JPS62127307A - 再水和性ポリアクリルアミドゲル及びその製造方法 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】

（産業上の利用分！）） 本発明は、室温で反１用間保存することができるｆＩｔ
水和性（ｒｅｈｙｄｒａｔａｂｌｅ）多目的ボ’）　７
　’）　’）　／ｌ／　７ミトゲル及びその製造方法に
関する。 （従来の技術及び発明が解決しようとする問題・ｊ？、
）ポリアクリルアミドゲル ｒｉｃ−ｆｏｃｕｓｉｎｇ）電気泳動、従来のｉｌ！Ｂ
ソーン市気泳動又は不ｄＩ続ゾーン′．Ｈ気泳動のよう
な分箸方法をはじめとする種々の′電気泳動法のゲル支
持マトリックスとして使用されている．通常、ポリアク
リルアミドゲルは、使用直前に個別的に調製されるが、
そうでない場合には、ゲルは，冷凍温度でかつ極〈限ら
れた時間だけ、憲封容器に保存しなければならない．ゲ
ルは一般には、特定の緩衝系を用いて特定の１］的のた
めに調製される．これまで、保存のためにゲルを脱水し
、次に、使用のためにゲルを１１１水和することにより
、ゲルの寿命をｋくする努力がなされてきた．しかしな
がら、この方法によると、ゲル構造が不可逆的な損傷を
受け，ゲルを使用してその後に行なわれる、生物学的又
はその他の帯電高分子体の分離が首尾よくいかない。従
って、高分子体を分離する電気泳動法においてその掛に
使用するために、室温で長期間保存することができるポ
リアクリルアミドゲルマトリックスが依然として必要と
されている。 （問題を解決するための手段） 従って、未発明の目的は、室温で保存するためにポルア
クリルアミドを乾燥した後、高分子体を、Ｅ気泳動分離
するために再水和する方法を提供することにある。 本発明の別の目的は、Ｉし気泳動法によって分離した成
分を可視化するための種々の試薬を有するポリアクリル
アミドを提供することにある。 本発明の別の目的は、従来つくられていたポリアクリル
アミドにおいて多く見受けられるｆり染のない、電気泳
動分離又は生化学反応用の支持物質（ｓｕｐｐｒｔ　ｍ
ａｔｅｒｉａｌ　）を提供することにある。 本発明の更に別の目的は、電気泳動法によって分離され
た高分子体の可視化量おいて、試薬押体として使用する
ことができる＋ｌｒ永和性ポルアクリルアミドゲルを提
供することにある。 本発明によれば、 （Ａ）アクリルアミドモノマーを手合してゲルを形成す
る工程と。 （Ｂ）ゲルから重合の残留成分を除去するｒ　Ｊ’＋“
と、 （Ｃ）ゲルにポリオール、高分子アルコール　多糖類及
びポリアミンの少なくとも１つを安定化品（ｓｔａｂｉ
ｌｉｚｉｎｇ　ａ＋ｓｏｕｒ＋ｔ）加えるＬ程と、（Ｄ
）ゲルをする乾燥する「程とを備えてなる；呼永和性ポ
リアクリルアミドゲルの製造方法が提供されている。 木ネ門によればまた、ポリオール、高分子アルコール　
多１＋、類又はポルアミンの少なくとも１つを安゛市化
・°ｌ：含イ！する悦＋ごれたピｖ橋ポリアクリルアミ
ドからなるＩｌｐ水和性ポリアクリルアミドゲルか提供
されている。 、に発１１１１　ｉ：よれば、ｌ；−１分子体（ｍａｃ
ｒｏｍｏｌｅｃｕｌｅｓ）の市気泳動分尊及び種々の／
ｒ物物的的物質可視化法においてイ１用な、保存安定性
のある再水和性ポルアクリロ７ミトゲルの５ＪＷ方法が
提供されてる。ポリアクリルアミドゲルは、保存のため
に脱水することができ、更に、充分に乾燥する前にポリ
オール　高分子アルコール、多糖類及びポリアミンの少
なくとも１つの安定化ｊＪ−をゲルに加えることにより
、機能性を不可Ｌφ的に失なうことな（＋Ｉｒ水和され
て使用でｙることがわかった。所望の場合には、再水和
の際、ゲルに試薬を含浸させて１．ｌ（気泳動法により
分離される種々の成分のＩｌｌｌｌ溶化処理進すること
ができる０本発明に係る石川なポリアクリルアミドゲル
は、ち業者にとって公知の従来の方法により、架橋剤の
存在下で重合されるアクリルアミドモノマーからつどら
れる。アクリルアＥ　Ｆモノマーに不純物が存在すると
重合反応を妨害するので、精製したアクリルアミドモノ
マーを使用してアクリルアミドゲルを形成するのが望ま
しい。 アクリルアミドは、ｔ−ブチルヒドロペルオキシド、過
酸化水素、アルカリ金属及びアンモニアの過硫酸塩、塩
素酸塩、過　酸塩、パーカーボネート　（ｐｅｒｃａｒ
ｂｏｎａｔｅ）などのようなラジカル開始剤を用いて、
高温の水溶液中で容易に重合させることができる。低温
での重合の場合、特に、高分子ｊ−のポリマが所望され
る場合には、レドックス触媒系がしばしば使用される。 レドックス触媒系は、■−記した開始剤のような酸化剤
及びチオ硫ｌｖ用又は酸性亜硫酸塩のような二元剤から
なる。 七ツマ−の重合はりポフラビン（ｒｅｂｏｆ　Ｉａマｉ
ｎ）又はその他の光活性重合剤の存在下で光重合により
行なうこともでき、あるいは化学哨合剤の存在下で、高
エネルギ電子ビームを使用するような照射によって行な
うこともできる。 手１合されていない出発試薬は、閉鎖系又は減圧酸表ド
の開放系においてローリング又はスライディングをはじ
めとする従来の方法に従がって、モールドに画用するこ
とができる。３つのラジカル発生成分を過剰にして重合
を加速する場合には　大気酸素下で重合を行なうことも
できる。 七ツマ−は、種々の重合容器において重合させることが
できるが、試薬を１重合したゲルに結合する支持物質の
１−に注ぐのが好ましい、このような支持物質には、例
えば、親木性ポリエステルノート、マイラ（Ｉ１１！１
ａｒ　）フィルム又はシランのような物質で処理して親
水性となったガラス板がある。Ｊ宜の支持物質は商！的
に入手することかでき、これらには、ドイツ国、ハイデ
ルベルクに所在するセルパ・フェイン・パイオケミカル
ズ（Ｓｅｒｖａ　Ｆｅ１ｎ　Ｂｉｏｃｈｅｍｉｃａｌｓ
　）ンＦ製のゲルフィ、クス（ｇｅｔｆｉｘ）及びアメ
リカ合衆国、メイン州　ロンクランドに所在するマリン
コロイズ（Ｍａｒｉｎｅ　　Ｃｏ１１ｏｉｄｓ）社製の
ゲルポンド−バッグ（ｇｅ　１ｂｏｎｄ−ｐａに）があ
る、ガラス支持体で重合を行なうことにより、ポリアク
リルアミドゲルは。 ガラス板に共有結合する。 ポリアクリルアミドを分離媒体として使用する場合の利
点の１つは、ゲルの細孔の大きさをイｉ効に制御できる
ことが挙げられる。ポリアクリルアミドゲルの有効な細
孔サイズは、「全モ／マー濃度」の逆関数であり、この
Ｃ度は、アクリルアミドモノマーと架橋剤のＣ度の合計
として定義される。低濃度のポリアクリルアミドゲルは
、架橋剤によって長い間隔で連結された長いポリアクリ
ルアミド鎖の細孔メツシュ状（ｐｏｒｅ−ｍｅｓｈｄｅ
ｄ）３次元格子であると考えらえる。アクリルアミドモ
ノマのパーセントが増加しかつ架橋剤のパーセントを低
く保持すると、重合鎖のひん度（ｆｒｅｑｕｅｎｃマ）
が増加することにより、細孔のサイズが小さくなる。こ
れは、アクリルアミドモノマが４０パーセント更には５
０パーセントまでで、架橋剤が５パーセントというゲル
Ｃ度の場合に見受けられた。架橋が進むと、架橋剤によ
って結合され、５パーセントの架橋剤で最大の　分け特
性（ｓｉｅｖｉｎｇ　ｐｒａｐｅｒｔ７）即ち、一定イ
ｌ１ｌＩのアクリルアミトモ／マーで最小の気孔サイズ
を有する規則的な配列の釦が形成される。全モノマーＣ
度は約４．５乃至５０パーセントであり、　ｌ！ｆまし
くは、％４Ｊ　６　、０乃至１０パーセントである。ア
クリルアミドモノマーの濃度は約２．５乃至３０パーセ
ントとすることができ、３乃至１２パーセントが好まし
い、架橋剤七ツマ−の濃度は、一般的には約２乃至２０
パーセントであり、３乃至５パーセントがＩＪ’ｆまし
い。 本発明のポリアクリルアミドゲルの製造において使用す
る架橋剤は、メチレン−ヒスアクリルアミド、Ｎ，Ｎ１
−ジアリルタルタルジアミド、ポリオレフィンアガロー
ス、Ｎ，Ｎ１−（１，２−ジヒドロキシエチレン）ビス
アクリルアミド、エチレンジアクリレート、ポリエチレ
ングリコールジアクリレート及びＮ、Ｎ’−ビスアクリ
ルクリスタミン並びにこれらの混合物をはじめとする従
来の架橋剤を含む、好ましくは、メチレンビスアクリル
アミド又はポリオレフィン７ガロース（ｐｏｌｙｏｌｅ
ｆｉｎｉｃ　ａｇａｒｏｓｅ）が使用される。 モノマーを・１１合してから、手合の残留成分を除去す
る。４Ｉ効な除去方法であれば、どの方法ち使用するこ
とができるが、１″＋尾よくいぐことがわかった方法は
、ゲルを　ノ入留木の中で、未重合モノマ、触奴及びそ
の他の未反応成分のような重合処理の残留成分を除去す
るのに充分な時間、ハ、ｎｌする方法である。残留成分
を除去することにより、最絆生成物は、従来つくられて
きた同様なゲルに比へて、７倍までの主導度（ｃｏｎｄ
ｕｃｔａｎｃｅ　）の低下を示す、この特性により、初
期電圧勾配が一層大きくなってジュール熱が減少するこ
とにより４通常の電気泳動だけでなく等電

【飄電気泳動
においても１分解俺（ｒｅｓｏｌｕｔｉｏｎ）を高める
ポテンシャルで分離時間を短かくすることができる。 残留成分を除去してから、ポリオール、１・；６分子−
アルコール、多糖類及びポリアミンの少なくとも１つ以
トを安定化ｊ１１だけゲルに加える。安定化剤は、ポリ
オール、高分子アルコール、多糖類又はポリアミンを含
む溶液において平＆させることにより加えることができ
る。ゲルはまた、部分乾燥し、ポリオール、高分子アル
コール、多糖類又はポリアミンで再水和してから、部分
乾燥を行なうことができる。適宜のポリオール化合物に
は、例えば、ｉＲＪ原子数が約２乃至７００のグリコー
ル及びグリセロールがある。グリコールは、約２乃金２
０の炭素原子を有するのが好ましい、高分子アルコール
もまた使用することができる０本発明の方法においては
、合成の又は生物起源の高分子アルコールを使用するこ
とができる。このような品分イーアルコールには１例え
ば、ポリエチレングリコール、グリコール及びポリビニ
ルアルコールかある。デキストラン（ｄｅｓｔｒａｎ　
）のような種々の多糖類及びポリリシン（ｐｏｌ！１ｙ
ｓｉｎｅ）のようなポリアミンも、使用することができ
る。好ましい安定化剤は、デキストラン（分子ｔ７５．
０００）である、ポリオール、高分子アルコール、多糖
類又はポリアミンを加えると、ゲルの残留湿潤度を制御
しかつポリマーと相互作用を起し、あるいはこれらのい
ずれかの動作を行なうことにより、ゲルが長時間の保存
においてη１逆的な損傷を受けないように保護すること
がわかった。ポリオール、高分子アルコール、多糖類又
はポリアミンは、ポリアクリルアミドゲルの全容ｊｔの
約５乃至３０容埴パーセントのｊ５を、生仲で又は組合
わせて添加することができる。好ましくは、約７乃至１
０容埴パーセントが加えられる。 ポリオール、高分子アルコール、多糖類又はポリアミン
をポリアクリルアミドゲルに加えてから、ゲルを乾燥す
る。室温での空気乾燥、赤外線ランプでの乾燥、送風機
での乾燥又は乾燥を伺直するために高温、即ち、４５乃
至１２０℃のオーブン中での乾燥をはじめとする種々の
乾燥方法を使用することができる。 本発明のポリアクリルアミドゲルは、シート、フィルム
、円筒体、柱状体などの種々の形態とすることができる
。ゲルがシートの形態をなしているときには、約３０乃
至５００ミクロンのような、通常の厚さとすることがで
きる。ゲルシ一トは　５０乃’ｌ’　３００　ミクロン
の厚さであるのかＩｌｆましい。 グリセロールのようなポリオール安ｊ−化剤を含む乾燥
したゲルは、プラスチ・２りｙはポル塩化ビニル、ポリ
プロピレン又はトリアセテートのような’、ｉ’　Ｉｄ
：忌４７　イＪｌ／　ム（ｍｅｔａｌｌｉｃ　ｒｅｐｅ
ｌｌｅｎｔ　ｆｉｌｍ）をか）、せることかできる。高
分子アルコール又は多１’＋類　例えば、デキストラノ
で安定化させた乾燥ゲルは　表面がカ質トカラス状であ
るので、袋　箱なとのような種々の容器に入れて保存す
ることかできる。 １１９本したポリアクリルアミドゲルは　ゲルのへ１４
される＋ｌｌ♂ｔこ応して、種々の溶液で１１ｇ永和５
せることかできる。種々の方υ、を使用してゲルを再乞
和させることができる。１つの方法として　適、ｌｌ　
ｊ、ｉの溶液又は試薬を含むプレートＹ−でゲルをころ
がす方法がある。ゲルはまた。噴霧又はゲルを所望の溶
液に侵清しあるいは浮かせるなどの飽和処理によっても
再水和させることができる。 未発明のポリアクリルアミドゲルの再水和速度（ｒｅｈ
ｙｄｒａｔｉｏｎ　ｋｉｎｅｔｉｃｓ）は、安定化剤（
Ｓ：）ｉ含まないゲルよりも勝っている。第１及び２Ａ
は、ゲルの１’／ネが回し場合、本発明のゲルの吸収−
（ｌがグリセロールを含まないゲルよりも直かに人゛き
いことを示している。 本発明は、１１）水和性ボリアクリルアＥトゲル１こ関
する。１り水和性ゲルは、長時間室温で保イヂすること
ができ、かつ１種々の物質で再水和されて種々の電気泳
動分離に適したマトリックスを提イノ」することができ
る。 １呼水和した場合のポリアクリルアミドの１隻数特性に
より、高分子マトリックスは膨潤し　ゲルの細孔サイズ
を自動的に大きくするとともに　層大きな高分子体の移
行（ｍｉｇｒａｔｉａｎ）を行なわせる制限性の少ない
マトリフクスをＩＬ′供することができる。吸収される
溶液のＳ、ｉと種類を調整しかつ制御することにより　
ポリアクリルアミドゲルに保持され又はこのゲルを通過
する特定の大きさの高分子体を直接制御することができ
る。かかる利ケ、１．により　篩分は効果が沖続又は不
ｄ１統の緩衝系において生し　等電直コλ′市気泳動の
場合のように、帯電生仲だけではなく、サイズと帯電と
に基づいて高分子体を分離することができる。がくして
、太き公分仁１！ＩＪち、２００．０００タルトン以ト
の分１′か　受ける制限が少なくなり、かつ、同様な゛
心５１１とミリアンペアの条件Ｆでより短かい時間で等
１１ｉ１．１．？ｌ、番こけするようになる。 本発明のポリアクリルアミドゲルは、多［１的の支持マ
トリックス材ネ１を提供する。このマトリックス材料は
　　・定ニーの適当な緩衝剤又は両性電解ν１で１１１
水和することにより　等電−１、り′心気泳動、従来の
１！１！続ンーン屯気泳動ヌは不ｔＩＩＩ続ゾーン′市
気泳タノのような種々の分離）Ｊ法における’＋ｈ気泳
動処理に使用することができる。未発明のボリアクリル
アＥトゲルを使用すると　等電ζ゛、工電気泳動分離を
向Ｉさせることかできる。 本発明の方ノ大は、拡散が極〈わずかな迅速酵素１４視
化］１１の試薬Ｊ１＋体として使１（１オることができ
るアクリルアミドゲルを袈４１１するものである。これ
は　反＋４’、−，）ｔ−Ｂ物の容品及び反Ｉ４：、時
間を高温で制御しかつその定１．１化（ｑｕａｎｔｉｆ
ｉｃａｔｉｏｎ）を＋Ｅ確に１υｊ御するとともに、そ
のゲルマトリンクスの再水和の際の七ツマ−の濃度と容
品を適宜制御ｄ１することにより行なうことができる。 ゲルマトリンクスは、種々の基質及び゛染料錯体と、ヘ
ルパー酵素（ｈｅｌｐｅｒ　ｅｎｚｙｍｅ　）との双方
又は一方で＋ｓｒ水和してから、′市気泳動分港を行な
うゲルの表面に角田することができる０次に、特定の反
応を、制御された容品のＦで、かつ、制限しないと分解
渣を低ドさせることになる拡散を制限するＪ８境におい
て、通常の時間と温度で行なわせる。 本発明の別の実施例では、中クーロ７＋１１又は多価抗
体を本発明のゲルに含浸させることができる。このよう
な抗体を含浸させることにより、　適宜の染色（ｓｔａ
ｉｎ　）法により明らかにすることができる１分離しか
つかぶせられたゲルの双方において特定の抗体抗涼反細
＼をマすることができる。 未発明のポリアクリルアミドゲルは、熱的に不安定であ
ってもよい他の化゛７及び生物学試薬で再水和すること
により、含浸処理を行なうことができる。含浸処理した
ゲルは１種々の上気泳動法において使用することができ
る。 プリアクリルアミドゲルは、グリセロールのような仙の
試薬で含浸処理して、液体サンプルの拡がりを社けるよ
うにゲルの表面什１−Ｆを調整することかできる。これ
（こより、通常のペーパータブ（ｐａｐｅｒ　ｔａｂ　
）法とは異なり、サンプルを直接適用することができる
。 乾僅ケＪし又は再水和により一１！なったゲルに含浸さ
せることかできる他の物質として、洗浄剤、解離剤（ｄ
ｉｓｓｏｃｉａｔｉｎｇ　ａｇｅｎｔ）又はこれらの混
合物がある０種々の洗浄剤には　例えば、通常の両性イ
オン＋１１洗剤及びドデシル硫酸ナトリウムがある。解
離剤の一例として　精製尿素が挙げられ己。これらの柚
々の試薬を入れることにより、特殊な電気泳動分離を行
なうことができる０例えば　このゲルにより、解離した
高分子体を１次元における等Ｊｆ　ｇｊ、　ｉｔｔ気泳
動によって尿素の存在下で分離し　次に２次ｙＬにおい
て洗浄剤又は変性剤の存呑トであるいは存在させずに分
離を行ない、より検出度の高い２次元電気泳動を得るこ
とができる。 本発明のポリアクリルアミドゲルによれば、通常の゛心
気泳動分離方法のいずれも、中−の物質から行なうこと
ができる０例えば、任σのｐｈｉ囲の又は任ａに製造さ
れた両性電解質を使用した等電【飄゛市気泳動勾配管（
ｇｒａｄｉｅｎｔ）を、１８当な容＋ｊの両性゛心解質
においてゲルを（１■木和させることによって簡単に得
ることができ、この場合には、必要とされる同じ古漬に
より、試薬のコストを大幅に低減させることができる。 （効果） 以ヒのように、本発明の再水和性ポリアクリルアミドゲ
ルは、乾燥することにより長時間保存することができ、
再水和すれば容易に電気泳動分離に使用することができ
るという優れた効果を奏する。 （実施例） 以下、本発明の実施例を示すが、本発明はこれに限定さ
れるものではない。 例１　アクリルアミドの再結晶 適宜の容器の中で、４５グラムのアクリルアミドを、１
μ浴において６０　’Ｃに加熱した９０ｍ１のクロロホ
ルムに加えた。アクリルアミドをこの温度で溶解してか
ら、溶液を、６０℃の加熱７・ヤケントに入れた漏斗に
保持したホワントマン（ｗｈａｔｍａｎ　）　Ｎ　Ｂ　
Ｒ１’Ｆ’紙を用いてＰめしだ０．Ｐｍ後、ｒｍを加熱
ジャケットに入れたフロレンスフラスコに集め、゛２液
を含む洗浄物を水浴において２２°Ｃよりも低くない温
度に冷却し、全ての溶液か結晶から取除かれるまで、ブ
フナー漏斗ホｑ・・トマンＮ　Ｂ　Ｒｔ　）；ｙ紙によ
り真空下で直ちに】Ｐ必した。次に、千ノで−を漏ン１
から除去し、乾燥した。 例２　アクリルアミド原液の調製 一゛１”Ｉ′の反応容器に１例１で得られた＋ｌＴ結晶
アクリルアミド２，８８グラムと、メチレンビスアクリ
ルアミド１００ｍｇと、法留水３．３０ｍ党を加えた。 次に、溶液を加熱しても七ツマ−を溶解した。このｔｌ
ｌの４８ノで一セント原液は、４０ｍｕの容品の最終ゲ
ルにとって充分なものであった。 例３ Ｎ、Ｎ、Ｎ’　、Ｎ’−テトラメチレンジアミン［テネ
ド（ｔｅｎｅｄ　）　］　５０交と、過酸アンモニウム
２０ｍ文　（５５ｍｇ／ｍＱ／）　と、トリス−０１３
０ｍ文（０，１７５ｍ文）をガラスピーカに加え、混合
した６次に、この混合物を実施例２のアクリルアミド原
液４．６２ｍＪＪと一緒にし、直ちに重合室へ注いだ、
気泡が取込まれないようにこれを閉じた。アクリルアミ
ドが重合するまで、室を室温で約２０分乃至１１ν間閉
１１−状態に保持した０次に、ゲルを室から取出し、へ
留水で数回洗浄した。 例４ 適宜の浅い皿に、所定；ｄのグリセロール（一般的には
、全容植のゲルに対し５乃〒３０容１．ｊ　、＜−セン
ト）を加えた０次に、例３で得らえたゲルを皿に浸漬し
、グリセロールを吸収させた。グリセロールを吸収した
後、含浸したゲルを１００℃で１１１ν間通常のオーブ
ンで乾燥した。乾燥後、ゲルにプラスチングをかふせ、
包装した。使用曲に、ゲルをＱ「ましくは１０パーセ〉
・１・（体積／１１［積）のグリセロールで約２０分間
１■■水和させた。 本発明を例示するために　幾つかの代表的な実施例を掲
げたが、本発明の精神と範囲とから逸脱することなく種
々の変更と修ＣＦを行なうことができるのは、当業者に
とって明白である。

【図面の簡単な説明】

第１図は乾僅曲の洗浄工程において安定化剤をポリアク
リルアミドゲルに入れることなくつくったポルアクリル
アミドゲルの再水和速度を示し、第２図は１０パーセン
ト（容品／容：＋）　）のグリセロールを入れてつくっ
たポリアクリルアミドの再水和速度をポす。 第１図は厚さ５０．１００父は２００．ｕｎに注型成形
し、蒸留水で洗浄し、空気中で一晩乾燥したゲルを蒸留
水で再水和させた時の再水和速度であり、第２図は、乾
燥の前に１０％グリセロールでゲルを平衡化させた以外
は第１図と同様である。 代理人　弁理士　松　永　官　行 τに嘲請？ 契に朔−ノ Ｌ続補正ｉ’５ 昭和６０年１２月２０１１ 特許ｌ？長官宇賀道部殿 １、・１１件の表示 昭和６０年特許願第２６３６０２号 ２、発Ｉｌｌの名称 ｉｆｆ水和性ポリアクリルアミドゲル及びその製造方法
３、補正をする者 ・１覧件との関係　　　　出願人 代表者　　ウィリアム　エイチ　メイ ４、代理人 住　所　〒１０５東京都港区虎ノ門三丁１１４番１７号
〜鹿友ビル　電話（４３４）０６８７番（代）氏名　（
７００２）弁理士松水宣行 ６抽ＩＩ−の対象 ５任状及その訳文、明Ｍ１１．村並びに１！！潟した図
面７、司１市の内容 （１）・３任状およびその訳文を別紙のとおり補充する
。 （２）　？’ｌｌ　、ｌｊ　した明４１１書を別紙のと
おり補充する。 （イ１用〜内容に変更なし） （３）　’！”１１）シた図面の第１図および第２図を
補充する。 （イ［１し、内容に変更なし） ８　添イ・１．Ｉ：類の１１録

Claims (1)

1. 【特許請求の範囲】 （１）（Ａ）アクリルアミドモノマーを重合してゲルを
   形成する工程と、（Ｂ）ゲルから重合の残留成分を除去
   する工程と、（Ｃ）ポリオール、高分子アルコール、多
   糖類及びポリアミンの少なくとも１つの安定化量を加え
   る工程と、（Ｄ）ゲルを乾燥する工程とを備えてなる再
   水和性ポリアクリルアミドゲルの製造方法。 （２）前記ポリオール、高分子アルコール、多糖類又は
   ポリアミンは溶液の形態で加える特許請求の範囲第１項
   に記載の方法。 （３）前記ポリオール、高分子アルコール、多糖類又は
   ポリアミンはゲルを部分乾燥した後の再水和工程で加え
   る特許請求の範囲第１項に記載の方法。 （４）前記ポリオールは約２乃至２０個の炭素原子を有
   するグリコール及びグリセロールよりなる群から選ばれ
   る特許請求の範囲第１項に記載の方法。 （５）前記高分子アルコールは合成又は生物起源のもの
   である特許請求の範囲第１項に記載の方法。 （６）前記高分子アルコールはポリエチレングリコール
   又はポリビニルアルコールである特許請求の範囲第５項
   に記載の方法。 （７）前記多糖類はデキストランである特許請求の範囲
   第１項に記載の方法。 （８）前記ポリアミンはポリリシンである特許請求の範
   囲第１項に記載の方法。 （９）前記ポリオール、高分子アルコール、多糖類又は
   ポリアミンは混合物の全容量の約５乃至３０容量パーセ
   ントの量を加える特許請求の範囲第１項に記載の方法。 （１０）前記ポリオール、高分子アルコール、多糖類又
   はポリアミンは混合物の混合物の約７乃至１０容量パー
   セントの量を加える特許請求の範囲第９項に記載の方法
   。 （１１）ゲルはメチレンビスアクリルアミド、Ｎ，Ｎ１
   −ジアリルタルタルジアミド、ポリオレフィンアガロー
   ス、Ｎ，Ｎ′−（１，２−ジヒドロキシエチレン）ビス
   アクリルアミド、エチレンジアクリレート、ポリエチレ
   ングリコールジアクリレート及びＮ，Ｎ′−ビスアクリ
   ルシスタミン並びにこれらの混合物よりなる群から選ば
   れる架橋剤で架橋される特許請求の範囲第１項に記載の
   方法。 （１２）架橋剤はメチレンビスアクリルアミド、高分子
   アガロース又はこれらの混合物である特許請求の範囲第
   １１項に記載の方法。 （１３）前記アクリルアミドモノマーは支持物質上で重
   合される特許請求の範囲第１項に記載の方法。 （１４）前記支持物質は親水性ポリエステルシート又は
   シラン化合物で処理されたガラス板である特許請求の範
   囲第１３項に記載の方法。 （１５）前記ポリアクリルアミドゲルはシートの形態を
   なす特許請求の範囲１項に記載の方法。 （１８）前記シートは厚さが約３０乃至５００ミクロン
   である特許請求の範囲第１５項に記載の方法。 （１７）前記シートは厚さが約５０乃至３００ミクロン
   である特許請求の範囲第１６項に記載の方法。 （１８）（Ａ）アクリルアミドモノマーを重合してゲル
   を形成する工程と、 （Ｂ）ゲルから重合の残留成分を除去する工程と、 （Ｃ）ポリオール、高分子アルコール、多糖類及びポリ
   アミンの少なくとも１つの安定化量を加える工程と、 （Ｄ）ゲルを乾燥する工程と、 （Ｅ）ゲルを両性電解質、緩衝剤、染料、酵素、抗体、
   洗浄剤、解離剤及びこれらの混合物の少なくとも１つで
   再水和する工程とを備えてなるポリアクリルアミドゲル
   の製造方法。 （１９）前記抗体は単クローン性又は多価である特許請
   求の範囲第１８項に記載の方法。 （２０）前記洗浄剤は両性イオン性洗浄剤及びドデシル
   硫酸ナトリウムよりなる群から選ばれる特許請求の範囲
   第１８項に記載の方法。 （２１）ゲルは解離剤及び洗浄剤で再水和される特許請
   求の範囲第１８項に記載の方法。 （２２）ポリオール、高分子アルコール、多糖類及びポ
   リアミンの少なくとも１つの安定化量を含む架橋ポリア
   クリルアミドからなる再水和性ポリアクリルアミドゲル
   。 （２３）前記ポリオールは約２乃至２０個の炭素原子を
   有するグリコール及びグリセロールよりなる群から選ば
   れる特許請求の範囲第２２項に記載のポリアクリルアミ
   ドゲル。 （２４）前記高分子アルコールは合成又は生物起源のも
   のである特許請求の範囲第２２項に記載のポリアクリル
   アミドゲル。 （２５）前記高分子アルコールはポリエチレングリコー
   ル又はポリビニルアルコールである特許請求の範囲第２
   ４項に記載のポリアクリルアミドゲル。 （２６）前記多糖類はデキストランである特許請求の範
   囲第２２項に記載のポリアクリルアミドゲル。 （２７）前記ポリアミンはポリリシンである特許請求の
   範囲第２２項に記載のポリアクリルアミドゲル。 （２８）前記ポリオール、高分子アルコール、多糖類又
   はポリアミンは混合物の全容量の約５乃至３０容量パー
   セントの量存在する特許請求の範囲第２２項に記載のポ
   リアクリルアミドゲル。 （２９）前記ゲルはメチレンビスアクリルアミド、Ｎ，
   Ｎ１−ジアリルタルタルジアミド、ポリオレフィンアガ
   ロース、Ｎ，Ｎ′−（１，２−ジヒドロキシエチレン）
   ビスアクリルアミド、エチレンジアクリレート、ポリエ
   チレングリコールジアクリレート及びＮ，Ｎ′−ビスア
   クリルシスタミンよりなる群から選ばられる架橋剤で架
   橋される特許請求の範囲第２２項に記載のポリアクリル
   アミドゲル。 （３０）前記ゲルはメチレンビスアクリルアミド、高分
   子アガロース又はこれらの混合物で架橋される特許請求
   の範囲第２２項に記載のポリアクリルアミドゲル。 （３１）前記アクリルアミドモノマーは支持物質上で重
   合される特許請求の範囲第２２項に記載のポリアクリル
   アミドゲル。 （３２）前記支持物質は親水性ポリエステルシート、マ
   イラーフィルム又はシラン化合物で処理されたガラス板
   である特許請求の範囲第３１項のポリアクリルアミドゲ
   ル。 （３３）前記ゲルはシートの形態をなす特許請求の範囲
   第２２項に記載のポルアクリルアミドゲル。 （３４）前記シートは厚さが約３０乃至５００ミクロン
   である特許請求の範囲第３３項に記載のポリアクリルア
   ミドゲル。 （３５）前記シートは厚さが約５０乃至３００ミクロン
   である特許請求の範囲第３４項に記載のポリアクリルア
   ミドゲル。 （３６）両性電解質、緩衝剤、染料、酵素、抗体、洗浄
   剤、解離剤及びこれらの混合物の少なくとも１つと組合
   わせた架橋ポリアクリルアミドポリマ並びにポリオール
   、高分子アルコール、多糖類及びポリアミンの少なくと
   も１つからなるポリアクリルアミドゲル。 （３７）前記ゲルは電気泳動処理の支持マトリックスと
   して使用される特許請求の範囲第２２項に記載のポリア
   クリルアミドゲル。 （３８）前記ゲルは等電点電気泳動、連続ゾーン電気泳
   動又は不連続ゾーン電気泳動の支持マトリックスとして
   使用される特許請求の範囲第２２項に記載のポリアクリ
   ルアミドゲル。