JPH10296220A - Method for decomposition with microbe and method for restoring environment - Google Patents

Abstract

PROBLEM TO BE SOLVED: To mitigate the adverse effect of a produced oxide upon bacteria by decomposing an organic chlorocompound and an aromatic compound with microbes using an antioxidant. SOLUTION: When a medium contaminated in an aromatic compound and an organic chlorine compound is restored and cleaned by bringing it into contact with biodegrading bacteria, the medium contaminated by the aromatic compound and the organic chlorine compound is effectively restored by continuously keeping the proliferation activity and the biodegradation activity of biodegrading bacteria with the help of an antioxidant added. That is, the antioxidant is added to trap an oxide such as epoxide produced and freed in a cell by biodegradation of the aromatic compound and the organic chlorine compound. Thus it is possible to control and mitigate the irreversible metabolism of nucleic acid and protein in the cell.

Description

【発明の詳細な説明】DETAILED DESCRIPTION OF THE INVENTION

【０００１】[0001]

【発明の属する技術分野】本発明は、微生物による有機
塩素化合物及び／又は芳香族化合物の分解方法に関す
る。また、汚染された水性媒体や土壌、空気（気相）の
浄化に有用な環境修復方法に関する。[0001] The present invention relates to a method for decomposing organochlorine compounds and / or aromatic compounds by microorganisms. Further, the present invention relates to an environmental restoration method useful for purifying a contaminated aqueous medium, soil, and air (gas phase).

【０００２】[0002]

【従来の技術】近年、生体に対して有害でありかつ難分
解性である揮発性有機塩素化合物による環境汚染が大き
な問題となってきている。特に、国内外の紙・パルプ工
業や精密機械関連産業地域の土壌中にはテトラクロロエ
チレン（ＰＣＥ）やトリクロロエチレン（ＴＣＥ）、ジ
クロロエチレン（ＤＣＥ）等の揮発性有機塩素化合物に
よる汚染がかなりの範囲で拡がっていると考えられてお
り、実際に環境調査等で検出された事例が多数報告され
ている。これらの揮発性有機塩素化合物は、土壌中に残
留したものが雨水等により地下水中に溶解して周辺地域
一帯に拡がるとされている。このような化合物は発癌性
の疑いがあり、また環境中で非常に安定であるため、特
に飲料水の水源として利用されている地下水の汚染は大
きな社会問題とされている。2. Description of the Related Art In recent years, environmental pollution by volatile organic chlorine compounds which are harmful to living organisms and are hardly decomposable has become a serious problem. In particular, the contamination of volatile organic chlorine compounds such as tetrachloroethylene (PCE), trichloroethylene (TCE), and dichloroethylene (DCE) has spread to a considerable extent in the soil of the paper and pulp industry and precision machinery-related industries in Japan and overseas. It has been reported that many cases were actually detected by environmental surveys. It is said that those volatile organic chlorine compounds remaining in the soil are dissolved in groundwater by rainwater or the like and spread throughout the surrounding area. Such compounds are suspected of carcinogenicity and are very stable in the environment. In particular, the contamination of groundwater used as a drinking water source is regarded as a major social problem.

【０００３】このようなことから、揮発性有機塩素化合
物の分解・除去による、汚染地下水等の水性媒体、土
壌、及びそれに伴う周辺気相の浄化は、環境保全の視点
から重要な課題であり、浄化に必要な技術の開発が行わ
れてきている。[0003] Therefore, purification of an aqueous medium such as contaminated groundwater, soil, and the accompanying gas phase by decomposing and removing volatile organic chlorine compounds is an important issue from the viewpoint of environmental conservation. The technology required for purification is being developed.

【０００４】例えば、活性炭による吸着処理、光や熱に
よる分解処理等が検討されてきたが、コストや操作性の
面から必ずしも実用的であるとはいえない。For example, adsorption treatment with activated carbon, decomposition treatment with light or heat, etc. have been studied, but are not always practical in terms of cost and operability.

【０００５】一方、環境中では安定であるＴＣＥ等の揮
発性有機塩素化合物に対して近年微生物による分解が報
告され、その実用化に向けた研究がなされ始めている。
この微生物を用いた生物分解処理には、用いる微生物を
選択することで有機塩素化合物を無害な物質までに分解
できること、基本的に特別な薬品が不要であること、メ
ンテナンスにかかる労力やコストを軽減できること等の
利点がある。On the other hand, volatile organic chlorine compounds such as TCE, which are stable in the environment, have recently been reported to be decomposed by microorganisms, and research for their practical use has begun.
In the biodegradation treatment using this microorganism, it is possible to decompose organic chlorine compounds to harmless substances by selecting the microorganism to be used, basically no special chemicals are required, and labor and cost for maintenance are reduced. There are advantages such as what you can do.

【０００６】例えば、ＴＣＥ分解菌としては、Welchia
alkenophila sero 5(USP4877736,ATCC53570)、Welchia
alkenophila sero 33(USP4877736,ATCC53571)、Methylo
cystis sp.strain M(Agric.Biol.Chem.,53,2903(198
9)、Biosci.Biotech.Biochem.,56,486(1992)、同56,736
(1992))、Methylosinus trichosprium OB3b(Am.Chem.So
c.Natl.Meet.Dev.Environ.Microbiol.,29,365(1989)、A
ppl.Environ.Microbiol.,55,3155(1989)、Appl.Bioche
m.Biotechnol.,28,877(1991)、特開平02-92274号公報、
特開平03-292970号公報）、Methylomonas sp.MM2(Appl.
Environ.Microbiol.,57,236(1991))、Alcaligenes deni
trificans ssp.xylosoxidans JE75(Arch.microbiol.,15
4,410(1990))、Alcaligenes eutrophus JMP134(Appl.En
viron.Microbiol.,56.1179(1990))、Alcaligenes eutro
phus FERM-13761(特開平07-123976号公報)、Pseudomona
s aeruginosa JI104（特開平07-236895号公報）、Mycob
acterium vaccae JOB5(J.Gen.Microbiol.,82,163(197
4)、Appl.Environ.Microbiol.,54.2960(1989)、ATCC2967
8)、Pseudomonas putida BH(下水道協会誌,24,27(198
7))、Pseudomonas sp.strain G4(Appl.Environ.Microbi
ol.,52,383(1986)、同53,949(1987)、同54,951(1989)、
同56,279(1990)、同57,193(1991)、USP4925802,ATCC536
17、この菌は初めPseudomonas cepaciaと分類されてい
たが、Acinetobactorsp.に変更された。）、Pseudomona
s mendocina KR-1(Bio/Technol.,7.282(1989))、Pseudo
monas putida F1(Appl.Environ.Microbiol.,54,1703(19
88)、同54,2578(1988))、Pseudomonas fluorescens PFL
12(Appl.Environ.Microbiol.,54,2578(1988))、Pseudom
onas putida KWI-9（特開平06-70753号公報）、Pseudom
onas cepacia KK01（特開平06-227769号公報）、Nitros
omonas europaea(Appl.Environ.Microbiol.,56,1169(19
90))、Lactobacillus vaginalis sp.nov(Int.J.Syst.Ba
cteriol.,39,368(1989)、ATCC49540)等がある。For example, TCE degrading bacteria include Welchia
alkenophila sero 5 (USP4877736, ATCC53570), Welchia
alkenophila sero 33 (USP4877736, ATCC53571), Methylo
cystis sp.strain M (Agric. Biol. Chem., 53, 2903 (198
9), Biosci. Biotech. Biochem., 56,486 (1992), 56,736
(1992)), Methylosinus trichosprium OB3b (Am.Chem.So
c. Natl. Meet. Dev. Environ. Microbiol., 29, 365 (1989), A
ppl.Environ.Microbiol., 55, 3155 (1989), Appl. Bioche
m.Biotechnol., 28,877 (1991), JP-A-02-92274,
JP-A-03-292970), Methylomonas sp.MM2 (Appl.
Environ.Microbiol., 57, 236 (1991)), Alcaligenes deni
trificans ssp.xylosoxidans JE75 (Arch.microbiol., 15
4,410 (1990)), Alcaligenes eutrophus JMP134 (Appl.
viron.Microbiol., 56.1179 (1990)), Alcaligenes eutro
phus FERM-13761 (JP 07-123976 A), Pseudomona
saeruginosa JI104 (Japanese Patent Application Laid-Open No. 07-236895), Mycob
acterium vaccae JOB5 (J. Gen. Microbiol., 82, 163 (197
4), Appl.Environ.Microbiol., 54.2960 (1989), ATCC2967
8), Pseudomonas putida BH (Sewerage Association Journal, 24, 27 (198
7)), Pseudomonas sp.strain G4 (Appl.Environ.Microbi
ol., 52,383 (1986), 53,949 (1987), 54,951 (1989),
56,279 (1990), 57,193 (1991), USP4925802, ATCC536
17. This fungus was initially classified as Pseudomonas cepacia, but was changed to Acinetobactorsp. ), Pseudomona
s mendocina KR-1 (Bio / Technol., 7.282 (1989)), Pseudo
monas putida F1 (Appl.Environ.Microbiol., 54,1703 (19
88), 54,2578 (1988)), Pseudomonas fluorescens PFL
12 (Appl.Environ.Microbiol., 54, 2578 (1988)), Pseudom
onas putida KWI-9 (JP-A-06-70753), Pseudom
onas cepacia KK01 (Japanese Patent Laid-Open No. 06-227769), Nitros
omonas europaea (Appl.Environ.Microbiol., 56,1169 (19
90)), Lactobacillus vaginalis sp.nov (Int.J.Syst.Ba
cteriol., 39, 368 (1989), ATCC 49540).

【０００７】[0007]

【発明が解決しようとする課題】しかしながら、これら
の分解菌を実際の環境浄化処理に用いる場合にきわめて
問題となるのが、ＴＣＥ等の揮発性有機塩素化合物の分
解にともなう分解中間産物による細胞内毒性である。例
えば、Methylocystis sp.strain M（Ｍ株）（バイオサ
イエンスとインダストリー，52,879(1994)）、トルエン
・フェノール分解菌（Appl.Environ.Microbiol.,55,272
3(1989)）、アンモニア酸化細菌（Appl.Environ.Microb
iol.,57,2986(1991)）、メタン資化性菌（バイオサイエ
ンスとインダストリー，49,492(1991)）などに報告があ
る。However, when these degrading bacteria are used in actual environmental purification treatment, it is extremely problematic that intracellular cells produced by decomposition intermediate products accompanying the decomposition of volatile organic chlorine compounds such as TCE. Toxic. For example, Methylocystis sp. Strain M (M strain) (Bioscience and Industry, 52,879 (1994)), toluene / phenol degrading bacteria (Appl. Environ. Microbiol., 55, 272)
3 (1989)), ammonia-oxidizing bacteria (Appl.Environ.Microb
iol., 57, 2986 (1991)), and methane assimilating bacteria (Bioscience and Industry, 49, 492 (1991)).

【０００８】これらの細胞内毒性の詳細なメカニズムに
ついては明確な結論は導かれていないが、例えば、反応
性に富んだ酸化物などの生成により、細胞内高分子、特
に核酸、蛋白質が不可逆的にアルキル化され、分解活
性、さらには分解微生物の生命活性そのものが失われて
しまうことが示唆されている。これら分解により生じる
細胞内毒性の問題は、分解微生物を利用した実際の環境
浄化において、分解活性の継続的な発現・分解菌の維持
を困難なものとしており、微生物を用いた環境浄化の大
きな課題となっている。Although a clear conclusion has not been drawn as to the detailed mechanism of these intracellular toxicity, for example, the production of highly reactive oxides causes irreversible intracellular macromolecules, especially nucleic acids and proteins. It has been suggested that the degrading activity and further the life activity itself of the degrading microorganism are lost. The problem of intracellular toxicity caused by these decompositions makes it difficult to maintain continuous expression of degrading activity and maintain degrading bacteria in actual environmental purification using degrading microorganisms. It has become.

【０００９】このように、芳香族化合物及び／又は揮発
性有機塩素化合物の分解により生じる細胞内毒性を回避
することにより、分解能の継続・分解菌の維持を可能と
するような、効果的な環境浄化方法の実現が強く求めら
れている。As described above, by avoiding the intracellular toxicity caused by the decomposition of the aromatic compound and / or the volatile organic chlorine compound, an effective environment capable of maintaining the resolution and maintaining the degrading bacteria can be obtained. There is a strong demand for a purification method.

【００１０】そこで本発明の目的は、このような芳香族
化合物及び／又は有機塩素化合物によって汚染された媒
体を、分解菌と接触させることによって修復浄化する際
に、その化合物の分解に起因する生成酸化物などによる
菌体へのダメ−ジを軽減し、その結果、分解菌の増殖能
および分解活性を継続・維持させることによって、芳香
族化合物及び／又は有機塩素化合物により汚染された媒
体の効果的な修復方法を提供することにある。Accordingly, an object of the present invention is to provide a medium contaminated with such an aromatic compound and / or an organochlorine compound when the medium is repaired and purified by bringing the medium into contact with a decomposing bacterium. The effect of the medium contaminated with aromatic compounds and / or organochlorine compounds is reduced by reducing damage to the cells by oxides and the like, thereby maintaining and maintaining the growth ability and decomposition activity of the decomposing bacteria. It is to provide an effective repair method.

【００１１】[0011]

【課題を解決するための手段】上記の目的は以下の本発
明によって達成される。The above object is achieved by the present invention described below.

【００１２】本発明は、微生物とともに酸化防止剤を用
いて有機塩素化合物及び／又は芳香族化合物を分解する
ことを特徴とする微生物による分解方法に関する。特
に、上記微生物が、酸化酵素であるオキシゲナーゼを発
現する微生物である上記分解方法に関する。また、本発
明は、上記発明の分解方法を用いた環境修復方法に関す
る。The present invention relates to a method for decomposing a microorganism, which comprises decomposing an organic chlorine compound and / or an aromatic compound using an antioxidant together with the microorganism. In particular, the present invention relates to the above decomposition method, wherein the microorganism is a microorganism that expresses an oxygenase, which is an oxidase. The present invention also relates to an environmental restoration method using the decomposition method of the present invention.

【００１３】[0013]

【発明の実施の形態】以下、本発明の実施の形態を挙げ
て詳細に説明する。Embodiments of the present invention will be described below in detail.

【００１４】本発明は、芳香族化合物及び／又は有機塩
素化合物によって汚染された媒体を、その分解菌と接触
させることにより修復浄化する際に、その化合物の分解
に起因する生成酸化物などによる菌体へのダメージの軽
減を目的として酸化防止剤を加えることにより、分解菌
の増殖能および分解活性を継続・維持させ、芳香族化合
物及び／又は有機塩素化合物により汚染された媒体を効
果的に修復する方法である。The present invention provides a method for repairing and purifying a medium contaminated with an aromatic compound and / or an organochlorine compound by contacting the medium with a decomposing bacterium, the bacterium being formed by oxides generated by the decomposition of the compound. By adding an antioxidant for the purpose of reducing the damage to the body, the growth ability and decomposition activity of the decomposing bacteria are maintained and maintained, and the medium contaminated with aromatic compounds and / or organic chlorine compounds is effectively repaired. How to

【００１５】つまり、芳香族化合物及び／又は有機塩素
化合物の分解により細胞内で生成・遊離してくるエポキ
サイド等の酸化物、スーパーオキシド、過酸化水素など
の過酸化物などの活性酸素種などを、これらの存在する
反応系に酸化防止剤を添加してトラップすることで、細
胞内の核酸や蛋白質が不可逆的に変成されることを抑制
・軽減し、分解活性の継続、分解微生物の生命活性の維
持を実現するものである。ここで酸化防止剤とは、自動
酸化の連鎖反応を抑制するラジカル阻害剤、あるいは過
酸化物を非ラジカル分解して不活性化する過酸化物分解
剤のことをいう。That is, active oxygen species such as oxides such as epoxides, superoxides, peroxides such as hydrogen peroxide, etc., which are generated and released in cells by the decomposition of aromatic compounds and / or organochlorine compounds are removed. By adding an antioxidant to these existing reaction systems and trapping them, irreversible denaturation of intracellular nucleic acids and proteins is suppressed / reduced. It is to realize the maintenance of. Here, the antioxidant refers to a radical inhibitor that suppresses a chain reaction of autoxidation or a peroxide decomposer that deactivates peroxide by non-radical decomposition.

【００１６】生成酸化物によるダメージを受けるもの
は、先にも述べたように核酸、蛋白質、脂質などが主な
ものである。蛋白質においては、メチオニン、ヒスチジ
ン、シスチン、チロシン、トリプトファン残基が特にダ
メージを受けやすく、これらアミノ酸残基の酸化修飾に
より酵素の不活性化を引き起こすのみならず、プロテア
ーゼによる分解も受けやすくなる。また、核酸において
は、アルキル化などにより鋳型の忠実な複製が困難とな
り、変異、さらには細胞死をもたらす。As described above, nucleic acids, proteins, lipids, and the like are mainly damaged by the generated oxide. In proteins, methionine, histidine, cystine, tyrosine, and tryptophan residues are particularly susceptible to damage. Oxidative modification of these amino acid residues not only causes inactivation of the enzyme but also makes them susceptible to degradation by proteases. Further, in a nucleic acid, faithful replication of a template becomes difficult due to alkylation or the like, resulting in mutation and further cell death.

【００１７】これらの生成酸化物のダメージを低減する
ために用いることのできる化合物としては、例えば、コ
ーヒー酸（３，４−ジヒドロキシケイ皮酸）、ビタミン
Ｅ（α−トコフェロール）、ビタミンＣ（アスコルビン
酸）、ユビキノール、尿酸、２−ヒドロキシエストラジ
オール、ビリルビン、３ーヒドロキシフラボン、クロロ
ゲン酸、カテキン、プロトカテキン酸、ピロガロール、
浸食子酸などの酸化防止剤が挙げられる。その他、芳香
族化合物及び／又は有機塩素化合物の微生物分解を継続
・維持させるために有効な酸化防止剤であれば、いかな
るものでも用いることが可能である。Compounds which can be used to reduce the damage of these formed oxides include, for example, caffeic acid (3,4-dihydroxycinnamic acid), vitamin E (α-tocopherol), vitamin C (ascorbin) Acid), ubiquinol, uric acid, 2-hydroxyestradiol, bilirubin, 3-hydroxyflavone, chlorogenic acid, catechin, protocatechinic acid, pyrogallol,
Antioxidants such as gallic acid; In addition, any antioxidant can be used as long as it is an effective antioxidant for maintaining and maintaining the microbial decomposition of the aromatic compound and / or the organochlorine compound.

【００１８】本発明に用いる酸化防止剤の濃度として
は、酸化防止剤の種類、あるいはそれを用いる媒体の種
類により異なるが、好ましくは１〜１０００ｐｐｍの範
囲であり、さらに好ましくは１〜２００ｐｐｍの範囲で
ある。The concentration of the antioxidant used in the present invention varies depending on the type of the antioxidant or the type of the medium using the antioxidant, but is preferably in the range of 1 to 1000 ppm, more preferably in the range of 1 to 200 ppm. It is.

【００１９】本発明に用いる微生物としては、芳香族化
合物及び／又は有機塩素化合物を分解し得る微生物であ
ればいかなるものでもよく、具体的にはシュードモナス
（Pseudomonas）属、アシネトバクター（Acinetobacte
r）属、アルカリゲネス（Alcaligenes）属、ビブリオ
（Vibrio）属、ノカルジア（Nocardia）属、バチルス
（Bacillus）属、ラクトバチルス（Lactobacillus）
属、アクロモバクター（Achromobacter）属、アルスロ
バクター（Arthrobacter）属、ミクロコッカス（Microc
occus）属、マイコバクテリウム（Mycobacterium）属、
メチロシナス（Methylosinus）属、メチロモナス（Meth
ylomonas）属、ベルキア（Welchia）属、メチロシスチ
ス（Methylocystis）属、ニトロゾモナス（Nitrosomona
s）属、サッカロミセス（Saccharomyces）属、カンジダ
（Ｃａｎｄｉｄａ）属、トルロプシス（Ｔｏｒｕｌｏｐ
ｓｉｓ）属、モラクセラ（Moraxella）属に属する微生
物が挙げられ、例えば、Ｊ１株（FERM BP-5102）、ＪＭ
１株（FERM BP-5352）、シュードモナス セパシアＫＫ
０１株（Pseudomonas cepacia KK01、FERM P-4235）、
シュードモナス・スピーシズＴＬ１株（Pseudomonas s
p.TL1、FERM P-14726）、シュードモナス アルカリゲ
ネスＫＢ２株（Pseudomonas alcaligenes KB2、FERM BP
-5354）、アルカリゲネス・スピーシズＴＬ２株（Alcal
igenes sp.TL2、FERM P-14642）、ビブリオ・スピーシ
ズＫＢ１株（Vibrio sp.KB1、FERM P-14643）等を挙げ
ることができる。As the microorganism used in the present invention, any microorganism can be used as long as it can decompose aromatic compounds and / or organochlorine compounds, and more specifically, microorganisms of the genus Pseudomonas and Acinetobacte.
r) genus, genus Alcaligenes, genus Vibrio, genus Nocardia, genus Bacillus, lactobacillus (Lactobacillus)
Genus, Achromobacter, Arthrobacter, Micrococcus
occus), Mycobacterium,
Methylosinus, Methylomonas
ylomonas, Genus Welchia, Genus Methylocystis, Nitrosomona
s) genus, Saccharomyces, Candida, Torulopsis
and genus Moraxella, for example, strain J1 (FERM BP-5102), JM
1 strain (FERM BP-5352), Pseudomonas cepacia KK
01 strains (Pseudomonas cepacia KK01, FERM P-4235),
Pseudomonas sp. TL1 strain (Pseudomonas sp.
p.TL1, FERM P-14726), Pseudomonas alkaligenes KB2 strain (Pseudomonas alcaligenes KB2, FERM BP)
-5354), Alkagenes species TL2 strain (Alcal
igenes sp. TL2, FERM P-14642), Vibrio sp. KB1 strain (Vibrio sp. KB1, FERM P-14643) and the like.

【００２０】本発明に用いる微生物を培養するために用
いられる無機塩培地としては、通常の微生物の生育に必
要であって微生物が生育可能であればいかなる培地でも
よく、例えばＭ９培地に選択的炭素源を添加したもので
培養することも可能である。Ｍ９培地の組成例として、
Ｎａ2ＨＰＯ4：６．２ｇ、ＫＨ2ＰＯ4：３．０ｇ、Ｎａ
Ｃｌ：０．５ｇ、ＮＨ4Ｃｌ：１．０ｇ（培地１リット
ル中、ｐＨ７．０）が挙げられる。培養は好気条件下で
行なうことができ、液体培養でも固体培養でもよい。培
養温度は３０℃前後が望ましい。The inorganic salt medium used for culturing the microorganism used in the present invention may be any medium as long as it is necessary for the growth of normal microorganisms and can grow the microorganisms. It is also possible to culture with a source added. As an example of the composition of the M9 medium,
Na2HPO4: 6.2 g, KH2PO4: 3.0 g, Na
Cl: 0.5 g, NH4 Cl: 1.0 g (in 1 liter of medium, pH 7.0). The culture can be performed under aerobic conditions, and may be a liquid culture or a solid culture. The culture temperature is preferably around 30 ° C.

【００２１】本発明における芳香族化合物及び／又は有
機塩素化合物の分解処理は、水性媒体中、土壌中、及び
気相中の芳香族化合物及び／又は有機塩素化合物と分解
微生物および酸化防止剤とを接触させることによって行
なうことができる。The decomposition treatment of the aromatic compound and / or the organic chlorine compound in the present invention comprises the step of separating the aromatic compound and / or the organic chlorine compound in the aqueous medium, the soil, and the gas phase with the decomposing microorganism and the antioxidant. This can be done by contact.

【００２２】分解微生物および酸化防止剤と芳香族化合
物及び／又は有機塩素化合物との接触は、微生物が分解
活性を発現し得る条件であればいかなる方法でも行なう
ことができ、バッチ法、半連続法、連続法などの種々の
方法を用いて実施できる。微生物は半固定状態で又は適
当な担体に固定化して用いることもできる。廃液、土
壌、気相等の被処理物は、必要に応じて各種の処理を行
ってもよい。The contact between the decomposing microorganism and the antioxidant and the aromatic compound and / or the organochlorine compound can be carried out by any method as long as the microorganism can exhibit the decomposing activity. And various methods such as a continuous method. The microorganism can be used in a semi-fixed state or by being fixed to a suitable carrier. The object to be treated such as waste liquid, soil, gas phase, etc. may be subjected to various treatments as necessary.

【００２３】本発明における水性媒体中の芳香族化合物
及び／又は有機塩素化合物の分解処理は、水性媒体中に
存在する芳香族化合物及び／又は有機塩素化合物と分解
微生物および酸化防止剤とを接触させることによって行
なうことができる。以下に主な利用形態を述べるが、こ
れらの形態に限定されることなく、いかなる水性媒体中
の芳香族化合物及び／又は有機塩素化合物汚染の浄化処
理にも利用可能である。In the present invention, the decomposition treatment of the aromatic compound and / or the organochlorine compound in the aqueous medium is performed by bringing the aromatic compound and / or the organochlorine compound present in the aqueous medium into contact with the decomposing microorganism and the antioxidant. It can be done by doing. The main use forms are described below, but the present invention is not limited to these forms, and can be used for purification treatment of aromatic compounds and / or organochlorine compounds in any aqueous medium.

【００２４】例えば、最も簡便な方法としては、芳香族
化合物及び／又は有機塩素化合物によって汚染された水
性媒体中に直接に分解微生物および酸化防止剤を導入す
る方法がある。この場合、水性媒体のｐＨや、塩濃度、
温度、汚染物質の濃度等を分解微生物の種類によって最
適なものとすることが望ましい。For example, the simplest method is to directly introduce a decomposing microorganism and an antioxidant into an aqueous medium contaminated with an aromatic compound and / or an organic chlorine compound. In this case, the pH of the aqueous medium, the salt concentration,
It is desirable to optimize the temperature, the concentration of pollutants, and the like according to the type of the decomposing microorganism.

【００２５】また別の利用形態としては、培養槽を設け
て分解微生物を培養し、この培養槽に酸化防止剤を加
え、芳香族化合物及び／又は有機塩素化合物で汚染され
た水性媒体を所定の流量で導入し、分解させる形態があ
る。水性媒体の導入および排水は連続して行ってもよい
が、処理能力に応じて間欠的に、あるいはバッチ式で処
理することも可能である。このような制御を芳香族化合
物及び／又は有機塩素化合物の濃度に合わせてシステム
制御し最適化を図るとよい。As another application form, a culture tank is provided to culture degraded microorganisms, an antioxidant is added to the culture tank, and an aqueous medium contaminated with an aromatic compound and / or an organic chlorine compound is subjected to a predetermined method. There is a form that is introduced at a flow rate and decomposed. The introduction and drainage of the aqueous medium may be performed continuously, but may be performed intermittently or batchwise according to the processing capacity. Such control may be optimized by controlling the system according to the concentration of the aromatic compound and / or the organic chlorine compound.

【００２６】さらに、分解微生物および酸化防止剤を担
体、例えば土壌粒子等に付着させ、これを反応槽に充填
し、この反応槽内に芳香族化合物及び／又は有機塩素化
合物汚染水性媒体を導入して分解処理を行う形態があ
る。この場合、使用する担体は、土壌粒子に限らずいか
なるものでも利用可能であるが、微生物の保持能力に優
れ、通気性を損なわないようなものがより望ましい。例
えば、微生物の棲息空間を与えるような材料として、従
来、医薬品工業、食品工業、廃水処理システム等で利用
されているバイオリアクタで汎用されているさまざまな
微生物用担体が利用できる。より具体的には、多孔質ガ
ラス、セラミクス、金属酸化物、活性炭、カオリナイ
ト、ベントナイト、ゼオライト、シリカゲル、アルミ
ナ、アンスラサイト等の無機粒子状担体、デンプン、寒
天、キチン、キトサン、ポリビニルアルコール、アルギ
ン酸、ポリアクリルアミド、カラギーナン、アガロー
ス、ゼラチン等のゲル状担体、イオン交換性セルロー
ス、イオン交換樹脂、セルロース誘導体、グルタルアル
デヒド、ポリアクリル酸、ポリウレタン、ポリエステル
等が挙げられる。また天然物として。綿、麻、紙類とい
ったセルロース系のもの、木粉、樹皮といったリグニン
系のものも利用可能である。Further, the decomposing microorganisms and the antioxidant are attached to a carrier, for example, soil particles, and the like, and the mixture is filled in a reaction tank, and an aqueous medium contaminated with an aromatic compound and / or an organic chlorine compound is introduced into the reaction tank. There is a form in which the disassembly process is performed. In this case, the carrier to be used is not limited to soil particles, but any carrier can be used. However, a carrier that has excellent ability to retain microorganisms and does not impair air permeability is more desirable. For example, as a material that provides a space for living microorganisms, various microorganism carriers commonly used in bioreactors conventionally used in the pharmaceutical industry, food industry, wastewater treatment systems, and the like can be used. More specifically, porous glass, ceramics, metal oxides, activated carbon, inorganic particulate carriers such as kaolinite, bentonite, zeolite, silica gel, alumina, anthracite, starch, agar, chitin, chitosan, polyvinyl alcohol, alginic acid And gel-like carriers such as polyacrylamide, carrageenan, agarose and gelatin, ion-exchangeable cellulose, ion-exchange resins, cellulose derivatives, glutaraldehyde, polyacrylic acid, polyurethane and polyester. Also as a natural product. Cellulosic materials such as cotton, hemp and paper, and lignin materials such as wood flour and bark can also be used.

【００２７】本発明における土壌中の芳香族化合物及び
／又は有機塩素化合物の分解処理は、土壌中に存在する
芳香族化合物及び／又は有機塩素化合物と分解微生物お
よび酸化防止剤とを接触させることによって行なうこと
ができる。以下に主な利用形態を述べるが、これらの形
態に限定されることなく、本発明の方法はいかなる土壌
中の芳香族化合物及び／又は有機塩素化合物汚染の浄化
処理にも利用可能である。In the present invention, the decomposition treatment of the aromatic compound and / or the organochlorine compound in the soil is performed by bringing the aromatic compound and / or the organochlorine compound present in the soil into contact with the decomposing microorganism and the antioxidant. Can do it. The main uses are described below, but without being limited to these forms, the method of the present invention can be used for purification treatment of aromatic and / or organochlorine compound contamination in any soil.

【００２８】例えば、最も簡便な方法としては、芳香族
化合物及び／又は有機塩素化合物によって汚染された土
壌中に直接に分解微生物および酸防止剤を導入する方法
がある。導入の方法としては、土壌表面に散布する方法
はもとより、比較的深い地層中の処理の場合には、地中
に挿入した井戸から導入する方法がある。さらに、空気
や水などによって圧力をかけると広範囲に分解微生物お
よび酸化防止剤が拡がり、より効果的である。この場
合、土壌中の諸条件を分解微生物に適するように調整す
ればよい。For example, the simplest method is to directly introduce a decomposing microorganism and an acid inhibitor into soil contaminated with an aromatic compound and / or an organic chlorine compound. As a method of introduction, in addition to a method of spraying on the soil surface, in the case of treatment in a relatively deep stratum, there is a method of introduction from a well inserted into the ground. Further, when pressure is applied by air, water, or the like, the decomposing microorganisms and the antioxidant are spread over a wide range, which is more effective. In this case, various conditions in the soil may be adjusted to be suitable for the degrading microorganism.

【００２９】また、分解微生物および酸化防止剤を担体
に付着させ、これを反応槽に充填し、この反応槽を芳香
族化合物及び／又は有機塩素化合物で汚染された土壌
の、主に帯水層中に導入して分解処理を行う形態があ
る。反応槽の形態はフェンス状やフイルム状のような、
土壌中の広範囲を網羅できるものが望ましい。この場
合、使用する担体は、いかなるものでも利用可能である
が、微生物の保持能力に優れ、通気性を損なわないよう
なものがより望ましい。例えば、微生物の棲息空間を与
えるような材料として、従来、医薬品工業、食品工業、
廃水処理システム等で利用されているバイオリアクタで
汎用されているさまざまな微生物用担体が利用できる。
より具体的には、多孔質ガラス、セラミクス、金属酸化
物、活性炭、カオリナイト、ベントナイト、ゼオライ
ト、シリカゲル、アルミナ、アンスラサイト等の無機粒
子状担体、デンプン、寒天、キチン、キトサン、ポリビ
ニルアルコール、アルギン酸、ポリアクリルアミド、カ
ラギーナン、アガロース、ゼラチン等のゲル状担体、イ
オン交換性セルロース、イオン交換樹脂、セルロース誘
導体、グルタルアルデヒド、ポリアクリル酸、ポリウレ
タン、ポリエステル等が挙げられる。また天然物とし
て、綿、麻、紙類といったセルロース系のもの、木粉、
樹皮といったリグニン系のものも利用可能である。Further, the decomposed microorganisms and the antioxidant are attached to a carrier, and the carrier is filled with the carrier. The reactor is mainly used for aquifers of soil contaminated with aromatic compounds and / or organochlorine compounds. There is a form in which it is introduced into the inside to perform a decomposition process. The reaction tank is shaped like a fence or film.
Those that can cover a wide range in soil are desirable. In this case, any carrier can be used, but it is more preferable that the carrier has an excellent ability to retain microorganisms and does not impair air permeability. For example, as a material that provides a habitat for microorganisms, conventionally, pharmaceutical industry, food industry,
Various microorganism carriers commonly used in bioreactors used in wastewater treatment systems and the like can be used.
More specifically, porous glass, ceramics, metal oxides, activated carbon, inorganic particulate carriers such as kaolinite, bentonite, zeolite, silica gel, alumina, anthracite, starch, agar, chitin, chitosan, polyvinyl alcohol, alginic acid And gel-like carriers such as polyacrylamide, carrageenan, agarose and gelatin, ion-exchangeable cellulose, ion-exchange resins, cellulose derivatives, glutaraldehyde, polyacrylic acid, polyurethane and polyester. As natural products, cellulosic materials such as cotton, hemp, paper, wood flour,
Lignin-based materials such as bark are also available.

【００３０】本発明における気相中の芳香族化合物及び
／又は有機塩素化合物の分解処理は、気相中に存在する
芳香族化合物及び／又は有機塩素化合物と分解微生物お
よび酸化防止剤とを接触させることによって行なうこと
ができる。以下に主な利用形態を述べるが、これらの形
態に限定されることなく、本発明の方法はいかなる気相
中の芳香族化合物及び／又は有機塩素化合物気相汚染の
浄化処理にも利用可能である。In the present invention, the decomposition treatment of the aromatic compound and / or the organochlorine compound in the gas phase is performed by bringing the aromatic compound and / or the organochlorine compound present in the gas phase into contact with the decomposing microorganism and the antioxidant. It can be done by doing. The main uses are described below, but without being limited to these forms, the method of the present invention can be used for the purification treatment of any gas phase of aromatic compounds and / or organochlorine compounds in the gas phase. is there.

【００３１】例えば、培養槽を設けて分解微生物を培養
し、この培養槽に酸化防止剤を加え、芳香族化合物及び
／又は有機塩素化合物で汚染された気体を所定の流量で
導入し、分解させる形態がある。気体の導入法について
はなんら制限はないが、気体の導入により培養液が攪拌
されエアレーションが促進される形態がより望ましい。
気体の導入および排気は連続して行ってもよいが、処理
能力に応じて間欠的に、あるいはバッチ式で処理するこ
とも可能である。このような制御を芳香族化合物及び／
又は有機塩素化合物の濃度に合わせてシステム制御し最
適化を図るとよい。For example, a decomposing microorganism is cultured in a culture tank, an antioxidant is added to the culture tank, and a gas contaminated with an aromatic compound and / or an organic chlorine compound is introduced at a predetermined flow rate to decompose the microorganism. There is a form. There is no particular limitation on the gas introduction method, but it is more preferable that the introduction of the gas agitates the culture solution and promotes aeration.
The introduction and exhaust of gas may be performed continuously, but it is also possible to perform processing intermittently or batchwise according to the processing capacity. Such control is performed by using an aromatic compound and / or
Alternatively, the system may be controlled and optimized according to the concentration of the organic chlorine compound.

【００３２】また別の利用形態としては、分解微生物お
よび酸化防止剤を担体、例えば土壌粒子等に付着させ、
これを反応層に充填し、この反応槽内に芳香族化合物及
び／又は有機塩素化合物汚染気体を導入して分解処理を
行う形態がある。この場合、使用する担体は、土壌粒子
に限らずいかなるものでも利用可能であるが、微生物の
保持能力に優れ、通気性を損なわないようなものがより
望ましい。例えば、微生物の棲息空間を与えるような材
料として、従来、医薬品工業、食品工業、廃水処理シス
テム等で利用されているバイオリアクタで汎用されてい
るさまざまな微生物担体が利用できる。より具体的に
は、多孔質ガラス、セラミクス、金属酸化物、活性炭、
カオリナイト、ベントナイト、ゼオライト、シリカゲ
ル、アルミナ、アンスラサイト等の無機粒子状担体、デ
ンプン、寒天、キチン、キトサン、ポリビニルアルコー
ル、アルギン酸、ポリアクリルアミド、カラギーナン、
アガロース、ゼラチン等のゲル状担体、イオン交換性セ
ルロース、イオン交換樹脂、セルロース誘導体、グルタ
ルアルデヒド、ポリアクリル酸、ポリウレタン、ポリエ
ステル等が挙げられる。また天然物として、綿、麻、紙
類といったセルロース系のもの、木粉、樹皮といったリ
グニン系のものも利用可能である。As another application form, a decomposing microorganism and an antioxidant are adhered to a carrier such as soil particles,
There is a form in which this is filled in a reaction layer, and a decomposition treatment is performed by introducing an aromatic compound and / or an organic chlorine compound contaminated gas into the reaction tank. In this case, the carrier to be used is not limited to soil particles, but any carrier can be used. However, a carrier that has excellent ability to retain microorganisms and does not impair air permeability is more desirable. For example, various materials commonly used in bioreactors conventionally used in the pharmaceutical industry, the food industry, wastewater treatment systems, and the like can be used as a material that provides a habitat for microorganisms. More specifically, porous glass, ceramics, metal oxides, activated carbon,
Inorganic particulate carriers such as kaolinite, bentonite, zeolite, silica gel, alumina, anthracite, starch, agar, chitin, chitosan, polyvinyl alcohol, alginic acid, polyacrylamide, carrageenan,
Gel-like carriers such as agarose and gelatin, ion-exchangeable cellulose, ion-exchange resins, cellulose derivatives, glutaraldehyde, polyacrylic acid, polyurethane, polyester and the like can be mentioned. As natural products, cellulosic materials such as cotton, hemp and paper, and lignin-based materials such as wood flour and bark can also be used.

【００３３】さらに、分解微生物および酸化防止剤の保
持と栄養供給を兼用できる材料としては、農林水産業関
係で利用される堆肥など、その例を多く挙げることがで
きる。すなわち、麦わら等の穀物類の藁や大鋸屑、米
糠、雪化菜、砂糖黍の絞りかす等の植物由来の乾燥物、
またカニやエビの殻などの海産廃棄物などが利用でき
る。Further, examples of the material which can serve both as holding the degrading microorganisms and the antioxidant and supplying nutrients include compost used in the agriculture, forestry and fisheries industry. That is, plant-derived dried products such as straw and sawdust of cereals such as straw, rice bran, snowy greens, sugarcane marc,
Marine waste such as crabs and shrimp shells can also be used.

【００３４】汚染気体の浄化処理においては、担体にな
る物質を予め充填した上で分解微生物および酸化防止剤
を導入すればよい。分解反応をより効率的に行わせるた
めには、先に述べた酸化防止剤や栄養素、含水比、酸素
濃度などを所望の条件に保つとよい。また、反応槽内の
担体と水分量の比は分解微生物の生育と通気性から、反
応槽の形態は処理する気体の量や濃度などから適宜選択
すればよいが、気体と担体に保持される分解微生物との
接触が促進されるように配慮するとよく、例えば、カラ
ム、チューブ、タンク、箱形のものを利用することがで
きる。さらに、このような形状のものを排気ダクトやフ
ィルタ等とユニット化してもよいし、能力にあわせてい
くつかを連続させてもよい。In the purification treatment of the contaminated gas, a substance to be a carrier is preliminarily filled, and then a decomposing microorganism and an antioxidant may be introduced. In order to perform the decomposition reaction more efficiently, the above-described antioxidants, nutrients, water content, oxygen concentration, and the like are preferably maintained under desired conditions. Further, the ratio of the amount of water to the carrier in the reaction tank may be appropriately selected from the amount and concentration of the gas to be treated, etc. Care should be taken to promote contact with degrading microorganisms. For example, columns, tubes, tanks, and boxes can be used. Further, a unit having such a shape may be unitized with an exhaust duct, a filter, or the like, or some units may be continuous according to the capacity.

【００３５】汚染気体は、初め担体材料に吸着する場合
もあり、微生物利用の効果がうまく観察されない例も稀
にあるが、一定期間の後には担体材料に付着した汚染物
質が分解されて、また汚染物質の分解した材料表面に再
度汚染物質が吸着することにより、担体材料ヘの吸着性
が再生される。このようにして、汚染除去能は飽和する
ことなく常に一定の分解が期待できる。The contaminant gas may be adsorbed on the carrier material at first, and there are rare cases where the effect of utilizing microorganisms is not well observed. However, after a certain period of time, the contaminants adhering to the carrier material are decomposed, The adsorbability of the contaminant to the carrier material is regenerated by adsorbing the contaminant again on the surface of the decomposed material. In this way, a constant decomposition can always be expected without saturating the decontamination ability.

【００３６】以上のような浄化処理における分解微生物
の増殖材料としては、先にも述べたように一般に用いら
れる微生物培養用の培地を使用できる。例えば、ブイヨ
ン培地、Ｍ９培地、２ＸＹＴ培地、Ｌ培地、あるいはポ
リペフトン、酵母エキスなどと糖や有機酸などの炭素源
とを任意に混合した培地などが有効である。また、これ
らの培地は液状、あるいはアガロースを加えることによ
りゲル状に調製したもの等、いずれも利用可能であり、
分解微生物に最適な条件を適宜選択すればよい。As described above, a commonly used culture medium for culturing microorganisms can be used as a growth material for degrading microorganisms in the above purification treatment. For example, a broth medium, M9 medium, 2XYT medium, L medium, or a medium in which polypeptone, yeast extract, and the like are arbitrarily mixed with a carbon source such as a sugar or an organic acid are effective. In addition, any of these media can be used, such as a liquid or a gel prepared by adding agarose.
Optimal conditions for the degrading microorganism may be appropriately selected.

【００３７】本発明の方法は、閉鎖系および開放系のい
ずれの廃液処理、土壌処理ならびに空気処理の方法にも
適用できる。なお、微生物を担体等に固定して用いた
り、生育を促進する各種の方法を併用してもよい。The method of the present invention is applicable to both closed and open wastewater treatment, soil treatment and air treatment. The microorganisms may be immobilized on a carrier or the like, or various methods for promoting growth may be used in combination.

【００３８】[0038]

【実施例】以下、本発明を実施例によりさらに説明する
が、本発明はこれらに限定するものではない。EXAMPLES The present invention will be further described below with reference to examples, but the present invention is not limited to these examples.

【００３９】実施例１ Ｊ１株による土壌（褐色森林土）中でのフェノール分解
処理に対するコーヒー酸の効果 酵母エキス０．２％を含む寒天培地上のＪ１株のコロニ
ーを、５００ｍｌ容坂口フラスコ中の酵母エキス０．０
２％を含むＭ９培地２００ｍｌに接種し、２５℃で２４
時間振とう培養を行った。Example 1 Effect of caffeic acid on phenol degradation treatment in soil (brown forest soil) by strain J1 A colony of strain J1 on an agar medium containing 0.2% yeast extract was placed in a 500 ml Sakaguchi flask. Yeast extract 0.0
Inoculate 200 ml of M9 medium containing 2%
Time shaking culture was performed.

【００４０】酵母エキス０．０２％を含むＭ９培地にフ
ェノール６００ｐｐｍ及びコーヒー酸１００ｐｐｍを加
え、その１ｍｌを１５ｍｌ容滅菌チューブに注入し、神
奈川県厚木市より採取した褐色森林土を４ｇ加えた。こ
れに、上記のように培養したＪ１株の菌液１０μｌを接
種した後、綿栓し、実際の土壌中の温度に近い１５℃で
静置培養し、フェノール濃度の測定を行った。To an M9 medium containing 0.02% yeast extract, 600 ppm of phenol and 100 ppm of caffeic acid were added, and 1 ml of the mixture was poured into a 15-ml sterilization tube, and 4 g of brown forest soil collected from Atsugi-shi, Kanagawa was added. After inoculating 10 μl of the bacterial solution of the J1 strain cultured as described above, cotton stoppers were applied, and the culture was allowed to stand at 15 ° C., which is close to the actual temperature in the soil, to measure the phenol concentration.

【００４１】フェノールの定量方法としては、チューブ
に５ｍｌの滅菌水を加え、１分間攪拌抽出した上澄み中
のフェノールに対し、アミノアンチピリンを用いたＪＩ
Ｓ法による検出法（JIS K0102-1993,28.1）で行った。As a method for quantifying phenol, 5 ml of sterilized water was added to a tube, and phenol in the supernatant extracted by stirring for 1 minute was subjected to JI using aminoantipyrine.
The detection was performed by the S method (JIS K0102-1993, 28.1).

【００４２】培養３日目のフェノールの残存率を表１に
示す。また、比較例１としてコーヒー酸を加えない場合
の結果も示す。Table 1 shows the residual ratio of phenol on the third day of the culture. Also, as Comparative Example 1, the results when no caffeic acid was added are shown.

【００４３】実施例２ Ｊ１株による土壌（褐色森林土）中でのＴＣＥ分解処理
に対するコーヒー酸の効果 ＴＣＥ５０ｐｐｍ、ＴＣＥ分解誘導物質としてフェノー
ル３００ｐｐｍ及び酵母エキス０．０２％を含むＭ９培
地１ｍｌを、１５ｍｌ容テフロン内蓋付きスクリューバ
イアル瓶に注入し、実施例１と同様の褐色森林土を４ｇ
加え、コーヒー酸を１００ｐｐｍの濃度になるように加
えた。さらに実施例１と同様にして培養したＪ１株の菌
液０．１ｍｌを接種し、ブチルゴム栓およびアルミシー
ルで密閉した。その後、ガス状のＴＣＥをシリンジで加
え、実際の土壌中の温度に近い１５℃で静置培養した。
ＴＣＥ量は気相部分のＴＣＥ濃度をガスクロマトグラフ
ィーで測定した。対照として、同様の実験系においてＪ
１株を加えない系でのＴＣＥ量の定量も併せて行い、対
照のＴＣＥ量に対する残存率を求めた。培養３日目のＴ
ＣＥの残存率を表１に示す。また、比較例２としてコー
ヒー酸を加えない場合の結果も示す。Example 2 Effect of caffeic acid on TCE degradation treatment in soil (brown forest soil) by strain J1 15 ml of M9 medium containing 50 ppm of TCE, 300 ppm of phenol as a TCE degradation inducer and 0.02% of yeast extract 4 g of brown forest soil as in Example 1 was poured into a screw vial with a Teflon inner lid.
In addition, caffeic acid was added to a concentration of 100 ppm. Further, 0.1 ml of the bacterial solution of the J1 strain cultured in the same manner as in Example 1 was inoculated, and sealed with a butyl rubber stopper and an aluminum seal. Then, gaseous TCE was added with a syringe, and the mixture was statically cultured at 15 ° C. which was close to the actual temperature in soil.
The TCE amount was determined by measuring the TCE concentration in the gas phase by gas chromatography. As a control, J
The amount of TCE in the system to which one strain was not added was also determined, and the residual ratio relative to the amount of TCE in the control was determined. T on day 3 of culture
Table 1 shows the residual ratio of CE. Also, as Comparative Example 2, the results when no caffeic acid was added are shown.

【００４４】実施例３-1〜３-3 Ｊ１株による土壌（褐色森林土）中でのＤＣＥ分解処理
に対するコーヒー酸の効果 培地中の分解対象物質ｃｉｓ−１，２−ジクロロエチレ
ン（ｃｉｓ−１，２−ＤＣＥ）、ｔｒａｎｓ−１，２−
ジクロロエチレン（ｔｒａｎｓ−１，２−ＤＣＥ）又は
１，１−ジクロロエチレン（１，１−ＤＣＥ）をそれぞ
れ３０ｐｐｍとした他は実施例２と同様の方法でＤＣＥ
の減少を測定した。培養３日目の各ＤＣＥの残存率を表
１に示す。また、比較例３-1〜３-3としてコーヒー酸を
加えない場合の結果も示す。Examples 3-1 to 3-3 Effect of caffeic acid on DCE decomposition treatment in soil (brown forest soil) by strain J1 Substance to be decomposed cis-1,2-dichloroethylene (cis-1,2) in the medium 2-DCE), trans-1,2-
DCE was prepared in the same manner as in Example 2 except that dichloroethylene (trans-1,2-DCE) or 1,1-dichloroethylene (1,1-DCE) was each 30 ppm.
Was measured. Table 1 shows the residual ratio of each DCE on the third day of culture. The results of Comparative Examples 3-1 to 3-3 when no caffeic acid was added are also shown.

【００４５】実施例４-1〜４-2 Ｊ１株による土壌（褐色森林土）中でのフェノール及び
ＴＣＥ分解処理に対するプロトカテキン酸の効果 酸化防止剤として、１００ｐｐｍコーヒー酸の代わりに
１００ｐｐｍプロトカテキン酸とした他は実施例１及び
２と同様にして、Ｊ１株による土壌中でのフェノール及
びＴＣＥ分解処理に対するプロトカテキン酸の効果を確
認した。培養３日目のフェノール及びＴＣＥのそれぞれ
残存率を表１に示す。また、比較例４-1〜４-2としてプ
ロトカテキン酸を加えない場合の結果も示す。Examples 4-1 to 4-2 Effect of protocatechinic acid on phenol and TCE degradation treatment in soil (brown forest soil) by strain J1 As an antioxidant, 100 ppm protocatechinic acid instead of 100 ppm caffeic acid In the same manner as in Examples 1 and 2, the effect of protocatechinic acid on phenol and TCE degradation treatment in soil by the J1 strain was confirmed. Table 1 shows the residual ratio of phenol and TCE on the third day of culture. Also, the results of Comparative Examples 4-1 and 4-2 when no protocatechinic acid was added are shown.

【００４６】実施例５-1〜５-2 Ｊ１株による土壌（褐色森林土）中でのフェノール及び
ＴＣＥ分解処理に対するビタミンＥの効果 酸化防止剤として、１００ｐｐｍコーヒー酸の代わりに
１００ｐｐｍビタミンＥとした他は実施例１及び２と同
様にして、Ｊ１株による土壌中でのフェノール及びＴＣ
Ｅ分解処理に対するビタミンＥの効果を確認した。培養
３日目のフェノール及びＴＣＥのそれぞれの残存率を表
１に示す。また、比較例５-1〜５-2としてビタミンＥを
加えない場合の結果も示す。Examples 5-1 to 5-2 Effect of Vitamin E on Decomposition of Phenol and TCE in Soil (Brown Forest Soil) by J1 Strain As an antioxidant, 100 ppm vitamin E was used instead of 100 ppm caffeic acid. Others were the same as in Examples 1 and 2, and phenol and TC
The effect of vitamin E on the E decomposition treatment was confirmed. Table 1 shows the residual ratios of phenol and TCE on the third day of culture. In addition, the results when no vitamin E was added are shown as Comparative Examples 5-1 and 5-2.

【００４７】[0047]

【表１】 [Table 1]

【００４８】実施例６ ＫＫ０１株による土壌（褐色森林土）中でのフェノール
分解処理に対するコーヒー酸の効果 酵母エキス０．２％を含むＭ９寒天培地上のＫＫ０１株
のコロニーを、５００ｍｌ容坂口フラスコ中のグルタミ
ン酸ナトリウム０．２％及び酵母エキス０．０２％を含
むＭ９地２００ｍｌに接種し、３０℃で１８時間振とう
培養を行った。Example 6 Effect of caffeic acid on phenol degradation treatment in soil (brown forest soil) by strain KK01 A colony of strain KK01 on M9 agar medium containing 0.2% yeast extract was placed in a 500 ml Sakaguchi flask. Was inoculated into 200 ml of M9 medium containing 0.2% of sodium glutamate and 0.02% of yeast extract, followed by shaking culture at 30 ° C. for 18 hours.

【００４９】フェノール８００ｐｐｍ及び１％グルタミ
ン酸ナトリウムを含むＭ９培地を調製し、コーヒー酸を
１００ｐｐｍの濃度になるように加えた。その１ｍｌを
１５ｍｌ容滅菌チューブに注入し、神奈川県厚木市より
採取した褐色森林土を４ｇ加えた。これに、上記のよう
に培養したＫＫ０１株の菌液１０μｌを接種した後、綿
栓し、２０℃で静置培養し、フェノール濃度の測定を行
った。An M9 medium containing 800 ppm of phenol and 1% sodium glutamate was prepared, and caffeic acid was added to a concentration of 100 ppm. 1 ml of the mixture was poured into a 15-ml sterile tube, and 4 g of brown forest soil collected from Atsugi-shi, Kanagawa was added. After 10 μl of the bacterial solution of the KK01 strain cultured as described above was inoculated thereto, the cotton stopper was inserted, and the culture was allowed to stand at 20 ° C., and the phenol concentration was measured.

【００５０】フェノールの定量方法としては、チューブ
に５ｍｌの滅菌水を加え、１分間攪拌抽出した上澄み中
のフェノールに対し、アミノアンチピリンを用いたＪＩ
Ｓ法による検出法（JIS K0102-1993,28.1）で行った。As a method for quantifying phenol, 5 ml of sterilized water was added to a tube, and phenol in the supernatant extracted by stirring for 1 minute was subjected to JI using aminoantipyrine.
The detection was performed by the S method (JIS K0102-1993, 28.1).

【００５１】培養２日目のフェノールの残存率を表２に
示す。また、比較例６としてコーヒー酸を加えない場合
の結果も示す。Table 2 shows the residual ratio of phenol on the second day of the culture. Also, as Comparative Example 6, the results when no caffeic acid was added are shown.

【００５２】実施例７-1〜７-4 ＫＫ０１株による土壌（褐色森林土）中でのクレゾール
分解処理に対するコーヒー酸の効果 分解対象物をｏ−クレゾール、ｍ−クレゾール、ｐ−ク
レゾール（各６００ｐｐｍ）及びトルエン（１００ｐｐ
ｍ）とした他は実施例６と同様にして、ＫＫ０１株によ
る高塩濃度培地条件における土壌中でのクレゾール及び
トルエン分解処理に対するコーヒー酸の効果を確認し
た。なお、トルエンの場合は内蓋にテフロンシートを施
し、ガスが漏れないように密栓した。Examples 7-1 to 7-4 Effect of caffeic acid on cresol degradation treatment in soil (brown forest soil) by KK01 strain o-cresol, m-cresol, p-cresol (600 ppm each) ) And toluene (100 pp)
Except for m), the effect of caffeic acid on cresol and toluene degradation treatment in soil under high salt concentration medium conditions by KK01 strain was confirmed in the same manner as in Example 6. In the case of toluene, a Teflon sheet was applied to the inner lid, and the inner lid was sealed to prevent gas leakage.

【００５３】各クレゾールの定量はｐ−ヒドラジノベン
ゼンスルホン酸を用いたＪＩＳ法による検出法（JIS K0
102-1993,28.2）で行い、トルエンの定量はへッドスペ
ースガスクロマトグラフィー法によって行った。培養２
日目の各クレゾール及びトルエンの残存率を表２に示
す。また、比較例７-1〜７-4としてコーヒー酸を加えな
い場合の結果も示す。The quantification of each cresol was determined by the detection method according to the JIS method using p-hydrazinobenzenesulfonic acid (JIS K0
102-1993, 28.2), and the quantitative determination of toluene was performed by a head space gas chromatography method. Culture 2
Table 2 shows the residual ratio of each cresol and toluene on the day. Also, the results when no caffeic acid was added are shown as Comparative Examples 7-1 to 7-4.

【００５４】実施例８ ＫＫ０１株による土壌（褐色森林土）中でのＴＣＥ分解
処理に対するコーヒー酸の効果 ＴＣＥ５０ｐｐｍ、ＴＣＥ分解誘導物質としてフェノー
ル３００ｐｐｍ、及び１％グルタミン酸ナトリウムを含
むＭ９培地１ｍｌを、１５ｍｌ容テフロン内蓋付きスク
リューバイアル瓶に注入し、実施例１と同様の褐色森林
立を４ｇ加え、コーヒー酸を１００ｐｐｍの濃度になる
ように加えた。これに、実施例６のように培養したＫＫ
０１株の菌液０．１ｍｌを接種した。ブチルゴム栓およ
びアルミシールで密閉した後、ガス状のＴＣＥをシリン
ジで加え、２０℃で静置培養した。ＴＣＥ量は気相部分
のＴＣＥ濃度をガスクロマトグラフィーで測定した。対
照として、同様の実験系においてＫＫ０１株を加えない
系でのＴＣＥ量の定量も併せて行い、対照のＴＣＥ量に
対する残存率を求めた。培養２日目のＴＣＥの残存率を
表２に示す。また、比較例８としてコーヒー酸を加えな
い場合の結果も示す。Example 8 Effect of Caffeic Acid on TCE Decomposition Treatment in Soil (Brown Forest Soil) by Strain KK01 15 ml of M9 medium containing 50 ppm of TCE, 300 ppm of phenol as a TCE decomposition inducer, and 1% sodium glutamate The mixture was poured into a screw vial with a Teflon inner lid, 4 g of the same brown forest as in Example 1 was added, and caffeic acid was added to a concentration of 100 ppm. To this, KK cultured as in Example 6
0.1 ml of the bacterial solution of the 01 strain was inoculated. After sealing with a butyl rubber stopper and an aluminum seal, gaseous TCE was added with a syringe, and the mixture was allowed to stand at 20 ° C. and cultured. The TCE amount was determined by measuring the TCE concentration in the gas phase by gas chromatography. As a control, the amount of TCE in a similar experimental system without the KK01 strain was also determined, and the residual ratio of the control to the TCE amount was determined. Table 2 shows the residual ratio of TCE on the second day of culture. In addition, as Comparative Example 8, the results when caffeic acid was not added are also shown.

【００５５】実施例９-1〜９-2 ＫＫ０１株による土壌（褐色森林土）中でのフェノール
及びＴＣＥ分解処理に対するプロトカテキン酸の効果 酸化防止剤として、１００ｐｐｍコーヒー酸の代わりに
１００ｐｐｍプロトカテキン酸とした他は実施例６及び
８と同様にして、ＫＫ０１株による土壌中でのフェノー
ル及びＴＣＥ分解処理に対するプロトカテキン酸の効果
を確認した。培養２日目のフェノール及びＴＣＥのそれ
ぞれの残存率を表２に示す。また、比較例９-1〜９-2と
してプロトカテキン酸を加えない場合の結果も示す。Examples 9-1 to 9-2 Effect of protocatechinic acid on phenol and TCE degradation treatment in soil (brown forest soil) by strain KK01 100 ppm protocatechinic acid instead of 100 ppm caffeic acid as antioxidant In the same manner as in Examples 6 and 8, the effect of protocatechinic acid on the degradation of phenol and TCE in soil by the KK01 strain was confirmed. Table 2 shows the residual ratios of phenol and TCE on the second day of culture. In addition, the results when no protocatechinic acid is added are shown as Comparative Examples 9-1 and 9-2.

【００５６】実施例１０-1〜１０-2 ＫＫ０１株による土壌（褐色森林土）中でのフェノール
及びＴＣＥ分解処理に対するビタミンＥの効果 酸化防止剤として、１００ｐｐｍコーヒー酸の代わりに
１００ｐｐｍビタミンＥとした他は実施例６及び８と同
様にして、ＫＫ０ｌ株による土壌中でのフェノール及び
ＴＣＥ分解処理に対するビタミンＥの効果を確認した。
培養２日目のフェノール及びＴＣＥのそれぞれの残存率
を表２に示す。また、比較例１０-1〜１０-2としてビタ
ミンＥを加えない場合の結果も示す。Examples 10-1 to 10-2 Effect of Vitamin E on Decomposition of Phenol and TCE in Soil (Brown Forest Soil) by KK01 Strain 100 ppm Vitamin E was used instead of 100 ppm caffeic acid as an antioxidant. Other than that, it carried out similarly to Example 6 and 8, and confirmed the effect of vitamin E to the phenol and TCE decomposition | disassembly process in soil by KK01 strain.
Table 2 shows the residual ratios of phenol and TCE on the second day of culture. In addition, the results when no vitamin E was added are shown as Comparative Examples 10-1 to 10-2.

【００５７】[0057]

【表２】 [Table 2]

【００５８】実施例１１-1〜１１-4 ＪＭ１株による土壌（細砂土）中でのＴＣＥ及びＤＣＥ
分解処理に対するコーヒー酸の効果 リンゴ酸ナトリウム１．０％を含むＭ９寒天培地上のＪ
Ｍ１株のコロニーを、５００ｍｌ容坂口フラスコ中の同
組成の液体培地２００ｍｌに接種し、２２℃で２０時間
振とう培養を行った。Examples 11-1 to 11-4 TCE and DCE in soil (fine sand) by JM1 strain
Effect of caffeic acid on degradation treatment J on M9 agar containing 1.0% sodium malate
The M1 strain colony was inoculated into 200 ml of a liquid medium of the same composition in a 500 ml Sakaguchi flask, and cultured with shaking at 22 ° C. for 20 hours.

【００５９】分解対象物としてＴＣＥ（５０ｐｐｍ）、
ｃｉｓ−１，２−ＤＣＥ、ｔｍｎｓ−１，２−ＤＣＥ又
は１，１−ＤＣＥ（各３０ｐｐｍ）と、２．０％リンゴ
酸ナトリウムを含むＭ９培地１ｍｌを１５ｍｌ容テフロ
ン内蓋付きスクリューバイアル瓶に注入し、佐原の通し
砂を５ｇ加え、コーヒー酸を１００ｐｐｍの濃度になる
ように加えた。これに、上記のように培養したＪＭ１株
の菌液０．１ｍｌを接種した。ブチルゴム栓およびアル
ミシールで密閉した後、ガス状のＴＣＥをシリンジで加
え、１５℃で静置培養した。TCE (50 ppm) as a substance to be decomposed,
1 ml of M9 medium containing cis-1,2-DCE, tmns-1,2-DCE or 1,1-DCE (30 ppm for each) and 2.0% sodium malate is placed in a 15 ml screw vial with a Teflon inner lid. 5 g of Sawara sand was added, and caffeic acid was added to a concentration of 100 ppm. This was inoculated with 0.1 ml of the bacterial solution of the JM1 strain cultured as described above. After sealing with a butyl rubber stopper and an aluminum seal, gaseous TCE was added with a syringe, and the mixture was cultured at 15 ° C. by standing still.

【００６０】ＴＣＥ及びＤＣＥ量は、気相部分のＴＣＥ
及びＤＣＥ濃度をガスクロマトグラフィーで測定した。
対照として、同様の実験系においてＪＭ１株を加えない
系でのＴＣＥ及びＤＣＥ量の定量も併せて行い、それぞ
れ対照のＴＣＥ及びＤＣＥ量に対する残存率を求めた。
培養３日目のＴＣＥ及び各ＤＣＥの残存率を表３に示
す。また、比較例１１-1〜１１-4としてコーヒー酸を加
えない場合の結果も示す。The amount of TCE and DCE is determined by
And DCE concentration were measured by gas chromatography.
As a control, TCE and DCE levels were also determined in the same experimental system without the addition of the JM1 strain, and the residual ratio of the control relative to the TCE and DCE levels was determined.
Table 3 shows the TCE and the residual ratio of each DCE on the third day of culture. Also, the results when no caffeic acid is added are shown as Comparative Examples 11-1 to 11-4.

【００６１】実施例１２-1〜１２-4 ＪＭ１株による土壌中（細砂土）でのＴＣＥ及びＤＣＥ
分解処理に対するプロトカテキン酸の効果 酸化防止剤として、１００ｐｐｍコーヒー酸の代わりに
１００ｐｐｍプロトカテキン酸とした他は実施例１１と
同様にして、ＪＭ１株による土壌中でのＴＣＥ及びＤＣ
Ｅ分解処理に対するプロトカテキン酸の効果を確認し
た。培養３日目の残存率を表３に示す。また、比較例１
２-1〜１２-4としてコーヒー酸を加えない場合の結果も
示す。Examples 12-1 to 12-4 TCE and DCE in soil (fine sand) by JM1 strain
Effect of Protocatechinic Acid on Decomposition Treatment In the same manner as in Example 11 except that 100 ppm of protocatechinic acid was used instead of 100 ppm of caffeic acid as an antioxidant, TCE and DC in soil by JM1 strain were used.
The effect of protocatechinic acid on the E decomposition treatment was confirmed. Table 3 shows the survival rate on the third day of the culture. Comparative Example 1
The results in the case where caffeic acid is not added are shown as 2-1 to 12-4.

【００６２】実施例１３-1〜１３-4 ＪＭ１株による土壌（細砂土）中でのＴＣＥ及びＤＣＥ
分解処理に対するビタミンＥの効果 酸化防止剤として、１００ｐｐｍコーヒー酸のかわりに
１００ｐｐｍビタミンＥとした他は実施例１１と同様に
して、ＪＭ１株による土壌中でのＴＣＥ及びＤＣＥ分解
処理に対するビタミンＥの効果を確認した。培養３日目
の残存率を表３に示す。また、比較例１３-1〜１３-4と
してコーヒー酸を加えない場合の結果も示す。Examples 13-1 to 13-4 TCE and DCE in soil (fine sand) by JM1 strain
Effect of Vitamin E on Decomposition Treatment Effect of Vitamin E on decomposition treatment of TCE and DCE in soil by JM1 strain in the same manner as in Example 11 except that 100 ppm vitamin E was used instead of 100 ppm caffeic acid as an antioxidant. It was confirmed. Table 3 shows the survival rate on the third day of the culture. In addition, the results when no caffeic acid was added are shown as Comparative Examples 13-1 to 13-4.

【００６３】[0063]

【表３】 [Table 3]

【００６４】実施例１４〜１７ その他の分解菌による土壌（ローム土）中でのＴＣＥ分
解処理に対するコーヒー酸の効果 分解菌として、いずれも芳香族化合物資化性のＴＣＥ分
解菌であるＴＬ１株（実施例１４）、ＴＬ２株（実施例
１５）、ＫＢ１株（実施例１６）、及びＫＢ２株（実施
例１７）を用い、前培養として、酵母エキス０．２％を
含むＭ９寒天培地上のコロニーを５００ｍｌ容坂口フラ
スコ中の同組成の液体培地２００ｍｌに接種し、２２℃
で３６時間振とう培養を行った。Examples 14 to 17 Effect of caffeic acid on TCE decomposition treatment in soil (loam soil) by other decomposing bacteria As the decomposing bacteria, TL1 strain (which is a TCE degrading bacterium capable of assimilating aromatic compounds) was used. Example 14) Using TL2 strain (Example 15), KB1 strain (Example 16) and KB2 strain (Example 17) as preculture, colonies on M9 agar medium containing 0.2% yeast extract Was inoculated into 200 ml of a liquid medium of the same composition in a 500 ml Sakaguchi flask,
For 36 hours.

【００６５】次に、分解対象物としてＴＣＥ（５０ｐｐ
ｍ）と、ＴＣＥ分解誘導物質としてフェノール２００ｐ
ｐｍを含む０．２％酵母エキス含有Ｍ９培地１ｍｌを１
５ｍｌ容テフロン内蓋付きスクリューバイアル瓶に注入
し、茨城県より採取したローム土を４ｇ加え、コーヒー
酸を１００ｐｐｍの濃度になるように加えた。これに上
記のように培養した菌液０．１ｍｌを接種した。ブチル
ゴム栓およびアルミシールで密閉した後、ガス状のＴＣ
Ｅをシリンジで加え、２０℃で静置培養した。Next, TCE (50 pp) was used as the decomposition target.
m) and phenol 200p as a TCE degradation inducer
1 ml of M9 medium containing 0.2% yeast extract containing pm
The mixture was poured into a 5 ml screw vial with a Teflon inner lid, 4 g of loam soil collected from Ibaraki Prefecture was added, and caffeic acid was added to a concentration of 100 ppm. This was inoculated with 0.1 ml of the bacterial solution cultured as described above. After sealing with butyl rubber stopper and aluminum seal, gaseous TC
E was added with a syringe and cultured at 20 ° C. by standing.

【００６６】ＴＣＥ量は気相部分のＴＣＥ濃度をガスク
ロマトグラフィーで測定した。対照として、同様の実験
系において株を加えない系でのＴＣＥ量の定量も併せて
行い、対照のＴＣＥ量に対する残存率を求めた。培養３
日目の残存率を表４に示す。また、比較例としてコーヒ
ー酸を加えない場合の結果も示す。The TCE amount was determined by measuring the TCE concentration in the gas phase by gas chromatography. As a control, the quantification of the amount of TCE in the same experimental system to which no strain was added was also performed, and the residual ratio of the control to the amount of TCE was determined. Culture 3
Table 4 shows the survival rate on the day. Also, as a comparative example, the results when no caffeic acid is added are shown.

【００６７】実施例１８〜２１ その他の分解菌による土壌（ローム土）中でのＴＣＥ分
解処理に対するプロトカテキン酸の効果 酸化防止剤として、１００ｐｐｍコーヒー酸の代わりに
１００ｐｐｍプロトカテキン酸とした他は実施例１４と
同様にして、各分解菌による高塩濃度培地条件における
土壌中でのＴＣＥ分解処理に対するプロトカテキン酸の
効果を確認した。培養３日目の残存率を表４に示す。ま
た、比較例としてプロトカテキン酸を加えない場合の結
果も示す。Examples 18 to 21 Effect of Protocatechinic Acid on TCE Decomposition Treatment in Soil (Loam Soil) by Other Decomposing Bacteria Except that 100 ppm protocatechinic acid was used instead of 100 ppm caffeic acid as an antioxidant. In the same manner as in Example 14, the effect of protocatechinic acid on the TCE degradation treatment in soil under the conditions of a high salt concentration medium by each degrading bacterium was confirmed. Table 4 shows the survival rate on the third day of the culture. In addition, the results when no protocatechinic acid was added are also shown as comparative examples.

【００６８】実施例２２〜２５ その他の分解菌による土壌（ローム土）中でのＴＣＥ分
解処理に対するビタミンＥの効果 酸化防止剤として、１００ｐｐｍコーヒー酸の代わりに
１００ｐｐｍビタミンＥとした他は実施例１４と同様に
して、各分解菌による高塩濃度培地条件における土壌中
でのＴＣＥ分解処理に対するビタミンＥの効果を確認し
た。培養３日目の残存率を表４に示す。また、比較例と
してビタミンＥを加えない場合の結果も示す。Examples 22 to 25 Effect of Vitamin E on TCE Decomposition Treatment in Soil (Loam Soil) by Other Decomposing Bacteria Example 14 except that 100 ppm vitamin E was used instead of 100 ppm caffeic acid as an antioxidant. In the same manner as described above, the effect of vitamin E on the TCE degradation treatment in soil under the conditions of a high salt concentration medium by each degrading bacterium was confirmed. Table 4 shows the survival rate on the third day of the culture. In addition, the results when vitamin E is not added are also shown as comparative examples.

【００６９】[0069]

【表４】 [Table 4]

【００７０】[0070]

【発明の効果】以上の説明から明らかなように本発明に
よれば、芳香族化合物及び／又は有機塩素化合物により
汚染された土壌の効果的な生物的分解修復処理が可能と
なる。As is apparent from the above description, according to the present invention, it is possible to carry out an effective biodegradation treatment of soil contaminated with an aromatic compound and / or an organic chlorine compound.

───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (51)Int.Cl.⁶ 識別記号 ＦＩ Ｃ１２Ｎ 1/00 Ｃ１２Ｎ 1/20 Ｄ 1/20 Ｆ Ｂ０９Ｂ 3/00 Ｅ //(Ｃ１２Ｎ 1/20 Ｃ１２Ｒ 1:38） (Ｃ１２Ｎ 1/20 Ｃ１２Ｒ 1:05） (Ｃ１２Ｎ 1/20 Ｃ１２Ｒ 1:63） ──────────────────────────────────────────────────続 き Continued on the front page (51) Int.Cl. ⁶ Identification symbol FI C12N 1/00 C12N 1/20 D 1/20 F B09B 3/00 E // (C12N 1/20 C12R 1:38) (C12N 1/20 C12R 1:05) (C12N 1/20 C12R 1:63)

Claims (37)

【特許請求の範囲】[Claims] 【請求項１】 微生物とともに酸化防止剤を用いて有機
塩素化合物及び／又は芳香族化合物を分解することを特
徴とする微生物による分解方法。1. A method for decomposing microorganisms, comprising decomposing an organic chlorine compound and / or an aromatic compound by using an antioxidant together with the microorganism. 【請求項２】 微生物が、酸化酵素であるオキシゲナー
ゼを発現する微生物である請求項１記載の微生物による
分解方法。2. The method according to claim 1, wherein the microorganism is a microorganism that expresses an oxygenase that is an oxidase. 【請求項３】 微生物が、シュードモナス属、アシネト
バクター属、アルカリゲネス属、ビブリオ属、ノカルジ
ア属、バチルス属、ラクトバチルス属、アクロモバクタ
ー属、アルスロバクター属、ミクロコッカス属、マイコ
バクテリウム属、メチロシナス属、メチロモナス属、ベ
ルキア属、メチロシスチス属、ニトロゾモナス属、サッ
カロミセス属、カンジダ属、トルロプシス属、モラクセ
ラ属に属する微生物のうち少なくとも１種である請求項
２記載の微生物による分解方法。3. The microorganism is a genus Pseudomonas, Acinetobacter, Alcaligenes, Vibrio, Nocardia, Bacillus, Lactobacillus, Achromobacter, Arthrobacter, Micrococcus, Mycobacterium, Methylosinus The method according to claim 2, wherein the microorganism is at least one of microorganisms belonging to the genus, Methylomonas, Berchia, Methylostysis, Nitrozomonas, Saccharomyces, Candida, Torulopsis, and Moraxella. 【請求項４】 微生物がＪ１株ＦＥＲＭ ＢＰ−５１０
２である請求項２記載の微生物による分解方法。4. The microorganism is J1 strain FERM BP-510.
3. The method for decomposing microorganisms according to claim 2. 【請求項５】 微生物がＪＭ１株ＦＥＲＭ ＢＰ−５３
５２である請求項２記載の微生物による分解方法。5. The method according to claim 5, wherein the microorganism is JM1 strain FERM BP-53.
The method for decomposing microorganisms according to claim 2, which is 52. 【請求項６】 微生物がシュードモナス・スピーシズで
ある請求項２記載の微生物による分解方法。6. The method according to claim 2, wherein the microorganism is Pseudomonas sp. 【請求項７】 微生物がシュードモナス・スピーシズＴ
Ｌ１株ＦＥＲＭ Ｐ−１４７２６である請求項２記載の
微生物による分解方法。7. The microorganism is Pseudomonas sp.
The method according to claim 2, which is L1 strain FERM P-14726. 【請求項８】 微生物がシュードモナス アルカリゲネ
スである請求項２記載の微生物による分解方法。8. The method according to claim 2, wherein the microorganism is Pseudomonas alkaligenes. 【請求項９】 微生物がシュードモナス アルカリゲネ
スＫＢ２株ＦＥＲＭＢＰ−５３５４である請求項２記載
の微生物による分解方法。9. The method according to claim 2, wherein the microorganism is Pseudomonas alkaligenes KB2 strain FERMBP-5354. 【請求項１０】 微生物がシュードモナス セパシアで
ある請求項２記載の微生物による分解方法。10. The method according to claim 2, wherein the microorganism is Pseudomonas cepacia. 【請求項１１】 微生物がジュードモナス セパシアＫ
Ｋ０１株ＦＥＲＭＢＰ−４２３５である請求項２記載の
微生物による分解方法。11. The method according to claim 11, wherein the microorganism is Judemonas cepacia K.
The method according to claim 2, wherein the strain is K01 strain FERMBP-4235. 【請求項１２】 微生物がアルカリゲネス・スピーシズ
である請求項２記載の微生物による分解方法。12. The method according to claim 2, wherein the microorganism is Alcaligenes species. 【請求項１３】 微生物がアルカリゲネス・スピーシズ
ＴＬ２株ＦＥＲＭＰ−１４６４２である請求項２記載の
微生物による分解方法。13. The method according to claim 2, wherein the microorganism is Alcaligenes sp. TL2 strain FERMP-14642. 【請求項１４】 微生物がビブリオ・スピーシズである
請求項２記載の微生物による分解方法。14. The method according to claim 2, wherein the microorganism is Vibrio species. 【請求項１５】 微生物がビブリオ・スピーシズＫＢ１
株ＦＥＲＭ Ｐ−１４６４３である請求項２記載の微生
物による分解方法。15. The microorganism is Vibrio species KB1.
The method according to claim 2, which is strain FERM P-14643. 【請求項１６】 微生物とともに用いる酸化防止剤が、
コーヒー酸、ビタミンＥ、ビタミンＣ、ユビキノール、
尿酸、２−ヒドロキシエストラジオール、ビリルビン、
３−ヒドロキシフラボン、クロロゲン酸、カテキン、プ
ロトカテキン酸、ピロガール、没食子酸の中から選ばれ
た１以上の化合物である請求項１〜１５のいずれか１項
に記載の微生物による分解方法。16. The antioxidant used with a microorganism,
Coffee acid, vitamin E, vitamin C, ubiquinol,
Uric acid, 2-hydroxyestradiol, bilirubin,
The method according to any one of claims 1 to 15, wherein the compound is at least one compound selected from 3-hydroxyflavone, chlorogenic acid, catechin, protocatechinic acid, pyrogal, and gallic acid. 【請求項１７】 酸化防止剤の濃度が１〜１０００ｐｐ
ｍの範囲である請求項１〜１６のいずれか１項に記載の
微生物による分解方法。17. An antioxidant concentration of 1 to 1000 pp
The method for decomposing microorganisms according to any one of claims 1 to 16, which is in the range of m. 【請求項１８】 有機塩素化合物及び／又は芳香族化合
物で汚染された媒体に、前記微生物とともに酸化防止剤
を接触させて、有機塩素化合物及び／又は芳香族化合物
を分解することを特徴とする請求項１〜ｌ７のいずれか
１項に記載の微生物による分解方法。18. The organic chlorine compound and / or aromatic compound is decomposed by contacting an antioxidant together with the microorganism to a medium contaminated with the organic chlorine compound and / or aromatic compound. Item 18. The method for decomposing microorganisms according to any one of Items 1 to 17. 【請求項１９】 請求項１〜１８のいずれか１項に記載
の微生物による分解方法を用いた環境修復方法。19. An environmental restoration method using the method for decomposing microorganisms according to any one of claims 1 to 18. 【請求項２０】 修復すべき環境が、有機塩素化合物及
び／又は芳香族化合物で汚染された媒体である請求項１
９記載の環境修復方法。20. The environment to be repaired is a medium contaminated with organochlorine compounds and / or aromatic compounds.
9. The environmental restoration method according to item 9. 【請求項２１】 有機塩素化合物及び／又は芳香族化合
物で汚染された媒体に、前記微生物とともに酸化防止剤
を接触させて、有機塩素化合物及び／又は芳香族化合物
を分解することを特徴とする請求項２０記載の環境修復
方法。21. An organic chlorine compound and / or aromatic compound is decomposed by bringing an antioxidant together with the microorganism into contact with a medium contaminated with the organic chlorine compound and / or aromatic compound. Item 21. The environmental restoration method according to Item 20, 【請求項２２】 汚染媒体が水性媒体である請求項２１
記載の環境修復方法。22. The contaminated medium is an aqueous medium.
Environmental restoration method described. 【請求項２３】 微生物および酸化防止剤を担持させた
担体に、有機塩素化合物及び／又は芳香族化合物を含む
水性媒体を接触させることを特徴とする請求項２２記載
の環境修復方法。23. The environmental restoration method according to claim 22, wherein an aqueous medium containing an organic chlorine compound and / or an aromatic compound is brought into contact with a carrier carrying the microorganism and an antioxidant. 【請求項２４】 前記接触を、微生物および酸化防止剤
を担持させた担体を容器に収容し、その容器の一方から
有機塩素化合物及び／又は芳香族化合物を含む水性媒体
を導入し、他方から排出させることにより行う請求項２
３記載の環境修復方法。24. The contacting is performed by placing a carrier carrying microorganisms and an antioxidant in a container, introducing an aqueous medium containing an organic chlorine compound and / or an aromatic compound from one of the containers, and discharging the aqueous medium from the other. Claim 2.
3. The environmental restoration method according to 3. 【請求項２５】 汚染媒体が土壌である請求項２１記載
の環境修復方法。25. The environmental restoration method according to claim 21, wherein the contaminated medium is soil. 【請求項２６】 微生物および酸化防止剤を含む水性媒
体を汚染土壌中に導入し、栄養素及び／又は酸素を付与
することにより該微生物を該土壌中で増殖させることを
特徴とする請求項２５記載の環境修復方法。26. The method according to claim 25, wherein an aqueous medium containing a microorganism and an antioxidant is introduced into the contaminated soil, and the microorganism is grown in the soil by providing nutrients and / or oxygen. Environmental restoration method. 【請求項２７】 微生物および酸化防止剤を含む水性媒
体の土壌中への導入は、土壌に設けた注入井より圧力に
よって行う請求項２６記載の環境修復方法。27. The environmental restoration method according to claim 26, wherein the introduction of the aqueous medium containing the microorganisms and the antioxidant into the soil is performed by pressure from an injection well provided in the soil. 【請求項２８】 微生物および酸化防止剤を含む水性媒
体中に、有機塩素化合物及び／又は芳香族化合物を含む
土壌を導入することを特徴とする請求項２５記載の環境
修復方法。28. The method according to claim 25, wherein a soil containing an organochlorine compound and / or an aromatic compound is introduced into an aqueous medium containing a microorganism and an antioxidant. 【請求項２９】 微生物および酸化防止剤を担持させた
担体に、有機塩素化合物及び／又は芳香族化合物を含む
土壌を接触させることを特徴とする請求項２５記載の環
境修復方法。29. The environmental remediation method according to claim 25, wherein a soil containing an organochlorine compound and / or an aromatic compound is brought into contact with a carrier carrying a microorganism and an antioxidant. 【請求項３０】 汚染媒体が空気である請求項２１記載
の環境修復方法。30. The method of claim 21, wherein the contaminated medium is air. 【請求項３１】 微生物および酸化防止剤を含む水性媒
体中に、有機塩素化合物及び／又は芳香族化合物を含む
空気を導入することを特徴とする請求項３０記載の環境
修復方法。31. The environmental restoration method according to claim 30, wherein air containing an organic chlorine compound and / or an aromatic compound is introduced into an aqueous medium containing a microorganism and an antioxidant. 【請求項３２】 微生物および酸化防止剤を担持させた
担体に、有機塩素化合物及び／又は芳香族化合物を含む
空気を接触させることを特徴とする請求項３０記載の環
境修復方法。32. The environmental remediation method according to claim 30, wherein air containing an organic chlorine compound and / or an aromatic compound is brought into contact with the carrier carrying the microorganism and the antioxidant. 【請求項３３】 前記接触を、微生物および酸化防止剤
を担持させた担体を容器に収容し、その容器の一方から
有機塩素化合物及び／又は芳香族化合物を含む空気を導
入し、他方から排出させることにより行う請求項３２記
載の環境修復方法。33. In the contact, a carrier supporting microorganisms and an antioxidant is contained in a container, air containing an organic chlorine compound and / or an aromatic compound is introduced from one of the containers, and discharged from the other. 33. The environmental restoration method according to claim 32, wherein the method is performed. 【請求項３４】 有機塩素化合物が、トリクロロエチレ
ン、ジクロロエチレンのいずれか１以上である請求項１
〜１８のいずれか１項に記載の微生物による分解方法。34. The organic chlorine compound is at least one of trichloroethylene and dichloroethylene.
19. The method for decomposing microorganisms according to any one of items 18 to 18. 【請求項３５】 有機塩素化合物が、トリクロロエチレ
ン、ジクロロエチレンのいずれか１以上である請求項１
９〜３３のいずれか１項に記載の環境修復方法。35. The organic chlorine compound is at least one of trichloroethylene and dichloroethylene.
The environmental restoration method according to any one of items 9 to 33. 【請求項３６】 芳香族化合物が、フェノール、トルエ
ン、クレゾールのいずれか１以上である請求項１〜１８
のいずれか１項に記載の微生物による分解方法。36. The aromatic compound is at least one of phenol, toluene and cresol.
The method for decomposing microorganisms according to any one of the above. 【請求項３７】 芳香族化合物が、フェノール、トルエ
ン、クレゾールのいずれか１以上である請求項１９〜３
３のいずれか１項に記載の環境修復方法。37. The aromatic compound is at least one of phenol, toluene and cresol.
4. The method for repairing an environment according to any one of items 3 to 3.