JPS62108814A - 過酸化脂質生成抑制剤 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 ［産業上の利用分野］ 本発明は、過酸化脂質生成抑制剤に関し、更に詳しくは
、諸種虚血性疾患並びにそれに伴う諸種脳疾患、心疾患
及び末梢ｗＵ環障害の予防・治療剤として有用な過酸化
脂質生成抑制剤に関するものである。

［従来技術及びその問題点］ 、　　脳、心臓又は末梢における循環障害疾患において
、虚血（組織に血液が供給されない状態）により、細胞
膜から遊離されたアラキドン酸を始めとする不飽和脂肪
酸に対し、その周辺組織において生じた活性８１（ＯＨ
”ラジカル　スーパーオキサイド等）が作用して過酸化
脂質が生成する。このような変化は虚血中のみならず、
虚血再開通掛の血液を介する再酸素化により更に加速度
的に進展し、不飽和脂肪酸に富む生体膜細胞の傷害、周
辺組織の破壊、血管内皮の破壊、血管摩縮又は浮腫等を
引き起こし、これら一連の反応の悪循環により病態が進
展することが知られている（「脳虚血と細胞障害」浅野
孝雄編集　にゅ−ろん社、１９８０、　　ｒ脳虚血とフ
リーラジカル」浅野孝雄編集にゅ−ろん社、１９８３）
。

従って、活性酸素による過酸化脂質生成を抑制すれば、
組織の破壊、血管内皮の破壊、血管彎縮、浮腫等を防ぐ
ことが可能となり、従来の血流を増加することにより循
環改善をする薬物と全く異なり、疾患の原因に対して作
用する新しいタイプの循環障害予防・治療剤となる。特
に近年、梗塞部において血流を増加することの有効性が
疑問視され、急性期脳血管障害ではむしろ逆効果とさえ
言われており、このような薬剤は更に重要性を増してき
ている。

活性酸素による脂質過酸化を抑制する薬剤としては、ビ
タミンＥ、 次式： で示されるイデベノン（バイオケミカル−アンド・バイ
オフィジカル−リサーチ・コミュニケーションズ（日ｉ
ａｃｈｅｍｉｃａｌ　ａｎｄ　Ｂｉｏｐｈｙｓｉｃａｌ
　ＲｅＳｅａｒｃｈＣｏｍｍｕｎｉｃａｔｉｏｎｓ）　
１２５　１０４８（１９８４）；武田研究所報４４、３
０（ｔ９８５））及び 次式： で示されるニジフェノン（ジャーナル・オプ・ニューロ
ケミストリー　（Ｊｏｕｒｎａｌ　ｏｆ　Ｎｅｕｒｏ−
ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ）３７．９３４（１９８１）　）が
知られている。

しかしながら、ビタミンＥは作用が不充分であり、イデ
ベノン及びニジフェノンは合成経路が長く、またイデベ
ノンは水への可溶化が困難なため注射製剤化に問題が考
えられ、ニジフェノンは中枢神経系の抑制作用が強い　
（医薬品研究展。

１　（１９８５））という欠点を有する。

ピラゾロン銹導体としては、種々のものが知られている
。

特開昭５１−１３７６８号公報には、次式（Ａ）：で示
されるピラゾリン−５−オン誘導体及びその抗血栓剤と
しての用途が； 特開昭５９−１４１５１７号公報には、同化合物の心筋
性虚血後の梗塞、炎症、喘息等に対する治療薬としての
用途が； 特開昭５９−１７５４８９号公報には、次式・（式中、
Ｘは基−ＣＨ２ＣＨ２０−１−ｃＨ２ｃＨ２ｓ−等を表
わし、Ｒはアリール基を表わす。） で示されるピラゾリン−５−オン誘導体及びそのりボキ
シゲナーゼ阻害剤としての用途が；特公昭５９−５１２
号公報には、次式：（式中、Ｒ１は水素原子又はアミ７
基を表わし、Ｒ２はアリール基を表わし、Ｘは基−（：
Ｈ２ＣＨ２−等を表わす、） で示されるピラゾリン−５−オン誘導体及びその利尿剤
、抗高血圧剤、抗血栓剤としての用途が；***特許願第
２８３８　Ｈ１号公報には、次式：（式中、Ｒ１及びＲ
２は、水素原子又は置換基を表わす、） で示されるピラゾリン−５−オン誘導体及びその抗炎症
剤としての用途が記載されているが、活性酸素による脂
質過酸化を抑制する作用に関する記載はない。また、式
（Ａ）で示される化合物はラット、ウサギ及びイヌを用
いた虚血性心疾患のモデルでは有効とされるが、ヒト心
臓の循環動態に近似のブタを用いたモデルでは無効であ
り、この結果はヒトにおける虚血性心疾患に無効である
との報告に良く一致している　（ヨーロピアン・ジャー
ナルφオフーフフルマコロジイ（ＥｕｒｏｐｅａｎＪｏ
ｕｒｎａｌ　ｏｆ　ＰｈａｒＩＩｌａｃｏｌｏｇｙ）　
１１４．１８９（１９８５））。

また脳虚血再開通後の保護に関する具体的な作用につい
ての記載もない。

そこで、本発明者等は、活性酸素による脂質過酸化を抑
制する作用を有する薬剤を提供することを目的として鋭
意研究を重ねた結果、 次式（１）： （式中、Ｒ１は、水素原子、アリール基、炭素数１〜５
のアルキル基又は総炭素数３〜８のアルコキシカルボニ
ルアルキル基を表わし；Ｒ２は、水素原子、アリールオ
キシ基、アリールメルカプト基、炭素数　１〜５のアル
キル基又は炭素数１〜３のヒドロキシアルキル基を表わ
し；あるいは、Ｒ１及びＲ２は、共同して炭素数３〜５
のアル午しン基を表わし；Ｒ３は、水素原子、炭素数１
〜５のアルキル基、炭素数５〜７のシクロアルキル基、
炭素数１〜３のヒドロキシアルキル基、ベンジル基、ナ
フチル基又は非置換の、又は炭素数　１〜５のアルキル
基、炭素数　１〜５のアルコキシ基、炭素数１〜３のヒ
ドロキシアルキル基、総炭素数２〜５のアルコキシカル
ボニル基、炭素数ｌ〜３のアルキルメルカプト基、炭素
数　１〜４のアルキルアミノ基、総炭素数　２〜８のジ
アルキルアミノ基、ハロゲン原子、トリフルオロメチル
基、カルボキシル基、シアノ基、水酸基、ニトロ基、ア
ミ７基及びアセトアミド基からなる群から選ばれる同−
若しくは異なる　１〜３個の置換基で置換されたフェニ
ル基を表わす。） で示されるピラゾロン誘導体が強力な脂質過酸化抑制作
用を有し、実際の病態に近い脳虚血再開通状態の動物モ
デルにおいて、脳波の回復等の保護作用を有することを
見出し、本発明を完成するに至った。

［発明の構成］ 本発明の過酸化脂質生成抑制剤は、前記式（ｌで示され
るピラゾロン誘導体又はその薬学的に許容される塩を有
効成分とすることを特徴とするものである。

本発明に用いる化合物ＣＩ）は、次式（Ｉ′）又は（Ｉ
“）： （Ｉ’）　　　　　　　　　（Ｉ“） で示される構造をもとりうる。従って、前記式（■゛）
又ｒｉ（ｔ”）の構造をとる化合物も本発明の有効成分
に含まれる。

前記式ＣＩ）において、Ｒ１の定義（こおけるアリール
基としては、フェニル基並びにメチル基、ブチル基、メ
トキシ基、ブトキシ基、塩素原子及び水酸基等の置換基
で置換されたフェニル基等が挙げられる。Ｒ１、Ｒ２及
びＲ３の定義（こおける炭素数　１〜５のアルキル基と
しては、メチル基、エチル基、プロピル基、インプロピ
ル基、ブチル基。

インブチル基、５ｅｃ−ブチル基、　ｔｅｒｔ−ブチル
基、ペンチル基等が挙げられる。Ｒ１の定義における総
炭素ａ３〜６のアルコキシカルボニルアルキルとしては
、メトキシカルボニルメチル基、エトキシカルボニルメ
チル基、プロポキシカルボニルメチル基、メトキシカル
ボニルエチル基、メトキシカルボニルプロピル基等が挙
げられる，　Ｒ２の定義におけるアリールオキシ基とし
ては，フェノキシ基、ｐ−メチルフェノキシ基、ｐ−メ
トキシフェノキシ基、ｐ−クロロフェノキシ基、ｐ−ヒ
ドロキシフェノキシ基等が挙げられ、アリールメルカプ
ト基としては、フェニルメルカプト基、ｐ−メチルフェ
こルメルカブト基、ｐ−メトキシフェニルメルカプト基
、ｐ−クロロフェニルメルカプトドロキシフェニルメル
カプ）１等が挙げられる。

Ｒ２及びＲ３の定義における炭素数　１〜３のヒドロキ
シアルキル基としては、ヒドロキシメチル基。

２−ヒドロキシエチル基、３−ヒドロキシプロピル基等
が挙げられる。Ｒ３の定義における炭素数５〜７のシク
ロアルキル基としては、シクロペンチル基、シクロヘキ
シル基、シクロへブチル基等が挙げられる。Ｒ３の定義
において、フェニル基の置換基における炭素数　１〜５
のアルコキシ基としては、メトキシ基、エトキシ基、プ
ロポキシ基、イソプロポキシ基、ブトキシ基、ペンチル
オキシ基等が挙げられ、総炭素数２〜５のアルコキシカ
ルボニル基としては、メトキシカルボニル基、エトキシ
カルボニル トキシカルボニル基等が挙げられ、炭素数　１〜３のア
ルキルメルカプト基としては、メチルメルカプト基、エ
チルメルカプト基、プロピルメルカプト基等が挙げられ
、炭素数　１〜４のアルキルアミ７基としては，メチル
アミノ基，エチルアミノ基、プロピルアミン基、ブチル
アミノ基等が挙げられ、総炭素数２〜８のジアルキルア
ミノ基としては、ジメチルアミノ基、ジエチルアミノ基
、ジプロピルアミ７基、ジブチルアミノ基等が挙げられ
る。

本発明に用いる化合物（Ｉ）の具体例とじては，例えば
、以下に示す化合物が挙げられる。

０３−メチル−１−フェニル−２−ピラゾリン−５−オ
ン０３−メチル−１−（２−メチルフェニル）−２−ピ
ラゾリン−５−オン ０３−メチル−１−（３−メチルフェニル）−２−ピラ
ゾリン−５−オン ０３−メチル−１−（４−メチルフェニル）−２−ピラ
ゾリン−５−オン ｏ３−メチル−１−（３．４−ジメチルフェニル）−２
−ピラゾリン−５−オン ０１−（４−エチルフェニル）−３−メチル−２−ピラ
ゾリン−５−オン ０３−メチル−１−（４−プロピルフェニル）−２−ピ
ラゾリン−５−オン ０　１−（４−ブチルフェニル）−３−メチル−２−ピ
ラゾリン−５−オン Ｑ　Ｉ−（３−　　トリフルオロメチルフェニル）−３
−メチル−２〜ピラゾリン−５−オン ０　１−（４−　トリフルオロメチルフェニル）−３−
メチル−２−ピラゾリン−５−オン Ｑ　１−（２−メトキシフェニル）−３−メチル−２−
ビランリン−５−オン ｏｉ−（３−メトキシフェニル）−３−メチル−２−ピ
ラゾリン−５−オン ０　１−（４−メトキシフェニル）−３−メチル−２−
ピラゾリン−５−オン ０　１−（３．４−ジメトキシフェニル）−３−メチル
−２−ピラゾリン−５−オン ０　１−（４−エトキシフェニル）−３−メチル−２−
ピラゾリン−５−オン ０３−メチル−１−（４−プロポキシフェニル）−２−
ピラゾリン−５−オン ０　１−（４−ブトキシフェニル）−３−メチル−２−
ピラゾリン−５−オン ０１−（２−クロロフェニル）＝３−メチル−２−ピラ
ゾリン−５〜オン ０　１−（３−クロロフェニル）−３−メチル−２−ピ
ラゾリン−５−オン ０　１−（４−クロロフェニル）−３−メチル−２−ピ
ラゾリン−５〜オン ０１−（３，４−ジクロロフェニル）−３−メチル−２
−ピラゾリン−５−オン ０１−（４−ブロモフェニル）−３−メチル−２−ピラ
ゾリン−５−オン ０１−（４−フルオロフェニル）−３−メチル−２−ピ
ラゾリン−５−オン ０１−（３−クロロ−４−メチルフェニル）−３−メチ
ル−２−ピラゾリン−５−オン ０１−（３−メチルメルカプトフェニル）−３−メチル
−２−ピラゾリン−５−オン ６１−（４−メチルメルカプトフェニル）−３−メチル
−２−ピラゾリン−５−オン ０４−（３−メチル−５−オキソ−２−ピラゾリン−１
−イル）安息香酸 ０ｌ−（４−エトキシカルボニルフェニル）−３−メチ
ル−２−ピラゾリン−５−オン ０１−（４−ニトロフェニル）−３−メチル−２−ピラ
ゾリン−５−オン ｏ３−エチル−１−フェニル−２−ピラゾリン−５−オ
ン０１−フェニル−３−プロピル−２−ピラゾリン−５
−オ０１．３−ジフェニ）レー２−ピラゾリンー５−オ
ン０３−フェニル−１−（Ｐ−トリル）−２−ピラゾリ
ン−５−オン ０１−（４−メトキシフェニル）−３−フェニル−２−
ピラゾリン−５−オン ０１−（４−クロロフェニル）−３−フェニル−２−ピ
ラゾリン−５−オン ０３．４−ジメチル−１−フェニル−２−ピラゾリン−
５−オン ０４−インブチル−３−メチル−１−フェニル−２−ピ
ラゾリン−５−オン Ｑ　４−（２−ヒドロキシエチル）−３−メチル−１−
フェニル−２−ピラゾリン−５−オン ｏ３−メチル−４−フェノキシ−１−フェニル−２−ピ
ラゾリン−５−オン ｏ３−メチル−４−フェニルメルカプト−１−フェニル
−２−ピラゾリン−５−オン ０３．３’　、４，５，８．７−ヘキサヒドロ−２−フ
ェニル−２Ｈ−インダゾール−３−オン ｏ　３−　（エトキシカルボニルメチル）−トフェニル
ー２−ピラゾリンー５−オン ０１−フェニル−２−ピラゾリン−５−オン０３−メチ
ル−２−ピラゾリン−５−オンｏ１，３−ジメチルー２
−ピラゾリン−５−オン０１−エチル−３−メチル−２
−ピラゾリン−５−オン０１−ブチル−３−メチル−２
−ピラゾリン−５−オン０ｌ−（２−ヒドロキエチル）
−３−メチル−２−ピラゾリン−５−オン ０１−シクロへキシル−３−メチル−２−ピラゾリン−
５−オン ｏｌ−ベンジル−３−メチル−２−ピラゾリン−５−オ
ンｏ１−（α−ナフチル）−３−メチル−２−ピラゾリ
ン−５−オン ｏｌ−メチル−３−フェニル−２−ピラゾリン−５−オ
ン０３−メチル−１−（４−メチルフェニル）−２−ピ
ラゾリン−５−オン ０ｌ−（４−プチルフェこル）−３−メチル−２−ピラ
ゾリン−５−オン ０１−（４−メトキシフェニル）−３−メチル−２−ピ
ラゾリン−５−オン Ｏ１−（４−ブトキシフェニル）−３−メチル−２−ピ
ラゾリン−５−オン ０１−（４−クロロフェニル）−３−メチル−２−ピラ
ゾリン−５−オン ０１−（４−ヒドロキシフェニル）−３−メチル−２−
ピラゾリン−５−オン ０１−（３，４−ジヒドロキシフェニル）−３−メチル
−２−ピラゾリン−５−オン Ｑｌ−（２−ヒドロキシフェニル）−３−メチル−２−
ピラゾリン−５−オン ０１−（３−ヒドロキシフェニル）−３−メチル−２−
ピラゾリン−５−オン ０１−（４−ヒドロキシフェニル）−３−メチル−２−
ピアゾリン−５−オン ０１−（３，４−ヒドロキシエチルニル）−３−メチル
−２−ピラゾリン−５−オン ０１−（４−ヒドロキシフェニル）−３−フェニル−２
−ピラゾリン−５−オン ０１−（４−ヒドロキシメチルフェニル）−３−メチル
−２−ピラゾリン−５−オン ０１−（４−アミノフェニル）−３−メチル−２−ピラ
ゾリン−５−オン ０１−（４−メチルアミノフェニル）−３−メチル−２
−ピラゾリン−５−オン ０１−（４−エチルアミノフェニル）−３−メチル−２
−ピラゾリン−５−オン ０１−（４−ブチルアミノフェニル）−３−メチル−２
−ピラゾリン−５−オン ０　１−（４−ジメチルアミノフェニル）−３−メチル
−２−ピラゾリン−５−オン ｏｌ−けセトアミドフェニル）−３−メチル−２−ピラ
ゾリン−５−オン ０１−（４−シアノフェニル）−３−メチル−２−ピラ
ゾリン−５−オン 本発明に用いる化合物の一部は、染料等の中間原料とし
て用いられる既知化合物であるが、医薬としての用途は
知られていない。

本発明に用いる化合物（Ｉ）の塩のうち、薬学的に許容
される塩としては、塩酸、硫酸、臭化水素酸、リン酸等
の誠酸との塩；メタンスルホン酸、ｐ−トルエンスルホ
ン酸、ベンゼンスルホン酸、酢酸、グリコール酸、グル
クロン酸、マレイン酸、フマル酸、シュウ酸、アスコル
ビン酸、クエン酸、サリチル酸、ニコチン酸、酒石酸等
の有機酸との塩；ナトリウム、カリウム等のアルカリ金
属との塩；マグネシウム、カルシウム等のアルカリ土類
金属との塩；アンモニア、トリス（ヒドロキシメチル）
アミノメタン、Ｎ、Ｎ−ビス（ヒドロキシエチル）ピペ
ラジン、２−アミノ−２−メチル−１−プロパツール、
エタノールアミン、Ｎ−メチルグルカミン、Ｌ−グルカ
ミン等のアミンとの塩が挙げられる。

本発明に用いる化合物は、合目的的な任意の方法で合成
することができるが、好ましい方法の１例を次に示す。

（Ｉ） （式中、　Ｒ１，Ｒ２及びＲ３は前記と同義であり、Ｒ
′は炭素数１〜５のアルキル基を表わす、）即ち、式（
ＩＴ）で示されるβ−ケト酸誘導体と式（ＩＩＩ）で示
されるヒドラジン誘導体を、例えばメタノール、エタノ
ール等のアルコール類若しくはベンゼン、トルエン等芳
香族類のような溶媒の存在下又は無溶媒で、必要に応じ
て、炭酸カリウム、ナトリウムエトキシド、水酸化ナト
リウム、水酸化カリウム、酢酸ナトリウム等の塩基、塩
酸、硫酸、臭化水素酸等の鑑酸、酢酸、パラトルエンス
ルホン酸等の有機酸等の触媒の存在下、ｌＯ〜２００″
Ｃの温度で反応させることにより、化合物（１）を得る
ことができる。

また、Ｒ３のアリール基の置換基によっては次に示すよ
うにして目的物を合成することができる。

（式中、Ｒ１，Ｒ２及びＲ゛は前記と同義であり、Ｒ“
は水素原子、炭素数１〜５のアルキル基又は総炭素ａ２
〜６のフルコキシカルポニル基を表わす、） 該置換基が水酸基である目的物は、例えば適当なアルコ
キシ基を臭化水素酸又はルイス酸で分解することにより
得ることができる。該置換基がヒドロキシメチル基であ
る目的物は、例えばカルボン酸又はその誘導体を適当な
還元剤、例えば水素化アルミニウムリチウム、水素化ホ
ウ素ナトリウム、ジポランで還元することにより得るこ
とができる、該置換基がアミノ基である目的物は、例え
ば、ニトロ基を適当な条件、例えば水素−Ｐｄ／Ｃ１塩
酸−塩化第二スズで還元することにより得ることができ
る。

化合物（Ｉ）を臨床に応用するに際し、経口的に用いる
場合は、成人に対し　１回化合物（Ｉ）として　１〜１
００ｍｇを　１日　１〜３回投与するのが好ましく、静
脈注射の場合は、成人に対し　１回化合物（Ｉ）として
０．０１〜ＩＯＢを　１日　２〜５回投与又はこれらの
用量を点滴持続注入するのが好ましく、また、直腸内投
与の場合は、　１回化合物（Ｉ）として、　１〜１００
Ｂを　１日　１〜３回投与するのが好ましい。また１以
上の投与量は、年齢、病態、症状により適宜増減するこ
とが更に好ましい。

また、経口又は直腸内投与の場合は、徐放化製剤として
用いてもよい。

製剤化に際しては、化合物ＣＩ）又はその薬学的に許容
される塩の一種又は二種以上を、通常用いられるｆ！Ｊ
！薬用担体、賦形剤その他の添加物を含む組成物として
使用するのふつうである。医薬担体は固体でも液体でも
よく、固体担体の例としては乳糖、白陶土（カオリン）
、シ：Ｉ糖、結晶セルロース、コーンスターチ、タルク
、寒天、ペクチン、アカシア、ステアリン酸、ステアリ
ン酸マグネシウム、レシチン、塩化ナトリウム等が挙げ
られる。

液状の担体の例としては、シロップ、グリセリン、落花
生油、ポリビニルピロリドン、オリーブ湯、エタノール
、ベンジルアルコール、プロピ１／ングリコール、水等
が挙げられる。

種々の剤形をとることができ、固体担体を用いる場合は
、錠剤、散剤、顆粒剤、硬ゼラチンカプセル剤、坐剤又
はトローチ剤とすることができる。固体担体の量は広範
に変えることができるが好ましくは約　１ｍｇ〜約１ｇ
とする。

液状の担体を用いる場合は、シロップ、乳液、軟ゼラチ
ンカプセル、更にアンプル入りのような滅菌注射液又は
水性若しくは非水性の懸濁液とすることができる。

また、化合物（Ｉ）をシクロデキストリン包接体又はリ
ポソーム中に入れる等の操作をして、用いることもでき
る。

［発明の効果］ 本発明の過酸化脂質生成抑制剤は、優れた作用を有し、
諸種虚血性疾患若しくはそれに基づく諸種疾患、即ち、
脳梗塞、脳卒中等の脳血管障害、又はそれらに起因する
脳機能低下、血管性痴呆、加齢に伴う脳血管組織病変等
の諸種脳疾患、心筋梗塞、心不全等心筋虚血に基づく諸
種心疾患及び諸種末梢′Ｏａ環障害等の予防・治療剤と
して有用である。

［発明の実施例］ 以下、合成例及び実施例に基づいて本発明を更に詳細に
説明するが、これらは、本発明の範囲を何ら制限するも
のではない。

合成例１ エタノール５〇−中にアセト酢酸エチル１３．０ｇ及び
フェニルヒドラジン１０．８ｇを加え、　３時間還流攪
拌した。放冷後、析出した結晶を枦取し、エタノールよ
り再結晶して３−メチル−１−フェニル−２−ピラゾリ
ン−５−オン（化合物Ｎｏ、１）　１１．３ｇを無色結
晶として得た。

収率　　８５％ 融点　　１２７．５〜１２８．５℃ 合成例２〜４３ 合成例１と同様にして表１に化合物Ｎｏ、２〜４３とし
て示す化合物を合成した。

合成例４４ １−（２−メトキシフェニル）−３−メチル−２−ピラ
ゾリン−５−オン　１．８０ｇを４７％臭化水素酸１８
−及び酢酸１８−の混合液中に加え、６．５時間還流攪
拌した。溶奴留去後、ＮａＨＣＱ３水溶液を加えてＰＨ
４とした後、酢酸エチルで抽出した。有機層を乾燥し、
ｅ縮径、残渣をエタノールから再結晶して１−（２−ヒ
ドロキシフェニル）−３−メチル−２−ピラゾリン−５
−オン　（化合物ＮＯ，４４）１．１９ｇを無色結晶と
して得た。

収率　　６７％ 融点　　２１２．５〜２１４℃ 合成例４５〜４Ｂ 合成例４４と同様にして表１に化合物Ｎｏ、４５〜４８
として示す化合物を合成した。

合成例４９ 無水クロロホルム　２５０ｄ中に　４−（３−メチル−
５−オキソ−２−ピラゾリン−１−イル）安息香酸５．
Ｏｇ及びトリエチルアミン２５ａ／を加え、更に水冷下
、クロル炭酸エチル１２．５＋Ｊを滴下した。溶媒留去
後、残渣をＴＨＦ　　２００−に溶解させ、不溶物をか
力抜、炉液に、ＮａＢＨ４２，０８ｇを水６０Ｗｋｌに
溶解した溶液を滴下し、室温で２時間攪拌した。溶媒留
去後、残渣に水を加え、希塩酸でＰＨ４〜５に調節した
後。

クロロホルムで抽出した。有機層を乾燥し、濃縮後、シ
リカゲルカラムクロマト上で展開溶媒としテクロロホル
ムーエタノール（＋００：ｌ）を用いて精製し、クロロ
ホルム−エチルエーテルで再結晶して　１−（４−ヒド
ロキシメチルフェニル）−３−メチル−２−ピラゾリン
−５−オン（化合物Ｎｏ、４９）１．．１８ｇを無色結
晶として得た。

収率　　３５％ 融点　　１３９〜１４０℃ 合成例５０ メタノール　３１〇−中に３−メチル−１−（４−ニト
ロフェニル）−２−ピラゾリン−５−オン　５００ｍｇ
を溶解し、　５％Ｐｄ１０　５０ｍｇ及び濃塩酸０．８
−を加え、水素雰囲気下で攪拌し、計算量の水素を消費
させた後、触媒を枦去し、ｌｐ液を濃縮した。残液をメ
タノール−エチルエーテルで再結晶して　１−（４−ア
ミノフェニル）−３−メチル−２−ピラゾリン−５−オ
ン二塩酸塩（化合物Ｎｏ、５０）４０９ｍｇを淡褐色結
晶として得た。

収率　　６８％ 融点　　１９６〜２００　’（：！ 合、成例５１ 合成例１と同様にして表１に化合物Ｎｏ、５１　として
示す化合物を合成した。

実施例１ （１）脂質過酸化抑制作用 （ａ）脳ホモジェネートの作製 ウィスター（Ｗｉｓｔａｒ）系雄性ラットを用い、以下
の操作手順に従って脳ホモジェネートを作製した。ベン
トパルビタールナトリウム４５Ｂ／ｋｇの腹腔内投与で
麻酔下に開胸し、左心室からポリエチレンチューブを大
動脈内に挿入し固定した。

次いで、このチューブを介して水冷した５０ＩＩＭリン
酸塩緩衝生理食塩水（ｐＨ７，４）　（以下ｒＰＢｓＪ
という。）で脳潅流を行い。全脳を摘出した。小脳を除
去後、大脳の湿重量を測定し、その９倍量のＰＢＳを加
え、氷水中においてテフロンホモジェナイザーで破砕し
均質化した。この脳ホネジェネートを４℃において２２
００ｒｐｍで１０分間遠心分離後、上清部０．３４を共
栓付遮光試験管に分取し、薬物評価用脳ホネジェネート
とした。

（ｂ）被験薬の評価 （ａ）で調製した脳ホモジェネートにＰＢＳ　　Ｏ，６
Ｉ、Ｌ／及び被験薬のエタノール溶液１０終り　（終濃
度５００ｇＭ又は０．３〜１００　μＮの公比３での濃
度）を添加し、３７°Ｃの温浴中で３０分間加温した。

次いで、３５％過塩素酸水溶液２００ル文を添加後、　
４°Ｃにおいて２８００ｒｐｍで１０分間遠心分離し、
上清を得た。

また、ブランク測定用として被験薬のエタノール溶液１
０用文の代りにエタノール１０ル文を添加しくブランク
）、同様に操作した。

（Ｃ）過酸化脂質の定量 （ｂ）で得たと盾部０．１−に８．１％ドデシル硫酩酊
ナトリウム水溶液０．２−１２０％酢酸緩衝液（ｐＨ３
，５）　１．５−１０．６７％２−チオバルビッール酸
水溶液　１，５ｄ及び蒸留水０．７−を加えて混和した
。

次いで、この混液を沸騰水浴中で６０分間加熱後。

氷水で急速に冷却し、蒸留水　１０−及びピリジン−ブ
タノール混液（１：１５）　５．０−を加え、約３０秒
間振盪後、３０００ｒｐｍで１０分間遠心分離し、その
上清部を過酸化脂質測定用試料とした。なお、リボパー
オキシド−テスト（Ｌｉｐｏｐｅｒａｘｉｄｅ−ｔｅｓ
ｔ）（和光紬薬■製；　１，１，３．３−テトラエトキ
シプロパン５ｒ＋ｍｏ交／−含有）Ｏ７１−を（ｂ）で
得た脳ホモジェネートの代りに添加し、標準液とした。

過酸化脂質は蛍光分光光度計（■日立製作所製２０４型
）を用い、励起波長５１５ｎｍ　、蛍光波長５５０ｎＩ
１１で測定し、次式に従って過酸化脂質量（ＴＢＡ値）
を求めた。

Ｆ；　標亭液の蛍光強度 ｆ；　被験薬の蛍光強度 次いで、（ｂ）のブランクのＴＢＡ値に対する被験薬各
濃度の抑制率を求め、最小二乗法に従ってｉｃ、、、値
を算出した。結果を表１に示す。

（２）ｌ血　　゛モデルに゛ける　； 体重的４００ｇのウィスター（Ｗｉｓｔａｒ）系雄性う
−、トにｄ−ツボクラリン０．６１１１ｇを筋肉内投与
して不動化し、気管カニユーレ装着後、人工呼吸下に頭
部を脳定位固定装置に保定した。頭皮を切開し、頭蓋骨
を穿孔後、硬膜ニガ大脳皮質前頭葉表面上に脳波導出用
の電極を存置した。電極を歯科用セメントを用いて頭蓋
骨に固定後、動物を前位に保持（７た０次いで、全身圧
測定用のカニユーレを左大腿動脈内に、ｄ−ツボクラリ
ン追加投与用のカニユーレを左大腿静脈内にそれぞれ留
置した。心拍数は動脈波によって心拍数計を駆動し測定
記録。

した。

血圧、心拍数及び脳波の諸パラメーターの安定後に、　
１％トラガカントゴム溶液でＩＪ　１ｋｇとなるように
懸濁調製した本発明の有効成分１０ｍｇ／ｋｇを脳虚血
負荷３０分前に十二指腸内に直接投与した。対照群には
、同容量の　１％トラガカントゴム溶液のみを同様に投
与した。

薬物投与１０〜２０分後に脳波、血圧及び心拍数を多用
途監視記録装置　（日本光電株製、Ｒト８５型）上で監
視しながら、脳虚血負荷のために以下の１［・式に従っ
て操作を行った。

先ず、左動軟骨端部で肋骨を遊離し、開胸した。次いで
、大動脈起始部で露出した左総頚動脈と左椎骨動脈を同
時に、続いて腕頭動脈を、動脈クリップを用いて薬物投
手３０分後に閉塞することによって、１０分間の頭部血
流の遮断を行った。

頭部血流の再開通は、前記各部位に装着した２本の動脈
クリップを同時に解除することによって行った。

薬物の脳虚血負荷３０分前の障害に対する保護作用は、
脳波の回復の有無によって検討した。

なお、実験中は保温マットを用い、動物の直腸温を３７
〜３８°Ｃに保持した。また、直ＩＩ！温は脳波、犬Ｉ
Ｉ、ｉｔ動脈圧及び心拍数と共にレコーダー上にＸ！ｌ
続描記した。

脳虚血を１０分間負荷したところ、虚血直後から脳波の
電圧は低下し、約１５秒も経過すると脳波は消失、平坦
化した。このような虚血負荷中の脳波の平坦化は対照群
及び本発明の有効成分投与群の双方に共通して認められ
た。

１０分間の脳虚血を解除し、再開通しても、対照群では
金側脳波の出現は全く認められず、虚血負荷中と同様に
平坦化されたままに推移した。このような平坦脳波の持
続によって、動物は再開通後平均７５分には死亡した。

しかしながら、本発明の有効成分投与群では。

再開通中に脳波が回復出現し、いわゆる脳機能の回復と
共に心脈管系の機能が賦活、正常化された。これらの総
合的な結果として、動物の生存時間は明らかに延長され
た。結果を表２に示す。

実施例２ −　　−　　　　の　　、　　　　　　　　−ｊ　　　
　）　　　　　　　　１ノ１　　　　の　１（＋）錠剤 下記成分を常法に従って混合し、慣用の装置により打錠
した。

本発明の有効成分　　　　　　　ＩＱ　　ｍｇ結晶セル
ロース　　　　　　　　２１　　ｍｇコーンスターチ　
　　　　　　　３３　　ｍｇ乳糖　　　　　　　　　　
　　　６５　　ｍｇステアリン酸マグネシウム　　　　
ｔ、３Ｂ（２）軟カプセル剤 下記成分を常法に従って混合し、軟カプセルに充填した
。

本発明の有効成分　　　　　　　１０　　ｒｎｇ。

オリーブ油　　　　　　　　　　１０５　　ｍｇレシチ
ン　　　　　　　　　　　　８．５ｍｇ（３）注射用製
剤 下記成分を常法に従って混合して　１−アンプルを：Ａ
製した。

Claims (1)

1. 【特許請求の範囲】 次式：▲数式、化学式、表等があります▼ （式中、Ｒ＿１は、水素原子、アリール基、炭素数１〜
   ５のアルキル基又は総炭素数３〜６のアルコキシカルボ
   ニルアルキル基を表わし；Ｒ＿２は、水素原子、アリー
   ルオキシ基、アリールメルカプト基、炭素数１〜５のア
   ルキル基又は炭素数１〜３のヒドロキシアルキル基を表
   わし；あるいは、Ｒ＿１及びＲ＿２は、共同して炭素数
   ３〜５のアルキレン基を表わし；Ｒ＿３は、水素原子、
   炭素数１〜５のアルキル基、炭素数５〜７のシクロアル
   キル基、炭素数１〜３のヒドロキシアルキル基、ベンジ
   ル基、ナフチル基又は非置換の、又は炭素数１〜５のア
   ルキル基、炭素数１〜５のアルコキシ基、炭素数１〜３
   のヒドロキシアルキル基、総炭素数２〜５のアルコキシ
   カルボニル基、炭素数１〜３のアルキルメルカプト基、
   炭素数１〜４のアルキルアミノ基、総炭素数２〜８のジ
   アルキルアミノ基、ハロゲン原子、トリフルオロメチル
   基、カルボキシル基、シアノ基、水酸基、ニトロ基、ア
   ミノ基及びアセトアミド基からなる群から選ばれる同一
   若しくは異なる１〜３個の置換基で置換されたフェニル
   基を表わす。） で示されるピラゾロン誘導体又はその薬学的に許容され
   る塩を有効成分とすることを特徴とする過酸化脂質生成
   抑制剤。