JPS59102436A - 吸着体 - Google Patents
吸着体Info
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- JPS59102436A JPS59102436A JP57212379A JP21237982A JPS59102436A JP S59102436 A JPS59102436 A JP S59102436A JP 57212379 A JP57212379 A JP 57212379A JP 21237982 A JP21237982 A JP 21237982A JP S59102436 A JPS59102436 A JP S59102436A
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- Japan
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- gel
- lipoprotein
- ldl
- adsorbent
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Abstract
(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。
め要約のデータは記録されません。
Description
【発明の詳細な説明】
本発明は血液中の有害成分の除去用の吸着体に関する。
さらに詳しくは、血液あるいは血漿、血清中からリポ蛋
白、特に低密度リポ蛋白（ＬＤＬ）を選択的に吸着除去
するだめの吸着体に関する。
白、特に低密度リポ蛋白（ＬＤＬ）を選択的に吸着除去
するだめの吸着体に関する。
血液中に存在するリポ蛋白のうちＬＤＬはコレステロー
ルを多く含み、動脈硬化の原因となることが知られてい
る。とりわけ家族性高脂血症等の扁コレステロール症で
は正常値の数倍のＬＤＬ値を示し、冠動脈の硬化等をひ
きおこす。この治療のため、血中ＬＤＬの低下を目的と
して食事療法、グロブコール、コレスチラミン等の薬物
療法が行なわれているが効果に限度があり、副作用も懸
念されている。特に家族性高脂血症に対しでは患者の血
漿を分離した後、正常血漿あるいはアルブミン等を成分
とする補液と交換する、いわゆる血漿交換療法が現在の
ところほぼ唯一の効果的な治療法である。しかしながら
周知のごとく血漿交換療法は、ｌ）高価な新鮮血漿ある
いは血漿製剤を用いる必要がある。２）肝炎ビールス等
の感染のおそれがある。３）有害成分のみでなく有用成
分も同時ｔζ除去してしまう等の欠点を有する。これら
の欠点を解消する目的で膜による有害成分の除去が試み
られているが、選択性の点で満足できるものはいまだ得
られていない。
ルを多く含み、動脈硬化の原因となることが知られてい
る。とりわけ家族性高脂血症等の扁コレステロール症で
は正常値の数倍のＬＤＬ値を示し、冠動脈の硬化等をひ
きおこす。この治療のため、血中ＬＤＬの低下を目的と
して食事療法、グロブコール、コレスチラミン等の薬物
療法が行なわれているが効果に限度があり、副作用も懸
念されている。特に家族性高脂血症に対しでは患者の血
漿を分離した後、正常血漿あるいはアルブミン等を成分
とする補液と交換する、いわゆる血漿交換療法が現在の
ところほぼ唯一の効果的な治療法である。しかしながら
周知のごとく血漿交換療法は、ｌ）高価な新鮮血漿ある
いは血漿製剤を用いる必要がある。２）肝炎ビールス等
の感染のおそれがある。３）有害成分のみでなく有用成
分も同時ｔζ除去してしまう等の欠点を有する。これら
の欠点を解消する目的で膜による有害成分の除去が試み
られているが、選択性の点で満足できるものはいまだ得
られていない。
また同じ目的で抗原、抗体等を固定したいわゆる免疫吸
着体を用いる試みがなされており、これは選択性の点で
はほぼ満足できるものの、用いる抗原、抗体の入手が困
難かつ高価であるという致命的な欠点を有する。
着体を用いる試みがなされており、これは選択性の点で
はほぼ満足できるものの、用いる抗原、抗体の入手が困
難かつ高価であるという致命的な欠点を有する。
さらには有害成分に親和性を有する化合物（いわゆるリ
ガンド）を固定した、いわゆるアフィニティークロマト
グラフの原理による吸着体も試みられている。これに用
いるリガンドは比較的安価で、選択性も比較的よく好都
合であるが、担体にアガロースに代表されるソフトゲル
を用いているため、カラムに充填した場合に十分な流量
を得るのが困難であった。すなわち近年発達した体外循
環回路を用いた血液、血漿かん流療法（いわゆるプラズ
マ７エレーシス等〕にこれらの吸着体を用いようとすれ
ば、筒流量を得るためにカラム形状に特別の工夫を要し
、またしばしば詰りを生ずるだめ予備のカラムを用意し
ておく必要があるなど問題点が多く、安定して治療を行
なえる状況には到っていない。吸着体の流れ特性を向上
嘔せるためには機械強度の大きい担体を用いればよいの
は明白であるが、これらの担体を用いるとアガロース等
のソフトゲルに比べて吸着能力が低下することが知られ
ている。
ガンド）を固定した、いわゆるアフィニティークロマト
グラフの原理による吸着体も試みられている。これに用
いるリガンドは比較的安価で、選択性も比較的よく好都
合であるが、担体にアガロースに代表されるソフトゲル
を用いているため、カラムに充填した場合に十分な流量
を得るのが困難であった。すなわち近年発達した体外循
環回路を用いた血液、血漿かん流療法（いわゆるプラズ
マ７エレーシス等〕にこれらの吸着体を用いようとすれ
ば、筒流量を得るためにカラム形状に特別の工夫を要し
、またしばしば詰りを生ずるだめ予備のカラムを用意し
ておく必要があるなど問題点が多く、安定して治療を行
なえる状況には到っていない。吸着体の流れ特性を向上
嘔せるためには機械強度の大きい担体を用いればよいの
は明白であるが、これらの担体を用いるとアガロース等
のソフトゲルに比べて吸着能力が低下することが知られ
ている。
一方一硫酸化多糖等のポリアニオン化合物がリポ蛋白と
親和性を持ち、金属イオンの共存下で沈殿を形成するこ
とが知られており［例えばＭ、ＢｕｒｎｓＬｅｉｎ
ａｎｄ Ｈ，Ｒ，５ｃｈｏｌｎｉｃｋ 、Ａｄｖ、
１ｎＬｉｐｉｄ、 Ｒｅｓ、、 Ｉｔ 、６７ （１９
７３＞ ］、臨床分析等に用いられている。しかしなが
らこの方法で患者の血中からＬＤＬを除去しようとすれ
ば、処理しようとする血１１ｃ対し少くとも０．０５％
のポリアニオン化合物および０．０２Ｍ以上の金属イ゛
オンを添加しなければならず、また生じた沈殿を遠心分
離等の方法で分離する必要が生じ、操作が煩雑で危険性
が高く、事実上適用不可能であった。
親和性を持ち、金属イオンの共存下で沈殿を形成するこ
とが知られており［例えばＭ、ＢｕｒｎｓＬｅｉｎ
ａｎｄ Ｈ，Ｒ，５ｃｈｏｌｎｉｃｋ 、Ａｄｖ、
１ｎＬｉｐｉｄ、 Ｒｅｓ、、 Ｉｔ 、６７ （１９
７３＞ ］、臨床分析等に用いられている。しかしなが
らこの方法で患者の血中からＬＤＬを除去しようとすれ
ば、処理しようとする血１１ｃ対し少くとも０．０５％
のポリアニオン化合物および０．０２Ｍ以上の金属イ゛
オンを添加しなければならず、また生じた沈殿を遠心分
離等の方法で分離する必要が生じ、操作が煩雑で危険性
が高く、事実上適用不可能であった。
本発明者らは鋭意研究の結果、特定のポーラスポリマー
ハードゲルを用い、これにリポ蛋白に親和性を有するポ
リアニオン化合物を固定することにより、安価で流れ特
性がよく、かつソフトゲルを担体に用いた場合に比し吸
着能力が低下しない除去能力に優れたリポ蛋白吸着体を
得、本発明に到達した。
ハードゲルを用い、これにリポ蛋白に親和性を有するポ
リアニオン化合物を固定することにより、安価で流れ特
性がよく、かつソフトゲルを担体に用いた場合に比し吸
着能力が低下しない除去能力に優れたリポ蛋白吸着体を
得、本発明に到達した。
すなわち本発明は、球状蛋白質の排除限界分子量が１０
０万以上】優以下のポーラスポリマ＝７・−ドゲルに、
リポ蛋白に親和性を有するポリアニオン化合物を固定し
てなるリポ蛋白吸着体である。
０万以上】優以下のポーラスポリマ＝７・−ドゲルに、
リポ蛋白に親和性を有するポリアニオン化合物を固定し
てなるリポ蛋白吸着体である。
以下詳細に本発明を説明する。
本発明に用いるに適した担体は、 ｌ）耐圧性であるこ
と、２）比較的大きな径の細孔を有することが必要であ
り、ボリマーノ・−ドゲルは本発明に最も適した担体で
ある。
と、２）比較的大きな径の細孔を有することが必要であ
り、ボリマーノ・−ドゲルは本発明に最も適した担体で
ある。
ここでいうハードゲルとは、デキストラン、アガロース
、アクリルアミド等のソフトゲルに比べ溶媒による膨潤
が少なく、また圧力により変形しにくいゲルのことをい
う。ハードゲルとソフトゲルは次の方法により区別する
ことができる。すなわち後記参考例に示したごとくゲル
を円筒状カラムに均一に充填し、水性液体を流した際の
圧力損失と流量の関係が、ハードゲルではほぼ直線とな
るのに対し、ソフトゲルでは圧力がある点を越えるとゲ
ルが変形し圧密化して流量が増加しなくなる。本発明で
は、少くとも０．３ ｋｙＡ まで上記直線関係のある
ものをノ・−ドゲルと称する。
、アクリルアミド等のソフトゲルに比べ溶媒による膨潤
が少なく、また圧力により変形しにくいゲルのことをい
う。ハードゲルとソフトゲルは次の方法により区別する
ことができる。すなわち後記参考例に示したごとくゲル
を円筒状カラムに均一に充填し、水性液体を流した際の
圧力損失と流量の関係が、ハードゲルではほぼ直線とな
るのに対し、ソフトゲルでは圧力がある点を越えるとゲ
ルが変形し圧密化して流量が増加しなくなる。本発明で
は、少くとも０．３ ｋｙＡ まで上記直線関係のある
ものをノ・−ドゲルと称する。
次に要求される性質は比較的大きな径の細孔を有するこ
とである。すなわちＬＤＬは分子量が少くとも１００万
以上といわれる巨大分子であり、これを吸着除去するた
めにはＬＤＬが細孔内に侵入できることが必要でおる。
とである。すなわちＬＤＬは分子量が少くとも１００万
以上といわれる巨大分子であり、これを吸着除去するた
めにはＬＤＬが細孔内に侵入できることが必要でおる。
次ｌ／ｉ：ＬＤＬが細孔内に侵入できても、細孔内に侵
入する確率がある程度大きくなければ吸着体としての性
能は低い、すなわち移動相と固定相（細孔内）間の分配
比（固定相の濃度／移動相の濃゛度）が大きいほど好ま
しいと考えられる。従って組孔径が大きい程有利と思わ
れる。
入する確率がある程度大きくなければ吸着体としての性
能は低い、すなわち移動相と固定相（細孔内）間の分配
比（固定相の濃度／移動相の濃゛度）が大きいほど好ま
しいと考えられる。従って組孔径が大きい程有利と思わ
れる。
細孔径の測定法には種々あり、水銀圧入法が最もよく用
いられているが、ポリマーハードゲルの場合には適用で
きないことがある。したがって細孔径の目安として排除
限界分子量を用いるのが適当である。排除限界分子量と
は放置（例えば波多野博行、花卉俊彦著、実験高速液体
クロマトグラフ、化学同人）等に述べられているごとく
、ゲル浸透クロマトグラフィーにおいて細孔内に侵入で
きない（排除される）分子のうち最も小さい分子量をも
つものの分子量をいう。現象的には、排除限界分子量以
上の分子は移動相体積Ｖｏ近傍に溶出されることから、
種々の分子量の化合物を用いて溶出体積との関係を調べ
れば排除限界分子量を求めることができる。排除限界分
子量は対象とする化合物の種類により異なることが知ら
れており、一般に球状蛋白質、デキストラン、ボリエテ
レノグリコール等についてよく調べられているが、リポ
蛋白についてはほとんど調べられていない。従って最も
類似している球状蛋白質（ビールスを含む）を用いて得
られた値を用いるｐが適当である。
いられているが、ポリマーハードゲルの場合には適用で
きないことがある。したがって細孔径の目安として排除
限界分子量を用いるのが適当である。排除限界分子量と
は放置（例えば波多野博行、花卉俊彦著、実験高速液体
クロマトグラフ、化学同人）等に述べられているごとく
、ゲル浸透クロマトグラフィーにおいて細孔内に侵入で
きない（排除される）分子のうち最も小さい分子量をも
つものの分子量をいう。現象的には、排除限界分子量以
上の分子は移動相体積Ｖｏ近傍に溶出されることから、
種々の分子量の化合物を用いて溶出体積との関係を調べ
れば排除限界分子量を求めることができる。排除限界分
子量は対象とする化合物の種類により異なることが知ら
れており、一般に球状蛋白質、デキストラン、ボリエテ
レノグリコール等についてよく調べられているが、リポ
蛋白についてはほとんど調べられていない。従って最も
類似している球状蛋白質（ビールスを含む）を用いて得
られた値を用いるｐが適当である。
排除限界の異なる種々の担体を用いて検討した結果、予
想に反し排除限界分子量がＬＤＬの分子量より小さい１
００万程反のものでもある程度のＬＤＬ吸層能を示し、
また細孔径の大きいもの程能力が大きいわけではなく、
むしろＬＤＬ以外の蛋白が除去されることから最適な細
孔径の範囲が存在することが明らかになった。すなわち
１００万未満の排除限界分子量を持つ担体を用いた場合
はＬＤＬの除去賞は小さく実用に耐えないが、排除限界
分子量が１００万乃至数百万とＬＤＬの分子量に近い担
体でもある程度実用に供しうる吸着体か得られた。一方
排除限界分子量とＬＤＬの吸着量、およびＬＤＬ以外の
蛋白質の吸着（いわゆる非特異吸層）との関係を調べる
と、排除限界分子量が太きくなるＶこっれＬＤＬの吸着
量が増加するが、この増加は排除限界が１０００万を超
えると頭打ちとなり、一方ＬＤＬ以外の蛋白、例えばＩ
ＧＧ、ＩＧＭ等の吸着が目立つようになることがわかっ
た。さらに排除限界分子量が１億以上になるとリガンド
の固定化量が減少して結果的にＬＤＬの吸着量が減り、
非特異吸着が無視できなくなる。従って本発明に用いる
相体の好ましい排除限界分子量は１００万以上１億以下
であり、最も好ましくは３００万以上７０００万以下で
ある。
想に反し排除限界分子量がＬＤＬの分子量より小さい１
００万程反のものでもある程度のＬＤＬ吸層能を示し、
また細孔径の大きいもの程能力が大きいわけではなく、
むしろＬＤＬ以外の蛋白が除去されることから最適な細
孔径の範囲が存在することが明らかになった。すなわち
１００万未満の排除限界分子量を持つ担体を用いた場合
はＬＤＬの除去賞は小さく実用に耐えないが、排除限界
分子量が１００万乃至数百万とＬＤＬの分子量に近い担
体でもある程度実用に供しうる吸着体か得られた。一方
排除限界分子量とＬＤＬの吸着量、およびＬＤＬ以外の
蛋白質の吸着（いわゆる非特異吸層）との関係を調べる
と、排除限界分子量が太きくなるＶこっれＬＤＬの吸着
量が増加するが、この増加は排除限界が１０００万を超
えると頭打ちとなり、一方ＬＤＬ以外の蛋白、例えばＩ
ＧＧ、ＩＧＭ等の吸着が目立つようになることがわかっ
た。さらに排除限界分子量が１億以上になるとリガンド
の固定化量が減少して結果的にＬＤＬの吸着量が減り、
非特異吸着が無視できなくなる。従って本発明に用いる
相体の好ましい排除限界分子量は１００万以上１億以下
であり、最も好ましくは３００万以上７０００万以下で
ある。
次ｖｃ担体の多孔構造については表面多孔性よりも全多
孔性が好ましく、空孔容積が２０％以上であることが好
ましい。担体の形状は、粒状、繊維状、膜状、ホローフ
ァイバー状等任意の形状を選ぶことができる。粒子状の
担体を用いる場合、その粒子径は１μ以上５０００μ以
下であるのが望ましい。
孔性が好ましく、空孔容積が２０％以上であることが好
ましい。担体の形状は、粒状、繊維状、膜状、ホローフ
ァイバー状等任意の形状を選ぶことができる。粒子状の
担体を用いる場合、その粒子径は１μ以上５０００μ以
下であるのが望ましい。
さらに担体表面には固定化反応に用い得る官能基あるい
は容易に活性化し得る官能基が存在していると好都合で
ある。これらの官能基の代表例としては、アミン基、カ
ルボキシル基、ヒドロキシル基、チオール基、酸無水物
基、サクシニルイミド基、塩素基、アルデヒド基、アミ
ド基、エポキシ基等があげられる。
は容易に活性化し得る官能基が存在していると好都合で
ある。これらの官能基の代表例としては、アミン基、カ
ルボキシル基、ヒドロキシル基、チオール基、酸無水物
基、サクシニルイミド基、塩素基、アルデヒド基、アミ
ド基、エポキシ基等があげられる。
本発明に適したポリマーハードゲルの代表例としては、
スチレン−ジビニルベン、ゼン共重合体、架橋ポリビニ
ルアルコール、架橋ポリアクリレート、架橋されたビニ
ルエーテル−無水マレイン酸共重合体、架橋されたスチ
レノー無水マレイン酸共重合体、架橋ポリアミド等の合
成高分子や多孔質セルロースゲル等の硬質多孔体、およ
びこれらの表面に多糖類、合成高分子等をコーティング
したもの等があげられるが、これらに限定てれるわけで
はない。これらのポリマーハードゲルは単独で用いても
よいし２種類以上混合して用いてもよい。
スチレン−ジビニルベン、ゼン共重合体、架橋ポリビニ
ルアルコール、架橋ポリアクリレート、架橋されたビニ
ルエーテル−無水マレイン酸共重合体、架橋されたスチ
レノー無水マレイン酸共重合体、架橋ポリアミド等の合
成高分子や多孔質セルロースゲル等の硬質多孔体、およ
びこれらの表面に多糖類、合成高分子等をコーティング
したもの等があげられるが、これらに限定てれるわけで
はない。これらのポリマーハードゲルは単独で用いても
よいし２種類以上混合して用いてもよい。
本発明に用いるに適したリボ蛋白に親和性を有するポリ
アニオン化合物の代表例としては、ヘパ、リン、テキス
トラン硫酸、コンドロイチン硫酸、コンドロイチンポリ
硫酸、ヘパラン酸、ケラタノ硫酸、ヘハリテン硫酸、キ
シラン硫酸、カロニン硫酸、セルロース硫酸、キチン釦
凱キトサン硫酸、ペクチンは酸、イヌリン硫酸、アルギ
ン酸硫酸、グリコーゲン硫酸、ポリラクトース硫酸、−
力ラゲニン硫酸、デンプ７硫酸、ポリグルコース硫酸、
ラミナリン硫酸、ガラクタン硫酸、レバン硫酸、メペサ
ルフエート等の硫酸化多糖、リンタングステン酸、ポリ
硫酸化アネトール、ポリビニルアルコール硫酸、ポリリ
ン酸等があげられる。最も好ましい例としては、ヘバリ
ノ、デキストラン硫酸、コンドロイチンポリ硫酸があげ
られる。
アニオン化合物の代表例としては、ヘパ、リン、テキス
トラン硫酸、コンドロイチン硫酸、コンドロイチンポリ
硫酸、ヘパラン酸、ケラタノ硫酸、ヘハリテン硫酸、キ
シラン硫酸、カロニン硫酸、セルロース硫酸、キチン釦
凱キトサン硫酸、ペクチンは酸、イヌリン硫酸、アルギ
ン酸硫酸、グリコーゲン硫酸、ポリラクトース硫酸、−
力ラゲニン硫酸、デンプ７硫酸、ポリグルコース硫酸、
ラミナリン硫酸、ガラクタン硫酸、レバン硫酸、メペサ
ルフエート等の硫酸化多糖、リンタングステン酸、ポリ
硫酸化アネトール、ポリビニルアルコール硫酸、ポリリ
ン酸等があげられる。最も好ましい例としては、ヘバリ
ノ、デキストラン硫酸、コンドロイチンポリ硫酸があげ
られる。
リポ蛋白に親和性を有する化合物（リガンド）を担体に
固定する方法としては既知の種々の方法を用いることが
できる。すなわち物理的吸着法、イオン結合法、共有結
合法等である。本発明による吸着体を治療に用いるには
、滅菌時あるいは治療中にリガンドが脱離しないことが
重要であるので結合の強固な共有結合法が望ましく、イ
オン結合法を用いるにしてもリガンドを共有結合的に架
橋しておくことが望ましい。また必要によりスペーサー
を担体とリガンドの間に導入してもよい。
固定する方法としては既知の種々の方法を用いることが
できる。すなわち物理的吸着法、イオン結合法、共有結
合法等である。本発明による吸着体を治療に用いるには
、滅菌時あるいは治療中にリガンドが脱離しないことが
重要であるので結合の強固な共有結合法が望ましく、イ
オン結合法を用いるにしてもリガンドを共有結合的に架
橋しておくことが望ましい。また必要によりスペーサー
を担体とリガンドの間に導入してもよい。
リガンドの固定化量については、リガンドの性状、活性
によシ異なるが、有意のリポ蛋白吸着量を得るにはカラ
ム体積１ｍβあたりｏ、ｏ２ｍダ以上が好ましく、また
経済性を考慮すると１００ ｍＦＩ以下が望ましい。で
らに好ましくは、カラム体積１．Ｊあたりｏ、５ｍｙ以
上２０ｍｆ以下である。
によシ異なるが、有意のリポ蛋白吸着量を得るにはカラ
ム体積１ｍβあたりｏ、ｏ２ｍダ以上が好ましく、また
経済性を考慮すると１００ ｍＦＩ以下が望ましい。で
らに好ましくは、カラム体積１．Ｊあたりｏ、５ｍｙ以
上２０ｍｆ以下である。
本発明による吸着体を治療に用いるには種々の方法があ
る。最も簡便な方法としては患者の血液を体外に導出し
て血准バッグ等に貯め、これに本発明の吸着体（粒子）
を混合してＬＤＬを除去した後、フィルターを通して吸
着体（粒子）を除去し血液を患者に戻す方法がある。こ
の方法は複雑な装置を必要としないが、１回の処理量が
少なく治療に時間を要し、操作が煩雑になるという欠点
を有する。次の方法は吸着体をカラムに充填し、体外循
環回路に組み込みオンラインで吸着除去を行なうもので
ある。処理方法には全血を直接がん流する方法と、血液
から血漿を分離した後、血漿をカラムに通す方法がある
。本発明による吸着体は、いずれの方法にも用いること
ができるが、前述のごとくオンライン処理に最も適して
いる。
る。最も簡便な方法としては患者の血液を体外に導出し
て血准バッグ等に貯め、これに本発明の吸着体（粒子）
を混合してＬＤＬを除去した後、フィルターを通して吸
着体（粒子）を除去し血液を患者に戻す方法がある。こ
の方法は複雑な装置を必要としないが、１回の処理量が
少なく治療に時間を要し、操作が煩雑になるという欠点
を有する。次の方法は吸着体をカラムに充填し、体外循
環回路に組み込みオンラインで吸着除去を行なうもので
ある。処理方法には全血を直接がん流する方法と、血液
から血漿を分離した後、血漿をカラムに通す方法がある
。本発明による吸着体は、いずれの方法にも用いること
ができるが、前述のごとくオンライン処理に最も適して
いる。
本発明による吸着体を用いてＬＤＬを除去する際、処理
しようとする血液、あるいは血漿に多価金属イオンを碓
カロすることにより除去効率、選択性を向上させること
が可能である。この目的に用いる多価金属イオンとして
は、カルシウム、マグネシウム、バリウム、ストロンチ
ウム等のアルカリ土類金属イオン、アルミニウム等の■
属元素イオン、マンガン等の■楓元素イオン、コバルト
等の■属元素イオン等があげられる。
しようとする血液、あるいは血漿に多価金属イオンを碓
カロすることにより除去効率、選択性を向上させること
が可能である。この目的に用いる多価金属イオンとして
は、カルシウム、マグネシウム、バリウム、ストロンチ
ウム等のアルカリ土類金属イオン、アルミニウム等の■
属元素イオン、マンガン等の■楓元素イオン、コバルト
等の■属元素イオン等があげられる。
以下実施例により本発明をさらに詳しく説明する。
参考例
両端に孔径１５μｍのフィルターを装着したガラス製円
筒カラム（内径９馴、カラム長１５０ｍ＋ｉ）にアガロ
ースゲル（Ｂｉｏｒａｄ社製Ｂｉｏｇｅ＃Ａ ５ ｍ
１粒径５０〜１００メツシュ）、ポリマーハードゲル（
東洋曹達工業■製トヨバールＨＷ６５、粒径５ｏ〜１０
０μｍ１およびチッソ■製セルロファインＧＣ−７００
、粒径４５〜１０５μｍ）をそれぞれ均一に充填し、ペ
リスタティックポンプにより水を流し、流量と圧力損失
の関係を求めた。
筒カラム（内径９馴、カラム長１５０ｍ＋ｉ）にアガロ
ースゲル（Ｂｉｏｒａｄ社製Ｂｉｏｇｅ＃Ａ ５ ｍ
１粒径５０〜１００メツシュ）、ポリマーハードゲル（
東洋曹達工業■製トヨバールＨＷ６５、粒径５ｏ〜１０
０μｍ１およびチッソ■製セルロファインＧＣ−７００
、粒径４５〜１０５μｍ）をそれぞれ均一に充填し、ペ
リスタティックポンプにより水を流し、流量と圧力損失
の関係を求めた。
結果を］！＋１に示す。それによるとポリマーハードゲ
ルが圧力の増加にほぼ比例して流量が増加するのに対し
、アガロースゲルは圧密ｊヒをひきおこし圧力を増加さ
せても流量が増力口しないことを示している。
ルが圧力の増加にほぼ比例して流量が増加するのに対し
、アガロースゲルは圧密ｊヒをひきおこし圧力を増加さ
せても流量が増力口しないことを示している。
実施例１
架橋アクリレートゲル（全多孔性の）・−ドゲル）であ
るトヨバールＨＷ５５（球状蛋白質の排除限界分子量（
以下蛋白質の排除限界と略称する）７００．０（１０，
粒径５０〜１００μｍ）、）ｌＷ６０（蛋白質の排除限
界１，０００．ｌ［ｏ 、粒径５０〜ＩＱＯｐｍ）、Ｈ
Ｗ６５（蛋白質の排除限界５．０００，０００ 、粒径
５０〜Ｉ ＯＯｐｍ ）、ＨＷ７５（蛋白質の排除限界
５０．０−００，００（Ｊ 、粒径５０〜１００ ｔｔ
ｍ ）各１０ｍ１に飽ＱＮａＯＨ水溶液６ ｔＪ。
るトヨバールＨＷ５５（球状蛋白質の排除限界分子量（
以下蛋白質の排除限界と略称する）７００．０（１０，
粒径５０〜１００μｍ）、）ｌＷ６０（蛋白質の排除限
界１，０００．ｌ［ｏ 、粒径５０〜ＩＱＯｐｍ）、Ｈ
Ｗ６５（蛋白質の排除限界５．０００，０００ 、粒径
５０〜Ｉ ＯＯｐｍ ）、ＨＷ７５（蛋白質の排除限界
５０．０−００，００（Ｊ 、粒径５０〜１００ ｔｔ
ｍ ）各１０ｍ１に飽ＱＮａＯＨ水溶液６ ｔＪ。
エピクロルヒドリン１５ｍｄを加え撹拌しながら５０°
Ｃで２時間反応しエポキシ化ゲルを得た。このゲルに濃
アンモニア水２０ ｍｇを加え５０℃で２時間撹拌しア
ミノ基を導入した。
Ｃで２時間反応しエポキシ化ゲルを得た。このゲルに濃
アンモニア水２０ ｍｇを加え５０℃で２時間撹拌しア
ミノ基を導入した。
次ニヘパリン２００ ｍＦ／をｔｏｍｂの水に溶解しｐ
Ｈ４，５に調整した後、これに３−ｇの上記アミ７基含
有ゲルを加えた。これ［１−エチル−３−（ジメチルア
ミノプロピル）−カルボジイミド２００４ ｆ：ｐＨを
４．５に保ちながら添加し４℃で２４時時間表うした。
Ｈ４，５に調整した後、これに３−ｇの上記アミ７基含
有ゲルを加えた。これ［１−エチル−３−（ジメチルア
ミノプロピル）−カルボジイミド２００４ ｆ：ｐＨを
４．５に保ちながら添加し４℃で２４時時間表うした。
反応終了後、２モル食塩溶液、０．５モル食塩溶液、水
で洗浄しヘパリン固定化ゲルを得た。固定化されたヘパ
リンの量はそれぞれ２．２ｍｆ／／ｍｌ！、１．８ ｍ
ｆ／ｍｌ、１．４ ｍＩ／ｍｅ 。
で洗浄しヘパリン固定化ゲルを得た。固定化されたヘパ
リンの量はそれぞれ２．２ｍｆ／／ｍｌ！、１．８ ｍ
ｆ／ｍｌ、１．４ ｍＩ／ｍｅ 。
０、８ ｍｆ／ｍｌであった。
実施例２
硬質セルロース多孔体（全多孔性のハードゲルλセルロ
ファインＧＣ７００（チッソ■製、蛋白質の排除限界４
００，０００ 、粒径４５〜１０５μｍ）、セルロファ
インＡ−２（チッソ■Ｈ（試作品）、蛋白質の排除限界
７００，０００．粒径４５〜１０５μｍ）、セルロファ
インＡ−３（チッソ（ｉ５ＩＯ製（試作品）、蛋白質の
排除限界約５０，０００，０００ 、粒径４５〜１０５
μｍ〕をそれぞれ吸引許過し、各１Ｏｆ／をとり、これ
ｌ／Ｉ：２０％ＮａＯＨを４ｙ、ヘゲタン１２ｙを加え
、さらにノニオン系界面活性剤ＴＷＥＥＮ２０を１滴加
え撹拌してゲルを分散させた。４０°Ｃで２時間撹拌後
、これにエピクロルヒドリン５ｙを加え４０℃で２時間
、撹拌した。静置後、上澄みを捨て、ゲルを水洗許過し
てエポキシ化ゲルを得た。これｌ／ｉｌ： Ｉ ５ ｍ
ｌの濃アンモニア水を９口え４０℃で１．５時間撹拌し
、内容物を吸引濾過、水洗してアミン基の導入されたセ
ルロースゲルを得た。
ファインＧＣ７００（チッソ■製、蛋白質の排除限界４
００，０００ 、粒径４５〜１０５μｍ）、セルロファ
インＡ−２（チッソ■Ｈ（試作品）、蛋白質の排除限界
７００，０００．粒径４５〜１０５μｍ）、セルロファ
インＡ−３（チッソ（ｉ５ＩＯ製（試作品）、蛋白質の
排除限界約５０，０００，０００ 、粒径４５〜１０５
μｍ〕をそれぞれ吸引許過し、各１Ｏｆ／をとり、これ
ｌ／Ｉ：２０％ＮａＯＨを４ｙ、ヘゲタン１２ｙを加え
、さらにノニオン系界面活性剤ＴＷＥＥＮ２０を１滴加
え撹拌してゲルを分散させた。４０°Ｃで２時間撹拌後
、これにエピクロルヒドリン５ｙを加え４０℃で２時間
、撹拌した。静置後、上澄みを捨て、ゲルを水洗許過し
てエポキシ化ゲルを得た。これｌ／ｉｌ： Ｉ ５ ｍ
ｌの濃アンモニア水を９口え４０℃で１．５時間撹拌し
、内容物を吸引濾過、水洗してアミン基の導入されたセ
ルロースゲルを得た。
次にヘパリ／２００ ｍｆをｒ ｏ ｍｅの水に溶解し
、こｆｌ、［上記アミノ基含有ゲル３ ｍｌを加えてｐ
Ｈ４，５に調整した。これに１−エチル−３−（ジメチ
ルアミンプロピル）−カルボッイミド２００ 、、ｆを
ｐＨ４，５Ｋ保ちなから添〃口し、４℃で２４時時間表
うした。反応終了後、２モル食塩溶液、０．５モル食塩
溶液、水で洗浄しヘパリン固定化ゲルを得た。固定化さ
れたヘバリ／址はそれぞれ２，５ｍ９／、、（１，２，
２ｍｙ／ｍｌ 、 １．８ ｍ’ｊ／ｍ（ｌであった
。
、こｆｌ、［上記アミノ基含有ゲル３ ｍｌを加えてｐ
Ｈ４，５に調整した。これに１−エチル−３−（ジメチ
ルアミンプロピル）−カルボッイミド２００ 、、ｆを
ｐＨ４，５Ｋ保ちなから添〃口し、４℃で２４時時間表
うした。反応終了後、２モル食塩溶液、０．５モル食塩
溶液、水で洗浄しヘパリン固定化ゲルを得た。固定化さ
れたヘバリ／址はそれぞれ２，５ｍ９／、、（１，２，
２ｍｙ／ｍｌ 、 １．８ ｍ’ｊ／ｍ（ｌであった
。
実施例３
ヘパリンをコンドロイテンポＩＪ ａ酸にかえた他は実
施例１と同じ方法でコンドロイチンポリ硫酸固定化トヨ
パールゲルＨＷ６５を得た。固定化量は１．２ ｍｆ／
ｍｅであった。
施例１と同じ方法でコンドロイチンポリ硫酸固定化トヨ
パールゲルＨＷ６５を得た。固定化量は１．２ ｍｆ／
ｍｅであった。
実施例４
セルロファイ７Ａ−３４ｙＪ’に０．５モルＮａＩＯ４
を加えて１０．Ｊとし１時間室温で撹拌後、濾過水洗し
てアルデヒド基を導入した。次にこのゲルをｐＨ８のリ
ン酸緩衝液１０ｍ１ｌ中に懸濁し、ジエチルアミン５０
ｍｆを加えて室温で２０時間撹拌しＰ別した。これを
１％ＮａＢＨ４溶液１０．Ｊ’中に懸濁し１５分間還元
後、戸集、洗浄してアミン基を導入した。
を加えて１０．Ｊとし１時間室温で撹拌後、濾過水洗し
てアルデヒド基を導入した。次にこのゲルをｐＨ８のリ
ン酸緩衝液１０ｍ１ｌ中に懸濁し、ジエチルアミン５０
ｍｆを加えて室温で２０時間撹拌しＰ別した。これを
１％ＮａＢＨ４溶液１０．Ｊ’中に懸濁し１５分間還元
後、戸集、洗浄してアミン基を導入した。
次にデキストラン硫酸３００ ｍｆを０．２５モルＮａ
ＩＯ４溶液１０．Ｊ［溶解し室温で４時間撹拌後、エチ
レングリコール２００ ｍｆを加えて１時間撹拌する。
ＩＯ４溶液１０．Ｊ［溶解し室温で４時間撹拌後、エチ
レングリコール２００ ｍｆを加えて１時間撹拌する。
この溶液をｐＨ８ＶＣ調整した後、上記アミノ基含有ゲ
ルを懸濁し２４時間撹拌した。反応終了後、ゲルをｐ集
、水洗し、これを１％ＮａＢＨ４溶液１０ｍ１ｌ／Ｃ懸
濁し１５分分間光し、濾過水洗してデキストラン硫酸固
定化セルロースゲルを得た。固定化量は０．５ ｍｆ／
ｍｌであった。
ルを懸濁し２４時間撹拌した。反応終了後、ゲルをｐ集
、水洗し、これを１％ＮａＢＨ４溶液１０ｍ１ｌ／Ｃ懸
濁し１５分分間光し、濾過水洗してデキストラン硫酸固
定化セルロースゲルを得た。固定化量は０．５ ｍｆ／
ｍｌであった。
実施例５
実施例１〜４で合成した吸着体各１４を試験管にとり、
これに人血漿３ ｍｌ！ （ＧａＣ（１２０，０２Ｍ含
有）を加えて撹拌し、２０℃で１５分間静置後、上澄み
のコレステロール濃度およびＬＤＬ （β−リポ蛋白）
童を測定した。結果を表１に示す。
これに人血漿３ ｍｌ！ （ＧａＣ（１２０，０２Ｍ含
有）を加えて撹拌し、２０℃で１５分間静置後、上澄み
のコレステロール濃度およびＬＤＬ （β−リポ蛋白）
童を測定した。結果を表１に示す。
（↓ス下太イつ
図１は、参考例において各種ゲルを用いて流力と圧力損
失の関係を調べたグラフである。 特許出願人 鐘淵化学工業株式会社 代理人 弁理士 浅 野 真 − 手続補正書（９匍 昭和り３年） 月２０口 特許庁長官 若杉和夫 殿 Ｙ、１４１１、事件
の表示 昭和５７年Ｉ寺 飾 願第２１２３７９号２・発明の名
称 吸 羞 Ａ渉− ３、補正をする者 事件との関係 特許出願人 徨ＩＪ 力Ｘ 太阪市北区中之島三丁目２番４号
Ｍｖ”しゎｈ＞ ”Ｈ）鐘淵化学工業１１・式会社代
表者 高１）敞 ４、代理人 ６、 補正により増加する発明の数 ７、補正の対象
失の関係を調べたグラフである。 特許出願人 鐘淵化学工業株式会社 代理人 弁理士 浅 野 真 − 手続補正書（９匍 昭和り３年） 月２０口 特許庁長官 若杉和夫 殿 Ｙ、１４１１、事件
の表示 昭和５７年Ｉ寺 飾 願第２１２３７９号２・発明の名
称 吸 羞 Ａ渉− ３、補正をする者 事件との関係 特許出願人 徨ＩＪ 力Ｘ 太阪市北区中之島三丁目２番４号
Ｍｖ”しゎｈ＞ ”Ｈ）鐘淵化学工業１１・式会社代
表者 高１）敞 ４、代理人 ６、 補正により増加する発明の数 ７、補正の対象
Claims (6)
- （１）球状蛋白質の排除限界分子量が１００万以上１億
以下のポーラスポリマーハードゲルに、リポ蛋白に親和
性を有するポリアニオン化合物を固ボしてなるリポ蛋白
吸着体。 - （２）ポーラスポリマーハードゲルが合成高分子からな
る特許請求の範囲第１項記載の吸着体。 - （３）ポーラスポリマーハードゲルが多孔質セルロー・
スゲルである特許請求の範囲第１項記載の吸着体。 - （４）ポリアニオン化合物が硫酸化多糖である特許請求
の範囲第１項記載の吸着体。 - （５）−硫酸化多糖がヘパリン、デキストラン硫酸、コ
ンドロイチンポリ硫酸から選ばれる少くとも１種である
特許請求の範囲第４項記載の吸着体。 - （６） ポリアニオン化合物の固定化量がカラム体積
１ｍ１ｈだり０．０２ｍｙ以上ｔ ｏ ｏ ｍｙ以下で
ある特許請求の範囲第１項記載の吸着体。
Priority Applications (16)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP57212379A JPS59102436A (ja) | 1982-12-02 | 1982-12-02 | 吸着体 |
| AU21832/83A AU571855B2 (en) | 1982-12-02 | 1983-11-30 | Adsorbent for removing harmful substances from blood |
| CA000442312A CA1221307A (en) | 1982-12-02 | 1983-11-30 | Adsorbent and process for preparing the same |
| ZA838908A ZA838908B (en) | 1982-12-02 | 1983-11-30 | Absorbent and process for preparing the same |
| US06/557,061 US4576928A (en) | 1982-12-02 | 1983-12-01 | Adsorbent and process for preparing the same |
| DE8383112042T DE3379644D1 (en) | 1982-12-02 | 1983-12-01 | Adsorbent and process for preparing the same |
| EP91115793A EP0464872B2 (en) | 1982-12-02 | 1983-12-01 | Adsorbent and process for preparing the same |
| AT91115793T ATE195891T1 (de) | 1982-12-02 | 1983-12-01 | Sorbentmittel und dessen herstellungsverfahren |
| AT87100215T ATE97832T1 (de) | 1982-12-02 | 1983-12-01 | Adsorbens und verfahren zu dessen herstellung. |
| DE3382834T DE3382834T3 (de) | 1982-12-02 | 1983-12-01 | Sorbentmittel und dessen Herstellungsverfahren |
| DE87100215T DE3382723T2 (de) | 1982-12-02 | 1983-12-01 | Adsorbens und Verfahren zu dessen Herstellung. |
| EP83112042A EP0110409B2 (en) | 1982-12-02 | 1983-12-01 | Adsorbent and process for preparing the same |
| AT83112042T ATE42222T1 (de) | 1982-12-02 | 1983-12-01 | Adsorbent und verfahren zu dessen herstellung. |
| EP87100215A EP0225867B1 (en) | 1982-12-02 | 1983-12-01 | Adsorbent and process for preparing the same |
| US06/737,880 US4637994A (en) | 1982-12-02 | 1985-05-28 | Adsorbent and process for preparing the same |
| AU12621/88A AU598643B2 (en) | 1982-12-02 | 1988-03-01 | Adsorbent and process for preparing the same |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP57212379A JPS59102436A (ja) | 1982-12-02 | 1982-12-02 | 吸着体 |
Related Child Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP63249652A Division JPH01145071A (ja) | 1988-10-03 | 1988-10-03 | リポ蛋白を除去した血漿の製造方法 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPS59102436A true JPS59102436A (ja) | 1984-06-13 |
| JPS6256782B2 JPS6256782B2 (ja) | 1987-11-27 |
Family
ID=16621591
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP57212379A Granted JPS59102436A (ja) | 1982-12-02 | 1982-12-02 | 吸着体 |
Country Status (2)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JPS59102436A (ja) |
| ZA (1) | ZA838908B (ja) |
Cited By (5)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JPS61268355A (ja) * | 1985-05-23 | 1986-11-27 | Kanegafuchi Chem Ind Co Ltd | 体外循環治療用リポ蛋白吸着体およびその製法 |
| JPS6222658A (ja) * | 1985-07-23 | 1987-01-30 | 旭化成株式会社 | 低比重リポ蛋白質吸着装置 |
| JP2005315666A (ja) * | 2004-04-28 | 2005-11-10 | Toshihiko Hanai | 糖結合充填剤およびその製造方法 |
| CN100455349C (zh) * | 2006-03-28 | 2009-01-28 | 南京赛邦医疗用品有限公司 | 用于血液体外循环去除低密度脂蛋白的吸附剂及其制法 |
| WO2012121073A1 (ja) * | 2011-03-04 | 2012-09-13 | Dic株式会社 | 糖類固定化ウイルス除去用高分子基材、及びウイルスの除去方法 |
Citations (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JPS525393A (en) * | 1975-06-25 | 1977-01-17 | Ajinomoto Kk | Production of carboxy alkylation substance |
| JPS5493689A (en) * | 1977-12-02 | 1979-07-24 | Baylor College Medicine | Resin of selectively removing antibacterial from bacteria infected sap sample and its use |
| JPS57190003A (en) * | 1981-05-18 | 1982-11-22 | Asahi Chem Ind Co Ltd | Wholly porous activated gel |
| JPS5812656A (ja) * | 1981-07-17 | 1983-01-24 | 旭化成株式会社 | 体外循環治療用吸着材 |
-
1982
- 1982-12-02 JP JP57212379A patent/JPS59102436A/ja active Granted
-
1983
- 1983-11-30 ZA ZA838908A patent/ZA838908B/xx unknown
Patent Citations (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JPS525393A (en) * | 1975-06-25 | 1977-01-17 | Ajinomoto Kk | Production of carboxy alkylation substance |
| JPS5493689A (en) * | 1977-12-02 | 1979-07-24 | Baylor College Medicine | Resin of selectively removing antibacterial from bacteria infected sap sample and its use |
| JPS57190003A (en) * | 1981-05-18 | 1982-11-22 | Asahi Chem Ind Co Ltd | Wholly porous activated gel |
| JPS5812656A (ja) * | 1981-07-17 | 1983-01-24 | 旭化成株式会社 | 体外循環治療用吸着材 |
Cited By (8)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JPS61268355A (ja) * | 1985-05-23 | 1986-11-27 | Kanegafuchi Chem Ind Co Ltd | 体外循環治療用リポ蛋白吸着体およびその製法 |
| JPH0513697B2 (ja) * | 1985-05-23 | 1993-02-23 | Kanegafuchi Chemical Ind | |
| JPS6222658A (ja) * | 1985-07-23 | 1987-01-30 | 旭化成株式会社 | 低比重リポ蛋白質吸着装置 |
| JPH0659309B2 (ja) * | 1985-07-23 | 1994-08-10 | 旭化成工業株式会社 | 低比重リポ蛋白質吸着装置 |
| JP2005315666A (ja) * | 2004-04-28 | 2005-11-10 | Toshihiko Hanai | 糖結合充填剤およびその製造方法 |
| CN100455349C (zh) * | 2006-03-28 | 2009-01-28 | 南京赛邦医疗用品有限公司 | 用于血液体外循环去除低密度脂蛋白的吸附剂及其制法 |
| WO2012121073A1 (ja) * | 2011-03-04 | 2012-09-13 | Dic株式会社 | 糖類固定化ウイルス除去用高分子基材、及びウイルスの除去方法 |
| JP5140211B2 (ja) * | 2011-03-04 | 2013-02-06 | Ｄｉｃ株式会社 | 糖類固定化ウイルス除去用基材、及びウイルスの除去器具 |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| JPS6256782B2 (ja) | 1987-11-27 |
| ZA838908B (en) | 1984-07-25 |
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