JPH10273447A

JPH10273447A - 徐放性マイクロスフィア、その製造法および用途

Info

Publication number: JPH10273447A
Application number: JP10014698A
Authority: JP
Inventors: Shigeru Kamei; 茂亀井; Atsushi Ota; 敦太田; Akira Saikawa; 彰犀川; Yasutaka Igari; 康孝猪狩
Original assignee: Takeda Chemical Industries Ltd
Current assignee: Takeda Pharmaceutical Co Ltd
Priority date: 1997-01-29
Filing date: 1998-01-28
Publication date: 1998-10-13

Abstract

(57)【要約】【課題】生理活性ペプチドを高含量で含有し、かつその
放出速度を制御できる徐放性製剤を提供する。【解決手段】生理活性ペプチドとパモ酸またはその塩と
を生体内分解性ポリマーで乳化混合することを特徴とす
る徐放性マイクロスフィアの製造法、粒径約０．０１〜
約１０μｍの生理活性ペプチドのパモ酸塩および生体内
分解性ポリマーを含有する徐放性マイクロスフィア、生
理活性ペプチド，パモ酸またはその塩および生体内分解
性ポリマーの三者から成る複合体または塩を含有する徐
放性マイクロスフィア、およびこれらマイクロスフィア
を含有する徐放性製剤。

Description

【発明の詳細な説明】

【０００１】

【発明の属する技術分野】本発明は、生理活性ペプチド
を含有する徐放性マイクロスフィア、該マイクロスフィ
アを含有する徐放性製剤およびその製造法に関する。

【０００２】

【従来の技術】生理活性ペプチドの徐放性マイクロスフ
ィア化技術については、従来より種々の方法が報告され
ている。例えば、特開平７−９７３３４号公報にはＬＨ
−ＲＨアンタゴニスト活性を有する生理活性ペプチドま
たはその塩と末端に遊離のカルボキシル基を有する生体
内分解性ポリマーとからなる徐放性製剤およびその製造
法が開示されている。特開平１−１２１２２２号および
特開平３−６６６２５号には、パモ酸、タンニン酸、ス
テアリン酸等の非毒性の水不溶性酸を用いて変換したＬ
Ｈ−ＲＨの誘導体等の水溶性ペプチドの水不溶性付加塩
等とポリラクチド、乳酸とグリコール酸とのコポリマー
のようなポリマーとからなる放出制御薬剤組成物および
その製造法が記載されており、２５ｍｇ／ｌ以下の蒸留
水中への溶解度を水不溶性と定義して水不溶性とするこ
とにより持続性が向上することが示唆されている。特開
平３−６８５１１号には、ポリマー基剤を薬物化合物が
溶解しない溶媒に溶解した溶液中に、薬物溶液を添加分
散させてミクロ粒剤を形成させ、これに水中油型乳濁液
を添加することにより、ミクロ粒剤を硬化させる徐放性
ミクロ粒剤の製造法およびこれにより得られるソマトス
タチンやその誘導体のミクロ粒剤を記載している。さら
に、該薬剤中でソマトスタチン誘導体であるオクトレチ
ドの安定な塩としてパモ酸塩を用いることを示唆してい
る。特開平５−２２１８５５号公報には、予め水溶性ペ
プチドを水不溶性ペプチドに変換した後、Ｏ／Ｗ型乳化
物を調製し、水溶液中の過剰のポリマー材料用有機溶媒
を濃縮することにより、該ペプチドを封入した生体内分
解性ポリマー材料からなるマイクロスフィアの形で得ら
れるペプチドの徐放制御医薬組成物の製造方法が開示さ
れている。さらには、特開平６−３４０５４３号公報に
はラクチド／グリコリドモル比が１００：０〜４０：６
０、分子量が１０．０００〜２００，０００、分散度が
１．７〜３．０であるポリラクチドのマトリックス中
に、ペプチドのエンボン酸（パモ酸）またはアスコルビ
ン酸塩を活性成分として含む徐放性製剤が記載されてお
り、エンボン酸やアスコルビン酸がポリラクチド類中の
ペプチドの安定化剤として有用であると示唆している。
ＷＯ９５／１５７６７号公報にはセトロレリックス（ｃ
ｅｔｒｏｒｅｌｉｘ）（ＬＨ−ＲＨアンタゴニスト）の
エンボン酸塩（パモ酸塩）（粒径が主に５μｍ〜２００
μｍ）およびその製造法が記載されており、この塩での
ＬＨ−ＲＨアンタゴニスト作用の持続時間は、この塩を
生体内分解性ポリマーに封入させた製剤のそれと変わり
ないことが記述されている。このように、医薬品組成物
中の生理活性ペプチドの安定化あるいは放出性を制御す
る目的で形成させた生理活性ペプチドのパモ酸塩を医薬
品組成物中に含有させることは知られていたが、生体内
分解性ポリマー共存下で生理活性ペプチドの微細なパモ
酸塩を形成させた組成物あるいは生理活性ペプチド、パ
モ酸および生体内分解性ポリマーの三者から成る塩およ
びこれを含有する組成物については全く報告されていな
い。また、これらの文献記載の方法で得られる徐放性製
剤は、臨床適用を考慮した場合に、十分に満足できるも
のではない。

【０００３】

【発明が解決しようとする課題】生理活性ペプチドを高
含量で含有し、かつその放出速度を制御できる徐放性製
剤およびその製造法を提供する。

【０００４】

【課題を解決するための手段】上記の問題点を解決する
ために鋭意研究した結果、生理活性ペプチドとパモ酸ま
たはその塩とを生体内分解性ポリマーで乳化混合するこ
とによって、生理活性ペプチドを高含量で含有し、その
放出速度を制御できる徐放性マイクロスフィアを製造で
きることを見いだした。より具体的には、従来のように
予め生理活性ペプチドのパモ酸塩を製造する方法とは異
なり、パモ酸と塩を形成し得る塩基性基を有する生理活
性ペプチド、パモ酸またはその塩および生体内分解性ポ
リマーを分子分散状態あるいはそれに近似の溶液状態で
乳化混合することによって粒径約０．０１〜約１０μｍ
程度の生理活性ペプチドの微細なパモ酸塩を溶媒を除去
するまでに形成させ、これを含有するマイクロスフィア
を製造した場合、高含量で生理活性ペプチドを取り込め
ることを見いだした。また、該塩基性基を２個以上有す
るペプチドの場合には、生理活性ペプチドにパモ酸と遊
離のカルボキシル基を有する生体内分解性ポリマーの両
者に対しての複合体または塩を形成させ、これを含有す
るマイクロスフィアを調製した場合には、予め調製した
生理活性ペプチドのパモ酸塩を含有させる従来法でのマ
イクロスフィアとは異なったパモ酸／生理活性ペプチド
比率となり、同時に生体内分解性ポリマーの分解速度に
よって生理活性ペプチドの放出速度を制御可能であるこ
とを見いだした。本発明者らは、これらの知見に基づい
て、さらに検討を重ねた結果、本発明を完成するに至っ
た。

【０００５】すなわち、本発明は、（１）生理活性ペプ
チドまたはその塩（ただし、パモ酸塩を除く）とパモ酸
またはそのアルカリ金属塩とを生体内分解性ポリマーで
乳化混合することを特徴とする徐放性マイクロスフィア
の製造法、（２）生体内分解性ポリマーの有機溶媒溶液
中で生理活性ペプチドまたはそのアルカリ金属塩（ただ
し、パモ酸塩を除く）の溶液とパモ酸またはその塩の溶
液を乳化混合した後、溶媒を除去することを特徴とする
第（１）項記載の徐放性マイクロスフィアの製造法、
（３）生理活性ペプチドまたはその塩（ただし、パモ酸
塩を除く）、生体内分解性ポリマーおよびパモ酸または
そのアルカリ金属塩を有機溶媒に混合溶解した後、溶媒
を除去することを特徴とする第（１）項記載の製造法、
（４）生理活性ペプチドまたはその塩（ただし、パモ酸
塩を除く）および生体内分解性ポリマーの有機溶媒溶液
とパモ酸またはそのアルカリ金属塩の溶液とを乳化混合
した後、溶媒を除去することを特徴とする第（１）項記
載の製造法、（５）生体内分解性ポリマーおよびパモ酸
またはそのアルカリ金属塩の有機溶媒溶液と生理活性ペ
プチドまたはその塩（ただし、パモ酸塩を除く）の溶液
とを乳化混合した後、溶媒を除去することを特徴とする
第（１）項記載の製造法、（６）溶媒の除去を水中乾燥
法で行う第（２）項〜第（５）項のいずれかに記載の製
造法、（７）さらに凍結乾燥を行う第（６）項記載の製
造法、（８）混合液中の生理活性ペプチドの濃度が約１
〜約２５重量％である第（２）項〜第（５）項のいずれ
かに記載の製造法、（９）混合液中の生体内分解性ポリ
マーの濃度が約１〜約２５重量％である第（２）項〜第
（５）項のいずれかに記載の製造法、（１０）混合液中
のパモ酸またはその塩の濃度が約０．０５〜約５重量％
である第（２）項〜第（５）項のいずれかに記載の製造
法、（１１）パモ酸またはその塩の溶液がパモ酸または
その塩のメタノール溶液である第（２）項または第
（４）項記載の製造法、（１２）パモ酸またはその塩の
溶液の使用量が、生理活性ペプチドおよび生体内分解ポ
リマーの有機溶媒溶液に対して約２〜約９０体積％であ
る第（４）項記載の製造法、（１３）生理活性ペプチド
またはその塩が遊離塩基またはｐＫａ４．０以上の弱酸
との塩である第（１）項記載の製造法、（１４）生理活
性ペプチドが、パモ酸と塩を形成し得る塩基性基を有す
るペプチドである第（１）項記載の製造法、（１５）生
理活性ペプチドが、パモ酸と塩を形成し得る塩基性基を
２個以上有するペプチドである第（１）項記載の製造
法、

【０００６】（１６）生理活性ペプチドがＬＨ−ＲＨア
ゴニストである第（１）項記載の製造法、（１７）生理
活性ペプチドがＬＨ−ＲＨアンタゴニストである第
（１）項記載の製造法、（１８）生理活性ペプチドが５
-oxo-Ｐro−Ｈis−Ｔrp−Ｓer−Ｔyr−ＤＬeu−Ｌeu−
Ａrg−Ｐro−NH-C₂H₅またはその塩である第（１）項記
載の製造法、（１９）生理活性ペプチドが５-oxo-Ｐro
−Ｈis−Ｔrp−Ｓer−Ｔyr−ＤＬeu−Ｌeu−Ａrg−Ｐro
−NH-C₂H₅の酢酸塩である第（１）項記載の製造法、
（２０）生体内分解性ポリマーがα−ヒドロキシカルボ
ン酸重合体である第（１）項記載の製造法、（２１）α
−ヒドロキシカルボン酸重合体が乳酸−グリコール酸重
合体である第（２０）項記載の製造法、（２２）乳酸と
グリコール酸との組成比が１００/０〜４０/６０（モル
％）である第（２１）項記載の製造法、（２３）重合体
の重量平均分子量が３,０００〜１００,０００である第
（２０）項記載の製造法、（２４）生体内分解性ポリマ
ーがポリ乳酸である第（１）項記載の製造法、（２５）
ポリ乳酸の重量平均分子量が１０,０００〜６０,０００
である第（２４）項記載の製造法、（２６）有機溶媒が
ジクロロメタンである第（２）項〜第（５）項のいずれ
かに記載の製造法、（２７）生理活性ペプチドがパモ酸
と塩を形成し得る塩基性基を１個有する生理活性ペプチ
ドであり、徐放性マイクロスフィアが粒径約０．０１〜
約１０μｍの生理活性ペプチドのパモ酸塩を含有する徐
放性マイクロスフィアである第（１）項記載の製造法、
（２８）生理活性ペプチドがパモ酸と塩を形成し得る塩
基性基を２個以上有する生理活性ペプチドであり、徐放
性マイクロスフィアが生理活性ペプチド、生体内分解性
ポリマーおよびパモ酸またはその塩の三者から形成され
る複合体または塩を含有する徐放性マイクロスフィアで
ある第（１）項記載の製造法、

【０００７】（２９）第（１）項記載の製造法で製造さ
れ得る徐放性マイクロスフィア、（３０）粒径約０．０
１〜約１０μｍの生理活性ペプチドのパモ酸塩および生
体内分解性ポリマーを含有することを特徴とする徐放性
マイクロスフィア、（３１）生理活性ペプチド、パモ酸
またはその塩および生体内分解性ポリマーの三者から形
成される複合体または塩を含有することを特徴とする徐
放性マイクロスフィア、（３２）生理活性ペプチド１モ
ルに対してパモ酸を約０．８モル以下の割合で含有する
ことを特徴とする徐放性マイクロスフィア、（３３）生
理活性ペプチド１モルに対してパモ酸を約０．３〜約
０．７モルの割合で含有する第（３２）項記載の徐放性
マイクロスフィア、（３４）生理活性ペプチドがｐＫａ
４.０以上の弱酸と塩を形成し得る塩基性基を有する生
理活性ペプチドである第（２９）項〜第（３２）項のい
ずれかに記載の徐放性マイクロスフィア、（３５）生理
活性ペプチドがパモ酸と塩を形成し得る塩基性基を有す
る生理活性ペプチドである第（２９）項〜第（３２）項
のいずれかに記載の徐放性マイクロスフィア、（３６）
生理活性ペプチドがパモ酸と塩を形成し得る塩基性基を
２個以上有する生理活性ペプチドである第（２９）項〜
第（３２）項のいずれかに記載の徐放性マイクロスフィ
ア、（３７）生理活性ペプチドがＬＨ−ＲＨアンタゴニ
ストである第（２９）項〜第（３２）項のいずれかに記
載の徐放性マイクロスフィア、（３８）生理活性ペプチ
ドがＬＨ−ＲＨアゴニストである第（２９）項〜第（３
２）項のいずれかに記載の徐放性マイクロスフィア、

【０００８】（３９）生理活性ペプチドが５-oxo-Ｐro
−Ｈis−Ｔrp−Ｓer−Ｔyr−ＤＬeu−Ｌeu−Ａrg−Ｐro
−NH-C₂H₅またはその塩である第（２９）項〜第（３
２）項のいずれかに記載の徐放性マイクロスフィア、
（４０）生理活性ペプチドが５-oxo-Ｐro−Ｈis−Ｔrp
−Ｓer−Ｔyr−ＤＬeu−Ｌeu−Ａrg−Ｐro−NH-C₂H₅の
酢酸塩である第（２９）項〜第（３２）項のいずれかに
記載の徐放性マイクロスフィア、（４１）生体内分解性
ポリマーがα−ヒドロキシカルボン酸重合体である第
（２９）項または第（３１）項記載の徐放性マイクロス
フィア、（４２）α−ヒドロキシカルボン酸重合体が乳
酸−グリコール酸重合体である第（４１）項記載の徐放
性マイクロスフィア、（４３）乳酸とグリコール酸との
組成比が１００/０〜４０/６０（モル％）である第（４
２）項記載の徐放性マイクロスフィア、（４４）重合体
の重量平均分子量が３,０００〜１００,０００である第
（４１）項記載の徐放性マイクロスフィア、（４５）生
体内分解性ポリマーがポリ乳酸である第（２９）項〜第
（３２）項のいずれかに記載の徐放性マイクロスフィ
ア、（４６）ポリ乳酸の重量平均分子量が１０，０００
〜６０，０００である第（４５）項記載の徐放性マイク
ロスフィア、

【０００９】（４７）徐放性マイクロスフィアにおける
生理活性ペプチドの割合が約１５〜約８５重量％である
第（２９）項〜第（３２）項のいずれかに記載の徐放性
マイクロスフィア、（４８）徐放性マイクロスフィアに
おけるパモ酸またはその塩の割合が約０．１〜約２５重
量％である第（２９）項〜第（３２）項のいずれかに記
載の徐放性マイクロスフィア、（４９）徐放性マイクロ
スフィアにおける生体内分解性ポリマーの割合が約１５
〜約８５重量％である第（２９）項〜第（３２）項のい
ずれかに記載の徐放性マイクロスフィア、（５０）徐放
性マイクロスフィアにおける粒径約０．０１〜約１０μ
ｍの生理活性ペプチドのパモ酸塩の割合が約１５〜約９
５重量％である第（３０）項記載の徐放性マイクロスフ
ィア、（５１）生理活性ペプチドが５-oxo-Ｐro−Ｈis
−Ｔrp−Ｓer−Ｔyr−ＤＬeu−Ｌeu−Ａrg−Ｐro−NH-C
₂H₅またはその塩であり、徐放性マイクロスフィアにお
ける該生理活性ペプチドの含有量が約１５〜約３０重量
％である第（２９）項〜第（３２）項のいずれかに記載
の徐放性マイクロスフィア、（５２）第（２９）項〜第
（３２）項のいずれかに記載の徐放性マイクロスフィア
を含有する徐放性製剤、（５３）注射用である第（５
２）項記載の徐放性製剤、（５４）第（３７）項または
第（３８）項記載の徐放性マイクロスフィアを含有する
徐放性製剤、および（５５）前立腺癌、前立腺肥大症、
子宮内膜症、子宮筋腫、子宮線維腫、思春期早発症また
は乳癌の予防・治療剤または避妊剤である第（５４）項
記載の徐放性製剤を提供する。

【００１０】本発明の製造法に用いられる生理活性ペプ
チドは、生理活性を示すペプチドでパモ酸と塩を形成可
能なペプチドであればいかなるものでもよく、例えば、
分子量が約３００〜約４０,０００、好ましくは分子量
約４００〜約３０,０００、さらに好ましくは分子量が
約５００〜約２０,０００であるペプチドなどが用いら
れる。このような生理活性ペプチドとしては、例えば、
ｐＫａ４.０以上の弱酸（例、炭酸、重炭酸、ホウ酸、
炭素数が１〜３の低級アルカンモノカルボン酸等）と塩
を形成しうる塩基性基を有していることが好ましい。該
生理活性ペプチドが分子内に複数の塩基性基を有する場
合には、少なくとも１個以上の塩基性基がパモ酸と塩を
形成可能であればよく、他の基は塩を形成していてもよ
い。また、塩基性基以外に遊離のあるいは塩を形成した
酸性基を有するものであっても、パモ酸との塩を形成し
うる限り、本発明に用いられる生理活性ペプチドの範囲
内である。

【００１１】生理活性ペプチドの活性として代表的なも
のとしては、ホルモン作用が挙げられる。また、該生理
活性ペプチドは天然物、合成物、半合成物、遺伝子工学
の産物のいずれでもよいし、さらにこれらの類縁体及び
／又は誘導体でもよい。これらの生理活性ペプチドの作
用機作は、作動性あるいは拮抗性のいずれでもよい。該
生理活性ペプチドとしては、黄体形成ホルモン放出ホル
モン（ＬＨ−ＲＨまたはゴナドトロピン放出ホルモン、
Ｇn−ＲＨと称されることもある。）、インスリン、ソ
マトスタチン、ソマトスタチン誘導体（例、サンドスタ
チン；USP4,087,390, 4,093,574, 4,100,117および4,25
3,998）、成長ホルモン（ＧＨ）、成長ホルモン放出ホ
ルモン（ＧＨ−ＲＨ）、プロラクチン、エリスロポイエ
チン（ＥＰＯ）、副腎皮質ホルモン（ＡＣＴＨ）、ＡＣ
ＴＨ誘導体（例、エビラチド）、メラノサイト刺激ホル
モン（ＭＳＨ）、甲状腺ホルモン放出ホルモン（(pyr)G
lu-His-ProNH₂；ＴＲＨ），その塩および誘導体（特開
昭５０−１２１２７３号公報、特開昭５２−１１６４６
５号公報）、甲状腺刺激ホルモン（ＴＳＨ）、黄体形成
ホルモン（ＬＨ）、卵胞刺激ホルモン（ＦＳＨ）、バソ
プレシン、バソプレシン誘導体（例、デスモプレシ
ン）、オキシトシン、カルシトニン、グルカゴン、ガス
トリン、セクレチン、パンクレオザイミン、コレシスト
キニン、アンジオテンシン、ヒト胎盤ラクトーゲン、ヒ
ト絨毛性ゴナドトロピン（ＨＣＧ）、エンケファリン、
エンケファリン誘導体（例、USP4,277,394、EP-3156
7）、エンドルフィン、キョウトルフィン、インターフ
ェロン（例、インターフェロン−α，β，γ）、インタ
ーロイキン（例、インターロイキン１〜１２各種）、タ
フトシン、サイモポイエチン、サイモシン、サイモチム
リン、胸腺液性因子（ＴＨＦ）、血中胸腺因子（ＦＴ
Ｓ）およびその誘導体（USP4,229,438）、腫瘍壊死因子
（ＴＮＦ）、コロニー誘導因子(例、ＣＳＦ，ＧＣＳ
Ｆ，ＧＭＣＳＦ，ＭＣＳＦ)、モチリン、デイノルフィ
ン、ボンベシン、ニューロテンシン、セルレイン、ブラ
ジキニン、心房性ナトリウム***増加因子、神経成長因
子（ＮＧＦ）、細胞増殖因子（例、ＥＧＦ，ＴＧＦ−
β，ＰＤＧＦ，酸性ＦＧＦ，塩基性ＦＧＦ）、神経栄養
因子（例、ＮＴ−３，ＮＴ−４，ＣＮＴＦ，ＧＤＮＦ，
ＢＤＮＦ）、エンドセリン拮抗作用を有するペプチド類
およびその類縁体（誘導体）（EP-436189，EP-457195，
EP-496452，特開平３−９４６９２号公報，特開平３−
１３０２９９号公報）、インスリンンレセプター，イン
スリン様成長因子（ＩＧＦ）−１レセプター，ＩＧＦ−
２レセプター，トランスフェリンレセプター，エピダー
マル成長因子レセプター，ローデンンシティリポプロテ
イン（ＬＤＬ）レセプター，マクロファージスカベンジ
ャーレセプター，ＧＬＵＴ−４トランスポーター，成長
ホルモンレセプター，レプチンレセプターの内在化を阻
害する活性を有するＭＨＣ−Ｉ（major histocompatibi
lity class I antigen complex）のα１ドメイン由来の
ペプチド（プロシーディングス・オブ・ザ・ナショナル
・アカデミー・オブ・サイエンスズ・オブ・ユーエスエ
ー（Proceedings of the National Academy of Science
s of the United State of America）、第９１巻、9086
-9090頁（1994年）；同第９４巻、11692-11697頁（1997
年））およびその類縁体（誘導体）、さらにはこれらの
フラグメントまたはフラグメントの誘導体などが挙げら
れる。

【００１２】生理活性ペプチドが塩である場合、薬理学
的に享受しうる塩などが挙げられる。例えば、該生理活
性ペプチドが分子内にアミノ基等の塩基性基を有する場
合、該塩基性基と無機酸（例、塩酸、硫酸、硝酸、ホウ
酸等）、有機酸（例、炭酸、重炭酸、コハク酸、酢酸、
プロピオン酸、トリフルオロ酢酸等）等との塩などが挙
げられる。また、生理活性ペプチドが分子内にカルボキ
シル基等の酸性基を有する場合、無機塩基（例、ナトリ
ウム、カリウム等のアルカリ金属、カルシウム、マグネ
シウム等のアルカリ土類金属など）や有機塩基（例、ト
リエチルアミン等の有機アミン類、アルギニン等の塩基
性アミノ酸類等）等との塩など挙げられる。また、生理
活性ペプチドは金属錯体化合物（例、銅錯体、亜鉛錯体
等）を形成していてもよい。ただし、本発明の製造法に
おいて原料として用いられる生理活性ペプチドの塩か
ら、生理活性ペプチドのパモ酸塩は除かれる。本発明に
用いられる生理活性ペプチドの好ましい具体例として
は、例えば、前立腺癌、前立腺肥大症、子宮内膜症、子
宮筋腫、子宮線維腫、思春期早発症、乳癌等のＬＨ−Ｒ
Ｈあるいはこれにより誘導されるホルモンに依存性の疾
患および避妊に対して有効なＬＨ−ＲＨ類縁体およびそ
の塩、成長ホルモンおよびこれにより誘導されるホルモ
ン依存性の疾患や消化性潰瘍等の消化器系の疾患等に対
して有効なソマトスタチン誘導体およびその塩などが挙
げられる。前記ＬＨ−ＲＨ類縁体またはその塩の具体例
は、例えば、トリートメントウイズＧnＲＨアナ
ログス：コントラバーシスアンドパースペクティブ
（Treatment with GnRH analogs: Controversies and p
erspectives）〔パルテノンパブリッシンググループ
（株）（The Parthenon Publishing Group Ltd.）発行
1996年〕、特表平３−５０３１６５号公報、特開平３
−１０１６９５号、同７−９７３３４号及び同８−２５
９４６０号公報などに記載されているペプチド類が挙げ
られる。

【００１３】ＬＨ−ＲＨ拮抗作用を有する生理活性ペプ
チドのより好ましい具体例としては、例えば、一般式
〔Ｉａ〕 X−D2Nal−D4ClPhe−D3Pal−Ser−A−B−Leu−C−Pro−
DAlaNH₂ 〔（式中ＸはＮ(４Ｈ２−furoyl）ＧlyまたはＮＡc
を、ＡはＮＭeＴyr、Ｔyr、Ａph（Ａtz）、ＮＭeＡph
（Ａtz）から選ばれる残基を、ＢはＤＬys（Ｎic）、Ｄ
Ｃit、ＤＬys（AzaglyNic)、ＤＬys（AzaglyFur）、Ｄh
Ａrg（Ｅt₂)、ＤＡph（Ａtz）、ＤhＣi から選ばれる残
基を、ＣはＬys（Ｎisp）、Ａrg、hＡrg（Ｅt₂）をそれ
ぞれ示す〕で表される生理活性ペプチドまたはその塩が
挙げられる。さらには、米国特許５，５８０，９５７号
公報などに記載の生理活性ペプチドまたはその塩がより
好ましい具体例として挙げられる。これらのペプチド
は、前記文献あるいは公報記載の方法あるいはこれに準
じる方法で製造することができる。ＬＨ−ＲＨ作動作用
を有する生理活性ペプチドのより好ましい具体例として
は、例えば、一般式〔Ｉｂ〕 5-oxo-Pro−His−Trp−Ser−Tyr−Y−Leu−Arg−Pro−Z 〔式中、ＹはＤＬeu、ＤＡla、ＤＴrp、ＤＳer（tB
u）、Ｄ２Ｎal、ＤＨis（ＩmBzl）から選ばれる残基
を、ＺはＮＨ-Ｃ₂Ｈ₅またはＧly-ＮＨ₂をそれぞれ示
す〕で表される生理活性ペプチドまたはその塩が挙げら
れる。なかでも、ＹがＤＬeuで、ＺがＮＨ-Ｃ₂Ｈ₅であ
るペプチドが好適である。これらのペプチドは、前記文
献あるいは公報記載の方法あるいはこれに準じる方法で
製造することができる。

【００１４】また、ソマトスタチン誘導体またはその塩
の具体例としては、例えば、プロシーディングスオブ
ナショナルアカデミーオブサイエンス（Proc.
Natl. Acad. Sci.）USA, 93巻, 12513-12518 頁（1996
年）あるいは該文献中に引用された文献中などに記載さ
れている。

【化１】また、サンドスタチン（USP4087390, 4093574, 410011
7, 4253998）なども好適である。

【００１５】パモ酸と塩を形成し得る塩基性基を１個有
する生理活性ペプチドのより好ましい具体例としては、
例えば、前述の一般式〔Ｉｂ〕で表されるＬＨ−ＲＨ作
動作用を有する生理活性ペプチドまたはその塩が挙げら
れる。パモ酸と塩を形成し得る塩基性基を２個以上有す
る生理活性ペプチドのより好ましい具体例としては、例
えば、前述の一般式〔Ｉａ〕で表されるＬＨ−ＲＨ拮抗
作用を有する生理活性ペプチドまたはその塩が挙げられ
るが、前述の一般式〔Ｉｂ〕で表される生理活性ペプチ
ドまたはその塩も同様に用いることができる。特に、本
発明に用いられる生理活性ペプチドとしては、例えば、
５-oxo-Pro−His−Trp−Ser−Tyr−DLeu−Leu−Arg−Pr
o−NH-C₂H₅またはその塩（特に、酢酸塩）が好適であ
る。

【００１６】本明細書中で使用される略号としては、略号名称Ｎ(４Ｈ２−furoyl）Ｇly ：Ｎ−テトラヒドロフロイルグリシン残基ＮＡc ：Ｎ−アセチル基Ｄ２Ｎal ：Ｄ−３−（２−ナフチル）アラニン残基Ｄ４ＣlＰhe ：Ｄ−３−（４−クロロフェニル）アラニン残基Ｄ３Ｐal ：Ｄ−３−（３−ピリジル）アラニン残基ＮＭeＴyr ：Ｎ−メチルチロシン残基Ａph（Ａtz）：Ｎ−〔５'−（３'−アミノ−１'Ｈ−１'，２'，４ '−トリアゾリル）〕フェニルアラニン残基ＮＭeＡph（Ａtz）：Ｎ−メチル−〔５'−（３'−アミノ−１'Ｈ−１' ，２'，４'−トリアゾリル）〕フェニルアラニン残基ＤＬys（Ｎic）：Ｄ−（ε−Ｎ−ニコチノイル）リシン残基ＤＣit ：Ｄ−シトルリン残基ＤＬys（AzaglyNic）：Ｄ−（アザグリシルニコチノイル）リシン残基ＤＬys（AzaglyFur）：Ｄ−（アザグリシルフラニル）リシン残基ＤhＡrg（Ｅt₂）：Ｄ−（Ｎ,Ｎ'−ジエチル）ホモアルギニン残基ＤＡph（Ａtz）：Ｄ−Ｎ−〔５'−（３'−アミノ−１'Ｈ−１'，２' ，４'−トリアゾリル）〕フェニルアラニン残基ＤhＣi ：Ｄ−ホモシトルリン残基Ｌys（Ｎisp）：（ε−Ｎ−イソプロピル）リシン残基 hＡrg（Ｅt₂）：（Ｎ,Ｎ'−ジエチル）ホモアルギニン残基ＤＳer（tＢu）：Ｄ−（Ｏ-t-ブチル）セリン残基ＤＨis（ＩmBzl）：Ｄ−（π−ベンジル）ヒスチジン残基

【００１７】その他アミノ酸に関し、略号で表示する場
合、ＩＵＰＡＣ−ＩＵＢコミッション・オブ・バイオケ
ミカル・ノーメンクレーチュアー（Commission on Bioc
hemical Nomenclature）(ヨーロピアン・ジャーナル・
オブ・バイオケミストリー（Europian Journal of Bioc
hemistry）第１３８巻、９〜３７頁（１９８４年））に
よる略号あるいは該当分野における慣用略号に基づくも
のとし、また、アミノ酸に関して光学異性体がありうる
場合は、特に明示しなければＬ体を示すものとする。

【００１８】本発明の製造法に用いられる好ましい生体
内分解性ポリマーの具体例としては、例えば、α−ヒド
ロキシカルボン酸類（例、グリコール酸、乳酸、ヒドロ
キシ酪酸等）、ヒドロキシジカルボン酸類（例、リンゴ
酸）、ヒドロキシトリカルボン酸（例、クエン酸）等の
１種以上から合成され、遊離のカルボキシル基を有する
重合体、共重合体、あるいはこれらの混合物、ポリ−α
−シアノアクリル酸エステル、ポリアミノ酸（例、ポリ
−γ−ベンジル−Ｌ−グルタミン酸等）、無水マレイン
酸系共重合体（例、スチレン−マレイン酸共重合体等）
等が挙げられる。ポリマーにおける重合の形式は、ラン
ダム、ブロック、グラフトのいずれでもよい。また、上
記α−ヒドロキシカルボン酸類、ヒドロキシジカルボン
酸類、ヒドロキシトリカルボン酸類が分子内に光学活性
中心を有する場合、Ｄ−体、Ｌ−体およびＤＬ−体のい
ずれも用いることができる。これらの中でも乳酸−グリ
コール酸重合体、ポリ−α−シアノアクリル酸エステル
が好ましい。さらに好ましくは、乳酸−グリコール酸重
合体である。

【００１９】生体内分解性ポリマーは、好ましくは
（Ａ）グリコール酸と一般式

【化２】（式中、Ｒは炭素数２から８のアルキル基を表す）で示
されるヒドロキシカルボン酸との共重合体および（Ｂ）
ポリ乳酸を混合した生体内分解性ポリマーまたは乳酸と
グリコール酸との共重合体である。一般式〔II〕中、Ｒ
で示される炭素数２から８の直鎖もしくは分枝状のアル
キル基としては、例えば、エチル、プロピル、イソプロ
ピル、ブチル、イソブチル、sec−ブチル、tert−ブチ
ル、ペンチル、イソペンチル、ネオペンチル、tert−ペ
ンチル、１−エチルプロピル、ヘキシル、イソヘキシ
ル、１,１−ジメチルブチル、２,２−ジメチルブチル、
３,３−ジメチルブチル、２−エチルブチルなどが挙げ
られる。好ましくは、炭素数２から５の直鎖もしくは分
枝状のアルキル基が用いられる。具体例としては、例え
ば、エチル、プロピル、イソプロピル、ブチル、イソブ
チルなどが挙げられる。特に好ましくは、Ｒはエチルで
ある。

【００２０】一般式〔II〕で示されるヒドロキシカルボ
ン酸としては、例えば、２−ヒドロキシ酪酸、２−ヒド
ロキシ吉草酸、２−ヒドロキシ−３−メチル酪酸、２−
ヒドロキシカプロン酸、２−ヒドロキシイソカプロン
酸、２−ヒドロキシカプリン酸などが挙げられる。この
うち特に、２−ヒドロキシ酪酸、２−ヒドロキシ吉草
酸、２−ヒドロキシ−３−メチル酪酸、２−ヒドロキシ
カプロン酸が好ましい。一般式〔II〕で示されるヒドロ
キシカルボン酸は、特に好ましくは２-ヒドロキシ酪酸
である。これらのヒドロキシカルボン酸はＤ−体、Ｌ−
体およびＤ，Ｌ−体の何れでもよいが、Ｄ−体／Ｌ−体
（モル％）が約７５／２５〜約２５／７５の範囲のもの
が好ましい。さらに好ましくは、Ｄ−体／Ｌ−体（モル
％）が約６０／４０〜約４０／６０の範囲のヒドロキシ
カルボン酸である。特に好ましくは、Ｄ−体／Ｌ−体
（モル％）が約５５／４５〜約４５／５５の範囲のヒド
ロキシカルボン酸である。

【００２１】グリコール酸と一般式〔II〕で示されるヒ
ドロキシカルボン酸との共重合体（以下、グリコール酸
共重合体と略称する）において、共重合の形式は、ラン
ダム，ブロック，グラフトの何れでもよい。好ましく
は、ランダム共重合体である。一般式〔II〕で示される
ヒドロキシカルボン酸は、１種または２種以上適宜の割
合で用いてもよい。上記（Ａ）のグリコール酸共重合体
におけるグリコール酸と一般式〔II〕で示されるヒドロ
キシカルボン酸との組成比は、グリコール酸が約１０〜
約７５モル％、残りがヒドロキシカルボン酸である場合
が好ましい。さらに好ましくは、グリコール酸が約２０
〜約７５モル％、残りがヒドロキシカルボン酸である場
合である。特に好ましくは、グリコール酸が約４０〜約
７０モル％、残りがヒドロキシカルボン酸である場合で
ある。これらグリコール酸共重合体は、重量平均分子量
が２,０００から１００,０００のものが用いられる。好
ましくは、重量平均分子量が３,０００から８０,０００
の共重合体である。さらに好ましくは、重量平均分子量
が５,０００から５０,０００の共重合体である。また、
これらのグリコール酸共重合体の分散度（重量平均分子
量／数平均分子量）は約１.２から約４.０が好ましい。
特に好ましくは、分散度が約１.５から約３.５の共重合
体である。上記（Ａ）のグリコール酸共重合体は、公知
の製造法、例えば、特開昭６１−２８５２１号公報に記
載の方法に従って合成できる。

【００２２】ポリ乳酸としては、Ｌ−体、Ｄ−体および
これらの混合物の何れでもよいが、Ｄ−体／Ｌ−体（モ
ル％）が約７５／２５〜約２０／８０の範囲のものが好
ましい。さらに好ましくは、Ｄ−体／Ｌ−体（モル％）
が約６０／４０〜約２５／７５の範囲のポリ乳酸であ
る。特に好ましくは、Ｄ−体／Ｌ−体（モル％）が約５
５／４５〜約２５／７５の範囲のポリ乳酸である。該ポ
リ乳酸は、重量平均分子量が１,５００から１００,００
０の範囲のものが好ましい。さらに好ましくは、重量平
均分子量が２,０００から８０,０００の範囲のポリ乳酸
である。特に好ましくは、重量平均分子量が１０，００
０〜６０，０００（さらに好ましくは、１５，０００〜
５０，０００）の範囲のポリ乳酸である。また、ポリ乳
酸の分散度は約１.２から約４.０が好ましい。特に好ま
しくは、分散度が約１.５から約３.５の場合である。ポ
リ乳酸の合成法については、乳酸の二量体であるラクタ
イドを開環重合する方法と乳酸を脱水重縮合する方法が
知られている。

【００２３】本発明の製剤基剤におけるグリコール酸共
重合体（Ａ）とポリ乳酸（Ｂ）は、例えば（Ａ）／
（Ｂ）で表わされる混合比（重量％）が約１０／９０〜
約９０／１０の範囲で使用される。好ましくは、混合比
（重量％）が約２０／８０〜約８０／２０の範囲であ
る。さらに好ましくは、約３０／７０〜約７０／３０の
範囲である。（Ａ），（Ｂ）のうち何れかの成分が多す
ぎると、（Ａ）もしくは（Ｂ）成分を単独で使用した場
合とほとんど同じ薬物放出パターンを有する製剤しか得
られず、混合基剤による放出後期の直線的な放出パター
ンが期待できない。グリコール酸共重合体およびポリ乳
酸の分解・消失速度は分子量あるいは組成によって大き
く変化するが、一般的にはグリコール酸共重合体の分解
・消失速度の方が速いため、混合するポリ乳酸の分子量
を大きくする、あるいは（Ａ）／（Ｂ）で表わされる混
合比を小さくすることによって放出期間を長くすること
ができる。逆に、混合するポリ乳酸の分子量を小さくす
る、あるいは（Ａ）／（Ｂ）で表わされる混合比を大き
くすることによって放出期間を短くすることもできる。
さらに、一般式〔II〕で示されるヒドロキシカルボン酸
の種類や割合を変化させることにより、放出期間を調節
することもできる。

【００２４】生体内分解性ポリマーとしてポリ乳酸また
は乳酸−グリコール酸共重合体（以下、単に乳酸−グリ
コール酸重合体と称す。）を用いる場合、その乳酸／グ
リコール酸組成比（モル％）は１００／０〜４０／６０
が好ましく、１００／０〜４５／５５がさらに好まし
く、とりわけ１００／０〜５０／５０が好ましい。上記
の乳酸−グリコール酸重合体の重量平均分子量は３,０
００〜１００,０００が好ましく、さらに５,０００〜８
０,０００が特に好ましい。また、乳酸−グリコール酸
重合体の分散度（重量平均分子量／数平均分子量）は約
１.２〜約４.０が好ましく、さらに約１.５〜約３.５が
特に好ましい。乳酸−グリコール酸重合体の分解・消失
速度は組成あるいは分子量によって大きく変化するが、
一般的にはグリコール酸分率が低いほど分解・消失が遅
いため、グリコール酸分率を低くするかあるいは分子量
を大きくすることによって放出期間を長くすることがで
きる。逆に、グリコール酸分率を高くするかあるいは分
子量を小さくすることによって放出期間を短くすること
もできる。長期間（例えば、１〜６カ月、好ましくは１
〜４カ月）型徐放性製剤とするには、上記の組成比およ
び重量平均分子量の範囲の乳酸−グリコール酸重合体が
好ましい。上記の組成比および重量平均分子量の範囲の
乳酸−グリコール酸重合体よりも分解が早い乳酸−グリ
コール酸重合体を選択すると初期バーストの抑制が困難
であり、逆に上記の組成比および重量平均分子量の範囲
の乳酸−グリコール酸重合体よりも分解が遅い乳酸−グ
リコール酸重合体を選択すると有効量の薬物が放出され
ない期間を生じやすい。

【００２５】本明細書における重量平均分子量、数平均
分子量および分散度とは、重量平均分子量が１２０,０
００、５２,０００、２２,０００、９,２００、５,０５
０、２,９５０、１,０５０、５８０、１６２の９種類の
ポリスチレンを基準物質としてゲルパーミエーションク
ロマトグラフィー（ＧＰＣ）で測定したポリスチレン換
算の分子量および算出した分散度をいう。測定は、ＧＰ
ＣカラムＫＦ８０４Ｌ×２（昭和電工製）、ＲＩモニタ
ーＬ−３３００（日立製作所製）を使用、移動相として
クロロホルムを用いた。また、生体内分解性ポリマーを
アセトン−メタノール混合溶媒に溶解し、フェノールフ
タレインを指示薬としてこの溶液をアルコール性水酸化
カリウム溶液でカルボキシル基を滴定して末端基定量に
よる数平均分子量を算出した。以下これを末端基定量に
よる数平均分子量と表記する。末端基定量による数平均
分子量が絶対値であるのに対してＧＰＣ測定による数平
均分子量は分析あるいは解析条件（例えば、移動相の種
類、カラムの種類、基準物質、スライス幅の選択、ベー
スラインの選択等）によって変動する相対値であるた
め、一義的な数値化は困難であるが、例えば乳酸とグリ
コール酸から無触媒脱水重縮合法で合成され、末端に遊
離のカルボキシル基を有する重合体では、ＧＰＣ測定に
よる数平均分子量と末端基定量による数平均分子量とが
ほぼ一致する。この乳酸−グリコール酸重合体の場合に
ほぼ一致するとは、末端基定量による数平均分子量がＧ
ＰＣ測定による数平均分子量の約０.５〜約２倍の範囲
内であることをいい、好ましくは約０.７〜約１.５倍の
範囲内であることをいう。

【００２６】本発明における乳酸−グリコール酸重合体
は、乳酸とグリコール酸からの無触媒脱水重縮合（特開
昭６１−２８５２１号）あるいはラクタイドとグリコラ
イド等の環状体からの触媒を用いた開環重合（Encyclop
edic Handbook of Biomaterials and Bioengineering P
art A：Materials, Volume 2, Marcel Dekker, Inc.199
5年）で製造できる。開環重合で合成される重合体は通
常はカルボキシル基を有しない重合体であるが、該重合
体を化学的に処理して末端を遊離のカルボキシル基にし
た重合体（ジャーナルオブコントロールドリリー
ズ（J. Controlled Release），４１巻、２４９−２５
７頁、１９９６年）を用いることもできる。上記の末端
に遊離のカルボキシル基を有する乳酸−グリコール酸重
合体は公知の製造法（例えば無触媒脱水重縮合法、特開
昭６１−２８５２１号公報参照）で問題なく製造でき、
さらには末端に特定されない遊離のカルボキシル基を有
する重合体は公知の製造法（例えば、ＷＯ９４／１５５
８７号公報参照）で製造できる。また、開環重合後の化
学的処理によって末端を遊離のカルボキシル基にした乳
酸−グリコール酸重合体は例えばベーリンガーエンゲ
ルハイム（Boehringer Ingelheim KG）から市販されて
いるものを用いてもよい。

【００２７】パモ酸またはその塩としては、市販のパモ
酸またはその塩を用いることができる。塩としては、例
えば、アルカリ金属塩（例、ナトリウム塩，カリウム塩
など）、アルカリ土類金属塩（例、カルシウム塩，マグ
ネシウム塩など）または遷移金属（例、亜鉛，鉄，銅な
ど）との塩などが用いられるが、特に、ナトリウム塩な
どのアルカリ金属塩が好適である。パモ酸またはその塩
の溶液および生理活性ペプチドの溶液に用いられる溶媒
としては、例えば、水、アルコール類（例、メタノー
ル、エタノール等）、ピリジン、ジメチルアセトアミ
ド，酢酸などが用いられ、特にメタノールなどのアルコ
ール類が好適である。生理活性ペプチド、パモ酸または
その塩または生体内分解性ポリマーの有機溶媒溶液に用
いられる有機溶媒としては、例えば、ハロゲン化炭化水
素（例、ジクロロメタン、クロロホルム、ジクロロエタ
ン、トリクロロエタン、四塩化炭素等）、エーテル類
（例、エチルエーテル、イソプロピルエーテル等）、脂
肪酸エステル（例、酢酸エチル、酢酸ブチル等）、芳香
族炭化水素（例、ベンゼン、トルエン、キシレン等），
アルコール類（例、メタノール、エタノール等）などが
用いられる。これらは適宜の割合で混合して用いてもよ
い。なかでも、ハロゲン化炭化水素が好ましく、特にジ
クロロメタンが好適である。

【００２８】

【発明の実施の形態】本発明の製造法は、従来法のよう
に予め生理活性ペプチドのパモ酸塩を形成させることな
く、生理活性ペプチドとパモ酸またはその塩とを生体内
分解性ポリマーで乳化混合することによって形成した、
（ｉ）粒径約０．０１〜約１０μｍ程度の生理活性ペプ
チドの微細なパモ酸塩、あるいは（ii）生理活性ペプチ
ド、生体内分解性ポリマーおよびパモ酸またはその塩か
ら形成される複合体または塩を含有する徐放性マイクロ
スフィアを製造することを特徴とするものである。した
がって、生体内分解性ポリマーがない条件下で生理活性
ペプチドとパモ酸またはその塩とを乳化混合して生理活
性ペプチドのパモ酸塩を形成させない限り、生理活性ペ
プチド、生体内分解性ポリマーおよびパモ酸またはその
塩の混合方法は問わない。すなわち、具体的には、本発
明は、（１）生体内分解性ポリマーの有機溶媒溶液中で
生理活性ペプチドまたはその塩（ただし、パモ酸塩を除
く）の溶液とパモ酸またはそのアルカリ金属塩の溶液と
を乳化混合した後、溶媒を除去する方法、（２）生理活
性ペプチドまたはその塩（ただし、パモ酸塩を除く）、
生体内分解性ポリマーおよびパモ酸またはそのアルカリ
金属塩を有機溶媒に溶解した後、溶媒を除去する方法、
（３）生理活性ペプチドまたはその塩（ただし、パモ酸
塩を除く）および生体内分解性ポリマーの有機溶媒溶液
とパモ酸またはそのアルカリ金属塩の溶液とを乳化混合
した後、溶媒を除去する方法、および（４）生体内分解
性ポリマーおよびパモ酸またはそのアルカリ金属塩の有
機溶媒溶液と生理活性ペプチドまたはその塩（ただし、
パモ酸塩を除く）の溶液とを乳化混合した後、溶媒を除
去する方法を提供する。

【００２９】本発明の製造法において、混合液中の生理
活性ペプチドの濃度は、通常約１〜約２５重量％、好ま
しくは約２〜約２０重量％である。混合液中の生体内分
解性ポリマーの濃度は、通常、約１〜約２５重量％、好
ましくは約２〜約２０重量％である。混合液中のパモ酸
またはその塩の濃度は、通常、約０．０５〜約５重量
％、好ましくは約０．２〜約４重量％である。パモ酸ま
たはその塩の溶液の使用量は、生理活性ペプチドおよび
生体内分解性ポリマーの有機溶媒溶液に対して、通常、
約２〜約９０体積％である。溶媒を除去するためには、
次の水中乾燥法、相分離法または噴霧乾燥法が用いられ
る。本発明の製造法を、各除去法に分けて具体的に説明
する。

【００３０】（Ｉ）水中乾燥法生理活性ペプチド（その塩を含む）を生体内分解性ポリ
マーの有機溶媒溶液に加え、生理活性ペプチドと生体内
分解性ポリマーとの有機溶媒溶液を作る。該有機溶媒と
しては、例えば、ハロゲン化炭化水素（例、ジクロロメ
タン、クロロホルム、ジクロロエタン、トリクロロエタ
ン、四塩化炭素等）、エーテル類（例、エチルエーテ
ル、イソプロピルエーテル等）、脂肪酸エステル（例、
酢酸エチル、酢酸ブチル等）、芳香族炭化水素（例、ベ
ンゼン、トルエン、キシレン等）などが用いられる。こ
れらは適宜の割合で混合して用いてもよい。なかでも、
ハロゲン化炭化水素が好ましく、特にジクロロメタンが
好適である。また、必要な量の生理活性ペプチドが、生
体内分解性ポリマーの有機溶媒溶液の全量に対して体積
比にして６０％以内の溶媒（例えば、水、アルコール類
（例、エタノール、メタノール等）、アセトニトリル、
酢酸等）に溶解する場合には、生理活性ペプチドを溶解
させた溶液を生体内分解性ポリマーの有機溶媒溶液に添
加して、両者の溶液としてもよいし、あるいは生理活性
ペプチド溶液を生体内分解性ポリマーの有機溶媒溶液に
乳化してＯ／ＯまたはＷ／Ｏエマルションとする。この
際、生理活性ペプチドを析出させることは好ましくな
い。

【００３１】ここで用いる生体内分解性ポリマーの有機
溶媒溶液中の濃度は、用いる生体内分解性ポリマーの分
子量、有機溶媒の種類等によって異なるが、例えば、ジ
クロロメタンを有機溶媒として用いた場合、一般的には
約０.５〜約７０重量％、より好ましくは約１〜約６０
重量％、特に好ましくは約２〜約５０重量％から選ばれ
る。生理活性ペプチドは、通常、上記の生体内分解性ポ
リマーの有機溶媒溶液１ｍｌに対して生理活性ペプチド
が約３０ｍｇ〜約５００ｍｇ、好ましくは約４０ｍｇ〜
約４００ｍｇになるように添加する。次いで、生理活性
ペプチドと生体内分解性ポリマーとの有機溶媒溶液ある
いはＯ／ＯまたはＷ／Ｏエマルションにパモ酸またはパ
モ酸塩（例、アルカリ金属塩（ナトリウム塩，カリウム
塩など），アルカリ土類金属塩（例、カルシウム塩，マ
グネシウム塩など）または遷移金属（例、亜鉛，鉄，銅
など）との塩）の溶液（該溶媒としては水、アルコール
類（例、メタノール、エタノール等）、ピリジン、ジメ
チルアセトアミド等）をホモジナイザーあるいは超音波
等の公知の方法で乳化しながら添加する。あるいは、生
理活性ペプチドあるいはその塩とパモ酸あるいはその
塩、さらには生理活性ペプチドのパモ酸塩が有機溶媒
（例、アルコール類（メタノール、エタノール等））に
完全に溶解する場合には、この有機溶媒溶液を生体内分
解性ポリマーの有機溶媒溶液にホモジナイザーあるいは
超音波等の公知の方法で乳化しながら添加する。上述の
２つの添加法でのパモ酸あるいはパモ酸塩の溶液中濃度
は飽和溶解濃度までなら特に限定されないが、好ましく
は飽和溶解濃度であり、パモ酸あるいはパモ酸塩の溶液
の生体内分解性ポリマーの溶液に対する体積比は約２〜
約９０％が好ましく、さらに好ましくは約５〜約７０
％、特に好ましくは約１０〜約５０％である。

【００３２】次いで、得られた生理活性ペプチド、パモ
酸を含む生体内分解性ポリマーの有機溶媒溶液（油相）
を第２相目の水相中に加え、Ｏ（油相）／Ｗ（水相）エ
マルションを形成させた後、油相中の溶媒を蒸発させ、
マイクロスフィアを調製する。この際の水相体積は一般
的には油相体積の約１倍〜約１０，０００倍、より好ま
しくは約２倍〜約５，０００倍、特に好ましくは約５倍
〜約２，０００倍から選ばれる。上記の外水相中に乳化
剤を加えてもよい。該乳化剤は、安定なＯ／Ｗエマルシ
ョンを形成できるものであればいずれでもよい。具体的
には、例えば、アニオン性界面活性剤（オレイン酸ナト
リウム、ステアリン酸ナトリウム、ラウリル硫酸ナトリ
ウムなど）、非イオン性界面活性剤（ポリオキシエチレ
ンソルビタン脂肪酸エステル〔ツイーン（Tween）８
０、ツイーン（Tween）６０、アトラスパウダー社〕、
ポリオキシエチレンヒマシ油誘導体〔ＨＣＯ−６０、Ｈ
ＣＯ−５０、日光ケミカルズ〕など）、ポリビニルピロ
リドン、ポリビニルアルコール、カルボキシメチルセル
ロース、レシチン、ゼラチン、ヒアルロン酸などが挙げ
られる。これらの中の１種類か、いくつかを組み合わせ
て使用してもよい。使用の際の濃度は、好ましくは約
０.０１％〜約１０重量％の範囲で、さらに好ましくは
約０.０５％〜約５重量％（ｗ／ｗ）の範囲で用いられ
る。

【００３３】上記の外水相中に浸透圧調節剤を加えても
よい。浸透圧調節剤としては、水溶液とした場合に浸透
圧を示すものであればよい。該浸透圧調節剤の具体例と
しては、例えば、多価アルコール類、一価アルコール
類、単糖類、二糖類およびオリゴ糖あるいはそれらの誘
導体などが挙げられる。上記の多価アルコール類として
は、例えば、グリセリン等の二価アルコール類、アラビ
トール、キシリトール、アドニトール等の五価アルコー
ル類、マンニトール、ソルビトール、ズルシトール等の
六価アルコール類などが挙げられる。これらのうち、六
価アルコール類が好ましく、なかでもマンニトールが特
に好ましい。上記の一価アルコール類としては、例え
ば、メタノール、エタノール、イソプロピルアルコール
等が挙げられ、このうちエタノールが好ましい。上記の
単糖類としては、例えば、アラビノース、キシロース、
リボース、２ーデオキシリボース等の五炭糖類、ブドウ
糖、果糖、ガラクトース、マンノース、ソルボース、ラ
ムノース、フコース等の六炭糖類が挙げられ、このうち
六炭糖類が好ましい。上記のオリゴ糖としては、例え
ば、マルトトリオース、ラフィノース糖の三糖類、スタ
キオース等の四糖類などが挙げられ、このうち三糖類が
好ましい。上記の単糖類、二糖類およびオリゴ糖の誘導
体としては、例えば、グルコサミン、ガラクトサミン、
グルクロン酸、ガラクツロン酸などが挙げられる。これ
らの浸透圧調節剤は単独で使用しても、混合して使用し
てもよい。これらの浸透圧調節剤は、外水相の浸透圧が
生理食塩水の浸透圧の約１／５０〜約５倍、好ましくは
約１／２５〜約３倍となる濃度で用いられる。

【００３４】有機溶媒を除去する方法は、公知の方法に
従って行うことができる。例えば、プロペラ型撹拌機あ
るいはマグネチックスターラーなどで撹拌しながら常圧
もしくは徐々に減圧にして有機溶媒を蒸発させる方法、
ロータリーエヴァポレーターなどを用いて真空度を調節
しながら有機溶媒を蒸発させる方法などが挙げられる。
このようにして得られたマイクロスフィア（マイクロカ
プセルと称されることもある）は遠心分離あるいは濾過
によって分取した後、マイクロスフィアの表面に付着し
ている生理活性ペプチド、パモ酸、薬物保持物質、乳化
剤などを蒸留水で数回繰り返し洗浄し、再び蒸留水など
に分散して凍結乾燥する。製造工程中、粒子同士の凝集
を防ぐために凝集防止剤を加えてもよい。該凝集防止剤
としては、例えば、マンニトール、ラクトース、ブドウ
糖、デンプン類（例、コーンスターチ等）などの水溶性
多糖、グリシン、フィブリン、コラーゲン等のタンパク
質等のタンパク質などが挙げられる。好ましくはマンニ
トールである。

【００３５】また、凍結乾燥後、必要であれば、減圧下
マイクロスフィア同士が融着しない条件内で加温してマ
イクロスフィア中の水分および有機溶媒の除去を行って
もよい。この場合、好ましくは毎分１０〜２０℃の昇温
速度の条件下で示差走査熱量計で求めた生体内分解性ポ
リマーの中間点ガラス転移温度よりも若干高い温度で加
温する。より好ましくは生体内分解性ポリマーの中間点
ガラス転移温度からこれより約３０℃高い温度範囲内で
加温する。とりわけ、生体内分解性ポリマーとして乳酸
−グリコール酸重合体を用いる場合にはその中間点ガラ
ス転移温度以上中間点ガラス転移温度より２０℃高い温
度範囲、好ましくは、中間点ガラス転移温度以上中間点
ガラス転移温度より１０℃高い温度範囲で加温する。加
温時間はマイクロスフィアの量などによって異なるもの
の、一般的にはマイクロスフィア自体が所定の温度に達
した後、約１２時間〜約１６８時間が好ましく、さらに
約４８時間〜約１２０時間が好ましい。特に、約４８時
間〜約９６時間が好ましい。加温方法は、マイクロスフ
ィアの集合が均一に加温できる方法であれば特に限定さ
れない。該加温乾燥方法の好ましい具体例として、例え
ば、恒温槽、流動槽、移動槽あるいはキルン中で加温乾
燥する方法、マイクロ波で加温乾燥する方法などが用い
られる。このなかで恒温槽中で加温乾燥する方法が好ま
しい。

【００３６】（ＩＩ）相分離法本法によってマイクロスフィアを製造する場合には、前
記（Ｉ）の水中乾燥法に記載した油相にコアセルベーシ
ョン剤を撹拌下徐々に加えてマイクロスフィアを析出、
固化させる。該コアセルベーション剤は油相体積の約
０.０１〜約１,０００倍から選ばれる。さらに好ましく
は約０.０５〜約５００倍から選ばれる。特に好ましく
は約０.１〜約２００倍から選ばれる。コアセルベーシ
ョン剤としては、有機溶媒と混和する高分子系、鉱物油
系または植物油系の化合物等で生体内分解性ポリマーを
溶解しないものであれば特に限定はされない。具体的に
は、例えば、シリコン油，ゴマ油，大豆油，コーン油，
綿実油，ココナッツ油，アマニ油，鉱物油，ｎ−ヘキサ
ン，ｎ−ヘプタンなどが用いられる。これらは２種類以
上混合して使用してもよい。このようにして得られたマ
イクロスフィアを分取した後、ヘプタン等で繰り返し洗
浄してコアセルベーション剤等を除去し、減圧乾燥す
る。もしくは前記（I）の水中乾燥法で記載と同様の方
法で洗浄を行った後に凍結乾燥、さらには加温乾燥す
る。

【００３７】（III）噴霧乾燥法本法によってマイクロスフィアを製造する場合には、前
記（Ｉ）の水中乾燥法に記載した油相をノズルを用いて
スプレードライヤー（噴霧乾燥器）の乾燥室内に噴霧
し、極めて短時間内に微粒化液滴内の有機溶媒を揮発さ
せ、マイクロスフィアを調製する。該ノズルとしては例
えば二流体ノズル型，圧力ノズル型，回転ディスク型等
がある。この後、必要であれば前記（Ｉ）の水中乾燥法
で記載と同様の方法で洗浄を行った後に凍結乾燥、さら
には加温乾燥してもよい。上述のマイクロスフィア以外
の剤形としてマイクロスフィアの製造法（Ｉ）の水中乾
燥法に記載した油相を、例えば、ロータリーエヴァポレ
ーターなどを用いて真空度を調節しながら有機溶媒およ
び水を蒸発させて乾固した後、ジェットミルなどで粉砕
して微粒子としてもよい。さらには、粉砕して得た微粒
子をマイクロスフィアの製造法（Ｉ）の水中乾燥法で記
載と同様の方法で洗浄を行った後に凍結乾燥、さらには
加温乾燥してもよい。

【００３８】マイクロスフィアあるいは微粒子は、その
ままあるいはこれを原料物質として種々の剤形に製剤化
し、経口又は非経口で投与することができる。具体的に
は筋肉内、皮下、臓器などへの注射剤または埋め込み
剤、鼻腔、直腸、子宮などへの経粘膜剤、経口剤〔例、
カプセル剤（例、硬カプセル剤、軟カプセル剤等）、顆
粒剤、散剤等の固形製剤、シロップ剤、乳剤、懸濁剤等
の液剤等〕などとして投与することができる。例えば、
マイクロスフィアあるいは微粒子を注射剤とするには、
これらを分散剤（例、Tween８０、ＨＣＯ−６０等の界
面活性剤、ヒアルロン酸ナトリウム、カルボキシメチル
セルロース、アルギン酸ナトリウム等の多糖類など）、
保存剤（例、メチルパラベン、プロピルパラベンな
ど）、等張化剤（例、塩化ナトリウム、マンニトール、
ソルビトール、ブドウ糖、プロリンなど）等と共に水性
懸濁剤とするか、ゴマ油、コーン油などの植物油と共に
分散して油性懸濁剤として実際に使用できる徐放性注射
剤とする。マイクロスフィアあるいは微粒子の粒子径
は、懸濁注射剤として使用する場合にはその分散度、通
針性を満足する範囲であればよく、例えば、平均粒子径
として約０.１〜３００μm の範囲が挙げられる。好ま
しくは、約１〜１５０μm の範囲の平均粒子径である。
さらに好ましくは、約２〜１００μm の範囲の平均粒子
径である。マイクロスフィアあるいは微粒子を無菌製剤
にするには、製造全工程を無菌にする方法、ガンマ線で
滅菌する方法、防腐剤を添加する方法等が挙げられる
が、特に限定されない。

【００３９】本明細書において、マイクロスフィアと
は、生理活性ペプチドと生体内分解性ポリマー基剤とを
含有する微粒子（マイクロパーティクル）であればよ
い。特に球状に近いものが好ましい。その具体例として
は、例えば１個の粒子中に１個の薬物コアーを含有する
マイクロカプセル、１個の粒子中に多数の薬物コアーを
含有する多核マイクロカプセル、または分子状で薬物が
固溶体として基剤に溶解あるいは分散しているような微
粒子等が挙げられる。本発明の徐放性マイクロイスフィ
アは、上記した本発明の製造法で製造し得る。例えば、
上記製造法において、パモ酸と塩を形成し得る塩基性基
を有する生理活性ペプチド（特に、該塩基性基を１個有
する生理活性ペプチド）を用いた場合、粒径約０．０１
〜約１０μｍの生理活性ペプチドの微細なパモ酸塩およ
び生体内分解性ポリマーを含有する徐放性マイクロスフ
ィアを製造することができる。このことによって、予め
生理活性ペプチドのパモ酸塩を形成させた後に生体内分
解性ポリマーと混合して該生理活性ペプチドのパモ酸塩
を含有する従来のマイクロスフィアの製造法よりも生理
活性ペプチドをマイクロスフィア中に高効率で取り込
め、高含量で生理活性ペプチドを含有するマイクロスフ
ィアを製造できる。

【００４０】一方、パモ酸と塩を形成し得る塩基性基を
２個以上有する生理活性ペプチドと遊離のカルボキシル
基を有する生体内分解性ポリマーを用いた場合、生理活
性ペプチド、パモ酸またはその塩および生体内分解性ポ
リマーの三者から形成された同様に微細な複合体または
塩を含有する徐放性マイクロスフィアを製造することが
できる。ここでいう三者から成る塩とは、生理活性ペプ
チドがパモ酸と生体内分解性ポリマーの両者との間に可
逆的な結合を介して一体となっていればよく、正塩、酸
性塩、塩基性塩、複塩、錯塩等いずれに属する塩であっ
てもよい。また、これら三者が形成しうる複合体のよう
なものも含む。該塩は、三者が分子分散あるいはこれに
近似の状態（例えば、溶液状態）で乳化混合することに
より形成され得るものである。この場合、三者の塩を含
有する本発明のマイクロスフィア中のパモ酸／生理活性
ペプチドのモル比が、従来法で得られるマイクロスフィ
ア中での生理活性ペプチドのパモ酸塩におけるパモ酸／
生理活性ペプチドのモル比よりも明らかに小さいという
特徴を有し、このことは該塩が従来の生理活性ペプチド
のパモ酸塩を用いるマイクロスフィア中のペプチドとは
異なる新規な塩であることを示している。本発明の徐放
性マイクロスフィアは生理活性ペプチドを高含量で含有
しており、製剤からの生理活性ペプチドの徐放性は、生
理活性ペプチドまたはそのパモ酸塩の解離、溶解特性並
びに生体内分解性ポリマーの分解速度に依存する。

【００４１】すなわち、本発明は、（１）粒径約０．０
１〜約１０μｍの生理活性ペプチドのパモ酸塩および生
体内分解性ポリマーを含有する徐放性マイクロスフィア
（Ａ）、および（２）生理活性ペプチド、パモ酸または
その塩および生体内分解性ポリマーの三者から形成され
る複合体または塩を含有する徐放性マイクロスフィア
（Ｂ）を提供する。これら徐放性マイクロスフィア
（Ａ）および（Ｂ）はいずれも、生理活性ペプチド１モ
ルに対してパモ酸を約０、８モル以下、好ましくは約
０．１〜約０．８モル、より好ましくは約０．２〜０．
８モル以下、さらに好ましくは約０．３〜０．７モルの
割合で含有する徐放性マイクロスフィアである。本発明
の徐放性マイクロスフィア（Ａ）において、生理活性ペ
プチド、パモ酸および生体内分解性ポリマーとしては、
それぞれ前記と同様のものが用いられる。生理活性ペプ
チドとしては、パモ酸と塩を形成し得る塩基性基を有す
る生理活性ペプチドが好ましく、特に、該塩基性基を１
個有する生理活性ペプチドが好適である。また、一般式
〔Ｉｂ〕で表されるＬＨ−ＲＨアゴニストが好ましく、
後述する実施例１１に示す化合物Ｃ：５-oxo-Ｐro−Ｈi
s−Ｔrp−Ｓer−Ｔyr−ＤＬeu−Ｌeu−Ａrg−Ｐro−NH-
C₂H₅またはその塩（例、酢酸塩）が具体例として挙げら
れる。生体内分解性ポリマーとしては、ポリ乳酸または
α−ヒドロキシカルボン酸重合体が好ましく、特に、ポ
リ乳酸が好適である。ポリ乳酸の場合、重量平均分子量
としては、例えば、１０，０００〜６０，０００が好ま
しく、特に、１５，０００〜５０，０００が好適であ
る。α−ヒドロキシカルボン酸重合体の場合、乳酸とグ
リコール酸との組成比としては、例えば、１００／０〜
４０／６０（モル％）が好ましい。重合体の重量平均分
子量としては、例えば、５,０００〜８０,０００が好ま
しい。

【００４２】本発明の徐放性マイクロスフィア（Ａ）に
おける生理活性ペプチドのパモ酸塩の粒径は、通常約
０．０１〜約１０μｍ、好ましくは約０．０２〜約５μ
ｍ、さらに好ましくは約０．０２〜約４μｍである。本
発明の徐放性マイクロスフィア（Ａ）において、通常、
生理活性ペプチド１モルに対してパモ酸は約０．８モル
以下、好ましくは約０．１〜０．８モル、さらに好まし
くは約０．２〜約０．８モル、特に好ましくは約０．３
〜約０．７モルの割合で含有される。本発明の徐放性マ
イクロスフィア（Ａ）における生理活性ペプチド、パモ
酸またはその塩および生体内分解性ポリマーの配合量
は、生理活性ペプチドの種類によって異なり、また所望
の薬理効果および効果の持続期間などによっても選択さ
れるが、生理活性ペプチドの割合は、マイクロスフィア
全体に対して、通常約１５重量％以上、好ましくは約１
５〜８５重量％、より好ましくは約２０〜約８０重量
％、さらに好ましくは約２０〜５０重量％である。特
に、生理活性ペプチドが５-oxo-Ｐro−Ｈis−Ｔrp−Ｓe
r−Ｔyr−ＤＬeu−Ｌeu−Ａrg−Ｐro−NH-C₂H₅またはそ
の塩（例、酢酸塩）である場合、該生理活性ペプチドの
含有量は、好ましくは約１５〜約３０重量％である。本
発明の徐放性マイクロスフィア（Ａ）におけるパモ酸ま
たはその塩の含有量は、マイクロスフェア全体に対し
て、通常約０．１〜約２５重量％、好ましくは約０．５
〜約１５重量％、さらに好ましくは約１〜約１０重量％
である。本発明の徐放性マイクロスフィア（Ａ）におけ
る生理活性ペプチドのパモ酸塩の含有量は、マイクロス
フィア全体に対して、通常約１５（または約１５．１）
〜約９５重量％、好ましくは約２０〜約９０重量％であ
る。本発明の徐放性マイクロスフィア（Ａ）における生
体内分解性ポリマーの含有量は、マイクロスフェア全体
に対して、通常約１５〜約８５重量％、好ましくは約３
０〜約６０重量％である。本発明の徐放性マイクロスフ
ィア（Ａ）において、通常、生理活性ペプチドはパモ酸
と塩を形成しているが、一部の生理活性ペプチドが塩を
形成しない状態で存在していてもよい。

【００４３】本発明の徐放性マイクロスフィア（Ｂ）に
おいて、生理活性ペプチド、パモ酸および生体内分解性
ポリマーとしては、それぞれ前記と同様のものが用いら
れる。生理活性ペプチドとしては、パモ酸と塩を形成し
得る塩基性基を２個以上有する生理活性ペプチドが好ま
しい。なかでも、一般式〔Ｉａ〕で表されるＬＨ−ＲＨ
アンタゴニストが好ましく、特に、後述する実施例１に
示す化合物Ａが好適である。生体内分解性ポリマーとし
ては、α−ヒドロキシカルボン酸重合体が好ましく、特
に、乳酸−グリコール酸重合体が好適である。乳酸とグ
リコール酸との組成比としては、例えば、１００/０〜
４０/６０（モル％）が好ましい。重合体の重量平均分
子量としては、例えば、５,０００〜８０,０００が好ま
しい。本発明の徐放性マイクロスフィア（Ｂ）における
生理活性ペプチドのパモ酸塩の粒径は、通常約０．０１
〜約１０μｍ、好ましくは約０．０２〜約５μｍ、さら
に好ましくは約０．０２〜約４μｍである。本発明の徐
放性マイクロスフィア（Ｂ）において、通常、生理活性
ペプチド１モルに対してパモ酸は約０．８モル以下、好
ましくは約０．１〜０．８モル、さらに好ましくは約
０．２〜約０．８モル、特に好ましくは約０．３〜約
０．７モルの割合で含有される。

【００４４】本発明の徐放性マイクロスフィア（Ｂ）に
おける生理活性ペプチド、パモ酸またはその塩および生
体内分解性ポリマーの配合量は、生理活性ペプチドの種
類によって異なり、また所望の薬理効果および効果の持
続期間などによっても選択されるが、生理活性ペプチド
の含有量は、生理活性ペプチド、パモ酸またはその塩お
よび生体内分解性ポリマーの三者の和としてのマイクロ
スフィア全体に対して、通常約１５重量％以上、好まし
くは約１５〜８５重量％、より好ましくは約２０〜約８
０重量％、さらに好ましくは約３０〜８０重量％、特に
好ましくは約４０〜８０重量％である。本発明の徐放性
マイクロスフィア（Ｂ）におけるパモ酸またはその塩の
含有量は、生理活性ペプチド、パモ酸またはその塩およ
び生体内分解性ポリマーの三者の和としてのマイクロス
フィア全体に対して、通常約０．１〜約２５重量％、好
ましくは約０．５〜約１５重量％、さらに好ましくは約
１〜約１０重量％である。本発明の徐放性マイクロスフ
ィア（Ｂ）における生体内分解性ポリマーの含有量は、
生理活性ペプチド、パモ酸またはその塩および生体内分
解性ポリマーの三者の和としてのマイクロスフィア全体
に対して、通常約１５〜約８５重量％、好ましくは約３
０〜約６０重量％である。本発明の徐放性マイクロスフ
ィア（Ｂ）において、通常、生理活性ペプチドはパモ酸
またはその塩および生体内分解性ポリマーとの３者の塩
を形成しているが、一部の生理活性ペプチドが塩を形成
しない状態で存在していてもよい。生理活性ペプチドの
パモ酸塩の粒径は、調製過程の油相あるいはマイクロス
フィア割断面を光学顕微鏡観察するか、あるいはマイク
ロスフィア割断面（切片）を電子顕微鏡観察して測定す
ることができる。

【００４５】本発明の徐放性マイクロスフィアは、各種
徐放性製剤として、低毒性でヒトまたは哺乳動物（例、
サル、牛、豚、犬、ネコ、マウス、ラット、ウサギ等）
に対して安全に用いることができる。徐放性製剤の活性
成分としての投与量は、主薬である生理活性ペプチドの
種類と含量、剤形、生理活性ペプチド放出の持続時間、
対象疾病、対象動物、投与方法などによって種々異なる
が、生理活性ペプチドの有効量であればよい。主薬であ
る生理活性ペプチドの１回当たりの投与量としては、例
えば、徐放性製剤が１カ月製剤である場合、好ましく
は、成人１人（体重５０ｋｇとして）当たり約０.００
１mg〜１００mg／kg体重の範囲から適宜選ぶことができ
る。さらに好ましくは約０.０１mg〜５０mg／kg体重の
範囲から、特に好ましくは約０.０５mg〜１０mg／kg体
重の範囲から適宜選ぶことができる。

【００４６】より具体的には、前述の一般式〔Ｉａ〕で
表わされるＬＨ−ＲＨアンタゴニストまたは一般式〔Ｉ
ｂ〕で表わされるＬＨ−ＲＨアゴニストを生理活性ペプ
チドとして用いる場合、例えば、前立腺癌，前立腺肥大
症，子宮内膜症，子宮筋腫，子宮線維腫，思春期早発
症，乳癌，膀胱癌，子宮頸部癌，慢性リンパ性白血病，
慢性骨髄性白血病，大腸癌，胃炎，ホジキン病，悪性黒
色腫，移転，多発性骨髄腫，非ホジキン性リンパ腫，非
小細胞肺癌，卵巣癌，消化性潰瘍，全身性真菌感染症，
小細胞肺癌，心弁膜症，乳腺症，多嚢胞性卵巣，不妊，
慢性無***症，婦人における適性***誘発，ざそう（ア
クネ），無月経（例、続発性無月経），卵巣および***
の嚢胞性疾患（多嚢胞性卵巣を含む），婦人科系の癌、
卵巣性高アンドロゲン血症および多毛症，胸腺幼若化を
介したＴ細胞産生によるＡＩＤＳ，男性性犯罪者の治療
のための男性避妊等のホルモン依存性疾患の治療・予防
剤、避妊，月経前症候群（ＰＭＳ）の症状軽減のための
薬剤、体外受精（ＩＶＦ）用剤などとして、特に、前立
腺癌，前立腺肥大症，子宮内膜症，子宮筋腫，子宮線維
腫，思春期早発症などの治療・予防剤や避妊薬として使
用することができる。該生理活性ペプチドの投与量は、
その剤形、所望の薬物放出持続時間、対象疾病、対象動
物などによって種々異なるが、薬物の有効量であればよ
い。薬物の１回当たりの投与量としては、例えば徐放性
製剤癌１カ月製剤である場合、好ましくは、成人１人当
たり約０.００５mg〜約１０mg／kg体重の範囲から適宜
選ぶことができる。さらに好ましくは、約０.０２mg〜
約５mg／kg体重の範囲から適宜選ぶことができる。１回
当たりの徐放性製剤におけるマイクロスフィア投与量は
成人１人当たり好ましくは、約０.００５mg〜５０mg／k
g体重の範囲から適宜選ぶことができる。さらに好まし
くは約０.０２mg〜３０mg／kg体重の範囲から適宜選ぶ
ことができる。投与回数は、数週間に１回、１か月に１
回、あるいは数か月に１回等、主薬である生理活性ペプ
チドの種類と含量、剤形、生理活性ペプチド放出の持続
時間、対象疾病、対象動物などによって適宜選ぶことが
できる。

【００４７】

【実施例】以下に実施例、比較例および実験例を挙げて
本発明をさらに具体的に説明するが、これらは本発明を
限定するものではない。

【実施例１】Ｎ−(Ｓ)−２−テトラヒドロフロイル−Ｇ
ly−Ｄ２Ｎal−Ｄ４ＣlＰhe−Ｄ３Ｐal−Ｓer−ＮＭeＴ
yr−ＤＬys（Ｎic）−Ｌeu−Ｌys（Ｎisp)−Ｐro−ＤＡ
laＮＨ₂（以下、化合物Ａと称する）の酢酸塩（ＴＡＰ
社製）９７２mgと乳酸−グリコール酸共重合体（乳酸／
グリコール酸＝５０／５０（モル％）、重量平均分子量
６,１５０、数平均分子量２,４００、末端基定量による
数平均分子量２,３００、和光純薬工業製）１０４０mg
とをジクロロメタン３mlに溶解した液に、パモ酸１００
mgを溶解したピリジン２.７mlを加えて（添加パモ酸／
化合物Ａモル比０.５），小型ホモジナイザーで６０秒
間乳化混合し、Ｓ／Ｏサスペンションを得た。このサス
ペンションを１８℃に冷却した後、予め１８℃に調節し
ておいた５％マンニトール含有０.１重量％ポリビニル
アルコール（ＥＧ−４０、日本合成化学製）水溶液４０
０ml中に注入し、タービン型ホモミキサーを用い、７,
０００rpm でＳ／Ｏ／Ｗエマルションとした。このＳ／
Ｏ／Ｗエマルションを室温で３時間撹拌してジクロロメ
タンを揮散させ、油相を固化させた後、遠心分離機（０
５ＰＲ−２２、日立製作所）を用いて２,０００rpm で
捕集した。これを再び蒸留水に分散後、さらに遠心分離
を行い、遊離薬物等を洗浄した。捕集されたマイクロカ
プセルは少量の蒸留水を加えて再分散後、凍結乾燥して
粉末として得られた。マイクロカプセル中への化合物Ａ
の封入率は９０.２％で、マイクロカプセル中の化合物
Ａ含量およびパモ酸／化合物Ａモル比はそれぞれ３８.
６重量％、０.４９であった。

【００４８】

【実施例２】実施例１中の乳酸−グリコール酸共重合体
を乳酸／グリコール酸＝５０／５０（モル％）、重量平
均分子量１０,１００、数平均分子量３,７２０、末端基
定量による数平均分子量３,５００の乳酸−グリコール
酸共重合体に変更し、ジクロロメタン量を３.５mlに変
更した以外実施例１と同様にしてマイクロカプセルを得
た。この際の添加パモ酸／化合物Ａモル比は０.５であ
った。マイクロカプセル中への化合物Ａの封入率は９
１.８％で、マイクロカプセル中の化合物Ａ含量およ
びパモ酸／化合物Ａモル比はそれぞれ３９.２重量％、
０.５１であった。

【００４９】

【実施例３】実施例１中の乳酸−グリコール酸共重合体
を乳酸／グリコール酸＝５０／５０（モル％）、重量平
均分子量１２,７００、数平均分子量４,７８０、末端基
定量による数平均分子量４,９００の乳酸−グリコール
酸共重合体に変更し、ジクロロメタン量を３.８mlに変
更した以外は実施例１と同様にしてマイクロカプセルを
得た。この際の添加パモ酸／化合物Ａモル比は０.５で
あった。マイクロカプセル中への化合物Ａの封入率は８
９.９％で、マイクロカプセル中の化合物Ａ含量および
パモ酸／化合物Ａモル比はそれぞれ３８.４重量％、０.
５３であった。

【実施例４】実施例１中のパモ酸量およびピリジン量を
２００mgと５mlにそれぞれ変更した以外は実施例３と同
様にしてマイクロカプセルを得た。この際の添加パモ酸
／化合物Ａモル比は１.０であった。マイクロカプセル
中への化合物Ａの封入率は９４.１％で、マイクロカプ
セル中の化合物Ａ含量およびパモ酸／化合物Ａモル比は
それぞれ３８.３重量％、０.６３であった。

【００５０】

【実施例５】化合物Ａの酢酸塩（ＴＡＰ社製）９７２mg
と乳酸−グリコール酸共重合体（乳酸／グリコール酸＝
５０／５０（モル％）、重量平均分子量１２,７００、
数平均分子量４,７８０、末端基定量による数平均分子
量４,９００、和光純薬工業製）１０４０mgとをジクロ
ロメタン４mlに溶解した液に、パモ酸ジナトリウム１
１２mgを溶解した蒸留水０.９mlを加えて（添加パモ酸
／化合物Ａモル比０.５），小型ホモジナイザーで６０
秒間乳化混合し、Ｓ／Ｏサスペンション（またはＷ／Ｏ
エマルション）を得た。このサスペンションを１８℃に
冷却した後、予め１８℃に調節しておいた５％マンニト
ール含有０.１重量％ポリビニルアルコール（ＥＧ−４
０、日本合成化学製）水溶液４００ml中に注入し、ター
ビン型ホモミキサーを用い、７,０００rpm でＳ／Ｏ／
Ｗエマルションとした。このＳ／Ｏ／Ｗエマルションを
室温で３時間撹拌してジクロロメタンを揮散させ、油相
を固化させた後、遠心分離機（０５ＰＲ−２２、日立製
作所）を用いて２,０００rpmで捕集した。これを再び蒸
留水に分散後、さらに遠心分離を行い、遊離薬物等を洗
浄した。捕集されたマイクロカプセルは少量の蒸留水を
加えて再分散後、凍結乾燥して粉末として得られた。マ
イクロカプセル中への化合物Ａの封入率は８９.８％
で、マイクロカプセル中の化合物Ａ含量およびパモ酸／
化合物Ａモル比はそれぞれ３８.４重量％、０.５６であ
った。

【００５１】

【実施例６】実施例５中の乳酸−グリコール酸共重合体
を乳酸／グリコール酸＝６５／３５（モル％）、重量平
均分子量１２,５００、数平均分子量４,１７０、末端基
定量による数平均分子量４,０００の乳酸−グリコール
酸共重合体に変更し、ジクロロメタン量を４.５mlに変
更した以外は実施例５と同様にしてマイクロカプセルを
得た。この際の添加パモ酸／化合物Ａモル比は０.５で
あった。マイクロカプセル中への化合物Ａの封入率は８
９.６％で、マイクロカプセル中の化合物Ａ含量および
パモ酸／化合物Ａモル比はそれぞれ３８.３重量％、０.
５７であった。

【００５２】

【実施例７】化合物Ａの酢酸塩（ＴＡＰ社製）４.０６
ｇと乳酸−グリコール酸共重合体（乳酸／グリコール酸
＝５０／５０（モル％）、重量平均分子量１２,７０
０、数平均分子量４,７８０、末端基定量による数平均
分子量４,９００、和光純薬工業製）４ｇとをジクロロ
メタン１６mlに溶解した液に、パモ酸ジナトリウム０.
４５ｇを溶解した蒸留水３.６mlを加えて（添加パモ酸
／化合物Ａモル比０.５），小型ホモジナイザーで６０
秒間乳化混合し、Ｓ／Ｏサスペンション（またはＷ／Ｏ
エマルション）を得た。このサスペンションを１８℃に
冷却した後、予め１８℃に調節しておいた５％マンニト
ール含有０.１重量％ポリビニルアルコール（ＥＧ−４
０、日本合成化学製）水溶液１６００ml中に注入し、タ
ービン型ホモミキサーを用い、７,０００rpm でＳ／Ｏ
／Ｗエマルションとした。このＳ／Ｏ／Ｗエマルション
を室温で３時間撹拌してジクロロメタンを揮散させ、油
相を固化させた後、遠心分離機（０５ＰＲ−２２、日立
製作所）を用いて２,０００rpmで捕集した。これを再び
蒸留水に分散後、さらに遠心分離を行い、遊離薬物等を
洗浄した。捕集されたマイクロカプセルは少量の蒸留水
を加えて再分散後、凍結乾燥して粉末として得られた。
その後、４０℃の恒温槽中で９６時間減圧乾燥した。得
られた平均粒径２２μｍのマイクロカプセル中への化合
物Ａの封入率は９３.８％で、マイクロカプセル中の化
合物Ａ含量およびパモ酸／化合物Ａモル比はそれぞれ４
１.０重量％、０.５２であった。

【００５３】

【実施例８】ＮＡc−Ｄ２Ｎal−Ｄ４ＣlＰhe−Ｄ３Ｐal
−Ｓer−ＮＭeＴyr−ＤＬys（Ｎic)-Leu−Ｌys（Ｎisp)
−Ｐro−ＤＡlaＮＨ₂（以下、化合物Ｂと称する）の酢
酸塩（ＴＡＰ社製）２ｇと乳酸−グリコール酸共重合体
（乳酸／グリコール酸＝５０／５０（モル％）、重量平
均分子量１２,７００、数平均分子量４,７８０、末端基
定量による数平均分子量４,９００、和光純薬工業製）
２ｇとをジクロロメタン９mlに溶解した液に、パモ酸ジ
ナトリウム０．２２４ｇを溶解した蒸留水１.８mlを加
えて（化合物Ｂ酢酸塩中の化合物Ｂ量を８６.７％とし
て換算した添加パモ酸／化合物Ｂモル比０.５），小型
ホモジナイザーで６０秒間乳化混合し、Ｓ／Ｏサスペン
ション（またはＷ／Ｏエマルション）を得た。このサス
ペンションを１８℃に冷却した後、予め１８℃に調節し
ておいた５％マンニトール含有０.１重量％ポリビニル
アルコール（ＥＧ−４０、日本合成化学製）水溶液８０
０ml中に注入し、タービン型ホモミキサーを用い、７,
０００rpm でＳ／Ｏ／Ｗエマルションとした。このＳ／
Ｏ／Ｗエマルションを室温で３時間撹拌してジクロロメ
タンを揮散させ、油相を固化させた後、遠心分離機（０
５ＰＲ−２２、日立製作所）を用いて２,０００rpm で
捕集した。これを再び蒸留水に分散後、さらに遠心分離
を行い、遊離薬物等を洗浄した。捕集されたマイクロカ
プセルは少量の蒸留水を加えて再分散後、凍結乾燥して
粉末として得られた。マイクロカプセル中への化合物Ｂ
の封入率は９８.９％で、マイクロカプセル中の化合物
Ｂ含量およびパモ酸／化合物Ｂモル比はそれぞれ４３.
６重量％、０.５２であった。

【００５４】

【実施例９】化合物Ａの酢酸塩（ＴＡＰ社製）１.０１
２ｇとパモ酸ジナトリウム０.１１２ｇ（添加パモ酸／
化合物Ａモル比０.５）とをメタノール６mlに溶解した
液に、乳酸−グリコール酸共重合体（乳酸／グリコール
酸＝５０／５０（モル％）、重量平均分子量１８,７０
０、数平均分子量６,１８０、末端基定量による数平均
分子量６,０００、和光純薬工業製）０.４７ｇを溶解し
たジクロロメタン１５mlを加えて均一溶液を得た。この
均一溶液をロータリーエヴァポレーターで有機溶媒を除
去して乾固した後、７５μm 以下に粉砕した。粉砕して
得た微粉末を再び蒸留水に分散後、さらに遠心分離
（３,０００rpm）を行い、遊離薬物等を洗浄した。捕集
された微粉末は少量の蒸留水を加えて再分散後、凍結乾
燥して粉末として得られた。微粉末中への化合物Ａの封
入率は９４.４％で、微粉末中の化合物Ａ含量およびパ
モ酸／化合物Ａモル比はそれぞれ５６.５重量％、０.６
０であった。

【００５５】

【実施例１０】化合物Ａの酢酸塩（ＴＡＰ社製）０.５
０６ｇとパモ酸ジナトリウム０.０５６ｇ（添加パモ酸
／化合物Ａモル比０.５）とをメタノール３mlに溶解し
た液に、乳酸−グリコール酸共重合体（乳酸／グリコー
ル酸＝５０／５０（モル％）、重量平均分子量１２,７
００、数平均分子量４,７８０、末端基定量による数平
均分子量４,９００、和光純薬工業製）０.０５６ｇを溶
解したジクロロメタン６mlを加えて均一溶液を得た。こ
の均一溶液をロータリーエヴァポレーターで有機溶媒を
除去して乾固した後、７５μm 以下に粉砕した。粉砕し
て得た微粉末を再び蒸留水に分散後、さらに遠心分離
（３,０００rpm）を行い、遊離薬物等を洗浄した。捕集
された微粉末は少量の蒸留水を加えて再分散後、凍結乾
燥して粉末として得られた。微粉末中への化合物Ａの封
入率は９４.６％で、微粉末中の化合物Ａ含量およびパ
モ酸／化合物Ａモル比はそれぞれ７５.７重量％、０.６
０であった。

【００５６】

【比較例１】９.４２２５ｇの化合物Ａの酢酸塩を溶解
した水溶液に、１.９４２ｇのパモ酸を溶解した水酸化
ナトリウム水溶液溶液を撹拌下滴下し（添加パモ酸／化
合物Ａモル比１.０）、沈殿物として化合物Ａのパモ酸
塩を得た。得られた沈殿物を大過剰の水で洗浄後、凍結
乾燥した。ＨＰＬＣでそれぞれを定量した結果、凍結乾
燥粉末中のパモ酸／化合物Ａモル比は１.０８であっ
た。

【比較例２】５４.０３mgのパモ酸ジナトリウム塩を溶
解した水溶液に２３５.５mgの化合物Ａの酢酸塩を溶解
した水溶液を撹拌下滴下し（添加パモ酸／化合物Ａモル
比１.０）、沈殿物として化合物Ａのパモ酸塩を得た。
得られた沈殿物を大過剰の水で洗浄後、凍結乾燥した。
ＨＰＬＣでそれぞれを定量した結果、凍結乾燥粉末中の
パモ酸／化合物Ａモル比は１.１７であった。

【００５７】

【比較例３】２７.０２mgのパモ酸ジナトリウム塩を溶
解した水溶液に２４５.２mgの化合物Ａの酢酸塩を溶解
した水溶液を撹拌下滴下し（添加パモ酸／化合物Ａモル
比０.５）、沈殿物として化合物Ａのパモ酸塩を得た。
得られた沈殿物を大過剰の水で洗浄後、凍結乾燥した。
ＨＰＬＣでそれぞれを定量した結果、凍結乾燥粉末中の
パモ酸／化合物Ａモル比は１.２６であった。

【比較例４】比較例１の化合物Ａのパモ酸塩を分級し、
平均粒子径１４μm のパモ酸塩を用いて以下のようにマ
イクロカプセルを調製した。乳酸−グリコール酸共重合
体（乳酸／グリコール酸＝５０／５０（モル％）、重量
平均分子量１２,７００、数平均分子量４,７８０、末端
基定量による数平均分子量４,５００）１.０４ｇをジク
ロロメタン４mlに溶解した液に化合物Ａのパモ酸塩（パ
モ酸／化合物Ａモル比１.０８）を加え、小型ホモジナ
イザーで乳化してＳ／Ｏサスペンションとし、このサス
ペンションを用いて以下実施例１と同様にしてマイクロ
カプセルを得た。マイクロカプセル中への化合物Ａの封
入率は１５％と低値で、マイクロカプセル中の化合物Ａ
含量は６.１重量％であった。マイクロカプセル中での
パモ酸／化合物Ａモル比は１.１２と封入前と同値であ
ったことから、化合物Ａはパモ酸塩のままでマイクロカ
プセルに封入され、乳酸−グリコール酸重合体の塩とは
なっていないと判断できる。

【００５８】

【比較例５】実施例１中のパモ酸およびピリジンを用い
なかった以外実施例３と同様にしてマイクロカプセルを
得た。マイクロカプセル中への化合物Ａの封入率は４
１.１％で、マイクロカプセル中の化合物Ａ含量は１８.
５重量％であった。

【比較例６】１０８.０６mgのパモ酸ジナトリウム塩を
溶解した水溶液に２２１.４mgの化合物Ｂの酢酸塩を溶
解した水溶液を撹拌下滴下し（添加パモ酸／化合物Ｂモ
ル比２.０）、沈殿物として化合物Ｂのパモ酸塩を得
た。得られた沈殿物を大過剰の水で洗浄後、凍結乾燥し
た。ＨＰＬＣでそれぞれを定量し、化合物Ｂ酢酸塩中の
化合物Ｂ量を８６.７％として算出すると、凍結乾燥粉
末中のパモ酸／化合物Ｂモル比は１.１１であった。

【００５９】

【実験例１】実施例１〜７で得られた各マイクロカプセ
ルあるいは比較例１で得られた化合物Ａパモ酸塩を２５
〜７５μm に分級したもの約６mgをそれぞれ０.５mlの
分散媒（０.２５mgのカルボキシメチルセルロース，０.
５mgのポリソルベート８０，２５mgのマンニトールを溶
解した蒸留水）に分散して６〜８週齢雄性ＳＤラットの
背部皮下に２２Ｇ注射針で投与した。投与後ラットを屠
殺して投与部位に残存するマイクロカプセルあるいはパ
モ酸塩を取り出し、この中の化合物Ａを定量したその結
果を〔表１〕に示す。

【００６０】

【表１】

【００６１】

【実施例１１】5-oxo-Ｐro−Ｈis−Ｔrp−Ｓer−Ｔyr−
ＤＬeu−Ｌeu−Ａrg−Ｐro−ＮＨ−Ｃ_２Ｈ_５の酢酸塩
（武田薬品工業製、以下化合物Ｃと称する）５００ｍｇ
を溶解した蒸留水０．４５mlにポリ乳酸（重量平均分子
量５０，０００、数平均分子量２５，０００、多木化学
製）１８００mgをジクロロメタン７．５mlに溶解した液
を加えて小型ホモジナイザーで６０秒間乳化混合して、
Ｗ／Ｏエマルションとした後、このＷ／Ｏエマルション
にパモ酸ジナトリウム８５mgを溶解したメタノール０．
８５mlを加えて小型ホモジナイザーで再度６０秒間混合
し、Ｓ／Ｏサスペンションを得た。このサスペンション
を１８℃に冷却した後、予め１８℃に調節しておいた５
％マンニトール含有０．１重量％ポリビニルアルコール
（ＥＧ−４０、日本合成化学製）水溶液４００ml中に注
入し、タービン型ホモミキサーを用い、７，０００ｒｐ
ｍでＳ／Ｏ／Ｗエマルションとした。このＳ／Ｏ／Ｗエ
マルションを室温で３時間撹拌してジクロロメタンを揮
散させ、油相を固化させた後、遠心分離機（０５ＰＲ−
２２、日立製作所）を用いて２，０００ｒｐｍで捕集し
た。これを再び蒸留水に分散後、さらに遠心分離を行
い、遊離薬物等を洗浄した。捕集されたマイクロカプセ
ルは少量の蒸留水を加えて再分散後、凍結乾燥して粉末
として得られた。マイクロカプセル中への化合物Ｃの封
入率は８６.４％で、マイクロカプセル中の化合物Ｃ含
量およびパモ酸／化合物Ｃモル比はそれぞれ１８．２重
量％、０．５０であった。

【００６２】

【実施例１２】実施例１１中のポリ乳酸を重量平均分子
量１７，０００、数平均分子量５，０００、末端基定量
による数平均分子量５，５００のポリ乳酸（和光純薬工
業製）１５００ｍｇに、ジクロロメタン量を８ｍｌに、
パモ酸ジナトリウムのメタノール溶液を蒸留水溶液
（１．１ml）にそれぞれ変更した以外は実施例１１と同
様にしてマイクロカプセルを得た。マイクロカプセル中
への化合物Ｃの封入率は９２.８％で、マイクロカプセ
ル中の化合物Ｃ含量およびパモ酸／化合物Ｃモル比はそ
れぞれ２１．９重量％、０．７８であった。

【実施例１３】化合物Ｃ１０００mgを溶解した蒸留水
０.９mlにポリ乳酸（重量平均分子量２４,３００、数平
均分子量７,７９０、末端基定量による数平均分子量８,
０００、和光純薬工業製）３６００mgをジクロロメタン
８mlに溶解した液を加えて小型ホモジナイザーで６０秒
間乳化混合してＷ／Ｏエマルションとして後、このＷ／
Ｏエマルションにパモ酸ジナトリウム２０４mgを溶解し
たメタノール２mlを加えて小型ホモジナイザーで再度６
０秒間乳化混合し、ほとんど澄明でかすかに濁った黄色
の溶液を得た。この黄色溶液を１８℃に冷却した後、予
め１８℃に調節しておいた５％マンニトール含有０.１
重量％ポリビニルアルコール（ＥＧ−４０、日本合成化
学製）水溶液８００ml中に注入し、タービン型ホモミキ
サーを用い、７,０００rpm でＯ／Ｗエマルションとし
た。このＯ／Ｗエマルションを室温で３時間撹拌してジ
クロロメタンを揮散させ、油相を固化させた後、遠心分
離機（０５ＰＲ−２２、日立製作所）を用いて２,００
０rpm で捕集した。これを再び蒸留水に分散後、さらに
遠心分離を行い、遊離薬物等を洗浄した。捕集されたマ
イクロカプセルは少量の蒸留水を加えて再分散後、凍結
乾燥して粉末として得られた。得られた平均粒子径２５
μｍのマイクロカプセル中への化合物Ｃの封入率は１０
０．０％で、マイクロカプセル中の化合物Ｃ含量および
パモ酸／化合物Ｃモル比はそれぞれ２０．９重量％、
０．５７であった。

【００６３】

【実施例１４】実施例１３中のポリ乳酸を重量平均分子
量４０,０００、数平均分子量２６,７００のポリ乳酸
（多木化学製）に、ジクロロメタン量を９mlにそれぞれ
変更した以外は実施例１３と同様にして得た黄色溶液を
用いて、以下実施例１３と同様の操作でマイクロカプセ
ルを得た。マイクロカプセル中への化合物Ｃの封入率は
１００．３％で、マイクロカプセル中の化合物Ｃ含量お
よびパモ酸／化合物Ｃモル比はそれぞれ２１．０重量
％、０．５６であった。

【実施例１５】ポリ乳酸量、ジクロロメタン量、パモ酸
ジナトリウム量およびメタノール量をそれぞれ５，００
０mg、１０ml、１３０mgおよび１．３mlに変更して得た
Ｗ／Ｏエマルションを用いた以外は実施例１３と同様の
操作でマイクロカプセルを得た。得られたマイクロカプ
セルを５５℃の恒温槽中で１２０時間減圧乾燥した。マ
イクロカプセル中への化合物Ｃの封入率は１００．０％
でマイクロカプセル中の化合物Ｃ含量およびパモ酸／化
合物Ｃモル比はそれぞれ１６．４重量％、０．３９であ
った。

【比較例７】実施例１１中のパモ酸ジナトリウムのメタ
ノール溶液を添加しなかった以外は実施例１１と同様に
してマイクロカプセルを得た。得られたマイクロカプセ
ル中の化合物含量は７．７重量％と低い値であった。

【００６４】

【比較例８】５００mgのパモ酸ジナトリウム塩を溶解し
た水溶液に２９３６．５mgの化合物Ｃを溶解した水溶液
を撹拌下、滴下し（添加パモ酸／化合物Ｃモル比０．
５）、沈殿物としてパモ酸塩を得た。得られた沈殿物を
大過剰の水で洗浄後、凍結乾燥した。ＨＰＬＣでそれぞ
れを定量した結果、凍結乾燥粉末中のパモ酸／化合物ｃ
モル比は０．８７であった、これを分級して得た平均粒
子径１０μm のパモ酸塩を化合物Ｃが実施例１１と同量
になるようにして添加し、化合物Ｃの水溶液およびパモ
酸ジナトリウムのメタノール溶液を添加しなかった以外
は実施例１１と同様にしてマイクロカプセルを得た。す
なわち、別途調製した化合物Ｃのパモ酸塩を分散した油
相を用いて水中乾燥法でマイクロカプセルを調製した。
マイクロカプセル中の化合物Ｃ含量は７．４重量％と低
い値であった。

【比較例９】実施例１２中のパモ酸ジナトリウムの蒸留
水溶液を添加しなかった以外は実施例１２と同様にして
マイクロカプセルを得た。得られたマイクロカプセル中
の化合物含量は１１．３重量％と低い値であった。

【００６５】

【発明の効果】本発明によれば、生理活性ペプチドの含
量が高く、生理活性ペプチドの放出性を制御する徐放性
マイクロスフィアを提供することができる。

───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (51)Int.Cl.⁶ 識別記号ＦＩＡ６１Ｋ 38/22 Ａ６１Ｋ 37/30 ＡＣＬ 38/11 ＡＣＪ 37/32 38/27 ＡＣＺ 37/34 ＡＣＪ 38/24 37/36 ＡＣＺ 38/35 37/38 47/46 37/40 (72)発明者猪狩康孝兵庫県神戸市東灘区本山南町５丁目４番25 −503号

Claims

【特許請求の範囲】

【請求項１】生理活性ペプチドまたはその塩（ただし、
パモ酸塩を除く）とパモ酸またはそのアルカリ金属塩と
を生体内分解性ポリマーで乳化混合することを特徴とす
る徐放性マイクロスフィアの製造法。
【請求項２】生体内分解性ポリマーの有機溶媒溶液中で
生理活性ペプチドまたはその塩（ただし、パモ酸塩を除
く）の溶液とパモ酸またはそのアルカリ金属塩の溶液を
乳化混合した後、溶媒を除去することを特徴とする請求
項１記載の徐放性マイクロスフィアの製造法。
【請求項３】生理活性ペプチドまたはその塩（ただし、
パモ酸塩を除く）、生体内分解性ポリマーおよびパモ酸
またはそのアルカリ金属塩を有機溶媒に混合溶解した
後、溶媒を除去することを特徴とする請求項１記載の製
造法。
【請求項４】生理活性ペプチドまたはその塩（ただし、
パモ酸塩を除く）および生体内分解性ポリマーの有機溶
媒溶液とパモ酸またはそのアルカリ金属塩の溶液とを乳
化混合した後、溶媒を除去することを特徴とする請求項
１記載の製造法。
【請求項５】生体内分解性ポリマーおよびパモ酸または
そのアルカリ金属塩の有機溶媒溶液と生理活性ペプチド
またはその塩（ただし、パモ酸塩を除く）の溶液とを乳
化混合した後、溶媒を除去することを特徴とする請求項
１記載の製造法。
【請求項６】溶媒の除去を水中乾燥法で行う請求項２〜
５のいずれかに記載の製造法。
【請求項７】さらに凍結乾燥を行う請求項６記載の製造
法。
【請求項８】混合液中の生理活性ペプチドの濃度が約１
〜約２５重量％である請求項２〜５にいずれかに記載の
製造法。
【請求項９】混合液中の生体内分解性ポリマーの濃度が
約１〜約２５重量％である請求項２〜５にいずれかに記
載の製造法。
【請求項１０】混合液中のパモ酸またはその塩の濃度が
約０．０５〜約５重量％である請求項２〜５にいずれか
に記載の製造法。
【請求項１１】パモ酸またはその塩の溶液がパモ酸また
はその塩のメタノール溶液である請求項２または４記載
の製造法。
【請求項１２】パモ酸またはその塩の溶液の使用量が、
生理活性ペプチドおよび生体内分解ポリマーの有機溶媒
溶液に対して約２〜約９０体積％である請求項４記載の
製造法。
【請求項１３】生理活性ペプチドまたはその塩が遊離塩
基またはｐＫａ４．０以上の弱酸との塩である請求項１
記載の製造法。
【請求項１４】生理活性ペプチドが、パモ酸と塩を形成
し得る塩基性基を有するペプチドである請求項１記載の
製造法。
【請求項１５】生理活性ペプチドが、パモ酸と塩を形成
し得る塩基性基を２個以上有するペプチドである請求項
１記載の製造法。
【請求項１６】生理活性ペプチドがＬＨ−ＲＨアゴニス
トである請求項１記載の製造法。
【請求項１７】生理活性ペプチドがＬＨ−ＲＨアンタゴ
ニストである請求項１記載の製造法。
【請求項１８】生理活性ペプチドが５-oxo-Ｐro−Ｈis
−Ｔrp−Ｓer−Ｔyr−ＤＬeu−Ｌeu−Ａrg−Ｐro−NH-C
₂H₅またはその塩である請求項１記載の製造法。
【請求項１９】生理活性ペプチドが５-oxo-Ｐro−Ｈis
−Ｔrp−Ｓer−Ｔyr−ＤＬeu−Ｌeu−Ａrg−Ｐro−NH-C
₂H₅の酢酸塩である請求項１記載の製造法。
【請求項２０】生体内分解性ポリマーがα−ヒドロキシ
カルボン酸重合体である請求項１記載の製造法。
【請求項２１】α−ヒドロキシカルボン酸重合体が乳酸
−グリコール酸重合体である請求項２０記載の製造法。
【請求項２２】乳酸とグリコール酸との組成比が１００
/０〜４０/６０（モル％）である請求項２１記載の製造
法。
【請求項２３】重合体の重量平均分子量が３,０００〜
１００,０００である請求項２０記載の製造法。
【請求項２４】生体内分解性ポリマーがポリ乳酸である
請求項１記載の製造法。
【請求項２５】ポリ乳酸の重量平均分子量が１０,００
０〜６０,０００である請求項２４記載の製造法。
【請求項２６】有機溶媒がジクロロメタンである請求項
２〜５のいずれかに記載の製造法。
【請求項２７】生理活性ペプチドがパモ酸と塩を形成し
得る塩基性基を１個有する生理活性ペプチドであり、徐
放性マイクロスフィアが粒径約０．０１〜約１０μｍの
生理活性ペプチドのパモ酸塩を含有する徐放性マイクロ
スフィアである請求項１記載の製造法。
【請求項２８】生理活性ペプチドがパモ酸と塩を形成し
得る塩基性基を２個以上有する生理活性ペプチドであ
り、徐放性マイクロスフィアが生理活性ペプチド、生体
内分解性ポリマーおよびパモ酸またはその塩の三者から
形成される複合体または塩を含有する徐放性マイクロス
フィアである請求項１記載の製造法。
【請求項２９】請求項１記載の製造法で製造され得る徐
放性マイクロスフィア。
【請求項３０】粒径約０．０１〜約１０μｍの生理活性
ペプチドのパモ酸塩および生体内分解性ポリマーを含有
することを特徴とする徐放性マイクロスフィア。
【請求項３１】生理活性ペプチド、パモ酸またはその塩
および生体内分解性ポリマーの三者から形成される複合
体または塩を含有することを特徴とする徐放性マイクロ
スフィア。
【請求項３２】生理活性ペプチド１モルに対してパモ酸
を約０．８モル以下の割合で含有することを特徴とする
徐放性マイクロスフィア。
【請求項３３】生理活性ペプチド１モルに対してパモ酸
を約０．３〜約０．７モルの割合で含有する請求項３２
記載の徐放性マイクロスフィア。
【請求項３４】生理活性ペプチドがｐＫａ４.０以上の
弱酸と塩を形成し得る塩基性基を有する生理活性ペプチ
ドである請求項２９〜３２のいずれかに記載の徐放性マ
イクロスフィア。
【請求項３５】生理活性ペプチドがパモ酸と塩を形成し
得る塩基性基を有する生理活性ペプチドである請求項２
９〜３２のいずれかに記載の徐放性マイクロスフィア。
【請求項３６】生理活性ペプチドがパモ酸と塩を形成し
得る塩基性基を２個以上有する生理活性ペプチドである
請求項２９〜３２のいずれかに記載の徐放性マイクロス
フィア。
【請求項３７】生理活性ペプチドがＬＨ−ＲＨアンタゴ
ニストである請求項２９〜３２のいずれかに記載の徐放
性マイクロスフィア。
【請求項３８】生理活性ペプチドがＬＨ−ＲＨアゴニス
トである請求項２９〜３２のいずれかに記載の徐放性マ
イクロスフィア。
【請求項３９】生理活性ペプチドが５-oxo-Ｐro−Ｈis
−Ｔrp−Ｓer−Ｔyr−ＤＬeu−Ｌeu−Ａrg−Ｐro−NH-C
₂H₅またはその塩である請求項２９〜３２のいずれかに
記載の徐放性マイクロスフィア。
【請求項４０】生理活性ペプチドが５-oxo-Ｐro−Ｈis
−Ｔrp−Ｓer−Ｔyr−ＤＬeu−Ｌeu−Ａrg−Ｐro−NH-C
₂H₅の酢酸塩である請求項２９〜３２のいずれかに記載
の徐放性マイクロスフィア。
【請求項４１】生体内分解性ポリマーがα−ヒドロキシ
カルボン酸重合体である請求項２９または３１記載の徐
放性マイクロスフィア。
【請求項４２】α−ヒドロキシカルボン酸重合体が乳酸
−グリコール酸重合体である請求項４１記載の徐放性マ
イクロスフィア。
【請求項４３】乳酸とグリコール酸との組成比が１００
/０〜４０/６０（モル％）である請求項４２記載の徐放
性マイクロスフィア。
【請求項４４】重合体の重量平均分子量が３,０００〜
１００,０００である請求項４１記載の徐放性マイクロ
スフィア。
【請求項４５】生体内分解性ポリマーがポリ乳酸である
請求項２９〜３２のいずれかに記載の徐放性マイクロス
フィア。
【請求項４６】ポリ乳酸の重量平均分子量が１０，００
０〜６０，０００である請求項４５記載の徐放性マイク
ロスフィア。
【請求項４７】徐放性マイクロスフィアにおける生理活
性ペプチドの割合が約１５〜約８５重量％である請求項
２９〜３２のいずれかに記載の徐放性マイクロスフィ
ア。
【請求項４８】徐放性マイクロスフィアにおけるパモ酸
またはその塩の割合が約０．１〜約２５重量％である請
求項２９〜３２のいずれかに記載の徐放性マイクロスフ
ィア。
【請求項４９】徐放性マイクロスフィアにおける生体内
分解性ポリマーの割合が約１５〜約８５重量％である請
求項２９〜３２のいずれかに記載の徐放性マイクロスフ
ィア。
【請求項５０】徐放性マイクロスフィアにおける粒径約
０．０１〜約１０μｍの生理活性ペプチドのパモ酸塩の
割合が約１５〜約９５重量％である請求項３０記載の徐
放性マイクロスフィア。
【請求項５１】生理活性ペプチドが５-oxo-Ｐro−Ｈis
−Ｔrp−Ｓer−Ｔyr−ＤＬeu−Ｌeu−Ａrg−Ｐro−NH-C
₂H₅またはその塩であり、徐放性マイクロスフィアにお
ける該生理活性ペプチドの含有量が約１５〜約３０重量
％である請求項２９〜３２のいずれかに記載の徐放性マ
イクロスフィア。
【請求項５２】請求項２９〜３２のいずれかに記載の徐
放性マイクロスフィアを含有する徐放性製剤。
【請求項５３】注射用である請求項５２記載の徐放性製
剤。
【請求項５４】請求項３７または３８記載の徐放性マイ
クロスフィアを含有する徐放性製剤。
【請求項５５】前立腺癌、前立腺肥大症、子宮内膜症、
子宮筋腫、子宮線維腫、思春期早発症または乳癌の予防
・治療剤または避妊剤である請求項５４記載の徐放性製
剤。