JPH0965899A - オリゴヌクレオチド、それから成るヘリコバクター・パイロリ検出用プライマー及びそれを用いたヘリコバクター・パイロリの検出方法 - Google Patents
オリゴヌクレオチド、それから成るヘリコバクター・パイロリ検出用プライマー及びそれを用いたヘリコバクター・パイロリの検出方法Info
- Publication number
- JPH0965899A JPH0965899A JP7246737A JP24673795A JPH0965899A JP H0965899 A JPH0965899 A JP H0965899A JP 7246737 A JP7246737 A JP 7246737A JP 24673795 A JP24673795 A JP 24673795A JP H0965899 A JPH0965899 A JP H0965899A
- Authority
- JP
- Japan
- Prior art keywords
- helicobacter pylori
- oligonucleotide
- primer
- detecting
- pcr
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Pending
Links
Landscapes
- Measuring Or Testing Involving Enzymes Or Micro-Organisms (AREA)
- Saccharide Compounds (AREA)
Abstract
(57)【要約】
【課題】 従来のヘリコバクター・パイロリの検出方法
よりも高感度にヘリコバクター・パイロリを検出するこ
とを可能にする、ＰＣＲによるヘリコバクター・パイロ
リの検出のためのプライマーとして用いられる新規なオ
リゴヌクレオチド、それから成るプライマー及びそれを
用いたヘリコバクター・パイロリの検出方法を提供する
こと。 【解決手段】 配列表の配列番号１ないし７で示される
塩基配列を有するオリゴヌクレオチド、それから成るプ
ライマー及びそれを用いたＰＣＲによるヘリコバクター
・パイロリの検出方法を提供した。
よりも高感度にヘリコバクター・パイロリを検出するこ
とを可能にする、ＰＣＲによるヘリコバクター・パイロ
リの検出のためのプライマーとして用いられる新規なオ
リゴヌクレオチド、それから成るプライマー及びそれを
用いたヘリコバクター・パイロリの検出方法を提供する
こと。 【解決手段】 配列表の配列番号１ないし７で示される
塩基配列を有するオリゴヌクレオチド、それから成るプ
ライマー及びそれを用いたＰＣＲによるヘリコバクター
・パイロリの検出方法を提供した。
Description
【０００１】
【産業上の利用分野】本発明は、ヘリコバクター・パイ
ロリ（Helicobacter pylori ）の検出に有用な新規なオ
リゴヌクレオチド、それから成るＰＣＲ用プライマー及
びそれを用いたヘリコバクター・パイロリの検出方法に
関する。
ロリ（Helicobacter pylori ）の検出に有用な新規なオ
リゴヌクレオチド、それから成るＰＣＲ用プライマー及
びそれを用いたヘリコバクター・パイロリの検出方法に
関する。
【０００２】
【従来の技術】ヘリコバクター・パイロリは、胃炎等の
消化器性疾患を引き起こす病原体であるので、体内にヘ
リコバクター・パイロリが存在するか否かを検査する必
要がある場合がある。従来より、ヘリコバクター・パイ
ロリの遺伝子の一部をＰＣＲにより増幅し、増幅産物を
検出することによりヘリコバクター・パイロリが存在す
るか否かを検査する方法が知られている。従来の方法で
は、配列表の配列番号８及び９で示される塩基配列を有
するオリゴヌクレオチドの組をプライマーとして用いて
いる。
消化器性疾患を引き起こす病原体であるので、体内にヘ
リコバクター・パイロリが存在するか否かを検査する必
要がある場合がある。従来より、ヘリコバクター・パイ
ロリの遺伝子の一部をＰＣＲにより増幅し、増幅産物を
検出することによりヘリコバクター・パイロリが存在す
るか否かを検査する方法が知られている。従来の方法で
は、配列表の配列番号８及び９で示される塩基配列を有
するオリゴヌクレオチドの組をプライマーとして用いて
いる。
【０００３】
【発明が解決しようとする課題】ヘリコバクター・パイ
ロリの検出において、検出感度が高ければ高いほど好ま
しいことは言うまでもない。
ロリの検出において、検出感度が高ければ高いほど好ま
しいことは言うまでもない。
【０００４】従って、本発明の目的は、従来のヘリコバ
クター・パイロリの検出方法よりも高感度にヘリコバク
ター・パイロリを検出することを可能にする、ＰＣＲに
よるヘリコバクター・パイロリの検出のためのプライマ
ーとして用いられる新規なオリゴヌクレオチド、それか
ら成るプライマー及びそれを用いたヘリコバクター・パ
イロリの検出方法を提供することである。
クター・パイロリの検出方法よりも高感度にヘリコバク
ター・パイロリを検出することを可能にする、ＰＣＲに
よるヘリコバクター・パイロリの検出のためのプライマ
ーとして用いられる新規なオリゴヌクレオチド、それか
ら成るプライマー及びそれを用いたヘリコバクター・パ
イロリの検出方法を提供することである。
【０００５】
【課題を解決するための手段】本願発明者らは、鋭意研
究の結果、従来のＰＣＲによるヘリコバクター・パイロ
リの検出方法よりも高感度にヘリコバクター・パイロリ
を検出することができるオリゴヌクレオチドを見出し、
本発明を完成した。
究の結果、従来のＰＣＲによるヘリコバクター・パイロ
リの検出方法よりも高感度にヘリコバクター・パイロリ
を検出することができるオリゴヌクレオチドを見出し、
本発明を完成した。
【０００６】すなわち、本発明は、配列表の配列番号１
ないし７で示される塩基配列を有する新規なオリゴヌク
レオチドを提供する。さらに本発明は、上記本発明のオ
リゴヌクレオチドから成る、ヘリコバクター・パイロリ
の遺伝子をＰＣＲにより検出するためのプライマーを提
供する。さらにまた、本発明は、(1) 配列番号１で示さ
れる塩基配列を有するオリゴヌクレオチド（以下、「Ａ
−２Ｒ」と言うことがある）と配列番号２で示される塩
基配列を有するオリゴヌクレオチド（以下、「Ａ−２Ｆ
１」ということがある）の組、(2) Ａ−２Ｒと配列番号
３で示される塩基配列を有するオリゴヌクレオチド（以
下、「Ａ−２Ｆ２」と言うことがある）の組、(3) Ａ−
２Ｒと配列番号４で示される塩基配列を有するオリゴヌ
クレオチド（以下、「Ａ−２Ｆ３」と言うことがある）
の組、(4) 配列番号５で示される塩基配列を有するオリ
ゴヌクレオチド（以下、「Ｂ−１Ｆ」と言うことがあ
る）と配列番号６で示される塩基配列を有するオリゴヌ
クレオチド（以下、「Ｂ−１Ｒ１」ということがある）
の組、又は(5) Ｂ−１Ｆと配列番号７で示される塩基配
列を有するオリゴヌクレオチド（以下、「Ｂ−１Ｒ２」
と言うことがある）の組をプライマーとして用いたＰＣ
Ｒにより検体中のヘリコバクター・パイロリの遺伝子の
一部を増幅し、増幅された遺伝子断片を検出することか
ら成るヘリコバクター・パイロリの検出方法を提供す
る。
ないし７で示される塩基配列を有する新規なオリゴヌク
レオチドを提供する。さらに本発明は、上記本発明のオ
リゴヌクレオチドから成る、ヘリコバクター・パイロリ
の遺伝子をＰＣＲにより検出するためのプライマーを提
供する。さらにまた、本発明は、(1) 配列番号１で示さ
れる塩基配列を有するオリゴヌクレオチド（以下、「Ａ
−２Ｒ」と言うことがある）と配列番号２で示される塩
基配列を有するオリゴヌクレオチド（以下、「Ａ−２Ｆ
１」ということがある）の組、(2) Ａ−２Ｒと配列番号
３で示される塩基配列を有するオリゴヌクレオチド（以
下、「Ａ−２Ｆ２」と言うことがある）の組、(3) Ａ−
２Ｒと配列番号４で示される塩基配列を有するオリゴヌ
クレオチド（以下、「Ａ−２Ｆ３」と言うことがある）
の組、(4) 配列番号５で示される塩基配列を有するオリ
ゴヌクレオチド（以下、「Ｂ−１Ｆ」と言うことがあ
る）と配列番号６で示される塩基配列を有するオリゴヌ
クレオチド（以下、「Ｂ−１Ｒ１」ということがある）
の組、又は(5) Ｂ−１Ｆと配列番号７で示される塩基配
列を有するオリゴヌクレオチド（以下、「Ｂ−１Ｒ２」
と言うことがある）の組をプライマーとして用いたＰＣ
Ｒにより検体中のヘリコバクター・パイロリの遺伝子の
一部を増幅し、増幅された遺伝子断片を検出することか
ら成るヘリコバクター・パイロリの検出方法を提供す
る。
【０００７】以下、本発明を詳細に説明する。
【０００８】上述のように、本発明のオリゴヌクレオチ
ドは、配列表の配列番号１ないし７で示される塩基配列
を有するものである。これらのオリゴヌクレオチドは、
ヘリコバクター・パイロリのゲノム内の領域にそれぞれ
ハイブリダイズする。ヘリコバクター・パイロリのゲノ
ムの塩基配列の一部は公知であり、J. Bacteriol. 173
1920-1931(1991) "Shuttle cloning and nucleotide se
quence of Helicobacter pylori gene responsible for
urease activity" に記載されている。本発明のオリゴ
ヌクレオチドの配列番号、名称及びそれらがハイブリダ
イズするヘリコバクター・パイロリのゲノム上の領域を
下記表１に示す。
ドは、配列表の配列番号１ないし７で示される塩基配列
を有するものである。これらのオリゴヌクレオチドは、
ヘリコバクター・パイロリのゲノム内の領域にそれぞれ
ハイブリダイズする。ヘリコバクター・パイロリのゲノ
ムの塩基配列の一部は公知であり、J. Bacteriol. 173
1920-1931(1991) "Shuttle cloning and nucleotide se
quence of Helicobacter pylori gene responsible for
urease activity" に記載されている。本発明のオリゴ
ヌクレオチドの配列番号、名称及びそれらがハイブリダ
イズするヘリコバクター・パイロリのゲノム上の領域を
下記表１に示す。
【０００９】
【表１】
【００１０】上記本発明のオリゴヌクレオチドは、その
塩基配列が明らかになっているので、市販のＤＮＡ合成
機を用いて容易に製造できる。
塩基配列が明らかになっているので、市販のＤＮＡ合成
機を用いて容易に製造できる。
【００１１】上記本発明のオリゴヌクレオチドは、ヘリ
コバクター・パイロリのゲノムをＰＣＲにより検出する
ためのプライマーとして用いることができる。この場
合、上記Ａ−２Ｒ、Ｂ−１Ｒ１及びＢ−１Ｒ２はリバー
スプライマーとして用いられ、Ａ−２Ｆ１、Ａ−２Ｆ
２、Ａ−２Ｆ３及びＢ−１Ｆはフォワードプライマーと
して用いられる。好ましいプライマーの組合せ及びそれ
らの組合せ（プライマーセット）の名称、並びにそれら
の各組合せにより増幅される領域及びそのサイズを下記
表２に示す。
コバクター・パイロリのゲノムをＰＣＲにより検出する
ためのプライマーとして用いることができる。この場
合、上記Ａ−２Ｒ、Ｂ−１Ｒ１及びＢ−１Ｒ２はリバー
スプライマーとして用いられ、Ａ−２Ｆ１、Ａ−２Ｆ
２、Ａ−２Ｆ３及びＢ−１Ｆはフォワードプライマーと
して用いられる。好ましいプライマーの組合せ及びそれ
らの組合せ（プライマーセット）の名称、並びにそれら
の各組合せにより増幅される領域及びそのサイズを下記
表２に示す。
【００１２】
【表２】
【００１３】本発明の方法に供される検体は、特に限定
されないが、例えば生体の組織、血液や胃液等の体液、
便等を挙げることができる。これらを緩衝液に懸濁後、
煮沸処理したもの、又はこれらから常法により抽出した
ＤＮＡをＰＣＲにかけることができる。この場合、ＤＮ
Ａの抽出は、市販の核酸抽出試薬を用いて容易に行うこ
とができる。
されないが、例えば生体の組織、血液や胃液等の体液、
便等を挙げることができる。これらを緩衝液に懸濁後、
煮沸処理したもの、又はこれらから常法により抽出した
ＤＮＡをＰＣＲにかけることができる。この場合、ＤＮ
Ａの抽出は、市販の核酸抽出試薬を用いて容易に行うこ
とができる。
【００１４】次いでＰＣＲを行うが、ＰＣＲの方法自体
はこの分野において周知であり、ＰＣＲを行うための試
薬キット及び装置は市販されている。これらを用いて常
法によりＰＣＲを行うことができる。なお、具体的な条
件の一例は下記実施例に記載されている。
はこの分野において周知であり、ＰＣＲを行うための試
薬キット及び装置は市販されている。これらを用いて常
法によりＰＣＲを行うことができる。なお、具体的な条
件の一例は下記実施例に記載されている。
【００１５】ＰＣＲ後、増幅産物は常法により検出する
ことができる。例えば、増幅産物を常法によりアガロー
スゲル電気泳動にかけ、ゲルをエチジウムブロミド等の
核酸染色試薬で染色した後、必要ならば紫外線照射下等
でバンドを検出する。また、例えば増幅産物を、これの
一部と相補的なＤＮＡプローブと結合させてこれを酵素
反応、発光反応等で検出することもできる。試料中にヘ
リコバクター・パイロリが存在した場合には、増幅バン
ドが検出され、存在しない場合には増幅バンドが検出さ
れないので、検体中のヘリコバクター・パイロリの有無
を知ることができる。
ことができる。例えば、増幅産物を常法によりアガロー
スゲル電気泳動にかけ、ゲルをエチジウムブロミド等の
核酸染色試薬で染色した後、必要ならば紫外線照射下等
でバンドを検出する。また、例えば増幅産物を、これの
一部と相補的なＤＮＡプローブと結合させてこれを酵素
反応、発光反応等で検出することもできる。試料中にヘ
リコバクター・パイロリが存在した場合には、増幅バン
ドが検出され、存在しない場合には増幅バンドが検出さ
れないので、検体中のヘリコバクター・パイロリの有無
を知ることができる。
【００１６】なお、上記表２に示したプライマーセット
を用いることにより、高感度にヘリコバクター・パイロ
リを検出することができるが、異なるプライマーセット
を用いて増幅操作を２回連続的に行うことによりさらに
検出感度を高めることができる。これは、いわゆるｎｅ
ｓｔｅｄ ＰＣＲとして知られる手法であり、１回目の
ＰＣＲ増幅産物中の領域を２回目のＰＣＲによりさらに
増幅するものである。この場合の好ましい第１回目のプ
ライマーセットと第２回目のプライマーセットの組合せ
の例を増幅産物のサイズと併せて下記表３に示す。
を用いることにより、高感度にヘリコバクター・パイロ
リを検出することができるが、異なるプライマーセット
を用いて増幅操作を２回連続的に行うことによりさらに
検出感度を高めることができる。これは、いわゆるｎｅ
ｓｔｅｄ ＰＣＲとして知られる手法であり、１回目の
ＰＣＲ増幅産物中の領域を２回目のＰＣＲによりさらに
増幅するものである。この場合の好ましい第１回目のプ
ライマーセットと第２回目のプライマーセットの組合せ
の例を増幅産物のサイズと併せて下記表３に示す。
【００１７】
【表３】
【００１８】
【実施例】以下、本発明を実施例に基づきより具体的に
説明する。もっとも、本発明は下記実施例に限定される
ものではない。
説明する。もっとも、本発明は下記実施例に限定される
ものではない。
【００１９】実施例１ 消化器性疾患患者の胃粘膜組織を、市販の核酸抽出試薬
であるＳｅｐａＧｅｎｅ（三光純薬社製）を用いてＤＮ
Ａ抽出を行った。抽出ＤＮＡを５０μｌの緩衝液に溶解
し、１０μｌをＰＣＲ反応系に用いた。ＰＣＲ反応は、
市販のＰＣＲキット及びサーマルサイクラー（商品名）
を用いて、９４℃１分間、５２℃１分間、７２℃１分間
のサイクルを３０回繰り返した。なお、プライマーセッ
トとしては、上記表２に示した、プライマーセットＡ
１、Ａ２、Ａ３、Ｂ１及びＢ２をそれぞれ用いて行っ
た。また、検体は、各プライマーセットにつき１００検
体を供した。増幅産物１０μｌを常法に従いアガロース
ゲルで電気泳動後、エチジウムブロミドで染色し、紫外
線照射下でバンドを検出した。その結果、いずれのプラ
イマーセットを用いた場合でも、５０％以上の検体が陽
性であった。
であるＳｅｐａＧｅｎｅ（三光純薬社製）を用いてＤＮ
Ａ抽出を行った。抽出ＤＮＡを５０μｌの緩衝液に溶解
し、１０μｌをＰＣＲ反応系に用いた。ＰＣＲ反応は、
市販のＰＣＲキット及びサーマルサイクラー（商品名）
を用いて、９４℃１分間、５２℃１分間、７２℃１分間
のサイクルを３０回繰り返した。なお、プライマーセッ
トとしては、上記表２に示した、プライマーセットＡ
１、Ａ２、Ａ３、Ｂ１及びＢ２をそれぞれ用いて行っ
た。また、検体は、各プライマーセットにつき１００検
体を供した。増幅産物１０μｌを常法に従いアガロース
ゲルで電気泳動後、エチジウムブロミドで染色し、紫外
線照射下でバンドを検出した。その結果、いずれのプラ
イマーセットを用いた場合でも、５０％以上の検体が陽
性であった。
【００２０】一方、比較のため、従来のプライマーセッ
トであるＨＰＵ（配列番号８及び９で示される塩基配列
を有する）を用いて上記と同様に検出操作を行った。そ
の結果をプライマーセットＡ１、Ａ２及びＢ１を用いた
場合と比較して下記表４ないし表７に示す。なお、これ
らの表中、「＋」は陽性、「−」は陰性を示す。
トであるＨＰＵ（配列番号８及び９で示される塩基配列
を有する）を用いて上記と同様に検出操作を行った。そ
の結果をプライマーセットＡ１、Ａ２及びＢ１を用いた
場合と比較して下記表４ないし表７に示す。なお、これ
らの表中、「＋」は陽性、「−」は陰性を示す。
【００２１】
【表４】
【００２２】
【表５】
【００２３】
【表６】
【００２４】
【表７】
【００２５】上記表４に示されるように、従来のプライ
マーセットを用いた場合には、１００検体中、陽性と判
定されたものが３８検体しかないのに対し、本発明の方
法によれば、いずれも５０検体以上が陽性と判定されて
いる。また、この結果を各プライマーセット毎に詳しく
見ると、表５ないし表７に示されるように、本発明の方
法で陰性と判定されたにもかかわらず従来の方法で陽性
と判定されたものはＡ１で１検体、Ｂ１で２検体しかな
く、Ａ２に至っては０検体であった。これとは逆に従来
の方法で陰性と判定されたにもかかわらず本発明の方法
で陽性と判定されたものはＡ１とＢ１で１９検体、Ａ２
で２４検体あった。これらから、本発明の方法が従来の
方法よりも高感度にヘリコバクター・パイロリを検出で
きることが確認された。
マーセットを用いた場合には、１００検体中、陽性と判
定されたものが３８検体しかないのに対し、本発明の方
法によれば、いずれも５０検体以上が陽性と判定されて
いる。また、この結果を各プライマーセット毎に詳しく
見ると、表５ないし表７に示されるように、本発明の方
法で陰性と判定されたにもかかわらず従来の方法で陽性
と判定されたものはＡ１で１検体、Ｂ１で２検体しかな
く、Ａ２に至っては０検体であった。これとは逆に従来
の方法で陰性と判定されたにもかかわらず本発明の方法
で陽性と判定されたものはＡ１とＢ１で１９検体、Ａ２
で２４検体あった。これらから、本発明の方法が従来の
方法よりも高感度にヘリコバクター・パイロリを検出で
きることが確認された。
【００２６】実施例２ 実施例１と全く同様にしてＰＣＲを行った。もっとも、
用いたプライマーセットは、上記表３に示された１回目
のプライマーセットであるＡ１、Ａ２及びＢ２であっ
た。次いで、得られたＰＣＲ産物５μｌを用いて１回目
と同様にＰＣＲを行った。もっとも、用いたプライマー
セットは、表３に示された２回目のプライマーセットで
あり、また、サイクル数は２０回であった。得られた増
幅産物を実施例１と同様にして検出した。その結果、表
８に示されるように陽性と判定された検体数は表７に示
された１回目のＰＣＲの結果陽性と判定された検体数よ
りも５検体から７検体増加した。このことから、本方法
によれば、さらに感度を高めることができることがわか
る。
用いたプライマーセットは、上記表３に示された１回目
のプライマーセットであるＡ１、Ａ２及びＢ２であっ
た。次いで、得られたＰＣＲ産物５μｌを用いて１回目
と同様にＰＣＲを行った。もっとも、用いたプライマー
セットは、表３に示された２回目のプライマーセットで
あり、また、サイクル数は２０回であった。得られた増
幅産物を実施例１と同様にして検出した。その結果、表
８に示されるように陽性と判定された検体数は表７に示
された１回目のＰＣＲの結果陽性と判定された検体数よ
りも５検体から７検体増加した。このことから、本方法
によれば、さらに感度を高めることができることがわか
る。
【００２７】
【表８】
【００２８】
【発明の効果】本発明により、ヘリコバクター・パイロ
リの検出が従来の方法よりも高感度に行えるようになっ
た。
リの検出が従来の方法よりも高感度に行えるようになっ
た。
【００２９】
配列番号：１ 配列の長さ：２１ 配列の型：核酸 配列 ATGGAAGTGT GAGCCGATTT G 21
【００３０】配列番号：２ 配列の長さ：２１ 配列の型：核酸 配列 TCACCCCAAA AGAGTTAGAT A 21
【００３１】配列番号：３ 配列の長さ：２２ 配列の型：核酸 配列 ATATTATGGA AGAAGCGAGA GC 22
【００３２】配列番号：４ 配列の長さ：２０ 配列の型：核酸 配列 CATGAAGTGG GTATTGAAGC 20
【００３３】配列番号：５ 配列の長さ：２３ 配列の型：核酸 配列 TTCACCCCAA CAAATCCCTA CAG 23
【００３４】配列番号：６ 配列の長さ：２４ 配列の型：核酸 配列 TTCTACACAA CCGGCTTCAT TCAA 24
【００３５】配列番号：７ 配列の長さ：１９ 配列の型：核酸 配列 GCCGCCAGCG CCTTCAGTG 19
【００３６】配列番号：８ 配列の長さ：１８ 配列の型：核酸 配列 GCCAATGGTA AATTAGTT 18
【００３７】配列番号：９ 配列の長さ：１８ 配列の型：核酸 配列 CTCCTTAATT GTTTTTAC 18
───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (51)Int.Cl.6 識別記号 庁内整理番号 ＦＩ 技術表示箇所 Ｃ１２Ｒ 1:01） (Ｃ１２Ｎ 15/09 ＺＮＡ Ｃ１２Ｒ 1:01） (Ｃ１２Ｑ 1/04 Ｃ１２Ｒ 1:01）
Claims (16)
- 【請求項１】 配列表の配列番号１で示される塩基配列
を有するオリゴヌクレオチド。 - 【請求項２】 配列表の配列番号２で示される塩基配列
を有するオリゴヌクレオチド。 - 【請求項３】 配列表の配列番号３で示される塩基配列
を有するオリゴヌクレオチド。 - 【請求項４】 配列表の配列番号４で示される塩基配列
を有するオリゴヌクレオチド。 - 【請求項５】 配列表の配列番号５で示される塩基配列
を有するオリゴヌクレオチド。 - 【請求項６】 配列表の配列番号６で示される塩基配列
を有するオリゴヌクレオチド。 - 【請求項７】 配列表の配列番号７で示される塩基配列
を有するオリゴヌクレオチド。 - 【請求項８】 請求項１ないし７のいずれか１項に記載
のオリゴヌクレオチドから成る、ヘリコバクター・パイ
ロリの遺伝子をＰＣＲにより検出するためのプライマ
ー。 - 【請求項９】 請求項１記載のオリゴヌクレオチドと請
求項２記載のオリゴヌクレオチドの組をプライマーとし
て用いたＰＣＲにより検体中のヘリコバクター・パイロ
リの遺伝子の一部を増幅し、増幅された遺伝子断片を検
出することから成るヘリコバクター・パイロリの検出方
法。 - 【請求項１０】 請求項１記載のオリゴヌクレオチドと
請求項３記載のオリゴヌクレオチドの組をプライマーと
して用いたＰＣＲにより検体中のヘリコバクター・パイ
ロリの遺伝子の一部を増幅し、増幅された遺伝子断片を
検出することから成るヘリコバクター・パイロリの検出
方法。 - 【請求項１１】 請求項１記載のオリゴヌクレオチドと
請求項４記載のオリゴヌクレオチドの組をプライマーと
して用いたＰＣＲにより検体中のヘリコバクター・パイ
ロリの遺伝子の一部を増幅し、増幅された遺伝子断片を
検出することから成るヘリコバクター・パイロリの検出
方法。 - 【請求項１２】 請求項５記載のオリゴヌクレオチドと
請求項６記載のオリゴヌクレオチドの組をプライマーと
して用いたＰＣＲにより検体中のヘリコバクター・パイ
ロリの遺伝子の一部を増幅し、増幅された遺伝子断片を
検出することから成るヘリコバクター・パイロリの検出
方法。 - 【請求項１３】 請求項５記載のオリゴヌクレオチドと
請求項７記載のオリゴヌクレオチドの組をプライマーと
して用いたＰＣＲにより検体中のヘリコバクター・パイ
ロリの遺伝子の一部を増幅し、増幅された遺伝子断片を
検出することから成るヘリコバクター・パイロリの検出
方法。 - 【請求項１４】 請求項１記載のオリゴヌクレオチドと
請求項２記載のオリゴヌクレオチドの組をプライマーと
して用いたＰＣＲにより検体中のヘリコバクター・パイ
ロリの遺伝子の一部を増幅し、次いで請求項１記載のオ
リゴヌクレオチドと請求項３記載のオリゴヌクレオチド
の組をプライマーとして用いたＰＣＲにより増幅断片の
一部をさらに増幅し、増幅された遺伝子断片を検出する
ことから成るヘリコバクター・パイロリの検出方法。 - 【請求項１５】 請求項１記載のオリゴヌクレオチドと
請求項３記載のオリゴヌクレオチドの組をプライマーと
して用いたＰＣＲにより検体中のヘリコバクター・パイ
ロリの遺伝子の一部を増幅し、次いで請求項１記載のオ
リゴヌクレオチドと請求項４記載のオリゴヌクレオチド
の組をプライマーとして用いたＰＣＲにより増幅断片の
一部をさらに増幅し、増幅された遺伝子断片を検出する
ことから成るヘリコバクター・パイロリの検出方法。 - 【請求項１６】 請求項５記載のオリゴヌクレオチドと
請求項７記載のオリゴヌクレオチドの組をプライマーと
して用いたＰＣＲにより検体中のヘリコバクター・パイ
ロリの遺伝子の一部を増幅し、次いで請求項５記載のオ
リゴヌクレオチドと請求項６記載のオリゴヌクレオチド
の組をプライマーとして用いたＰＣＲにより増幅断片の
一部をさらに増幅し、増幅された遺伝子断片を検出する
ことから成るヘリコバクター・パイロリの検出方法。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP7246737A JPH0965899A (ja) | 1995-08-31 | 1995-08-31 | オリゴヌクレオチド、それから成るヘリコバクター・パイロリ検出用プライマー及びそれを用いたヘリコバクター・パイロリの検出方法 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP7246737A JPH0965899A (ja) | 1995-08-31 | 1995-08-31 | オリゴヌクレオチド、それから成るヘリコバクター・パイロリ検出用プライマー及びそれを用いたヘリコバクター・パイロリの検出方法 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPH0965899A true JPH0965899A (ja) | 1997-03-11 |
Family
ID=17152907
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP7246737A Pending JPH0965899A (ja) | 1995-08-31 | 1995-08-31 | オリゴヌクレオチド、それから成るヘリコバクター・パイロリ検出用プライマー及びそれを用いたヘリコバクター・パイロリの検出方法 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JPH0965899A (ja) |
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| KR20030024129A (ko) * | 2001-09-17 | 2003-03-26 | 국윤호 | 헬리코박터 파일로리의 탐지 및 동정 방법 |
-
1995
- 1995-08-31 JP JP7246737A patent/JPH0965899A/ja active Pending
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| KR20030024129A (ko) * | 2001-09-17 | 2003-03-26 | 국윤호 | 헬리코박터 파일로리의 탐지 및 동정 방법 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| JP2709256B2 (ja) | マイコバクテリアプローブ | |
| JP2651483B2 (ja) | ポリメラーゼ連鎖反応によるヒト乳頭腫ウイルスの検出 | |
| JP2016013133A (ja) | 多数の標的の増幅のためのアンプリコンレスキューマルチプレックスポリメラーゼ連鎖反応 | |
| WO2014087055A1 (en) | Method for detecting helicobacter pylori dna in a stool sample | |
| JP2005518216A (ja) | 融解温度依存ｄｎａ増幅 | |
| US20110287965A1 (en) | Methods and compositions to detect clostridium difficile | |
| TW201247878A (en) | Method, composition and system for amplifying and detecting target microorganism DNA | |
| JP2007274934A (ja) | プライマーセット及び食中毒細菌の検出方法 | |
| JP2007535292A (ja) | 臨床検体中の病原性マイコバクテリアを検出する方法 | |
| CN111996273B (zh) | 检测幽门螺杆菌耐药基因突变的方法及试剂盒 | |
| KR20190026403A (ko) | 돼지 유행성 설사 바이러스의 유전자형 분석용 프라이머 및 이의 용도 | |
| US6316192B1 (en) | Method for enrichment of unique DNA fragments through cyclical removal of PCR adapter attached to DNA fragments whose sequences are shared between two DNA pools | |
| CN113981072A (zh) | 用于hla-a*29基因检测的引物、探针、试剂盒和方法 | |
| JPH0965899A (ja) | オリゴヌクレオチド、それから成るヘリコバクター・パイロリ検出用プライマー及びそれを用いたヘリコバクター・パイロリの検出方法 | |
| JP2006061134A (ja) | 結核菌検出のためのプライマーおよび検出同定法 | |
| US8304184B2 (en) | Genotyping using multiple variant-specific primer pools | |
| JP2007075017A (ja) | Ｃａｍｐｙｌｏｂａｃｔｅｒｊｅｊｕｎｉの検出法 | |
| CN115058493B (zh) | 一种用于多重核酸检测的dna探针、crispr-反向点杂交核酸检测***及应用 | |
| WO2023121335A1 (ko) | 유행성궤양증후군 검출용 조성물 및 이의 검출방법 | |
| WO2024136540A1 (ko) | 잉어봄바이러스 검출용 조성물 및 이의 검출방법 | |
| WO2021124960A1 (ja) | マイコバクテリウム・ツベルクローシス、マイコバクテリウム・アビウム及びマイコバクテリウム・イントラセルラーを検出するためのプライマーセット及びこれを用いた方法、並びにそのための試薬キット | |
| KR20180113047A (ko) | 게놈 dna 기반의 장 pcr 프라이머 세트를 포함하는 신경섬유종증 진단용 조성물 | |
| KR101954747B1 (ko) | 다중 중합효소 연쇄반응을 이용한 비브리오 분지군 동시 검출용 조성물 | |
| CN108517371B (zh) | 用于二倍体d基因组棉种或四倍体棉种鉴定的引物及方法 | |
| JP2001169778A (ja) | 迅速細菌遺伝子検査法及びキット |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| A131 | Notification of reasons for refusal |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A131 Effective date: 20050111 |
|
| A02 | Decision of refusal |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A02 Effective date: 20050517 |