JPH08509291A - フロースルーまたはディップスティック形式の免疫クロマトグラフィアッセイのための一体化したパッケージホルダ装置 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】 この発明は、試料中に分析物があるかどうかを検出するための、一体化したパッケージホルダアッセイ装置に関する。この装置は、免疫クロマトグラフィアッセイを支持し、これを保護するという二重の役割を果たす。この装置は、いかなる免疫クロマトグラフィアッセイフォーマットにも適合する。アッセイは、実験室またはフィールドにおいて用いるために１つの装置で実施され得る。特定の例において、アッセイ装置は、透明な接着テープと剛性のあるプラスチックストリップとの間にシールされる、コチニンに関する免疫クロマトグラフィアッセイのために構成、配列されるナイロン膜である。プラスチックストリップの上に置かれる白いテープは、アッセイ結果を観測するための窓を規定する。

Description

【発明の詳細な説明】 フロースルーまたはディップスティック形式の 免疫クロマトグラフィアッセイのための 一体化したパッケージホルダ装置 １．発明の分野 この発明は、試料中に分析物があるかどうかを検出するためのアッセイ装置に 関する。このアッセイは、実験室またはフィールドで用いるために１つの装置で 行なうことができる。 ２．発明の背景 ２．１．免疫クロマトグラフィアッセイ装置 ディップスティック（dipsticK）またはフロースルー（flow-through）装置に おいて固体支持体として膜を用いる免疫クロマトグラフィアッセイは、臨床実験 室、および代替として、すなわち実験室でない、現場での試験で用いるために、 現在、確立されている。この形式を用いるアッセイは、濫用薬物（コカイン、カ ンナビノイド、アンフェタミン、アヘン剤、ＰＣＰ）、妊娠および***（それぞ れｈＣＧおよびｈＬＨ）、ならびに感染症（クラミジア、Strep A、感染性単核 症（ＩＭ））に対して利用可能である。 免疫クロマトグラフィアッセイ装置は、プラスチックホルダに密閉された膜（ セルロース系または非セルロース系）を一般に提示する。この装置はさらに、環 境制御物として作用する、シールされた箔またはプラスチックポーチで１つずつ またはまとめて包装される。パッケージの完全 性は、室温での装置の安定性を長く保つためには不可欠である。 プラスチックホルダは、確実に装置全体を正しく機能させるために、適切な構 成で膜を保持する。一般にホルダには１ないし３の窓がある。結果の観測を可能 にするのに役立つ試験窓が常にある。試験窓はまた、たとえば試験が適切に行な われているのを確かめるために、コントロール反応を見るのを可能にし、代替と して、コントロール窓が結果窓から離されてもよい。さらに、（開いた窓での試 料の接触を可能にしながら）装置を試料の中に直接置くことによって、または窓 において滴下手段によって試料を与えることによって、液体試料を膜に与えるの を可能にする、第３の窓があってもよい。プラスチックホルダはまた、一般に、 ウィック（wick）（毛管作用体）として働くパッド（セルロース系または非セル ロース系）と接触させて膜を保持する。一般に、試料を与える窓または試料が与 えられる部位にアプリケータパッドがあり、膜の反対側の端部にパッドがある。 プラスチックホルダは、パッドを膜と接触させて保持し、したがって、アプリケ ータから膜を通って上方に、およびアプリケーションパッドから上部パッドに、 試料を吸い上げるための連続体を与える。 アッセイ装置の基本的な構造の多くの変更例がある。たとえば、リトマン（Li tman）他（米国特許第５，１５６，９５２号および第５，０３０，５５８号）は 、試料中に最 小量の分析物があるかどうかを測定するためのアッセイ方法および装置を説明し ている。ウルマン（Ullman）他（米国特許第５，１３７，８０８号および第４， ８５７，４５３号）は、試料の流れを助けるために、予め含まされた液体試薬を 含むアッセイ膜を収容する装置を説明している。ダフォーン（Dafforn）他（米 国特許第４，９８１，７６８号）は、試料および追加の液体を与えるためのポー ト（出入口）を備えた装置を説明している。アッセイ装置はまた、コーティ（Co rti）他（欧州特許出願第８９１１８３７８．２号）、グリーンキスト（Greenqu ist）他（米国特許第４，８０６，３１２号）およびバーガー（Berger）他（米 国特許第５，１１４，６７３号）により説明されている。 膜およびパッドを含むプラスチック装置は、一般に、乾燥剤とともにまたは乾 燥剤なしで、シールされた箔またはプラスチックポーチで包装される。外側のパ ッケージポーチは、環境制御物として、特に、膜ストリップの外の環境への露出 を制限し、試験の完全性を確実にするのに不可欠である。室温での装置の安定性 を長く保つためには、パッケージ内の湿度が低いことが不可欠であり、したがっ て一般に乾燥剤がある。シールされたパッケージ内に、または装置と一体的に、 湿度インジケータを加えることにより、使用前の装置の完全性を確実にする。 一般的な試験方法は、外側のパッケージを開けてプラスチック装置を取出し、 （装置を試料の中に浸漬することに より、または試料を試料窓の上に滴下することにより）試料窓において試料を与 え、アッセイを実施するための、勧められた時間を待ち、陽性または陰性の結果 について結果窓を検査し、テストが正確に行なわれたかどうかを判定するために コントロール窓を検査することを伴う。 テスト装置に必要なパッケージにはいくつかの欠点がある。たとえば、装置が まとめて包装される場合、偶然に破れるのであれ、試験のために装置を取出すた めであれ、パッケージのいかなる破損も、装置の貯蔵寿命を制限する。各テスト 装置を個々に包装することは、費用がかかり、余分な固体廃棄物を生じる。 したがって、この発明の目的は、一体化したパッケージホルダの免疫クロマト グラフィアッセイ装置を提供することである。さらに他の目的は、別個のプラス チックホルダおよび外側のパッケージの必要をなくす装置を提供することである 。 ２．２競合アッセイにおける分析物の検出 微量分析のための常法である競合アッセイは、分析物がある場合には「陰性」 のシグナルをもたらし、分析物がない場合には「陽性」のシグナルをもたらす。 したがって、分析物の存在はシグナルの存在に反比例する。シグナルと分析物の 存在との間の、この逆の関係は、素人により観測される場合、重大な影響を与え る可能性がある。この逆の相関関係は、混乱させるものであり、非論理的で、こ の分 野におけるそのような試験の有用性を制限する。 標準的な競合免疫クロマトグラフィ装置において、マーカーで標識をつけられ た分析物または受容体のいずれかであり得る標識試薬は、トラップに移動し、（ 標識試薬が分析物である場合は）受容体で、（標識試薬が受容体である場合は） 分析物で、膜コーティングされる。試料が分析物を含む場合、それは受容体（移 動相または固定相のいずれか）に結合し、マーカーがトラップにより捕えられず 、「陰性」のシグナルをもたらす。試料が分析物を含まない場合、マーカーがト ラップにより捕えられ、スポット、すなわち「陽性」のシグナルが現われる。そ のため標準的な競合アッセイにおいて、陰性の結果は陽性のシグナルを有する。 したがって、この発明のさらなる目的は、試料が分析物を含む場合には競合イ ムノアッセイのフォーマットにおいて明らかな「陽性」のシグナルを与え、試料 が分析物を欠く場合には明らかな「陰性」のシグナルを与えるアッセイ装置を提 供することである。 陽性のシグナルを試料中の微量分析物の存在と相関させるために、他の方法が 提案されている。しかしながら、これらは、正確に力価検定されている追加のト ラップを、アッセイ膜に与えることを必要とする。そのような方法は、有用なア ッセイ装置を提供するが、製造の複雑さを増大させ、したがって装置の費用を増 大させる。 ３．発明の概要 この発明は、フロースルーおよびディップスティック免疫クロマトグラフィア ッセイのための一体化したパッケージホルダ積層物に関する。この装置は、免疫 クロマトグラフィアッセイを行なうための手段、たとえば、アッセイ試薬が前も って含浸されている膜を含み、これは、実質的に気密なかつ実質的に液体の漏れ ない態様の、免疫クロマトグラフィアッセイ手段をシールするための手段、たと えばマイラー、プラスチックまたは他の適切な支持体によって、完全に囲まれる 。シール手段は、アッセイ手段と接触しかつこれを支持し、さらにアッセイ手段 を露出するために開けられるように適合される。 積層物は、気密なかつ液体の漏れない態様で膜ストリップ（膜片）を同様に封 じ込める、両面テープもしくは接着フィルム、または音波溶接などのいかなる他 の方法でもシールされ得る。したがって、積層物は、膜のための一体的ホルダ、 およびパッケージポーチとして作用する。構成物は、１つの積層物に１つのスト リップまたは多数のストリップを含み、１つのストリップは、同時に多数の試験 を実施する能力を有し得る。 この発明は好ましくは、両面テープまたは接着フィルムとして供給された積層 接着剤と全表面が直接的に接触することにより全体が封じ込められた試験ストリ ップ膜（試験片膜）を含む。次に、ストリップは、必要に応じて、裏 （見えない）側にプラスチック、マイラー、または他の適切な材料を敷くことに より、支持体を与えられる。表（見える側）は、透明なプラスチックでカバーさ れ得る。次に、不透明な材料（白または着色されたプラスチック、テープ、カー ド、紙、塗料、顔料など）のさらなる層が、結果を見るための適切な窓を残しな がら、接着剤により透明なプラスチック（表）の上に直接的に付与される。積層 物は、それ自身の専用ホルダ／パッケージポーチ内にこのように与えられ、完全 に閉じ込められた試験ストリップ膜を、外の雰囲気から隔離して含む。これは、 この装置のための別個のパッケージ（プラスチック／箔ポーチまたはブリスター パック）の必要をなくす。 この発明は、免疫クロマトグラフィアッセイ、たとえば「競合」および「サン ドイッチ」アッセイと適合する、いかなるアッセイフォーマット（様式）で用い られてもよい。 この発明の免疫クロマトグラフィアッセイ装置がそれ自身のパッケージ材料を 与えることは、特に利点である。 アッセイ装置が、試料の移動を増加させるために外来のウィックまたはパッド を必要とせず、試料の移動のために追加の流体が必要でないことは、さらなる利 点である。 この発明は、気密なかつ液体の漏れない態様でシールされている、ナイロンス トリップなどの免疫クロマトグラフィアッセイ支持体を、免疫クロマトグラフィ アッセイにおいて用いることができるという、驚くべき発見に基づく。 この発明はさらに、アッセイストリップ上で、競合免疫クロマトグラフィアッ セイの試料中に分析物があるかどうかを肯定的に（ポジティブに）検出するため のゾーンに関する。この発明に従うと、免疫クロマトグラフィアッセイは、移動 可能な標識試薬を含み、そのため液体試料がある場合、標識試薬は試料とともに 、アッセイストリップに沿って検出ゾーンに移動される。検出ゾーンは、検出ゾ ーンの領域内に固定化された標識を含み、そのため、標識と検出ゾーン内の膜ス トリップとの間にはコントラストがある。アッセイの実施において、検出ゾーン 内のコントラストシグナル（コントラストのあるシグナル）は、試料中に分析物 があることを示し、検出ゾーン内の非コントラストシグナル（コントラストのな いシグナル）は、試料中に分析物がないことを示す。 ４．図面の簡単な説明 この発明の装置は、図により理解され得る。これらの図は概略図であり、同じ スケールで描かれてはいない。 図１は、この発明の装置の上面図である。 図２は、図１の装置の端から見た断面図である。 図３は、図１の装置の横から見た断面図である。 図４は、この発明の装置の別の具体例の上面図である。 図５は、この発明の装置のさらに別の具体例の側面図である。 図６は、この発明の特定の具体例の部分的な構成を示す 概略上面図である。 図７は、図６に示された装置の切断断面図である。 図８は、図６に示された、完成された装置の上面図である。 図９は、図８に示された装置の切断端面図である。 図１０は、この発明の別の装置の特定の具体例を示す上面図である。 図１１は、図１０に示された装置の切断端面図である。 ５．発明の詳細な説明 この発明は、試料中に分析物があるかどうかを検出するための免疫クロマトグ ラフィアッセイ装置（図１、図２および図３）に関する。アッセイ装置は、免疫 クロマトグラフィアッセイを行なうための手段１２を含み、手段１２は、シール 手段（１８ａおよび１８ｂ）と接触し、これらの中に、実質的に気密なかつ実質 的に液体の漏れない態様でシールされる。この発明はさらに、アッセイ手段を支 持する支持手段２０を含む。シール手段は、アッセイ手段と接触し、これを支持 する。シール手段は、アッセイ手段へのアクセスを与えるために、すなわち試料 を与えるために、ユーザにより開けられるように適合される。 この発明はさらに、試料中に関心のある分析物がある場合、競合イムノアッセ イにおいて陽性の結果を与える検出システムを提供する。 ここで用いられるように、「試料」という用語は、関心 のある分析物を含んでいると疑われる水溶液の試料を指す。そのような試料は、 血液、血漿、血清、尿、唾液、汗、滲出液、体液、および適切な水溶性の溶媒、 たとえば緩衝溶液で再構成されたかまたは溶解された材料を含むが、これらに限 定されない。 ここで用いられるように、「分析物」という用語は、関心のある分子を指す。 分析物はいかなる抗原でもよいが、小さい分析物（１００から１０００ドルトン （Dalton）のＭＷ）がまず関心のあるところである。そのような分析物は、治療 薬物およびその代謝物質、不法な薬物およびその代謝物質、ステロイド、ならび にペプチドホルモンを含む。それだけでなく、アッセイは、たとえばインシュリ ンなどのタンパク質ホルモン、またはウィルス性抗原、細菌性抗原、血清タンパ ク質、抗体もしくはいかなる関心のある抗原などの、より大きい分子に対するも のであってもよく、これらは、高速、特異的で、感度の高いアッセイにおいて分 析物があるか（またはないか）を検出することが望ましい。 ５．１．免疫クロマトグラフィアッセイ この発明の装置は、免疫クロマトグラフィアッセイを行なうための手段（「免 疫クロマトグラフィアッセイ手段」）を含む。多くの免疫クロマトグラフィアッ セイ手段およびフォーマット（形式）が、この技術分野において知られており（ 上のセクション２．１を参照のこと）、この発明 を実施する際に用いられ得る。一般に、免疫クロマトグラフィアッセイは、液体 を導くための固相支持体の使用を伴う。ここで用いられるように、「液体を導く ための固相手段」という用語は、たとえば毛管作用によって、液体がそれを通っ て移動するのを可能にする固体支持体を指す。 この発明を実施するにおいて、固相支持体はヒドロゲルとして作用するべきで ある。いかなる特定の理論によっても限定されることを意図しないが、ヒドロゲ ル材料は、液体試料がこの発明の装置の実質的に気密な環境中に移動するのを可 能にすると考えられる。適切な固相免疫クロマトグラフィアッセイ手段はナイロ ン膜であり、これはこの目的のための好ましい固相支持体であるが、試料の移動 を可能にするいかなる固相が用いられてもよい。他の適切な固相支持体は、たと えば薄層クロマトグラフィのために用いられるようなコーティングされたプラス チックおよびコーティングされたガラス、フィルタ、ポリマービーズ、シリカゲ ル、紙、膜、アガロースゲル、ポリアクリルアミドゲル、ゼラチンなどを含むが 、これらに限定されない。さらなる具体例において、固相支持体は、タンパク質 （たとえばコラーゲン、ゼラチン、アルブミンなど）、ポリエチレングリコール 、荷電されたまたは中性の多糖類（たとえばヒアルロン酸、キサントゲン酸塩、 アルギン酸塩、グアーガム、アガロースなど）およびデンプンなどのヒドロゲル 材料で含浸され得るが、これらに限定されない。別の具体 例において、免疫クロマトグラフィアッセイ手段をシールするのに用いられる接 着ポリマーもヒドロゲル特性を有し得る。 この発明の免疫クロマトグラフィアッセイ手段は、好ましくは膜ストリップで あり、より好ましくはナイロン膜ストリップである。しかしながら、免疫クロマ トグラフィアッセイ手段が、たとえばディスク上のように、液体試料が放射状に 移動するために、構成、配列され得ることが企図される。 この発明は、免疫クロマトグラフィアッセイに適合できるいかなるアッセイフ ォーマットでも用いられ得る。いかなる特定の例によっても限定されないが、一 般に、アッセイフォーマットに依存して、免疫クロマトグラフィアッセイ手段は 、移動可能な標識試薬と、標識試薬を検出するための検出ゾーンとを含む。ここ で用いられるように、「標識試薬」という用語は、関心のある分析物に対して特 異的な標識受容体、または標識分析物を指し、「移動可能な」という用語は、試 薬が液体試料とともに固相支持体に沿って移動することを意味する。移動可能な 標識試薬は、液体試料によって移動可能にされ、検出ゾーンに移動され得るよう に、固相支持体上に置かれる。以下の特定の具体例において、標識試薬は標識分 析物である。競合アッセイフォーマットにおいて、検出ゾーンは、検出ゾーン内 に固定化された標識試薬の特異的結合パートナー、すなわち、標識 受容体が用いられる場合には分析物、または標識分析物が用いられる場合には受 容体を含む（上のセクション２．２を参照のこと）。上のセクション２．２にお いて指摘されたように、検出ゾーン内の標識の検出と試料中の分析物の存在との 間には逆の相関関係がある。 サンドイッチイムノアッセイフォーマットにおいて、１つの受容体が標識をつ けられ、分析物と結合するための最初の受容体と競合しない別の受容体が、検出 ゾーン内に固定化される。分析物がある場合、それは標識受容体および固定化さ れた受容体の両方と結合し、したがって標識を検出ゾーン内の特定の領域に集中 させる。この場合、シグナルは分析物の存在と直接的に相関関係にある。 好ましくは、免疫クロマトグラフィアッセイ手段は、アッセイが正しく行なわ れていることを示すためにコントロールを含む。コントロールは、検出ゾーンよ り、固相支持体上の試料を与えるポイントからより遠位の特異的結合スポットで もよく、分析物がある場合またはない場合に標識試薬に結合し、したかって、移 動可能な受容体が液体試料とともに十分な距離を移動していて、意味のある結果 を与えていることを示す。 「受容体」という用語は、分析物に特異的に結合することができる分子を指す 。この発明のアッセイにおいて用いるのに適切な受容体は、抗体、細胞表面受容 体（もしくはリガンドおよび分析物の結合部位を含む細胞表面受容体の フラグメント）、酵素（もしくは酵素の基質結合部位）、またはリガンドと特異 的に結合しこれと複合体を形成することができ、かつ分折物と特異的に結合しこ れと複合体を形成することができる、いかなる他の分子もしくは巨大分子も含む 。抗体および細胞表面受容体が好ましいが、抗体がより好ましい。好ましい具体 例において、受容体は、分析物上の最もユニークなエピトープに対して特異的で あるように生成されるかまたは選択される。 適切な標識は、酵素、発蛍光団、発色団、放射性同位体、染料、コロイド状金 、ラテックス粒子、および化学発光試薬を含む。コントロールマーカーが用いら れる場合、受容体およびコントロールマーカーに対して同じまたは異なる標識が 用いられてもよい。以下の特定の具体例において、標識は着色されたラテックス 粒子である。 ５．２．装置のシールおよび支持 この装置はまた、シール部材とも呼ばれる、免疫クロマトグラフィアッセイ手 段をシールするための手段（「シール手段」）を含む。ここで用いられるように 、「シール手段」および「シール部材」という用語は、実質的に気密なかつ実質 的に液体の漏れない態様で免疫クロマトグラフィアッセイ手段をシールするよう に用いられ得る材料を指す。シール手段はまた、実質的に湿潤可能でないとすべ きであり、すなわち顕著な量の水を吸収しない。この発明に従うと、シール手段 として有用な材料は、接着テープ、プラス チック、マイラーなどを含むが、これらに限定されない。１つの具体例において 、シール手段は接着剤でシールされる。別の具体例において、シール手段は音波 溶接でシールされる。特定の理論によって限定されることを意図しないが、接着 剤でのシールは、装置に非剛性を与え、接着剤の隙間の空間への空気の移動、ま たはシール手段の僅かな分離を可能にし、固相支持体内での液体の移動を可能に すると考えられる。 この装置はまた、支持部材とも呼ばれる、装置を支持するための手段（「支持 手段」）を含む。ここで用いられるように、「支持手段」および「支持部材」と いう用語は、液体を導くための固相手段を強化する、すなわち膜ストリップを支 えるかまたは補強するように作用し得る材料を指す。支持手段は、たとえば接着 剤によってシール手段に付着され得る材料から選択される。特定の具体例におい て、支持手段はシール手段としても作用し得る。支持手段として用いる材料は、 ガラス、プラスチック、マイラーなどを含むが、これらに限定されない。好まし い具体例において、支持手段は、ナイロン膜を支持するのに十分剛性のある透明 なプラスチックである。代替的に、比較的剛性のない材料に、適切な剛性体が付 着されてもよい。 この装置において、液体を導くための固相手段は、シール手段と支持手段との 間に積層される。したがって、支持手段およびシール手段の両方の寸法は、免疫 クロマトグラ フィアッセイ手段の寸法より大きい。 好ましくはこの装置は、アッセイの結果を見るための、試験ゾーンと適切な位 置関係にある透明な窓を規定する。 この発明はさらに、１つの装置内に１つを超える免疫クロマトグラフィアッセ イ手段、たとえば膜ストリップをシールし、多数のアッセイを可能にすることを 企図する。 ５．３．発明の好ましい実施の形態 ここで図１、図２および図３を参照する。特定の具体例において、アッセイ試 薬が前もって含浸され、安定化されている膜ストリップ１２は、両面テープもし くは接着フィルム１８ａまたは音波溶接などの任意の積層技術によって、シール 部材１０（プラスチック、マイラーまたは他の適切な材料）に直接的に付着され る。次に、両面テープまたは接着フィルム１８ｂが、残りの露出した膜表面にさ らに与えられ、これに続いて、剛性のある、透明なプラスチックシート２０の層 が与えられ、膜ストリップを完全に密封する。代替的に、剛性のある、透明なプ ラスチックシート２０は、音波溶接によってシール部材１０にシールされ得る。 さらなる具体例において、次に、透明なプラスチックシート２０には、試験結 果およびコントロール反応を見るのを可能にするために適切な窓１４（または複 数の窓）を残しながら、両面テープまたは接着フィルム１８ｃが間接的に敷かれ 、続いて白もしくは着色されたテープまたはプラスチック２２が敷かれ（または 代替的に、白もしくは着色 された接着剤で裏打ちされたテープまたはプラスチック２２が直接的に敷かれ） 得る。代替的に、透明なプラスチックシート２０は、窓１４を規定するように塗 料を塗られるか、染色されるか、または着色され得る。 上で説明されたように製造されると、膜ストリップは、膜ホルダおよび防湿ポ ーチの二重機能を果たすパッケージ内の湿潤可能でないシート内に完全に封じ込 められる。 アッセイは、単に、たとえば積層物を切断することによって、または保護カバ ーをはがすことによって、膜ストリップの端部を露出することにより、実施され る。好ましくは、装置の上に切断マーク１６が示される。この露出した膜は、次 に試料に浸漬され、試料は露出した端部を通って入り、膜を移動する。代替的に 、装置をちょうど試料（たとえば十分な尿収集容器）に浸漬することができ、試 料は膜の露出した端部（唯一の利用可能なアクセスチャネル）を通って入り、上 方に移動する。別の具体例において、試料を露出した膜に与えることができる。 その結果は、検出ゾーン内の標識の有無で読取られる。好ましい局面において、 標識は観測窓１４を介して観測される。さらに、この装置は、パッケージ内に完 全に密封された免疫クロマトグラフィアッセイの一体的な配置であるために、試 料から取出され、乾燥され、好ましくは（たとえば接着テープで）再びシールさ れ、永久的な記録装置として便宜に貯蔵され得る。 膜および積層方法の選択は、そのような装置が、制御された細孔サイズを有し 、赤血球などのあるサイズを超える粒子を効果的に除去し、そのような装置を全 血に対して有用であるようにするように、制御され得る。 この発明の装置は、妊娠（ｈＣＧ）、***（ｈＬＨ）、感染性単核症（ＩＭ） 、Strep A、クラミジアおよび濫用薬物に対して、ディップスティックまたはフ ロースルー形式で免疫クロマトグラフィアッセイに用いられるような、たとえば 膜ストリップなどの、いかなる免疫クロマトグラフィアッセイ手段も、膜の全面 が接触され、膜が完全に密封されるように、積層を用いて密封する。次に、積層 物は、剛性のためおよびまたは表面的な外観のため必要とされるような、プラス チック、マイラーまたは任意の他の材料によって、完成され得る。上で指摘され たように、こうして膜は、一体的ホルダおよびパッケージポーチとして働く装置 内に保持される。 別の具体例において、１９９１年７月２９日に出願された米国特許出願第０７ ／７３７，０９１号に記載されるような膜が、この装置内で用いられ得る。 この発明の装置は、液体試料の移動を良好に制御する。なぜなら装置に入る試 料の容量は、密封された試験ストリップ膜の物理的な寸法によって制限されるか らである。試料の移動は、試験ストリップ膜を積層物内に閉じ込めることによっ て課される、物理的な制限によって厳しく制御さ れる。入る試料の容量は、用いられる膜の面積によって制御される。 １つの好ましい具体例において、積層物は、試験ストリップ膜および材料のシ ート（接着フィルム、テープ、透明なプラスチックシートなど）から組立てられ 、最終的な積層物は所要の寸法にダイ−カット（型で切断）される。これは、予 め切断されまたは成形された構成要素を用いると必要になる費用を排除し、個々 の構成要素を積層物に組立てると必要になる精密さを不要にする。 ここで図４を参照する。別の好ましい具体例において、水分レベル（低い湿度 に対しては青、高い湿度に対してはピンク）を示すことができる、着色された表 示ストリップ２０が、この装置に組入れられる。適切な表示ストリップは、マル チフォーム・デシカント（Multiform Desiccants）で販売される。代替的に、適 切な湿度インジケータが、試料と接触することが意図されない固相支持体の一部 分に含浸され得る。着色された領域は、積層物の上部または下部においてそれ自 身の観測窓を与えられる。インジケータはパッケージの完全性の確認として役立 つ。着色された領域がピンクである場合、すなわち高い湿度を示す場合、積層物 の完全性は危うくなっており、試験に用いられるべきではない。満足のできるパ ッケージの一体性は、青のままである着色された領域によって示される。 ここで図５を参照する。さらに別の具体例において、積 層物は、尿収集容器などの試料収集容器３０に組入れられ、したがって、収集容 器内での直接的な試料試験を可能にする。収集容器は、結果を見るのを可能にす るために透明であるべきである。この装置は、接着フィルム、両面テープ、また は音波溶接によって収集容器の内壁に付着される。この具体例において、積層物 が予め切断され、試験ストリップ膜が露出され得る（すなわち、試験を実施する 準備ができているようにする）。次に収集容器は、パッケージの完全性をもたら すように、（ねじ締めされるキャップ３２などで）シールされる。代替的に、こ の装置は、試験を実施する準備ができるまで膜ストリップが積層物内にシールさ れたままであるように、取外し可能な接着ストリップを含み得る。この場合、試 料を加える前に接着ストリップが取外される。試料が容器に集められると、試験 が自動的に実施される。集められる試料の量は、試験ストリップ膜が露出された レベルを超えるだけでよい。 ５．４．この発明の好ましい検出ゾーン 一体的な免疫クロマトグラフィアッセイ装置に加えて、この発明は、競合アッ セイフォーマットのための有利な検出ゾーンを設ける。この発明の検出ゾーンは 、標準的な競合アッセイ技術（上のセクション２．２を参照のこと）とは対照的 に、試料中に分析物がある場合には陽性のシグナルを与え、試料中に分析物がな い場合には陰性のシグナルを与える。免疫クロマトグラフィアッセイは、移動可 能な 標識試薬を含み、それにより、液体試料がある場合、標識試薬が試料とともにア ッセイストリップに沿って検出ゾーンに移動される。標識は検出ゾーン全体では なくその一部で固定化されており、そのため、標識と検出ゾーン内の膜ストリッ プとの間にはコントラストがある。検出ゾーンはまた、上で説明されたように、 標識試薬の特異的結合パートナーを含む。しかしながら、標識試薬が検出ゾーン 内の特異的結合パートナーに結合する場合、すなわち試料中に分析物がない場合 、検出ゾーン内の標識と膜ストリップとの間のコントラストが失われる。標識試 薬が検出ゾーンに結合しない場合、すなわち分析物がある場合、コントラストシ グナルが残る。したがって、検出ゾーン内のコントラストシグナルは、試料中に 分析物があることを示し、検出ゾーン内の非コントラストシグナルは、試料中に 分析物がないことを示す。このように、シグナルは試料中の分析物の存在と直接 的に相関関係がある。 別の具体例において、検出ゾーンは、１つのセクションに標識試薬の特異的結 合パートナーを含み、別の部分に標識試薬の非特異的な結合パートナー、すなわ ちコントロール結合パートナー（または代替的にコントロール標識試薬の結合パ ートナー）を含む。分析物がある場合、コントロール試薬は検出ゾーンのコント ロール領域内で結合し、一方、標識試薬は結合せず、したがって検出ゾーンの標 識領域と標識をつけられていない領域との間にコントラストを 生じ、（１）「陽性」の結果と、（２）アッセイが正しく実施されたこととを示 す。分析物がない場合、検出ゾーン全体が標識をつけられ、（１）「陰性」の結 果と、（２）アッセイが正しく実施されたこととを示す。検出ゾーンが全く標識 をつけられない場合、アッセイの実施は失敗である。 検出ゾーン内のコントラスト領域が、「＋」の印または文字などの形状に配置 され得ることが容易に理解され得る。 この技術分野における当業者によって理解され得るように、免疫クロマトグラ フィアッセイのために通常用いられる、いかなる標識システムも、この発明に従 って用いられ得る。 この発明は、以下の例によってより明らかにされる。この例は、この発明の一 例であり、発明を限定するものではないことが意図される。 ６．例：試料中のコチニン（Cotinine）の検出 ６．１．材料および方法 コチニンコーティングされた粒子の調製。青色に染色されたラテックス（直径 ０．３１８μｍ、セラディン（Seradyn）、ＩＮ（インディアナナ州）は、０． ０５Ｍのリン酸塩緩衝液、ｐＨ７．２−７．５において、室温で一晩、ウシγ− グロブリンに化学結合されたコチニン（コチニン−ＢＧＧ）の溶液でコーティン グされた。青色のラテックスの最終的な濃度は０．２５％であり、コチニン−Ｂ ＧＧの 最終濃度は３μｇ／ｍｌであった。粒子はリン酸塩緩衝液、ｐＨ７．２−７．５ 中５ｍｇ／ｍｌのＢＳＡで２回洗浄され、コーティングされたラテックス溶液は ５ｍｇ／ｍｌのＢＳＡを含むリン酸塩緩衝液で懸濁された。 コチニンに対するウサギ抗体。コチニン誘導体に対して増されるウザギ抗体は 、１９９１年７月２９日に出願された米国特許出願第０７／７３７，５２６号お よび１９９３年２月１８日に発行された国際特許公報ＷＯ ９３／０３３６７に 記載された標準的な方法を用いてトランス−４−ヒドロキシコチニン−ＫＬＨ抱 合体に対して調製された。抗体は、セファロース−コチニン（Sepharose-cotini ne）上のアフィニティクロマトグラフィによってアフィニティ精製されたバッチ のものであった。アフィニティ精製された材料は、３５０μｇ／ｍｌの濃度に０ ．５Ｍの炭酸ナトリウム、ｐＨ９．５で希釈された。 コントロール抗体。ウサギ抗ヒツジ抗体（ジャクソン・イムノリサーチ・ラボ （Jackson Immunoresearch Labs））が、０．５Ｍの炭酸ナトリウム、ｐＨ９． ３中１．２ｍｇ／ｍｌに希釈された。 試験ストリップ膜の調製。ナイロン膜（バイオダインＡ（Biodyne A）、細孔 サイズ５μｍ、ポール・バイオメンブレイン（Pall Biomembranes）、ＮＹ（ニ ューヨーク州））が、７×１０ｃｍのシートに切断された。アフィニティ精製さ れたウサギ抗コチニン抗体およびコントロール抗 体は、ライン（１ライン当り２０μｌ、２．５μｌ／ｃｍの割合で８ｃｍの長さ ）としてナイロンのシートに塗布された。ライン幅は、１０ｃｍの辺に平行に、 シートの下方端部からそれぞれ２ｃｍおよび２．５ｃｍであった。この塗布は、 ２５−７５ｐｓｉの窒素で、機械化されたエアブラシアプリケータを用いて行な われた。次にシートは、室温で１時間風乾され、続いてインキュベータにおいて ３７℃で３０分風乾された。次にシートは、０．５％カゼイン、５％スクロース 、０．１％ＴＲＩＴＯＮ Ｘ−１００、０．０５Ｍトリス、０．００３Ｍ Ｍｇ Ｃｌ₂、０．９％ＮａＣｌ、０．０２％ＮａＮ₃、ｐＨ８．０の水溶液に、攪拌下 、３０分間、浸漬された。シートは室温で少なくとも４時間風乾された。 ２０％のスクロースで０．２５％に希釈されたコチニン−ＢＧＧでコーティン グされた青色ラテックスが、アフィニティ精製されたウサギ抗コチニンのライン に隣接しかつこれと平行なゾーンとしてナイロンのシートに塗布された。各ゾー ンは約０．３×０．５ｃｍであり、各ゾーン間の空隙は約１．５ｍｍであった。 空隙は目で見えるものであった。ゾーンはシートの下方端部から約１．５ｃｍ離 れて塗布された。この塗布は、２５−７５ｐｓｉの窒素で機械化されたエアブラ シアプリケータを用いて行なわれた。次にシートは室温で風乾された。 ７×１０ｃｍのシートは、０．５×７ｃｍのストリップ に切断され、各ストリップは、目に見える青のラテックスゾーンならびにアフィ ニティ精製された抗コチニンのラインおよびコントロール抗体ゾーンを有する。 試験ストリップ膜の、その一体化したホルダ／パッケージポーチへの組立。 （ａ） 図６および図７を参照して、試験ストリップ膜１２が、アークラド（ Arclad）７１４８両面テープ６０（アドヒーシブズ・リサーチ（Adhesives Rese arch）、ＰＡ（ペンシルバニア州））の小片（２×８ｃｍ）の上に置かれた。膜 のコーティングされていない表面（コーティングされた青色ラテックスおよび抗 体が含浸されていない側）が、テープの露出した表面に付着され、膜がテープの 小片の中央に置かれた。膜１２がテープ６０の上に置かれ、青色ラテックスのス トリップ６２がほぼ図６に示されるように位置決めされた。 （ｂ） ここで図８および図９を参照して、膜ストリップ１２は、アークラド ７５３０接着フィルム６６（アドヒーシブズ・リサーチ、ＰＡ）の小片（２×８ ｃｍ）で膜の露出した表面および接着剤をカバーすることにより、完全に密封さ れた。７５３０の第２の接着表面の上のカバーが除去され、露出した表面（上表 面）が透明なプラスチックフィルム６４、すなわち支持部材でカバーされた。接 着フィルムおよびプラスチックフィルムは、すべての接着表面を完全に接触させ 、膜をアセンブリ内に完全にシールする のを可能にするように、全面がしっかりと押圧された。 （ｃ） ここで図１０および図１１を参照する。次に、透明なプラスチックの 上表面が、試験結果およびコントロール反応を見るのを可能にするために、膜ス トリップ１２上のアフィニティ精製された抗コチニンラインおよびコントロール 抗体ラインの上で適切な窓１４（または複数の窓）を残しながら、白もしくは着 色されたテープまたはプラスチック７０でカバーされた。（接着剤で裏打ちされ た材料で直接カバーされるが、同じ効果が、両面テープまたは接着フィルム、続 いて白もしくは着色されたテープまたはプラスチックで、間接的に達成すること ができた。）さらに、積層物の下方端部が、コーティングされた青色ラテックス のストリップ６２のすぐ下で、２つのライン１６でマークをつけられた。試験を 実施するために試験ストリップ膜１２を試料に曝露するため、２つのライン間の スペースが切断された。アセンブリ全体、すなわち一体化したホルダパッケージ ポーチ内の試験ストリップ膜全体が、コチニンに関するアッセイのための装置で ある。 コチニンに関するアッセイ。装置の下部の、２つのマーカーラインにより示さ れているところを切断することにより、試験キットを用いる準備ができた。これ は試験ストリップ膜の端部を露出した。 装置の切断された端部が試料と接触するように、装置が試料中に置かれた。装 置は１０分間試料中に置かれたまま にされ、その時間の後結果が読取られた。試料は既知の量のコチニンを含む尿試 料であった。 ６．２．結果 疾病管理センター（Centers for Disease Control）（ＣＤＣ）から受取られ る既知のコチニン濃度を有する尿試料で、６０の試験が実施された。この装置を 用いるアッセイの結果（「本装置を用いた検出（Detectlon with the Device） 」）は、以下の表１に示され、試料のコチニン濃度と、ＣＤＣにより提出された １００ｎｇ／ｍｌの陽性のカットオフ値と比較される。 表２で表１の結果を要約した。ＣＤＣ標準の下でおよびこの装置を用いて、コ チニンに関して陽性と記録された試料の数は、「＋、＋」スクエアの（３２）で あり、この発明の装置を用いて陽性と記録されたかＣＤＣ標準に従うと陰性であ った試料の数は、「＋、−」スクエアに示されるように（０）であり、この装置 を用いて陰性と記録されたかＣＤＣ標準に従うと陽性であった試料の数は、「− 、＋」スクエアの（１１）であり、この装置を用いて陰性と記録された一方ＣＤ Ｃ標準に従い陰性であった試料の数は、「−、−」スクエアに示される。 精度（この装置を用いた、正確なアッセイ結果の比率）、感度（この装置を用 いた、正確な陽性の結果の比率）および特異性（この装置を用いた、正確な陰性 の結果の比率）について以下の所見を、表２のデータから得ることができる。陽 性の結果に対するカットオフが１００ｎｇ／ｍｌである、既知のコチニン濃度の 試験試料に対して、この発明の装置を用いるアッセイの全精度は、８１．６％（ ６０のうち４９）である。この値は、「＋、＋」および「−、−」の値をすべて 加算し、試験の総数で割ることによって計算される。陽性と記録された試料の数 を、ＣＤＣ標準に従う陽性の試料の総数で割ることから計算される、この装置を 用いるアッセイの感度は、７４．４％（４３のうち３２）であった。陰性と記録 された試料の数を、ＣＤＣ標準に従う陰性の試料の総数で割ることから計算され る、この装置の特異性は、１００％（１７／１７）であった。 この結果は、この発明が尿試料中のコチニンを検出することかできることをは っきりと示す。 この発明は、ここで説明された特定の具体例による範囲内に限定されるべきで はない。それどころか、ここで説明 されたものに加えてこの発明のさまざまな変形例が、上述の説明および添付の図 面から当業者には明らかになるであろう。そのような変形例は、添付された請求 の範囲の範囲内にあることが意図される。 さまざまな公報をここに引用したが、その開示の全体を引用により援用する。

【手続補正書】特許法第１８４条の８ 【提出日】１９９５年６月２６日 【補正内容】請求の範囲 １．ａ）検出ゾーンを規定した、試料中に分析物があるかどうかを検出するた めに免疫クロマトグラフィアッセイを行なうための手段と、 ｂ）前記アッセイ手段を実質的に気密なかつ実質的に液体の漏れない態様でシ ールするための手段とを含み、前記シール手段は、前記アッセイ手段と接触しか つこれを支持し、さらに前記アッセイ手段を液体試料に暴露するように適合され る、免疫クロマトグラフィアッセイ装置。 ２．前記シール手段は、前記シール手段を切断することによって前記アッセイ 手段を露出するように適合される、請求項１に記載の装置。 ３．前記シール手段は、アッセイ結果を見るための、試験ゾーンと整合した透 明な窓を規定する、請求項１に記載の装置。 ４．前記シール手段に結合され、前記装置を堅くするための剛性体手段をさら に含む、請求項１に記載の装置。 ５．前記シール手段および前記剛性体手段は、実質的に透明であり、前記装置 は、前記剛性体手段に結合され前記剛性体手段および前記シール手段を介して試 験ゾーンを見るための窓を規定する実質的に不透明な層をさらに含む、請求項４ に記載の装置。 ６．前記シール手段内の汚染を検出するための手段をさらに含む、請求項１に 記載の装置。 ７．アッセイされるべき試料を保持するための容器をさらに含み、前記シール 手段および前記アッセイ手段は、前記容器の内部表面に固定される、請求項１に 記載の装置。 ８．前記シール手段には、前記アッセイ手段を露出するための手段が設けられ る、請求項７に記載の装置。 ９．前記剛性体手段は透明なプラスチックである、請求項４に記載の装置。 １０．１つを超える分析物に対するアッセイ手段を含む、請求項１に記載の装 置。 １１．前記シール手段は透明なプラスチックテープである、請求項１に記載の 装置。 １２．前記アッセイ手段は、膜、コーティングされたプラスチック、コーティ ングされたガラス、フィルタ、シリカゲル、紙、アガロースゲル、ポリアクリル アミドゲル、およびゼラチンからなるグループから選択される材料を含む、請求 項１に記載の装置。 １３．前記アッセイ手段は、ナイロン膜を含む、請求項１に記載の装置。 １４．前記免疫クロマトグラフィアッセイ手段は、接着剤によって前記シール 手段に付着される、請求項１に記載の装置。 １５．前記接着剤は、前記シール手段上の接着剤および両面テープからなるグ ループから選択される、請求項１４に記載の装置。 １６．前記剛性体手段は、音波溶接、両面接着テープ、または接着剤によって 前記シール手段にシールされる、請求項４に記載の装置。 １７．ａ）第１の、細長い、実質的に湿潤可能でない層と、 ｂ）前記第１の層上に置かれた、それを通って液体試料を導くことができ、か つ、アッセイ試薬、および試料中に分析物があるかどうかを検出するための検出 ゾーンを含むストリップ部材と、 ｃ）前記ストリップ部材を囲んで前記第１の層にシールされた、前記第１の層 および前記ストリップ部材の上に置かれる、第２の、細長い、実質的に湿潤可能 でない層とを含み、 前記第１の層および前記第２の層のうち少なくとも１つは、アッセイ結果を観 測するための、前記アッセイ試薬と整合した透明な窓を規定し、前記第１の層お よび前記第２の層は、前記ストリップ部材を前記試料に暴露するように適合され る、免疫クロマトグラフィアッセイ装置。 １８．前記第１の層または前記第２の層は、透明なプラスチックである、請求 項１７に記載の装置。 １９．前記第２の層は、透明なプラスチックテープまたは音波溶接によって前 記第１の層にシールされる、請求項１７に記載の装置。 ２０．前記ストリップ部材はナイロン膜である、請求項 １７に記載の装置。 ２１．前記ストリップ部材は、両面接着テープによって前記第１の層に付着さ れる、請求項１７に記載の装置。 ２２．１つを超えるストリップ部材を含み、それにより、１つを超える分析物 が試料中に検出され得る、請求項１７に記載の装置。 ２３．前記免疫クロマトグラフィアッセイ手段は、アッセイストリップ上で、 競合免疫クロマトグラフィアッセイの試料中に分析物があるかどうかを肯定的に 検出するためのゾーンを含み、前記免疫クロマトグラフィアッセイは、標識に結 合された移動可能な試薬を含み、そのため液体試料がある場合には、標識試薬は 前記試料とともに前記アッセイストリップに沿って検出ゾーンに移動され、前記 検出ゾーンは、その領域内に固定化された標識と、前記標識が固定化されている 領域に離れて隣接した、その領域内に固定化された前記標識試薬の特異的結合パ ートナーとを含む前記アッセイストリップの領域であり、それにより、前記標識 が固定化されている領域と前記特異的結合パートナーが固定化されている領域と の間にコントラストを観測することができ、そのため、分析物がない場合に前記 標識試薬が移動可能にされると、前記標識試薬は、前記検出ゾーン内の固定化さ れた特異的結合パートナーに結合し、固定化された標識と前記固定化された特異 的結合パートナーとの間のコントラストをなくし、一方分析物がある場合に前記 標識試薬が移動可能にされると、前記標識試薬は、前記分析物と前記検出ゾーン 内の前記特異的結合パートナーとの結合のために、前記検出ゾーン内の前記固定 化された特異的結合パートナーに結合せず、前記標識と前記検出ゾーン内の膜ス トリップとの間のコントラストを維持し、ここで、前記検出ゾーン内のコントラ ストシグナルは前記試料中に分析物があることを示し、前記検出ゾーン内の非コ ントラストシグナルは前記試料中に分析物がないことを示す、請求項１に記載の 装置。 ２４．膜ストリップは、アッセイストリップ上で、競合免疫クロマトグラフィ アッセイの試料中に分析物があるかどうかを肯定的に検出するためのゾーンを含 み、前記免疫クロマトグラフィアッセイは、標識に結合された移動可能な試薬を 含み、そのため液体試料がある場合には、標識試薬は前記試料とともに前記アッ セイストリップに沿って検出ゾーンに移動され、前記検出ゾーンは、その領域内 に固定化された標識と、前記標識か固定化されている領域に離れて隣接した、そ の領域内に固定化された前記標識試薬の特異的結合パートナーとを含む前記アッ セイストリップの領域であり、それにより、前記標識が固定化されている領域と 前記特異的結合パートナーが固定化されている領域との間にコントラストを観測 することができ、そのため、分析物がない場合に前記標識試薬が移動可能にされ ると、前記標識試薬は、前記検出ゾーン内の固定化された特異的結 合パートナーに結合し、固定化された標識と前記固定化された特異的結合パート ナーとの間のコントラストをなくし、一方分析物がある場合に前記標識試薬が移 動可能にされると、前記標識試薬は、前記分析物と前記検出ゾーン内の前記特異 的結合パートナーとの結合のために、前記検出ゾーン内の前記固定化された特異 的結合パートナーに結合せず、前記標識と前記検出ゾーン内の前記膜ストリップ との間のコントラストを維持し、ここで、前記検出ゾーン内のコントラストシグ ナルは前記試料中に分析物があることを示し、前記検出ゾーン内の非コントラス トシグナルは前記試料中に分析物がないことを示す、請求項１７に記載の装置。 ２５．アッセイストリップ上で、競合免疫クロマトグラフィアッセイの試料中 に分析物があるかどうかを肯定的に検出するためのゾーンであって、前記免疫ク ロマトグラフィアッセイは、標識に結合された移動可能な試薬を含み、そのため 液体試料がある場合、標識試薬は前記試料とともに前記アッセイストリップに沿 って検出ゾーンに移動され、前記検出ゾーンは、その領域内に固定化された標識 と、前記標識が固定化されている領域に離れて隣接した、その領域内に固定化さ れた前記標識試薬の特異的結合パートナーとを含む前記アッセイストリップの領 域であり、それにより、前記標識が固定化されている領域と前記特異的結合パー トナーが固定化されている領域との間にコントラストを観測することができ、そ のため、分析物かない場合に前記 標識試薬が移動可能にされると、前記標識試薬は、前記検出ゾーン内の固定化さ れた特異的結合パートナーに結合し、固定化された標識と前記固定化された特異 的結合パートナーとの間のコントラストをなくし、一方、分析物がある場合に前 記標識試薬が移動可能にされると、前記標識試薬は、前記分析物と前記検出ゾー ン内の前記特異的結合パートナーとの結合のために、前記検出ゾーン内の前記固 定化された特異的結合パートナーに結合せず、前記標識と前記検出ゾーン内の膜 ストリップとの間のコントラストを維持し、ここで、前記検出ゾーン内のコント ラストシグナルは前記試料中に分析物があることを示し、前記検出ゾーン内の非 コントラストシグナルは前記試料中に分析物がないことを示す、ゾーン。 ２６．試料中に分析物があるかどうかを測定するためにアッセイを行なうため の方法であって、 ａ）膜の露出した部分に試料を与えるステップを含み、この膜ストリップは、 免疫クロマトグラフィアッセイを行なうための手段を含み、このアッセイ手段は 、検出ゾーンを含み、前記膜ストリップは、前記検出ゾーンと整合した、少なく とも１つの透明な窓部分を有する、少なくとも２つの実質的に湿潤可能でない層 の間にシールされ、それにより、前記試料は前記膜ストリップによって前記検出 ゾーンに導かれ、さらに ｂ）前記窓部分を介して前記検出ゾーン内のアッセイ結 果を観測するステップを含み、 前記アッセイ結果は、前記試料中に前記分析物があるかどうかに対応する、方 法。 ２７．試料中に分析物があるかどうかを測定するためにアッセイを行なうため の方法であって、 ａ）免疫クロマトグラフィアッセイ装置のアッセイ手段の露出した部分に試料 を与えるステップを含み、前記装置は、 ｉ）試料中に分析物があるかどうかを検出するために免疫クロマトグラフィ アッセイを行なうための手段を含み、このアッセイ手段は検出ゾーンを規定し、 前記装置はさらに ｉｉ）実質的に気密なかつ実質的に液体の漏れない態様で前記アッセイ手段 をシールするための手段を含み、前記シール手段は、前記アッセイ手段と接触し かつこれを支持し、さらに前記アッセイ手段の一部分を液体試料に暴露するよう に適合され、 それにより、前記試料は前記アッセイ手段によって前記検出ゾーンに導かれ 、前記方法はさらに ｂ）前記検出ゾーン内のアッセイ結果を観測するステップを含み、 前記アッセイ結果は、前記試料中に前記分析物があるかどうかに対応する、方 法。 ２８．試料中に分析物があるかどうかを測定するために アッセイを行なうための方法であって、 ａ）免疫クロマトグラフィアッセイ装置のストリップ部材の露出した部分に試 料を与えるステップを含み、前記装置は、 ｉ） 第１の、細長い、実質的に湿潤可能でない層と、 ｉｉ）前記第１の層の上に置かれた、それを通って液体試料を導くことがで き、かつ、アッセイ試薬、および試料中に分析物があるかどうかを検出するため の検出ゾーンを含むストリップ部材とを含み、前記装置はさらに ｉｉｉ）前記第１の層および前記ストリップ部材の上に置かれる、第２の、 細長い、実質的に湿潤可能でない層を含み、前記第２の層は、実質的に気密なか つ実質的に液体の漏れない態様で、前記ストリップ部材を囲んで前記第１の層に シールされ、前記第１の層および前記第２の層のうちの少なくとも１つは、アッ セイ結果を観測するための、前記アッセイ試薬と整合した透明な窓を規定し、前 記第１の層および前記第２の層は、前記ストリップ部材を前記試料に暴露するよ うに適合され、 それにより、前記試料は前記ストリップ部材によって前記検出ゾーンに導か れ、前記方法はさらに ｂ）窓部分を介して前記検出ゾーン内のアッセイ結果を観測するステップを含 み、 前記アッセイ結果は、前記試料中に前記分析物があるかどうかに対応する、方 法。

Claims (1)

1. 【特許請求の範囲】 １．検出ゾーンを規定した、試料中に分析物があるかどうかを検出するために 免疫クロマトグラフィアッセイを行なうための手段と、 実質的に気密なかつ実質的に液体の漏れない態様で前記アッセイ手段をシール するための手段とを含み、前記シール手段は、前記アッセイ手段と接触しかつこ れを支持し、さらに、前記アッセイ手段を液体試料に暴露するために、使用者に より開けられるように適合される、免疫クロマトグラフィアッセイ装置。 ２．前記シール手段は、前記シール手段を切断することにより開けられるよう に適合される、請求項１に記載の装置。 ３．前記シール手段は、アッセイ結果を見るための、試験ゾーンと整合した透 明な窓を規定する、請求項１に記載の装置。 ４．前記シール手段に結合され、前記装置を堅くするための剛性体手段をさら に含む、請求項１に記載の装置。 ５．前記シール手段および前記剛性体手段は実質的に透明であり、前記装置は 、前記剛性体手段に結合され前記剛性体手段およびシール手段を介して試験ゾー ンを見るための窓を規定する実質的に不透明な層をさらに含む、請求項４に記載 の装置。 ６．前記シール手段内の汚染を検出するための手段をさ らに含む、請求項１に記載の装置。 ７．アッセイされるべき試料を保持するための容器をさらに含み、前記シール 手段および前記アッセイ手段は、前記容器手段の内部表面に固定される、請求項 １に記載の装置。 ８．前記シール手段には、前記アッセイ手段を露出するための手段が設けられ る、請求項７に記載の装置。 ９．前記剛性体手段は透明なプラスチックである、請求項４に記載の装置。 １０．１つを超える分析物に対するアッセイ手段を含む、請求項１に記載の装 置。 １１．前記シール手段は透明なプラスチックテープである、請求項１に記載の 装置。 １２．前記アッセイ手段は、膜、コーティングされたプラスチック、コーティ ングされたガラス、フィルタ、シリカゲル、紙、アガロースゲル、ポリアクリル アミドゲル、およびゼラチンからなるグループから選択される材料を含む、請求 項１に記載の装置。 １３．前記アッセイ手段はナイロン膜を含む、請求項１に記載の装置。 １４．前記アッセイ手段は、接着剤によって前記シール手段に付着される、請 求項１に記載の装置。 １５．前記接着剤は、前記シール手段上の接着剤および両面テープからなるグ ループから選択される、請求項１４ に記載の装置。 １６．前記剛性体手段は、音波溶接、両面接着テープ、または接着剤によって 前記シール手段にシールされる、請求項４に記載の装置。 １７．第１の、細長い、実質的に湿潤可能でない層と、 前記第１の層上に置かれた、それを通って液体試料を導くことができ、かつ、 アッセイ試薬、および試料中に分析物があるかどうかを検出するための検出ゾー ンを含むストリップ部材と、 前記ストリップ部材を完全に囲んで前記第１の層にシールされた、前記第１の 層および前記ストリップ部材の上に置かれる、第２の、細長い、実質的に湿潤可 能でない層とを含み、 前記第１の層および前記第２の層のうち少なくとも１つは、アッセイ結果を観 測するための、前記アッセイ試薬と整合した透明な窓を規定し、前記第１の層お よび第２の層は、前記ストリップ部材を前記試料に暴露するように適合される、 免疫クロマトグラフィアッセイ装置。 １８．前記第１の層または前記第２の層は透明なプラスチックである、請求項 １７に記載の装置。 １９．前記第２の層は、透明なプラスチックテープまたは音波溶接によって前 記第１の層にシールされる、請求項１７に記載の装置。 ２０．前記ストリップ部材はナイロン膜である、請求項 １７に記載の装置。 ２１．ストリップ膜ストリップは、両面接着テープによって前記第１の層に付 着される、請求項１７に記載の装置。 ２２．１つを超えるストリップ部材を含み、それにより、１つを超える分析物 が試料中に検出され得る、請求項１７に記載の装置。 ２３．前記免疫クロマトグラフィアッセイ手段は、アッセイストリップ上で、 競合免疫クロマトグラフィアッセイの試料中に分析物があるかどうかを肯定的に 検出するためのゾーンを含み、前記免疫クロマトグラフィアッセイは、移動可能 な標識試薬を含み、そのため液体試料がある場合、前記標識試薬は前記試料とと もに前記アッセイストリップに沿って検出ゾーンに移動され、標識は、前記検出 ゾーンの領域内に固定化されており、そのため前記標識と前記検出ゾーン内の膜 ストリップとの間にコントラストがあり、それにより、前記検出ゾーン内のコン トラストシグナルは前記試料中に分析物があることを示し、前記検出ゾーン内の 非コントラストシグナルは前記試料中に分析物がないことを示す、請求項１に記 載の装置。 ２４．膜ストリップは、アッセイストリップ上で、競合免疫クロマトグラフィ アッセイの試料中に分析物があるかどうかを肯定的に検出するためのゾーンを含 み、前記免疫クロマトグラフィアッセイは、移動可能な標識試薬を含み、そのた め液体試料がある場合、前記標識試薬は前記試料と ともに前記アッセイストリップに沿って検出ゾーンに移動され、標識は、前記検 出ゾーンの領域内に固定化されており、そのため前記標識と前記検出ゾーン内の 前記膜ストリップとの間にコントラストがあり、それにより、前記検出ゾーン内 のコントラストシグナルは前記試料中に分析物があることを示し、前記検出ゾー ン内の非コントラストシグナルは前記試料中に分析物がないことを示す、請求項 １７に記載の装置。 ２５．アッセイストリップ上で、競合免疫クロマトグラフィアッセイの試料中 に分析物があるかどうかを肯定的に検出するためのゾーンであって、前記免疫ク ロマトグラフィアッセイは、移動可能な標識試薬を含み、そのため液体試料があ る場合、前記標識試薬は前記試料とともに前記アッセイストリップに沿って検出 ゾーンに移動され、標識は、前記検出ゾーンの領域内に固定化されており、その ため前記標識と前記検出ゾーン内の膜ストリップとの間にコントラストがあり、 それにより、前記検出ゾーン内のコントラストシグナルは前記試料中に分析物が あることを示し、前記検出ゾーン内の非コントラストシグナルは前記試料中に分 析物がないことを示す、ゾーン。 ２６．試料中に分析物があるかどうかを測定するためにアッセイを行なうため の方法であって、 検出ゾーンを、前記検出ゾーンと整合した少なくとも１つの透明な窓部分を有 する少なくとも２つの実質的に湿潤 可能でない層の間に含む免疫クロマトグラフィアッセイを行なうための手段を含 む膜ストリップを、シールするステップと、 前記膜ストリップの一部分を露出するステップと、 前記膜ストリップの露出された部分に試料を与え、それにより前記試料が前記 膜ストリップによって前記検出ゾーンに導かれるステップと、 前記検出ゾーン内のアッセイ結果を、前記窓部分を介して観測するステップと を含む、方法。 ２７．試料中に分析物があるかどうかを測定するためにアッセイを行なうため の方法であって、 請求項１に記載の免疫クロマトグラフィアッセイ装置のアッセイ手段を露出す るステップと、 前記アッセイ手段の露出された部分に試料を与え、それにより前記試料が前記 アッセイ手段によって検出ゾーンに導かれるステップと、 前記検出ゾーン内のアッセイ結果を観測するステップとを含む、方法。 ２８．試料中に分析物があるかどうかを測定するためにアッセイを行なうため の方法であって、 請求項１７に記載の装置のストリップ部材の一部分を露出するステップと、 前記ストリップ部材の露出された部分に試料を与え、それにより前記試料が前 記ストリップ部材によって検出ゾー ンに導かれるステップと、 前記検出ゾーン内のアッセイ結果を、窓部分を介して観測するステップとを含 む、方法。