯＯｇ
トモルホリン０．３７ｇを乾燥塩化メチレン３１ｄに溶
解し、室温で２時間攪拌する。減圧下に溶媒を留去し、
残留物を酢酸エチル／ベンゼン／ヘキサン＝１／１／１
の混液から結晶化し、無色結晶の２−（１−ナフチルメ
チレン）−３−（モルホリノカルボニル）プロピオン酸
１．１０ｇを得る。このプロピオン酸１．００ｇをメタ
ノール４０ｍ１に溶解し、１０％パラジウム炭素０．１
ｇを加えて常圧で水添する。触媒をろ去後減圧下に溶媒
を留去する。残留物にヘキサンを加え結晶化し、白色粉
末状の２−（１−ナフチルメチル）−３−（モルホリノ
カルボニル）フロピオン酸０．９０ｇを得る。

Ｒｆ、　：　　０．６７ ＭＳ　　：　　　ＭＨ’　　、　　３２Ｂ融　　点　：
　　６４〜６８℃ ＩＲ（ＫＢｒ）　二　　ｖｃｏ　　　１７２０．　　１
６４０　　　ｃｍ−’ＮＭＲ（Ｃ［］Ｃ１１） δ：　　２．３５〜２．７（ｍ、　　２Ｈ）、　　３．
０５〜３．８５（ｍ、　　ＩＩＨ）。

７、２５〜８．２　（ｍ、　　７Ｈ） 参考例　２ シト ２−（１−ナフチルメチル）−３−（モルホリノカルボ
ニル）プロピオン酸０．８９ｇとし−ヒスチジンメチル
エステル２塩酸塩０．７９ｇをＮ、Ｎ−ジメチルホルム
アミド２３ｍｊ２に懸濁し、水冷攪拌下にジフェニルリ
ン酸アジド０，７０ｒｎ１とトリエチルアミン１．５０
＋ｎｊ！を加え、そのまま１６時間攪拌する。減圧下に
溶媒を留去し、残留物に５％炭酸水素ナトリウム水溶液
を加えて、酢酸エチルで抽出後、水で洗い、無水硫酸マ
グネシウムで乾燥する。減圧下に溶媒を留去し、残留物
にエーテルを加え、析出結晶をろ取し、白色粉末状のＮ
−（２−（１−ナフチルメチル）−３−（モルホリノカ
ルボニル）プロピオニル）−Ｌ−ヒスチジンメチルエス
テル１．２５ｇを得る。このエステル０．９８ｇをメタ
ノール１ＯｆｆＬｉ２に溶解し、ヒドラジン１水和物０
．５２ｇを加え、室温で４時間攪拌する。減圧下に溶媒
を留去し、残留物をシリカゲルカラムクロマトグラフィ
ー（溶出溶媒：クロロホルム／メタノール＝１０／１）
でＲｆ、が０，４９に相当する部分を単離精製して、白
色粉末状のＮ−〔２〜（１−ナフチルメチル）−３−（
モルホリノカルボニル）プロピオニルコーし−ヒスチジ
ンヒドラジド０．２３ｇを得る。

融　　点：　　１１５〜１１９℃ Ｒｆ＋　：　　０．４９ Ｍ５　　：　　ＭＨ”、　４７９ ＩＲ（ＫＢｒ）　：　　ｖ　ｃｏ　　１６２０　　ｃｍ
−’参考例　３ （２ＲＳ、　３Ｓ）−３−アミノ−４−シクロへキシル
−２−ヒドロキシ酪酸イソプロピル塩酸塩 Ｎ−（ｔｅｒｔ−ブチルオキシカルボニル）−シーフェ
ニルアラニン１３．２５ｇ　をメタノール２５ｍ１２に
溶解し、５％ロジウムアルミナ１．２ｇを加え、３．５
ｋｇ／ｃｍ”　の加圧下で水添する。触媒をろ去後減圧
下に溶媒を留去し、白色粉末状のＮ−（ｔｅｒｔ−ブチ
ルオキシカルボニル）−シーシクロへキシルアラニン１
３．４ｇを？ｉる。

Ｎ−（ｔｅｒｔ−ブチルオキシカルボニル）−シーシク
ロヘキシルアラニン２．７１ｇを乾燥テトラヒドロフラ
ン５ＩＩＬ１２に溶かし、この混合物をアルゴン気流中
１Ｍボランテトラヒドロフラン溶液２０ｍｇに、内温５
〜８℃を保ちつつ滴下し、そのまま３時間攪拌する。

反応液に１０％酢酸メタノール溶液を加えてｐＨ４とし
、減圧下に溶媒を留去する。残留物にエーテルを加え、
この溶液をクエン酸水溶液、炭酸水素ナトリウム水溶液
および飽和食塩水で洗い、硫酸マグネシウムで乾燥後、
減圧下に溶媒を留去し、Ｎ−（ｔｅｒｔ−ブチルオキシ
カルボニル）−Ｌ−シクロへキシルアラニナール２．４
２ｇを得る。

Ｎ−（ｔｅｒｔ−ブチルオキシカルボニル）−シーシク
ロへキシルアラニノール２．４ｇ、乾燥トリエチルアミ
ン６．５ｍｌ、乾燥ベンゼン３ｄおよび乾燥ジメチルス
ルホキシド６．６−の混合物を１５℃（内温）に冷却し
、この混合物に、三酸化イオウピリジン錯塩７．４ｇを
内温１５〜２５℃を保ちつつ加え、そのまま１０分間攪
拌する。反応液を水にあけ、酢酸エチルで抽出し、酢酸
エチル暦を飽和炭酸水素ナトリウム水溶液および水で洗
い、硫酸マグネシウムで乾燥後、減圧下に溶媒を留去し
て、Ｎ−（ｔｅｒｔ−ブチルオキシカルボニル）−Ｌ−
シクロへキシルアラニナール２．９ｇを得る。

Ｎ−（ｔｅｒｔ−ブチルオキシカルボニル）−し−シク
ロへキシルアラニナール２．９ｇに亜硫酸水素ナトリウ
ム２．９ｇの水２０ｍ１溶液を加え水冷下に１４時間攪
拌する。この反応液にシアン化カリウム１．８２ｇの水
５ｄ溶液と酢酸エチル４０ｍｔを加え室温で４時間攪拌
する。酢酸エチル層を飽和食塩水で洗ったのち、無水硫
酸マグネシウムで乾燥する。減圧下に溶媒を留去し、残
留物に２３％塩酸２１ｍｊ！を加え、１２時間加熱還流
する。反応液をエーテルで洗い、水層を減圧下に濃縮し
、白色粉末状の（２Ｒ３，３Ｓ）−３−アミノー４−シ
クロへキシル−２−ヒドロキシ酪酸塩酸塩２．５ｇを得
る。次いで、（２ＲＳ、　３Ｓ）−３−アミノ−４−シ
クロへキシル−２−ヒドロキシ酪酸塩酸塩１００ｍｇを
インプロパツール１２ｒｎ１に溶解し、氷冷攪拌下に塩
化水素ガスを吹き込み、２時間加熱還流する。

反応液を減圧下に濃縮乾固し、残留物をシリカゲルカラ
ムクロマトグラフィー（溶出溶媒：クロロホルム／メタ
ノール＝１５／１）で精製し、塩酸酸性とした後濃縮乾
固し、白色粉末状の＜２Ｒ３，３Ｓ）−３−アミノ−４
−シクロへキシル−２−ヒドロキシ酪酸イソプロピル塩
酸塩１０８ｍｇを得る。

ＩＲ（ＫＢｒ）：　　ｖｃｏ　　１７３５　　ｃｍ−’
ＮＭＲ（Ｄ２０） δ：　０．８〜１．８（ｍ、　１９ｆｌ）、　３．６〜
３．８（ｍ、　ＬＨ＞。

４．３〜４．６（ｍ、　ＬＨ）、　５．０〜５．２（ｍ
、　ＩＨ）参考例　４ （２ＲＳ、　３Ｓ）−３−アミノ−４−シクロヘキシル
−２−ヒドロキシ酪酸塩酸塩１．４ｇとトリエチルアミ
ン１．６４ｍＡを水１０ｍ１とジオキサン１０ｍ１に溶
解し、ジーｔｅｒｔ−プチルジカルボネイ）３．２ｇを
加えたのち室温で１６時間攪拌する。反応液に水２０１
１１１２を加え、中性部をエーテルで抽出除去したのち
、水層にクエン酸水溶液を加え酸性とし、エーテルで抽
出する。エーテル層を飽和食塩水で洗ったのち無水硫酸
マグネシウムで乾燥する。減圧下に溶媒を留去し、無色
油状の（２ＲＳ、　３Ｓ）−３−ｔｅｒｔ−ブチルオキ
シカルボニルアミノ−４−シクロへキシル−２−ヒドロ
キシ酪酸０．９ｇを得る。

この酪酸４００＋ｎｇ、イソブチルアミン塩酸塩１７５
■、１−ヒドロキシベンゾトリアゾール２７０ｍｇおよ
びトリエチルアミン０．２２ｍ１を酢酸エチル２０ｍｇ
に溶かし、水冷撹拌下にジシクロへキシルカルボジイミ
ド３００ｍｇを加え、室温で１６時間攪拌する。反応液
を氷冷し、不溶物をろ去したのち、クエン酸水溶液、５
％炭酸水素す）　ＩＪウム水溶液および飽和食塩水で順
次洗ったのち、無水硫酸マグネシウムで乾燥する。減圧
下に溶媒を留去し、（２Ｒ３，３Ｓ）−３−（ｔｅｒｔ
−ブチルオキシカル・ボニル）アミノ−４−シクロヘキ
シル−２−ヒドロキシブチリルイソブチルアミド５９５
ｍｇを得る。

上記アミド５９０ｍｇをメタノール１０ｍｊに溶解し、
２規定塩酸３．３−を加え、６０℃で２時間加熱還流す
る。減圧下に溶媒を留去し、白色粉末状の（２ＲＳ。

３Ｓ）−３−アミノ−４−シクロへキシル−２−ヒドロ
キシブチリルイソブチルアミド塩酸塩２５４■を得る。

ＩＲ（ＫＢｒ）　二　　ｖｃｏ　　　１６４０　　　ｃ
ｍ　−’ＮＭＲ（０２０） δ：　０．８〜２．０（ｍ、　２０Ｈ）、　２．９〜３
．２（ｍ、　２Ｈ）。

３．５〜３．７（ｍ、　　ＩＨ）、　４．２〜４．５（
ｍ、　ＩＦＩ）実施例　Ｉ Ｎ−（２−（１−ナフチルメチル）−３−（モルホリノ
カルボニル）プロピオニル〕−し−ヒスチジンヒドラジ
ド１００ｍｇをＮ、Ｎ−ジメチルホルムアミド５ｎ４に
溶かし、−２０℃で５．９５規定乾燥塩化水素／Ｎ、Ｎ
−ジメチルホルムアミド０．１２ｍｊ２、続いて亜硝酸
イソアミル０．０４３　ｒｎｌを加えて攪拌する。ヒド
ラジドの消失を確認した後、反応液の温度を一３０℃ま
で下げてトリエチルアミン０．１０ｍ７！で中和し、Ｎ
−（２−（１−ナフチルメチル）−３−（モルホリノカ
ルボニル）プロビニオル）　−Ｌ−ヒスチジンアジド溶
液を調整する。

別に（２Ｒ３，３Ｓ）−３−アミノ−４−シクロへキシ
ル−２−ヒドロキシ酪酸イソプロピル塩酸塩５８ｍｇと
トリエチルアミン０．０６４ｍ１のＮ、Ｎ−ジメチルホ
ルムアミド２ｎｔｇ溶液に氷冷下、先のアジド***液を
滴下し、そのまま１６時間攪拌する。反応液に５％炭酸
水素ナトリウム水溶液を加え、酢酸エチルで抽出し、飽
和食塩水で洗い、無水硫酸マグネシウムで乾燥する。減
圧下に溶媒を留去し、残留物にプレバラティブシリカゲ
ル薄層クロマトグラフィー（展開溶媒：クロロホルム／
メタノール＝５／１）で、Ｒｆ、が０，５０に相当する
部分を単離精製し、白色粉末状の（２ＲＳ、　３Ｓ）−
３−（Ｎ−Ｃ２−（１−ナフチルメチル）−３−　（モ
ルホリノカルボニル）プロピオニル）　−Ｌ−ヒスチジ
ル）アミノ−４−シクロへキシル−２−ヒドロキシ酪酸
イソプロピル５５ｍｇを得る。

融　　点＝　　１０３〜１０６℃ Ｒｆ、：　　０．６０ Ｒｆ２：　　０．５０ Ｍ５　　：　　Ｍ）Ｉ”、　　６９０ 実施例　２ Ｎ−（２−（１−ナフチルメチル）−３−（モルホリノ
カルボニル）プロピオニル〕−し−ヒスチジルメチルエ
ステル１００ｍｇをメタノール５ｄに溶解し、水冷下１
規定水酸化ナトリウム水溶液０．４２ｆｆＬｉ２を加え
、室温で１６時間攪拌する。減圧下に溶媒を留去し、残
留物と＜２Ｒ３，３Ｓ）−３−アミノ−４−シクロへキ
シル−２−ヒドロキシブチリルイソブチルアミド塩酸塩
６１ｍｇおよび１−ヒドロキシベンゾトリアゾール４３
ｍｇをＮ、Ｎ−ジメチルホルムアミド５ｆｆ！！に溶か
し、水冷攪拌下にジシクロへキシルカルボジイミド４８
ｍｇを加え、室温で１６時間攪拌する。減圧下に溶媒を
留、去し、残留物に５％炭酸水素ナトリウム水溶液を加
え、酢酸エチルで抽出し、飽和食塩水で洗い、無水硫酸
マグネシウムで乾燥する。減圧下に溶媒を留去し、残留
物をプレパラティブシリカゲル薄層クロマトグラフィー
（展開溶媒：クロロホルム／メタノール＝５／１）で、
Ｒｆ２が０．４１に相当する部分を単離精製し、白色粉
末状の（２Ｒ３，３Ｓ）−３−（Ｎ−Ｃ２−（１−ナフ
チメチル）−３−モルホリノカルボニル）プロピオニル
〕−し−ヒスチジル）アミノ−４−シクロヘキシル−２
−ヒドロキシブチリルイソブチルアミド６．５■を得る
。

融　　点：　　１１９〜１２５℃ Ｒｆ　宜　：　　　　０．５４ Ｒｆ２：　　０．４１ Ｍ５　　：　　ＭＨ”、７０３ 実施例　３ ヒトレニン−羊レニン基質でのレニン活性阻害作用 ｐＨ７，４の１２５　ｍＭ　　ピロフォスフェート緩衝
液（ｐｙｒｏｐｈｏｓｐｈａｔｅ　ｂｕｆｆｅｒ）　２
００．ｃＪとアンジオテンシン変換酵素阻害剤として２
０　ｍＭのし一フェニルアラニルーＬ−アラニル−し−
プロリンの水溶液２５　ｄ、２０００　ｎｇアンジオテ
ンシン■当量／−の部分精製羊レニン基質５０ｄ、脱イ
オン水１５０ｄと本発明の化合物のジメチルスルホキシ
ド溶液５０ｄまたはコントロール群としてジメチルスル
ホキシド５０ｄの溶液中に２０〜３０　ｎｇ　アンジオ
テンシンＩ　／ｄ／時間の精製ヒトレニン２５ＢＮを加
え、３７℃の水浴中で１５分間インキュベート（ｉｎｃ
ｕｂａｔｅ）　したのち、この反応液を１００℃の水浴
中に５分間入れ、反応を停止する。冷却後２００通を分
取し、レニン添加によって生成されたアンジオテンシン
Ｉの量をラジオイムノアッセイ　（ｒａｄｉｏｉｍｍｕ
ｎｏ　ａｓｓａｙ）法で定量し、下式により阻害活性を
求めた。

阻害活性（％）＝ コントロール　　　本発明の化合物 上式により求められた阻害活性から５０％阻害活性モル
濃度（ＩＣｓ。）を求めた。

（２Ｒ５，３Ｓ）−３−（Ｎ−（２−（１−ナフチルメ
チル）−３−（モルホリノカルボニル）プロピオニル］
　−Ｌ−ヒスチジル）アミノ−４−シクロへキシル−２
−ヒドロキシ酪酸インプロピル ６．５　　Ｘ　　１０−’ （２Ｒ３，３Ｓ）−３−（Ｎ−［２−（１−ナフチルメ
チル）−３＝（モルホリフカルボニル）プロピオニル〕
−し一ヒスチジル）アミノ−４−シクロへキシル−２−
ヒドロキシブチリルイソブチルアミド ２．９　　Ｘ　　１０−’ 実施例　４ ヒト高レニン血漿におけるレニン活性阻害作用ヒト高レ
ニン血漿５００　ｄに１４　ｍＭ　ＢＤＴＡ　・２Ｎａ
　と０．３％ネオマイシン硫酔を含むｐＨ７，０の０．
５Ｍ　リン酸緩衝液（ｐｈｏｓｐｈａｔｅ　ｂｕｆｆｅ
ｒ）　　３５０　ｔｉ、アンジオテンシン変換酵素阻害
剤とじて２０　ｍＭのし一フェニルアラニルーし一アラ
ニルーし一プロリンの水溶液５０Ｉｉ、および本発明の
化合物のジメチルスルホキシド溶液１００４またはコン
トロール群としてジメチルスルホキシド１００通を加え
る。この反応液のうち、２００通を４℃の水浴中に入れ
、残った８００通を３７℃の水浴中で６０分間インキュ
ベートする。

３７℃でインキュベートした反応液より２００通を分取
し、ただちに氷冷し、水浴中でインキュベートした反応
液と共にアンジオテンシンＩ量をラジオイムノアッセイ
法で定量する。

血漿レニン活性は３７℃でインキュベートした反応液中
のアンジオテンシンＩ量から４℃でインキュベートした
反応液中のアンジオテンシンエ量を差し引くことにより
算出する。阻害活性（％）は下式により求めた。

阻害活性（％）＝ コントロール　　　本発明の化合物 上式により求められた阻害活性から５０％阻害活性モル
濃度（ＩＣｓｏ）を求めた。

（２Ｒ５，３Ｓ）−３−（Ｎ−Ｃ２−（１−ナフチルメ
チル）−３−（モルホリノカルボニル）プロピオニル〕
−し−ヒスチジル）アミノ−４−シクロへキシル−２−
ヒドロキシ酪酸イソプロピル １、ＯＸ　　１０−” （２ＲＳ、　３Ｓ）−３−（Ｎ−（２−（１−ナフチル
メチル）−３−（モルホリノカルボニル）プロピオニル
シーシー　ヒスチジル）アミノ−４−シクロへキシル−
２−ヒドロキシブチリルイソブチルアミド ２．６　　Ｘ　　１０−’ 実施例　５ コモンマーモセットの血漿レニン活性（ＰＲＡ）低下作
用 ホフバウアー（Ｋ、Ｇ、　Ｈｏｆｂａｕｅｒ）らにより
クリニカル　アンド　エクスペリメンタル　ハ、（／（
−テンシＢ　７　（（ＣＩｉｎ、εｉｐ、　）Ｉｙｐｅ
ｒｔｅｎｓ、）　Ａ５巻、７＆８号、１２３７〜１２４
７ページ、１９８３年〕に報告されているコモンマーモ
セット　（ｃｏｍｍｏｎ　ｍａｒｍｏｓｅｔ）を用い、
減塩食下で経口的にフロセミド１５　ｍｇ　／　ｋｇ　
／　ｄａｙをＩＢおきに３回投与して人為的な高レニン
状態を作り出す。フロセミド投与中止後３臼目に実験を
行う。

測定方法 体重３３５〜３７５ｇのコモンマーモセットを雌雄の別
なく用い、小型サル用の固定台に有意識下に固定し、大
腿動脈に挿入したカテーテルより経時的に採血し、血漿
レニン活性を測定する。血漿レニン活性は０．２ｒｎ１
の血漿を３７℃、６０分間インキユヘートシて生ずるア
ンジオテンシンＩの量をダイナボット社のレニンリアビ
ーズ　キットを用いて測定する。本発明の化合物は希塩
酸に溶かし、胃ゾンデを用いて経口的に投与する。

化合物塩：　　（２ＲＳ、３Ｓ）−３−（Ｎ−（２−（
１−ナフチルメチル）−３−（モルホリノカルボニル）
フロピオニル〕−し−ヒスチジル）アミノ−４−シクロ
へキシル−２−ヒドロキシ醋酸イソプロピル ３０　ｍｇ　／　ｋｇ経口投与（例数２〜３）ＰＲＡ　
　（阻害％）

Claims (4)

【特許請求の範囲】
1. （１）一般式 ▲数式、化学式、表等があります▼ （式中のＨｉｓはＬ−ヒスチジル基であり、Ｘは−Ｏ−
   または−ＮＨ−であり、Ｒは炭素数１〜７の直鎖状また
   は枝分かれ状のアルキル基である）で表されるアミノ酸
   誘導体およびそれらの薬理学的に許容される酸付加塩。
2. （２）一般式 ▲数式、化学式、表等があります▼ （式中のＣはＳ配置を示し、Ｈｉｓ、ＸおよびＲは前記
   と同じ意味をもつ）で表される特許請求の範囲第１項記
   載のアミノ酸誘導体およびそれら薬理学的に許容される
   酸付加塩。
3. （３）式 ▲数式、化学式、表等があります▼ で表される特許請求の範囲第２項記載のアミノ酸誘導体
   およびその薬理学的に許容される酸付加塩。
4. （４）式 ▲数式、化学式、表等があります▼ で表される特許請求の範囲第２項記載のアミノ酸誘導体
   およびその薬理学的に許容される酸付加塩。