JPS5831195B2 - コウセイブツシツガルジマイシンルイノ セイゾウホウ - Google Patents

Description

【発明の詳細な説明】 本発明はアクチノプラネス属（ｇｅｎｕｓ Ａｃｔｉｎ
ｏ −ｐｌａｎｅｓ）に属する菌株の醗酵によって得ら
れる新しい種属の抗生物質の製造釦よび単離に関する。

それらの物質は以後メタポライドＡ、メタポライドＢ釦
よびメタポライドＣとして示し：メタポライトＢはまた
ガルジマイシン（ｇａｒｄｉ ｍｙｃ ｉｎ）と命名す
る。

上記の如く、木杭生物質はアクチノプラネス属に属する
醗酵菌株の培養によって製造される。

それらの菌株はテモシ（Ｔｅｍｏｓｓｉ）地方（イタリ
ア）釦よびガルバノ・ブリッジ（Ｇａｒｂａｄｉ Ｂ
ｒｉｄｇｅ ）（インド）で採取された土壌試料から単
離された。

我々の保存番号は、イタリアの土壌試料から単離したも
のがＡ／６３５３であり、そしてインドの土壌試料から
単離されたものがＡ／１０８８９であＩＱ：両方共にＡ
ＴＣＣの保存菌株の１部分をなし、そこではそれらはそ
れぞれ番号３１０４８ｉ−よび３１０４９を指定された
。

本新規抗生物質の製造に、％−？では、選択した微生物
を、好気性条件下、炭素源、窒素源釦よび無機塩類を含
有する水性栄養培地中で培養する。

通常菌株は振盪フラスコ中でかなりの抗生物質活性が存
在するようになる１で前培養し、ついで培養物は栄養醗
酵培地を含有するジャー・ファメンターに接株するため
に使用する。

培養は２５−３５度Ｃに釦いて、好気性条件下に、かな
りの抗生物質水準を生成するのに充分な時間継続する。

この間に、生成する抗生物質の濃度を管理するために微
生物学的定量を寒天拡散法によって行なう。

サルシナ・ルテア（５ａｒｃｉｎａ １ｕｔｅａ）
が試験微生物として使用される。

かく得られた抗生物質活性は常法、たとえば抗生物質活
性が溶けそして水性媒質と不混和性である有機溶媒での
抽出により醗酵液から単離できる。

この目的には、炭素原子３なｍ１６個の低級アルカノー
ル釦よび（Ｃ１−４）−低級・・ロゲン化炭化水素から
選択サレる有機溶媒が有利に使用できる。

有機層は水性媒質から分離し、小容量に濃縮し、そして
沈澱が形成する渣で低温で１０−１５時間放置し、沈澱
を濾過により回収する。

得られた粗生成物のワットマンＰ紙應ｉ上のペーパー・
クロマトグラフィ訃よびシリカゲル上の薄層クロマトグ
ラフィ、そして検出系としてスタフィロコッカス・アウ
レウス（５ｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ ａｕｒｅｕｓ
）上の引続く微生物学的発色〔ニコラウス（Ｎ ｉ
ｃｏ １ａｕｓ ）等、イル・ファルマコ（Ｉ Ｉ Ｆ
ａｒｍａｃｏ） 、ニド・プラ） （Ｅｄ、 Ｐｒａｔ
、 ）、８，３５０−３７０．１９６１年〕は、少なく
とも２種の活性成分の存在を示し、それは同定の目的で
メタボライ）ＡＪ−よびメタポライドＢと命名し、後者
は前者よりもより多量に生成する。

それら２つの成分は溶出系の性質に依存して変化する異
なったＲｆ値を有する。

メタポライドＡ訃よびＢは、通常の技術たとえばこの２
つの抗生物質が異なった分配係数を有する予め決定した
溶媒系中に釦けるいくつかの向流抽出によって精製釦よ
び単離しつる。

この工程の間に、メタポライドＢはモノナトリウム塩と
して回収され、それはついでアルカリ金属捷たはアルカ
リ土金属で他の塩に変形でき、あるいは通常の操作によ
り対応の遊離酸に変形できる。

ブタノール抽出に由来する母液は、不活性の非極性有機
溶媒、たとえば軽油中に注入し、そして更に沈澱が形成
する。

上記の如く行なったクロマトグラフィ研究釦よび微生物
学的発色は得られた固体が基本的に単一化合物からなり
、それは同じ溶出系での異なったＲｆ値に基づきメタポ
ライドＡ、ｔ−よびＢと異なったものであることを示し
：同定の目的で、それをメタポライドＣと命名する。

３種のメタポライドＡ、Ｂ、％−よびＣのクロマトグラ
フィ・パターンは以後に報告する。

メタポライドＡ、メタポライドＢ（以後、ガルジマイシ
ンとして示す）、渣たそのアルカリ金属釦よびアルカリ
土金属との塩、釦よびメタポライドＣは良いインビトロ
釦よびインビボの抗菌活性を示す。

更に詳しくは、ガルジマイシンは、各種の病原微生物の
増殖を阻害する抗生物質の最小濃度を報告する次の表か
られかるように、特にグラム陽性細菌に対し、工ないし
５０μｙ ／ｍｅの濃度水準で著しいインビトロ抗微生
物作用を発揮する。

表１ 菌 株 最小阻止濃度（μグ
／ｍｅ ） メタフィロコツカス・アウレウス （Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓａｕｒｅｕｓ）ＡＴＣ
Ｃ５３８５０ミクロコツカス・フラツグ （Ｍｉｃｒｏｃｏｃｃｕｓ ｆｌａｖｕｓ）ＡＴＣＣ１
０２４０ストレプトコッカス・フェカリス （Ｓ ｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ ｆａｅｃａｌｉｓ）
ＡＴＣＣ１０５４１０ ストレプトコッカス・ヘモリテイクス （Ｓ ｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ ｈａｅｍｏｌｙｔｉ
ｃｕｓ）Ｃ２０３ティフロコツカス・ニューモニエ （Ｄｉｐｌｏｃｏｃｃｕｓｐｎｅｕｍｏｎｉａｅ）ＯＣ
４１５０クロストリジウム・パーフリンジエンス （Ｃｌｏｓｔｒｉｄｉｕｍ ｐｅｒｆｒｉｎｇｅｎｓ）
ｌ５Ｓ３０５４３２ナイセリア・ゴル工 （Ｎｅｉｓｓｅｒｉａｇｏｎｏｒｒｈｅａｅ）ＡＴＣＣ
９８２６２０抗生物質ガルジマイシンの他の好ましい特
徴は、臨床的に単離されたストレプトコッカス菌株に対
し活性なことである。

表２ 菌 株 最／」個止濃度（μ？
／ｍｌ） ストレプトコッカス・ヘモリチクス （Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓｈａｅｍｏｌｙｔｉｃｕ
ｓ）２０７８ １ストレフトコシカス・“ヘモリチク
ス２０８７ １ストレプトコツカス・ビリダンス （Ｓ ｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ ｖｉｒ １ｄａｎｓ
） ２０５７ ５ストレプトコツカス・ビリ
ダンス２０８５ ２更に、上記の如く、ガルジマイシ
ンはまた、ディプロコツカス属釦よびストレプトコツカ
ス属の病原細菌によって生じるノ・ツカネズミに釦ける
実験感染に対し、非常に興味深いインビボ活性を発揮す
る。

以下に報告する表はストレプトコッカスへモリチフスＣ
２０：ｌ−よびディプロコツカス・ニューモニエ０Ｃ４
１によって起させた実験感染に対するガルジマイシンの
ＥＩ）５０値を示す。

表３ 菌株 ＥＨ１１”ｆｌ／ｋｆ ストレプトコッカス・ヘモリチクスＣ２０３０，７５テ
イフロコツカス・ニューモニエ０Ｃ４１３０それらの好
ましい抗微生物性質は、抗生物質ガルジマイシンのＬＤ
５ｏ値が１０００■／にりｉｐ以上ｉ−よび約２０００
■／ｋｑｉｖであるという非常に低い毒性と組み合わさ
っている。

生成菌株の説明 菌株Ａ／６３５３の説明 本菌株は数種の寒天培地上によく生育する。

オートミール寒天上で、直径約５關のコロニーはぎざぎ
ざの輪郭（１ｎｄｅｎｔｅｄ ｃｏｎｔｏｕｒｓ）、僅
かな放射状の溝（ｒａｄｉａｌ ｆｕｒｒｏｗｓ） ’
ｈよび中心の陥凹（ａｃｅｎｔｒａｌ ｄｅｒｅｓｓｉ
ｏｎ）を有する。

気菌糸は常に存在しなｈ０胞子嚢はオートミール寒天、
グリセロールアスパラギン寒天釦よびツアペックグルコ
ース寒天上に豊富に形威し、媒質に依存して異なった形
状と大きさを示す。

オートミール寒天上で、それらは正規の輪郭（ｒｅｇｕ
ｌａｒ ｃｏｎｔｏｕｒｏ） 、 ’ｒｒよび球状か
ら卵形の間で変化する形状を有する。

胞子嚢の大きさは１５−２５μの間にある。

胞子は運動性でありそして直径１．５−２μの球状であ
る黄−コ・・り色の可溶性色素がいくつかの培地中で生
成する。

アクチノプラネスＡ／１０８８９の説明 本菌株は各種の栄養寒天上でよく生育する。

表面は不透明でそして通常あらくしわが寄っている（
ｒｏｕｇｈ ｔｏ ｕｒｉｎｋｌｅｄ）。

気菌糸は通常存在しないが、若干の媒質中では気菌糸の
原基痕跡（ｒｕｄｉ−ｍ ｅｎｔｅ ）が観察される。

鏡検に釦いて生長菌糸は直径〜１μで僅かに分枝する。

胞子嚢はカルシウムマレエート寒天上でのみ中程度に形
威し、そして直径７０ないし１２．０μのしばしば裂片
状（１ｏｂａｔｅ ） の不規則な表面をもった球形
である。

胞子嚢壁の開裂の後、胞子放出を観察することが可能で
ある。

亜球形（５ｕｂｓｐｈｅｒ ｉ −ｃａｌ）胞子は運動
性である（直径１．０ないし１．５２つの菌株の若干の
形態学的特徴の比較を表４に示す。

表５はシリング（Ｓｈｉｒｌｉｎｇ ） 釦よびゴツ
トリーブ（Ｇｏｔｔｌｉｅｂ） Ｃインターナショナル
・ジャーナル・オブ・シストロジカル・バクテリオロジ
ー（Ｉｎｔｅｒｎ、 Ｊ、 ５ｙｓｔ、 Ｂａｃｔ、
） １６．３１３−３４０．１９６６］によって示唆さ
れた各種の標準培地釦よびワックスマン（Ｗａｋｓ ｍ
ａｎ ） Ｃジ・アクチノプラネス（Ｔｈｅ Ａｃｌ
ｉｎｏｍｙＡｃｌｌｎｏ、第■巻、ウィリアムス・アン
ド・ウイルキンス社（ＴｈｅＷｉｌｌｉａｍｓ ａｎｄ
Ｗｉｌｋｉｎｓ Ｃｏ １９６１ 〕＠ν によって推奨された他の培地上で培養したアクチノプラ
ネスＡ／６３５３ｉ−よびアクチノプラネスＡ／１０８
８９の培養特徴を報告する。

培養特徴は３０度Ｃに釦ける６ないし１４日のインキュ
ベーションの後に決定した。

コロニーの発現に最も好ましい温度は約１８ないし約４
２度Ｃの間であると認められ、最適温度は約２８度Ｃな
いし約３７度Ｃである。

表６はプリダム（Ｐ ｒｉｄｈａｍ ） Ｌ−よびゴツ
トリープの方法に従って試験した炭素源の利用性を報告
する。

２つの菌株Ａ／６３５３訃よびＡ／１０８８９はそれら
の球形の胞子前、運動性胞子、釦よびコロニーの形態の
故にアクチノプラネス属に帰属スる。

しかしながら、それらは異なった寒天上のそれらの生育
型式、可溶性色素の生成または不生成、炭素利用形式、
釦よび生理学的特徴に基づき、訃互すに明らかに異なっ
てｂる。

特に、Ａ／６３５３は、これ１で記載されている限りに
釦いてはアクチノプラネスの種のすべてによって利用さ
れるシュクロースを含むグリコシド結合を加水分解する
非常に限定された能力を示す。

Ａ／１０８８９はアクチノプラネス種に釦しては殆んど
認められない原基痕跡的気菌糸を生成する。

この２つの菌株はまたこｉｔで知られてしるアクチノプ
ラネス種のすべてから容易に見わけられる。

これらの理由で、菌株Ａ／６３５３卦よび菌株Ａ／１０
８８９はアクチノプラネスの新菌種と確認され、そして
アクチノプラネス・リグリエ（Ａｃｔｉｎｏｐｌａｎｅ
ｓｌｉｇｕｒｉａｅ）ＡＴＣＣ３１０４８ｈよびアクチ
ノプラネス・ガルバジネンシス（Ａｃｔｉｎｏｐｌａｎ
ｅｓ ｇａｒｂａｄｉｎｅｎｓｉｓ） Ａ Ｔ ＣＣ３
１０４９の名前を与える。

例１ 抗生物質の製造、各種メタポライドの単離訃よび分離 抗生物質活性の製造のために、菌株アクチノプラネス、
ガルバジネンシス（ＡＴＣＣ１０４９）を、栄養培地中
で、かなりの抗生物質活性が存在するようになる１で、
好気的に前培養する。

例として、振盪フラスコ培地は？／ｌで次の組成を有し
つる。

内袖出物 ３．０酵母抽出物
１０．０ 炭酸カルシウム ４．０ デンプン ２５．０ 水道水、適量 全量ｉｏｏｏｍｇフラスコ
を約２８−３０度Ｃで約２４時間振盪し、ついで前培養
物（１１）は次の栄養培地１０１を各々含有するジャー
ファメンターに接株するために使用する。

内袖出物 ４０グ ペプトン ４０グ 酵母抽出物 １０ｆ 塩化ナトリウム ２５１ 大豆ミール １００１ グルコース ５００／ 炭酸カルシウム ５０Ｌ？ 水道水適量 全量１０１ 醗酵バツチを２８−３０度Ｃで攪拌下に好気的にインキ
ュベートする。

試験微生物としてサルシナ・ルテアを使用し、間を釦い
て抗生物質活性を寒天拡散法により微生物的に定量する
。

９０−１２０時間の醗酵の後に最高活性に達する。

醗酵ブロスなｐ Ｈ８，０に調節し、ついで済過助剤と
してハイフロス−パーセル（Ｈｙｆｌｏ ５ｕｐｅｒ
−ｃｅ １１ ）を使用して沢過する。

菌糸を捨て、セして炉浴をその容量の約１／２に相当す
る量のブタノールで抽出する。

有機層を水性層から分離し、そして酸性の水（ｐＨ４，
０）で洗滌した後、もとの量の約１／１０に濃縮し、そ
して３−６度Ｃの温度で１０−１２時間放置する。

粗沈澱形を済過器上に採取し、ブタノールで洗滌し、そ
して真空下、室温で乾燥する：収量３．０１゜この粗沈
澱のワットマン済紙Ａｌ上またはシリカゲル上のクロマ
トグラフィ分析釦よび引続く検出系としてスタフィロコ
ッカス・アウレウスを使用することによるスポットの微
生物学的発色はメタポライドＡ、％−よびメタポライド
Ｂ（ガルジマイシン）と定義される２種の取分の存在を
示す：それらは使用した溶出系の性質に依存する異なっ
たＲｆ値を有する。

粗混合物は水約３０ｍ１に溶かすことによって更に精製
する。

生成した溶液を蒸留水に対し約１６時間透析し、ついで
真空下に小容量１で濃縮する。

粗抗生物質１．５１が得られ、それはな釦メタポライド
Ａとガルジマイシンの混合物である。

２種の抗生物質は、予め決定された溶媒系中に釦ける取
分Ａとガルジマイシンの異なった分配係数に依存し、数
回の向流抽出によって分離釦よび精製される。

使用する溶媒系は比率１：１：０．１のブタノールニリ
ン酸ナトリウム−カリウムバッファーＭ／ １５ ｐ
Ｈ７，２：ヘキサンからなり；メタポライドＡ卦よびガ
ルジマイシンのこの媒質中に釦ける分配係数はそれぞれ
０．３ ｉ−よび０．８である。

１００回抽出の後、モノナトリウム塩としてのガルジマ
イシン０．４５ Ｑ ｆが得られる。

メタボライ）Ａ、％−よびＢの混合物の沈澱後のブタノ
ールからの母液は更に小容量に濃縮し、ついで過剰の軽
油中に注入する。

沈澱が容易に形威し、それを済過により回収する。

上記と同様の条件で行なったクロマトグラフィ分析は、
この画分が同シ溶媒系でＡタボライ）ＡＪ−よびＢと異
なったＲｆ値を有する１生成物からなるものであること
を示す。

この画分はメタポライドＣと命名する。各種溶出系に釦
ける３種のメタポライドの異なったクロマトグラフィー
パターンを次表に報告する。

例１に記載した如くに操作することにより、菌株アクチ
ノプラネス・リグリエＡＴＣＣ３１０４８を約２８−３
０度Ｃで１３０−１７０時間好気的に培養する。

抗生物質活性１．４Ｌ？が得られ、それはメタポライド
ＡとメタポライドＢ（ガルジマイシン）との混合物であ
る。

２種のメタポライドの存在は例１に報告したと同じクロ
マトグラフィ分析によって検出した。

得られた抗生物質活性の精製釦よび２質のメタポライド
の分離は例１に卦ける如くに遠戚した。

モノナトリウム塩としてのガルジマイシン０．２ｆが得
られる。

モノナトリウム塩としてのガルジマイシンの化学−物理
的性質 ガルジマイシン（モノナトリウム塩としての）は両性特
性を有する無晶形の白色粉末である。

それはエレクトロフォー力リゼーション（ｅｌｅｃｔｒ
。

ｆｏｃａｌｉｚａｔｉｏｎ）によって決定して等電点４
．２を有する。

密封容器中に釦いて、塩酸６Ｎ中１２０度で１６時間強
い加水分解をなし、そして加水分解生成物のクロマトグ
ラフィ分析をすることにより、次のアミノ酸を証明する
ことが可能であったニバリン、セリン、グリシン、グル
タミン酸、インロイシン ロイシンわよびアラニン。

密封容器中に訃いて、水酸化バリウムで１１０度に釦す
で１５時間アルカリ性加水分解し、そして加水分解生成
物をクロマトグラフィ分析した後に、トリプトファンの
存在を証明することが可能である。

上記アミノ酸は次の比率で存在するニ アミノ酸 近似比率 バリン ２ セリン １ グリシン ２ グルタミン酸 １ イソロイシン ２ ０イシン ｌ アラニン １ トリプトファン １ 乃 更に、酸性加水分解から生成する生成物の分析は構造未
決定の更に他のアミノ酸の存在を明らかにし、それらの
若干のものは硫黄を含有する。

更にガルジマイシン（モノナトリウム塩としての）は次
の性質で特徴づけられる二 １）融点： ２６０度Ｃ（分解） ２）分子量： ２００５−２１６８ ３）元素分析： Ｃ＝ ４８．７−４８．６係；Ｈ＝６
．７−６．６幅； Ｎ ＝ １１．８−１２．２％；Ｓ
＝５．５−５．５’Ｚ ；Ｎａ＝１．１％ ；Ｈ２０＝
３．６−３．３係 ４）Ｕ、Ｖ、吸着帯： 以下に略記する溶媒系の各々中でガルジマイシンは次の
値を示す： 溶媒 λｍａｘ （ｍμ）Ｅ” １ｃｍ メタノール ２７３（肩）２８０
２６ ２９９ ２４ 水酸化ナトリウム０．ＩＮ ２７３（肩）２７９
２６ ２８８ ２２ 塩酸０．１Ｎ ２７３（肩）２７９
２６ ２８８ ２２ ホスフェートバッファー ２７３（肩）ｐＨ７３８
２７９２４ ２８８２０ スペクトルの完全な図は第１図に示す。

５）赤外スペクトルニヌジョール中に訃ける特徴的な吸
収帯は次の周波数で観察された＝ （ｃｍ ” ）：３２８０．２９２０−２８４０（ヌジ
ョーノン）：；１６５０，１５２０．１４５５（ヌジョ
ール）、１３７５（ヌジョール）、１２６０．１０４５
，９９０，７２００スペクトルの完全な図は第２図に示
す。

６）比旋光度： 〔α〕冨−−４４度（Ｃ＝０．５係ジメチルホルムアミ
ド） ７）溶解性： 水、水性重炭酸ナトリウム、水酸化アルカリの冷水溶液
、熱メタノール、ジメチルホルムアミド、ジメチルスル
ホキサイド、氷酢酸に可溶。

希鉱酸、ベンゼン、アセトン、クロロホルム、四塩化炭
素、（Ｃ２−６）−脂肪族アルカノール−１ｉ’−）ラ
ヒドロフランに不溶。

８）特徴的反応： フェーリング 陽性 トーレンス 陽性 ＫＭｎＯ４陽性 濃Ｈ２ＳＯ４陽性 ニンヒドリン 陰性 ＦｅＣｌ３ 陰性 □ロン 陰性 シッフ 陰性 マルトール 陰性 ９）イオン化函数（Ｉ ｏｎｉｚａｂｌｅ ｆｕｎｃｔ
ｉｏｎ） ：イオン化函数はポテンシオメトリー的に ｐＫａ＝７．１（水）釦よびｐＫａ＝８．５（メチルセ
ロソルブ：水−１６：４）と証明される。

１０）更に、ガルジマイシンのモノナトリウム塩から出
発して、次の誘導体を製造することが可能である： ａ） ガルジマイシン遊離酸：ガルジマイシンモノナ
トリウム塩１．Ｏｆを水１５０７７２１に溶かす。

生成した溶液を水性ｉｏｚ塩酸の添加によりｐＨ２，５
となし、ついで水飽和ブタノール７５ｍ１で２回抽出す
る。

ブタノール抽出液を採取し、真空中４５度Ｃで最初の容
量の１／２０に相当する容量渣で濃縮する。

４度Ｃで１２時間放置した後、沈澱が形成し、それを採
取し、軽油で洗滌し、そして真空中４０−４５度Ｃで乾
燥する。

生成物０．９５Ｏｆが得られ、それは約２５０ないし約
３００度Ｃの間で分解する。

ｂ）ガルジマイシンジナトリウム塩二ガルジマイシンモ
ノナトリウム塩１．０１を水１５０７７２ｇに溶かし、
そして生成した溶液のｐＨをＮ／１０水酸化ナトリウム
の添加により９．６とする。

溶液をついで凍結乾燥する。融点２５０度Ｃの生成物０
．９０Ｏｆが得られる。

Ｃ） ガルジマイシンカルシウム塩二カルシマイシン
モノナトリウム塩０．３１を水２０Ｔｌｌに溶かし、そ
して生成した溶液に塩化カルシウムの飽和溶液を数回に
わけて、完全な沈澱が達成される１で、攪拌下にゆっく
り加える。

得られた固体を済過し、真空中で乾燥し、そしてアセト
ンｉｏｍｇに溶かす。

ジェチルエーテル２００ｍ１に注入した後沈澱が生威し
、それを済過し、そして真空中４０−４５度Ｃで乾□燥
する。

生成物０．２りが得られ、それは３３０−４０度Ｃで分
解する。

本発明は特許請求の範囲記載の製法であるが、な卦以下
の態様をも包含するものである。

１）次の特徴（モノナトリウム塩として）を有する抗生
物質ガルマイシン： １ 融点：２６０度Ｃ（分解） ２ 分子量：２００５−２１６８ ３ 元素分析： Ｃ＝ ４８．７−４８．６係；Ｈ＝６
．７．６．６係；Ｎ＝１１．８− １２．２係；Ｓ＝５．３−５．５係； Ｎａ＝１．１％；Ｈ２０＝３．６− ３．３係； ４Ｕ、Ｖ、吸着帯： 以下に略記する溶媒系の各々中で、ガルジマイシンは次
の値を示す： 溶媒 λｍａｘ（ｍμ）Ｅ ｃｍ メタノール ２７３（肩） ２８０ ２６ ２９９ ２４ 水酸化ナトリウム０．１Ｎ ２７３（肩）２７９
２６ ２８８ ２２ 塩酸０．１Ｎ ２７３（肩）２７９
２６ ２８８ ２２ ホスフェートバッファー２７３（肩） ｐＨ７３８２７９２４ ２８８２０ スペクトルの完全な図は、第１図に示す。

５ 赤外スペクトルニヌジョール中に釦ける特徴的な吸
収は次の周波数（ｃｍ−１）に観察された：３２８０．
２９２０−２８４０ （ヌジョール）、１６５Ｑ、１５
２０．１４５５（ヌジョール）、１３７５（ヌジョール
）、１２６０．１０４５，９９０．７２００ スペクトルの完全な図は、第２図に示す。

６ 比旋光度二 〔α：］−−４４度（Ｃ＝０．５ 係ジメチルホルム
アミド） ７ 溶解性： 水、水性重炭酸ナトリウム、水酸化アルカリの冷水溶液
、熱メタノール、ジメチルホルムアミド、ジメチルスル
ホキサイド、氷酢酸に可溶。

希鉱酸、ベンゼン、アセトン、クロロホルム、四塩化炭
素、（Ｃ２−６）−脂肪族アルカノール、テトラヒドロ
フランに不溶。

８ 特徴的反応： フェーリング 陽性 トーレンス 陽性 ＫＭｎＯ４陽性 濃Ｈ２ＳＯ４陽性 ニンヒドリン 陰性 ＦｅＣｌ３ 陰性 □ロン 陰性 シッフ 陰性 マルトール 陰性 ９ イオン化函数： イオン化函数はポテンシオメトリー的に ｐＫａ＝７．１（水）釦よびｐＫａ＝８．５（メチルセ
ロソルブ：水＝１６：４）と証明される。

１０等電点： ４．２（エレクトロフオーカリゼーションにより決定） ｕＲｆ（直二 ワットマンｒ 紙層１上のクロマ Ｒｆ 値トグラフ
イスタフイロコッカス・ アウレウスに対する微生物学的発 色によるスポットの可視化 溶出系 １）ホスフェートバッファーＭ／１５ ｐ Ｈ６，０で飽和したブタノール ０．１５２
）２％のＰ−トルエンスルホン酸を 含有する水で飽和したブタノール Ｏ，５Ｏ３）２
係の水酸化アンモニウムを含有 する水で飽和したブタノール ０．１０４）ブ
タノールで飽和したホスフェー トバッファーＭ−／ １５ ｐ Ｈ６，００，８０５）
塩化ナトリウムの２０％水溶液 ０．８０６）０．
７５％のメチルオレンジを含有 するブタノールニメタノール：水＝ ４０：１０：２０ ０．６５７）
ブタノール：メタノール：水− ４０：１０：２０ ０．６０８）ア
セトン：水＝１＝１ ０．８０９）水で飽和
した酢酸エチル ０．００シリカゲル上クロマ
トグラフイ 硫酸とワニリン、釦よびスタフィロコッカス・アウレウ
スに対する微生物学的発色によるスポットの可視化 溶出系 水酸化アンモニウムニエタノール Ｏ６：水−１二
８ 二 １ ０．７０
本抗生物質は同定された構造のア□ノ酸の次の近似比率
によって更に特徴づけられるニ アミノ酸 近似比率バリン
２ セリン １ グリシン ２グルタミン酸
１イソロイシン
２０イシン ｌ アラニン ｌ トリプトファン １２）菌株・ア
クチノプラネス・ガルバジネンシスＡＴＣＣ３１０４９
゜ ３）菌株アクチノプラネス・リブリエＡＴＣＣ。

３１０４８゜ ４）遊離酸としての抗生物質ガルジマイシン。

５）ジナトリウム塩としての抗生物質ガルジマイシン。

６）カルシウム塩としての抗生物質ガルジマイシンＯ アクチノプラネス・ガルバジネンシスＡＴＣＣ３１０４
９訃よびアクチノプラネス・リグニエＡＴＣＣ３１０４
８は昭和５０年７月２５日日付で各々申請受理番号Ａ３
１８３．＄ｒよびＡ３１８２として微生物工業技術研究
所で受理され、それぞれ微工研菌寄第３１８３号釦よび
第３１８２号として寄託されてしる。

【図面の簡単な説明】

第１図は本発明のガルジマイシンの各種溶媒中に訃ケる
Ｕ、 Ｖ、吸収曲線を示し、そして第２図は同じ物質の
ヌジョール中にふ−ける赤外吸収曲線を示す。

Claims (1)

【特許請求の範囲】
1. １ ガルジマイシン抗生物質の製造方法であって、アク
   チノプラネス・ガルバジネンシスＡＴＣＣ３１０４９、
   アクチノプラネス・リグリエＡＴＣＣ３１０４８、ｌ、
   −よびそれらの均等菌から選択される菌株を、同化しつ
   る炭素源、同化しつる窒素源釦よび無機塩類を含有する
   水性栄養培地中、好気条条化に、実質的な抗生物質活性
   が培地中に存在するようになる迄培養し、該抗性物質を
   それから採取することからなる方法。