JPH09328434A - 抗掻痒剤 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】 【課題】 地膚子または木鼈根の医薬としての使用。 【解決手段】 地膚子または木鼈根のアルコール抽出エ
キス及びそれらのサポニン成分であるモモルジン Iとモ
モルジン Ic は、優れた抗ヒスタミン作用を有し、ま
た、抗アレルギー作用及び抗炎症作用も併せ持ち、副作
用も少ないので、抗アレルギー作用及び抗炎症作用を併
せ持つ抗掻痒剤として有用である。

Description

【発明の詳細な説明】

【０００１】

【発明の属する技術分野】本発明は、地膚子（じふし）
または木鼈根（もくべつこん）のアルコールまたはアセ
トン抽出エキスまたはそれらのサポニン成分であるモモ
ルジンＩおよびモモルジンＩｃの少なくともいずれか１
種を有効成分とする抗掻痒剤に関する。

【０００２】

【従来の技術および発明が解決しようとする課題】皮膚
掻痒は生体にとって厄介な問題で、種々の原因に由来す
るが、その発症原因は必ずしも明らかにされているわけ
ではない。対症療法として、止痒剤（抗掻痒剤）が局所
的には外用剤とし種々用いられている。止痒剤はその種
類も多く、掻痒に対してのみ有効のものもあるが、むし
ろアレルギー、網内皮系、植物神経あるいは内分泌系に
影響し、更に消炎効果の結果痒みを軽減させるものが多
い。日常汎用されている止痒剤には抗ヒスタミン剤があ
るが、他に抗プラスミン剤、ＳＨ系製剤（還元グルタチ
オン，チオ硫酸ナトリウムなど）、ビタミン剤（Ｂ2群)
、ホルモン剤、植物神経遮断剤、肝機能亢進剤などが
ある。また、漢方薬にも有効なものが知られている。

【０００３】地膚子はアカザ科(Chenopodiaceae)のホウ
キギ(Kochia scoparia(L.) Schrad.(=Chenopodium scop
aria L.) の乾燥果実であり、その主な産地は中国（河
北，山西，河南，山東省などに主産）と韓国である。地
膚子は解毒，利尿薬として、淋病，小便不利，水腫，脚
気，湿瘡，疥癬などの掻痒に応用されている〔難波恒雄
著，原色和漢薬図鑑（上）２２８頁，（株）保育社〕。
その薬理作用については、水浸剤(1:3) がin vitroでシ
ェーンライン黄癬菌、オーズアン小胞子菌などの皮膚真
菌に対して抑制作用を有することが知られている
〔（株）小学館，中薬大辞典第二巻１１０６頁〕。ま
た、地膚子は皮膚糸状菌に対して発育阻止すること〔Ca
o, R. L.ら, Chin. J. Dermat. 5, 286-290 (1957)〕お
よびヒスタミン或いは塩化バリウムによって惹起される
モルモットの摘出回腸の収縮を阻止することが知られて
いる〔Itokawa, H. ら, Shoyakugaku Zasshi 37, 223-2
28 (1983)〕。更に最近、地膚子には抗ＩＶ型アレルギ
ー作用があることが報告されている〔戴岳ら，中国薬科
大学学報 25, 44-48(1994)〕。

【０００４】また、地膚子の含有成分の研究がなされて
おり、地膚子にはトリテルペノイドサポニン，油１５％
が含まれており、そのサポニン成分としてモモルジンＩ
ｃ(momordin Ic) ，モモルジンＩＩｃ (momordin IIc)
など５種のトリテルペノイドサポニンが見いだされてい
る〔Y. Wenら, Planta Medica, 61, 450-452(1995)〕。

【０００５】これらのモモルジンは地膚子以外の他の植
物、例えばウリ科木鼈子（木別子；ナンバンカラスウ
リ； Momordica cochinchinensis (Lour.) Spreng.) の
乾燥根（木鼈根）からも得られる〔（株）小学館，中薬
大辞典第四巻２５２１頁〕。したがって、モモルジンは
これら地膚子や木鼈子由来に限定されるものではない。
ナンバンカラスウリは熱帯原産種の多年草であり、中
国、台湾、東南アジアに分布している。その乾燥根（木
鼈根）はモモルジン、ベッシステロール、コストールを
含み、漢方薬ではきょ痰剤として使われている。

【０００６】木鼈根は主サポニン成分のモモルジンＩ
(momordin I) ，モモルジンＩＩ(momordin II) と少量
サポニン成分のモモルジンＩｃ，モモルジンＩＩｃなど
を含み、それぞれ単離され、それらの化学構造が決定さ
れている〔N. Kawamura ら, Phytochemistry, 27, 3585
-3591(1988) 〕。

【０００７】モモルジンＩ，モモルジンＩｃ及びＩＩｃ
の化学名と化学構造式は次の通りである。

【０００８】モモルジンＩ : ３−Ｏ−［β−Ｄ−アラ
ビノピラノシル（１→３）−β−Ｄ−グルクロノピラノ
シル］−オレアン−１２−エン−２８−オイック アシ
ッド（化１）

【０００９】

【化１】

【００１０】モモルジンＩｃ： ３β−（［Ｏ−β−Ｄ
−キシロピラノシル（１→３）−Ｏ−β−Ｄ−グルコピ
ラヌロノシル］オキシ）−オレアン−１２−エン−２８
−オイック アシッド（化２）

【００１１】

【化２】

【００１２】モモルジンＩＩｃ： ３β−（［Ｏ−β−
Ｄ−キシロピラノシル（１→３）−Ｏ−β−Ｄ−グルコ
ピラヌロノシル］オキシ）−オレアン−１２−エン−２
８−オイック アシッド ２８−β−Ｄ−グルコピラノ
シル エステル（化３）

【００１３】

【化３】

【００１４】しかしながら、これまで地膚子や木鼈根の
アルコールまたはアセトン抽出エキスまたはそれらのサ
ポニン成分であるモモルジンＩとモモルジンＩｃに抗掻
痒作用があることは知られていなかった。

【００１５】本発明の目的は、地膚子または木鼈根のア
ルコールまたはアセトン抽出エキスまたはそれら由来の
モモルジンＩとＩｃを有効成分とする抗掻痒剤を提供す
ることにある。

【００１６】

【課題を解決するための手段】本発明者らは、地膚子や
木鼈根に抗掻痒作用があることを見いだした。より詳し
くは、地膚子と木鼈根のアルコールまたはアセトン抽出
エキスまたはそれら由来のモモルジンＩ, Ｉｃに優れた
抗掻痒作用があることを見いだした。これらを有効成分
とする抗掻痒剤（止痒剤）の提供を可能とした。

【００１７】本発明の抗掻痒剤の有効成分である地膚子
または木鼈根のアルコールまたはアセトン抽出エキスは
一般の抽出方法で得ることができる。アルコール抽出操
作に用いるアルコールは低級アルコール単独でも含水低
級アルコールでもよい。ここで、低級アルコールとは炭
素数１〜５の直鎖状または分岐状のアルコールを意味す
る。また、アセトン抽出操作に用いるアセトンは単独で
も含水アセトンでもよい。したがって、本明細書中でア
ルコール抽出エキスとは、特に断らないかぎり、低級ア
ルコールまたは含水低級アルコール抽出エキスを意味
し、アセトン抽出エキスとは、同様にアセトンまたは含
水アセトン抽出エキスを意味する。

【００１８】地膚子または木鼈根アルコール抽出エキス
は地膚子または木鼈根を粉砕した後例えば１０倍量のメ
タノールまたは７０％含水エタノール（以下、７０％エ
タノールと略記。）で熱時抽出して得ることができる。
アルコールをアセトンに代え同様にして、地膚子または
木鼈根アセトン抽出エキスを得ることができるが、以下
では、地膚子または木鼈根アルコール抽出エキスについ
て述べる。

【００１９】地膚子由来のモモルジンＩｃ，ＩＩｃは地
膚子アルコール抽出エキスから常法により分離・精製し
て得ることができる。すなわち、当該アルコール抽出エ
キスに水を加え、酢酸エチルで脱脂し、脱脂後の水層を
更にｎ−ブタノールで抽出してｎ−ブタノール抽出物を
得る。この抽出物をカラムクロマトグラフィーに付し
て、地膚子由来のモモルジンＩｃ，ＩＩｃをそれぞれ得
ることができる。

【００２０】また、木鼈根由来のモモルジンＩは木鼈根
アルコール抽出エキスから上記と同様の操作で、または
文献〔N. Kawamura ら, Phytochemistry, 27, 3585-359
1(1988) 〕記載の方法に準じて得ることができる。

【００２１】このようにして得られる地膚子または木鼈
根アルコール抽出エキスまたはそれらのサポニン成分で
あるモモルジンＩ, Ｉｃは、後述のごとく、優れた抗ヒ
スタミン作用を有し、しかも副作用も少ないので抗掻痒
剤（止痒剤）として有用である。また、該アルコール抽
出エキス又はモモルジンＩ, Ｉｃは優れた抗アレルギー
作用および抗炎症作用も有するので、抗アレルギー剤お
よび抗炎症剤としても有用である。したがって、本発明
の地膚子または木鼈根アルコール抽出エキス及びモモル
ジンＩ, Ｉｃは、抗アレルギー作用および抗炎症作用を
併せもつ抗掻痒剤として、痒疹，皮膚掻痒，湿疹・皮膚
炎，じん麻疹，アレルギー性鼻炎，アレルギー性結膜
炎，即時型喘息などの治療に使用することが可能であ
る。

【００２２】本発明の抗掻痒剤の有効成分である地膚子
または木鼈根アルコール抽出エキスおよびモモルジン
Ｉ, Ｉｃは、それ自体あるいは必要に応じて他の公知の
添加剤、例えば賦形剤，結合剤，崩壊剤, 滑沢剤, 抗酸
化剤，コーティング剤，界面活性剤, 流動性促進剤, 矯
味矯臭剤, 着色剤, 可塑剤，香料などを添加・混合し、
常法により錠剤, カプセル剤，顆粒剤, 細粒剤, 散剤,
液剤などの経口剤として、あるいは注射剤, 外用剤，座
剤, 吸入剤, 点鼻剤, 点眼剤などの非経口剤として投与
することができる。該液剤としては、例えば懸濁液，エ
マルジョン，シロップ剤，エリキシル剤が挙げられる。
また、該外用剤としては、例えば軟膏剤,クリ−ム, 乳
液, リニメント剤, ローション剤が挙げられる。

【００２３】医薬品として許容される添加物は、一般的
に製剤に用いられるものである。賦形剤としては、例え
ばブドウ糖, 白糖, 乳糖, マンニトール, キシリトー
ル, ソルビトール, 結晶セルロース, カルボキシメチル
セルロースナトリウム, リン酸水素カルシウム, デンプ
ン, カルボキシメチルスターチナトリウム, デキストリ
ン, α−シクロデキストリン, β−シクロデキストリ
ン, カルボキシビニルポリマー, 軽質無水ケイ酸, 酸化
チタン, メタケイ酸アルミン酸マグネシウム, ポリエチ
レングリコール, 中鎖脂肪酸トリグリセリドが挙げられ
る。

【００２４】結合剤としては、例えば結晶セルロース,
メチルセルロース, エチルセルロース, ヒドロキシプロ
ピルセルロース, ヒドロキシプロピルメチルセルロー
ス, ポリビニルピロリドン, ポリビニルアルコール, ア
ラビアゴム, α化デンプン, プルラン, ゼラチン, 寒
天, タラガント, アルギン酸ナトリウム, アルギン酸プ
ロピレングリコールエステルが挙げられる。

【００２５】崩壊剤としては、例えば結晶セルロース,
カルボキシメチルセルロース, 低置換度ヒドロキシプロ
ピルセルロース, カルボキシメチルセルロースナトリウ
ム,カルボキシメチルセルロースカルシウム, クロスカ
ルメロースナトリウム, デンプン, ヒドロキシプロピル
スターチ, 部分α化デンプンが挙げられる。

【００２６】滑沢剤としては、例えばステアリン酸, ス
テアリン酸アルミニウム, ステアリン酸マグネシウム,
ステアリン酸カルシウム, ステアリン酸ポリオキシル,
セタノール, タルク, 硬化油, ショ糖脂肪酸エステル,
ジメチルポリシロキサン, ポリエチレングリコール, ロ
ウ類, 水素添加植物油が挙げられる。

【００２７】抗酸化剤としては、例えば没食子酸プロピ
ル, ジブチルヒドロキシトルエン,ブチルヒドロキシア
ニソール, α−トコフェロール, クエン酸が挙げられ
る。

【００２８】コーティング剤としては、例えばメチルセ
ルロース, エチルセルロース, ヒドロキシプロピルセル
ロース, ヒドロキシプロピルメチルセルロース, ヒドロ
キシプロピルメチルセルロースフタレート, ヒドロキシ
プロピルメチルセルロースアセテートサクシネート, カ
ルボキシメチルエチルセルロース, 酢酸フタル酸セルロ
ース, ポリビニルアセタールジエチルアミノアセテー
ト, アミノアルキルメタアクリレートコポリマー, メタ
アクリル酸コポリマー, セルロースアセテートサフタレ
ート, セルロースアセテートトリメリテート, ポリビニ
ルアセテートサフタレート, セラックが挙げられる。

【００２９】界面活性剤としては、例えばポリオキシエ
チレン硬化ヒマシ油, モノステアリン酸グリセリン, モ
ノステアリン酸ソルビタン, モノパルミチン酸ソルビタ
ン,モノラウリン酸ソルビタン, ポリソルベート類, ラ
ウリル硫酸ナトリウム, マクロゴール類, ショ糖脂肪酸
エステル, 大豆レシチンが挙げられる。

【００３０】流動性促進剤としては、例えば軽質無水ケ
イ酸, 乾燥水酸化アルミニウムゲル, 合成ケイ酸アルミ
ニウム, ケイ酸マグネシウムが挙げられる。矯味矯臭剤
としては、例えばクエン酸, アジピン酸, アスコルビン
酸, メントールが挙げられる。着色剤としては、例えば
タール色素, 酸化チタンが挙げられる。可塑剤として
は、例えばクエン酸トリメチル, トリアセチン, セタノ
ールが挙げられる。

【００３１】本発明の抗掻痒剤の有効成分の投与量は、
抽出物などの性状, 投与経路, 年齢, 体重, 症状により
適宜増減するが、地膚子または木鼈根のアルコール抽出
エキスでは１日当たり約１mg〜１０mg/kg 、サポニン成
分のモモルジンＩまたはモモルジンＩｃでは１日当たり
約０．１mg〜１mg/kg であるのが望ましい。モモルジン
ＩとモモルジンＩｃはそれぞれ単独に使用されるが、そ
れらを配合して用いてもよい。本発明の好ましい具体例
は、地膚子もしくは木鼈根のアルコール抽出エキスまた
はモモルジンＩもしくはモモルジンＩｃと製剤上の補助
成分とからなるものである。また、本発明の他の好まし
い具体例は、上記１日当たりの投与量を１回ないし数回
に分けて投与することもできる。

【００３２】

【発明の効果】本発明の抗掻痒剤の有効成分である地膚
子または木鼈根アルコール抽出エキスおよびモモルジン
Ｉ, Ｉｃは、優れた抗掻痒作用，抗アレルギー作用およ
び抗炎症作用を有し、また、副作用も少ないので、抗ア
レルギー作用および抗炎症作用を併せもつ抗掻痒剤とし
て有用である。

【００３３】

【実施例】実施例を挙げて本発明を更に説明する。

【００３４】（実施例１） 抗掻痒作用

【００３５】(1a)地膚子の７０％エタノールおよびメタ
ノール抽出エキスの調製：中国産地膚子を粉砕した後、
１０倍量の７０％含水エタノールで１時間、２回熱時抽
出した。抽出液を熱時濾過し、濾液を減圧下に濃縮し、
凍結乾燥を施して、乾燥７０％エタノール抽出エキス
（以下、ＫＳ−ｅｘｔと略記。）を１３．４％の収率で
得た。また、７０％含水エタノールをメタノールに代
え、１０倍量のメタノールで３時間、３回熱時抽出し
た。抽出液を熱時濾過し、濾液を減圧下に濃縮乾涸し
て、メタノール抽出エキス（以下、ＫＭ−ｅｘｔと略
記。）を１０．６％の収率で得た。

【００３６】(1b)地膚子由来サポニンのモモルジンＩｃ
とモモルジンＩＩｃの単離：上記メタノール抽出エキス
に水を加え、酢酸エチルで抽出し、有機層から酢酸エチ
ル抽出物（収率：２．２６％）を得た。水層は更にｎ−
ブタノールで抽出処理し、ｎ−ブタノール抽出物（収
率：３．９８％）を得た。ｎ−ブタノール抽出物をシリ
カゲルカラムクロマトグラフィーに付し、クロロホルム
／メタノール／水，（７：３：１），（６：４：１）で
順次展開溶出し、フラクション１（収率：１．５１％）
とフラクション２（収率：１．５４％）を得た。更に、
フラクション１をオクタデシルシラン（以下、ＯＤＳと
略記）カラムクロマトグラフィーに付し、８０％含水メ
タノール，メタノールで順次展開溶出し、モモルジンＩ
ｃを得た（収率：０．０９３％）。また、フラクション
２を分取用高速液体クロマトグラフィー（ＯＤＳ−Ａ）
に付し、８０％含水メタノール／１％酢酸水溶液で溶出
し、モモルジンＩＩｃを得た（収率：０．０３８％）。

【００３７】(2a)木鼈根のメタノール抽出エキスの調
製：中国産木鼈根を粉砕した後、１０倍量のメタノール
で３時間、３回熱時抽出した。抽出液を熱時濾過し、濾
液を減圧下に濃縮乾涸して、メタノール抽出エキス（以
下、ＭＣ−ｅｘｔと略記）を２０．５％の収率で得た。

【００３８】(2b)木鼈根由来サポニンのモモルジンＩの
単離：木鼈根メタノール抽出エキスから文献〔N. Kawam
ura ら, Phytochemistry, 27, 3585-3591(1988) 〕記載
の方法に準じてモモルジンＩを得た。

【００３９】(3) Compound 48/80 誘発掻痒モデル（皮
下) の作製：（実験動物）Ｓｌｃ：ｄｄＹ系雄性マウス
（６週令，２６〜３０g ）を用いた。飼育環境は恒温恒
湿，１２時間明／１２時間暗のサイクルで飼育室で、市
販の固形飼料〔ラボＭＲストック，日本農産（株）〕を
用い、水道水を自由に摂取させ、購入後実験に供するま
で１週間予備飼育した。

【００４０】（掻痒モデル（皮下) の作製）１８時間絶
食したＳｌｃ：ｄｄＹ系雄性マウス（６週令，２６〜３
０g ）の背部皮下に各用量の、起痒物質（ヒスタミン遊
離剤）Compound 48/80生理食塩水０．１ml（０，１０，
３０，５０，１００，１５０μg ／マウス）を注射し、
マウスの掻痒行動を惹起させた。掻痒行動の判定は、マ
ウスが注射部位を後肢にて引っ掻き行動を掻痒行動と
し、注射直後より５分間隔で６０分間、その回数を計数
することにより掻痒行動を評価判定した。結果を図１に
示す。

【００４１】(3a)地膚子７０％エタノール抽出エキスお
よびメタノール抽出エキスの抗掻痒作用：上述のCompou
nd 48/80誘発掻痒モデルを用いて、地膚子７０％エタノ
ール抽出エキス（ＫＳ−ｅｘｔ）およびメタノール抽出
エキス（ＫＭ−ｅｘｔ）の抗掻痒作用を評価した。すな
わち、１８時間絶食したＳｌｃ：ｄｄＹ系雄性マウス
（６週令，２６〜３０g ；１群１３匹使用）に被検体を
経口投与し、その１時間後にマウスの背部皮下に０．１
％Compound 48/80生理食塩水０．１ml（１００μg ／マ
ウス）を注射し、マウスの掻痒行動を惹起させた。注射
直後より１０分間、マウスが注射部位を後肢にて引っ掻
く回数を計数することにより掻痒行動の抑制を評価判定
した。結果を表１に示す。

【００４２】

【表１】

【００４３】 有意差検定：＊ｐ＜０．０５；＊＊ｐ＜０．０１

【００４４】表１から明らかなように、ＫＳ−ｅｘｔと
ＫＭ−ｅｘｔ投与群は投与量５００mg/kgでcompound 48
/80誘発掻痒に対して有意な抑制作用を示した。

【００４５】(3b)地膚子由来モモルジンＩｃとモモルジ
ンＩＩｃの抗掻痒作用：上記(3a)と同様にして、地膚子
由来モモルジンＩｃとモモルジンＩＩｃの抗掻痒作用を
評価した。但し、１群１３−１５匹使用。結果を表２に
示す。

【００４６】

【表２】

【００４７】 有意差検定：＊ｐ＜０．０５；＊＊ｐ＜０．０１

【００４８】表２から明らかなように、モモルジンＩｃ
投与群はcompound 48/80誘発掻痒に対し有意な抑制作用
を示したが、モモルジンＩＩｃ投与群は抑制しなかっ
た。

【００４９】(3c)木鼈根メタノール抽出エキスの抗掻痒
作用：上述のCompound 48/80誘発掻痒モデル（皮下) を
用い同様にして、木鼈根メタノール抽出エキス（ＭＣ−
ｅｘｔ）の抗掻痒作用を評価した。すなわち、１８時間
絶食したＳｌｃ：ｄｄＹ系雄性マウス（６週令，２６〜
３０g ；１群１２−１３匹使用）に被検体を経口投与
し、その１時間後にマウスの背部皮下に０．１％Compou
nd 48/80生理食塩水０．１ml（１００μg ／マウス）を
注射し、マウスの掻痒行動を惹起させた。注射直後より
１０分間、マウスが注射部位を後肢にて引っ掻く回数を
計数することにより掻痒行動の抑制を評価判定した。比
較対照群として地膚子の７０％エタノール抽出エキス
（ＫＳ−ｅｘｔ）投与群を用いた。結果を表２に示す。

【００５０】

【表３】

【００５１】 有意差検定：＊ｐ＜０．０５；＊＊ｐ＜０．０１

【００５２】表３から明らかなように、ＭＣ−ｅｘｔ投
与群は、compound 48/80誘発掻痒に対し投与量５００ m
g/kgで、ＫＳ−ｅｘｔ投与群と同等若しくは同等以上の
抑制作用を示した。

【００５３】(3d)木鼈根由来モモルジンＩの抗掻痒作
用：上記(3c)と同様にして、木鼈根由来モモルジンＩの
抗掻痒作用を評価した。但し、１群１０−１２匹使用。
結果を表４に示す。

【００５４】

【表４】

【００５５】有意差検定：＊ｐ＜０．０１

【００５６】表４から明らかなように、モモルジンＩ投
与群はcompound 48/80誘発掻痒に対し有意に抑制作用を
示した。

【００５７】（実施例２） 抗アレルギー作用：

【００５８】(1）地膚子７０％エタノール抽出エキス
（ＫＳ−ｅｘｔ）および地膚子由来モモルジンＩｃとモ
モルジンＩＩｃのラットの受動的皮膚アナフィラキシィ
ー（以下ＰＣＡと略記）反応に及ぼす影響：

【００５９】(i) 抗卵白アルブミンラット血清の調製：
Stotland and Shareの方法に準じた。すなわち、１mgの
卵白アルブミン（以下ＥＷＡと略記）と１０mgの水酸化
アルミニウムゲルを含む生理食塩水０．５mlをWistar系
雄性ラットの足蹠皮内に４分割して投与し、同時に百日
咳死菌(Bordetella pertussis)２ｘ１０¹⁰個／mlを含む
生理食塩水１mlを腹腔内に投与し、感作した。７日後上
述のＥＷＡ生理食塩水をラットの両大腿部筋肉内に投与
し、さらに百日咳死菌２ｘ１０¹⁰個／mlを含む生理食塩
水を腹腔内に投与して追加感作した。追加感作７日後腹
大動脈から採血して、抗ＥＷＡラット血清を得た。血清
は−８０℃で凍結保存した。なお、この血清の抗体価は
ラット４８時間ＰＣＡ反応にて検定し、１：３２であっ
た。

【００６０】(ii)ＰＣＡ反応試験：Wistar系雄性ラット
（１群６−８匹）の背部を剪毛し、皮内に８倍、もしく
は１６倍に希釈した抗ＥＷＡラット血清を０．０５ml／
匹の割合で、それぞれ１点ずつ合計２点注射し感作し
た。４８時間後、ＥＷＡ２mgを含む１％エバンスブルー
生理食塩水０．５mlを尾静脈から注射し、３０分後に放
血致死させ、８倍希釈の血清により生じた青斑部の面積
および漏出色素量を測定した。漏出色素量の測定は片山
らの方法に従った。すなわち、この青斑部を細切し、1N
KOH１mlを加え、３７℃, ４８時間インキュベ−トした
後、0.6N H₃PO₄２．５mlで中和し、アセトン６．５mlで
よく混和抽出した。３０００ｒｐｍ，１０分間遠心し、
６２０ｎｍでその上清液の吸光度を測定し、その色素量
を予め作製したエバンスブルーの検量線より求めた。被
検体はＰＣＡ誘発１時間前に１回経口投与した。結果を
表５に示す。

【００６１】

【表５】

【００６２】有意差検定：＊ｐ＜０．０１

【００６３】表５より明らかなように、ＫＳ−ｅｘｔと
モモルジンＩｃ投与群はＰＣＡ反応を有意に抑制した。

【００６４】(2) 地膚子７０％エタノール抽出エキス
（ＫＳ−ｅｘｔ）のＩｇＥ抗体産生に及ぼす影響：

【００６５】(i) ＩｇＥ抗体産生: Levin and Vaz の方
法に従った。すなわち、１mgのＥＷＡと１．５mgの水酸
化アルミニウムゲルの混合液０．２mlをＢＡＬＢ／ｃ系
雌生マウス（１群１０−１２匹）に腹腔内投与した。免
疫後７，１４，２１日目に眼底静脈洞から採血し、常法
により得た血清をＩｇＥ抗体価の測定に使用した。ＫＳ
−ｅｘｔ〔投与量５０，２００および５００mg/kg ：
０．２％カルボキシメチルセルロースナトリウム（以
下、ＣＭＣ−Ｎａと略記）に懸濁〕は免疫日から１日１
回連日経口投与した。

【００６６】(ii)ＩｇＥ抗体価の測定：ラット４８時間
ＰＣＡ反応により測定した。すなわち、Wistar系雄性ラ
ット（１群３匹）の背部を剪毛し、皮内に各血清を生理
食塩水で倍々希釈系で希釈したものを０．１mlずつ注射
した。４８時間後、ＥＷＡ２mgを含む１％エバンスブル
ー生理食塩水０．５mlを尾静脈から注入し、３０分後に
放血致死させ、背部の皮を剥ぎ、血清により生じた直径
５mm以上の青斑をプラスとして判定し、ＩｇＥ抗体価と
した。

【００６７】(iii) 実験結果: ＫＳ−ｅｘｔ５０，２０
０，５００mg/kg のいづれの投与群においても、抗原感
作１週間，２週間および３週間後でもＩｇＥ抗体価は抑
制しなかった。したがって、ＩｇＥ抗体産生には影響を
及ぼさなかった。

【００６８】(3) 地膚子７０％エタノール抽出エキス
（ＫＳ−ｅｘｔ）及びモモルジンＩｃのcompound 48/80
によるラット腹腔内マストセルからのヒスタミン遊離に
及ぼす影響：

【００６９】(i) ラット腹腔内マストセル浮遊液の調
製： ラットからの腹腔内マストセルの分離はUvnas an
d Thonの方法に準じて行った。すなわち、ラットを断頭
瀉血し、ただちにハンクス液（１０U/mlのヘパリン含
有）１０mlを腹腔内に注入した。９０秒間腹部を静かに
マッサージした後、腹腔内液を採取し、４０％フィコー
ル溶液２mlに静かに重層し、室温で３０分間放置後、５
℃, １２００ｒｐｍ, １０分間遠心分離を行い、フィコ
ール層上のマストセルを集めた。このマストセルはリン
酸緩衝液（以下、ＰＢＳと略記）（ｐＨ７．０）に浮遊
させ、遠心分離による洗浄を３回繰り返し、再びＰＢＳ
に浮遊（マストセル数２．９ｘ１０⁶ 個／ml）させた。
この浮遊液中のマストセル含有率は８５−９０％で、生
存率はトルイジンブルー（０．１％，５０％エタノール
溶液) 染色法で９０％以上であることを確認した。

【００７０】(ii)ヒスタミン遊離反応試験： (i)に述べ
た方法で得られたマストセル浮遊液１．８mlを３７℃,
１０分間プレインキュベートした後、被検液（１０％ジ
メチルスルホキシド／ＰＢＳに溶解）を０．１ml加え、
１０分間インキュベートし、更にcompound 48/80（最終
濃度１０ mg/ml）０．１mlを加えて１５分間インキュベ
ートした。氷冷により反応を停止し、５℃, １２００ｒ
ｐｍ，５分間遠心分離を行い、上清及び沈渣を得た。上
清中のヒスタミン量をShore らの方法に準じて測定し
た。すなわち、上清０．７mlに水１．４ml, 1N NaOH
０．４ml, １％オルト−フタルジアルデヒド／メタノー
ル溶液０．１mlを加えて、４分間放置後、3NHCl溶液
０．２mlで反応を停止させた。反応終了１０分後に５
℃, ３０００ｒｐｍ，５分間遠心分離し、上清の蛍光を
励起波長３６０ｎｍ, 蛍光波長４５０ｎｍで測定（日立
蛍光分光光度計６５０−１０Ｓ）し、既知濃度のヒスタ
ミン検量線からヒスタミン量を求めた。また、マストセ
ルに残留するヒスタミン量は沈渣にＰＢＳ２mlを加えて
超音波処理、更に凍結融解法でマストセルからヒスタミ
ンを遊離させ、上記と同様の方法で測定し、ヒスタミン
遊離率を求めた。

【００７１】(iii) 実験結果: 被検体ＫＳ−ｅｘｔ（１
０，５０，２００および５００μg/ml）およびモモルジ
ンＩｃ（１０，５０，１００および２００μg/ml）はい
づれもcompound 48/80によるラット腹腔内マストセルか
らのヒスタミン遊離には影響を及ぼさなかった。

【００７２】（実施例３） 急性炎症抑制作用：

【００７３】(1) 地膚子７０％エタノール抽出エキス
（ＫＳ−ｅｘｔ）のラットのカラゲニン誘発足蹠浮腫に
及ぼす影響： （実験方法）絶食した Wistar 系雄性ラット（１５０〜
１８０g ）にＫＳ−ｅｘｔ（０．２％ＣＭＣ−Ｎａに懸
濁) を経口投与し、その１時間後にラットの右後肢足蹠
皮下に１％λ−カラゲニン生理食塩水を０．１ml注射
し、浮腫を惹起させた。反応惹起前および惹起０．５〜
５時間後までの浮腫を水容積置換法にて測定し、浮腫率
として求めた。結果を図２に示す。

【００７４】図２から明らかなように、ＫＳ−ｅｘｔ投
与群はカラゲニン誘発浮腫形成を有意に抑制する傾向を
示した。

【００７５】(2) 地膚子７０％エタノール抽出エキス
（ＫＳ−ｅｘｔ）のマウスのヒスタミン誘発足蹠浮腫お
よびセロトニン誘発足蹠浮腫に及ぼす影響： （実験方法）絶食したＳｌｃ：ｄｄＹ系雄性マウス（１
８〜２０g ，１群１２匹）にＫＳ−ｅｘｔ（０．２％Ｃ
ＭＣ−Ｎａに懸濁) を経口投与し、その１時間後にマウ
スの右後肢足蹠皮下にヒスタミンまたはセロトニン生理
食塩水を５μl （５μg ／マウス）を注射し、浮腫を惹
起させた。反応惹起前および惹起１０，２０，３０分後
における右後肢足蹠の体積をdial thickness gaugeを用
いて測定し、浮腫率として求めた。結果を図３（ヒスタ
ミン）および図４（セロトニン）に示す。

【００７６】図３，４から明らかなように、ＫＳ−ｅｘ
ｔ投与群はヒスタミン誘発浮腫およびセロトニン誘発浮
腫形成を有意に抑制した。

【００７７】(3) 地膚子７０％エタノール抽出エキス
（ＫＳ−ｅｘｔ）の酢酸誘発毛細血管透過性亢進に及ぼ
す影響： （実験方法）絶食したＳｌｃ：ｄｄＹ系雄性マウス（１
８〜２０g ，１群１２匹）にＫＳ−ｅｘｔ（０．２％Ｃ
ＭＣ−Ｎａに懸濁) を経口投与し、その１時間後に４％
ポンタミンスカイブルー生理食塩水１０ml／kgを尾静脈
注射し、１５分後に０．７％酢酸生理食塩水１０mg／kg
を腹腔内注射し、更に２０分後にマウスを断頭致死さ
せ、腹腔内に滲出した色素を生理食塩水で洗い集め、全
量１０mlとした後1N NaOH ０．１mlを添加し、５９０ｎ
ｍで吸光度を測定した。結果を表６に示す。

【００７８】

【表６】

【００７９】 有意差検定：＊ｐ＜０．０５；＊＊ｐ＜０．０１

【００８０】表６から明らかなように、ＫＳ−ｅｘｔ投
与群は酢酸誘発毛細血管透過性亢進を抑制する傾向を示
した。

【００８１】(4) 地膚子７０％エタノール抽出エキス
（ＫＳ−ｅｘｔ）のマウスのアラキドン酸誘発耳介浮腫
に及ぼす影響： （実験方法）絶食したＳｌｃ：ｄｄＹ系雄性マウス（１
８〜２０g ，１群１２匹）にＫＳ−ｅｘｔ（０．２％Ｃ
ＭＣ−Ｎａに懸濁) を経口投与し、その1 時間後にマウ
スの右耳にアラキドン酸を含むアセトン溶液２０μl
（２mg／マウス）を塗布し、浮腫を惹起させた。反応惹
起前および惹起１時間後における右耳の体積をdial thi
ckness gaugeを用いて測定し、浮腫率として求めた。結
果を表７に示す。

【００８２】

【表７】

【００８３】有意差検定：＊ｐ＜０．０５

【００８４】表７から明らかなように、ＫＳ−ｅｘｔ５
００mg/kg 投与群はアラキドン酸誘発耳介浮腫形成を有
意に抑制した。

【００８５】（実施例４） 抗侵害受容作用：

【００８６】地膚子７０％エタノール抽出エキス（ＫＳ
−ｅｘｔ）の酢酸ライジングに及ぼす影響： （実験方法）絶食したＳｌｃ：ｄｄＹ系雄性マウス（２
０〜２５g ，１群１２匹）にＫＳ−ｅｘｔ（０．２％Ｃ
ＭＣ−Ｎａに懸濁) を経口投与し、その１時間後に１％
酢酸生理食塩水１０ml／kgを腹腔内注射し、その５分後
よりマウスのライジングを１０分間計数した。結果を表
８に示す。

【００８７】

【表８】

【００８８】有意差検定：＊ｐ＜０．０５

【００８９】表８から明らかなように、ＫＳ−ｅｘｔ５
００mg/kg 投与群は酢酸ライジングを有意に抑制した。

【図面の簡単な説明】

【図１】１８時間絶食したＳｌｃ：ｄｄＹ系雄性マウス
の背部皮下に各用量のCompound48/80生理食塩水０．１m
lを注射したときのマウスの掻痒行動を示す。横軸は皮
下注射後の経過時間（分）を表し、縦軸は引っ掻き回数
を表す。━は生理食塩水（コントロール）、−○−は１
０μg 、−■−（黒四角）は３０μg 、−△−は５０μ
g 、−▽−は１００μg および−●−は１５０μg をマ
ウスに注射した場合を示す。

【図２】ラットのカラゲニン誘発足蹠浮腫における地膚
子７０％エタノール抽出エキス（ＫＳ−ｅｘｔ）の経口
投与での抑制効果を示す。横軸は足蹠浮腫後の経過時間
（時間）を表し、縦軸は浮腫率を表す。・・・はコント
ロール、−●−は５０mg/kg 、−△−は２００mg/kg お
よび−■−（黒四角）は５００mg/kg 投与した場合を示
す。有意差検定：＊ｐ＜０．０５；＊＊ｐ＜０．０１

【図３】マウスのヒスタミン誘発足蹠浮腫におけるＫＳ
−ｅｘｔの経口投与での抑制効果を示す。横軸は足蹠浮
腫後の経過時間（分）を表し、縦軸は浮腫率を表す。・
・はコントロール、−●−は５０mg/kg 、−△−は２０
０mg/kg および−■−（黒四角）は５００mg/kg 投与し
た場合を示す。有意差検定：＊ｐ＜０．０５

【図４】マウスのセロトニン誘発足蹠浮腫におけるＫＳ
−ｅｘｔの経口投与での抑制効果を示す。横軸は足蹠浮
腫後の経過時間（分）を表し、縦軸は浮腫率を表す。・
・はコントロール、−●−は５０mg/kg 、−△−は２０
０mg/kg および−■−（黒四角）は５００mg/kg 投与し
た場合を示す。有意差検定：＊＊ｐ＜０．０１

Claims (3)

【特許請求の範囲】
1. 【請求項１】 地膚子または木鼈根のアルコールまたは
   アセトン抽出エキスを有効成分とする抗掻痒剤。
2. 【請求項２】 モモルジンＩおよびモモルジンＩｃの少
   なくともいずれか１種を有効成分とする抗掻痒剤。
3. 【請求項３】 モモルジンＩおよびモモルジンＩｃが地
   膚子または木鼈根由来である請求項２記載の抗掻痒剤。