JPH11510182A - セラミドのレベルを下げるための塩基性アミノ酸および誘導体の使用 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】 セラミドの高レベルを伴う疾患の予防または細胞障害の医療処置のための薬剤の製造における塩基性アミノ酸、アシル化塩基性アミノ酸およびそれらの薬理学的に許容される塩の使用を開示した。

Description

【発明の詳細な説明】 セラミドのレベルを下げるための塩基性アミノ酸および誘導体の使用 本発明は、セラミドの高レベルを伴う疾患の予防または細胞障害の医療処置の ために塩基性アミノ酸、アシル化塩基性アミノ酸およびそれらの薬理学的に許容 される塩の新しい医療上の使用に関する。特に、本発明は、セラミドの高レベル を伴う疾患の予防または細胞異常の医療処置のためにＬ−カルニチン、アシルＬ −カルニチン誘導体およびそれらの薬理学的に許容される塩に関する。 セラミドはスフィンゴ脂質の構造単位および代謝に関する塩基性分子である。 すべてのスフィンゴ脂質は、主な親水性構成因子としてセラミドを含有し、セラ ミドからその１−ヒドロキシ位を主に修飾する生合成経路を通り生成する。 セラミドは細胞膜を通るシグナルの導入において重要な役割を演じる。細胞内 受容体（すなわち、カルシトリオール）または膜内受容体[すなわち、ガンマー インターフェロン(ＩＦＮ−γ)、インターロイキン−１(ＩＬ−１)および神経生 長因子(ＮＧＦ)]は、スフィングミエリンをセラミドに加水分解する。セラミド は、ホスファターゼやタンパク質キナーゼを活性化し、生物学的観点からは、細 胞アポトーシス、生長および細胞分化を誘発し、シクロオキシゲナーゼやホスホ リパーゼの発現およびkＢ核因子(ＮＦkＢ)の活性化を調節する[Ｋuno，Ｋ．et a l.，Ｊ．Ｌeukoc．Ｂiol.，５６(５): ５４２−７; Ｃifone，Ｍ．Ｇ．et al.， Ｊ.Ｅxp．Ｍed.，１８０(４): １５４７−５２; Ｋolesnick Ｒ.，Ｍol．Ｃhem .Ｎeuropathol.，２１(２−３): ２８７−９７; Ｊarvis，Ｗ．Ｄ．et al.，Ｐr oc．Ｎatl．Ａcad．Ｓci．Ｕ.Ｓ.Ａ.，９１(１): ７３−７; Ｏbeid，Ｌ．Ｍ．e t al.，Ｓcience，２５９(５１０２): １７６９−７１]。 セラミドの濃度や代謝の変化が多くの疾病の原因となり、また、代謝細胞性障 害を誘発することを見出した。残念ながら今日まで、インビボでのセラミドのレ ベルを低下せしめる方法は存在しなかった。 従って、本発明の１つの目的は、インビボでのセラミドのレベルを低下せしめ るために塩基性アミノ酸、アシル化塩基性アミノ酸およびそれらの薬理学的に許 容される塩の新規な使用を提供することである。 本発明の第２の目的は、セラミドの高レベルを伴う疾患の予防または細胞障害 の医療処置のために塩基性アミノ酸、アシル化塩基性アミノ酸およびそれらの薬 理学的に許容される塩の新規な使用を提供することである。 塩基性アミノ酸、その低分子量塩基性化合物、すなわちアシル誘導体および薬 理学的に許容される塩の投与がセラミドのレベルを低下し、かかる化合物がセラ ミドの高レベルを特徴とする疾患の処置に有用であることを見出した。 特に、アルギニン、リジン、ヒスチジン、オルニチン、カルニチンなどの塩基 性アミノ酸、そのアシル誘導体およびそれらの薬理学的に許容される塩がセラミ ドの高レベルを特徴とする疾患の処置に有用であることを見出した。 本発明によって、インビボでのセラミドのレベルを低下せしめるために塩基性 アミノ酸、塩基性アミノ酸アシル誘導体およびそれらの薬理学的に許容される塩 の新しい用途が提供される。 適当なアミノ酸には、アルギニン、リジン、ヒスチジン、オルニチンおよびカ ルニチンなどの塩基性電荷を有するいかなるアミノ酸も含まれる。これらの化合 物は市販されている。好ましくはＬ−アミノ酸が用いられる。より好ましくは、 カルニチンが用いられる。これらの化合物は、遊離アミノ酸として、あるいは薬 理学的に許容される塩として用いられる。 塩基性アミノ酸のアシル誘導体も本発明で用いることができる。直鎖または分 枝状のＣ_2-6アシルアミノ酸が用いられる。これらのアミノ酸は薬理学者や製造 技術者によく知られている。特に好ましいアシル基は、アセチル、プロピオニル 、ブチリル、バレリルおよびイソバレリルである。 適当な薬理学的に許容される塩は、上記塩基性アミノ酸と通常のアニオンとで 形成され、例えば、クロライド、ブロマイド、イオダイド、アスパルテートなど の酸性アスパルテート、シトレートなどの酸性シトレート、タルトレートなどの 酸性タルトレート、ホスフェートなどの酸性ホスフェート、酸性フマレート、グ ルコホスフェートなどのグリコホスフェート、酸性ラクテート、酸性マレエート 、 オロテート、酸オキサレート、特にシュウ酸、スルファート、特に好ましくはス ルファート、トリクロロアセテートおよびメタンスルフォネートである。 セラミドのレベル上昇を特徴とする疾患または異常の例としては、炎症性腸疾 患、拡散性脈管内凝固、熱症、タンパク質異化および／または脂質消耗、炎症性 または代謝性肝疾患を伴う肝脾腫、心筋内膜炎、内皮細胞および白血球の活性化 、毛管血栓症、感染による髄膜脳炎、臓器移植、リウマチ様関節炎および関連組 織疾患、自己免疫疾患、甲状腺機能高進症、放射線または化学療法剤による損傷 および慢性疲労症候群である。 ある種の薬剤の使用もセラミドの高レベルをもたらすので、本発明は、かかる 薬剤の治療を受けた患者におけるセラミドのレベルを低下せしめることを目的と する。例えば、本発明の塩基性アミノ酸は、セラミドのレベルの増加を防止する ために、コルチコステロイド(デキサメサゾンなど)、抗炎症剤(インドメサシン など)、抗ウイルス剤(インターフェロンなど)、免疫抑制剤(シクロスポリンなど )、化学療法剤(アドリアマイシンなど)、免疫強化剤(イムノグロブリン、ワチク ンなど)および内分泌薬剤(メチマゾールなど)と共に投与することができる。 健康人におけるセラミドの正常値は、年令、大きさおよび体重により相違する が、一般的に５−５０ピコモル／１０⁶細胞(好ましくは、末梢血のリンパ球)の 範囲にある。５０ピコモル／１０⁶細胞以上の値は高レベルとされる。本発明の 塩基性アミノ酸、アシル化塩基性アミノ酸およびこれらの薬理学的に許容される 塩の使用は、この高レベルを少なくとも２５％低下せしめる。 一般的に、塩基性アミノ酸は、セラミドレベルを少なくとも２５％低下せしめ る濃度で本発明に従って投与される。この結果は塩基性アミノ酸の約５０mg−１ ５g／日での経口または非経口投与によって達成される。好ましくはこれらの塩 基性アミノ酸の高レベルは１日１g以上、さらに１日２g以上投与される。特に好 ましくは、１日４−１０gである。 セラミドのレベルの監視は、細胞(リンパ球など)中のセラミドのレベルを直接 監視するか、あるいは細胞中のセラミド代謝体の濃度を間接的に監視することに よってなされる。減少量を知るために、塩基性アミノ酸投与の前と後の両方で患 者のセラミドのレベルが測定されるのが好ましい。監視は投与後のいかなる時点 から始めても良いが、正確な結果を知るために３時間後に開始するのが適切であ る。監視は不定期的に続けられる。 セラミドのレベルは患者から末梢血リンパ球を採取して直接的に測定される。 細胞を遠心分離して上清を除き、脂質を細胞ペレットから取り出す。セラミドを リン酸化する“ＤＡＧキナーゼ検定”を用いて、細胞含有の有機層を検査し、次 いでオートラジオグラフィーでセラミドを確認する[Ｃifone，Ｍ．Ｇ．et al.， Ｅxp．Ｍed.，１８０(４): １５４７−５２]。 本発明を一般的に記載してきたが、いくつかの実施例を参照することにより一 層の理解が得られる。これらの実施例は説明のためのものであって、格別の特記 がない限り制限を意図するものでない。 実施例１ 末梢血リンパ球を通常の方法によって単離した。細胞をＬ−カルニチン(２０ ０mcg／ml)またはイソバレリルＬ−カルニチンと共に３０分間、次いでアンチＦ asモノクローナル抗体と共にさらに３０分間、インキュベートする。細胞を遠心 分離し、上清を除き、細胞ペレットを脱脂質した。有機層(セラミドを含有)をセ ラミドのリン酸化のための“ＤＡＧキナーゼ検定”で調べ、次いでオートラジオ グラフィーで確認した。 結果を下記の表１に示す。 適当に刺激された(例えば、Ｆas−Ｌ、インターロイキン−１などによって)細 胞がセラミドを生み出すことが分かる。アンチＦas抗体を用いると、元の値(２ ０ピコモル／１０⁶細胞)から８１.６ピコモル／１０⁶細胞にセラミドの産生が増 加した。 Ｌ−カルニチンおよびイソバレリルＬ−カルニチンはインビトロでのセラミド の合成を阻害する。 実施例２ 全身性神経−筋症(慢性疲労症候群)の患者２人にＬ−カルニチンを１日３g、 ２カ月間経口投与した。投与の前と後に筋中でのセラミドを測定した。 結果を下記の表２に示す。 実施例３ ８カ月以上メチマゾールの治療(１日１５mg経口投与)を受けていた甲状腺機能 高進症の患者４人に対しＬ−カルニチンを１日８g、４週間経口投与した。リン パ球のセラミドを投与の前と後に測定した。 結果を下記の表３に示す。 実施例４ Ｃ型ウイルス肝炎による肝脾腫の患者３人にＬ−カルニチンを４g静脈注入し た。リンパ球のセラミドを注入の前と後に測定した。 結果を下記の表４に示す。 Ｌ−カルニチンの投与は注入３時間後すでにセラミドレベルの増加を明らかに 阻害した。この作用は少なくとも２日間継続した。 実施例５ 結核感染の結果としてタンパク質異化および脂質消耗がある患者４人にＬ−カ ルニチンを１日８g、２週間非経口的に投与した。投与の前と後に末梢血リンパ 球のセラミドを測定した。 結果を下記の表５に示す。 本発明を完全に記述したが、請求された本発明の精神および範囲を離れること なく、多くの変更および修飾をなし得ることは当業者に明らかであろう。

───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (51)Int.Cl.⁶ 識別記号 ＦＩ Ａ６１Ｋ 31/00 ６４３ Ａ６１Ｋ 31/00 ６４３ ６４３Ｌ 45/00 45/00

Claims (1)

1. 【特許請求の範囲】 １．セラミドの高レベルを伴う疾患の予防または細胞障害の医療処置のための 薬剤の製造における塩基性アミノ酸、アシル化塩基性アミノ酸およびそれらの薬 理学的に許容される塩の使用。 ２．セラミドの高レベルを特徴とする疾患または異常が炎症性腸疾患、拡散性 脈管内凝固、熱症、タンパク質異化および／または脂質消耗、炎症性または代謝 性肝疾患を伴う肝脾腫、心筋内膜炎、内皮細胞および白血球の活性化、毛管血栓 症、感染による髄膜脳炎、臓器移植、リウマチ様関節炎および関連組織疾患、自 己免疫疾患、甲状腺機能高進症、放射線または化学療法剤による損傷および慢性 疲労症候群を含む、請求項１の使用。 ３．塩基性アミノ酸、アシル化塩基性アミノ酸およびそれらの薬理学的に許容 される塩がコルチコステロイド、抗炎症剤、抗ウイルス剤、免疫抑制剤、化学療 法剤、免疫強化剤および内分泌薬剤と共に投与される、請求項１または２の使用 。 ４．塩基性アミノ酸がアルギニン、リジン、ヒスチジン、オルニチンまたはカ ルニチンである、請求項１−３のいずれかの使用。 ５．塩基性アミノ酸がＬ−カルニチンである、請求項４の使用。 ６．該塩基性アミノ酸のアシル基がアセチル、プロピオニル、ブチリル、バレ リルおよびイソバレリルから選択される請求項１−３のいずれかの使用。 ７．該アシル化塩基性アミノ酸がイソバレリルＬ−カルニチンである、請求項 ６の使用。 ８．該薬理学的に許容される塩のアニオンが、クロライド、ブロマイド、イオ ダイド、酸性アスパルテート、酸性シトレート、酸性タルタレート、酸性ホスフ ェート、酸性フマレート、グリコホスフェート、酸性ラクテート、酸性マレエー ト、オロテート、酸性オキサレートおよびスルフェートからなる群より選択され る、請求項１−３の使用。 ９．該アニオンがスルフェート、トリクロロアセテートまたはメタンスルフォ ネートである、請求項８の使用。 １０．経口または非経口で投与される１日量が５０mg−１５ｇである、請求項 １の使用。 １１．経口または非経口で投与される１日量が４−１０ｇである、請求項１の 使用。 １２．活性成分として塩基性アミノ酸、アシル化塩基性アミノ酸またはそれら の薬理学的に許容される塩の、セラミドのレベルを低下するのに有効な量、およ び少なくとも１種の薬理学的に許容される賦形剤を含む、セラミドの高レベルを 伴う疾患の予防または細胞障害の医療処置のための経口または非経口投与可能な 医薬組成物。 １３．セラミドの高レベルを特徴とする疾患または異常が炎症性腸疾患、拡散 性脈管内凝固、熱症、タンパク質異化および／または脂質消耗、炎症性または代 謝性肝疾患を伴う肝脾腫、心筋内膜炎、内皮細胞および白血球の活性化、毛管血 栓症、感染による髄膜脳炎、臓器移植、リウマチ様関節炎および関連組織疾患、 自己免疫疾患、甲状腺機能高進症、放射線または化学療法剤による損傷および慢 性疲労症候群を含む、請求項１２の経口または非経口投与可能な医薬組成物。 １４．塩基性アミノ酸を５０mg−１５ｇ／日、経口または非経口で投与するの に適切な請求項１２または１３の組成物。 １５．塩基性アミノ酸を４ｇ−１０ｇ／日、経口または非経口で投与するのに 適切な請求項１２または１３の組成物。