JPH08248033A - 乳癌再発検出のための腫瘍マーカー群 - Google Patents
乳癌再発検出のための腫瘍マーカー群Info
- Publication number
- JPH08248033A JPH08248033A JP5073996A JP5073996A JPH08248033A JP H08248033 A JPH08248033 A JP H08248033A JP 5073996 A JP5073996 A JP 5073996A JP 5073996 A JP5073996 A JP 5073996A JP H08248033 A JPH08248033 A JP H08248033A
- Authority
- JP
- Japan
- Prior art keywords
- assay
- tumor marker
- patient
- tps
- disease
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Pending
Links
Classifications
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
- G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
- G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
- G01N33/53—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor
- G01N33/574—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor for cancer
- G01N33/57407—Specifically defined cancers
- G01N33/57415—Specifically defined cancers of breast
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Immunology (AREA)
- Urology & Nephrology (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Hematology (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Analytical Chemistry (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Hospice & Palliative Care (AREA)
- Oncology (AREA)
- Food Science & Technology (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Physics & Mathematics (AREA)
- Cell Biology (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- General Physics & Mathematics (AREA)
- Pathology (AREA)
- Investigating Or Analysing Biological Materials (AREA)
- Measuring Or Testing Involving Enzymes Or Micro-Organisms (AREA)
Abstract
(57)【要約】
【課題】 乳癌の再発を検出する。
【解決手段】 腫瘍マーカー検定群を実施する。患者か
らの血液試料中の異常腫瘍マーカー水準の存在によって
検出する。その腫瘍マーカー群はＣＡ２２８検定とＣＡ
１５ー３検定とＴＰＳ検定との中少なくとも２つを包含
する。３つ全ての腫瘍マーカー検定を包含する腫瘍マー
カー群は全ての場合、本質的に１００％再発を検出し、
約５．５ケ月の先行期間中央値を与える。
らの血液試料中の異常腫瘍マーカー水準の存在によって
検出する。その腫瘍マーカー群はＣＡ２２８検定とＣＡ
１５ー３検定とＴＰＳ検定との中少なくとも２つを包含
する。３つ全ての腫瘍マーカー検定を包含する腫瘍マー
カー群は全ての場合、本質的に１００％再発を検出し、
約５．５ケ月の先行期間中央値を与える。
Description
【０００１】
【発明の背景】本発明は乳癌の処置をうけた患者におけ
る疾病の再発を検出する診断方法に関する。更に、本発
明は臨床的に意義あるリードタイム（ｌｅａｄ ｔｉｍ
ｅ）を持った、乳癌再発の検出のための診断方法に関す
る。
る疾病の再発を検出する診断方法に関する。更に、本発
明は臨床的に意義あるリードタイム（ｌｅａｄ ｔｉｍ
ｅ）を持った、乳癌再発の検出のための診断方法に関す
る。
【０００２】癌生体マ−カ−（腫瘍マ−カ−）は、健康
な個体に比較して、癌を持つ患者の血液中で濃度が増大
する物質である。癌生体マ−カ−に関する、５つの可能
性を持つ用法が提案された（文献１、２）。これには潜
在的癌に関して、無症候個体群における選別と、症候患
者における癌診断の確認と、他の方法で癌と診断された
患者における予後と、一次の療法の成功の監視と、療法
を受けている患者における再発の監視とが含まれる。３
０年前の、ＧｏｌｄとＦｒｅｅｄｍａｎとによるＣＥＡ
の発見（文献３）後の嘱望にも拘らず、腫瘍マ−カ−は
一般個体群における選別に関しては有用な手段ではな
い。
な個体に比較して、癌を持つ患者の血液中で濃度が増大
する物質である。癌生体マ−カ−に関する、５つの可能
性を持つ用法が提案された（文献１、２）。これには潜
在的癌に関して、無症候個体群における選別と、症候患
者における癌診断の確認と、他の方法で癌と診断された
患者における予後と、一次の療法の成功の監視と、療法
を受けている患者における再発の監視とが含まれる。３
０年前の、ＧｏｌｄとＦｒｅｅｄｍａｎとによるＣＥＡ
の発見（文献３）後の嘱望にも拘らず、腫瘍マ−カ−は
一般個体群における選別に関しては有用な手段ではな
い。
【０００３】例外は、指頭直腸診察と組合せた場合の前
立腺癌の早期検出について、Ａｍｅｒｉｃａｎ Ｃａｎ
ｃｅｒ ＳｏｃｉｅｔｙとＵ．Ｓ．Ｆｏｏｄ ａｎｄ
Ｄｒｕｇ Ａｄｍｉｎｉｓｔｒａｔｉｏｎにより推薦さ
れた前立腺特異性抗原（ＰＳＡ）である。同様に、提案
時には（ａｔ ｔｈｅ ｔｉｍｅ ｏｆ ｐｒｅｓｅｎ
ｔａｔｉｏｎ）血清マ−カ−は予想に明白な有用性を示
さなかった。しかし、生体マ−カ−は一次療法に引き続
く患者の監視および癌の再発の監視で有用なことが判っ
た。このことは、繊毛癌の検出におけるｈＣＧの使用と
睾丸癌をもつ患者の監視におけるＡＦＰとに関しては特
に真実である（文献４、５）。これらのマ−カ−は末期
の繊毛癌と睾丸癌とにおいてさえ、治効のある療法の有
効性のために、この適用は好結果であることが判った。
立腺癌の早期検出について、Ａｍｅｒｉｃａｎ Ｃａｎ
ｃｅｒ ＳｏｃｉｅｔｙとＵ．Ｓ．Ｆｏｏｄ ａｎｄ
Ｄｒｕｇ Ａｄｍｉｎｉｓｔｒａｔｉｏｎにより推薦さ
れた前立腺特異性抗原（ＰＳＡ）である。同様に、提案
時には（ａｔ ｔｈｅ ｔｉｍｅ ｏｆ ｐｒｅｓｅｎ
ｔａｔｉｏｎ）血清マ−カ−は予想に明白な有用性を示
さなかった。しかし、生体マ−カ−は一次療法に引き続
く患者の監視および癌の再発の監視で有用なことが判っ
た。このことは、繊毛癌の検出におけるｈＣＧの使用と
睾丸癌をもつ患者の監視におけるＡＦＰとに関しては特
に真実である（文献４、５）。これらのマ−カ−は末期
の繊毛癌と睾丸癌とにおいてさえ、治効のある療法の有
効性のために、この適用は好結果であることが判った。
【０００４】乳癌をもつ患者の管理に対する癌生体マ−
カ−の適用は不成功であることが経験された。乳癌にお
ける臨床的有用性に関して試験された検体には癌胎児性
抗原（ＣＥＡ）、癒着分子として機能する、結腸および
***組織中に低水準で発現する糖蛋白質（文献６）と、
ＣＡ１５−３検定により測定される、牛乳脂肪球中に見
出されるムチン性抗原（文献７）と、多クロ−ン抗体に
基づく検定（組織ポリペプチド特異性抗原ＴＰＡ）と単
クロ−ン抗体に基づく検定（組織ポリペプチド特異性抗
原ＴＰＳ）とにより測定されるチトケラチン１８の断片
とを含む。ＣＡ１５−３（ＭＣＡ、ＣＡＭ２６、ＣＡＭ
２９、ＣＡ５４９、ＢＣＭ）と同じムチンを検出する、
あり余る程の検定を含む他の検定が乳癌の検出に或る感
度を示した。
カ−の適用は不成功であることが経験された。乳癌にお
ける臨床的有用性に関して試験された検体には癌胎児性
抗原（ＣＥＡ）、癒着分子として機能する、結腸および
***組織中に低水準で発現する糖蛋白質（文献６）と、
ＣＡ１５−３検定により測定される、牛乳脂肪球中に見
出されるムチン性抗原（文献７）と、多クロ−ン抗体に
基づく検定（組織ポリペプチド特異性抗原ＴＰＡ）と単
クロ−ン抗体に基づく検定（組織ポリペプチド特異性抗
原ＴＰＳ）とにより測定されるチトケラチン１８の断片
とを含む。ＣＡ１５−３（ＭＣＡ、ＣＡＭ２６、ＣＡＭ
２９、ＣＡ５４９、ＢＣＭ）と同じムチンを検出する、
あり余る程の検定を含む他の検定が乳癌の検出に或る感
度を示した。
【０００５】表１に示すごとく、患者が単一の診断試験
を用いて監視されている場合、乳癌再発は患者の約５０
〜７０％で検出できる（文献８−１９）。生体マ−カ−
監視による乳癌再発の検出は広く転移した再発例えば骨
と内臓と中枢神経システムとへの転移に関しては非常に
敏感である。しかし、生体マ−カ−は局部への転移（ｌ
ｏｃｏｒｅｇｉｏｎａｌ ｓｐｒｅａｄ）の検出は相当
効果が少い（文献９、１２、１７）。乳癌再発の早期検
出の感度を改善するため、生体マ−カ−の一群が提案さ
れ、試験された。表１にまとめられた結果は、２つのマ
−カ−例えばＣＡ１５−３とＣＥＡとの併用は感度を約
５〜２０％上昇させることを示している。その上、幾つ
かの研究では３つの、マ−カ−の群を適用し全感度８１
〜８７％を達成した。しかし、他の研究においては、癌
マ−カ−の組合せは単一マ−カ−だけの使用以上の有利
さを示していない。例えば、Ｔｏｎｄｉｎｉ等（文献１
６）とＣｏｌｏｍｅｒ等（文献１８）とはＣＡ１５−３
とＣＥＡとの組合せはＣＡ１５−３のみによって得られ
た結果を改善するのに失敗したと結論した。同様にＳｏ
ｌｅｔｏｒｍｏｓ等（文献２０）はＣＡ１５−３へのＣ
ＥＡまたはＴＰＡの添加は乳癌の再発を検出する能力の
改善を与えなかったことを示した。他の研究において
は、乳癌再発の検出感度の増大は僅かである（文献１
７）。まとめると、これらのデ−タは、与えられた、癌
生体マ−カ−のどんな組合せも乳癌再発の早期検出の感
度は改善するかもしれないが、実際に何等かの改善がさ
れるかどうか、そして、もしそうであったとしても、ど
んな感度の増加量が得られるかを、知識の現水準に基づ
いて何等かの正確さで予言できないことを示唆してい
る。
を用いて監視されている場合、乳癌再発は患者の約５０
〜７０％で検出できる（文献８−１９）。生体マ−カ−
監視による乳癌再発の検出は広く転移した再発例えば骨
と内臓と中枢神経システムとへの転移に関しては非常に
敏感である。しかし、生体マ−カ−は局部への転移（ｌ
ｏｃｏｒｅｇｉｏｎａｌ ｓｐｒｅａｄ）の検出は相当
効果が少い（文献９、１２、１７）。乳癌再発の早期検
出の感度を改善するため、生体マ−カ−の一群が提案さ
れ、試験された。表１にまとめられた結果は、２つのマ
−カ−例えばＣＡ１５−３とＣＥＡとの併用は感度を約
５〜２０％上昇させることを示している。その上、幾つ
かの研究では３つの、マ−カ−の群を適用し全感度８１
〜８７％を達成した。しかし、他の研究においては、癌
マ−カ−の組合せは単一マ−カ−だけの使用以上の有利
さを示していない。例えば、Ｔｏｎｄｉｎｉ等（文献１
６）とＣｏｌｏｍｅｒ等（文献１８）とはＣＡ１５−３
とＣＥＡとの組合せはＣＡ１５−３のみによって得られ
た結果を改善するのに失敗したと結論した。同様にＳｏ
ｌｅｔｏｒｍｏｓ等（文献２０）はＣＡ１５−３へのＣ
ＥＡまたはＴＰＡの添加は乳癌の再発を検出する能力の
改善を与えなかったことを示した。他の研究において
は、乳癌再発の検出感度の増大は僅かである（文献１
７）。まとめると、これらのデ−タは、与えられた、癌
生体マ−カ−のどんな組合せも乳癌再発の早期検出の感
度は改善するかもしれないが、実際に何等かの改善がさ
れるかどうか、そして、もしそうであったとしても、ど
んな感度の増加量が得られるかを、知識の現水準に基づ
いて何等かの正確さで予言できないことを示唆してい
る。
【０００６】
【発明の要約】ＣＡ２２８検定とＣＡ１５−３検定とＴ
ＰＳ検定との中少くとも２つからなる試験群が患者の乳
癌の再発検出について有用な手段を提供することが思い
がけず発見された。全ての３つのマ−カ−を測定した場
合全ての再発を本質的に１００％検出できる。異常な腫
瘍マ−カ−血液水準は、例えば、腫瘍マ−カ−値が
（ｉ）正常値の上限あるいは（ｉｉ）疾患の証拠を示し
ていない間に患者から採った血液試料について実施した
少くとも３回の検定の平均値の１１０％（より通常には
１３０％、より好ましくは１５０％）を超えていると決
定することにより、何らかの統計的に有意な方法で示す
ことができる。乳癌の再発は多くの違った形例えば対側
の***の二次悪性腫瘍、癌の局所リンパ節への転移ある
いは腫瘍のより遠い部位例えば骨、肝臓または中枢神経
システムへの転移で現われ得る。全ての場合再発は一次
腫瘍の、手術、放射線、化学療法などによる除去または
処置前に起った一次腫瘍の転移の反映である。本発明の
３つの腫瘍マ−カ−群が約５．５ケ月の先行期間中央値
を与えることが発見された。先行期間は腫瘍生体マ−カ
−の初期上昇と、生体マ−カ−測定以外の在来の診断方
法例えば健康検査、胸部Ｘ線、骨スキャン、核磁気共鳴
映像法（ＭＲＩ）などを用いて、医師による再発の検出
時との間の期間として定義される。
ＰＳ検定との中少くとも２つからなる試験群が患者の乳
癌の再発検出について有用な手段を提供することが思い
がけず発見された。全ての３つのマ−カ−を測定した場
合全ての再発を本質的に１００％検出できる。異常な腫
瘍マ−カ−血液水準は、例えば、腫瘍マ−カ−値が
（ｉ）正常値の上限あるいは（ｉｉ）疾患の証拠を示し
ていない間に患者から採った血液試料について実施した
少くとも３回の検定の平均値の１１０％（より通常には
１３０％、より好ましくは１５０％）を超えていると決
定することにより、何らかの統計的に有意な方法で示す
ことができる。乳癌の再発は多くの違った形例えば対側
の***の二次悪性腫瘍、癌の局所リンパ節への転移ある
いは腫瘍のより遠い部位例えば骨、肝臓または中枢神経
システムへの転移で現われ得る。全ての場合再発は一次
腫瘍の、手術、放射線、化学療法などによる除去または
処置前に起った一次腫瘍の転移の反映である。本発明の
３つの腫瘍マ−カ−群が約５．５ケ月の先行期間中央値
を与えることが発見された。先行期間は腫瘍生体マ−カ
−の初期上昇と、生体マ−カ−測定以外の在来の診断方
法例えば健康検査、胸部Ｘ線、骨スキャン、核磁気共鳴
映像法（ＭＲＩ）などを用いて、医師による再発の検出
時との間の期間として定義される。
【０００７】本発明はまたＣＡ２２８検定とＣＡ１５−
３検定とＴＰＳ検定とのおのおのを実施するための免疫
学的検定試薬を包含する、患者の乳癌再発検出に用いる
試験キットを提供する。典型的には、前記の検定おのお
ののための免疫学的検定試薬は各腫瘍マ−カ−抗原と結
合する特異性の、一組の抗体試薬を包含する。
３検定とＴＰＳ検定とのおのおのを実施するための免疫
学的検定試薬を包含する、患者の乳癌再発検出に用いる
試験キットを提供する。典型的には、前記の検定おのお
ののための免疫学的検定試薬は各腫瘍マ−カ−抗原と結
合する特異性の、一組の抗体試薬を包含する。
【０００８】
【好ましい態様の説明】ここに用いるように、ＣＡ２２
８検定とはＮＣＡ５０／９０測定のための検定を言う。
ＮＣＡ（非特異***差感作抗原）は、もとはＣＥＡに対
して生じる抗体と交差感作する正常組織の一成分として
記載された（Ｍａｃｈ Ｊ−Ｐ及びＰｕｓｚｔａｓｚｅ
ｒｉ Ｇ（１９７２） Ｉｍｍｕｎｏｃｈｅｍｉｓｔｒ
ｙ ９，１０３１−１０３４；とｖｏｎ Ｋｌｅｉｓｔ
Ｓ，Ｃｈａｖｅｎｅｌ Ｇ及びＢｕｒｔｉｎ Ｐ（１
９７２）Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳ
Ａ６９，２４９２−２４９４）。そういうものとして、
ＮＣＡはＣＥＡの検定に関して潜在的な非腫瘍由来の妨
害物と見なされていた。分子クロ−ニングは計算値Ｍｒ
３７，０００の一種のＮＣＡを同定した（Ｂａｒｎｅｔ
ｔ Ｔ，Ｇｏｅｂｅｌ ＳＪ，Ｍｏｔｈｄｕｒｆｔ Ｍ
Ａ及びＥｌｔｉｎｇ ＪＪ（１９８８）Ｇｅｎｏｍｉｃ
ｓ ３，５９−６６；Ｔａｗａｒｇｉ Ｙ ｅｔ ａｌ
（１９８８）Ｂｉｏｃｈｅｍ．Ｂｉｏｐｈｙｓ．Ｒｅ
ｓ．Ｃｏｍｍｕｎ．１５０，８９−９６；およびＮｅｕ
ｍａｉｅｒ Ｍ，ｅｔ ａｌ（１９８８）Ｊ．Ｂｉｏ
ｌ．Ｃｈｅｍ．２６３，３２０３−３２０７）。このＮ
ＣＡはＭｒ９０，０００イソフォルム（ｉｓｏｆｏｒ
ｍ）をもつアミノ酸同一性を持つ、Ｍｒ５０，０００の
成熟蛋白質（ｍａｔｕｒｅ ｐｒｏｔｅｉｎ）とコ−ド
化されていることが知られているので、ＮＣＡ５０／９
０と命名された。ＮＣＡ遺伝系統群の第２のメンバ−
（ｓｅｃｏｎｄ ｍｅｍｂｅｒ）は分子クロ−ニングで
同定され、Ｍｒ９５，０００糖蛋白質の暗号はＮＣＡ９
５と命名された（Ｋｕｒｏｋｉ Ｍ ｅｔ ａｌ（１９
９１）Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．２６６，１１８１０−
１１８１７）。特別のＣＡ２２８検定法は以下の実施例
中に記載されている。
８検定とはＮＣＡ５０／９０測定のための検定を言う。
ＮＣＡ（非特異***差感作抗原）は、もとはＣＥＡに対
して生じる抗体と交差感作する正常組織の一成分として
記載された（Ｍａｃｈ Ｊ−Ｐ及びＰｕｓｚｔａｓｚｅ
ｒｉ Ｇ（１９７２） Ｉｍｍｕｎｏｃｈｅｍｉｓｔｒ
ｙ ９，１０３１−１０３４；とｖｏｎ Ｋｌｅｉｓｔ
Ｓ，Ｃｈａｖｅｎｅｌ Ｇ及びＢｕｒｔｉｎ Ｐ（１
９７２）Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳ
Ａ６９，２４９２−２４９４）。そういうものとして、
ＮＣＡはＣＥＡの検定に関して潜在的な非腫瘍由来の妨
害物と見なされていた。分子クロ−ニングは計算値Ｍｒ
３７，０００の一種のＮＣＡを同定した（Ｂａｒｎｅｔ
ｔ Ｔ，Ｇｏｅｂｅｌ ＳＪ，Ｍｏｔｈｄｕｒｆｔ Ｍ
Ａ及びＥｌｔｉｎｇ ＪＪ（１９８８）Ｇｅｎｏｍｉｃ
ｓ ３，５９−６６；Ｔａｗａｒｇｉ Ｙ ｅｔ ａｌ
（１９８８）Ｂｉｏｃｈｅｍ．Ｂｉｏｐｈｙｓ．Ｒｅ
ｓ．Ｃｏｍｍｕｎ．１５０，８９−９６；およびＮｅｕ
ｍａｉｅｒ Ｍ，ｅｔ ａｌ（１９８８）Ｊ．Ｂｉｏ
ｌ．Ｃｈｅｍ．２６３，３２０３−３２０７）。このＮ
ＣＡはＭｒ９０，０００イソフォルム（ｉｓｏｆｏｒ
ｍ）をもつアミノ酸同一性を持つ、Ｍｒ５０，０００の
成熟蛋白質（ｍａｔｕｒｅ ｐｒｏｔｅｉｎ）とコ−ド
化されていることが知られているので、ＮＣＡ５０／９
０と命名された。ＮＣＡ遺伝系統群の第２のメンバ−
（ｓｅｃｏｎｄ ｍｅｍｂｅｒ）は分子クロ−ニングで
同定され、Ｍｒ９５，０００糖蛋白質の暗号はＮＣＡ９
５と命名された（Ｋｕｒｏｋｉ Ｍ ｅｔ ａｌ（１９
９１）Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．２６６，１１８１０−
１１８１７）。特別のＣＡ２２８検定法は以下の実施例
中に記載されている。
【０００９】ここで用いるように、“ＣＡ１５−３検
定”とは文献−Ｇｅｎｄｌｅｒ ＳＪ，Ｓｐｉｃｅｒ
ＡＰ，Ｌａｌａｎｉ Ｅ−Ｎ，Ｄｕｈｉｇ Ｊ，Ｐｅａ
ｔ Ｎ，Ｂｕｒｃｈｅｌｌ Ｊ，Ｐｅｍｂｅｒｔｏｎ
Ｌ，Ｂｏｓｈｅｌｌ Ｍ ａｎｄ Ｔａｙｌｏｒ−Ｐａ
ｐａｄｉｍｉｔｒｉｏｕ Ｊ（１９９１） Ａｎ Ｒｅ
ｖ Ｄｉｓ １４４：５４２−５４７，およびＨｉｌｋ
ｅｎｎｓ Ｊ，Ｌｉｇｔｅｎｂｅｒｇ ＭＪＬ，Ｖｏｓ
ＨＬ ａｎｄ Ｌｉｔｏｖｉｎｏｖ ＳＶ（１９９
２）ＴＩＢＳ １７：３５９−３６３に記載されている
ように、脂肪球中に見出されるムチン抗原測定のための
検定をいう。ＣＡ１５−３検定はまた種種な商業的に入
手可能なキット例えばＴＥＣＨＮＩＣＯＮ ＩＭＭＵＮ
Ｏ １TMＣＡ１５−３検定、Ｍｉｌｅｓ Ｄｉａｇｎｏ
ｓｔｉｃｓ， Ｔａｒｒｙｔｏｗｎ，Ｎｅｗ Ｙｏｒ
ｋ， ＵＳＡ； ＣＥＮＴＯＣＯＲ ＣＡ１５−３検
定，Ｃｅｎｔｏｃｏｒ，Ｍａｌｖｅｒｎ，Ｐｅｎｎｓｙ
ｌｖａｎｉａ，ＵＳＡおよびＣＩＳ ｂｉｏ ｉｎｔｅ
ｒｎａｔｉｏｎａｌ， Ｇｉｆ−Ｓｕｒ−Ｙｖｅｅｔｔ
ｅ，Ｃｅｄｅｘ，Ｆｒａｎｃｅから入手可能のＣＡ１５
−３検定を用いて実施できる。
定”とは文献−Ｇｅｎｄｌｅｒ ＳＪ，Ｓｐｉｃｅｒ
ＡＰ，Ｌａｌａｎｉ Ｅ−Ｎ，Ｄｕｈｉｇ Ｊ，Ｐｅａ
ｔ Ｎ，Ｂｕｒｃｈｅｌｌ Ｊ，Ｐｅｍｂｅｒｔｏｎ
Ｌ，Ｂｏｓｈｅｌｌ Ｍ ａｎｄ Ｔａｙｌｏｒ−Ｐａ
ｐａｄｉｍｉｔｒｉｏｕ Ｊ（１９９１） Ａｎ Ｒｅ
ｖ Ｄｉｓ １４４：５４２−５４７，およびＨｉｌｋ
ｅｎｎｓ Ｊ，Ｌｉｇｔｅｎｂｅｒｇ ＭＪＬ，Ｖｏｓ
ＨＬ ａｎｄ Ｌｉｔｏｖｉｎｏｖ ＳＶ（１９９
２）ＴＩＢＳ １７：３５９−３６３に記載されている
ように、脂肪球中に見出されるムチン抗原測定のための
検定をいう。ＣＡ１５−３検定はまた種種な商業的に入
手可能なキット例えばＴＥＣＨＮＩＣＯＮ ＩＭＭＵＮ
Ｏ １TMＣＡ１５−３検定、Ｍｉｌｅｓ Ｄｉａｇｎｏ
ｓｔｉｃｓ， Ｔａｒｒｙｔｏｗｎ，Ｎｅｗ Ｙｏｒ
ｋ， ＵＳＡ； ＣＥＮＴＯＣＯＲ ＣＡ１５−３検
定，Ｃｅｎｔｏｃｏｒ，Ｍａｌｖｅｒｎ，Ｐｅｎｎｓｙ
ｌｖａｎｉａ，ＵＳＡおよびＣＩＳ ｂｉｏ ｉｎｔｅ
ｒｎａｔｉｏｎａｌ， Ｇｉｆ−Ｓｕｒ−Ｙｖｅｅｔｔ
ｅ，Ｃｅｄｅｘ，Ｆｒａｎｃｅから入手可能のＣＡ１５
−３検定を用いて実施できる。
【００１０】ここに用いるように、“ＴＰＳ検定”とは
文献−Ｂｉｏｒｋｌｕｎｄ Ｂ（１９７８）Ａｎｔｉｂ
ｉｏｔｉｃｓ Ｃｈｅｍｏｔｈｅｒ ２２：１６−３
１；およびＥｓｋｅｌｉｎｅｎ Ｍ，Ｈｉｐｐｅｌａｉ
ｎｅｎ Ｍ，ＳａｌｍｅｌａＥ，Ｐａａｊａｎｅｎ
Ｈ，Ａｌｈａｖａ Ｅ ａｎｄ Ｓｙｒｊａｎｅｎ Ｋ
（１９９２）Ａｎｔｉｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓ １２：２
０３３−２０３６に記載されているように、組織ポリペ
プチド特異性抗原に関する単クロ−ン抗体に基づく検定
をいう。商業的試験キットもまた例えばＢＥＫＩ Ｄｉ
ａｇｎｏｓｔｉｃｓ，Ｂｒｏｍｍａ，Ｓｗｅｄｅｎから
入手可能である。
文献−Ｂｉｏｒｋｌｕｎｄ Ｂ（１９７８）Ａｎｔｉｂ
ｉｏｔｉｃｓ Ｃｈｅｍｏｔｈｅｒ ２２：１６−３
１；およびＥｓｋｅｌｉｎｅｎ Ｍ，Ｈｉｐｐｅｌａｉ
ｎｅｎ Ｍ，ＳａｌｍｅｌａＥ，Ｐａａｊａｎｅｎ
Ｈ，Ａｌｈａｖａ Ｅ ａｎｄ Ｓｙｒｊａｎｅｎ Ｋ
（１９９２）Ａｎｔｉｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓ １２：２
０３３−２０３６に記載されているように、組織ポリペ
プチド特異性抗原に関する単クロ−ン抗体に基づく検定
をいう。商業的試験キットもまた例えばＢＥＫＩ Ｄｉ
ａｇｎｏｓｔｉｃｓ，Ｂｒｏｍｍａ，Ｓｗｅｄｅｎから
入手可能である。
【００１１】本発明は個別の腫瘍マ−カ−検定を実施す
るためのどんな特別な方法にも限定されない。血液（例
えば血清または血漿）腫瘍マ−カ−水準の測定には、本
質的にどんな定量法を採用してもよい。典型的には、し
かし、関心のある腫瘍マ−カ−抗原を抗体試薬の特異的
結合に基づいて測定する免疫学的検定が採用されること
になる。在来の多クロ−ンまたは単クロ−ン抗体が免疫
学的検定形式および技術でよく知られている方法に採用
できる。典型的には、そのような測定は２つの抗体試
薬、即ち、その１つは他の潜在的な関係物質の除外のた
めにその腫瘍マ−カ−を認識する１つと、その腫瘍マ−
カ−と特異的または非特異的に結合できる他の１つとを
用いる。二重（ｔｗｏ ｓｉｔｅ）免疫測定あるいはサ
ンドウィッチ免疫学的検定により実施されることにな
る。サンドウィッチ免疫学的検定においては、少くとも
１つの単クロ−ン抗体を採用するのが一般的には好まし
い。要求される抗体試薬調製のための検定形式及び方法
はその分野で熟達している人によって選択できる。適当
な抗体試薬は、標識例えば酵素−標識されるか、あるい
は不動化、例えばプラスチックあるいは磁気ビ−ズまた
は球に結合されてミクロタイタ−板（ｍｉｃｒｏｔｉｔ
ｅｒ ｐｌａｔｅ）に塗られることができ、そしてそれ
は全免疫グロブリン例えばＩｇＧまたはＩｇＭあるい
は、断片例えばＦａｂとＦａｂ´とＦ（ａｂ´）2 断片
あるいは、それらの凝集体よりなることができる。
るためのどんな特別な方法にも限定されない。血液（例
えば血清または血漿）腫瘍マ−カ−水準の測定には、本
質的にどんな定量法を採用してもよい。典型的には、し
かし、関心のある腫瘍マ−カ−抗原を抗体試薬の特異的
結合に基づいて測定する免疫学的検定が採用されること
になる。在来の多クロ−ンまたは単クロ−ン抗体が免疫
学的検定形式および技術でよく知られている方法に採用
できる。典型的には、そのような測定は２つの抗体試
薬、即ち、その１つは他の潜在的な関係物質の除外のた
めにその腫瘍マ−カ−を認識する１つと、その腫瘍マ−
カ−と特異的または非特異的に結合できる他の１つとを
用いる。二重（ｔｗｏ ｓｉｔｅ）免疫測定あるいはサ
ンドウィッチ免疫学的検定により実施されることにな
る。サンドウィッチ免疫学的検定においては、少くとも
１つの単クロ−ン抗体を採用するのが一般的には好まし
い。要求される抗体試薬調製のための検定形式及び方法
はその分野で熟達している人によって選択できる。適当
な抗体試薬は、標識例えば酵素−標識されるか、あるい
は不動化、例えばプラスチックあるいは磁気ビ−ズまた
は球に結合されてミクロタイタ−板（ｍｉｃｒｏｔｉｔ
ｅｒ ｐｌａｔｅ）に塗られることができ、そしてそれ
は全免疫グロブリン例えばＩｇＧまたはＩｇＭあるい
は、断片例えばＦａｂとＦａｂ´とＦ（ａｂ´）2 断片
あるいは、それらの凝集体よりなることができる。
【００１２】前記のように、商業的キットはＣＡ１５−
３検定とＴＰＳ検定との実施のために入手できる。ある
いは又ＣＡ１５−３検定とＴＰＳ検定実施のためと、Ｃ
Ａ２２８検定実施のためとの免疫学的検定試薬は文献中
の教えに従う在来の方法で調製できる。特別な腫瘍マ−
カ−のための抗体試薬は適当な免疫原、例えば腫瘍マ−
カ−含有免疫原混合物例えば腫瘍細胞の精製抽出物と、
腫瘍発現（ｅｘｐｒｅｓｓｉｎｇ）トランスフェクタン
ト（ｔｒａｎｓｆｅｃｔａｎｔ）細胞系（ＮＣＡ５０／
９０に関する欧州特許公告第３４６，７０２号参照）
と、ペプチドが腫瘍マ−カ−のエピト−プを取り囲むア
ミノ酸配列を持っている。在来の免疫原担体分子に結合
した、合成的に調製されたペプチドを包含する免疫原抱
合体（ｃｏｎｊｕｇａｔｅ）と、技術で理解されるよう
なものとによる宿主動物の免疫によって調製できる。
３検定とＴＰＳ検定との実施のために入手できる。ある
いは又ＣＡ１５−３検定とＴＰＳ検定実施のためと、Ｃ
Ａ２２８検定実施のためとの免疫学的検定試薬は文献中
の教えに従う在来の方法で調製できる。特別な腫瘍マ−
カ−のための抗体試薬は適当な免疫原、例えば腫瘍マ−
カ−含有免疫原混合物例えば腫瘍細胞の精製抽出物と、
腫瘍発現（ｅｘｐｒｅｓｓｉｎｇ）トランスフェクタン
ト（ｔｒａｎｓｆｅｃｔａｎｔ）細胞系（ＮＣＡ５０／
９０に関する欧州特許公告第３４６，７０２号参照）
と、ペプチドが腫瘍マ−カ−のエピト−プを取り囲むア
ミノ酸配列を持っている。在来の免疫原担体分子に結合
した、合成的に調製されたペプチドを包含する免疫原抱
合体（ｃｏｎｊｕｇａｔｅ）と、技術で理解されるよう
なものとによる宿主動物の免疫によって調製できる。
【００１３】単クロ−ン抗体を包含する抗体試薬が一般
的には好ましい。ＣＡ２２８検定において有用な、特に
好ましいＮＣＡ５０／９０特異性単クロ−ン抗体は、Ａ
ｍｅｒｉｃａｎ Ｔｙｐｅ Ｃｕｌｔｕｒｅ Ｃｏｌｌ
ｅｃｔｉｏｎ（ＡＴＣＣ），Ｒｏｃｋｖｉｌｌｅ，Ｍａ
ｒｙｌａｎｄ，ＵＳＡに保管され、ＡＴＣＣ ＨＢ１１
２０４として同定されているハイブリド−マにより生産
されるものと実質的に同じエピト−プと結合しているも
のである。多くの標準的方法が、ハイブリド−マがＡＴ
ＣＣにより保管された前記の抗体と実質的に同じエピト
−プと特別な単クロ−ン抗体とが結合するかどうかを決
定するために用いることが出来ることは理解されよう。
特に有用な方法は、関心ある抗体の、参照抗体存在下で
ＮＣＡ５０／９０と結合する能力を測定される競合結合
である。両抗体の結合することの実質的な不能性は、同
時に、同じエピト−プが実質的に関与していることを示
している。
的には好ましい。ＣＡ２２８検定において有用な、特に
好ましいＮＣＡ５０／９０特異性単クロ−ン抗体は、Ａ
ｍｅｒｉｃａｎ Ｔｙｐｅ Ｃｕｌｔｕｒｅ Ｃｏｌｌ
ｅｃｔｉｏｎ（ＡＴＣＣ），Ｒｏｃｋｖｉｌｌｅ，Ｍａ
ｒｙｌａｎｄ，ＵＳＡに保管され、ＡＴＣＣ ＨＢ１１
２０４として同定されているハイブリド−マにより生産
されるものと実質的に同じエピト−プと結合しているも
のである。多くの標準的方法が、ハイブリド−マがＡＴ
ＣＣにより保管された前記の抗体と実質的に同じエピト
−プと特別な単クロ−ン抗体とが結合するかどうかを決
定するために用いることが出来ることは理解されよう。
特に有用な方法は、関心ある抗体の、参照抗体存在下で
ＮＣＡ５０／９０と結合する能力を測定される競合結合
である。両抗体の結合することの実質的な不能性は、同
時に、同じエピト−プが実質的に関与していることを示
している。
【００１４】患者の血液試料（例えば血清または結漿）
について３つの腫瘍マ−カ−検定を実施した後、腫瘍マ
−カ−水準の何か１つまたはそれ以上に異常な上昇があ
るかどうかの決定がなされる。腫瘍マ−カ−水準の何か
１つまたはそれ以上における異常な上昇は再発の高い危
険性を示す。異常な腫瘍マ−カ−水準は何等かの統計的
に有意な方法で定義できる。一般に、測定値が正常値の
上限を超えている場合は腫瘍マ−カ−が上昇したと見做
される。正常値の上限とは典型的には明白な癌のない健
康な個体の統計的に有意な数についての標準偏差の２倍
を加えた平均値として定義される。腫瘍マ−カ−値の異
常上昇の決定のための他の方法は、患者が一次癌の処置
に引き続いて疾患の証拠を示さない場合、長期（ｌｏｎ
ｇｉｔｕｄｉｎａｌ）平均値を設定することである。例
えば、患者は***腫瘍除去手術後つづいて放射線と化学
療法とホルモン療法を受けてもよい。手術後或る期間、
臨床的に乳癌の証拠がないことを見出すことができる
（ＮＥＤ期間−疾患の証拠なし）。この期間中に採った
血液試料をその患者の正常値設定に用いてもよい。その
癌マ−カ−の値における後での上昇は癌再発を示しても
よい。有意と見做された典型的な増大は１０％（ＮＥＤ
の間に採られた試料の平均値の１１０％）から３０％の
範囲である。異常腫瘍マ−カ−水準を定義する他の方法
は検定に伴われる変動性と、健康な個体における、期間
中に測定された腫瘍マ−カ−の血中濃度における変動性
との決定を含む。検定の変動性のこれら２つの構成要素
は疾患再発を示すと見做される最少の増加の決定に用い
ることができる（ＴｏｎｄｉｎｉＣ，Ｈａｙｅｓ ＤＦ
ａｎｄ Ｋｕｆｅ ＤＷ（１９８９）Ｈｅｍａｔｏｌ
／Ｏｎｃｏｌ Ｃｌｉｎ Ｎｏｒｔｈ Ａｍｅｒｉｃａ
３：６５３−６７４）。異常腫瘍マ−カ−水準につい
てのｃｕｔ−ｏｆｆ値設定の他の統計的方法はその分野
における人には明らかであろう。
について３つの腫瘍マ−カ−検定を実施した後、腫瘍マ
−カ−水準の何か１つまたはそれ以上に異常な上昇があ
るかどうかの決定がなされる。腫瘍マ−カ−水準の何か
１つまたはそれ以上における異常な上昇は再発の高い危
険性を示す。異常な腫瘍マ−カ−水準は何等かの統計的
に有意な方法で定義できる。一般に、測定値が正常値の
上限を超えている場合は腫瘍マ−カ−が上昇したと見做
される。正常値の上限とは典型的には明白な癌のない健
康な個体の統計的に有意な数についての標準偏差の２倍
を加えた平均値として定義される。腫瘍マ−カ−値の異
常上昇の決定のための他の方法は、患者が一次癌の処置
に引き続いて疾患の証拠を示さない場合、長期（ｌｏｎ
ｇｉｔｕｄｉｎａｌ）平均値を設定することである。例
えば、患者は***腫瘍除去手術後つづいて放射線と化学
療法とホルモン療法を受けてもよい。手術後或る期間、
臨床的に乳癌の証拠がないことを見出すことができる
（ＮＥＤ期間−疾患の証拠なし）。この期間中に採った
血液試料をその患者の正常値設定に用いてもよい。その
癌マ−カ−の値における後での上昇は癌再発を示しても
よい。有意と見做された典型的な増大は１０％（ＮＥＤ
の間に採られた試料の平均値の１１０％）から３０％の
範囲である。異常腫瘍マ−カ−水準を定義する他の方法
は検定に伴われる変動性と、健康な個体における、期間
中に測定された腫瘍マ−カ−の血中濃度における変動性
との決定を含む。検定の変動性のこれら２つの構成要素
は疾患再発を示すと見做される最少の増加の決定に用い
ることができる（ＴｏｎｄｉｎｉＣ，Ｈａｙｅｓ ＤＦ
ａｎｄ Ｋｕｆｅ ＤＷ（１９８９）Ｈｅｍａｔｏｌ
／Ｏｎｃｏｌ Ｃｌｉｎ Ｎｏｒｔｈ Ａｍｅｒｉｃａ
３：６５３−６７４）。異常腫瘍マ−カ−水準につい
てのｃｕｔ−ｏｆｆ値設定の他の統計的方法はその分野
における人には明らかであろう。
【００１５】本発明は以下の実施例により説明されるが
それに限定する意図はない。
それに限定する意図はない。
【００１６】
【材料並びに方法】患者標本ー血清試料はＧｙｎｅｃｏ
ｌｏｇｙ ａｎｄ ＯｂｓｔｅｔｒｉｃｓＣｌｉｎｉｃ
ａｔ Ｈａｒｔｆｏｒｄ Ｈｏｓｐｉｔａｌ， Ｈａ
ｒｔｆｏｒｄ， Ｃｏｎｎｅｃｔｉｃｕｔ に通う健康
な女性篤志家から得られた。全ての供給者は毎年の健康
検査のためその診療所に通って来て、その医師の患者で
あった。全ての健康な篤志家は癌を持っていないと信じ
られたが可能性のある潜在的悪性腫瘍を除去する包括的
試験は行われなかった。試料はＩｎｓｔｉｔｕｔｉｏｎ
ａｌ Ｒｅｖｉｅｗ Ｂｏａｒｄ により容認された要
綱の下に集められた。同様に、乳癌患者からの血清はＤ
ｕｋｅ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ Ｃｏｍｐｒｅｈｅｎｓ
ｉｖｅ Ｃａｎｃｅｒ Ｃｅｎｔｅｒに通う患者からの
捨てられる試料として得られた。全ての試料は遡及して
試験された。乳癌をもつ患者に関して、臨床的状態が参
加した医者により決定され、疾病の証拠なし（ＮＥＤ）
あるいは疾病の臨床的証拠あり（ＣＥＤ）のように分類
された。ＣＥＤ患者は更に安定性悪性腫あるいは進行性
悪性腫瘍に分類された。再発の決定はＸ線と骨スキャン
とＣＴスキャンと他の診断様式との結果に基き、参加医
師によりなされた。全部で２１名の患者がこの研究の間
に再発の疾病を発生させた。乳癌再発をもつ２１名の患
者の中、１８名が１次再発であり、３名が２次再発であ
った。全ての再発は、患者が疾病の証拠なしと分類（ｎ
＝１９）または安定性疾病と分類（ｎ＝２）された場
合、最小３つの試料を得られる期間だけの先行期間はあ
った。
ｌｏｇｙ ａｎｄ ＯｂｓｔｅｔｒｉｃｓＣｌｉｎｉｃ
ａｔ Ｈａｒｔｆｏｒｄ Ｈｏｓｐｉｔａｌ， Ｈａ
ｒｔｆｏｒｄ， Ｃｏｎｎｅｃｔｉｃｕｔ に通う健康
な女性篤志家から得られた。全ての供給者は毎年の健康
検査のためその診療所に通って来て、その医師の患者で
あった。全ての健康な篤志家は癌を持っていないと信じ
られたが可能性のある潜在的悪性腫瘍を除去する包括的
試験は行われなかった。試料はＩｎｓｔｉｔｕｔｉｏｎ
ａｌ Ｒｅｖｉｅｗ Ｂｏａｒｄ により容認された要
綱の下に集められた。同様に、乳癌患者からの血清はＤ
ｕｋｅ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ Ｃｏｍｐｒｅｈｅｎｓ
ｉｖｅ Ｃａｎｃｅｒ Ｃｅｎｔｅｒに通う患者からの
捨てられる試料として得られた。全ての試料は遡及して
試験された。乳癌をもつ患者に関して、臨床的状態が参
加した医者により決定され、疾病の証拠なし（ＮＥＤ）
あるいは疾病の臨床的証拠あり（ＣＥＤ）のように分類
された。ＣＥＤ患者は更に安定性悪性腫あるいは進行性
悪性腫瘍に分類された。再発の決定はＸ線と骨スキャン
とＣＴスキャンと他の診断様式との結果に基き、参加医
師によりなされた。全部で２１名の患者がこの研究の間
に再発の疾病を発生させた。乳癌再発をもつ２１名の患
者の中、１８名が１次再発であり、３名が２次再発であ
った。全ての再発は、患者が疾病の証拠なしと分類（ｎ
＝１９）または安定性疾病と分類（ｎ＝２）された場
合、最小３つの試料を得られる期間だけの先行期間はあ
った。
【００１７】血清生体マーカー試験ーＣＡ２２８検定
は、血清および血漿中の非特異的交差感作抗原５０／９
０（ＮＣＡ５０／９０）を定量的に測定する２重ーサン
ドウィッチ免疫学的検定である。その検定は捕捉相につ
いてはＮＣＡ５０／９０に特異的の単クローン抗体を、
検出相としてはＣＥＡに対し交差感作性の多クローン抗
体を用いる。
は、血清および血漿中の非特異的交差感作抗原５０／９
０（ＮＣＡ５０／９０）を定量的に測定する２重ーサン
ドウィッチ免疫学的検定である。その検定は捕捉相につ
いてはＮＣＡ５０／９０に特異的の単クローン抗体を、
検出相としてはＣＥＡに対し交差感作性の多クローン抗
体を用いる。
【００１８】９６穴ＥＬＩＳＡ板（Ｉｍｍｕｌｏｎ
４，Ｄｙｎａｔｅｃｈ，Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ，Ｃ
ｈａｎｔｉｌｌｙ，Ｖｉｒｇｉｎｉａ，ＵＳＡ）を、
０．１ＭＮａＨＣＯ3 中５μｇ／ｍｌでの、２２８．２
モノクローン抗体（ＡＴＣＣ ＨＢ １１２０４、上
掲）５０μｌで塗り、４℃で一夜保温する。穴は空けら
れ、板上の反応していない部位を、５％牛アルブミン
（ＢＳＡ、画分Ｖ、Ｓｉｇｍａ、Ｃａｔａｌｏｇ Ｎ
ｏ．Ａー７０３０）と共に２５ｍＭトリス、ｐＨ７．５
／１５０ｍＭ ＮａＣｌ／０．０５％ Ｔｗｅｅｎ２０
／０．１％ＮａＮ3 （ＴＢＳＴ）２００μｌの添加、そ
れに続く３７℃における１時間の保温によりクエンチ
（ｑｕｅｎｃｈ）する。穴はＴＢＳＴで６回洗浄し、各
穴には、ＮＣＡ５０／９０校正液（以下）あるいは２５
ｍＭ ＨＥＰＥＳ、ｐＨ７．０／２５０ｍＭＮａＣｌ
１００μｇ／ｍｌ マウスＩｇＧ／２．５％ＢＳＡ／５
０μｇ／ｍｌゲンタマイシン／０．１％（ｗ／ｖ）Ｎａ
Ｎ3 （試料希釈液）中で１：５１に希釈された患者試料
の５０μｌを加え、その板を３７℃で２時間保温する。
６回洗浄後、全ての穴に５０ｍＭ ＨＥＰＥＳ中の山羊
抗ーＣＥＡアルカリホスファターゼ（以下）の２．５μ
ｇ／ｍｌ溶液、ｐＨ７．０／１５０ｍＭ ＮａＣｌ／１
ｍＭ ＭｇＣｌ6・Ｈ2０／０．１ｍＭ ＺｎＣｌ2 ／５
％ＢＳＡ／５０μｇ／ｍｌゲンタマイシン／０．１％Ｎ
ａＮ3 （共役物希釈液）５０μｌ容量を加える。３７℃
で１時間保温後、板をＴＢＳＴで１２回洗浄し、ＤＥＡ
基質緩衝液（Ｐｉｅｒｃｅ，Ｒｏｃｋｆｏｒｄ，Ｉｌｌ
ｉｎｏｉｓ，Ｕ．Ｓ．Ａ．）中のｐ−ニトロフェニル
ホスファート５０μｌと共に３０分間保温する。この反
応を１００μｌの１Ｎ ＮａＯＨを用いて停止させ、マ
イクロプレート読取り器（Ｔｈｅｒｍｏmax，Ｍｏｌｅ
ｃｕｌａｒ，Ｄｅｖｉｃｅｓ Ｃｏｒｐ．Ｓｕｎｎｙｖ
ａｌｅ，Ｃａｌｉｆｏｒｎｉａ，ＵＳＡ）を用い４０５
ｎｍにおける吸光度ー４９０ｎｍにおける吸光度を測定
する。ＮＣＡ５０／９０の量は非線型スプライン（Ｓｐ
ｌｉｎｅ）曲線あてはめプログラムを用い校正標準曲線
との比較により各試験試料について測定される。
４，Ｄｙｎａｔｅｃｈ，Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ，Ｃ
ｈａｎｔｉｌｌｙ，Ｖｉｒｇｉｎｉａ，ＵＳＡ）を、
０．１ＭＮａＨＣＯ3 中５μｇ／ｍｌでの、２２８．２
モノクローン抗体（ＡＴＣＣ ＨＢ １１２０４、上
掲）５０μｌで塗り、４℃で一夜保温する。穴は空けら
れ、板上の反応していない部位を、５％牛アルブミン
（ＢＳＡ、画分Ｖ、Ｓｉｇｍａ、Ｃａｔａｌｏｇ Ｎ
ｏ．Ａー７０３０）と共に２５ｍＭトリス、ｐＨ７．５
／１５０ｍＭ ＮａＣｌ／０．０５％ Ｔｗｅｅｎ２０
／０．１％ＮａＮ3 （ＴＢＳＴ）２００μｌの添加、そ
れに続く３７℃における１時間の保温によりクエンチ
（ｑｕｅｎｃｈ）する。穴はＴＢＳＴで６回洗浄し、各
穴には、ＮＣＡ５０／９０校正液（以下）あるいは２５
ｍＭ ＨＥＰＥＳ、ｐＨ７．０／２５０ｍＭＮａＣｌ
１００μｇ／ｍｌ マウスＩｇＧ／２．５％ＢＳＡ／５
０μｇ／ｍｌゲンタマイシン／０．１％（ｗ／ｖ）Ｎａ
Ｎ3 （試料希釈液）中で１：５１に希釈された患者試料
の５０μｌを加え、その板を３７℃で２時間保温する。
６回洗浄後、全ての穴に５０ｍＭ ＨＥＰＥＳ中の山羊
抗ーＣＥＡアルカリホスファターゼ（以下）の２．５μ
ｇ／ｍｌ溶液、ｐＨ７．０／１５０ｍＭ ＮａＣｌ／１
ｍＭ ＭｇＣｌ6・Ｈ2０／０．１ｍＭ ＺｎＣｌ2 ／５
％ＢＳＡ／５０μｇ／ｍｌゲンタマイシン／０．１％Ｎ
ａＮ3 （共役物希釈液）５０μｌ容量を加える。３７℃
で１時間保温後、板をＴＢＳＴで１２回洗浄し、ＤＥＡ
基質緩衝液（Ｐｉｅｒｃｅ，Ｒｏｃｋｆｏｒｄ，Ｉｌｌ
ｉｎｏｉｓ，Ｕ．Ｓ．Ａ．）中のｐ−ニトロフェニル
ホスファート５０μｌと共に３０分間保温する。この反
応を１００μｌの１Ｎ ＮａＯＨを用いて停止させ、マ
イクロプレート読取り器（Ｔｈｅｒｍｏmax，Ｍｏｌｅ
ｃｕｌａｒ，Ｄｅｖｉｃｅｓ Ｃｏｒｐ．Ｓｕｎｎｙｖ
ａｌｅ，Ｃａｌｉｆｏｒｎｉａ，ＵＳＡ）を用い４０５
ｎｍにおける吸光度ー４９０ｎｍにおける吸光度を測定
する。ＮＣＡ５０／９０の量は非線型スプライン（Ｓｐ
ｌｉｎｅ）曲線あてはめプログラムを用い校正標準曲線
との比較により各試験試料について測定される。
【００１９】ＮＣＡ較正物は２５ｍＭトリス、ｐＨ７．
５／１５０ｍＭ ＮａＣｌ、０．０５％（ｖ／ｖ）Ｔｗ
ｅｅｎ２０、５％（ｗ／ｖ）ＢＳＡ、５０μｇ／ｍｌゲ
ンタマイシン、０．１％ＮａＮ3 中０〜１００ｍｇ／ｍ
ｌの濃度の組替え体ＮＣＡ５０／９０を包含する。組替
え体ＮＣＡ５０／９０は次の如く調製した。ＮＣＡ５０
／９０に対応するＣＤＮＡを、前記の如く、***腫瘍細
胞系統ＢＴー２０から誘導した（Ｂａｒｎｅｔｔ Ｔ，
Ｇｏｅｂｅｌ ＳＪ，Ｎｏｔｈｄｕｒｆｔ ＭＡａｎｄ
Ｅｌｔｉｎｇ ＪＪ（１９８８）Ｇｅｎｏｍｉｃｓ
３：５９ー６６）。ＮＣＡ５０／９０遺伝子の暗号領域
をホスホイノシトール グリカン結合による交換を示す
Ｃー末端疎水領域の除去および分子のカルボキシル末端
における一続きの６つのヒスチジン残基の添加により変
更した（Ｄｒａｋ Ｌ ａｎｄＢａｒｎｅｔｔ Ｔ（１
９９２）Ｂｉｏｔｅｃｈｎｉｑｕｅｓ １２：６４５ー
６４９）。この構造物をＰＣＲによりｐＶＬ１３９３に
クローンを発生させ、Ｓｐｏｄｏｐｔｅｒａ ｆｒｕｇ
ｉｐｅｒｄａ（Ｓｆ９）細胞を感染するために組替え体
桿状ウイルス ファージを用いて発現させた。ＮＣＡ５
０／９０は、記載の如くイミド酢酸亜鉛ーＳｅｐｈａｒ
ｏｓｅTMカラムを用いＳｆ９上澄液からアフィニティ−
精製した（Ｄｒａｋｅ ａｎｄ Ｂａｒｎｅｔｔ、上
掲）。ＮＣＡ５０／９０の濃度はＢＣＡ蛋白質検定によ
り決めた（Ｐｉｅｒｃｅ，Ｃａｔ．Ｎｏ．２３２２５
Ｇ）．組替え体ＮＣＡもまたＡｍｅｅｉｃａｎ Ｔｙｐ
ｅ Ｃｕｌｔｕｒｅ Ｃｏｌｌｅｃｔｉｏｎ，Ｒｏｃｋ
ｖｉｌｌｅ，Ｍａｒｙｌａｎｄ，ＵＳＡで保管されてい
る細胞系統ＣＲＬ９７３２により作られた。
５／１５０ｍＭ ＮａＣｌ、０．０５％（ｖ／ｖ）Ｔｗ
ｅｅｎ２０、５％（ｗ／ｖ）ＢＳＡ、５０μｇ／ｍｌゲ
ンタマイシン、０．１％ＮａＮ3 中０〜１００ｍｇ／ｍ
ｌの濃度の組替え体ＮＣＡ５０／９０を包含する。組替
え体ＮＣＡ５０／９０は次の如く調製した。ＮＣＡ５０
／９０に対応するＣＤＮＡを、前記の如く、***腫瘍細
胞系統ＢＴー２０から誘導した（Ｂａｒｎｅｔｔ Ｔ，
Ｇｏｅｂｅｌ ＳＪ，Ｎｏｔｈｄｕｒｆｔ ＭＡａｎｄ
Ｅｌｔｉｎｇ ＪＪ（１９８８）Ｇｅｎｏｍｉｃｓ
３：５９ー６６）。ＮＣＡ５０／９０遺伝子の暗号領域
をホスホイノシトール グリカン結合による交換を示す
Ｃー末端疎水領域の除去および分子のカルボキシル末端
における一続きの６つのヒスチジン残基の添加により変
更した（Ｄｒａｋ Ｌ ａｎｄＢａｒｎｅｔｔ Ｔ（１
９９２）Ｂｉｏｔｅｃｈｎｉｑｕｅｓ １２：６４５ー
６４９）。この構造物をＰＣＲによりｐＶＬ１３９３に
クローンを発生させ、Ｓｐｏｄｏｐｔｅｒａ ｆｒｕｇ
ｉｐｅｒｄａ（Ｓｆ９）細胞を感染するために組替え体
桿状ウイルス ファージを用いて発現させた。ＮＣＡ５
０／９０は、記載の如くイミド酢酸亜鉛ーＳｅｐｈａｒ
ｏｓｅTMカラムを用いＳｆ９上澄液からアフィニティ−
精製した（Ｄｒａｋｅ ａｎｄ Ｂａｒｎｅｔｔ、上
掲）。ＮＣＡ５０／９０の濃度はＢＣＡ蛋白質検定によ
り決めた（Ｐｉｅｒｃｅ，Ｃａｔ．Ｎｏ．２３２２５
Ｇ）．組替え体ＮＣＡもまたＡｍｅｅｉｃａｎ Ｔｙｐ
ｅ Ｃｕｌｔｕｒｅ Ｃｏｌｌｅｃｔｉｏｎ，Ｒｏｃｋ
ｖｉｌｌｅ，Ｍａｒｙｌａｎｄ，ＵＳＡで保管されてい
る細胞系統ＣＲＬ９７３２により作られた。
【００２０】山羊抗ーＣＥＡーアルカリホスファターゼ
は次の如く調製された。アルカリホスファターゼは、２
ーイミノチオランを用いての抗体への遊離スルフヒドリ
ル基の導入と、ヘテロ２官能架橋スルホーＳＭＣＣを用
いてのアルカリホスファターゼへの遊離マレイミド基の
導入とにより、多クローン抗ーＣＥＡ抗体調製物と結合
（Ｃｏｎｊｕｇａｔｅ）させた。その反応種精製後、２
つの蛋白質は自然に反応し、チオエーテル結合を形成す
る。特に、２５ｍＭ Ｎａ2 ＨＰＯ4、ｐＨ７．０、
０．０５ｍＭ ＺｎＣｌ2 中のアルカリホスファターゼ
（犢腸管からの、Ｂｉｏｚｙｍｅ Ｉｎｔｅｒｎａｔｉ
ｏｎａｌ，Ｓａｎ Ｄｉｅｇｏ，Ｃａｌｉｆｏｒｎｉ
ａ，ＵＳＡ）の１２ｍｇ／ｍｌ溶液は４．３６ｍｇ／ｍ
ｌのスルホーＳＭＣＣ（Ｐｉｅｒｃｅ）により、室温、
２５分間で活性化された。ＣＥＡに対する多クローンＩ
ｇＧ（山羊からアフィニティ−精製されたもの、Ｂｉｏ
ｓＰａｃｉｆｉｃ，Ｅｍｃｒｙｖｉｌｌｅ，Ｃａｌｉｆ
ｏｒｎｉａ，ＵＳＡ）を１０ｍｇ／ｍｌに懸濁し、１０
０ｍＭトリエタノールアシン、１００ｍＭ ＮａＣｌ、
１ｍＭエチレンジアミン四酢酸（ＥＤＴＡ）中の２ーイ
ミノチオラン１．３８ｍｇ／ｍｌ中で活性化し、そして
室温で１０分間反応させた。反応アルカリホスファター
ゼと抗体分子とを、Ｓｅｐｈａｄｏｘ Ｇー５０カラム
を通して未反応のスルホ−ＳＭＣＣと２−イミノチオラ
ンとから分離した。アルカリホスファターゼを９ｍｇ／
ｍｌに抗体を５ｍｇ／ｍｌに濃縮し、反応種をＩｇＧは
２．５ｍｇ／ｍｌ、アルカリホスファターゼは４．４ｍ
ｇ／ｍｌで混合した。このことでアルカリホスファター
ゼ対ＩｇＧ２：１モル比になった。室温で３時間保温、
続いて１夜、４℃でＮ2 を流した後、その共役物を０．
２μｍ酢酸セルロース膜を通して濾過し、Ｓｕｐｅｒｏ
ｓｅ６カラムを通して全蛋白質約２０ｍｇ／ｍｌに濃縮
した。画分は２８０ｎｍにおける吸光度で監視し、一緒
にし、５ｍｇ／ｍｌＢＳＡ、０．１％ＮａＮ3 にした。
は次の如く調製された。アルカリホスファターゼは、２
ーイミノチオランを用いての抗体への遊離スルフヒドリ
ル基の導入と、ヘテロ２官能架橋スルホーＳＭＣＣを用
いてのアルカリホスファターゼへの遊離マレイミド基の
導入とにより、多クローン抗ーＣＥＡ抗体調製物と結合
（Ｃｏｎｊｕｇａｔｅ）させた。その反応種精製後、２
つの蛋白質は自然に反応し、チオエーテル結合を形成す
る。特に、２５ｍＭ Ｎａ2 ＨＰＯ4、ｐＨ７．０、
０．０５ｍＭ ＺｎＣｌ2 中のアルカリホスファターゼ
（犢腸管からの、Ｂｉｏｚｙｍｅ Ｉｎｔｅｒｎａｔｉ
ｏｎａｌ，Ｓａｎ Ｄｉｅｇｏ，Ｃａｌｉｆｏｒｎｉ
ａ，ＵＳＡ）の１２ｍｇ／ｍｌ溶液は４．３６ｍｇ／ｍ
ｌのスルホーＳＭＣＣ（Ｐｉｅｒｃｅ）により、室温、
２５分間で活性化された。ＣＥＡに対する多クローンＩ
ｇＧ（山羊からアフィニティ−精製されたもの、Ｂｉｏ
ｓＰａｃｉｆｉｃ，Ｅｍｃｒｙｖｉｌｌｅ，Ｃａｌｉｆ
ｏｒｎｉａ，ＵＳＡ）を１０ｍｇ／ｍｌに懸濁し、１０
０ｍＭトリエタノールアシン、１００ｍＭ ＮａＣｌ、
１ｍＭエチレンジアミン四酢酸（ＥＤＴＡ）中の２ーイ
ミノチオラン１．３８ｍｇ／ｍｌ中で活性化し、そして
室温で１０分間反応させた。反応アルカリホスファター
ゼと抗体分子とを、Ｓｅｐｈａｄｏｘ Ｇー５０カラム
を通して未反応のスルホ−ＳＭＣＣと２−イミノチオラ
ンとから分離した。アルカリホスファターゼを９ｍｇ／
ｍｌに抗体を５ｍｇ／ｍｌに濃縮し、反応種をＩｇＧは
２．５ｍｇ／ｍｌ、アルカリホスファターゼは４．４ｍ
ｇ／ｍｌで混合した。このことでアルカリホスファター
ゼ対ＩｇＧ２：１モル比になった。室温で３時間保温、
続いて１夜、４℃でＮ2 を流した後、その共役物を０．
２μｍ酢酸セルロース膜を通して濾過し、Ｓｕｐｅｒｏ
ｓｅ６カラムを通して全蛋白質約２０ｍｇ／ｍｌに濃縮
した。画分は２８０ｎｍにおける吸光度で監視し、一緒
にし、５ｍｇ／ｍｌＢＳＡ、０．１％ＮａＮ3 にした。
【００２１】ＴＰＳ検定は血清中のサイトケラチン１８
の断片を測定するＥＩＡ法である。その検定はＢＥＫＩ
Ｄｉａｇｎｏｓｔｉｃｓ（Ｂｒｏｍｍａ，Ｓｗｅｄｅ
ｎ）から得られ、製造業者の使用説明書に従って用い
た。ＣＡ１５ー３検定は上皮ムチン上に露出（ｅｘｐｏ
ｓｅ）されているエピトープ、エピシアリン、ＭＵＣー
１遺伝子の一生成物を測定する。その検定は二重放射免
疫学的検定（２−Ｓｉｔｅ ｒａｄｉｏｍｅｔｒｉｃ
ｉｍｍｕｎｏａｓｓａｙ）であり、製造業者の要綱に従
って行った（Ｃｅｎｔｏｃｏｒ，Ｍａｌｖｅｒｎ，Ｐｅ
ｎｎｓｙｌｖａｎｉａ，ＵＳＡ）。
の断片を測定するＥＩＡ法である。その検定はＢＥＫＩ
Ｄｉａｇｎｏｓｔｉｃｓ（Ｂｒｏｍｍａ，Ｓｗｅｄｅ
ｎ）から得られ、製造業者の使用説明書に従って用い
た。ＣＡ１５ー３検定は上皮ムチン上に露出（ｅｘｐｏ
ｓｅ）されているエピトープ、エピシアリン、ＭＵＣー
１遺伝子の一生成物を測定する。その検定は二重放射免
疫学的検定（２−Ｓｉｔｅ ｒａｄｉｏｍｅｔｒｉｃ
ｉｍｍｕｎｏａｓｓａｙ）であり、製造業者の要綱に従
って行った（Ｃｅｎｔｏｃｏｒ，Ｍａｌｖｅｒｎ，Ｐｅ
ｎｎｓｙｌｖａｎｉａ，ＵＳＡ）。
【００２２】
【結果】正常値の上限−健康な篤志家からの全部で２０
８個の血清試料をＣＡ２２８検定とＣＡ１５ー３検定と
ＴＰＳ検定とで試験した。９５番目の百分位数の値は標
準偏差の２倍を加えた平均値を用いて、正規分布を仮定
して計算した。３つの関与した検定のそれぞれの計算さ
れた正常値の上限（ＵＬＮ）を表２に示してある。３９
Ｕ／ｍｌの、ＣＡ１５−３検定について見出された正常
値の上限は製造業者により測定された２８．８Ｕ／ｍｌ
より幾分高い。この研究に参加している健康な篤志家個
体群は大きくて、よく特性づけられた群である故に、Ｃ
Ａ１５−３検定に関する正常値の上限としては３９Ｕ／
ｍｌが用いられた。この値は２５Ｕ／ｍｌ（１２、１
７、２１）と３２Ｕ／ｍｌ（１１）と３３Ｕ／ｍｌ（１
３）と３７Ｕ／ｍｌ（９）と４０Ｕ／ｍｌという、ＣＡ
１５−３検定に関する正常値の上限について以前に報告
された値に似ている。
８個の血清試料をＣＡ２２８検定とＣＡ１５ー３検定と
ＴＰＳ検定とで試験した。９５番目の百分位数の値は標
準偏差の２倍を加えた平均値を用いて、正規分布を仮定
して計算した。３つの関与した検定のそれぞれの計算さ
れた正常値の上限（ＵＬＮ）を表２に示してある。３９
Ｕ／ｍｌの、ＣＡ１５−３検定について見出された正常
値の上限は製造業者により測定された２８．８Ｕ／ｍｌ
より幾分高い。この研究に参加している健康な篤志家個
体群は大きくて、よく特性づけられた群である故に、Ｃ
Ａ１５−３検定に関する正常値の上限としては３９Ｕ／
ｍｌが用いられた。この値は２５Ｕ／ｍｌ（１２、１
７、２１）と３２Ｕ／ｍｌ（１１）と３３Ｕ／ｍｌ（１
３）と３７Ｕ／ｍｌ（９）と４０Ｕ／ｍｌという、ＣＡ
１５−３検定に関する正常値の上限について以前に報告
された値に似ている。
【００２３】乳癌再発の検出に関する生体マーカー群の
感度−乳癌再発の生体マーカー検出に関する互除法は前
記の正常値の上限と前記の方法とに基いて確立された。
生体マーカーは、若し２つの条件の中１つに合えば再発
を示すと見做された。第１に、生体マーカー値が正常値
の上限（９５番目百分位数）より上に上昇した場合、そ
の増大した値は陽性と見做される。第２に、再発を持つ
おのおのの患者に関し、その患者が疾病の証拠を示さな
い間に採った３つの測定の最小なものをＮＥＤ状態にお
ける平均の生体マーカー値を計算するのに用いた。平均
のＮＥＤ値を超えた、引続く≧５０％の測定の増大もま
た再発の徴候と見做された。この５０％という値は、１
０〜３０％の増加を乳癌再発の指標として用いた以前の
研究（１１、１４、１６）とよく一致する。
感度−乳癌再発の生体マーカー検出に関する互除法は前
記の正常値の上限と前記の方法とに基いて確立された。
生体マーカーは、若し２つの条件の中１つに合えば再発
を示すと見做された。第１に、生体マーカー値が正常値
の上限（９５番目百分位数）より上に上昇した場合、そ
の増大した値は陽性と見做される。第２に、再発を持つ
おのおのの患者に関し、その患者が疾病の証拠を示さな
い間に採った３つの測定の最小なものをＮＥＤ状態にお
ける平均の生体マーカー値を計算するのに用いた。平均
のＮＥＤ値を超えた、引続く≧５０％の測定の増大もま
た再発の徴候と見做された。この５０％という値は、１
０〜３０％の増加を乳癌再発の指標として用いた以前の
研究（１１、１４、１６）とよく一致する。
【００２４】表３に示されている結果は、この研究で評
価された３つの生体マーカーのどれも乳癌再発の約７５
％を検出することを示している。これらの生体マーカー
の中２つを１群の中で一緒に用いる場合は、再発検出の
感度は１５〜２０％増大する。再発乳癌をもつ全ての患
者の１００％の感度まで更に増大するには３つの全ての
診断試験の組合せによることが判る。
価された３つの生体マーカーのどれも乳癌再発の約７５
％を検出することを示している。これらの生体マーカー
の中２つを１群の中で一緒に用いる場合は、再発検出の
感度は１５〜２０％増大する。再発乳癌をもつ全ての患
者の１００％の感度まで更に増大するには３つの全ての
診断試験の組合せによることが判る。
【００２５】乳癌再発の早期検出の先行期間−乳癌再発
の検出は、再発が在来の診断様式により達成され得る期
間枠よりも早期に検出する場合のみ臨床的利用が期待さ
れる。従って、本発明の生体マーカー群の能力が在来の
方法による再発以前に乳癌再発を検出することを調べ
た。表４に示されているように、個別の生体マーカーは
約１／３の場合においてのみある先行期間を以て再発を
検出した。しかし、生体マーカーの幾つかの組合せは先
行期間をもつ場合の割合を約２００％程増大させる。最
も効率のよい腫瘍マーカー組合せは明らかにＣＡ２２８
とＣＡ１５ー３とである。この群にＴＰＳを加えること
は先行期間を持つ再発検出の感度は改善しないが、平均
先行期間をやや改善する。先行期間の改善は、ＣＡ２２
８（４．８ケ月）あるいはＣＡ１５ー３（６．５ケ月）
と比較してＴＰＳだけ（７．１ケ月）で達成される改善
された先行期間に基づいて予測されると思われる。
の検出は、再発が在来の診断様式により達成され得る期
間枠よりも早期に検出する場合のみ臨床的利用が期待さ
れる。従って、本発明の生体マーカー群の能力が在来の
方法による再発以前に乳癌再発を検出することを調べ
た。表４に示されているように、個別の生体マーカーは
約１／３の場合においてのみある先行期間を以て再発を
検出した。しかし、生体マーカーの幾つかの組合せは先
行期間をもつ場合の割合を約２００％程増大させる。最
も効率のよい腫瘍マーカー組合せは明らかにＣＡ２２８
とＣＡ１５ー３とである。この群にＴＰＳを加えること
は先行期間を持つ再発検出の感度は改善しないが、平均
先行期間をやや改善する。先行期間の改善は、ＣＡ２２
８（４．８ケ月）あるいはＣＡ１５ー３（６．５ケ月）
と比較してＴＰＳだけ（７．１ケ月）で達成される改善
された先行期間に基づいて予測されると思われる。
【００２６】考察−ここに記載した研究の結果は、マー
カー群（ｍａｒｋｅｒ ｐａｎｅｌ）が２つの方法で癌
マーカーの診断効用を改善することを示している。第１
に、ＣＡ２２８とＣＡ１５ー３とＴＰＳとの組合わせは
調査した患者の１００％における乳癌再発を検出した。
このことは２ー３腫瘍マーカー群に関し総括的感度約７
５〜８５％を予測した以前の結果（表１）の観点では予
知されない。更に、本発明のマーカー群は患者の約６０
％に５〜６ケ月の先行期間を与え、それは単独で用いら
れた場合のマーカーのどれと比較しても２倍の患者割合
であった。
カー群（ｍａｒｋｅｒ ｐａｎｅｌ）が２つの方法で癌
マーカーの診断効用を改善することを示している。第１
に、ＣＡ２２８とＣＡ１５ー３とＴＰＳとの組合わせは
調査した患者の１００％における乳癌再発を検出した。
このことは２ー３腫瘍マーカー群に関し総括的感度約７
５〜８５％を予測した以前の結果（表１）の観点では予
知されない。更に、本発明のマーカー群は患者の約６０
％に５〜６ケ月の先行期間を与え、それは単独で用いら
れた場合のマーカーのどれと比較しても２倍の患者割合
であった。
【００２７】本発明を上記して特に記載し、例をあげ
た。明らかに、本発明の多くの他の変形並びに変更態様
が本発明の精神と範囲とを逸脱することなく作られる。
た。明らかに、本発明の多くの他の変形並びに変更態様
が本発明の精神と範囲とを逸脱することなく作られる。
【００２８】以下に表１〜表５について説明する。表１
は乳癌再発に関連する文献中に報告された腫瘍マーカー
のデータを要約した表である。表２はＣＡ２２８検定と
ＣＡ１５ー３検定とＴＰＳ検定とに関し、健康な篤志家
の試験結果を要約した表である。表３は本発明の腫瘍マ
ーカー群による、乳癌患者の疾病再発検出率を要約した
表である。表４は本発明の腫瘍マーカー群を用いて決ま
った臨床的再発に対しての先行期間を要約した表であ
る。表５は明細書中に引用した文献を番号順に並べた表
である。表６は明細書中に引用した文献を番号順に並べ
た表である。
は乳癌再発に関連する文献中に報告された腫瘍マーカー
のデータを要約した表である。表２はＣＡ２２８検定と
ＣＡ１５ー３検定とＴＰＳ検定とに関し、健康な篤志家
の試験結果を要約した表である。表３は本発明の腫瘍マ
ーカー群による、乳癌患者の疾病再発検出率を要約した
表である。表４は本発明の腫瘍マーカー群を用いて決ま
った臨床的再発に対しての先行期間を要約した表であ
る。表５は明細書中に引用した文献を番号順に並べた表
である。表６は明細書中に引用した文献を番号順に並べ
た表である。
【表１】
【表２】
【表３】
【表４】
【表５】
【表６】
Claims (17)
- 【請求項１】 （ａ）患者より得られた血液試料につい
て、ＣＡ２２８検定とＣＡ１５−３検定とＴＰＳ検定と
から選択した少くとも２つの腫瘍マ−カ−検定を実施
し、そして（ｂ）測定された腫瘍マ−カ−値のどれかが
異常な上昇を示すかどうかを決定する段階を包含する、
患者の乳癌の再発検出方法。 - 【請求項２】 患者試料について３つ全ての腫瘍マ−カ
−検定を実施する、請求項１に記載の方法。 - 【請求項３】 段階（ｂ）を、測定された腫瘍マ−カ−
値のどれかが（ｉ）正常値の上限、あるいは（ｉｉ）疾
患の証拠を示していない間に患者から採った血液試料に
ついて実施した少くとも３回の検定の平均値の１１０％
の何れかを超えているかどうかを決定することにより実
施する、請求項２に記載の方法。 - 【請求項４】 段階（ｂ）を、測定された腫瘍マ−カ−
値の何れかが（ｉ）正常値の上限、あるいは（ｉｉ）疾
患の証拠を示していない間に患者から採った血液試料に
ついて実施した少くとも３回の検定の平均値の１３０％
の何れかを超えているかどうかを決定することにより実
施する、請求項２に記載の方法。 - 【請求項５】 段階（ｂ）を、測定された腫瘍マ−カ−
値の何れかが（ｉ） 正常値の上限、あるいは（ｉｉ）
疾患の証拠を示していない間に患者から採った血液試料
について実施した少くとも３回の検定の平均値の１５０
％の何れかを超えているかどうかを決定することにより
実施する、請求項２に記載の方法。 - 【請求項６】 ＣＡ２２８検定とＣＡ１５−３検定とを
患者試料について実施する、請求項１に記載の方法。 - 【請求項７】 ＣＡ２２８検定とＴＰＳ検定とを患者試
料について実施する、請求項１に記載の方法。 - 【請求項８】 ＣＡ１５−３検定とＴＰＳ検定とを患者
試料について実施する、請求項１に記載の方法。 - 【請求項９】 段階（ｂ）を、測定された腫瘍マ−カ−
値のどれかが、（ｉ）正常値の上限、あるいは（ｉｉ）
疾患の証拠を示していない間に患者から採った血液試料
について実施した少くとも３回の検定の平均値の１１０
％の何れかを超えているかどうかを決定することにより
実施する、請求項１に記載の方法。 - 【請求項１０】 段階（ｂ）を、測定された腫瘍マ−カ
−値のいずれかが、（ｉ）正常値の上限、あるいは（ｉ
ｉ）疾患の証拠を示していない間に患者から採った血液
試料について実施した少くとも３回の検定の平均値の１
３０％の何れかを超えているかどうかを決定することに
より実施する、請求項１に記載の方法。 - 【請求項１１】 段階（ｂ）を、測定された腫瘍マ−カ
−値の何れかが、（ｉ）正常値の上限、あるいは（ｉ
ｉ）疾患の証拠を示していない間に患者から採った血液
試料について実施した少くとも３回の検定の平均値の１
５０％の何れかを超えているかどうかを決定することに
より実施する、請求項１に記載の方法。 - 【請求項１２】 ＣＡ２２８検定とＣＡ１５−３検定と
ＴＰＳ検定との中、少くとも２つを実施するための免疫
学的検定試薬を包含する、患者の乳癌の再発検出に使用
のための試験キット。 - 【請求項１３】 ３つ全ての腫瘍マ−カ−検定を実施す
るための免疫学的検定試薬を包含する、請求項１２に記
載の試験キット。 - 【請求項１４】 ＣＡ２２８検定とＣＡ１５−３検定と
を実施するための、免疫学的検定試薬を包含する、請求
項１２に記載の試験キット。 - 【請求項１５】 ＣＡ２２８検定とＴＰＳ検定とを実施
するための、免疫学的検定試薬を包含する、請求項１２
に記載の試験キット。 - 【請求項１６】 ＣＡ１５−３検定とＴＰＳ検定とを実
施するための、免疫学的検定試薬を包含する、請求項１
２に記載の試験キット。 - 【請求項１７】 それぞれの検定のための免疫学的検定
試薬が、それぞれの腫瘍マ−カ−抗原と結合するのに特
異的な、一組の抗体試薬を包含する、請求項１２に記載
の試験キット。
Applications Claiming Priority (2)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| US38887695A | 1995-02-15 | 1995-02-15 | |
| US08/388876 | 1995-02-15 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPH08248033A true JPH08248033A (ja) | 1996-09-27 |
Family
ID=23535899
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP5073996A Pending JPH08248033A (ja) | 1995-02-15 | 1996-02-15 | 乳癌再発検出のための腫瘍マーカー群 |
Country Status (2)
| Country | Link |
|---|---|
| EP (1) | EP0727664A3 (ja) |
| JP (1) | JPH08248033A (ja) |
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JP2013522652A (ja) * | 2010-03-23 | 2013-06-13 | パーデュー・リサーチ・ファウンデーション | 代謝物プロファイリングを用いた再発乳癌の早期検出 |
Families Citing this family (6)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| EP1373896A2 (en) | 2001-03-12 | 2004-01-02 | MonoGen, Inc. | Cell-based detection and differentiation of disease states |
| CA2567987A1 (en) * | 2004-06-18 | 2005-12-29 | Gabriele Pestlin | Use of protein pdx1 as a marker for breast cancer |
| US20070099251A1 (en) * | 2005-10-17 | 2007-05-03 | Institute For Systems Biology | Tissue-and serum-derived glycoproteins and methods of their use |
| ITTO20070051A1 (it) | 2007-01-24 | 2008-07-25 | Indesit Co Spa | Utenza elettrica, in particolare un elettrodomestico, relativo dispositivo ausiliario opzionale e sistema comprendente tali utenza e dispositivo |
| EP2905619A1 (en) * | 2014-02-05 | 2015-08-12 | Dublin City University | A method for monitoring response to therapy and recurrence of breast cancer |
| US20230324393A1 (en) * | 2022-04-07 | 2023-10-12 | Add Biomedical Inc. | Rapid kit for breast cancer diagnosis by using monoclonal antibody specific to tumor marker cancer antigen 15-3 |
Family Cites Families (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CA2082605C (en) * | 1991-12-30 | 2005-02-01 | James J. Elting | Monitoring of nca-bt in blood samples of breast cancer patients |
| CA2118760C (en) * | 1993-04-21 | 2004-06-22 | William Jeffrey Allard | Diagnosis and monitoring of colon cancer patients by measurement of nca 50/90 in blood |
-
1996
- 1996-02-02 EP EP96101474A patent/EP0727664A3/en not_active Withdrawn
- 1996-02-15 JP JP5073996A patent/JPH08248033A/ja active Pending
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JP2013522652A (ja) * | 2010-03-23 | 2013-06-13 | パーデュー・リサーチ・ファウンデーション | 代謝物プロファイリングを用いた再発乳癌の早期検出 |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| EP0727664A2 (en) | 1996-08-21 |
| EP0727664A3 (en) | 1996-11-20 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| US20170052186A1 (en) | Cancer detection methods and reagents | |
| AU780957B2 (en) | Early cancer tumor marker | |
| US7205117B1 (en) | Cancer detection method and reagents | |
| US20080254481A1 (en) | Methods and kits for detecting prostate cancer biomarkers | |
| US20210190780A1 (en) | Serum thymidine kinase 1 detection kit based on automatic chemiluminescence analyzer | |
| WO2005043165A2 (en) | Specific method for cancer detection | |
| JP7043548B2 (ja) | 乳癌検出のための試薬および方法 | |
| JP2012524521A (ja) | グリコデリンモノクローナル抗体および卵巣癌の検出におけるその使用のための方法 | |
| JPH08248033A (ja) | 乳癌再発検出のための腫瘍マーカー群 | |
| Devine et al. | CA15-3, CASA, MSA, and TPS as diagnostic serum markers in breast cancer | |
| JPH08311100A (ja) | ヒト肺腺癌に関するモノクローナル抗体および抗原、及びそれを用いた免疫測定方法 | |
| US5593847A (en) | Monitoring of NC 50/90 in blood samples of breast cancer patients | |
| JP4282086B2 (ja) | 乳癌に対するマーカーとしてのタンパク質細胞性レチノイン酸結合タンパク質ｉｉ（ｃｒａｂｐｉｉ）の使用 | |
| CA2118760C (en) | Diagnosis and monitoring of colon cancer patients by measurement of nca 50/90 in blood | |
| EP3102600B1 (en) | Composition and method for detecting malignant neoplastic disease | |
| CA2082605C (en) | Monitoring of nca-bt in blood samples of breast cancer patients | |
| EP0621480B1 (en) | Monitoring of lung cancer patients by measurement of NCA 50/90 in blood | |
| EP0789032A2 (en) | Method for preparing a monoclonal antibody that provides an equimolar response to free and complexed analyte in a monoclonal/polyclonal sandwich immunoassay | |
| WO2021100621A1 (ja) | がんの骨転移を検出する方法及び検出試薬 | |
| JP2004198313A (ja) | 甲状腺腫瘍の診断用キット | |
| JP2003527607A (ja) | 乳癌の検出および診断のための新規バイオマーカーとしてのリソソームペプスタチン非感受性タンパク質分解酵素 | |
| JPH07285884A (ja) | ｐ５３癌抑制遺伝子産物に対する抗体 |