JPH10311785A

JPH10311785A - 粒子測定装置

Info

Publication number: JPH10311785A
Application number: JP9119846A
Authority: JP
Inventors: Fumio Kubota; 文雄久保田
Original assignee: Sysmex Corp
Current assignee: Sysmex Corp
Priority date: 1997-05-09
Filing date: 1997-05-09
Publication date: 1998-11-24
Anticipated expiration: 2017-05-09
Also published as: JP3587651B2

Abstract

(57)【要約】【課題】この発明は粒子測定装置に関し、血小板領域
に存在する血小板以外の粒子を取り除いて、正確な血小
板を計数することを課題とする。【解決手段】粒子の流れをシース液で取り囲んだ細い
試料流に形成するシースフローセルと、前記試料流に光
を照射する光照射手段と、照射された粒子から得られる
光を検出する検出手段と、検出された光から粒子の特徴
パラメータを算出する算出手段と、算出された特徴パラ
メータの分布図を作成する分布図作成手段と、作成され
た分布図において血小板が含まれる第１の領域を分画す
る第１分画手段と、前記第１の領域内において、***赤
血球が含まれる第２の領域を分画する第２分画手段と、
前記第１の領域から前記第２の領域を除いた領域に含ま
れる粒子の個数を計数する第１計数手段とから構成され
ることを特徴とする。

Description

【発明の詳細な説明】

【０００１】

【発明の属する技術分野】この発明は、粒子測定装置に
関し、特に、血小板の計数を高精度に行う粒子測定装置
に関する。

【０００２】

【従来の技術】従来から、フローサイトメータを利用し
て、血液中に含まれる赤血球や白血球などの計数・解析
が盛んに行われている。フローサイトメータを用いた粒
子測定では、目的の粒子を含む細い試料流に光を照射し
て、粒子に当たって散乱した前方散乱光の強度と蛍光の
強度を計測して、目的の粒子の計数・解析を行う。

【０００３】通常、得られた前方散乱光の強度（ＦＳ
Ｃ）と蛍光の強度（ＦＬ）を特徴パラメータとして２次
元スキャッタグラムを作成し、このスキャッタグラムを
基に種々の解析処理をして赤血球等の粒子が含まれる領
域の分画及び粒子の計数が行われる。たとえば、赤血球
と血小板はその大きさ、形状が異なっているため、スキ
ャッタグラム上では明確に異なるクラスタとして分離可
能である。

【０００４】また、網血小板は、血小板のうち、比較的
ＲＮＡの含有量の多いものである。網血小板は、再生不
良性貧血や急性骨髄性白血病などで、その数が減少する
ことが知られている。したがって網血小板をの計数・解
析をすることは、血液疾患の骨髄における血小板造成の
指標に有用であると考えられている。

【０００５】

【発明が解決しようとする課題】上記のように、フロー
サイトメータを用いて作成した２次元スキャッタグラム
を用いれば血小板の計数が可能であるが、特徴パラメー
タを得るための受光素子の感度のばらつき等によって
は、精度よく測定できない場合もあった。また、フロー
サイトメータで細流化された試料流中の粒子の画像を撮
影する測定装置（ＦＩＣ）によって、２次元スキャッタ
グラムで求められた血小板の分布集団（クラスタ）の近
傍には、血小板とは異なる粒子（***赤血球など）が含
まれていることがわかった。***赤血球とは赤血球がち
ぎれてできた断片のことである。すなわち、従来の方法
では、***赤血球などの非血小板粒子が血小板として計
数されていたため、正確な血小板数が算出できなかっ
た。また、２次元スキャッタグラムの血小板の領域中に
***白血球（臣核球を含む）が含まれている場合もあ
り、これは、血小板の誤計数の要因となっていた。

【０００６】そこで、この発明は、以上のような事情を
考慮してなされたものであり、２次元スキャッタグラム
上の血小板の領域から非血小板の属する領域を排除して
血小板の正確な計数を行うことのできる粒子測定装置を
提供するものである。

【０００７】

【課題を解決するための手段】この発明は、粒子の流れ
をシース液で取り囲んだ細い試料流に形成するシースフ
ローセルと、前記試料流に光を照射する光照射手段と、
照射された粒子から得られる光を検出する検出手段と、
検出された光から粒子の特徴パラメータを算出する算出
手段と、算出された特徴パラメータの分布図を作成する
分布図作成手段と、作成された分布図において血小板が
含まれる第１の領域を分画する第１分画手段と、前記第
１の領域内において、***赤血球が含まれる第２の領域
を分画する第２分画手段と、前記第１の領域から前記第
２の領域を除いた領域に含まれる粒子の個数を計数する
第１計数手段とから構成されることを特徴とする粒子測
定装置を提供するものである。ここで、前記第２分画手
段は、作成された分布図上の血小板が含まれる第１の領
域内の分布集団の度数分布を求める分布演算手段と、こ
の度数分布の統計学的パラメータに基づいて前記***赤
血球が含まれる第２の領域を分画する第１分画線を設定
する第１分画線描画手段とから構成されるようにしても
よい。

【０００８】

【発明の実施の形態】以下、図面に示す実施の形態に基
づいてこの発明を詳述する。なお、これによってこの発
明が限定されるものではない。この発明のシースフロー
セルは、対象粒子を含む試料液をシース液で包んで流す
ことにより流体力学的効果によって細い試料液の流れを
形成させることのできるフローセルであり、これには、
従来公知のものを用いることができる。この発明が対象
とする粒子は、血液や尿に含まれる血球や細胞を主とし
ているが、酵母菌や乳酸菌等の微生物等を測定対象とし
てもよい。血球や細胞の種類を分類するために、細胞内
の顆粒や核酸等を特異的な蛍光試薬と反応させ、その蛍
光強度を計測するようにすることがある。特に、この発
明では、血液中に含まれる血小板の正確な計数を主目的
とする。使用可能な蛍光試薬としては、オーラミンＯ、
アクリジンオレンジ、プロピディウムアイオダイド、エ
チジウムブロマイド、ヘキスト３３３４２、ピロニン
Ｙ、ローダミン１２３などがある。

【０００９】光照射手段には、レーザ、ハロゲンランプ
又はタングステンランプのような連続的に光を照射する
連続光源を用いることができる。検出手段としては、電
気的検出によるもの、光学的検出によるものなどを用い
ることができる。例えば、光照射手段によって照明され
た粒子を光学的に検出し粒子の散乱光や蛍光などの光の
強度を出力する光検出手段（例えば、フォトダイオー
ド，フォトトランジスタまたはフォトマルチプライヤチ
ューブ）を用いることができる。算出手段は、検出され
た光から散乱光信号強度，蛍光信号強度，散乱光信号パ
ルス幅，蛍光信号パルス幅などの必要な特徴パラメータ
を算出する。

【００１０】算出手段、分布図作成手段、第１、第２、
第３及び第４分画手段、第１、第２及び第３計数手段、
第１及び第２分画線描画手段、及び分布演算手段は、Ｃ
ＰＵ，ＲＯＭ，ＲＡＭ，タイマー，Ｉ／Ｏインタフェー
ス等からなるマイクロコンピュータによって構成でき、
各手段の機能は、ＣＰＵがＲＡＭ等に記憶されたプログ
ラムの手順に従って動作することによって実行される。

【００１１】また、分布図作成手段によって作成される
分布図は、特徴パラメータの分布状態を表わすものであ
り、たとえば、縦軸に前方散乱光強度、横軸に蛍光強度
を表した２次元スキャッタグラムである。２次元スキャ
ッタグラム上の各軸の強度は、フォトダイオードの最高
感度を２５５チャンネルとしたときの相対強度（チャン
ネル）で表わされる。

【００１２】この２次元スキャッタグラムにおいて、分
裂赤血球は、第１分画手段で分画された血小板が含まれ
る第１の領域内であって、血小板の分布集団の近傍、か
つ蛍光強度が小さい側に表れることが、特開平８−１７
８８２６号公報に示すフローサイトメータで撮影した画
像によって確かめられている。

【００１３】また、一般に、***赤血球は健常人では表
れないことが知られているので、健常人の２次元スキャ
ッタグラムを作成し血小板を含む第１の領域を分画し、
血小板の分布集団をその度数分布の統計学パラメータに
基づいて特定すれば、***赤血球の表れる第２の領域が
決定できる。

【００１４】また、同様に、***白血球も健常人では出
現しないことが知られている。出現する場合には、血小
板を含む第１の領域の蛍光強度のかなり大きい領域に表
れることが、前記したフローサイトメータの画像撮影に
より確かめられている。したがって、***白血球の表れ
る領域も、血小板の分布集団の度数分布の統計学パラメ
ータによって決定することが可能である。

【００１５】また、網血小板は、その性質上その内部に
含まれる核酸と顆粒量が単一血小板よりも多いことが知
られており、このため網血小板は、２次元スキャッタグ
ラム上では、蛍光強度が血小板の分布集団よりも大きい
領域に表れることが確かめられている。この網血小板が
含まれる領域も、同様に血小板の分布集団の度数分布の
統計学パラメータによって決定することが可能である。

【００１６】この発明の測定装置の一実施例における光
学系の部分を図１に示す。この実施例では、散乱光や蛍
光を検出するための連続発生レーザ光源２１と、粒子画
像を撮像するためのパルス光源８との２つの光源を設け
ている。この２つの光源２１，８からの光Ｌ１，Ｌ２
は、シースフローセル５（図１では紙面に直角方向に試
料流が流れる）に対して互いに直交するように９０°交
差させて照射している。

【００１７】また、この実施例では、粒子画像を撮像す
るためのパルス光は、図２に示すようにシースフローセ
ル５内の試料流に対して、連続発生レーザ光源２１の照
射位置より（例えば０．５mm程度）下流側に照射するよ
うにしている。このような照射位置をずらすことによっ
て、細胞による散乱光や蛍光に影響されない明瞭な粒子
画像を撮像することができる。

【００１８】連続発生レーザ光は、コンデンサレンズ２
４によって細く絞られてシースフローセル５に導かれた
試料流に照射される。この照射領域に粒子が流れてくる
と、その粒子による散乱光や蛍光が集光レンズ２５によ
って集められ、散乱光はダイクロイックミラー２６によ
って反射され、フォトダイオード２７で受光される。緑
色，赤色の蛍光は、それぞれダイクロイックミラー２
８，ミラー２９によって反射され、光電子増倍管３０，
３１で受光，増倍される。

【００１９】フォトダイオード２７，光電子増倍管３
０，３１によって検出された散乱光強度信号Ｓ１および
蛍光強度信号Ｓ２，Ｓ３は、図示していない信号処理装
置に渡され、各検出信号パルスの高さ，面積，巾等の情
報がＡ／Ｄ変換されたデータとして得られる。たとえ
ば、信号処理装置により、散乱光強度ａ，信号パルス巾
ｂ，緑蛍光強度ｃ，赤蛍光強度ｄの４つの特徴パラメー
タが得られる。そして、それらのパラメータを用いて各
粒子の種類を実時間で同定する。

【００２０】ビデオカメラによる粒子画像の撮影は、あ
らかじめ撮像対象として指定された種類の粒子（たとえ
ば血小板）だけを選別して行うようにすることもでき
る。すなわち、ある粒子の特徴パラメータが、撮像対象
としている種類の粒子の特徴パラメータに合致している
かどうかを実時間で比較し、その結果撮像対象としてい
る粒子であると判定されれば、その粒子を撮像するため
の発光トリガ信号をパルス光源８に対して供給する。

【００２１】パルス光源８は、発光トリガ信号Ｔｓによ
って一瞬だけ（数十ナメ秒程度）発光するタイプの光源
であり、試料流の流速が数ｍ／秒と高速であっても、流
れる粒子をブレ無く撮像することができる。パルス光は
図２に示すように、光ファイバー２２でシースフローセ
ル５へ導かれ、コンデンサレンズ２３によって細く絞ら
れて試料流に照射される。光ファイバー２２を介して照
射することにより、パルス光のコヒーレンシーが落ち、
回折縞の少ない粒子画像を撮像することができる。試料
流を透過したパルス光は、投影レンズ２４によってビデ
オカメラ１０の受光面に結像され、細胞の透過光像が撮
像される。ビデオカメラ１０からのビデオ信号Ｖｓは画
像処理装置１１に渡され、ディジタル画像として記憶，
保存される。

【００２２】また、画像処理装置では、記憶された粒子
画像を解析し、粒子像のエッジ抽出，面積，円相当径，
円形度などの画像パラメータが算出される。なお、この
発明では、パルス光源８，ビデオカメラ１０，画像処理
装置１１は、粒子の画像を撮影して、測定された粒子が
血小板，***赤血球，あるいは***白血球であるかどう
かを確認するために用いられる付随的な装置であり、２
次元スキャッタグラムの作成や各粒子領域の分画処理に
直接寄与するものではない。

【００２３】散乱光強度や蛍光強度等の特徴パラメータ
ａ〜ｄのパラメータが組合せられ、２次元スキャッタグ
ラムの作成，表示が行われ、さらに所定の粒子の分画，
粒子数の算出が行われる。以上が、この発明の粒子測定
装置の構成の概要である。

【００２４】次に、この発明において、スキャッタグラ
ム上での各粒子領域の分画，及び血小板等の個数を計数
する実施例について述べる。図３に、この発明の血小板
及び網血小板数の計数のフローチャートを示す。主とし
て、次のＳ１からＳ４までの４つの処理からなる。

【００２５】前処理Ｓ１：全血試料２００μＬが、この
発明の測定装置内に吸引され、そのうちの１０μＬがこ
の測定に使用される。測定に使用される試料は、直ちに
４０μＬの２．６％オーラミンＯ溶液（９５．９％エ
チレングリコール）と、１９５０μＬの希釈液（バッフ
ァ）と混合される。この混合によって、血小板は非常に
短い時間内に蛍光染色される。

【００２６】検出処理Ｓ２：前処理にて混合された試料
液２．８μＬは、シースフローセルにおいて、４８８ｎ
ｍのアルゴンイオンレーザ光線が照射される。試料液中
の各粒子で散乱されたレーザ光は、フォトダイオードと
フォトマルチプライヤにおいて、光電変化され、前方散
乱光強度（ＦＳＣ：Forward ScatterIntensity）と前方
蛍光強度（ＦＬ：Fluorescence Intensity）とが測定さ
れる。光電変換された電気信号は、ピータ値においてサ
ンプルホールドされ、さらにＡ／Ｄ変換されて、特徴パ
ラメータとして信号処理装置に与えられる。

【００２７】解析処理Ｓ３：前方蛍光強度ＦＬをＸ軸
に、前方散乱光強度ＦＳＣをＹ軸にとった２次元スキャ
ッタグラムを作成し、２次元スキャッタグラム上におい
て前記検出処理で測定された特徴パラメータをもとに、
粒子集団の分画、血小板の計数等が行われる。この解析
処理の詳細については後述する。

【００２８】出力処理Ｓ４：解析処理Ｓ３で算出された
血小板の計数の結果や２次元スキャッタグラムを、表示
装置あるいは印刷装置に出力する。以上が、この発明の
フローチャートであるが、４つの処理（Ｓ１からＳ４）
が、各検体ごとに繰り返され、各検体ごとに血小板の計
数等が行われる。これらの４つの処理は、信号処理装置
内のマイクロコンピュータによって実現できる。

【００２９】図４に、解析処理Ｓ３のフローチャートを
示す。信号処理装置において、検出処理Ｓ２で求められ
た各粒子の特徴パラメータを用いて、前方蛍光強度ＦＬ
をＸ軸、前方散乱光強度ＦＳＣをＹ軸としたスキャッタ
グラムをＲＡＭ上に展開して作成する（ステップＳ
５）。図５に、スキャッタグラムの一実施例を示す。縦
軸（Ｙ軸）の前方散乱光強度は、粒子のサイズに対応し
たものである。また、横軸（Ｘ軸）の前方蛍光強度は、
ＲＮＡ含有量に対応したものである。

【００３０】ステップＳ６において、スキャッタグラム
を赤血球領域と血小板領域の２つに分画する。ここで、
分画する方法としては、特願平１−３０８９６４号公報
に記載された「二次元分布分画方法」を用いることがて
きる。この方法によれば、図５に示すように、スキャッ
タグラムの左上に存在する赤血球領域と下方部分に存在
する血小板領域を分画する分画線を引くことができる。
図５において、曲線Ｅが分画線である。

【００３１】ステップＳ７において、血小板領域の分布
角度を算出する。ここで分布角度とは、粒子の分布集団
の重心とスキャッタグラムの原点を結んだ直線（図５に
おける直線Ａ）の傾き（ｔａｎθ）である。血小板の分
布集団の重心は、血小板領域内に存在する各粒子の散乱
光強度（ＦＳＣ）と蛍光強度（ＦＬ）のそれぞれの平均
値から求められる。

【００３２】ステップＳ８において、***赤血球用の分
画線を決定する。***赤血球のない健常人の血液では、
血小板の分布集団は、その重心と原点を結んだ直線の直
角方向に投影した度数分布において、平均値−標準偏差
×３（ＡＶ−３ＳＤ）におさまると統計学的に推定でき
る。また、***赤血球は、このＡＶ−３ＳＤをこえる部
分に存在することが撮影画像により確認されている。

【００３３】そこで、血小板の分布集団の重心と原点を
結んだ直線と平行で、ＡＶ−３ＳＤに相当する位置の直
線を***赤血球用の分画線と決定する。具体的には、蛍
光強度を示すＸ軸上の−２３チャネルを通る傾きｔａｎ
θの直線を求め、これを分画線とする。図５において、
直線Ｂが、***赤血球用の分画線である。図５では、血
小板領域内で、直線Ｂの左側に位置する領域に属する粒
子が***赤血球（Ｆｒａｇ）とみなされる。この***赤
血球が存在する領域をＦｒａｇ領域と呼ぶ。

【００３４】ステップＳ９において、***白血球用の分
画線を決定する。***白血球も健常人では出現せず、特
定の疾患の検体でのみ出現することが知られている。こ
のような検体を測定し、粒子画像を撮影した場合、蛍光
強度を示すＸ軸上の１６４チャネルを超える領域に***
白血球が表れることが確認されている。

【００３５】そこで、Ｘ軸上の１６４チャネルを通る傾
きｔａｎθの直線を求め、これを***白血球の分画線と
する。図５において、直線Ｃがこの分画線であり、血小
板領域内で、直線Ｃの右側に位置する領域に属する粒子
が***白血球（Ｏｔｈｅｒ）とみなされる。この***白
血球が存在する領域をＯｔｈｅｒ領域と呼ぶ。

【００３６】ステップＳ６、ステップＳ８及びステップ
Ｓ９によって求められた血小板領域と、分画線Ｂ，Ｃに
よって、高純度の血小板が含まれる領域が特定される。
すなわち、血小板領域内に含まれる粒子のうち、Ｆｒａ
ｇ領域の粒子とＯｔｈｅｒ領域の粒子を取り除いたもの
が、高純度の血小板であると決定できる。

【００３７】次に、ステップＳ１０において、網血小板
用の分画線を決定する。網血小板は、蛍光強度が通常の
単一血小板よりも大きい値を示すことが知られており、
ここでは、前記した度数分布の平均値＋標準偏差×２
（ＡＶ＋２ＳＤ）に相当する位置の直線を網血小板用の
分画線と定義する。

【００３８】具体的には、スキャッタグラムのＸ軸上の
２０チャネルを通る傾きｔａｎθの直線を分画線とし、
この直線の右側に位置する血小板を網血小板と判断す
る。図５において、直線Ｄがこの分画線であり、血小板
領域内で、直線Ｄと直線Ｃとで囲まれた領域に属する粒
子が網血小板（ＲＰ）とみなされる。この網血小板が存
在する領域をＲＰ領域と呼ぶ。以上のようにして、スキ
ャッタグラム上の粒子は、Ｆｒａｇ領域，ＲＰ領域，Ｏ
ｔｈｅｒ領域と血小板の分布集団の領域とに分画され
る。

【００３９】図６に、***赤血球が出現している検体の
スキャッタグラムの一実施例を示す。図６（ａ）は、赤
血球領域と血小板領域とを分画したスキャッタグラムを
示しており、図６（ｂ）は、図６（ａ）からＦｒａｇ領
域を除去した後のスキャッタグラムを示している。血小
板領域内で直線ＢとＣとで囲まれた領域が高純度の血小
板領域である。

【００４０】次に、ステップＳ１１において、各領域内
の粒子の計数を行う。粒子の計数は、ＲＡＭ上に展開さ
れたスキャッタグラム上のドット数を、ＣＰＵが領域ご
とにカウントすることによって行われる。ここで、Ｆｒ
ａｇ領域，ＲＰ領域及びＯｔｈｅｒ領域のドット数の計
数値を、それぞれ＄Ｆｒａｇ，＄ＲＰ及び＄Ｏｔｈｅｒ
と呼ぶ。

【００４１】ステップＳ１２において、上記の計数値
と、血小板領域の総ドット数（＄ＰＬＴ）とから、それ
ぞれの領域内の粒子数の、血小板領域の全粒子数に対す
る比率が、次式により求められる。Ｆｒａｇ％＝＄Ｆｒａｇ／＄ＰＬＴ×１００ ……（１）ＲＰ％＝＄ＲＰ／＄ＰＬＴ×１００ ……（２）Ｏｔｈｅｒ％＝＄Ｏｔｈｅｒ／＄ＰＬＴ×１００ ……（３）ここで、Ｆｒａｇ％は***赤血球の全血小板数に対する
比率、ＲＰ％は網血小板の全血小板数に対する比率、Ｏ
ｔｈｅｒ％は***白血球の全血小板数に対する比率を表
わす。

【００４２】また、全血における血小板濃度ＰＬＴ＃
（個数／μＬ）は、分析された試料容積と希釈倍率を用
いて、次式により算出される。ＰＬＴ＃＝＄ＰＬＴ÷分析試料容積（μＬ）÷希釈倍率 ……（４）さらに、全血における***赤血球濃度（Ｆｒａｇ＃）、
網血小板濃度（ＲＰ＃）及び***白血球濃度（Ｏｔｈｅ
ｒ＃）が、次式により算出される。Ｆｒａｇ＃＝ＰＬＴ＃× Ｆｒａｇ％÷１００ ……（５）ＲＰ＃＝ＰＬＴ＃× ＲＰ％ ÷１００ ……（６）Ｏｔｈｅｒ＃＝ＰＬＴ＃×Ｏｔｈｅｒ％÷１００ ……（７）また、***赤血球及び***白血球を除いた高純度の血小
板の個数（Ｐ−ＰＬＴ＃）は、次式によって求められ
る。Ｐ−ＰＬＴ＃＝ＰＬＴ＃−Ｆｒａｇ＃−Ｏｔｈｅｒ＃ ……（８）

【００４３】図６に示した検体について、この発明の解
析処理を行って求めた各計数値を以下に示す。＄ＰＬＴ＝１０５９（ドット）＃ＰＬＴ＝１９５×１０³（個／μＬ）ＲＰ％＝０．２７（％）Ｆｒａｇ％＝０．５（％）Ｏｔｈｅｒ％＝０．０（％）ＲＰ＃＝０．５３×１０³（個／μＬ）Ｆｒａｇ＃＝０．９８×１０³（個／μＬ）Ｏｔｈｅｒ＃＝０．０（個／μＬ）Ｐ−ＰＬＴ＃＝１９４×１０³（個／μＬ）以上のような解析により、高純度の血小板数（Ｐ−ＰＬ
Ｔ＃）の計数が可能となり、さらに、網血小板の数（Ｒ
Ｐ＃）も算出できる。

【００４４】

【発明の効果】この発明によれば、スキャッタグラム上
において所定の粒子が存在する領域を分画する分画線を
引いて、血小板領域から***赤血球等の血小板でない粒
子を除去しているので、正確な血小板数の計数が可能と
なる。

【図面の簡単な説明】

【図１】この発明の測定装置における光学系の部分の構
成図である。

【図２】この発明の測定装置におけるフローセル部分の
構成図である。

【図３】この発明の血小板の分画・計数のフローチャー
トである。

【図４】この発明の解析処理Ｓ３のフローチャートであ
る。

【図５】この発明に関するスキャッタグラムの一実施例
である。

【図６】この発明の***赤血球が出現している検体のス
キャッタグラムの一実施例である。

【符号の説明】

５フローセル８パルス光源９投影レンズ１０ビデオカメラ１１画像処理装置２１連続発光レーザ２２光ファイバー２３コンデンサレンズ２４コンデンサレンズ２５集光レンズ２６ダイクロイックミラー２７フォトダイオード２８ダイクロイックミラー２９ミラー３０光電子増倍管３１光電子増倍管

Claims

【特許請求の範囲】

【請求項１】粒子の流れをシース液で取り囲んだ細い
試料流に形成するシースフローセルと、前記試料流に光を照射する光照射手段と、照射された粒子から得られる光を検出する検出手段と、検出された光から粒子の特徴パラメータを算出する算出
手段と、算出された特徴パラメータの分布図を作成する分布図作
成手段と、作成された分布図において血小板が含まれる第１の領域
を分画する第１分画手段と、前記第１の領域内において、***赤血球が含まれる第２
の領域を分画する第２分画手段と、前記第１の領域から前記第２の領域を除いた領域に含ま
れる粒子の個数を計数する第１計数手段とから構成され
ることを特徴とする粒子測定装置。
【請求項２】前記第２分画手段が、作成された分布図
上の血小板が含まれる第１の領域内の分布集団の度数分
布を求める分布演算手段と、この度数分布の統計学的パ
ラメータに基づいて前記***赤血球が含まれる第２の領
域を分画する第１分画線を設定する第１分画線描画手段
とから構成されることを特徴とする請求項１記載の粒子
測定装置。
【請求項３】前記第１の領域内において、***白血球
が含まれる第３の領域を分画する第３分画手段と、第１
計数手段によって計数された粒子の個数から前記第３の
領域の粒子の個数を除く第２計数手段とをさらに備えた
ことを特徴とする請求項１記載の粒子測定装置。
【請求項４】前記第１の領域内において、網血小板が
含まれる第４の領域を分画する第４分画手段と、前記第
２計数手段によって計数された粒子の個数から、前記第
４の領域に含まれる粒子の個数のみを計数する第３計数
手段とをさらに備えたことを特徴とする請求項３記載の
粒子測定装置。
【請求項５】前記第４分画手段が、前記度数分布の統
計学的パラメータに基づいて網血小板が含まれる第４の
領域を分画する第２分画線を設定する第２分画線描画手
段を含むことを特徴とする請求項４記載の粒子測定装
置。