JPH09201397A - 液状診断薬の保存方法 - Google Patents
液状診断薬の保存方法Info
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- JPH09201397A JPH09201397A JP8011585A JP1158596A JPH09201397A JP H09201397 A JPH09201397 A JP H09201397A JP 8011585 A JP8011585 A JP 8011585A JP 1158596 A JP1158596 A JP 1158596A JP H09201397 A JPH09201397 A JP H09201397A
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- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61J—CONTAINERS SPECIALLY ADAPTED FOR MEDICAL OR PHARMACEUTICAL PURPOSES; DEVICES OR METHODS SPECIALLY ADAPTED FOR BRINGING PHARMACEUTICAL PRODUCTS INTO PARTICULAR PHYSICAL OR ADMINISTERING FORMS; DEVICES FOR ADMINISTERING FOOD OR MEDICINES ORALLY; BABY COMFORTERS; DEVICES FOR RECEIVING SPITTLE
- A61J1/00—Containers specially adapted for medical or pharmaceutical purposes
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12Q—MEASURING OR TESTING PROCESSES INVOLVING ENZYMES, NUCLEIC ACIDS OR MICROORGANISMS; COMPOSITIONS OR TEST PAPERS THEREFOR; PROCESSES OF PREPARING SUCH COMPOSITIONS; CONDITION-RESPONSIVE CONTROL IN MICROBIOLOGICAL OR ENZYMOLOGICAL PROCESSES
- C12Q1/00—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
- G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
- G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
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Abstract
(57)【要約】
【課題】 液状診断薬の保存方法に関する。
【解決手段】 液状診断薬を脱酸素剤の存在下に気密容
器で密閉することを特徴とする液状診断薬の保存方法。
器で密閉することを特徴とする液状診断薬の保存方法。
Description
【０００１】
【発明の属する技術分野】 本発明は液状診断薬の保存
方法に関する。
方法に関する。
【０００２】
【従来の技術】 診断薬の分野では、凍結乾燥品を用い
ない、液状診断薬が開発され、医療の現場に急速に普及
してきている。しかしながら診断薬に含まれる酵素、補
酵素、酵素の活性化剤、基質、指示試薬または生体由来
成分の中には液状では不安定なため液状で保存すること
が困難な物質があり一部または全部が凍結乾燥品として
調製され保存されていた。従って、該凍結乾燥品は、使
用直前に液状に調製する必要があった。これら液状で不
安定な物質の保存安定性を改善する方法としては、種々
の金属キレート剤、紫外線吸収剤、防腐剤、還元剤、安
定化剤等を液状診断薬中に添加することが知られている
が、試薬中に添加した化合物が目的とする検出反応に影
響を与えることなどの問題点があった。溶液中に安定化
試薬を添加しない安定化方法としては、滋養強壮用液剤
中のビタミンＣの安定化方法（特開平７−２２３９４６
号公報）が知られている。
ない、液状診断薬が開発され、医療の現場に急速に普及
してきている。しかしながら診断薬に含まれる酵素、補
酵素、酵素の活性化剤、基質、指示試薬または生体由来
成分の中には液状では不安定なため液状で保存すること
が困難な物質があり一部または全部が凍結乾燥品として
調製され保存されていた。従って、該凍結乾燥品は、使
用直前に液状に調製する必要があった。これら液状で不
安定な物質の保存安定性を改善する方法としては、種々
の金属キレート剤、紫外線吸収剤、防腐剤、還元剤、安
定化剤等を液状診断薬中に添加することが知られている
が、試薬中に添加した化合物が目的とする検出反応に影
響を与えることなどの問題点があった。溶液中に安定化
試薬を添加しない安定化方法としては、滋養強壮用液剤
中のビタミンＣの安定化方法（特開平７−２２３９４６
号公報）が知られている。
【０００３】
【発明が解決しようとする課題】 本発明は、液状診断
薬の検出反応に影響を与えない確実かつ簡便な保存方法
を提供するものである。
薬の検出反応に影響を与えない確実かつ簡便な保存方法
を提供するものである。
【０００４】
【課題を解決するための手段】 前述したような問題点
を解決するために鋭意研究した結果、液状診断薬を脱酸
素剤と共に気密容器で密閉保存した場合、意外にも液状
診断薬の保存安定性が高まることを見いだし、本発明を
完成した。すなわち本発明は、液状診断薬を脱酸素剤の
存在下に気密容器で密閉することを特徴とする液状診断
薬の保存方法に関する。
を解決するために鋭意研究した結果、液状診断薬を脱酸
素剤と共に気密容器で密閉保存した場合、意外にも液状
診断薬の保存安定性が高まることを見いだし、本発明を
完成した。すなわち本発明は、液状診断薬を脱酸素剤の
存在下に気密容器で密閉することを特徴とする液状診断
薬の保存方法に関する。
【０００５】
【発明の実施の形態】 本発明によれば、液状診断薬と
脱酸素剤を気密容器で密閉することにより液状診断薬が
安定化される。本発明において用いられる脱酸素剤とし
ては、酸素を吸収する作用を有するものであれば特に限
定されないが、酸化防止剤、還元性物質、金属化合物等
をあげることができる。
脱酸素剤を気密容器で密閉することにより液状診断薬が
安定化される。本発明において用いられる脱酸素剤とし
ては、酸素を吸収する作用を有するものであれば特に限
定されないが、酸化防止剤、還元性物質、金属化合物等
をあげることができる。
【０００６】酸化防止剤としてはフェノール類、アミン
類、ヒドロキシルアミン類、アルデヒド類、ヒドラジン
類等をあげることができる。フェノール類としては、例
えばフェノール、ナフトール、ブチルヒドロキシトルエ
ン、ブチルヒドロキシアニソール等の一価フェノール
類、カテコール、ヒドロキノン等の二価フェノール類、
ピロガロール、フロログルシン、没食子酸もしくはその
塩等の三価フェノール類、リグニン、タンニン等の多価
フェノールがあげられる。
類、ヒドロキシルアミン類、アルデヒド類、ヒドラジン
類等をあげることができる。フェノール類としては、例
えばフェノール、ナフトール、ブチルヒドロキシトルエ
ン、ブチルヒドロキシアニソール等の一価フェノール
類、カテコール、ヒドロキノン等の二価フェノール類、
ピロガロール、フロログルシン、没食子酸もしくはその
塩等の三価フェノール類、リグニン、タンニン等の多価
フェノールがあげられる。
【０００７】アミン類としては、メチルアミン、エチル
アミン等の脂肪族第一アミン類、ジメチルアミン、ジエ
チルアミン等の脂肪族第二アミン類、トリメチルアミ
ン、トリエチルアミン等の脂肪族第三アミン、アリルア
ミン、トリアリルアミン等の脂肪族不飽和アミン類、シ
クロプロピルアミン、シクロヘキシルアミン等の脂環式
アミン類、アニリン、ベンジルアミン等の芳香族アミン
類があげられる。
アミン等の脂肪族第一アミン類、ジメチルアミン、ジエ
チルアミン等の脂肪族第二アミン類、トリメチルアミ
ン、トリエチルアミン等の脂肪族第三アミン、アリルア
ミン、トリアリルアミン等の脂肪族不飽和アミン類、シ
クロプロピルアミン、シクロヘキシルアミン等の脂環式
アミン類、アニリン、ベンジルアミン等の芳香族アミン
類があげられる。
【０００８】ヒドロキシアミン類としては、ヒドロキシ
アミン、メチルヒドロキシアミン等があげられる。アル
デヒド類としては、ホルムアルデヒド、アセトアルデヒ
ド等の脂肪族飽和アルデヒド類、グリオキサール、スク
シンジアルデヒド等の脂肪族ジアルデヒド類、アクロレ
イン、クロトンアルデヒド等の脂肪族不飽和アルデヒド
類、ベンズアルデヒド、ナフトアルデヒド等の芳香族ア
ルデヒド類、フルフラール等の複素環式アルデヒド類を
あげることができる。
アミン、メチルヒドロキシアミン等があげられる。アル
デヒド類としては、ホルムアルデヒド、アセトアルデヒ
ド等の脂肪族飽和アルデヒド類、グリオキサール、スク
シンジアルデヒド等の脂肪族ジアルデヒド類、アクロレ
イン、クロトンアルデヒド等の脂肪族不飽和アルデヒド
類、ベンズアルデヒド、ナフトアルデヒド等の芳香族ア
ルデヒド類、フルフラール等の複素環式アルデヒド類を
あげることができる。
【０００９】ヒドラジン類としては、ヒドラジン、メチ
ルヒドラジン、ジメチルヒドラジン、フェニルヒドラジ
ン等があげられる。
ルヒドラジン、ジメチルヒドラジン、フェニルヒドラジ
ン等があげられる。
【００１０】還元性物質としては、例えば水素化合物、
低級酸化物、イオウ化合物、リン化合物、砒素化合物、
酸化階程の低い有機化合物をあげることができる。水素
化合物としては、例えば水素、ヨウ化水素等のハロゲン
化水素類、硫化水素、水素化アルミニウムリチウム、水
素化ホウ素ナトリウム等があげられる。
低級酸化物、イオウ化合物、リン化合物、砒素化合物、
酸化階程の低い有機化合物をあげることができる。水素
化合物としては、例えば水素、ヨウ化水素等のハロゲン
化水素類、硫化水素、水素化アルミニウムリチウム、水
素化ホウ素ナトリウム等があげられる。
【００１１】低級酸化物としては、例えば一酸化炭素、
二酸化イオウ等があげられる。イオウ化合物としては、
例えば硫化ナトリウム、ポリ硫化ナトリウム、硫化アン
モニウム、亜硫酸ナトリウム等があげられる。リン化合
物としては、例えば黄リン、ホスフィン類等をあげるこ
とができる。砒素化合物としては、砒素等があげられ
る。
二酸化イオウ等があげられる。イオウ化合物としては、
例えば硫化ナトリウム、ポリ硫化ナトリウム、硫化アン
モニウム、亜硫酸ナトリウム等があげられる。リン化合
物としては、例えば黄リン、ホスフィン類等をあげるこ
とができる。砒素化合物としては、砒素等があげられ
る。
【００１２】酸化階程の低い有機化合物としては、アス
コルビン酸もしくはその塩、イソアスコルビン酸もしく
はその塩、ソルボース、グルコース等の糖類、ギ酸、シ
ュウ酸等があげられる。塩としてはナトリウム、カリウ
ム等の金属塩が例示される。金属化合物としては、電気
的陽性の大きい金属、低原子価状態にある金属塩をあげ
ることができる。
コルビン酸もしくはその塩、イソアスコルビン酸もしく
はその塩、ソルボース、グルコース等の糖類、ギ酸、シ
ュウ酸等があげられる。塩としてはナトリウム、カリウ
ム等の金属塩が例示される。金属化合物としては、電気
的陽性の大きい金属、低原子価状態にある金属塩をあげ
ることができる。
【００１３】電気的陽性の大きい金属としては、例えば
リチウム、ナトリウム、カリウム等のアルカリ金属類、
マグネシウム、カルシウム、亜鉛、鉄、チタン、クロ
ム、スズ、アルミニウム等をあげることができる。低原
子価状態にある金属塩としては、例えば鉄（ＩＩ）塩、
スズ（ＩＩ）塩、チタン（ＩＩＩ）塩、クロム（ＩＩ）
塩等があげられる。この金属塩としては、例えば塩化第
一鉄、硫化鉄等をあげることができる。
リチウム、ナトリウム、カリウム等のアルカリ金属類、
マグネシウム、カルシウム、亜鉛、鉄、チタン、クロ
ム、スズ、アルミニウム等をあげることができる。低原
子価状態にある金属塩としては、例えば鉄（ＩＩ）塩、
スズ（ＩＩ）塩、チタン（ＩＩＩ）塩、クロム（ＩＩ）
塩等があげられる。この金属塩としては、例えば塩化第
一鉄、硫化鉄等をあげることができる。
【００１４】これら脱酸素剤のうち、アスコルビン酸も
しくはその塩、イソアスコルビン酸もしくはその塩また
は鉄粉等の金属粉を含む脱酸素剤が好しく、鉄粉を含有
する脱酸素剤が特に好ましい。鉄粉等の金属粉を含む脱
酸素材としては市販品［例えば「商品名、エージレス
（登録商標）」三菱ガス化学（株）製、「商品名、アン
チモールド（登録商標）」フロイント社製］等として容
易に入手できる。
しくはその塩、イソアスコルビン酸もしくはその塩また
は鉄粉等の金属粉を含む脱酸素剤が好しく、鉄粉を含有
する脱酸素剤が特に好ましい。鉄粉等の金属粉を含む脱
酸素材としては市販品［例えば「商品名、エージレス
（登録商標）」三菱ガス化学（株）製、「商品名、アン
チモールド（登録商標）」フロイント社製］等として容
易に入手できる。
【００１５】気密容器の形状は特に限定されない。気密
容器の材質としては、酸素の透過を制限しうる材質のも
のであればいずれの材質のものでも使用でき、例えば金
属、ガラス、アルミ、アルミ蒸着膜、樹脂等があげら
れ、ガラスおよび樹脂が好ましい。樹脂としては、ポリ
エチレン、ポリスチレン、ポリカーボネート、ポリプロ
ピレン、ポリ塩化ビニル、６−ナイロン、ポリエチレン
テレフタレート等も用いうるが、酸素透過係数の低い樹
脂が好ましい。酸素透過係数の低い樹脂としては、酸素
透過係数が０．１×１０-11 ｃｍ3 （ＳＴＰ）ｃｍ-1ｓ
-1ｃｍＨｇ-1未満の樹脂、例えばポリビニルアルコー
ル、ポリアクリロニトリル、ポリ塩化ビニリデン等があ
げられる。
容器の材質としては、酸素の透過を制限しうる材質のも
のであればいずれの材質のものでも使用でき、例えば金
属、ガラス、アルミ、アルミ蒸着膜、樹脂等があげら
れ、ガラスおよび樹脂が好ましい。樹脂としては、ポリ
エチレン、ポリスチレン、ポリカーボネート、ポリプロ
ピレン、ポリ塩化ビニル、６−ナイロン、ポリエチレン
テレフタレート等も用いうるが、酸素透過係数の低い樹
脂が好ましい。酸素透過係数の低い樹脂としては、酸素
透過係数が０．１×１０-11 ｃｍ3 （ＳＴＰ）ｃｍ-1ｓ
-1ｃｍＨｇ-1未満の樹脂、例えばポリビニルアルコー
ル、ポリアクリロニトリル、ポリ塩化ビニリデン等があ
げられる。
【００１６】特に、酸素透過係数の低い袋状の気密容器
としては、ポリ塩化ビニリデンコート延伸ナイロン／ポ
リエチレンの二層膜の袋［商品名「飛竜（登録商標）」
サランラップ販売（株）］等が好ましい。液状診断薬と
脱酸素剤を気密容器で密閉保存する場合、密閉方法は特
に限定されない。
としては、ポリ塩化ビニリデンコート延伸ナイロン／ポ
リエチレンの二層膜の袋［商品名「飛竜（登録商標）」
サランラップ販売（株）］等が好ましい。液状診断薬と
脱酸素剤を気密容器で密閉保存する場合、密閉方法は特
に限定されない。
【００１７】好ましい密閉保存方法としては、液状診断
薬または脱酸素剤の少なくとも一方を酸素を透過しやす
くかつ溶液を透過しない材質からなる隔離容器で覆い、
気密容器で密閉する方法があげられる。隔離容器で覆う
ことにより、気密容器がいかなる状態におかれても、液
状診断薬と脱酸素剤とが実質的に混ざり合わない状態に
することができ脱酸素剤の液状診断薬への混入を防止で
きる。
薬または脱酸素剤の少なくとも一方を酸素を透過しやす
くかつ溶液を透過しない材質からなる隔離容器で覆い、
気密容器で密閉する方法があげられる。隔離容器で覆う
ことにより、気密容器がいかなる状態におかれても、液
状診断薬と脱酸素剤とが実質的に混ざり合わない状態に
することができ脱酸素剤の液状診断薬への混入を防止で
きる。
【００１８】隔離容器の形状は特に限定されない。隔離
容器の材質としては、溶液を保持できかつ酸素を透過で
きるものであれば材質は特に限定されないが樹脂が好ま
しい。樹脂としては酸素透過係数が０．１×１０-11 ｃ
ｍ3 （ＳＴＰ）ｃｍ-1ｓ-1ｃｍＨｇ-1以上の樹脂、例え
ばポリジメチルシロキサン、ポリ（４−メチルペンテン
−１）、天然ゴム、エチルセルロース、ポリ（２，６−
ジメチルフェニレンオキシド）、ポリテトラフルオロエ
チレン、定密度ポリエチレン、ポリスチレン、ポリカー
ボネート、ブチルゴム、酢酸セルロース、ポリプロピレ
ン、高密度ポリエチレン、ポリ塩化ビニル、６−ナイロ
ン、ポリエチレンテレフタレート等があげられる。
容器の材質としては、溶液を保持できかつ酸素を透過で
きるものであれば材質は特に限定されないが樹脂が好ま
しい。樹脂としては酸素透過係数が０．１×１０-11 ｃ
ｍ3 （ＳＴＰ）ｃｍ-1ｓ-1ｃｍＨｇ-1以上の樹脂、例え
ばポリジメチルシロキサン、ポリ（４−メチルペンテン
−１）、天然ゴム、エチルセルロース、ポリ（２，６−
ジメチルフェニレンオキシド）、ポリテトラフルオロエ
チレン、定密度ポリエチレン、ポリスチレン、ポリカー
ボネート、ブチルゴム、酢酸セルロース、ポリプロピレ
ン、高密度ポリエチレン、ポリ塩化ビニル、６−ナイロ
ン、ポリエチレンテレフタレート等があげられる。
【００１９】具体的な密閉方法としては、例えば脱酸素
剤を上記の隔離容器で覆い上記の気密容器に液状診断薬
とともに入れて密閉する方法、液状診断薬を上記の隔離
容器で覆い上記の気密容器に脱酸素剤とともに入れて密
閉する方法、または脱酸素剤および液状診断薬の両方を
隔離容器で覆ったのち、気密容器に入れて密閉する方法
等があげられる。
剤を上記の隔離容器で覆い上記の気密容器に液状診断薬
とともに入れて密閉する方法、液状診断薬を上記の隔離
容器で覆い上記の気密容器に脱酸素剤とともに入れて密
閉する方法、または脱酸素剤および液状診断薬の両方を
隔離容器で覆ったのち、気密容器に入れて密閉する方法
等があげられる。
【００２０】脱酸素剤の使用量は、脱酸素剤の酸素吸収
能力と気密容器中の空気体積、特に酸素量を考慮して決
定すればよく、密閉容器中の実質的な酸素１容量に対し
て脱酸素剤の酸素吸収能力が１容量以上、好ましくは２
容量以上である。従って、気密容器中および隔離容器中
の空気量を最小限に抑えることが好ましく、必要に応じ
て空気を窒素ガス等で置換してもよい。
能力と気密容器中の空気体積、特に酸素量を考慮して決
定すればよく、密閉容器中の実質的な酸素１容量に対し
て脱酸素剤の酸素吸収能力が１容量以上、好ましくは２
容量以上である。従って、気密容器中および隔離容器中
の空気量を最小限に抑えることが好ましく、必要に応じ
て空気を窒素ガス等で置換してもよい。
【００２１】本発明に用いうる液状診断薬は、その組成
には特に限定されるものではないが酵素または指示試薬
を含有し、必要に応じて酵素の反応基質、補酵素、賦活
剤、防腐剤、安定化剤、界面活性剤、生体由来成分、緩
衝液等を含んでいるものが好ましい。酵素としては、酸
化還元酵素、転移酵素、加水分解酵素、脱離酵素、異性
化酵素、合成酵素等があげられる。
には特に限定されるものではないが酵素または指示試薬
を含有し、必要に応じて酵素の反応基質、補酵素、賦活
剤、防腐剤、安定化剤、界面活性剤、生体由来成分、緩
衝液等を含んでいるものが好ましい。酵素としては、酸
化還元酵素、転移酵素、加水分解酵素、脱離酵素、異性
化酵素、合成酵素等があげられる。
【００２２】酸化還元酵素としては、ＣＨ−ＯＨを供与
体とするもの、アルデヒドまたはオキソ基を供与体とす
るもの、ＣＨ−ＣＨを供与体とするもの、ＣＨ−ＮＨ2
を供与体とするものＣＨ−ＮＨを供与体とするもの、還
元型ニコチンアミドアデニンジヌクレオチド（以下、Ｎ
ＡＤＨと略記する。）または還元型ニコチンアミドアデ
ニンジヌクレオチドリン酸（以下、ＮＡＤＰＨと略記す
る。）に作用するもの、窒素化合物を供与体とするも
の、ジフェノールまたは関連化合物を供与体とするも
の、過酸化水素を受容体とするもの、分子状酸素を取り
込み一対の供与体に作用するもの、スーパーオキシドを
受容体として作用するもの等があげられる。
体とするもの、アルデヒドまたはオキソ基を供与体とす
るもの、ＣＨ−ＣＨを供与体とするもの、ＣＨ−ＮＨ2
を供与体とするものＣＨ−ＮＨを供与体とするもの、還
元型ニコチンアミドアデニンジヌクレオチド（以下、Ｎ
ＡＤＨと略記する。）または還元型ニコチンアミドアデ
ニンジヌクレオチドリン酸（以下、ＮＡＤＰＨと略記す
る。）に作用するもの、窒素化合物を供与体とするも
の、ジフェノールまたは関連化合物を供与体とするも
の、過酸化水素を受容体とするもの、分子状酸素を取り
込み一対の供与体に作用するもの、スーパーオキシドを
受容体として作用するもの等があげられる。
【００２３】ＣＨ−ＯＨを供与体とするものとしては、
例えばアルコールデヒドロゲナーゼ、グルコース−６−
リン酸デヒドロゲナーゼ、グリセロールデヒドロゲナー
ゼ、グリセロール−３−リン酸デヒドロゲナーゼ、３α
−ヒドロキシステロイドデヒドロゲナーゼ、７α−ヒド
ロキシステロイドデヒドロゲナーゼ、１２α−ヒドロキ
システロイドデヒドロゲナーゼ、イソクエン酸デヒドロ
ゲナーゼ、乳酸デヒドロゲナーゼ、ピラノースオキシダ
ーゼ、グリセロールオキシダーゼ、アルコールオキシダ
ーゼ、コリンオキシダーゼ、ガラクトースオキシダー
ゼ、グルコースオキシダーゼ、コレステロールオキシダ
ーゼ、Ｌ−α−グリセロリン酸オキシダーゼ、乳酸オキ
シダーゼ、Ｄ−乳酸デヒドロゲナーゼ、マレイン酸デヒ
ドロゲナーゼ、ホスホグルコネートデヒドロゲナーゼ、
フラクトースデヒドロゲナーゼ、Ｄ−３−ヒドロキシブ
チレートデヒドロゲナーゼ、マンニトールデヒドロゲナ
ーゼ等があげられる。
例えばアルコールデヒドロゲナーゼ、グルコース−６−
リン酸デヒドロゲナーゼ、グリセロールデヒドロゲナー
ゼ、グリセロール−３−リン酸デヒドロゲナーゼ、３α
−ヒドロキシステロイドデヒドロゲナーゼ、７α−ヒド
ロキシステロイドデヒドロゲナーゼ、１２α−ヒドロキ
システロイドデヒドロゲナーゼ、イソクエン酸デヒドロ
ゲナーゼ、乳酸デヒドロゲナーゼ、ピラノースオキシダ
ーゼ、グリセロールオキシダーゼ、アルコールオキシダ
ーゼ、コリンオキシダーゼ、ガラクトースオキシダー
ゼ、グルコースオキシダーゼ、コレステロールオキシダ
ーゼ、Ｌ−α−グリセロリン酸オキシダーゼ、乳酸オキ
シダーゼ、Ｄ−乳酸デヒドロゲナーゼ、マレイン酸デヒ
ドロゲナーゼ、ホスホグルコネートデヒドロゲナーゼ、
フラクトースデヒドロゲナーゼ、Ｄ−３−ヒドロキシブ
チレートデヒドロゲナーゼ、マンニトールデヒドロゲナ
ーゼ等があげられる。
【００２４】アルデヒドまたはオキソ基を供与体とする
ものとしては、例えばルビン酸オキシダーゼ、グリセロ
アルデヒド−３−リン酸デヒドロゲナーゼ、キサンチン
オキシダーゼ、ピルビン酸デヒドロゲナーゼ、ホルムア
ルデヒドデヒドロゲナーゼ等があげられる。ＣＨ−ＣＨ
を供与体とするものとしては、例えばアシル−ＣｏＡオ
キシダーゼ、ビリルビンオキシダーゼ等があげられる。
ものとしては、例えばルビン酸オキシダーゼ、グリセロ
アルデヒド−３−リン酸デヒドロゲナーゼ、キサンチン
オキシダーゼ、ピルビン酸デヒドロゲナーゼ、ホルムア
ルデヒドデヒドロゲナーゼ等があげられる。ＣＨ−ＣＨ
を供与体とするものとしては、例えばアシル−ＣｏＡオ
キシダーゼ、ビリルビンオキシダーゼ等があげられる。
【００２５】ＣＨ−ＮＨ2 を供与体とするものとして
は、例えばグルタメートシンセターゼ、アラニンデヒド
ロゲナーゼ、チラミンオキシダーゼ、アミンオキシダー
ゼ、プトレシンオキシダーゼ、グルタメートデヒドロゲ
ナーゼ、ロイシンデヒドロゲナーゼ、Ｌ−アミノ酸オキ
シダーゼ等があげられる。ＣＨ−ＮＨを供与体とするも
のとしては、例えばサルコシンオキシダーゼ、サルコシ
ンデヒドロゲナーゼ等があげられる。
は、例えばグルタメートシンセターゼ、アラニンデヒド
ロゲナーゼ、チラミンオキシダーゼ、アミンオキシダー
ゼ、プトレシンオキシダーゼ、グルタメートデヒドロゲ
ナーゼ、ロイシンデヒドロゲナーゼ、Ｌ−アミノ酸オキ
シダーゼ等があげられる。ＣＨ−ＮＨを供与体とするも
のとしては、例えばサルコシンオキシダーゼ、サルコシ
ンデヒドロゲナーゼ等があげられる。
【００２６】ＮＡＤＨまたはＮＡＤＰＨに作用するもの
としては、例えばグルタチオンレダクターゼ、ジアホラ
ーゼ、ＮＡＤＨ−フラビンモノヌクレオチド（以下、Ｆ
ＭＮと略記する。）オキシドレダクターゼ、ＮＡＤＰＨ
−ＦＭＮオキシドレダクターゼ等があげられる。窒素化
合物を供与体とするものとしては、例えばウリカーゼ等
があげられる。
としては、例えばグルタチオンレダクターゼ、ジアホラ
ーゼ、ＮＡＤＨ−フラビンモノヌクレオチド（以下、Ｆ
ＭＮと略記する。）オキシドレダクターゼ、ＮＡＤＰＨ
−ＦＭＮオキシドレダクターゼ等があげられる。窒素化
合物を供与体とするものとしては、例えばウリカーゼ等
があげられる。
【００２７】ジフェノールまたは関連化合物を供与体と
するものとしては、例えばアスコルビン酸オキシダーゼ
等があげられる。過酸化水素を受容体とするものとして
は、例えばペルオキシダーゼ、グルタチオンペルオキシ
ダーゼ等があげられる。分子状酸素を取り込み一対の供
与体に作用するものとしては、例えばルシュフェラー
ゼ、ｐ−ヒドロキシ安息香酸ヒドロキシラーゼ等があげ
られる。
するものとしては、例えばアスコルビン酸オキシダーゼ
等があげられる。過酸化水素を受容体とするものとして
は、例えばペルオキシダーゼ、グルタチオンペルオキシ
ダーゼ等があげられる。分子状酸素を取り込み一対の供
与体に作用するものとしては、例えばルシュフェラー
ゼ、ｐ−ヒドロキシ安息香酸ヒドロキシラーゼ等があげ
られる。
【００２８】スーパーオキシドを受容体として作用する
ものとしては、例えばスーパーオキサイドディスムター
ゼ等があげられる。
ものとしては、例えばスーパーオキサイドディスムター
ゼ等があげられる。
【００２９】転移酵素としては、アシル転移酵素、グリ
コシル転移酵素、リンを含む基を転移するもの等があげ
られる。アシル転移酵素としては、例えばγ−グルタミ
ルトランスフェラーゼ、ホスホトランスアセチラーゼ、
トランスグルタミナーゼ等があげられる。
コシル転移酵素、リンを含む基を転移するもの等があげ
られる。アシル転移酵素としては、例えばγ−グルタミ
ルトランスフェラーゼ、ホスホトランスアセチラーゼ、
トランスグルタミナーゼ等があげられる。
【００３０】グリコシル転移酵素としては、例えばプリ
ンヌクレオチドフォスフォリラーゼ、シュクロースフォ
スフォリラーゼ、マルトースフォスフォリラーゼ等があ
げられる。リンを含む基を転移するものとしては、例え
ばクレアチンキナーゼ、ミオキナーゼ、ヘキソキナー
ゼ、フォスフォグルコムターゼ、ピルビン酸キナーゼ、
グリセロールキナーゼ、酢酸キナーゼ、フォスフォフル
クトキナーゼ、フォスフォグリセレートキナーゼ、ポリ
ヌクレオチドフォスフォリラーゼ、フォスフォリパーゼ
Ａ２等があげられる。
ンヌクレオチドフォスフォリラーゼ、シュクロースフォ
スフォリラーゼ、マルトースフォスフォリラーゼ等があ
げられる。リンを含む基を転移するものとしては、例え
ばクレアチンキナーゼ、ミオキナーゼ、ヘキソキナー
ゼ、フォスフォグルコムターゼ、ピルビン酸キナーゼ、
グリセロールキナーゼ、酢酸キナーゼ、フォスフォフル
クトキナーゼ、フォスフォグリセレートキナーゼ、ポリ
ヌクレオチドフォスフォリラーゼ、フォスフォリパーゼ
Ａ２等があげられる。
【００３１】加水分解酵素としては、エステル結合に作
用するもの、グリコシル化合物に作用するもの、ペプチ
ド結合に作用するもの、ペプチド以外のＣ−Ｎ結合に作
用するもの等があげられる。エステル結合に作用するも
のとしては、例えばリゾホスホリパーゼコレステロール
エステラーゼ、ホスホリパーゼＣ、ホスホリパーゼＤ、
スフィンゴミエリナーゼ、アルカリホスファターゼ、リ
ポプロテインリパーゼ等があげられる。
用するもの、グリコシル化合物に作用するもの、ペプチ
ド結合に作用するもの、ペプチド以外のＣ−Ｎ結合に作
用するもの等があげられる。エステル結合に作用するも
のとしては、例えばリゾホスホリパーゼコレステロール
エステラーゼ、ホスホリパーゼＣ、ホスホリパーゼＤ、
スフィンゴミエリナーゼ、アルカリホスファターゼ、リ
ポプロテインリパーゼ等があげられる。
【００３２】グリコシル化合物に作用するものとして
は、例えばグルコアミラーゼ、α−グルコシダーゼ、β
−グルコシダーゼ、β−ガラクトシダーゼ、ノイラミニ
ダーゼ、インベルターゼ等があげられる。ペプチド結合
に作用するものとしては、例えばカルボキシペプチダー
ゼ、プリンイミノペプチダーゼ、ピログルタミルペプチ
ダーゼ等があげられる。
は、例えばグルコアミラーゼ、α−グルコシダーゼ、β
−グルコシダーゼ、β−ガラクトシダーゼ、ノイラミニ
ダーゼ、インベルターゼ等があげられる。ペプチド結合
に作用するものとしては、例えばカルボキシペプチダー
ゼ、プリンイミノペプチダーゼ、ピログルタミルペプチ
ダーゼ等があげられる。
【００３３】ペプチド以外のＣ−Ｎ結合に作用するもの
としては、例えばウレアーゼ、クレアチニンアミドヒド
ロラーゼ、クレアチニンデイイミナーゼ、クレアチナー
ゼ、クレアチニナーゼ等があげられる。脱離酵素として
は、炭素−炭素結合に作用するもの、炭素−酸素結合に
作用するもの等があげられる。
としては、例えばウレアーゼ、クレアチニンアミドヒド
ロラーゼ、クレアチニンデイイミナーゼ、クレアチナー
ゼ、クレアチニナーゼ等があげられる。脱離酵素として
は、炭素−炭素結合に作用するもの、炭素−酸素結合に
作用するもの等があげられる。
【００３４】炭素−炭素結合に作用するものとしては、
例えばＮ−アセチルノイラミン酸アルドラーゼ、オキサ
ロ酢酸デカルボキシラーゼ等があげられる。炭素−酸素
結合に作用するものとしては、例えばエノラーゼ、アコ
ニターゼ等があげられる。異性化酵素としは、ラセマー
ゼとイソメラーゼ、分子内酸化還元酵素等があげられ
る。
例えばＮ−アセチルノイラミン酸アルドラーゼ、オキサ
ロ酢酸デカルボキシラーゼ等があげられる。炭素−酸素
結合に作用するものとしては、例えばエノラーゼ、アコ
ニターゼ等があげられる。異性化酵素としは、ラセマー
ゼとイソメラーゼ、分子内酸化還元酵素等があげられ
る。
【００３５】ラセマーゼとイソメラーゼとしては、例え
ばムタロターゼ等があげられる。分子内酸化還元酵素と
しては、例えばホスホグルコースイソメラーゼ等があげ
られる。合成酵素としては、炭素−硫黄結合を生成する
もの、炭素−窒素結合を生成するもの等があげられる。
ばムタロターゼ等があげられる。分子内酸化還元酵素と
しては、例えばホスホグルコースイソメラーゼ等があげ
られる。合成酵素としては、炭素−硫黄結合を生成する
もの、炭素−窒素結合を生成するもの等があげられる。
【００３６】炭素−硫黄結合を生成するものとしては
例えばアシル−ＣｏＡシンセターゼ等があげられる。炭
素−窒素結合を生成するものとしては、例えばウレアア
ミドリアーゼ等があげられる。指示試薬としては、呈色
試薬、呈色性酵素基質、発光試薬、蛍光試薬、メルカプ
ト化合物等があげられる。
例えばアシル−ＣｏＡシンセターゼ等があげられる。炭
素−窒素結合を生成するものとしては、例えばウレアア
ミドリアーゼ等があげられる。指示試薬としては、呈色
試薬、呈色性酵素基質、発光試薬、蛍光試薬、メルカプ
ト化合物等があげられる。
【００３７】呈色試薬としては、例えば酸化によって発
色する試薬があげられる。４−アミノアンチピリンと反
応する試薬として、例えばフェノール誘導体、アニリン
誘導体、トルイジン誘導体等［生化学と新しい診断薬の
開発，シーエムシー株式会社（１９８４）］があげられ
る。また、ペルオキシダーゼまたは過酸化水素測定用色
原体としてビス［３−ビス（４−クロロフェニル）メチ
ル−４−ジメチル−アミノフェニル］アミン等のロイコ
インドフェノール類誘導体、Ｎ−（カルボキシメチルア
ミノカルボニル）−４，４’−ビス（ジメチルアミノ）
ジフェニルアミンナトリウム塩、１０−（カルボキシメ
チルアミノカルボニル）−３，７−ビス（ジメチルアミ
ノ）フェノチアジン（以下、ＣＣＡＰと略記する。）、
４，４’−ビス（ジメチルアミノ）−ジフェニルアミ
ン、１０−Ｎ−メチルカルバミル−３，７−ビス（ジメ
チルアミノ）−１０Ｈ−フェノチアジン等のロイコメチ
レンブルー類誘導体、トリフェニルメタン系ロイコ色素
等があげられる。
色する試薬があげられる。４−アミノアンチピリンと反
応する試薬として、例えばフェノール誘導体、アニリン
誘導体、トルイジン誘導体等［生化学と新しい診断薬の
開発，シーエムシー株式会社（１９８４）］があげられ
る。また、ペルオキシダーゼまたは過酸化水素測定用色
原体としてビス［３−ビス（４−クロロフェニル）メチ
ル−４−ジメチル−アミノフェニル］アミン等のロイコ
インドフェノール類誘導体、Ｎ−（カルボキシメチルア
ミノカルボニル）−４，４’−ビス（ジメチルアミノ）
ジフェニルアミンナトリウム塩、１０−（カルボキシメ
チルアミノカルボニル）−３，７−ビス（ジメチルアミ
ノ）フェノチアジン（以下、ＣＣＡＰと略記する。）、
４，４’−ビス（ジメチルアミノ）−ジフェニルアミ
ン、１０−Ｎ−メチルカルバミル−３，７−ビス（ジメ
チルアミノ）−１０Ｈ−フェノチアジン等のロイコメチ
レンブルー類誘導体、トリフェニルメタン系ロイコ色素
等があげられる。
【００３８】呈色性酵素基質とは、酵素により分解され
て呈色性を示す化合物を示す。一例として酵素により分
解され黄色のニトロフェノール類を生じる化合物等があ
げられる。例えばβ−Ｄ−ガラクトシダーゼ等が作用す
る呈色性酵素基質として２−ニトロフェニル−β−Ｄ−
ガラクトピラノシド等が、アミラーゼ等が作用する呈色
性酵素基質として２−クロロ−４−ニトロフェニル−α
−Ｄ−マルトトリオシド等があげられる。
て呈色性を示す化合物を示す。一例として酵素により分
解され黄色のニトロフェノール類を生じる化合物等があ
げられる。例えばβ−Ｄ−ガラクトシダーゼ等が作用す
る呈色性酵素基質として２−ニトロフェニル−β−Ｄ−
ガラクトピラノシド等が、アミラーゼ等が作用する呈色
性酵素基質として２−クロロ−４−ニトロフェニル−α
−Ｄ−マルトトリオシド等があげられる。
【００３９】発光試薬としては、例えば臨床診断薬の分
野において通常使用される、ルミノール、イソルミノー
ル、ルシゲニン、アクリジニウムエステル、ルシフェリ
ン、ＡＭＰＰＤ（トロピックス社商標）、ＡＭＰＧＤ
（トロピックス社商標）等の化合物およびこれらの誘導
体［生物発光と化学発光、今井一洋編、ｐ８２−８９，
（１９８９）廣川書店、ベーリンガーマンハイム社カタ
ログ（１９９２，１９９３）］があげられる。
野において通常使用される、ルミノール、イソルミノー
ル、ルシゲニン、アクリジニウムエステル、ルシフェリ
ン、ＡＭＰＰＤ（トロピックス社商標）、ＡＭＰＧＤ
（トロピックス社商標）等の化合物およびこれらの誘導
体［生物発光と化学発光、今井一洋編、ｐ８２−８９，
（１９８９）廣川書店、ベーリンガーマンハイム社カタ
ログ（１９９２，１９９３）］があげられる。
【００４０】蛍光試薬としては、例えばクマリン、フル
オレッセイン、レゾルフィン、アミノアクリドン、ピレ
ン、ジフェニルヘキサトリエン、ニトロスチルベン等の
化合物およびこれらの誘導体［和光純薬工業（株）カタ
ログ（１９８９）］があげられる。メルカプト化合物と
しては、ＳＨ基を持つ化合物群であり、特に臨床診断薬
の分野において有用なシステイン、Ｎ−アセチルシステ
イン、ジチオスレイトール、メルカプトエタノール、グ
ルタチオン、補酵素Ａ（ＣｏＡ）、アセチルＣｏＡ等の
化合物およびこれらの誘導体［生物化学実験法１０、Ｓ
Ｈ基の定量法、松本博・国則登代著、学会出版センター
（１９７８）］があげられる。
オレッセイン、レゾルフィン、アミノアクリドン、ピレ
ン、ジフェニルヘキサトリエン、ニトロスチルベン等の
化合物およびこれらの誘導体［和光純薬工業（株）カタ
ログ（１９８９）］があげられる。メルカプト化合物と
しては、ＳＨ基を持つ化合物群であり、特に臨床診断薬
の分野において有用なシステイン、Ｎ−アセチルシステ
イン、ジチオスレイトール、メルカプトエタノール、グ
ルタチオン、補酵素Ａ（ＣｏＡ）、アセチルＣｏＡ等の
化合物およびこれらの誘導体［生物化学実験法１０、Ｓ
Ｈ基の定量法、松本博・国則登代著、学会出版センター
（１９７８）］があげられる。
【００４１】補酵素としては、例えば酸化型あるいは還
元型ニコチンアミドアデニンジヌクレオシド、酸化型あ
るいは還元型ニコチンアミドアデニンジヌクレオシドリ
ン酸、ＦＭＮ、フラビンアデニンジヌクレオチド、チア
ミン二リン酸、ピリドキサルリン酸、リポ酸、葉酸、ア
デノシン三リン酸、アデノシン二リン酸、アデノシン一
リン酸等をあげることができる。
元型ニコチンアミドアデニンジヌクレオシド、酸化型あ
るいは還元型ニコチンアミドアデニンジヌクレオシドリ
ン酸、ＦＭＮ、フラビンアデニンジヌクレオチド、チア
ミン二リン酸、ピリドキサルリン酸、リポ酸、葉酸、ア
デノシン三リン酸、アデノシン二リン酸、アデノシン一
リン酸等をあげることができる。
【００４２】酵素の活性化剤としては、例えば金属イオ
ン、塩素イオン、アンモニウムイオン、リン酸イオン、
硫酸イオン、炭酸イオン等をあげることができる。基質
としては、前述の酵素が作用する基質をあげることがで
きる。生体由来成分としては、例えば尿酸、ビリルビ
ン、ヘモグロビン、アルブミン、グロブリン、ホルモン
等をあげることができる。
ン、塩素イオン、アンモニウムイオン、リン酸イオン、
硫酸イオン、炭酸イオン等をあげることができる。基質
としては、前述の酵素が作用する基質をあげることがで
きる。生体由来成分としては、例えば尿酸、ビリルビ
ン、ヘモグロビン、アルブミン、グロブリン、ホルモン
等をあげることができる。
【００４３】緩衝液としては、例えば乳酸緩衝液、クエ
ン酸緩衝液、酢酸緩衝液、コハク酸緩衝液、フタル酸緩
衝液、リン酸緩衝液、トリエタノールアミン緩衝液、ジ
エタノールアミン緩衝液、ホウ酸緩衝液、グリシン緩衝
液、バルビツール緩衝液、トリス（ヒドロキシメチル）
アミノメタン−塩酸緩衝液、イミダゾール−酢酸緩衝液
等をあげることができる。
ン酸緩衝液、酢酸緩衝液、コハク酸緩衝液、フタル酸緩
衝液、リン酸緩衝液、トリエタノールアミン緩衝液、ジ
エタノールアミン緩衝液、ホウ酸緩衝液、グリシン緩衝
液、バルビツール緩衝液、トリス（ヒドロキシメチル）
アミノメタン−塩酸緩衝液、イミダゾール−酢酸緩衝液
等をあげることができる。
【００４４】液状診断薬中には酵素、指示試薬、補酵
素、酵素の活性化剤、基質、生体由来成分または緩衝液
が複数含まれていてもよい。本発明の効果を試験例を用
いて説明する
素、酵素の活性化剤、基質、生体由来成分または緩衝液
が複数含まれていてもよい。本発明の効果を試験例を用
いて説明する
【００４５】試験例１ ０．１％トリトンＸ−１００を含む１００ｍＭリン酸緩
衝液（ｐＨ６．６）に、呈色試薬であるＣＣＡＰを０．
１ｍｇ／ｍｌとなるように溶解し液状指示試薬を調製し
た。この液状指示試薬１００ｍｌを１００ｍｌ容ポリ塩
化ビニル製の容器に入れネジ口キャップにて封をし、次
の各条件下で、３０℃で保存した。 保存条件（１）：ポリ塩化ビニル製の容器のまま。 保存条件（２）：ポリ塩化ビニル製の容器をポリエチレ
ン製の袋（１４０×２００ｍｍ）に入れ密封する。 保存条件（３）：ポリ塩化ビニル製の容器と脱酸素剤
［エージレス（登録商標）Ｓ−２００（２００ｍｌの酸
素吸収能を有する）、三菱ガス化学（株）］をポリエチ
レン製の袋（１４０×２００ｍｍ）に入れ密封する。 保存条件（４）：ポリ塩化ビニル製の容器と脱酸素剤
（エージレスＳ−２００）をポリ塩化ビニリデンコート
延伸ナイロン／ポリエチレン製の袋［飛竜（登録商標）
ＫＮ−２０４（１４０×２００ｍｍ）、サランラップ販
売（株）］に入れ密封する。
衝液（ｐＨ６．６）に、呈色試薬であるＣＣＡＰを０．
１ｍｇ／ｍｌとなるように溶解し液状指示試薬を調製し
た。この液状指示試薬１００ｍｌを１００ｍｌ容ポリ塩
化ビニル製の容器に入れネジ口キャップにて封をし、次
の各条件下で、３０℃で保存した。 保存条件（１）：ポリ塩化ビニル製の容器のまま。 保存条件（２）：ポリ塩化ビニル製の容器をポリエチレ
ン製の袋（１４０×２００ｍｍ）に入れ密封する。 保存条件（３）：ポリ塩化ビニル製の容器と脱酸素剤
［エージレス（登録商標）Ｓ−２００（２００ｍｌの酸
素吸収能を有する）、三菱ガス化学（株）］をポリエチ
レン製の袋（１４０×２００ｍｍ）に入れ密封する。 保存条件（４）：ポリ塩化ビニル製の容器と脱酸素剤
（エージレスＳ−２００）をポリ塩化ビニリデンコート
延伸ナイロン／ポリエチレン製の袋［飛竜（登録商標）
ＫＮ−２０４（１４０×２００ｍｍ）、サランラップ販
売（株）］に入れ密封する。
【００４６】上記保存条件で１週間または２週間保存後
に分光光度計で波長６６６ｎｍで該溶液の吸光度を測定
した結果を第１表に示す。脱酸素剤を用い、気密容器で
密閉することにより指示試薬溶液の酸化が抑制され安定
化されたことがわかる。
に分光光度計で波長６６６ｎｍで該溶液の吸光度を測定
した結果を第１表に示す。脱酸素剤を用い、気密容器で
密閉することにより指示試薬溶液の酸化が抑制され安定
化されたことがわかる。
【００４７】
【表１】
【００４８】試験例２ １００ｍＭリン酸緩衝液（ｐＨ６．６）を窒素置換し、
グルコース−６−リン酸デヒドロゲナーゼを２．０Ｕ／
ｍｌとなるように溶解し酵素液とした。この酵素液１０
０ｍｌを１００ｍｌ容ポリ塩化ビニル製の容器に入れネ
ジ口キャップにて封をし、試験例１に示す各保存条件下
で、３０℃で保存した。上記条件で１週間または２週間
保存後にグルコース−６−リン酸デヒドロゲナーゼの残
存酵素活性を測定した結果を第２表に示す。脱酸素剤を
用い、気密容器で密閉することにより酵素の失活が抑制
され安定化されたことがわかる。
グルコース−６−リン酸デヒドロゲナーゼを２．０Ｕ／
ｍｌとなるように溶解し酵素液とした。この酵素液１０
０ｍｌを１００ｍｌ容ポリ塩化ビニル製の容器に入れネ
ジ口キャップにて封をし、試験例１に示す各保存条件下
で、３０℃で保存した。上記条件で１週間または２週間
保存後にグルコース−６−リン酸デヒドロゲナーゼの残
存酵素活性を測定した結果を第２表に示す。脱酸素剤を
用い、気密容器で密閉することにより酵素の失活が抑制
され安定化されたことがわかる。
【００４９】
【表２】
【００５０】以下に本発明の実施例を示す。
【００５１】
実施例１ 試験例１で調製した液状指示試薬を試験例１の保存条件
（３）で２週間保存した液状指示試薬にパーオキシダー
ゼを１０Ｕ／ｍｌおよび過酸化水素を３００μＭ／ｌと
なるように溶解し、３７℃で５分間反応させ分光光度計
で６６６ｎｍの吸光度の変化量を測定した。尚、対照セ
ル（ブランク）には過酸化水素無添加の保存溶液を用い
た。
（３）で２週間保存した液状指示試薬にパーオキシダー
ゼを１０Ｕ／ｍｌおよび過酸化水素を３００μＭ／ｌと
なるように溶解し、３７℃で５分間反応させ分光光度計
で６６６ｎｍの吸光度の変化量を測定した。尚、対照セ
ル（ブランク）には過酸化水素無添加の保存溶液を用い
た。
【００５２】その結果、吸光度の変化量は３５２ｍＡＢ
Ｓを示し、調製直後の液状指示試薬を用いて同様に吸光
度の変化量を測定した場合の吸光度の変化量３６１ｍＡ
ＢＳとほぼ同一の値を得た。一方、試験例１で調製した
液状指示試薬を試験例１の保存条件（１）で２週間保存
した液状指示試薬を用いて同様に試験したところ、吸光
度の変化量は、−１４ｍＡＢＳとなり全く測定できなか
った。
Ｓを示し、調製直後の液状指示試薬を用いて同様に吸光
度の変化量を測定した場合の吸光度の変化量３６１ｍＡ
ＢＳとほぼ同一の値を得た。一方、試験例１で調製した
液状指示試薬を試験例１の保存条件（１）で２週間保存
した液状指示試薬を用いて同様に試験したところ、吸光
度の変化量は、−１４ｍＡＢＳとなり全く測定できなか
った。
【００５３】実施例２ 試験例１で調製した液状指示試薬を試験例１の保存条件
（４）で２週間保存した液状指示試薬を用いて実施例１
と同様に試験したところ、吸光度の変化量は３６０ｍＡ
ＢＳを得た。調製直後の液状指示試薬を用いて同様に測
定した場合の吸光度の変化量３６１ｍＡＢＳとほぼ同一
の値を得た。
（４）で２週間保存した液状指示試薬を用いて実施例１
と同様に試験したところ、吸光度の変化量は３６０ｍＡ
ＢＳを得た。調製直後の液状指示試薬を用いて同様に測
定した場合の吸光度の変化量３６１ｍＡＢＳとほぼ同一
の値を得た。
【００５４】一方、試験例１で調製した液状指示試薬を
試験例１の保存条件（２）で２週間保存した液状指示試
薬を用いて同様に試験したところ、吸光度の変化量は、
−１ｍＡＢＳとなり全く測定できなかった。 実施例３ 下記成分を含有するクレアチンキナーゼ測定用試薬を調
製した。
試験例１の保存条件（２）で２週間保存した液状指示試
薬を用いて同様に試験したところ、吸光度の変化量は、
−１ｍＡＢＳとなり全く測定できなかった。 実施例３ 下記成分を含有するクレアチンキナーゼ測定用試薬を調
製した。
【００５５】 試薬１液 イミダゾールー酢酸緩衝液（ｐＨ６．６） １１５ｍＭ ＥＤＴＡ ２．３ｍＭ 酢酸マグネシウム １１．５ｍＭ Ｎーアセチルシステイン ２３ｍＭ ジチオスレイトール １０ｍＭ ＡＤＰ ２．３ｍＭ ＡＭＰ ５．８ｍＭ ＡＰ5Ａ １１．５μＭ カルボキシメトキシルアミン塩酸塩 １０ｍＭ グルコース ２３ｍＭ ＮＡＤＰ ２．３ｍＭ ヘキソキナーゼまたはグルコキナーゼ ３．４５Ｕ/ｍｌ グルコース−６−リン酸デヒドロゲナーゼ １．７２５Ｕ/ｍｌ アルブミン ０．１ｍｇ/ｍｌ 試薬２液 クレアチンリン酸 ３４５ｍＭ この試薬液それぞれ１００ｍｌを試験例１に示した保存
条件（３）で保存した。常法により上記保存試薬を用い
て、標準血清中のクレアチンキナーゼを定量した。
条件（３）で保存した。常法により上記保存試薬を用い
て、標準血清中のクレアチンキナーゼを定量した。
【００５６】その結果、調製直後の上記試薬液を用いて
測定された定量値を１００％とすると、１週間保存した
試薬液で９９．６％、２週間保存した試薬液で９２．６
％、３週間保存した試薬液で８８．５％、４週間保存し
た試薬液で８０．２％の定量値が得られた。一方、試験
例１に示した保存条件（１）で保存した場合は、１週間
保存した試薬液で９９．８％、２週間保存した試薬液で
８７．３％、３週間保存した試薬液で７２．５％、４週
間保存した試薬液で６２．０％の定量値が得られ、活性
の定量値が急激に減少した。
測定された定量値を１００％とすると、１週間保存した
試薬液で９９．６％、２週間保存した試薬液で９２．６
％、３週間保存した試薬液で８８．５％、４週間保存し
た試薬液で８０．２％の定量値が得られた。一方、試験
例１に示した保存条件（１）で保存した場合は、１週間
保存した試薬液で９９．８％、２週間保存した試薬液で
８７．３％、３週間保存した試薬液で７２．５％、４週
間保存した試薬液で６２．０％の定量値が得られ、活性
の定量値が急激に減少した。
【００５７】実施例４ 実施例３で調製した、クレアチンキナーゼ測定用試薬１
００ｍｌを試験例１に示した保存条件（４）で保存し
た。常法により上記保存試薬を用いて、標準血清中のク
レアチンキナーゼを定量した。
００ｍｌを試験例１に示した保存条件（４）で保存し
た。常法により上記保存試薬を用いて、標準血清中のク
レアチンキナーゼを定量した。
【００５８】その結果、調整直後の上記試薬液を用いて
測定された定量値を１００％とすると、１週間保存した
試薬液で１００．２％、２週間保存した試薬液で９８．
８％、３週間保存した試薬液で９７．３％、４週間保存
した試薬液で９６．２％の活性を示した。一方、試験例
１に示した保存条件（２）で保存した場合は、１週間保
存した試薬液で１００．１％、２週間保存した試薬液で
８８．８％、３週間保存した試薬液で７１．３％、４週
間保存した試薬液で６０．５％の定量値が得られ、活性
の定量値が急激に減少した。
測定された定量値を１００％とすると、１週間保存した
試薬液で１００．２％、２週間保存した試薬液で９８．
８％、３週間保存した試薬液で９７．３％、４週間保存
した試薬液で９６．２％の活性を示した。一方、試験例
１に示した保存条件（２）で保存した場合は、１週間保
存した試薬液で１００．１％、２週間保存した試薬液で
８８．８％、３週間保存した試薬液で７１．３％、４週
間保存した試薬液で６０．５％の定量値が得られ、活性
の定量値が急激に減少した。
【００５９】
【発明の効果】本保存方法により、液状診断薬を安定し
て保存できる。
て保存できる。
Claims (3)
- 【請求項１】 液状診断薬を脱酸素剤の存在下に気密容
器で密閉することを特徴とする液状診断薬の保存方法。 - 【請求項２】 液状診断薬または脱酸素剤の少なくとも
一方が酸素を透過しやすくかつ溶液を透過しない材質か
らなる隔離容器で覆われている請求項１記載の保存方
法。 - 【請求項３】 液状診断薬が酵素または指示試薬を含有
する液状診断薬である請求項１または２記載の保存方
法。
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Cited By (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JP2006115728A (ja) * | 2004-10-20 | 2006-05-11 | Asahi Glass Co Ltd | レシチン化スーパーオキシドディスムターゼ製品 |
| KR100743930B1 (ko) * | 2003-09-10 | 2007-07-30 | 도꾸리쯔교세이호진상교기쥬쯔소고겡뀨죠 | 탈산소제 및 그 제조방법 |
| JP4915955B2 (ja) * | 2005-09-26 | 2012-04-11 | 独立行政法人産業技術総合研究所 | ウミホタルルシフェリン発光基質及びその製造法 |
| JP2021145603A (ja) * | 2020-03-18 | 2021-09-27 | 味の素株式会社 | 液体製剤中の酵素の安定化方法 |
Families Citing this family (12)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CA2249227A1 (en) * | 1997-01-20 | 1998-07-23 | Kyowa Medex Co., Ltd. | Methods and reagents for quantitatively determining ascorbic acid |
| GB9801153D0 (en) * | 1998-01-21 | 1998-03-18 | Whitley Don Scient Ltd | Anaerobic culturing |
| US6729369B2 (en) | 1998-07-31 | 2004-05-04 | Chata Biosystems, Inc. | Vessel for containing/transporting a fluent substance |
| US6136339A (en) | 1998-08-21 | 2000-10-24 | Gardiner; Paul T. | Food supplements and methods comprising lipoic acid and creatine |
| DE60234142D1 (de) * | 2001-03-27 | 2009-12-10 | Nipro Corp | Albuminlösung enthaltender Kunststoffbehälter |
| JP4399556B2 (ja) * | 2001-10-11 | 2010-01-20 | アークレイ株式会社 | 酸化発色剤の安定化方法 |
| US6703216B2 (en) | 2002-03-14 | 2004-03-09 | The Regents Of The University Of California | Methods, compositions and apparatuses for detection of gamma-hydroxybutyric acid (GHB) |
| US7176135B2 (en) * | 2004-01-08 | 2007-02-13 | Taiwan Semiconductor Manufacturing Company, Ltd. | EBR shape of spin-on low-k material providing good film stacking |
| AU2005220514A1 (en) * | 2004-03-17 | 2005-09-22 | Daiichi Pure Chemicals Co., Ltd. | Method for stabilizing oxidizable color developing reagent |
| CN101063111B (zh) * | 2006-04-26 | 2010-08-25 | 上海复星医药（集团）股份有限公司 | 一种提高肌酸激酶液体双试剂稳定的方法 |
| WO2016030711A1 (en) * | 2014-08-25 | 2016-03-03 | Diasys Diagnostics India Private Limited | Stable phosphatase substrate formulation and uses thereof |
| CN111024959A (zh) * | 2019-12-20 | 2020-04-17 | 深圳市蔚景生物科技有限公司 | 一种稳定的蛋白质溶液、其制备方法及检测试剂盒 |
Family Cites Families (7)
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|---|---|---|---|---|
| US4277562A (en) * | 1976-09-13 | 1981-07-07 | Modrovich Ivan Endre | Stabilized liquid enzyme and coenzyme compositions |
| JPS6028820A (ja) * | 1983-07-26 | 1985-02-14 | Daishiro Fujishima | 脱酸素剤 |
| DE3812194A1 (de) * | 1988-04-13 | 1989-10-26 | Wolfgang Dr Med Klietmann | Transportmedium fuer mikroorganismen |
| JPH02104297A (ja) * | 1988-10-11 | 1990-04-17 | Amano Pharmaceut Co Ltd | キナーゼ類の安定化された試薬組成物 |
| JPH04339772A (ja) * | 1991-05-09 | 1992-11-26 | Toyo Seikan Kaisha Ltd | ライナー付容器蓋及びその製造方法 |
| JP3260020B2 (ja) * | 1993-08-31 | 2002-02-25 | 株式会社ヤトロン | Ｕｉｂｃ測定用試薬 |
| JPH07223946A (ja) | 1994-02-14 | 1995-08-22 | Taisho Pharmaceut Co Ltd | ビタミンｃの安定化方法 |
-
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Cited By (6)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| KR100743930B1 (ko) * | 2003-09-10 | 2007-07-30 | 도꾸리쯔교세이호진상교기쥬쯔소고겡뀨죠 | 탈산소제 및 그 제조방법 |
| JP2006115728A (ja) * | 2004-10-20 | 2006-05-11 | Asahi Glass Co Ltd | レシチン化スーパーオキシドディスムターゼ製品 |
| JP4915955B2 (ja) * | 2005-09-26 | 2012-04-11 | 独立行政法人産業技術総合研究所 | ウミホタルルシフェリン発光基質及びその製造法 |
| JP2012095649A (ja) * | 2005-09-26 | 2012-05-24 | National Institute Of Advanced Industrial Science & Technology | ウミホタルルシフェリン発光基質及びその製造法 |
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| JP2021145603A (ja) * | 2020-03-18 | 2021-09-27 | 味の素株式会社 | 液体製剤中の酵素の安定化方法 |
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